專(zhuān)利名稱(chēng)：抑制β-分泌酶(SECRETASE)活性的化合物及其使用方法
相關(guān)申請(qǐng)的交叉參考
本申請(qǐng)要求于2005年4月8日提交的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)60/669,541及于2005年9月14日提交的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)60/717,541的權(quán)益，這些申請(qǐng)各自整體引入本文作為所有目的的參考。
關(guān)于對(duì)在聯(lián)邦政府資助的研究或開(kāi)發(fā)下
進(jìn)行的發(fā)明的權(quán)利的聲明
由政府支持、在由國(guó)立衛(wèi)生研究院給予的資金AG-18933和AI-38189下進(jìn)行了本發(fā)明。政府擁有本發(fā)明中的某些權(quán)利。
背景技術(shù)：
阿爾茨海默病是一種人的進(jìn)行性精神衰退，尤其導(dǎo)致記憶缺失、錯(cuò)亂和定向障礙。阿爾茨海默病占老年性癡呆的大部分，是成人死亡的主要原因(Anderson，R.N.，Natl.Vital Stat.Rep.491-87(2001)，該文獻(xiàn)的教導(dǎo)整體引入本文)。在組織學(xué)上，患有阿爾茨海默病的人的腦部特征為主要由腦內(nèi)β-淀粉狀蛋白(Aβ)積聚所引起的細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)原纖維畸變以及存在老年斑，這些老年斑由具有淀粉狀蛋白核心的顆粒狀或絲狀嗜銀團(tuán)所組成。Aβ積聚在該疾病的發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮著作用(Selkoe，DJ.，Nature 39923-31(1999))，其為淀粉樣前體蛋白(APP)的蛋白水解片段。APP首先由β-分泌酶(還稱(chēng)為memapsin 2)切割、然后再由γ-分泌酶切割而生成Aβ(Lin，X.等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 971456-1460(2000)；De Stropper，B.等人，Nature 397387-390(1998))。
需要開(kāi)發(fā)用于治療阿爾茨海默病的有效化合物和方法。本發(fā)明實(shí)現(xiàn)了這些及其它需要。
發(fā)明概述 本發(fā)明提供了新的β-分泌酶抑制劑及其使用方法、包括治療阿爾茨海默病的方法。
一方面，本發(fā)明提供了具有(I)式的β-分泌酶抑制劑化合物
在式(I)中，R1是鹵素、-OH、-CF3、-NO2、-NR8R9、-OR10、-S(O)nR11、-C(O)R12、氫、取代或未取代的C3-C20烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基或者-L4-Y。
R5是鹵素、-OH、-CF3、-NO2、-NR8R9、-OR10、-S(O)nR11、-C(O)R12、氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。
R2和R3獨(dú)立地是鹵素、-CF3、-NO2、-NR8R9、-OR10、-S(O)nR11、-C(O)R12、氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基或者-L4-Y。
R4是鹵素、-OH、-CF3、-NO2、-NR8R9、-OR10、-S(O)nR11、-C(O)R12、氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基或者-L4-Y。
R6和R7獨(dú)立地是-S(O)2R11、-C(O)R12、-NR8R9、氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基或者-L4-Y。
符號(hào)n表示0至2的整數(shù)。
R8獨(dú)立地是-C(O)R13、-S(O)2R14、氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。
R9獨(dú)立地是氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。
R10獨(dú)立地是-C(O)R13、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。
R11獨(dú)立地是氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。如果n是2，則R11任選是-NR15R16。如果n是1或2，則R11不是氫。
R12獨(dú)立地是-NR18R19、-OR19、氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。
R13獨(dú)立地是-OR19、-NR18R19、氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。
R14獨(dú)立地是-NR18R19、氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。
R18和R19獨(dú)立地是氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。
R15和R16獨(dú)立地是氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。
L1和L3獨(dú)立地是價(jià)鍵、-NR17-、-S(O)q-、取代或未取代的亞烷基或者取代或未取代的雜亞烷基。L2是取代或未取代的亞烷基、-NR17-、-S(O)q-或者取代或未取代的雜亞烷基。
R17獨(dú)立地是氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。
符號(hào)q表示0至2的整數(shù)。
A1和A2獨(dú)立地是取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。Y是載體部分。
L4是價(jià)鍵、-OP(OH)2O-、-C(O)OR20-、-C(O)NHR21-、-S(O)2NHR22-、取代或未取代的亞烷基、取代或未取代的雜亞烷基或者肽基連接基。
R20、R21和R22獨(dú)立地是取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。
在本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明的β-分泌酶抑制劑化合物可以用于分別相對(duì)于在沒(méi)有β-分泌酶抑制劑的存在下memapsin 2催化活性、β-分泌酶位點(diǎn)水解和β-淀粉狀蛋白積聚的量而言降低memapsin 2催化活性、減少memapsin 2底物的β-分泌酶位點(diǎn)水解和/或減少β-淀粉狀蛋白積聚的方法。
另一方面，本發(fā)明提供了包含本發(fā)明的memapsin 2 β-分泌酶抑制劑化合物或者memapsin 2 β-分泌酶抑制劑化合物與可藥用載體的組合的藥物組合物。
在本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明的β-分泌酶抑制劑化合物可以用于治療與β-分泌酶活性、β-淀粉樣前體蛋白的β-分泌酶位點(diǎn)水解和/或β-淀粉狀蛋白積聚有關(guān)的疾病或病癥。一般地，治療哺乳動(dòng)物的疾病或病癥。在示例性實(shí)施方案中，該疾病是阿爾茨海默病。
發(fā)明詳述 縮略語(yǔ)和定義 本文所用的縮略語(yǔ)具有其在化學(xué)和生物學(xué)領(lǐng)域內(nèi)的常規(guī)含義。本文提出的化學(xué)結(jié)構(gòu)和化學(xué)式按照化學(xué)領(lǐng)域中已知的化學(xué)價(jià)的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)則而構(gòu)建。
當(dāng)取代基基團(tuán)由其從左向右書(shū)寫(xiě)的常規(guī)的化學(xué)式來(lái)說(shuō)明時(shí)，它們同樣包括由從右向左書(shū)寫(xiě)該結(jié)構(gòu)所產(chǎn)生的化學(xué)上等同的取代基，例如-CH2O-等同于-OCH2-。
術(shù)語(yǔ)“烷基”本身或作為其它取代基的一部分表示直鏈(即無(wú)分枝)或支鏈或者二者的組合，這些鏈可以是完全飽和、單或多元不飽和的并且可以包括二價(jià)和多價(jià)基團(tuán)，具有指定的碳原子數(shù)(即C1-C10表示1至10個(gè)碳)，另有說(shuō)明除外。飽和烴基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于例如如下基團(tuán)甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、異丁基、仲丁基、(環(huán)己基)甲基、同系物和異構(gòu)體如正戊基、正己基、正庚基、正辛基等的同系物和異構(gòu)體。不飽和烷基是具有一條或多條雙鍵或三鍵的烷基。不飽和烷基的實(shí)例包括但不限于乙烯基、2-丙烯基、丁烯基、2-異戊烯基、2-(丁二烯基)、2，4-戊二烯基、3-(1，4-戊二烯基)、乙炔基、1-和3-丙炔基、3-丁炔基以及更高級(jí)的同系物和異構(gòu)體。烷氧基是通過(guò)氧連接基(-O-)與分子的剩余部分連接的烷基。
術(shù)語(yǔ)“亞烷基”本身或作為其它取代基的一部分表示由烷基衍生的二價(jià)基團(tuán)，例如但不限于-CH2CH2CH2CH2-，該術(shù)語(yǔ)還包括下文作為“雜亞烷基”所述的那些基團(tuán)。一般地，烷基(或亞烷基)可具有1至24個(gè)碳原子，在本發(fā)明中優(yōu)選具有10個(gè)或更少碳原子的那些基團(tuán)。“低級(jí)烷基”或“低級(jí)亞烷基”是通常具有8個(gè)或更少碳原子的短鏈烷基或亞烷基。
術(shù)語(yǔ)“雜烷基”本身或與其它術(shù)語(yǔ)組合時(shí)表示包括至少一個(gè)碳原子和至少一個(gè)選自O(shè)、N、P、Si和S的雜原子并且其中氮和硫原子可以任選被氧化且氮雜原子可以任選被季銨化的穩(wěn)定的直鏈或支鏈或環(huán)狀烴基團(tuán)，或者它們的組合，另有說(shuō)明除外。雜原子O、N、P和S以及Si可以位于雜烷基的任意內(nèi)部位置或位于烷基與分子的剩余部分連接的位置。實(shí)例包括但不限于-CH2-CH2-O-CH3、-CH2-CH2-NH-CH3、-CH2-CH2-N(CH3)-CH3、-CH2-S-CH2-CH3、-CH2-CH2、-S(O)-CH3、-CH2-CH2-S(O)2-CH3、-CH＝CH-O-CH3、-Si(CH3)3、-CH2-CH＝N-OCH3、-CH＝CH-N(CH3)-CH3、O-CH3、-O-CH2-CH3和-CN。最多2個(gè)雜原子可以是相鄰的，例如-CH2-NH-OCH3和-CH2-O-Si(CH3)3。類(lèi)似地，術(shù)語(yǔ)“雜亞烷基”本身或作為其它取代基的一部分表示由雜烷基衍生的二價(jià)基團(tuán)，例如但不限于-CH2-CH2-S-CH2-CH2-和-CH2-S-CH2-CH2-NH-CH2-。對(duì)于雜亞烷基，雜原子還可以占據(jù)兩個(gè)鏈末端的任一端或兩端(例如亞烷基氧基、亞烷基二氧基、亞烷基氨基、亞烷基二氨基等)。此外，對(duì)于亞烷基和雜亞烷基連接基團(tuán)，連接基團(tuán)沒(méi)有通過(guò)連接基團(tuán)的結(jié)構(gòu)式書(shū)寫(xiě)的方向進(jìn)行定位。例如，式-C(O)2R′-既表示-C(O)2R′-，又表示-R′C(O)2-。如上所述，如本文所用的雜烷基包括通過(guò)雜原子與分子的剩余部分連接的那些基團(tuán)，例如-C(O)R′、-C(O)NR′、-NR′R″、-OR′、-SR′和/或-SO2R′。當(dāng)描述“雜烷基”、然后描述特定的雜烷基如-NR′R″等時(shí)，應(yīng)當(dāng)理解，術(shù)語(yǔ)雜烷基和-NR′R″不是多余的或互相排斥的。更確切地說(shuō)，描述特定的雜烷基可更加清楚。因此，術(shù)語(yǔ)“雜烷基”在本文中不應(yīng)解釋為排除特定的雜烷基、例如-NR′R″等。
術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”和“雜環(huán)烷基”本身或與其它術(shù)語(yǔ)組合時(shí)分別表示“烷基”和“雜烷基”的環(huán)狀形式，另有說(shuō)明除外。此外，對(duì)于雜環(huán)烷基，雜原子還可以占據(jù)雜環(huán)與分子的剩余部分連接的位置。環(huán)烷基的實(shí)例包括但不限于環(huán)戊基、環(huán)己基、1-環(huán)己烯基、3-環(huán)己烯基、環(huán)庚基等。雜環(huán)烷基的實(shí)例包括但不限于1-(1，2，5，6-四氫吡啶基)、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-嗎啉基、3-嗎啉基、四氫呋喃-2-基、四氫呋喃-3-基、四氫噻吩-2-基、四氫噻吩-3-基、1-哌嗪基、2-哌嗪基等。
術(shù)語(yǔ)“鹵代基”或“鹵素”本身或作為其它取代基的一部分表示氟、氯、溴或碘原子，另有說(shuō)明除外。此外，術(shù)語(yǔ)如“鹵代烷基”還意欲包括單鹵代烷基和多鹵代烷基。例如，術(shù)語(yǔ)“鹵代(C1-C4)烷基”意欲包括但不限于三氟甲基、2，2，2-三氟乙基、4-氯丁基、3-溴丙基等。
術(shù)語(yǔ)“芳基”表示多元不飽和的芳香族烴取代基，所述芳香族烴取代基可以是單環(huán)或者稠合在一起或共價(jià)連接的多環(huán)(優(yōu)選1至3個(gè)環(huán))，另有說(shuō)明除外。術(shù)語(yǔ)“雜芳基”指含有1至4個(gè)選自N、O和S的雜原子的芳基基團(tuán)(或環(huán))，其中氮和硫原子任選被氧化且氮原子任選被季銨化。雜芳基可以通過(guò)碳或雜原子與分子的剩余部分連接。芳基和雜芳基的非限制性實(shí)例包括苯基、1-萘基、2-萘基、4-聯(lián)苯基、1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、3-吡唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、吡嗪基、2-唑基、4-唑基、2-苯基-4-唑基、5-唑基、3-異唑基、4-異唑基、5-異唑基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-苯并噻唑基、嘌呤基、2-苯并咪唑基、5-吲哚基、1-異喹啉基、5-異喹啉基、2-喹喔啉基、5-喹喔啉基、3-喹啉基和6-喹啉基。以上所指的各芳基和雜芳基環(huán)系統(tǒng)的取代基選自下述的可接受的取代基。
為了簡(jiǎn)短，當(dāng)術(shù)語(yǔ)“芳基”與其它術(shù)語(yǔ)組合使用時(shí)(例如芳氧基、芳基硫氧基(arylthioxy)、芳基烷基)，該術(shù)語(yǔ)既包括如上定義的芳基環(huán)，又包括如上定義的雜芳基環(huán)。因而，術(shù)語(yǔ)“芳基烷基”意欲包括其中芳基與烷基連接的那些基團(tuán)(例如芐基、苯乙基、吡啶基甲基等)，所述烷基包括其中碳原子(例如亞甲基)已經(jīng)被例如氧原子替換的那些烷基(例如苯氧甲基、2-吡啶氧基甲基、3-(1-萘氧基)丙基等)。
如本文所用的術(shù)語(yǔ)“氧代基”表示通過(guò)雙鍵與碳原子結(jié)合的氧。
如本文所用的術(shù)語(yǔ)“烷基磺?；北硎揪哂惺?S(O2)-R′的部分，其中R′是如上定義的烷基。R′可以具有特定數(shù)目的碳(例如“C1-C4烷基磺?；?。
以上術(shù)語(yǔ)(例如“烷基”、“雜烷基”、“芳基”和“雜芳基”)各自意欲包括所述基團(tuán)的取代和未取代形式。各類(lèi)型基團(tuán)的優(yōu)選的取代基在下文提供。
烷基和雜烷基(包括通常稱(chēng)為亞烷基、鏈烯基、雜亞烷基、雜鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基和雜環(huán)烯基的那些基團(tuán))的取代基可以是一個(gè)或多個(gè)各種基團(tuán)，所述基團(tuán)選自但不限于-OR′、＝O、＝NR′、＝N-OR′、-NR′R″、-SR′、-鹵素、-SiR′R″R、-OC(O)R′、-C(O)R′、-CO2R′、-CONR′R″、-OC(O)NR′R″、-NR″C(O)R′、-NR′-C(O)NR″R、-NR″C(O)2R′、-NR-C(NR′R″R)＝NR′、-NR-C(NR′R″)＝NR、-S(O)R′、-S(O)2R′、-S(O)2NR′R″、-NRSO2R′、-CN和-NO2，其數(shù)目為0至(2m′+1)，其中m′為所述基團(tuán)中碳原子的總數(shù)。R′、R″、R和R′各自?xún)?yōu)選獨(dú)立地指氫、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基(例如被1-3個(gè)鹵素取代的芳基)、取代或未取代的烷基、烷氧基或硫代烷氧基或芳基烷基。當(dāng)本發(fā)明的化合物包括一個(gè)以上R基團(tuán)時(shí)，對(duì)各R基團(tuán)進(jìn)行獨(dú)立的選擇，如同各R′、R″、R和R′基團(tuán)那樣，如果存在一個(gè)以上這些基團(tuán)的話(huà)。當(dāng)R′和R″與同一氮原子連接時(shí)，它們可以與氮原子組合而形成4、5、6或7元環(huán)。例如，-NR′R″意欲包括但不限于1-吡咯烷基和4-嗎啉基。由以上對(duì)取代基的討論，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，術(shù)語(yǔ)“烷基”意欲包括如下基團(tuán)包括與基團(tuán)而非氫基團(tuán)結(jié)合的碳原子的基團(tuán)，例如鹵代烷基(例如-CF3和-CH2CF3)和酰基(例如-C(O)CH3、-C(O)CF3、-C(O)CH2OCH3等)。
與對(duì)烷基所述的取代基類(lèi)似，芳基和雜芳基的取代基有多種并且例如選自數(shù)目為0至芳香族環(huán)系統(tǒng)上開(kāi)價(jià)的總數(shù)目的如下基團(tuán)鹵素、-OR′、-NR′R″、-SR′、-鹵素、-SiR′R″R、-OC(O)R′、-C(O)R′、-CO2R′、-CONR′R″、-OC(O)NR′R″、-NR″C(O)R′、-NR′-C(O)NR″R、-NR″C(O)2R′、-NR-C(NR′R″R)＝NR′、-NR-C(NR′R″)＝NR、-S(O)R′、-S(O)2R′、-S(O)2NR′R″、-NRSO2R′、-CN和-NO2、-R′、-N3、-CH(Ph)2、氟(C1-C4)烷氧基和氟(C1-C4)烷基；其中R′、R″、R和R′優(yōu)選獨(dú)立地選自氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基和取代或未取代的雜芳基。當(dāng)本發(fā)明的化合物包括一個(gè)以上R基團(tuán)時(shí)，對(duì)各R基團(tuán)進(jìn)行獨(dú)立的選擇，如同各R′、R″、R和R′基團(tuán)那樣，如果存在一個(gè)以上這些基團(tuán)的話(huà)。
芳基環(huán)或雜芳基環(huán)相鄰原子上的取代基中的兩個(gè)可以任選形成式-T-C(O)-(CRR′)q-U-的環(huán)，其中T和U獨(dú)立地是-NR-、-O-、-CRR′-或單鍵，q是0至3的整數(shù)?；蛘?，芳基環(huán)或雜芳基環(huán)相鄰原子上的取代基中的兩個(gè)可以任選被式-A-(CH2)r-B-的取代基替換，其中A和B獨(dú)立地是-CRR′-、-O-、-NR-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-S(O)2NR′-或單鍵，r是1至4的整數(shù)。如此形成的新環(huán)的單鍵中的一條可以任選被雙鍵替換?；蛘?，芳基環(huán)或雜芳基環(huán)相鄰原子上的取代基中的兩個(gè)可以任選被式-(CRR′)s-X′-(C″R)d-的取代基替換，其中s和d獨(dú)立地是0至3的整數(shù)，X′是-O-、-NR′-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-或-S(O)2NR′。取代基R、R′、R″和R″優(yōu)選獨(dú)立地選自氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基和取代或未取代的雜芳基。
如本文所用的術(shù)語(yǔ)“雜原子”或“環(huán)雜原子”意欲包括氧(O)、氮(N)、硫(S)、磷(P)和硅(Si)。
如本文所用的“取代基”表示選自以下部分的基團(tuán) (A)-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、氧代基、鹵素、未取代的烷基、未取代的雜烷基、未取代的環(huán)烷基、未取代的雜環(huán)烷基、未取代的芳基、未取代的雜芳基，以及 (B)被至少一個(gè)選自如下的取代基取代的烷基、雜烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基和雜芳基 (i)氧代基、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、鹵素、未取代的烷基、未取代的雜烷基、未取代的環(huán)烷基、未取代的雜環(huán)烷基、未取代的芳基、未取代的雜芳基，以及 (ii)被至少一個(gè)選自如下的取代基取代的烷基、雜烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基和雜芳基 (a)氧代基、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、鹵素、未取代的烷基、未取代的雜烷基、未取代的環(huán)烷基、未取代的雜環(huán)烷基、未取代的芳基、未取代的雜芳基，以及 (b)被至少一個(gè)選自如下的取代基取代的烷基、雜烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基氧代基、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、鹵素、未取代的烷基、未取代的雜烷基、未取代的環(huán)烷基、未取代的雜環(huán)烷基、未取代的芳基和未取代的雜芳基。
如本文所用的“大小有限的取代基”或“大小有限的取代基基團(tuán)”表示選自以上對(duì)“取代基”所述的所有取代基的基團(tuán)，其中，取代或未取代的烷基各自是取代或未取代的C1-C20烷基，取代或未取代的雜烷基各自是取代或未取代的2至20元雜烷基，取代或未取代的環(huán)烷基各自是取代或未取代的C4-C8環(huán)烷基，取代或未取代的雜環(huán)烷基各自是取代或未取代的4至8元雜環(huán)烷基。
如本文所用的“低級(jí)取代基”或“低級(jí)取代基基團(tuán)”表示選自以上對(duì)“取代基”所述的所有取代基的基團(tuán)，其中，取代或未取代的烷基各自是取代或未取代的C1-C8烷基，取代或未取代的雜烷基各自是取代或未取代的2至8元雜烷基，取代或未取代的環(huán)烷基各自是取代或未取代的C5-C7環(huán)烷基，取代或未取代的雜環(huán)烷基各自是取代或未取代的5至7元雜環(huán)烷基。
術(shù)語(yǔ)“可藥用鹽”意欲包括用相對(duì)無(wú)毒的酸或堿制備的活性化合物的鹽，這取決于在本文所述的化合物上發(fā)現(xiàn)的具體的取代基。當(dāng)本發(fā)明的化合物含有相對(duì)酸性的官能團(tuán)時(shí)，可以通過(guò)單獨(dú)或在適宜的惰性溶劑中使這些化合物的中性形式與足量的所需堿接觸，得到堿加成鹽?？伤幱脡A加成鹽的實(shí)例包括鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、銨鹽、有機(jī)氫基鹽或鎂鹽或者類(lèi)似的鹽。當(dāng)本發(fā)明的化合物含有相對(duì)堿性的官能團(tuán)時(shí)，可以通過(guò)單獨(dú)或在適宜的惰性溶劑中使這些化合物的中性形式與足量的所需酸接觸，得到酸加成鹽?？伤幱盟峒映甥}的實(shí)例包括由無(wú)機(jī)酸和相對(duì)無(wú)毒的有機(jī)酸衍生的那些鹽，所述無(wú)機(jī)酸的鹽例如有鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硝酸鹽、碳酸鹽、碳酸氫鹽、磷酸鹽、磷酸氫鹽、磷酸二氫鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、氫碘酸鹽或亞磷酸鹽等，所述有機(jī)酸例如有乙酸、丙酸、異丁酸、馬來(lái)酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、富馬酸、乳酸、扁桃酸、酞酸、苯磺酸、對(duì)甲苯磺酸、枸櫞酸、酒石酸、甲磺酸等。還包括氨基酸鹽如精氨酸鹽等以及有機(jī)酸鹽如葡糖醛酸鹽或半乳糖醛酸(galactunoric acid)鹽等(例如參見(jiàn)Berge等人，“Pharmaceutical Salts”，Journal OF Pharmaceutical Science，1977，66，1-19)。本發(fā)明的某些特定的化合物既含有堿性官能團(tuán)又含有酸性官能團(tuán)，這些官能團(tuán)允許化合物轉(zhuǎn)化為堿或酸加成鹽。
因此，本發(fā)明的化合物可以作為鹽、例如與可藥用酸的鹽而存在。本發(fā)明包括這些鹽。這些鹽的實(shí)例包括鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、甲磺酸鹽、硝酸鹽、馬來(lái)酸鹽、乙酸鹽、枸櫞酸鹽、富馬酸鹽、酒石酸鹽(例如(+)-酒石酸鹽、(-)-酒石酸鹽或二者的混合物、包括外消旋混合物)、琥珀酸鹽、苯甲酸鹽和與氨基酸如谷氨酸的鹽?？梢酝ㄟ^(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法來(lái)制備這些鹽。
化合物的中性形式優(yōu)選通過(guò)使鹽與堿或酸接觸并按常規(guī)方法分離母體化合物而重新生成?；衔锏哪阁w形式在某些物理性質(zhì)、例如在極性溶劑中的溶解度上不同于各種鹽形式。
除了鹽形式外，本發(fā)明還提供了前藥形式的化合物。本文所述的化合物的前藥是易于在生理?xiàng)l件下經(jīng)過(guò)化學(xué)變化而提供本發(fā)明的化合物的那些化合物。此外，還可以通過(guò)化學(xué)或生物化學(xué)方法在活體外環(huán)境中將前藥轉(zhuǎn)化為本發(fā)明的化合物。例如，當(dāng)將前藥置于含有適宜的酶或化學(xué)試劑的透皮貼劑貯庫(kù)中時(shí)，該前藥可以緩慢轉(zhuǎn)化為本發(fā)明的化合物。
本發(fā)明的某些化合物可以以非溶劑化形式以及包括水合形式在內(nèi)的溶劑化形式而存在。通常，溶劑化形式等效于非溶劑化形式，并且被包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。本發(fā)明的某些化合物可以以多晶形或非晶形形式而存在。通常，對(duì)于本發(fā)明所考慮的用途而言，所有物理形式均是等效的，并且意欲包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
本發(fā)明的某些化合物具有不對(duì)稱(chēng)碳原子(旋光中心)或雙鍵；外消旋物、非對(duì)映異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、幾何異構(gòu)體和單獨(dú)的異構(gòu)體被包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。本發(fā)明的化合物不包括本領(lǐng)域已知很不穩(wěn)定以致于不能合成和/或分離的那些化合物。
本發(fā)明的化合物還可以在一個(gè)或多個(gè)構(gòu)成這些化合物的原子處含有非天然比例的原子同位素。例如，可以用放射性同位素如氚(3H)、碘-125(125I)或碳-14(14C)將化合物進(jìn)行放射性標(biāo)記。本發(fā)明的化合物的所有同位素變體(無(wú)論是否為放射性)均被包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
“疏水”基團(tuán)是不會(huì)降低化合物在辛烷中的溶解度或增加化合物在辛烷中的溶解度的基團(tuán)。疏水基團(tuán)的實(shí)例包括脂肪族基團(tuán)、芳基和芳烷基。
如本文所用的術(shù)語(yǔ)“天然氨基酸”指本領(lǐng)域已知的如下23種天然氨基酸(由它們的前3個(gè)字母縮寫(xiě)表示)Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Cys-Cys、Glu、Gln、Gly、His、Hyl、Hyp、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr和Val。如本文所用的術(shù)語(yǔ)“氨基酸的側(cè)鏈”是在天然氨基酸α-碳上的取代基。
術(shù)語(yǔ)“非天然氨基酸”指式NH2-C(R32)2-COOH的化合物，其中R32各自獨(dú)立地是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任意側(cè)鏈部分；非天然氨基酸的實(shí)例包括但不限于羥脯氨酸、高脯氨酸、4-氨基-苯丙氨酸、正亮氨酸、環(huán)己基丙氨酸、α-氨基異丁酸、N-甲基-丙氨酸、N-甲基-甘氨酸、N-甲基-谷氨酸、叔丁基甘氨酸、α-氨基丁酸、叔丁基丙氨酸、鳥(niǎo)氨酸、α-氨基異丁酸、2-氨基茚滿(mǎn)-2-甲酸等以及它們的衍生物，尤其是當(dāng)胺中的氮已經(jīng)被單或二烷基化時(shí)。
肽取代基是通過(guò)酰胺鍵連接在一起的天然或非天然氨基酸的序列，該酰胺鍵通過(guò)使一個(gè)氨基酸的α-胺與相鄰氨基酸的α-羧酸反應(yīng)而形成。優(yōu)選肽序列僅包括天然氨基酸。在一個(gè)實(shí)施方案中，肽取代基是約6個(gè)天然氨基酸的序列。在另一個(gè)實(shí)施方案中，肽取代基是2個(gè)天然氨基酸的序列。在另一個(gè)實(shí)施方案中，肽取代基是1個(gè)天然氨基酸。
如本文所用的“過(guò)渡態(tài)電子等排物”或“電子等排物”是包含羥乙胺連接基團(tuán)-CH(OH)-CH2-NH-的化合物。該電子等排物在本文中還稱(chēng)為“羥乙胺電子等排物”。羥乙胺連接基團(tuán)可以在肽的一對(duì)天然或非天然氨基酸之間找到。羥乙胺基團(tuán)是酰胺鍵水解的過(guò)渡態(tài)的電子等排物。
如本文所用的“memapsin 2”指由國(guó)家生物技術(shù)信息中心(“NCBI”)登錄號(hào)NP_036236所鑒定的蛋白質(zhì)(有時(shí)稱(chēng)為“β-位點(diǎn)APP-切割酶1”或“BACE-1”)，包括其保持蛋白水解活性的同系物、同工型和亞結(jié)構(gòu)域(還稱(chēng)為β分泌酶)。活性memapsin 2蛋白質(zhì)和蛋白片段(及其核苷酸編碼序列)的序列鑒別先前已經(jīng)在共同懸而未決的美國(guó)申請(qǐng)?zhí)?0040121947和國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT/USO2/34324(公開(kāi)號(hào)WO 03/039454)中被公開(kāi)和詳細(xì)討論，這些申請(qǐng)各自整體引入本文作為所有目的的參考。如本文所用的“memapsin 2蛋白質(zhì)”表示全長(zhǎng)的memapsin 2蛋白質(zhì)或其保持蛋白水解活性的片段。
如本文所用的“memapsin 1”指由國(guó)家生物技術(shù)信息中心(“NCBI”)登錄號(hào)NP_036237所鑒定的蛋白質(zhì)(有時(shí)稱(chēng)為“β-位點(diǎn)APP-切割酶2”或“BACE-2”)和/或先前在共同懸而未決的美國(guó)申請(qǐng)?zhí)?0040121947和國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT/USO2/34324(公開(kāi)號(hào)WO 03/039454)中被公開(kāi)和詳細(xì)討論的那些(這些申請(qǐng)整體引入本文作為所有目的的參考)，包括其保持蛋白水解活性的同系物、同工型和亞結(jié)構(gòu)域。
如本文所用的“組織蛋白酶D”指由國(guó)家生物技術(shù)信息中心(“NCBI”)登錄號(hào)NP_036236所鑒定的蛋白質(zhì)(有時(shí)稱(chēng)為“β-位點(diǎn)APP-切割酶1”或“BACE-1”)和/或由酶結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫(kù)(Enzyme Structure Database)亞類(lèi)EC3.4.23.5.所鑒定的蛋白質(zhì)，包括其保持蛋白水解活性的同系物、同工型和亞結(jié)構(gòu)域。
“β-分泌酶位點(diǎn)”是由活性memapsin 2或其活性片段切割的氨基酸序列。特異的β-分泌酶位點(diǎn)先前也已經(jīng)在共同懸而未決的美國(guó)申請(qǐng)?zhí)?0040121947和國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT/USO2/34324(公開(kāi)號(hào)WO 03/039454)中被提出和詳細(xì)討論(這些申請(qǐng)整體引入本文作為所有目的的參考)，并且包括瑞典型突變序列(Swedish mutation sequence)和天然的β-淀粉樣前體蛋白切割序列。因此，可以測(cè)定β-分泌酶抑制劑降低底物如β-淀粉樣前體蛋白、β-淀粉樣前體蛋白類(lèi)似物或β-淀粉樣前體蛋白片段的β-分泌酶位點(diǎn)水解的能力。
“β-分泌酶抑制劑”指相對(duì)于沒(méi)有抑制劑時(shí)的活性而言能夠降低memapsin 2的蛋白水解活性的化合物。
如本文所用的術(shù)語(yǔ)表示一個(gè)(種)或多個(gè)(種)。此外，如本文所用的短語(yǔ)“被...取代”表示所指的基團(tuán)可以被任意或所有指定取代基中的一個(gè)或多個(gè)取代。例如，當(dāng)基團(tuán)如烷基或雜芳基“被未取代的C1-C20烷基或未取代的2至20元雜烷基取代”時(shí)，該基團(tuán)可以含有一個(gè)或多個(gè)未取代的C1-C20烷基和/或一個(gè)或多個(gè)未取代的2至20元雜烷基。
本發(fā)明的化合物的“有效量”是有效地獲得其預(yù)期目的的量。當(dāng)術(shù)語(yǔ)“有效量”用于治療受治療者(例如哺乳動(dòng)物、人等)的方法的上下文中時(shí)，該術(shù)語(yǔ)是治療有效量(即對(duì)所述的疾病或疾病狀態(tài)有效地獲得治療有效結(jié)果的量)。
“治療”包括預(yù)防和改善特定的疾病或疾病狀態(tài)，以及在一些情況下治愈疾病。
I.β-分泌酶抑制劑 一方面，本發(fā)明提供了抑制(即降低)β-分泌酶(memapsin 2)催化活性的化合物。這些化合物在本文中可以稱(chēng)為“本發(fā)明的化合物”、“β-分泌酶抑制劑化合物”或“memapsin 2 β-分泌酶抑制劑”。在該方面，化合物具有式(I)結(jié)構(gòu)
在式(I)中，R1是鹵素、-OH、-CF3、-NO2、-NR8R9、-OR10、-S(O)nR11、-C(O)R12、氫、取代或未取代的C3-C20烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基或者-L4-Y。
R5是鹵素、-OH、-CF3、-NO2、-NR8R9、-OR10、-S(O)nR11、-C(O)R12、氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。
R2和R3獨(dú)立地是鹵素、-CF3、-NO2、-NR8R9、-OR10、-S(O)nR11、-C(O)R12、氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基或者-L4-Y。
R4是鹵素、-OH、-CF3、-NO2、-NR8R9、-OR10、-S(O)nR11、-C(O)R12、氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基或者-L4-Y。
R6和R7獨(dú)立地是-S(O)2R11、-C(O)R12、氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基或者-L4-Y。
符號(hào)n表示0至2的整數(shù)。
R8獨(dú)立地是-C(O)R13、-S(O)2R14、氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。
R9獨(dú)立地是氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。
R10獨(dú)立地是-C(O)R13、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。
R11獨(dú)立地是氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。如果n是2，則R11任選是-NR15R16。如果n是1或2，則R11不是氫。
R12獨(dú)立地是-NR18R19、-OR19、氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。
R13獨(dú)立地是-OR19、-NR18R19、氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。
R14獨(dú)立地是-NR18R19、氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。
R18和R19獨(dú)立地是氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。
R15和R16獨(dú)立地是氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。
L1和L3獨(dú)立地是價(jià)鍵、-NR17-、-S(O)q-、取代或未取代的亞烷基或者取代或未取代的雜亞烷基。L2是取代或未取代的亞烷基、-NR17-、-S(O)q-或者取代或未取代的雜亞烷基。
R17獨(dú)立地是氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。
符號(hào)q表示0至2的整數(shù)。
A1和A2獨(dú)立地是取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。Y是載體部分。
L4是價(jià)鍵、-OP(OH)2O-、-C(O)OR20-、-C(O)NHR21-、-S(O)2NHR22-、取代或未取代的亞烷基、取代或未取代的雜亞烷基或者肽基連接基。
R20、R21和R22獨(dú)立地是取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。
在一些實(shí)施方案中，L3是未取代的C1-C5(例如C1-C3)亞烷基。L3還可以是未取代的2至5元雜亞烷基。在其它實(shí)施方案中，L3是-(CH2)e-S-。符號(hào)e表示0至10的整數(shù)。在一些實(shí)施方案中，e是1。
在一些實(shí)施方案中，R1是氫、鹵素、-NR8R9、-OR10或-S(O)nR11。在其它實(shí)施方案中，R1是氫、-NR9S(O)nR14、-OR10或-S(O)nR11。R1還可以是氫或-NR9S(O)nR14。
R5、R8、R9、R10和R11可以獨(dú)立地是氫、取代或未取代的C1-C20烷基、取代或未取代的2至20元雜烷基、取代或未取代的C5-C7環(huán)烷基、取代或未取代的5至7元雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基或者-L4-Y。
在式(I)的一些實(shí)施方案中，取代或未取代的亞烷基各自是R23-取代或未取代的C1-C20亞烷基，取代或未取代的雜亞烷基各自是R23-取代或未取代的2至20元雜亞烷基，取代或未取代的烷基各自是R23-取代或未取代的C1-C20烷基，取代或未取代的雜烷基各自是R23-取代或未取代的2至20元雜烷基，取代或未取代的環(huán)烷基各自是R23-取代或未取代的C5-C7環(huán)烷基，取代或未取代的雜環(huán)烷基各自是R23-取代或未取代的5至7元雜環(huán)烷基，取代或未取代的雜芳基各自是R24-取代或未取代的雜芳基，取代或未取代的芳基各自是R24-取代或未取代的芳基。
R23獨(dú)立地是氧代基、鹵素、-CN、-CF3、-OCF3、-OR27、-S(O)tR27、-OCH3、-C(O)R27、-NR28R29、-NR28C(O)R27、-C(O)NR28R29、R25-取代或未取代的C1-C20烷基、R25-取代或未取代的2至20元雜烷基、R25-取代或未取代的C5-C7環(huán)烷基、R25-取代或未取代的5至7元雜環(huán)烷基、R26-取代或未取代的雜芳基或者R26-取代或未取代的芳基。
R24獨(dú)立地是鹵素、-CN、-CF3、-OCF3、-OCH3、OR27、-S(O)tR27、-OCH3、-C(O)R27、-NR28R29、-NR28C(O)R27、-C(O)NR28R29、R25-取代或未取代的C1-C20烷基、R25-取代或未取代的2至20元雜烷基、R25-取代或未取代的C5-C7環(huán)烷基、R25-取代或未取代的5至7元雜環(huán)烷基、R26-取代或未取代的雜芳基或者R26-取代或未取代的芳基。
符號(hào)t獨(dú)立地是0至2的整數(shù)。
R27、R28和R29獨(dú)立地是氫、R25-取代或未取代的C1-C20烷基、R25-取代或未取代的2至20元雜烷基、R25-取代或未取代的C5-C7環(huán)烷基、R25-取代或未取代的5至7元雜環(huán)烷基、R26-取代或未取代的雜芳基或者R26-取代或未取代的芳基。如果t是1或2，則R27不是氫。
R25獨(dú)立地是氧代基、鹵素、-CN、-OH、-CF3、-OCF3、-OCH3、未取代的C1-C20烷基、未取代的2至20元雜烷基、未取代的C5-C7環(huán)烷基、未取代的5至7元雜環(huán)烷基、未取代的芳基或未取代的雜芳基。R26獨(dú)立地是鹵素、-CN、-OH、-CF3、-OCF3、-OCH3、未取代的C1-C20烷基、未取代的2至20元雜烷基、未取代的C5-C7環(huán)烷基、未取代的5至7元雜環(huán)烷基、未取代的芳基或未取代的雜芳基。
在一些實(shí)施方案中，A1和/或A2獨(dú)立地是R23-取代或未取代的C5-C7環(huán)烷基、R23-取代或未取代的5至7元雜環(huán)烷基、R24-取代或未取代的雜芳基或者R24-取代或未取代的芳基。
在其它實(shí)施方案中，R2、R3、R8、R9、R10、R11和/或R12獨(dú)立地是氫、R23-取代或未取代的C1-C20烷基、R23-取代或未取代的2至20元雜烷基、R23-取代或未取代的C5-C7環(huán)烷基、R23-取代或未取代的5至7元雜環(huán)烷基、R24-取代或未取代的雜芳基或者R24-取代或未取代的芳基。R2、R3、R8、R9、R10、R11和/或R12可以是取代或未取代的C1-C20烷基或者取代或未取代的雜環(huán)烷基。R2、R3、R4、R8、R9、R10、R11和/或R12還可以是未取代的C1-C20烷基。R2、R3、R8、R9、R10、R11和/或R12還可以是未取代的C1-C5烷基。
R4、R6和/或R7可以獨(dú)立地是氫、R23-取代或未取代的C1-C20烷基、R23-取代或未取代的2至20元雜烷基、R23-取代或未取代的C5-C7環(huán)烷基、R23-取代或未取代的5至7元雜環(huán)烷基、R24-取代或未取代的雜芳基或者R24-取代或未取代的芳基。R4、R6和/或R7還可以獨(dú)立地是氫或未取代的C1-C20烷基。在一些實(shí)施方案中，R4、R6和/或R7獨(dú)立地是氫或未取代的C1-C5烷基。
R27、R28和R29可以獨(dú)立地是氫、R25-取代或未取代的C1-C20烷基或者R25-取代或未取代的2至20元雜烷基。R23可以獨(dú)立地是氧代基、鹵素、-CN、-CF3、-OCF3、-OR27、-S(O)tR27、-OCH3、-C(O)R27、-NR28R29、-NR28C(O)R27、-C(O)NR28R29、R25-取代或未取代的C1-C20烷基或者R25-取代或未取代的2至20元雜烷基。R24可以獨(dú)立地是鹵素、-CN、-CF3、-OCF3、-OCH3、-OR27、-S(O)tR27、-OCH3、-C(O)R27、-NR28R29、-NR28C(O)R27、-C(O)NR28R29、R25-取代或未取代的C1-C20烷基或者R25-取代或未取代的2至20元雜烷基。
在一些實(shí)施方案中，R2和R3可以獨(dú)立地是氫、鹵素或未取代的C1-C20烷基。
R5可以是R23-取代或未取代的C5-C7環(huán)烷基、R23-取代或未取代的5至7元雜環(huán)烷基、R24-取代或未取代的雜芳基或者R24-取代或未取代的芳基。R5還可以是R24-取代或未取代的雜芳基或者R24-取代或未取代的芳基。在一些實(shí)施方案中，R5是R24-取代或未取代的芳基。在一些相關(guān)的實(shí)施方案中，R24是鹵素、-CN、-OH、-CF3、未取代的C1-C20烷基或未取代的烷氧基(例如C1-C20烷氧基)。R5還可以是鹵代苯基(例如二氟苯基)或苯基。在一些相關(guān)的實(shí)施方案中，L3是未取代的C1-C5(例如C1-C3)亞烷基。
在一些實(shí)施方案中，R5選自取代或未取代的四氫呋喃基、取代或未取代的四氫吡喃基和取代或未取代的吡啶基甲基。在一些相關(guān)的實(shí)施方案中，L3是未取代的C1-C5烷基。在其它相關(guān)的實(shí)施方案中，L3是亞甲基。
在一些實(shí)施方案中，R5是R24-取代或未取代的芳基或者R24-取代或未取代的雜芳基(例如取代或未取代的噻唑基、取代或未取代的唑基、取代或未取代的咪唑基或者取代或未取代的吡唑基)。在一些實(shí)施方案中，R5是R24-取代或未取代的苯基(例如鹵代苯基，如3，5-二氟苯基)或者R24-取代或未取代的噻唑基。在另一個(gè)相關(guān)的實(shí)施方案中，L3是亞甲基。
在一些實(shí)施方案中，R5選自取代或未取代的苯基、取代或未取代的吡唑基、取代或未取代的呋喃基、取代或未取代的咪唑基、取代或未取代的異唑基、取代或未取代的二唑基、取代或未取代的唑基、取代或未取代的吡咯基、取代或未取代的吡啶基、取代或未取代的嘧啶基、取代或未取代的噠嗪基、取代或未取代的噻唑基、取代或未取代的三唑基、取代或未取代的噻吩基、取代或未取代的二氫噻吩并吡唑基、取代或未取代的硫茚基、取代或未取代的咔唑基、取代或未取代的苯并咪唑基、取代或未取代的苯并噻吩基、取代或未取代的苯并呋喃基、取代或未取代的吲哚基、取代或未取代的喹啉基、取代或未取代的苯并三唑基、取代或未取代的苯并噻唑基、取代或未取代的苯并唑基、取代或未取代的苯并咪唑基、取代或未取代的異喹啉基、取代或未取代的異吲哚基、取代或未取代的吖啶基、取代或未取代的benzoisazolyl(苯并異唑基)、取代或未取代的二甲基乙內(nèi)酰脲、取代或未取代的吡嗪基、取代或未取代的四氫呋喃基、取代或未取代的吡咯啉基、取代或未取代的吡咯烷基、取代或未取代的嗎啉基、取代或未取代的吲哚基、取代或未取代的二氮雜?；⑷〈蛭慈〈牡s?；?、取代或未取代的硫雜?；蛘呷〈蛭慈〈难蹼s?；?。
A1和A2可以獨(dú)立地是取代或未取代的C5-C7環(huán)烷基、取代或未取代的5至7元雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。A1和/或A2還可以獨(dú)立地是取代或未取代的芳基(例如苯基)或者取代或未取代的雜芳基(例如吡啶基)。
在一些實(shí)施方案中，A1和A2獨(dú)立地是取代或未取代的苯基、取代或未取代的吡唑基、取代或未取代的呋喃基、取代或未取代的咪唑基、取代或未取代的異唑基、取代或未取代的二唑基、取代或未取代的唑基、取代或未取代的吡咯基、取代或未取代的吡啶基、取代或未取代的嘧啶基、取代或未取代的噠嗪基、取代或未取代的噻唑基、取代或未取代的三唑基、取代或未取代的噻吩基、取代或未取代的二氫噻吩并吡唑基、取代或未取代的硫茚基、取代或未取代的咔唑基、取代或未取代的苯并咪唑基、取代或未取代的苯并噻吩基、取代或未取代的苯并呋喃基、取代或未取代的吲哚基、取代或未取代的喹啉基、取代或未取代的苯并三唑基、取代或未取代的苯并噻唑基、取代或未取代的苯并唑基、取代或未取代的苯并咪唑基、取代或未取代的異喹啉基、取代或未取代的異吲哚基、取代或未取代的吖啶基、取代或未取代的benzoisazolyl(苯并異唑基)、取代或未取代的二甲基乙內(nèi)酰脲、取代或未取代的吡嗪基、取代或未取代的四氫呋喃基、取代或未取代的吡咯啉基、取代或未取代的吡咯烷基、取代或未取代的嗎啉基、取代或未取代的吲哚基、取代或未取代的二氮雜?；?、取代或未取代的氮雜?；⑷〈蛭慈〈牧螂s?；⑷〈蛭慈〈倪哙せ蛘呷〈蛭慈〈难蹼s?；?。
在一些實(shí)施方案中，L3和L1獨(dú)立地是價(jià)鍵、未取代的亞烷基或未取代的雜亞烷基。在其它實(shí)施方案中，L3和L1獨(dú)立地是價(jià)鍵、未取代的C1-C20亞烷基或未取代的2至20元雜亞烷基。L3和L1還可以獨(dú)立地是價(jià)鍵、未取代的C1-C5亞烷基或未取代的2至5元雜亞烷基。L3還可以是C1-C5亞烷基。L1可以是支鏈未取代的C1-C5亞烷基。
在一些實(shí)施方案中，L2是未取代的C1-C20亞烷基或未取代的2至20元雜亞烷基。在其它實(shí)施方案中，L2是未取代的C1-C5亞烷基或未取代的2至5元雜亞烷基。L2可以是未取代的C1-C5亞烷基。L2可以是支鏈未取代的C1-C5亞烷基。L2還可以是亞甲基。在一些相關(guān)的實(shí)施方案中，A2是取代或未取代的雜芳基(例如吡啶基)或者取代或未取代的芳基(例如苯基)。在一些相關(guān)的實(shí)施方案中，A1是取代或未取代的雜芳基(例如吡啶基)或者取代或未取代的芳基(例如苯基)。
在一些實(shí)施方案中，當(dāng)R1是-NR8R9且R8是-S(O)2R14時(shí)，則R6是氫。R7可以是取代或未取代的烷基。R7可以是未取代的C1-C5烷基。R2和R3可以均是氫。因此，在一些實(shí)施方案中，R1是-NR8R9，R8是-S(O)2R14，R6是氫，R7是未取代的C1-C5烷基，并且R2和R3是氫。
在一些實(shí)施方案中，當(dāng)R1是氫時(shí)，則R6不是氫。在一些相關(guān)的實(shí)施方案中，R6是取代或未取代的烷基。在一些相關(guān)的實(shí)施方案中，R6是未取代的C1-C5烷基。在一些相關(guān)的實(shí)施方案中，R6是取代或未取代的C3-C6環(huán)烷基。在一些相關(guān)的實(shí)施方案中，R6是取代或未取代的環(huán)丙基。在一些相關(guān)的實(shí)施方案中，R7是氫。在一些相關(guān)的實(shí)施方案中，R2和R3是氫。
在一些實(shí)施方案中，R1是氫。R2、R3和R4可以是氫。A1可以是取代或未取代的雜芳基或者取代或未取代的雜環(huán)烷基。在一些相關(guān)的實(shí)施方案中，A1是取代或未取代的雜芳基(例如取代或未取代的噻唑基(thioazolyl)、取代或未取代的唑基、取代或未取代的咪唑基或者取代或未取代的吡唑基)。A2可以是取代或未取代的芳基或者雜芳基。A2還可以是取代或未取代的苯基或者取代或未取代的吡啶基。R6可以是取代或未取代的烷基或者取代或未取代的環(huán)烷基(例如未取代的(C1-C6)烷基或未取代的(C3-C6)環(huán)烷基)。L1可以是未取代的亞甲基。L2可以是未取代的亞甲基。在一些相關(guān)的實(shí)施方案中，R6是甲基或環(huán)丙基，R7是氫，L1是未取代的亞甲基，并且L2是未取代的亞甲基。L3可以是未取代的亞甲基。R5可以是取代或未取代的苯基。在一些相關(guān)的實(shí)施方案中，A1是取代或未取代的2-噻唑基(例如未取代的2-噻唑基或者被取代或未取代的烷基、例如一個(gè)或多個(gè)未取代的(C1-C5)烷基取代的2-噻唑基)。例如，A1可以是2-(4-甲基噻唑基)。A2可以是取代或未取代的3-吡啶基或者取代或未取代的苯基(例如3-(5-取代的吡啶基)或間位取代的苯基)。在一些實(shí)施方案中，3-(5-取代的吡啶基)和間位取代的苯基被取代或未取代的烷基(例如未取代的C1-C5烷基或C1-C5鹵代烷基)取代。本段中各取代基定義的一些或所有實(shí)施方案可以組合而形成適宜的亞屬。因此，在一些實(shí)施方案中，R1、R2、R3和R4是氫，A1是取代或未取代的2-噻唑基，A2是取代或未取代的3-吡啶基或者取代或未取代的苯基，R6是未取代的(C1-C6)烷基或者未取代的(C3-C6)環(huán)烷基，R7是氫，并且L1、L2和L3是未取代的亞甲基。
在一些實(shí)施方案中，R1是-NR9S(O)nR14。R6可以是氫。A1可以是取代或未取代的苯基。A2可以是取代或未取代的苯基或者取代或未取代的吡啶基。在一些相關(guān)的實(shí)施方案中，n是2，R9是未取代的(C1-C5)烷基(例如甲基)，并且R14是未取代的(C1-C5)烷基(例如甲基)。L2可以是未取代的亞甲基。L1可以是甲基亞甲基。R2、R3和R4可以是氫。本段中各取代基定義的一些或所有實(shí)施方案可以組合而形成適宜的亞屬。因此，在一些實(shí)施方案中，R1是-NR9S(O)nR14，R6是氫，A1是取代或未取代的苯基，A2是取代或未取代的苯基或者取代或未取代的吡啶基，n是2，R9是未取代的(C1-C5)烷基(例如甲基)，R14是未取代的(C1-C5)烷基(例如甲基)，L2是未取代的亞甲基，L1是甲基亞甲基，并且R2、R3和R4是氫。
在一些實(shí)施方案中，β-分泌酶抑制劑化合物具有式(II)結(jié)構(gòu)
在式(II)中，L1、L2、L3、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、A1和A2如上文式(I)的討論中所定義。
在一些實(shí)施方案中，β-分泌酶抑制劑化合物具有式(III)結(jié)構(gòu)
在式(III)中，L1、L2、L3、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、A1和A2如上文式(I)的討論中所定義。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，β-分泌酶抑制劑化合物具有式(IV)結(jié)構(gòu)
在式(II)中，L1、L2、L3、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R23、A1和A2如上文式(I)的討論中所定義。在一些實(shí)施方案中，R23是未取代的C1-C5烷基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，β-分泌酶抑制劑化合物具有式(V)結(jié)構(gòu)
在式(V)中，L1、L2、L3、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R23、A1和A2如上文式(I)的討論中所定義。在一些實(shí)施方案中，R23是未取代的C1-C5烷基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，β-分泌酶抑制劑化合物具有式(VI)結(jié)構(gòu)
在式(VI)中，L1、L2、L3、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R23、A1和A2如上文式(I)的討論中所定義。在一些實(shí)施方案中，R23是未取代的C1-C5烷基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，β-分泌酶抑制劑化合物具有式(VII)結(jié)構(gòu)
在式(VII)中，L1、L2、L3、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R23、A1和A2如上文式(I)的討論中所定義。在一些實(shí)施方案中，R23是未取代的C1-C5烷基。
在一些實(shí)施方案中，以上在式(I)-(VII)的化合物中所述的取代的基團(tuán)各自被至少一個(gè)取代基基團(tuán)取代。更特別地，在一些實(shí)施方案中，以上在式(I)-(VII)的化合物中所述的取代的烷基、取代的雜烷基、取代的環(huán)烷基、取代的雜環(huán)烷基、取代的芳基、取代的雜芳基、取代的亞烷基或取代的雜亞烷基各自被至少一個(gè)取代基基團(tuán)取代。在其它實(shí)施方案中，至少一個(gè)或所有這些基團(tuán)被至少一個(gè)大小有限的取代基基團(tuán)取代。或者，至少一個(gè)或所有這些基團(tuán)被至少一個(gè)低級(jí)取代基基團(tuán)取代。
在式(I)-(VII)的化合物的其它實(shí)施方案中，取代或未取代的烷基各自是取代或未取代的C1-C20烷基，取代或未取代的雜烷基各自是取代或未取代的2至20元雜烷基，取代或未取代的環(huán)烷基各自是取代或未取代的C4-C8環(huán)烷基，取代或未取代的雜環(huán)烷基各自是取代或未取代的4至8元雜環(huán)烷基，取代或未取代的亞烷基各自是取代或未取代的C1-C20亞烷基，并且取代或未取代的雜亞烷基各自是取代或未取代的2至20元雜亞烷基。
或者，取代或未取代的烷基各自是取代或未取代的C1-C8烷基，取代或未取代的雜烷基各自是取代或未取代的2至8元雜烷基，取代或未取代的環(huán)烷基各自是取代或未取代的C5-C7環(huán)烷基，取代或未取代的雜環(huán)烷基各自是取代或未取代的5至7元雜環(huán)烷基，取代或未取代的亞烷基各自是取代或未取代的C1-C8亞烷基，并且取代或未取代的雜亞烷基各自是取代或未取代的2至8元雜亞烷基。
在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物包括任意一種或所有表1的化合物。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物包括任意一種或所有以下實(shí)施例4的化合物。
A.載體部分 在共同懸而未決的美國(guó)申請(qǐng)?zhí)?0040121947和國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT/USO2/34324(公開(kāi)號(hào)WO 03/039454)中(這些申請(qǐng)引入本文作為所有目的的參考)，具有和不具有載體部分的電子等排物β-分泌酶抑制劑在表達(dá)人淀粉樣前體蛋白的瑞典型突變的tg2576小鼠中顯示出有效地減少Aβ的生成(Hsiao，K.等人，Science 274，99-102(1996))。因此，本領(lǐng)域技術(shù)人員將知道，本發(fā)明的化合物可以以具有或不具有載體部分的形式來(lái)施用。載體部分可以與本發(fā)明的化合物上任意適宜的部位連接。
如本文所用的“載體部分”指增強(qiáng)化合物穿過(guò)血腦屏障(BBB)能力的、與本發(fā)明的β-分泌酶抑制劑化合物共價(jià)或非共價(jià)連接的化學(xué)部分。本發(fā)明的β-分泌酶抑制劑可以通過(guò)共價(jià)相互作用(例如肽鍵)或通過(guò)非共價(jià)相互作用(例如離子鍵、氫鍵、范德華引力)與載體部分連接或結(jié)合。
血腦屏障是存在于腦內(nèi)細(xì)胞外液和毛細(xì)血管腔內(nèi)血液之間的通透性屏障。該屏障源自腦內(nèi)毛細(xì)血管和其它組織內(nèi)發(fā)現(xiàn)的毛細(xì)血管之間的結(jié)構(gòu)差異。腦毛細(xì)血管的結(jié)構(gòu)差異中最顯著的差異是內(nèi)皮細(xì)胞間的緊密連接。與位于腦外的毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)的跨內(nèi)皮電阻(3-33ohms/cm2)相比，這些特殊的緊密連接可產(chǎn)生非常高的跨內(nèi)皮電阻(1500-2000ohms/cm2)，從而減少了在其它器官中觀(guān)察到的基于水性液的旁細(xì)胞擴(kuò)散(Brightman，M.，Bradbury MWB(編者)，Physiology and Pharmacology of the blood-brainbarrier.實(shí)驗(yàn)藥理學(xué)手冊(cè)(Handbook of experimental pharmacology)103，Springer-Verlag，柏林，(1992)；Lo，E.H.等人，Brain Res.Rev.，38140-148，(2001))。因此，在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與載體部分(在上式中以符號(hào)Y表示)共價(jià)結(jié)合。
任意適宜的載體部分可以用于本發(fā)明。有用的載體部分例如包括親脂性載體部分、酶底物載體部分、肽基載體部分和納米粒載體部分。載體部分還可以包括低聚糖單元或者通過(guò)磷酸酯鍵或脂-酯鍵或其它可水解的鍵與化合物連接的其它分子，這些鍵可被溶酶體和內(nèi)涵體中的糖苷酶、磷酸酶、酯酶、脂酶或其它水解酶切割。載體部分可以含有胍、氨基或咪唑官能團(tuán)。
1.親脂性載體部分 親脂性載體部分可增加化合物的總親脂性，由此有助于穿過(guò)BBB。可以使用本領(lǐng)域已知的任意適宜方法來(lái)定量親脂性。例如，可以測(cè)定辛醇和水之間的分配系數(shù)(log Po/w)，由此表示親脂性的程度。在一些實(shí)施方案中，親脂性載體部分具有的log Po/w為1.5-2.5。親脂性載體部分是本領(lǐng)域廣泛已知的，例如在Lambert，D.M.，Eur JPharm Sci.，11S15-27(2000)中有詳細(xì)討論。用于增加化合物親脂性的示例性親脂性載體部分包括修飾和未修飾的二甘油酯、脂肪酸和磷脂。
一些親脂性載體部分在穿過(guò)BBB后經(jīng)歷酶介導(dǎo)的氧化，產(chǎn)生載體部分的親水性膜不可通透的形式，其在BBB后仍被捕獲(Bodor等人，PharmacolTher 761-27(1997)；Bodor等人，American Chemical Society，Washington，DC第317-337頁(yè)(1995)；Chen等人，J Med Chem 413773-3781(1998)；Wu等人，J Pharm Pharmacol 54945-950(2002))。經(jīng)歷酶介導(dǎo)的氧化的示例性親脂性載體部分包括1，4-二氫胡蘆巴堿(Palomino等人，J Med Chem，32622-625(1989))；已經(jīng)成功用于將睪酮和齊多夫定轉(zhuǎn)運(yùn)穿過(guò)血腦屏障的膦酸烷基酯載體部分(Somogyi，G.等人，Int J Pharm，16615-26(1998))；和經(jīng)酶氧化成離子吡啶鹽的親脂性二氫吡啶載體部分(Bodor等人，Science，214(18)1370-1372(1981))。
2.肽基載體部分 肽基載體部分是用于幫助化合物轉(zhuǎn)運(yùn)穿過(guò)BBB的部分或全部由肽(包括多肽、蛋白質(zhì)、抗體和抗體片段)組成的部分(Wu等人，J Clin Invest1001804-1812(1997)；美國(guó)專(zhuān)利號(hào)4,801,575；Pardridge等人，Adv DrugDeliv Rev，36299-321(1999))。
肽基載體部分可以與將相應(yīng)的配體或受體靶向于BBB的內(nèi)皮細(xì)胞的特異性肽轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)、受體或配體相互作用。特異性轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)可以包括載體介導(dǎo)或受體介導(dǎo)的穿過(guò)BBB的轉(zhuǎn)運(yùn)(美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?0040110928)。示例性肽基載體部分包括胰島素(Pardridge等人，Nat Rev Drug Discov，1131-139(2002))；較小的肽，例如腦啡肽、促甲狀腺激素釋放激素、精氨酸-加壓素(Bergley，J Pharm Pharmacol，48136-146(1996)；Banks等人，Peptides，131289-1294(1992)；Han等人，AAPS Pharm.Si，2E6(2000))；嵌合肽，例如WO-A-89/10134中描述的那些；氨基酸衍生物，例如美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?0030216589中公開(kāi)的那些；反式激活因子肽(tat peptide)(Schwarze，S.R.等人，Science 2851569-1572(1999))；聚精氨酸肽(Wender，P.A.等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 9713003-13008(2000))；胰島素樣生長(zhǎng)因子-1；胰島素樣生長(zhǎng)因子-2；轉(zhuǎn)鐵蛋白；瘦素；低密度脂蛋白(Pardridge，Nat.Rev.DrugDiscov.1131-139(2002)；Colma等人，Pharm.Res.17266-274(2000)；Pardridge，Endocrine Rev，7314-330(1986)；Golden等人，J Clin Invest，9914-18(1997)；Bickel等人，Adv.Drug Deliv.Rev.46(1-3)247-79(2001))；和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)(美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?0040102369)。
共同懸而未決的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?0040121947和國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT/USO2/34324(公開(kāi)號(hào)WO 03/039454)公開(kāi)了與結(jié)合有熒光反式激活因子的電子等排β-分泌酶抑制劑一起孵育的細(xì)胞的共聚焦顯微圖像顯示出細(xì)胞內(nèi)的不均勻分布。一些高的熒光強(qiáng)度顯示在內(nèi)涵體和溶酶體細(xì)胞內(nèi)的囊狀結(jié)構(gòu)中。這表明反式激活因子載體部分可能已經(jīng)在溶酶體或內(nèi)涵體內(nèi)被蛋白酶修飾了，從而產(chǎn)生不能離開(kāi)溶酶體或內(nèi)涵體室的抑制劑。溶酶體和內(nèi)涵體含有多種蛋白酶，包括水解酶，例如組織蛋白酶A、B、C、D、H和L。這些酶中的一些是內(nèi)肽酶，例如組織蛋白酶D和H。其它酶是外肽酶，例如組織蛋白酶A和C，而組織蛋白酶B既具有內(nèi)肽酶活性，又具有外肽酶活性。這些蛋白酶的特異性的足夠廣泛從而水解反式激活因子肽遠(yuǎn)離抑制劑化合物，由此水解載體肽遠(yuǎn)離電子等排抑制劑。因此，已經(jīng)表明，反式激活因子和其它載體肽可以特別用于將電子等排抑制劑特異地傳遞給溶酶體和內(nèi)涵體。當(dāng)通過(guò)諸如注射的機(jī)制施用于哺乳動(dòng)物時(shí)，結(jié)合的化合物可穿透細(xì)胞并滲入到溶酶體和內(nèi)涵體的內(nèi)部。然后，溶酶體和內(nèi)涵體中的蛋白酶可將反式激活因子水解，由此阻止從溶酶體和內(nèi)涵體中逃逸。
載體肽可以是反式激活因子或者是可被溶酶體和內(nèi)涵體的蛋白酶所水解的其它堿性肽、例如寡-L-精氨酸?？梢匝b配對(duì)溶酶體或內(nèi)涵體的蛋白酶切割敏感的特異性肽鍵，由此促進(jìn)載體化合物從抑制劑移除。例如，二肽Phe-Phe、Phe-Leu、Phe-Tyr和其它可被組織蛋白酶D切割。
在一個(gè)實(shí)施方案中，肽基載體分子包括陽(yáng)離子官能團(tuán)如反式激活因子-肽(Schwarze，S.R.等人，Science 2851569-1572(1999))或9個(gè)精氨酸殘基(Wender，P.A.等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 9713003-13008(2000))。有用的陽(yáng)離子官能團(tuán)例如包括胍、氨基和咪唑官能團(tuán)。因此，陽(yáng)離子官能團(tuán)還包括氨基酸側(cè)鏈如賴(lài)氨酸、精氨酸和組氨酸殘基的側(cè)鏈。在一些實(shí)施方案中，肽基載體分子可以包括1-10個(gè)陽(yáng)離子官能團(tuán)。當(dāng)本發(fā)明的化合物與載體部分結(jié)合或連接時(shí)，所得結(jié)合物在本文中可以稱(chēng)為“載體肽-抑制劑”結(jié)合物或“CPI”。CPI結(jié)合物可以施用于體外樣品或哺乳動(dòng)物，由此用作本發(fā)明的化合物進(jìn)入體外樣品或哺乳動(dòng)物的細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)載體。載體部分和CPI結(jié)合物可增強(qiáng)本發(fā)明的化合物有效地穿過(guò)細(xì)胞和血腦屏障來(lái)抑制memapsin 2切割A(yù)PP、隨后生成Aβ的能力。
吸附介導(dǎo)的胞轉(zhuǎn)作用(AME)提供了肽基載體部分可以穿過(guò)BBB的供選機(jī)制。AME與其它形式的胞轉(zhuǎn)作用的不同之處在于，載體部分與腔質(zhì)膜的最初結(jié)合是通過(guò)與陰離子部位的靜電相互作用或者與糖殘基的特異性相互作用而被介導(dǎo)的。通過(guò)載體部分的C-末端結(jié)構(gòu)和堿性來(lái)測(cè)定通過(guò)AME的攝取。示例性的吸附性肽基載體部分包括具有堿性等電點(diǎn)的肽和蛋白質(zhì)(陽(yáng)離子蛋白質(zhì))以及一些凝集素(糖蛋白結(jié)合蛋白)。參見(jiàn)Tamai，I.等人，J.Pharmacol.Exp.Ther.280410-415(1997)；Kumagai，A.K.等人，J.Biol.Chem.26215214-15219(1987)。
肽基載體部分還包括抗體載體部分?？贵w載體部分是包括抗體或其片段的載體部分。一般地，抗體或抗體片段是單克隆抗體或衍生自單克隆抗體?？贵w載體部分與細(xì)胞受體或在腦毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的腔表面上表達(dá)的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白結(jié)合(美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?0040101904)。示例性的抗體或其片段包括與人胰島素受體結(jié)合的MAb 83-14(Pardridge等人，Pharm Res.12807-816(1995))、抗轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體(Li，J.Y.等人，Protein Engineering 12787-796(1999))和模擬如上討論已知可穿過(guò)BBB的內(nèi)源性蛋白質(zhì)或肽的單克隆抗體。
3.納米粒載體部分 納米粒載體部分是直徑或長(zhǎng)度通常小于1微米的固態(tài)膠體載體?；衔锟梢员话⑽交蚬矁r(jià)連接在納米粒載體部分的表面。納米粒載體部分已經(jīng)成功地用于將多種化合物傳遞到腦，這些化合物包括六肽dalagrin(腦啡肽類(lèi)似物)、洛哌丁胺、tubocerarine和多柔比星(Ambikanandan等人，J.Pharm Pharmaceut Sci 6(2)252-273(2003))。除了幫助轉(zhuǎn)運(yùn)到腦內(nèi)外，可以用于包裹納米粒的非離子型清潔劑如聚山梨酯-80還可以用于抑制外流泵。Zordan-Nudo，T.等人，Cancer Res，535994-6000(1993)。用于制備納米粒載體部分的示例性材料包括聚氰基丙烯酸烷基酯(PACA)(Bertling等人，Biotechnol.Appl.Biochem.13390-405(1991))、聚氰基丙烯酸丁酯(PBCA)(Chavany等人，Pharm.Res.9441-449(1992))、具有被吸收到表面并用聚山梨酯80包裹的肽-藥物復(fù)合物的聚氰基丙烯酸丁酯(Kreuter，J.等人，Brain Res，674171-174(1995)；Kreuter，J.，Adv Drug Deliv Rev，4765-81，(2001)；Kreuter，J.，Curr Med Chem，2241-249(2002))、聚氰基丙烯酸異己酯(PIHCA)(Chavany等人，Pharm.Res.111370-1378(1994))、聚氰基丙烯酸己酯(PHCA)(Zobel等人，Antisense Nucleic Acid Drug Dev.7483-493(1997))和聚乙二醇化的聚氰基丙烯酸酯(Pilar，C.等人，Pharm Res18(8)1157-1166(2001))。
4.連接基部分 連接基部分可以用于將載體部分與本發(fā)明的β-分泌酶抑制劑連接。例如，可以采用聚合物技術(shù)(例如聚乙二醇化)以及引入長(zhǎng)的間隔臂的連接基分子來(lái)阻止化合物與載體間的空間位阻(Yoshikawa，T.等人，J PharmacolExp Ther，263897-903，1992)。連接基部分可以是可切割或不可切割的。
可切割的連接基分子包括可切割的部分。任意適宜的可切割部分可用于本發(fā)明，例如包括磷酸酯、酯、二硫化物等?？汕懈畹牟糠诌€包括能夠被生物酶如肽酶、糖苷酶、磷酸酶、酯酶、脂酶或其它水解酶切割的那些部分。當(dāng)載體部分干擾化合物的生物活性時(shí)，可切割的連接基分子是尤其有用的。示例性的可切割連接基分子包括N-琥珀酰亞氨基-3-2-吡啶基二硫基丙酸鹽(SPDP)或N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)。
不可切割的連接基分子是參與載體部分與化合物通過(guò)通常對(duì)生物環(huán)境和酶穩(wěn)定的鍵的連接的那些。當(dāng)載體部分不干擾化合物的生物活性時(shí)，一般使用不可切割的連接基分子。示例性的不可切割的連接基分子包括硫醚(例如間-馬來(lái)酰亞氨基苯甲?；鵑-羥基琥珀酰亞胺酯(MBS))、酰胺(例如N-羥基琥珀酰亞胺(NHS-XX-))、擴(kuò)展的酰胺(例如N-羥基琥珀酰亞胺聚乙二醇(NHS-PEG))和擴(kuò)展的酰肼連接(例如酰肼-PEG-生物素-)、抗生物素蛋白-生物素以及PEG連接基(Ambikanandan等人，J.Pharm Pharmaceut Sci 6(2)252-273(2003)；Pardridge，Adv Drug Deliv Rev，36299-321(1999)；美國(guó)專(zhuān)利號(hào)6,287,792)。
II.示例性合成 通過(guò)通常眾所周知的合成方法的適宜組合合成本發(fā)明的化合物?？捎糜诤铣杀景l(fā)明的化合物的技術(shù)對(duì)于相關(guān)領(lǐng)域技術(shù)人員而言既顯而易見(jiàn)，又易于達(dá)到。以下討論被提出用于說(shuō)明可用于合成本發(fā)明的化合物的多種方法中的某些。但是，該討論并非意欲限定可用于制備本發(fā)明的化合物的反應(yīng)范圍或反應(yīng)順序。
流程

圖1
在流程圖1、2和3中，L1、L2、L3、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、A1和A2如上所定義。某些1s和2s化合物的合成在以下實(shí)施例部分中有詳述。將1s用三乙胺和甲磺酰氯處理，然后用疊氮化鈉處理，然后進(jìn)行鈀還原反應(yīng)，得到甲胺取代的環(huán)2s。通過(guò)在部分被保護(hù)的間苯二酸3s和甲胺2s之間形成酰胺鍵而形成間苯二甲酰胺4s。最后，通過(guò)使用烷基鹵進(jìn)行氫化鈉介導(dǎo)的烷基化反應(yīng)而產(chǎn)生烷基化的酰胺5s。
流程圖2
或者，化合物5s可以按照流程圖2中的順序來(lái)制備，其中使醛6s與適宜的胺和氰基硼氫化鈉進(jìn)行還原性胺化反應(yīng)，得到胺7s。然后，將胺7s與3s偶聯(lián)，然后進(jìn)行酯水解，得到烷基化的酰胺5s。
流程圖3
將環(huán)氧化物8s用適宜的胺處理，得到氨基醇9s。用酸除去Boc保護(hù)基團(tuán)，然后與片段5s偶聯(lián)(流程圖1)，產(chǎn)生最終的抑制劑10s。
III.β-分泌酶抑制劑的活性 為了開(kāi)發(fā)有用的β-分泌酶抑制劑，可以在體外鑒別能夠選擇性降低memapsin 2催化活性的候選抑制劑，隨后可以測(cè)定其減少Aβ生成的能力。可以采用本領(lǐng)域已知的方法和/或本文提出的那些方法來(lái)測(cè)定抑制劑化合物的活性。
可以使用生物活性memapsin 2(重組或天然存在的)來(lái)鑒別和測(cè)定降低memapsin 2催化活性的化合物。memapsin 2可以在體外分離的天然細(xì)胞中找到，或者可以在細(xì)胞中被共表達(dá)或表達(dá)?？梢允褂枚喾N本領(lǐng)域已知的方法來(lái)測(cè)定相對(duì)于沒(méi)有抑制劑時(shí)的活性而言在抑制劑存在下的memapsin 2催化活性的降低。
例如，可以測(cè)定化合物在memapsin 2的存在下導(dǎo)致肽的β-分泌酶位點(diǎn)水解可被檢測(cè)地降低的能力。這些數(shù)據(jù)可以例如表示為Ki、表觀(guān)Ki、Vi/Vo或抑制百分率。Ki是表明化合物抑制給定酶(例如memapsin 2、memapsin 1和/或組織蛋白酶D)的能力的抑制平衡常數(shù)。Ki數(shù)值越小，表明本發(fā)明的化合物對(duì)酶的親和力越高。Ki值與底物無(wú)關(guān)，可由表觀(guān)Ki轉(zhuǎn)化。
在底物存在下按照確立的技術(shù)(例如參見(jiàn)Bieth，J.，Bayer-Symposium V蛋白酶抑制劑，第463-469頁(yè)，Springer-Verlag，柏林(1994))來(lái)測(cè)定表觀(guān)Ki。表觀(guān)Ki的標(biāo)準(zhǔn)誤差是來(lái)自Vi/Vo數(shù)據(jù)的非線(xiàn)性回歸的誤差，這些Vi/Vo數(shù)據(jù)采用眾所周知的技術(shù)(例如參見(jiàn)Bieth，J.，Bayer-Symposium V蛋白酶抑制劑，第463-469頁(yè)，Springer-Verlag，柏林(1994)；Ermolieff，J.等人，Biochemistry 3912450-12456(2000)，這些文獻(xiàn)的教導(dǎo)整體引入本文作為參考)在本發(fā)明的化合物的不同濃度(例如約10nM至約1000nM)下測(cè)定。Vi/Vo描述了在沒(méi)有(Vo)或有(Vi)抑制劑時(shí)由酶引起的酶底物初始轉(zhuǎn)化速率的比(Ermolieff等人，Biochemistry 4012450-12456(2000))。Vi/Vo值為1.0表明化合物沒(méi)有抑制酶。Vi/Vo值小于1.0表明本發(fā)明的化合物抑制了酶的活性。
當(dāng)鑒別出能夠在memapsin 2的存在下減少肽的β-分泌酶位點(diǎn)水解的化合物后，可以進(jìn)一步測(cè)定這些化合物相對(duì)于其它酶而言選擇性抑制memapsin 2的能力。一般地，其它酶是肽水解酶，例如memapsin 1或組織蛋白酶D?？墒褂蒙锘钚悦?重組或天然存在的)來(lái)測(cè)定降低組織蛋白酶D催化活性或memapsin 1催化活性的化合物。組織蛋白酶D或memapsin 1的催化活性可以在體外分離的天然細(xì)胞中找到，或者可以在細(xì)胞中被共表達(dá)或表達(dá)?？墒褂脴?biāo)準(zhǔn)的體外或體內(nèi)測(cè)定法、例如本領(lǐng)域眾所周知的或如本文另外所述的那些測(cè)定法來(lái)測(cè)定本發(fā)明的化合物的抑制作用。
例如，可以通過(guò)測(cè)定與相同化合物抑制memapsin 1和/或組織蛋白酶D切割底物肽的β-分泌酶位點(diǎn)的程度相比memapsin 2水解底物肽的程度來(lái)測(cè)定選擇性?？捎糜跍y(cè)定memapsin 2活性的示例性底物肽包括APP及其衍生物，例如FS-2(Bachem Americas，托蘭斯，CA)。可用于測(cè)定memapsin 1和組織蛋白酶D的活性的示例性底物肽包括例如包括序列ELDLAVEFWHDR在內(nèi)的肽。這些數(shù)據(jù)可以例如表示為Ki、表觀(guān)Ki、Vi/Vo或抑制百分率，并且可以描述相對(duì)于memapsin 1或組織蛋白酶D的催化活性而言化合物對(duì)memapsin 2催化活性的抑制作用。例如，如果本發(fā)明的抑制劑化合物與memapsin 1或組織蛋白酶D之間的反應(yīng)的Ki為1000并且本發(fā)明的抑制劑化合物與memapsin 2之間的反應(yīng)的Ki為100，則抑制劑化合物對(duì)memapsin 2的β-分泌酶活性的抑制作用是對(duì)memapsin 1的抑制作用的10倍。
對(duì)于表現(xiàn)出在memapsin 2的存在下導(dǎo)致肽的β-分泌酶位點(diǎn)水解可被檢測(cè)地降低(或者另外地，對(duì)memapsin 2的作用的選擇性)的能力的化合物，可以在細(xì)胞模型或動(dòng)物模型中測(cè)定它們引起β-淀粉狀蛋白(Aβ)的量或生成可被檢測(cè)地降低的能力。例如，已經(jīng)測(cè)定了memapsin 2的電子等排抑制劑減少所培養(yǎng)細(xì)胞中Aβ生成的能力(共同懸而未決的美國(guó)申請(qǐng)?zhí)?0040121947和國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT/USO2/34324(公開(kāi)號(hào)WO 03/039454))。簡(jiǎn)言之，可以將抑制劑加入到用編碼人APP瑞典型突變體(或者倫敦型(London)突變或雙重突變體)的核苷酸構(gòu)建物以及如果需要的話(huà)用編碼人memapsin 2的核苷酸構(gòu)建物穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞(例如人胚腎(HEK293)細(xì)胞、HeLa細(xì)胞、中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞或成神經(jīng)細(xì)胞瘤系M17細(xì)胞)的培養(yǎng)物中。通過(guò)對(duì)Aβ進(jìn)行免疫沉淀、然后進(jìn)行SDS-凝膠電泳，對(duì)在有和無(wú)抑制劑時(shí)所生成的Aβ的量進(jìn)行檢測(cè)和定量。
除了細(xì)胞培養(yǎng)外，動(dòng)物模型也可以用于測(cè)定memapsin 2的抑制劑減少Aβ生成的能力。例如，可以用抑制劑對(duì)表達(dá)人淀粉樣前體蛋白的瑞典型突變的動(dòng)物(例如tg2576小鼠)(Hsiao，K.等人，Science 274，99-102(1996)進(jìn)行腹膜內(nèi)注射。然后，可以收集血漿并通過(guò)捕獲ELISA(BioSourceInternational，Camarillo，CA)來(lái)測(cè)定Aβ水平。
可以使用與抑制劑結(jié)合的熒光標(biāo)記物并通過(guò)共聚焦顯微鏡顯像來(lái)確定抑制劑在動(dòng)物模型的器官中或在細(xì)胞腔隙內(nèi)的存在(共同懸而未決的美國(guó)申請(qǐng)?zhí)?0040121947和國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT/USO2/34324(公開(kāi)號(hào)WO03/039454))。
由哺乳動(dòng)物獲得的樣品可以是液體樣品、例如血漿或血清樣品，或者可以是組織樣品、例如腦活組織檢查樣品?？梢允褂脴?biāo)準(zhǔn)技術(shù)(例如蛋白質(zhì)印跡法和ELISA測(cè)定法)來(lái)測(cè)定β-淀粉狀蛋白的量或β-淀粉狀蛋白生成的減少。
在以下實(shí)施例部分中給出了鑒別memapsin 2-β-分泌酶抑制劑的測(cè)定法的另外的實(shí)例。測(cè)定memapsin 2、memapsin 1和組織蛋白酶D的活性以及降低這些酶活性的物質(zhì)的活性的其它方法是本領(lǐng)域已知的。適宜測(cè)定方法的選擇完全在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力范圍之內(nèi)。
IV.藥物組合物 另一方面，本發(fā)明提供了包含本發(fā)明的β-分泌酶抑制劑化合物或者β-分泌酶抑制劑化合物與可藥用載體的組合的藥物組合物。該藥物組合物包括本文公開(kāi)的抑制劑的旋光異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或可藥用鹽。例如，在一些實(shí)施方案中，該藥物組合物包括本發(fā)明的化合物和作為可藥用鹽的枸櫞酸鹽。該藥物組合物中所包括的β-分泌酶抑制劑可以如上所述與載體部分共價(jià)連接。或者，該藥物組合物中所包括的β-分泌酶抑制劑不與載體部分共價(jià)連接。
如本文所用的“適于藥用的載體”指藥物賦形劑，例如適于腸內(nèi)或胃腸道外應(yīng)用并且不會(huì)與本發(fā)明的化合物(extract)進(jìn)行有害反應(yīng)的可藥用、生理上可接受的有機(jī)或無(wú)機(jī)載體物質(zhì)。適宜的可藥用載體包括水、鹽溶液(例如林格溶液)、醇、油、明膠以及碳水化合物如乳糖、直鏈淀粉或淀粉、脂肪酸酯、羥甲基纖維素和聚乙烯吡咯烷?？梢詫⑦@些制劑滅菌，并且如果需要的話(huà)可以與不會(huì)與本發(fā)明的化合物進(jìn)行有害反應(yīng)的輔助物質(zhì)如潤(rùn)滑劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、潤(rùn)濕劑、乳化劑、影響滲透壓的鹽、緩沖劑、著色劑和/或芳香物質(zhì)等混合。
本發(fā)明的化合物可以單獨(dú)施用或者可以共同施用于患者。共同施用意欲包括單獨(dú)或組合(一種以上化合物)來(lái)同時(shí)或依次施用化合物。因此，需要時(shí)，制劑還可以與其它活性物質(zhì)(例如減少代謝性降解的物質(zhì))進(jìn)行組合。
A.制劑 本發(fā)明的β-分泌酶抑制劑可以以多種口服、胃腸道外和局部劑型來(lái)制備和施用。因此，本發(fā)明的化合物可以通過(guò)注射(例如靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮內(nèi)、皮下、十二指腸內(nèi)或腹膜內(nèi)注射)來(lái)施用。此外，本文所述的化合物還可以通過(guò)吸入(如鼻內(nèi))來(lái)施用。此外，本發(fā)明的化合物還可以透皮施用。還可以預(yù)想，多種施用途徑(例如肌內(nèi)、口服、透皮)可以用于施用本發(fā)明的化合物。因此，本發(fā)明還提供了包含可藥用的載體或賦形劑以及一種或多種本發(fā)明的化合物的藥物組合物。
為了由本發(fā)明的化合物制備藥物組合物，可藥用載體可以是固體或液體。固體形式的制劑包括粉末、片劑、丸劑、膠囊劑、扁囊劑、栓劑和可分散的顆粒劑。固體載體可以是還可以用作稀釋劑、矯味劑、粘合劑、防腐劑、片劑崩解劑或成囊材料的一種或多種物質(zhì)。
在粉末中，載體是與細(xì)分的活性組分混合的細(xì)分的固體。在片劑中，將活性組分以適宜的比例與具有必需的粘合性質(zhì)的載體混合并壓縮成所需的形狀和大小。
粉末和片劑優(yōu)選含有5％至70％的活性化合物。適宜的載體是碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石粉、蔗糖、乳糖、果膠、糊精、淀粉、明膠、西黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、低熔點(diǎn)蠟、可可脂等。術(shù)語(yǔ)“制劑”意欲包括活性化合物與作為載體的成囊材料的制劑，該載體可提供其中具有或不具有其它載體的活性組分被載體包圍的膠囊，從而載體與其相聯(lián)合。類(lèi)似地，包括扁囊劑和錠劑。片劑、粉末、膠囊劑、丸劑、扁囊劑和錠劑可以用作適于口服施用的固體劑型。
為了制備栓劑，首先將低熔點(diǎn)蠟、例如脂肪酸甘油酯或可可脂的混合物熔化，將活性組分均勻分散在其中，例如通過(guò)攪拌。然后將熔化的均勻混合物倒入大小適宜的模具中，使其冷卻，由此而固化。
液體形式的制劑包括溶液劑、混懸劑和乳劑，例如水或水/丙二醇溶液劑。對(duì)于胃腸道外注射，可以將液體制劑配制成在水性聚乙二醇溶液中的溶液劑。
當(dāng)需要或期望胃腸道外應(yīng)用時(shí)，本發(fā)明化合物的特別適宜的混合物是可注射的無(wú)菌溶液、優(yōu)選油性或水性溶液，以及混懸液、乳劑或植入劑，包括栓劑。特別地，胃腸道外施用的載體包括葡萄糖水溶液、鹽水、純水、乙醇、甘油、丙二醇、花生油、芝麻油、聚氧乙烯-嵌段聚合物等。安瓿劑是方便的單位劑量。還可以將本發(fā)明的化合物加入到脂質(zhì)體中或者通過(guò)透皮泵或貼劑來(lái)施用。適用于本發(fā)明的藥物混合物是本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的，它們例如在藥物科學(xué)(Pharmaceutical Sciences)(第17版，Mack出版公司，Easton，PA)和WO 96/05309中有描述，二者的教導(dǎo)引入本文作為參考。
適于口服使用的水溶液可以通過(guò)如下方法來(lái)制備將活性組分溶于水中，酌情加入適宜的著色劑、矯味劑、穩(wěn)定劑和增稠劑。適于口服使用的水混懸液可以通過(guò)如下方法來(lái)制備將細(xì)分的活性組分分散在含有粘性材料如天然或合成的樹(shù)膠、樹(shù)脂、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和其它眾所周知的助懸劑的水中。
還包括用于在臨用前轉(zhuǎn)變?yōu)榭诜┯玫囊后w形式制劑的固體形式制劑。這類(lèi)液體形式包括溶液、混懸液和乳劑。除了活性組分外，這類(lèi)制劑還可以含有著色劑、矯味劑、穩(wěn)定劑、緩沖劑、人造和天然甜味劑、分散劑、增稠劑、增溶劑等。
藥物制劑優(yōu)選是單位劑型。在這種形式中，制劑被再分為含有適宜量的活性組分的單位劑量。單位劑型可以是包裝制劑，包裝含有分離量的制劑，所述的包裝制劑例如是被包裝的片劑、膠囊劑和在小瓶或安瓿中的粉末。此外，單位劑型還可以是膠囊劑、片劑、扁囊劑或錠劑本身，或者它可以是被包裝形式的適宜數(shù)目的任意這些劑型。
根據(jù)活性組分的具體應(yīng)用和效能，單位劑量制劑中活性組分的量在0.1mg至10000mg、更通常為1.0mg至1000mg、最通常為10mg至500mg之間變化或調(diào)節(jié)。如果需要的話(huà)，組合物還可以含有其它可配伍的治療劑。
一些化合物可能具有有限的水溶解度，因此，在組合物中可能需要表面活性劑或其它適宜的助溶劑。所述助溶劑包括聚山梨酯20、60和80；普流羅尼克F-68、F-84和P-103；環(huán)糊精；聚氧乙烯(35)蓖麻油；或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它物質(zhì)。這類(lèi)助溶劑通常以約0.01％至約2％重量的水平采用。
可能需要粘性高于單純水溶液的粘性以減小分散制劑的變異性、減小混懸劑或乳劑制劑的組分的物理分離性和/或另外改善制劑。這類(lèi)粘性構(gòu)建劑(building agents)例如包括聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、羥丙基纖維素、硫酸軟骨素及其鹽、透明質(zhì)酸及其鹽、上述物質(zhì)的組合以及本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它物質(zhì)。這些物質(zhì)通常以約0.01％至約2％重量的水平采用。任意以上佐劑的可接受的量易于由本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)確定。
本發(fā)明的組合物還可以包括提供緩慢釋放和/或安慰的組分。這類(lèi)組分包括高分子量的陰離子擬粘液(mucomimetic)聚合物、膠凝多糖和細(xì)分的藥物載體物質(zhì)。這些組分在美國(guó)專(zhuān)利4,911,920、5,403,841、5,212,162和4,861,760中有更詳細(xì)的討論。這些專(zhuān)利的全部?jī)?nèi)容整體引入本文作為所有目的的參考。
B.有效劑量 由本發(fā)明提供的藥物組合物包括活性成分以治療有效量、即以有效地獲得其預(yù)期目的(以上定義)的量而被含在其中的組合物。對(duì)特定應(yīng)用有效的實(shí)際量將尤其取決于所治療的病癥。例如，當(dāng)在治療阿爾茨海默病的方法中施用時(shí)，這類(lèi)組合物將含有有效地獲得所需結(jié)果(例如降低β-分泌酶活性或減少β-淀粉狀蛋白生成)的量的活性成分。本發(fā)明化合物的治療有效量的確定完全在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力范圍之內(nèi)，尤其可考慮本文的詳細(xì)公開(kāi)內(nèi)容來(lái)確定。
施用于哺乳動(dòng)物的劑量和頻率(單或多劑量)可以根據(jù)多種因素而改變，所述因素包括導(dǎo)致memapsin 2活性增加或β-淀粉狀蛋白積聚增加的疾病、哺乳動(dòng)物是否患有其它疾病以及其施用途徑；接受者的尺寸、年齡、性別、健康、體重、體重指數(shù)和飲食；所治療疾病(例如阿爾茨海默病)的癥狀的性質(zhì)和程度、共同治療的種類(lèi)、所治療疾病的并發(fā)癥或其它與健康有關(guān)的問(wèn)題。其它治療方案或物質(zhì)可以與申請(qǐng)人的發(fā)明的方法和化合物聯(lián)合使用。確定劑量(例如頻率和持續(xù)時(shí)間)的調(diào)節(jié)和控制完全在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力范圍之內(nèi)。
對(duì)于本文所述的任意化合物而言，治療有效量可以最初由細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)定法來(lái)確定。目標(biāo)濃度將是能夠降低memapsin 2催化活性的活性化合物的那些濃度，如采用本文所述或本領(lǐng)域已知的方法所測(cè)定的。
如本領(lǐng)域眾所周知的，用于人的治療有效量還可以由動(dòng)物模型來(lái)確定。例如，可以配制用于人的劑量以獲得已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在動(dòng)物中有效的濃度。用于人的劑量可以如上所述通過(guò)監(jiān)測(cè)memapsin 2抑制和向上或向下調(diào)節(jié)劑量來(lái)進(jìn)行調(diào)節(jié)。根據(jù)上述方法和如本領(lǐng)域眾所周知的其它方法來(lái)調(diào)節(jié)劑量以在人中獲得最大效能完全在普通技術(shù)人員的能力范圍之內(nèi)。
劑量可以根據(jù)患者的需要和所采用的化合物而改變。在本發(fā)明的上下文中，施用于患者的劑量應(yīng)當(dāng)足以隨時(shí)間在患者中產(chǎn)生有益的治療響應(yīng)。劑量的大小還將由任意不良副作用的存在、性質(zhì)和程度來(lái)確定。對(duì)特定情況確定恰當(dāng)劑量在醫(yī)師的技術(shù)范圍之內(nèi)。通常，用小于化合物最佳劑量的較小劑量開(kāi)始治療。此后，以較小的量增加劑量直到在這些情況下獲得最佳作用。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，劑量范圍為0.001％至10％w/v。在另一個(gè)實(shí)施方案中，劑量范圍為0.1％至5％w/v。
給藥劑量和間隔可以單獨(dú)進(jìn)行調(diào)節(jié)，以提供對(duì)所治療的特定臨床適應(yīng)癥有效的所施用化合物的水平。這將提供與個(gè)體疾病狀況的嚴(yán)重性相稱(chēng)的治療方案。
利用本文提供的教導(dǎo)，可以設(shè)計(jì)不會(huì)引起顯著毒性并且還完全有效地治療特定患者所顯示的臨床癥狀的有效的預(yù)防性或治療性治療方案。該設(shè)計(jì)應(yīng)當(dāng)包括通過(guò)考慮諸如化合物的效能、相對(duì)生物利用度、患者體重、不良副作用的存在和嚴(yán)重性、優(yōu)選的施用方式和所選物質(zhì)的毒性性質(zhì)來(lái)仔細(xì)選擇活性化合物。
C.毒性 特定化合物的毒性和療效之間的比值是其治療指數(shù)，該比值可以表示為L(zhǎng)D50(導(dǎo)致50％群體死亡的化合物的量)和ED50(對(duì)50％群體有效的化合物的量)之間的比值。優(yōu)選顯示出高治療指數(shù)的化合物。由細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)定法和/或動(dòng)物研究所得到的治療指數(shù)數(shù)據(jù)可以用于配制用于人的劑量范圍。這些化合物的劑量?jī)?yōu)選在包括ED50并且毒性很小或無(wú)毒的血漿濃度范圍內(nèi)。劑量可以在該范圍內(nèi)改變，這取決于所采用的劑型和所利用的施用途徑。例如參見(jiàn)Fingl等人，治療的藥理學(xué)基礎(chǔ)(THE PHARMACOLOGICALBASIS OF THERAPEUTICS)，第1章，第1頁(yè)，1975?？梢杂蓚€(gè)體醫(yī)師考慮患者的病癥和其中使用化合物的特定方法來(lái)選擇確切的制劑、施用途徑和劑量。
v.降低memapsin 2催化活性的方法 在本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明的β-分泌酶抑制劑化合物可以用于分別相對(duì)于在沒(méi)有β-分泌酶抑制劑的存在下memapsin 2催化活性、β-分泌酶位點(diǎn)水解和β-淀粉狀蛋白積聚的量而言降低memapsin 2催化活性、減少memapsin 2底物的β-分泌酶位點(diǎn)水解和/或減少β-淀粉狀蛋白積聚的方法。
在示例性實(shí)施方案中，提供了降低memapsin 2催化活性的方法。該方法包括使memapsin 2蛋白質(zhì)與有效量的本發(fā)明的β-分泌酶抑制劑化合物接觸。memapsin 2可以在任意適宜的環(huán)境中接觸。相對(duì)于在沒(méi)有β-分泌酶抑制劑存在下的活性的量而言，memapsin 2催化活性被降低。
在另一個(gè)示例性實(shí)施方案中，提供了使用本發(fā)明的抑制劑來(lái)選擇性降低memapsin 2催化活性的方法。選擇性降低memapsin 2的活性表示memapsin 2不僅相對(duì)于在沒(méi)有抑制劑時(shí)的活性而言被降低，而且與由于對(duì)抗其它肽水解酶的抑制劑作用所引起的活性降低相比，memapsin 2以較大程度被降低。例如，如上所述，酶活性的降低可以以抑制常數(shù)(Ki)表示。當(dāng)抑制劑選擇性降低memapsin 2活性時(shí)，本發(fā)明的抑制劑化合物與memapsin 2之間反應(yīng)的Ki小于本發(fā)明的抑制劑化合物和其它肽水解酶之間反應(yīng)的Ki。
在示例性實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制劑化合物與memapsin 2之間反應(yīng)的Ki比本發(fā)明的抑制劑化合物與其它肽水解酶之間反應(yīng)的Ki至少低2倍。在另一個(gè)示例性實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制劑化合物與memapsin 2之間反應(yīng)的Ki比本發(fā)明的抑制劑化合物與其它肽水解酶之間反應(yīng)的Ki至少低10倍。在另一個(gè)示例性實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制劑化合物與memapsin 2之間反應(yīng)的Ki比本發(fā)明的抑制劑化合物與其它肽水解酶之間反應(yīng)的Ki至少低100倍。在另一個(gè)示例性實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制劑化合物與memapsin 2之間反應(yīng)的Ki比本發(fā)明的抑制劑化合物與其它肽水解酶之間反應(yīng)的Ki至少低1000倍。在另一個(gè)示例性實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制劑化合物與memapsin2之間反應(yīng)的Ki比本發(fā)明的抑制劑化合物與其它肽水解酶之間反應(yīng)的Ki至少低10000倍。
在一些相關(guān)的實(shí)施方案中，與memapsin 1相比，抑制劑選擇性地降低memapsin 2的活性。在其它相關(guān)的實(shí)施方案中，與組織蛋白酶D相比，抑制劑選擇性地降低memapsin 2的活性。
因此，本發(fā)明提供了選擇性降低memapsin 2活性的方法。該方法包括使memapsin 2蛋白質(zhì)與有效量的本發(fā)明的β-分泌酶抑制劑化合物接觸。在相關(guān)的實(shí)施方案中，該方法包括在memapsin 1的存在下使memapsin 2與β-分泌酶抑制劑接觸。在供選的相關(guān)實(shí)施方案中，該方法包括在組織蛋白酶D的存在下使memapsin 2與有效量的β-分泌酶抑制劑接觸。在另一個(gè)相關(guān)的實(shí)施方案中，該方法包括在組織蛋白酶D和memapsin 1的存在下使memapsin 2與有效量的β-分泌酶抑制劑接觸。
在一些實(shí)施方案中，可以通過(guò)測(cè)定β-分泌酶底物的β-分泌酶位點(diǎn)的水解來(lái)測(cè)定β-分泌酶的活性。因此，本發(fā)明還涉及通過(guò)使memapsin 2蛋白質(zhì)與本發(fā)明的β-分泌酶抑制劑化合物接觸來(lái)減少β-分泌酶底物的β-分泌酶位點(diǎn)水解的方法。在一些實(shí)施方案中，相對(duì)于在沒(méi)有抑制劑時(shí)水解的量而言，β-分泌酶位點(diǎn)的水解被減少。在其它實(shí)施方案中，與由memapsin 1和/或組織蛋白酶D引起的水解相比，水解被選擇性地減少。因此，提供了相對(duì)于memapsin 1和/或組織蛋白酶D而言選擇性減少樣品中β-淀粉樣前體蛋白的β-分泌酶位點(diǎn)水解的方法。該方法包括使memapsin 2蛋白質(zhì)與本發(fā)明的β-分泌酶抑制劑化合物接觸。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及通過(guò)使memapsin 2與有效量的本發(fā)明的β-分泌酶抑制劑化合物接觸來(lái)減少樣品中β-淀粉狀蛋白的量的方法。相對(duì)于在沒(méi)有抑制劑時(shí)樣品中β-淀粉狀蛋白的量而言，樣品中β-淀粉狀蛋白的量被減少。因此，β-淀粉狀蛋白的積聚由此被減少。
memapsin 2可以在任意適宜的環(huán)境或任意適宜的樣品中被接觸。例如，memapsin 2可以在體外、在細(xì)胞內(nèi)或在哺乳動(dòng)物內(nèi)被接觸。一般地，選擇體外溶液以便使組分基本上不干擾memapsin 2的酶活性(例如水溶液)。在一些實(shí)施方案中，體外溶液包括生物樣品，例如哺乳動(dòng)物樣品。示例性哺乳動(dòng)物樣品包括血漿或血清樣品以及組織樣品、例如腦活組織檢查樣品?？梢赃x擇任意適當(dāng)?shù)募?xì)胞或細(xì)胞樣品，其中使memapsin 2與抑制劑接觸。細(xì)胞可以含有如前所述的內(nèi)源性memapsin 2或重組memapsin 2 (共同懸而未決的美國(guó)申請(qǐng)?zhí)?0040121947和國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT/USO2/34324 (公開(kāi)號(hào)WO 03/039454))。示例性細(xì)胞包括人胚腎(HEK293)細(xì)胞、HeLa細(xì)胞、中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞或成神經(jīng)細(xì)胞瘤系M17細(xì)胞Hela細(xì)胞、293細(xì)胞。在示例性實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物施用于哺乳動(dòng)物(例如小鼠、兔或人)以抑制β-淀粉樣前體蛋白的β-分泌酶位點(diǎn)的水解。
VI.治療阿爾茨海默病的方法 在本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明的β-分泌酶抑制劑化合物可以用于治療與β-分泌酶活性、β-淀粉樣前體蛋白的β-分泌酶位點(diǎn)水解和/或β-淀粉狀蛋白積聚有關(guān)的疾病或病癥。一般地，治療哺乳動(dòng)物的疾病或病癥。在示例性實(shí)施方案中，該疾病是阿爾茨海默病。
因此，在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了在哺乳動(dòng)物中治療阿爾茨海默病的方法，該方法包括將有效量的本發(fā)明的β-分泌酶抑制劑施用于哺乳動(dòng)物的步驟。用抑制劑治療的哺乳動(dòng)物可以是人靈長(zhǎng)類(lèi)、非人靈長(zhǎng)類(lèi)和/或非人哺乳動(dòng)物(例如嚙齒類(lèi)、犬類(lèi))。在一個(gè)實(shí)施方案中，給哺乳動(dòng)物施用降低β-分泌酶活性(抑制memapsin 1和memapsin 2催化活性)的本發(fā)明的化合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，給哺乳動(dòng)物施用選擇性降低memapsin 2催化活性的化合物。在相關(guān)的實(shí)施方案中，化合物對(duì)降低memapsin 1的催化活性具有最小影響或沒(méi)有影響。因此，本發(fā)明還提供了在需要其的受治療者中治療阿爾茨海默病的方法，該方法包括給受治療者施用β-分泌酶抑制劑化合物。在示例性實(shí)施方案中，β-分泌酶抑制劑化合物是藥物制劑的一部分，如上文所述。
本發(fā)明的抑制劑化合物可以用于治療與β-分泌酶活性有關(guān)的疾病或病癥，這些抑制劑化合物可以阻止、逆轉(zhuǎn)或減弱疾病或病癥、特別是阿爾茨海默病的發(fā)展。除了降低memapsin 2催化活性的化合物外，選擇性降低memapsin 2催化活性的化合物也可用于治療與memapsin 2催化活性有關(guān)的疾病或病癥或者生物學(xué)過(guò)程，而不是用于治療與memapsin 2催化活性和其它肽水解酶(例如組織蛋白酶D或memapsin 1)均有關(guān)的疾病或病癥或者生物學(xué)過(guò)程。
例如，memapsin 1和memapsin 2均在β-分泌酶位點(diǎn)切割淀粉樣前體蛋白(APP)以形成β-淀粉狀蛋白(本文還稱(chēng)為Aβ或β-淀粉狀蛋白)。因此，memapsin 1和memapsin 2均具有β-分泌酶活性(Hussain，I.等人，J.Biol.Chem.27623322-23328(2001))。但是，memapsin 1的β-分泌酶活性顯著低于memapsin 2的β-分泌酶活性(Hussain，I.等人，J.Biol. Chem.27623322-23328(2001))。memapsin 2位于腦和胰以及其它組織中(Lin，X.等人，Proc.Natl.Acad Sci.USA 971456-1460(2000))，而memapsin 1優(yōu)先位于胎盤(pán)中(Lin，X.等人，Proc.Natl.Acad Sci. USA971456-1460(2000))。阿爾茨海默病與由β-分泌酶(本文還稱(chēng)為memapsin 2、ASP2和BACE)切割A(yù)PP所引起的Aβ在腦內(nèi)積聚有關(guān)。因此，采用相對(duì)于memapsin 1催化活性而言選擇性抑制memapsin 2催化活性的化合物的方法在治療與memapsin 2相關(guān)性疾病、例如阿爾茨海默病中可以是重要的。選擇性抑制memapsin 2催化活性使本發(fā)明的化合物成為適用于治療阿爾茨海默病的候選藥物。
A.向CNS施用β-分泌酶抑制劑的方法 可以通過(guò)侵入性或非侵入性方法將本發(fā)明的抑制劑化合物施用于CNS。非侵入性施用方法包括不需要使用機(jī)械或物理方法就可突破血腦屏障完整性的那些方法。一般地，非侵入性方法包括使用免疫脂質(zhì)體、血腦屏障分裂(blood-brain barrier disruption，BBBD)或嗅覺(jué)通道。
免疫脂質(zhì)體是具有與脂質(zhì)體表面連接的抗體或抗體片段的脂質(zhì)體，所述抗體或抗體片段與腦毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞上表達(dá)的受體或轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白結(jié)合。示例性免疫脂質(zhì)體組合了聚合物(例如聚乙二醇化)技術(shù)和嵌合肽技術(shù)。例如，可以將β-分泌酶抑制劑包裹到含有PEG2000衍生物的單層脂囊泡中，所述PEG2000衍生物在一個(gè)末端含有反應(yīng)活性基團(tuán)，用于與抗體或其片段的互補(bǔ)反應(yīng)活性基團(tuán)連接。互補(bǔ)反應(yīng)活性基團(tuán)是本領(lǐng)域眾所周知的，例如包括胺以及活化的羧酸、硫羥和馬來(lái)酰亞胺等(Ambikanandan等人，J.PharmPharmaceut Sci 6(2)252-273(2003)；Huwyler等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，9314164-14169(1996)；和Huwyler等人，J Pharmcol Exp Ther.2821541-1546(1997)；以及美國(guó)專(zhuān)利號(hào)6,372,250)。
血腦屏障分裂是包含血腦屏障的內(nèi)皮細(xì)胞之間的緊密連接的完整性暫時(shí)喪失。通常，化合物通過(guò)全身或頸動(dòng)脈間注射與暫時(shí)性血腦屏障分裂(BBBD)的聯(lián)合來(lái)施用?？捎糜谝養(yǎng)BBD的示例性物質(zhì)包括溶劑，例如二甲基亞砜(DMSO)；乙醇(EtOH)；金屬(例如鋁)；X-輻射；病理學(xué)條件(例如高血壓、高碳酸血、低氧或局部缺血)的誘導(dǎo)；抗腫瘤劑(例如VP-16、順鉑、羥基脲、氟脲嘧啶和依托泊苷)；或同時(shí)全身施用驚厥藥戊四氮(metrazol)和抗驚厥藥戊巴比妥(Ambikanandan等人，J Pharm Pharmaceut Sci 6(2)252-273(2003))；作用于血管的白細(xì)胞三烯(Black等人，J Neurosurg，81(5)745-751(1994))；頸動(dòng)脈內(nèi)輸注緩激肽、組胺或合成的緩激肽類(lèi)似物RMP-7(Miller等人，Science 2971116-1118(2002)；Matsukado等人，Neurosurgery39125-133(1996)；Abbott等人，Mol Med Today 2106-113(1996)；Emerich等人，Clin Pharmacokinet 40105-123(2001))；透明質(zhì)酸酶(美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?0030215432，Kreil等人，Protein Sci.，4(9)1666-1669(1995))；和頸動(dòng)脈間注射惰性高張溶液、例如甘露醇或阿拉伯糖(Neuwelt，E.A.等人，NeuweltEA(編者)，Implications of the Blood Brain Barrier and its ManipulationClinical Aspects.第2卷，Plenum出版社，紐約，(1989)；Neuwelt等人，J NuclMed，351831-1841(1994)；Neuwelt等人，Pediatr Neurosurg 2116-22(1994)；Kroll等人，Neurosurg，421083-1099(1998)；Rapoport，Cell Mol Neurobiol20217-230(2000)；和Doran等人，Neurosurg 36965-970(1995))。
嗅覺(jué)通道施用是將化合物經(jīng)鼻內(nèi)傳遞到鼻道上部三分之一的嗅神經(jīng)。經(jīng)鼻內(nèi)傳遞后，化合物向后沿感覺(jué)嗅神經(jīng)元傳遞，在腦脊髓液(CSF)和嗅球內(nèi)產(chǎn)生顯著的濃度(Thorne等人，Brain Res，692(1-2)278-282(1995)；Thorne等人，Clin Pharmacokinet 40907-946(2001)；Illum，Drug DiscovToday 71184-1189(2002)；美國(guó)專(zhuān)利6,180,603；美國(guó)專(zhuān)利6,313,093；和美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?0030215398)。
侵入性施用方法是包括通常通過(guò)機(jī)械或物理方法使血腦屏障物理性突破以將化合物傳入CSF中或直接傳入腦實(shí)質(zhì)中的那些方法。侵入性施用方法通常可以包括將化合物注射或手術(shù)植入。
在注射方法中，使用針頭來(lái)物理性突破BBB并將化合物直接傳遞到CSF中。示例性注射方法包括心室內(nèi)、鞘內(nèi)或腰髓內(nèi)施用，并且還可以包括通過(guò)身體外部的貯庫(kù)來(lái)輸注化合物(Krewson等人，Brain Res 680196-206(1995)；Harbaugh等人，Neurosurg.23(6)693-698(1988)；Huang等人，J Neurooncol 459-17(1999)；Bobo等人，Proc Natl Acad Sci USA 912076-2082(1994)；Neuwalt等人，Neurosurg.38(4)1129-1145(1996))。
在手術(shù)植入法中，將化合物直接置于腦實(shí)質(zhì)中。示例性手術(shù)植入法可以包括將化合物加入到直接置于腦間質(zhì)中的聚酐糯米紙囊劑中(Brem等人，Sci Med 3(4)1-11(1996)；Brem等人，J Control Release 7463-67(2001))。
VII.結(jié)晶復(fù)合物 另一方面，本發(fā)明提供了含有memapsin 2蛋白質(zhì)和本發(fā)明的β-分泌酶抑制劑的結(jié)晶復(fù)合物?？捎糜谂c電子等排化合物形成共結(jié)晶的memapsin 2蛋白質(zhì)(例如memapsin 2蛋白片段、跨膜蛋白等)先前已經(jīng)有詳細(xì)討論(共同懸而未決的美國(guó)申請(qǐng)?zhí)?0040121947和國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT/USO2/34324(公開(kāi)號(hào)WO 03/039454))。這些memapsin 2蛋白質(zhì)同樣可用于與本發(fā)明的β-分泌酶抑制劑形成結(jié)晶復(fù)合物。
可以采用共同懸而未決的美國(guó)申請(qǐng)?zhí)?0040121947和國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT/USO2/34324(公開(kāi)號(hào)WO 03/039454)中所述的技術(shù)形成結(jié)晶復(fù)合物。簡(jiǎn)言之，產(chǎn)生編碼蛋白質(zhì)的核苷酸構(gòu)建物，將其在宿主細(xì)胞、例如哺乳動(dòng)物宿主細(xì)胞(例如Hela細(xì)胞、293細(xì)胞)或細(xì)菌宿主細(xì)胞(例如大腸桿菌(E.coli)中表達(dá)，進(jìn)行純化，與本發(fā)明的化合物結(jié)晶。結(jié)晶蛋白質(zhì)的衍射分辨率極限可以例如通過(guò)x-射線(xiàn)衍射或中子衍射技術(shù)來(lái)測(cè)定。
在示例性實(shí)施方案中，結(jié)晶蛋白質(zhì)可以具有的x-射線(xiàn)衍射分辨率極限不高于約4.0Δ。結(jié)晶蛋白質(zhì)還可以具有的x-射線(xiàn)衍射分辨率極限不高于約4.0Δ、約3.5Δ、約3.0Δ、約2.5Δ、約2.0Δ、約1.5Δ、約1.0Δ或約0.5Δ。在一些實(shí)施方案中，結(jié)晶蛋白質(zhì)還可以具有的x-射線(xiàn)衍射分辨率極限不高于約2Δ。結(jié)晶蛋白質(zhì)的衍射分辨率極限可以采用標(biāo)準(zhǔn)x-射線(xiàn)衍射技術(shù)來(lái)測(cè)定。
在其它示例性實(shí)施方案中，結(jié)晶復(fù)合物的β-分泌酶抑制劑在S3′結(jié)合袋、S4′結(jié)合袋和/或S4結(jié)合袋處與所述蛋白質(zhì)相連。S3′、S4′和S4結(jié)合袋在共同懸而未決的美國(guó)申請(qǐng)?zhí)?0040121947和國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT/USO2/34324(公開(kāi)號(hào)WO 03/039454)中有詳細(xì)討論。
本文已經(jīng)采用的術(shù)語(yǔ)和表述可用作描述而非加以限制，并且并非意欲使用這些術(shù)語(yǔ)和表述來(lái)排除所示和所述特征的同等物或其部分，可以知道，在所要求的本發(fā)明的范圍內(nèi)各種變通是可能的。此外，本發(fā)明的任意實(shí)施方案的任意一個(gè)或多個(gè)特征可以與本發(fā)明的任意其它實(shí)施方案的任意一個(gè)或多個(gè)其它特征組合而不背離本發(fā)明的范圍。例如，本發(fā)明的β-分泌酶抑制劑的特征同樣可應(yīng)用于治療疾病狀態(tài)的方法和/或本文所述的藥物組合物。本文引用的所有出版物、專(zhuān)利和專(zhuān)利申請(qǐng)整體引入本文作為所有目的的參考。
VIII.實(shí)施例 以下實(shí)施例僅用于說(shuō)明性目的而非意欲限制本發(fā)明的范圍。
實(shí)施例1所選的B-分泌酶抑制劑化合物的制備 實(shí)施例1.13-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基氨基甲酸叔丁酯的合成 于-78℃將在THF中的甲基噻唑(1.0g，10.1mmol)用n-BuLi(1.6M，7.56mL)處理30分鐘，逐滴加入DMF(1.4mL，18.2mmol)。將所得反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?。原料消失?通過(guò)TLC)，將反應(yīng)混合物再次冷卻至0℃，加入LAH(0.69g，18.5mmol)。將該混合物溫?zé)嶂潦覝兀瑪嚢?小時(shí)，將反應(yīng)物用NH4Cl水溶液淬滅，用EtOAc稀釋。分離有機(jī)溶液，用EtOAc萃取2次，用Na2SO4干燥，濃縮。將殘余物用快速色譜法純化，得到淺黃色油狀的相應(yīng)的醇。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)，δ6.89(s，1H)；4.95(s，2H)；2.48(s，3H). 于0℃在二氯甲烷中將甲基噻唑甲醇(0.57g，4.4mmol)用甲磺酰氯(0.42mL，5.4mmol)和三乙基乙胺進(jìn)行處理。將所得混合物攪拌20分鐘，然后用NH4Cl水溶液淬滅。從有機(jī)層中蒸發(fā)溶劑，將殘余物進(jìn)行快速色譜法，得到油狀的相應(yīng)的甲磺酸酯。然后將甲磺酸酯(0.25g，1.2mmol)溶于DMF中，加入疊氮化鈉(0.62g，9.6mmol)。將該混合物加熱回流2小時(shí)，然后冷卻，用NH4Cl水溶液洗滌。從有機(jī)層中蒸發(fā)溶劑，得到相應(yīng)的疊氮化物。將疊氮化物(0.14g，0.91mmol)溶于乙酸乙酯中，加入Pd(OH)2(0.07g)，在氫氣氛圍下將該混懸液攪拌5小時(shí)。將該混懸液通過(guò)Celite過(guò)濾。蒸發(fā)溶劑，將殘余物進(jìn)行快速色譜法，得到黃色油狀的相應(yīng)的甲基噻唑甲胺。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)，δ6.74(m，1H)；4.09(m，2H)；2.37(s，3H). 將間苯二酸一甲酯(0.054g，0.30mmol)用EDCI(0.064g，0.33mmol)、HOBt(0.046g，0.34mmol)、DIPEA(0.07mL，0.4mmol)和甲基噻唑甲胺(0.046g，0.36mmol)處理。在氬氣下于室溫將所得混合物攪拌15小時(shí)，然后用水淬滅。分層，將水層用CHCl3(2×20mL)萃取。將合并的有機(jī)層用Na2SO4干燥，在減壓下濃縮。將所得油狀物溶于THF(5mL)中，向其中加入3mL1.0N LiOH(水溶液)。將所得混合物迅速攪拌1.5小時(shí)。通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去揮發(fā)物，將所得水溶液用CHCl3(×3)萃取。然后用1N HCl(水溶液)將該水溶液酸化至pH1，用CHCl3(×3)萃取。將合并的有機(jī)層用Na2SO4干燥，在減壓下濃縮，得到相應(yīng)的間苯二酸。將該產(chǎn)物(0.042g，0.11mmol)溶于DMF中，用NaH(0.015g，0.62mmol)和MeI(0.04mL，0.64mmol)處理，攪拌過(guò)夜。通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去揮發(fā)物，將所得溶液用1N LiOH稀釋?zhuān)肅HCl3(×3)萃取。然后用1N HCl(水溶液)將該水溶液酸化至pH1，用CHCl3(×3)萃取。將合并的有機(jī)層用Na2SO4干燥，在減壓下濃縮，得到N-甲基-N-(4-甲基-噻唑-2-基甲基)-間氨甲酰苯甲酸。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)，δ8.16(m，2H)，7.70(m，1H)，7.51(m，1H)，6.91(s，1H)，5.05(s，1.5H)，4.75(s，0.5H)，3.2-3.0(m，3H)，2.46(s，3H). 向攪拌的(1-環(huán)氧乙烷基-2-苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(0.5g，1.9mmol)在iPrOH中的溶液中加入3-甲氧基芐胺(0.28mL，2.1mmol)。將該混合物加熱回流過(guò)夜，然后冷卻，在減壓下除去揮發(fā)物。將殘余物進(jìn)行快速色譜法，得到固態(tài)的相應(yīng)的氨基醇。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.35-7.17(m，6H)，6.93-6.78(m，3H)，4.65(d，1H)，3.90-3.7(m，5H)，3.51(m，1H)，3.15-2.65(m，6H)，1.34(s，9H). 向攪拌的3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基氨基甲酸叔丁酯(0.032g，0.079mmol)在二氯甲烷中的溶液中加入TFA。將所得混合物攪拌1小時(shí)，然后在減壓下除去揮發(fā)物。將該胺溶于二氯甲烷中，用DIPEA處理，將其加入到N-甲基-N-(4-甲基-噻唑-2-基甲基)-間氨甲酰苯甲酸(0.021g，0.071mmol)、EDCI(0.015g，0.078mmol)和HOBt(0.011g，0.081mmol)在二氯甲烷中的溶液中。于室溫將所得混合物攪拌過(guò)夜，然后用水洗滌，用Na2SO4干燥，在減壓下除去揮發(fā)物。將殘余物進(jìn)行快速色譜法，得到目標(biāo)分子。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.8-7.M(m，11H)，6.94-6.76(m，4H)，4.95(s，1.5H)，4.63(s，0.5H)，4.38(m，1H)，3.90-3.64(m，5H)，3.18-2.74(m，9H)，2.44(s，3H). 實(shí)施例1.2N1-(3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-(1-苯乙基)間苯二甲酰胺的合成 通過(guò)在2-丙醇中、在回流條件下(1-環(huán)氧乙烷基-2-苯乙基)-氨基甲酸叔丁酯與3-甲氧基芐胺的開(kāi)環(huán)反應(yīng)一步得到3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基氨基甲酸叔丁酯。通過(guò)用在CH2Cl2或甲醇HCl中的TFA進(jìn)行處理，將Boc基團(tuán)脫保護(hù)，得到3-氨基-1-(3-甲氧基芐氨基)-4-苯基丁-2-醇，在N-乙基-N’-(二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)、1-羥基苯并三唑水合物和二異丙基乙胺的存在下、在DMF和CH2Cl2的混合物中將其與3-(N-甲基甲磺酰氨基)-5-(1-苯乙基氨甲酰基)苯甲酸直接進(jìn)行肽偶聯(lián)反應(yīng)，得到N1-(3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-(1-苯乙基)間苯二甲酰胺。
通過(guò)在二氯甲烷中用甲磺酰氯和吡啶處理而將5-氨基間苯二酸二甲酯甲磺酰化。然后在NaH/DMF條件下用甲基碘進(jìn)行N-烷基化，得到5-(N-甲基甲磺酰氨基)間苯二酸二甲酯。將5-(N-甲基甲磺酰氨基)間苯二酸二甲酯進(jìn)行選擇性水解，然后與α-甲基芐胺進(jìn)行EDC/HOBT/DIPEA介導(dǎo)的偶聯(lián)，得到3-(N-甲基甲磺酰氨基)-5-(1-苯乙基氨甲?；?苯甲酸甲酯。在THF/MeOH的存在下使用1N NaOH水溶液進(jìn)行酯水解，得到白色固態(tài)的純3-(N-甲基甲磺酰氨基)-5-(1-苯乙基氨甲?；?苯甲酸。
將攪拌的(1-環(huán)氧乙烷基-2-苯乙基)-氨基甲酸叔丁酯(131.6mg，0.5mmol)、3-甲氧基-芐胺(0.25mL，2mmol)在3mL 2-丙醇中的溶液加熱回流12小時(shí)，得到4-(3-甲氧基芐氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基氨基甲酸叔丁酯。蒸發(fā)溶劑，將粗產(chǎn)物通過(guò)硅膠快速柱色譜法(在CHCl3中的5-10％MeOH)純化，得到無(wú)色固態(tài)的4(154mg，產(chǎn)率77％)。
于室溫向攪拌的5-氨基間苯二酸二甲酯(2.09g，10mmol)在二氯甲烷(30mL)中的溶液中加入吡啶(2.43mL，30mmol)。于0℃加入甲磺酰氯(0.86mL，11mmol)，于室溫將所得混合物攪拌過(guò)夜。然后將該反應(yīng)混合物在減壓下濃縮，加入乙酸乙酯(50mL)。將所得白色沉淀物過(guò)濾，用己烷洗滌，得到白色固態(tài)的磺酰胺(2.715g，產(chǎn)率95％)。
于室溫向攪拌的NaH(0.24g，10mmol，60％，在油混懸液中)在10mLDMF中的混懸液中加入以上磺酰胺(1.435g，5mmol)，然后加入碘代甲烷(0.62mL，10mmol)。5小時(shí)后，將反應(yīng)物用H2O(25mL)淬滅。然后將反應(yīng)混合物用EtOAc萃取，用H2O進(jìn)一步洗滌以除去過(guò)量的DMF，通過(guò)無(wú)水Na2SO4干燥，濃縮。將由此得到的粗產(chǎn)物用己烷洗滌，得到白色固態(tài)的5-(N-甲基甲磺酰氨基)間苯二酸二甲酯(1.37g，產(chǎn)率91％)。
將5-(N-甲基甲磺酰氨基)間苯二酸二甲酯(0.842g，2.8mmol)溶于THF∶MeOH(1∶1)(8mL)和H2O(3mL)中。加入固態(tài)NaOH(0.112g，2.8mmol)，于室溫?cái)嚢?8小時(shí)。將反應(yīng)混合物在減壓下濃縮。將飽和NaHCO3(10mL)溶液加入到該反應(yīng)混合物中，用甲苯萃取(以除去＜10％未反應(yīng)的原料)。將水溶液用稀HCl(10％)酸化，用EtOAc萃取，通過(guò)無(wú)水Na2SO4干燥。蒸發(fā)溶劑，在減壓下干燥，得到白色固態(tài)的3-(甲氧羰基)-5-(N-甲基甲烷-5-基磺酰氨基)苯甲酸(75％，0.598g)，其未經(jīng)純化用于進(jìn)一步反應(yīng)。
于室溫向攪拌的3-(甲氧羰基)-5-(N-甲基甲烷-5-基磺酰氨基)苯甲酸(0.215g，0.75mmol)、EDC(0.172g，0.9mmol)、HOBt(0.122g，0.9mmol0在DMF/CH2Cl2(1∶5mL)中的溶液中加入α-甲基芐胺(0.1mL，0.75mmol)，然后加入二異丙基乙胺(0.5mL)。于室溫將反應(yīng)混合物攪拌16小時(shí)。然后加入水，將該反應(yīng)混合物用EtOAc萃取。將有機(jī)層通過(guò)Na2SO4干燥，濃縮。將由此得到的粗產(chǎn)物通過(guò)硅膠快速柱色譜法(在CHCl3中的3％MeOH)純化，得到相應(yīng)的酰胺10(0.343g)，將其溶于THF∶MeOH(1∶1)(6mL)和H2O(2mL)中。加入固態(tài)NaOH(80mg，2.0mmol)，于室溫?cái)嚢?小時(shí)。將反應(yīng)混合物在減壓下濃縮。將飽和NaHCO3(10mL)溶液加入到該反應(yīng)混合物中，用甲苯萃取(以除去有機(jī)雜質(zhì))。將水性反應(yīng)混合物用稀HCl(10％)酸化，用EtOAc萃取，通過(guò)無(wú)水Na2SO4干燥。蒸發(fā)溶劑，在減壓下干燥，得到白色固態(tài)的3-(N-甲基甲烷-5-基磺酰氨基)-5-((1-苯乙基)氨甲酰基)苯甲酸(0.198g，60％)。
于室溫向3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基氨基甲酸叔丁酯(40mg，0.1mmol)在CH2Cl2(1mL)中的溶液中加入TFA(0.5mL)。于室溫將反應(yīng)混合物攪拌30分鐘。之后，將混合物在減壓下濃縮，溶于CH2Cl2(1mL)中，與二異丙基乙胺(0.2mL)一起攪拌。將該混合物加入到攪拌的3-(N-甲基甲烷-5-基磺酰氨基)-5-((1-苯乙基)氨甲?；?苯甲酸(37.6mg，0.1mmol)、EDC(24mg，0.125mmol)、HOBt(16.9mg，0.125mmol)在DMF/CH2Cl2(1∶2mL)中的溶液中。于室溫將該反應(yīng)混合物攪拌19小時(shí)。然后加入水，將該反應(yīng)混合物用EtOAc萃取。將有機(jī)層通過(guò)Na2SO4干燥，濃縮。將由此得到的粗產(chǎn)物N1-(4-(3-甲氧基芐氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲烷-5-基磺酰氨基)-N3-(1-苯乙基)間苯二甲酰胺通過(guò)硅膠快速柱色譜法(在CHCl3中的10％MeOH)純化，得到白色固態(tài)的目標(biāo)分子(22.3mg，34％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ1.58(3H，d)，2.72(3H，s)，2.74-2.83(4H，m)，3.22(3H，s)，3.69-3.83(6H，m)，4.29-4.33(1H，m)，5.26(1H，q)，6.78(1H，dd)，6.85-6.86(2H，m)，7.13-7.37(12H，m)，7.76(1H，s)，7.89(2H，s)，8.11(1H，s). 實(shí)施例2所選的前體化合物的合成 以下合成的前體化合物可用于制備本文提供的本發(fā)明的化合物的方法。使用以上的示例性合成和實(shí)施例1中所提供的指導(dǎo)，本領(lǐng)域技術(shù)人員將立即知道，可以通過(guò)使用眾所周知的技術(shù)修改以下合成來(lái)制備以下前體化合物，以獲得多種抑制劑化合物。
實(shí)施例2.11-(吡啶-3-基)乙胺 于室溫向3-乙酰吡啶(82.6mmol)在甲醇(200mL)中的溶液中一次性加入乙酸銨(1.03mol)。將混合物攪拌20分鐘后，將氰基硼氫化鈉(57.8mmol)加入到該混合物中。攪拌1天后，將6M鹽酸加入到反應(yīng)混合物中。將所得溶液用乙醚洗滌，然后用氫氧化鉀將水相堿化至PH＝10。將釋放的胺用氯仿萃取，將合并的有機(jī)萃取液通過(guò)無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下除去溶劑后，得到無(wú)色油狀的粗胺，將其通過(guò)在減壓下蒸餾而進(jìn)一步純化。
1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ8.552(d，1H)，8.453(dd，1H)，7.678(m，1H)，7.206-7.261(m，1H)，4.148(q，1H)，1.378(d，3H). 以上方法還用于制備以下化合物 1-(3-甲氧基苯基)乙胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ7.274-7.219(m，1H)，6.941-6.905(m，2H)，6.796-6.757(m，1H)，4.090(q，1H)，3.811(s，3H)，1.382(d，3H). 1-(3-氟苯基)乙胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ7.297-7.224(m，1H)，7.105-7.032(m，2H)，6.903-6.862(m，1H)，4.100(q，1H)，1.352(d，3H). 實(shí)施例2.2(3-甲基異唑-5-基)甲基氨基甲酸叔丁酯 將321mg(2.27mmol) 2-(3-甲基異唑-5-基)乙酸、0.5mL(2.32mmol)二苯基磷酰基疊氮化物(DPPA)和0.35mL(2.51mmol)三乙胺在30mL蒸餾叔丁醇中的溶液回流13.5小時(shí)。將該溶液濃縮，將粗殘余物溶于EtOAc中。將有機(jī)層用1N HCl(3×10mL)和飽和NaHCO3溶液(3×10mL)洗滌。將有機(jī)層通過(guò)硫酸鈉干燥，過(guò)濾，濃縮。通過(guò)快速硅膠色譜法(28％EtOAc/己烷)純化，得到50mg(產(chǎn)率10％)淡黃色固態(tài)的被保護(hù)的胺。
實(shí)施例2.3(3-(甲氧基甲基)苯基)甲胺 使用在以下參考文獻(xiàn)中找到的方法將1，3-亞苯基二甲醇轉(zhuǎn)化為(3-(甲氧基甲基)苯基)甲醇Liu，Xuan；Zheng，Qi-Huang；Fei，Xiangshu；Wang，Ji-Quan；Ohannesian，David W.；Erickson，Leonard C.；Stone，K.Lee；Hutchins，Gary D.；Bioorg.Med.Chem.Lett.2003，13，641-644。按照標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)、包括與DPPA形成疊氮化物和還原將(3-(甲氧基甲基)苯基)甲醇轉(zhuǎn)化為目標(biāo)分子。
實(shí)施例2.43-乙酰氨基芐基氨基甲酸叔丁酯 于0℃向攪拌的3-氨基芐基氨基甲酸叔丁酯(Hah，Jung-Mi；Martasek，Pavel；Roman，Linda J.；Silverman，Richard B.；J.Med.Chem.；2003，46，1661-1669)(287mg，1.29mmol)在CH2Cl2(10mL)中的溶液中加入Et3N(0.27mL，2.0mmol)和乙酰氯(0.10mL，1.4mmol)，將所得溶液緩慢溫?zé)嶂潦覝?。另外攪?小時(shí)后，將反應(yīng)物用飽和NH4Cl水溶液淬滅。分層，將水層用CH2Cl2(2×20mL)萃取，將合并的有機(jī)層用水、鹽水洗滌，用Na2SO4干燥，在減壓下濃縮。將殘余油狀物通過(guò)柱色譜法(在己烷中的60％EtOAc)純化，得到乙酰胺(123.1mg，36％)。
實(shí)施例2.53-(甲基氨基)芐基氨基甲酸叔丁酯 按照標(biāo)準(zhǔn)還原性胺化條件、使用甲醛和氰基硼氫化鈉將3-氨基芐基氨基甲酸叔丁酯轉(zhuǎn)化為目標(biāo)分子。
實(shí)施例2.65-氟間苯二酸 向輕微回流的1.9g(15.3mmol)5-氟-間二甲苯在約13.5mL吡啶和約9.5mL水中的溶液中分?jǐn)?shù)批加入13.8g(87.3mmol)KMnO4。將混合物回流約7小時(shí)后，加入亞硫酸鈉以淬滅過(guò)量的KMnO4。將溫?zé)岬幕旌衔镞^(guò)濾，加入1N HCl至pH＝3。將濾液用EtOAc洗滌，用NaCl飽和，用(80mL CHCl3∶10mL MeOH∶10mL H2O)的混合物的萃取劑萃取3-4次。將合并的萃取液通過(guò)硫酸鈉干燥，過(guò)濾，濃縮，得到約400mg(產(chǎn)率14％)淡黃色固態(tài)的二酸。
實(shí)施例2.75-(芐氧基)煙酸甲酯 在A(yíng)r下于60℃將818mg(5.34mmol) 5-羥基煙酸、1.70g(12.3mmol)K2CO3和1.0mL(8.41mmol)溴化芐在25mL DMF中的混合物加熱16小時(shí)。將該混合物通過(guò)棉布過(guò)濾，將殘余物溶于CHCl3中。將有機(jī)層用水(2×30mL)、鹽水(30mL)洗滌，通過(guò)Na2SO4干燥，過(guò)濾，濃縮。通過(guò)快速硅膠色譜法純化，得到363mg(產(chǎn)率28％)橙色油狀的芐基醚。
實(shí)施例2.8(5-(芐氧基)吡啶-3-基)甲醇 于0℃向攪拌的363mg(1.49mmol) 5-(芐氧基)煙酸甲酯在10mL THF中的溶液中加入141mg(3.71mmol)LiAlH4。移去冰浴，55分鐘后，加入20.5mgLiAlH4。40分鐘后，通過(guò)連續(xù)加入160μL H2O、160μL 15％NaOH水溶液和480μL鹽水淬滅反應(yīng)物。通過(guò)快速硅膠色譜法(2mL MeOH/100mLCHCl3)純化，得到250mg(產(chǎn)率78％)醇(黃色油狀物)。
實(shí)施例2.93-(疊氮基甲基)-5-(芐氧基)吡啶 向攪拌的250mg(1.17mmol)(5-(芐氧基)吡啶-3-基)甲醇在8mL甲苯中的溶液中加入310μL(1.44mmol)DPPA。將該混合物冷卻至0℃，加入210μL(1.44mmol) 1，8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]-十一碳-7-烯(DBU)。移去冰浴，在溫?zé)嶂潦覝貢r(shí)繼續(xù)攪拌。約20小時(shí)后，將溶液用EtOAc稀釋?zhuān)尤?N HCl至pH為7至8。將有機(jī)層用水(2×15mL)和鹽水(15mL)洗滌，通過(guò)Na2SO4干燥。過(guò)濾并濃縮后，將粗產(chǎn)物通過(guò)快速硅膠色譜法(56-60％EtOAc/己烷)純化，得到181mg(產(chǎn)率65％)無(wú)色油狀的疊氮化物。
實(shí)施例2.10(5-(芐氧基)吡啶-3-基)甲胺 于0℃向攪拌的181mg 3-(疊氮基甲基)-5-(芐氧基)吡啶在6mL THF中的溶液中加入80.6mg(2.12mmol) LiAlH4。移去冰浴，在溫?zé)嶂潦覝貢r(shí)繼續(xù)攪拌。30分鐘后，通過(guò)連續(xù)加入160μL H2O、160μL 15％ NaOH水溶液和480μL鹽水淬滅反應(yīng)物。將混合物通過(guò)Celite過(guò)濾，濃縮。粗產(chǎn)物未經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一反應(yīng)。
實(shí)施例2.11(5-甲基吡啶-3-基)甲醇 于0℃向攪拌的233mg(1.70mmol)5-甲基煙酸(按照5-氟-間苯二酸的通用方法合成)在30mL THF中的溶液中加入181mg(4.76mmol) LiAlH4。25分鐘后，通過(guò)連續(xù)加入180μL H2O、180μL 15％NaOH水溶液和540μL鹽水淬滅反應(yīng)物。將混合物通過(guò)Celite過(guò)濾，濃縮，得到87mg粗醇，其未經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一反應(yīng)。
實(shí)施例2.12(5-甲基吡啶-3-基)甲胺 按照如上文對(duì)煙酸芐基醚衍生物所述的通用方法、由相應(yīng)的醇合成了前體化合物。
實(shí)施例2.13(5-甲氧基吡啶-3-基)甲胺 按照如上文對(duì)煙酸芐基醚衍生物所述的通用方法、由羥基煙酸酯合成了前體化合物。
實(shí)施例2.144-氟-間苯二酸 按照對(duì)5-氟-間苯二酸所述的方法、由2-氟-5-甲基苯甲酸合成了前體化合物。
實(shí)施例2.154-甲基-間苯二酸 按照對(duì)5-氟-間苯二酸所述的方法、由2，5-二甲基苯甲酸合成了前體化合物。
實(shí)施例2.161-(4-甲基噻唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯 將BOC-丙氨酸-硫代酰胺(1.39g，6.81mmoles)、氯丙酮(0.65mL，8.18mmoles)和碳酸鈣(1.0g，10.22mmoles)的混合物在乙醇(25mL)中回流4小時(shí)。將該反應(yīng)物冷卻至室溫，用20mL飽和NaHCO3水溶液淬滅。在減壓下蒸發(fā)乙醇，用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。將合并的有機(jī)層通過(guò)Na2SO4干燥，濃縮。將殘余物進(jìn)行硅膠色譜法(20％乙酸乙酯/80％己烷)，得到48％所需產(chǎn)物。
實(shí)施例2.174-((1H-苯并[d]咪唑-2-基)甲基氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基氨基甲酸叔丁酯 將1-(環(huán)氧乙烷-2-基)-2-苯乙基氨基甲酸叔丁酯(185mg，0.7mmoles)、(1H-苯并[d]咪唑-2-基)甲胺二鹽酸鹽(232mg，1.01mmoles)和Hunig氏堿(0.49mL，2.8mmoles)在iPrOH(6mL)中的溶液回流12小時(shí)。將該反應(yīng)物冷卻至室溫，在減壓下蒸發(fā)溶劑，進(jìn)行色譜法(5％MeOH/95％CHCl3)，得到175mg(61％)所需產(chǎn)物。
實(shí)施例2.18N1-(3-羥基-4-((1-異丁基哌啶-4-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-(1-苯乙基)間苯二甲酰胺二鹽酸鹽 于80℃將在異丙醇(20mL)中的1-(環(huán)氧乙烷-2-基)-N-((氧代硼基)亞甲基)-2-苯基乙胺(1.61mmol，424mg)和4-(氨甲基)哌啶-1-甲酸芐酯(1.94mmol，480mg)加熱過(guò)夜。蒸發(fā)溶劑，通過(guò)快速色譜法純化，得到4-((2-羥基-3-((氧代硼基)亞甲基氨基)-4-苯基丁基氨基)甲基)哌啶-1-甲酸芐酯(880mg)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ7.363-7.174(m，10H)，5.118(s，2H)，4.767(br，1H)，4.187(m，2H)，3.786(m，1H)，3.458(m，1H)，3.023-2.671(m，6H)，2.484(d，J＝6.6Hz，2 H)，1.733(m，2H)，1.600(m，1H)，1.347(s，9H)，1.13(m，2H). 將在二氯甲烷中的4-((2-羥基-3-((氧代硼基)亞甲基氨基)-4-苯基丁基氨基)甲基)哌啶-1-甲酸芐酯(1.04mmol，530mg)加入到TFA(7.6mL)中，于室溫?cái)嚢?0分鐘。蒸發(fā)溶劑。將殘余物溶于二氯甲烷中，加入二異丙基乙胺(4.14mmol，0.72mL)，攪拌30分鐘。然后將酸(1.04mmol，390mg)和BOP試劑(1.14mmol，504mg)加入到燒瓶中。將所得混合物攪拌過(guò)夜，蒸發(fā)溶劑。將殘余物溶于氯仿中，用水和鹽水洗滌。最后將黃色殘余物通過(guò)快速色譜法純化，得到產(chǎn)物(320mg)。
1HNMR(300MHz，CDCl3)，δ7.992(s，1H)，7.865(m，1H)，7.715(s，1H)，7.383-7.106(m，15H)，5.241(m，1H)，5.093(s，2H)，4.291(m，1H)，4.146(m，2H)，3.843(m，1H)，3.232(s，3H)，3.065(m，1H)，2.962-2.626(m，7H)，2.779(s，3H)，1.714(m，3H)，1.579(d，J＝6.9Hz，3H)，1.120(m，2H). 將以上化合物(318mg，0.413mmol)溶于無(wú)水甲醇中，然后溶于三乙胺(0.2mL，過(guò)量)和焦碳酸叔丁酯(108.3mg，0.5mmol)中。將所得混合物攪拌過(guò)夜。然后蒸發(fā)溶劑，將殘余物溶于甲醇中，在1atm下用Pd(OH)2氫化。過(guò)濾后，蒸發(fā)溶劑，將殘余物通過(guò)快速色譜法純化，得到產(chǎn)物(215mg)。
1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)，δ8.227-7.802(m，3H)，7.365-7.059(m，10H)，5.214(m，1H)，4.308(br，1H)，3.885(m，1H)，3.467(m，1H)，3.293-2.879(m，6H)，3.211(s，3H)，2.805-2.668(m，3H)，2.782(s，3H)，1.717(m，3H)，1.562(d，J＝6.9Hz，3H)，1.386(s，9H)，1.174(m，2H). 將溶于甲醇/乙腈(5/1)中的胺(50mg，0.068mmol)加入到異丁醛(0.1mL，過(guò)量)中，攪拌15分鐘，然后加入NaBCNH3(12.8mg，0.2mmol)，繼續(xù)攪拌30分鐘。將5滴乙酸加入到該反應(yīng)混合物中，繼續(xù)攪拌過(guò)夜。蒸發(fā)溶劑。然后將白色固體溶于氯仿中，用NaHCO3水溶液、鹽水洗滌，過(guò)濾，用無(wú)水Na2SO4干燥。將所得殘余物通過(guò)快速色譜法純化，得到產(chǎn)物(40mg)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ8.014(s，1H)，7.902(s，1H)，7.798(s，1H)，7.372-7.087(m，10H)，5.261(m，1H)，4.340(m，1H)，3.870(m，1H)，3.420-3.207(m，3H)，3.282(s，3H)，3.103-2.890(m，4H)，2.841(s，3H)，2.610(m，3H)，2.132(m，2H)，1.935-1.774(m，3H)，1.569(d，J＝6.9Hz，3H)，1.422(s，9H)，1.302(m，2H)，0.979(d，J＝6.6Hz，3H)， 將以上化合物溶于4M HCl二烷溶液中，攪拌1小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，回收得到白色固態(tài)的N1-(3-羥基-4-((1-異丁基哌啶-4-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲基磺酰氨基)-N3-(1-苯乙基)間苯二甲酰胺二鹽酸鹽。
實(shí)施例2.193-(異丙基((4-甲基噻唑-2-基)甲基)氨甲?；?苯甲酸甲酯 在A(yíng)r下將Et3N(1滴，催化)加入到攪拌的間苯二酸一甲酯(0.294mmol，1.0當(dāng)量)在2mL SOCl2中的混懸液中。于90℃將該混合物加熱回流2小時(shí)。將反應(yīng)物冷卻至室溫，真空除去溶劑。將殘余物置于A(yíng)r氛圍下，溶于2mL無(wú)水CH2Cl2中。在A(yíng)r下將所得溶液用溶于1mL無(wú)水CH2Cl2中的N-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)丙-2-胺(0.294mmol，1.0當(dāng)量，由4-甲基噻唑-2-甲醛與異丙胺的還原性胺化制得)溶液處理。于室溫?cái)嚢?0分鐘后，將反應(yīng)物用ET3N(0.294mmol，1當(dāng)量)處理。于室溫?cái)嚢?0分鐘后，將反應(yīng)物倒入分液漏斗中，用飽和NaHCO3(×1)、水(×3)、鹽水(×1)洗滌，通過(guò)Na2SO4干燥。通過(guò)過(guò)濾除去無(wú)機(jī)物，真空除去溶劑，得到粗產(chǎn)物(產(chǎn)率93％)。
實(shí)施例2.20(3-甲基異唑-5-基)甲基氨基甲酸叔丁酯 將321mg(2.27mmol)2-(3-甲基異唑-5-基)乙酸、0.5mL(2.32mmol)二苯基磷?；B氮化物(DPPA)和0.35mL(2.51mmol)三乙胺在30mL蒸餾叔丁醇中的溶液回流13.5小時(shí)。將該溶液濃縮，將粗殘余物溶于EtOAc中。將有機(jī)層用1N HCl(3×10mL)和飽和NaHCO3溶液(3×10mL)洗滌。將有機(jī)層通過(guò)硫酸鈉干燥，過(guò)濾，濃縮。通過(guò)快速硅膠色譜法(28％EtOAc/己烷)純化，得到50mg(產(chǎn)率10％)淡黃色固態(tài)的(3-甲基異唑-5-基)甲基氨基甲酸叔丁酯。
實(shí)施例2.215-氟間苯二酸 向輕微回流的1.9g(15.3mmol)5-氟-間二甲苯在約13.5mL吡啶和約9.5mL水中的溶液中分?jǐn)?shù)批加入13.8g(87.3mmol)KMnO4。將混合物回流約7小時(shí)后，加入亞硫酸鈉以淬滅過(guò)量的KMnO4。將溫?zé)岬幕旌衔镞^(guò)濾，加入1N HCl至pH＝3。將濾液用EtOAc洗滌，用NaCl飽和，用(80mL CHCl3∶10mL MeOH∶10mL H2O)的混合物的萃取劑萃取3-4次。將合并的萃取液通過(guò)硫酸鈉干燥，過(guò)濾，濃縮，得到約400mg(產(chǎn)率14％)淡黃色固態(tài)的5-氟間苯二酸。
實(shí)施例2.22(5-(芐氧基)吡啶-3-基)甲胺 在A(yíng)r下于60℃將818mg(5.34mmol)5-羥基煙酸、1.70g(12.3mmol)K2CO3和1.0mL(8.41mmol)溴化芐在25mL DMF中的混合物加熱16小時(shí)。將該混合物通過(guò)棉布過(guò)濾，將殘余物溶于CHCl3中。將有機(jī)層用水(2×30mL)、鹽水(30mL)洗滌，通過(guò)Na2SO4干燥，過(guò)濾，濃縮。通過(guò)快速硅膠色譜法純化，得到363mg(產(chǎn)率28％)橙色油狀的5-(芐氧基)煙酸甲酯。
于0℃向攪拌的363mg(1.49mmol) 5-(芐氧基)煙酸甲酯在10mL THF中的溶液中加入141mg(3.71mmol)LiAlH4。移去冰浴，55分鐘后，加入20.5mgLiAlH4。40分鐘后，通過(guò)連續(xù)加入160μL H2O、160μL 15％NaOH水溶液和480μL鹽水淬滅反應(yīng)物。通過(guò)快速硅膠色譜法(2mL MeOH/100mLCHCl3)純化，得到250mg(產(chǎn)率78％)(5-(芐氧基)吡啶-3-基)甲醇(黃色油狀物)。
向攪拌的250mg(1.17mmol)(5-(芐氧基)吡啶-3-基)甲醇在8mL甲苯中的溶液中加入310μL(1.44mmol)DPPA。將該混合物冷卻至0℃，加入210μL(1.44mmol)1，8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]-十一碳-7-烯(DBU)。移去冰浴，在溫?zé)嶂潦覝貢r(shí)繼續(xù)攪拌。約20小時(shí)后，將溶液用EtOAc稀釋?zhuān)尤?N HCl至pH為7至8。將有機(jī)層用水(2×15mL)和鹽水(15mL)洗滌，通過(guò)Na2SO4干燥。過(guò)濾并濃縮后，將粗產(chǎn)物通過(guò)快速硅膠色譜法(56-60％EtOAc/己烷)純化，得到181mg(產(chǎn)率65％)無(wú)色油狀的3-(疊氮基甲基)-5-(芐氧基)吡啶。
于0℃向攪拌的181mg 3-(疊氮基甲基)-5-(芐氧基)吡啶在6mL THF中的溶液中加入80.6mg(2.12mmol)LiAlH4。移去冰浴，在溫?zé)嶂潦覝貢r(shí)繼續(xù)攪拌。30分鐘后，通過(guò)連續(xù)加入160μLH2O、160μL 15％NaOH水溶液和480μL鹽水淬滅反應(yīng)物。將混合物通過(guò)Celite過(guò)濾，濃縮，得到粗(5-(芐氧基)吡啶-3-基)甲胺。粗產(chǎn)物未經(jīng)進(jìn)一步純化使用。
實(shí)施例2.23(5-甲基吡啶-3-基)甲醇 于0℃向攪拌的233mg(1.70mmol)5-甲基煙酸(按照5-氟-間苯二酸的通用方法合成)在30mL THF中的溶液中加入181mg(4.76mmol) LiAlH4。25分鐘后，通過(guò)連續(xù)加入180μL H2O、180μL 15％NaOH水溶液和540μL鹽水淬滅反應(yīng)物。將混合物通過(guò)Celite過(guò)濾，濃縮，得到87mg粗(5-甲基吡啶-3-基)甲醇，其未經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一反應(yīng)。
實(shí)施例2.241，5-雙(氯甲基)-2，4-二甲苯 于90℃將3mL(24.4mmol)間二甲苯、2.6g(28.5mmol)1，3，5-三烷和2.6g(19.0mmol) ZnCl2在100mL 1.0M HCl(在乙酸中)中的溶液加熱。23小時(shí)后，加入水、NaHCO3和EtOAc。分層，將有機(jī)層用水(3-4×)和鹽水洗滌，通過(guò)Na2SO4干燥，過(guò)濾，濃縮。通過(guò)快速硅膠色譜法(己烷至3％EtOAc/己烷)純化，得到2.45g(產(chǎn)率49％)無(wú)色固態(tài)的1，5-雙(氯甲基)-2，4-二甲苯。
實(shí)施例2.25(5-乙基吡啶-3-基)甲醇 于-78℃向攪拌的1.08g(12.0mmol)CuCN在20mL THF中的混合物中加入24mL EtMgBr(1M，在THF中)。攪拌20分鐘后，加入在20mL THF中的387mg 5-(5-溴吡啶-3-基)甲醇，于-78℃繼續(xù)攪拌3小時(shí)。然后使該反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，攪拌約17小時(shí)，加入氫氧化銨。將該混合物攪拌直至顏色變?yōu)槠匪{(lán)，將其放置過(guò)夜。將其用CHCl3(2×)萃取，通過(guò)Na2SO4干燥，過(guò)濾，濃縮。通過(guò)快速硅膠色譜法(2.5％MeOH/CHCl3)純化，得到37mg(產(chǎn)率13％)黃色油狀的(5-乙基吡啶-3-基)甲醇。
實(shí)施例2.265-氟煙酸甲酯 于0℃向攪拌的243mg(1.6mmol)5-氨基煙酸甲酯在5mL HF-吡啶中的溶液中加入119mg(1.72mmol)NaNO2。于0℃將該混合物攪拌30分鐘，于50℃攪拌1小時(shí)。將該反應(yīng)物通過(guò)冰和飽和NaHCO3溶液淬滅。將水層用CHCl3萃取，通過(guò)Na2SO4干燥，過(guò)濾，濃縮。通過(guò)快速硅膠色譜法(1％MeOH/CHCl3)純化，得到139mg(產(chǎn)率56％)黃色固態(tài)的5-氟煙酸甲酯。
實(shí)施例2.272-氯-1-(2，4-二氟-5-甲基苯基)乙酮 于0℃向攪拌的2，4-二氟甲苯溶液中加入6.3g(47.3mmol) AlCl3和3.4mL(42.6mmol)氯乙酰氯。于0℃將該混合物攪拌10分鐘后，然后于45℃攪拌30分鐘。使該混合物溫?zé)嶂潦覝?，加入約16mL濃HCl、25mL水和100mL EtOAc。分離有機(jī)層，用鹽水和飽和NaHCO3(2×)洗滌，通過(guò)Na2SO4干燥。將溶液過(guò)濾，濃縮，得到9.0g無(wú)色固態(tài)的2-氯-1-(2，4-二氟-5-甲基苯基)乙酮，其未經(jīng)進(jìn)一步純化使用。
實(shí)施例2.285-異丙氧基煙酸甲酯 于60℃將677mg(3.28mmol)二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)、0.3mL(3.92mmol)異丙醇和7.7mg(0.078mmol)CuCl的溶液加熱。13小時(shí)后，加入460mg(3.0mmol) 5-羥基煙酸甲酯和10mL苯，于105℃加熱24.5小時(shí)。將該混合物用氯仿稀釋?zhuān)^(guò)濾。將有機(jī)層用15mL飽和NaHCO3、水和鹽水洗滌，通過(guò)Na2SO4干燥。通過(guò)快速硅膠色譜法(100％CHCl3)純化，得到274mg(產(chǎn)率47％)黃色油狀的5-異丙氧基煙酸甲酯。
實(shí)施例2.291-(3-甲基異唑-5-基)乙醇 于0℃歷經(jīng)2小時(shí)45分鐘向攪拌的5.2mL(84.9mmol)乙醛肟、6.7mL(85.5mmol)3-丁炔-2-醇和1.2mL(8.6mmol)Et3N在20mL CH2Cl2中的溶液中加入275mL NaOCl。移去冰浴，于室溫繼續(xù)攪拌18小時(shí)。加入氯仿，分層。將有機(jī)層用CHCl3(2×)和(80mL CHCl3∶10mL H2O∶10mL MeOH)的混合物的萃取劑(2×)萃取。將合并的萃取液通過(guò)Na2SO4干燥，過(guò)濾，濃縮。通過(guò)快速硅膠色譜法(2％MeOH/CHCl3)純化，得到2.2g(產(chǎn)率20％)橙黃色油狀的1-(3-甲基異唑-5-基)乙醇。
實(shí)施例2.30(4-甲氧基吡啶-2-基)甲胺 于室溫向攪拌的1.2g(9.67mmol)4-甲氧基吡啶-N-氧化物在18mLCH2Cl2中的混合物中加入1.6mL(12.0mmol)TMSCN。5分鐘后，加入0.9mL(9.8mmol)二甲基氨甲酰氯。于室溫將該溶液攪拌13小時(shí)，加入CHCl3和20mL 10％K2CO3。將水層用CHCl3萃取3次，將合并的萃取液通過(guò)Na2SO4干燥，過(guò)濾，濃縮。通過(guò)快速硅膠色譜法(38-44％EtOAc/己烷)純化，得到949mg(產(chǎn)率73％)無(wú)色固態(tài)的4-甲氧基吡啶甲腈。
于0℃向攪拌的949mg 4-甲氧基吡啶甲腈在15mL THF中的溶液中加入約0.6g LiAlH4。反應(yīng)變得非常放熱。使該混合物溫?zé)嶂潦覝兀?0分鐘后，連續(xù)加入以下物質(zhì)0.4mL H2O、0.4mL 15％NaOH(水溶液)和1.2mL鹽水。于室溫將該混合物攪拌75分鐘，然后通過(guò)Celite過(guò)濾，濃縮，得到377mg(4-甲氧基吡啶-2-基)甲胺，其未經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一反應(yīng)。
實(shí)施例2.315-(二甲基氨基)煙酸甲酯 向攪拌的283mg(1.86mmol)5-氨基煙酸甲酯在19mL CH3CN和19mL37％甲醛(在H2O中)中的溶液中加入353mg(5.62mmol)NaCNBH3和50滴乙酸。于室溫將該溶液攪拌18.5小時(shí)，加入40mL EtOAc和40mL飽和NaHCO3溶液。分層，將有機(jī)層用25mL飽和NaHCO3和25mL鹽水洗滌，通過(guò)Na2SO4干燥，過(guò)濾，濃縮。通過(guò)快速硅膠色譜法(0.5％MeOH/CHCl3)純化，得到124mg(產(chǎn)率37％)黃色油狀的5-(二甲基氨基)煙酸甲酯。
實(shí)施例2.323-(2，2-二甲基-1-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)肼羰基)苯甲酸甲酯 于室溫向在CH2Cl2中的3-(甲氧基羰基)苯甲酸(253mg，1.40mmol)中加入EDCI(312mg，1.64mmol)和HOBT(189mg，1.40mmol)，于室溫?cái)嚢?0分鐘。向該混合物中加入N，N-二甲基肼，然后加入DIPEA(404mg，14.0mmol)。于室溫將反應(yīng)混合物攪拌16小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物用氯仿稀釋?zhuān)盟?、鹽水洗滌，干燥。將粗殘余物通過(guò)柱色譜法純化，得到3-(2，2-二甲基肼羰基)苯甲酸甲酯(產(chǎn)率60％)。
于0℃向在THF(3mL)中的氫化鈉(16mg，0.68mmol)中加入3-(2，2-二甲基肼羰基)苯甲酸甲酯(100mg，0.45mmol)。10分鐘后，加入4-甲基-2-溴甲基噻唑(103mg，0.54mmol)，于3-4℃將反應(yīng)混合物攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)混合物用MeOH淬滅，用乙酸乙酯稀釋。將有機(jī)層用水、鹽水洗滌，干燥。將粗殘余物通過(guò)柱色譜法純化，得到3-(2，2-二甲基-1-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)肼羰基)苯甲酸甲酯(產(chǎn)率70％)。
實(shí)施例2.333-(氟甲基)芐基氨基甲酸叔丁酯 于-78℃向在CH2Cl2(30mL)中的DAST(600mg，3.72mmol)中緩慢加入醇3-(羥基甲基)芐基氨基甲酸叔丁酯(630mg，2.65mmol)。于-78℃將反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)，于室溫另外攪拌1小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物用甲醇淬滅，然后用碳酸氫鈉淬滅。除去溶劑后，將粗殘余物進(jìn)行柱色譜法，得到3-(氟甲基)芐基氨基甲酸叔丁酯(產(chǎn)率60％)。
實(shí)施例2.34(3-異丙基苯基)甲胺 于0℃向在THF中的溴化甲基三苯基(4.3gm，12mmol)中加入n-BuLi(1.6M，7.5mL，12mmol)，攪拌30分鐘。然后緩慢加入在THF中的3-乙?；S腈，于0℃將該反應(yīng)混合物另外攪拌3小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物用氯化銨水溶液淬滅，用乙酸乙酯稀釋。將有機(jī)層用水、鹽水洗滌，干燥。將粗殘余物進(jìn)行柱純化后，得到3-(丙-1-烯-2-基)芐腈(產(chǎn)率86％)。
向在乙酸乙酯(30mL)中的3-(丙-1-烯-2-基)芐腈(1.2gm，8.3mmol)中加入10％Pd/C(120mg)，在氫氣氛圍下攪拌16小時(shí)。然后將該反應(yīng)混合物過(guò)濾，蒸發(fā)溶劑，得到定量產(chǎn)率的3-異丙基芐腈。
于0℃向在THF中的3-異丙基芐腈中緩慢加入LAH(1.74gm，45.7mmol)，使該反應(yīng)混合物達(dá)到室溫，于室溫?cái)嚢?8小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，用乙醚稀釋?zhuān)蔑柡土蛩徕c溶液淬滅。將殘余物過(guò)濾，蒸發(fā)溶劑，得到定量產(chǎn)率的胺(3-異丙基苯基)甲胺。
實(shí)施例2.353-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙烷-1-胺 于0℃向在THF(60mL)中的3-甲氧基-4-甲基苯甲酸甲酯(3gm，16.6mmol)中緩慢加入LAH(3gm，66.6mmol)。于0℃另外攪拌30分鐘后，將反應(yīng)混合物如上所述進(jìn)行處理，得到定量產(chǎn)率的醇(3-甲氧基-4-甲基苯基)甲醇。
于0℃將Dess-Martin過(guò)碘烷(periodinane)(3gm，7.07mmol)加入到在CH2Cl2(35mL)中的(3-甲氧基-4-甲基苯基)甲醇(1gm，6.57mmol)中。于0℃攪拌0.5小時(shí)后，除去一些CH2Cl2，將反應(yīng)混合物用乙醚稀釋?zhuān)锰妓釟溻c溶液、硫代硫酸鈉溶液和水洗滌。將有機(jī)層干燥，蒸發(fā)，得到定量產(chǎn)率的3-甲氧基-4-甲基苯甲醛。
使3-甲氧基-4-甲基苯甲醛與氰甲基三苯基正膦進(jìn)行Wittig反應(yīng)，得到3-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙烯腈(產(chǎn)率77％)，使用上述方法將其進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為3-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙烷-1-胺。
實(shí)施例2.364-(3-乙炔基芐氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基氨基甲酸叔丁酯 向在三乙胺(3mL)中的3-溴芐基氨基甲酸叔丁酯(220mg，1mmol)中加入三甲基甲硅烷基乙炔(147mg，1.5mmol)，然后加入碘化亞銅(8mg，0.04mmol)。攪拌5分鐘后，加入二氯雙(三苯膦)鈀(II)(35mg，0.05mmol)，于90℃將該反應(yīng)混合物加熱18小時(shí)。然后將該反應(yīng)混合物過(guò)濾，用乙酸乙酯稀釋?zhuān)盟礈?。將有機(jī)層干燥，蒸發(fā)，將粗殘余物通過(guò)柱色譜法純化，得到3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)芐基氨基甲酸叔丁酯(產(chǎn)率67％)。
將Boc-基團(tuán)從3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)芐基氨基甲酸叔丁酯中除去，所得胺用于打開(kāi)環(huán)氧化物(S)-1-((S)-環(huán)氧乙烷-2-基)-2-苯乙基氨基甲酸叔丁酯，得到3-羥基-1-苯基-4-(3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)芐氨基)丁-2-基氨基甲酸叔丁酯(產(chǎn)率60％)。
向在THF(2mL)和MeOH(2mL)的混合物中的3-羥基-1-苯基-4-(3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)芐氨基)丁-2-基氨基甲酸叔丁酯中加入1M K2CO3(0.25mL)，于室溫將該反應(yīng)混合物攪拌18小時(shí)。然后除去溶劑，將粗殘余物重新溶于乙酸乙酯中，用水、鹽水洗滌，干燥。進(jìn)行柱純化，得到4-(3-乙炔基芐氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基氨基甲酸叔丁酯(產(chǎn)率85％)。
實(shí)施例2.375-(甲磺酰基甲基)間苯二酸二乙酯 于0℃向在THF(30mL)中的5-(羥基甲基)間苯二酸二乙酯(2.52gm，10mmol)中加入三苯基膦(5.25gm，20mmol)，然后加入硫羥乳酸(1.52gm，20mmol)和偶氮二甲酸二異丙酯(4.04gm，20mmol)。然后使反應(yīng)混合物達(dá)到室溫，攪拌2小時(shí)。然后除去溶劑，將粗品重新溶于最少量的CH2Cl2中。在攪拌下加入己烷，棄去所得固體。將濾液蒸發(fā)至干，將殘余物進(jìn)行柱純化，得到5-(乙?；蚣谆?間苯二酸二乙酯(產(chǎn)率95％)。
向在THF(10mL)和MeOH(10mL)中的5-(乙?；蚣谆?間苯二酸二乙酯(1.02gm，3.30mmol)中加入甲醇鈉(207mg，3.63mmol)，于室溫?cái)嚢?小時(shí)。然后分兩批加入甲基碘(0.69mL，10.9mmol)。于室溫?cái)嚢?小時(shí)后，真空除去THF和MeOH，將該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋。將有機(jī)層用水、鹽水洗滌，干燥。將粗殘余物進(jìn)行柱純化，得到5-(甲基硫甲基)間苯二酸二乙酯(產(chǎn)率55％)。
于0℃將m-CPBA(990mg，4.43mmol)加入到在CH2Cl2(10mL)中的S-甲基化合物(500mg，1.77mmol)中。攪拌15分鐘后，使反應(yīng)混合物達(dá)到室溫，攪拌20小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物用CH2Cl2稀釋?zhuān)锰妓釟溻c溶液洗滌。將粗殘余物進(jìn)行柱純化，得到5-(甲磺?；谆?間苯二酸二乙酯(產(chǎn)率73％)。
實(shí)施例3memapsin 2催化活性的抑制 通過(guò)測(cè)定化合物抑制memapsin 2對(duì)熒光底物的催化活性測(cè)定了它們的效能。使用如Ermolieff等人(Biochemistry 3912450-12456(2000)，該文獻(xiàn)的教導(dǎo)整體引入本文)所述的方法進(jìn)行了動(dòng)力學(xué)抑制實(shí)驗(yàn)。簡(jiǎn)言之，在pH4、37℃下通過(guò)將memapsin 2酶與化合物預(yù)孵育20分鐘進(jìn)行了試驗(yàn)。通過(guò)加入熒光底物FS-2(Bachem Americas，托蘭斯，CA)開(kāi)始活性測(cè)定。熒光信號(hào)隨時(shí)間增加作為肽底物的水解速率而被測(cè)定。水解速率的抑制相對(duì)于未抑制的對(duì)照而言被表達(dá)并且擬合為緊密結(jié)合的抑制劑的模型(J.Bieth，“蛋白酶抑制劑，”Bayer專(zhuān)題討論會(huì)V，463-469，1974)。結(jié)果示于下表1。
表1 在表1中，對(duì)于Ki數(shù)據(jù)，“+”表示Ki大于501nM，“++”表示Ki為500nm至301nm，“+++”表示Ki小于300nm。對(duì)于IC50數(shù)據(jù)，“+”表示IC50大于5μM，“++”表示IC50為1至5μM，“+++”表示IC50小于1μM。在上表1中，出現(xiàn)一次以上的化合物名稱(chēng)包括供選的立體化學(xué)構(gòu)型。
實(shí)施例4鑒定數(shù)據(jù) N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((4-甲基噻唑-2-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.56(d，3H)，2.36(d，3H)，2.85(s，3H)，2.78-3.00(m，4H)，3.30(s，3H)，3.68-3.78(m，1H)，4.01(s，2H)，4.30-4.40(m，1H)，5.20-5.35(m，1H)，6.80(d，1H)，7.10-7.40(m，10H)，7.79-7.82(m，1H)，7.90-7.92(m，1H)，8.01-8.05(m，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-(4-甲基噻唑-2-基)乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.68(d，3H)，2.41(d，3H)，2.85(s，3H)，2.70-3.02(m，4H)，3.31(s，3H)，3.75(s，3H)，3.70-3.83(m，2H)，4.30-4.40(m，1H)，5.50-5.60(m，1H)，6.72-6.90(m，3H)，7.10-7.30(m，7H)，7.79-7.82(m，1H)，7.90-7.92(m，1H)，8.05-8.10(m，1H). N1-((2S，3R)-4-(芐氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.56(d，3H)，2.82(s，3H)，2.68-3.02(m，4H)，3.27(s，3H)，3.70-3.85(m，3H)，4.25-4.35(m，1H)，5.20-5.30(m，1H)，7.10-7.40(m，15H)，7.75-7.77(m，1H)，7.86-7.90(m，1H)，8.01-8.03(m，1H). N1-芐基-N3-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)2.84(s，3H)，2.70-3.02(m，4H)，3.30(s，3H)，3.74(s，3H)，3.70-3.83(m，3H)，4.30-4.42(m，1H)，4.58(s，2H)，6.74-6.88(m，2H)，7.10-7.38(m，12H)，7.74-7.78(m，H)，7.90-7.94(m，1H)，8.05-8.10(m，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-硝基-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H MR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.59(d，3H)，2.70-3.02(m，4H)，3.73(s，3H)，3.70-3.85(m，3H)，4.28-4.39(m，1H)，5.20-5.35(m，1H)，6.72-6.88(m，2H)，7.10-7.40(m，12H)，8.42-8.44(m，1H)，8.55-8.57(m，1H)，8.74-8.77(m，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-1-苯基-4-(吡嗪-2-基甲基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.58(d，3H)，2.80(s，3H)，2.70-3.02(m，4H)，3.29(s，3H)，3.60-3.72(m，1H)，3.85-4.01(m，2H)，4.34-4.48(m，1H)，5.25-5.40(m，1H)，7.12-7.40(m，10H)，7.76-7.80(m，1H)，7.93-7.97(m，1H)，8.03-8.07(m，1H)，8.40-8.42(m，1H)，8.46-8.48(m，1H)，8.59-8.61(m，1H).熔點(diǎn)75-80℃ N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(500MHz，CDCl3)δ1.58(3H，d，J＝7.0Hz)，2.72(3H，s)，2.74-2.83(4H，m)，3.22(3H，s)，3.69-3.83(6H，m)，4.29-4.33(1H，m)，5.26(1H，m)，6.78(1H，m)，6.85-6.86(2H，m)，7.13-7.37(12H，m)，7.76(1H，s)，7.89(2H，s)，8.11(1H，s)；mp 77-80℃. N1-((2S，3R)-4-((1H-苯并[d]咪唑-2-基)甲基氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.56(d，3H)，2.81(s，3H)，2.68-2.94(m，4H)，3.24(s，3H)，3.70-3.77(m，1H)，3.90-4.01(m，2H)，4.30-4.40(m，1H)，5.20-5.30(m，1H)，7.05-7.50(m，15H)，7.75-7.77(m，1H)，7.86-7.89(m，1H)，8.03-8.06 (m，1H). N1-((2S，3R)-4-((2，5-二甲基唑-4-基)甲基氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.48(d，3H)，2.14(s，3H)，2.24(s，3H)，2.58-2.82(m，4H)，2.78(s，3H)，3.23(s，3H)，3.36(s，2H)，3.60-3.70(m，1H)，4.25-4.32(m，1H)，5.18-5.32(m，1H)，7.05-7.32(m，10H)，7.77-7.81(m，1H)，7.90-7.94(m，1H)，8.06-8.09(m，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((S)-1-(4-甲基噻唑-2-基)乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.45(d，3H)，1.55(d，3H，J＝6.9Hz)2.37(d，3H)，2.74-2.84(m，2H)，2.81(s，3H)，2.95(d，2H)，3.30(s，3H)，3.58-3.65(m，1H)，4.00-4.12(m，1H)，4.30-4.42(m，1H)，5.22-5.34(m，1H)，6.79(d，1H)7.10-7.32(m，10H)，7.74-7.78(m，1H)，7.94-7.96(m，1H)，8.02-8.05(m，1H).熔點(diǎn)80-87℃ N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((R)-1-(4-甲基噻唑-2-基)乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.43(d，3H)，1.54(d，3H)2.33(d，3H)，2.62-2.84(m，2H)，2.84(s，3H)，2.87(d，2H)，3.27(s，3H)，3.65-3.75(m，1H)，4.00-4.12(m，1H)，4.28-4.48(m，1H)，5.18-5.32(m，1H)，6.76(d，1H)7.05-7.35(m，10H)，7.78-7.81(m，1H)，7.87-7.90(m，1H)，8.02-8.05(m，1H).熔點(diǎn)85-90℃ N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((S)-1-(4-甲基噻唑-2-基)乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.61(d，3H)，2.34(s，3H)，2.68-2.88(m，4H)，2.77(s，3H)，3.23(s，3H)，3.62-3.82(m，3H)，3.70(s，3H)，4.27-4.38(m，1H)，5.40-5.51(m，1H)，6.70-6.87(m，4H)，7.05-7.50(m，5H)，7.71-7.74(m，1H)，7.86-7.89(m，1H)，7.98-8.03(m，1H).熔點(diǎn)57-61℃ 5-(N-乙基甲磺酰氨基)-N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.06(t，3H)，1.58(d，3H)，2.68-3.02(m，4H)，2.87(s，3H)，3.62-3.84(m，3H)，3.75(s，3H)，4.25-4.36(m，1H)，5.20-5.33(m，1H)，6.73-6.90(m，4H)，7.07-7.42(m，10H)，7.66-7.72(m，1H)，7.83-7.87(m，1H)，8.02-8.06(m，1H).熔點(diǎn)110-116℃ N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基苯乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NHMR(300MHz，CDCl3)1.60(d，3H，J＝7.2 Hz)，2.75(s，3H)，2.77-3.07(m，8H)，3.24(s，3H)，3.74(s，3H)，3.81-3.90(m，1H)，4.28-4.40(m，1H)，5.24-5.76(m，1H)，6.72-6.75(m，3H)，7.12-7.37(m，11H)，7.80-7.91(m，3H)，8.15(s，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)0.80-0.88(m，4H)，2.45(s，3H)，2.80-2.86(m，2H)，2.92-3.02(m，2H)，3.69-3.86 (m，6H)，4.36-4.44(m，1H)，4.96-5.12(m，2H)，6.79-6.99(m，4H)，7.15-7.26(m，8H)，7.64-7.67(m，1H)，7.82(s，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)1.64(d，3H，J＝7.2Hz)，2.33(s，3H)，2.79-3.33(m，7H)，3.29(s，3H)，3.82-3.91(m，3H)，4.24-4.41(m，1H)，5.29-5.42(m，1H)，6.93-7.43(m，14H)，7.83(s，1H)，7.94(s，1H)，8.13(s，1H). N1-((2S，3R)-4-(3-氟芐氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)2.40(s，3H)，2.76-2.81(m，2H)，2.92-3.05(m，5H)，3.71-3.78(m，3H)，4.26-4.42(m，1H)，4.86-4.96(m，2H)，6.88-7.66(m，14H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((S)-1-(4-甲基噻唑-2-基)乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)2.25(s，3H)，2.38(s，3H)，2.65-2.81(m，2H)，2.92-3.13(m，5H)，3.64-3.88(m，3H)，4.22-4.39(m，1H)，4.89(s，2H)，6.82-7.59(m，14H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((3-甲基異唑-5-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.73-7.82(m，1H)，7.64-7.66(m，1H)，7.46-7.59(m，1H)，7.37-7.42(m，1H)，7.16-7.29(m，6H)，7.08-7.11(m，1H)，6.90-6.92(m，2H)，6.80-6.83(m，1H)，6.00-6.14(m，1H)，4.77(m，1.5H)，4.33-4.47(m，1.5H) 3.71-3.89(m，6H)，3.00-3.08(m，5H)，2.81-2.90(m，2H)，2.47(s，1H)，2.30(s，3H)；m.p.46-56℃. N1-((2S，3R)-3-羥基-1-苯基-4-(吡啶-2-基甲基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.50-8.51(m，1H)，8.20(s，1H)，8.10-8.13(m，1H)，8.02(s，1H)，7.88(s，1H)，7.65-7.71(m，1H)，7.15-7.31(m，14H)，5.28-5.38(m，1H)，4.39-4.48(m，1H)，3.64-3.84(m，4H)，3.30(s，3H)，2.81-2.95(m，5H)，2.63-2.69(m，1H)，2.28(s，1H)，1.53(d，3H)；m.p.53-67℃. N1-((2S，3R)-3-羥基-1-苯基-4-(吡啶-4-基甲基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.49-8.51(m，2H)，7.93(s，1H)，7.89(s，1H)，7.75(s，1H)，7.09-7.41(m，13H)，6.87-6.97(m，1H)，5.27-5.36(m，1H)，4.31-4.40(m，1H)，3.75-3.91(m，2H)，3.62-3.70(m，2H)，3.31(d，3H)，2.96-2.98(m，2H)，2.81(s，3H)，2.74-2.76(m，2H)，2.02(s，1H)，1.62(d，3H)；m.p.73-84℃. N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((3-甲基異唑-5-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.05(s，1H)，7.97(s，1H)，7.78(s，1H)，7.20-7.40(m，10H)，7.08-7.18(m，1H)，6.97-7.08(m，1H)，5.98(s，1H)，5.26-5.41(m，1H)，4.33-4.43(m，1H)，3.82-4.01(m，2H)3.61-3.65(m，2H)，3.33(s，3H)，2.99-3.02(m，2H)，2.83(s，3H)，2.75-2.76(m，2H)，2.21(s，3H)，1.70(s，1H)，1.62(d，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-((5-羥基吡啶-3-基)甲基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.15(s，1H)，7.81-7.98 (m，3H)，7.72(s，1H)，7.06-7.27(m，9H)，6.86-6.89(m，2H)，6.79-6.81(m，1H)，4.34-4.46(m，2H)，4.22-4.34(m，2H)，3.95-4.03(m，1H)，3.88-3.91(m，2H)，3.60-3.80(m，4H)，3.21(s，3H)，2.77-2.98(m，7H)，2.27(s，1H)；m.p.100-113.5℃. 4-或6-氟-N3-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N1-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.25-8.29(m，1H)，7.78-7.85(m，1H)，6.89-7.37(m，17H)，6.66-6.82(m，1H)，5.28-5.37(m，2H)，4.32-4.44(m，1H)，3.76-3.92(m，5H)，2.95-3.06(m，2H)，2.77-2.95(m，2H)，2.17(s，1H)，1.60(d，3H). 6-或4-氟-N3-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N1-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.14-8.16 (m，1H)，7.90-7.98(m，1H)，7.00-7.32(m，13H)，6.75-6.90(m，2H)，6.64-6.74(m，2H)，5.18-5.29(m，2H)，4.26-4.42(m，1H)，3.56-3.88(m，6H)，2.89-3.08(m，2H)，2.65-2.89(m，2H)，2.23(s，1H)，1.53-1.55(d，3H)；m.p.55-67℃. N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((5-甲基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.46(s，1H)，8.33-8.36(m 1H)，8.19(s，1H)，8.13(s，1H)，8.04-8.07(m，1H)，7.95-7.97(m，1H)，7.69-7.72(m，1H)，7.1 5-7.44(m，11H)，6.89-6.95(m，1H)，5.30-5.44(m，1H)，4.32-4.41(m，1H)，3.99-4.04(m，1H)，3.57-3.83(m，2H)，3.31(s，3H)，2.94-3.09(m，2H)，2.81(s，3H)，2.61-2.62(m，2H)，2.27(s，3H)，2.03(s，1H)，1.65(d，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-4-或6-甲基-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.61-7.63(m，1H)，7.14-7.42(m，15H)，6.88-6.95(m，2H)，6.81-6.85(m，1H)，6.16-6.29(m，1H)，5.28-5.36(m，1H)，4.30-4.43(m，1H)，3.72-3.93(m，5H)，3.02-3.04(m，2H)，2.75-2.95(m，3H)，2.42(s，3H)，1.74(s，1H)，1.60(d，3H)；m.p.64-77℃. N3-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-6-或4-甲基-N1-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.66-7.91(m，1H)，7.49(s，1H)，7.08-7.40(m，13H)，6.87-6.90(m，2H)，6.77-6.83(m，1H)，6.57(s，1H)，6.32(s，1H)，5.25-5.37(m，1H)，4.30-4.43(m，1H)，3.65-3.90(m，5H)，2.95-3.16(m，2H)，2.72-2.95(m，3H)，2.13(s，3H)，2.02(s，1H)，1.60(d，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((5-甲氧基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.25(s，1H)，8.09(s，1H)，7.98(s，1H)，7.76-7.82(m，1H)，7.72(s，1H)，7.16-7.44(m，14H)，6.77-6.86(m，1H)，5.30-5.45(m，1H)，4.30-4.42(m，1H)，4.00-4.12(m，1H)，3.73-3.87(m，2H)，3.55-3.73(m，2H)，3.33(s，3H)，2.98-3.03(m，2H)，2.82(s，3H)，2.60-2.69(m，2H)，1.70(s，1H)，1.66(d，3H). 4-或6-氟-N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.06(s，1H)，7.61(s，1H)，7.05-7.28(m，10H)，6.85-7.05(m，2H)，6.78-6.81(m，1H)，4.89-5.02(m，2H)，4.36-4.52(m，1H)，3.69-3.87(m，5H)，3.59-3.69(m，1H)，2.96-3.16(m，5H)，2.72-2.84(m，2H)，2.44(s，3H)，2.04(s，1H). 6-或4-氟-N3-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N1-甲基-N1-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.61-7.81(m，2H)，7.03-7.45(m，10H)，6.87-6.98(m，2H)，6.77-6.87(m，1H)，4.99(s，2H)，4.32-4.46(m，1H)，3.77-3.98(m，5H)，3.62-3.70(m，1H)，2.96-3.04(m，5H)，2.76-2.93(m，2H)，2.46(s，3H)，1.68(s，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((6-甲基吡啶-2-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 8.28(s，1H)，8.01(m，1H)，7.87(m，1H)，7.52-7.57(m，1H)，7.11-7.29(m，10H)，7.00-7.05 (m，2H)，5.28-5.35(m，1H)，4.40-4.46(m，1H)，3.69-3.75(m，3H)，3.27(s，3H)，2.81-2.93(m，2H)，2.78(s，3H)，2.51-2.69(m，2H)，2.42(s，3H)，1.51(d，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(2-甲基-2-苯基肼基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 7.88-7.90(m，1H)，7.84-7.85(m，1H)，7.68-7.69(m，1H)，7.16-7.37(m，12H)，6.76-6.86(m，3H)，5.22-5.28(m，1H)，4.37-4.42(m，1H)，4.11-4.14(m，1H)，3.41-3.43(m，2H)，3.27(s，3H)，3.00-3.14(m，2H)，2.96(s，3H)，2.83(s，3H)，1.60(d，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(2-羥基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 8.01(s，1H)，7.88(s，1H)，7.72(s，1H)，7.12-7.38(m，11H)，6.97-7.01(m，1H)，6.77-6.81(m，2H)，5.24-5.29(m，1H)，4.30(m，1H)，3.86-4.02(m，3H)，3.23(s，3H)，2.83-2.92(m，4H)，2.78(s，3H)，1.60(d，3H). N1-((2S，3R)-4-(3-乙酰氨基芐氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 8.27(s，1H)，7.90(s，1H)，7.80(s，1H)，7.50(s，1H)，7.38-7.41(m，3H)，7.11-7.26(m，10H)，5.25-5.30(m，1H)，4.26(m，1H)，3.84(m，1H)，3.64-3.76(m，2H)，3.19(s，3H)，2.75-2.85(m，4H)，2.73(s，3H)，1.98(s，3H)，1.60(d，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((6-甲基吡啶-2-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 7.67-7.70(m，1H)，7.51-7.56(m，2H)，7.35-7.40(m，1H)，7.16-7.25(m，6H)，7.02-7.06(m，2H)，6.88(s，1H)，4.95(s，2H)，4.43-4.48(m，1H)，3.94-4.01(m，2H)，3.79-3.82(m，1H)，2.92-3.10(m，7H)，2.50(s，3H)，2.44(s，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-(甲氧基甲基)芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 8.06(s，1H)，7.91-7.93(m，1H)，7.78-7.79(m，1H)，7.15-7.38(m，14H)，5.26-5.31(m，1H)，4.40(s，2H)，4.31-4.36(m，1H)，3.68-3.88(m，3H)，3.34(s，3H)，3.27(s，3H)，2.86-2.89(m，2H)，2.79-2.81(m，2H)，2.77(s，3H)，1.59(d，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-(甲基氨基)芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲基磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 8.31(s，1H)，7.91(s，1H)，7.83(s，1H)，7.37-7.44(m，2H)，7.07-7.25(m，9H)，6.57-6.60(m，2H)，6.47-6.49(m，1H)，5.26-5.31(m，1H)，4.29-4.33(m，1H)，3.95-4.00(m，1H)，3.75-3.89(m，2H)，3.22(s，3H)，2.78-2.82(m，4H)，2.73(s，3H)，2.72(s，3H)，1.64(d，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(4-羥基-3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 8.09-8.10(m，1H)，7.84-7.86(m，1H)，7.73-7.74(m，1H)，7.35-7.39(m，2H)，7.09-7.29(m，8H)，6.88(s，1H)，6.72(s，2H)，5.20-5.24(m，1H)，4.16-4.21(m，1H)，3.79-3.93(m，3H)，3.75(s，3H)，3.25(s，3H)，3.09-3.15(m，1H)，2.79-2.93(m，3H)，2.81(s，3H)，1.57(d，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)2.44(s，3H)，2.80(d，2H)，2.98(d，3H)，2.95-3.14(m，2H)，3.77(s，3H)，3.64-3.86(m，3H)，4.33-4.45(m，1H)，4.63(bs，0.6H)，4.95(bs，1.4H)，6.76-6.92(m，4H)，7.13-7.29(m，7H)，7.33-7.40(m，1H)，7.50-7.84(m，3H). N1-(1-(4-氟苯基)乙基)-N3-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.53(d，3H)，2.77(2s，3Htotal)，2.80-2.91(m，3H)，3.24(2s，3H total)，3.74(2s，3H total)，3.64-3.86(m，3H)，4.27-4.40(m，1H)，5.17-5.29(m，2H)，6.73-6.81(m，1H)，6.82-6.88(m，2H)，6.90-7.02(m，2H)，7.12-8.36(m，9H)，7.72-7.78(m，1H)，7.87-7.96(m，2H)，8.01-8.07(m，1H). N1-((2S，3R)-4-(3-氟芐氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.57(d，3H)，2.77(s，3H)，2，72-2.80(m，2H)，2.86-2.93(m，2H)，3.25(s，3H)，3.64-3.72(m，1H)，3.72-3.89(m，2H)，4.29-4.40(m，1H)，5.22-5.33(m，1H)，6.88-7.08(m，4H)，7.12-7.38(m，11H)，7.64(d，1H)，7.74-7.77(m，1H)，7.88-7.92(m，1H)，7.99-8.02(m，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-1-苯基-4-((S)-1-苯基乙基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 m.p.103-108℃.1HNMR(300MHz，CDCl3帶有少量的CD3OD)，δ7.939(s，1H)，7.791(s，1H)，7.631(s，1H)，6.985-7.296(m，15H)，5.142(m，1H)，4.055(m，1H)，3.788(m，1 H)，3.674(m，1H)，3.176(s，3H)，2.969(m，1H)，2.785(s，3H)，2.785(m，1H)，2.567(m，2H)，1.488(d，3H)，1.371(d，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-1-苯基-4-((S)-1-苯基乙基氨基)丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 m.p.46-51℃.1H NMR(300MHz，CDCl3帶有少量的CD3OD)，δ7.485(m，2H)，7.374(m，1H)，7.292(m，1H)，6.935-7.123(m，10H)，6.803(s，3H)，4.782(s，1.3H)，4.496(s，0.7H)，4.180(m，1H)，3.611(m，1H)，3.530(m，1H)，2.893-2.945(m，1H)，2.834(s 3H)，2.653(m，1H)，2.470(m，2H)，2.273(s，3H)，1.249(m，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-1-苯基-4-((R)-1-苯基乙基氨基)丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)，δ7.729(m，2H)，7.516(m，1H)，7.402(m1H)，7.327-7.110(m，10H)，6.861(s，1H)，4.938(br，1.2H)，4.634(br，0.8H)，4.360(m，1H)，3.752-3.635(m，2H)，2.980(s 3H)，2.894-2.557(m，4H)，2.424(s，3H)，1.400(d，J＝6.6Hz，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-1-苯基-4-((S)-1-苯基丙基氨基)丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 m.p.50-55℃.1H NMR(300MHz，CDCl3帶有少量的CD3OD)，δ7.304-7.561(m，4H)，6.998-7.208(m，10H)，6.838(s，1H)，4.836(m，2H)，4.154(m，1H)，3.551(m，1H)，3.367(m，1H)，2.876-2.998(m，1H)，2.876(s，3H)，2.730(m，1H)，2.493(m，1H)，2.328(s 3H)，1.660-1.775(m，1H)，1.536-1.633(m，1H)，0.675(t，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-1-苯基-4-((S)-1-苯基丙基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 m.p.74-77℃.1H NMR(300MHz，CDCl3帶有少量的CD3OD)，δ7.916(m，1H)，7.826(m，1H)，7.660(m，1H)，7.050-7.334(m，15H)，5.201(m，1H)，4.214(m，1H)，3.598(m，1H)，3.411(m，1H)，3.229(s，3H)，3.938(m，1H)，2.805-2.728(m，1H)，2.805(s 3H)，2.527(m，1H)，1.699-1.835(m，1H)，1.575-1.672(m，1H)，1.523(d，3H)，0.710(t，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基丙基)間苯二甲酰胺 m.p.92-94℃.1H NMR(300MHz，CDCl3帶有少量的CD3OD)，δ7.969(m，1H)，7.814(m，1H)，7.693(m，1H)，7.026-7.307(m，11H)，6.697-6.815(m，3H)，4.913(m，1H)，4.212(m，1H)，3.625-3.787(m，3H)，3.680(s，3H)，3.217(s，3H)，2.993(m，1H)，2.650-2.816(m，3H)，2.791(s，3H)，1.807-1.912(m，2H)，0.891(t，3H). N1-((2S，3R)-4-((R)-1-(4-氟苯基)乙基氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 m.p.102-109℃.1H NMR(300MHz，CDCl3帶有少量的CD3OD)，δ7.979(m，1H)，7.850(m，1H)，7.718(m，1H)，7.038-7.348(m，12H)，6.889-6.947(m，2H)，5.245(m，1H)，4.177-4.245(m，1H)，3.646-3.748(m，2H)，3.259(s，3H)，2.830(s，3H)，2.700-3.013(m，2H)，2.431-2.648(m，2H)，1.546(d，3H)，1.357(d，3H). N1-((2S，3R)-4-((S)-1-(4-氟苯基)乙基氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 m.p.95-97℃.1HNMR(300MHz，CDCl3帶有少量的CD3OD)，δ7.956(m，1H)，7.850(m，1H)，7.696 (m，1H)，7.066-7.362(m，12H)，6.900-6.957(m，2H)，5.233(m，1H)，4.194-4.261(m，1H)，3.625-3.768(m，2H)，3.261(s，3H)，2.950-3.013(m，1H)，2.771-2.849(m，1H)，2.830(s，3H)，2.497-2.634(m，2H)，1.553(d，3H)，1.352(d，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-1-苯基-4-((R)-1-苯基乙基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 m.p.95-99℃.1H NMR(300MHz，CDCl3帶有少量的CD3OD)，δ8.013(m，1H)，7.873(m，1H)，7.754(m，1H)，7.078-7.363(m，15H)，5.245(m，1H)，4.250(m，1H)，3.651-3.737(m，2H)，3.269(s，3H)，2.712-2.883(m，2H)，2.488-2.683(m，2H)，2.834(s，3H)，1.560(d，3H)，1.378(d，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-1-苯基-4-((S)-1-(吡啶-3-基)乙基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 m.p.67-85℃.1HNMR(300MHz，CDCl3帶有少量的CD3OD)，δ8.323-8.493(m，2H)，8.031(m，1H)，7.945(s，1H)，7.845-7.881(m，1H)，7.606-7.700(m，1H)，7.064-7.363(m，10H)，5.241(m，1H)，4.232(m，1H)，3.790(m，1H)，3.636(m，1H)，3.263(s，3H)，2.946-3.028(m，1H)，2.769-2.867(m，1H)，2.834(s，3H)，2.587-2.650(m，1H)，2.467-2.520(m，1H)，1.555(d，J＝7.2Hz，3H)，1.379(d，J＝5.3Hz，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-1-苯基-4-((R)-1-(吡啶-3-基)乙基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3帶有少量的CD3OD)，δ8.518(s，1H)，8.355-8.334(m，2H)，8.065(s，1H)，7.890(m，1H)，7.678-7.613(m，2H)，7.378-7.104(m，10H)，5.305-5.240(m，1H)，4.279-4.209(m，1H)，3.773-3.706(m，1H)，3.648-3.596(m，1H)，3.281(s，3H)，3.027-2.745(m，2H)，2.843(s，3H)，2.613-2.560(m，1H)，2.472-2.413(m，1H)，1.587(d，3H)，1.427(d，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-(1-(吡啶-3-基)乙基)間苯二甲酰胺 m.p.84-89℃.1H NMR(300MHz，CDCl3帶有少量的CD3OD)，δ8.654(s，1H)，8.400-8.249(m，3H)，7.969(d，1H)，7.838-7.735(m，2H)，7.397(m，1H)，7.294-7.087(m，6H)，6.903-6.801(m，3H)，5.297(m，1H)，4.264(m，1H)，3.971-3.857 (m，3H)，3.725(s，3H)，3.132-2.836(m，4H)，1.654-1.598(m，3H). 1-((2S，3R)-3-羥基-4-(1-(3-甲氧基苯基)乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-(1-(3-甲氧基苯基)乙基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ8.031(m，1H)，7.933(m，1H)，7.786(m，1H)，7.287-7.117(m，6H)，6.984-6.706(m，7H)，5.257(m，1H)，4.361(m，1H)，3.767(m，6H)，3.608-3.725(m，2H)，3.299(s，3H)，3.2.924(m，1H)，2.842(m，1H)，2.805(m，3H)，2.717-2.567(m，2H)，1.613-1.574(m，3H)，1.442-1.406(m，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((R)-1-(3-甲氧基苯基)乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ8.025-7.919(m，2H)，7.809-7.765 (m，1H)，7.391-7.117(m，11H)，6.942-6.754 (m，3H)，5.359-5.249(m，1H)，4.419-4.301(m，1H)，3.744-3.576(m，2H)，3.762(d，3H)，3.298(s，3H)，2.804(s，3H)，2.936-2.565(m，4H)，1.613(d，1.5H)，1.604(d，1.5H)，1.427-1.393(m，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((S)-1-(3-甲氧基苯基)乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 m.p.76-82℃.1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ8.026-7.922(m，2H)，7.812-7.770(m，1H)，7.401-7.120(m，11H)，6.933-6.756(m，3H)，5.363-5.252(m，1H)，4.420-4.302(m，1H)，3.761-3.581(m，2H)，3.764(d，3H)，3.303(s，3H)，2.806(s，3H)，2.938-2.564(m，4H)，1.629-1.598(m，3H)，1.434-1.401(m，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-((S)-1-(3-甲氧基苯基)乙基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ8.007(m，1H)，7.913(m，1H)，7.780(m，1H)，7.275-7.126(m，6H)，6.972-6.742(m，7H)，5.297-5.195(m，1H)，4.405-4.320(m，1H)，3.951-3.672(m，3H)，3.772(s，3 H)，3.753(s，3H)，3.277(s，3H)，2.920-2.882(m，2H)，2.791(s，5H)，1.580-1.558(m，3H). N1-((2S，3R)-4-(3，5-二氟芐氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ8.007(s，1H)，7.945(m，1H)，7.800(m，1H)，7.408-7.141(m，9H)，6.909-6.837(m，2H)，6.748-6.638(m，2H)，5.350-5.256(m，1H)，4.415-4.321(m，1H)，3.832(q，J＝14.1；37.2Hz，2H)，3.704-3.653(m，1H)，3.326(s，3H)，2.990(d，2H)，2.818(s，3H)，2.764-2.728(m，2H)，1.621(d，3H). N1-((2S，3R)-4-((R或S)-1-(3-氟苯基)乙基氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ8.021-7.924(m，2H)，7.806-7.773(m，1H)，7.400-7.145(m，10H)，7.101-6.861(m，3H)，6.790(m，1H)，5.355-5.248(m，1H)，4.407-4.302(m，1H)，3.797-3.682(m，1H)，3.630-3.554(m，1H)，3.310(d，3H)，2.960-2.857(m，2H)，2.813(s，3H)，2.707-2.581(m，2H)，1.627-1.597(m，3H)，1.420-1.386(m，3H). N1-((2S，3R)-4-((S或R)-1-(3-氟苯基)乙基氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 m.p.84-88℃.1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ8.027-7.926(m，2H)，7.814-7.781(m，1H)，7.407-7.169(m，10H)，7.109-6.866(m，3H)，6.771(m，1H)，5.360-5.260 (m，1H)，4.407-4.302(m，1H)，3.822-3.697(m，1H)，3.640-3.554(m，1H)，3.321(d，3H)，2.965-2.893(m，2H)，2.818(s，3H)，2.675-2.561(m，2H)，1.636-1.607(m，3H)，1.432-1.405(m，3H). N1-((R或S)-1-(3-氟苯基)乙基)-N3-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ8.116(m，1H)，7.941(m，1H)，7.806(m，1H)，7.334-7.038(m，10H)，6.979-6.869(m，2H)，6.824-6.768(m，1H)，5.313-5.213(m，1H)，4.390(m，1H)，3.893-3.742(m，3H)，3.764(s，3H)，3.300(s，3H)，2.939(m，2H)，2.803(m，5H)，1.625-1.571(m，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-異丙基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.69-7.18(m，1H)，6.91-6.79(m，5H)，4.90(寬s，1.3H)，4.64(寬s，0.7H)4.41(m，1H)，3.96-3.69(m，7H)，3.00(m，2H)，2.81(m，2H)，2.43(s，3H)，1.29-1.16(m，7H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-異丁基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.77-7.22(m,11H)，7.15-6.81(m，5H)5.00(寬s，1.2H)，4.66(寬s，0.7H)，4.40(m，1H)，3.88-2.83(m，14H)，2.46(s，3H)，2.20-1.96(m，2H)，0.99-0.70(m，7H). N1-乙基-N3-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N1-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.71-7.18(m，12H)，7.08-6.79(m，5H)，4.96(寬s，1.2H)，4.63(寬s，0.7H)，4.40(m，1H)，3.86-3.30(m，8H)，3.02-2.82(m，5H)，2.44(s，3H)，1.11(m，4H)。
N1-芐基-N3-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N1-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.84-7.15(m，17H)，6.91-6.79(m，4H)，4.93-4.55(m，4H)，4.38(m，1H)，3.85-3.68(m，6H)，3.00-2.80(m，5H)，2.43(s，3H). N1-環(huán)戊基-N3-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N1-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.71-7.19(m，12H)，7.06-6.81(m，5H)，4.88(寬s，2H)，4.41(m，1H)，4.03-3.68(m，7H)，3.02-2.82(m，4H)，2.43(s，4H)，1.68-1.38(m，8H). N1-((2S，3R)-4-(2-氟-3-甲氧基芐氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ7.93(s，1H)，7.83(s，1H)，7.68(s，1H)，7.01-7.29(m，10H)，6.92(m，1H)，6.76-6.81(m，2H)，5.19(m，1H)，4.26(m，1H)，3.71-3.82(m，2H)，3.77(s，3H)，3.59-3.64(m，1H)，3.16(s，3H)，2.63-2.78(m，4H)，2.69(s，3H)，1.49(m，3H). N1-((2S，3R)-4-(3-((二甲基氨基)甲基)芐氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 8.10(m，1H)，7.99 (m，1H)，7.96(m，1H)，7.19-7.33(m，2H)，7.03-7.20(m，12H)，5.26(m，1H)，4.88(m，1H)，3.68(m，1H)，3.34-3.51(m，3H)，3.29(s，3H)，3.17(m，1H)，3.00-3.04(m，2H)，2.77-2.87(m，1H)，2.79(s，3H)，2.63-2.70(m，1H)，2.17(s，6H)，1.57(m，3H) N1-((2S，3R)-4-(2-氟-6-甲氧基芐氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 7.99(s，1H)，7.90(m，1H)，7.75(m，1H)，7.14-7.37(m，10H)，6.93(m，1H)，6.82-6.85(m，1H)，6.70-6.75(m，1H)，5.27(m，1H)，4.33(m，1H)，3.76-3.82(m，2H)，3.72(s，3H)，3.68-3.71(m，1H)，3.24(s，3H)，2.71-2.87(m，4H)，2.76(s，3H)，1.57(m，3H) N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(2-嗎啉代基乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 8.68(s，1H)，8.04-8.06(m，1H)，8.01(m，1H)，7.52-7.55(m，2H)，7.18-7.35(m，8H)，5.35(m，1H)，4.51(m，1H)，4.04(m，1H)，3.33-3.44(m，4H)，3.28(s，3H)，3.02-3.20(m，4H)，2.88-2.93(m，2H)，2.85(s，3H)，2.52-2.58(m，2H)，2.36(m，2H)，2.23(m，2H)，1.72(m，3H) N1-((2S，3R)-3-羥基-1-苯基-4-(2-(吡咯烷-1-基)乙基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 8.18(s，1H)，7.95(m，1H)，7.86(m，1H)，7.40-7.43(m，2H)，7.19-7.32(m，8H)，5.31(m，1H)，4.46(m，1H)，3.75(m，1H)，3.31(s，3H)，3.06-3.13(m，1H)，2.94-3.01(m，1H)，2.80-2.89(m，4H)，2.82(s，3H)，2.69-2.71(m，2H)，2.58-2.62(m，4H)，1.74-1.77(m，4H)，1.64(m，3H) N1-((2S，3R)-3-羥基-1-苯基-4-(2-(哌啶-1-基)乙基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 8.12(s，1H)，7.95(m，1H)，7.86(m，1H)，7.23-7.40(m，10H)，5.31(m，1H)，4.46(m，1H)，3.69(m，1H)，3.31(s，3H)，3.06-3.13(m，1H)，2.91-3.00(m，2H)，2.70-2.88(m，3H)，2.81(s，3H)，2.43-2.48(m，2H)，2.32-2.39(m，4H)，1.62(m，3H)，1.48-1.58(m，4H)，1.39-1.42(m，2H) N1-((2S，3R)-3-羥基-1-苯基-4-(2-(吡咯烷-1-基)乙基氨基)丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 7.72(m，1H)，7.42(m，2H)，7.17-7.29(m，6H)，6.89(s，1H)，4.96(s，2H)，4.42(m，1H)，3.66(m，1H)，2.99-3.12(m，6H)，2.76-2.82(m，4H)，2.60-2.64(m，2H)，2.56(m，4H)，2.44(s，3H)，1.78(s，3H) N1-((2S，3R)-3-羥基-1-苯基-4-((1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯-2-基)甲基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 8.29(m，1H)， 8.00(m，1H)，7.91(m，1H)，7.47-7.49(m，2H)，7.21-7.34(m，8H)，6.77(m，1H)，6.22(m，1H)，6.10(m，1H)，5.36(m，1H)，5.22(m，2H)，4.43(m，1H)，3.98(m，2H)，3.86(m，1H)，3.45-3.52(m，2H)，3.32(s，3H)，2.79-3.02(m，4H)，2.83(s，3H)，1.69(m，3H)，0.89(m，2H)，0.00(s，9H) N1-((2S，3R)-3-羥基-1-苯基-4-((1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-4-基)甲基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 7.96-7.98(m，2H)，7.75(m，1H)，7.21-7.45(m，11H)，6.90(s，1H)，5.36(m，1H)，5.30(s，2H)，4.31(m，1H)，3.87(m，2H)，3.57(m，1H)，3.48(m，2H)，3.31(s，3H)，3.01(m，2H)，2.83(s，3H)，2.73(m，2H)，1.65(m，3H)，3.90(m，2H)，0.00(s，9H) N1-((2S，3R)-4-((1H-咪唑-4-基)甲基氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 8.18(s，1H)，7.91(m，1H)，7.79(m，1H)，7.18-7.47(m，11H)，7.03(s，1H)，5.28(m，1H)，4.24(m，1H)，3.91(m，1H)，3.29(s，3H)，3.27-3.33(m，2H)，2.83-3.18(m，4H)，2.87(s，3H)，1.62(m，3H) N1-((2S，3R)-3-羥基-1-苯基-4-((1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)甲基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 8.19(s，1H)，8.01(m，1H)，7.84(m，1H)，7.17-7.34(m，10H)，6.94(m，1H)，6.90(m，1H)，5.33(m，1H)，5.25(s，2H)，4.40(m，1H)，3.74-3.94(m，2H)，3.60(m，1H)，3.48-3.55(m，2H)，3.29(s，3H)，2.93-3.00(m，1H)，2.79-2.90(m，3H)，2.81(s，3H)，1.55(m，3H)，0.89-0.95(m，2H)，0.00(s，9H) N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((3-甲基-1H-吡唑-5-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 8.22(s，1H)，8.12(m，1H)，8.09(m，1H)，7.16-7.44(m，10H)，5.99(s，1H)，5.38(m，1H)，4.96(m，1H)，3.85(m，1H)，3.53-3.66(m，2H)，3.40(s，3H)，3.30-3.36(m，1H)，3.11-3.22(m，1H)，2.91(s，3H)，2.76-2.98(m，2H)，2.30(s，3H)，1.70(m，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((5-甲基呋喃-2-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ8.093(s，1H)，7.946(s，1H)，7.850(s，1H)，7.054-7.37(m，10H)，6.094(m，1H)，5.875(m，1H)，5.343-5.248(m，1H)，4.428-4.334(m，1H)，3.777-3.667(m，3H)，3.286(s，3H)，2.951-2.750(m，4H)，2.789(s，3H)，2.167(s，3H)，1.583(d，J＝7.2Hz，3H). (2R，3S)-2-羥基-3-(3-(N-甲基甲磺酰氨基)-5-((R)-1-苯基乙基氨甲?；?苯甲酰氨基)-4-苯基丁基(3-甲氧基芐基)氨基甲酸叔丁酯 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ7.951(m，1H)，7.885(s，1H)，7.771(s，1H)，7.405-7.133(m，11H)，6.768(m，3H)，5.310(m，1H)，4.457-4.298(m，3H)，3.910(m，1H)，3.753(s，3H)，3.431-3.327(m，2H)，3.328(s，3H)，2.972(m，2H)，2.829(s，3H)，1.617(d，J＝6.9Hz，3H)，1.490(s，9H). N1-((2S，3R)-4-((S)-1-環(huán)己基乙基氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ8.622(m，1H)，7.956(m，2H)，7.514-7.126(m，10H)，5.307-5.215(m，1H)，4.230(m，1H)，3.849(m，1H)，3.274(s，3H)，3.079-2.812(m，4H)，2.698(m，1H)，1.713(d，J＝6.93Hz，3H)，1.668-1.428(m，3H)，1.690(d，J＝6.6Hz，3H)，1.253-0.862(m，8H). 4-(((2R，3S)-2-羥基-3-(3-(N-甲基甲磺酰氨基)-5-((R)-1-苯基乙基氨甲?；?苯甲酰氨基)-4-苯基丁基氨基)甲基)哌啶-1-甲酸芐酯 1HNMR(300MHz，CDCl3)，δ8.105(s，1H)，7.901(m，1H)，7.792(m，1H)，7.405-7.139(m，15H)，5.326-5.231(m，1H)，5.108(s，2H)，4.377-4.278(m，1H)，4.202-4.078(m，2H)，3.748(m，1H)，3.256(s，3H)，3.024-3.608(m，6H)，2.777(s，3H)，2.584 (m，2H)，1.711(m，3H)，1.612(d，J＝6.9 Hz，3H)，1.125(m，2H). N1-((R)-1-環(huán)己基乙基)-N3-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ8.023(s，1H)，7.905(s，1H)，7.780(m，1H)，7.274-7.134(m，5H)，6.893-6.772(m，4H)，4.377-4.312(m，1H)，4.050-3.977(m，1H)，3.867-3.712(m，3H)，3.768(s，3H)，3.315(s，3H)，3.014-2.733(m，4H)，2.846(s，3H)，1.802-1.605(m，6H)，1.468-1.369(m，1H)，1.238-0.974(m，4H)，1.188(d，J＝6.6Hz，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-1-苯基-4-(哌啶-4-基甲基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)，δ8.226(s，1H)，7.844(s，1H)，7.757(s，1H)，7.384-7.041(m，10H)，5.184(m，1H)，4.268(m，1H)，4.126(m，1H)，3.174(s，3H)，2.778(s，3H)，3.373-2.775(m，10H)，2.118-1.861(m，3H)，1.578(d，J＝6.9Hz，3H)，1.567-1.421(m，2H). N1-((2S，3R)-3-羥基-1-苯基-4-(哌啶-3-基甲基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)，δ7.879-7.678(m，3H)，7.528-7.115(m，10H)，5.261-5.142(m，1H)，4.479(m，1H)，3.892(m，1H)，3.324(s，3H)，3.328-2.568(m，10H)，2.875(s，3H)，1.992-1.133(m，3H)，1.560(d，J＝6.6Hz，3H)，1.536-1.362(m，2H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((1-甲基哌啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)，δ7.939-7.715(m，3H)，7.528-7.115(m，10H)，5.300-5.203(m，1H)，3.834(m，1H)，3.309(s，3H)，3.052-2.590(m，6H)，2.484-2.267(m，4H)，2.355(s，3H)，2.011-1.762(m，3H)，1.572(br，s，3H)，1.536-1.362(m，2H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(((R)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)，δ7.961(s，1H)，7.881(m，1H)，7.685(m，1H)，7.401-7.089(m，10H)，5.276(m，1H)，4.398(m，1H)，3.862(m，1H)，3.315(s，3H)，3.280-2.646(m，6H)，2.840(s，3H)，2.278(s，3H)，2.356-2.117(m，3H)，2.019-1.674(m，4H)，1.583(d，J＝6.9Hz，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(((R)-1-異丙基吡咯烷-2-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)，δ7.945(s，1H)，7.869(s，1H)，7.686(s，1H)，7.390-7.098(m，10H)，5.269(m，1H)，4.403(m，1H)，3.672(m，1H)，3.308(s，3H)，3.056-2.659(m，6H)，2.836(s，3H)，2.447(m，4H)，2.011-1.707(m，4H)，1.576(d，J＝6.9Hz，3H)，0.953(d，J＝6.3Hz，3H)，0.921(d，J＝6.3Hz，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((3-甲氧基環(huán)己基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ8.273-7.879(m，3H)，7.395-7.061(m，10H)，5.263(m，1H)，4.249(m，1H)，4.029(m，1H)，3.496(m，1H)，3.287-3.178(m，6H)，3.139-2.677(m，6H)，2.771(s，3H)，2.077-1.466(m，12H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((1-異丁基哌啶-4-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺二鹽酸鹽 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)，δ8.272-7.836(br，3H)，7.426-7.032(m，10H)，5.172(br，1H)，4.212(br，1H)，3.882(br，1H)，3.243(br，9H)，2.768(br，7H)，1.955(br，5H)，1.569(br，3H)，1.207(br，2H)，0.959(br，6H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((1-(2-甲氧基芐基)哌啶-4-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺二鹽酸鹽 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ8.108(m，1H)，7.894(m，1H)，7.778(m，1H)，7.395-7.088(m，12H)，6.933-6.841(m，2H)，5.244(m，1H)，4.279(m，1H)，3.814(m，1H)，3.788(s，3H)，3.642(s，2H)，3.261(s，3H)，3.136-2.513(m，10H)，2.818(s，3H)，2.141(m，2H)，1.690(m，1H)，1.586(d，J＝7.2Hz，3H)，1.370(m，2H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((1-(3-甲氧基芐基)哌啶-4-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ8.012(m，1H)，7.872(m，1H)，7.742(m，1H)，7.369-7.081(m，11H)，6.850-6.750(m，3H)，5.245(m，1H)，4.302-4.234(m，1H)，3.764(s，3H)，3.730(m，1H)，3.436(s，2H)，3.256(s，3H)，3.104-2.814(m，6H)，2.816(s，3H)，2.725(m，2H)，2.496(m，2H)，1.932(m，2H)，1.653(m，2H)，1.564(d，J＝6.9Hz，3H)，1.461(m，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-((R)-1-(3-甲氧基苯基)乙基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ8.039(m，1H)，7.887(m，1H)，7.763(m，1H)，7.260-7.092(m，7H)，6.966-6.742(m，6H)，5.226(m，1H)，4.295(m，1H)，3.844-3.716(m，8H)，3.272(s，3H)，3.030-2.714(m，4H)，2.823(s，3H)，1.562(d，J＝6.9Hz，3H). N1-((2S，3R)-4-(苯并[d][1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基甲基氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ8.100(m，1H)，7.901(m，1H)，7.790(m，1H)，7.404-7.108(m，10H)，6.800-6.696(m，3H)，5.896(s，2H)，5.273 (m，1H)，4.316(m，1H)，3.806-3.684(m，3H)，3.280(s，3H)，3.024-2.714(m，4H)，2.815(s，3H)，1.597(d，J＝6.9Hz，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-1-苯基-4-(3-(三氟甲基)芐氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ8.038(m，1H)，7.896(m，1H)，7.770(m，1H)，7.565-7.111(m，14H)，5.277 (m，1H)，4.330(m，1H)，3.924-3.722(m，3H)，3.283(s，3H)，2.992-2.761(m，4H)，2.818(s，3H)，1.584(d，J＝6.9Hz，3H). N1-((2S，3R)-4-(3-(二氟甲氧基)芐氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ8.020(m，1H)，7.888(m，1H)，7.764(m，1H)，7.384-6.975(m，14H)，6.746(s，0.3H)，6.500(s，0.4H)，6.253(s，0.3H)，5.263(m，1H)，4.312(m，1H)，3.861-3.731(m，3H)，3.285(s，3H)，3.021-2.801(m，2H)，2.833(s，3H)，2.761(m，2H)，1.578(d，J＝7.2Hz，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((S)-1-(3-甲氧基苯基)乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ7.987(m，1H)，7.874(m，1H)，7.727(m，1H)，7.378-7.076(m，11H)，6.850-6.721(m，3H)，5.255(m，1H)，4.268(m，1H)，3.744(s，3H)，3.739-3.635(m，2H)，3.272(s，3H)，3.002-2.778(m，2H)，2.832(s，3H)，2.608(m，2H)，1.570(d，J＝6.9Hz，3H)，1.377(d，J＝6.6Hz，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-1-苯基-4-(3-(三氟甲基)芐氨基)丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ7.693-7.368(m，8H)，7.264-7.131(m，5H)，6.884(s，1H)，4.943(br，1.5H)，4.638(br，0.5H)，4.339(m，1H)，3.907-3.711(m，3H)，3.097-2.881(m，5H)，2.784(d，J＝5.2Hz，2H)，2.430(s，3H). N1-((2S，3R)-4-(3-(二氟甲氧基)芐氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ7.693-7.116(m，13H)，6.876(s，1H)，6.753(s，0.28H)，6.507(s，0.44H)，6.261(s，0.28H)，4.93 1(br，1.3H)，4.627(br，0.7H)，4.328(m，1H)，3.827-3.688(m，3H)，3.087-2.859(m，5H)，2.756(d，J＝4.5Hz，2H)，2.417(s，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(2-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ7.693-7.098(m，10H)，6.927-6.862(m，4H)，4.926(br，1.3H)，4.623(br，0.7H)，4.262(m，1H)，4.105-3.934(m，3H)，3.827(s，3H)，3.177-2.787(m，5H)，2.414(s，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-1-苯基-4-(3-(三氟甲氧基)芐氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ8.021(m，1H)，7.890 (m，1H)，7.765(m，1H)，7.378-7.072(m，14H)，5.266(m，1H)，4.330(m，1H)，3.860-3.714(m，3H)，3.276(s，3H)，3.001-2.698(m，4H)，2.826(s，3H)，1.569(d，J＝6.6Hz，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(4-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ7.673-7.353(m，4H)，7.266-7.112(m，8H)，6.877-6.812(m，3H)，4.924(br，1.4H)，4.620(br，0.6H)，4.292(m，1H)，3.827-3.702(m，3H)，3.751(s，3H)，3.073-2.735(m，7H)，2.410(s，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-1-苯基-4-(3-(三氟甲氧基)芐氨基)丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ7.672-7.505(m，3H)，7.41 1-7.076(m，10H)，6.878(s，1H)，4.930(br，1.3H)，4.627(br，0.7H)，4.320(m，1H)，3.842-3.699(m，3H)，3.083-2.852(m，5H)，3.177-2.787(m，5H)，2.754(d，J＝4.5Hz，2H)，2.416(s，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-1-苯基-4-(喹啉-3-基甲基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ 8.91-8.92(m，1H)，8.03-8.07 (m，3H)，7.93(s，1H)，7.69-7.75(m，2H)，7.64-7.69(m，1H)，7.50-7.55(m，1H)，7.32-7.41(m，3H)，7.17-7.29(m，9H)，7.04-7.06(m，1H)，5.31-5.38(m，1H)，4.34-4.44(m，1H)，4.13-4.17(d，1H)，3.90-3.95(d，1H)，3.64-3.70(m，1H)，3.30(s，3H)，2.96-2.99(d，2H)，2.72-2.84(m，5H)，1.94(s，1H)，1.62-1.65(d，3H) N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((3-甲基異唑-5-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3) δ7.65-7.83(m，2H)，7.48-7.58(m，1H)，7.39-7.44(m，1H)，7.14-7.29(m，6H)，6.80-6.99(m，2H)，5.99(s，1H)，4.96(s，2H)，4.33-4.45(m，1H)，3.83-3.94(m，2H)，3.62-3.72 (m，1H)，2.94-3.15(m，6H)，2.73-2.85(m，2H)，2.44(s，3H)，2.26(s，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.72-7.77(m，2H)，7.63-7.66(d，1H)，7.16-7.32(m，6H)，6.89-6.92(m，4H)，6.79-6.82(m，1H)，4.95(s，2H)，4.32-4.44 (m，1H)，3.78-3.90(m，5H)，3.65-3.75(m，1H)，3.33(s，3H)，3.01-3.18(m，4H)，2.97-2.99(d，2H)，2.76-2.89(m，6H)，2.45(s，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-4，6-二甲基-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.34-7.36(d，3H)，7.11-7.32(m，7H)，7.04-7.11(m，1H)，7.02(s，1H)，6.92(s，1H)，6.85-6.87(m，2H)，6.77-6.80(m，1H)，6.38-6.51(m，1H)，6.20-6.31(m，1H)，5.18-5.29(m，1H)，4.25-4.37(m，1H)，3.72-3.83 (m，5H)，3.63-3.71(m，1H)，3.03-3.09(m，1H)，2.71-2.80(m，5H)，2.32(s，3H)，2.09(s，3H)，1.54-1.56(d，3H). N1-((2S，3R)-4-((5-乙基吡啶-3-基)甲基氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.48(s，1H)，8.20-8.21(d，1H)，8.13(s，1H)，8.01-8.04(d，1H)，7.97(s，1H)，7.70-7.73(m，1H)，7.41-7.44(m，2H)，7.17-7.36(m，10H)，6.77-6.90(m，1H)，5.33-5.42(m，1H)，4.30-4.42(m，1H)，4.01-4.06(m，1H)，3.65-3.69(d，1H)，3.55-3.63(m，1H)，3.32(s，3H)，3.00-3.02(d，2H)，2.80(s，3H)，2.55-2.62(m，4H)，2.02(s，1H)，1.65-1.67(d，3H)，1.17-1.22(d，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((5-甲基異唑-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.03(s，1H)，7.95(s，1H)，7.82(s，1H)，7.63-7.74(m，1H)，7.15-7.34(m，12H)，6.90-7.00(m，1H)，5.96(s，1H)，5.25-5.35(m，1H)，4.33-4.45(m，1H)，3.77-3.88(m，2H)，3.66-3.74 (m，1H)，3.29(s，3H)，2.84-3.02(m，4H)，2.80(s，3H)，2.38(s，3H)，1.57-1.59(d，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((5-甲基異唑-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ 7.63-7.84(m，2H)，7.52-7.63 (m，1H)，7.40-7.45(m，1H)，7.17-7.30(m，5H)，6.90(s，1H)，6.69-6.86(m，2H)，5.97(s，1H)，4.97(s，2H)，4.34-4.40(m，1H)，3.85(s，2H)，3.61-3.71(m，1H)，2.96-3.16(m，5H)，2.80-2.81(d，2H)，2.45(s，3H)，2.38(s，3H)，1.82(s，1H). N1-((2S，3R)-4-((5-氟吡啶-3-基)甲基氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.44(s，1H)，8.26-8.27(d，1H)，8.04(s，1H)，7.96(s，1H)，7.74(s，1H)，7.18-7.39(m，14H)，6.81-6.98(m，1H)，5.29-5.40(m，1H)，4.30-4.39(m，1H)，4.00-4.05(d，1H)，3.72-3.76(d，1H)，3.58-3.66(m，1H)，3.32-3.33(m，3H)，2.93-3.09(m，2H)，2.82(s，3H)，2.60-2.71(m，2H)，1.63-1.65(d，3H). 4，6-二氟-N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.70-8.73(d，1H)，7.72-7.74(d，1H)，7.36-7.37(d，3H)，7.16-7.33(m，8H)，6.96-6.98(m，2H)，6.73-6.84(m，2H)，6.62-6.66(d，1H)，5.28-5.39(m，1H)，4.36-4.47(m，1H)，3.88-3.95(m，4H)，3.73-3.84(m，2H)，3.64-3.73(m，1H)，2.94-3.12(m，2H)，2.88-2.93(m，1H)，2.75-2.81(m，1H)，2.00(s，1H)，1.57-1.59(d，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((5-異丙氧基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.17(s，1H)，8.11(s，1H)，7.68-7.86(m，1H)，7.63-7.66(d，1H)，7.49-7.60(m，1H)，7.38-7.43(m，1H)，7.27-7.15(m，6H)，6.94-7.05(m，1H)，6.89(s，1H)，4.96(s，2H)，4.52-4.63(m，1H)，4.28-4.44(m，1H)，3.75-3.85(m，2H)，3.61-3.74(m，1H)，2.88-3.16(m，6H)，2.80(s 3H)，2.45(s，3H)，1.32-1.34(d，6H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((5-異丙氧基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ 8.23(s，1H)，8.16(s，1H)，8.06-8.07(d，1H)，7.95-8.02(m，1H)，7.74(s，1H)，7.42-7.45(m，2H)，7.17-7.35(m，12H)，7.0-7.10(m，1H)，5.30-5.44(m，1H)，4.48-4.62(m，1H)，4.29-4.40(m，1H)，4.03-4.08(d，1H)，3.62-3.84(m，2H)，3.31(s，3H)，2.93-3.08(m，2H)，2.80(s，3H)，2.65-2.73(m，2H)，1.65-1.67(d，3H)，1.29-1.31(d，6H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((5-異丙基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.49(s，1H)，8.25(s，1H)，8.17(s，1H)，7.93-8.05(m，2H)，7.74(s，1H)，7.42-7.50(m，2H)，7.14-7.35(m，9H)，6.99-7.02(d，1H)，5.32-5.43(m，1H)，4.29-4.41(m，1H)，4.03-4.08(d，1H)，3.60-3.82(m，2H)，3.31(s，3H)，2.98-3.00(d，2H)，2.76-2.94(m，5H)，2.62-2.69(m，2H)，2.03(s，1H)，1.65-1.67(d，3H)，1.20-1.26(m，6). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(1-(3-甲基異唑-5-基)乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.14(s，1H)，7.98-7.99(m，1H)，7.73-7.77(m，1H)，7.54-7.57(d，1H)，7.07-7.42(m，11H)，6.85-6.94(m，1H)，5.95(s，1H)，5.27-5.41(m，1H)，4.31-4.45(m，1H)，4.03-4.15(m，1H)，3.89-4.00(m，1H)，3.54-3.65(m，1H)，3.33(s，3H)，2.96-3.04(m，2H)，2.83(s，3H)，2.58-2.77(m，2H)，2.16-2.19(m，3H)，1.61-1.64(m，3H)，1.48-1.54(m，3H). N1-((2S，3R)-4-((5-乙氧基吡啶-3-基)甲基氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.23(s，1H)，8.16(s，1H)，8.04-8.10(m，1H)，7.97-8.04(m，1H)，7.95(s，1H)，7.73(s，1H)，7.42-7.44(m，2H)，7.12-7.33(m，12H)，5.29-5.41(m，1H)，4.28-4.40(m，1H)，3.95-4.08(m，3H)，3.63-3.82(m，2H)，3.28(s，3H)，2.88-3.06(m，2H)，2.79(s，3H)，2.63-2.70(m，2H)，1.64-1.66(d，3H)，1.34-1.39(m，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((5-甲氧基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.19(s，1H)，8.14(s，1H)，7.71(s，1H)，7.61-7.64(m，1H)，7.47-7.57(m，1H)，7.35-7.40(m，1H)，7.14-7.26(m，7H)，7.04(s，1H)，6.88(s，1H)，4.96(s，2H)，4.27-4.42(m，1H)，3.74-3.88(m，5H)，3.65-3.74(m，1H)，3.36(s，1H)，2.91-3.15(m，5H)，2.78-2.79(d，2H)，2.44(s，3H). N1-((2S，3R)-4-((5-乙氧基吡啶-3-基)甲基氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.21(s，1H)，8.16(s，1H)，7.71-7.87(m，1H)，7.62-7.71(m，1H)，7.47-7.57(m，1H)，7.30-7.47(m，2H)，7.13-7.30(m，6H)，6.90(s，1H)，4.96(s，2H)，4.28-4.43(m，1H)，4.09-4.02(m，2H)，3.86-3.97(m，2H)，3.69-3.82(m，1H)，2.93-3.16(m，7H)，2.77-2.93(m，2H)，2.45(s，3H)，1.38-1.43(m，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((5-異丁基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.53(s，1H)，8.28-8.31(m，1H)，8.20(s，1H)，7.94(s，1H)，7.76(s，1H)，7.51(s，1H)，7.40-7.45(m，2H)，7.13-7.29(m，11H)，5.26-5.40(m，1H)，4.18-4.36(m，1H)，4.05-4.18(m，1H)，3.70-3.95(m，2H)，3.27-3.35(m，1H)，3.24(s，3H)，2.76-3.07(m，7H)，2.38-2.40(d，2H)，1.70-1.91(m，2H)，1.64-1.67(d，2H)，0.82-0.84(d，6H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((4-甲氧基吡啶-2-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.40-8.53(m，1H)，8.20-8.27(m，1H)，8.00(s，1H)，7.84-7.98(m，2H)，7.31-7.45(m，2H)，7.08-7.31(m，12)，6.66-6.75(m，2H)，5.26-5.39(m，1H)，4.36-4.52(m，1H)，3.59-4.04(m，5H)，3.26(s，3H)，2.81-3.30(m，3H)，2.78(s，3H)，2.02(s，1H)，1.59-1.61(d，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((5-甲基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.36(s，1H)，8.32(s，1H)，7.72-7.81(m，1H)，7.63-7.66(m，1H)，7.51(s，2H)，7.36-7.41(m，1H)，7.00-7.26(m，6H)，6.88(s，1H)，4.95(s，2H)，4.28-4.42(m，1H)，3.61-3.91(m，4H)，2.89-3.11(m，5H)，2.71-2.89(m，2H)，2.44(s，3H)，2.30(s，3H)，2.02(s，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((5-異丁基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.38(s，1H)，8.29(s，1H)，7.64-7.82(m，1H)，7.63-7.66(m，1H)，7.49-7.55(m，1H)，7.47(s，1H)，7.36-7.41(m，1H)，7.13-7.26(m，7H)，7.02-7.13(m，1H)，6.88(s，1H)，4.95(s，2H)，3.77-3.88(m，2H)，3.66-3.76(m，1H)，2.91-3.16(m，6H)，2.80-2.81(d，2H)，2.43-2.45(m，5H)，1.77-1.89(m，1H)，0.87-0.89(d，6H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((5-異丁氧基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.20-8.21(d，1H)，8.14(s，1H)，7.69-7.83(m，1H)，7.65-7.67(d，1H)，7.49-7.58(m，1H)，7.37-7.43(m，1H)，7.15-7.27(m，7H)，6.92-7.03(m，1H)，6.89(s，1H)，4.96(s，2H)，4.30-4.45 (m，1H)，3.79-3.93H)，2H)，3.74-3.76(d，2H)，2.93-3.17(m，7H)，2.77-2.87(m，2H)，2.45(s，3H)，2.01-2.17(m，1H)，1.01-1.03(d，6H). N1-((2S，3R)-4-((5-(二甲基氨基)吡啶-3-基)甲基氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.35-8.38(d，1H)，8.24(s，1H)，8.01(s，1H)，7.95(s，2H)，7.80-7.86(m，1H)，7.73(s，1H)，7.38-7.45(m，2H)，7.13-7.31(m，11H)，6.88-6.97(m，1H)，5.26-5.44(m，1H)，4.28-4.39(m，1H)，4.17-4.28(m，1H)，3.93-4.06(m，1H)，3.60-3.82(m，3H)，3.26(s，3H)，2.97(s，3H)，2.82-2.91(m，4H)，2.77(s，3H)，1.64-1.66(d，3H). N1-((2S，3R)-4-((5-乙基吡啶-3-基)甲基氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHZ，CDCl3)δ8.34-8.37(m，2H)，7.68-7.84(m，1H)，7.59-7.68(m，1H)，7.51(s，2H)，7.36-7.41(m，1H)，7.10-7.27(m 6H)，6.99-7.10(m，1H)，6.88(s，1H)，4.95(s，2H)，4.29-4.43(m，1H)，3.77-3.87(m，2H)，3.63-3.76(m，1H)，2.90-3.16(m，6H)，2.79-2.81(d，2H)，2.58-2.65(m，2H)，2.44(s，3H)，1.19-1.25(m，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((5-異丁氧基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.24(s，1H)，8.18(s，1H)，8.00-8.13(m，2H)，7.95(s，1H)，7.73(s，1H)，7.42-7.44(m，2H)，7.10-7.36(m，11H)，5.28-5.42(m，1H)4.19-4.39(m，1H)，3.99-4.19(m，1H)，3.62-3.85(m，4H)，3.28(s，3H)，2.88-3.08(m，2H)，2.79-2.84(m，4H)，(2.64-2.76，2H)，1.96-2.12(1H)，1.64-1.67(d，3H)，0.98-1.00(d，6H). N1-((2S，3R)-4-(3-乙氧基芐氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.13(s，1H)，7.92(s，1H)，7.81(s，1H)，7.67-7.78(m，1H)，7.38-7.41 (m，2H)，7.11-7.33(m，12H)，6.87-6.93(m，2H)，6.76-6.85(m，1H)，5.24-5.36(m，1H)，4.28-4.39(m，1H)，3.94-4.01(m，2H)，3.76-3.92(m，3H)，3.26(s，3H)，2.78-2.91(m，4H)，2.76(s，3H)，1.61-1.63(d，3H)，1.34-1.38(m，3H). N1-((2S，3R)-4-(3-乙氧基芐氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.70-7.86(m，1H)，7.65-7.67(m，1H)，7.48-7.60(m，1H)，7.36-7.41(m，1H)，7.12-7.29(m，8H)，6.84-6.93(m，2H)，6.78-6.82(m，1H)，4.96(s，2H)，4.33-4.45(m，1H)，3.97-4.04(m，2H)，3.77-3.89(m，2H)，3.66-3.79 (m，3H)，2.92-3.16(m，5H)，2.73-2.92(m，2H)，2.44(s，3H)，1.36-1.41(m，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-異丙氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ.7.71-7.85(m，1H)，7.60-7.71(m，1H)，7.48-7.60(m，1H)，7.36-7.41(m，1H)，7.13-7.29(m，7H)，6.84-6.92(m，3H)，6.77-6.81(m，1H)，4.96(s，2H)，4.48-4.60(m，1H)，4.32-4.44(m，1H)，3.73-3.86(m，2H)，3.68-3.77(m，3H)，2.92-3.16(m，5H)，2.74-2.91(m，2H)，2.44(s，3H)，1.30-1.32(d，6H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-異丁氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.75-7.86(m，1H)，7.66-7.69(m，1H)，7.51-7.60 (m，1H)，7.38-7.43(m，1H)，7.15-7.33(m，6H)，6.86-6.94(m，4H)，6.81-6.84(m，1H)，4.97(s，2H)，4.34-4.46(m，1H)，2.82-3.95(m，2H)，3.64-3.78(m，4H)，2.95-3.18(m，5H)，2.75-2.95(m，2H)，2.45(s，3H)，1.99-2.13(m，2H)，1.00-1.02(d，6H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((5-異丙基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.38(s，2H)，7.69-7.84(m，1H)，7.63-7.66 (m，1H)，7.48-7.59(m，1H)，7.39-7.43(m，1H)，7.15-7.29(m，7H)，6.70-6.90(m，2H)，4.96(s，2H)，4.32-4.43(m，1H)，3.77-3.87(m，2H)，3.64-3.74(m，1H)，2.95-3.16(m，6H)，2.85-2.96(m，1H)，2.79-2.80(d，2H)，2.44(s，3H)，1.23-1.26(d，6H). N1-((2S，3R)-4-(3-乙基芐氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)1.18(t，3H，J＝7.2Hz)，1.58(d，3H，J＝6.9Hz)，2.56-2.84(m，9H)，3.21(s，3H)，3.67-3.85(m，3H)，4.29-4.40(m，1H)，5.23-5.32(m，1H)，7.05-7.36(m，14H)，7.79(s，1H)，7.91(s，1H)，8.06(s，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-異丙基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)1.19(s，3H)，1.21(s，3H)，1.59(d，3H，J＝6.6Hz)，2.77-2.94(m，8H)，3.27(s，3H)，3.72-3.88(m，3H)，4.22-4.41(m，1H)，5.26-5.33(m，1H)，7.11-7.39(m，14H)，7.77(s，1H)，7.92(s，1H)，8.07(s，1H). 2-氟-2-氟-N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)2.85(s，3H)，2.90-3.18(m，7H)，3.81(s，3H)，3.99-4.60(m，5H)，4.92-5.30(m，3H)，6.86(m，4H)，7.17-7.45(m，7H)，7.45-7.52(m，1H)，7.81-7.83(m，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-異丙基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)1.21(s，3H)，1.23(s，3H)，2.44(s，3H)，2.75-3.20(m，8H)，3.63-3.86(m，3H)，4.35-4.43(m，1H)，4.92(s，2H)，6.82(s，1H)，7.12-7.25 (m，10H)，7.38-7.42(m，1H)，7.7.46-7.83(m，2H). N1-((2S，3R)-4-(3-(氟甲基)芐氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)1.62(d，3H，J＝7.2Hz)，2.80-3.25(m，7H)，3.31(s，3H)，3.64-3.93(m，3H)，4.15-4.39(m，1H)，5.23-5.41(m，3H)，7.16-7.46(m，14H)，7.80(s，1H)，7.93(s，1H)，8.03(s，1H). N1-((2S，3R)-4-(3-(氟甲基)芐氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)2.41(s，3H)，2.78-3.08(m，7H)，3.74-3.85(m，3H)，4.26-4.36(m，1H)，4.93(s，2H)，5.24-5.41(d，2H，J＝47.4Hz)，6.88(s，1H)，7.1 5-7.41(m，10H)，7.53-7.66(m，3H). N1-((2S，3R)-4-(3-乙基芐氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)1.17-1.22(t，3H，J＝7.8Hz)，2.43(s，3H)，2.57-2.65(q，2H，J＝7.8Hz)，2.75-3.10(m，7H)，3.71-3.83(m，3H)，4.32-4.41(m，1H)，4.95(s，2H)，6.87(s，1H)，7.13-7.23(m，10H)，7.35-7.40(m，1H)，7.63-7.73(m，2H). 3-(2，2-二甲基-1-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)肼羰基)-N-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)苯甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)2.43(s，3H)，2.72-3.02(m，4H)，3.43(s，6H)，3.46-3.73(m，6H)，4.28-4.38(m，1H)，5.17(s，2H)，6.75-6.88(m，4H)，6.99(s，1H)，7.09-7.26(m，6H)，7.66-7.69(m，1H)，7.99-8.02 (m，1H)，8.17(s，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基苯乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)2.42(s，3H)，2.79-3.16(m，11H)，3.76(s，3H)，3.81-3.90(m，1H)，4.25-4.34(m，1H)，4.93(s，2H)，6.73-6.78(m，3H)，6.88(s，1H)，7.13-7.25(m，7H)，7.42-7.46(m，1H)，7.69-7.72(m，2H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(4-甲氧基苯乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)1.54(d，3H，J＝7.2Hz)，2.67-2.87(m，11H)，3.17(s，3H)，3.67(s，3H)，3.71-3.78(s，1H)，4.22-4.36(m，1H)，5.13-5.25(m，1H)，6.69-6.71(d，2H，J＝7.4Hz)，6.97-7.33(m，13H)，7.73(s，1H)，7.84(s，1H)，8.10(s，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(2-甲氧基苯乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)1.69(d，3H，J＝7.2Hz)，2.78(s，3H)，2.97-3.31(m，11H)，3.73 9s，3H)，3.89-4.16(m，1H)，4.35-4.43(m，1H)，5.22-5.34(m，1H)，6.76-6.81(m，1H)，7.02-7.25(m，14H)，7.46-7.49(m，1H)，7.95-7.98(m，1H)，8.57(s，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-異丁基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)0.79(d，6H，J＝6.2Hz)，1.53(d，3H，J＝7.2Hz)，1.64-1.82(m，1H)，2.34-2.82(m，9H)，3.21(s，3H)，3.67-3.3.82(m，3H)，4.22-4.39(m，1H)，5.12-5.30，m，1H)，6.97-7.30(m，14H)，7.74(s，1H)，7.85(s，1H)，8.00(s，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((R)-1-(4-甲基噻唑-2-基)乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)1.88-1.94(br d，3H)，2.65(s，3H)，2.98-3.36(m，7H)，3.93-4.07(m，6H)，4.30-4.33(m，1H)，4.46-4.54(m，1H)，6.99-7.17(m，3H)，7.33-7.47(m，4H)，7.33-7.47(m，4H)，7.63-7.68(m，1H)，7.89-7.93(m，2H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-異丁基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)0.9(d，6H，J＝6.2Hz)，1.78-1.92(m，1H)，2.45(s，3H)，2.74-3.16(m，9H)，3.78-3.92(m，3H)，4.30-4.38(m，1H)，4.93(s，2H)，6.84-7.35(m，11H)，7.44-7.59(m，1H)，7.72-7.76(m，2H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)1.63(d，3H，J＝.3 Hz)，1.82-2.12(m，6H)，2.34-2.62(m，3H)，2.82-2.94(m，7H)，2.96-3.10(m，2H)，3.82(s，3H)，4.68-4.73(m，1H)，5.21-5.30(m，1H)，6.60(s，1H)，7.26-7.30(m，12H)，8.36-8.38(m，2H)，8.96(s，1H). N1-((2S，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)2.40(s，3H)，2.72-2.85(m，3H)，2.98-3.06(m，4H)，3.67-3.84(m，6H)，4.22-4.28(m，1H)，4.93(s，2H)，6.53-6.77(m，1H)，6.78-7.05(m，6H)，7.24-7.26(m，1H)，7.38-7.43(m，1H)，7.69-7.72(m，2H). N1-((2S，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)1.61(d，3H，J＝7.2H)，2.71-2.87(m，7H)，3.31(s，3H)，3.71-3.90(m，6H)，4.25-4.36(m，1H)，5.22-5.33(m，1H)，6.58-6.91(m，7H)，7.18-7.27(m，5H)，7.83(s，1H)，7.94(s，1H)，8.03(s，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-(噻唑-4-基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)1.62(d，3H，J＝7.2Hz)，2.65-2.80(m，5H)，3.01-3.05(m，1H)，3.19-3.41(m，4H)，3.71-3.83(m，6H)，4.08-4.34(m，1H)，5.29-5.38(m，1H)，6.76-6.96(m，4H)，7.14-7.25(m，6H)，8.01(s，1H)，8.05(s，1H)，8.18(s，1H)，8.75(s，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-羥基-4-甲氧基苯乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)1.63(d，3H，J＝7.2Hz)，2.60-2.89(m，11H)，3.18(s，3H)，3.64-3.78(m，4H)，4.22-4.34(s，1H)，5.14-5.32(m，1H)，6.51-6.67(m，3H)，7.06-7.38(m，10H)，7.69(s，1H)，7.86(s，1H)，8.10(s，1H). N1-((2S，3R)-4-(3-乙炔基芐氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)1.62(d，3H，J＝7.2Hz)，2.74-2.94(m，7H)，3.28(s，1H)，3.30(s，3H)，3.71-3.88(m，3H)，4.32-4.38(m，1H)，5.25-5.34(m，1H)，7.17-7.44(m，14H)，7.80(s，1H)，7.92(s，1H)，8.05(s，1H). N1-((2S，3R)-4-(3-乙炔基芐氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)2.21(s，3H)，2.54-2.86(m，10H)，3.49-3.61(m，3H)，4.07-4.13(m，1H)，4.72(s，2H)，6.67(s，1H)，6.95-7.22(m，10H0，7.40-7.46(m，3H). N1-((2S，3R)-4-(芐氨基)-3-羥基-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)2.43(s，3H)，2.80-3.09(m，7H)，3.63-3.87(m，3H)，4.28-4.37(m，1H)，4.94(s，2H)，6.88(s，1H)，7.21-7.70(m，14H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(2-甲氧基苯乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)2.40(s，3H)，2.85-3.19(m，11H)，3.66-3.78(m，4H)，4.23-4.32(m，1H)，4.91(s，2H)，6.81-6.87(m，4H)，7.09-7.20(m，7H)，7.39-7.43(m，1H)，7.69-7.72(m，2H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(4-甲氧基苯乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)2.41(s，3H)，2.72-3.19(m，11H)，3.75(s，3H)，3.82-3.92(s，1H)，4.59-4.68(m，1H)，4.93(s，1H)，6.79-6.88(m，3H)，7.08-7.27(m，8H)，7.40-7.44(m，1H)，7.69-7.72(m，2H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)-5-硝基間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)2.41(s，3H)，2.70-2.98(m，2H)，2.98-3.18(m，5H)，3.70-3.73(m，6H)，4.25-4.30(m，1H)，4.92(s，2H)，6.74-6.89(m，4H)，7.10-7.22(m，6H)，8.03(s，1H)，8.35(s，1H)，8.52(s，1H) N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(甲磺?；谆?-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300Mz，CDCl3)1.67(d，3H，J＝7.2Hz)，2.78(s，3H)，2.86-2.97(m，4H)，3.80-3.94(m，6H)，4.20(s，2H)，4.42-4.46(m，1H)，5.30-5.39(m，1H)，6.85-6.96(m，3H)，7.21-7.47(m，11H)，7.78(s，1H)，7.94(s，1H)，8.19(s，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(N-(3-甲氧基芐基)-4-(2-嗎啉代基乙基氨基)-4-氧代丁酰氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.60(d，3H，J＝7.2Hz)，2.34-2.67(m，10H)，2.84(s，3H)，2.96-3.04(m，2H)，3.20-3.36(m，2H)，3.32(s，3H)，3.40-3.49(m，1H)，3.60-3.76(m，5H)，3.76(s，3H)，3.90-4.06(m，1H)，4.32-4.45(m，1H)，4.58-4.64(m.2H)5.26-5.38(m，1H)，6.46-6.68(m，1H)，6.66-6.95(m，4H)，7.10-7.42(m，10H)，7.86-7.89(m，1H)，7.96-7.99(m，1H)，8.04-8.08(m，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(N-(3-甲氧基芐基)-4-氧代-4-(吡啶-3-基甲基氨基)丁酰氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.48(d，3H，J＝6.6Hz)，2.34-3.32(m，6H)，2.80(s，3H)，3.22(s，3H)，3.76(s，3H)，3.80-4.78(m，8H)，5.20-5.32(m， 1H)，6.64-6.82(m，3H)，7.00-7.36(m，12H)，7.42-8.48(m，6H) N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(N-(3-甲氧基芐基)-5-氧代-5-(吡啶-3-基甲基氨基)戊酰氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.60(d，3H，J＝7.2Hz)，1.88-2.20(m，2H)，2.24-2.42(m，4H)，2.80(s，3H)，2.82-3.44(m，3H)，3.26(s，3H)，3.64-3.76(m，1H)，3.76(s，3H)，3.80-4.02(m，1H)，4.20-4.58(m，4H)，5.22-5.36(m，1H)，6.60-6.82(m，4H)，7.06-7.40(m，13H)，7.50-8.41(m，5H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(N-(3-甲氧基芐基)-5-(2-嗎啉代基乙基氨基)-5-氧代戊酰氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.59(d，3H，J＝6.6Hz)，1.88-2.00(m，2H)，2.20-2.29(m，4H)，2.31-2.52(m，6H)，2.82(s，3H)，2.92-3.08(m，2H)，3.20-3.38(m，2H)，3.29(s，3H)，3.40-3.60(m，2H)，3.64-3.74(m，4H)，3.76(s，3H)，3.92-4.04(m，1H)，4.28-4.40(m，1H)，4.58-4.64(m.2H)5.23-5.36(m，1H)，6.20-6.35(m，1H)，6.62-6.80(m，4H)，7.10-7.40(m，10H)，7.86-7.89(m，1H)，7.95-7.98(m，1H)，7.98-8.00(m，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(N-(3-甲氧基芐基)-5-(4-甲基哌嗪-1-基氨基)-5-氧代戊酰氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.57(d，3H，J＝6.6Hz)，1.84-2.00(m，2H)，2.24-3.16(m，17H)，2.80(s，3H)，3.26(s，3H)，3.40-3.60(m，2H)，3.74(s，3H)，3.92-4.12(m，1H)，4.20-4.72(m，3H)，5.22-5.38(m，1H)，6.56-6.80(m，3H)，7.02-7.24(m，11H)，7.74-8.22(m，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(N-(3-甲氧基芐基)-5-氧代-5-(2-(哌啶-1-基)乙基氨基)戊酰氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD30D)1.56(d，3H，J＝6.6Hz)，1.84-2.00(m，2H)，2.24-3.16(m，19H)，2.81(s，3H)，3.28(s，3H)，3.40-3.60(m，2H)，3.74(s，3H)，3.92-4.12(m，1H)，4.20-4.72(m，3H)，5.20-5.38(m，1H)，6.56-6.80(m，3H)，7.02-7.24(m，11H)，7.74-8.22(m，3H) 4-(((2R，3S)-2-羥基-3-(3-(N-甲基甲磺酰氨基)-5-((R)-1-苯基乙基氨甲酰基)苯甲酰氨基)-4-苯基丁基)(3-甲氧基芐基)氨基)-4-氧代丁酸2-(3，4-雙(芐氧基)-5-氧代-2，5-二氫呋喃-2-基)-2-羥基乙基酯 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.56(m，3H)，1.88-2.06(m，2H)，2.24-2.60(m，4H)，2.77(s，3H)，2.90-3.80 (m，2H)，3.25(s，3H)，3.75(s，3H)，3.92-4.68(m，8H)，4.78-5.34(m，5H)，6.60-6.82(m，3H)，7.04-7.42(m，21H)，7.74-8.26(m，3H) 4-(((2R，3S)-2-羥基-3-(3-(N-甲基甲磺酰氨基)-5-((R)-1-苯基乙基氨甲?；?苯甲酰氨基)-4-苯基丁基)(3-甲氧基芐基)氨基)-4-氧代丁酸2-(3，4-二羥基-5-氧代-2，5-二氫呋喃-2-基)-2-羥基乙基酯 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.55(d，3H，J＝6.6Hz)，2.40-3.42(m，9H)，2.83(s，3H)，3.25(s，3H)，3.74(s，3H)，3.90-4.36(m，5H)，4.60-4.74(m，2H)，5.18-5.28(m，1H)，6.60-6.80(m，3H)，7.04-7.39(m，11H)，7.58-8.00(m，3H) N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-((R)-1-(4-(羥基甲基)唑-2-基)乙基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)間苯二甲酰胺 1HNMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.59(d，3H，J＝7.2Hz)，2.60-3.02(m，4H)，2.83(s，3H)，3.26(s，3H)，3.66-3.82(m，3H)，3.73(s，3H)，4.24-4.36(m，1H)，4.44(s.2H)5.32-5.42(m，1H)，6.74-6.83(m，3H)，7.04-7.24(m，6H)，7.53(s.1H)7.75-7.77(m，1H)，7.92-7.96(m，1H)，8.05-8.08(m，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-((4-(羥基甲基)唑-2-基)甲基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)間苯二甲酰胺 1HNMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)2.70-3.08(m，4H)，2.84(s，3H)，3.27(s，3H)，3.68-3.85(m，3H)，3.73(s，3H)，4.26-4.35(m，1H)，4.46(s.2H)，4.64(s.2H)，6.74-6.88(m，3H)，7.07-7.24(m，6H)，7.53(s.1H)7.75-7.77(m，1H)，7.93-7.96(m，1H)，8.05-8.08(m，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-(4-甲基唑-2-基)乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.63(d，3H，J＝7.2Hz)，2.70-3.04(m，4H)，2.85(s，3H)，3.31(s，3H)，3.74-3.88(m，3H)，3.75(s，3H)，4.32-4.39(m，1H)，5.36-5.44(m，1H)，6.76-6.90(m，3H)，7.12-7.26(m，6H)，7.30-7.32(m.1H)7.83-7.84(m，1H)，7.97-7.99(m，1H)，8.10-8.12(m，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)2.17(s，3H)，2.74-3.16(m，7H)3.64-3.90(m，3H)，3.78(s，3H)，4.34-4.44(m，1H)，4.77-4.84(m，2H)，6.79-6.96(m，3H)，7.00-7.50(m，7H)，7.50-7.89(m.4H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((R)-2-羥基-1-苯基乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.58(d，3H，J＝6.6Hz)，2.50-3.04(m，4H)，2.84(s，3H)，3.28(s，3H)，3.62-3.86(m，4H)，4.30-4.38(m，1H)，5.20-5.32(m，1H)，7.04-7.20(m，15H)，7.76-7.78(m，1H)，7.85-7.87(m，1H)，8.05-8.08(m，1H). N1-((2，5-二甲基唑-4-基)甲基)-N3-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N1-甲基間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)2.24-2.60(m，6H)，2.76-3.14(m，7H)3.64-3.88(m，3H)，3.76(s，3H)，4.28-4.36(m，1H)，4.40-4.60(m，2H)，6.79-6.92(m，3H)，7.00-7.50(m，6H)，7.50-7.89(m.4H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-(噻唑-2-基)乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.72(d，3H，J＝6.9Hz)，2.70-3.01(m，4H)，2.84(s，3H)，3.29(s，3H)，3.70-3.89(m，3H)，3.75(s，3H)，4.27-4.36(m，1H)，5.54-5.66(m，1H)，6.76-6.90(m，3H)，7.08-7.30(m，6H)，7.67-7.69(m.1H)7.81-7.83(m，1H)，7.95-7.98(m，1H)，8.10-8.13(m，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.62(d，3H，J＝7.2Hz)，2.60-3.02(m，4H)，2.82(s，3H)，3.32(s，3H)，3.68-3.78(m，3H)，3.75(s，3H)，4.21-4.33(m，1H)，5.24-5.38(m，1H)，6.74-6.84(m，3H)，7.11-7.40(m，11H)，7.90-7.92(m.1H)7.94-7.96 (m，1H)，8.17-8.19(m，1H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((2-甲基噻唑-4-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)2.64(s，3H)，2.76-3.14(m，7H)3.66-3.80(m，3H)，3.78(s，3H)，4.30-4.38(m，1H)，4.68-4.84(m，2H)，6.78-6.93(m，3H)，7.04-7.40(m，7H)，7.44-7.82(m.4H). N1-((4-乙基噻唑-2-基)甲基)-N3-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N1-甲基間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.26(t，3H，J＝7.5Hz)，2.62-3.14(m，9H)3.64-3.82(m，3H)，3.75(s，3H)，4.28-4.36(m，1H)，4.84-5.02(m，2H)，6.78-6.91(m，3H)，7.08-7.426(m，7H)，7.33-7.78(m.4H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((2-甲基唑-4-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)2.54(s，3H)，2.74-3.10(m，7H)3.68-3.84(m，3H)，3.75(s，3H)，4.27-4.36(m，1H)，4.48-4.62(m，2H)，6.76-6.90(m，3H)，7.07-7.27(m，7H)，7.36-7.84(m.4H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((S)-1-(3-甲氧基苯基)乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)，δ7.670(m，2H)，7.526(m，1H)，7.408(m 1H)，7.237-7.107(m，6H)，6.889-6.739(m，4H)，4.931(br，1.3H)，4.630(br，0.7H)，4.293(m，1H)，3.765(s，3H)，3.783-3.633(m，2H)，3.020-2.858(m，5H)，2.646(m，2H)，2.421(s，3H)，1.398(d，J＝6.6Hz，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-((R)-1-(3-甲氧基苯基)乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)，δ7.732(m，2H)，7.532(m，1H)，7.387(m 1H)，7.277-7.113(m，6H)，7.091-6.746(m，4H)，4.932(br，1.4H)，4.633(br，0.6H)，4.333(m，1H)，3.798-3.681(m，2H)，3.731(s，3H)，2.976(s，3H)，2.846(m，2H)，2.772-2.505(m，2H)，2.421(s，3H)，1.426(d，J＝6.3Hz，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-(吡嗪-2-基甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)2.54-3.06 (m，7H)，3.65-3.84(m，6H)，4.25-4.36(m，1H)，4.76-4.92(m，2H)，6.74-6.90(m，3H)，7.08-7.82(m，10H)，8.30-8.71(m.3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(4-甲基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)2.19(s，3H)，2.40(s，3H)，2.63-2.96(m，7H)，3.61-3.69(m，3H)，4.16-4.22(m，1H)，4.78-4.85(s，2H)，6.78(s，1H)，6.99-7.17(m，10H)，7.25-7.58(m，3H). N1-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-5-(甲磺酰基甲基)-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1HNMR(300MHz，CDCl3)2.42(s，3H)，2.62-3.18(m，10H)，3.72-3.83(m，6H)，4.2(s，2H)，4.14-4.20(m，1H)，4.824.90(s，2H)，6.76-6.92(m，4H)，7.21-7.38(m，6H)，7.67-8.18(m，3H). N1-環(huán)己基-N3-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-N1-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)

7.69-7.15(m，1H)，7.05-6.81(m，5H)，4.93(broad s，2H)，4.40(m，1H)，3.87-3.68(m，6H)，3.49(broad s，1H)，3.03-2.81(m，5H)，2.43(s，4H)，1.72-1.54(m，7H)，1.01-0.86(m，4H). N1-環(huán)丙基-N3-((2S，3R)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-甲氧基-N1-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.32-7.16(m，10H)，6.93-6.79(m，4H)，4.98(broad s，2H)，4.37(m，1H)，4.00-3.74(m，9H)，3.10-2.77(m，4H)，2.45(s，3H)，0.58-0.48(m，4H). N1-((2S，3S)-3-羥基-4-(3-甲氧基芐氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3+CD3OD)1.62(d，3H，J＝7.2Hz)，2.60-3.02(m，4H)，2.82(s，3H)，3.32(s，3H)，3.68-3.78(m，3H)，3.75(s，3H)，4.21-4.33(m，1H)，5.24-5.38(m，1H)，6.74-6.84(m，3H)，7.11-7.40(m，11H)，7.90-7.92(m.1H)7.94-7.96(m，1H)，8.17-8.19(m，1H). N1-環(huán)丙基-N3-((2S，3R)-3-羥基-4-((5-異丙基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N1-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)間苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.32-7.16(m，10H)，6.93-6.79(m，4H)，4.98(broad s，21-1)，4.37(m，1H)，4.00-3.74(m，9H)，3.10-2.77(m，4H)，2.45(s，3H)，0.58-0.48(m，4H). 實(shí)施例5memapsin 1、memapsin 2和組織蛋白酶D催化活性的抑制 將底物肽NH3-ELDLAVEFWHDR-CO2(用于memapsin 2、memapsin1和組織蛋白酶D的抑制試驗(yàn))以2mg/ml溶于DMSO中，用0.1M乙酸鈉以1∶100進(jìn)行稀釋?zhuān)囼?yàn)前pH正好為4.0。將溶于DMSO中的抑制劑用0.1M乙酸鈉稀釋?zhuān)琾H為4.0(1∶100稀釋)。將在pH4緩沖液中的抑制劑溶液的50ml等分試樣與150ml 0.1M含有100-200nM memapsin 1、memapsin 2或組織蛋白酶D的乙酸鈉合并。于37℃預(yù)先孵育，然后通過(guò)加入50ml用pH4緩沖液稀釋的底物開(kāi)始蛋白水解試驗(yàn)，于37℃繼續(xù)孵育。以時(shí)間間隔移去等分試樣，將其與等體積的MALDI-TOF基質(zhì)(在丙酮中的α-羥基肉桂酸，20mg/ml)合并，立即在不銹鋼MALDI樣品板上點(diǎn)樣，一式兩份。在校內(nèi)的分子生物學(xué)資源中心，在PE Biosystems Voyager DE儀器上進(jìn)行了MALDI-TOF質(zhì)譜法。該儀器以具有150ns延遲的正極模式在25,000加速電壓下進(jìn)行操作。在650-2000原子質(zhì)量單位的范圍內(nèi)檢測(cè)了具有質(zhì)荷比(m/z)的離子。通過(guò)Voyager Data Explorer模塊分析了數(shù)據(jù)，得到所給混合物中底物和相應(yīng)產(chǎn)物的質(zhì)量類(lèi)別的離子強(qiáng)度數(shù)據(jù)。將相對(duì)產(chǎn)物的形成計(jì)算為產(chǎn)物的信號(hào)強(qiáng)度與產(chǎn)物和相應(yīng)底物的信號(hào)強(qiáng)度總和的比。使用如下模型、由表示初始形成15％產(chǎn)物的數(shù)據(jù)的非線(xiàn)性回歸分析得到每單位時(shí)間形成的相對(duì)產(chǎn)物 1-e-kT， 其中k為相對(duì)水解速率常數(shù)，T為時(shí)間(秒)?；蛘?，使用熒光切割測(cè)定法(fluorogenic cleavage assay，Ermolieff，J.等人，Biochemistry，3912450-12456(2000))測(cè)定了相對(duì)水解速率。來(lái)自任一方法的初始速率相對(duì)于未抑制的對(duì)照而言被表達(dá)，通過(guò)非線(xiàn)性擬合為競(jìng)爭(zhēng)性抑制的緊密結(jié)合模型(Bieth，J.，Bayer-Symposium V蛋白酶抑制劑，第463-469頁(yè)，Spinger-Varlag，柏林(1994))測(cè)定了抑制常數(shù)Ki。結(jié)果示于上表1(M2K、CDK和M1K欄分別表示對(duì)memapsin 2、組織蛋白酶D和memapsin 1得到的Ki值)。
實(shí)施例6細(xì)胞AβIC50的測(cè)定 在A(yíng)β生成的細(xì)胞試驗(yàn)中測(cè)定了化合物對(duì)memapsin 2催化活性的效能。成功穿過(guò)細(xì)胞膜的化合物表明它們具有抑制內(nèi)涵體腔(endosomalcompartment)中memapsin 2催化活性、從而阻斷Aβ生成的能力。將過(guò)表達(dá)具有倫敦和瑞典型突變的人APP695的中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞以10％匯合接種在多孔板中。將化合物溶于DMSO中至濃度接近1mM，用培養(yǎng)基稀釋至終濃度接近4μM(最終為0.4％DMSO)。將化合物進(jìn)行系列稀釋?zhuān)诮臃N后48小時(shí)應(yīng)用于多孔板中的細(xì)胞。在5％CO2、37℃下繼續(xù)孵育24小時(shí)。移去等分試樣，使用夾心ELISA(BioSource International)對(duì)Aβ40含量進(jìn)行測(cè)定。相對(duì)于對(duì)照孵育而言，將Aβ40的量相對(duì)于化合物的濃度范圍擬合為4-參數(shù)IC50模型。結(jié)果在上表1中提供(標(biāo)注為“細(xì)胞”的欄)。
權(quán)利要求
1.具有下式的化合物
其中
R1是鹵素、-OH、-CF3、-NO2、-NR8R9、-OR10、-S(O)nR11、-C(O)R12、氫、取代或未取代的C3-C20烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基或者-L4-Y；
R5是鹵素、-OH、-CF3、-NO2、-NR8R9、-OR10、-S(O)nR11、-C(O)R12、氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基；
R2和R3獨(dú)立地是鹵素、-CF3、-NO2、-NR8R9、-OR10、-S(O)nR11、-C(O)R12、氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基或者-L4-Y；
R4是鹵素、-OH、-CF3、-NO2、-NR8R9、-OR10、-S(O)nR11、-C(O)R12、氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基或者-L4-Y；
R6和R7獨(dú)立地是-S(O)2R11、-C(O)R12、-NR8R9、氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基或者-L4-Y；
n獨(dú)立地是0、1或2；
R8獨(dú)立地是-C(O)R13、-S(O)2R14、氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基；
R9獨(dú)立地是氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基；
R10獨(dú)立地是-C(O)R13、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基；
R11獨(dú)立地是氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基，其中如果n是2，則R11任選是-NR15R16，并且其中如果n是1或2，則R11不是氫；
R12獨(dú)立地是-NR18R19、-OR19、氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基；
R13獨(dú)立地是-OR19、-NR18R19、氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基，
R14獨(dú)立地是-NR18R19、氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基，其中
R18和R19獨(dú)立地是氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基；
R15和R16獨(dú)立地是氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基；
L1和L3獨(dú)立地是價(jià)鍵、-NR17-、-S(O)q-、取代或未取代的亞烷基或者取代或未取代的雜亞烷基；
L2是取代或未取代的亞烷基、-NR17-、-S(O)q-或者取代或未取代的雜亞烷基；
R17獨(dú)立地是氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基；
q獨(dú)立地是0、1或2；
A1和A2獨(dú)立地是取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基；
Y是載體部分；且
L4是價(jià)鍵、-OP(OH)2O-、-C(O)OR20-、-C(O)NHR21-、-S(O)2NHR22-、取代或未取代的亞烷基、取代或未取代的雜亞烷基或者肽基連接基，其中
R20、R21和R22獨(dú)立地是取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是氫、鹵素、-NR8R9、-OR10或-S(O)nR11。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是氫、-NR9S(O)nR14、-OR10或-S(O)nR11。
4.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是氫或-NR9S(O)nR14。
5.權(quán)利要求1的化合物，其中R5、R8、R9、R10和R11獨(dú)立地是氫、取代或未取代的C1-C20烷基、取代或未取代的2至20元雜烷基、取代或未取代的C5-C7環(huán)烷基、取代或未取代的5至7元雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基或者-L4-Y。
6.權(quán)利要求1的化合物，其中取代或未取代的亞烷基各自是R23-取代或未取代的C1-C20亞烷基，取代或未取代的雜亞烷基各自是R23-取代或未取代的2至20元雜亞烷基，取代或未取代的烷基各自是R23-取代或未取代的C1-C20烷基，取代或未取代的雜烷基各自是R23-取代或未取代的2至20元雜烷基，取代或未取代的環(huán)烷基各自是R23-取代或未取代的C5-C7環(huán)烷基，取代或未取代的雜環(huán)烷基各自是R23-取代或未取代的5至7元雜環(huán)烷基，取代或未取代的雜芳基各自是R24-取代或未取代的雜芳基，取代或未取代的芳基各自是R24-取代或未取代的芳基，其中
R23獨(dú)立地是氧代基、鹵素、-CN、-CF3、-OCF3、-OR27、-S(O)tR27、-OCH3、-C(O)R27、-NR28R29、-NR28C(O)R27、-C(O)NR28R29、R25-取代或未取代的C1-C20烷基、R25-取代或未取代的2至20元雜烷基、R25-取代或未取代的C5-C7環(huán)烷基、R25-取代或未取代的5至7元雜環(huán)烷基、R26-取代或未取代的雜芳基或者R26-取代或未取代的芳基；
R24獨(dú)立地是鹵素、-CN、-CF3、-OCF3、-OCH3、OR27、-S(O)tR27、-OCH3、-C(O)R27、-NR28R29、-NR28C(O)R27、-C(O)NR28R29、R25-取代或未取代的C1-C20烷基、R25-取代或未取代的2至20元雜烷基、R25-取代或未取代的C5-C7環(huán)烷基、R25-取代或未取代的5至7元雜環(huán)烷基、R26-取代或未取代的雜芳基或者R26-取代或未取代的芳基；
t獨(dú)立地是0、1或2；
R27、R28和R29獨(dú)立地是氫、R25-取代或未取代的C1-C20烷基、R25-取代或未取代的2至20元雜烷基、R25-取代或未取代的C5-C7環(huán)烷基、R25-取代或未取代的5至7元雜環(huán)烷基、R26-取代或未取代的雜芳基或者R26-取代或未取代的芳基，其中如果t是1或2，則R27不是氫，并且其中
R25獨(dú)立地是氧代基、鹵素、-CN、-OH、-CF3、-OCF3、-OCH3、未取代的C1-C20烷基、未取代的2至20元雜烷基、未取代的C5-C7環(huán)烷基、未取代的5至7元雜環(huán)烷基、未取代的芳基或未取代的雜芳基，并且
R26獨(dú)立地是鹵素、-CN、-OH、-CF3、-OCF3、-OCH3、未取代的C1-C20烷基、未取代的2至20元雜烷基、未取代的C5-C7環(huán)烷基、未取代的5至7元雜環(huán)烷基、未取代的芳基或未取代的雜芳基。
7.權(quán)利要求6的化合物，其中R2、R3、R8、R9、R10、R11和R12獨(dú)立地是R23-取代或未取代的C1-C20烷基、R23-取代或未取代的2至20元雜烷基、R23-取代或未取代的C5-C7環(huán)烷基、R23-取代或未取代的5至7元雜環(huán)烷基、R24-取代或未取代的雜芳基或者R24-取代或未取代的芳基。
8.權(quán)利要求7的化合物，其中
R27、R28和R29獨(dú)立地是氫、R25-取代或未取代的C1-C20烷基或者R25-取代或未取代的2至20元雜烷基；
R23獨(dú)立地是氧代基、鹵素、-CN、-CF3、-OCF3、-OR27、-S(O)tR27、-OCH3、-C(O)R27、-NR28R29、-NR28C(O)R27、-C(O)NR28R29、R25-取代或未取代的C1-C20烷基或者R25-取代或未取代的2至20元雜烷基；且R24獨(dú)立地是鹵素、-CN、-CF3、-OCF3、-OCH3、-OR27、-S(O)tR27、-OCH3、-C(O)R27、-NR28R29、-NR28C(O)R27、-C(O)NR28R29、R25-取代或未取代的C1-C20烷基或者R25-取代或未取代的2至20元雜烷基。
9.權(quán)利要求6的化合物，其中R2、R3、R8、R9、R10、R11和R12是取代或未取代的C1-C20烷基或者取代或未取代的雜環(huán)烷基。
10.權(quán)利要求6的化合物，其中R2、R3、R8、R9、R10、R11和R12是未取代的C1-C20烷基。
11.權(quán)利要求6的化合物，其中R2、R3、R8、R9、R10、R11和R12是未取代的C1-C5烷基。
12.權(quán)利要求1的化合物，其中R2和R3獨(dú)立地是氫、鹵素或未取代的C1-C20烷基。
13.權(quán)利要求6的化合物，其中R5是R23-取代或未取代的C5-C7環(huán)烷基、R23-取代或未取代的5至7元雜環(huán)烷基、R24-取代或未取代的雜芳基或者R24-取代或未取代的芳基。
14.權(quán)利要求6的化合物，其中R5是R24-取代或未取代的雜芳基或者R24-取代或未取代的芳基。
15.權(quán)利要求6的化合物，其中R5是R24-取代或未取代的芳基。
16.權(quán)利要求1的化合物，其中R5選自取代或未取代的四氫呋喃基、取代或未取代的四氫吡喃基和取代或未取代的吡啶基甲基。
17.權(quán)利要求16的化合物，其中L3是未取代的C1-C5烷基。
18.權(quán)利要求17的化合物，其中L3是亞甲基。
19.權(quán)利要求15的化合物，其中R24是鹵素、-CN、-OH、-CF3、未取代的C1-C20烷基或未取代的烷氧基。
20.權(quán)利要求19的化合物，其中R5是二氟苯基。
21.權(quán)利要求15的化合物，其中R5是苯基。
22.權(quán)利要求21的化合物，其中L3是未取代的C1-C3亞烷基。
23.權(quán)利要求21的化合物，其中L3是未取代的2至5元雜亞烷基。
24.權(quán)利要求23的化合物，其中L3是-(CH2)e-S-，其中符號(hào)e表示0至10的整數(shù)。
25.權(quán)利要求24的化合物，其中e是1。
26.權(quán)利要求1的化合物，其中A1和A2獨(dú)立地是取代或未取代的C5-C7環(huán)烷基、取代或未取代的5至7元雜環(huán)烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。
27.權(quán)利要求1的化合物，其中A2是取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。
28.權(quán)利要求1的化合物，其中A1和A2獨(dú)立地是取代或未取代的苯基、取代或未取代的吡唑基、取代或未取代的呋喃基、取代或未取代的咪唑基、取代或未取代的異唑基、取代或未取代的二唑基、取代或未取代的唑基、取代或未取代的吡咯基、取代或未取代的吡啶基、取代或未取代的嘧啶基、取代或未取代的噠嗪基、取代或未取代的噻唑基、取代或未取代的三唑基、取代或未取代的噻吩基、取代或未取代的二氫噻吩并吡唑基、取代或未取代的硫茚基、取代或未取代的咔唑基、取代或未取代的苯并咪唑基、取代或未取代的苯并噻吩基、取代或未取代的苯并呋喃基、取代或未取代的吲哚基、取代或未取代的喹啉基、取代或未取代的苯并三唑基、取代或未取代的苯并噻唑基、取代或未取代的苯并唑基、取代或未取代的苯并咪唑基、取代或未取代的異喹啉基、取代或未取代的異吲哚基、取代或未取代的吖啶基、取代或未取代的benzoisazolyl(苯并異唑基)、取代或未取代的二甲基乙內(nèi)酰脲、取代或未取代的吡嗪基、取代或未取代的四氫呋喃基、取代或未取代的吡咯啉基、取代或未取代的吡咯烷基、取代或未取代的嗎啉基、取代或未取代的吲哚基、取代或未取代的二氮雜?；⑷〈蛭慈〈牡s?；?、取代或未取代的硫雜?；?、取代或未取代的哌啶基或者取代或未取代的氧雜?；?br> 29.權(quán)利要求1的化合物，其中A2是取代或未取代的芳基。
30.權(quán)利要求1的化合物，其中A2是取代或未取代的苯基。
31.權(quán)利要求1的化合物，其中A2是取代或未取代的雜芳基。
32.權(quán)利要求1的化合物，其中A2是取代或未取代的吡啶基。
33.權(quán)利要求1的化合物，其中L3和L1獨(dú)立地是價(jià)鍵、未取代的亞烷基或未取代的雜亞烷基。
34.權(quán)利要求1的化合物，其中L3和L1獨(dú)立地是價(jià)鍵、未取代的C1-C20亞烷基或未取代的2至20元雜亞烷基。
35.權(quán)利要求1的化合物，其中L3和L1獨(dú)立地是價(jià)鍵、未取代的C1-C5亞烷基或未取代的2至5元雜亞烷基。
36.權(quán)利要求1的化合物，其中L3是C1-C5亞烷基。
37.權(quán)利要求1的化合物，其中L1是支鏈未取代的C1-C5亞烷基。
38.權(quán)利要求1的化合物，其中L2是未取代的C1-C20亞烷基或未取代的2至20元雜亞烷基。
39.權(quán)利要求1的化合物，其中L2是未取代的C1-C5亞烷基或未取代的2至5元雜亞烷基。
40.權(quán)利要求1的化合物，其中L2是未取代的C1-C5亞烷基。
41.權(quán)利要求1的化合物，其中L2是支鏈未取代的C1-C5亞烷基。
42.權(quán)利要求1的化合物，其中L2是亞甲基。
43.權(quán)利要求40的化合物，其中A2是取代或未取代的雜芳基或者取代或未取代的芳基。
44.權(quán)利要求43的化合物，其中A1是取代或未取代的雜芳基或者取代或未取代的芳基。
45.權(quán)利要求44的化合物，其中A2是取代或未取代的苯基或者取代或未取代的吡啶基。
46.權(quán)利要求44的化合物，其中A1是取代或未取代的苯基或者取代或未取代的吡啶基。
47.權(quán)利要求45的化合物，其中L2是亞甲基。
48.權(quán)利要求1的化合物，其中如果R1是-NR8R9且R8是-S(O)2R14，則R6是氫。
49.權(quán)利要求48的化合物，其中R7是取代或未取代的烷基。
50.權(quán)利要求48的化合物，其中R7是未取代的C1-C5烷基。
51.權(quán)利要求48的化合物，其中R2和R3是氫。
52.權(quán)利要求1的化合物，其中如果R1是氫，則R6不是氫。
53.權(quán)利要求52的化合物，其中R6是取代或未取代的烷基。
54.權(quán)利要求52的化合物，其中R6是未取代的C1-C5烷基。
55.權(quán)利要求52的化合物，其中R6是取代或未取代的C3-C6環(huán)烷基。
56.權(quán)利要求52的化合物，其中R6是取代或未取代的環(huán)丙基。
57.權(quán)利要求54的化合物，其中R7是氫。
58.權(quán)利要求57的化合物，其中R2和R3是氫。
59.在需要其的受治療者中治療阿爾茨海默病的方法，該方法包括給需要這種治療的受治療者施用有效量的權(quán)利要求1的化合物。
60.降低memapsin 2催化活性的方法，該方法包括使memapsin 2蛋白質(zhì)與有效量的權(quán)利要求1的化合物接觸。
61.權(quán)利要求60的方法，其中所述的memapsin 2β-分泌酶在細(xì)胞內(nèi)接觸。
62.相對(duì)于memapsin 1催化活性而言選擇性降低memapsin 2催化活性的方法，該方法包括在memapsin 1β-分泌酶的存在下使memapsin 2蛋白質(zhì)與有效量的權(quán)利要求1的化合物接觸。
63.相對(duì)于組織蛋白酶D催化活性而言選擇性降低memapsin 2催化活性的方法，該方法包括在組織蛋白酶D的存在下使memapsin 2蛋白質(zhì)與有效量的權(quán)利要求1的化合物接觸。
64.相對(duì)于memapsin 1催化活性和組織蛋白酶D催化活性而言選擇性降低memapsin 2催化活性的方法，該方法包括在memapsin 1 β-分泌酶和組織蛋白酶D的存在下使memapsin 2蛋白質(zhì)與有效量的權(quán)利要求1的化合物接觸。
全文摘要
本發(fā)明提供了通式(I)的新的β-分泌酶(secretase)抑制劑、使用它們來(lái)治療阿爾茨海默病的方法以及使用它們來(lái)降低memapsin 2催化活性的方法，其中變量A1、A2、L1、L2、L3、R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7如權(quán)利要求中所定義。
文檔編號(hào)C07C233/00GK101198583SQ200680020719
公開(kāi)日2008年6月11日 申請(qǐng)日期2006年4月10日 優(yōu)先權(quán)日2005年4月8日
發(fā)明者A·K·高希, N·庫(kù)馬拉古魯巴蘭, 劉春峰, T·德瓦薩穆德拉姆, 暉 雷, L·斯旺森, S·安卡拉, J·唐, G·比爾塞爾 申請(qǐng)人:科門(mén)蒂斯公司, 伊利諾斯大學(xué)理事會(huì), 俄克拉荷馬州醫(yī)療研究基金會(huì), 珀杜研究基金會(huì)