專利名稱：金絲桃素的一種提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及化合物的提取方法，特別是涉及金絲桃素的提取方法。
背景技術(shù)：
金絲桃素(hypericin 4，4，5，5，7，7-六羥基-2，2-二甲基-中位-萘并二蒽酮)，是貫葉連翹(Hypericum Perforatum L.)中最具生物活性的物質(zhì)，具有抗病毒、抗抑郁和光動(dòng)活性。
由于貫葉連翹全草中金絲桃素的含量只有萬分之幾，因此只有通過化學(xué)手段進(jìn)行提取精制。目前國內(nèi)外常用的提取方法如下1、甲醇或乙醇提取法將貫葉連翹全草干燥、粉碎后，用乙醇或甲醇作溶劑，80℃回流提取1-2h，重復(fù)提取多次，合并提取液并濃縮，得到金絲桃素浸膏。用這種方法得到的產(chǎn)品存在易吸濕、發(fā)粘的缺點(diǎn)。
2、堿液提取法稱取一定量經(jīng)干燥、粉碎的貫葉連翹全草，用30倍量的1％氫氧化鈉溶液煮沸2h，提取3次，過濾，合并濾液，加入0.1mol/L鹽酸溶液至pH值為3，減壓濃縮，真空干燥，得到金絲桃素浸膏。這種方法存在所使用得溶劑毒性較大，提取周期長并且得到的產(chǎn)品含量較低的缺點(diǎn)。
3、談增毅，高蓉(貫葉連翹浸膏的工藝研究J.基層中藥雜志.2002，16(3)26)的方法為取干藥材1000g，用剪刀剪成2cm長短，用70-80℃氫氧化鈉溶液(0.2mol/L)迅速拌潤，裝入塑料袋中，立即用棉絮包裹，保溫發(fā)酵5d，待整個(gè)草藥變?yōu)楹谏癄€狀時(shí)，加入甲醇—丙酮(混合比例為7∶3)6000mL，50℃溫浸12h，過濾，如此溫浸3次，合并濾液，60℃減壓濃縮，回收溶劑，再60℃真空干燥，得到金絲桃素干浸膏粉86.4g。這種提取方法中所用溶劑的毒性較大，提取周期長，并且提取物中金絲桃素的含量較低。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種簡單易行且經(jīng)濟(jì)適用的金絲桃素的提取方法。
本發(fā)明所提供的金絲桃素的提取方法，包括以下步驟1、將貫葉連翹干燥、粉碎；2、將貫葉連翹粗粉與有機(jī)溶媒按體積比為1-2∶3混合，在40-70℃下提取2-4小時(shí)，收集提取液，過濾，收集過濾液；所述有機(jī)溶媒可為80-100％(V/V)乙醇；
3、對過濾液減壓濃縮，回收濃縮液；4、將濃縮液用樹脂進(jìn)行吸附，洗脫，收集洗脫液；5、對洗脫液減壓濃縮，得到金絲桃素浸膏。
在上述提取方法中，為獲得更純的金絲桃素，可將步驟1中經(jīng)干燥、粉碎的貫葉連翹先用乙醚進(jìn)行除雜，再進(jìn)行步驟2-步驟5。
所述步驟2中的有機(jī)溶媒優(yōu)選為98％乙醇；貫葉連翹粗粉與有機(jī)溶媒混合的體積比優(yōu)選為2∶3；過濾所需的濾膜孔徑為0.45um。
為獲得更好的提取效果，可將步驟2重復(fù)15-20次，合并過濾液。
步驟3和步驟5中的減壓濃縮優(yōu)選為在50-60℃下進(jìn)行。
步驟4中所用的樹脂為LSA-5B專用吸附樹脂或大孔吸附樹脂；可用的洗脫液為80-100％(V/V)乙醇。
本發(fā)明提供了一種有效的金絲桃素的提取方法。該提取方法具有以下優(yōu)點(diǎn)1、操作簡單，易于進(jìn)行工業(yè)化應(yīng)用；2、提取成本低廉；3、所用提取溶劑的毒性較小，提取周期短；4、提取物中金絲桃素含量高，含量可達(dá)0.9-1.4％，收率約為萬分之2至5。本發(fā)明為金絲桃素的大規(guī)模生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)，將在金絲桃素的有效利用中發(fā)揮巨大作用。
下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)說明


圖1為本發(fā)明金絲桃素提取工藝的流程2A為金絲桃素標(biāo)準(zhǔn)反相高效液相色譜2B為提取的金絲桃素樣品的反相高效液相色譜3為提取的金絲桃素樣品的核磁共振氫譜圖具體實(shí)施方式
下述實(shí)施例中所用方法如無特別說明均為常規(guī)方法。
實(shí)施例1、金絲桃素的提取現(xiàn)用本發(fā)明的方法進(jìn)行金絲桃素的生物提取，流程圖見圖1，包括以下步驟1、將貫葉連翹干燥、粉碎至24目，精密稱取貫葉連翹碎粉2Kg；2、貫葉連翹粗粉裝滲漉柱，分批加入，用乙醚去除雜質(zhì)，避光陰干；3、將除雜的貫葉連翹與80％(V/V)乙醇按體積比為1∶3混合，在40℃下提取4小時(shí)，收集提取液，用孔徑為0.45um的濾膜過濾，收集過濾液，重復(fù)該步驟15次，合并過濾液；4、在60℃下對過濾液減壓濃縮至粘稠狀，回收濃縮液；
5、將濃縮液用大孔吸附樹脂進(jìn)行吸附，用80％(V/V)乙醇洗脫，收集玫瑰紅色的洗脫液；6、在60℃下對洗脫液減壓濃縮至無液體流出，得到金絲桃素浸膏。
現(xiàn)用反相高效液相色譜法對提取的金絲桃素浸膏進(jìn)行檢測，同時(shí)測定含量，反相高效液相色譜檢測結(jié)果如圖2B所示(圖2A為金絲桃素標(biāo)準(zhǔn)品的檢測結(jié)果)，核磁共振氫譜圖如圖3所示，結(jié)果表明獲得了純度較高的金絲桃素提取物，提取物中的金絲桃素含量為0.9％，收率約為萬分之2。
實(shí)施例2、金絲桃素的提取現(xiàn)用本發(fā)明的方法進(jìn)行金絲桃素的生物提取，包括以下步驟1)將貫葉連翹干燥、粉粹至24目，精密稱取貫葉連翹碎粉3Kg；2)將除雜的貫葉連翹與90％(V/V)乙醇按體積比為2∶3混合，在60℃下提取3小時(shí)，收集提取液，用孔徑為0.45um的濾膜過濾，收集過濾液，重復(fù)該步驟20次，合并過濾液；3)在60℃下對過濾液減壓濃縮至粘稠狀，回收濃縮液；4)將濃縮液用LSA-5B專用吸附樹脂進(jìn)行吸附，用90％(V/V)乙醇洗脫，收集玫瑰紅色的洗脫液；5)在60℃下對洗脫液減壓濃縮至無液體流出，得到金絲桃素浸膏。
現(xiàn)用與實(shí)施例1相同的方法對提取的金絲桃素浸膏進(jìn)行檢測，同時(shí)測定含量，表明獲得了純度較高的金絲桃素提取物，提取物中的金絲桃素含量為0.95％，收率約為萬分之2.2。
實(shí)施例3、金絲桃素的提取現(xiàn)用本發(fā)明的方法進(jìn)行金絲桃素的生物提取，包括以下步驟1)將貫葉連翹干燥、粉粹至24目，精密稱取貫葉連翹碎粉2Kg；2)貫葉連翹碎粉裝滲漉柱，分批加入，用乙醚去除雜質(zhì)，避光陰干；3)將除雜的貫葉連翹與98％(V/V)乙醇按體積比為2∶3混合，在70℃下提取2小時(shí)，收集提取液，用孔徑為0.45um的濾膜過濾，收集過濾液，重復(fù)該步驟20次，合并過濾液；4)在50℃下對過濾液減壓濃縮至粘稠狀，回收濃縮液；5)將濃縮液用LSA-5B專用吸附樹脂進(jìn)行吸附，用98％(V/V)乙醇洗脫，收集玫瑰紅色的洗脫液；
6)在50℃下對洗脫液減壓濃縮至無液體流出，得到金絲桃素浸膏。
現(xiàn)用與實(shí)施例1相同的方法對提取的金絲桃素浸膏進(jìn)行檢測，同時(shí)測定含量，表明獲得了純度較高的金絲桃素提取物，提取物中的金絲桃素含量為1.0％，收率約為萬分之2.5。
上述實(shí)施例中的檢測結(jié)果表明本發(fā)明的方法可用于金絲桃素的工業(yè)化提取中。
權(quán)利要求
1.一種金絲桃素的提取方法，包括以下步驟1)將貫葉連翹干燥、粉碎；2)將貫葉連翹粉末與有機(jī)溶媒按體積比為1-2∶3混合，在40-70℃下提取2-4小時(shí)，收集提取液，過濾，收集過濾液；所述有機(jī)溶媒為80-100％乙醇；3)對過濾液減壓濃縮，回收濃縮液；4)將濃縮液用樹脂進(jìn)行吸附，洗脫，收集洗脫液；5)對洗脫液減壓濃縮，得到金絲桃素浸膏。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于所述提取方法還包括將步驟1)中經(jīng)干燥、粉碎貫葉連翹用乙醚進(jìn)行除雜的步驟，再進(jìn)行步驟2)-步驟5)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的提取方法，其特征在于所述步驟2)中的有機(jī)溶媒為98％乙醇；貫葉連翹粉末與有機(jī)溶媒混合的體積比為2∶3；過濾所需的濾膜孔徑為0.45um。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的提取方法，其特征在于將步驟2)重復(fù)15-20次，合并過濾液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的提取方法，其特征在于所述步驟3)和步驟5)中的減壓濃縮是在50-60℃下進(jìn)行的。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的提取方法，其特征在于所述步驟4)中樹脂的類型為LSA-5B專用吸附樹脂或大孔吸附樹脂；洗脫液為80-100％乙醇。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種金絲桃素的提取方法。該方法包括以下步驟1.將貫葉連翹干燥、粉碎；2.貫葉連翹粉末與有機(jī)溶媒按體積比為1－2∶3混合，在40－70℃下提取2－4小時(shí)，收集提取液，過濾，收集過濾液；3.對過濾液減壓濃縮，回收濃縮液；4.將濃縮液用樹脂進(jìn)行吸附，洗脫，收集洗脫液；5.對洗脫液減壓濃縮，得到金絲桃素浸膏。該提取方法具有以下優(yōu)點(diǎn)1.操作簡單，易于進(jìn)行工業(yè)化應(yīng)用；2.提取成本低廉；3.所用提取溶劑的毒性較小，提取周期短；4.提取物中金絲桃素含量高?；谏鲜鰞?yōu)點(diǎn)，本發(fā)明將在金絲桃素的生物提取中發(fā)揮巨大作用。
文檔編號C07C46/00GK1850766SQ200610078988
公開日2006年10月25日 申請日期2006年4月29日 優(yōu)先權(quán)日2006年4月29日
發(fā)明者梁劍平, 崔穎, 王學(xué)紅, 華蘭英, 尚若鋒, 羅永江, 牛建榮, 呂嘉文, 白衛(wèi)兵, 趙曉紅, 王選慧, 祝艷, 王曙陽, 謝等龍 申請人:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所