專利名稱：：酶抑制劑的制作方法酶抑制劑本發(fā)明涉及抑制組蛋白脫乙酰酶家族成員的化合物以及該化合物在治療包括癌癥在內(nèi)的細胞增殖疾病、聚谷氨酰胺病如亨廷頓病、神經(jīng)變性疾病如阿耳茨海默病、自身免疫性疾病如類風濕性關節(jié)炎和器官移植排斥、糖尿病、血液學疾病、炎性疾病、心血管疾病、動脈粥樣硬化以及感染的炎性后遺癥中的應用。發(fā)明背景在真核細胞中，DNA被組蛋白包裹以形成染色質(zhì)。大約150個DNA堿基對在組蛋白八聚體(組蛋白2A、2B、3和4各兩個)周圍被包裹兩次從而形成染色質(zhì)的基本單位一核小體。染色質(zhì)的有序結(jié)構(gòu)需要被修飾以轉(zhuǎn)錄相關基因。轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)是分化、增殖和凋亡的關鍵，因此被密切控制。對染色質(zhì)結(jié)構(gòu)改變的控制(以及因此對轉(zhuǎn)錄的控制)受組蛋白的共價修飾調(diào)節(jié)，最顯著的是N-末端尾巴。對氨基酸側(cè)鏈的共價修飾(例如甲基化、乙?；⒘姿峄头核鼗?是由酶介導的(有關組蛋白的修飾以及它們在轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)中的作用的綜述可在BergerSL2001Oncogene20，3007-3013中找到；參見Grunstein，M1997Nature389，349-352;WolffeAP1996Science272，371-372;以及WadePA等，1997TrendsBiochemSci22，128-132，其中回顧了組蛋白的乙?；娃D(zhuǎn)錄)。組蛋白的乙酰化與具有轉(zhuǎn)錄活性的染色質(zhì)區(qū)域有關，而具有低乙酰化水平的核小體通常是轉(zhuǎn)錄沉默的。組蛋白的乙?；癄顟B(tài)受兩類活性相對的酶控制組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(HAT)和組蛋白脫乙酰酶(HDAC)。在轉(zhuǎn)化的細胞中，據(jù)信HDAC的不適當?shù)谋磉_導致腫瘤抑制因子沉默(關于HDAC在腫瘤發(fā)生中的作用的綜述，可參見GraySG和TehBT2001CurrMolMed1，401-429)。該文獻中已經(jīng)描述了HDAC酶抑制劑并顯示它可誘導某些基因的轉(zhuǎn)錄再激活，從而導致抑制癌細胞增殖、誘導凋亡和抑制腫瘤在動物中生長(相關綜述，可參見Kelly，WK等，2002ExpertOpinInvestigDrugs11，1695-1713)。這種發(fā)現(xiàn)提示，HDAC抑制劑有治療癌癥等增殖性疾病的治療潛能(Kramer,OH等，2001TrendsEndocrinol12，294-300，VigushinDM和CoombesRC2002AnticancerDrugs13，1-13)。此外，還提到異常的HDAC活性或組蛋白乙?；c以下疾病和紊亂有關聚谷氨酰胺病如亨廷頓病(HughesRE2002CurrBiol12，R141-R143;McCampbellA等，2001ProcSocNatlAcadSci98，15179-15184;HocklyE等，2003ProcSocNatlAcadSci100，2041-2046)，其它神經(jīng)變性疾病如阿耳茨海默病(HempenB和BrionJP1996，JNeuropatholExpNeurol55，964-972)，自身免疫性疾病和器官移植排斥(SkovS等，2003Blood101，1430-1438;MishraN等，2003JClinInvest111，539-552)，糖尿病(MosleyAL和OzcanS2003JBiolChem278，19660陽19666)和糖尿病并發(fā)癥，感染(包括原生動物感染(Darkin-Rattray，SJ等，1996ProcSocNatlAcadSci93，13143-13147))和血液學疾病包括地中海貧血(WittO等，2003Blood101，2001-2007)。這些文獻中的觀察結(jié)果提示，抑制HDAC對于這些疾病以及其它相關疾病應具有治療益處。已經(jīng)提出過許多類型的HDAC抑制劑化合物，這些化合物中的一些目前正在接受關于治療癌癥的臨床評價。例如，以下專利申請公開了這種化合物US5,369,108禾卩WOWO03畫395WO04/1109890測171WO03/076400WO04/092115US4,254,220WO03/076401WO0柳22柳1WO01/70675WO03/076421WO05/014588WO01/38322WO03/076430WO05/018578WO02/30879WO03/076422WO05/019174WO02/26703WO03艦2明WO05/004861WO02/069947WO03/08TO57WO05/007091WO02/26696WO03/092686WO05/030704WO0纖22幼WO03,579WO05/013958WO02/22577WO03/011851WO05/028447WO03/075929WO04/013,30WO05/026907其中，環(huán)A是具有任選的取代基R的碳環(huán)或雜環(huán)環(huán)系統(tǒng)，[鍵合基(linker)]是各種類型的鍵合基。異羥肟酸(hydroxamate)基團作為金屬連接基團，與HDAC酶活性位點上的金屬離子相互作用，其位于折疊的酶結(jié)構(gòu)內(nèi)的袋的基部。環(huán)或環(huán)系統(tǒng)A位于含有金屬離子的袋內(nèi)或入口上，而-(鍵合基]-基團深入到該袋中以使A與結(jié)合異羥躬本領域抑制的HDAC抑制劑中有許多具有式(A)所示的結(jié)構(gòu)模板:酸基的金屬相連。在本領域中，環(huán)或環(huán)系統(tǒng)A有時被非正式地稱為抑制劑的"頭部基團(headgroup)",在本文中有時也這樣。使用前藥來增強到靶器官和組織的遞送或克服母體藥物較差的藥代動力學特性是一種熟知的藥物化學方法。給予酯類前藥，例如可在體內(nèi)被血清羧酸酯酶水解成活性母體酸的酯，能使母體酸的血清水平高于給予酸本身。發(fā)明簡述本發(fā)明基于以下發(fā)現(xiàn)，即將a氨基酸酯基團引入上述HDAC抑制劑分子模板(A)有助于藥劑透過細胞膜，從而使細胞內(nèi)羧酸酯酶活性水解酯以釋放母體酸。酸在帶有電荷時不容易被轉(zhuǎn)運出細胞，從而會累積而提高活性HDAC抑制劑的細胞內(nèi)濃度。這導致作用潛能提高且持續(xù)時間增加。因此，本發(fā)明提供了一類以具有a氨基酸酯部分為結(jié)構(gòu)特征的化合物，a氨基酸酯部分是共價連接到HDAC抑制劑分子模板的細胞內(nèi)羧酸酯酶(文中也稱為"酯酶基序")的底物，并提供了相應的去酯化的母體酸，這種化合物具有藥物用途，可用于治療諸如癌癥等受益于在細胞內(nèi)抑制HDAC的疾病。發(fā)明詳述根據(jù)本發(fā)明，提供了一種式(I)的化合物其鹽、N-氧化物、水合物或溶劑合物/N—Y—L1—X1—[CH2];H其中，&是羧酸基(-COOH)或是可被一種或多種細胞內(nèi)羧酸酯酶水解成羧酸基的酯基；R2是天然或非天然a氨基酸的側(cè)鏈；Y是鍵、-C(=0)-、-S(=0)r、-C(=0)0-、-C(=0)NR3-、-C(=S)-NR3、-C(=NH)NR3或-S(K))2NR3-，其中R3是氫或任選取代的C,-C6烷基；L1是式-(Alk、(Q)n(Alk2)p-的二價基團，其中，m、n和p獨立為0或1，Q是:(i)具有5-13個環(huán)成員的任選取代的二價單環(huán)或雙環(huán)碳環(huán)或雜環(huán)基團，或(ii)，當m和p都是0時是式-X、QL或-Q^X、的二價基團，其中乂2是-0-，:鍵合基1—CONHOH(I)S-或NRA-，其中RA是氫或任選取代的C廣C3烷基，(^是具有5-13個環(huán)成員的任選取代的二價單環(huán)或雙環(huán)碳環(huán)或雜環(huán)基團，AU^和AlP獨立代表任選取代的二價C3-C7環(huán)烷基，或任選取代的直鏈或支鏈的C,-C6亞垸基、CrC6亞烯基或C2-C6亞炔基，所述基團可任選含有或終止于醚(-O-)、硫醚(-S-)或氨基(-NRA-)連接，其中，RA是氫或任選取代的C1-C3院基5X1代表鍵；-C(=0);或-8(=0)2-;-NR4C(=0)-、國C(K))NR4-、-NR4C(=0)NR5-、-^8(=0)2-或-8(=0)2^-，其中R4和Rs獨立為氫或任選取代的C,-C6垸基；Z是0或1;A代表任選取代的單環(huán)、二環(huán)或三環(huán)碳環(huán)或雜環(huán)環(huán)系統(tǒng)，其中，基團R,R2NH-Y-L、X、[CH2]z-和HONHCO-[鍵合基]-結(jié)合于不同的環(huán)原子；和-[鍵合基-代表連接A中的環(huán)原子與異羥肟酸基CONHOH的二價鍵合基，該鍵合基的長度，即從連接A的環(huán)原子的最后一個原子到連接異羥肟酸基的最后一個原子的長度，等于含有3-10個碳原子的無支鏈飽和烴鏈的長度。盡管上面的定義可能包括高分子量的分子，但根據(jù)藥物化學實踐的一般原則，優(yōu)選本發(fā)明涉及的化合物的分子量應不超過600。在另一個廣義方面，本發(fā)明提供了上面定義的式(I)的化合物或其N-氧化物、鹽、水合物或溶劑合物在制備用于抑制HDAC酶活性的組合物中的應用。本發(fā)明涉及的化合物可用于在體外或體內(nèi)抑制HDAC活性，尤其是HDAC1活性。在本發(fā)明的一個方面，本發(fā)明的化合物可用于制備用來治療以下疾病的組合物細胞增殖疾病如癌細胞增殖、聚谷氨酰胺病如亨廷頓病、神經(jīng)變性疾病如阿耳茨海默病、自身免疫性疾病如類風濕性關節(jié)炎、器官移植排斥、糖尿病、血液學疾病、感染(包括但不限于原生動物和真菌感染)、炎性疾病、以及包括動脈粥樣硬化在內(nèi)的心血管疾病。另一方面，本發(fā)明提供了一種治療上述疾病類型的方法，所述方法包括給予患有這種疾病的對象有效量的如上文所定義的式(I)的化合物。術(shù)語"酯"或"酯化的羧基，，表示基團R90(C=0)-，其中R9是從理論上說衍生自醇R9OH的酯的特征性基團。文中，術(shù)語"(CVCb)垸基"，其中a和b是整數(shù)，表示含有a-b個碳原子的直鏈或支鏈垸基。因此，例如當a是l而b是6時，該術(shù)語包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基和正己基。文中，術(shù)語"二價(CVCb)亞烷基"，其中a和b是整數(shù)，表示含有a-b個碳原子和兩個不飽和化學價的飽和烴鏈。文中，術(shù)語"((VCb)烯基"，其中a和b是整數(shù)，表示含有a-b個碳原子并具有至少一個合適的E或Z立體化學的雙鍵的直鏈或支鏈烯基部分。該術(shù)語包括，例如，乙烯基、烯丙基、l-和2-丁烯基和2-甲基-2-丙烯基。文中，術(shù)語"二價(CVCb)亞烯基"表示含有a-b個碳原子、至少一個雙鍵和兩個不飽和化學價的烴鏈。文中，術(shù)語"CVCb炔基"，其中a和b是整數(shù)，表示含有2-6個碳原子且還含有一個三鍵的直鏈或支鏈烴基。該術(shù)語將包括，例如，乙炔基、l-丙炔基、l-和2-丁炔基、2-甲基-2-丙炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、4-戊炔基、2-己炔基、3-己炔基、4-己炔基和5-己炔基。文中，術(shù)語"二價(CVCb)亞炔基"，其中a和b是整數(shù)，表示含有2-6個碳原子和至少一個三鍵的二價烴鏈。文中，術(shù)語"碳環(huán)"指含有最多達16個環(huán)原子且所有環(huán)原子均為碳原子的單環(huán)、二環(huán)或三環(huán)基團，并包括芳基和環(huán)垸基。文中，術(shù)語"環(huán)烷基"指含有3-8個碳原子的單環(huán)的飽和碳環(huán)基團，該術(shù)語包括，例如，環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基和環(huán)辛基。文中，非限制性術(shù)語"芳基"指單環(huán)、二環(huán)或三環(huán)的碳環(huán)芳香基團，并包括含有兩個通過共價鍵直接相連的單環(huán)碳環(huán)芳香環(huán)的基團。這種基團的例子有苯基、聯(lián)苯基和萘基。文中，非限制性術(shù)語"雜芳基"指含有一個或多個選自S、N或0的雜原子的單環(huán)、二環(huán)或三環(huán)芳香基團，并包括含有通過共價鍵直接相連的兩個此類單環(huán)或者一個此類單環(huán)和一個單環(huán)芳基環(huán)的基團。這種基團的例子有噻吩基、苯并噻吩基、呋喃基、苯并呋喃基、吡咯基、咪唑基、苯并咪唑基、噻唑基、苯并噻唑基、異噻唑基、苯并異噻唑基、吡唑基、噁唑基、苯并噁唑基、異噁唑基、苯并異嚼、唑基、異噻唑基、三唑基、苯并三唑基、噻二唑基、噁二唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、吲哚基和吲唑基。文中，非限制性術(shù)語"雜環(huán)基"或"雜環(huán)"包括上面定義的"雜芳基"，其非芳香含義包括含有一個或多個選自S、N或O的雜原子的單環(huán)、二環(huán)或三環(huán)非芳香基團，并包括由含有一個或多個這種雜原子的單環(huán)非芳香基團構(gòu)成的基團，所述單環(huán)非芳香基團共價連接到另一個此類基團或連接到單環(huán)碳環(huán)基團。這種基團的例子有吡咯基、呋喃基、噻吩基、哌啶基、咪唑基、噁唑基、異嗎唑基、噻唑基、噻二唑基、吡唑基、吡啶基、吡咯垸基、嘧啶基、嗎啉基、哌嗪基、吲哚基、嗎啉基、苯并呋喃基、吡喃基、異嗯唑基、苯并咪唑基、亞甲基二氧苯基、亞乙基二氧苯基、馬來酰亞胺基(maleimido)和琥珀酰亞胺基。除非當其出現(xiàn)時文中另有說明，術(shù)語"取代的"用于本文所述的任何部分時表示被最多4個相容的取代基取代，各取代基獨立為，例如，(C!-C6)烷基，(d-C6)烷氧基，羥基，羥基(CrC6)垸基，巰基，巰基(CrC6)垸基，(d-C6)垸硫基，苯基，鹵素(包括氟、溴和氯)，三氟甲基，三氟甲氧基，硝基，腈(-CN)，氧代，-COOH，-COORA，-cora，-so2ra，-conh2，-so2nh2，-conhra，-so2nhra，陽conrArb，-so2nrarb，-NH2，畫NHRA，-NRARB，-OCONH2，-OCONHRA，-OCONRARB，-NHCORA，-NHCOORA，-NRBCOORA，-NHS02ORA，-NRBS02OH，-NRBS02ORA，-NHCONH2，-NRACONH2，-NHCONHR8，-NRaCONHRb，-NHCONRARB或-NRACONRARB，其中，rA和rB獨立為(C,-C6)烷基，(C3-C6)環(huán)垸基，苯基或含有5或6個環(huán)原子的單環(huán)雜芳基。"任選的取代基"可以是上述取代基之一。術(shù)語"天然或非天然a-氨基酸的側(cè)鏈"表示式NH2-CH(R、COOH所示天然或非天然氨基酸的W基團。天然a氨基酸的側(cè)鏈的例子包括丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、谷氨酸、組氨酸、5-羥基賴氨酸、4-羥基脯氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸、纈氨酸、a-氨基己二酸、a-氨基-正丁酸、3,4-二羥基苯丙氨酸、高絲氨酸、a-甲基絲氨酸、鳥氨酸、2-哌啶酸和甲狀腺素的側(cè)鏈。在其特征性側(cè)鏈中含有功能性取代基如氨基、羧基、羥基、巰基、胍基、咪唑基或吲哚基的天然a-氨基酸包括精氨酸、賴氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、色氨酸、組氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸和半胱氨酸。在本發(fā)明的化合物中，當R2是上述側(cè)鏈之一時，則所述功能性取代基可任選被保護。術(shù)語"保護的"當用于天然a-氨基酸側(cè)鏈中的功能性取代基時表示衍生這種取代基使其基本失去功能。例如，羧基可被酯化(例如Q-C6垸基酯)，氨基可被轉(zhuǎn)化成酰胺(例如作為NHCOd-C6烷基酰胺)或氨基甲酸酯(例如作為NHC—0)OCrC6烷基或NHC(=0)OCH2Ph氨基甲酸酯)，羥基可被轉(zhuǎn)化成醚(例如OCrC6烷基或0(d-C6垸基)苯基醚)或酯(例如0C—0)d-C6烷基酯)，硫醇基團可被轉(zhuǎn)化成硫醚(例如叔丁基或芐基硫醚)或硫代酸酯(thioester)(例如SC(=0)CrC6垸基硫代酸酯)。非天然a氨基酸的側(cè)鏈的例子包括下文在討論用于本發(fā)明化合物的合適的R2基團時提到的那些。文中，術(shù)語"鹽"包括堿加成鹽、酸加成鹽和季鹽(quatemarysalt)。酸性的本發(fā)明的化合物可與堿、有機堿形成鹽，包括藥學上可接受的鹽，所述堿例如堿金屬的氫氧化物如氫氧化鈉和氫氧化鉀；堿土金屬的氫氧化物如氫氧化鈣、氫氧化鋇和氫氧化鎂；所述有機堿例如N-甲基-D-葡糖胺、膽堿三(羥甲萄氨基-甲垸、L-精氨酸、L-賴氨酸、N-乙基哌啶、二芐基胺等。那些堿性的化合物(I)可與無機酸和有機酸形成鹽，包括藥學上可接受的鹽，所述無機酸例如氫鹵酸如鹽酸或氫溴酸、硫酸、硝酸或磷酸等，所述有機酸例如乙酸、酒石酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、蘋果酸、水楊酸、檸檬酸、甲磺酸、對甲苯磺酸、苯甲酸、苯磺酸、谷氨酸、乳酸和扁桃酸等。由于存在不對稱碳原子，含有一個或多個實際的或潛在的手性中心的本發(fā)明的化合物可作為許多在各手性中心上具有R或S立體化學的非對映異構(gòu)體存在。本發(fā)明包括所有這些非對映異構(gòu)體和它們的混合物。如上所述，本發(fā)明的酯是它們將被細胞內(nèi)羧酸酯酶轉(zhuǎn)化成的相應羧酸的主要前藥。然而，只要它們還未被水解，所述酯本身就具有HDAC抑制活性。本發(fā)明的化合物不僅包括酯，還包括相應的羧酸水解產(chǎn)物。異羥肟酸基團-C一O)NHOH在本發(fā)明的化合物中，異羥肟酸基團作為金屬連接基團，與HDAC醇活性位點上的金屬離子相互作用，其位于折疊的酶結(jié)構(gòu)內(nèi)的袋的基部。環(huán)或環(huán)系統(tǒng)A環(huán)或環(huán)系統(tǒng)A是任選被取代的單環(huán)、二環(huán)或三環(huán)碳環(huán)或雜環(huán)環(huán)系統(tǒng)。在本發(fā)明的化合物中，當結(jié)合到HDAC酶的活性位點時，環(huán)或環(huán)系統(tǒng)A位于含有金屬離子的袋內(nèi)或入口處，而-(鍵合基]-基團深入到該袋中以使A與結(jié)合異羥肟酸基的金屬相連。在本領域中，環(huán)或環(huán)系統(tǒng)A有時被非正式地稱為抑制劑的"頭部基團"。環(huán)系統(tǒng)A的例子包括以下這些其中R,o是氫或任選取代的C,-C6烷基，被波浪線貫穿的鍵連接化合物(I)中的鍵合基，而化合物(I)中的基團R,R2CHNHYlJx、CH2]z與所示環(huán)系統(tǒng)中任何方便的環(huán)原子相連。-r鍵合基i-基團-[鍵合基]-代表連接A中的環(huán)原子與異羥肟酸基CONHOH的二價鍵合基，該鍵合基的長度，即從連接A的環(huán)原子的最后一個原子到連接異羥肟酸基的最后一個原子的長度，等于含有3-10個碳原子的無支鏈飽和烴鏈的長度。含有3個碳原子的無支鏈飽和烴鏈的長度約為2.5埃，含有10個碳原子的無支鏈飽和鏈烴的長度約為11.3埃。任何給定的-[鍵合基]-的長度可根據(jù)文獻中的原子半徑和鍵長數(shù)據(jù)來確定，或者可用DSViewerPro(Accelrys，Inc)等化學結(jié)構(gòu)建模軟件來確定。-[鍵合基]-的規(guī)定長度反映了頭部基團A可位于酶活性位點上的含有金屬離子的袋入口處或該袋內(nèi)這一事實，因此與袋的深度松散相關。在多數(shù)情況下，鍵合基的長度將等于有4-9個碳原子，例如5、6或7個碳原子的無支鏈飽和烴鏈的長度。具體通用類型的-[鍵合基]-是下述"1型"、"2型"和"3型"鍵合基。l型鍵合基在這種類型中，-[鍵合基]-代表式為-(<:112、-2丄2-的二價基團，其中x是O或1;Z是鍵、-NR3-、-NR3C(=0)-、-C(=0)NRr、-NR4C(=0)-NR3-、-C(=S)-NR3、陽C^N)-NR3-NR3S^O)2-或-S(K))2NR3-，其中R3是氫或CVC6烷基；-C(=0);或-S(=0)2-;禾口1^代表任選取代的直鏈或支鏈的CVC7亞垸基、C4-C6亞烯基或C4-C6亞炔基，所述基團任選含有或終止于醚(-O-)、硫醚(-S-)或氨基(-NRA-)連接，其中，RA是氫或任選取代的Q-C3垸基。在這種類型的鍵合基的一個亞類中，在任何相容的組合中，x是0;Z是-NH-、-c(=o)-、-,<:(=0)-或-(:(=0),國和1是-((:112)5-、-(<:!12)6-或-((:112)7陽。2型鍵合基在這種類型中，-[鍵合基]-代表式為-(<:112))(丄3-八一丄4-的二價基團，其中X是O或1;1^是Z或I^或Z-L2，其中，Z如對l型鍵合基的定義，I是鍵或任選取代的二價Q-C3亞烷基；Ar'是二價苯基或具有5-13個環(huán)成員的二價單環(huán)或二環(huán)雜芳基，和L4是鍵或任選取代的-CH2-或-Cr^CH-。在這種類型的鍵合基的一個亞類中，在任何相容的組合中，x是0或l;I是Z或Z-L2，其中Z是-NH-、-NHS(=0)2-、-S(K))2NH-或-S(-0)2-;1^2是-0"12丄4是鍵或-CH2-;和Ar'是選自下組的二價基團其中，X是O、S或NH。在上述A,基團中，一個具體的例子是苯并[b]噻吩-6-基在這種類型的鍵合基的一個亞類中，在任何相容的組合中，X是0;1^是L2，其中I是可任選含有醚(-0-)、硫醚(-S-)或氨基(-NRA-)連接的直鏈CrC5亞烷基，其中，RA是氫或任選取代的CrC3烷基，例如羥乙基；Ar1是選自上段所列基團的二價基團。在這種類型的另一個亞類中，x是0，1^3和1/是鍵，A—是二價苯基或含有9-13個環(huán)成員的二價二環(huán)雜芳基，例如可選自下組xw々uX少Q(mào)、、Pu'其中，X選自0、S或NH，P、Q和U獨立選自N和CH;用"標記的鍵連接到CONHOH基團；用4示記的鍵連接到環(huán)或環(huán)系統(tǒng)A。3型鍵合基在這種類型中，-[鍵合基]-代表式為-(CH2)x-L3-B-Ar1-L4-的二價基團，其中x、Ar1，!^和1/如上文對2型鍵合基的討論；B是單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)環(huán)系統(tǒng)。在這種類型的鍵合基的一個亞類中，B是以下基團之一廠NVN-<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>其中，X是N，W是NH、O或S。酯基A必須是本發(fā)明化合物中被一種或多種細胞內(nèi)羧酸酯酶水解成羧酸基的基團。能夠?qū)⒈景l(fā)明化合物的酯基水解成相應的酸的細胞內(nèi)羧酸酯酶包括三種已知的人類的酶的同種型hCE-l、hCE-2和hCE-3。盡管這些酶被認為是主要的酶，但其它的酶如聯(lián)苯基水解酶(BPH)也具有水解酯的作用。通常，如果羧酸酯酶將游離的氨基酸酯水解成母體酸，由于下述hCE-2和hCE-3針對的是N-羰基，則當共價結(jié)合到HDAC抑制劑時羧酸酯酶也會水解酯基序(estermotif)。因此，本文描述的破細胞測定法(brokencellassay)提供了一種直接、快速且簡便的首次篩選具有所需水解曲線的酯的方法。當將用這種方法選出的酯基序通過選擇性結(jié)合化學結(jié)合到調(diào)節(jié)物時可采用相同的羧酸酯酶測定法再次測定，以證實它仍舊是該背景下的羧酸酯酶底物。為被細胞內(nèi)羧酸酯酶水解，特定的酯基!^的例子包括式-(CW)OR9的基團，其中，R9是(i)R7R8CH-，其中，R7是任選取代的(CrC3)垸基-(Z')a-(C,-C3)烷基-或(C2-C3)烯基-(Z')a-(C廣C3)垸基-，其中a是0或l，Zi是-0-、-S-或-NH-，R8是氫或(C!-C3)烷基-，或者R7和R8與它們所結(jié)合的碳原子一起形成任選取代的C3-C7環(huán)烷基環(huán)或任選取代的5或6個環(huán)原子的雜環(huán)；或(ii)任選取代的苯基或含有5或6個環(huán)原子的單環(huán)雜環(huán)。在這些種類中，R9可以是，例如，甲基，乙基，正或異丙基，正或仲丁基，環(huán)己基，烯丙基，苯基，芐基，2-、3-或4-吡啶基甲基，N-甲基哌啶-4-基，四氫呋喃-3-基或甲氧基乙基。目前優(yōu)選R9是環(huán)戊基。已知巨噬細胞通過釋放細胞因子，尤其是TNFa和IL-1而在炎性疾病中發(fā)揮關鍵作用(vanRoon等，ArthritisandRheumatism,2003，1229-1238)。在類風濕性關節(jié)炎中，它們是維持關節(jié)炎癥和關節(jié)破壞的主要貢獻者。巨噬細胞也參與腫瘤的生長和發(fā)展(Naldini和Carraro，CurrDrugTargetsInflammAllergy,2005，3-8)。因此，選擇性靶向巨噬細胞增殖的試劑對于治療癌癥和自身免疫性疾病很有價值。預計靶向特定細胞類型能降低副作用。發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了將HDAC抑制劑靶向巨噬細胞的方法，該方法基于以下發(fā)現(xiàn)，即酯酶基序連接HDAC抑制劑的方式?jīng)Q定了它是否被水解，因此是否在不同細胞類型中累積。具體地說，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)巨噬細胞含有人羧酸酯酶hCE-l而其它細胞類型不含有。在通式(I)中，當酯酶基序R^2CHNH-的氮不直接連接到羰基(-C(K))-)時，即當Y不是-C(-O)、-CtO)O-或-C(K))NRr基團時，該酯將僅被hCE-l水解，因此HDAC抑制劑將僅在巨噬細胞中累積。文中，除非具體提到"單核細胞"或"單核細胞"，術(shù)語巨噬細胞將用來表示巨噬細胞(包括腫瘤相關的巨噬細胞)和/或單核細胞。氨基酸側(cè)鏈R7當需要使酯基&被細胞內(nèi)羧酸酯酶水解時，不要求側(cè)鏈基團R2是相同的。氨基酸側(cè)鏈的例子包括C,-Q烷基，苯基，2-、3-或4-羥基苯基,2-、3-或4-甲氧基苯基，2-、3隱或4-吡啶基甲基、芐基、苯基乙基，2-、3-或4-羥基芐基，2-、3-或4-芐氧基芐基，2-、3-或4-d-C6烷氧基芐基，以及芐氧基(CrC6垸基)-基團；天然a氨基酸的特征性基團，其中的任何官能團可被保護；基團-[Alky^，其中，Alk是任選被一個或多個-0-或-S-原子或-N(R7)-基團[其中，R7是氫原子或(CVC6)烷基]打斷的(C,-C6)烷基或(CVC6)烯基或，n是0或l，&是任選取代的環(huán)烷基或環(huán)烯基；在苯環(huán)中被式-OCH2COR8的基團取代的芐基，其中R8是羥基、氨基、(Q-C6)垸氧基、苯基(Q-C6)垸氧基、(CrC6)烷基氨基、二((CrC6)垸基)氨基、苯基(Q-C6)烷基氨基、氨基酸或?；u的殘基、酯或其酰胺衍生物，所述殘基通過酰胺鍵連接，所述氨基酸選自甘氨酸、a或(3丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、賴氨酸、組氨酸、精氨酸、谷氨酸或天冬氨酸；在雜環(huán)環(huán)中未被取代或被以下基團單-或二-取代的雜環(huán)(Q-C6)垸基鹵素、硝基、羧基、(C-C6)烷氧基、氰基、(C廣C6)垸?；?、三氟甲基(C廣C6)烷基、羥基、甲酰、氨基、(CVC6)烷基氨基、二-(CrC6)烷基氨基、巰基、(C,-C6)垸硫基、羥基(CrC6)垸基、巰基(CrC6)垸基或(d-C6)垸基苯基甲基；和基團-CRaRbR^，其中Ra、Rb和K各自獨立為氫、(C,-C6)烷基、(CVC6)烯基、(CVC6)炔基、苯基(CVC6)垸基、(C3-C8)環(huán)烷基；或Rc是氫，Ra和Rb獨立為苯基或雜芳基，如吡啶基；或Rc是氫、(CrC6)垸基、(CVC6)烯基、(C2-C6)炔基、苯基(CVC6)垸基或(C3-C8)環(huán)垸基，Ra和Rb與它們所結(jié)合的碳原子一起形成3-8元環(huán)烷基或5-6元雜環(huán)；或Ra、Rb和Rc與它們所結(jié)合的碳原子一起形成三環(huán)(例如金剛垸基)；或Ra和Rb各自獨立為(C,-C6)烷基、(C2-C6)烯基、(CrC6)炔基、苯基(Ci-C6)焼基、或是除氫之外的如下文對Rc定義的基團，或者Ra和Rb與它們所結(jié)合的碳原子一起形成環(huán)烷基或雜環(huán)，且Rc是氫、-OH、-SH、鹵素、-CN、-c02H、(CVC4)全氟垸基、-ch2oh、-c02(c廣C6)垸基、-0(<:1曙(:6)垸基、-0((:2-(:6)烯基、-s(c廣C6)垸基、-80(<:1-(:6)垸基、-802((:1-<:6)垸基、-8(<:2-(:6)烯基、-80(<32《6)烯基、-802((:2-(:6)烯基或基團-(^\^，其中，Q代表鍵或-O-、-S-、-SO-或-SOr，w代表苯基、苯基烷基、(C3-C8)環(huán)垸基、(C3-C8)環(huán)垸基垸基、(C4-C8)環(huán)烯基、(C4-C8)環(huán)烯基垸基、雜芳基或雜芳基烷基，基團w可任選被一個或多個獨立選自下組的取代基取代羥基、鹵素、-cn、-c02h、-c02(c廣C6)垸基、-conh2、-(:0麗((:1-(:6)烷基、-<:0麗(<:1-(:6烷基)2、-cho、-ch2oh、(c廣Q)全氟烷基、-0(cvc6)烷基、-s(d-C6)烷基、-80(<:1-(:6)烷'基、陽so2(c廣C6)烷基、-no2、-nh2、-麗(<:1-(:6)烷基、->^((<:1-(:6)烷基)2、-雨(:0((:1《6)烷基、(c廣C6)烷基、(crc6)烯基、(CVC6)炔基、(C3-C8)環(huán)烷基、(CVC8)環(huán)烯基、苯基或芐基。具體的R2基團的例子包括氫(甘氨酸"側(cè)鏈")、芐基、苯基、環(huán)己基甲基、環(huán)己基、吡啶-3-基甲基、叔丁氧基甲基、異丁基、仲丁基、叔丁基、l-芐硫基-l-甲基乙基、l-甲硫基-l-甲基乙基、l-巰基-l-甲基乙基和苯基乙基。目前優(yōu)選的R2基團包括苯基、芐基和異丁基。對于要全身給予的本發(fā)明的化合物，優(yōu)選被羧酸酯酶斷裂的速率慢的酯，因為這種酯不易于被系統(tǒng)前代謝。因此它們完整到達其靶組織的能力增強了，且所述酯可在靶組織的細胞內(nèi)被轉(zhuǎn)化成酸產(chǎn)物。然而，對于局部給藥而言，此時酯被直接施加于耙組織或通過例如吸入直接到達靶組織，通常需要這種酯被酯酶快速斷裂，以使全身暴露和隨后不希望的副作用最小。在本發(fā)明的化合物中，如果鄰近a氨基酸酯a碳原子的碳原子被單取代，即R2是CH2RZ(RZ為單取代基)，則與上述碳原子如果被二取代或三取代(例如R2是苯基或環(huán)己基的情況)相比，這種酯趨于更快被斷裂。該基團(或鍵)來自于選擇用來偶聯(lián)氨基酸酯基序RiCH(R2)NH-與抑制劑的頭部基團A的特定化學方法。顯然，用于該偶聯(lián)的化學方法可以非常多，因此Y、L1、X1和z可以有許多組合。然而，如上所述，當抑制劑結(jié)合到HDAC酶的活性位點時，頭部基團A位于該酶含有金屬離子的袋的頂部或之內(nèi)，因此，將氨基酸酯基序與頭部基團連接時，頭部基團通常向離開袋的方向延伸，從而最小化或避免了對抑制劑模板A-[鍵合基]-CONHOH的結(jié)合模式的干擾。因此，構(gòu)成氨基酸酯基序與頭部基團A之間的連接化學的變量的精確組合將通常與作為一個整體的化合物的結(jié)合模式無關。另一方面，在一些情況下，連接化學選擇與位于含有金屬離子的袋頂部或鄰近該袋的酶采取其它結(jié)合相互作用，從而增強了結(jié)合。還應當注意，當氨基酸酯基序與頭部基團之間的鍵不是細胞內(nèi)肽酶活性(這種活性可導致從分子中切割下氨基酸)的底物時，上述氨基酸酯基序的益處(易于進入細胞、在細胞內(nèi)被羧酸酯酶水解、以及在細胞內(nèi)累積活性羧酸水解產(chǎn)物)最大。當然，也可將該化合物與破裂的細胞內(nèi)容物一起孵育并分析任何此類切割來方便地測量對細胞內(nèi)肽酶的穩(wěn)定性。當頭腦中有了上述一般概念時，接下來就可以考慮構(gòu)成基團-Y-lAx^[CH2]z-的各種變量Z可以是0或1，因此頭部基團A上可任選連接有亞甲基；當不需要巨噬細胞選擇性時，特別優(yōu)選的Y的例子包括-(0=0)-、-(CK))NH-和-(CK))O-;當需要巨噬細胞選擇性時，Y的任何其它選擇，包括Y是鍵的情況，都是合適的。在基團L1中，當AlW和AlP基團存在時，其例子包括-CH2-、-CH2CH2-、-CH2CH2CH2-、-CH2CH2CH2CH2-、-CH=CH-、-CH=CHCH2-、-CH2CH=CH-、CH2CH=CHCH2-、-C三C-、-C=CCH2-、CH2C三C-和CH2C=CCH2。Alk1和Alk2的其它例子包括-CH2W-、-CH2CH2W-、-CH2CH2WCH2-、-CH2CH2WCH(CH3)-、-CH2WCH2CHr、-CH2WCH2CH2WCH2^n-WCH2CHr，其中W是-O-、-S-、-nh-、-1^(013)-或-(:112<:112:^((:112(:112011)012-。aiW和Aik2進一步的例子包括二價環(huán)丙基、環(huán)戊基和環(huán)己基。在lJ中，當n是0時，所述基團是烴鏈(任選被取代，且可能含有醚、硫醚或氨基連接)。目前優(yōu)選I^中沒有任選的取代基。當m和p都是0時，"是含有5-13個環(huán)原子的二價單環(huán)或雙環(huán)碳環(huán)或雜環(huán)基團(任選被取代)。當n是1且m和p中至少有一個是l時，U是二價基團，包括一條或多條烴鏈以及含有5-13個環(huán)原子的單環(huán)或雙環(huán)碳環(huán)或雜環(huán)基團(任選被取代)。當Q存在時它可以是，例如，二價苯基、萘基、環(huán)丙基、環(huán)戊基或環(huán)己基，或是含有5-13個環(huán)成員的單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)基團，如哌啶基、哌嗪基、吲哚基、吡啶基、噻吩基或吡咯基，但目前優(yōu)選l,4-亞苯基。具體地說，在本發(fā)明的一些實施方案中，L1、m和p可以是O而n為1。在其它實施方案中，n和p可以是O而m為l。在其它實施方案中，m、n和p可以都是0。再在其它實施方案中，m可以是0，n可以是l，而Q為單環(huán)雜環(huán)基團，且p可以是0或l。Alk1和Alk2當存在時可以選自-CHr、-CH2CH24n-CH2CH2CH2-，而Q可以是1,4-亞苯基?；鶊F-Y-I^X^CH^-的具體例子包括-C(=0)-和-C(=0)NH-、以及-(CH2)V-、<formula>formulaseeoriginaldocumentpage23</formula>其中，v是l、2、3或4，w是l、2或3，如-CH2-、-CH20-、-C(=0)-CH2-、-C(=0)-CH20-、-C(=0)-NH-CH2^n-C(=0)-NH-CH20-。本發(fā)明化合物特定亞組的例子包括式(IA)-(IM)所示的那些<formula>formulaseeoriginaldocumentpage23</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage24</formula>其中，z、R卜R2、R3、L1以及^和Y如上述有關式(I)的定義，包括其優(yōu)選條件。具體的本發(fā)明化合物的例子包括以下這些(S)-[4-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-芐基氨基]-苯基-乙酸環(huán)戊酯(S)-2-[3-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-節(jié)基氨基]-4-苯基-丁酸環(huán)戊酯(S)-[3-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-芐基氨基]-苯基-乙酸環(huán)戊酯(S)-2-[3-(7-羥基氨甲酰基-庚酰氨基)-芐基氨基]-4-甲基-戊酸環(huán)戊酯(SH2-[3-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-苯基]-乙基氨基)-苯基-乙酸環(huán)戊酯(S)-2-(3-[3-(7-羥基氨甲酰基-庚酰氨基)-苯氧基]-丙基氨基〉-3-苯基-丙酸環(huán)戊酯(8)-2-(4-{[(2-羥基氨甲?；?苯并[13]噻吩-6-基甲基)-氨基]-甲基}-芐基氨基)-3-(4-羥基-苯基)-丙酸環(huán)戊酯(S)-3-叔丁氧基-2-(4-U(2-羥基氨甲?；?苯并[b]噻吩-6-基甲基)-氨基]-甲基h芐基氨基)-丙酸環(huán)戊酯(8)-1-(4-{[(2-羥基氨甲?；?苯并[13]噻吩-6-基甲基)-氨基]-甲基}-芐基)-吡咯烷-2-羧酸環(huán)戊酯(S)-2-(4《(2-羥基氨甲?；?苯并[b]噻吩-6-基甲基)-氨基]-甲基L芐基氨基)-丙酸環(huán)戊酯(4-{[(2-羥基氨甲?；?苯并[，塞吩-6-基甲基)-氨基]-甲基}-芐基氨基)-乙酸環(huán)戊酯例如，可通過下述方法和這里的實施例中描述的方法制備本發(fā)明的化合物。例如，本發(fā)明的化合物可從相應的相應的羧酸(II)制備，方法是將其活化衍生物如?；扰c羥胺或保護的羥胺反應?；蛘?，N-或O-保護的或N，O-雙保護的所需化合物(I)的前體可被去保護。在這種方法的一種有用的版本中，O-保護由樹脂載體提供，可通過例如酸性水解從樹脂載體上切下所需的異羥肟酸(I)。本發(fā)明的羧基保護的化合物(II)的衍生物，或O-連接的樹脂-支持的化合物(II)的衍生物可用文獻中所述的方法合成，按照所需化合物的具體結(jié)構(gòu)進行選擇。那種情況下，上述專利公開提供了關于合成與本發(fā)明的那些HDAC抑制劑結(jié)構(gòu)類似的HDAC抑制劑的信息。在一種適用于化合物(I)的方法中，其中Z是亞磺酰氨基-NHS02-，可使胺(III)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage26</formula>(III)與活化衍生物，例如磺酸HOS02-lAzS的酰基氯反應，其中，ZZ是保護的羧基，如可切割的酯或O-連接的樹脂-支持的異羥肟酸基。在另一種適用于化合物(I)的方法中，Z是酰胺基-NHC(K))-，可在存在碳二亞胺偶聯(lián)劑時使胺(III)與羧酸HOC(=0)-L-Z2反應，Z2如上一段中的定義。對于環(huán)或環(huán)系統(tǒng)A通過環(huán)氮原子連接到-鍵合基-CONHOH部分且Z是-(CK))-或-S02-的化合物(1)，可使合適的N-雜環(huán)(IV)(IV)與相應的羧酸或磺酸(即H00C-L、ZZ或H0S02-IAZ2，其中，ZZ如上文的定義)反應，所述羧酸或磺酸可作為其活化衍生物如氯化物或在存在碳二亞胺偶聯(lián)劑時反應。為進一步闡述文獻方法在合成上述式(I)范圍內(nèi)的化合物中的應用，提供了以下反應方案l-6。在這些方案中，基團R代表本發(fā)明化合物中存在的基團R2N—Y—L'—X'——[CH2]Z——H，或代表可用文獻方法構(gòu)建該基團的官能團。還在這些方法中，符號@代表固相樹脂載體。NaOH,THFEDC,HOBtNH2OH,DMF方案l、NaH,Br',OH<formula>formulaseeoriginaldocumentpage28</formula>TFA/DCM[OHAPyBOPDCMiPr2EtN,皂化和>與氨基酸方案3<formula>formulaseeoriginaldocumentpage30</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage31</formula>如上所述，本發(fā)明涉及的化合物是HDAC抑制劑，因此可用于治療人類和其它哺乳動物的細胞增殖疾病，如癌癥。應理解，用于任何特定患者的具體劑量水平將取決于各種因素，其中包括采用的具體化合物的活性、年齡、體重、一般健康、性別、飲食、給藥次數(shù)、給藥途徑、排泄率、藥物組合以及接受治療的特定疾病的嚴重性。最佳劑量水平和給藥頻率將由臨床試驗確定。本發(fā)明涉及的化合物可被制成通過任何與其藥代動力學特性一致的途徑給予。可口服給予的組合物的形式可以是片劑，膠囊，粉末，顆粒，錠劑，液體或凝膠制品如口服、局部或無菌腸胃外溶液或懸浮液。供口服給藥的片劑或膠囊可采用單位劑型，并可含有常規(guī)賦形劑，如粘合劑，例如糖漿、阿拉伯膠、明膠、山梨糖醇、黃蓍膠或聚乙烯吡咯烷酮；填料，例如乳糖、蔗糖、玉米淀粉、磷酸鈣、山梨糖醇或甘氨酸；壓片潤滑劑，例如硬脂酸鎂、滑石、聚乙二醇或二氧化硅；崩解劑，例如馬鈴薯淀粉，或可接受的潤濕劑如月桂基硫酸鈉?？砂凑粘Ｒ?guī)制藥實踐中熟知的方法將片劑包衣?？诜后w制劑的形式可以是，例如，水性或油性懸浮液、溶液、乳劑、糖漿劑或酏劑，或者可呈現(xiàn)為在使用前用水或其它合適載體重建的干燥產(chǎn)品。這種液體制劑可含有常規(guī)的添加劑，如懸浮劑，例如山梨糖醇、糖漿、甲基纖維素、葡萄糖漿、明膠、氫化食用脂肪；乳化劑，例如卵磷脂、去水山梨糖醇單油酸酯或阿拉伯膠；非水性載體(可包括食用油)，例如杏仁油、分餾椰子油、油性酯如甘油、丙二醇或乙醇；防腐劑，例如對羥基苯甲酸甲酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯或山梨酸，需要的話還可含有常規(guī)的調(diào)味劑或著色劑。當局部施用于皮膚時，可將藥物制成霜劑、洗劑或軟膏劑?？捎糜谒幬锏乃獎┗蜍浉鄤┡浞绞潜绢I域熟知的常規(guī)配方，例如標準藥物教科書如《英國藥典》(BritishPharmacopoeia)中描述的配方。為通過吸入局部施用，可將藥物制成通過氣霧劑遞送，例如通過壓力驅(qū)動的噴射霧化器或超聲霧化器，或者優(yōu)選通過推進劑驅(qū)動的計量式氣霧劑或者不釆用推進劑給予微粉化粉末，例如吸入劑膠囊或其它"干粉"遞送系統(tǒng)。這種吸入配方中可含有賦形劑，例如推進劑(例如，在計量式氣霧劑中為Frigen)、表面活性物質(zhì)、乳化劑、穩(wěn)定劑、防腐劑、調(diào)味劑和填料(例如，在干粉吸入器中為乳糖)。為了吸入，大量裝置都是適用的，這些裝置能產(chǎn)生最佳粒度的氣溶膠并采用適合患者的吸入技術(shù)給予。除了采用適配器(間隔物(spacer)、擴展器)和梨形容器(例如Nebulator、Volumatic)以及發(fā)射吹入噴霧的自動裝置(Autohaler⑧)，為給予經(jīng)過計量的氣溶膠，尤其是采用干粉吸入器時，許多技術(shù)方案是適用的(例如，Diskhaler、Rotadisk、Turbohaler或者例如歐洲專利申請EPO505321中描述的吸入器)。為局部施用于眼睛，可用合適的水性或非水性無菌載體將藥物制成溶液或懸浮液。也可含有添加劑，例如，緩沖劑，如偏亞硫酸氫鈉或依地酸二鈉；防腐劑，包括殺菌劑和殺真菌劑如醋酸苯汞或硝酸苯汞、苯扎氯銨或氯己定；以及增稠劑，如羥丙甲纖維素。也可采用無菌介質(zhì)腸胃外給予活性成分。根據(jù)所用載體和濃度，藥物可懸浮于或溶于載體中。有利地，佐劑如局部麻醉劑、防腐劑和緩沖劑也可溶于載體。以下實施例例舉了本發(fā)明的具體化合物的制備及其HDAC抑制特性在這些實施例中市售試劑和溶劑(HPLC級)無需進一步純化即可使用。微波照射用CEMDiscover聚焦微波反應器進行。用無加熱的GeneVacSeriesI或具有30°CVacRamp的GenevacSeriesII或Buchi旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)儀除去溶劑。用獲自Silicycle的粒度為40-63|im(230-400目)的硅膠通過快速層析柱純化化合物。用制備型HPLC純化化合物是在Gilson系統(tǒng)上進行的，采用反相ThermoHypersil-KeystoneHyperprepHSC18柱(12,，訓x21.2mm)，9.5分鐘20-100%B梯度(A-水/0.P/oTFA，B=乙腈/0.1o/。TFA)，流速=30ml/min，加樣溶劑2:1DMSO:乙腈(1.6ml)，在215nmUV檢測。在氘化溶劑中用Bruker400MHzAV光譜儀記錄NMR譜?；瘜W位移(S)用用百萬分之一份(ppm)表示。用Kieselgel60F254(Merck)板進行薄層層析(TLC)分析并用紫外光顯色。分析型HPLCMS在AgilentHPllOO、Waters600或Waters1525LC系統(tǒng)上進行，采用反相HypersilBDSC18柱(5pm,2.1x50mm)，2.10分鐘0-95%B梯度(A^水/0.1%TFA，B=乙腈/0.1。/。TFA)，流速=1.0ml/min。用GilsonG1315A二極管陣列檢測器、G1214A單波長UV檢測器、Waters2487雙波長UV檢測器、Waters2488雙波長UV檢測器或Waters2996二極管陣列UV檢測器記錄215nm的UV光譜。用具有Z-噴射界面的MicromassLCT或者具有Z-噴射或MUX界面的MicromassLCT以每秒掃描2次或每1.2秒掃描1次的采樣速率獲得m/z150-850之間的質(zhì)譜。數(shù)據(jù)用OpenLynx和OpenLynxBrowser軟件積分和報告。采用以下縮寫MeOH=甲醇EtOH-乙醇EtOAc=乙酸乙酯Boc=叔丁氧基羰基Cbz=節(jié)氧羰基(carbobenzyloxy)DCM=二氯甲烷DCE=二氯乙烷DMF=二甲基甲酰胺DMSO=二甲亞砜TFA=三氟乙酸THF=四氫呋喃Na2C03=碳酸鈉HC1=鹽酸DIPEA=二異丙基乙胺NaH=氫化鈉NaOH=氫氧化鈉NaHC03=碳酸氫鈉Pd/C=碳載鈀TBME=叔丁基甲基醚DMAP=4-二甲基氨基吡啶N2=氮氣PyBop=苯并三唑-l-基-氧-三-吡咯垸-磷鏡六氟磷酸鹽Na2S04=硫酸鈉Et3N=三乙胺NH3=氨TMSC1=三甲基氯硅烷NH4C1=氯化銨LiAlH4=氫化鋁鋰pyBrOP=溴代-三-吡咯垸磷鎩v六氟磷酸鹽MgS04=硫酸鎂Mn02=二氧化錳nBuLi=正丁基鋰C02=二氧化碳EDCI-AK3-二甲基氨基丙基)W-乙基碳二亞胺鹽酸鹽Et20=二乙醚LiOH=氫氧化鋰HOBt-l-羥基苯并三唑DIAD=偶氮二羧酸二異丙酯HATU=0-(7-氮雜苯并三唑-l-基-A/;A/;A^7V'-四甲基脲鏡(uronium)六氟磷酸鹽ELS=蒸發(fā)光散射TLC=薄層層析ml=毫升g=克mg=毫克mol=摩爾mmol=毫摩爾eq=摩爾當量LCMS-高效液相色譜/質(zhì)譜NMR=核磁共振r.t.=室溫樹脂化學的標準洗滌過程樹脂按以下順序洗滌DMF，MeOH,DMF，MeOH，DCM，MeOH，DCM，MeOHx2，TBMEx2。樹脂的測試切除室溫下將少量功能化的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(約0.3ml反應混合物，約10mg樹月旨)用2。/。TFA/DCM(0.5ml)處理10分鐘。過濾樹脂，濾液通過氮氣氣流吹掃濃縮。獲得殘余物的LCMS。(注意對于功能化的羥胺Wang樹脂的測試切除采用50%TFA/DCM進行)。制備辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂<formula>formulaseeoriginaldocumentpage36</formula>階段1—固定到2-氯三苯甲基-0-NH2樹脂<formula>formulaseeoriginaldocumentpage36</formula>在裝有2-氯三苯甲基-0-NH2樹脂(6g，以1.14mmol/g加載，6.84mmol)和DCM(60ml)的圓底燒瓶中加入二異丙基乙胺(5.30，41.0mmol，6eq)。邊定軌振蕩(orbitalshaking)邊在反應混合物中緩慢加入8-氯-8-氧代辛酸甲酯(4.2g，20.5mmol，3eq)，再將將反應混合物振蕩48小時。將樹脂過濾，并用標準洗滌過程洗滌。真空干燥樹脂。LCMS純度通過ELS檢測測定，100%，m/z204[]Vr+H]+。階段2_皂化<formula>formulaseeoriginaldocumentpage36</formula>在裝有階段1的樹脂(4g，以1.14mmol/g加載，4.56mmol)的圓底燒瓶中加入THF(16ml)和MeOH(16ml)。在反應物中加入NaOH(0.91g，22.8mmol，5叫)的水(16ml)溶液。將反應混合物振蕩48小時。將樹脂過濾并用水X2和MeOHX2洗滌，然后用標準洗滌過程洗滌。真空干燥樹脂。LCMS純度通過ELS檢測測定，100%m/z190[M"+H]+。制備環(huán)戊酯該酯按照以下方法之一制備。方法A—合成(S)-2-氨基-3-叔丁氧基-丙酸環(huán)戊酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage36</formula>階段1:(S)-2-芐氧基羰基氨基-3-叔丁氧基-丙酸環(huán)戊酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage37</formula>將(S)-2-芐氧基羰基氨基-3-叔丁氧基-丙酸(4g，0.014mol)溶于DMF(40ml)。加入環(huán)戊醇(2.54ml，0.027mol)和二甲基氨基吡啶(0.165g，0.014mol)。溶液用冰浴冷卻至(TC并在其中加入N-(3-二甲基氨基丙基)-N，-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(2.73g，(X014mo1，1.05eq.)?；旌衔镌?。C攪拌IO分鐘，然后使其回復室溫并再攪拌18小時。在反應混合物中加入水(20-30ml)，然后加入EtOAc(40ml)。分離各層，含水層用EtOAc(15ml)重新萃取。合并的有機層用水(4x20ml)洗滌，干燥(MgS04),并在真空下除去溶劑以得到殘余物。通過柱層析(l:lEtOAc/庚烷)純化得到無色油狀產(chǎn)物(3.82g，78%產(chǎn)率)。！HNMR(300MHz，CDC13)，5:U5(9H，s，CH3x3)，1.50-1.90(8H，m，CH2x4)，3.57(1H，dd，J=7.4,1.2Hz，CH)，3.85(1H，dd，J=7.4，1.2Hz，CH)，4.45(1H，m，CH)，5.15(2H，s，CH2)，5.25(1H，m，CH)，5.65(1H，d，CH，J=7,6Hz)，7.30-7.50(5H，m，ArHx5)。階段2:(S)-2-氨基-3-叔丁氧基丙酸環(huán)戊酯將(S)-2-芐氧基羰基氨基-3-叔丁氧基-丙酸環(huán)戊酯(3.82g，O.Ollmol)溶于EtOH(50ml)。在溶液中小心加入20重量％氫氧化鈀(濕)。將系統(tǒng)排空并在氫氣氛下放置4小時。將系統(tǒng)排空并通過硅藻土濾去殘余的鈀。硅藻土用EtOH(3x5ml)充分洗滌。在真空下除去濾液的溶劑以得到無色油狀產(chǎn)物(2.41g，100%產(chǎn)率)。^NMR(300MHz，CDC13)，5:1.15(9H,s，CH3x3)，1.50-1.90(IOH，m，CH2x4，NH2)，3.50-3,70(3H，m，CH2，CH)，5.22(1H，s，CH)。方法B—合成(S)-氨基-環(huán)己基-乙酸環(huán)戊酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage38</formula>階段l:(S)-叔丁氧基羰基氨基-環(huán)己基-乙酸環(huán)戊酯該物質(zhì)用與(S)-2-節(jié)氧基羰基氨基-3-叔丁氧基-丙酸環(huán)戊酯(方法A，階段l)相同的方法但從(S)-叔丁氧基羰基氨基-環(huán)己基乙酸制備。1HNMR(300MHz，CDC13)，S:1.00-1.40(IOH，m，CHxlO)，1.45(9H，s，C(CH3)3)，1.60-2.00(8H，m，4xCH2)，4.15(1H，m，CH)，5.05(1H，d，NH，J=7.6Hz)，5.25(1H，m，CH)。階段2:(S)-氨基-環(huán)己基-乙酸環(huán)戊酯(TC下將(S)-叔丁氧基羰基氨基-環(huán)己基-乙酸環(huán)戊酯(1.17g，3.60mmol)溶于TFA/DCM混合物(l:l，10ml)。將溶液攪拌90分鐘，在真空下除去溶劑。殘余物與DCM/庚烷混合物共沸(2x)以得到膠狀物。將膠狀物重溶于DCM(10ml)并用飽和NaHC03水溶液(3xl0ml)洗滌，干燥(MgS04)并過濾。在真空下除去濾液的溶劑以得到油狀產(chǎn)物(0.780g，78%產(chǎn)率)。'H薩R(300MHz，CDC13)，S:1.00-1.40(IOH，m，CHxlO)，1.50-2.00(8H，m，CHx8)，3.25(1H，d，CH，J=7.2Hz)，5.20(1H，m，CH)。方法C一合成(S)-2-氨基-4-甲基-戊酸環(huán)戊酯階段l:(S)-2-氨基-4-甲基-戊酸環(huán)戊酯甲苯-4-磺酸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage39</formula>在(S)-亮氨酸(15g，0.11mol)的環(huán)己烷(400ml)懸浮液中加入環(huán)戊醇(103.78ml，1.14mmol)和對甲苯磺酸(23.93g，0.13mol)。將懸浮液加熱回流以有效溶劑化。將溶液回流16小時后將其冷卻以得到白色懸浮液。將庚烷(500ml)加入混合物并過濾懸浮液以得到白色固體狀產(chǎn)物(35g，85%產(chǎn)率)。iHNMR(300MHz，MeOD)，5:1.01(6H，t，CH3x2，J=5.8Hz)，1.54-2.03(IIH，m，llxCH)，2.39(3H，s，CH3)，3.96(1H，t，CH，J=6.5Hz)，5.26-5.36(1H，m，CH)，7.25(2H，d，ArHx2，J=7.9Hz)，7.72(2H，d，ArHx2，J=8.3Hz)。階段2:合成(S)-2-氨基-4-甲基-戊酸環(huán)戊酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage39</formula>(S)-2-氨基-4-甲基-戊酸環(huán)戊酯甲苯-4-磺酸(2.57g，0.013mol)的DCM(5ml)溶液用飽和NaHC03水溶液(2x3ml)洗滌。合并的含水層用DCM(3x4ml)回萃。將合并的有機層干燥(MgSO4)并在真空下除去溶劑以得到無色油狀物(1.10g,80%產(chǎn)率)。iHNMR(300固z，CDC13)，5:0.卯(6H，t，CH3x2,J=6.4Hz)，1.23-1.94(IIH，m，5xCH2，CH)，3.38(1H，dd，CH，J=8.4，5.9Hz)，5.11-5.22(1H,m，CH)。方法D—合成(S)-2-氨基-3-叔丁硫基(butylsulfanyl)-丙酸環(huán)戊酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage39</formula>階段1:(S)-3-叔丁硫基-2-(9H省-9-基甲氧基羰基氨基)-丙酸環(huán)戊酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage39</formula>該物質(zhì)用與(S)-2-芐氧基羰基氨基-3-叔丁氧基-丙酸環(huán)戊酯(方法A，階段l)相同的方法但從(S)-3-叔丁硫基-2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)-丙酸制備。]HNMR(300顧z，CDC13)，5:1.30(9H，s，(CH3)3)，1,55-1,95(8H，m，CH2x4)，3.05(2H，d，CH2，J=4.8Hz)，4.20-4.30(1H，m，CH)，4.40(2H，d，CH2，J=7.5Hz)，4.65(1H，m，CH)，5.25(1H，m，CH)，5.70(1H，d，NH，J=7.8Hz)，7.30-7.50(4H，m，ArHx4)，7.65(2H，d，J=7.5Hz，ArHx2)，7.80(2H，d，J=7.5Hz，ArHx2)。階段2:(S)-2-氨基-3-叔丁硫基-丙酸環(huán)戊酯(TC下將(S)-3-叔丁硫基-2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)-丙酸環(huán)戊酯(1.63g，3.5Ommol)溶于CH3CN(25ml)。在此溶液中加入哌啶(21ml)。攪拌30分鐘后在真空下除去溶劑以得到殘余物。通過柱層析(EtOAc洗脫液)純化得到無色油狀產(chǎn)物(628mg，73%產(chǎn)率)。!HNMR(300MHz，CDC13)，5:1.30(9H，s，(CH3)3)，1.55-1.95(8H，m，CH2x4)，2.75(1H，dd，CH，J=7.2，12.3Hz)，2.95(1H，dd，CH，J=4.8，12.3Hz)，5.25(1H，m，CH)。按照上述方法A將以下N-Cbz保護的氨基酸轉(zhuǎn)化成環(huán)戊酯(S)-2-芐氧基羰基氨基-琥珀酸4-叔丁酯(S)-2-芐氧基羰基氨基-琥珀酸(succinamicacid)(S)-2-節(jié)氧基羰基氨基-4-氨甲?；?丁酸(S)-2-節(jié)氧基羰基氨基-3-(4-叔丁氧基-苯萄-丙酸(S)-2-芐氧基羰基氨基-3-羥基-丁酸(S)-2-節(jié)氧基羰基氨基-3，3-二甲基-丁酸(S)-2-節(jié)氧基羰基氨基-3-(lH-吲哚-2-基)-丙酸(8)-2-芐氧基羰基氨基-6-叔丁氧基羰基氨基-己酸按照上述方法B將以下N-Boc保護的氨基酸轉(zhuǎn)化成環(huán)戊酯叔丁氧基羰基氨基-乙酸(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-甲基-戊酸(S)-吡咯垸-l,2-二羧酸1-叔丁酯(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-甲基-丁酸(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-4-甲硫基(methylsuIfanyl)-丁酸按照上述方法C將以下游離氨基酸轉(zhuǎn)化成環(huán)戊酯(s)-氨基-苯基-乙酸(S)-2-氨基-3-苯基-丙酸(S)-2-氨基-丙酸(S)-2-氨基-4-甲基-戊酸制備6-甲酰-苯并fW噻吩-2-羧酸(l-異丁氧基-乙氧基)酰胺合成顯示在下面的方案7中。與該途徑有關的其它文獻參考可在refra/z^ro"35，2，219-222和WO05/034880中找到。NalO,_硫基乙醇酸乙酯K2C03,DMF階段3方案7啶熱M力段階段l:4-(2-二甲基氨基-乙烯基)-3-硝基苯甲酸甲酯將4-甲基-3-硝基苯甲酸甲酯(5g，25.6mmol)溶于DMF(25mL，5體積)并在其中加入AUV-二甲基甲酰胺二甲基縮醛(4.4mL，33.3mmol)?；旌衔镌?40。C攪拌3小時。將所得深紅色溶液冷卻并真空濃縮。殘余物與甲醇一起研磨并過濾。濾液用甲醇洗滌并在燒結(jié)漏斗(sinter)上干燥以得到4-(2-二甲基氨基-乙烯基)-3-硝基苯甲酸甲酯(5.2g，80%)。'H麗R(300MHz，DMSO)，5:2.98(6H，s，2xCH3)，3.87(3H，s，CH3)，5.58(1H，m，CH)，7.72-7.83(3H，m，ArH)，8.32(1H，m，CH)。階段2:4-甲酰-3-硝基苯甲酸甲酯在烯胺(5g，20.0mmol)的THF(50mL，10體積)和水(50mL，IO體積)溶液中加入高碘酸鈉(12.8g，60.0mmol)并將混合物攪拌2小時。將混合物過濾，所得固體用EtOAc(500mL)洗滌。將有機層分離，用NaHC03(3xlOOmL)洗滌并干燥(MgS04)。真空濃縮得到4-甲酰-3-硝基苯甲酸甲酯(3.9g，93%)。LCMSm/z210[M^H]+，&NMR(300畫z，DMSO)，5:3.96(3H，s，OMe)，8.01(1H，d，ArH)，8.39(1H，d，ArH)，8.54(1H，s，ArH)，10.31(1H，s，CHO)。階段3:苯并[b]噻吩-2,6-二羧酸2-乙酯6-甲酯將4-甲酰-3-硝基苯甲酸甲酯(3.9g，18.7mmol)、巰基-乙酸乙酯(2.2mL，20.4mmol)和K2C03(3.3g,24mmol)的DMF(40ml，10體積)的混合物在50。C加熱過夜。冷卻至室溫后將混合物倒入冰冷的水(250mL)中并將所得混合物攪拌40分鐘。形成的固體通過過濾分離，用水(4x50mL)洗滌并真空干燥以得到標題化合物(3.9g，80%)。LCMSm/z265[Iv^+H]+，'HNMR(300MHz，CDC13)S:1.40(3H，tJ=6.8Hz,CH3)，3.95(3H，s，OMe)，4.40(2H，qJ=7.2Hz，CH2)，7.88(1H，dJ=8.0Hz，ArH)，7.97-8.09(2H，m.ArH)，8.56(1H，s，ArH)。階段4:苯并[b]噻吩-2,6-二羧酸2-乙酯將苯并[b]噻吩-2,6-二羧酸2-乙酯6-甲酯(3.9g，14.77mmol)和碘化鋰(10g，74.6mmol)的無水吡啶(30ml，9體積)混合物攪拌回流16小時。冷卻至室溫后將混合物加入(以熔化物形式或切碎的形式)冰冷的2NHC1(200mL)中。形成的固體通過過濾分離并用水(3x50mL)洗滌。產(chǎn)物通過從甲醇中重結(jié)晶純化以得到標題化合物(1.8g，49%)。LCMSm/z251[lyT+H]+，'HNMR(300應z，DMSO)，S:1.35(3H，tJ=6.9Hz，CH3)，4.38(2H，qJ=7.1Hz，CH2)，7.99(1H，dJ=8.3Hz，ArH)，8.12(1H，dJ=8.3Hz，ArH)，8.27(1H，s，ArH)，8.70(1H，s，ArH)。階段5:6-羥甲基-苯并[b]噻吩-2-羧酸乙酯將苯并[b]噻吩-2,6-二羧酸2-乙酯(1.6g，6.4mmol)的無水THF(40mL，25體積)溶液冷卻至(TC。在其中緩慢加入BH3(1M，用THF配制，30mL，30.Ommo1)。使反應物回復至室溫并攪拌3小時。然后將溶液冷卻至O'C并用INHC1(7.5mL)淬滅(quench)。將反應混合物真空濃縮以除去所有THF，所得固體通過過濾分離并真空干燥以得到6-羥甲基-苯并[b]噻吩-2-羧酸乙酯(1.3g，87%)。LCMSm/z237pvT+H]+，&NMR(300麗z，DMSO)，5:1.34(3H，tJ=6.9Hz，CH3)，4.35(2H，qJ=7.1Hz，CH2)，4.65(2H，s，CH2)，6.53(1H，brs，OH)，7.42(1H，dJ=9.4Hz)，7,98(3H，m，ArH)，8.18(1H，s，ArH)。階段6:6-羥甲基-苯并[b]噻吩-2-羧酸將6-羥甲基-苯并[b]噻吩-2-羧酸乙酯(2.4g，9.6mmo1，1叫)溶于THF(10mL，4體積)并加入(IOmL)和LiOH(0.69g，28.8mmol)。反應混合物在50。C攪拌3小時，然后濃縮至干并無需純化用于下一步驟。階段7:6-羥甲基-苯并[b]噻吩-2-羧酸(l-異丁氧基-乙氧基)酰胺<formula>formulaseeoriginaldocumentpage44</formula>在6-羥甲基-苯并[b]噻吩-2-羧酸(1.76g，8.4mmol，1eq)的DMF溶液中加入PyBrOP(4.3g，9.2mmol)、0-(異丁氧基-乙基)-羥胺(11.5mL，84.0mmol)(通過WO0160785所述方法制備)和DIPEA(2.9mL，16.7mmol)。反應混合物在室溫攪拌2小時，然后用水(40mL)和EtOAc(40mL)稀釋。將有機層分離，用鹽水(50mL)洗滌并濃縮。殘余物通過硅膠層析純化，用EtOAc/庚烷(l:l)洗脫以得到標題化合物(1.8g，兩個步驟的產(chǎn)率為67%)。LCMSm/z322[M^H]+，^NMR(300MHz，MeOD)，5:0.83(6H，dJ=6.6Hz，2xCH3)，1.32(3H，dJ=5.9Hz，CH3)，1.75(1H，m，CH)，3.38(2H，m，CH2)，4.63(2H，s，CH2)，4.95(1H，m，CH)，7.32(1H，dJ=8.2Hz，ArH)，7.77(3H，m，ArH)。階段8:6-甲酰-苯并[b]噻吩-2-羧酸(l-異丁氧基-乙氧基)酰胺在6-羥甲基-苯并[b]噻吩-2-羧酸(l-異丁氧基-乙氧基)酰胺(600mg，1.86mmol)的DCM(3mL)溶液中加入Mn02(2.1g，24.1mmol)。將混合物室溫攪拌30分鐘然后通過硅藻土過濾。將濾液濃縮以得到標題化合物(435mg，82%)。LCMSm/z320[M+-H]+，iHNMR(300顧z，MeOD)，S:0.94(6H，dJ=6.7Hz，2xCH3)，1.45(3H，dJ=5.3Hz，CH3)，1.87(1H，m，CH)，3.40(2H，m，CH2)，5.08(1H，ddJ=5.2，10.6Hz，CH)，7.89-8.09(3H，m，ArH)，8.55(1H，s，ArH)，10.11(1H，s，CHO)。合成圖1的化合物，以化合物(1)和化合物(2)為例力HR=環(huán)戊基1R=H2R=環(huán)戊基3R=H4<formula>formulaseeoriginaldocumentpage44</formula>制備結(jié)構(gòu)單元A-G結(jié)構(gòu)單元A和B將N-Boc-D-四氫-P-咔啉-3-羧酸(5.0g，15.8mmol)和TMSC1(20ml，158mmol)的MeOH(50ml)溶液加熱回流2小時。將反應混合物蒸發(fā)至干以得到(R)-2，3，4,9-四氫-lH-!3-咔啉-3-羧酸甲酯(結(jié)構(gòu)單元A)。LCMS純度100%。m/z231[]Vr+H]+，461[2M^H]+。結(jié)構(gòu)單元A無需進一步純化即可使用。用N-boc-L-四氫-P-咔啉-3-羧酸通過與結(jié)構(gòu)單元A相同的方法獲得(S)-2,3，4,9-四R=乙基5R=H6R-OMeOR=環(huán)戊基11R-H12R—O'OHPhOR二環(huán)戊基13R=H14R-環(huán)戊基15R=H16PhOR—OR=環(huán)戊基17R=H18R-叔丁基19圖1ooo=氫-lH-p-昨啉-3-羧酸甲酯(結(jié)構(gòu)單元B)。階段h邊攪拌邊將乙醛酸單水合物(1.51g，16.4mmol)的水(10ml)溶液逐滴加入鹽酸色胺(3.0g，15.3mmol)的水(200ml)溶液。加入KOH(0.827g，14.7mmol)的水(10ml)溶液。將反應混合物室溫攪拌1小時，之后發(fā)生隨時間沉淀。減壓過濾后收集四氫-(3-咔啉-l-羧酸并用水洗滌。產(chǎn)量為1.9g(58%);m/z217[M"+H]+。階段2:四氫-P-咔啉-l-羧酸(7.4g)的MeOH(250ml)溶液用HC1氣體飽和20分鐘。反應混合物在室溫溫和攪拌18小時，觀察到約80%轉(zhuǎn)化。反應混合物用HC1氣體再次處理并再攪拌18小時。反應完成后真空濃縮混合物以得到2,3,4,9-四氫-lH-p-咔啉-l-羧酸甲酯(結(jié)構(gòu)單元C)，LCMS純度95。/。，m/z231[M++H]+。產(chǎn)物無需進一步純化即可使用。結(jié)構(gòu)單元DD采用結(jié)構(gòu)單元C所用的方法將6-甲氧基-四氫-p-咔啉-l-羧酸酯化得到6-甲氧基-2,3，4,9-四氫-111-(3-咔啉-1-羧酸甲酯(結(jié)構(gòu)單元D)。結(jié)構(gòu)單元D:LCMS純度98%,m/z261[AT+H]+。結(jié)構(gòu)單元D無需進一步純化即可使用。結(jié)構(gòu)單元E4-哌嗪-l-基-芐腈(1.5g，8.0mmol)的MeOH(150ml)溶液用HCl氣體飽和。加入水(0.17ml)并將混合物加熱回流18小時。將反應混合物冷卻至室溫并用HC1氣體再次飽和。再回流24小時。將混合物減壓濃縮得到4-哌嗪-l-基-苯甲酸甲酯(結(jié)構(gòu)單元E)。LCMS純度90%，m/z221[M^H]+。結(jié)構(gòu)單元E無需進一步純化即可使用。結(jié)構(gòu)單元FO按照與結(jié)構(gòu)單元E相同的方法制備l，2，3，4-四氫-異喹啉-7-羧酸甲酯(結(jié)構(gòu)單元F)。LCMS純度89。/。。m/z193[M"+H]+。該產(chǎn)物無需進一步純化即可使用。結(jié)構(gòu)單元GoG4-氨基-苯甲酸甲酯(結(jié)構(gòu)單元G)是市售的合成化合物(1)和化合物(2)在無水DCM(50ml)中溶脹用辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(4.6g，以U4mmol/g加載，5.24mmo1)。加入結(jié)構(gòu)單元A(4.76g，15.72mmo1)，然后加入pyBOP(8.18g，15.72mmo1，3eq)和DIPEA(6.77g，52.4mmo1，10eq)。將反應物振蕩18小時，過濾，并用標準洗滌過程洗滌。真空干燥樹脂。注意對于結(jié)構(gòu)單元G，采用上述條件偶聯(lián)得到約10%的轉(zhuǎn)化。因此采用另一種條件將階段2的樹脂(1.0g，以1.14mmol/g加載)在無水DCM(100ml)中溶脹。0°C時在氮氣下加入l-氯-W/Z-2-三甲基丙烯胺(Ghosez試劑y(7.53ml，57.0mmol，50叫)。使混合物回復室溫并溫和振蕩1-2小時。在20分鐘內(nèi)分批加入苯胺結(jié)構(gòu)單元G(8.6g，57.0mmo1，50eq)。加入Et3N(8.0ml，57.0mmo1，50eq)。將混合物振蕩18小時。測試切除后的LCMS顯示有70%轉(zhuǎn)化，m/z323[M^H]+，645[2!vT+H]+。將樹脂過濾，并用標準洗滌過程洗滌。真空干燥樹脂。階段2:皂化將階段1的樹脂(4.8g，以U4mmol/g加載，5.47mmol)懸浮于MeOH(17.5ml)和THF(17.5ml)。加入NaOH(l.lg，27.5mmol，5eq)的水(17.5ml)溶液。將混合物振蕩18小時。測試切除后的LCMS證實反應完全，m/z388[M^H]+，775[2M"+H]+。將樹脂過濾并用水x2和MeOHx2洗滌，然后用標準洗滌過程洗滌。真空干燥樹脂。注意對于結(jié)構(gòu)單元E，皂化用10eq.2.7MNaOH進行并振蕩72小時。階段3:與L-苯基甘氨酸環(huán)戊酯偶聯(lián)將階段2的樹脂(2.4g，以U4mmol/g加載，2.7mmol)懸浮于無水DCM(30ml)。加入L-苯基甘氨酸環(huán)戊酯甲苯磺酸鹽(tosyl5化)(3.2§，8.111111101，369)，然后加入？丫80(4.2g，8.1mmo1，3叫)和DIPEA(3.5g，27.0mmo1，IO叫)。將混合物振蕩18小時。測試切除后的LCMS(即用標準洗滌過程洗滌少量樹脂，干燥，并在2。/oTFA/DCM中切除。將樹脂濾出并濃縮至干。獲得LCMS)證實反應完全，m/z589[M++H]+。將所有樹脂樣品過濾，并用標準洗滌過程洗滌。真空干燥樹脂。注意對于化合物5-8，采用L-苯丙氨酸乙酯(3eq)。對于化合物19，采用L-苯基甘氨酸叔丁酯(3eq)。階段4:0{[(11)-2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-2，3,4,9-四氫-111-卩-咔啉-3-羰基]-氨基}-苯基-乙酸環(huán)戊酯(l)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage49</formula>將階段3的樹脂(1.0g，以1.14mmol/g加載)在2%TFA/DCM(10ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。收集濾液并在室溫下減壓蒸發(fā)。樹脂用2n/。TFA/DCM(10ml)重新處理，20分鐘后過濾。將合并的濾液在室溫下減壓蒸發(fā)至干，殘余物(約300mg)通過制備型HPLC純化以得到化合物(l)，m/z589[Nf+H]+;NMR(400MHz,CD3OD)S:1.3-1.7(16H，m，CH2)，2.1-2.3(2H，m，CH2)，2.5(2H，m，CH2)，3.0-3.5(2H，m，CH2)，4.5-4.8(2H，m，CH2)，5.1(1H，m，C02CH)，5.2(1H，dd，CH2C1JNC0)，5.5-5.9(1H，d，CONHC)，7.0-7.5(9H，m，Ar)。相應的羧酸通過以下過程獲得階段5:皂化將階段3的樹脂(1.0g，以1.14mmol/g加載)懸浮于MeOH(4ml)和THF(4ml)。加入NaOH(0.23g，5.7mmoI)的水(4ml)溶液。將混合物振蕩18小時。測試切除后的LCMS證實反應完全，m/z521[N^+H]+。將樹脂過濾并用水x2和MeOHx2洗滌，然后通過標準洗滌過程洗滌。樹脂在真空下干燥。階段6:0{[(!1)-2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-2,3,4,9-四氫-111-(3-咔啉-3-羰基]-氨基}-苯基-乙酸(2)階段5的樹脂(1.0g，以1.14mmol/g加載)用階段6所述方法切割得到化合物(2)，m/z521[M+十H]+;'HNMR(400麗z，CD3OD)，5:1.3-1.5(4H，2xCH2),1.6-1.8(4H，2xCH2)，2.1-2.2(2H，m，CH2)，2.4-2.7(2H，m，CH2)，3.0-3.2(1H，m)，3.5(1H，m)，4.55(m)，4.9(m)，5.1-5.35(2H，m)，(2H，m，CH2NCO)，5.75-5.8(1H，2xd，NHCgPh),7.0-7.5(9H，m，Ar)，7.6(d),7.7(d),8.35(d),8.95(s)，9.05(s)。以下化合物按照為化合物(1)和化合物(2)描述的方法制備(SH[(S)-2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-2，3，4，9-四氫-lH-P-咔啉-3-羰萄-氨基卜苯基-乙酸環(huán)戊酯(3)使用結(jié)構(gòu)單元BLCMS純度98。/。，m/z589[Nf+H]+，HNMR(400MHz，MeOD)，5:1.20-1.40(8H，m，4xCH2)，1.40-1.80(8H，m，4xCH2)，2.10(2H，m，CH2)，3.45(2H，m，CH2)，5.0(2H，m，(3112與020峰重疊)，5.25-5.45(2H，m，2xCH)，5.50(1H，s，CONHCgPh)，7.00-7.50(9H，m，Ar)。(SH[(S)-2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-2，3，4，9-四氫-lH-P-咔啉-3-羰基]-氨基)-苯基-乙酸(4)使用結(jié)構(gòu)單元BLCMS純度100%，m/z521[M^H]+，^NMR(400固z，MeOD)，51.30-1.50(4H,m，2xCH2)，1.55-1.80(4H，m，2xCH2)，2.15(2H，m，CH2)，2.60(2H，m，CH2)，3.00-3.25(2H，m，CH2)，3.40-3.55(2H，m，CH2)，5.20-5.30(1H，m，CHCON)，5.35(IH，s，NHCgPh)，7.05-7.50(9H，m，Ar)。(S)-2-U(R)-2-(7-羥基氨甲酰基-庚酰)-2，3，4，9-四氫-lH-p-咔啉-3-羰基-氨基)-3-苯基-丙酸乙酯(5)使用結(jié)構(gòu)單元ALCMS純度100%m/z563[Nf+H]+，iHNMR(400MHz，MeOD)，51.00(3H，t，CH3)，1.20-1.24(4H，m，2xCH2)，1.50-1.70(4H，m，2xCH2)，2.00(2H，m，CH2)，2.30-2.50(2H，m，CH2)，2.80-3.00(2H，m，CH2)，4.05(2H，q，C02CH2)，4.35-4.50(1H，m，CH)，4.80-5.05(2H，m,CH2)，5.40(1H，s，NHPhCO)，6.80-7.30(9H，m，Ar)。(S)-2-U(R)-2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-2，3，4，9-四氫-lH-P-咔啉-3-羰基-氨基H-苯基-丙酸(6)使用結(jié)構(gòu)單元ALCMS純度100%，m/z534[JVT+H]+，'HNMR(400MHz，MeOD)，51.30-1.50(4H，m，2xCH2)，1.60-1.80(4H,m，2xCH2)，2.15(2H，m，CH2)，2.50(2H，m，CH2)，3.00(2H，m，CH2)，3.20(2H，m，CH2)，4.30-4.80(2H，m，CH2)，5.15(1H，m，CH)，6.90-7.50(9H，m，Ar)。(S)-2-U(S)-2-(7-羥基氨甲酰基-庚酰)-2，3，4，9-四氫-lH-p-咔啉-3-羰基卜氨基)-3-苯基-丙酸乙酯(7)使用結(jié)構(gòu)單元BLCMS純度100%，m/z563[ivT+H]+，'HNMR(400MHz，MeOD)，S1.00(3H，t，CH3)，1.30-1.50(4H，m，2xCH2)，1.60-1.70(4H，m，2xCH2)，2.10(2H，m，CH2)，2.30-2.65(2H，m，CH2)，2.95-3.20(2H，m，CH2)，3.45(1H，m，CH)，4.05(2H，q，C02CH2)，4.35-4.50(1H，m，CH)，4.80-5.05(2H，m，CH2)，5.50(1H，s，麗PhCO)，6.90-7.50(9H，m，Ar)。(S)-2-U(S)-2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-2，3，4，9-四氫-lH-p-咔啉-3-羰基-氨基)-3-苯基-丙酸(8)使用結(jié)構(gòu)單元BLCMS純度100%，m/z534[M++H]+，&NMR(400MHz，MeOD)，51.30-1.50(4H，m，2xCH2)，1.60-1.80(4H，m，2xCH2)，2.15(2H，m，CH2)，2.50(2H，m，CH2)，2.95-3.15(2H，m，CH2)，3.20-3.50(2H，m，CH2)，4.30-4.50(2H，m，2xCH)，4.80-5.20(2H，m，CH2)，6.90-7.50(9H，m，Ar)。(SH[2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-2，3，4，9-四氫-lH-p-咔啉-l-羰基-氨基!-苯基-乙酸環(huán)戊酯(9)使用結(jié)構(gòu)單元CLCMS純度100%，m/z589[Nf+H]+，！HNMR(400MHz，CDC13)，S1.30-1.80(16H，m，8xCH2)，2.15(2H，m，CH2)，2.45-2.70(2H，m，CH2)，2.95(2H，m，CH2)，3.55(1H，m，CH)，4.35(1H，m，CH)，5.15(1H，m，C02CH)，5.45(1H，m，CH)，6.20(1H，d，PhCHNH)7.00-7.80(9H，m，Ar)，8.80-9.20(1H，寬峰m，CHNHOH)。(SH2-(7-羥基氨甲酰基-庚酰)-2，3，4，9-四氫-lH-p-咔啉-l-羰基-氨基)-苯基-乙酸(10)使用結(jié)構(gòu)單元cLCMS純度100%,m/z521[Nf+H]+，！HNMR(400MHz，MeOD)，51.30-1.50(4H，m，2xCH2)，1.60-1.80(4H,m，2xCH2)，2.15(2H，m，CH2)，2.50-2.65(2H，m，CH2)，2.95(2H，m，CH2)，3.70(1H，dd，CH)，4.30(1H，dd，CH)，5.50(1H，m，CH)，6.10禾口6.20(各0.5H，s，PhCiJNH)7.00-7.50(9H，m，Ar)。(SH[2-(7-羥基氨甲酰基-庚酰)-6-甲氧基-2,3，4，9-四氫-lH-p-咔啉-l-羰基-氨基卜苯基-乙酸環(huán)戊酯(ll)使用結(jié)構(gòu)單元DLCMS純度100%，m/z619[]Vr+H]+，'HNMR(400顧z，CDC13)，S1.30-1.80(16H，m，8xCH2)，2.15(2H，m，CH2)，2.50-2.65(2H，m，CH2)，2.85(2H，m，CH2)，3.70(1H，dd，CH)，3.80(3H，s，OMe)，4.30(1H，dd，CH)，5.20(1H，m，C02CH)，5.30-5.50(1H，m，CH)，6.15-6.20(1H，d，PhQiNH)6.80-7,80(8H，m，Ar)，8.80-9.00(1H，m，CONHOH)。(SH2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-6-甲氧基-2，3，4，9-四氫-lH-P-咔啉-l-羰基-氨基〉誦苯基-乙酸(12)使用結(jié)構(gòu)單元DLCMS純度1000/0，m/z551[M++H]+，'HNMR(400MHz，MeOD)，51.30-1.60(8H，m，4xCH2)，2.05(2H，m，CH2)，2.50-2.65(2H，m，CH2)，2.80(2H，m，CH2)，3.55(1H，dd，CH)，3.70(3H，s，OMe)，4.30(1H，dd，CH)，5.30-5.50(1H，m，CH)，5.90-6.10(各0.5H，s，PhCHNH)，6.65(1H，m，Ar)，6.80(1H，m，Ar)，7.10(1H，m，Ar)，7.35(5H，m，Ar)。(SH[2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-6-甲氧基-2，3，4，9-四氫-111-|}-咔啉-1-羰基-氨基}-苯基-乙酸環(huán)戊酯(13)使用結(jié)構(gòu)單元ELCMS純度95%，m/z579[M++H]+，'H畫R(400MHz，CDC13)，51.40-1.90(16H，m，8xCH2)，2.15(2H，m，CH2)，2.45(2H，m，CH2)，3.40(4H，m，2xCH2N),3.60-3.80(4H，m，2><CH2N)，5.30(1H，m，C02CH)，5.70(1H，d，PhQJNH)，6.90(2H，d，Ar)，7.30-7.50(6H，m，Ar)，7.80(2H，d，Ar)。(8)-{[2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-6-甲氧基-2，3，4，9-四氫-111爺咔啉-1-羰基-氨基}-苯基-乙酸(14)使用結(jié)構(gòu)單元ELCMS純度100%，m/z511[M^H]+，iHNMR(400固z，MeOD)，51.30(4H，m，2xCH2)，1.50(4H，m，2xCH2)，2.00(2H，t，CH2)，2.35(2H，t，CH2)，3.30(4H，m，2xCH2N)，3,70(4H，m，2xCH2N)，5.55(1H，s，PhQJNH)，6.90(2H，d，Ar)，7.30(3H，m，Ar)，7.40(2H，m，Ar)，7.70(2H，d，Ar)。(SH[2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-l，2，3，4-四氫-異喹啉-7-羰基-氨基)-苯基-乙酸環(huán)戊酯(15)使用結(jié)構(gòu)單元FLCMS純度100%，m/z550[]VT+H]+，iHNMR(400固z，CDC13)，S1.30-1.80(16H，m，8xCH2)，2.15(2H，m，CH2)，2.45(2H，m，CH2)，2,95(2H，m，2xCH2)，3.70-3.90(2H，m，2xCH2)，4.60-4.70(2H，m，CH2)，5.25(1H，m，C02CH)，5.70(IH，m，PhCHNH)，7.20-7.70(8H，m，Ar)。(SH[2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-l，2，3，4-四氫-異喹啉-7-羰基-氨基p苯基-乙酸(16)使用結(jié)構(gòu)單元FLCMS純度87%,m/z482[M++H]+，NMR(400固z，MeOD)，S1.30-1.50(4H，m，2xCH2)，1.60-1.70(4H，m，2xCH2)，2.15(2H，m，CH2)，2.50(2H，m，CH2)，2.95(2H，m，2xCH2)，3.70(2H，m，CH2)，4.80(2H，m，CH2)，5.70(1H，s，PhCMNH)，7.20-7.80(8H，m，Ar)。(SH4-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-苯甲酰氨萄-苯基-乙酸環(huán)戊酯(17)使用結(jié)構(gòu)單元GLCMS純度94%，m/z510[M^H]+，^畫R(400固z，MeOD)，51.30-1.80(16H，m，8xCH2)，2.00-2.20(4H，m，2><CH2)，5.10-5.30(1H，m，C02CH)，5.70(IH，m,PhCHNH)，7.30-7.80(9H，m，Ar)。(SH4-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-苯甲酰氨萄-苯基-乙酸(18)使用結(jié)構(gòu)單元GLCMS純度100%，m/z442[M++H]+，'HN證(400畫z，MeOD)，51.30-1.40(4H，m，2xCH2)，1.50-1.70(4H，m，2xCH2)，2.20(2H，t，CH2)，2.35(2H，t，CH2)，5.70(1H，s，PhCHNH)，7.25-7.40(3H，m，Ar)，7.50(2H，d，Ar)，7.65(2H，d，Ar)，7.80(2H，d，Ar)。(8)-{[(議)-2-(7-羥基氨甲酰基-庚酰)-2，3，4，9-四氫-111+咔啉-3-羰基1-氨基}-苯基-乙酸叔丁酯(19)使用結(jié)構(gòu)單元ALCMS純度100%，m/z577[M++H]+，！HNMR(400畫z，CDC13)，51.20-1.40(17H，m，4xCH2禾口C(CH3)3)，2.10(2H，m，CH2)，2.45(2H，m，CH2)，3.15-3.60(2H，m，CH2)，4.75(2H，m，CH2)，5.35(2H，m，PhCHNH和CH)，6.90-7.50(9H，m，Ar)o合成化合物(20)和化合物(21)20階段l:(S)-(4-硝基-芐基氨基)-苯基-乙酸環(huán)戊酯,0、'21將DMF(250ml)中的4-硝基芐基溴化物(15g，69.4mmo1)、L-苯基甘氨酸環(huán)戊酯甲苯磺酸鹽(27.1g，60.4mmol)和碳酸鉀(19.6g，138.8mmol)的混合物室溫攪拌18小時。反應混合物用EtOAc(300ml)稀釋并用水(3x200ml)洗滌。將EtOAc層分離，干燥(Na2S04)，過濾并濃縮至干得到橙色油狀物。分離出21克粗產(chǎn)物。LCMS純度81%,m/z355[M++H;T。該產(chǎn)物無需進一步純化即可使用。階段2:(S)-[叔丁氧基羰基-(4-硝基-節(jié)基)-氨基]-苯基-乙酸環(huán)戊酯,0、=在階段1的產(chǎn)物(15g，42.37mmol)的THF(150ml)溶液中加入K2C03(6.9g，50.8mmo1)，然后加入二碳酸二叔丁酯(22.2g，101.7mmo1)。加入水(150ml)并將反應物室溫攪拌36小時。將反應混合物蒸發(fā)至干。將殘余物重溶于EtOAc(300ml)，用0.1MHC1(150ml)、飽和NaHC03水溶液和水(150ml)依次洗滌。將EtOAc層干燥(Na2S04)，過濾并濃縮至干得到黃色油狀物。通過柱層析(10。/。EtOAc/己垸)純化后獲得澄清的黃色油狀產(chǎn)物(12g，62%產(chǎn)率)。LCMS純度95%，m/z455[]Vf+H]+，496[M^H+41]+。階段3:(S)-[(4-氨基-芐基)-叔丁氧基羰基-氨基]-苯基-乙酸環(huán)戊酯.0、將EtOAc(350ml)中的階段2的產(chǎn)物(12g，26.4mmol)和10%Pd/C(2.0g)的混合物在室溫下氫化18小時。通過硅藻土墊濾去Pd/C催化劑。將濾液減壓濃縮以得到白色固體(10.1g，90%產(chǎn)率)。LCMS純度1000/。，m/z425[1VT+H]+，466[!VT+H+41]+。階段4:偶聯(lián)階段3的苯胺將用辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(1.0g，以0.94mmol/g加載)在無水DCM(100ml)中溶脹。0。C時在氮氣下加入l-氯-A^-2-三甲基丙烯胺(Ghosez試劑)1(0.373ml，2.82mmo1，3叫)。使混合物回復室溫并溫和振蕩1-2小時。在20分鐘內(nèi)分批加入階段3的苯胺(1.2g，2.82mmo1，3叫)。加入Et3N(0.53ml，3.76mmo1，4eq)。將混合物振蕩l小時。測試切除后的LCMS顯示有70。/。轉(zhuǎn)化，m/z596[]Vr+H]+。將樹脂過濾，并用標準洗滌過程洗滌。真空干燥樹脂。階段5:(S)-[4-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-芐基氨基]-苯基-乙酸環(huán)戊酯(20)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage55</formula>將階段4的樹脂(1.5g，以0.94mmol/g加載)在2%TFA/DCM(10ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。收集濾液并在室溫下減壓蒸發(fā)。樹脂用2%TFA/DCM(10ml)重新處理，20分鐘后過濾。合并的濾液在室溫下減壓蒸發(fā)至干以得到殘余物。使該殘余物在20。/。TFA/DCM中靜置40分鐘。再在室溫下減壓蒸發(fā)至干后，殘余物通過制備型HPLC純化以得到化合物(20)，其為TFA鹽，LCMS純度95%，m/z496[M^+H]+，'HNMR(400固z，DMSO)，S:1.30-1.50(6H，m，3xCH2)，1.50-1.70(8H，m，4xCH2)，1.80(2H，m，CH2)，2.10(2H，t，CH2)，2.45(2H，t，CH2)，4.1(2H，dd，賜NH)，5.25(1H，m，C即CO)，5.35(1H，m，OCOC^Ph),7.45(2H，d，Ar)，7.60(5H，m，Ar)，7.80(2H，d，Ar)，10.00-10.10(2H，brs)，10.50(1H，s)。階段6:環(huán)戊酯的皂化將階段4的樹脂(2.5g，以0.94mmol/g加載，2.35mmol)懸浮于MeOH(8.7ml)和THF(8.7ml)。加入2.7NNaOH水溶液(8.8ml，10eq，23.5mmo1)。將混合物振蕩36小時。測試切除后的LCMS證實反應完全，m/z528[Nf+H]+。將樹脂過濾并用水x2和MeOHx2洗滌，然后通過標準洗滌過程洗滌。真空干燥樹脂。階段7:(S)-[4-(7-羥基氨甲酰基-庚酰氨基)-芐基氨基]-苯基-乙酸(21)將階段6的樹脂(2.5g，以0.94mmol/g加載，2.35mmol)切除并用階段5中列出的過程進行boc去保護。粗產(chǎn)物(0.40g)通過制備型HPLC純化得到化合物(21)，其為TFA鹽。LCMS純度100。/。，m/z428[W+H]，NMR(400MHz，CD3OD)，5:1.30(4H，2xCH2)，1.55(4H，2xCH2)，2.00(2H，t，CH2)，2.30(2H，t，CH2)，3.90(1H，s，NHCH2)，4.05(2H，dd，NHQ^),4.95(1H，s，CgPh)，7.35(2H，d，Ar)，7.40(5H,m，Ar)，7.55(2H，d，Ar)。合成化合物(22)和化合物(23)(TC下，在L-苯基甘氨酸(0.227g，1.5mmol)的水(5ml)和二嚼烷(5ml)溶液中加入三乙胺(0.42ml，3.0mmol)，然后緩慢加入4-硝基苯磺酰氯(0.5g，2.3mmol)的二噁烷(5ml)溶液。攪拌45分鐘后將反應混合物蒸發(fā)至干，重溶于EtOAc并用飽和NaHC03階段l(S)-(4-硝基-苯磺?；被?-苯基-乙酸溶液(2x20ml)和水(10ml)洗滌。EtOAc層用Na2S04干燥，過濾并蒸發(fā)至干。LCMS純度75%，(未觀察到分子離子)產(chǎn)量為0.58g，(76%)。該材料無需任何純化即可使用。階段2:(S)-(4-硝基-苯磺?；被?-苯基-乙酸環(huán)戊酯(TC時在階段1的酸(4.32g，12.8mmol)的環(huán)戊醇(60ml)溶液中緩慢加入亞硫酰氯(9.3ml，128mmo1)。攪拌反應混合物并在7(TC加熱回流2小時。在真空下蒸發(fā)除去過量亞硫酰氯，將反應混合物萃入EtOAc，用飽和NaHC03溶液洗滌并用Na2S04干燥，過濾并蒸發(fā)至干。用DCM進行快速柱層析純化得到所需產(chǎn)物(3.6g，70%產(chǎn)率)。LCMS純度為100%，(未觀察到分子離子)。階段3:(S)-(4-氨基-苯磺?；被?-苯基-乙酸環(huán)戊酯室溫下，將EtOAc(350ml)中的(S)-(4-硝基-苯磺?；被?-苯基-乙酸環(huán)戊酯(5.29g，13.1mmol)和10%Pd/C(5.0g)的混合物在氣球壓力(balloonpressure)下氫化24小時。通過硅藻土墊濾去Pd/C催化劑。將濾液減壓濃縮以得到所需產(chǎn)物(4.54g，92%產(chǎn)率)。LCMS純度100%，m/z375[1VT+H]+。階段4:偶聯(lián)苯胺(anline)將用辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(0.39g，以1.14mmol/g加載)在無水DCM(25ml)中溶脹，并于O'C在氮氣下逐滴加入l-氯-WM2-三甲基丙烯胺(0.175ml，1.33mmo1)。將(25ml)溶液，然后加入三乙胺(0.251111，1.76mmo1)。將反應混合物再振蕩10分鐘。測試切除后的LCMS顯示61。/。轉(zhuǎn)化，m/z546[1Vr+H]+。將樹脂過濾，并用標準洗滌過程洗滌。樹脂在真空下干燥并用于下一步驟。階段5:(S)-[4-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-苯磺?；碧?苯基-乙酸環(huán)戊酯(22)將階段4的樹脂(1.12g，以1.14mmol/g加載)在2%TFA/DCM(10ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。收集濾液并在室溫下減壓蒸發(fā)。樹脂用2%TFA/DCM(10ml)重新處理，20分鐘后過濾。合并的濾液在室溫下減壓蒸發(fā)至干以得到殘余物。殘余物通過制備型HPLC純化以得到化合物(22)。LCMS純度93%，m/z546[M++H]+，&NMR(400MHz，DMSO)，5:1.20-1.68(16H，m，8><CH2)，1.93(2H，t，CH2)，2.33(2H，t，CH2)，4.80(1H，m，C邸CO)，4.81(1H，d，OCOCgPh)，7.27(5H，m，Ar)，7.65(2H，d，Ar)，7.71(2H，d，Ar)，8.67(1H，brs)，8.75(1H，d)，10.24(1H，s)，10.34(1H，s)。階段6:環(huán)戊酯的皂化將階段4的樹脂(1.2g，以1.14mmol/g加載)懸浮于THF(8ml)和甲醇(8ml)并加入2.7M氫氧化鈉(5.1ml，13.68mmo1)。將混合物振蕩48小時。測試切除后的LCMS證實反應完全，m/z478[NT+H]+。將樹脂過濾并用水x2和MeOHx2洗滌，然后通過標準洗滌過程洗滌。真空干燥樹脂。階段7:(S)-[4-(7-羥基氨甲酰基-庚酰氨基)-苯磺?；被鵠-苯基-乙酸(23)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage59</formula>將階段6的樹脂(1.2g，以1.14mmol/g加載)在2%TFA/DCM(10ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。收集濾液并在室溫下減壓蒸發(fā)。樹脂用2%TFA/DCM(10ml)重新處理，20分鐘后過濾。合并的濾液在室溫下減壓蒸發(fā)至干以得到殘余物。殘余物通過制備型HPLC純化以得到化合物(23)。LCMS純度91。/。，m/z478[1Vr+H]+，&NMR(400顧z，MeOD)，S:1.44(4H，m，2xCH2)，1.62-1.74(4H，m，2xCH2)，2.12(2H，t，CH2)，2.34(1H，m，OCOCgPh)，2.41(2H，t，CH2)，7.25(5H，m，Ar)，7.69(2H，d，Ar)，7.72(2H，d，Ar)。合成化合物(24)和化合物(25)(<formula>formulaseeoriginaldocumentpage59</formula>階段1:(2,3，4,9-四氫-lH-(3-咔啉-6-基氧基)-乙酸甲酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage59</formula>將5-羧基甲氧基色胺(1.248，4.56mmol)、36%甲醛水溶液和MeOH(25ml)的混合物加熱回流1.5小時。將反應混合物蒸發(fā)至干。依次加入MeOH(50ml)和TMSC1(1.24ml)。繼續(xù)回流l小時。將反應混合物蒸發(fā)至干并不經(jīng)純化用于下面的階段。階段2:酰胺化MeO將用辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(2.0g，以1.14mmol/g加載，2.28mmo1)懸浮于DCM(40ml)。加入pyBOP(3.56g)，然后加入階段1的胺(4.56mmol)的DCM溶液(40ml)和DIPEA(3.9ml，22.8mmol)。將反應物室溫振蕩18小時。測試切除后的LCMS證實反應完全。將樹脂過濾，用標準洗滌過程洗滌并充分干燥。階段3:甲酯的皂化o將階段2的樹脂(2.0g，1.14mmol/g，2.28mmol)懸浮于THF(10ml)和MeOH(10ml)的混合物。在5分鐘內(nèi)加入1.4MNaOH(10ml)。將混合物振蕩18小時。測試切除后的LCMS證實反應完全。將樹脂過濾，并用標準洗滌過程洗滌。階段4:與L-苯基甘氨酸環(huán)戊酯偶聯(lián)將階段3的樹脂(2.0g，以1.14mmol/g加載，2.28mmol)懸浮于DCM(30ml)。加入pyBOP(3.56g，6.84mmo1)，然后加入L-苯基甘氨酸環(huán)戊酯(2.59g，6.84mmol)和DIPEA(3.9ml，22.8mmo1)。將混合物振蕩18小時。測試切除后的LCMS證實反應完全。將樹脂過濾，用標準洗滌過程洗滌并真空干燥。階段5:(SH2-[2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-2,3，4,9-四氫-lH-(3-咔啉-6-基氧基]-乙酰氨基}-苯基-乙酸環(huán)戊酯(24)用2%TFA/DCM(3xl0ml)切除階段4的樹脂(0.8g，以1.14mmol/g加載，0.91mmo1)。濾液在室溫下減壓蒸發(fā)至干以得到油狀殘余物(200mg)，該物質(zhì)通過制備型HPLC純化以得到化合物(24)，其為TFA鹽。LCMS純度95%，m/z619[JVT+H]+，!HNMR(400匿z，固SO)，S:1.05-1.66(16H，m，8xCH2)，1Z79(2H，m，CH2)，2.16-2.31(2H，m，2.41-2.56(2H，m，CH2)，3.60(2H，m，CH2)，4.42(2H，s，CH2)，4.49(2H，s，CH2)，4,93(1H，m，QJOCO)，5.28(1H，m，OCOCgPh)，6.59(1H，d，Ar)，6.65(1H，s，Ar)，7.04(1H，d，Ar)，7.21(5H，m，Ar)，8.57(1H，m)，10.17(1H，s)，10.58(1H，s，Ar)。階段6:環(huán)戊酯的皂化階段4的樹脂(1.0g，以1.14mmol/g加載，1.14mmol)按照階段3中描述的過程皂化。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage61</formula>階段7:(SH2-[2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-2，3，4,9-四氫-m-l3-咔啉-6-基氧基]-乙酰氨基}-苯基-乙酸環(huán)戊酯(25)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage61</formula>將階段6的樹脂(1.0g，以1.14mmol/g加載，1.14mmol)切除并用階段5中詳細描述的過程純化?；衔?25):LCMS純度97。/。，m/z551[M""+H]+，NMR(400MHz，MeOD)，S:1.33-1.49(4H，m，2xCH2)，1.58-1.75(4H，m，2xCH2)，2.06-2.17(2H，m，CH2)，2.51-2.60(2H，m，CH2)，2.70-2.83(2H，m，CH2)，3.85-3.96(2H，m，CH2)，4.61(2H，m，CH2)，4.78(2H，m，CH2)，5.56(1H，s，OCOCgPh)，6.89(1H，m，Ar)，7.00(1H，s，Ar)，7.26(1H，m，Ar)，7.35(5H，m，Ar)。合成圖2的化合物，以化合物(26)和化合物(27)為例<formula>formulaseeoriginaldocumentpage61</formula>R=乙基26R=乙基29R-H27R-H30合成化合物(26)和化合物(27)階段1:(S)-2-(3-硝基-芐基氨基)-3-苯基-丙酸乙酯將3-硝基芐基溴化物(10.0g，46mmol)溶于DMF(180ml)并加入碳酸鉀(12.7g，92mmol)和L-苯丙氨酸乙酯鹽酸(10.6g，46mmo1)。將反應物室溫攪拌17小時，然后蒸發(fā)至干。將殘余物重溶于EtOAc(150ml)，并用水(3x80ml)洗滌，干燥(^2804)，過濾并濃縮至干。通過快速柱層析(30。/。EtOAc/己垸)純化后獲得產(chǎn)物(3.7g，24%產(chǎn)率)。LCMS純度86%,m/z329[1Vf+H]+。階段2:(S)-2-[叔丁氧基羰基-(3-硝基-芐基)-氨基]-3-苯基-丙酸乙酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage62</formula>將階段1的胺(13.4g，40.9mmol)溶于THF(250ml)，然后加入碳酸鉀(8.46g，61.4mmol)和水(150ml)。加入二碳酸二叔丁酯(35.6.163mmol)并將反應混合物在50°C加熱18小時。在所得混合物中加入DCM，用0.1MHC1(150ml)、飽和NaHC03水溶液和水(150ml)連續(xù)洗滌。將DCM層干燥(Na2S04)，過濾并濃縮至干。通過快速柱層析(5%EtOAc/己垸)純化后將產(chǎn)物分離(9.4g，54。/。產(chǎn)率)。LCMS純度95%，m/z428[M++H]+。階段3:(S)-2-[(3-氨基-節(jié)萄-叔丁氧基羰基-氨基]-3-苯基-丙酸乙酯將階段2的氨基甲酸酯(4.92g，11.5mmol)溶于EtOAc(150ml)，然后加入Pd/C(100/0濕(wet))催化劑(0.8g)并于室溫在氣球壓力下氫化18小時。將反應混合物通過硅藻土墊過濾并蒸發(fā)至干以得到紅色固體(4.0g，89%產(chǎn)率)。LCMS純度100%，m/z399[M++H]+。階段4:偶聯(lián)到樹脂將用辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(0.39g，以0.83mmol/g加載)在DMF(15ml)中溶脹并加入PyBOP(1.36g，2.61mmo1)，接著加入DIPEA(1.5ml，8.7mmo1)。將階段3的苯胺(1.04g，2.61mmol)溶于DCM(15ml)并加到反應混合物中。將反應物室溫振蕩24小時。測試切除后的LCMS顯示86%轉(zhuǎn)化，m/z570[M++H]+。將樹脂過濾，并用標準洗滌過程洗滌。真空干燥樹脂。階段5:(S)-2-[3-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-芐基氨基]-3-苯基-丙酸乙酯(26)階段4的樹脂(1.3g，以0.83mmol/g加載)在2%TFA/DCM(10ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。濾液在室溫下減壓蒸發(fā)。樹脂用2。/。TFA/DCM(10ml)重新處理，20分鐘后過濾。合并的濾液在室溫下減壓蒸發(fā)至干以得到油狀殘余物。使殘余物在20%TFA/DCM中靜置40分鐘。同樣在室溫下減壓蒸發(fā)至干后，將粗產(chǎn)物通過制備型HPLC純化以得到化合物(26)。LCMS純度100%，m/z470[M^H]+，iHNMR(400固z，MeOD)，5:1.08(3H，t，CH3)，1.35-1,45(4H，m，2xCH2)，1.60-1.80(4H，m，2xCH2)，2.10(2H，t，CH2)，2.40(2H，t，CH2)，3.13(1H，dd，PhCgH)，3.40(1H，dd，PhC昭)，4.11(2H，q，C壓CH3)，4.14-4.22(3H，m)，7.20-7.48(8H，m，Ar)，7.92(1H，s，Ar)。階段6:皂化將階段4的樹脂(1.4g，以0.83mmol/g加載)懸浮于THF(8.6ml)和甲醇(8.6ml)并加入1.4M氫氧化鈉溶液(8.6ml，5.98mmo1)。將混合物振蕩24小時，然后測試切除顯示83%轉(zhuǎn)化成所需的酸，m/z541[IVf+H]將樹脂過濾并用水x2和MeOHx2洗滌，然后通過標準洗滌過程洗滌。真空干燥樹脂。階段7:(S)-2-[3-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-芐基氨基]-3-苯基-丙酸(27)將階段6的樹脂(1.44g，以0.83mmol/g加載)在2%TFA/DCM(10ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。濾液在室溫下減壓蒸發(fā)。樹脂用2%TFA/DCM(10ml)重新處理，20分鐘后過濾。合并的濾液在室溫下減壓蒸發(fā)至干以得到油狀殘余物。使殘余物在20。/。TFA/DCM中靜置40分鐘。在室溫下減壓蒸發(fā)至干后，將粗產(chǎn)物通過制備型HPLC純化以得到化合物(27)。LCMS純度100%，m/z442[VT+H]+，^NMR(400顧z，MeOD)，S:1.35-1.48(4H，m，2><CH2)，1.60-1.78(4H，m，2xCH2)，2.10(2H，t，CH2)，2.40(2H，t，CH2)，3.20(1H，dd，PhC邸)，3.28(1H，dd，PhCHg),3.90(1H，t，OCOCg)，4.14(2H，m)，7.15(1H，d，Ar)，7.26(6H，m，Ar)，7.51(1H，d，Ar)，7.73(lHs，Ar)。以下化合物按照為化合物(26)和化合物(27)描述的方法制備(S)-2-[3-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-芐基氨基卜3-苯基-丙酸環(huán)戊酯(28)LCMS純度100%，m/z510[M++H]+，!HNMR(400薩z，MeOD)，S:1.00-1.61(16H，m，8xCH2)，1.90(2H，t，CH2)，2.20(2H，d，CH2)，2.90(1H，dd，PhC昭)，3.20(1H，dd，PhCHH)，4.00-4.11(3H，m)，4.91(1H，m)，7.00-7.25(8H，m,Ar)，7.75(1H，s，Ar)。(S)-2-[3-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨萄-節(jié)基氨基卜4-苯基-丁酸乙酯(29)LCMS純度100%,m/z484pvT+H]+，'HNMR(400固z，MeOD)，S:1.23-1.29(7H，m，CH3，2xCH2)，1.53(2H，t,CH2)，1.62(2H，t，CH2)，1.99(2H，t，CH2)，2.11-2.16(2H，m，CH2)，2.28(2H，t，CH2)，2.53-2.61(1H，m，CH)，2.65-2.76(1H，m，CH)，3.80-3.90，(1H，m，CHC02Et),4.05(2H，s，CH2)，4.21(2H，q，CH2)，7.05-7.15(4H，m，Ar)，7.15-7.22(2H，m，Ar)，7.25-7.39(2H，m，Ar)，7.75(1H，s，Ar)。(S)-2-[3-(7-羥基氨甲酰基-庚酰氨基)-節(jié)基氨基-4-苯基-丁酸(30)LCMS純度100%,m/z456[M++H]+，'HNMR(400MHz，MeOD)，5:1.27-1.32(4H，m，2xCH2)，1.53(2H，t，CH2)，1.62(2H，t，CH2)，1.99(2H，t，CH2)，2.11-2.16(2H，m，CH2)，2.29(2H，t，CH2)，2.57-2.64(1H，m，CH)，2.69-2.77(1H，m，CH)，3.84-3.87(1H，m，CHC02H)，4.12(2H，q，CH2)，7.09-7.11(4H，m，Ar)，7.16-7.20(2H，m，Ar)，7.27-7.35(2H，m，Ar)，7.78(1H，s，Ar)。(S)-2-[3-(7-羥基氨甲酰基-庚酰氨萄-節(jié)基氨萄-4-苯基-丁酸環(huán)戊酯(31)LCMS純度100%，m/z524[Nf+H]+，'HNMR(400函z，MeOD)，S:1.20-1.35(4H，m)，1.45-1.62(10H，m)，1.85(2H，m)，2.00(2H，t，CH2)，2.10(2H，m)，2.28(2H，t，CH2)，2.55(1H，m)，2.68(1H，m)，3.88(1H，t，OCOC^NH),4.11(2H，s，CH2Ph)，5.24(1H，m)7.02-7.12(4H，m，Ar)，7.18(2H，m，Ar)，7.30(2H，m，Ar)，7.80(1H，s，Ar)。(S)-3-叔丁氧基-2-[3-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-芐基氨萄-丙酸乙酯(32)LCMS純度90%，m/z466[IVT+Hf,!HNMR(400MHz，MeOD)，S:1.25(9H，s，C(CH3)3)，1.35(3H，t，CH2Qi3)，1.35-1.45(4H，m，2xCH2)，1.62-1.76(4H，m，2xCH2)，2.12(2H，t,CH2)，2.40(2H，t，CH2)，3.89(1H，m)，3.98(1H，m)，4.20-4.40(5H，m)，7.25(1H，d，Ar)，7.39-7.50(2H，m，Ar)，7.90(1H，s，Ar)。(S)-3-叔丁氧基-2-[3-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-節(jié)基氨萄-丙酸(33)LCMS純度86%，m/z438CVT+H]+，！HNMR(400固z，MeOD)，5:1.20(9H，s，C(CH3)3)，1.38(4H，m，2xCH2)，1.57-1.75(4H，m，2xCH2)，2.10(2H，t，CH2)，2.39(2H，t，CH2)，3.78-3.85(3H，m)，4.26(2H，s，CH2Ph)，7.21(1H，d，Ar)，7.39(1H，t，Ar)，7.50(1H，d，Ar)，7.80(1H，s，Ar)。(S)-3-叔丁氧基-2-[3-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-節(jié)基氨萄-丙酸環(huán)戊酯(34)LCMS純度94%，m/z506[VT+H]+，HNMR(400MHz,MeOD)，S:1.25(9H，s'C(C潟3)，1.33-1.50(4H，m，2><CH2)，1.60-2.00(12H，m)，2.13(2H，t，CH2)，2.42(2H，t，CH2)，3.83-4.00(2H，m)，4.18(1H，m)，4.28(2H，s，CH2Ph)，5,35(1H，m)，7.25(1H，m，Ar)，7.45(2H，m，Ar)，7.卯(1H，s，Ar)。(S)-3-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-芐基氨基-苯基-乙酸叔丁酯(35)LCMS純度97%，m/z484[M^H]+，！H雨R(400畫z，MeOD)，5:1.30(13H，m，2xCH2，C(Qi3)3)，1.45-1.65(4H，m，CH2x2)，1.93-2.05(2H，m，CH2)，2.20-2.40(2H，m，CH2)，3,99(2H，q，CH2)，4.65-4.95(1H，m，CH，掩蔽的信號)7.05(1H，d，Ar)，7.25-7.33(2H，m，Ar)，7.35-7.50(5H，m，Ar)，7.75(1H，s，Ar)。(SH3-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-節(jié)基氨萄-苯基-乙酸環(huán)戊酯(36)LCMS純度100%，m/z496[]VT+H]+，^NMR(400畫z，MeOD)，5:1.30-1.70(16H，m，8xCH2)，2.00(2H，t，CH2)，2.30(2H，t，CH2)，4.05(2H，dd，Q^NH),5.00(1H，m，OCOCHPh)，5.15(1H，m，CgOCO)，7.05(1H，m，Ar)，7.30(2H，m，Ar)，7.40(5H，m，Ar)，7.75(1H，m，Ar)。(S)-3-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-芐基氨基-苯基-乙酸(37)LCMS純度100%，m/z428[MVH]+，'HNMR(400MHz,MeOD)，S:1.20-1.35(4H，m，2xCH2)，1.50-1.65(4H，m，2xCH2)，2.00(2H,m，CH2)，2.30(2H，m，CH2)，4.00(2H，dd，CH^NH),4.卯(1H，m，OCOCHPh)，7.05(1H，m，Ar)，7.25-7.50(7H，m，Ar)，7.70(1H，m，Ar)。(S)-2-[3-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-芐基氨基]-4-甲基-戊酸(38)LCMS純度91。/。，m/z408[M^+H]+，'HNMR(400MHz，MeOD)，S:0.78(3H，d，J=6.6Hz，CH3)，0.84Hz(3H，d，J=6.6Hz,CH3)，1.26-1.40(6H，m，烷基)，1.49-1.70(5H，m，CH+2xCH2)，1.95(2H，t，J=7.32，CH2)，2.25(2H，t，J=7.36，CH2)，3.00(1H，t，J=6.88Hz，NHCgCO),3.42(1H，d，J=12.7Hz，CH)，3.68(1H，d,J=12.5Hz，CH),7.00(1H,d，J=7.6Hz，Ar)，7.15(1H，t，J=7.8Hz，Ar)，7.30(1H，s.Ar)，7.47(1H，brd，Ar)(S)-2-[M7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-節(jié)基氨基-4-甲基-戊酸環(huán)戊酯(39)LCMS純度100。/。，m/z476[M""+H]+，'HNMR(400固z，MeOD)，5:0.85-0.95(6H，2xd，2xCH3)，1.30(4H，m，2xCH2)，1.50-1.70(13H，m，烷基)，1.75(2H，m，CH2)，2.00(2H，t，CH2)，2.30(2H，t，CH2)，3.90(1H，NHCgCO)，4.10(2H，q，CH2)，5.25，(1H，m，CH)，7.10(1H，d，Ar)，7.30(2H，m)，7.80(1H，s，Ar)合成化合物(40)和化合物(41)4041階段l:(S)-(2-硝基-芐基氨基)-苯基-乙酸環(huán)戊酯將DMF(300ml)中的2-硝基芐基溴化物(15g，69.4rnrno1)、L-苯基甘氨酸環(huán)戊酯甲苯磺酸鹽(27.2g，69.4!!111101)和碳酸鉀(19.2§，138.8mmol)的混合物室溫攪拌18小時。反應混合物用EtOAc(300ml)稀釋并用水(3x200ml)洗滌。將EtOAc層分離，干燥(Na2S04)，過濾并濃縮至干得到橙色油狀物。分離出24克粗產(chǎn)物。LCMS純度81。/t)，m/z355[M"+H]+。該產(chǎn)物無需進一步純化即可使用階段2:(SH叔丁氧基羰基-(2-硝基-節(jié)基)-氨基]-苯基-乙酸環(huán)戊酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage68</formula>在(S)-(2-硝基-芐基氨基)-苯基-乙酸環(huán)戊酯(24.4g，69.1mmol)的THF(150ml)溶液中加入K2C03(7.6g，69.1mmo1)，然后加入二碳酸二叔丁酯(30.1g，138.1mmo1)。加水(150ml)，再加入二碳酸二叔丁酯(45.1g，206.6mmo1)，并將反應物室溫攪拌8天。將反應混合物蒸發(fā)至干。殘余物重溶于EtOAc(300ml)，用0.1MHC1(150ml)、飽和NaHC03水溶液和水(150ml)洗滌。將EtOAc層干燥(Na2S04)，過濾并濃縮至干得到黃色油狀物。通過柱層析(20%EtOAc/己垸)純化后獲得澄清的黃色油狀產(chǎn)物(15g，48%產(chǎn)率)?！付?:(S)-[(2-氨基-芐基)-叔丁氧基羰基-氨基]-苯基-乙酸環(huán)戊酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage68</formula>室溫下，將EtOAc(130ml)中的階段2的氨基甲酸酯(4.44g，9.78mmol)和10%Pd/C(0.7g)的混合物在氣球壓力下氫化18小時。通過硅藻土墊濾去Pd/C催化劑。將濾液減壓濃縮以得到白色固體(4.25g)。LCMS純度100。/。，m/z425[M^H]+，階段4:偶聯(lián)階段3的苯胺<formula>formulaseeoriginaldocumentpage68</formula>將用辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(1.6g，以0.83mmol/g加載)在無水DCM(100ml)中溶脹。(TC在氮氣下加入l-氯-A^-2-三甲基丙烯胺(Ghosez試劑)1(0.56ml，3.3mmo1，3eq)。使混合物回復室溫并溫和振蕩1-2小時。在20分鐘內(nèi)分批加入階段3的苯胺(1.4g，3.3mmo1，3叫)。加入Et3N(0.76ml，4.4mmo1，4eq)。將混合物振蕩1小時。測試切除后的LCMS顯示有97n/。轉(zhuǎn)化，m/z596[M++H]+。將樹脂過濾，并用標準洗滌過程洗滌。真空干燥樹脂。_1.Ghosez等，J.C,S.Chem.Comm.,1979，1180。階段5:(S)-[2-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-芐基氨基]-苯基-乙酸環(huán)戊酯(40)將階段4的樹脂(1.34g，以0.83mmol/g加載)在2°/。TFA/DCM(10ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。收集濾液并在室溫下減壓蒸發(fā)。樹脂用2%TFA/DCM(10ml)重新處理，20分鐘后過濾。合并的濾液在室溫下減壓蒸發(fā)至干以得到殘余物。使殘余物在20。/。TFA/DCM中靜置40分鐘。同樣在室溫下減壓蒸發(fā)至干后，將粗產(chǎn)物通過制備型HPLC純化以得到化合物40，其為TFA鹽，LCMS純度100%，m/z496[M十+H]+，'HNMR(400MHz，MeOD)，S:1.40-2.00(16H，m,8xCH2)，2.15(2H,m，CH2)，2.45(2H，m，CH2)，3.95(1H，d，Qj^NH),4.20(1H，d，CH^NH)'5.20(1H，m，OCOCHPh)，5.35(1H，m，CgOCO),7.25(1H，m，Ar)，7.40(1H，m，Ar)，7.50-7.60(7H，m，Ar)。階段6:皂化將階段4的樹脂(2.0g，以0.83mmol/g加載，2.35mmol)懸浮于MeOH(6.1)和THF(6.1ml)。加入2.7NNaOH(水溶液，6.1ml)。將混合物振蕩5天。測試切除后的LCMS證實反應完全，m/z528[MT+H]+。將樹脂過濾并用水x2和MeOHx2洗滌，然后通過標準洗滌過程洗滌。真空干燥樹脂。階段7:(S)-[2-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-節(jié)基氨蜀-苯基-乙酸化合物(41)將階段6的樹脂(2.0g，以0.83mmol/g加載)切除并用階段5中列出的方法進行boc去保護。粗產(chǎn)物通過制備型HPLC純化得到化合物(41)，其為TFA鹽。LCMS純度98%，m/z428[M++H]+，'HNMR(400固z，MeOD)，5:1.25-1.35(4H，m，2xCH2)，1.50-1.65(4H，m，2xCH2)，2.00(2H，m，CH2)，2.30(2H，m，CH2),3.80(1H，d，C1^NH)，4.10(1H，d，Q^NH)，5.00(1H，m，OCOCgPh)，7.10(1H，m，Ar)，7.30(1H，m，Ar)，7.40-7.50(7H，m，Ar)。合成化合物(42)和化合物(43)階段1:1,3，4,9-四氫-P-咔啉-l，2-二羧酸2-芐基酯將1，2,3,4-四氫咔啉-l-羧酸(5g，23.1mmol)在二噁垸(25ml)和2MNaOH(23ml，46mmol)中的溶液冷卻至0'C。緩慢加入氯甲酸芐酯(3.95ml，27mmo1)。室溫攪拌1小時后再加入氯甲酸芐酯(1.4ml，9.5mmo1)。2.5小時后用醚洗滌反應混合物。將含水層酸化至pH2并用DCM萃取，干燥(MgS04)，過濾并蒸發(fā)至干，得到第一批黃色固體，其LCMS純度為79。/。，m/z351[!VT+H]+。最初的一批無需進一步純化即可使用。將醚層濃縮后獲得第二批材料從而得到進一步的粗產(chǎn)物。該粗材料通過快速層析純化，用DCM到20%2M甲醇NH3、80%DCM洗脫，得到進一步的Cbz-保護的化合物(產(chǎn)率49。/。)，其LCMS純度為82。/。，m/z351[Nf+H]+。階段2:1-(甲氧基-甲基-氨甲?；?-1,3,4,9-四氫-P-咔啉-2-羧酸芐基酯^^^^N-cbzHO6—將1,3,4,9-四氫-(3-咔啉-1,2-二羧酸2-芐基酯(3g，8.4mmol)溶于無水DCM(30ml)并加入三乙胺(5.22ml，37.8mmo1)。在此溶液中加入HOBt(2.848g，21.4mmol)、EDCI(4.08g，21.4mmol)和N，O-二甲基羥胺鹽酸鹽(1.86g，19丄mmo1)。室溫攪拌2小時后將反應混合物蒸發(fā)至干，重溶于EtOAc并用飽和NaHC03溶液(2x100ml)和水(50ml)洗滌。將EtOAc層干燥(Na2S04)，過濾并蒸發(fā)至干。通過柱層析純化，用DCM到3。/o甲醇/DCM洗脫，得到所需的Weinreb酰胺(產(chǎn)率40%)。LCMS純度85%，m/z394[VT+H]+。階段3:l-甲酰-l,3,4,9-四氫-P-咔啉-2-羧酸芐基酯氮氣下將1,3,4,9-四氫-卩-咔啉-l,2-二羧酸2-芐基酯(3.7mg，9.4mmol)的THF(100ml)溶液冷卻至-78"C。在2小時內(nèi)加入1.5MDIBAL的甲苯溶液(31.2ml，47mmo1)。攪拌4小時后用甲醇和水淬滅反應混合物，萃入EtOAc并用稀HCl水溶液洗滌。有機層用Na2S04干燥，過濾并蒸發(fā)至干。LCMS純度50。/。，m/z335[NT+H]+。該材料無需進一步純化便可用于下一階段。階段4:l-([((S)-環(huán)戊氧基羰基-苯基-甲基)-氨基]-甲基W,3,4,9-四氫-卩-咔啉-2-羧酸芐基酯將IPA(100ml)中的l-甲酰-l,3,4，9-四氫-P-咔啉-2-羧酸芐基酯(lg，3mmo1)、乙酸鈉(0.68g，87.4mmo1)、L-苯基甘氨酸環(huán)戊酯甲苯磺酸鹽(1.16g，3mmo1)、氰基硼氫化鈉(0.26g，4.2mmol)和分子篩的混合物室溫攪拌1小時。將反應混合物蒸發(fā)至干，重溶于EtOAc并依次用飽和NaHC03溶液和鹽水洗滌。將EtOAc層用MgS04干燥，過濾并蒸發(fā)至干。LCMS純度為39。/。，m/z538[VT+H]+。粗材料無需進一步純化便可用于下一階段。階段5:l-U叔丁氧基羰基-((S)-環(huán)戊氧基羰基-苯基-甲萄-氨基]-甲基卜1,3,4,9，氫-P-咔啉-2-羧酸芐基酯HO邊攪拌邊在階段4的胺(1.08g，2.0mmol)的THF(20ml)溶液中加入碳酸鉀(0.42g，3.0mmol)和二碳酸二叔丁酯(1.75g，8.0mmo1)。將反應混合物在50。C攪拌96小時，冷卻至室溫，用DCM(50ml)稀釋并用O.IMHC1溶液(25ml)、飽和NaHC03溶液(2x25ml)和水(15ml)洗滌。將DCM層用Na2S04干燥，過濾并蒸發(fā)至干。用10%EtOAc/庚垸通過柱層析純化得到產(chǎn)物(0.89g70。/。產(chǎn)率)。LCMS純度為79%，m/z638[M^H]+。階段6:(S)-[叔丁氧基羰基-(2,3,4,9-四氫-lH-P-咔啉-l-基甲基)-氨基]-苯基-乙酸環(huán)戊酯氫氣下，在存在10%Pd/C(0.4g)時將階段5的二氨基甲酸酯(0.5g，0.78mmol)的乙醇(40ml)溶液在氣球壓力下攪拌2小時。將反應混合物通過硅藻土墊過濾并蒸發(fā)至干得到所需產(chǎn)物(0.35g，90%)，91。/o純度(LCMS)，m/z504[]VT+H]+。階段7:偶聯(lián)階段6的胺將用辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(703mg，以0.83mmol/g加載)在DCM(12ml)中溶脹。加入PyBOP(912mg，1.75mmo1)，然后加入階段6的胺(325mg，0.64mmol)和DIPEA(1.01ml，5.8mmo1)。將反應混合物振蕩18小時。測試切除后材料的LCMS顯示80%轉(zhuǎn)化。m/z675[]VT+H]+。將樹脂過濾，并用標準洗滌過程洗滌。真空干燥樹脂。階段8:(SH[2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-2,3,4,9-四氫-lH-P-咔啉-l-基甲基]-氨基卜苯基-乙酸環(huán)戊酯(42)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage73</formula>將階段7的樹脂(135mg，以0.83mmol/g加載)在2%TFA/DCM(10ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。濾液在室溫下減壓蒸發(fā)。樹脂用2%TFA/DCM(10ml)重新處理，20分鐘后過濾。合并的濾液在室溫下減壓蒸發(fā)至干以得到油狀殘余物。使殘余物在20。/。TFA/DCM中靜置40分鐘。同樣在室溫下減壓蒸發(fā)至干后，將粗產(chǎn)物通過制備型HPLC純化以得到化合物(42)，其為TFA鹽，LCMS純度91%，m/z575[M十+H]+，'HNMR(400畫z，MeOD)，5:1.30-1.70(16H，m，8xCH2)，2.00(2H，m，CH2)，2.50(2H，m，CH2)，2.75(2H，m，CH2)，3.30-3.50(2H，m，CH2)，4.15(1H，m，CH2CH)，4.80(2H，m，CgNH,掩蔽的信號)，5.25(1H，m，CgOCO),6.00(1H，m，OCOQiPh)，6.90(1H，m，Ar)，7.00(1H，m，Ar)，7.20(IH，m，Ar)，7.30(IH，m，Ar)，7.45(5H，m，Ar)。階段9:環(huán)戊酯的皂化<formula>formulaseeoriginaldocumentpage73</formula>將階段7的樹脂(395mg，以0.83mmol/g加載)懸浮于THF(1.5ml)和甲醇(1.5ml)并加入1.4M氫氧化鈉水溶液(1.17ml，1.6mmol)。將混合物振蕩8天。測試切除顯示86%轉(zhuǎn)化成酸，m/z607[M++H]。將樹脂過濾并用水x2和MeOHx2洗滌，然后通過標準洗滌過程洗滌。真空干燥樹脂。階段10:(SH[2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-2,3，4,9-四氫-lH-P-咔啉-l-基甲基]-氨基卜苯基-乙酸(43)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage73</formula>將階段9的樹脂(100mg，以0.83mmol/g加載)切除并用為化合物(42)列出的過程進行boc去保護。通過制備型HPLC純化得到化合物(43)，其為TFA鹽，LCMS純度96%，m/z507[M""+H]+，'HNMR(400顧z，MeOD)，S:1.25-1.40(4H，m，2xCH2)，1.50-1.65(4H，m，2xCH2)，2.00(2H，m，CH2)，2.50(2H，m，CH2)，2.70(2H，m，CH2)，3.40(2H，m，CH2)，4.15(1H，m，CH2Cg)，4.80(2H，m，C]^NH，掩蔽的信號)，6.00(1H，m，OCOCHPh)，6.90(1H，m，Ar)，7.00(1H，m，Ar)，7.20(1H，m，Ar)，7.30-7.50(6H，m，Ar)。合成圖3的化合物，以化合物(44)和化合物(45)為例r=乙基50r=環(huán)戊基53r二環(huán)戊基51r=h.54r=hs2<formula>formulaseeoriginaldocumentpage75</formula>制備結(jié)構(gòu)單元h-l結(jié)構(gòu)單元hTMSCIMeOH將(S)-l,2,3，4-四氫異喹啉-3-羧酸(10g，56mmol)、TMSCI(39ml，310mmol)和甲醇(500ml)—起回流(在7(TC)2小時。將反應混合物蒸發(fā)至干，LCMS分析表明100%轉(zhuǎn)化成(S)-l,2,3,4-四氫-異喹啉-3-羧酸甲酯，m/z192[IvT+H]+。結(jié)構(gòu)單元iJLTMSCI1zIj!jHMeOHVnHHCI將DL-脯氨酸(10g，87mmol)、TMSCI(51ml，430mmol)和甲醇(500ml)—起回流2小時(在7(TC)。將反應混合物蒸發(fā)至干，LCMS分析顯示100%轉(zhuǎn)化成所需產(chǎn)物吡咯垸-2-羧酸甲酯，m/z130[1Vr+H]+。結(jié)構(gòu)單元J階段1和2將(R)-2-Fmoc-l，2，3,4-四氫去甲哈爾滿(norharmane)-3-羧酸(2.0g，9.25mmol)加入TMSCl(6ml，47.17mmol)的甲醇(100ml)溶液并加熱回流2小時。將反應混合物蒸發(fā)至干以得到1.7g產(chǎn)物(LCMS顯示100%轉(zhuǎn)化，m/z453[VT+H]+)。用20%哌啶的DCM溶液(100ml)處理階段l的酯(1.7g)30分鐘以有效除去fmoc。將粗制反應混合物蒸發(fā)至干，溶于DCM并用飽和NaHC03溶液洗漆。將DCM層分離，干燥(Na2S04)，過濾并濃縮至干。用3%MeOH/DCM通過柱層析純化以得到(S)-2，3，4,9-四氫-lH-p-咔啉-4-羧酸甲酉旨。LCMS100%，m/z231[Nf+H]+。結(jié)構(gòu)單元KO3-氨基苯甲酸甲酯獲自市售原料結(jié)構(gòu)單元Lo階段l邊攪拌邊在鹽酸色胺(3.0g，15.3mmol)的水(200ml)溶液中加入乙醛酸單水合物(1.51g，16.4mmol)的水(10ml)溶液。加入KOH(0.827g，14.7mmol)的水(10ml)溶液。將反應混合物室溫攪拌1小時，之后發(fā)生隨時間沉淀。減壓過濾后收集白色沉淀并用水洗滌以得到2，3,4，9-四氫-lH-(3-咔啉-l-羧酸，產(chǎn)量為1.9g(58%);m/z217[IvT+H]+。階段21,2,3,4-四氫-(3-咔啉-l-羧酸(7.4g)的MeOH(250ml)溶液用HC1氣體飽和20分鐘。將反應混合物在室溫溫和攪拌18小時。反應混合物再用HC1氣體處理并再攪拌18小時。反應完成后將混合物真空濃縮以得到結(jié)構(gòu)單元L，LCMS純度95。/。，m/z231[ivT+H]+。產(chǎn)物(2,3,4,9-四氫-lH-p-咔啉-l-羧酸甲酯)無需進一步純化即可使用。合成圖3列出的化合物，以化合物(44，R-環(huán)戊基)和化合物(45，R-H)為例0H階段l:將胺加載到樹脂上o將用辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(6.6g，以0.83mmol/g加載)在無水DCM(65ml)中溶脹。加入PyBOP(8.6g，16.43mmo1)、胺結(jié)構(gòu)單元A(3.7g，16.43mmol)和DIPEA(9.5ml，58.4mmo1)。將反應物室溫振蕩24小時。測試切除材料的LCMS顯示反應完全。將樹脂過濾，并用標準洗滌過程洗滌。真空干燥樹脂。階段2:甲酯的皂化O將結(jié)合樹脂的階段1的酯(6.95g，以0.83mmol/g加載)懸浮于THF(25ml)和甲醇(25ml)。加入1.4M的氫氧化鈉水溶液(25ml)。將混合物振蕩48小時，24小時后再加入氫氧化鈉(25ml)。測試切除材料的LCMS顯示65。/。轉(zhuǎn)化成酸。m/z349[IvT+H]+。將樹脂過濾并用水x2和MeOHx2洗滌，然后通過標準洗滌過程洗滌。真空干燥樹脂。階段3:與L-苯基甘氨酸環(huán)戊酯偶聯(lián)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage78</formula>在無水DCM(25ml)中溶脹結(jié)合樹脂的階段2的羧酸(2.2g，以0.83mmol/g加載)。加入PyBOP(2.85g，5.48mmo1)、L-苯基甘氨酸環(huán)戊酯甲苯磺酸鹽(2.14g，5.48mmo1)和DIPEA(3.17ml，18.3mmo1)。將混合物室溫振蕩24小時。測試切除后的LCMS顯示52%轉(zhuǎn)化，m/z550[1Vr+H]+。將樹脂過濾并用標準洗滌過程洗滌。樹脂在真空下干燥。階段4:(S)-U(S)-2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-l,2,3，4-四氫-異喹啉-3-羰基]-氨基)-苯基-乙酸環(huán)戊酯(44)將階段3的樹脂(2.2g，以0.83mmol/g加載)在2%TFA/DCM(10ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。收集濾液并在室溫下減壓蒸發(fā)。樹脂用2%TFA/DCM(10ml)重新處理，20分鐘后過濾。合并的濾液在室溫下減壓蒸發(fā)至干以得到殘余物。殘余物通過制備型HPLC純化以得到化合物(44)，其為TFA鹽。LCMS純度95%，m/z550[M+十H]+，'HNMR(400畫z，MeOD)，5:1.12-1.75(16H，m，8xCH2)，1.92-2.02(2H，m，CH2)，2.09-2.30(1H，m)，2.48(1H，m)，3.10(2H，m，CH2)，4.58-4.66(2H，m，CH2)，4.82(1H，m)，5.04(1H，m)，5.20(1H，s，OCOCHPh)，6.95-7.20(9H，m，Ar)。階段5:環(huán)戊酯的皂化將階段3的樹脂(1.3g，1.13mmol)懸浮于THF(4.6ml)和甲醇(4.6ml)。加入1.4M的氫氧化鈉水溶液(4.6ml)。將混合物振蕩24小時。測試切除材料的LCMS證實轉(zhuǎn)化成所需的酸。將樹脂過濾并用水x2和MeOHx2洗滌，然后通過標準洗滌過程洗滌。真空干燥樹脂。階段6:(SH[(S)-2-(7-羥基氨甲酰基-庚酰)-l,2,3，4-四氫-異喹啉-3-羰基]-氨基)-苯基-乙酸(45)將階段5的樹脂(1.3g，以0.83mmol/g加載)在2%TFA/DCM(10ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。收集濾液并在室溫下減壓蒸發(fā)。樹脂用2%TFA/DCM(10ml)重新處理，20分鐘后過濾。合并的濾液在室溫下減壓蒸發(fā)至干以得到殘余物。殘余物通過制備型HPLC純化以得到化合物(45)。LCMS純度96%，m/z482[]VT+H]+，^NMR(400固z，MeOD)，S:1.12-1.38(4H，m，2xCH2)，1.45-1.61(4H，m，CH2)，1.98(2H，m，CH2)，2.10-2.58(2H，m，CH2)，3.04-3.20(2H，m，CH2)，4.48-4.65(2H,m)，4.85(1H，m)，5.20(1H，m)，6.92-7.25(9H，m，Ar)。以下化合物按照為化合物(44)和化合物(45)描述的方法制備(SH[(S)-2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-l，2，3，4-四氫-異喹啉-3-羰基-氨基r苯基-乙酸乙酯(46)使用結(jié)構(gòu)單元HLCMS純度97%，m/z510[M^H]+，'HNMR(400固z，MeOD)，S:1.19(3H，t，CH3)，1.32-1.48(4H，m，2xCH2)，1.54-1.73(4H，m，2xCH2)，2.02-2.15(2H，m，CH2)，2.50-2.70(2H，m，CH2)，3.10-3.30(2H，m，CH2)，4.10(2H，m，CH2)，4.70(2H，m)，4.95(1H，m)，5.35(1H，s，OCOCgPh)，7,10-7,40(9H，m，Ar)。(8)-2-{[(8)-2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-1，2，3，4-四氫-異喹啉-3-羰基-氨基}-3-苯基-丙酸乙酯(47)使用結(jié)構(gòu)單元HLCMS純度100。/。，m/z524[VT+H]+，'HNMR(400廳z，MeOD)，5:1.20(3H，m，CH3)，1,30-1.49(4H，m，2xCH2),1.55-1.70(4H，m，CH2)，2.10(2H，m，CH2)，2.60(2H，m)，2.88-3.25(4H，m)，4.08-4.20(2H，m，CH2)，4.45-4.62(2H，m)，4.75(IH，m)，5.03(1H，m)，7.09-7.32(9H，m，Ar)。，(8)-2-{[(8)-2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-1，2，3，4-四氫-異喹啉-3-羰萄-氨基}-3-苯基-丙酸(48)使用結(jié)構(gòu)單元HLCMS純度100%,m/z564[ivT+Hf,!HNMR(400顧z，MeOD)，5:1.25-1.85(16H，m，8xCH2)，2.10(2H，m，CH2)，2.55(2H，t，CH2)，2.85-3.20(4H，m)，4.40-4.60(2H，m)，4.75(1H，m)，4.95-5.15(2H，m)，7.05-7.30(9H，m，Ar)。(8)-2-{[(8)-2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-1，2，3，4-四氫-異喹啉-3-羰基-氨基}-3-苯基-丙酸(49)使用結(jié)構(gòu)單元HLCMS純度100%，m/z496[M"+H]+，'HNMR(400固z，MeOD)，5:1.10-1.31(4H，m，2xCH2)，1.40-1.55(4H，m，2xCH2)，1.98(2H，m，CH2)，2.43(2H，m，CH2)，2.75-3.10(4H，m)，4.30-4.75(3H，m)，4.90(1H，m)，6.90-7.15(9H，m，Ar)。(S)-2-U(S)-2-(7-羥基氨甲酰基-庚酰)-1，2,3，4-四氫-異喹啉-3-羰基-氨基}-4-甲基-戊酸乙酯(50)使用結(jié)構(gòu)單元HLCMS純度98%,m/z490[lVr+H]+，'HNMR(400固z，MeOD)，5:0.60(1H，m，CH)，0.70-0.85(6H，m，2xCH3)，1.25(3H，t，CH2賜)，1.38-1.65(10H，m，5xCH2)，2.10(2H，m，CH2)，2.60(2H，m，CH2)，3.20(2H，m，CH2)，4.10(2H，q，Ci^CH3)，4.35(1H，m，CH)，4.70-4.80(2H，m，CH2)，4.95(1H，m，CH)，7.23-7.25(4H，m，Ar)。(8)-2-{(8)-2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-1，2，3，4-四氫-異喹啉-3-羰基-氨基}-4-甲基-戊酸環(huán)戊酯(51)使用結(jié)構(gòu)單元HLCMS純度96。/。，m/z530pvT+H]+，^NMR(400應z，MeOD)，S:0.75(3H，d，CH3)，0.88(3H，d，CH3)，1.30-1.90(19H，m)，2.10(2H，t，CH2)，2,60(2H，m，CH2)，3.15-3.30(2H，m，CH2)，4.30(1H，m)，4.65-4.85(2H，m)，4.95(1H，m)，5.10(1H，m)，7.15-7.28(4H，m，Ar)。(8)-2-{[(8)-2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-1，2，3，4-四氫-異喹啉-3-羰基]-氨基}-4-甲基-戊酸乙酯(52)使用結(jié)構(gòu)單元HLCMS純度1000/0，m/z462[]VT+H]+，'HNMR(400MHz，MeOD)，S:0.60(1H，m，CH)，0.70-0.85(6H，m，2xCH3)，1.38-1.65(10H，m，5xCH2)，2.10(2H，m，CH2)，2.40-2.60(2H，m，CH2)，3.20(2H，m，CH2)，4.35(1H，m，CH)，4.70-4.80(2H，m，CH2)，4.95(1H，m，CH，掩蔽的信號)，7.23-7.25(4H，m，Ar)。(8)-{[1-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-吡咯垸-2-羰基-氨基}-苯基-乙酸環(huán)戊酯(53)使用結(jié)構(gòu)單元ILCMS純度100%，m/z488[!VT+H]+，^NMR(400顧z，MeOD)，5:1.30-2,45(24H，m)，3.50-3.70(2H，m，CH2)，4.55(1H，m，CH)，5.18(1H，m，CH)，5.40(1H，m，CH)，7.40(5H，m，Ar)。(SH[l-(7-羥基氨甲酰基-庚酰)-吡咯垸-2-羰基-氨基卜苯基-乙酸(54)使用結(jié)構(gòu)單元ILCMS純度90%，m/z420[M++H]+，^NMR(400MHz,MeOD)，5:1.20-1.20(4H，m，2xCH2)，1.45-1.56(4H，m，CH2)，1.75-2.35(8H，m)，3.35-3.60(2H，m)，4.45(1H，m)，5.35(1H，m)，7.18-7.35(5H，m，Ar)。(S)-2-Ul-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-吡咯垸-2-羰基-氨基P-苯基-丙酸乙酯(55)使用結(jié)構(gòu)單元ILCMS純度100%，m/z462[M++H]+，^NMR(400固z，MeOD)，S:1.20-2.20(19H，m)，2.94-3.20(2H，m，CH2Ph)，3.48-3.69(2H，m，CJ^N),4.10-4.25(2H，m，CS2CH3)，4.33-4.49(1H，m)，4.60-4.79(1H，m)，7.20-7.35(5H，m，Ar)。(S)-2-Ul-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-吡咯垸-2-羰基卜氨基〉-3-苯基-丙酸環(huán)戊酯(56)使用結(jié)構(gòu)單元ILCMS純度100。/。，m/z502[M++H]+，'HNMR(400畫z，MeOD)，5:1.27-2.23(22H，m，llxCH2)，2.35(2H，m，CH2)，2.97-3.27(2H，m，CH2Ph)，3.53-3.63(2H，m，CH2)，4.35-4.45(1H，m，CH)，4.60-4.70(1H，m，CgCH2Ph)，5.10-5.20(1H，m，CgOCO)，7.23-7.30(5H，m，Ar)。(S)-2-Ul-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-吡咯垸-2-羰基]-氨基)-3-苯基-丙酸(57)使用結(jié)構(gòu)單元ILCMS純度90。/。，m/z434[JVT+H]+，！HNMR(400畫z，MeOD)，5:1.30-1.41(4H，m，2xCH2)，1.55-1.69(4H，m，2xCH2)，1.80-1.90(8H，m)，2.91-3.26(2H，m)，3.45-3.70(2H，m)，4.40(1H，m)，4.72(1H，m)，7.16-7.30(5H，m，Ar)。(S)-2-U(S)-2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-2，3，4，9-四氫-lH-p-咔啉-4-羰基-氨基)-3-苯基-丙酸環(huán)戊酯(58)使用結(jié)構(gòu)單元JLCMS純度為100%,m/z563[Nf+H]+，^NMR(400顧zMeOD)，S:1.10-1.30(3H，m，CH3)，1.35-1.80(8H，m，4xCH2)，2.15(2H，m，CH2)，2.4-2.65(2H，m，CH2)，2.95-3.20(3H，m)，4.0-4.2(2H，mC,)，4.3-5.0(4H，m掩蔽的信號)，5.05-5.20(1H，mCgOCO)，6.90-7.50(9H，m，Ar)。(S)-2-U(S)-2-(7-羥基氨甲酰基-庚酰)-2,3,4，9-四氫-lH-P-咔啉-4-羰基-氨基)-3-苯基-丙酸(59)使用結(jié)構(gòu)單元JLCMS純度為100%，m/z535[M++H]+，&NMR(400固zMeOD)，5:1.20-1.40(4H，m，2xCH2)，1.45-1.65(4H，m，2xCH2)，1.90-2.10(2H，m，CH2)，2.30-2.50(2H，m，CH2)，2.70-3.15(3H，m)，4.2-4.9(4H，m掩蔽的信號)，5.00(1H，mCgOCO)，6.75-7.40(9H，m，Ar)(S)-P-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-苯甲酰氨基]-苯基-乙酸環(huán)戊酯(60)使用結(jié)構(gòu)單元KLCMS純度100。/。，m/z510[1VT+H]+，'HNMR(400MHz，MeOD),5:1.28(4H，m，2xCH2)，1.40-1.80(12H，m，6xCH2)，1.98(2H，t，CH2)，2,27(2H，t，CH2)，5.12(1H，m)，5.50(1H，s，OCOCgPh),7.21-7.32(4H，m，Ar)，7.36(2H，m，Ar)，7,45(1H，d，Ar)，7.61(1H，d，Ar)，7.90(1H，s，Ar)。(S)-[3-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-苯甲酰氨基-苯基-乙酸(61)使用結(jié)構(gòu)單元KLCMS純度1000/。，m/z442pyT+H]+，iHNMR(400畫z，MeOD)，5:1.21-1.34(4H，m，2xCH2)，1.48-1.63(4H，m，2xCH2)，1.98(2H，t，CH2)，2.26(2H，t，CH2)，5.55(1H，s，OCOCgPh)，7.20-7.32(4H，m，Ar)，7.40(2H，d，Ar)，7.48(1H，d，Ar)，7.64(1H，d，Ar)，7,89(1H，s，Ar)。(S)-2-[3-(7-羥基氨甲酰基-庚酰氨基)-苯甲酰氨萄-4-甲基-戊酸環(huán)戊酯(62)使用結(jié)構(gòu)單元KLCMS純度93。/。，m/z490[M^H]+，'HNMR(400顧z，MeOD)，5:0.84(3H，d，CH(Cii2))，0.88(3H，d，CH(CHi))，1.20-1.40(4H，m，2xCH2)，1.40-1.85(15H，m，6xCH2，CH(CH3)2，賜CH(CH3)2)，2.00(2H，t，CH2)，2.25(2H，t，CH2)，4.45(1H，m，OCOCHCH2)，5.10(1H，m，C即CO)，7.25(1H，mAr)，7.40(1H，d，Ar)，7.60(1H，d，Ar)，7.90(1H，s，Ar)。(S)-2-[3-(7-羥基氨甲酰基-庚酰氨基)-苯甲酰氨基-4-甲基-戊酸(63)使用結(jié)構(gòu)單元KLCMS純度97%，m/z422pvT+H]+，'HNMR(400函z，MeOD)，5:1.03(3H，d，CH(Qi2》，1.06(3H，d，CH(Q^))，1.40-1.55(4H，m，2xCH2)，1.65-1.95(7H，m,2xCH2，C,H3)2，賜(:即113)2)，2.15(2H，t，CH2)，2.45(2H，t，CH2)，4.70(1H，m，OCOCHCH2)，7.45(1H，m，Ar)，7.60(1H，d，Ar)，7.80(1H，d，Ar)，8.05(IH，s，Ar)。(8)-2-{[2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-2，3，4，9-四氫-111+-咔啉-1-羰基-氨基}-3-苯基-丙酸環(huán)戊酯(64)使用結(jié)構(gòu)單元LLCMS純度100%，m/z603[1Vf+H]+，'HNMR(400MHz，MeOD)，5:1.18-1.71(16H，m，8xCH2)，2.00(2H，t，CH2)，2.45(2H，m)，2.70(2H，m)，2.90-3.11(2H，m)，3.40(1H，m)，4.10(1H，m)，4.50(1H，m)，5.00(1H，m)，5.95(1H，m)，6.90-7.11(7H，m，Ar)，7.25(1H，d，Ar)，7.34(1H，d，Ar)。(S)-2-U2-(7-羥基氨甲?；?庚酰)-2，3，4，9-四氫-lH-P-咔啉-l-羰基-氨基l-3-苯基畫丙酸(65)使用結(jié)構(gòu)單元LLCMS純度91%，m/z535[N^+H〗+，！HNMR(400而z，MeODS:1.15-1.32(4H，m，2xCH2)，1.40-1.60(4H，m，2xCH2)，1.98(2H，t，CH2)，2.41(2H，m)，2.69(2H，m)，2.90-3.11(2H，m)，3.30(1H，m)，4.06(1H，m)，4.60(1H，m)，5.92(1H，m)，6.84(7H，m，Ar)，7.20(1H，d，Ar)，7.31(1H，d，Ar)。合成化合物(66)和化合物(67)6667階段l:5-氨基-煙酸甲酯將5-氨基煙酸(lg，7.2mmmol)懸浮于甲醇(100ml)并在Ot:時逐滴加入亞硫酰氯(4.22ml，57.9mmo1)。將反應混合物室溫攪拌18小時。將反應混合物蒸發(fā)至干，將所得黃色油狀物重溶于甲醇/乙醚(l:l)，并通過過濾收集所得黃色晶體(鹽酸鹽)，產(chǎn)量為1.2g(85%)。LCMS純度91%，m/z153[Nf+Hf階段2:(5-氨基-吡啶-3-基)-甲醇N將5-氨基-煙酸甲酯(5.7g，30.2mmol)溶于THF(150ml)并在0。C下緩慢加入LiAlH4(1M的THF溶液，133ml，133mmo1)。將反應混合物室溫攪拌21小時。淬滅反應混合物，用稀HCl酸化至pH3，并用固體Na2C03堿化(pH8)。減壓除去溶劑。殘余物通過硅膠過濾，用20%MeOH/DCM洗脫得到3.8g產(chǎn)物，(100%)LCMS純度為97%，m/z125[VT+H]+，通過ELS測定。階段3:將階段2的酸偶聯(lián)到樹脂上將用辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(0.49g，0.86mmol/g，0.42mmol)在無水DCM(6ml)中溶脹并加入PyBOP(0.67g，1.3mmo1)。將階段2的苯胺(0.16g，1.3mmo1)加入DMF(6ml)，隨后加入DIPEA(0.75ml，4.2mmo1)。測試切除后的LCMS顯示27%轉(zhuǎn)化，m/z296[Ivr+H]+。將樹脂過濾，并用標準洗滌過程洗滌。真空干燥樹脂。階段4:甲磺酰化將結(jié)合樹脂的階段3的醇(1.8g，1.57mmol)在無水DCM(30ml)中溶脹并在O'C下加入DIPEA(1.62ml，9.42mmo1)，然后加入甲磺酰氯(0.23ml，3.14mmo1)。將反應混合物在0。C振蕩30分鐘。測試切除后的LCMS顯示21。/。轉(zhuǎn)化，m/z374[]Vr+H]+，并有9%通過用氯化物取代甲磺酸酯衍生得到的副產(chǎn)物，m/z314[NT+H]+。將樹脂過濾，并用標準洗滌過程洗滌。真空干燥樹脂。階段5:用L-苯丙氨酸乙酯取代甲磺酸酯將結(jié)合樹脂的階段4的產(chǎn)物(0.5g，0.43mmol)在無水DMF(4ml)中溶脹并加入碘化鈉(0.05g，10。/。重量/體積)。加入L-苯丙氨酸乙酯鹽酸鹽(0.3g，1.29mmol)的無水DMF(4ml)溶液，然后加入DIPEA(0.75ml，4.3mmo1)。振蕩3小時后，測試切除材料的LCMS顯示35。/。轉(zhuǎn)化，m/z471[lVr+H]+。將樹脂過濾，并用標準洗滌過程洗漆。真空干燥樹脂。階段6:(S)-2-U5-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-吡啶-3-基甲蜀-氨基H-苯基-丙酸乙酯(66)階段5的樹脂(2g，以0.87mmol/g加載)在2%TFA/DCM(20ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。收集濾液并在室溫下減壓蒸發(fā)。樹脂用2。/。TFA/DCM(10ml)重新處理，10分鐘后過濾。合并的濾液在室溫下減壓蒸發(fā)至干以得到粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)物通過制備型HPLC純化以得到化合物(66)，其為TFA鹽。LCMS純度100%，m/z471[Nf+H]+，'HNMR(400畫z，MeOD)，S:1.10(3H，t，C02CH2Qi3)，1.31-1.50(4H，m，2xCH2)，1.58-1.80(4H，m，2xCH2)，2.05-2.15(1H，m，CH)，2.24-2.38(1H，m，CH)，2.45(2H，t，CH2)，3.10-3.20(1H，m，CH)，3.38-3.49(1H，m，CH)，4.12(2H，q，CH2)，4.35(3H，m，CH2，CH)，7.20-7.40(5H，m，Ar)，8,30-9.00(3H，m，Ar)。階段7:(S)-2-([5-(7-羥基氨甲酰基-庚酰氨基)-吡啶-3-基甲基]-氨基H-苯基-丙酸(67)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage86</formula>在階段6的產(chǎn)物(30mg，以1.8mmol/g加載)的THF(lml)溶液中加入1.4M氫氧化鈉(lml)。將反應混合物攪拌30分鐘。LCMS顯示75。/。轉(zhuǎn)化，m/z442[]VT+H]+。將反應混合物蒸發(fā)至干并通過制備型HPLC純化以得到所需化合物，其為TFA鹽，化合物(67)。LCMS純度100%，m/z443[M++H]+。'HNMR(400畫z，MeOD)，5:1.30(4H，m，2xCH2)，1.50-1.70(4H，m，2xCH2)，2.00(2H，t，CH2)，2.30(2H，t，CH2)，3.20(2H，m，CM2Ph，掩蔽的信號)，4.20(3H，m)，7.20(5H，m，Ar)，8.30(1H，brs，Ar)，8.40(1H，s，Ar)，8.65(1H，brs，Ar)。合成化合物(68)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage86</formula>(S)-2-([5-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-吡啶-3-基甲基]-氨基H-苯基-丙酸叔丁酯(68)使用所列出的用來制備化合物(66)的步驟進行制備LCMS純度100。/。，m/z499[M十+H]+，！HNMR(400顧z，MeOD)，5:1.20(9H，s，C(Cg3)3)，1.25-1.35(4H，m，2xCH2)，1.49-1.65(4H，m，2xCH2)，2.00(2H，t，CH2)，2.35(3H，t，CH2)，3.00(1H，m)，3.32(1H，m)，4.15-4.30(3H，m)，7.15-7.30(5H，m，Ar)，8.30(1H，brs，Ar)，8.45(1H，s，Ar)，8.65(1H，brs，Ar)。合成化合物(69)和化合物(70)86<formula>formulaseeoriginaldocumentpage87</formula>階段L將Fmoc氨基己酸加載到樹脂上<formula>formulaseeoriginaldocumentpage87</formula>在羥胺2-氯三苯甲基樹脂(2.5g，以0.94mmol/g加載)和無水DCM(10ml)的混合物中加入1，3-二異丙基碳二亞胺(l.lml，7.05mmol)和6-(Fmoc-氨基)己酸(2.5g，7.05mmol)的無水DCM(10ml)溶液。加入DMF(5ml)并在室溫振蕩反應物1小時。測試切除顯示96%轉(zhuǎn)化成所需產(chǎn)物。將樹脂過濾，并用標準洗滌過程洗滌。真空干燥樹脂。階段2:Fmoc去保護將階段1的Fmoc保護的胺樹脂(2.0g，以0.94mmol/g加載)溶于20%的哌啶的DMF(25ml，過量)溶液并室溫振蕩30分鐘。測試切除，LCMS顯示完全轉(zhuǎn)化，100%(ELS檢測)。將樹脂過濾，用標準洗滌過程洗滌并真空干燥。階段3:偶聯(lián)反應在結(jié)合樹脂的階段2的胺(2.0g，以0.94mmol/g加載)的無水DCM(10ml)和DMF(10ml)溶液中加入DIC(0.71ml，5.64mmol)和3-(氯甲基)苯甲酸(0.96g，5.64mmo1)。將混合物振蕩l小時，然后測試切除，LCMS顯示49。/。轉(zhuǎn)化，m/z219[VT+H]+。將樹脂過濾，并用標準洗滌過程洗滌。真空干燥樹脂。階段4:用L-苯基甘氨酸環(huán)戊酯取代氯化物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage87</formula>在結(jié)合樹脂的階段3的氯化物(0.5g，0.47mmol)的無水DMF(51111)溶液中加入L苯基甘氨酸環(huán)戊酯甲苯磺酸鹽(0.57g，1.41mmol)、DIPEA(0.24ml，1.41mmoI)和催化量的碘化鈉。反應混合物在6(TC加熱1小時。測試切除后的LCMS顯示45%轉(zhuǎn)化，m/z482[M"+H]+。將樹脂過濾，并用標準洗滌過程洗滌。真空干燥樹脂。階段5:(S)-[3-(5-羥基氨甲酰基-戊基氨甲?；?-節(jié)基氨蜀-苯基-乙酸環(huán)戊酯(69)將階段4的樹脂(1.0g，以0.94mmol/g加載)在2%TFA/DCM(10ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。收集濾液并在室溫下減壓蒸發(fā)。樹脂用2%TFA/DCM(10ml)重新處理，20分鐘后過濾。合并的濾液在室溫下減壓蒸發(fā)至千以得到殘余物。殘余物通過制備型HPLC純化以得到化合物(69)。LCMS純度89%，m/z482[N^+H]+，]HNMR(400固z，MeOD)，S:1.24-1.82(14H，m，7xCH2)，2.03(2H，t，CH2)，3.30(2H，t，CH2)，4.08(1H，d，CHgPh)，2.20(1H，d，CgHPh)，5.09(1H，s，OCOQiPh)，5.18(1H，m，C即CO)，7.39-7.54(7H，m，Ar)，7.77(2H，m，Ar)。階段6:環(huán)戊酯的皂化將階段4的樹脂(1.35g，以0.94mmol/g加載)懸浮于THF(4.7ml)和甲醇(4.7ml)。加入1.4M氫氧化鈉(9.4ml，12.66mmol)。將混合物振蕩48小時。測試切除后的LCMS顯示49%轉(zhuǎn)化成酸，m/z414[NT+H]+。將樹脂過濾并用水x2和MeOHx2洗滌，然后通過標準洗滌過程洗滌。樹脂在真空下干燥階段7:(S)-[3-(5-羥基氨甲?；?戊基氨甲酰萄-節(jié)基氨基]-苯基-乙酸(70)將階段6的樹脂(1.35g，以0.94mmol/g加載)在2%TFA/DCM(10ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。收集濾液并在室溫下減壓蒸發(fā)。樹脂用2%TFA/DCM(10ml)重新處理，20分鐘后過濾。合并的濾液在室溫下減壓蒸發(fā)至干以得到殘余物。殘余物通過制備型HPLC純化以得到化合物(70)。LCMS純度100%,m/z414[M""+H]+，!HNMR(400函z，MeOD)，S:1.30(2H，m，CH2)，1.57(4H，m，2xCH2)，2.20(2H，t，CH2)，3.30(2H，t，CH2)，4.05(1H，d，CJiHPh)，4.18(1H，d，CH,)，4.90(1H，s，OCOCHPh)，7.35-7.52(7H，m，Ar)，7.78(2H，m，Ar)。合成圖4的化合物，以化合物(71)和化合物(72)為例<formula>formulaseeoriginaldocumentpage89</formula>R=環(huán)戊基71R=H72<formula>formulaseeoriginaldocumentpage89</formula>R=環(huán)戊基73R=H74<formula>formulaseeoriginaldocumentpage89</formula>R=環(huán)戊基75R=H76<formula>formulaseeoriginaldocumentpage89</formula>R=環(huán)戊基77R=H78<formula>formulaseeoriginaldocumentpage89</formula>圖4制備結(jié)構(gòu)單元M，N，O結(jié)構(gòu)單元M<formula>formulaseeoriginaldocumentpage90</formula>階段l:2-(3-氨基-苯基)-乙醇將硝基苯乙醇(8.0g，0.047mol)和10%Pd/C(0.6g)的乙醇(100ml)混合物在氫氣下(氣球壓力)攪拌18小時。將反應混合物通過硅藻土墊過濾并除去Pd/C催化劑。將濾液減壓濃縮以得到淡棕色固體6.1g(95%產(chǎn)率)。LCMS純度98%，m/z138[M+H]+。階段2:3-(2-溴-乙基)-苯胺將2-(3-氨基-苯基)-乙醇(2.0g)在48%的HBr水溶液(20ml)中的溶液于9(TC加熱18小時。將混合物冷卻至室溫，并通過過濾收集形成的沉淀。真空干燥固體得到結(jié)構(gòu)單元M，1.8g(61。/。產(chǎn)率)。LCMS純度90。/。，m/z200/202[M+H]+。結(jié)構(gòu)單元N<formula>formulaseeoriginaldocumentpage90</formula>結(jié)構(gòu)單元N階段l:2-(3-硝基-苯氧基)-乙醇在3-硝基苯酚(10g，71.9mmol)的DMF(40ml)溶液中加入加入NaOH顆粒(3.16g，79.1mmol)和2-溴乙醇(5.6ml，79.1mmo1)。反應混合物于60。C加熱18小時。LCMS顯示65%轉(zhuǎn)化成所需產(chǎn)物。反應混合物用水(10ml)稀釋并用2MHCl慢慢中和。反應混合物用EtOAc(50ml)萃取并用水(50ml)洗滌。將EtOAc層干燥(Na2S04)，過濾并蒸發(fā)至干?？焖僦鶎游黾兓?(P/。EtOAc/庚垸洗脫，得到所需產(chǎn)物(8.2g，62%產(chǎn)率)。LCMS純度100%，m/z184[M+H]+。階段2:2-(3-氨基-苯氧基)-乙醇還原反應按照對于結(jié)構(gòu)單元M列出的過程進行。階段3:3-(2-溴-乙氧基)-苯胺溴化反應按照對于結(jié)構(gòu)單元M列出的過程進行。結(jié)構(gòu)單元O<formula>formulaseeoriginaldocumentpage91</formula>階段3結(jié)構(gòu)單元O結(jié)構(gòu)單元O按照對結(jié)構(gòu)單元G的描述用3-溴-l-丙醇代替2-溴乙醇進行制備(合成圖4的化合物，以化合物(71，R-環(huán)戊基)和化合物(72，R-H)為例<formula>formulaseeoriginaldocumentpage91</formula>階段l:將苯胺衍生物偶聯(lián)到羧酸官能化的樹脂<formula>formulaseeoriginaldocumentpage91</formula>、在用辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(1.0g，0.94mmo1，以0.94mmol/g加載)的DCM/DMF(10ml/10ml)懸浮液中加入DIPEA(1.75ml)，然后加入結(jié)構(gòu)單元M(0.8g，2.82mmo1)。加入PyBrOP(0.53g，3.76mmol)并將懸浮液振蕩18小時。樹脂用標準洗滌過程洗滌并充分干燥。階段2:用L-苯基甘氨酸環(huán)戊酯取代溴化物在瓶中的階段l的樹脂(0.4g，0.38mmol)的DMF(4ml)的懸浮液中加入L-苯基甘氨酸環(huán)戊酯甲苯磺酸鹽(0.44g，U2mmol)和DIPEA(0.67ml，3.76mmo1)，然后加入Nal(50mg)。使反應物在65'C靜置8小時。用標準洗滌過程充分洗滌樹脂。階段3:(S):2-[3-(7-羥基氨甲酰基-庚酰氨基)-苯基]-乙基氨基卜苯基-乙酸環(huán)戊酯(71)用2%TFA/DCM(10mlx3)切除階段2的樹脂。將濾液濃縮至干并通過制備型HPLC純化殘余物以得到化合物(71)，其為TFA鹽。產(chǎn)量為21mg(總共11%)，LCMS純度99%，m/z510[M^H]+，'HNMR(400MHz，MeOD)，S:1.35-1.95(16H,m8xCH2)，2.10(2H，t，CH2)，2.38(2H，t，CH2)，2.91-3.29(4H，m)，5.18(1H，s，OCOQiPh)，5.32(1H，m，CgOCO),6.98(1H，m，Ar)，7.30(2H，m，Ar)，7.47-7.56(5H，m，Ar)，7.62(1H，s，Ar)。階段4:皂化將階段2的樹脂(1.2g，1.12mmol)懸浮于THF/MeOH(12ml/12ml)。加入2.7MNaOH溶液并將混合物室溫振蕩18小時。反應完成后充分洗滌樹脂(標準洗滌過程)。階段5:(SH2-[3-(7-羥基氨甲酰基-庚酰氨基)-苯基]-乙基氨基卜苯基-乙酸(72)用2。/。TFA7DCM(10mlx3)切除階段4的樹脂(0.8g，0.76mmo1)。將濾液濃縮至干并通過制備型HPLC純化殘余物以得到化合物(72)，其為TFA鹽，產(chǎn)量為40mg(總共10%)。LCMS純度為100。/。，m/z442[M+十H]+，'HNMR(400MHzMeOD)，S:1.20-1.35(4H，m，2xCH2)，1.45-1.70(4H，m，2><CH2)，1.95(2H，t，CH2)，2.25(2H，t，CH2)，2.80-3.20(4H，mCH^NH，CJ^Ph),5.00(1H，s，CHCOOH)，6.85(1H，m，Ar)，7.15(2H，m，Ar)，7.40(5H，s，Ar)，7.50(1H，s，Ar)。以下化合物按照關于化合物(71)和化合物(72)描述的方法制備(S)-2-(2-[3-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-苯氧基-乙基氨基)-3-苯基-丙酸環(huán)戊酯(73)采用結(jié)構(gòu)單元NLCMS純度94。/。，m/z540[M"+H]+，NMR(400MHz，MeOD)'5:1.26-1.82(16H，m,8xCH2)，2.11(2H，t，CH2)，2.39(2H，t，CH2)，3.15(1H，dd，QiHPh)，3.44(1H,dd，C昭Ph)，3.56(2H，m，CH2)，4.30(2H，t，CH2)，4.40(1H，m)，5.13(1H，m，CgOCO)，6.76(1H，d，Ar)，7.00(1H，d，Ar)，7.24-7.41(6H，m，Ar)，7.57(1H，s，Ar)。(S)-2-(2-[3-(7-羥基氨甲酰基-庚酰氨基)-苯氧基〗-乙基氨基H-苯基-丙酸(74)采用結(jié)構(gòu)單元NLCMS純度100%，m/z472[IV^+H〗+，！HNMR(400MHz'MeOD)'5:1.35-1.46(4H，m，2xCH2)，1.61-1.77(4H，m，2xCH2)，2.11(2H，t，CH2)，2.40(2H，t，CH2)，3.28-3.40(2H，m，CH2，掩蔽的信號)，3.53(2H，t，CH2)，4.29(2H，t，CH2)，4.38(1H，t，OCOC|iCH2)，6.75(1H，d，Ar)，7.00(1H,d，Ar)，7.25(1H，t，Ar)，7.30-7.41(5H，m，Ar),7.53(1H，s，Ar)。(8)-2-{3-[3-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-苯氧基-丙基氨基}-3-苯基-丙酸環(huán)戊酯(75)采用結(jié)構(gòu)單元OLCMS純度100%，m/z554[Nf+H]+，'HNMR(400顧z，MeOD)，5:1.29-1.87(16H，m，8xCH2)，2.10(2H，t，CH2)，2.21(2H，m，CH2)，2.37(2H，t，CH2)，3.12(1H，dd，CHHPh)，3.25-3.43(3H，m，CH,，CH2)，4.11(2H，t，CH2)，4,33(1H，m，OCOCliCH2)，5.18(1H，m，CHOCO)，6.78(1H，d，Ar)，7.00(1H，d，Ar)，7.22(1H，t，Ar)，7.24-7.39(5H，m，Ar)，7.44(1H，s，Ar)。(S)-2-(3-[3-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-苯氧基-丙基氨基卜3-苯基-丙酸(76)采用結(jié)構(gòu)單元oLCMS純度100%，m/z486[IvT+H]+，^NMR(400顧z，MeOD)，S:1.34-1.47(4H，m，2xCH2)，1.60-1.75(4H，m，2xCH2)，2.10(2H，t，CH2)，2,19(2H，m，CH2)，2.38(2H，t，CH2)，3.25-3.40(4H，m，2xCH2，掩蔽的信號)，4.09(2H，t，CH2)，4.35(IH，OCOQiCH2)，6.75(1H，d，Ar)，6.98(1H，d，Ar)，7.20(IH，t，Ar)，7.28-7.39(5H，m，Ar)，7.41(1H，s，Ar)。(SH3-[3-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-苯氧基-丙基氨基h苯基-乙酸環(huán)戊酯(77)采用結(jié)構(gòu)單元OLCMS純度為100%，m/z540[M++H]+，！HNMR(400MHz，MeOD)，S:1.20-1.50(8H，m，4xCH2)，1.50-1.80(8H，m，4><CH2)，1.80-1.90(2H，m，NHCH2CH2)，2.00(2H，t，CH2)，2.25(2H，t，CH2)，2.55-2.70(2H，m，NHCJ^),3.90(2H，t，CH2CHzO)，4.25(1H，s，OCOCgPh)，5.05(1H，m，CgOCO)，6.55(1H，m，Ar)，6,95(1H，m，Ar)，7.00-7.10(1H，m，Ar)，6.15-6.35(6H，m，Ar)(SH3-[3-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-苯氧基-丙基氨基)-苯基-乙酸環(huán)戊酯(78)采用結(jié)構(gòu)單元OLCMS純度為100%,m/z472[Iv/T+H]+，NMR(400MHz，DMSO)，5:1.20-1.40(4H，m，2xCH2)，1.45-1.65(4H，m，2xCH2)，1.90(2H，m，麗(:恥歸，2.00-2.20(2H，m，CH2)，2.20-2.35(2H，m，CH2)，2.80-3.10(2H，m，NHCHa掩蔽的信號)，3.90-4.00(2H，m，CH2C|^0)，4.60-4.85(1H，brs，OCOCgPh)，6.55(1H，d，Ar)，7.05(1H，d，Ar)，7.15(1H，m，Ar)，7.30-7.60(6H，m,Ar)，8.50-8.85(IH，brs)，9.85(1H，s)，10.35(1H，s)。合成圖5的化合物，以化合物79和化合物80為例R=環(huán)戊基79R=H80圖5合成化合物79(R-環(huán)戊基)和化合物80(R=H)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage95</formula>階段l:3-硝基-芐胺將3-硝基芐基溴化物(10g，46.3mmol)溶于乙醇(200ml)并于室溫攪拌。在30分鐘內(nèi)在反應物中逐滴加入濃氨水(200ml)的乙醇(300ml)溶液。將反應物室溫攪拌18小時，然后蒸發(fā)至干。在殘余物中加入水(350ml),溶液用EtOAc(2x200ml)洗滌。含水層用1MNaOH堿化并用EtOAc(2x200ml)萃取。將堿性層的有機萃取物合并，干燥(Na2S04)并蒸發(fā)至干。所得產(chǎn)物為橙色油狀物(4.6g，65%產(chǎn)率)。LCMS純度100%，m/z153[Nf+H]+。階段2:l-異氰酸甲酯基-3-硝基-苯在氮氣下將3-硝基-芐胺(2.3g，15.1mmol)溶于無水二噁垸(50ml)。加入雙光氣(2.2ml，18.2mmo1)，有沉淀形成，該沉淀在加熱至75'C時溶解。將反應物在75'C攪拌3小時，冷卻并蒸發(fā)至干，得到3.4g粗材料，該材料無需進一步純化即可用于下一步驟。階段3:(S)-[3-(3-硝基-芐基)-脲基]-苯基-乙酸環(huán)戊酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage96</formula>將L-苯基甘氨酸環(huán)戊酯甲苯磺酸鹽(7.47g，19.1mmol)溶于DMF(70ml)。加入三乙胺(5.8ml，42.0mmol)并將混合物冷卻至0°C。氮氣下，在反應混合物中緩慢加入l-異氰酸甲酯基-3-硝基-苯溶液(3.4g，19.1mmo1，溶于30mlDMF)。繼續(xù)攪拌18小時使反應物回復室溫?；旌衔镉盟?200ml)稀釋并用EtOAc(2x200ml)萃取。有機萃取物用水(3xl00ml)和鹽水(100ml)洗滌，干燥(Na2S04)并蒸發(fā)至干。粗制的脲通過柱層析(1%MeOH/DCM)純化以得到淡黃色油狀物(4.6g，65%產(chǎn)率)。LCMS純度85%，m/z398[M+十H]+。階段4:(S)-[3-(3-氨基-芐基)-脲基]-苯基-乙酸環(huán)戊酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage96</formula>將(S)-[3-(3-硝基-芐基)-脲基]-苯基-乙酸環(huán)戊酯(3.6g，9.0mmol)溶于乙醇(50ml)，加入Pd/C(10M，濕重)催化劑(100mg)，混合物在氫氣(氣球壓力)下攪拌18小時。將反應混合物通過硅藻土塞過濾并蒸發(fā)至干以得到紫色油狀物(2.34g，71%產(chǎn)率)。LCMS純度90%，m/z368[M^+H]+。階段5:偶聯(lián)到樹脂<formula>formulaseeoriginaldocumentpage96</formula>將用辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(1.5g，以0.94mmol/g加載)在DMF(15ml)中溶脹，加入PyBOP(2.2g，4.23mmol)和DIPEA(2.4ml，14.1mmo1)。將階段4的苯胺(1.3g，3.53mmol)溶于DCM(15ml)并加入反應混合物中。反應物在室溫下振蕩42小時，然后進行標準樹脂洗滌步驟和干燥。階段6:(SH3-[3-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-芐基]-脲基》-苯基-乙酸環(huán)戊酯(79)79將階段5的結(jié)合樹脂的環(huán)戊酯(1.75g)與2%TFA/DCM(15ml)—起振蕩10分鐘，然后過濾樹脂并在室溫下減壓蒸發(fā)溶劑。重復該過程(3次)，合并的粗產(chǎn)物通過制備型HPLC純化以得到化合物(79)。LCMS純度100%，m/z539[M^+H]+，&NMR(400MHz，MeOD)，5:1.34-1.90(16H，m，8xCH2),2.11(2H，t，CH2)，2.38(2H，t，CH2)，4.30(2H，s，CH2)，5.18(1H，m，C即CO)，5.30(1H，s，OCOCHPh)，7.05(1H，d，Ar)，7.26(1H，t，Ar)，7.34-7.40(5H，m，Ar)，7.47(2H，m，Ar)。階段7:(SH3-[3-(7-羥基氨甲酰基-庚酰氨基)-節(jié)基]-脲基)-苯基-乙酸(80)將化合物(79)(75mg)溶于THF(lml)并加入2MNaOH(水溶液，lml)。反應物室溫攪拌2小時。在氮氣氣流下除去THF，含水層(約lml)通過制備型HPLC純化以得到化合物(80)。LCMS純度99%，m/z471[M^H]+，&NMR(400MHz，MeOD)，5:1.20-1.35(4H，m，2xCH2)，1.45-1.65(4H，m，2xCH2)，2.00(2H，t，CH2)，2.25(2H，t，CH2)，4.20(2H，s賜,，5.25(1H，sCgPh)，6.90(1H，d，Ar)，7.10(1H，t，Ar)，7.15-7.40(7H，m，Ar)。以下化合物按照為化合物(79)和化合物(80)描述的方法制備(S)-2-(3-3-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-節(jié)基-脲基H-苯基-丙酸環(huán)戊酯(81)LCMS純度950/0，m/z553[M^H]+，'HNMR(400固z，MeOD)，5:1.20-1.40(4H，m，2xCH2)，1.40-1.80(12H，m，6xCH2)，2.00(2H，t，CH2)，2.25(2H，t，CH2)，2.90(2H，m，CHC^Ph),4.15(2H，s賜NH)，4.40(1H，m，OCOCgCH2)，5.00(1H，m，CgOCO)，6.85(1H，d，Ar)，7.00-7.25(6H，m，Ar)，7.35(2H，brs，At)。(S)-2-P-3-(7-羥基氨甲酰基-庚酰氨基)-節(jié)基l-脲基卜3-苯基-丙酸(82)LCMS純度94。/。，m/z485[M十+H]+，!HNMR(400畫z，MeOD)，S:1.30-1.50(4H，m，2xCH2)，1.60-1.80(4H，m，2xCH2)，2.10(2H，t，CH2)，2.35(2H，t，CH2)，2.95-3.25(2H，m，CHCH^Ph)，4.25(2H，s，賜NH)，4.60(1H，mOCOC￡iCH2)，7.00(1H，d，Ar)，7.15-7.35(6H，m，Ar)，7.45(2H，m，Ar)合成圖6所示的化合物，以化合物(83)和化合物(84)為例R=環(huán)戊基83R=H84R=環(huán)戊基86R=H87R=環(huán)戊基89R=H90R=環(huán)戊基85O一HR=環(huán)戊基88R=環(huán)戊基91圖6O一HO一卜階段l:7-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲?；?-庚酸甲酯0/0v0將辛二酸一甲酯(25.0g，13.3mmol，1.0eq)溶于THF(300mL)和DCM(300mL)。邊攪拌邊在溶液中加入EDC.HCl(25.46g，13.3mmol，1.0eq)，然后加入HOBt(17.95g，13.3mmol，1.0eq)和三乙胺(48.5mL，34.5mmol，2.6叫)。在粘性溶液中加入O-(l-異丁氧基-乙基)-羥胺(21.9mL，15.9mmol，1.2叫)并將反應物在室溫攪拌過夜。將反應混合物真空濃縮，加入DCM(350mL)并用水(250mL)和鹽水(200mL)洗滌。將有機層分離，干燥(MgS04)，過濾并真空濃縮。所得產(chǎn)物為白色固體(36.6g，91%產(chǎn)率)LCMS純度88。/。，m/z302(M^H)+。該物質(zhì)無需進一步純化便可用于下一步驟。階段2:7-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲?；?-庚酸5CTC時，在存在氫氧化鋰(8.68g，36.2mmol，3.0叫)時將7-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲?；?-庚酸甲酯(36.6g，12.1mmo1,1.0eq)在THF(200mL)和水(200mL)中攪拌3小時。在真空下蒸發(fā)掉THF并在混合物中加入水(100mL)和乙酸乙酯(200mL)。加入1NHCl將混合物小心酸化至pH3。分離有機相，含水層用乙酸乙酯(150mL)重新萃取。將有機相合并，干燥(MgS04)，過濾并真空濃縮。所得產(chǎn)物為白色固體(29.0g，83%產(chǎn)率)，m/z288[IVT+Hf，該產(chǎn)物無需進一步純化便可用于階段4。階段3:4-三甲基甲硅垸氧基甲基-苯胺邊攪拌邊在4-氨基芐醇(16.0g，13.0mmol，1.0eq)的THF(400mL)溶液中加入三乙胺(18.9mL，13.6mmol，1.05eq)，然后加入三甲基氯硅烷(17.2mL，13.6mmol，1.05eq)。室溫氮氣下攪拌反應混合物過夜。在真空下蒸發(fā)THF并將混合物在乙酸乙酯(300mL)和水(300mL)之間分配。分離有機相，含水層用乙酸乙酯(2x100mL)重新萃取。合并的有機相用鹽水(2xl50mL)洗滌，干燥(MgS04)，過濾并真空濃縮。所得產(chǎn)物為黃色油狀物(24.0g，95%產(chǎn)率)，該產(chǎn)物無需進一步純化便可用于階段4。階段4:辛二酸(Octanedioicacid)(4-羥甲基-苯基)-酰胺(l-異丁氧基乙氧基)-酰胺<formula>formulaseeoriginaldocumentpage99</formula>在DMF(140mL)中一起攪拌7-(1-異丁氧基-乙氧基氨甲?；?-庚酸(5.0g，1.72mmol，1.0eq)和4-三甲基甲硅烷氧基甲基-苯胺(3.38g，1.72mmol，1.0叫)。在混合物中加入PyBroP(10.5g，2.25誦ol，1.3eq)和DiPEA(3.9mL，2.25腿ol，1.3eq)。室溫下在氮氣下攪拌反應物過夜。加入乙酸乙酯(200mL)和水(200mL)。將水相分離并用乙酸乙酯(2x100mL)重新萃取。合并的有機相用水(2x50mL)和鹽水(50mL)洗滌，然后干燥(MgS04)，過濾并真空濃縮。將粗產(chǎn)物溶于最小量的乙酸乙酯并通過二氧化硅墊純化。產(chǎn)物通過二氧化硅用乙酸乙酯洗滌，并收集在100mL的錐形瓶中，直到LCMS分析顯示洗脫終止。純化得到黃色油狀物(3.59g，53%產(chǎn)率)。LCMS純度61%，m/zWClvr+Nar階段5:辛二酸(4-甲酰-苯基)-酰胺(l-異丁氧基-乙氧基)-酰胺o將辛二酸(4-羥甲基-苯基)-酰胺(1-異丁氧基乙氧基)-酰胺(100mg，0.025mmol，l.Oeq)溶于DCM(5mL)。在反應混合物中加入Mn02(286mg，0.33mmol，13.0叫)并室溫攪拌1.5小時。將反應混合物通過硅藻土過濾并用DCM洗滌，然后蒸發(fā)溶劑以得到黃色油狀物(78.6mg，79。/。產(chǎn)率)LCMS純度53%，m/z415[M"+Na]+。產(chǎn)物無需進一步純化便可用于下面的步驟。階段6:(RH4-[7-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲酰萄-庚酰氨基]-芐基氨基)-苯基-乙酸環(huán)戊酯將辛二酸(4-甲酰-苯基)-酰胺(l-異丁氧基-乙氧基)-酰胺(276mg，0.70mmol，1.0eq)和D-苯基甘氨酸環(huán)戊酯(170mg，0.77mmol，1.1eq)在DCE(15mL)中攪拌10分鐘。加入乙酸(65pL)并攪拌2分鐘。加入三乙酰氧基硼氫化鈉(448mg，0.21mmol，3.0eq)并將反應混合物在氮氣下室溫攪拌1小時。加入碳酸氫鈉以淬滅反應。然后加入DCM并分離有機相。含水層用DCM重新萃取，將有機層合并，干燥(MgS04)，過濾并真空濃縮以得到粗產(chǎn)物(100mg，24%)，LCMS純度94.0。/。，m/z496[m++H]+，該產(chǎn)物無需進一步驟7:(R)-[4-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-芐基氨基]-苯基-乙酸環(huán)戊酯(83)將(RH4-[7-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲?；?-庚酰氨基]-芐基氨基卜苯基-乙酸環(huán)戊酯(50mg，0.08mmol，1eq)溶于DCM(0.5mL)并與4MHC1—起在二嗯烷(0.2mL)中攪拌30分鐘。將所得鹽濃縮，溶于甲醇并通過制備型HPLC純化以得到化合物(83)。LCMS純度940/。，m/z496[Ivr+H]+，iH蘭R(300應z，MeOD)，5:1.41-1.95(16H,m，8xCH2)，2.15-2.17(2H，m，CH2)，2.40(2H，t，J=7.2Hz，CH2)，4.16(2H，q，J二13.5Hz，CH2)，5.12(1H，s，CH)，5.27-5.30(1H，m，CH)，7.40(2H，d，J=8.7Hz，Ar-H)，7.50-7.56(5H，m，Ar-H)，7.67(2H，d，J=8.7Hz，Ar-H)。階段8:(R)-[4-(7-羥基氨甲酰基-庚酰氨基)-芐基氨基]-苯基-乙酸(84)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage101</formula>在CHR-003644(50mg，0.008mmol，1.0叫)的THF(2mL)和水(2mL)的溶液中加入LiOH(8.0mg，0.033mmol，4.0eq)。反應物在氮氣下于40。C攪拌過夜。在真空下蒸發(fā)THF，所得水性反應溶劑用乙酸乙酯洗滌。將溶液酸化至pH3并真空濃縮產(chǎn)物。將所得鹽溶于甲醇并通過制備型HPLC純化產(chǎn)物以得到化合物(84)。LCMS純度97%，m/z428[M"+H]+，'HNMR(300畫z，MeOD)，S:1.39-1.41(4H，m，2xCH2)，1.62-1.74(4H，m，2><CH2)，2.13-2.15(2H，m，CH2)，2.40(2H，t，J=7.5Hz，CH2)，4.14(2H，q，J=12.9Hz，CH2)，5.06(1H，s，CH)，7.39(2H，d，J=8.4Hz，Ar-H)，7.54(5H，s，Ar-H)，7.67(2H，d，J=8.7Hz，Ar-H)以下化合物按照與化合物(83)和化合物(84)類似的方法采用合適的中間體制備。(S)-2-[4-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-芐基氨萄-4-甲基-戊酸環(huán)戊酯(85)LCMS純度97%，m/z476pvT+H]+，^NMR(300顧z，MeOD)，5:0.98-1.03(6H，m，2xCH3)，1.41-1.42(4H，m，2xCH2)，1.71-1.96(14H，m，7xCH2)，2.10-2.15(2H，m，CH2)，2,40(2H，t，J=7.2Hz，CH2)，3.96-4.01(1H，m，CH)，4.15-4.26(2H，m，CH2)，4.81(1H，s，CH)，5.31-5.34(1H，m，CH)，7.44(2H，d，J=8.7Hz，Ar-H)，7.70(2H，d，J=8.7Hz，Ar-H)(S)-環(huán)己基-[4-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-芐基氨萄-乙酸(87)LCMS純度95%，m/z434[Iv^+H]+，！HNMR(300應z，MeOD)，S:1.23-1.96(18H，m，9xCH2)，2.10-2.15(2H，m，CH2)，2.39(2H，m，CH2)，3.71(1H，m，CH)，4.12(2H，q，J=7.2Hz，CH2)，4.80(1H，s，CH)，7.43(2H，d，J=8.4Hz，Ar-H)，7.68(2H，d，J=8.7Hz，Ar-H)(S)-3-叔丁氧基-2-4-(7-羥基氨甲酰基-庚酰氨基)-芐基氨基-丁酸環(huán)戊酯(88)LCMS純度83%，m/z520[!Vr+H]+，tHN證(300MHz，MeOD)，S:1.19(9H，s，3xCH3)，1.29(3H，d，J=7.8Hz，CH3)，1.37-1.41(4H，m，CH2)，1.64-1.89(12H，m，CH2)，2.09-2.15(2H，m，CH2)，2.40(2H，t，J=7.2Hz，CH2)，3.36-3.37(IH，m，CH)，3.70-3.71(1H，m，CH)，4.24-4.27(2H，m，CH2)，5.17-5.19(1H，m，CH)，7.42(2H，d，J=6.9Hz，Ar-H)，7.68(2H，d，J=8.4Hz，Ar-H)(S)-3-叔丁氧基-2-[4-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-芐基氨萄-丙酸環(huán)戊酯(89)LCMS純度95%，m/z506[M++H]+，^NMR(300應z，MeOD)，8:1.23(9H，s，C(CH3)3)，1.36-2.09(16H，m，8xCH2)，1.66(2H，t，J=7.7Hz，CH2)，1.75(2H，t，J=7.4Hz，CH2)，2.11(2H，t，J=7.4Hz，CH2)，2.40(2H，t，J=7.3Hz，CH2)，3,92(2H，m，CH2)，4.16(1H，m，CH)，4.26(2H，s，CH2)，5.32(1H，m，CH)，7.45(2H，d，J=8.5Hz，ArH)，7.67(2H，dd，J=3.2，8.3Hz，ArH)。(S)-3-叔丁氧基-2-[4-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-芐基氨萄-丙酸(90)LCMS純度95%，m/z438[M^H]+，^NMR(300固z，MeOD)，S:1.25(9H，s，C(CH3)3)，1.39-1.42(4H，m，2xCH2)，1.62-1.69(4H，m，2xCH2)，2.08-2.17(2H，m，CH2)，2.40(2H，t，J=7.5Hz，CH2)，3.85-3.96(2H，m，CH2)，4.01-4.04(1H,m，CH)，4.26(2H，s，CH2)，7.46(2H，d，J=8.4Hz，Ar隱H)，7.68(2H，d，J=8.4Hz，Ar鄰(S)-2-[4-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨萄-節(jié)基氨萄-3-苯基-丙酸環(huán)戊酯(91)LCMS純度95。/。，m/z510[ivT+H]+，&NMR(300應z，MeOD)，S:1.17-2.43(22H，m，llxCH2)，4.19-4.30(2H，m，CH2)，5.08(1H，s，CH)，5.20-5.26(1H，m，CH)，7.24-7.71(9H，m，Ar-H)化合物(86)用另一種方法制備，改變的條件在下面詳述步驟6b:(8)-環(huán)己基-{4-[7-(1-異丁氧基-乙氧基氨甲?；?-庚酰氨基]-芐基氨基}-乙酸環(huán)戊酯將辛二酸(4-甲酰-苯基)-酰胺(1-異丁氧基-乙氧基)-酰胺(220mg，0.056mmol，1.0eq)和L-環(huán)己基-甘氨酸環(huán)戊酯(138.9mg，0.062mmol，1.1eq)在甲醇(8mL)中室溫攪拌過夜。加入氫硼化鈉(31.8mg，0.084mmol，1.5eq)并將反應混合物攪拌15分鐘。將反應混合物轉(zhuǎn)移到冰浴中并加入2滴氫氧化鈉(2M)。加入二乙醚并分離有機相。含水層用二乙醚重新萃取，將有機層合并并用鹽水洗滌。然后將有機相干燥(MgS04)，過濾并真空濃縮以得到粗材料，該材料無需進一步純化便可用于下一步驟。步驟L(8)-環(huán)己基-[4-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-節(jié)基氨基]-乙酸環(huán)戊酯(86)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage103</formula>將步驟6b(50mg，0.083mmol，1eq)的材料溶于DCM/甲醇(2mL:2mL)并與TFA(1.0mL)—起攪拌2小時。將所得鹽濃縮，溶于甲醇并通過制備型HPLC純化以得到化合物(86)。LCMS純度100。/。，m/z502[VT+H]+，^NMR(300MHz，MeOD)，5:1.28-1.98(26H，m，13xCH2)，2.10-2.15(2H，m，CH2)，2.40(2H，t，J=7.8Hz，CH2)，3.81(1H，d，J=3.9Hz，CH)，4.21(2H，m，CH2)，5.01(1H，s，CH)，5.23-5.25(1H，m，CH)，7.43(2H，d，J=8.4Hz，Ar-H)，7.68(2H，d，J=8.7Hz，Ar-H)合成92和93<formula>formulaseeoriginaldocumentpage104</formula>階段l:4-(3-硝基-苯氧基)-丁酸甲酯在3-硝基苯酚(8.35g，60mmol)的DMF(50ml)溶液中加入K2C03(16.56g，12Ommo1)和1,4-溴代丁酸甲酯(11.95g，66mmo1)。將反應物室溫攪拌16小時。用乙酸乙酯和水稀釋反應物。將有機相分離并用水(2x200ml)洗滌。有機相用Na2S04干燥并真空濃縮。通過層析(乙酸乙酯:庚烷，l:9)分離所需的醚，其為淡黃色固體(12.2g，85%產(chǎn)率)。LCMS純度100%，m/z240pvT+H]+。階段2:4-(3-氨基-苯氧基)-丁酸甲酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage104</formula>將階段1的硝基酯(250mg，lmmol)溶于乙醇(3ml)。加入Pd/碳(40mg)并將反應物在氫氣(氣球壓力)下攪拌16小時。將反應混合物通過硅藻土過濾。硅藻土墊用乙醇洗滌并將合并的有機餾分真空濃縮以得到橙色油狀的所需產(chǎn)物(210mg，100%產(chǎn)率)。LCMS純度89M，m/z210[M++H]+。苯胺無需進一步純化便可用于下一階段。階段3:偶聯(lián)到樹脂<formula>formulaseeoriginaldocumentpage104</formula>將辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(8g，7.52mmo1，以0.94mmol/g加載)在DCM/DMF(80ml/80ml)中溶脹。在燒瓶中加入PyBOP(11.8g，22.6mmol)和二異丙基乙胺(13.1ml，75.2mmol)，然后加入4-(3-氨基-苯氧基)-丁酸甲酯(4.73g，22.6mmol)。將反應物室溫振蕩72小時然后進行標準洗滌和干燥。階段4:酯水解將階段3的樹脂(9.5g)懸浮于THF/MeOH(34ml/34ml)。加入NaOH(1.4M，水溶液，34ml)并將反應物室溫振蕩16小時。樹脂用標準洗滌過程洗滌，然后空氣干燥。階段5:偶聯(lián)氨基酸酯將階段4的樹脂(2.Ig)懸浮于DCM/DMF(20ml/20ml)。依次加入PyBOP(3.1g，5.92mmo1)、N-苯基甘氨酸環(huán)戊酯(2.4g，5.92mmol)和二異丙基乙胺(3.4ml，19.7mmo1)并將反應物室溫振蕩72小時。對樹脂進行標準洗滌并干燥。階段6:(S)-H-[3-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-苯氧基]-丁酰氨基卜苯基-乙酸環(huán)戊酯(92)92將階段5的結(jié)合樹脂的環(huán)戊酯(l.lg)與2e/。TFA/DCM(10ml)—起振蕩10分鐘，然后過濾樹脂并在室溫減壓蒸發(fā)溶劑。重復該過程(3次)，合并的粗產(chǎn)物通過制備型HPLC純化以得到化合物(92)(114mg)。LCMS純度99%,m/z568[TvT+H]+，^NMR(400麗z，MeOD)，S:1.40(4H，m，2xCH2)，1.45-1.90(13H，m，烷基)，2.10(4H，m，2xCH2)，2.40(2H，t，CH2)，2.50(2H，m，CH2)，4.00(2H,m，CH2)，5.15(1H，m，)，5.40(1H，s，NHCHCO)，6.65(1H，m，Ar)，7.15(1H，m，Ar)，7.20(1H，t，Ar)，7.30(1H，s，Ar)，7.40(5H，s，Ar)。階段7:(S)-(4-[3-(7-羥基氨甲酰基-庚酰氨基)-苯氧基]-丁酰氨基卜苯基-乙酸(93)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage106</formula>將階段6環(huán)戊酯樹脂(500mg)懸浮于THF(15ml)。在懸浮液加入NaOH(1.4M水溶液，1.6ml)并將反應物室溫振蕩16小時。除去濾液，將樹脂洗滌并干燥，然后切除。與2。/。TFA/DCM(5ml)—起振蕩IO分鐘以進行有效切除，然后過濾樹脂并在室溫減壓蒸發(fā)溶劑。重復該過程(3次)，合并的粗產(chǎn)物通過制備型HPLC純化以得到化合物(93)(62mg)。LCMS純度99%,m/z500[M^H]+，'HNMR(400固z，MeOD)，5:1.40(4H，m，2xCH2),1.60-1.80(4H，m，烷基)，2.10(4H，m，2><CH2)，2.40(2H，t，CH2)，2.50(2H，t，CH2)，4.00(2H，m，CH2)，5.45(1H,s，NHCgCO),6.65(1H，d，Ar)，7.10(1H，m，Ar)，7.20(1H't，Ar)'7.25(1H，s，Ar)，7.30-7.45(5H，m，Ar)。合成94和95<formula>formulaseeoriginaldocumentpage106</formula>階段l:形成氯甲酸3-硝基-芐基酯在3-硝基芐醇(10g，65mmol)的二嗯垸(無水，100ml)溶液中加入氯甲酸三氯甲酯(9.47ml，78mmol)。反應物在氮氣下于75"C加熱16小時。蒸發(fā)溶劑，將殘余物重懸于二嚼烷并蒸發(fā)。重復該過程(3次)。粗制氯甲酸酯無需進一步純化便可用于下一階段。階段2:(S)-2-(3-硝基-芐氧基羰基氨基)-3-苯基-丙酸環(huán)戊酯將L-Phe-環(huán)戊酯的TsOH鹽(9.42g，23mmol)懸浮于DCM(40ml)。加入三乙胺(6.5ml，47mmol)并將反應物室溫攪拌5分鐘。將溶于DCM(10ml)的階段1的氯甲酸酯(5g，23mol)逐滴加入反應混合物并冷卻(冰浴)。將反應物室溫攪拌16小時。除去溶劑并將殘余物溶于EtOAc(100ml)，用水(50mlx3)洗滌并干燥(Na2SO4)，然后真空濃縮。粗材料通過層析(EtOAc凍垸，l:9)純化以得到所需的氨基甲酸酯(6.4g，67%產(chǎn)率)。m/z413[MVh;T階段3:(S)-2-(3-氨基-芐氧基羰基氨基)-3-苯基-丙酸環(huán)戊酯將階段2的硝基氨基甲酸酯(6.4g，15.5mmol)溶于乙醇(64ml)。加入二水合氯化錫(17.5g，77mmol)然后將反應物室溫攪拌16小時。將溶劑蒸發(fā)并將殘余物溶于EtOAc(60ml)。加入飽和酒石酸鈉鉀溶液(60ml)，然后加入加入飽和碳酸氫鈉溶液(120ml)。將此雙相溶液攪拌15分鐘。分離有機層并用EtOAc(60mlxl)萃取水相。將有機層合并，干燥并蒸發(fā)溶劑以得到粗產(chǎn)物，粗產(chǎn)物通過層析(EtOAc:庚垸1:3—1:1)純化。分離所需產(chǎn)物(3.5g,59%產(chǎn)率)。LCMS純度100。/。，m/z383[VT+H;T。階段4:偶聯(lián)到樹脂將辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(2.0g，1.88mmo1，以0.94mmol/g加載)在DMF(20ml)中溶脹。加入PyBOP(2.93g，5.64mmol)和二異丙基乙胺(3.25ml，18.8mmo1)。加入溶于DCM(20ml)的階段3的苯胺基氨基甲酸酯(1.8g，4.7mmol)并將反應物振蕩4天，然后除去濾液，對樹脂進行標準洗滌并空氣干燥。階段5:(S)-2-[3-(7-羥基氨甲酰基-庚酰氨基)-節(jié)氧基羰基氨基]-3-苯基-丙酸環(huán)戊酯(94)94將階段4的結(jié)合樹脂的環(huán)戊酯(2g)在2。/。TFA/DCM(15ml)中振蕩10分鐘，然后過濾樹脂并在室溫下減壓蒸發(fā)溶劑。重復該過程(3次)，合并的粗產(chǎn)物通過制備型HPLC純化以得到化合物(94)。LCMS純度95%,m/z554[IVT+H],!HNMR(400MHz，MeOD)，S:1.30(4H，m，2xCH2)，1.40-1.卯(13H,m，烷基)，2.00(2H，t，CH2)，2.30(2H，t，CH2)，2.90(2H，ddd，CH2)，3.80(1H，m)，4.25(1H,dd，NHCgCO)，4.90(2H，s，CH2)，5.05(IH，m)，5.35(1H，m)，6.95(1H，d，Ar)，7.05-7.25(6H，m，Ar)，7.35-7.75(2H，m，Ar)。階段6:(S)-2-[3-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-芐氧基羰基氨基]3-苯基-丙酸(95)95將化合物(94)(100mg，0.18mmol)溶于THF(lml)并加入2MNaOH(lml)。將反應瓶振蕩4小時，然后用氮氣氣流除去THF。水性殘余物通過制備型HPLC純化以得到化合物(95)(62mg)。LCMS純度95%，m/z486[M^H]+，&NMR(400固z，MeOD)，5:1.35(4H，m，2><CH2)，1.55-1.75(4H，m，烷基)，2.10(2H，t，CH2)，2.35(2H，t，CH2)，2.95(2H，dd，CH)，3.20(1H，dd，CH)，4.45(1H，dd，NHCgCO)，5.00(2H，s，CH2)，7.05(1H，d，Ar)，7.20-7.35(6H,m，Ar)，7.55(2H，m,Ar)。合成化合物(96)和化合物(97)R=環(huán)戊基96R=H97階段1:(S)-7-硝基-l，2,3，4-四氫-異喹啉-3-羧酸按照TettLetts42，2001，3507的描述制備。階段2:(S)-7-硝基-3,4-二氫-lH-異喹啉-2，3-二羧酸-2-叔丁酯將(S)-7-硝基-l,2,3,4-四氫-異喹啉-3-羧酸(7g，31.5mmol)溶于THF:7_K(1:1,350ml)。加入K2C03(5.2g，37mmol)，然后加入boc酸酐(13.7g，63mmol)并將溶液在4(TC加熱1小時。通過蒸發(fā)除去THF，將含水層調(diào)至pH-7，然后用EtOAc萃取。有機層用0.1MHC1(X3)洗滌并用Na2S04干燥，然后真空濃縮。柱層析(EtOAc:庚垸2:3—EtOAc)后得到所需N-保護的產(chǎn)物(7.5g，74%)，LCMS純度92。/。，未觀察到分子離子階段3:(S)-3-((S)-l-環(huán)戊氧基羰基-3-甲基-丁基氨甲?；?-7-硝基-3,4-二氫-lH-異喹啉-2-羧酸叔丁酯將(S)-7-硝基-3,4-二氫-lH-異喹啉-2，3-二羧酸-2-叔丁酯(2.5g，7.76mmol)溶于DCM(100ml)。加入HOBt(1.16g，8.53mmo1)，加入L-亮氨酸環(huán)戊酯(3.19g，8.53mmo1)，然后加入三乙胺(2.38ml，n.lmmol)。加入EDCI.HC1(1.46g，8.5mmol)并將反應物室溫攪拌16小時。在反應物中加入DCM(100ml)，有機層用水(3x300ml)洗滌，用Na2SO4干燥并在真空下除去溶劑。粗產(chǎn)物通過層析(EtOAc:庚烷1:2—EtOAc)純化以得到所需產(chǎn)物3.14g(82%產(chǎn)率)，LCMS純度100%,m/z504[IVT+Hf階段4:(S)-7-氨基-3-((S)-l-環(huán)戊氧基羰基-3-甲基-丁基氨甲酰基)-3,4-二氫-lH-異喹啉-2-羧酸叔丁酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage110</formula>將(3)-3-((3)-1-環(huán)戊氧基羰基-3-甲基-丁基氨甲?；?-7-硝基-3,4-二氫-lH-異喹啉-2-羧酸叔丁酯(3.14§，6.24mmol)和Pd/碳(0.4g)懸浮于EtOAc(20ml)。將反應物在氫氣(氣球壓力)下攪拌16小時。溶液通過硅藻土墊過濾并除去溶劑。粗產(chǎn)物(3.04g)無需進一步純化便可用于下一步驟。LCMS純度83。/。，m/z474[1Vf+H]十階段5:偶聯(lián)到樹脂將辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(2,2g，以0.94mmol/g加載)在DCM/DMF(l:l，80ml)中溶脹。加入PyBOP(3.20g，6.15mmol)和二異丙基乙胺(3.54ml，20.7mmo1)。加入溶解在DMF(40ml)的階段3的苯胺基酰胺(3.04g，6.43mmol)并將反應物振蕩3天，然后除去濾液，對樹脂進行標準洗滌并空氣干燥。階段6:(S)-2-([(S)-7-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-l,2,3,4-四氫-異喹啉-3-羰基]-氨基}-4-甲基-戊酸環(huán)戊酯(96)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage110</formula>將階段5的結(jié)合樹脂的環(huán)戊酯(600mg)與2%TFA/DCM(8ml)—起振蕩30分鐘，然后濾去樹脂并在室溫減壓蒸發(fā)溶劑。粗產(chǎn)物通過制備型HPLC純化以得到(8)-2-{[(8)-7-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-1,2，3，4-四氫-異喹啉-3-羰基]-氨基}-4-甲基-戊酸環(huán)戊酯(17.5mg)。除了切除樹脂外，還除去boc基團。LCMS純度98。/。，m/z545PvT+H]+，'HNMR(400顧z，MeOD)，5:0.85-0.88(6H，2xd，J=6.4Hz，J=6.5Hz，2xCH3)，1.30(4H，m，烷基)，1.50-1.65(13H，m，烷基)，1.80(2H，m，CH2)，1.95(2H，t，CH2)，2.25(2H，t，CH2),3.00(1H，m，CH)，3.25(IH，m，CH)，4.10(1H，m，CH)，4.25(2H，s，CH2)，4.29(1H，m，CH)，5.10(1H，m，CH)，7.11(IH，d,J=8.4Hz'Ar)，7.25(1H,d，J=8.3Hz，Ar)，7,55(2H，m，Ar)。階段7:(S)-2-U(S)-7-(7-羥基氨甲?；?庚酰氨基)-l，2,3，4-四氫-異喹啉-3-羰基]-氨基卜4-甲基-戊酸(96)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage111</formula>將階段5的環(huán)戊酯樹脂(1.55g)懸浮于THF/MeOH(10ml/10ml)。在懸浮液中加入NaOH(1.4M水溶液，5ml)并將反應物室溫振蕩16小時。除去濾液，將樹脂洗滌(標準洗滌)并干燥，然后切除。與2。/。TFA/DCM(8ml)—起振蕩30分鐘以進行有效切除(600mg樹脂)，然后過濾樹脂并在室溫減壓蒸發(fā)溶劑。粗產(chǎn)物通過制備型HPLC純化以得到化合物(97)(73.4mg)。除了切除樹脂外，還除去boc基團。LCMS純度％%,m/z477pvT+H]+，'HNMR(400羅z，MeOD)，5:0.98-1.02(6H，2xd，J=6Hz,J=6.1Hz，2xCH3)，1.40(4H，m，烷基)，1.60-1.80(7H，m，烷基)，2.10(2H，t,J=7.4Hz，CH2)，2.39(2H，t，7.6Hz，CH2)，3.15(1H，dd，J=12.5Hz，J=16.6Hz，CH)，3.45(1H，dd，J=4.9Hz，J=17Hz，CH)，4.00(1H，s，CH)，4.20(1H，dd，J=4.7Hz，J=12.2Hz，CH)，4.40(2H，m，CH2)，4.55(1H，dd，J=4.7Hz，J=10Hz，CH)，7.25(1H，d，J=8.4Hz，Ar)，7.25(1H，d，J=8Hz，Ar)，7.55(1H，J=7Hz，Ar)。合成化合物(98)和化合物(99)丫m<formula>formulaseeoriginaldocumentpage112</formula>階段1:(S)-4-甲基-2-(4-硝基-苯甲酰氨基)-戊酸環(huán)戊酯將L-亮氨酸環(huán)戊酯的TsOH鹽(7.98g，21.51mmol)溶于THF(40ml)并加入三乙胺(6ml，21.5mmo1)。分批加入4-硝基苯甲酰氯(4g，21.5mmol)并用冰浴冷卻。將反應物室溫攪拌16小時然后蒸發(fā)至干。將殘余物溶于DCM(100ml)并用飽和碳酸氫鈉(3xl00ml)、1MHC1(3xl00ml)和鹽水洗滌，干燥(Na2S04),并在真空下除去溶劑以得到5.25g所需產(chǎn)物(70%產(chǎn)率)，該產(chǎn)物無需進一步純化便可用于下一步驟，LCMS純度100%，m/z349[M^Hf階段2:(S)-2-(4-氨基-苯甲酰氨基)-4-甲基-戊酸環(huán)戊酯將階段1的硝基酰胺(5.25g，15.1mmol)溶于乙醇(100ml)。加入Pd/碳(200mg)并將反應物在氫氣(氣球壓力)下室溫攪拌16小時。將反應混合物通過硅藻土過濾并蒸發(fā)以得到3.9g所需的胺酰胺(amineamide)(81。/。產(chǎn)率)，該物質(zhì)無需進一步純化便可用于下一步驟，LCMS純度100%，m/z319[Nf+Hf階段3:偶聯(lián)到樹脂將辛二酸衍生的Wang羥胺樹脂(1.6g，以1.8mmoI/g加載)在DCM(無水，20ml)中溶脹。逐滴加入l-氯-AUV-2-三甲基丙烯胺(1.15ml，8.64mmol)，然后室溫振蕩1小時。加入(S)-2-(4-氨基-苯甲酰氨基)-4-甲基-戊酸環(huán)戊酯(2.75g，8.64mmol)和三乙胺(2.4ml，17.63mmol)并將反應物室溫振蕩16小時。將樹脂洗滌(標準洗滌)并空氣干燥。階段4:(S)-2-[4-(7-羥基氨甲酰基-庚酰氨基)-苯甲酰氨基]-4-甲基-戊酸環(huán)戊酯(98)將階段3的結(jié)合樹脂的環(huán)戊酯與2%TFA/DCM(10ml)—起振蕩10分鐘，然后過濾樹脂并于室溫減壓蒸發(fā)溶劑。重復該過程(3次)，合并的粗產(chǎn)物通過制備型HPLC純化以得到化合物(98)(36mg)。LCMS純度9P/。，m/z490[M++H]+，NMR(400麗z，MeOD)，5:0.80-0.95(6H，2xCH3)，1.25(4H，m，烷基)'1.40-1.85(15H，m，'烷基)，2.00(2H，t，CH2)，2.30(2H，t，CH2)，4.45(1H，m，CH)，5.05(1H，m，CH)，7.60(2H，d，Ar)，7.75(2H，d，Ar)。階段5:(S)-2-[4-(7-羥基氨甲?；０被?-苯甲酰氨基]-4-甲基-戊酸(99)99將化合物(98)(21mg，0.043mmol)溶于THF(lml)并加入2MNaOH(lml)。將反應瓶振蕩16小時，然后在溶液表面用氮氣吹掃以除去THF。水性殘余物通過制備型HPLC純化以得到化合物(99)(5,2mg)。LCMS純度92%，m/z422[M"+H]+，'HNMR(400畫z，MeOD)，5:0.95-1.05(6H，m，2xCH3)，1.30-1.50(4H，m，烷基)，1.55-1.85(7H，m，烷基)'2.10(2H，t，CH2)，2.40(2H，t，CH2)，4.65(1H，m，CH)，7.65(2H，d，Ar)，7.80(2H，d，Ar)。合成化合物(100)和化合物(101)HR=環(huán)戊基100R=H101階段1:5-((E)-2-乙氧基羰基-乙烯基)-lH』引哚-2-羧酸在微波試管中加入5-溴吲哚-2-羧酸(400mg，1.66mmol)和三-0-甲苯基膦(96mg,0.32mmo1)。加入丙烯酸乙酯(0.56ml，5.6mmol)、Et3N(0.92ml，6.6mmol)、乙腈(2.5ml)和Pd(OAc)2(40mg,0.18mmo1)。反應物放置在150W、9CTC的CEM微波中處理30分鐘，斜坡時間(ramptime)為5分鐘。加入EtOAc并通過硅藻土過濾反應混合物。硅藻土墊用DCM洗滌，除去合并的有機組分以得到黃色固體。將該固體重溶于DCM并用飽和碳酸氫鈉萃取。含水層用DCM和二乙醚洗滌。水性堿性層用2MHC1酸化(pt^5)并將產(chǎn)物萃取入EtOAc。除去溶劑以得到所需產(chǎn)物(370mg，86%產(chǎn)率)。LCMS純度86%，m/z260[Nf+Hf階段2:5-((E)-2-乙氧基羰基-乙烯基)-lH-吲哚-2-羧酸將5-((E)-2-乙氧基羰基-乙烯基)-lH-吲哚-2-羧酸(430mg，1.66mmol)溶于EtOAc(100ml)。加入Pd/碳(100mg)并將反應物在氫氣(氣球壓力)下攪拌18小時。將反應混合物通過硅藻土墊過濾并用EtOAc洗滌。除去溶劑以得到所需產(chǎn)物，該產(chǎn)物無需進一步純化便可用于下一步驟(0.47g)。LCMS純度92%，m/z262|>^+司+階段3:3-{2-[6-(四氫-吡喃-2-基氧基氨甲?；?-己基氨甲?；鵠-舊-吲哚-5-基}-丙酸乙酯將5-((E)-2-乙氧基羰基-乙烯基)-lH-吲哚-2-羧酸(0.427g，1.6mmol)溶于無水DMF(20ml)。加入EDCI.HC1(0.38g，2mmo1)、Et3N(0.59ml，4.3mmol)、HOBt(0.27g，2mmol)和7-氨基庚酸(四氫吡喃-2-基氧基)酰胺*(0.4g，1.6mmo1，溶于20ml無水DMF)并將反應物在氮氣下室溫攪拌16小時。加入水，將反應混合物酸化至pH-6-7(10n/。檸檬酸)并用DCM萃取。有機層用10%檸檬酸和飽和碳酸氫鈉(><2)洗滌。溶劑在真空下除去以得到粗產(chǎn)物，粗產(chǎn)物通過層析(EtOAc:己烷1:2—EtOAc)純化以得到黃色固體狀的所需產(chǎn)物(550mg，69%產(chǎn)率)。LCMS純度93%，m/z488[W+Hf階段4:3-(2-[6-(四氫-妣喃-2-基氧基氨甲酰基)-己基氨甲?；鵠-lH-吲哚-5-基)-丙酸將3-{2-[6-(四氫-妣喃-2-基氧基氨甲?；?-己基氨甲?；鵠-1&吲哚-5-基}-丙酸乙酯(550rng，1.13mmol)溶于THF/甲醇(50ml/25ml)。加入1.4MNaOH溶液(50ml)并將反應物室溫攪拌4小時。將溶劑減少至約50%體積，加入1MHCl使pH為6-7?；旌衔镉肈CM萃取并用EtOAc進一步萃取。合并的有機層用Na2S04干燥并在真空下除去溶劑以得到357mg黃色粉末狀的所需產(chǎn)物(69。/。產(chǎn)率)，該產(chǎn)物無需進一步純化便可用于下一步驟。LCMS純度94。/。，m/z460[M"+H;T階段5:(3)-3-苯基-2-(3-{2-[6-(四氫-吡喃-2-基氧基氨甲酰基)-己基-氮甲?；鵠-111-吲哚-5-基}-丙酰氨基)-丙酸環(huán)戊酯將3-(2-[6-(四氫-吡喃-2-基氧基氨甲酰基)-己基氨甲?；鵠-lH-吲哚-5-基卜丙酸(0.357g'0.78mmol)溶于DCM/DMF(20m脂ml)。力口入EDCI.HC1(0.163mg,0.86mmo1)、三乙胺(0.24ml，1.7mmo1)、HOBt(0.116mg，0.88mmol)禾卩L-苯丙氨酸環(huán)戊酯的TsOH鹽(0.346mg，0.88mmo1)，并將反應混合物在氮氣下室溫攪拌16小時。減小溶劑體積(約10ml)，加入DCM并用水(x3)洗滌有機層。將有機層干燥(Na2S04)并除去溶劑以得到所需產(chǎn)物(500mg，95%產(chǎn)率)，該產(chǎn)物無需進一步純化即可使用。LCMS純度77。/。，m/z675[Nf+H]+階段6:(8)-2-{3-[2-(6-羥基氨甲酰基-己基氨甲?；?-1^吲哚-5-基]-丙酰氨基}-3-苯基-丙酸環(huán)戊酯(100)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage116</formula>將(S)-3-苯基-2-(3j2-[6-(四氫-吡喃-2-基氧基氨甲?；?-己基-氨甲酰基]-lH-吲哚-5-基}-丙酰氨基)-丙酸環(huán)戊酯(200mg.0.297mrno1)在TFA/DCM/MeOH(1.5ml/15ml/15ml)中室溫攪拌3.5小時。再加入TFA(0.3ml)并將反應物再攪拌30分鐘。將溶液真空濃縮，重懸于DCM并除去溶劑(x3)。粗材料通過制備型HPLC純化以得到純的化合物(100)(19.3mg)，LCMS純度100%，m/z591[M^H]+，^NMR(4(K)MHz，MeOD)，S:1.27-1.70(16H，m，烷基)，1.97(2H，t，CH2),2.40(2H，t，J=7.84Hz，CH2)，2.76-2.85(4H，m，2xCH2)，3.25(2H，t，J=7Hz，CH2)，4.41(1H，m，麗CHCO，4.95(1H，m，CH)，6.85(1H，s，CH)，6.95(3H，m，Ar)，7.05(3H，m，Ar)，7.20-7.26(2H，s+d,J=8.5Hz，Ar)階段7:(3)-2-{3-[2-(6-羥基氨甲酰基-己基氨甲?；?-111-吲哚-5-基]-丙酰氨基}-3-苯基-丙酸(lOl)將化合物(100)(80mg,0.14mmol)溶于THF/MeOH(lmV0.5ml)并加入1.4MNaOH(0.5ml)。將反應物室溫攪拌2小時。在溶液表面用氮氣氣流吹掃以除去THF，殘余物通過制備型HPLC純化以得到化合物(101)(34.9mg)，LCMS純度95%,m/z523[M^H]+，iHNMR(400應z，MeOD)，S:1.35-1.50(4H，m，烷基)，1.60-1.75(4H，m，烷基)，2.15(2H，brt，CH2)，2.55(2H，brt，CH2)，2.95(3H，m，CH+CH2)，3.10(1H，dd，CH)，4.65，(1H，m，NHCHCO)，7.00-7.15(7H，m，Ar)，7.35-7.41(2H，m，Ar)*制備7-氨基庚酸(四氫吡喃-2-基氧基)酰胺階段1:6-(四氫-吡喃-2-基氧基氨甲?；?-己基]-氨基甲酸9H-芴-9-基甲酯在7-(9H-芴-9-基氧基羰基氨基)庚酸(lg，2.72mmol)的無水DCM/THF(15ml/15ml)溶液中加入EDCI.HCl(627mg，3.27mmo1)、HOBt(442mg，3.27mmol)和O陽(四氫-吡喃-2-基)-羥胺(383mg，3.27mmol)并在氮氣下攪拌48小時。加入EDCI.HC1(260mg，1.36mmol)、HOBt(184mg，1.36mmol)和0隱(四氫-吡喃-2-基)-羥胺(159mg，1.36mmo1)并將反應物繼續(xù)攪拌24小時。反應混合物用稀DCM(IOOml)、水(3xl00ml)和鹽水(100ml)洗滌，干燥(Na2S04)，過濾并真空濃縮。通過層析(MeOH:DCM2:98)純化得到白色固體(1.03g，81%)。階段2:7-氨基-庚酸四氫-吡喃-2-基酯將6-(四氫-吡喃-2-基氧基氨甲?；?-己基]-氨基甲酸9H-芴-9-基甲酯(300mg，0.644,01)溶于20%呃啶/DCM(30ml)并將反應物攪拌0.5小時。將反應物蒸發(fā)至干，重溶于DCM并蒸發(fā)(x3)。層析(MeOH:DCM:NH3)后得到120mg所需產(chǎn)物。LCMS純度98%，m/z245[M++H]+。合成化合物(102)和化合物(103)R=環(huán)戊基102R=H103階段l:加載樹脂將Wang羥胺樹脂(3.72g，1.8mmol/g)在DMF(50ml)中溶脹。加入HATU(7.5g，19.7mmo1)、5-硝基-l-苯并噻吩-2-羧酸(3g，13.45mmo，溶于150mlDMF)和二異丙基乙胺(4.65ml，26.7mmol)并將樹脂室溫振蕩4天。將樹脂過濾，用標準洗滌過程洗滌并空氣干燥。階段2:還原硝基將階段1的樹脂(4.9g，1.8mmol/g)在DMF(200ml)中溶脹并加入二水合氯化錫(19.9g，88mmo1)。將反應物室溫振蕩16小時。將樹脂過濾，用標準洗滌過程洗滌并空氣干燥。階段3:4-(4-芐氧基羰基甲基-苯氧基)-丁酸甲酯將4-羥基苯基乙酸芐酯(9g，37mmol)溶于DMF(300ml)。加入粉末氫氧化鈉(2.23g,56mmol)和4-溴丁酸甲酯(6.4ml，56mmol)并將反應物在6(TC加熱16小時。在冷卻的反應混合物中加入水并用1MHC1酸化該溶液(pH=5/6)。含水層用EtOAc萃取，有機層用水(x2)洗滌，用Na2S04千燥，過濾并蒸發(fā)至干。層析(EtOAc:庚烷1:2)后獲得所需的二酯(9.56g，75%)LCMS純度90%，m/z343[VT+H]+。階段4:4-(4-羧甲基-苯氧基)-丁酸甲酯將4-(4-芐氧基羰基甲基-苯氧基)-丁酸甲酯(1.4g，4.09mmol)溶于EtOAc(60ml)。加入Pd/碳(100mg)并將反應物在氫氣(氣球壓力)下室溫攪拌16小時。將反應混合物通過硅藻土墊過濾，墊子用EtOAc洗滌。將濾液蒸發(fā)至干以得到白色固體(1.03g，100%產(chǎn)率)。LCMS純度93%，m/z253[1Vf+H〗+。階段5:偶聯(lián)到樹脂將階段2的樹脂(0.18g，1.8mmol/g)在DMF(5ml)中溶脹。加入HATU(0.37g，0.96mmo1)、4-(4-羧甲基-苯氧基)-丁酸甲酯(0.247g，0.96mmo1，溶于10mlDMF)禾口二異丙胺(0.56ml，3.3mmol)并將反應物室溫振蕩16小時。過濾反應物，樹脂用標準洗滌過程洗滌并空氣干燥。階段6:酯水解將階段5的甲酯(280mg，1.8mmol/g)溶于THF/MeOH(4ml/4ml)并加入1.4MNaOH(8ml)。將反應物室溫振蕩16小時。將樹脂過濾，用標準洗滌過程洗滌并空氣干燥。階段7:氨基酸偶聯(lián)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage120</formula>將階段6的樹脂(1.6g，1.8mmol/g)在無水DMF(120ml)中溶脹。加入HATU(3.3g，8.6mmo1)、L-苯丙氨酸環(huán)戊酯的TsOH鹽(3.4g，8.6mmol)和二異丙胺(5ml，2.9mmo1)并將反應物室溫振蕩16小時。過濾反應物，樹脂用標準洗滌過程洗漆并空氣干燥。階段8:(S)-2-(4-(4-[(2-羥基氨甲?；?苯并[b]噻吩-5-基氨甲?；?-甲基]-苯氧基卜丁酰氨基)-3-苯基-丙酸環(huán)戊酯(102)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage120</formula>將階段7的結(jié)合樹脂的環(huán)戊酯與2%TFA/DCM(10ml)—起振蕩10分鐘，然后濾去樹脂并在室溫下減壓蒸發(fā)溶劑。重復該過程(3次)，合并的粗產(chǎn)物通過制備型HPLC純化以得到化合物(102)(22.5mg)。LCMS純度99%，m/z644[N^+H]+，'HNMR(400MHz，MeOD)，S:1.45-1.80(6H，m，烷基)，1.95(2H，pent,CH2)，2.34(2H，t，J=7.3Hz,CH2)，2.90(1H，dd，CH)，3.04(1H，dd，CH)，3.62(2H，s，CH2)，3.86，(2H，m,CH2)，4.55(1H，m，NHCgCO)，5.07(1H，brs，CH)，6.83(2H，d，J=8.3Hz，Ar)，7.14-7.18(5H，m，Ar)，7.25(2H，d，J=8Hz，Ar)，7.47(IH，d，J=9Hz，Ar)，7.73(1H，s，Ar)，7.81(1H，d，J=8.8Hz)，8.25(1H，s，Ar)階段9:(S)-2-(4-(4-[(2-羥基氨甲?；?苯并[b]噻吩-5-基氨甲?；?-甲基]-苯氧基)-丁酰氨基)-3-苯基-丙酸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage120</formula>(103)將階段7環(huán)戊酯樹脂(200mg)在THF/MeOH(2ml/2ml)中溶脹并加入1.4MNaOH(2ml)。將反應物室溫振蕩16小時。將樹脂過濾并用標準洗滌過程洗滌。將結(jié)合樹脂的羧酸與2%TFA/DCM(3ml)—起振蕩10分鐘，然后濾去樹脂并在室溫下減壓蒸發(fā)溶劑。重復該過程(3次)，合并的粗產(chǎn)物通過制備型HPLC純化以得到化合物(103)(33.7mg)。LCMS純度88%，m/z576[M++H]+，'HNMR(400MHz，d6醫(yī)DMSO),S:1.93(2H，m，CH2)，2.30(2H，m，CH2)，2.91(1H，dd，J=9.9Hz，J=13.8Hz，CH)，3.13(1H，dd，J=4.8Hz，J=13.9Hz，CH)，3.67(2H，s，CH2)，3.91，(2H,m，CH2)，4.50(1H，m，NHCgCO),6.92(2H，d，J=8.7Hz，Ar)，7.24-7.34(7H，m，Ar)，7.61(1H，m)，7.92(1H,brs，Ar)，8.00(1H，d，J=8.8Hz,Ar)，8.31(1H，d，J=8.1Hz，Ar)，8.39(1H，s)，9.36(1H，brs)，10.36(1H，s)，11.52(IH，s)，12.76(1H，brs)合成圖7的化合物，以化合物(104)和化合物(105)為例OR-環(huán)戊基113U5R=H114oR=環(huán)戊基116R=環(huán)戊基118R-H117R=H119步驟l:4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-苯甲酸0將4-氨基甲基芐醇(1.0g，6.60mmol)在THF(10mL)和水(10mL)的混合物中調(diào)成漿液。加入飽和碳酸氫鈉溶液直到溶液的pH值>pH9。將混合物冷卻至0'C并加入二碳酸二叔丁酯(2.89g，13.23mmol)。將反應物攪拌過夜然后在真空下除去THF。含水混合物用EtOAc(20mL)萃取，然后加入INHC1酸化至pH3。再用EtOAc(2x10mL傳取，將有機層合并，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)至干以得到所需產(chǎn)物(1.60g，97%)。m/z252[IVT+Hf步驟2:(4-羥甲基-芐基)-氨基甲酸叔丁酯將LiAU(227mg，5.97mmol)在THF(5mL)和二嗯垸(5mL)的混合物中調(diào)成漿液并在氮氣下冷卻至0°C。將4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-苯甲酸溶于THF(5mL)和二嚼烷(5mL)的混合物并用15分鐘逐滴加入到所述的已冷卻的溶液中。使反應混合物回復室溫并攪拌16小時。在反應混合物中加水(lmL)，然后通過硅藻土過濾。將濾液蒸發(fā)至干并使殘余物在EtOAc(25mL)和水(25mL)之間分配。含水層用EtOAC(2x25mL)萃取，將有機層合并，干燥(Na2SO4)并蒸發(fā)至干以得到所需產(chǎn)物(460mg，100%)。m/z260[M^Naf步驟3:(4-甲酰-芐基)-氨基甲酸叔丁酯將(4-羥甲基-芐基)-氨基甲酸叔丁酯(480mg，0.71mmol)溶于DCM(3mL)并冷卻至-78。C(干冰/丙酮)。將Dess陽Martin氧化齊'J(Dess-Martinperiodinane)(331mg，0.78mmol)加入反應物中，使其回復室溫并攪拌3小時。加入飽和碳酸氫鈉和亞硫酸鈉的l:l溶液(20mL)并將反應混合物劇烈攪拌15分鐘。將有機層分離，用飽和碳酸氫鈉(10mL)洗滌，干燥(Na2SO4)并蒸發(fā)至干以得到所需化合物(480mg，100%)。m/z258[^T+Na〗十步驟4:(S)-2-[4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-芐基氨基]-3-苯基-丙酸環(huán)戊酯將(4-甲酰-芐基)-氨基甲酸叔丁酯(200mg，0.85mmol)溶于DCE(10mL)并在其中加入苯丙氨酸環(huán)戊酯(214mg，0.94mmo1)。將反應物室溫攪拌15分鐘。加入三乙酰氧基硼氫化鈉(538mg，2.55mmol)和乙酸(60uL)并將反應物再攪拌1小時。加入飽和碳酸氫鈉(IOml)并用DCM(20mL)稀釋該溶液。將有機層分離并濃縮以得到所需產(chǎn)物，該產(chǎn)物無需進一步純化便可用于下一步驟。111/2453[1^+11]+步驟5:(S)-2-(4-氨基甲基-節(jié)基氨基)-3-苯基-丙酸環(huán)戊酯用4MHC1的二嚼烷(lmL，0.25mmol)溶液處理(S)-2-[4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-芐基氨基]-3-苯基-丙酸環(huán)戊酯并室溫攪拌1小時。將混合物蒸發(fā)至干并在EtOAc(20mL)和水(20mL)之間分配。在含水層中加入飽和碳酸氫鈉(20mL)然后用EtOAc(3x20mL)萃取。將有機層合并，干燥(Na2S04)并蒸發(fā)至干以得到所需產(chǎn)物(263mg，2個步驟79°/。)。m/z353[M^Hf步驟6:(3)-2-[4-({[2-(1-異丁氧基-乙氧基氨甲?；?-苯并[1)]噻吩-6-基甲基]-氨基}-甲基)-芐基氨基]-3-苯基-丙酸環(huán)戊酯在氮氣下將6-甲酰-苯并[b]噻吩-2-羧酸(l-異丁氧基-乙氧基)酰胺(方案7)(220mg，0.68mmol)和(S)-2-(4-氨基甲基-芐基氨基)-3-苯基-丙酸環(huán)戊酯(263mg，0.75mmol)溶于DCE(10mL)。加入三乙酰氧基硼氫化鈉(430mg，2.04mmoI)和乙酸(50pL)并將反應物室溫攪拌3小時。加入碳酸氫鈉(20mL)并用二氯甲烷(3x50mL)萃取反應混合物。將有機層合并并濃縮。殘余物通過柱層析(50。/。-100。/。EtOAc/庚烷)純化以得到保護的化合物(80mg，21%)。m/z658Of+H^步驟7:(S)-2-(4-([(2-羥基氨甲?；?苯并[b]噻吩-6-基甲基)-氨基]-甲基卜芐基氨基)-3-苯基-丙酸環(huán)戊酯(104)將(S)-2-[4-(([2-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲酰基)-苯并[b]噻吩-6-基甲基]-氨基)-甲基)-芐基氨基]-3-苯基-丙酸環(huán)戊酯溶于DCM(2mL)和MeOH(2mL)并用TFA(1mL)處理。將混合物室溫攪拌l小時，然后濃縮至干并加入DCM(5mL)和庚烷(5mL)?；旌衔镎舭l(fā)至干。該過程重復三次以得到油狀化合物(104)(20mg，59%)。LCMS純度95%，m/z558[M^H]十，1HNMR(300MHz，MeOD)，5:1.25-1.91(8H，m，4xCH2)，3.12-3.47(2H，m，CH2)，4.26(1H，m，CH)，4.33(2H，d，J-5.5Hz，CH2)，4.36(2H，s，CH2)，4.43(1H，s，CH2)，5.16(1H，s，CH)，5.13(1H，m，CH)，7.25-7.37(6H，m,ArH)，7.54-7.63(4H，m，ArH)'7.94(2H，m，ArH)，8.09(1H，s，ArH)。步驟8:(S)-2-[4-(U2-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲?；?-苯并[b]噻吩-6-基甲基]-氨基卜甲基)-芐基氨基]-3-苯基-丙酸將(S)-2-[4-(([2-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲酰基)-苯并[b]噻吩-6-基甲基]-氨基》-甲基)-芐基氨基]-3-苯基-丙酸環(huán)戊酯(40mg，0.06mmol)溶于THF(2mL)和水(2mL)。加入LiOH(8mg，0.30mmol)并將反應混合物在5(TC加熱36小時。蒸發(fā)除去THF，將殘余物在水(IOmL)和EtOAc(10mL)之間分配。分離含水層并加入1MHC1將pH調(diào)至3。用EtOAc(3x20mL)萃取，將有機層合并并蒸發(fā)至干。步驟9:(S)-2-(4-U(2-羥基氨甲?；?苯并[b]噻吩-6-基甲基)-氨基]-甲基卜節(jié)基氨基)-3-苯基-丙酸(105)將(S)-2-[4-U[2-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲?；?-苯并[b]噻吩-6-基甲基]-氨基)-甲基)-芐基氨基]-3-苯基-丙酸溶于MeOH(2mL)和THF(2mL)。在混合物中加入TFA(lmL)并室溫攪拌1小時。將反應混合物濃縮至干并加入DCM(5mL)和庚烷(5mL)。將混合物蒸發(fā)至干。該過程重復三次以得到粉紅色固體狀的化合物(105)(17mg，57%)。LCMS純度90%，m/z4卯[Nf+H]+，1HN證(300MHz，MeOD)，5:3.33(2H，m，CH2)，4.19(1H，m，CH2)，4.29(2H，s，CH2)，4.35(2H，s，CH2)，4.42(2H，s，CH2)，7.29-7.39(5H，m，ArH)，7.54-7.72(5H，m，ArH)，7.88(1H，s，ArH)，8.00(1H，dJ=8.0Hz，ArH)，8.08(1H，s，ArH)以下化合物按照為化合物(104)和化合物(105)描述的方法制備(8)-2-(4-{[(2-羥基氨甲?；?苯并[1)噻吩-6-基甲基)-氨基-甲基}-芐基氨基)-3-(4-羥基-苯基)-丙酸環(huán)戊酯(106)LCMS純度98%,m/z574OvT+H]+，'HNMR(300MHz，MeOD)，S:1.30-1.87(8H，m，4xCH2)，2.97-3.35(2H，m，CH2)，4.17(1H，m，CH)，4.31(2H，d，J=5.4Hz，CH2)，4.36(2H，s，CH2)，4.42(2H，s，CH2)，5.11-5.16(1H，m，CH)，6.77(2H，d，J=8.4Hz，Ar-H)，7.06(2H，d，J=8.4Hz，Ar-H)，7,54-7.65(5H，m，Ar-H)，7.87(1H，s，Ar-H)，7.99(1H，d，J=8.4Hz，Ar-H)，8.08(1H，s，Ar陽H)(8)-2-(4-{[(2-羥基氨甲酰基-苯并[1)噻吩-6-基甲基)-氨萄-甲基}-芐基氨基)-3-(4-羥基-苯基)-丙酸(107)LCMS純度90%，m/z505[ivT+H]+，iHNMR(300MHz，MeOD)，S:3.09-3.27(2H，m，CH2)，4.03(1H，m，CH)，4.24(2H，s，CH2),4.34(2H，s，CH2)，4.42(2H，s，CH2)，6.76(2H，dJ^8.3Hz，Ar-H)，7.11(2H，dJ-8.5Hz，Ar-H)，7.56-7.59(5H，m，Ar-H)，7.89(1H，s，Ar-H),8.02(1H，d，J=8.4Hz，Ar-H)，8.08(1H，s，Ar隱H)(S)-3-叔丁氧基-2-(4-U(2-羥基氨甲酰基-苯并[b]噻吩-6-基甲萄-氨萄-甲基卜芐基氨基)-丁酸環(huán)戊酯(108)LCMS純度99。/。，m/z568[M++H]+，]HNMR(300MHz，MeOD)，S:1.20(9H，s，3xCH3)，1.29(3H，d，J=6.6Hz，CH3)，1.67-1.94(8H，m，4xCH2)，3.75(1H，d，J=2.7Hz，CH)，4.29-4.32(1H，m，CH)，4.36(4H，d，J=2.4Hz，2xCH2)，4.43(2H，s，CH2)，5.22-5.25(1H，m，CH)，7.54-7.65(5H，m，Ar-H)，7.88(1H，s，Ar-H)，8.01(1H，d，J=8.1Hz,Ar陽H)，8.08(1H，s，Ar-H)(S)-3-叔丁氧基-2-(4-U(2-羥基氨甲?；?苯并[bj噻吩-6-基甲萄-氨萄-甲基卜芐基氨基)-丙酸環(huán)戊酯(109)LCMS純度95%，m/z554[Ivf+H]十，JHNMR(300MHz，MeOD)，5:1.23(9H，s，3xCH3)，1.67-1.98(8H，m，4><CH2)，3.87-3.98(2H，m，CH2)，4.19-4.22(1H，m，CH)，4.34-4.36(4H，m，2><CH2)，4.42(2H，s，CH2)，5.31-5.35(1H，m，CH)，7.54-7.62(5H，m，Ar-H),7.87(1H，s，Ar-H)，8.00(1H，d，J=8.1Hz，Ar-H)，8.08(1H，s，Ar鄰(S)-2-(4-U(2-羥基氨甲?；?苯并[b噻吩-6-基甲基)-氨基-甲基卜芐基氨基)-4-甲硫基-丁酸環(huán)戊酯(UO)LCMS純度90%,m/z541[M++H]+，iHNMR(300MHz，MeOD)，5:1.70-1.98(8H，m，4xCH2)，2.11(3H，s，CH3)，2.17-2.34(2H，m，CH2)，2.54-2.73(2H,m，CH2)，4.19-4.23(1H，m，CH)，4.27-4.42(6H，m，3xCH2)，5.35-5.39(1H，m，CH),7.54-7.63(5H，m，Ar-H)，7.87(1H，s，Ar-H)，7.97-8.00(1H，m，Ar-H)，8.08(1H，s，Ar-H)(S)-l-(4-U(2-羥基氨甲酰基-苯并[b噻吩-6-基甲基)-氨基]-甲基}-芐基)-吡咯垸-2-羧酸環(huán)戊酯(lll)LCMS純度96。/。，m/z508[N^+H]+，NMR(300MHz，MeOD)，5:1.66-2.29(12H，m，6xCH2)，3.59-3.67(2H，m，CH2)，4.38-4.46(6H'm，3xCH2)，4.62(1H，d，J=12.3Hz，CH)，5.21(1H，m，CH)，7.61-7.68(5H，m，Ar-H)，7.88(1H，s，Ar-H)，8.00-8.02(m，m，Ar國H)'8.13(1H，s，Ar-H)(8)-1-(4-{[(2-羥基氨甲酰基-苯并[1>1噻吩-6-基甲基)-氨基卜甲基}-芐基)-吡咯烷-2-羧酸(U2)LCMS純度100。/。，m/z440[M++H]+，!H雨R(300顧z，MeOD)，S:1.96-2.09(2H，m，CH2)，2.14-2.23(2H，m，CH2)，2.52-2.65(1H，m，CH2)，3.56-3.67(1H，m，CH2)，4.19-4.25(1H，m，CH),4.36-4.57(6H，m，3xCH2)，7.55-7.64(5H，m，Ar-H)，7.88(1H，s，Ar-H)，7.99-8.01(1H,m，Ar-H)，8.09(1H，s，Ar-H)(R)-3-叔丁硫基-2-(H[(2-羥基氨甲?；?苯并[bl噻吩-6-基甲基)-氨萄-甲基p芐基氨基)-丙酸環(huán)戊酯(113)LCMS純度97。/。，m/z570[M+H]+，'H蘭R(300MHz，MeOD)，5:1.36(9H，s)，1.79(8H，m)，3.16(2H，d，5.3Hz)，4.25(2H，t，J=5.6Hz)，4.31(2H，s)，4.36(2H,s)，4.42(2H，s)，5.34(m，m)，7.56(1H，d，J=8.1Hz)，7.62(4H，s)，7.89(1H，s)，8.09(1H，s)，8.51(m，d，J=8.1Hz)，(R)-3-叔丁硫基-2-(4-U(2-羥基氨甲?；?苯并[bl噻吩-6-基甲基)-氨萄-甲基)-芐基氨基)-丙酸(U4)LCMS純度97。/。，m/z502[M]+，'H畫R(300固z，MeOD),5:1.35(9H,s，3xCH3)，3.09(2H，m，CH2)，3.22(2H，m，CH2)，3.83(1H，t，J=8.8Hz，CH)，4.34(2H，s，CH2)，4.42(2H，s，CH2),7.57(1H，d，J=10.0Hz，ArH)，7.62(4H，s，ArHx4)，7.89(1H，s，ArH)，8.02(1H，d，J=8.1Hz，ArH)，8.09(1H，s，ArH)。(S)-2-(H(2-羥基氨甲酰基-苯并Ib噻吩-6-基甲基)-氨基]-甲基}-芐基氨基)-3，3-二甲基-丁酸環(huán)戊酯(115)LCMS純度94。/。，m/z546[M+Na]+，'HNMR(300MHz，MeOD)，S:1.08(9H，s，3xCH3)，1.80(8H，m，4><CH2)，3.49(1H，s，CH)，4.29(2H，d，J=13.5Hz，CH2)，4.29(2H，d，J=13.5Hz，CH2)，4.36(2H,s,CH2)，4.44(2H，s，CH2)，5.19(1H，t，J=5.7Hz)，7.59(5H，m，ArHx5)，7.88(1H，ArH)，8.00(1H，d，J=8.3Hz)，8.09(1H，s，ArH)。(S)-環(huán)己基-(4-{[(2-羥基氨甲?；?苯并[b噻吩-6-基甲基)-氨基l-甲基}-芐基氨基)-乙酸環(huán)戊酯(U6)LCMS純度100。/。，m/z550[M+H]+，NMR(300MHz，MeOD)，S:0.86-1.95(18H,m，9xCH2)，3.73(1H，m，CH)，4.11(1H，dJ=5.7Hz，CH)，4.19(2H，s，CH2)，4.26(2H，s，CH2)，4.36(2H，s,CH2)，7.53(5H，m，ArH)，7.77(1H，s，CH)，7.82(1H,dJ=11.6Hz，ArH)，8.02(1H，s，ArH)(8)-環(huán)己基-(4-{[(2-羥基氨甲?；?苯并[1>噻吩-6-基甲基)-氨基-甲基}-節(jié)基氨基)-乙酸(U7)LCMS純度100Q/。，m/z482[M+H]+，NMR(300MHz，MeOD),5:0.72-1.60(IOH，m，9xCH2)，3.89(1H，m,CH)，4.11(3H，m，CH)，4.23(2H，s，CH2)，4.31(2H，s，CH2)，7.48(5H，m，ArH)，7.76(1H，s，CH)，7.88(1H，dJ=11.6Hz，ArH)，7.98(1H，s，ArH)。(S)-2-(4-U(2-羥基氨甲?；?苯并[bl噻吩-6-基甲基)-氨基卜甲基)-芐基氨基)-4-甲基-戊酸環(huán)戊酯(122)LCMS純度940/。，m/z524[M++H]+，1HNMR(300MHz，MeOD)，S:1.01(6H，s，2xCH3)，1.28(1H，m，CH)，1.56-1.95(IOH，m，4xCH2，CH2)，4.00-4.43(6H，m，3xCH2)，4.88(m，m，CH)，5.36(1H，brs，CH)，7.47-7.62(5H，m，ArH)，7.94(2H，t，ArH)，8.08(1H，s，ArH)。(S)-2-(4-U(2-羥基氨甲?；?苯并[bl噻吩-6-基甲基)-氨基-甲基)-芐基氨基)-4-甲基-戊酸(123)LCMS純度980/0，m/z456pvT+H]+'lHNMR(300畫z'MeOD)，5:1.00(6H，m，2xCH3)，1.86(2H，m,CH2)，3.86(1H，m，CH)，4.29(2H，s，CH2)，4.36(2H，s，CH2)，4.43(2H，s，CH2)，7.56(1H，m,ArH)，7.89(1H，s，CH)，8.02(1H，dJ=8.2Hz，ArH)，8.09(1H，s，ArH)。(S)-(H[(2-羥基氨甲?；?苯并[b噻吩-6-基甲基)-氨基-甲基)-節(jié)基氨基)-苯基-乙酸環(huán)戊酯(124)LCMS純度卯。/。，m/z544[Nf+H]+，1HNMR(300MHz，MeOD)，S:1.31-1.91(IOH，m，4xCH2，CH2)，4.22(2H，ddJ=13.1Hz，CH2)，4.35(2H，s，CH2)，4.42(1H，s，CH2)，5.16(1H，s，CH)，5.30(1H，m，CH)，7.47-7.62(9H，m，ArH)，7.94(2H，m，ArH),8.08(1H，s,ArH)。(S)-(4-U(2-羥基氨甲?；?苯并[bl噻吩-6-基甲基)-氨萄-甲基p芐基氨基)-苯基-乙酸(125)LCMS純度1000/0，m/z476[^T+H]+，lHN魔(300麗z，MeOD)，5:4.08-4.24(3H，m，CH，CH2)，4.35(2H，s，CH2)，4.43(1H，s，CH2)，7.46-7.75(IOH，m，ArH)，7.89(1H，s，ArH),8.01(1H，dJ=7.9Hz,ArH)，8.09(1H，s，ArH)以下化合物按照為化合物(104)和化合物(105)描述的方法制備，步驟3和4采用下述可替換方法步驟3b:(4-溴甲基-芐基)-氨基甲酸叔丁酯將N-溴琥珀酰亞胺(5.13g，28.8mmol)溶于DCM(80mL)并冷卻至(TC。制備三苯基膦(7.18g，27.0mmol)的DCM(20mL)溶液并將其加入所述已冷卻的溶液中，然后加入吡啶(l.OmL，1.26mmol)。將步驟2的材料(2.14g，9.0mmol)溶于DCM(20mL)并加入，然后使反應物回復室溫并攪拌16小時。濃縮混合物，殘余物通過柱層析(50。/。/50。/oEtOAc/庚垸)純化以得到所需化合物(864mg，32%)。m/z301[IvT+Naf步驟4b:(S)-2-[4-(叔丁氧基羰基氨基-甲萄-節(jié)基氨萄-丙酸環(huán)戊酯將L-丙氨酸環(huán)戊酯(463mg,1.41mmo)溶于DMF(9mL)并在其中加入DIPEA(0.74mL，4.24mmol)。將混合物室溫攪拌15分鐘，然后用1小時逐滴加入步驟3b所得材料(212mg，0.706mmol)的DMF(5mL)溶液。然后室溫攪拌反應物16小時，之后用水(50mL)和EtOAc(50mL)稀釋。有機層用鹽水(2x50mL)洗滌，干燥并濃縮以得到粗材料(0.26g，100%)，其無需進一步純化便可用于下一步驟。m/z377步驟5-9如對化合物(104)和化合物(105)的描述<formula>formulaseeoriginaldocumentpage129</formula>(S)-2-(4-U(2-羥基氨甲酰基-苯并[b]噻吩-6-基甲基)-氨基]-甲基卜芐基氨基)-丙酸環(huán)戊酯(118)LCMS純度95。/。，m/z482[Ivt+H]+，'HNMR(300MHz，MeOD)，S:1.61(3H，d，J=7.2Hz，CH3)，1.71-1.97(8H，m,4><CH2)，4.13(1H，q,J=7.2Hz，CH)，4.30(2H，s，CH2)，4.36(2H，s，CH2)，4.43(2H，s，CH2)，5.33-5.36(1H，m，CH)，7.54-7.63(5H，m，Ar-H)，7.88(1H，s，Ar-H)，8.00(1H，d，J=8.1Hz，Ar-H)，8.08(1H，s，Ar鄰<formula>formulaseeoriginaldocumentpage130</formula>(S)-2-(4-U(2-羥基氨甲?；?苯并[b]噻吩-6-基甲基)-氨基]-甲基}-芐基氨基)-丙酸(119)LCMS純度950/0，m/z414[M++H〗+，'HNMR(300MHz，MeOD)，S:1.64(3H，d'J=7.1Hz，CH3)，楊-4.4(lH,m,CH),4.31(2H,s，CH2)，4.36(2H，s，CH2)，4.43(2H，s,CH2)，7,55-7.63(5H，m，Ar-H)，7.88(1H，s，Ar-H)，8.00(1H，d，J=8.1Hz，Ar-H),8.09(1H，s，Ar陽H)以下化合物按照為化合物(118)和化合物(119)描述的過程制備，包括以下替換/額外步驟步驟4b:[4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-芐基氨基]-乙酸環(huán)戊酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage130</formula>過程如步驟4a(采用環(huán)戊酯的HC1鹽)產(chǎn)物m/z363[M++H]+步驟4c:[[4-(叔丁氧基羰基氨基-甲萄-節(jié)蜀-(9H-莉-9-基甲氧基-羰基)-氨基]-乙<formula>formulaseeoriginaldocumentpage130</formula>在[4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-芐基氨基]-乙酸環(huán)戊酯(0.2g，0.55mmol)和lM酸環(huán)戊酯Na2C03(1.1mL，1.1mmol)的DCM(2mL)溶液中邊攪拌和冰浴冷卻邊緩慢加入氯甲酸9-芴基甲基酯(0.14g，0.55mmol)的二噁烷(1.4mL)溶液。將混合物在冰浴中攪拌4小時并在室溫攪拌過夜。將混合物倒入水(卯mL)中并用二乙醚萃取。將有機萃取物合并，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)至干以得到所需產(chǎn)物(0.32g，100%)。1^2607[^+,〗+步驟5a:[(4-氨基甲基-節(jié)基)-(9H-芴-9-基甲氧基羰基)-氨基]-乙酸環(huán)戊酯過程如步驟5中所述。產(chǎn)物m/z485[M++H]+步驟6a:((9H-芴-9-基甲氧基羰基)-[4-(U2-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲?；?-苯并[b〗噻吩-6-基甲基]-氨基}-甲基)-芐基]-氨基}-乙酸環(huán)戊酯過程如步驟6中所述。產(chǎn)物m/z790[VT+H]+步驟7a:(4-([(2-羥基氨甲?；?苯并[b]噻吩-6-基甲基)-氨基]-甲基}-芐基氨基)-乙酸環(huán)戊酯(120)將{(附-芴-9-基甲氧基羰基)-[4-({[2-(1-異丁氧基-乙氧基氨甲酰基)-苯并[b]噻吩-6-基甲基]-氨基}-甲基)-芐基]-氨基卜乙酸環(huán)戊酯(0.11g，0.14mmol)溶于乙腈(3mL)并在其中加入哌啶(1.5mL)。將所得混合物室溫攪拌l小時。將溶劑蒸發(fā)至干并將產(chǎn)物分成2份。對于其中l(wèi)份將環(huán)戊酯水解，而將另一份溶于DCM(1.5mL)并與4MHC1的二嗯烷(1.0mL)溶液一起攪拌2小時。將溶劑蒸發(fā)至干，產(chǎn)物通過制備型HPLC純化以得到所需產(chǎn)物，其為TFA鹽。LCMS純度99°/。，m/z468[Nf+H]+，^NMR(300應z，MeOD)，5:8.09(1H，s，ArH)，8.00(1H，d，J=8.3Hz，ArH)，7.88(1H，s，ArH)，7.54-7.65(5H，m，ArH)，5.31-5.35(1H，m，CH)，4.43(2H，s，CH2)，4.35(2H，s，CH2)，4.31(2H，s，CH2)，3.96(2H，s，CH2)，1.65-1.93(8H，m，4xCH2)步驟9a:(4-U(2-羥基氨甲?；?苯并[b]噻吩-6-基甲基)-氨基]-甲基卜芐基氨基)-乙酸(m)121過程如步驟9中所述。LCMS純度99。/。，m/z400[M++H]+，'HNMR(300MHz,MeOD)，S:8.09(1H，s，ArH)，8.00(1H，d，J=8.3Hz，ArH)，7.89(1H，s，ArH),7.54-7.62(5H，m，ArH)，4.43(2H，s，CH2)，4.35(2H，s，CH2)，4.32(2H，s，CH2)，3.93(2H，s，CH2)合成圖8的化合物，以化合物(126)和化合物(127)為例R=環(huán)戊基126R=環(huán)戊基128R=H127R=H129圖8階段l:4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基-環(huán)己烷羧酸將溶于40ml二嚼烷和40ml水的反-4-(氨基甲基)環(huán)己烷羧酸(lg，6.4mmol)和氫氧化鈉(256mg,6.4mmol)的溶液邊攪拌邊在冰水浴中冷卻。加入二碳酸二叔丁酯(1.39g，6.4mmol)并將混合物室溫攪拌5小時，然后靜置過夜。將溶液真空濃縮并用2NHCI酸化至pH2。酸化的含水層用EtOAc萃取3次。將有機層合并并用鹽水洗滌。有機層通過硫酸鎂干燥并蒸發(fā)至干。所得產(chǎn)物為白色固體(l.lg，64%產(chǎn)率)。^NMR(300MHz，CDC13)，S:0.86-1.07(2H，m，CH2),1.34-1.53(11H，m，boc和CH2)，1.84(2H，dd，J-13.0，2.3Hz，CH2)，2.05(2H，dd，CH2)，2.18-2.35(1H，m，CHCH2)，2.99(2H，t，J=6.3Hz，CJ^NH)'4.59(1H，br.s，CgCOOH)，II.0(1H，br.s，COOH)。階段2:(4-羥甲基-環(huán)己基甲基)-氨基甲酸叔丁酯將氫化鋁鋰(465mg，12.2mmol)懸浮于無水THF(10m)并在氮氣下冷卻至0'C。緩慢加入4-(叔丁氧基-羰基-氨基-甲基-環(huán)己烷羧酸(Ug，4.1mmol)的THF和二嗯烷(10ml，l:l)溶液并將混合物室溫攪拌過夜。逐滴加入水以猝滅過量的氫化鋁鋰。過濾并用THF(10ml)和MeOH(10ml)洗滌濾餅。真空濃縮濾液并用1NHCl酸化至pH2。水層用EtOAc萃取兩次。有機層通過硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)至干以得到964mg產(chǎn)物(97%產(chǎn)率)。'H羅R(300MHz，CDC13)，5:0.81-1.08(4H，m，2><CH2)，1.33-1.60(10H，m，boc和CH)，1.82(4H，d，月.7Hz，2xCH2)，2.98(2H，t'J二6.4Hz，賜NH)，3.46(2H，d，J-6.4Hz，C逸OH)，4.60(1H，br.s，CH)階段3:(4-甲酰-環(huán)己基甲基)-氨基甲酸叔丁酯將(4-羥甲基-環(huán)己基甲基)-氨基甲酸叔丁酯(965mg，4.0mmol)溶于DCM(20ml)并冷卻至-78。C。將DessMartin試劑(2.52g，6.0mmol)溶于DCM(30ml)并緩慢加入階段2的醇的溶液中。然后將反應混合物室溫攪拌3小時。將所得溶液倒入飽和的NaHC03和Na2S203溶液(l:l，100ml)同時劇烈攪拌。將有機層分離并用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥并蒸發(fā)至干以得到產(chǎn)物(786mg，82%產(chǎn)率)。'HNMR(300MHz，CDC13)，S:0.83-1.01(2H,m，CH2)，1.15-1.24(2H，m，CH2),1.34(9H，s，Boc)，1.75-1.88(2H，m，CH2)，1.90-2.00(2H，m，CH2)，2.05-2.18(1H，m，CH)，2.93(2H，t，7=6.4Hz，Qi^NH),4.53(1H，br.s，C旦CHO)，9.55(1H，s，CHO)階段4:(S)-([4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-環(huán)己基甲基]-氨基)-苯基-乙酸環(huán)戊酯將(4-甲酰-環(huán)己基甲基)-氨基甲酸叔丁酯(3卯mg，1.61!111101)和(3)-氨基-苯基-乙酸環(huán)戊酯(394mg，1.8mmol)在DCE(6ml)中室溫攪拌25分鐘。加入乙酸(9.6ul，0.16mmo1)和三乙酰氧基硼氫化鈉(1.0g，4.8mmol)并將所得混合物在室溫下攪拌1小時30分鐘。加入DCM(0m)和飽和NaHCO3溶液(10ml)并分離各相。含水相用EtOAc(2xl0ml)萃取，有機相通過硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物通過柱層析(8:2庚烷/EtOAc)純化以得到223mg純的胺(31%產(chǎn)率)。LCMS純度100%,m/z445[Nf+H]+。階段5:(S)-[(4-氨基甲基-環(huán)己基甲基)-氨基]-苯基-乙酸環(huán)戊酯將(S)-U4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-環(huán)己基甲基]-氨基)-苯基-乙酸環(huán)戊酯(223mg，0.5mmol)在DCM(4ml)中攪拌，加入TFA(lml)并將混合物室溫攪拌2小時。將溶液真空濃縮，溶解在DCM中，用飽和NaHC03溶液洗滌2次并用飽和鹽水溶液洗滌1次。有機相通過硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)以得到所需的胺，其為黃色油狀物(130mg，75%產(chǎn)率)。LCMS純度100。/。，m/z345[N^+H]+。階段6:(S)-[(4-([(2-羥基氨甲酰基-苯并[b]噻吩-6-基甲基)-氨基]-甲基卜環(huán)己基甲基)-氨基]-苯基-乙酸環(huán)戊酯(126)將階段5的胺(130mg，0.38mmol)與6-甲酰-苯并[b]噻吩-2-羧酸(l-異丁氧基-乙氧基)酰胺(方案7)(110mg，0.34mmol)的DCE溶液一起室溫攪拌30分鐘。加入乙酸(2.1ul，0.03mmol)和三乙酰氧基硼氫化鈉(218mg，l.Ommol)，所得混合物室溫攪拌過夜。將混合物真空濃縮，溶解在EtOAc中，用飽和NaHCO3溶液(10ml)和鹽水(10ml)洗滌。有機相通過硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物(167mg)通過制備型HPLC純化以得到淡粉色固體狀的化合物(126)。LCMS純度86%，m/z550[VT+H]+，約10%羧酸。'HNMR(300MHz，MeOD)，5:1.08(4H,m，2xCH2)，1.76(14H，m，6xCH2禾口2xCH)，2.81(4H，m，2xC腿H)，4.35(2H，s，賜NH)，5.12(1H，s，QJNH)，5.30(1H，m，OCH)，7.51(6H，m，Ar)，7.85(1H，s，Ar)，7.96(1H，d，Ar)，8.08(1H，s，Ar)。合成((S)-[(4-U(2-羥基氨甲?；?苯并問噻吩-6-基甲基)-氨基j-甲基卜環(huán)己基甲基)-氨基1-苯基-乙酸(127)階段1:(SH[4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-環(huán)己基甲基]-氨基》-苯基-乙酸叔丁西將(4-甲酰-環(huán)己基甲基)-氨基甲酸叔丁酯(899mg，3.7mmol)和(S)-叔丁基苯基甘氨酸酯(850mg，4.1mmol)在DCE(20ml)中攪拌30分鐘。加入乙酸(20ul，0.37mmol)和三乙酰氧基硼氫化鈉(2.37g，11.1mmol)并將反應混合物室溫攪拌3小時。加入DCM(10ml)和飽和NaHCO3溶液(20ml)并將各相分離。水相用EtOAc(20ml)萃取。有機相通過硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。粗產(chǎn)物(2.4g)用柱層析(7:3庚烷/EtOAe)純化以得到所需產(chǎn)物(385mg，24%產(chǎn)率)。LCMS純度100%，m/z433[VT+H]+。階段2:(SH[4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-環(huán)己基甲基]-氨基)-苯基-乙酸叔丁酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage136</formula>將(S)《4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-環(huán)己基甲基]-氨基)-苯基-乙酸叔丁酯(385mg，0.9mmol)在DCM(5ml)中攪拌，加入TFA(2ml)并將混合物室溫攪拌30分鐘。將溶液真空濃縮，溶解在EtOAc(5ml)中，用NaHC03飽和溶液(2x5ml)洗滌兩次并用飽和鹽水溶液(5ml)洗滌1次。有機相通過硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)以得到所需胺，其為黃色油狀物(2卯mg，97%產(chǎn)率)。LCMS純度100M，m/z333[M++H〗+。階段3:(SH[4-(([2-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲?；?-苯并[b]噻吩-6-基甲基]-氨基V甲基)-環(huán)己基甲基]-氨基}-苯基-乙酸叔丁酯將(S)-([4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-環(huán)己基甲基]-氨基h苯基-乙酸叔丁酯(290mg，0.9mmol)和6-甲酰-苯并[b]噻吩-2-羧酸(l-異丁氧基-乙氧基)酰胺(方案7)(255mg，0.8mmol)在DCE(8ml)中攪拌30分鐘。加入乙酸(4ul，0.08mmol)和三乙酰氧基硼氫化鈉(504mg，2.4mmol)并將反應混合物室溫攪拌1小時30分鐘。加入DCM(5ml)和NaHCO3飽和溶液(10ml)并分離各相。水相用EtOAc(15ml)萃取。有機相通過硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。粗產(chǎn)物(543mg)用柱層析(5-10。/。的MeOH的DCM溶液)純化以得到所需的純產(chǎn)物(172mg，34%產(chǎn)率)。LCMS純度100%，m/z638[M十+H]+。階段4:(SH[4-(([2-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲?；?-苯并[b]噻吩-6-基甲基]-氨基卜甲基)-環(huán)己基甲基]-氨基}-苯基-乙酸叔丁酯(127)將(S)-U4-({[2-(1-異丁氧基-乙氧基氨甲?；?-苯并問噻吩-6-基甲基]-氨基}-甲基)-環(huán)己基甲基]-氨基卜苯基-乙酸叔丁酯(172mg，0.27mmol)在4MHC1的二嗎烷溶液(2ml)中室溫攪拌30分鐘。將溶液蒸發(fā)至干以得到化合物(127)，其為米色固體(123mg，95%產(chǎn)率)。LCMS純度98。/。，m/z482[VT+H]+。'HNMR(300固z，MeOD)，5:1.10(4H，m，2xCH2)，1.80(6H，m，2xCH2and2xCH)，2.88(2H，dd，C逸NH)，2.94(2H，d，賜,，4.36(2H，s，賜NH》5.07(1H，s，CH)，7.53(6H，m，Ar)，7.87(1H，s，Ar)，7.97(1H，d，Ar)，8.12(1H，s，Ar)。以下化合物按照為化合物(126)和化合物(127)描述的方法制備(S)-2-[(H(2-羥基氨甲酰基-苯并[bl噻吩-6-基甲基)-氨基j-甲基l環(huán)己基甲基)-氨基-4-甲基-戊酸環(huán)戊酯(128)LCMS純度86°/。，m/z530[IVf+H]+，^NMR(300MHz，MeOD)，S:0.99(6H，t，J=6Hz，2xCH3)，1.11(4H，t，J=8.1Hz，2xCH2)，1.76(20H，m，2xCH和9xCH2)，2.80(1H，m，CH)，2.97(4H,m，2xC,H)，3.95(1H，m，CH)，4.35(2H，s，Qi2NH)，5.32(1H，m，OCH)，7.54(1H，d，J=6Hz，Ar)，7.84(1H，s，Ar)，7.94(1H，d，J=9Hz，Ar)，8.08(1H，s，Ar)。(S)-2-[(4-U(2-羥基氨甲?；?苯并[b噻吩-6-基甲基)-氨基l-甲基)-環(huán)己基甲基)-氨基-4-甲基-戊酸(129)LCMS純度95%，m/z462[M十+H]+，'HNMR(300MHz，MeOD)，5:1.00(6H，t，風3Hz，2xCH3)，1.10(4H，m，2>CH2)，1.85(8H，m，2xCH和3xCH2)，2.94(4H，m，2x賜NH)，3.91(1H，m，C,H)，4.36(2H，s，CHa卿，7.54(1H，d，J=7.8Hz，Ar)，7.85(1H，s，Ar)'7.95(1H，d，J=8.1Hz，Ar)，8.08(1H，s)。合成圖9的化合物，以化合物(130)為例oo<formula>formulaseeoriginaldocumentpage138</formula>132<formula>formulaseeoriginaldocumentpage138</formula>133<formula>formulaseeoriginaldocumentpage138</formula>134階段1:(S)-[(3-硝基-芐基)-氨基]-苯基-乙酸環(huán)戊酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage138</formula>在苯基甘氨酸環(huán)戊酯對甲苯磺酸鹽(3.08g，7.8mmol)的DCE(120ml)溶液中加入3-硝基苯甲醛(1.01g，6.7mmo1)，然后加入三乙酰氧基硼氫化鈉(3.03g)。將混合物攪拌3.5小時，然后加入飽和碳酸氫鈉溶液(200ml)進行淬滅。產(chǎn)物用DCM(250ml)萃取，將有機萃取物干燥(MgS04)。產(chǎn)物無需進一步純化即可進行下面的步驟。階段2:(S)-[(3-硝基-節(jié)基)-叔丁氧基羰基-氨基]-苯基-乙酸環(huán)戊酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage138</formula>在DCM(50ml)中的(S)-[(3-硝基-芐基)-氨基]-苯基-乙酸環(huán)戊酯的粗制混合物中加入二碳酸二叔丁酯(3.38g，15.6mmo1)?；旌衔镌?(TC加熱過夜，然后冷卻至室溫。然后加入MW-三甲基乙二胺(2ml)并將混合物攪拌2小時。然后將混合物倒入乙酸乙酯(150ml)并用lMHCl(3X50ml)洗滌，干燥(MgS04)并濃縮以得到所需的無色油狀產(chǎn)物(1.509g'42%產(chǎn)率)。LCMS純度98。/。，m/z477(M+Na+)。&NMR(300MHz,d6-DMSO)，.5:7.97(1H，dd，J=2.1，9Hz),7.15-7.45(8H，m)，5.60-6.00(1H，m)，5.20-5,35(1H，m)，4.65-4.82(1H，m),4.21(1H，d，JN16Hz)，1.30-1.95(17H，m)階段3:(S)-[(3-氨基-芐基)-叔丁氧基羰基-氨基]-苯基-乙酸環(huán)戊酯在(S)-[(3-硝基芐基)-叔丁氧基羰基-氨基]-苯基-乙酸環(huán)戊酯(1.509g，3.32mmol)的乙醇(IOml)溶液中加入碳載鈀(10。/。，0.38g，0.36mmo)。將燒瓶排空并重新填滿氫氣。將混合物攪拌過夜，然后通過硅藻土過濾，用乙醇(150ml)洗滌并濃縮以得到所需無色油狀產(chǎn)物(1.351g，96%產(chǎn)率)。iHNMR(300MHz，CDC13)，S:7.19-7.42(5H，m)，6.97(1H，t，J=7.5Hz)，6.46(2H，dd，J=8.1，16.5Hz)，6.29(1H，brs)，5.58(1H，brs)，5.29(1H，brs)，4.69(1H，brs)，4.00(1H，d，J=15.9Hz)，3.74(1H，q，J=6.9Hz)，3.51(2H，brs)，1.20-2.00(17H，m)階段4:(SH叔丁氧基羰基-(3-([2-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲?；?-苯射b]-噻吩-6-基甲基]-氨基}-芐基)-氨基]-苯基-乙酸環(huán)戊酯在(S)-[(3-氨基-芐基)-叔丁氧基羰基-氨基]-苯基-乙酸環(huán)戊酯(0.317g，0.75mmol)中加入6-甲酰-苯并[b]噻吩-2-羧酸(l-異丁氧基-乙氧基)-酰胺(方案7)(0.210g，0.65mmol)的DCE(8ml)溶液。加入2滴冰醋酸，然后加入三乙酰氧基硼氫化鈉(0.170g，0.8mmol)。將混合物攪拌2小時然后倒入DCM(150ml)。溶液用飽和碳酸氫鈉(50ml)洗滌，然后干燥(MgS04)，濃縮并通過快速柱層析純化以得到所需淡黃色泡沫狀的產(chǎn)物(0.346g，73%產(chǎn)率)。^NMR(300MHz，CDC13)，S:8.35-8.43(1H，m)，7.56-8.05(2H'm)，7.01-7.41(8H，m)，6.卯-7.01(1H，m)，6.42(1H，dd，J=2.6，7.9Hz)，5.25-5.31(1H，m)，5.12(1H，q，J=5.2Hz)，4.40(1H，d，J5.4Hz)，4.00(1H，dd，J-3.1,15.8Hz)，3.60-3.70(1H，m)，3.35-3.40(1H，m)，1.33-1.94(21H,m)，0.98(3H，d，J=6.6Hz)，0.97(3H，d，J=6.6Hz)階段5:(SH3-[(2-羥基氨甲?；?苯并[b]噻吩-6-基甲基)-氨基]-芐基-氨基)-苯基-乙酸環(huán)戊酯(130)在(S)-[叔丁氧基羰基-(3-([2-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲酰基)-苯并[b]噻吩-6-基甲基]-氨基}-芐基)-氨基]-苯基-乙酸環(huán)戊酯(0.100g，0.14mmol)的DCM/MeOH(lml:lml)溶液中加入TFA(8ml)。將溶液攪拌2小時，然后用DCM(200ml)稀釋。溶液用飽和碳酸氫鈉(IOOml)洗滌。將溶液干燥(Na2S04)，濃縮并通過反相HPLC純化以得到所需產(chǎn)物(8.1mg，11%產(chǎn)率)。LCMS純度98。/。，m/z531(M+H)+300MHz，DMSO，5:1.26-1.85(8H，m)，3.47(2H，s)，4.21(1H，s)，4.38(2H，d，J5.8Hz)，5.02-5.07(m，m)，6.32(m，t,J6.0Hz)，6.45(2H，d，J7.9Hz)，6.57(1H,s)，6.97(1H，t，J7.8Hz)，7.23-7.35(5H，m)，7.42(1H，dd，J1.2，8.3Hz)，7.84(1H，s)，7.87(1H，s)，7.93(1H，s)，9.23(1H，brs)，11.4(1H，brs)以下化合物按照為化合物(130)描述的過程制備(S)-(3-[(2-羥基氨甲?；?苯并[b噻吩-6-基甲基)-氨基-芐基氨基卜環(huán)己基-乙酸環(huán)戊酯(131)LCMS純度>98%，m/z536.25(M+H)+，！HNMR(300MHz，d6-DMSO)，5:0.7-1.25(8H，m)，.50-1.95(14H,m),3.69(1H，brs)，3.98(2H，brs)，4.43(2H，brs)，5.14(1H，t，J5.4Hz)，6.60-6.71(2H，m)，7.05-7.28(3H，m)，7.43(1H,d，J8.5Hz)，7.83-7.98(2H，m)，9.25(1H，brs)，11.45(1H，brs)(S)-3-叔丁氧基-2-(3-[(2-羥基氨甲?；?苯并b噻吩-6-基甲基)-氨基]-節(jié)基氨基卜丙酸環(huán)戊酯(132)LCMS純度〉980/。，m/z540.25(M+H)+，&NMR(300MHz，d6-DMSO)，5:1.05(9H,s)，1.50-1.78(8H，m)，3.15-3.67(5H，m)，4.38(2H，d，J5.8Hz)，5.05-5.15(1H，m)，6.31(1H，t，J5.9Hz)，6.40-6.48(2H，m)，6.56(1H，s)，6.96(1H，t，J7.8Hz)，7.42(1H，d，J8.2Hz)，7.87(1H，s)，7.93(1H，s)，9.24(1H，brs)，11.43(1H，brs)(S)-2-(3-(2-羥基氨甲?；?苯并[b〗噻吩-6-基甲基)-氨基-節(jié)基氨基H-甲基-戊酸環(huán)戊酯(133)LCMS純度98%，m/z510.25(M+H)+,!HNMR(300固z,d6-DMSO)，5:0.87(6H，d，J6.4Hz)，1.50-1.94(IOH，m)，3.57-4.20(3H，m),4.44(2H，s)，5.20(1H，t，J5.8Hz)，6.58-6.74(3H，m)，7.11(IH,t，J7.7Hz)，7.43(1H，dJOHz)，7.85-7.96(3H，m)，9.38(2H，brs)，11.46(1H，brs)(S)-3-叔丁氧基-2書-[(2-羥基氨甲?；?苯并b噻吩-6-基甲基)-氨基]-節(jié)基氨基卜丙酸環(huán)戊酯(134)LCMS純度98%，m/z540.25(M+H)+，^NMR(300MHz，d4-MeOD)，S:7.64-7.77(2H，m)，7.28(1H，d，J=7.2Hz)，6.99(2H，d，J=6.6Hz)，6.53(2H，d，J=6.6Hz)，5.06-5.08(1H，m)，4.35(2H,s)，3.40-3.75(5H，m)，1.50-1.82(8H，m)，1.04(9H，s)測量生物學活性組蛋白脫乙?；富钚杂觅徸訠iomol的HDAC熒光活性試驗測量化合物抑制組蛋白脫乙?；富钚缘哪芰Α：喲灾?，在存在或不存在抑制劑時將尸&orA丄^^底物(一種s-氨基被乙?；馁嚢彼?與具有組蛋白脫乙?；富钚缘脑?HeLa細胞核提取物)一起孵育。底物的脫乙?；沟孜飳/"or血Z^^顯影劑敏感從而產(chǎn)生熒光。因此，將底物與具有HDAC活性的原料一起孵育導致信號增強，而當存在HDAC抑制劑時信號減弱。數(shù)據(jù)表達為占不存在抑制劑時測得的對照的百分比，所有樣品要減去背景信號，如下所示%活性=((Si-B)/(S°-B))xl00其中，Si是存在底物、酶和抑制劑時的信號，S。是存在底物、酶和載體時的信號，其中的抑制劑是被溶解的，而B是不存在酶時測得的背景信號。確定IC50值時釆用GraphpadPrism軟件，將8個數(shù)據(jù)點的結(jié)果擬合到具有可變斜率的S形劑量反應曲線方程(％活性與化合物濃度的對數(shù))，然后通過非線性回歸分析確定IC50值。利用HeLa細胞粗制核提取物的組蛋白脫乙?；富钚赃M行篩選。購自4C(Seneffe，Bdgium)的制品是從收獲自指數(shù)生長期的HeLa細胞制備的。按照DignamJD1983Nucl.Acid.Res.il，1475-1489制備核提取物，在液氮中急凍并儲存于-80'C。最終的緩沖液組成為20mMHepes、100mMKC1、0.2mMEDTA、0.5mMDTT、0.2mMPMSF和20。/。(v/v)甘油。IC50結(jié)果被歸入3個范圍之一，如下范圍A:IC50〈100nM，范圍B:IC50從101nM到1000nM;范圍C:IC50>1001nM。NT=未檢測實施例的化合物在該試驗中的測試結(jié)果給在下面的表2的第二列中。細胞抑制試驗收獲生長在對數(shù)期的相應的癌細胞系(Hela、U937和HUT)并以1000細胞/孔(最終體積為200ul)接種到96孔組織培養(yǎng)板上。細胞生長24小時后用化合物(最終濃度為20uM)處理細胞。然后再將平板孵育72小時，之后按照Skehan19卯JNatlCancInst82，1107-1112進行磺基羅丹明B(SRB)細胞存活試驗。數(shù)據(jù)表達為不存在抑制劑時測得的對照的抑制百分數(shù)，如下所示%抑制=ioo-((sVs°)xioo)其中，Si是存在抑制劑時的信號，S。是存在DMSO時的信號。確定IC50值時采用GraphpadPrism軟件，將8個數(shù)據(jù)點的結(jié)果擬合到具有可變斜率的S形劑量反應曲線方程(。/?；钚耘c化合物濃度的對數(shù))，然后通過非線性回歸分析確定IC50值。IC50結(jié)果被歸入3個范圍之一，如下范圍A:IC5(K330nM，范圍B:IC50從330nM到3300nM;范圍C:IC50>3301nM。NT=未檢測實施例的化合物在該試驗中的測試結(jié)果給在下面的表2的第3-5列中。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage143</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage144</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage145</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage146</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage147</column></row><table>破碎細胞羧酸酯酶試驗制備細胞提取物U937或Hctl16腫瘤細胞(約109，用4倍體積的DulbeccosPBS(約1升)洗滌并在4°。以160g離心IO分鐘使其沉淀)。重復兩次，然后在25"C將最終的細胞沉淀物重懸于35ml冷的勻漿緩沖液(Trizma10mM、NaCl130mM、CaCl20.5mMPH7.0)。通過氮氣氣蝕制備勻漿(700psi，50分鐘，4°C)。將勻漿保持在冰上并用設計的抑制劑混合物補足以得到以下最終濃度亮肽素lpM抑肽酶0.1pME648jiM胃酶抑素1.5nM胰凝乳蛋白酶抑制劑33pM將細胞勻漿在360rpm離心10分鐘以使其澄清，所得上清液被用作酯酶活性來源并可儲存于-8(TC直至使用。測量酯的切除用這種細胞提取物可測量酯變?yōu)橄鄳聂人岬乃庾饔?。為達到這種效果，將細胞提取物(約30ug/0.5ml總測試體積)在Tris-HCl25mM、125mMNaCl、緩沖液(25°。時PH為7.5)中于37"C孵育。在0時刻加入最終濃度為2.5pM的相應的酯(底物)并將樣品在37。C孵育適當時間(通常為0或80分鐘)。加入3倍體積的乙腈終止反應。對于0時刻樣品，在加入酯化合物之前加入乙腈。12000g離心5分鐘后，在室溫下通過LCMS(SciexAPI3000，HP1100二元泵，CTCPAL)分析母體酯及其相應的羧酸。采用的色譜條件基于AceCN(75X2.1mm)柱和流動相，流動相為5-95%乙腈水溶液/0.1%甲酸。權(quán)利要求1.式(I)的化合物或其鹽、N-氧化物、水合物或溶劑合物其中，R1是羧酸基(-COOH)或是可被一種或多種細胞內(nèi)羧酸酯酶水解成羧酸基的酯基；R2是天然或非天然α氨基酸的側(cè)鏈；Y是鍵、-C(＝O)-、-S(＝O)2-、-C(＝O)O-、-C(＝O)NR3-、-C(＝S)-NR3、-C(＝NH)NR3或-S(＝O)2NR3-，其中R3是氫或任選取代的C1-C6烷基；L1是式-(Alk1)m(Q)n(Alk2)p-的二價基團，其中，m、n和p獨立為0或1，Q是(i)具有5-13個環(huán)成員的任選取代的二價單環(huán)或雙環(huán)碳環(huán)或雜環(huán)基團，或(ii)，當m和p都是0時是式為-X2-Q1-或-Q1-X2-的二價基團，其中X2是-O-，S-或NRA-，其中RA是氫或任選取代的C1-C3烷基，Q1是具有5-13個環(huán)成員的任選取代的二價單環(huán)或雙環(huán)碳環(huán)或雜環(huán)基團，Alk1和Alk2獨立代表任選取代的二價C3-C7環(huán)烷基，或任選取代的直鏈或支鏈的C1-C6亞烷基、C2-C6亞烯基或C2-C6亞炔基，所述基團可任選含有或終止于醚(-O-)、硫醚(-S-)或氨基(-NRA-)連接，其中，RA是氫或任選取代的C1-C3烷基；X1代表鍵；-C(＝O)；或-S(＝O)2-；-NR4C(＝O)-、-C(＝O)NR4-、-NR4C(＝O)NR5-、-NR4S(＝O)2-或-S(＝O)2NR4-，其中R4和R5獨立為氫或任選取代的C1-C6烷基；z是0或1；A代表任選取代的單環(huán)、二環(huán)或三環(huán)碳環(huán)或雜環(huán)環(huán)系統(tǒng)，其中，基團R1R2NH-Y-L1-X1-[CH2]z-和HONHCO-[鍵合基]-結(jié)合于不同的環(huán)原子；和-[鍵合基]-代表連接A中的環(huán)原子與異羥肟酸基CONHOH的二價鍵合基，該鍵合基的長度，即從連接A的環(huán)原子的最后一個原子到連接異羥肟酸基的最后一個原子的長度，等于含有3-10個碳原子的無支鏈飽和烴鏈的長度。2.如權(quán)利要求1所述的化合物，其特征在于，所述鍵合基的長度等于含有4-9個:鍵合基1—CONHOH(I)碳原子的無支鏈飽和烴鏈的長度。3.如權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所述的化合物，其特征在于，-[鍵合基]-代表式為-(012))^丄2-的二價基團，其中X是0或1;Z是鍵、-NR3C(=0)-、-C(=0)NR3-、-NR4C(=0)-NRr、-C(=S)-NR3、-C^NH)-NR3-NR3S(K))2-或-S^O)2NRr，其中R3是氫或C-C6烷基；-C(=0);或-S(=0)2-;和LM戈表任選取代的直鏈或支鏈的CVC7亞垸基、CVC6亞烯基或C4-C6亞炔基，所述基團可任選含有或終止于醚(-O-)、硫醚(-S-)或氨基(-NRA-)連接，其中，RA是氫或任選取代的C,-C3烷基。4.如權(quán)利要求2或權(quán)利要求3所述的化合物，其特征在于，x是0。5.如權(quán)利要求2-4中任一項所述的化合物，其特征在于，Z是-C(^0)-、-NHC(K))-或-C—0)NH-。6.如權(quán)利要求2-5中任一項所述的化合物，其特征在于，1^是-(CH2)5-、-(CH2)6-或-(CH2)7陽。7.如權(quán)利要求1所述的化合物，其特征在于，-[鍵合基]-代表式為-(<:!12))4丄3-^1丄4-的二價基團，其中x是0或1;L^是Z或I^或Z-L2，其特征在于，Z如權(quán)利要求3中的定義，1^是鍵或任選取代的二價C,-C3亞垸基；Ar1是二價苯基或具有5-13個環(huán)成員的二價單環(huán)或二環(huán)雜芳基，和L4是鍵或任選取代的-CH2-或-CHK:H-。8.如權(quán)利要求7所述的化合物，其特征在于，x是0。9.如權(quán)利要求7或權(quán)利要求8所述的化合物，其特征在于，1^是Z或Z-L2，其中Z是-NH-、-NHS(=0)2-、-8(=0)2,-或-3(=0)2-;L2是-CHr和L4是鍵或-CHr。10.如權(quán)利要求7或權(quán)利要求8所述的化合物，其特征在于，！^是L2，其中L2是直鏈CVC5亞垸基，所述基團可任選含有醚(-O-)、硫醚(-S-)或氨基(-NRA-)連接，其中，RA是氫或任選取代的CVC3垸基，例如羥乙基。11.如權(quán)利要求7-10中任一項所述的化合物，其特征在于，"是-CI^CH-。12.如權(quán)利要求7-10中任一項所述的化合物，其特征在于，L^是-CH2-。13.如權(quán)利要求7-12中任一項所述的化合物，其特征在于，A^是選自下組的二價基團<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中，X是O、S或NH。14.如權(quán)利要求7所述的化合物，其特征在于，x是0，1^和"是鍵，A^是二價苯基或具有9-13個環(huán)成員的二價二環(huán)雜芳基。15.如權(quán)利要求7所述的化合物，其特征在于，Ar1是二價苯基或下式所示的二價苯并[b]噻吩基16.如權(quán)利要求1所述的化合物，其特征在于，-[鍵合基]-代表式為-((^2))(丄3-8-/^1丄4-的二價基團，其中x、Ar1、1^3和"如權(quán)利要求7-13中任一項中的定義；B是單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)系統(tǒng)。17.如權(quán)利要求16所述的化合物，其特征在于，B選自下組.-<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中，X是N，W是NH、O或S。18.如上述權(quán)利要求中任一項所述的化合物，其特征在于，A是任選被取代的以下基團之一<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中，RH)是氫或任選取代的CrCV烷基，顯示為連接到固定原子的被波浪線貫穿的鍵連接化合物(I)中的鍵合基，而顯示為浮動的另一個鍵將所示的環(huán)系統(tǒng)中任何方便的環(huán)原子連接到R,R2CHNHYi;xi[CH2]z基團。19.如上述權(quán)利要求中任一項所述的化合物，其特征在于，z是0。20.如上述權(quán)利要求中任一項所述的化合物，其特征在于，Y是-S(K))2-、-C(=S)-NR3、《(=順)-順3或-8(=0)2服3-，其中R3是氫或C廣C6烷基。21.如權(quán)利要求1-19中任一項所述的化合物，其特征在于，Y是鍵。22.如上述權(quán)利要求中任一項所述的化合物，其特征在于，在基團L'中，當Alk1和Alk2存在時其選自-CHr、-CH2CHr、-CH2CH2CH2-、以及二價環(huán)丙基、環(huán)戊基和環(huán)己基。23.如上述權(quán)利要求中任一項所述的化合物，其特征在于，在基團lJ中，Q是二價苯基或具有5-13個環(huán)成員的單環(huán)或二環(huán)雜芳基。24.如權(quán)利要求22所述的化合物，其特征在于，Q是l,4-亞苯基。25.如上述權(quán)利要求中任一項所述的化合物，其特征在于，在基團L'中，m和p是0。26.如權(quán)利要求1-24中任一項所述的化合物，在基團I^中，n和p是0，m是l。27.如權(quán)利要求1-24中任一項所述的化合物，在基團U中，m、n和p都是0。28.如上述權(quán)利要求中任一項所述的化合物，其特征在于，基團-Y-LLxL[CH2;^選自-C(=0)-、-C(=0)NH-、-(CH2)v-、-(CH2)vO-、-C(=0)-(CH2)v-、-C(=0)-(CH2)vO-、-C(=0)-NH-(CH2)w-、-C(=0)-NH-(CH2)wO-、^H^^~(CH2)wO卜TO^(CH2)w01"其中，v是l、2、3或4，w是l、2或3。29.如權(quán)利要求1-27中任一項所述的化合物，其特征在于，基團-￥丄1-乂1-[(:112]2-是-<:12-、-ch2o-、-c(=o)-ch2-、-c(=o)-ch2o-、-<:(=0)-則陽012-或-(:(=0)-順-0120-。30.如上述權(quán)利要求中任一項所述的化合物，其特征在于，R,是式-(CK))OR9的酯基，其中，R9是(i)R7R8CH-，其中R7是任選取代的(CrC3)烷基-(Z、-(d-C3)烷基-或(CrC3)烯基-^、-(€:1-(:3)烷基-，其中，a是o或i，z'是-o-、-s-或-nh-，仗8是氫或((:1-(:3)烷基-或R7和R8與它們所結(jié)合的碳原子一起形成任選取代的C3-C7環(huán)垸基環(huán)或含有5個或6個環(huán)原子的任選取代的雜環(huán)；或(ii)任選取代的苯基或含有5或6個環(huán)原子的單環(huán)雜環(huán)。31.如權(quán)利要求30所述的化合物，其特征在于，R9是甲基、乙基、正或異丙基，正或仲丁基、環(huán)己基、烯丙基、苯基、芐基、2-、3-或4-吡啶基甲基、N-甲基哌啶-4-基、四氫呋喃-3-基或甲氧基乙基。32.如權(quán)利要求30所述的化合物，其特征在于，R9是環(huán)戊基。33.如上述權(quán)利要求中任一項所述的化合物，其特征在于，R2是環(huán)己基甲基、環(huán)己基、吡啶-3-基甲基、仲丁基、叔丁基、l-芐硫基-l-甲基乙基、l-甲硫基-l-甲基乙基或l-巰基-l-甲基乙基。34.如權(quán)利要求1-32中任一項所述的化合物，其特征在于，R2是氫。35.如權(quán)利要求1-32中任一項所述的化合物，其特征在于，R2是苯基、芐基、苯基乙基、叔丁氧基甲基或異丁基。36.如權(quán)利要求1所述的具有文中具體實施例中的任何化合物的結(jié)構(gòu)的化合物。37.—種藥物組合物，所述藥物組合物含有如上述任一權(quán)利要求所述的化合物以及藥學上可接受的載體。38.如權(quán)利要求1-36中任一項所述的式(I)的化合物在制備用于抑制HDAC酶活性的組合物中的應用。39.如權(quán)利要求38所述的應用，用于在體外或體內(nèi)抑制HDAC1活性。40.—種抑制HDAC酶活性的方法，所述方法包括使該酶接觸有效產(chǎn)生這種抑制的量的如權(quán)利要求1-36中任一項所述的化合物。41.一種相對于其它細胞類型在巨噬細胞和/或單核細胞中選擇性抑制HDAC酶活性的方法，所述方法包括使該酶接觸有效產(chǎn)生這種抑制的量的如權(quán)利要求1-36中任一項所述的化合物，其中，Y是鍵、-S(=0)2或-S^O)2NR3-，其中R3是氫或任選取代的d-C6烷基。42.如權(quán)利要求40或權(quán)利要求41所述的方法，用于在體外或體內(nèi)抑制HDAC1活性。43.—種治療細胞增殖疾病、聚谷氨酰胺病、神經(jīng)變性疾病、自身免疫性疾病、炎性疾病、器官移植排斥、糖尿病、血液學疾病和感染的方法，所述方法包括給予患有這種疾病的對象有效量的如權(quán)利要求1-36中任一項所述的式(I)的化合物。44.如權(quán)利要求43所述的方法，用于治療癌細胞增殖、亨廷頓病或阿耳茨海默病。45.如權(quán)利要求43所述的方法，用于治療類風濕性關節(jié)炎。46.—種相對于其它細胞類型在巨噬細胞和/或單核細胞中選擇性抑制aurora激酶活性的方法，所述方法包括使所述酶接觸有效產(chǎn)生這種抑制的量的如權(quán)利要求1-36中任一項所述的化合物，其中，Y是鍵、-3(=0)2或-3(=0)2順3-，其中R3是氫或任選取代的CVCV烷基。47.如權(quán)利要求37所述的藥物組合物，所述藥物組合物適合局部給藥，且在如權(quán)利要求1-36中任一項所述的化合物中，R2通過亞甲基-CH2-連接到碳原子上。全文摘要式(I)的化合物是組蛋白脫乙酰酶活性的抑制劑，并可用于治療例如癌癥，其中，R₁是羧酸基(-COOH)或是可被一種或多種細胞內(nèi)羧酸酯酶水解成羧酸基的酯基；R₂是天然或非天然α氨基酸的側(cè)鏈；Y是鍵、-C(＝O)-、-S(＝O)₂-、-C(＝O)O-、-C(＝O)NR₃-、-C(＝S)-NR₃、-C(＝NH)NR₃或-S(＝O)₂NR₃-，其中R₃是氫或任選取代的C₁-C₆烷基；L¹是式-(Alk¹)_m(Q)_n(Alk²)_p-的二價基團，其中，m、n和p獨立為0或1，Q是(i)具有5-13個環(huán)成員的任選取代的二價單環(huán)或雙環(huán)碳環(huán)或雜環(huán)基團，或(ii)，當m和p都是0時是式-X²-Q¹-或-Q¹-X²-的二價基團，其中X²是-O-，S-或NR^A-，其中R^A是氫或任選取代的C₁-C₃烷基，Q¹是具有5-13個環(huán)成員的任選取代的二價單環(huán)或雙環(huán)碳環(huán)或雜環(huán)基團，Alk¹和Alk²獨立代表任選取代的二價C₃-C₇環(huán)烷基，或任選取代的直鏈或支鏈的C₁-C₆亞烷基、C₂-C₆亞烯基或C₂-C₆亞炔基，所述基團可任選含有或終止于醚(-O-)、硫醚(-S-)或氨基(-NR^A-)連接，其中，R^A是氫或任選取代的C₁-C₃烷基；X¹代表鍵；-C(＝O)；或-S(＝O)₂-；-NR₄C(＝O)-、-C(＝O)NR₄-、-NR₄C(＝O)NR₅-、-NR₄S(＝O)₂-或-S(＝O)₂NR₄-，其中R₄和R₅獨立為氫或任選取代的C₁-C₆烷基；z是0或1；A代表任選取代的單環(huán)、二環(huán)或三環(huán)碳環(huán)或雜環(huán)環(huán)系統(tǒng)，其中，基團R₁R₂NH-Y-L¹-X¹-[CH₂]_z-和HONHCO-[鍵合基]-結(jié)合于不同的環(huán)原子；和-[鍵合基]-代表連接A中的環(huán)原子與異羥肟酸基CONHOH的二價鍵合基，該鍵合基的長度，即從連接A的環(huán)原子的最后一個原子到連接異羥肟酸基的最后一個原子的長度，等于含有3-10個碳原子的無支鏈飽和烴鏈的長度。文檔編號C07D207/40GK101133060SQ200680006916公開日2008年2月27日申請日期2006年5月4日優(yōu)先權(quán)日2005年5月5日發(fā)明者A·D·G·唐納爾德,A·H·德呂蒙,A·H·戴維森,D·F·C·莫法特,F·A·馬塞,K·W·J·貝克,S·J·戴維斯,S·R·佩特爾申請人:色品療法有限公司