專利名稱：咪唑－4－羧酰胺衍生物及其制備和用于治療肥胖癥的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物領(lǐng)域，特別是治療肥胖癥領(lǐng)域。更特別地，本發(fā)明涉及某些咪唑化合物，該化合物可用于治療肥胖癥及與肥胖癥相關(guān)的疾病，且可作為體重減輕或體重控制劑。
背景技術(shù)：
肥胖癥被定義為相對(duì)于瘦型體重身體過于肥胖，它是許多潛在對(duì)生命具有威脅的疾病的危險(xiǎn)因素，所述疾病如動(dòng)脈硬化癥、高血壓、糖尿病、中風(fēng)、肺栓塞、睡眠性呼吸暫停及癌癥。進(jìn)一步地，它能夠使得多種慢性疾病復(fù)雜化，所述慢性疾病如呼吸性疾病、骨關(guān)節(jié)炎、骨質(zhì)疏松癥、膽囊疾病和脂質(zhì)代謝障礙。該問題的嚴(yán)重性在于其最佳反映了死亡率隨體重增加而上升的事實(shí)。從三千五百萬美國人來看，一旦體重指數(shù)(BMI)超過30kg/m2，與肥胖相關(guān)的疾病死亡率占全部死亡率的比例超過50％(參見Lee，JAMA 2682045-2049，1992)。由于每年由肥胖癥引起的死亡人數(shù)超過三十萬人，其死亡人數(shù)在潛在可預(yù)防疾病死亡的最常見原因中僅次于吸煙位居第二(McGinnis，JAMA 2702207-2212，1993)。伴隨著該問題的破壞性醫(yī)療結(jié)果，其在美國衛(wèi)生保健體系中已留下了嚴(yán)重的財(cái)政負(fù)擔(dān)。人們估計(jì)，30～50％中年人群被視為肥胖(Kuczmarski et al.，JAMA 272205-211，1994)。據(jù)報(bào)道，肥胖癥及其相關(guān)疾病引起的醫(yī)療費(fèi)用上的經(jīng)濟(jì)損失超過每年六百八十億美元(Colditz，Am.J.Clin.Nutr.55503S-507S，1992)。這個(gè)數(shù)字還不包括每年花費(fèi)在減肥食品、減肥商品及減肥計(jì)劃上的超過三百億美元(Wolf，Pharmacoeconomics.534-37，1994)。
聚集或維持身體脂肪與熱量的攝入直接相關(guān)。因此，全面的處理計(jì)劃集中在借助于種種體系，改進(jìn)降低熱量攝入的行為和增加體力運(yùn)動(dòng)。這些方法效果有限且與累犯率超過95％有關(guān)(NIH TechnologyAssessment Conference Panel，Ann.Intern.Med.119764-770，1993)。
肥胖癥也可通過對(duì)肥胖人群服用特定的藥劑進(jìn)行治療，所述藥劑如厭食劑。但是，厭食劑，如右旋安非他命、非安非他命藥物苯叔丁胺和氟苯丙胺的組合(Phen-Fen)及單獨(dú)的右旋氟苯丙胺(Redux)與許多嚴(yán)重的副作用相關(guān)。不吸收的物質(zhì)如asolestra(OLEAN_，植物油或辛戊基酯(參見美國專利US 2,962,419))已被提議作為食用脂肪的替代品。由此，藤黃酸及其衍生物被描述成可通過妨礙脂肪酸合成而治療肥胖癥。可膨脹的交聯(lián)乙烯基吡啶樹脂被描述成可通過提供非營養(yǎng)性物質(zhì)機(jī)理的食欲抑制劑(參見美國專利US 2,923,662)。
為了治療嚴(yán)重的肥胖癥，人們也研制出了手術(shù)干涉法，如分割法、空腸回腸旁路法和迷走神經(jīng)切斷術(shù)(Greenway，Endo.Metab.Clin.N.Amer.251005-1027，1996)。盡管從長遠(yuǎn)來看，這些外科方法更加有效，但根據(jù)國家衛(wèi)生研究院(NCH)肥胖癥手術(shù)輿論性會(huì)議(NIH Conference，Ann.Intern.Med.115956-961，1991)，對(duì)病態(tài)肥胖患者，這種入侵性方法保留了急性危險(xiǎn)利益率(BMI＞40kg/m2)。因此，對(duì)于多數(shù)體重過重的患者而言，除非或直至其變得極其肥胖且患有伴隨的并發(fā)癥，這種方法不是一種選擇。
因此，非常需要能夠促進(jìn)體重減輕的方法和藥物。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了取代咪唑衍生物，其在實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物中可抑制食欲并引起體重減輕。本發(fā)明也提供了合成該化合物的方法、含有該化合物的藥物組合物、該組合物用于引起體重減輕和治療肥胖癥及與肥胖癥相關(guān)的疾病的方法。
發(fā)明詳述本發(fā)明涉及取代咪唑衍生物，其可用于治療肥胖癥，所述衍生物具有式I及其藥用鹽和酯，
其中R1和R2相同或不同，選自苯基，該苯基任意地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基、硝基、(C1-C6)烷基磺酰基、(C1-C6)烷基磺酰基氨基、(C1-C6)烷基羰基氨基或苯基取代，(C2-C6)烷基，環(huán)己基，該環(huán)己基任意地被(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基取代，或任意地被一個(gè)或多個(gè)氟取代，1-萘基或2-萘基，該基團(tuán)任意地被鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基或氰基取代，芐基，該芐基在其苯環(huán)上任意地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基或氰基取代，5-至10-元飽和或不飽和雜環(huán)基團(tuán)，該雜環(huán)基團(tuán)任意地被氟、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基或氰基取代，以及5-至10-元芳族單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)基團(tuán)，該基團(tuán)任意地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基、硝基或苯基取代；R3為氫、(C1-C6)烷基、芐基、氯或溴；X為 其中R4為氫或(C1-C6)烷基；R5選自(C2-C9)烷基或(C7-C11)二環(huán)烷基，各自任意地被一個(gè)或多個(gè)苯基、羥基、芐氧基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷基氨基、二[(C1-C3)烷基]氨基、1-哌啶基、1-吡咯烷基、2，3-二氫-1，4-苯并二氧雜環(huán)己烯-2-基、羥基-取代(C1-C6)烷基或氟取代，芐基、2-苯基-1-乙基、苯并環(huán)己基或苯并環(huán)戊基，各自在其中一個(gè)烷基碳上任意地被羥基、芐氧基或羥基(C1-C6)烷基取代，或在苯環(huán)上任意地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基、羥基、芐氧基或硝基取代，哌啶-4-基、哌啶-3-基或吡咯烷-3-基，各自在哌啶或吡咯烷環(huán)的氮原子上任意地被(C1-C6)烷基、羥基取代(C1-C6)烷基、(C1-C3)烷氧基取代(C1-C3)烷基、芐基或苯基取代，這些基團(tuán)任意地被一個(gè)或多個(gè)(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基、羥基、芐氧基、硝基或鹵素取代，-NR6R7，其中R6為氫或(C1-C6)烷基，R7為(C1-C9)烷基，或苯基，這些基團(tuán)任意地被一個(gè)或多個(gè)(C1-C6)烷基、羥基取代(C1-C6)烷基、(C1-C3)烷氧基取代(C1-C3)烷基、苯基、羥基、芐氧基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基、硝基或鹵原子取代，或R6和R7及與其相連的氮原子一起形成5-至10-元飽和或不飽和雜環(huán)，該雜環(huán)任意地被一個(gè)或多個(gè)(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、羥基取代(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷氧基取代(C1-C3)烷基、芐基、苯基、羥基、芐氧基或氟取代；或R4和R5及與其相連的氮原子一起形成5-至10-元飽和或不飽和雜環(huán)基團(tuán)，該雜環(huán)基團(tuán)任意地被一個(gè)或多個(gè)氟、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷基氨基、二[(C1-C3)烷基]氨基、三氟甲基、羥基、羥基取代(C1-C6)烷基、苯基取代(C1-C6)烷基、氰基、5-至10-元芳族單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)基團(tuán)或苯基取代，這些基團(tuán)任意地被一個(gè)或多個(gè)(C1-C6)烷基、羥基、芐氧基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基、硝基或鹵素取代；
或X為 其中R10為(C1-C9)烷基，該基團(tuán)任意地被一個(gè)或多個(gè)苯基、羥基、芐氧基、(C1-C6)烷氧基或氟原子取代，或苯基、苯并環(huán)己基或苯并環(huán)戊基，該基團(tuán)任意地在苯環(huán)上被一個(gè)或多個(gè)苯基、羥基、芐氧基、(C1-C6)烷氧基或鹵素取代。
本發(fā)明另一實(shí)施方案由具有式I的咪唑衍生物或其藥用鹽和酯，其中R1和R2相同或不同，選自苯基，該苯基任意地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基、硝基、(C1-C6)烷基羰基氨基、(C1-C6)烷基氨基羰基氨基或苯基取代，(C2-C6)烷基，環(huán)己基，該環(huán)己基任意地被(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基取代，或任意地被一個(gè)或多個(gè)氟取代，1-或2-萘基，該基團(tuán)任意地被鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基或氰基取代，芐基，該芐基在其苯環(huán)上任意地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基或氰基取代，5-至10-元飽和或不飽和雜環(huán)基團(tuán)，該雜環(huán)基團(tuán)任意地被氟、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基或氰基取代，以及5-至10-元芳族單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)基團(tuán)，該基團(tuán)任意地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基、硝基或苯基取代，條件是R2不為未取代4-吡啶基或未取代4-嘧啶基；R3為氫、(C1-C6)烷基、芐基、氯或溴；X為 其中R4為氫或(C1-C6)烷基；R5為苯基，該苯基被一個(gè)或多個(gè)(C1-C6)烷基、羥基(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、苯基、羥基、芐氧基、三氟甲基或鹵素取代，或5-至10-元芳族單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)基團(tuán)，該基團(tuán)任意地被一個(gè)或多個(gè)(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基或三氟甲基取代；或X為 其中R8為氫或(C1-C6)烷基；R9為(C1-C9)烷基或(C7-C11)二環(huán)烷基，各自任意地被一個(gè)或多個(gè)苯基、羥基、芐氧基、(C1-C6)烷氧基或氟取代，芐基，其中苯環(huán)任意地被一個(gè)或多個(gè)(C1-C6)烷基、羥基、芐氧基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基、硝基或鹵素取代，或苯基、苯并環(huán)己基或苯并環(huán)戊基，該基團(tuán)任意地在苯環(huán)上被一個(gè)或多個(gè)苯基、羥基、芐氧基、(C1-C6)烷氧基或鹵素取代；或R8和R9及與其相連的氮原子一起形成5-至10-元飽和或不飽和雜環(huán)基團(tuán)，該雜環(huán)基團(tuán)任意地被一個(gè)或多個(gè)(C1-C6)烷基、芐基、羥基、芐氧基、(C1-C6)烷氧基、鹵素取代，5-至10-元飽和或不飽和雜環(huán)基團(tuán)；或苯基，所述苯基任意地被一個(gè)或多個(gè)(C1-C6)烷基、羥基、芐氧基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基、硝基或鹵素取代；或X為 其中R11為(C2-C9)烷基，該基團(tuán)任意地被一個(gè)或多個(gè)苯基、羥基、芐氧基、(C1-C6)烷氧基或氟取代，苯基，其中苯環(huán)任意地被一個(gè)或多個(gè)(C1-C6)烷基、羥基、芐氧基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基、硝基或鹵素取代，芐基、2-苯基乙基、苯并環(huán)己基或苯并環(huán)戊基，各自在一個(gè)烷基碳上任意地被羥基、芐氧基或羥基(C1-C6)烷基取代，及在苯環(huán)上任意地被鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基、羥基、芐氧基或硝基取代，或5-至10-元芳族單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)基團(tuán)。
上述術(shù)語具有下列含義“鹵素”是指氟、氯、溴或碘。
術(shù)語“(C1-C3)烷基”、“(C1-C6)烷基”、“(C2-C6)烷基”、“(C1-C9)烷基”和“(C2-C9)烷基”分別是指C1-C3、C1-C6、C2-C6、C1-C9和C2-C9直鏈或支鏈烷基基團(tuán)，也可包括作為烷基部分的環(huán)烷基基團(tuán)。例如，這可包括環(huán)丙基、環(huán)己基、環(huán)丙基甲基和環(huán)庚基甲基。優(yōu)選的烷基基團(tuán)為甲基、乙基和異丙基。
“(C1-C3)烷氧基”和“(C1-C6)烷氧基”分別是指(C1-C3)烷基氧基和(C1-C6)烷基氧基。
“(C7-C11)二環(huán)烷氧基”是指C7-C11二環(huán)烷基基團(tuán)，如八氫-2-并環(huán)戊二烯基、二環(huán)[2.2.1]庚-2-基和二環(huán)[3.2.1]辛-8-基，該基團(tuán)可任意地被一個(gè)或多個(gè)甲基取代。
術(shù)語“5-至10-元飽和或不飽和雜環(huán)基團(tuán)”是指含1至3個(gè)雜原子氮、氧或硫的稠合或橋接一、二或三環(huán)非芳族雜環(huán)基團(tuán)。這些基團(tuán)包括下述基團(tuán)如吡咯烷-1-基、哌啶-1-基、氮雜環(huán)庚烷-1-基、嗎啉-4-基、六氫環(huán)戊二烯并[c]吡咯-2(1H)-基和硫代嗎啉-4-基。
術(shù)語“5-至10-元芳族單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)基團(tuán)”是指含1至3個(gè)雜原子氮、氧或硫的5-或6-元芳族雜環(huán)基團(tuán)或稠合二環(huán)芳族雜環(huán)基團(tuán)。這些基團(tuán)包括下述基團(tuán)如呋喃基、噻吩基、異_唑基、吡啶基、嘧啶基、苯并呋喃基和苯并噻吩基。
當(dāng)任何部分被描述成被取代時(shí)，其可在位于該部分任何可能的位置上含一個(gè)或多個(gè)指定的取代基。當(dāng)在任何部分含有二或多個(gè)取代基時(shí)，其在各種情況下彼此獨(dú)立定義。
式化合物有代表性的鹽包括通過現(xiàn)有技術(shù)公知的方式，如由無機(jī)或有機(jī)酸或堿形成的常規(guī)非毒性鹽及季銨鹽。如酸成鹽包括乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、肉桂酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、延胡索酸鹽、葡糖庚酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、衣康酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠酯酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、磺酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽和十一烷酸鹽。
堿成鹽包括堿金屬鹽，如鉀鹽和鈉鹽；堿土金屬鹽，如鈣鹽和鎂鹽；及與有機(jī)堿形成的銨鹽，如二環(huán)己胺鹽和N-甲基-D-葡糖胺鹽。另外，堿性含氮基團(tuán)可被適當(dāng)?shù)脑噭┘句@化，如低級(jí)烷基鹵，例如甲基、乙基、丙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物；二烷基硫酸鹽，如二甲基、二乙基和二丁基硫酸鹽及二戊基硫酸鹽；長鏈鹵化物，如癸基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基氯化物、溴化物和碘化物；芳烷基鹵化物，如芐基和苯乙基溴化物及其它。
本發(fā)明中的酯為式I醇的非毒性可藥用酯衍生物，包括由乙酸、苯甲酸、扁桃酸、硬脂酸、乳酸、水楊酸、羥基萘甲酸、葡糖庚酸和葡糖酸制得的酯衍生物。式I醇化合物可通過許多常規(guī)的方法酯化，包括將適當(dāng)?shù)乃狒Ⅳ人峄蝓Ｂ扰c式I化合物的醇基團(tuán)反應(yīng)。在存在催化劑的條件下，如1，8-二[二甲氨基]萘或DMAP(N，N-二甲氨基吡啶)，將適當(dāng)?shù)乃狒c醇反應(yīng)。在存在脫水劑如二環(huán)己基碳化二亞胺、1-[3-二甲氨基丙基]-3-乙基碳化二亞胺或其它用于通過除去水而進(jìn)行反應(yīng)的水溶性脫水劑，以及任意的?；呋瘎┑臈l件下，適當(dāng)?shù)聂人崤c醇反應(yīng)。酯化反應(yīng)可通過在存在三氟乙酸酸酐和任意的吡啶的條件下，或在存在含吡啶的N，N-羰基二咪唑的條件下，利用適當(dāng)?shù)聂人徇M(jìn)行。酰氯與醇的反應(yīng)可在存在?；呋瘎┤鏒MAP或吡啶的條件下進(jìn)行。本領(lǐng)域的技術(shù)人員可容易地知道如何成功地進(jìn)行這些反應(yīng)及其它酯化醇的方法。式I化合物中的敏感或活性基團(tuán)需要在上述生成酯的方法中保護(hù)起來，且保護(hù)基團(tuán)可通過本領(lǐng)域公知的常規(guī)方法添加和除去。
人們應(yīng)當(dāng)理解，實(shí)例性結(jié)構(gòu)的非對(duì)映異構(gòu)體和對(duì)映體常常是可能的，純的異構(gòu)體代表了優(yōu)選的實(shí)施方案。純的立體異構(gòu)體及其混合物屬于本發(fā)明范圍。
鑒于不對(duì)稱中心和有限旋轉(zhuǎn)的性質(zhì)，本發(fā)明化合物可以異構(gòu)體形式存在。任何異構(gòu)體均可以(R)-、(S)-或(R，S)構(gòu)型存在，優(yōu)選(R)-、(S)-構(gòu)型，無論哪一種均是最具活性。
本發(fā)明化合物的所有異構(gòu)體，不論是分離的、純的、部分純的或是外消旋混合物，均包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。所述異構(gòu)體的純化及所述外消旋混合物的分離均可通過本領(lǐng)域公知的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)完成。
鑒于雙鍵或環(huán)取代基的性質(zhì)，幾何異構(gòu)體可以順式(＝Z-)或反式(＝E-)形式存在。這兩種異構(gòu)體形式均包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。
用于制備本發(fā)明化合物的特別方法取決于所需的特定化合物。選擇特定部分及不同部分中的特定取代基的因素在下述制備本發(fā)明特定化合物的路線中均其著作用。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員能夠容易地認(rèn)識(shí)到這些因素。
對(duì)于合成任何特別化合物，本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)認(rèn)識(shí)到，使用保護(hù)基團(tuán)對(duì)于合成含某些取代基的化合物是需要的。對(duì)適宜保護(hù)基團(tuán)及添加和除去這類基團(tuán)的適當(dāng)方法的描述可在下述文獻(xiàn)中發(fā)現(xiàn)Protective Groups in Organic Synthesis，Second Edition，T.W.Greene，JohnWiley and Sons，New York，1991。
在下述反應(yīng)流程中，本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)認(rèn)識(shí)到，實(shí)際使用的試劑和溶劑可選自本領(lǐng)域公知的具有等同效果的幾種試劑和溶劑。因此，當(dāng)特定的試劑或溶劑顯示在反應(yīng)流程中時(shí)，其是指能夠完成特定反應(yīng)流程所需條件的說明性實(shí)例。在說明書中沒有指明的縮略語將在下文“縮略語和縮寫詞”中公開。
本發(fā)明的另一目的在于提供制備本發(fā)明化合物的方法?；衔锟赏ㄟ^反應(yīng)流程1和2中描述的方法及通過其明顯的改進(jìn)，由容易得到的物質(zhì)制得。
本發(fā)明涉及本發(fā)明化合物在治療易餓病和肥胖癥中的用途，所述疾病包括相關(guān)的脂質(zhì)代謝障礙癥和其它與肥胖癥和體重超重有關(guān)的并發(fā)癥，如膽固醇膽石、癌癥(如結(jié)腸癌、直腸癌、前列腺癌、乳房癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌、膽囊癌和膽管癌)、月經(jīng)異常、不育癥、多囊卵巢病、骨關(guān)節(jié)炎和睡眠性呼吸暫停，以及涉及許多與其相關(guān)的藥學(xué)用途，如調(diào)節(jié)食欲和食物攝取、脂質(zhì)代謝障礙癥、高甘油三酯癥、綜合癥X、II型糖尿病(非胰島素依耐性糖尿病)、動(dòng)脈粥樣硬化疾病(如心力衰竭)、高脂血、高膽固醇、低HDL水平、高血壓、心血管疾病(如動(dòng)脈硬化癥、冠心病、冠狀動(dòng)脈疾病和高血壓)、腦血管疾病和周圍血管疾病。本發(fā)明化合物也可用于治療與如調(diào)節(jié)胰島素靈敏性、炎性響應(yīng)、血漿甘油三酯、HDL、LDL和膽固醇水平等相關(guān)的生理學(xué)疾病。
本發(fā)明式I化合物可用于治療劑。由此，本發(fā)明實(shí)施方案包括治療患者(包括人)上述各種疾病的方法，該方法包括對(duì)所述患者服用含治療目標(biāo)疾病有效量的式I化合物的組合物。
式I化合物可單獨(dú)給藥或與一種或多種另外的治療劑組合給藥。組合治療包括服用含式I化合物及一種或多種另外治療劑的式I化合物的單獨(dú)藥物劑量制劑，以及服用式I化合物和以其單獨(dú)藥物劑量制劑的各種另外的治療劑。例如，式I化合物和治療劑可一起以單獨(dú)口服劑量組合物(如片劑或膠囊)對(duì)患者給藥，或者各種制劑以單獨(dú)口服劑量制劑形式給藥。
當(dāng)使用單獨(dú)劑量制劑時(shí)，式I化合物與一種或多種另外的治療劑可基本上同時(shí)(如同時(shí)地)或分別交叉(如順序地)給用。
例如，式I化合物可與用于治療肥胖癥的其它治療劑或藥物組合給藥，如與3-腎上腺受體激動(dòng)劑(如CL-316，243)組合給用，或與調(diào)節(jié)消化和/或代謝的藥物化合物(如調(diào)節(jié)生熱、脂解、內(nèi)臟運(yùn)動(dòng)、脂肪吸收和過飽的藥物)組合給用。
另外，式I化合物可與一種或多種下述用于治療糖尿病或與糖尿病相關(guān)的疾病的降血糖劑組合給用胰島素；雙胍，如甲福明二甲胍或丁二胍；磺酰脲，如乙酰苯磺酰環(huán)己脲、氯磺丙脲、甲磺氮草脲、甲苯磺丁脲、格列本脲、格列吡嗪、glyclazide；或任何其它胰島素促分泌素，例如環(huán)格列奈和那格列奈；或α-糖苷酶抑制劑，如阿卡波糖、伏格列波糖或米格列醇。另外，為了提高患有脂質(zhì)代謝障礙癥的患者的脂含量，式I化合物可與HMG Co-A還原酶抑制劑(statins)、膽汁酸結(jié)合樹脂或纖維酸衍生物組合使用。式I化合物也可與調(diào)節(jié)高血壓的試劑(如血管緊張肽轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制劑、3-阻滯劑、鈣通道阻滯劑)組合使用。
另外，根據(jù)嚙齒動(dòng)物中的口服劑量，可確定本發(fā)明化合物以高濃度存在于大腦中。因此，本發(fā)明化合物可用于治療任何不同的CNS(中樞神經(jīng)系統(tǒng))或心理學(xué)疾病，例如物質(zhì)或行為沉溺，以及治療與使用作用于精神物質(zhì)相關(guān)的疾病。類似地，本發(fā)明化合物可用于處理或治療認(rèn)知和記憶疾病。
式I化合物也可以游離堿形式或以組合物形式用于研究和診斷中，或用作本領(lǐng)域公知的分析參考標(biāo)準(zhǔn)等。因此，本發(fā)明包括含有惰性載體和有效量式I化合物或其鹽或酯的組合物。惰性載體可以使任何不與所含的化合物發(fā)生相互作用的物質(zhì)，它們可用作所含化合物的助劑、運(yùn)輸介質(zhì)、散裝劑、可跟蹤物質(zhì)等。化合物的有效量是指能夠產(chǎn)生效果或?qū)λM(jìn)行的特別步驟施加影響的量。
人們可以理解本發(fā)明化合物的前藥形式在某些情況下被證明是有用的，這類化合物也屬于本發(fā)明范圍。前藥形式具有優(yōu)于這里所例證的母體化合物，這是因?yàn)樗鼈兾招愿谩⒎植几?、更容易滲透中樞神經(jīng)系統(tǒng)中去，它們能更慢慢地代謝或清除等。前藥形式在結(jié)晶度或水溶性方面也更具有制劑優(yōu)勢(shì)。例如，含一個(gè)或多個(gè)羥基基團(tuán)的本發(fā)明化合物可轉(zhuǎn)變成帶有一個(gè)或多個(gè)羧基、羥基或氨基基團(tuán)的酯或碳酸酯，它們可在生理pH值下水解，且可在體內(nèi)通過內(nèi)在酯酶或脂酶分解。參見如US 4,942,184、US 4,960,790、US 5,817,840和US5,824,701(所有這些均以其全部引作參考)及其其中的參考文獻(xiàn)。
本發(fā)明的目的在于提供了通過服用本發(fā)明化合物引起個(gè)體體重減輕的方法。本發(fā)明方法包括對(duì)個(gè)體服用藥物有效量的至少本發(fā)明一種化合物或其前藥，該劑量足以引起體重減輕。本發(fā)明進(jìn)一步包括預(yù)防體重增加的方法，該方法是對(duì)個(gè)體服用足以預(yù)防體重增加的劑量的至少本發(fā)明一種化合物或其前藥。
一般性制備式I化合物式I化合物可通過許多種方法制備。選擇所使用的特定方法取決于這些因素，獲得適宜起始原料的可能性、官能團(tuán)與所使用試劑的相容性，以及存在于所制備的最終化合物中的最后結(jié)構(gòu)特征。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，在有些情況下，多于一種方法可用于制備單個(gè)式I化合物實(shí)例。
一般地，式I化合物可通過反應(yīng)流程2描述的方法，由式VI中間體化合物制得；式VI化合物可通過所示的兩種路線之一，由反應(yīng)流程1描述的方法制得。對(duì)于式Ia～d和II～XIII化合物，除非另外特別指明，R、R1～R11和X如上述式I定義。
反應(yīng)流程1 制備式VI中間體(反應(yīng)流程1)在路線1中，通過將式III胺與式II腈反應(yīng)，制得式IV亞胺酸酰胺(imidamide)。該反應(yīng)可在室溫下于中性溶劑(如THF)中，利用強(qiáng)堿，如Grignard試劑(例如EtMgBr)完成，或者在加熱下于惰性溶劑(如甲苯)中，利用Lewis酸(如AlCl3)完成。然后在任意的加熱條件下，于惰性溶劑(如甲苯或THF)中一起混合，將產(chǎn)物亞胺酸酰胺IV與式V3-溴丙酮酸酯反應(yīng)，得到式VI咪唑中間體。該反應(yīng)可通過加入堿(如丙胺、碳酸鈉等)繼續(xù)進(jìn)行，除去所生成的作為副產(chǎn)物的過量HBr。此外，IV轉(zhuǎn)變成VI可通過逐步方式完成，即首先進(jìn)行IV與V的反應(yīng)并分離粗產(chǎn)物，然后在乙酸中與R1NH2一起加熱殘留物，完成環(huán)化，得到咪唑VI。
在路線2中，通過在冷卻條件下，于質(zhì)子溶劑(典型地利用乙酸/水)中與亞硝酸鈉反應(yīng)，可將式VII酮酯轉(zhuǎn)變成式VIII肟化合物。然后在極性溶劑(如乙腈)中，將產(chǎn)物VIII與式R1NH2胺一起加熱，得到式IX咪唑。最后，通過利用堿和式R2Y化合物(其中Y為離去基團(tuán)，如鹵素、甲磺酸基團(tuán)或甲苯磺酸基團(tuán))處理IX，進(jìn)行N-取代。對(duì)于這個(gè)合成路線，其中R2為芳基，一般是活化(親電子)鹵代芳烴，如4-鹵代硝基苯或2-或4-鹵代吡啶，它們能夠經(jīng)歷親核芳族取代反應(yīng)。
通過本領(lǐng)域公知的酯水解方法，可以由其中R′為烷基的式VI化合物制備其中R′為H的式VI化合物。
反應(yīng)流程2 制備式I化合物(反應(yīng)流程2)由反應(yīng)流程1所示的方法制得的式VI化合物可用于制備式I化合物中。為了闡述可用于制備式I化合物的方法，這里給出了更特定式Ia、Ib、Ic和Id化合物合成路線。這四種結(jié)構(gòu)表示了X分別為-C(＝O)NR4R5、-CH2NR8R9、-C(＝O)NHSO2R10和-C(＝O)R11的式I化合物變形。
制備式I化合物的各種不同變形的合成方法表示在反應(yīng)流程2中。
在一種這類方法中，對(duì)于其中R′＝H的式VI化合物，首先將羧基活化成酰鹵(例如利用SOCl2或TFFH)，接著利用式R4R5NH(通常利用以三乙胺或PS-DIEA(聚苯乙烯結(jié)合的二異丙基乙胺)形式存在的堿)處理。另一種方法，可將酸活化成碳化二亞胺加成物(例如利用1-(3-二甲氨基丙基，三乙胺和1-羥基-7-氮雜苯并三唑)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽)或六氟苯基酯(由六氟苯酚和EDCI制得)。活化之后，加入以R4R5NH表示的化合物，反應(yīng)生成式Ia化合物。例如通過同時(shí)混合偶合劑(如HATU)和R4R5NH化合物，也可進(jìn)行這種轉(zhuǎn)化的一鍋?zhàn)冃巍?br>
式Ia化合物也可通過一起加熱R4R5NH化合物和三乙基鋁，由其中R′＝烷基的式VI化合物制得。
正如所示，式Ia化合物也可通過下述方法由其中R3為H的式VI酯制得，通過標(biāo)準(zhǔn)方法(如NBS或SO2Cl2)鹵化咪唑，得到式X鹵代咪唑。利用如Pd-催化有機(jī)錫偶合反應(yīng)(如當(dāng)R3為甲基時(shí))這類方法，將這種中間體用于制備其中R3≠H的式VI中間體，在上述式VI化合物轉(zhuǎn)化成式Ia化合物的相同條件下，式X化合物也可轉(zhuǎn)化成式XI酰胺。。然后，通過Pd-催化有機(jī)錫偶合反應(yīng)，將所得的式XI酰胺轉(zhuǎn)化成其中R3≠H的式Ia化合物。
在還原條件下，式Ib化合物可在存在式R8R9NH氨基化合物下，由式VI化合物制得。當(dāng)R8為氫時(shí)，利用如二異丁基鋁氫化物(DBBAH)，可首先將其中R′＝烷基的式VI化合物部分還原成醛，加入R8R9NH化合物，就地生成亞胺中間體，然后利用硼氫化鈉還原。當(dāng)R8≠H時(shí)，還原烷基化反應(yīng)可通過利用Khanna等人描述的方法(Synthesis 607-608，1975)，由R8R9NH化合物和氫化鋰鋁一步完成。
利用偶合劑如N，N′-二烷基碳化二亞胺(例如N，N′-二環(huán)己基碳化二亞胺)和堿如DMAP，促進(jìn)式VI化合物(其中R′＝H)與式R′SO2NH2磺酰胺反應(yīng)，可以制得式Ic酰基磺酰胺。
式Ic化合物可通過下述方法制得將上述由VI(其中R′＝H)和SOCl2制得的式XII酰氯轉(zhuǎn)化成式XIII酰胺，然后與由標(biāo)準(zhǔn)方法制得的有機(jī)金屬試劑如式R11gBr烷基或芳基Grignard試劑反應(yīng)。所得產(chǎn)物為式Id酮。式Id酮也可由類似的反應(yīng)制得，即將芳基或烷基鋰試劑如R11Li與式XIII或其中R4R5NH為4-哌啶酮的式Ia酰胺反應(yīng)。
利用標(biāo)準(zhǔn)的官能團(tuán)轉(zhuǎn)化化學(xué)，可將式Ia、Ib、Ic和Id取代化合物轉(zhuǎn)化成不同的取代式I化合物。例如利用試劑如Na2BH4，可將酮基取代基還原成對(duì)應(yīng)的羥基取代化合物。其它這類實(shí)例為1)酰基苯取代基轉(zhuǎn)化成對(duì)應(yīng)的氨基苯取代基，以及2)O-或N-烷基化或OH或NH取代基酰基化，得到對(duì)應(yīng)的O-或N-烷基或N-?；〈衔?。
實(shí)驗(yàn)實(shí)施例下列特定的制備性實(shí)施例用來闡述本發(fā)明特定化合物的制備方法，不是以任何方式限制本發(fā)明的范圍。
NMR方法利用General Electric GN-Omega 300(300MHz)分光計(jì)測(cè)定質(zhì)子(1H)核磁共振(NMR)光譜，利用Me4Si(δ0.00)或殘留的質(zhì)子化溶劑(CHCl3δ7.26；MeOH δ3.30；DMSO δ2.49)作為參考標(biāo)準(zhǔn)。利用General Electric GN-Omega 300(75MHz)分光計(jì)測(cè)定碳(13C)NMR，利用溶劑(CDCl3δ77.0；d3-MeOD；δ49.0；d6-DMSO δ39.5)作為參考標(biāo)準(zhǔn)。
LC-MS儀器使用方法(a)Gilson HPLC系統(tǒng)，安裝有兩個(gè)Gilson306泵、一個(gè)Gilson215自動(dòng)取樣器、一個(gè)Gilson二極管排列檢測(cè)器、一個(gè)YMC Pro C-18柱(2×23mm，120A)和一個(gè)帶有z-噴霧電噴離子化裝置的Micromass LCZ單四極質(zhì)譜儀。光譜在1.5秒內(nèi)由120-800amu掃描。ELSD(蒸發(fā)式光散射光度計(jì))數(shù)據(jù)也以模擬通道獲得。
(b)Hewlett-Packard 1100 HPLC，安裝有四個(gè)一組的泵、一套可變波長檢測(cè)器(254nm)、一個(gè)YMC pro C-18柱(2×23mm，120A)和一個(gè)帶有電噴離子化裝置的Finnigan LCQ離子阱質(zhì)譜儀。根據(jù)離子源中離子數(shù)量，利用可變離子時(shí)間由120-800amu掃描光譜。
HPLC條件。在下列提供的實(shí)施例額表格中，給出的LC-MS數(shù)據(jù)含有利用下述之一方法確定的保留時(shí)間(RT)
方法1 洗脫液為A于水中的2％乙腈，含0.02％TFA，及B于乙腈中的2％水，含0.02％TFA。洗脫條件包括流速為1.0mL/min，初始固定在10％B 0.5分鐘；接著梯度洗脫，在3.5分鐘內(nèi)由10％B至95％B；最后固定在95％B 0.5分鐘。總的操作時(shí)間為6.5分鐘。
方法2洗脫液如上。洗脫流速為1.5mL/min，初始固定在10％B 0.5分鐘；接著梯度洗脫，在3.5分鐘內(nèi)由10％B至90％B；最后固定在90％B 0.5分鐘。總的操作時(shí)間為4.8分鐘。
縮略語和縮寫詞當(dāng)使用下列縮略語時(shí)，其具有下述含義BINAP 2，2′-二(二苯基膦基)-1，1′-二萘基CD3OD甲醇-d4Celite_硅藻土過濾劑，_Celite Corp.
DMAP 4-(N，N-二甲氨基)吡啶DMSO 二甲亞砜EDCI 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽ELSD 蒸發(fā)式光散射光度計(jì)EtOAc乙酸乙酯EtOH 乙醇(100％)Et2O二乙基醚Et3N三乙胺h 小時(shí)HATU O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N′N′-四甲基糠醛六氟膦酸鹽HPLC 高效液體色譜LC-MS 液相色譜質(zhì)譜min 分鐘m/z 質(zhì)量與電荷之比MeCN 乙腈Ms甲磺?；鵑BS N-溴琥珀酰亞胺NMM 4-甲基嗎啉
OMs甲磺酰基氧基OTs4-甲苯磺?；趸鵓S-DIEA聚苯乙烯結(jié)合的二異丙基乙胺Rf 保留因子(TLC)RT 保留時(shí)間(HPLC)rt 室溫THF四氫呋喃TFA三氟乙酸TFFH 氟-N，N，N′N′-四甲基甲脒六氟磷酸鹽TLC薄層色譜Ts 4-甲苯磺酰基實(shí)施例1制備2，4-二氯-N-(4-氯苯基)苯羧亞胺酸酰胺 在氬氣下，將4-氯苯胺(6.67g，52.5mmol)慢慢部分加入到EtMgBr(52mL，1M，于THF中，52mmol)中。在攪拌溶液0.5小時(shí)后，加入2，4-二氯苯甲腈(9.03g，52.5mmol)。所得溶液在室溫下攪拌過夜。利用水小心地驟冷反應(yīng)混合物，利用乙酸乙酯萃取。在MgSO4上干燥有機(jī)層，過濾并濃縮。所得粗產(chǎn)物(16.26g)為粘性棕色泡沫，其可在不進(jìn)行進(jìn)一步純化下用于下一步驟。LC-MS m/z 299.3(MH+)，保留時(shí)間1.75min(MDLC 1)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.92(2H，br)，7.09-7.51(7H，m).
實(shí)施例2制備N-(4-氯苯基)-3-甲基丁亞胺酸酰胺
向3-甲基丁腈(250mg，3.0mmol)和AlCl3(400mg，3.0mmol)的甲苯(6mL)溶液中加入4-氯苯胺(383mg，3.0mmol)?；亓鲾嚢杷萌芤?小時(shí)，利用水稀釋，利用EtOAc萃取。利用飽和NaHCO3溶液中和水層，利用EtOAc萃取。在MgSO4上干燥合并的萃取液，過濾并濃縮。所得粗產(chǎn)物(364mg，58％收率)可在不進(jìn)行進(jìn)一步純化下用于下一步驟。
實(shí)施例3制備1-(4-氟苯基)-2-(2-氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酸乙酯 向粗2-氯-N-(4-氟苯基)苯羧亞胺酸酰胺(6.8g，27mmol)的甲苯(100mL)溶液中加入溴丙酮酸乙酯(3.5mL，27mmol)。所得溶液在115℃下加熱90分鐘，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，加入丙胺(2.2mL，27mmol)。利用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，利用飽和NaCl溶液洗滌。在MgSO4上干燥有機(jī)層，過濾并濃縮。在硅膠上利用快速色譜純化(30％乙酸乙酯，于己烷中)殘留物，得到產(chǎn)物(3.4g，37％由4-氟苯胺得到的總收率)，為亮黃色固體。LC-MS m/z 345.2(MH+)，保留時(shí)間2.78min(方法1)；Rf＝0.20(30％EtOAc，于己烷中)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.38-1.43(3H，t，J＝6.9Hz)，4.39-4.46(2H，q，J＝3.9Hz)，6.98-7.52(8H，m)，7.89(1H，s).
實(shí)施例4制備1-(4-氯苯基)-2-(2，4-二氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酸乙酯 向粗2，4-二氯-N-(4-氯苯基)苯羧亞胺酸酰胺(10.3g，34.6mmol)的甲苯(100mL)溶液中加入溴丙酮酸乙酯(4.3mL，34.6mmol)和Na2CO3(7.3g，41.6mmol)?；亓骷訜崴萌芤?小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫。濾出固體，蒸發(fā)溶劑。在硅膠上利用快速色譜純化(40％乙酸乙酯，于己烷中)殘留物，得到產(chǎn)物(7.5g，52％由4-氟苯胺得到的總收率)，為亮黃色固體LC-MS m/z 395(MH+)，保留時(shí)間3.91min(方法1)；mp143～144℃；Rf＝0.63(50％EtOAc，于己烷中)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.39-1.43(3H，t，J＝7.2Hz)，4.39-4.46(2H，q，J＝6.9Hz)，7.04-7.08(2H，m)，7.25-7.50(5H，m)，7.89(1H，s).
實(shí)施例5制備2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-5-乙基-1H-咪唑-4-羧酸乙酯 利用K2CO3(5.2g，37.7mmol)處理2-二氯-N-(4-氯苯基)苯羧亞胺酸酰胺(10g，37.7mmol)的THF(100mL)溶液，接著在3小時(shí)內(nèi)慢慢加入3-溴-2-氧基戊酸乙酯(10.1g，45mmol)。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物過夜。然后濾出固體，蒸發(fā)溶劑。將殘留物(20g，37.7mmol)溶解在乙酸(100mL)中，回流加熱1小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，利用水(200mL)稀釋，利用乙酸乙酯萃取。利用水洗滌有機(jī)層，利用飽和NaHCO3中和水層，利用乙酸乙酯萃取。在MgSO4上干燥合并的萃取液，過濾并濃縮。在硅膠上利用快速色譜純化(40％乙酸乙酯，于己烷中)殘留物，得到產(chǎn)物(8.5g，40％由4-氟苯胺得到的總收率)，為亮黃色固體LC-MS m/z 389(MH+)，保留時(shí)間3.31min(方法1)；Rf＝0.28(40％EtOAc，于己烷中)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.05-1.10(3H，t，J＝7.5Hz)，1.40-1.44(3H，t，J＝7.2Hz)，2.85-2.92(2H，q，J＝4.2Hz)，4.39-4.46(2H，q，J＝7.2Hz)，7.09-7.41(8H，m).
實(shí)施例6制備2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-5-乙基-N-(1-哌啶基)-1H-咪唑-4-羧酰胺 向1-氨基哌啶(2.48mL，23mmol)的CH2Cl2(15mL)溶液中加入三乙基鋁(11.5mL，2M，于己烷中，23mmol)。攪拌混合物0.5小時(shí)后，加入2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-5-乙基-1H-咪唑-4-羧酸乙酯(3.0g，7.7mmol)的CH2Cl2(10mL)溶液?；亓骷訜岱磻?yīng)混合物2小時(shí)，冷卻至室溫。在0℃下，向反應(yīng)混合物中慢慢滴加水，直至沒有氣泡出來。在MgSO4上干燥混合物，過濾并濃縮。在硅膠上利用快速色譜純化(先40％，然后60％乙酸乙酯，于己烷中)殘留物，得到產(chǎn)物(2.4g，64％收率)，為白色固體LC-MS m/z 443(MH+)，保留時(shí)間2.95min(方法1)；mp208～209℃，Rf＝0.74(40％EtOAc)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ0.98-1.03(3H，t，7.8Hz)，1.35-1.37(2H，m)，1.58-1.70(4H，m)，2.77-2.88(6H，m)，6.70-7.30(8H，m)，7.84(1H，s).
實(shí)施例7制備1-(4-氯苯基)-2-(2，4-二氯苯基)-5H-咪唑-4-羧酸 向1-(4-氯苯基)-2-(2，4-二氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酸乙酯(1.1g，2.79mmol)的MeOH(20mL)溶液中加入KOH(2.2g，39mmol)的水(20mL)溶液?；旌衔镌?0℃下加熱3小時(shí)。將混合物冷卻至室溫，蒸發(fā)MeOH。加入HCl(1N)，直至生成白色沉淀。濾出固體，真空干燥，得到產(chǎn)物(1.0g，98％收率)，為白色固體LC-MS m/z 367(MH+)，保留時(shí)間為3.43min(方法1)；mp150-151℃；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.24-7.65(7H，m)，8.26(1H，s).
實(shí)施例8制備1-(4-氯苯基)-2-(2，4-二氯苯基)-N-(4-嗎啉基)-1H-咪唑-4-羧酰胺 向1-(4-氯苯基)-2-(2，4-二氯苯基)-5H-咪唑-4-羧酸(50mg，0.137mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液中加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(58mg，0.164mmol)、1-羥基-7-氮雜苯并三唑(40mg，0.164mmol)和三乙胺(1.5mL)。在攪拌混合物15分鐘后，加入4-嗎啉胺(0.164mmol)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜，利用水洗滌。在MgSO4上干燥有機(jī)層，過濾并濃縮。HPLC純化(填充YMC的PRO C18 15×200mm柱，10～90％CH3CN，于H2O/TFA中，20mL/min)殘留物，得到產(chǎn)物(10mg，16％收率)，為黃色油狀物L(fēng)C-MSm/z 451(MH+)，保留時(shí)間3.03min(方法1)；Rf＝0.57(50％EtOAc，于己烷中)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ2.97-3.00(4H，t，J＝4.5Hz)，3.83-3.86(4H，t，J＝4.2Hz)，7.04-7.39(8H，m)，7.92(1H，s).
實(shí)施例9制備2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-(3-吡啶基)-1H-咪唑-4-羧酰胺 將2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酸(403mg，1.2mmol)溶解在二氯甲烷(5mL)中，利用O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N′N′-四甲基糠醛六氟膦酸鹽(HATU)(459mg，1.56mmol)和N-甲基嗎啉(NMM)(182mg，1.8mmol)處理。混合物在氬氣氣氛下攪拌15分鐘，之后加入3-氨基吡啶(349mg，3.6mmol)。繼續(xù)在室溫下攪拌過夜。然后將反應(yīng)混合物吸附到硅膠上，色譜純化(2～3％MeOH，于CH2Cl2中)，得到2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-(3-吡啶基)-1H-咪唑-4-羧酰胺(266mg，54％收率)LC-MS m/z 409.3，保留時(shí)間2.43分鐘(方法1)。
實(shí)施例10制備2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N′-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-咪唑-4-碳酰肼 在20mL螺帽小瓶中，將100mg(0.3mmol)2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酸、87mg(0.33mmol)TFFH(Advanced Chemtech，Louisville，KY)和5.0當(dāng)量PS-DIEA(Argonaut Technologies Inc.，San Carlos，CA)(裝填量3.50mmol/g，429mg，1.5mmol)在8ml 1，2-二氯乙烷中，于35℃下加熱過夜。通過LC-MS監(jiān)控酰氟的生成。向混合物中加入1.1當(dāng)量(58mg，0.33mmol)2-(三氟甲基)苯基肼，反應(yīng)繼續(xù)過夜。通過濾管(聚丙烯玻璃料)過濾混合物，減壓蒸發(fā)濾液。將粗產(chǎn)物溶解在1mL MeOH中，通過制備性HPLC純化，得到41.8mg 2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N′-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-咪唑-4-碳酰肼，為三氟乙酸鹽(亮黃色固體，23％收率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.70(s，1H)，7.85(s，1H)，7.45(m，2H)，7.20-7.38(m，6H)，7.12(d，1H)，7.00(d，2H)，6.88(t，1H)，6.60(s，1H)；LC-MS m/z 491.2(MH+)，保留時(shí)間4.02min(方法2)。
產(chǎn)物的游離堿形式可通過下述方法獲得將TFA鹽溶解在二氯甲烷中，利用飽和碳酸鈉溶液和水洗滌，接著利用硫酸鎂干燥有機(jī)相，減壓蒸發(fā)有機(jī)相。產(chǎn)物的鹽酸鹽形式可通過下述方法獲得利用1.0M于二乙基醚中的氫氯酸處理于二氯甲烷中的游離堿，直至不再有沉淀生成，接著減壓蒸發(fā)溶劑。
實(shí)施例11制備1-{[2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)
-1H-咪唑-4-基]羰基}-4-[4-(三氟甲基)苯基]哌嗪 在20mL螺帽小瓶中，將100mg(0.3mmol)2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酸、87mg(0.33mmol)TFFH和5.0當(dāng)量PS-DIEA(裝填量3.50mmol/g，429mg，1.5mmol)在8ml 1，2-二氯乙烷中，于35℃下加熱過夜。通過LC-MS監(jiān)控酰氟的生成。向混合物中加入1.1當(dāng)量(76mg，0.33mmol)1-(4-三氟甲基苯基)哌嗪，反應(yīng)繼續(xù)過夜。通過濾管(聚丙烯玻璃料)過濾混合物，減壓蒸發(fā)濾液。將粗產(chǎn)物溶解在1mL MeOH中，通過制備性HPLC純化，得到45.9mg1-{[2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基]羰基}-4-[4-(三氟甲基)苯基]哌嗪，為三氟乙酸鹽(黃色油狀物，23％收率)。
1H NMR(400MHz，CD3COCD3)δ7.95(s，1H)，7.60(m，1H)，7.30-7.50(m，7H)，7.25(d，2H)，7.05(d，2H)，4.5(bs，2H)，3.80(bs，2H)，3.35(m，4H)；LC-MS m/z 545.3(MH+)，保留時(shí)間4.21min(方法2)。
實(shí)施例12制備2-(2，4-二氯苯基)-N-(反式-2-羥基環(huán)己基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基羧酰胺 在20mL螺帽小瓶中，將182mg(0.5mmol)2-(2，4-二氯苯基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-羧酸、145mg(0.55mol)TFFH和5.0當(dāng)量PS-DIEA(裝填量3.50mmol/g，716mg，2.5mmol)在10ml1，2-二氯乙烷中，于35℃下加熱過夜。通過LC-MS監(jiān)控酰氟的生成。向混合物中加入1.1當(dāng)量(84mg，0.55mmol)反式-2-氨基環(huán)己醇鹽酸鹽，反應(yīng)繼續(xù)過夜。通過濾管(聚丙烯玻璃料)過濾混合物，減壓蒸發(fā)濾液。將粗產(chǎn)物溶解在1mL MeOH中，通過制備性HPLC純化，得到53mg 2-(2，4-二氯苯基)-N-(反式-2-羥基環(huán)己基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基羧酰胺(琥珀色油狀物，23％收率)。
1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ7.90(s，1H)，7.30-7.50(m，4H)，7.10(d，2H)，6.90(d，2H)，3.85(s，3H)，3.80(m，1H)，3.50(m，1H)，3.25(bs，1H)，2.0(m，2H)，1.75(m，2H)，1.30-1.50(m，4H)；LC-MS m/z 460.2(MH+)，保留時(shí)間3.31min(方法2)。
實(shí)施例13制備1-{[2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基]羰基}-4-哌啶酮 步驟1 將硫酰氯(0.66mL，9mmol)加入到2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酸(1g，3mmol)的甲苯(10mL)溶液中。在氬氣氣氛下回流加熱混合物1.5小時(shí)，濃縮得到2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羰基氯，該產(chǎn)物可在不進(jìn)行進(jìn)一步純化條件下用于下一步驟。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ8.40(s，1H)，7.69-7.09(m，8H).
步驟2 將三乙胺(1.46mL，10.45mmol)加入到4-哌啶酮三氟乙酸鹽(0.76g，3.58mmol)的CH2Cl2(10mL)懸浮液中，加入2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羰基氯的CH2Cl2(5mL)溶液?；旌衔镌谑覝叵掠跉鍤鈿夥障聰嚢?7小時(shí)，利用CH2Cl2(50mL)稀釋，利用水(2×50mL)洗滌，在MgSO4上干燥并濃縮得到1-{[2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基]羰基}-4-哌啶酮(0.96g，77％)，為黃色固體。MS(電噴)414(MH+)，1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ7.80(s，1H)，7.37-7.20(m，6H)，7.06-7.00(m，6H)，4.47(br，2H)，3.92(br，2H)，2.46(t，4H).
實(shí)施例145-丁基-2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-(1-哌啶基)-1H-咪唑-4-羧酰胺 步驟1 在室溫下，向5-丁基-2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酸(438mg，1.12mmol)的無水甲苯(3mL)溶液中加入硫酰氯(401μL，3.4mmol)。在室溫下攪拌溶液過夜，在110℃下加熱5小時(shí)。將所得溶液冷卻至室溫，蒸發(fā)溶劑，得到5-丁基-2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羰基氯(401pu，3.4mmol)，該產(chǎn)物可在不進(jìn)行進(jìn)一步純化條件下用于下一步驟。LC-MSm/z 407(MH+)，保留時(shí)間3.62min(方法2)。
步驟2 向5-丁基-2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羰基氯(227mg，0.56mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液中加入1-氨基哌啶(113mg，1.12mmol)和Et3N(234μL，1.68mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?，然后減壓蒸發(fā)溶劑。制備性反相HPLC純化殘留物，利用于水中的20至100％MeOH梯度洗脫，得到125mg(48％)5-丁基-2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-(1-哌啶基)-1H-咪唑-4-羧酰胺，為白色粉末。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.49-7.27(m，8H)，2.93(t，2H)，2.82(bs，4H)，1.77-1.71(m，4H)，1.46-1.37(m，4H)，1.25-1.20(2H)，0.79(t，3H).
LC-MS m/z 471.33(MH+)，保留時(shí)間2.88min(方法2)。
實(shí)施例15制備N-外-二環(huán)[2.2.1]庚-2-基-2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酰胺 步驟1 將2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酸(1.5g，4.5mmol)溶解在二氯甲烷(40mL)中，加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDCI，946mg，4.95mmol)和三乙胺(500mg，4.95mmol)，接著加入五氟苯酚(815mg，4.37mmol)?；旌衔镌跉鍤鈿夥障掠谑覝叵聰嚢?小時(shí)，之后利用5％HCl洗滌。干燥(MgSO4)有機(jī)層，過濾并濃縮，得到粗產(chǎn)物(1.26g)，將其進(jìn)行硅膠色譜純化(20％EtOAc，于己烷中)，得到2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酸五氟苯基酯(0.73g，32％收率)。LC-MS m/z499.0(MH+)，保留時(shí)間3.93min(方法1)。
步驟2 將五氟苯酚酯(60mg，0.12mmol)和掛-降冰片胺(40mg，0.36mmol)溶解在二氯甲烷(2mL)中，利用三乙胺(49mg，0.48mmol)處理，在室溫下攪拌過夜。然后利用5％HCl水溶液、碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾并濃縮。由此得到純的N-外-二環(huán)[2.2.1]庚-2-基-2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酰胺(30mg，59％收率)LC-MS m/z 426.1(MH+)，保留時(shí)間3.49min(方法1)。
實(shí)施例16制備N-{[2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1-咪唑-4-基]羰基}-4-(三氟甲基)苯磺酰胺
在20mL螺帽小瓶中，加入250mg(0.75mmol)2-(2-氯苯基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-羧酸、18.3mg(0.15mol)DMAP、1.25g(1.5mmol)PS-碳化二亞胺(聚苯乙烯支撐的碳化二亞胺，Argonaut Technologies Inc.，San Carlos，CA)、169mg(0.75mmol)α，α，α-三氟對(duì)甲苯磺酰胺和12mL二氯甲烷，在室溫下通過軌道振蕩混合反應(yīng)混合物過夜。通過濾管(聚丙烯玻璃料)過濾混合物，減壓蒸發(fā)濾液。將粗產(chǎn)物溶解在2mL MeOH中，通過制備性HPLC純化，得到39.3mg N-{[2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1-咪唑-4-基]羰基}-4-(三氟甲基)苯磺酰胺(淺褐色固體，10％收率)。
1H NMR(400MHz，CD3COCD3)δ8.25(d，2H)，7.85(s，1H)，7.75(s，2H)，7.20-7.40(m，6H)，6.95(t，2H)；LC-MS m/z 540(MH+)，保留時(shí)間3.36min(方法2)。
實(shí)施例17制備1-{[2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基]羰基}-4-(4-氟苯基)-4-哌啶醇 在-78℃下，將1-{[2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基]羰基}-4-哌啶酮(0.1g，0.24mmol，由實(shí)施例13制得)的THE(4mL)溶液滴加到4-氟苯基溴化鎂(0.6mL，0.60mL)溶液中?；旌衔镌?78℃下攪拌2小時(shí)，然后溫?zé)嶂?0℃。慢慢加入飽和NH4Cl(3mL)，接著加入水(3mL)。利用乙酸乙酯(3×20mL)萃取混合物，在MgSO4上干燥。通過柱分離(50％乙酸乙酯，于己烷中)得到產(chǎn)物(0.056g，46％)。MS(電噴)510.1(M)+；1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ7.81(s，1H)，7.50-7.24(m，8H)，7.10-6.98(m，4H)，5.33-5.17(m，1H)，4.74-4.57(m，1H)，3.68(t，1H)，3.31(t，1H)，2.15(br，2H)，1.83(d，2H).
實(shí)施例18制備1-{[2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基]羰基}-4-(2呋喃基)-4-哌啶醇 在-78℃下，將BuLi(0.875mL，1.40mmol，1M THF溶液)慢慢加入到呋喃(0.106mL，1.45mmol)的THF(2mL)溶液中，混合物在-78℃下攪拌1小時(shí)。慢慢加入1-{[2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基]羰基}-4-哌啶酮(0.3g，0.68mmol)的THF(1mL)溶液?；旌衔镌?78℃下攪拌2小時(shí)，加入飽和NH4Cl(3mL)和水。利用乙酸乙酯(3×20mL)萃取混合物，在MgSO4上干燥。通過柱分離(乙酸乙酯)得到產(chǎn)物(0.142g，61％)。MS(電噴)482.1(M)+；1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ7.85(s，1H)，7.51-7.31(m，7H)，7.10-6.98(m，4H)，7.17-7.10(m，2H)，6.39(s，1H)，6.29(s，1H)，4.68(br，1H)，4.28(br，1H)，3.94(br，1H)，3.57(br，1H)，2.26-1.91(m，4H).
實(shí)施例19制備2-羥基氨基-3-氧代丁酸叔丁酯
將乙酰乙酸叔丁酯(5.0g，31.6mmol)溶解在乙酸(4.5mL)中，通過冰水浴冷卻，在水(5.5mL)中利用亞硝酸鈉(2.45g，35.5mmol)處理，其間內(nèi)部溫度保持在＜10℃(參見如US 4,743,586)。加料完成后，混合物在室溫下攪拌30分鐘，至后加入水(16mL)。2小時(shí)后，利用乙醚(3×25mL)萃取，將其利用水(10mL)、碳酸氫鈉溶液(3×10mL)和水(20mL)洗滌，得到2-羥基氨基-3-氧代丁酸叔丁酯(5.52g，93％)，為白色固體1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.61(s，1H)，2.39(s，3H)，1.58(s，9H).
實(shí)施例20制備2-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-咪唑-4-羧酸叔丁酯 將2-羥基氨基-3-氧代丁酸叔丁酯(0.50g，2.67mmol)在無水乙腈(10mL)下與2-氯苯甲胺(0.34mL，2.82mmol)混合，回流加熱3小時(shí)。在冷卻時(shí)，過濾懸浮液，利用少量的乙腈洗滌濾出的物質(zhì)，得到白色固體(0.379g)。濃縮濾液，硅膠色譜純化(25％EtOAc，于己烷中)殘留物，得到2-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-咪唑-4-羧酸叔丁酯(0.262g，82％合并的收率)，為黃色泡沫狀物1H NMR(300MHz，CDCl3)δ10.43(br，1H)，8.29(m，1H)，7.38(m，3H)，2.52(s，3H)，1.60(s，9H).
實(shí)施例21制備2-(2-氯苯基)-5-甲基-1-(4-硝基苯基)-1H-咪唑-4-羧酸叔丁酯
在無水DMF中，將2-(2-氯苯基)-5-甲基咪唑-4-羧酸叔丁酯(70mg，0.24mmol)與4-氟-1-硝基苯(27μL，0.25mmol)和碳酸鉀(66mg，0.48mmol)混合，在20℃下加熱4小時(shí)。利用水稀釋混合物并過濾，得到黃色固體，將其進(jìn)行硅膠色譜純化(40％EtOAc，于己烷中)，得到黃色固體(72mg，73％)1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.20(m，2H)，7.51(m，1H)，7.25(m，5H)，2.45(s，3H)，1.66(s，9H).
實(shí)施例22制備2-(2-氯苯基)-5-甲基-1-(4-硝基苯基)-1H-咪唑-4-羧酸 將2-(2-氯苯基)-5-甲基-1-(4-硝基苯基)-1H-咪唑-4-羧酸叔丁酯(69mg，0.17mmol)溶解在無水二氯甲烷(2mL)中，利用三氟乙酸(2mL)逐滴處理。在室溫下攪拌2小時(shí)后，濃縮溶液，得到2-(2-氯苯基)-5-甲基-1-(4-硝基苯基)-1H-咪唑-4-羧酸，為黃色泡沫狀物，其可在不進(jìn)行進(jìn)一步純化下用于實(shí)施例23制備中。
實(shí)施例23制備N-環(huán)己基-2-(2-氯苯基)-5-
甲基-1-(4-硝基苯基)-1H-咪唑-4-羧酰胺 將由實(shí)施例22得到的羧酸溶解在無水二氯甲烷(3mL)中，通過冰水浴冷卻，利用1-(3-二甲氨基)丙基-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(39mg，0.20mmol)和二甲氨基吡啶(46mg，0.38mmol)處理?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?小時(shí)，之后加入環(huán)己胺(23μL，0.20mmol)。攪拌溶液過夜，利用二氯甲烷稀釋，用水和氯化銨溶液洗滌，干燥(硫酸鈉)并過濾。濃縮濾液得到黃色油狀物(70mg)，將其進(jìn)行硅膠色譜純化(35％EtOAc，于己烷中)，得到N-環(huán)己基-2-(2-氯苯基)-5-甲基-1-(4-硝基苯基)-1H-咪唑-4-羧酰胺(50mg，67％)，為黃色固體1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.20(d，2H)，7.41(m，1H)，7.25(m，5H)，7.12(m，1H)，3.95(m，1H)，2.55(s，3H)，2.00(m，2H)，1.75(m，2H)，1.61(m，1H)，1.30(m，5H)；LC-MS m/z 439.2(MH+)，保留時(shí)間3.41min(方法1)。
實(shí)施例24制備1-(4-氯苯基)-2-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-咪唑-4-羧酸叔丁酯 在無水乙腈(3mL)中，將2-(2-氯苯基)-5-甲基咪唑-4-羧酸叔丁酯(70mg，0.24mmol)與4-氯芐基溴(50mg，0.24mmol)和碳酸鉀(66mg，0.48mmol)混合，回流加熱過夜。下一天加入另外的4-氯芐基溴(10mg，0.05mmol)，再回流加熱過夜。下一天向冷卻的混合物中加入水，接著利用EtOAc萃取。利用水合NaCl洗滌萃取液，干燥(Na2SO4)，過濾并濃縮，得到無色油狀物(113mg)。將其進(jìn)行硅膠色譜純化(25％EtOAc，于己烷中)，得到1-(4-氯苯基)-2-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-咪唑-4-羧酸叔丁酯(61mg，61％收率)，為白色泡沫狀物1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.48(d，1H)，7.40(m，1H)，7.27(m，2H)，7.17(d，2H)，6.78(d，2H)，5.33(br，2H)，2.55(s，3H)，1.50(s，9H)；LC-MS m/z 417.1(MH+)，保留時(shí)間3.23min(方法1)。
實(shí)施例25制備5-溴-1-(4-氯苯基)-2-(2，4-二甲基苯基)-1H-咪唑-4-羧酸乙酯 將1-(4-氯苯基)-2-(2，4-二甲基苯基)-1H-咪唑-4-羧酸乙酯(1.23g，3.47mmol)溶解在EtOH(15mL)中，利用N-溴琥珀酰亞胺(1.25g，7.02mmol)處理。溶液在室溫下攪拌3小時(shí)，加入水。利用二氯甲烷萃取，然后利用NaCl溶液洗滌，得到橘黃色固體(1.94g)。將其進(jìn)行硅膠色譜純化(20％EtOAc，于己烷中)，得到亮褐色固體(1.028g，68％)1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.35(d，2H)，7.03(d，2H)，7.00(m，1H)，6.86(m，2H)，4.44(q，2H)，2.26(s，3H)， 2.10(s，3H)，1.43(t，3H)；LC-MS m/z 433.1(MH+)，保留時(shí)間3.84min(方法1)。
實(shí)施例26制備1-(4-氯苯基)-5-甲基-2-
(2，4-二甲基苯基)-1H-咪唑-4-羧酸乙酯 在壓力試管中，將5-溴-1-(4-氯苯基)-2-(2，4-二甲基苯基)-1H-咪唑-4-羧酸乙酯(430mg，0.99mmol)溶解在無水DMF(5mL)中，利用四甲基錫(1.3mL，9.38mmol)、乙酸鈀(9mg，0.04mmol)和三-鄰甲苯基膦(26mg，0.085mmol)處理。混合物在110℃下加熱15分鐘。在混合物冷卻至室溫后，加入水(25mL)。利用二氯甲烷(2×25mL)萃取混合物，利用水洗滌有機(jī)相，干燥(Na2SO4)，過濾并濃縮，得到亮棕色油狀物(436mg)。將其進(jìn)行硅膠色譜純化(33％EtOAc，于己烷中)，得到1-(4-氯苯基)-5-甲基-2-(2，4-二甲基苯基)-1H-咪唑-4-羧酸乙酯(338mg，93％收率)，為白色泡沫狀物1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.30(d，2H)，7.00(m，3H)，6.85(m，2H)，4.41(q，2H)，2.42(s，3H)，2.23(s，3H)，2.06(s，3H)，1.41(t，3H).
實(shí)施例27制備5-溴-2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-(1-哌啶基)-1H-咪唑-4-羧酰胺 步驟1 在75℃下，攪拌2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酸(50mg，0.15mmol)和N-溴琥珀酰亞胺(88mg，0.49mmol)的二甲基甲酰胺(5mL)溶液3天。通過制備性HPLC純化溶液，得到5-溴-2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酸(30.7mg，50％)，為白色固體。LC-MS m/z 411.2(MH+)，保留時(shí)間2.70min(方法2)。
步驟2 如先前實(shí)施例14所描述，將5-溴-2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酸轉(zhuǎn)化成5-溴-2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-(1-哌啶基)-1H-咪唑-4-羧酰胺。LC-MSm/z 493.0(MH+)，保留時(shí)間2.63min(方法2)。
1H NMR(CD2Cl2，400MHz)δ7.29(m，6H，Ph)，7.05(m，2H，Ph)，3.68(m，3H，哌啶)，3.36(m，2H，哌啶)，1.88(m，3H，哌啶)，1.57(m，2H，哌啶).
實(shí)施例28制備5-氯-2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酸乙酯 向2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酸乙酯(270mg，0.75mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液中加入SO2Cl2(1.6mL，20mmol)。回流加熱混合物過夜，利用水稀釋。在MgSO4上干燥，過濾并濃縮。將其進(jìn)行快速硅膠色譜純化(33％EtOAc，于己烷中)，得到5-氯-2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酸乙酯(60mg，20％收率)，為白色固體LC-MS m/z 395.0(MH+)，保留時(shí)間3.45min(方法1)。該中間體為流程2式X的實(shí)例，將其轉(zhuǎn)化成5-氯-2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-(1-哌啶基)-1H-咪唑-4-羧酰胺(表?xiàng)l目21)。
實(shí)施例29制備2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)
-N-甲氧基-N-甲基-1H-咪唑-4-羧酰胺 在攪拌下，于氬氣氣氛下，在冰水浴中，將2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羰基氯(4.71g，13.4mmol，由實(shí)施例13步驟1描述的方法制得)的10mL二氯甲烷溶液加入到N，O-二甲基羥基胺鹽酸鹽(1.44g，14.7mmol)和三乙胺(5.6mL，40.2mmol)的60mL二氯甲烷溶液中。在加料完成后除去冰水浴，繼續(xù)攪拌1小時(shí)。加入水，利用乙酸乙酯萃取混合物。有機(jī)層在Na2SO4上干燥，減壓濃縮。硅膠純化粗產(chǎn)物，利用乙酸乙酯洗脫，得到2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-甲氧基-N-甲基-1H-咪唑-4-羧酰胺(4.20g，83％)，為灰白色固體Rf＝0.22(乙酸乙酯)。
實(shí)施例30制備[2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基](4-氟苯基)甲酮 在氬氣氣氛下，于室溫?cái)嚢钘l件下，向2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-甲氧基-N-甲基-1H-咪唑-4-羧酰胺(50.0mg，0.133mmol)的1.5mL THF溶液中加入1.0M 4-氟苯基溴化鎂(0.27mL，0.27mmol)溶液。攪拌所得混合物30分鐘，加入飽和NH4Cl水溶液。利用乙酸乙酯萃取混合物，在Na2SO4上干燥有機(jī)層，真空濃縮。HPLC純化粗產(chǎn)物，得到[2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基](4-氟苯基)甲酮(38.0mg，69％)，為固體Rf＝0.58(1∶1 乙酸乙酯/己烷)。
實(shí)施例31制備[2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-5-乙基-1H-咪唑-4-基](2-噻吩基)甲酮 在氬氣氣氛下，于-78℃攪拌條件下，向2-溴代噻吩(0.22g，1.36mmol)的2mL THF溶液中加入0.84mL 1.6M BuLi的己烷溶液，繼續(xù)攪拌1小時(shí)。向其中加入1-{[2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-5-乙基-1H-咪唑-4-基]羰基}-4-哌啶酮的2mL THF溶液。攪拌所得混合物，漸漸溫?zé)嶂潦覝剡^夜。利用飽和NH4Cl水溶液驟冷反應(yīng)，利用乙酸乙酯萃取混合物。濃縮有機(jī)層，HPLC純化粗產(chǎn)物，得到[2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-5-乙基-1H-咪唑-4-基](2-噻吩基)甲酮(60mg，31％)，為固體Rf＝0.13(1∶5 乙酸乙酯/己烷)。
實(shí)施例32制備2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羧醛
在-78℃下，向2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酸乙酯(200mg，0.51mmol)的甲苯(10mL)溶液中滴加DIBAH(2.0mL)。所得溶液在室溫下攪拌，利用1N HCl(0.5mL)驟冷。利用1N HCl(5mL)洗滌有機(jī)層，在MgSO4上干燥，過濾并濃縮。利用快速色譜純化(50％EtOAc，于己烷中)殘留物，得到產(chǎn)物(62mg，38％收率)。LC-MS m/z 317.0(MH+)，保留時(shí)間2.75min(方法1)。
實(shí)施例33制備N-{[2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基]甲基}-N-環(huán)己胺 向2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羧醛(62mg，0.20mmol)的甲醇(7mL)溶液中加入環(huán)己胺(58μL，0.5mmol)。攪拌混合物過夜，冷卻至4℃。加入NaBH4(40mg，1.1mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?小時(shí)，濃縮。將殘留物溶解在CH2Cl2中，利用鹽水洗滌，在MgSO4，過濾并濃縮。制備性TLC(50％EtOAc，于己烷中)純化殘留物，得到N-{[2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基]甲基}-N-環(huán)己胺(65mg，81％收率)LC-MS m/z(400.7MH+)，保留時(shí)間2.32min(方法1)。
實(shí)施例34制備1-{[1-(4-氯苯基)-2-(2，4-二氯苯基)-1H-咪唑-4-基]甲基}-4-(4-甲基苯基)哌嗪
向氫化鋰鋁(21mg，0.54mmol)的THF(2mL)懸浮液中加入1-(4-甲基苯基)哌嗪鹽酸鹽(32mg，0.13mmol)。10分鐘后，滴加2-(2，4-二氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酸乙酯(39mg，0.1mmol)。攪拌反應(yīng)混合物10分鐘，利用水稀釋。HPLC純化(填充YMC的PRO C18 20×150mm柱，10～90％CH3CN，于H2O/TFA中，25mL/min)殘留物。在MgSO4上干燥有機(jī)層，過濾并濃縮。HPLC純化殘留物，得到1-{[1-(4-氯苯基)-2-(2，4-二氯苯基)-1H-咪唑-4-基]甲基}-4-(4-甲基苯基)哌嗪(1.4mg，2％收率)LC-MS m/z 511.1(MH+)，保留時(shí)間2.94min(方法1)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ2.29(3H，s)，3.42-3.49(8H，br)，4.39(2H，s)，6.85-7.41(11H，m)，7.54(1H，s).
其它方法在有些情況下，通過應(yīng)用適當(dāng)?shù)牧硗饣瘜W(xué)步驟，由實(shí)施例1至34描述的方法實(shí)驗(yàn)制得的產(chǎn)物和中間體可轉(zhuǎn)化成另外的產(chǎn)物。這些另外的實(shí)施例如下。
實(shí)施例351-(4-氯苯基)-2-(2，4-二氯苯基)-N-[(1R，2R)-2-羥基環(huán)己基]-1H-咪唑-4-羧酰胺
向N-[(1R，2R)-2-(芐氧基)環(huán)己基]-1-(4-氯苯基)-2-(2，4-二氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酰胺(表?xiàng)l目278，由實(shí)施例13和14描述的方法制備)(100mg，0.18mmol)的CH2Cl2(2mL)溶液中加入TMSI(碘三甲基甲硅烷)(60μL，0.42mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢柽^夜，利用水稀釋。在MgSO4上干燥有機(jī)層，過濾并濃縮。制備性TLC純化(EtOAc)殘留物，得到1-(4-氯苯基)-2-(2，4-二氯苯基)-N-[(1R，2R)-2-羥基環(huán)己基]-1H-咪唑-4-羧酰胺(56mg，67％收率)，為黃色固體LC-MS m/z 464.3(MH+)，保留時(shí)間3.19min(方法1)；Rf＝0.67(EtOAc)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.16-1.30(4H，m)，1.66-1.69(2H，m)，1.98-2.02(2H，m)，3.37-3.39(1H，m)，3.70-3.80(1H，m)，3.99-4.06(1H，m)，6.96-7.37(8H，m)，7.78(1H，s).
實(shí)施例361-(4-氯苯基)-2-(2，4-二氯苯基)-N-[(1S，2S)-2-羥基環(huán)戊基]-1H-咪唑-4-羧酰胺 向N-[(1S，2S)-2-(芐氧基)環(huán)戊基]-1-(4-氯苯基)-2-(2，4-二氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酰胺(表?xiàng)l目282，由實(shí)施例13和14描述的方法制備)(119mg，0.22mmol)的CH2Cl2(4mL)溶液中加入TMSI(0.2mL，1.4mmol)。混合物在室溫下攪拌過夜，利用水稀釋。在MgSO4上干燥有機(jī)層，過濾并濃縮。制備性TLC純化(EtOAc)殘留物，得到1-(4-氯苯基)-2-(2，4-二氯苯基)-N-[(1S，2S)-2-羥基環(huán)戊基]-1H-咪唑-4-羧酰胺(80mg，82％收率)，為白色泡沫狀物L(fēng)C-MS m/z 450.0(MH+)，保留時(shí)間3.24min(方法1)；Rf＝0.45(50％EtOAc，于己烷中)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.22-2.24(6H，m)，3.97-4.15(2H，m)，7.03-7.42(7H，m)，7.86(1H，s).
實(shí)施例372-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-(4-哌啶基)-1H-咪唑-4-羧酰胺 向4-({[2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基]羰基}氨基)-1-哌啶羧酸乙酯(表?xiàng)l目221)(0.595g，1.221mmol)的CH2Cl2(10mL)溶液中加入TMSI(0.176mL，2.7mmol)?；亓骷訜峄旌衔?小時(shí)，利用甲醇稀釋并濃縮。將殘留物溶解在甲醇中，加入NaOMe(0.62mmol)。濃縮混合物并通過快速色譜純化(2M于甲醇中的NH3∶EtOAc＝15∶85)，得到產(chǎn)物2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-(4-哌啶基)-1H-咪唑-4-羧酰胺(180mg，36％收率)LC-MS m/z415.3(MH+)，保留時(shí)間2.22min(方法1)；Rf＝0.25(1∶1 EtOAc/2M于MeOH中的NH3)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.35-1.51(2H，m)，1.91-2.15(3H，br)，2.63-2.78(2H，m)，3.03-3.09(2H，m)，3.97-4.15(1H，m)，6.96-7.52(8H，m)，7.81(1H，s).
實(shí)施例382-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-[1-(2吡啶基)-4-哌啶基]-1H-咪唑-4-羧酰胺 向燒瓶中裝入2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-(4-哌啶基)-1H-咪唑-4-羧酰胺(實(shí)施例37)(100mg，0.24mmol)、2-溴吡啶(0.55mg，0.22mmol)、Pd2(dba)3(38mg，0.24mmol)、BINAP(1.18mg，0.0019mmol)、NaOtBu(33.6mg，0.35mmol)和甲苯(2mL)?；亓骷訜岱磻?yīng)混合物，冷卻至室溫，利用CH2Cl2稀釋。濾出固體，蒸發(fā)溶劑。利用快速色譜純化(33％EtOAc，于己烷中)殘留物，得到產(chǎn)物2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-[1-(2-吡啶基)-4-哌啶基]-1H-咪唑-4-羧酰胺(55mg，47％收率)LC-MS m/z 492.1(MH+)，保留時(shí)間2.47min(方法1)；Rf＝0.33(50％EtOAc，于己烷中)。
實(shí)施例392-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-咪唑-4-羧酰胺
向2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-(4-哌啶基)-1H-咪唑-4-羧酰胺(實(shí)施例37)(80mg，0.2mmol)的CH2Cl2(6mL)溶液中加入CH3I(28.4mg，0.2mmol)和Et3N(0.031mL，0.22mmol)?；亓骷訜岱磻?yīng)混合物5小時(shí)，冷卻至室溫，利用鹽水洗滌。在MgSO4上干燥有機(jī)層，過濾并濃縮。利用快速色譜純化(2M于甲醇中的NH3∶EtOAc＝1∶10)殘留物，得到產(chǎn)物2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-咪唑-4-羧酰胺(24mg，28％收率)LC-MS m/z 429.1(MH)，保留時(shí)間2.27min(方法1)；Rf＝0.31(EtOAc∶2M于甲醇中的NH3＝9∶1)。
實(shí)施例402-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-[反式-2-(2-羥基乙氧基)環(huán)己基]-1H-咪唑-4-羧酰胺 在1小時(shí)內(nèi)，于溫度保持在20℃下，向2-{[反式-2-({[2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基]羰基}氨基)環(huán)己基]氧基}乙酸乙酯(表?xiàng)l目286)(31mg，0.06mmol)的THF(7mL)和水(0.7mL)溶液中加入NaBH4(5mg，0.13mmol)。在室溫下攪拌混合物過夜，冷卻至5℃，利用丙酮(1mL)處理，然后濃縮。將殘留物溶解在CH2Cl2中，利用鹽水洗滌。在MgSO4上干燥有機(jī)層，過濾并濃縮。利用快速色譜純化(2.5％甲醇，于EtOAc中)殘留物，得到產(chǎn)物2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-[(1R，2S)-2-(2-羥基乙氧基)環(huán)己基]-1H-咪唑-4-羧酰胺(7.5mg，26％收率)LC-MS m/z(474.8MH+)，保留時(shí)間2.91min(方法1)；Rf＝0.17(EtOAc)。
實(shí)施例41
2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-[反式-2-甲氧基環(huán)己基]-1H-咪唑-4-羧酰胺 向燒瓶中裝入2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-[反式-2-羥基環(huán)己基]-1H-咪唑-4-羧酰胺(表?xiàng)l目336)(35mg，0.1mmol)、苯(3mL)、50％NaOH水溶液(2.5mL)和Bu4NHSO4(17mg)。在10℃下劇烈攪拌混合物的同時(shí)，快速滴加CH3I(19μL，0.3mmol)。再攪拌混合物30分鐘，利用水(5mL)和己烷(10mL)稀釋。在MgSO4上干燥有機(jī)層，過濾并濃縮。利用快速色譜純化(75％EtOAc，于己烷中)殘留物，得到產(chǎn)物2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-[(1R，2S)-2-甲氧基環(huán)己基]-1H-咪唑-4-羧酰胺(23mg，63％收率)LC-MS m/z 444.2(MH+)，保留時(shí)間3.24min(方法1)。
實(shí)施例424-2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基]羰基}硫代嗎啉1-氧化物 向4-[2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基]羰基}硫代嗎啉(表?xiàng)l目176)(30mg，0.072mmol)的丙酮(2mL)溶液中加入30％水合H2O2(0.09mmol)。在室溫下攪拌所得溶液36小時(shí)，利用水稀釋，利用NaHCO3中和，利用CH2Cl2萃取。在MgSO4上干燥有機(jī)層，過濾并濃縮。利用快速色譜純化(20％MeOH，于EtOAc中)殘留物，得到產(chǎn)物4-{[2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基]羰基}硫代嗎啉1-氧化物(17mg，54％收率)LC-MS m/z434.5(MH+)，保留時(shí)間2.55min(方法1)；Rf＝0.47(17％EtOAc，于己烷中)。
實(shí)施例43N-[(1S，2S)-2-(芐氧基)環(huán)己基]-5-溴-2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酰胺 在75℃下，將N-[(1S，2S)-2-(芐氧基)環(huán)己基]-2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酰胺(表?xiàng)l目276)(198mg，0.380mmol)和N-溴代琥珀酰亞胺(88mg，0.49mmol)的二甲基甲酰胺(5mL)溶液攪拌3天。制備性HPLC純化溶液，得到N-[(1S，2S)-2-(芐氧基)環(huán)己基]-5-溴-2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酰胺(196mg，86％)，為固體。LC-MS m/z 598.1(MH+)，保留時(shí)間3.72min(方法2)。
實(shí)施例445-溴-2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-[(1S，2S)-2-羥基環(huán)己基]-1H-咪唑-4-羧酰胺
正如先前實(shí)施例35所描述，通過利用碘代三甲基甲硅烷處理，使N-[(1S，2S)-2-(芐氧基)環(huán)己基]-5-溴-2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-羧酰胺(實(shí)施例43)脫芐基化，得到5-溴-2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-[(1S，2S)-2-羥基環(huán)己基]-1H-咪唑-4-羧酰胺。LC-MS m/z 508.1(MH+)，保留時(shí)間2.96min(方法2)。
1H NMR(CD2Cl2，400MHz)δ7.43(d，1H，Ph)，7.27(m，5H，Ph)，7.06(m，2H，Ph)，3.70(m，1H，CHOH)，3.44(m，1H，CHN)，1.95(m，2H，環(huán)己烷)，1.64(m，2H，環(huán)己烷)，1.24(m，4H，環(huán)己烷).
實(shí)施例451-(4-氨基苯基)-2-(2-氯苯基)-5-甲基-N-(1-哌啶基)-1H-咪唑-4-羧酰胺 將于甲醇(5mL)中的2-(2-氯苯基)-5-甲基-1-(4-硝基苯基)-N-(1-哌啶基)-1H-咪唑-4-羧酰胺(表?xiàng)l目41)(111mg，0.25mmol)懸浮液加入到Degussa型鈀/碳(10％重量比，12mg)?；旌衔镌谑覝叵掠诖髿鈮毫ο職浠?小時(shí)。通過硅藻土過濾混合物并濃縮濾液，得到1-(4-氨基苯基)-2-(2-氯苯基)-5-甲基-N-(1-哌啶基)-1H-咪唑-4-羧酰胺(104mg，100％)，為黃色泡沫狀物。該產(chǎn)物可在不進(jìn)行進(jìn)一步純化條件下用于制備本發(fā)明化合物，如用于實(shí)施例46。
實(shí)施例462-(2-氯苯基)-1-(4-{[(乙氨基)羧基]氨基}苯基)-5-甲基-N-(1-哌啶基)-1H-咪唑-4-羧酰胺三氟乙酸鹽 將1-(4-氨基苯基)-2-(2-氯苯基)-5-甲基-N-(1-哌啶基)-1H-咪唑-4-羧酰胺(實(shí)施例45)(52mg，0.13mmol)溶解在無水二氯甲烷(2mL)中，加入到異氰酸乙酯(20μL，0.25mmol)中。溶液在室溫下攪拌6小時(shí)，之后加入更多的乙氰酸乙酯(30μL，0.38mmol)。在攪拌過夜后，回流加熱混合物1小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，得到黃色固體，將其進(jìn)行硅膠色譜純化(3％MeOH，于EtOAc中)，得到半純的產(chǎn)物(21mg)。該產(chǎn)物通過HPLC(填充YMC的PRO C18 15×200mm柱，30～90％CH3CN，于H2O/TFA中，20mL/min)進(jìn)一步純化，得到2-(2-氯苯基)-1-(4-{[(乙氨基)羰基]氨基}苯基)-5-甲基-N-(1-哌啶基)-1H-咪唑-4-羧酰胺三氟乙酸鹽(12mg，13％收率)，為白色固體LC-MS m/z 481.4(MH+)，保留時(shí)間2.35min(方法1)。
實(shí)施例471-[4-(乙酰氨基)苯基]-2-(2-氯苯基)-5-甲基-N-(1-哌啶基)-1H-咪唑-4-羧酰胺
將1-(4-氨基苯基)-2-(2-氯苯基)-5-甲基-N-(1-哌啶基)-1H-咪唑-4-羧酰胺(實(shí)施例45)(51mg，0.12mmol)溶解在無水二氯甲烷(2mL)中，通過滴加乙酸酸酐(14μL，0.15mmol)處理。溶液在室溫下攪拌4小時(shí)，之后蒸發(fā)溶劑，得到琥珀色油狀物。該產(chǎn)物通過HPLC(填充YMC的PRO C18 15×200mm柱，30～90％CH3CN，于H2O/TFA中，20mL/min)進(jìn)行純化，得到灰白色固體(13mg，15％收率)LC-MS m/z 452.3(MH+)，保留時(shí)間2.31min(方法1)。
實(shí)施例482-(2-氯苯基)-5-甲基-1-{4-[(甲磺?；?氨基]苯基}-N-(1-哌啶基)-1H-咪唑-4-羧酰胺三氟乙酸鹽 將1-(4-氨基苯基)-2-(2-氯苯基)-5-甲基-N-(1-哌啶基)-1H-咪唑-4-羧酰胺(實(shí)施例45)(52mg，0.13mmol)溶解在無水二氯甲烷(2mL)中，通過冰水浴冷卻，利用甲磺酰氯(12μL，0.16mmol)和三乙胺(21μL，0.15mmol)處理。溶液在室溫下攪拌過夜，之后蒸發(fā)溶劑。殘留物通過HPLC(填充YMC的PRO C18 15×200mm柱，30～90％CH3CN，于H2O/TFA中，20mL/min)進(jìn)行純化，得到亮棕褐色固體(21mg，27％收率)LC-MS m/z 488.4(MH+)，保留時(shí)間2.29min(方法1)。
實(shí)施例491-{[1-(4-氯苯基)-2-(2-甲基苯基)-1H-咪唑-4-基]羰基}-4-苯基-1，2，3，6-四氫吡啶 將30mg 1-{[2-(2-甲基苯基)-1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基]羰基}-4-甲基-4-哌啶醇(表?xiàng)l目414)樣品溶解在20mL二氯甲烷中，然后加入于乙醚中的5mL 2M HCl溶液。在多樣品蒸發(fā)器(GeneVac)中高溫(大約70℃，16小時(shí))蒸發(fā)溶劑，得到1-{[1-(4-氯苯基)-2-(2-甲基苯基)-1H-咪唑-4-基]羰基}-4-苯基-1，2，3，6-四氫吡啶(黃色固體)。
1H NMR(400MHz，CD3COCD3)δ8.31(s，1H)，7.05-7.35(m，13H)，6.05(s，1H)，4.2(m，2H)，3.85(m，2H)，2.5(m，2H)，2.0(s，3H)；LC-MS m/z 454(MH+)，保留時(shí)間2.92min(方法2)。
制備中間體制備商業(yè)上不能得到的化學(xué)試劑的試驗(yàn)步驟如下文所述。
中間體A3-溴-2-氧代丁酸乙酯 該溴代丙酮酸酯可以通過Plouvier等人(Heterocycles 32693-701，1991)描述的方法，氧化溴化相應(yīng)的羥基酯得到。類斯地，可制得3-溴-2-氧代戊酸乙酯和3-溴-2-氧代己酸乙酯。
中間體23-溴-3-環(huán)丙基-2-氧代丙酸乙酯 該步驟類似于文獻(xiàn)(參見如J.Org.Chem.37，505-506，1972)中描述的方法。
步驟1 在1小時(shí)內(nèi)，向回流加熱的BF3·Et2O(57.5mL，0.454mmol)的CHCl3(180mL)溶液中滴加1，3-丙烷二硫醇(22.7mL，0.227mmol)的CHCl3(40mL)溶液，然后加入二乙氧基乙酸乙酯(40g，0.227mmol)。加熱所得混合物30分鐘，然后冷卻至室溫。冷卻的溶液利用水洗滌兩次，利用飽和NaHCO3洗滌一次，然后再利用水重新洗滌。在MgSO4上干燥合并的有機(jī)相，然后蒸發(fā)得到41g(94％)1，3-硫烷-2-羧酸乙酯，為黃色油狀物，該產(chǎn)物可在不進(jìn)行純化下用于下一步驟。
1H NMR(CDCl3)δ4.24(2H， q，J＝7.2Hz)，4.17(1H，s)，3.46-3.39(2H，m)，2.64-2.58(2H，m)，2.18-2.01(2H，m)，1.30(3H，t，J＝7.2Hz).
步驟2 在10分鐘內(nèi)向在0℃下攪拌的于無水甲苯(120mL)中的NaH(95％，2.8g，111mmol)懸浮液中加入于DMF(40mL)中的溴代甲基環(huán)丙烷(15g，111mmol)和1，3-硫烷-2-羧酸乙酯(17.77g，92.58mmol)的溶液。除去冰浴，溶液在室溫下攪拌過夜。向溶液中加入水，分離相。在MgSO4上干燥有機(jī)相，然后蒸發(fā)得到19.6g(50％)2-(環(huán)丙基甲基)-1，3-二硫烷-2-羧酸乙酯，該產(chǎn)物可在不進(jìn)行純化下用于下一步驟。
1H NMR(CDCl3)δ4.26(2H，q，J＝7.2Hz)，3.30-3.23(2H，m)，2.69-2.64(2H，m)，2.16-2.11(1H，m)，1.96(2H，d，J＝6.8Hz)，1.91-1.81(1H，m)，1.34(3H，t，J＝7.2Hz)，0.93-0.86(1H，m)，0.52-0.47(2H，m)，0.20-0.16(2H，m).
步驟3 在30分鐘內(nèi)，將2-(環(huán)丙基甲基)-1，3-二硫烷-2-羧酸乙酯(19.6g，79.67mmol)的CH3CN(20mL)溶液慢慢加入到充分?jǐn)嚢璧挠贑H3CN(210mL)和水(55mL)中的NBS(N-溴代琥珀酰亞胺)懸浮液中。攪拌混合物1小時(shí)后，將所得的紅色溶液注入到冰冷CH2Cl2-己烷溶液(1∶1，500mL)中。利用飽和水合NaHSO3和水洗滌所得混合物。利飽和水合Na2CO3和水小心洗滌無色有機(jī)相。在MgSO4上干燥有機(jī)相，然后蒸發(fā)得到6.88g(55％)3-環(huán)丙基-2-氧代丙酸乙酯，為黃色油狀物。
1H NMR(CDCl3)δ4.29(2H，q，J＝8Hz)，2.71(2H，d，J＝9Hz)，1.35(3H，t，J＝8Hz)，1.05-0.98(1H，m)，0.59-0.54(2H，m)，0.17-0.14(2H，m).
步驟4 在室溫下，向3-環(huán)丙基-2-氧代丙酸乙酯(4.75g，30.44mmol)的CCl4(60mL)溶液中加入NBS(5.96g，33.49mmol)?；亓骷訜崴幕旌衔镞^夜，然后冷卻、過濾并蒸發(fā)得到3-溴-3-環(huán)丙基-2-氧代丙酸乙酯。
1H NMR(CDCl3)δ4.46-4.32(3H，m)，1.41(3H，t，J＝8Hz)，0.96-0.86(1H，m)，0.55-0.50(2H，m)，0.07-0.03(2H，m).
該化合物可在不進(jìn)行純化下用于制備本發(fā)明化合物如1-(4-氯苯基)-2-(2-氯苯基)-N-(1-哌啶基)-5-環(huán)丙基-1H-咪唑-4-羧酰胺鹽酸鹽(表?xiàng)l目22)。根據(jù)類似的方法，可制得3-溴-3-環(huán)丁基-2-氧代丙酸乙酯和3-溴-3-異丁基-2-氧代丙酸乙酯。
中間體C3-溴-2-氧代庚酸乙酯 步驟1 在室溫下，向LiI(23.61g，176.44mmol)的THF(200mL)懸浮液中慢慢加入Cu2Br2(25.30g，88.22mmol)。其發(fā)生劇烈的放熱反應(yīng)，然后將混合物冷卻至-78℃。在-78℃下慢慢加入溴化戊基鎂，緊接著加入氯(氧代)乙酸乙酯(10g，73.52mmol)。在-78℃下攪拌所得溶液10分鐘，然后通過滴加水驟冷。將混合物溫?zé)嶂潦覝?，然后分離有機(jī)相，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。快速色譜純化，利用9∶1己烷/EtOAc作為洗脫液，得到2-氧代庚酸乙酯(3.0g，23％)，為無色油狀物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.33-4.21(m，2H)，2.82(m，2H)，1.63-1.59(m，2H)，1.63-11.19(m，pH)，0.9-0.83(m，3H)。
LC-MS m/z 279.21(MH+)，保留時(shí)間2.42min(方法2)。
步驟2 向2-氧代庚酸乙酯(2g，11.62mmol)的AcOH(20mL)冷溶液中加入Br2(596μL，11.62mmol)。混合物在0℃下攪拌20分鐘，然后溫?zé)嶂潦覝?。在混合物攪?小時(shí)后加入水和CH2Cl2。分離有機(jī)相，干燥(MgSO4)，得到3-溴-2-氧代庚酸乙酯，為黑色油狀物；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.05-5.01(m，1H)，4.45-4.20(m，2H)，2.18-1.94(m，2H)，1.74-1.57(m，2H)，1.48-1.17(m，5H)，0.95-0.82(m，3H).該化合物可在不進(jìn)行純化下用于制備本發(fā)明化合物如1-(4-氯苯基)-2-(2-氯苯基)-N-(1-哌啶基)-5-丁基-1H-咪唑-4-羧酰胺鹽酸鹽(表?xiàng)l目20)。
中間體D4-哌啶酮三氟乙酸鹽 在室溫下攪拌于三氟乙酸(10mL)中的1-氧代-1-哌啶羧酸叔丁酯(10g，0.05mol)懸浮液過夜，濃縮得到淺黃色固體(11.26g，粗產(chǎn)物)。MS(電噴)100(MH+)，游離胺；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ3.27-3.12(m，4H)，2.01-1.86(m，4H).
中間體E反式-氨基-2-羥基二氫化茚 根據(jù)Thompson等人(J.Med.Chem.351685-1701，1992)描述的方法制備該化合物。向冷卻至0℃的1升12N NH4OH中加入50g(0.235mol)2-溴-1-二氫化茚醇。攪拌30分鐘后，溫?zé)峄旌衔?，然后再攪?4小時(shí)。減壓濃縮混合物，除去過量的氨，然后在室溫下保持開口過夜。通過加入20％KOH，使混合物呈堿性(pH＞10)，在冰浴中冷卻并過濾。將殘留物在60℃真空爐中干燥過夜后，得到所需的產(chǎn)物(24g，69％)，為棕褐色固體。
中間體F順式-羥基-2-氨基二氫化茚 根據(jù)TetrahedronAsymmetry 71559-1562，1996描述的方法，將反式-2-溴-1-二氫化茚醇(500mg，2.35mmol)溶解在DMF(5mL)中，滴加疊氮化鈉(305mg，4.69mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?小時(shí)，然后加熱至70℃，再攪拌18小時(shí)。冷卻混合物，加入水，利用乙醚萃取。除去乙醚，將粗產(chǎn)物(412mg)溶解在THF(15mL)中。將該溶液加入到Pd/C(41mg)中，在室溫下于氫氣氣氛中攪拌3天。過濾反應(yīng)混合物，濃縮濾液，得到所需產(chǎn)物，該產(chǎn)物無需進(jìn)行純化。
中間體G反式-1-氨基-2-羥基-1，2，3，4-四氫萘 根據(jù)Bellucci等人(TetrahedronAsymmetry 8895-902，1997)描述的方法，由二氫萘制備該化合物。
中間體H反式-(2R，3R)-3-[(2，4-二甲氧基芐基)
氨基]-1，2，3，4-四氫-2-萘醇 根據(jù)Efange等人(J.Med.Chem.403905-3914，1997)描述的方法化合物。
中間體I(1S，2R，3S，4R)-3-氨基-1，7，7-三甲基二環(huán)[2.2.1]庚-2-醇 根據(jù)Gawley and Zhang，(J.Org.Chem.618103-8112，1996)描述的方法，通過LiAlH4還原相應(yīng)的樟腦醌3-肟，可得到該化合物及其對(duì)映體。
中間體J[(反式-2-氨基環(huán)己基)氧基]乙酸乙酯 在氬氣氣氛下，向反式-2-氨基環(huán)己醇鹽酸鹽(455mg，3.0mmol)的THF(7mL)溶液中加入氫化鈉(78mg，3.25mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?2小時(shí)，之后加入溴代乙酸乙酯(500mg，3.0mmol)，溶液在室溫下再攪拌12小時(shí)。過濾后濃縮溶液，殘留物收集在CH2Cl2中，利用鹽水洗滌。分離有繼承并濃縮。殘留物進(jìn)行快速硅膠色譜純化(乙酸乙酯)，得到所需的產(chǎn)物(51mg，8.5％收率)LC-MS m/z 202.2(MH+)，保留時(shí)間0.73min(方法1)；Rf＝0.23(乙酸乙酯)。
中間體K[(2S)-1-氨基-2-哌啶基]甲醇 根據(jù)Rosling等人(Heterocycles 95-106，1997)描述的方法，制備[(2S)-1-氨基-2-哌啶基]甲醇。根據(jù)類似的方法，可以制備[(2S)-1-氨基-2-吡咯烷及]甲醇和[(2R)-1-氨基-2-吡咯烷基]甲醇。
中間體L3-甲基異煙酰腈 該腈可通過van den Haak等人(J.Heterocycl.Chem.181349-1352，1981描述的方法制得。
實(shí)施例概要利用適當(dāng)?shù)钠鹗荚霞吧鲜鰧?shí)施例1～49和中間體A～L描述的方法，制備下表1～18的化合物。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解可以對(duì)所參考的方法進(jìn)行微小的改進(jìn)，但這些改進(jìn)不會(huì)顯著地影響制備的結(jié)果。
表中所列的化合物L(fēng)C-MS表征是通過前述儀器和方法完成。
表1
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，于表2
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MS與該結(jié)構(gòu)吻合。
類似于實(shí)施例(XXIV-1)和/或根據(jù)一般制備說明，得到下面式(XXIV)化合物
表9
將十二胺、r-丁內(nèi)酯、丙醇按1∶1.01∶0.1的摩爾比加入配料釜2，加熱到80℃后直接進(jìn)入管道式反應(yīng)器3，管道式反應(yīng)器3前段40％長度部分是靜態(tài)混合器，反應(yīng)壓力5.0Mpa，溫度280℃，反應(yīng)時(shí)間0.5h。
將在管道式反應(yīng)器3中反應(yīng)后的混合物送入連續(xù)蒸餾塔4進(jìn)行減壓分離，連續(xù)蒸餾塔4中壓力492Pa，溫度控制為塔底260℃，塔中220℃，塔頂160℃，塔底餾出產(chǎn)物為N-十二烷基吡咯烷酮，經(jīng)檢測(cè)，轉(zhuǎn)化率為98.2％，產(chǎn)品提純后純度為99.3％。
采用本發(fā)明所提供的方法生產(chǎn)的N-十二烷基吡咯烷酮產(chǎn)品檢驗(yàn)質(zhì)量與現(xiàn)有技術(shù)得到產(chǎn)品的質(zhì)量對(duì)照表如下表所示
顯然，本發(fā)明不限于以上實(shí)施例，還可以有許多變形。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員能從本發(fā)明公開的內(nèi)容直接導(dǎo)出或聯(lián)想到的所有變形，均應(yīng)認(rèn)為是本發(fā)明的保護(hù)范圍。
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補(bǔ)鈣效果下面的試驗(yàn)結(jié)果驗(yàn)證了本發(fā)明化合物對(duì)大鼠的新骨形成的活性以及補(bǔ)鈣效果SD大鼠60只，隨機(jī)分為6組，即正常對(duì)照組，維甲酸模型組、FDP-Ca 30、100、300、1000mg/kg，除正常對(duì)照組外各組動(dòng)物均每日口服維甲酸70mg/kg，連續(xù)14天，給藥組動(dòng)物從維甲酸給藥開始時(shí)起每日一次口服給藥，連續(xù)28天，給藥結(jié)束斷頭放血分離血清，按試劑盒法測(cè)血清中鈣、磷含量，取一側(cè)大腿股骨在DPX-L型雙能X線骨密度儀作大鼠股骨掃描，測(cè)出骨密度(g/cm)，測(cè)定結(jié)束后股骨110℃干燥1h，干燥股骨置于800℃馬福爐中灰化6h，取出后將骨灰溶于3％硝酸溶液中，測(cè)定骨鈣含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表表1.FDP-Ca大鼠股骨骨密度含量的變化
*P＜0.05，**P＜0.01與對(duì)照組比較△△P＜0.01與模型組比較維甲酸可造成大鼠股骨密度下降，與正常大鼠比較有明顯差異(P＜0.01)，口服FDP-Ca后低劑量組(30mg/kg)與模型組比較無明顯差異，而FDP-Ca 100mg/kg、300mg/kg、1000mg/kg三個(gè)劑量組大鼠均能提高大鼠股骨密度(P＜0.05、P0.01)。
果糖-1，6-二磷酸一鈣鹽為水溶性鈣鹽，溶解度高，口服進(jìn)入胃腸道，在小腸液中呈離子狀態(tài)，大大增加了在機(jī)體內(nèi)的吸收，提高了生物利用度，同時(shí)母體FDP作為高能基質(zhì)提供金屬離子鈣通過主動(dòng)運(yùn)輸進(jìn)入組織和細(xì)胞所需的能量，提高了鈣的生物效能。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1配置FDP溶液58L(濃度86g/L)，調(diào)節(jié)pH為5.0。加入2L CaCl2溶液，摩爾濃度7.2mol/L，在250rpm下攪拌30min后，真空濃縮，緩緩加入2倍溶液體積得酒精，<p>表13
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生物學(xué)活性評(píng)價(jià)化合物對(duì)降低禁食一夜的瘦型大鼠食物攝入的功效評(píng)價(jià)w參考禁食劇烈進(jìn)食測(cè)定本方案的目的在于測(cè)定單劑量未知化合物對(duì)禁食一夜的瘦型大鼠食物消耗的作用。參考禁食大鼠模型常用于肥胖癥領(lǐng)域，從而確定具有厭食作用效力的化合物。該動(dòng)物模型已成功地用于確定或表征已用在肥胖人群體重處理中的化合物的功效曲線圖(參見如Balvet et al.，Gen.Pharmacol.13293-297，1982；Grignaschi et al.，Br.J.Pharmacol.1271190-1194，1999；McTavish and Heel，Drug 43713-733，1992；Rowland et al.，Life Sci.362295-2300，1985)。
典型的研究包括60～80只雄性大鼠(n＝10/處理組)，其平均體重大約為280g。將大鼠放置在控制溫濕度的標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物房中，且12/12黑白循環(huán)。將大鼠單獨(dú)關(guān)在帶有網(wǎng)格地板的懸掛籠中。除非為研究而需要禁食，連續(xù)地提供水和食物。
載體試驗(yàn)將大鼠根據(jù)其在載體試驗(yàn)中的性能進(jìn)行分組。載體試驗(yàn)在功效試驗(yàn)之前進(jìn)行2至7天。大鼠在黑暗的環(huán)境下禁食過夜(總共大約16～18小時(shí))。給動(dòng)物服用0.5mL劑量的去離子水。服用1小時(shí)后，將預(yù)先稱重的食物瓶放回動(dòng)物籠中。動(dòng)物進(jìn)食時(shí)間為1小時(shí)。1小時(shí)后，將溢出的食物放回食物瓶中，確定食物的消耗數(shù)量。將大鼠進(jìn)行分組，使得組與組之間的1小時(shí)食物消耗平均值的平均和標(biāo)準(zhǔn)誤差類似。
功效試驗(yàn)大鼠在黑暗的環(huán)境下禁食過夜(總共大約16～18小時(shí))。給大鼠服用預(yù)先設(shè)定的處理量(2mg/ml)。服用1小時(shí)后，將預(yù)先稱重的食物瓶放回動(dòng)物籠中。記錄30、60、90、180和240分鐘時(shí)的食物攝入量。在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)，溢出的食物被放回食物瓶中，然后稱重食物瓶，測(cè)定每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的食物消耗量。利用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)分析方法，確定處理組之間差異。
結(jié)果發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明化合物在本參考禁食劇烈進(jìn)食測(cè)定中具有活性。例如當(dāng)10mg/kg p.o.給用咪唑衍生物2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-[(1S，2S)-2-羥基環(huán)己基]-1H-咪唑-4-羧酰胺時(shí)，在30至240分鐘時(shí)間進(jìn)行測(cè)定，食物消耗量下降34％至62％(相對(duì)于載體對(duì)照組觀察到的食物消耗)。類似地，當(dāng)10mg/kg p.o.給用咪唑衍生物2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N′-[4-(三氟甲基)苯基]-1H-咪唑-4-碳酰肼鹽酸鹽時(shí)，在30至240分鐘時(shí)間進(jìn)行測(cè)定，食物消耗量下降31％至53％(相對(duì)于載體對(duì)照組觀察到的食物消耗)。
化合物對(duì)肥胖型Zucker fa/fa大鼠體重減輕與食物和水消耗降低的功效評(píng)價(jià)持續(xù)進(jìn)食測(cè)定本方案的目的在于確定持續(xù)給用未知化合物對(duì)肥胖型Zuckerfa/fa大鼠體重減輕與食物和水消耗降低的作用。肥胖型Zucker fa/fa大鼠常用于化合物在體重減輕中的功效測(cè)定。該動(dòng)物模型已成功地用于確定或表征已用在肥胖人群體重處理中的化合物的功效曲線圖(參見如A1-Barazanji et al.，Obes Res.8317-323，2000；Assimacopoulos-Jeannet et al.，Am.J.Physiol.260(2 Pt 2)R278-283，1991；Dryden et al.，Horm.Metab.Res.31363-366，1999；Edwards and Stevens，Pharmacol.Biochem.Behav.47865-872，1994；Grinker et al.，Pha rmacol.Biochem.Behav.12265-275，1980)。
典型的研究包括60～80只雄性Zucker fa/fa大鼠(n＝10/處理組)，其平均體重大約為550g。將大鼠放置在控制溫濕度的標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物房中，且12/12黑白循環(huán)。持續(xù)供應(yīng)水和食物。將大鼠單獨(dú)關(guān)在帶有柵格地板的大鞋盒中。動(dòng)物適合于柵格地板，至少在4天前，對(duì)動(dòng)物給用虛假的研究載體，之后記錄兩天的體重基線測(cè)定值和24小時(shí)的食物和水的消耗量。根據(jù)其體重基線，將大鼠指定到6～8格處理組之一。建立處理組，使得其平均體重的平均與標(biāo)準(zhǔn)誤差類似。
在預(yù)先確定的黑白循環(huán)天數(shù)(典型地為6～14天)的黑暗環(huán)境下之前，每天通過口服填喂法(2mL/kg)，對(duì)動(dòng)物給用化合物。此時(shí)，測(cè)量體重及食物和水的消耗量。在最后一天，通過吸入CO2使動(dòng)物安樂死，測(cè)量其體重。
結(jié)果發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明化合物在本持續(xù)進(jìn)食測(cè)定中具有活性。例如當(dāng)每天10mg/kg p.o.給用咪唑衍生物2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N-[(1S，2S)-2-羥基環(huán)己基]-1H-咪唑-4-羧酰胺時(shí)，在處理的第6天，由基線的體重增加大約為2.4％，表示與對(duì)照組相比，得到了大約50％的體重減輕，其中對(duì)照組由基線的體重增加大約為4.6％。類似地，當(dāng)每天10mg/kg p.o.給用咪唑衍生物2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-N′-[4-(三氟甲基)苯基]-1H-咪唑-4-碳酰肼鹽酸鹽時(shí)，在處理的第6天，由基線的體重增加大約為1.8％，表示與對(duì)照組相比，得到了大約60％的體重減輕，其中對(duì)照組由基線的體重增加大約為4.6％。
腦暴露測(cè)定對(duì)雄性Zucker fa/fa大鼠服用化合物，典型地為10mg/kg p.o.，然后在服用2小時(shí)后采集大腦，測(cè)定腦濃度。稱量大腦，利用4mL 10mM乙酸銨緩沖液(pH3)均質(zhì)，利用乙腈蛋白沉淀萃取腦組織均質(zhì)樣品。利用加熱的噴霧器界面，通過使用質(zhì)譜儀選擇性探測(cè)的液相色譜法(LC/MS/MS)，旋渦、離心和分析樣品。利用加權(quán)(1/x2)線性內(nèi)標(biāo)校準(zhǔn)曲線定量樣品。例如當(dāng)100mg/kg p.o.給用1-(4-氯苯基)-2-(2-氯苯基)-N-(1-哌啶基)-5-丁基-1H-咪唑-4-羧酰胺時(shí)，測(cè)定的腦均質(zhì)暴露水平大約為200nM；而當(dāng)100mg/kg p.o.給用2-(2-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-5-乙基-N-[(1S，2S)-2-羥基環(huán)己基]-1H-咪唑-4-羧酰胺時(shí)，測(cè)定的腦均質(zhì)暴露水平大約為200hM。
本發(fā)明化合物另外的生物學(xué)活性實(shí)證可通過本領(lǐng)域公知的試管外、體外和體內(nèi)測(cè)定完成。例如，為了說明藥劑在治療與肥胖癥相關(guān)的疾病如糖尿病、綜合癥X或動(dòng)脈粥樣硬化癥及相關(guān)疾病如高甘油三酯病和高膽固醇病方面的功效，可以使用下列測(cè)定。
測(cè)定血糖水平的方法從db/db小鼠(由Jackson Laboratories，Bar Harbor，ME獲得)取血(通過眼或尾部靜脈)，根據(jù)等同平均血糖水平分組。經(jīng)口服給用(通過填喂可藥用載體)試驗(yàn)化合物，每天一次，共14天。此時(shí)，再次通過該動(dòng)物眼或尾部靜脈取血，測(cè)定血糖水平。在每種情況下，利用Glucometer Elite XL(Bayer Corporation，Elkhart，IN)測(cè)定血糖水平。
測(cè)定甘油三酯水平的方法從hApoAl小鼠(由Jackson Laboratories，Bar Harbor，ME獲得)取血(通過眼或尾部靜脈)，根據(jù)等同平均血清甘油三酯水平分組。經(jīng)口服給用(通過填喂可藥用載體)試驗(yàn)化合物，每天一次，共8天。此時(shí)，再次通過該動(dòng)物眼或尾部靜脈取血，測(cè)定血清甘油三酯水平。在每種情況下，利用Technicon Axon Autoanalyzer(BayerCorporation，Tarrytown，NY)測(cè)定血清甘油三酯水平。
測(cè)定HDL-膽固醇水平的方法為了測(cè)定HDL-膽固醇水平，從hApoAl小鼠取血，根據(jù)等同平均血漿HDL-膽固醇水平分組。經(jīng)口服給用載體或試驗(yàn)化合物，每天一次，共7天；然后在第8天再次取血。利用Synchron Clinical System(CX4)(Beckman Coulter，F(xiàn)ullerton，CA)，分析血漿的HDL-膽固醇水平。測(cè)定總膽固醇、HDL-膽固醇、甘油三酯和葡萄糖水平的方法在另一體內(nèi)測(cè)定中，從肥胖的猴子取血，經(jīng)口服用載體或試驗(yàn)化合物，每天一次，共4周，再次取血。利用Synchron Clinical System(CX4)(Beckman Coulter，F(xiàn)ullerton，CA)分析血清總膽固醇、HDL-膽固醇、甘油三酯和葡萄糖水平。通過Oliver et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 985306-5311，2001描述的方法分析脂蛋白小類。
測(cè)定心血管參數(shù)作用的方法心血管參數(shù)(如心率和血壓)也可以評(píng)價(jià)。經(jīng)口對(duì)SHR大鼠給用載體或試驗(yàn)化合物，每天一次，共2周。利用Grinse11 et al.，Am.J.Hyperten s.13370-375，2000描述的方法，通過尾套法(tail-cuff)測(cè)定血壓和心率。在猴子中，利用Shen et al.，J.Pharmacol.Exp.Therap.2781435-1443，1996描述的方法監(jiān)測(cè)血壓和心率。
另外，為了闡述本發(fā)明化合物的CNS活性，使用下述體內(nèi)測(cè)定。試驗(yàn)認(rèn)知任務(wù)與空間記憶的方法將Morris Water Maze常規(guī)地用于測(cè)定認(rèn)知任務(wù)與空間記憶(Jaspers et al.，Neurosci.Lett.117149-153，1990；Morris，J.Neurosci.Methods 1147-60，1984)。在該測(cè)定中，將動(dòng)物置于分區(qū)的水池中。其中一個(gè)區(qū)域中暗藏有一個(gè)平臺(tái)。將動(dòng)物置于水池中，期望其在指定的時(shí)間內(nèi)找到暗藏的平臺(tái)。在許多練習(xí)實(shí)驗(yàn)中，動(dòng)物認(rèn)知了平臺(tái)的位置，逃離了水池。在該測(cè)試中，動(dòng)物接受了多次試驗(yàn)。對(duì)于每個(gè)動(dòng)物，我們記錄總的行程、到達(dá)平臺(tái)的試驗(yàn)次數(shù)、找到平臺(tái)的反應(yīng)時(shí)間和游泳路線。通過發(fā)現(xiàn)暗藏平臺(tái)所需要的時(shí)間長度或試驗(yàn)次數(shù)測(cè)定動(dòng)物的認(rèn)知能力。通過在獲取后預(yù)定的時(shí)間延遲上發(fā)現(xiàn)平臺(tái)的試驗(yàn)次數(shù)或反應(yīng)時(shí)間測(cè)定記憶不足或改善。通過動(dòng)物在獲得結(jié)果時(shí)穿過放置平臺(tái)區(qū)域的次數(shù)可以測(cè)定認(rèn)知和記憶。
試驗(yàn)藥物依賴性的方法動(dòng)物自給藥是一種人的化合物濫用潛在預(yù)警。該過程的改進(jìn)也可用于鑒別可預(yù)防或阻滯具有濫用效力的性能增強(qiáng)的化合物。壓制藥物自給藥的化合物可預(yù)防藥物濫用或其依賴性(Ranaldi et al.，Psychopharmacol.161442-448，2002；Campbell et al.，Exp.Clin.Psychopharmacol.8312-25，2000)。在自給藥試驗(yàn)中，將動(dòng)物置于含有活動(dòng)和非活動(dòng)桿的操作室中?；顒?dòng)桿的每次響應(yīng)產(chǎn)生試驗(yàn)化合物或已知自給藥的藥物的灌輸。按動(dòng)非活動(dòng)桿，沒有作用，但也要記錄。然后在一組時(shí)間段內(nèi)，通過將藥物每天放置在入口處，將動(dòng)物運(yùn)至自給藥化合物/藥物。照亮操作室，表示一段操作開始并能夠得到化合物/藥物。當(dāng)這一段操作結(jié)束時(shí)，將操作室燈關(guān)閉。起初，通過每次按動(dòng)活動(dòng)桿進(jìn)行藥物灌輸。按動(dòng)桿的行為一旦開始，產(chǎn)生藥物灌輸?shù)陌磩?dòng)次數(shù)增加。在獲得穩(wěn)定的化合物/藥物自給藥后，評(píng)價(jià)第二化合物對(duì)藥物增強(qiáng)行為的作用。在這一段操作之前的第二化合物的給藥可能對(duì)自給藥行為的改變會(huì)起到增強(qiáng)、熄滅哦不產(chǎn)生變化的作用。試驗(yàn)每兩天進(jìn)行一次，試驗(yàn)化合物的給藥順序受到控制。
藥物組合物基于上述測(cè)試，或基于用于測(cè)定哺乳動(dòng)物治療功效的其它公知測(cè)定，或通過將這些結(jié)果與用于治療這些疾病的公知藥物的結(jié)果進(jìn)行比較，本發(fā)明化合物的有效劑量可容易地通過各種所需跡象確定。治療這些疾病的活性成分量可根據(jù)下述考慮，至雜寬范圍內(nèi)改變，所述考慮包括特定的化合物及所使用的劑量單元、給藥方式、治療時(shí)間、被治療患者的年齡和性別，以及疾病的嚴(yán)重程度。
服用的活性成分總量一般為每天大約0.001mg/kg至大約200mg/kg的范圍，優(yōu)選大約0.01mg/kg至大約200mg/kg體重。單位劑量可包含大約0.05mg至大約1500mg活性成分，每天可服用一次或多次。日劑量可通過注射，包括靜內(nèi)、肌內(nèi)、皮下或非腸道注射給藥，及使用灌輸給藥，劑量為大約0.01至大約200mg/kg。每天的直腸給藥劑量為0.01至200mg/kg體重。經(jīng)皮的濃度需要維持在日劑量為0.01至200mg/kg。
當(dāng)然，對(duì)于每個(gè)患者，其特定的初始及持續(xù)劑量制度可根據(jù)下述情況變化，即主治診斷醫(yī)生所確定的疾病性質(zhì)和嚴(yán)重程度、所使用特定化合物的活性、患者的年齡、患者的飲食、給藥時(shí)間、給藥路線、藥物的排泄率、藥物組合等。本領(lǐng)域技術(shù)人員利用常規(guī)的治療試驗(yàn)，可確定所需的治療方案和本發(fā)明化合物或其可藥用鹽的劑量。
通過對(duì)需要治療的患者，以適當(dāng)?shù)闹苿┧幬锝M合物形式給用本發(fā)明化合物，可以獲得所需的藥物效果。對(duì)于本發(fā)明的目的，患者可以是需要特定疾病治療的哺乳動(dòng)物，包括人。由此，本發(fā)明包括藥物組合物，該組合物包含可藥用載體和這里所述方法確定的有效劑量化合物可藥用鹽或酯?？伤幱幂d體可以是在組成有效活性的活性成分的濃度時(shí)相對(duì)無毒無害的任何載體，所有由載體帶來的副作用不會(huì)損害活性成分的有益作用?；衔锏闹委熡行Я渴侵笇?duì)待治療的特定病情能夠產(chǎn)生結(jié)果或?qū)ζ溆凶饔玫牧?。由這里描述的方法確定的化合物可利用常規(guī)的劑量形式與可藥用載體一起服用，所述劑量形式包括如立即或延遲釋放的制劑、口服制劑、非腸道制劑、局部制劑等。
對(duì)于口服給藥，化合物可制成固體或液體制劑，如膠囊、丸劑、片劑、藥片、錠劑、熔融劑、粉劑、溶液、懸浮液或乳液，它們可根據(jù)制造藥物組合物領(lǐng)域公知的方法制備。固體單位制劑可以是膠囊形式，其可以使硬或軟殼明膠類型，含有如乳化劑、潤滑劑和惰性填料(如乳糖、蔗糖、磷酸鈣和玉米淀粉)。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物可以與下述材料一起制成片劑片基材料，如乳糖、蔗糖和玉米淀粉；結(jié)合劑，如阿拉伯膠、玉米淀粉或明膠；有助于破裂和溶解服藥后的片劑的崩解劑，如土豆淀粉、藻酸、玉米淀粉和瓜耳膠；改善片劑成粒流動(dòng)且預(yù)防片劑材料與片劑模沖表面之間附著的潤滑劑，如硬脂酸或硬脂酸鎂、鈣或鋅；提高片劑美學(xué)質(zhì)量且使其更被患者接受的染料、著色劑和香味劑。適于口服液體制劑的適宜賦刑劑包括稀釋劑，如水和醇，例如乙醇、苯甲醇和聚乙二醇，它們可添加或不添加可藥用表面活性劑、懸浮劑或乳化劑。各種奇它材料可以以涂層存在，或者用于改進(jìn)劑量單元的物理形狀。例如片劑、丸劑或膠囊可涂覆有蟲膠、食糖或二者都有。
可分散的粉劑和顆粒劑適于制備水懸浮液。它們可提供與可分散或濕潤劑、懸浮劑及一種或多種防腐劑混合的活性成分。適宜的可分散或濕潤劑和懸浮劑的實(shí)例如上文所述。也可存在另外的賦刑劑，如上文所述的那些甜味劑、香味劑和著色劑。
本發(fā)明藥物組合物也可以水包油乳劑形式存在。油相可以是植物油，如液體石蠟或植物油的混合物。適宜的乳化劑可以是(1)天然存在的樹膠，如阿拉伯和黃嗜膠，(2)天然存在的磷脂，如大豆和卵磷脂，(3)由脂肪酸和己糖醇酐衍生的酯或偏酯，如山梨聚糖單油酸酯，以及(4)所述偏酯與環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物，如聚氧乙烯山梨聚糖單油酸酯。乳液可包含甜味劑和香味劑。
油懸浮液可以通過下述方法制備將活性成分懸浮在植物油中，如花生油、橄欖油、蓖麻油或椰子油；或懸浮在礦物油中，如液體石蠟。油懸浮液可含有增稠劑，如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟基醇。懸浮液也可包含一種或多種防腐劑，如對(duì)羥基苯甲酸乙酯或正丙酯；一種或多種著色劑；一種或多種香味劑；以及一種或多種甜味劑，如蔗糖或糖精。
糖漿和酏劑可通過與甜味劑制成，所述甜味劑如丙三醇、丙二醇、山梨糖醇或蔗糖。這類制劑可包含緩和劑、防腐劑、香味劑和著色劑。
本發(fā)明化合物也可以可注射劑型經(jīng)非腸道給藥，如皮下、靜內(nèi)、肌內(nèi)或腹膜內(nèi)給藥，所述可注射劑型是將化合物在可藥用稀釋劑中與可藥用載體混合制成，所述可藥用載體可以是無菌液體或液體的混合物。所述液體如水、生理鹽水、水合葡萄糖和相關(guān)的糖溶液；醇，如乙醇、異丙醇或十六烷醇；二醇，如丙二醇或聚乙二醇；丙三醇縮酮類，如2，2-二甲基-1，1-二氧戊環(huán)-4-甲醇；醚類，如聚(乙二醇)400；油類；脂肪酸；脂肪酸酯或甘油酯；或乙?；舅岣视王?。所述制劑可以包含或不包含可藥用表面活性劑，如肥皂或洗滌劑；懸浮劑，如膠質(zhì)、丙烯酸聚合物、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素或羧甲基纖維素；或乳化劑及其它藥物助劑。
可用于本發(fā)明非腸道制劑的油類實(shí)例為石油、動(dòng)物油、植物油或合成類油，例如花生油、豆油、蓖麻油、棉籽油、玉米油、橄欖油、礦脂和礦物油。
適宜的脂肪酸包括油酸、硬脂酸和異硬脂酸。適宜的脂肪酸酯為油酸乙酯和肉豆蔻酸異丙酯。適宜的肥皂包括脂肪堿金屬、銨和三乙醇胺鹽。適宜的洗滌劑包括陽離子洗滌劑，如二甲基二烷基鹵化銨鹵化烷基吡啶鹽和烷基胺乙酸鹽；陰離子洗滌劑，如烷基、芳基和石蠟磺酸酯，烷基醚、石蠟醚，以及磺酸單甘油酯和磺基琥珀酸單油酸酯；非離子洗滌劑，如脂肪胺氧化物、脂肪酸烷醇酰胺和聚氧乙烯聚丙烯共聚物；兩性洗滌劑，如烷基-β-氨基丙酸酯和2-烷基咪唑啉季銨鹽；以及它們的混合物。
本發(fā)明非腸道組合物在其溶液中典型地包含大約0.5％至大約25％重量活性成分。防腐劑和緩沖液可有利地使用。為了減輕或消除注射位置的疼痛，這類組合物可包含親水-親脂平衡(HLB)為大約12至大約17的非離子表面活性劑。
在這類制劑中的表面活性劑量為大約5％至大約15％重量。表面活性劑可以是具有上述HLB的單個(gè)成分，或者是具有所需HLB的兩種或多種成分的混合物。
用于非腸道制劑中的表面活性劑實(shí)例為聚乙烯山梨聚糖脂肪酸酯，如山梨聚糖單油酸酯；以及環(huán)氧乙烷與疏水堿的高分子量加成物，該加成物由環(huán)丙烷與丙二醇縮合生成。
藥物組合物可以無菌可注射水合懸浮液形式存在。這類懸浮液可根據(jù)公知的方法，利用適當(dāng)?shù)目煞稚⒒驖駶檮┖蛻腋┲瞥?，所述懸浮劑如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯基吡咯烷酮、黃嗜膠和阿拉伯膠；所述可分散或濕潤劑可以為天然存在的磷脂，如卵磷脂；烯化氧與脂肪酸的縮合物，如硬脂酸聚氧乙烯；環(huán)氧乙烷與長鏈脂肪醇的縮合物，如十七亞乙基氧基鯨蠟醇；環(huán)氧乙烷與由脂肪酸和己糖醇和己糖醇酐衍生的偏酯的縮合物，如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯。
無菌可注射制劑也可以是于無毒非腸道可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液或懸浮液。可使用的稀釋劑和溶劑如水、Ringer溶液和等滲氯化鈉溶液。另外，不揮發(fā)無菌油類可常規(guī)地用作溶劑或懸浮介質(zhì)。為此，可使用的任何溫和的不揮發(fā)性油類包括合成單或二甘油酯。此外，脂肪酸(如油酸)也可用于可注射制劑中。
本發(fā)明組合物也可以藥物直腸給藥的栓劑形式給藥。這類組合物可通過將藥物與適當(dāng)?shù)臒o刺激性的賦形劑混合制成，所述無刺激賦形劑在常溫下為固體，但在直腸溫度下為液體，因此可在直腸中熔化而釋放藥物。這類材料可以是如可可脂和聚乙二醇。
用于本發(fā)明方法中的另一類制劑采用經(jīng)皮傳遞裝置(“斑貼”)。這類經(jīng)皮斑貼可用于以控制量提供連續(xù)或不連續(xù)本發(fā)明化合物灌輸。用于傳遞藥物制劑的經(jīng)皮斑貼的結(jié)構(gòu)和使用在本領(lǐng)域中是公知的(參見美國專利US 5,023,252，該文獻(xiàn)在此引作參考)。這類斑貼可制成連續(xù)、脈動(dòng)或藥物制劑所需的形式。
通過機(jī)械傳遞裝置將藥物組合物引入到患者是需要或必要的。用于傳遞藥物制劑的機(jī)械傳遞裝置的結(jié)構(gòu)和使用在本領(lǐng)域中是公知的。例如，用于對(duì)腦直接給藥的直接技術(shù)一般涉及將藥物傳遞導(dǎo)管置于患者心室系統(tǒng)中，從而迂回血腦屏障。用于輸運(yùn)藥劑至身體特定解剖區(qū)域的一種這類可移植傳遞系公開在美國專利US 5,011,472中，該文獻(xiàn)在此引作參考。
如果必要或需要的話，本發(fā)明組合物也可包含其它常規(guī)可藥用組合成分，通常是指載體或稀釋劑。本發(fā)明任何組合物都可通過加入抗氧化劑(如抗壞血酸)或通過其它適宜的防腐劑進(jìn)行防腐處理?？刹捎弥苽溥@類適當(dāng)劑型的組合物的常規(guī)方法。
可用作適合給藥路線制劑的常用藥物成分包括酸化劑，例如但不局限于乙酸、檸檬酸、富馬酸、鹽酸、硝酸；堿化劑，例如但不局限于氨水溶液、碳酸銨、二乙醇胺、單乙醇胺、氫氧化鉀、硼酸鈉、碳酸鈉、氫氧化鈉、三乙醇胺、三乙醇胺。
其它藥物成分包括但不局限于吸附劑(如粉狀纖維素和活性碳)；氣溶膠推進(jìn)劑(如二氧化碳、CCl2F2、F2ClC-CClF2和CClF3)；空氣置換試劑(如氮?dú)夂蜌鍤?；抗真菌防腐劑(如苯甲酸、對(duì)羥基苯甲酸丁酯、對(duì)羥基苯甲酸乙酯)；抗菌防腐劑(如氯化芐烷銨、氯化苯乙烷銨苯甲醇、氯化鯨蠟基吡啶翁鹽、氯丁醇、苯酚、苯乙醇、苯基硝酸汞和噻汞撒)；抗氧化劑(如抗壞血酸、抗壞血酸棕櫚酸酯、丁基化羥基苯甲醚、丁基化羥基甲苯、次磷酸、單硫代丙三醇、五倍子酸丙酯、抗壞血酸鈉、重亞硫酸鈉、甲醛磺酸納、偏亞硫酸氫鈉)；結(jié)合材料(如嵌段聚合物、天然和合成橡膠、聚丙烯酸酯、聚脲、硅樹脂和苯乙烯-丁二烯共聚物)；緩沖劑(如偏磷酸鉀、單價(jià)堿性磷酸鉀、乙酸鈉、水合檸檬酸鈉和二水檸檬酸鈉)；輸運(yùn)試劑(如阿拉伯膠糖漿、芳族糖漿、芳族酏劑、櫻桃糖漿、可可糖漿、糖漿、玉米油、礦物油、花生油、蓖麻油、細(xì)菌抑制氯化鈉注射劑和注射用細(xì)菌抑制水)；螯合劑(如乙二胺四乙酸二鈉和乙二胺四乙酸)；著色劑(如FD & C3號(hào)紅、FD & C20號(hào)紅、FD & C6號(hào)黃、FD & C2號(hào)蘭、D& C5號(hào)綠、D & C5號(hào)橙、D & C8號(hào)紅、醬色和氧化鐵紅)；澄清劑(如膨潤土)；乳化劑(例如但不局限于阿拉伯膠、鯨蠟基大粒凝膠、鯨蠟醇、單硬脂酸甘油酯、卵磷脂、山梨糖醇單油酸酯、聚乙烯50硬脂酸酯)；成膠囊劑(如明膠和纖維素乙酸鄰苯二甲酸酯)；香味劑(如茴芹油、肉桂油、可可、薄荷醇、橙子油、胡椒薄荷油和香蘭素)；潤滑劑(如丙三醇、丙二醇和山梨糖醇)；成粉劑(如礦物油和丙三醇)；油類(如落花生油、礦物油、橄欖油、花生油、蓖麻油和植物油)；油膏基(如羊毛脂、親水油膏、聚乙二醇油膏、礦脂、親水礦脂、白色油膏、黃色油膏和玫瑰水油膏)；滲透性增強(qiáng)劑(經(jīng)皮傳遞)(如一羥基或多羥基醇，飽和或不飽和脂肪酯、飽和或不飽和二羧酸、精華油、磷脂酰衍生物、腦磷脂、萜烯、酰胺、醚、酮和脲)；增塑劑(如鄰苯二甲酸二乙酯和丙三醇)；溶劑(如醇、玉米油、棉籽油、丙三醇、異丙醇、礦物油、油酸、花生油、純凈水、注射用水、注射用無菌水和沖洗用無菌水)；堅(jiān)挺劑(如鯨蠟醇、鯨蠟基酯石蠟、微晶蠟、石蠟、硬脂醇、白蠟和黃蠟)；栓劑基(如可可脂和聚乙二醇(混合物))；表面活性劑(如氯化芐烷銨、nonoxynol 10、oxtoxynol 9、聚山梨醇酯80、月桂基硫酸鈉和山梨醇糖單棕櫚酸酯)；懸浮劑(如瓊脂、膨潤土、丙烯酸聚合物、羧甲基纖維素鈉、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、高嶺土、甲基纖維素、黃嗜膠和膠體鎂鋁硅酸鹽)；甜味劑(如天冬氨酰苯丙氨酸甲酯、葡萄糖、丙三醇、甘露醇、丙二醇、糖精鈉、山梨醇和蔗糖)；片劑抗附著劑(如硬脂酸鎂和滑石)；片劑結(jié)合劑(如阿拉伯膠、藻酸、羧甲基纖維素鈉、壓縮糖、乙基纖維素、明膠、液體葡萄糖、甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮和預(yù)成膠淀粉)；片劑和膠囊稀釋劑(如二堿性磷酸鈣、高嶺土、乳糖、甘露醇、微晶纖維素、粉狀纖維素、沉淀的碳酸鈣、碳酸鈉、磷酸鈉、山梨糖醇和淀粉)；片劑涂覆劑(如液體葡萄糖、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、甲基纖維素、乙基纖維素、纖維素乙酸鄰苯二甲酸酯和蟲膠)；片劑直接壓縮賦形劑(如二堿性磷酸鈣)；片劑崩解劑(如藻酸、羧甲基纖維素鈣、微晶纖維素、polacrillin potassium、藻酸鈉、淀粉乙醇酸鈉和淀粉)；片劑滑移劑(glidant)(如硅膠、玉米淀粉和滑石)；片劑潤滑劑(如硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、礦物油、硬脂酸和硬脂酸鋅)；片劑/膠囊遮光劑(如二氧化鈦)；片劑拋光劑(如carnuba蠟和白蠟)；增稠劑(如蜂蠟、鯨蠟醇和石蠟)；強(qiáng)壯劑(如葡萄糖和氯化鈉)；粘度增加劑(如藻酸、膨潤土、丙烯酸聚合物、羧甲基纖維酸鈉、甲基纖維素、聚乙烯基吡咯烷酮、藻酸鈉和黃嗜膠)；以及濕潤劑(如十七亞乙基氧基鯨蠟醇、卵磷脂、聚乙烯山梨醇單油酸酯、聚氧乙烯山梨醇單油酸酯和聚氧乙烯硬脂酸酯)。
由這里描述的方法確定的化合物可作為單獨(dú)的藥物制劑給藥或以與一種或多種其它在結(jié)合時(shí)不會(huì)產(chǎn)生不可接受的反作用的藥物制劑結(jié)合給藥。例如本發(fā)明化合物可與公知的抗肥胖癥或公知的抗糖尿病或其它指明的試劑等結(jié)合，也可以與這些組合的混合物結(jié)合。
由這里描述的方法確定的化合物可以游離堿或組合物形式用于研究和診斷中，或者用作分析參考標(biāo)準(zhǔn)等。由此，本發(fā)明包括組合物，該組合物包含惰性載體和由這里描述的方法確定的有效量化合物或其鹽或酯。惰性載體是不與化合物作用且對(duì)所含的化合物提供支撐、運(yùn)輸方式、散裝、痕量物質(zhì)等的任何材料?；衔锏挠行Я渴侵改軌?qū)Ρ惶幚淼奶囟ㄟ^程產(chǎn)生結(jié)果或存在作用的量。
適于皮下、靜內(nèi)、肌內(nèi)等給藥的制劑，適宜的藥用載體及制劑和給藥的方法均可通過本領(lǐng)域公知的方法獲得(參見如Remington′sPharmaceutical Sciences，Mack Publishing Co.，Easton，Pa.，20thedition，2000)。
下列實(shí)施例用來說明這里描述的本發(fā)明，并不是用來以任何方式限制本發(fā)明的范圍。
膠囊制劑由下列成分制備膠囊制劑本發(fā)明化合物 40mg淀粉 109mg硬脂酸鎂 1mg摻混上述成分，使其通過適當(dāng)目數(shù)的篩，填入硬明膠膠囊中。
片劑制劑由下列成分制備片劑制劑本發(fā)明化合物 25mg纖維素，微晶 200mg膠狀二氧化硅 10mg硬脂酸 5.0mg混合上述成分，將其壓成片劑。為了增加其平面性、改善外觀和穩(wěn)定性及延遲吸收，可施加適當(dāng)?shù)乃虾头撬贤繉印?br>
無菌IV溶液利用無菌注射用水制備5mg/ml本發(fā)明所需化合物溶液，如果必要，可調(diào)節(jié)其pH。利用5％無菌葡萄糖稀釋給藥溶液至1～2mg/ml，在60分鐘內(nèi)以IV灌輸給藥。
肌內(nèi)懸浮液由下列成分制備肌內(nèi)懸浮液本發(fā)明化合物 50mg/ml羧甲基纖維素鈉 5mg/mlTWEEN 80 4mg/ml氯化鈉 9mg/ml苯甲醇 9mg/ml
肌內(nèi)給用懸浮液。
硬殼膠囊向兩只由小牛肉制成的標(biāo)準(zhǔn)硬膠囊中分別填充100mg粉狀活性成分、150mg乳糖、50mg纖維素和6mg硬脂酸鎂，制得大量單位膠囊。
軟明膠膠囊制備于可消化油(如豆油、棉籽油或橄欖油)中的活性成分混合物；利用正位移泵，將其注入到熔融明膠中，形成軟明膠膠囊，該膠囊中包含100mg活性成分。洗滌并干燥膠囊?；钚猿煞挚扇芙庠诰垡叶肌⒈己蜕嚼娲嫉幕旌衔镏?，從而制得易與水混合的醫(yī)用混合物。
立即釋放的片劑/膠囊通過常規(guī)和新的方法制備固體口服劑型。這些單元可在沒有用于立即溶解并傳輸藥物的水的情況下進(jìn)行口服。在含有如蔗糖、明膠、膠質(zhì)和甜味劑的成分的液體中混合活性成分。通過冷凍干燥和固態(tài)提取方法，將這些液體固化成固體片劑或囊片。藥物化合物與粘彈性和熱塑性食糖和聚合物或冒泡的成分一起壓縮，生成可在不需要水的條件下立即釋放的多空基質(zhì)。
這里描述的結(jié)構(gòu)、材料、組合物和方法是用來表示本發(fā)明的實(shí)施例，人們不應(yīng)當(dāng)理解為本發(fā)明范圍限制在這些實(shí)施例范圍內(nèi)。本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)認(rèn)識(shí)到，在實(shí)踐中可以改變這里描述的結(jié)構(gòu)、材料、組合物和方法，且這些改變均被認(rèn)為在本發(fā)明范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.式I化合物及其藥用鹽和酯， 其中R1和R2相同或不同，選自苯基，該苯基任意地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基、硝基、(C1-C6)烷基羰基氨基、(C1-C6)烷基氨基羰基氨基或苯基取代，(C2-C6)烷基，環(huán)己基，該環(huán)己基任意地被(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基取代，或任意地被一個(gè)或多個(gè)氟取代，1-或2-萘基，該基團(tuán)任意地被鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基或氰基取代，芐基，該芐基在其苯環(huán)上任意地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基或氰基取代，5-至10-元飽和或不飽和雜環(huán)基團(tuán)，該雜環(huán)基團(tuán)任意地被氟、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基或氰基取代，以及5-至10-元芳族單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)基團(tuán)，該基團(tuán)任意地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基、硝基或苯基取代，條件是R2不為未取代4-吡啶基或未取代4-嘧啶基；R3為氫、(C1-C6)烷基、芐基、氯或溴；X為 其中R8為氫或(C1-C6)烷基；R9為(C1-C9)烷基或(C7-C11)二環(huán)烷基，各自任意地被一個(gè)或多個(gè)苯基、羥基、芐氧基、(C1-C6)烷氧基或氟取代，或芐基，其中苯環(huán)任意地被一個(gè)或多個(gè)(C1-C6)烷基、羥基、芐氧基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基、硝基或鹵素取代，或苯基、苯并環(huán)己基或苯并環(huán)戊基，該基團(tuán)任意地在苯環(huán)上被一個(gè)或多個(gè)苯基、羥基、芐氧基、(C1-C6)烷氧基或鹵素取代；或R8和R9及與其相連的氮原子一起形成5-至10-元飽和或不飽和雜環(huán)基團(tuán)，該雜環(huán)基團(tuán)任意地被一個(gè)或多個(gè)(C1-C6)烷基、芐基、羥基、芐氧基、(C1-C6)烷氧基、鹵素取代，5-至10-元飽和或不飽和雜環(huán)基團(tuán)；或苯基，所述苯基任意地被一個(gè)或多個(gè)(C1-C6)烷基、羥基、芐氧基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基、硝基或鹵素取代。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物及其藥用鹽和酯，其中R1、R2和R3如權(quán)利要求1定義；X為 其中R8為氫或(C1-C6)烷基；R9為(C1-C9)烷基，該基團(tuán)任意地被一個(gè)或多個(gè)羥基或氟取代，或芐基，其中苯環(huán)任意地被一個(gè)或多個(gè)(C1-C6)烷基、羥基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基或鹵素取代。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物及其藥用鹽和酯，其中R1、R2相同或不同，選自苯基，該苯基任意地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基、硝基、(C1-C6)烷基羰基氨基、(C1-C6)烷基氨基羰基氨基或苯基取代，R3為氫、(C1-C6)烷基、芐基、氯或溴；X為 其中R8為氫或(C1-C6)烷基；R9為(C1-C9)烷基，該基團(tuán)任意地被一個(gè)或多個(gè)羥基或氟取代，或芐基，其中苯環(huán)任意地被一個(gè)或多個(gè)(C1-C6)烷基、羥基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基或鹵素取代。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物及其藥用鹽和酯，其中R1、R2相同或不同，選自苯基，該苯基任意地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基或氰基取代，R3為氫、(C1-C6)烷基、芐基、氯或溴；X為 其中R8為氫或(C1-C6)烷基；R9為(C1-C9)烷基，該基團(tuán)任意地被一個(gè)或多個(gè)羥基或氟取代，或芐基，其中苯環(huán)任意地被一個(gè)或多個(gè)(C1-C6)烷基、羥基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基或鹵素取代。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的化合物及其藥用鹽和酯，其中R1、R2相同或不同，選自苯基，該苯基任意地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基或氰基取代，R3為氫、甲基、乙基、正丙基或正丁基；X為 其中R8為氫或(C1-C6)烷基；R9為(C1-C9)烷基，該基團(tuán)任意地被一個(gè)或多個(gè)羥基或氟取代，或芐基，其中苯環(huán)任意地被一個(gè)或多個(gè)(C1-C6)烷基、羥基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基或鹵素取代。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的化合物及其藥用鹽和酯，其中R1、R2相同或不同，選自苯基，該苯基任意地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基或氰基取代，R3為氫、甲基、乙基、正丙基或正丁基；X為 其中R8為氫或(C1-C6)烷基；R9為環(huán)己基或2-羥基環(huán)己基，或芐基，其中苯環(huán)任意地被一個(gè)或多個(gè)(C1-C6)烷基、羥基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基或鹵素取代。
7.式I化合物及其藥用鹽和酯， 其中R1和R2相同或不同，選自苯基，該苯基任意地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基、硝基、(C1-C6)烷基羰基氨基、(C1-C6)烷基氨基羰基氨基或苯基取代，(C2-C6)烷基，環(huán)己基，該環(huán)己基任意地被(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基取代，或任意地被一個(gè)或多個(gè)氟取代，1-或2-萘基，該基團(tuán)任意地被鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基或氰基取代，芐基，該芐基在其苯環(huán)上任意地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基或氰基取代，5-至10-元飽和或不飽和雜環(huán)基團(tuán)，該雜環(huán)基團(tuán)任意地被氟、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基或氰基取代，以及5-至10-元芳族單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)基團(tuán)，該基團(tuán)任意地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基、硝基或苯基取代，條件是R2不為未取代4-吡啶基或未取代4-嘧啶基；R3為氫、(C1-C6)烷基、芐基、氯或溴；X為 其中R11為(C2-C9)烷基，該基團(tuán)任意地被一個(gè)或多個(gè)苯基、羥基、芐氧基、(C1-C6)烷氧基或氟取代，苯基，該苯基任意地被一個(gè)或多個(gè)(C1-C6)烷基、羥基、芐氧基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基、硝基或鹵素取代，芐基、2-苯基乙基、苯并環(huán)己基或苯并環(huán)戊基，各自在一個(gè)烷基碳上任意地被羥基、芐氧基或羥基(C1-C6)烷基取代，及在苯環(huán)上任意地被鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基、羥基、芐氧基或硝基取代，或5-至10-元芳族單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)基團(tuán)。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的化合物及其藥用鹽和酯，其中R1、R2和R3如權(quán)利要求1定義；X為 其中R11為(C2-C9)烷基，該基團(tuán)任意地被一個(gè)或多個(gè)苯基、羥基、(C1-C6)烷氧基或氟取代，苯基，該苯基任意地被一個(gè)或多個(gè)(C1-C6)烷基、羥基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基或鹵素取代。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的化合物及其藥用鹽和酯，其中R1、R2相同或不同，選自苯基，該苯基任意地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基、硝基、(C1-C6)烷基羰基氨基、(C1-C6)烷基氨基羰基氨基或苯基取代，R3為氫、(C1-C6)烷基、芐基、氯或溴；X為 其中R11為(C2-C9)烷基，該基團(tuán)任意地被一個(gè)或多個(gè)苯基、羥基、(C1-C6)烷氧基或氟取代，苯基，該苯基任意地被一個(gè)或多個(gè)(C1-C6)烷基、羥基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基或鹵素取代。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的化合物及其藥用鹽和酯，其中R1、R2相同或不同，選自苯基，該苯基任意地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基或氰基取代，R3為氫、(C1-C6)烷基、芐基、氯或溴；X為 其中R11為(C2-C9)烷基，該基團(tuán)任意地被一個(gè)或多個(gè)苯基、羥基、(C1-C6)烷氧基或氟取代，苯基，該苯基任意地被一個(gè)或多個(gè)(C1-C6)烷基、羥基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基或鹵素取代。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的化合物及其藥用鹽和酯，其中R1、R2相同或不同，選自苯基，該苯基任意地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基或氰基取代，R3為氫、甲基、乙基、正丙基或正丁基；X為 其中R11為(C2-C9)烷基，該基團(tuán)任意地被一個(gè)或多個(gè)苯基、羥基、(C1-C6)烷氧基或氟取代，苯基，該苯基任意地被一個(gè)或多個(gè)(C1-C6)烷基、羥基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基或鹵素取代。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的化合物及其藥用鹽和酯，其中R1、R2相同或不同，選自苯基，該苯基任意地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基或氰基取代，R3為氫、甲基、乙基、正丙基或正丁基；X為 其中R11為(C2-C9)烷基，苯基，該苯基任意地被一個(gè)或多個(gè)(C1-C6)烷基、羥基、(C1-C6)烷氧基、三氟甲基、氰基或鹵素取代。
13.一種藥物組合物，該組合物包含與可藥用載體結(jié)合的有效劑量權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的化合物或其可藥用鹽或酯。
14.一種藥物組合物，該組合物包含與可藥用載體和一種或多種降血糖劑結(jié)合的有效劑量權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的化合物或其可藥用鹽或酯。
15.根據(jù)權(quán)利要求14的藥物組合物，其中所述降血糖劑選自胰島素、雙胍、磺酰脲、胰島素促分泌素、α-糖苷酶抑制劑和β3-腎上腺素受體激動(dòng)劑。
16.一種藥物組合物，該組合物包含與可藥用載體和一種或多種選自HMG Co-A還原酶抑制劑、膽汁酸結(jié)合劑、纖維酸衍生物及調(diào)劑高血壓的試劑結(jié)合的有效劑量權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的化合物或其可藥用鹽或酯。
17.一種藥物組合物，該組合物包含與可藥用載體和一種或多種選自調(diào)節(jié)生熱、脂解、內(nèi)臟運(yùn)動(dòng)、脂肪吸收和過飽的藥物結(jié)合的有效劑量權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的化合物或其可藥用鹽或酯。
18.一種藥物組合物，該組合物包含與惰性載體結(jié)合的有效劑量權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的化合物或其可藥用鹽或酯。
19.權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的化合物在制備治療肥胖癥及與肥胖癥相關(guān)疾病的藥物中的用途。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的用途，其中所述與肥胖癥相關(guān)疾病包括脂質(zhì)代謝障礙癥、高甘油三酯癥、高血壓癥、糖尿病、綜合癥X、動(dòng)脈粥樣硬化疾病、心血管疾病、腦血管疾病、周圍血管疾病、膽固醇膽石、癌癥、月經(jīng)不調(diào)、不育癥、多囊性卵巢、骨關(guān)節(jié)炎和睡眠性呼吸暫停。
21.權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的化合物在制備調(diào)節(jié)飲食和食物攝入的藥物中的用途。
22.權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的化合物在制備治療易餓病的藥物中的用途。
23.與一種或多種降血糖劑結(jié)合的權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的化合物在制備治療肥胖癥及與肥胖癥相關(guān)疾病的藥物中的用途。
24.與一種或多種調(diào)節(jié)消化和/或代謝的藥劑結(jié)合的權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的化合物在制備治療肥胖癥及與肥胖癥相關(guān)疾病的藥物中的用途。
25.根據(jù)權(quán)利要求24的用途，其中所述調(diào)節(jié)消化和/或代謝的藥劑包括調(diào)節(jié)生熱、脂解、內(nèi)臟運(yùn)動(dòng)、脂肪吸收和過飽的藥劑。
26.根據(jù)權(quán)利要求25的用途，其中所述調(diào)節(jié)消化和/或代謝的藥劑包括β3-腎上腺素受體藥劑。
27.與一種或多種選自HMG Co-A還原酶抑制劑、膽汁酸結(jié)合劑、纖維酸衍生物及調(diào)劑高血壓的試劑結(jié)合的權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的化合物在制備治療肥胖癥及與肥胖癥相關(guān)疾病的藥物中的用途。
28.權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的化合物在制備治療CNS疾病的藥物中的用途。
29.權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的化合物在制備治療認(rèn)知和記憶疾病的藥物中的用途。
30.權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的化合物在制備治療物質(zhì)或行為沉溺的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及式I取代咪唑衍生物，其可抑制食欲并引起體重減輕。本發(fā)明也提供了合成該化合物的方法、含有該化合物的藥物組合物、該組合物用于引起體重減輕和治療肥胖癥及與肥胖癥相關(guān)的疾病的方法。
文檔編號(hào)C07D405/04GK1865248SQ20061009151
公開日2006年11月22日 申請(qǐng)日期2002年9月24日 優(yōu)先權(quán)日2001年9月24日
發(fā)明者R·A·史密斯, S·J·奧康諾, S·－N·維爾茨, W·C·王, S·蔡, H·C·E·克呂恩德, N·蘇, G·王, F·阿切貝, S·嬴 申請(qǐng)人:拜爾藥品公司