專利名稱：吡咯并吡啶，吡咯并嘧啶和吡唑并吡啶化合物，包含它們的組合物及它們的使用方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及吡咯并吡啶，吡咯并嘧啶和吡唑并吡啶化合物，包含它們的組合物，以及它們的使用方法。

背景技術(shù)：
據(jù)報道，氨基酸L-脯氨酸在調(diào)節(jié)哺乳動物腦部的突觸傳遞中起作用。參見，例如，Crump等人，Molecular and Cellular Neuroscience，1325-29(1999)。例如，由鳥氨酸合成L-脯氨酸的突觸小體生物合成途徑已經(jīng)被報道，并且已經(jīng)觀察到了高親和性Na+依賴性突觸小體對L-脯氨酸的攝取。Yoneda等人，Brain Res.，239479-488(1982)；Balcar等人，Brain Res.，102143-151(1976)。
一般而言，神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)通常具有滅活信號發(fā)送的機制，其中有許多通過Na+依賴性轉(zhuǎn)運蛋白(transporter)的作用而起作用。在這種情況下，已經(jīng)有人描述了脯氨酸的Na+依賴性轉(zhuǎn)運蛋白，并克隆了分子實體(人SLC6A7)。參見，例如，美國專利5,580,775和5,759,788。但轉(zhuǎn)運蛋白的具體作用仍不清楚。例如，人的Na+依賴性脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白通常被定位于突觸末梢，這與在神經(jīng)遞質(zhì)信號發(fā)送中的作用一致。然而，沒有高親和性受體被發(fā)現(xiàn)用于脯氨酸，這暗示其是神經(jīng)調(diào)質(zhì)而不是神經(jīng)遞質(zhì)。Shafqat S.，等人，Molecular Pharmacology 48219-229(1995)。
Na+依賴性脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白在背根神經(jīng)節(jié)中表達的事實使一些人提出了其可能參與傷害感受，和抑制轉(zhuǎn)運蛋白的化合物可以用來治療疼痛的建議。參見，例如，美國專利申請20030152970A1。但該建議尚未有實驗數(shù)據(jù)的支持。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明包括吡咯并吡啶，吡咯并嘧啶和吡唑并吡啶化合物，包含它們的藥物組合物，以及它們的使用方法。
本發(fā)明的一方面包括式I的化合物
及其藥學(xué)上可接受的鹽和溶劑合物，其各種取代基在本文中定義。
另一方面包括式II的化合物
及其藥學(xué)上可接受的鹽和溶劑合物，其各種取代基在本文中定義。
另一方面包括式III的化合物
(III) 及其藥學(xué)上可接受的鹽和溶劑合物，其各種取代基在本文中定義。
優(yōu)選的化合物抑制脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白，并且特定化合物在幾乎不影響多巴胺或甘氨酸轉(zhuǎn)運蛋白的條件下抑制脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白。
本發(fā)明的另一方面包括本發(fā)明的化合物(即，本文所公開的化合物)的藥物組合物。
另一方面包括抑制脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白的方法，其包括使所述轉(zhuǎn)運蛋白與本發(fā)明的化合物接觸。
另一方面包括用本發(fā)明的化合物改善認知性能，和治療，控制和/或預(yù)防各種疾病和病癥的方法。
發(fā)明詳述 本發(fā)明部分地基于如下發(fā)現(xiàn)由基因圖定位為5q31-q32的人基因(SLC6A7基因；GENBANK登記號NM_014228)編碼的脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白可以是哺乳動物心理功能的有效調(diào)節(jié)劑。具體而言，人們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，不表達SLC6A7基因的鼠同源基因(ortholog)的功能產(chǎn)品的基因工程小鼠與對照動物相比，顯示出認知功能，注意廣度，學(xué)習(xí)和記憶的顯著增強。
鑒于該發(fā)現(xiàn)，與SLC6A7編碼區(qū)相關(guān)的蛋白產(chǎn)品被用來發(fā)現(xiàn)可以改善認知性能，并且可以用于治療，預(yù)防和/或控制如下疾病和病癥的化合物，所述疾病和病癥例如為阿爾茨海默氏病，孤獨癥，認知障礙，癡呆，學(xué)習(xí)障礙和短期及長期記憶喪失。
1.定義 除非另有說明，術(shù)語“烯基”表示含有2-20(例如，2-10或2-6)個碳原子，并且包含至少一個碳-碳雙鍵的直鏈，支鏈和/或環(huán)狀烴。代表性的烯基部分包括乙烯基，烯丙基，1-丁烯基，2-丁烯基，異丁烯基，1-戊烯基，2-戊烯基，3-甲基-1-丁烯基，2-甲基-2-丁烯基，2，3-二甲基-2-丁烯基，1-己烯基，2-己烯基，3-己烯基，1-庚烯基，2-庚烯基，3-庚烯基，1-辛烯基，2-辛烯基，3-辛烯基，1-壬烯基，2-壬烯基，3-壬烯基，1-癸烯基，2-癸烯基和3-癸烯基。
除非另有說明，術(shù)語“烷基”表示含有1-20(例如，1-10或1-4)個碳原子的直鏈，支鏈和/或環(huán)狀(“環(huán)烷基”)烴。含有1-4個碳原子的烷基部分被稱為“低級烷基”。烷基的例子包括甲基，乙基，丙基，異丙基，正丁基，叔丁基，異丁基，戊基，己基，異己基，庚基，4，4-二甲基戊基，辛基，2，2，4-三甲基戊基，壬基，癸基，十一烷基和十二烷基。環(huán)烷基部分可以是單環(huán)或多環(huán)，例子包括環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，環(huán)己基和金剛烷基。烷基部分的其它例子具有直鏈，支鏈和/或環(huán)狀部分(例如，1-乙基-4-甲基-環(huán)己基)。術(shù)語“烷基”包括飽和烴及烯基和炔基部分。
除非另有說明，術(shù)語“烷基芳基”或“烷基-芳基”表示與芳基部分結(jié)合的烷基部分。
除非另有說明，術(shù)語“烷基雜芳基”或“烷基-雜芳基”表示與雜芳基部分結(jié)合的烷基部分。
除非另有說明，術(shù)語“烷基雜環(huán)”或“烷基-雜環(huán)”表示與雜環(huán)部分結(jié)合的烷基部分。
除非另有說明，術(shù)語“炔基”表示含有2-20(例如，2-6)個碳原子，并且包含至少一個碳-碳叁鍵的的直鏈，支鏈和/或環(huán)狀烴。代表性的炔基部分包括乙炔基，丙炔基，1-丁炔基，2-丁炔基，1-戊炔基，2-戊炔基，3-甲基-1-丁炔基，4-戊炔基，1-己炔基，2-己炔基，5-己炔基，1-庚炔基，2-庚炔基，6-庚炔基，1-辛炔基，2-辛炔基，7-辛炔基，1-壬炔基，2-壬炔基，8-壬炔基，1-癸炔基，2-癸炔基和9-癸炔基。
除非另有說明，術(shù)語“烷氧基”表示-O-烷基。烷氧基的例子包括但不限于-OCH3，-OCH2CH3，-O(CH2)2CH3，-O(CH2)3CH3，-O(CH2)4CH3和-O(CH2)5CH3。
除非另有說明，術(shù)語“芳基”表示由碳原子和氫原子組成的芳香性環(huán)或芳香性或部分芳香性環(huán)體系。芳基部分可以包括結(jié)合或稠合在一起的多個環(huán)。芳基部分的例子包括蒽基，薁基(azulenyl)，聯(lián)苯基，芴基，茚滿，茚基，萘基，菲基，苯基，1，2，3，4-四氫-萘和甲苯基。
除非另有說明，術(shù)語“芳基烷基”或“芳基-烷基”表示與烷基部分結(jié)合的芳基部分。
除非另有說明，術(shù)語“DTIC50”表示用下文實施例中所述測定法測得的對人重組多巴胺轉(zhuǎn)運蛋白的IC50。
除非另有說明，術(shù)語“GTIC50”表示用下文實施例中所述測定法測得的對人重組甘氨酸轉(zhuǎn)運蛋白的IC50。
除非另有說明，術(shù)語“鹵素”和“鹵”包括氟，氯，溴和碘。
除非另有說明，術(shù)語“雜烷基”是指其中至少一個碳原子被雜原子(例如，N，O或S)替代的烷基部分(例如，直鏈，支鏈或環(huán)狀烷基)。
除非另有說明，術(shù)語“雜芳基”表示其中至少一個碳原子被雜原子(例如，N，O或S)替代的芳基部分。例子包括吖啶基，苯并咪唑基，苯并呋喃基，苯并異噻唑基，苯并異噁唑基，苯并喹唑啉基，苯并噻唑基，苯并噁唑基，呋喃基，咪唑基，吲哚基，異噻唑基，異噁唑基，噁二唑基，噁唑基，2，3-二氮雜萘基，吡嗪基，吡唑基，噠嗪基，吡啶基，嘧啶基(pyrimidinyl)，嘧啶基(pyrimidyl)，吡咯基，喹唑啉基，喹啉基，四唑基，噻唑基和三嗪基。
除非另有說明，術(shù)語“雜芳基烷基”或“雜芳基-烷基”表示與烷基部分結(jié)合的雜芳基部分。
除非另有說明，術(shù)語“雜環(huán)”是指由碳，氫和至少一個雜原子(例如，N，O或S)組成的芳香性，部分芳香性或非芳香性單環(huán)或多環(huán)或環(huán)系統(tǒng)。雜環(huán)可以包括多個(即，兩個或更多個)稠合或結(jié)合在一起的環(huán)。雜環(huán)包括雜芳基。例子包括苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯基(dioxolyl)，2，3-二氫-苯并[1，4]二氧雜環(huán)己烯基(dioxinyl)，肉啉基，呋喃基，乙內(nèi)酰脲基(hydantoinyl)，嗎啉基，氧雜環(huán)丁烷基，環(huán)氧乙烷基，哌嗪基，哌啶基，吡咯烷酮基，吡咯烷基，四氫呋喃基，四氫吡喃基，四氫吡啶基，四氫嘧啶基，四氫噻吩基，四氫噻喃基和戊內(nèi)酰胺基。
除非另有說明，術(shù)語“雜環(huán)烷基”或“雜環(huán)-烷基”是指與烷基部分結(jié)合的雜環(huán)部分。
除非另有說明，術(shù)語“雜環(huán)烷基”是指非芳香性雜環(huán)。
除非另有說明，術(shù)語“雜環(huán)烷基烷基”或“雜環(huán)烷基-烷基“是指與烷基部分結(jié)合的雜環(huán)烷基部分。
除非另有說明，術(shù)語“控制”包括預(yù)防特定疾病或病癥在已患所述疾病或病癥的患者中的復(fù)發(fā)，和/或延長已患所述疾病或病癥的患者保持在緩解期的時間。該術(shù)語包括調(diào)節(jié)所述疾病或病癥的閾值，發(fā)展和/或持續(xù)時間，或者改變患者應(yīng)答所述疾病或病癥的方式。
除非另有說明，術(shù)語“藥學(xué)上可接受的鹽”是指由藥學(xué)上可接受的無毒酸或堿，包括無機酸和堿及有機酸和堿制備的鹽。適合的藥學(xué)上可接受的堿加成鹽包括但不限于由鋁，鈣，鋰，鎂，鉀，鈉和鋅制成的金屬鹽，或由賴氨酸，N，N’-二芐基乙二胺，氯普魯卡因，膽堿，二乙醇胺，乙二胺，葡甲胺(N-甲基葡萄糖胺)和普魯卡因制成的有機鹽。適合的無毒酸包括但不限于無機和有機酸，如乙酸，藻酸，鄰氨基苯甲酸，苯磺酸，苯甲酸，樟腦磺酸，檸檬酸，乙烯基磺酸，甲酸，富馬酸，糠酸，半乳糖醛酸，葡糖酸，葡糖醛酸，谷氨酸，羥基乙酸，氫溴酸，鹽酸，羥乙基磺酸，乳酸，馬來酸，蘋果酸，扁桃酸，甲磺酸，粘酸，硝酸，雙羥萘酸，泛酸，苯乙酸，磷酸，丙酸，水楊酸，硬脂酸，琥珀酸，對氨基苯磺酸，硫酸，酒石酸和對甲苯磺酸。具體的無毒酸包括鹽酸，氫溴酸，磷酸，硫酸和甲磺酸。具體的鹽的例子因此包括鹽酸鹽和甲磺酸鹽。其它是本領(lǐng)域公知的。參見，例如，Remington’s Pharmaceutical Sciences(第18版，Mack Publishing，EastonPA1990)和RemingtonThe Science and Practice of Pharmacy(第19版，Mack Publishing，Easton PA1995)。
除非另有說明，術(shù)語“預(yù)防”包括發(fā)生在患者開始患特定疾病或病癥之前的，抑制或降低所述疾病或病癥的嚴(yán)重度的行為。
除非另有說明，化合物的“預(yù)防有效量”是足以預(yù)防疾病或病癥或與該疾病或病癥相關(guān)的一種或多種癥狀，或預(yù)防其復(fù)發(fā)的量?；衔锏念A(yù)防有效量表示在該疾病或病癥的預(yù)防中提供預(yù)防好處的單獨或與其它藥劑組合的治療劑的量。術(shù)語“預(yù)防有效量”可以包括改善總體預(yù)防或增強另一種預(yù)防劑的預(yù)防效力的量。
除非另有說明，術(shù)語“PTIC50”表示用下文實施例中所述測定法測得的對人重組Na+依賴性脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白的IC50。
除非另有說明，術(shù)語“特定脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白抑制劑”表示PTIC50小于約200nM的化合物。
除非另有說明，術(shù)語“取代的”，當(dāng)用于描述化學(xué)結(jié)構(gòu)或部分時，是指該結(jié)構(gòu)或部分的衍生物，其中一個或多個其氫原子被化學(xué)部分或官能團取代，所述化學(xué)部分或官能團例如但不限于醇，醛，烷氧基，鏈烷酰氧基(alkanoyloxy)，烷氧基羰基，烯基，烷基(例如，甲基，乙基，丙基，叔丁基)，炔基，烷基羰基氧基(-OC(O)烷基)，酰胺(-C(O)NH-烷基-或-烷基NHC(O)烷基)，脒基(amidinyl)(-C(NH)NH-烷基或-C(NR)NH2)，胺(伯胺，仲胺和叔胺，如烷基氨基，芳基氨基，芳基烷基氨基)，芳?；?，芳基，芳氧基，偶氮，氨基甲?；?-NHC(O)O-烷基-或-OC(O)NH-烷基)，氨甲?；?例如，CONH2，CONH-烷基，CONH-芳基和CONH-芳基烷基)，羰基，羧基，羧酸，羧酸酐，酰氯，氰基，酯，環(huán)氧化物，醚(例如，甲氧基，乙氧基)，胍基，鹵素，鹵代烷基(例如，-CCl3，-CF3，-C(CF3)3)，雜烷基，半縮醛，亞胺(伯和仲)，異氰酸酯，異硫氰酸酯，酮，腈，硝基，氧基，磷酸二酯，硫化物，亞磺酰氨基(例如，SO2NH2)，砜，磺酰基(包括烷基磺?；?，芳基磺?；头蓟榛酋；?，亞砜，硫醇(例如，巰基，硫醚)和脲(-NHCONH-烷基-)。
除非另有說明，化合物的“治療有效量”是在疾病或病癥的治療或控制中足以提供治療好處，或延遲與該疾病或病癥相關(guān)的一種或多種癥狀或使其最小化的量?；衔锏闹委熡行Я勘硎驹谠摷膊』虿“Y的治療或控制中提供治療好處的單獨或與其它治療劑組合的治療劑的量。術(shù)語“有效治療量”可以包括改善總體治療，減少或避免疾病或病癥的癥狀或病因，或增強另一種治療劑的治療效果的量。
除非另有說明，術(shù)語“治療”包括發(fā)生在患者患有特定疾病或病癥的同時，降低該疾病或病癥的嚴(yán)重度或其一種或多種癥狀，或延遲或延緩該疾病或病癥的進展的行為。
除非另有說明，術(shù)語“包括”具有與“包括但不限于”相同的意思。類似地，術(shù)語“例如”具有與“例如但不限于”相同的意思。
除非另有說明，緊鄰一連串名詞前的一個或多個形容詞應(yīng)被理解為應(yīng)用于所述名詞中的每一個。例如，短語“任選取代的烷基(alky)，芳基或雜芳基”具有與“任選取代的烷基(alky)，任選取代的芳基或任選取代的雜芳基”相同的意思。
應(yīng)該注意的是，形成較大的化合物的一部分的化學(xué)部分在本文中可以用其作為單個分子存在時通常被給予的名稱或者其基通常被給予的名稱來描述。例如，術(shù)語“吡啶”和“吡啶基”，當(dāng)用于描述與其它化學(xué)基團相連的部分時，被給予相同的意思。因此，兩個短語“XOH，其中X是吡啶基”和“XOH，其中X是吡啶”被給予相同的意思，并且包括化合物吡啶-2-醇，吡啶-3-醇和吡啶-4-醇。
同樣應(yīng)該注意的是，圖中所示任何具有不滿足化合價的原子均被假定與足以滿足所述化合價的氫原子相連。此外，如果化合價允許，用平行的一條虛線和一條實線表示的化學(xué)鍵包括單和雙(例如，芳香性)鍵。表示具有一個或多個手性中心的化合物，但未標(biāo)明立體化學(xué)(例如，用粗或虛線)的結(jié)構(gòu)包括其純立體異構(gòu)體和混合物。類似地，未指定手性中心的立體化學(xué)的具有一個或多個手性中心的化合物的名稱包括其純立體異構(gòu)體和混合物。
2.化合物 本發(fā)明包括式I的化合物
及其藥學(xué)上可接受的鹽和溶劑合物，其中 R1是氫或任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)； R2是氫或任選取代的烷基； 各R3獨立地為鹵素，胺，羥基，烷氧基或任選取代的烷基，芳基或雜環(huán)； R4和R5各自獨立地為氫或任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)，或與它們所連接的氮原子合起來形成任選取代的雜環(huán)；和 n是0-5。
在一個實施方案中，R1是任選取代的烷基。在另一個實施方案中，其是烷基(例如，叔丁基或丙基)。在另一個實施方案中，其是任選取代的芳基。在另一個實施方案中，其是任選取代的雜環(huán)。
在另一個實施方案中，R2是氫。在另一個實施方案中，其是任選取代的烷基(例如，任選取代的甲基)。
在另一個實施方案中，R3是鹵素。在另一個實施方案中，其是任選取代的烷基(例如，任選取代的低級烷基)。在另一個實施方案中，其是羥基。
在另一個實施方案中，R4和R5獨立地為氫或任選取代的烷基。在另一個實施方案中，其合起來形成任選取代的吡啶或吡咯烷。
在另一個實施方案中，n是0。在另一個實施方案中，n是1。在另一個實施方案中，n是2。
在另一個實施方案中，R4和R5與它們所連接的氮原子合起來不形成1，4-二氮雜-二環(huán)[3.2.2]壬烷。在另一個實施方案中，R4和R5與它們所連接的氮原子合起來不形成哌嗪-C(O)-芳基(例如，哌嗪-C(O)-苯基)。
本發(fā)明包括式I-A的化合物
及其藥學(xué)上可接受的鹽和溶劑合物，其中 A是雜環(huán)； R1是氫或任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)； R2是氫或任選取代的烷基； 各R3獨立地為鹵素，胺，羥基，烷氧基，或任選取代的烷基，芳基或雜環(huán)； R6是任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)；和n是0-5。
在一個實施方案中，A是吡啶或吡咯烷。
在一個實施方案中，R1是任選取代的烷基。在另一個實施方案中，其是烷基(例如，叔丁基或丙基)。在另一個實施方案中，其是任選取代的芳基。在另一個實施方案中，其是任選取代的雜環(huán)。
在另一個實施方案中，R2是氫。在另一個實施方案中，其是任選取代的烷基(例如，任選取代的甲基)。
在另一個實施方案中，R3是鹵素。在另一個實施方案中，其是任選取代的烷基(例如，任選取代的低級烷基)。在另一個實施方案中，其是羥基。
在另一個實施方案中，R6是任選取代的烷基。在另一個實施方案中，其任選是雜環(huán)。在另一個實施方案中，其是雜環(huán)(例如，吡啶或吡咯烷)。
在另一個實施方案中，n是0。在另一個實施方案中，n是1。在另一個實施方案中，n是2。
在另一個實施方案中，A不是1，4-二氮雜-二環(huán)[3.2.2]壬烷。在另一個實施方案中，A不是哌嗪-C(O)-芳基(例如，哌嗪-C(O)-苯基)。
本發(fā)明包括式II的化合物
及其藥學(xué)上可接受的鹽和溶劑合物，其中 R1是氫或任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)； R2是氫或任選取代的烷基； 各R3獨立地為鹵素，胺，羥基，烷氧基，或任選取代的烷基，芳基或雜環(huán)； R4和R5各自獨立地為氫，或任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)，或與其所連接的氮原子合起來形成任選取代的雜環(huán)；和 n是0-5。
在一個實施方案中，R1是任選取代的烷基。在另一個實施方案中，其是烷基(例如，叔丁基或丙基)。在另一個實施方案中，其是任選取代的芳基。在另一個實施方案中，其是任選取代的雜環(huán)。
在另一個實施方案中，R2是氫。在另一個實施方案中，其是任選取代的烷基(例如，任選取代的甲基)。
在另一個實施方案中，R3是鹵素。在另一個實施方案中，其是任選取代的烷基(例如，任選取代的低級烷基)。在另一個實施方案中，其是羥基。
在另一個實施方案中，R4和R5獨立地為氫或任選取代的烷基。在另一個實施方案中，它們合起來形成任選取代的吡啶或吡咯烷。
在另一個實施方案中，n是0。在另一個實施方案中，n是1。在另一個實施方案中，n是2。
在另一個實施方案中，R4和R5與它們所連接的氮原子合起來不形成1，4-二氮雜-二環(huán)[3.2.2]壬烷。在另一個實施方案中，R4和R5與它們所連接的氮原子合起來不形成哌嗪-C(O)-芳基(例如，哌嗪-C(O)-苯基)。
本發(fā)明包括式II-A的化合物
及其藥學(xué)上可接受的鹽和溶劑合物，其中 A是雜環(huán)； R1是氫或任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)； R2是氫或任選取代的烷基； 各R3獨立地為鹵素，胺，羥基，烷氧基，或任選取代的烷基，芳基或雜環(huán)； R6是任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)；和 n是0-5。
在一個實施方案中，A是吡啶或吡咯烷。
在一個實施方案中，R1是任選取代的烷基。在另一個實施方案中，其是烷基(例如，叔丁基或丙基)。在另一個實施方案中，其是任選取代的芳基。在另一個實施方案中，其是任選取代的雜環(huán)。
在另一個實施方案中，R2是氫。在另一個實施方案中，其是任選取代的烷基(例如，任選取代的甲基)。
在另一個實施方案中，R3是鹵素。在另一個實施方案中，其是任選取代的烷基(例如，任選取代的低級烷基)。在另一個實施方案中，其是羥基。
在另一個實施方案中，R6是任選取代的烷基。在另一個實施方案中，其任選是雜環(huán)。在另一個實施方案中，其是雜環(huán)(例如，吡啶或吡咯烷)。
在另一個實施方案中，n是0。在另一個實施方案中，n是1。在另一個實施方案中，n是2。
在另一個實施方案中，A不是1，4-二氮雜-二環(huán)[3.2.2]壬烷。在另一個實施方案中，A不是哌嗪-C(O)-芳基(例如，哌嗪-C(O)-苯基)。
本發(fā)明包括式III的化合物
(III) 及其藥學(xué)上可接受的鹽和溶劑合物，其中 R1是氫或任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)； R2是氫或任選取代的烷基； 各R3獨立地為鹵素，胺，羥基，烷氧基，或任選取代的烷基，芳基或雜環(huán)； R4和R5各自獨立地為氫，或任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)，或與它們所連接的氮原子合起來形成任選取代的雜環(huán)；和 n是0-5。
在一個實施方案中，R1是任選取代的烷基。在另一個實施方案中，其是烷基(例如，叔丁基或丙基)。在另一個實施方案中，其是任選取代的芳基。在另一個實施方案中，其是任選取代的雜環(huán)。
在另一個實施方案中，R2是氫。在另一個實施方案中，其是任選取代的烷基(例如，任選取代的甲基)。
在另一個實施方案中，R3是鹵素。在另一個實施方案中，其是任選取代的烷基(例如，任選取代的低級烷基)。在另一個實施方案中，其是羥基。
在另一個實施方案中，R4和R5獨立地為氫或任選取代的烷基。在另一個實施方案中，它們合起來形成任選取代的吡啶或吡咯烷。
在另一個實施方案中，n是0。在另一個實施方案中，n是1。在另一個實施方案中，n是2。
在另一個實施方案中，R4和R5與它們所連接的氮原子合起來不形成1，4-二氮雜-二環(huán)[3.2.2]壬烷。在另一個實施方案中，R4和R5與它們所連接的氮原子合起來不形成哌嗪-C(O)-芳基(例如，哌嗪-C(O)-苯基)。
本發(fā)明包括式III-A的化合物
及其藥學(xué)上可接受的鹽和溶劑合物，其中 A是雜環(huán)； R1是氫或任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)； R2是氫或任選取代的烷基； 各R3獨立地為鹵素，胺，羥基，烷氧基，或任選取代的烷基，芳基或雜環(huán)； R6是任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)；和n是0-5。
在一個實施方案中，A是吡啶或吡咯烷。
在一個實施方案中，R1是任選取代的烷基。在另一個實施方案中，其是烷基(例如，叔丁基或丙基)。在另一個實施方案中，其是任選取代的芳基。在另一個實施方案中，其是任選取代的雜環(huán)。
在另一個實施方案中，R2是氫。在另一個實施方案中，其是任選取代的烷基(例如，任選取代的甲基)。
在另一個實施方案中，R3是鹵素。在另一個實施方案中，其是任選取代的烷基(例如，任選取代的低級烷基)。在另一個實施方案中，其是羥基。
在另一個實施方案中，R6是任選取代的烷基。在另一個實施方案中，其任選是雜環(huán)。在另一個實施方案中，其是雜環(huán)(例如，吡啶或吡咯烷)。
在另一個實施方案中，n是0。在另一個實施方案中，n是1。在另一個實施方案中，n是2。
在另一個實施方案中，A不是1，4-二氮雜-二環(huán)[3.2.2]壬烷。在另一個實施方案中，A不是哌嗪-C(O)-芳基(例如，哌嗪-C(O)-苯基)。
本發(fā)明的化合物可以含有一個或多個立體中心，并且可以作為對映異構(gòu)體的外消旋混合物或非對映異構(gòu)體的混合物存在。本發(fā)明包括這些化合物的立體異構(gòu)純形式的應(yīng)用及這些形式的混合物的應(yīng)用。例如，包括等量或不等量的本發(fā)明的特定化合物的對映異構(gòu)體的混合物可以用于本發(fā)明的方法和組合物。這些異構(gòu)體可以被不對稱合成，或者用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)，如手性柱或手性拆分劑進行拆分。參見，例如，Jacques，J.等人，Enantiomers，Racemates and Resolutions(Wiley Interscience，NewYork，1981)；Wilen，S.H.等人，Tetrahedron 332725(1977)；Eliel，E.L.，Stereochemistry of Carbon Compounds(McGraw Hill，NY，1962)；和Wilen，S.H.，Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions，第268頁(E.L.Eliel，編，Univ.of Notre Dame Press，Notre Dame，IN，1972)。
本發(fā)明進一步包括本文所公開化合物的立體異構(gòu)混合物。其還包括混合物或純或基本上純的形式的本文所公開化合物的構(gòu)型異構(gòu)體，如順式(Z)和反式(E)烯烴異構(gòu)體。
本發(fā)明所包含的化合物包括 7-叔丁基-N-異丙基-4-甲基-2-(4-甲基苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-N-異丙基-2-(4-甲基苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； (S)-N-(7-叔丁基-5-(2-(吡咯烷-1-基甲基)吡咯烷-1-羰基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基)-4-甲基苯甲酰胺； 7-叔丁基-2-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-(吡啶-4-基甲基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-N，N-二甲基-2-(4-甲基苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-2-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-丙基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-N-環(huán)丙基-2-(4-甲基苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； N-(7-叔丁基-5-(吡咯烷-1-羰基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基)-4-甲基苯甲酰胺； 7-叔丁基-N-乙基-2-(4-甲基苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-2-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-N-甲基-2-(4-甲基苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-N-異丁基-2-(4-甲基苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-N-(2-(二甲氨基)乙基)-2-(4-甲基苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-2-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-(吡啶-2-基甲基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-2-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-(吡啶-3-基甲基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； N-異丙基-2-(4-甲基苯甲酰氨基)-7-丙基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 2-(4-甲基苯甲酰氨基)-7-丙基-N-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-2-(3-氟-4-甲基苯甲酰氨基)-N-異丙基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-2-(3-氟-4-甲基苯甲酰氨基)-N-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-2-(4-乙基苯甲酰氨基)-N-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-2-(4-乙基苯甲酰氨基)-N-異丙基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-2-(4-乙基苯甲酰氨基)-N-(2-甲氧基乙基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-2-(3-氟-4-甲基苯甲酰氨基)-N-(2-甲氧基乙基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-2-(3-氟-4-甲基苯甲酰氨基)-N-(吡啶-3-基甲基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-N-(2-乙氧基乙基)-2-(3-氟-4-甲基苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-N-乙基-2-(4-乙基苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-2-(4-乙基苯甲酰氨基)-N-異丁基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-N-環(huán)丙基-2-(4-乙基苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-2-(4-乙基苯甲酰氨基)-N-(吡啶-3-基甲基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-2-(3-氟-4-甲基苯甲酰氨基)-N-異丁基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-2-(3-氟-4-甲基苯甲酰氨基)-N-丙基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-2-(4-乙基苯甲酰氨基)-N-丙基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-N-環(huán)丙基-2-(3-氟-4-甲基苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-N-(2-甲氧基乙基)-2-(4-甲基苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-N-(2-乙氧基乙基)-2-(4-乙基苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-N-乙基-2-(3-氟-4-甲基苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-N-(2-乙氧基乙基)-2-(4-甲基苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-N-(1-甲氧基丙-2-基)-2-(4-甲基苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-N-異丙基-2-(4-丙基苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-N-(2-乙氧基乙基)-2-(4-丙基苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-2-(4-丙基苯甲酰氨基)-N-(吡啶-3-基甲基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-N-異丙基-2-(4-異丙基苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-N-(2-乙氧基乙基)-2-(4-異丙基苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-2-(4-異丙基苯甲酰氨基)-N-(吡啶-3-基甲基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-異丁基-N-異丙基-2-(4-甲基苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-異丁基-2-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； N-異丙基-2-(4-甲基苯甲酰氨基)-7-叔戊基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 2-(4-甲基苯甲酰氨基)-7-叔戊基-N-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-2-(3，4-二甲基苯甲酰氨基)-N-異丙基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-2-(3，4-二甲基苯甲酰氨基)-N-(2-乙氧基乙基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 7-叔丁基-2-(3，4-二甲基苯甲酰氨基)-N-(吡啶-3-基甲基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 4-甲基-N-(7-叔戊基-5-(吡咯烷-1-羰基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基)苯甲酰胺； 2-(4-甲基苯甲酰氨基)-7-叔戊基-N-(吡啶-3-基甲基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； N-(2-乙氧基乙基)-2-(4-甲基苯甲酰氨基)-7-叔戊基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； N-環(huán)丙基-2-(4-甲基苯甲酰氨基)-7-叔戊基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酰胺； 1-叔丁基-N-異丙基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-(2-(吡啶-3-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-(2-(吡啶-3-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； (S)-N-(1-叔丁基-3-(2-異丁基吡咯烷-1-羰基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)-4-甲基苯甲酰胺； 1-叔丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； N-(1-叔丁基-3-(2-(吡啶-2-基)哌啶-1-羰基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)-4-甲基苯甲酰胺； 1-叔丁基-N-異丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-(吡啶-2-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-N-異丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-(戊-3-基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； (S)-N-(1-叔丁基-3-(2-(吡咯烷-1-基甲基)吡咯烷-1-羰基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)-4-甲基苯甲酰胺； N-((1H-吲哚-3-基)甲基)-1-叔丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； N-(2-(1H-吲哚-3-基)乙基)-1-叔丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-(1-(吡啶-3-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-異丙基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-(1-(吡啶-3-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-異丙基-N，N-二甲基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-N-異丙基-6-(6-甲基煙酰氨基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； 6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1-丙基-N-(1-(吡啶-3-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-芐基-N-異丙基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-芐基-N，N-二甲基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-芐基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-(2-(吡啶-2-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-芐基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-(1-(吡啶-3-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； N，N-二甲基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1-丙基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； 6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1-丙基-N-(2-(吡啶-2-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； N-異丙基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1-丙基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-N-異丙基-6-(3-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； N-異丙基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； 6-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-(2-(吡啶-2-基)乙基)-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； 6-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-(1-(吡啶-3-基)乙基)-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； N-環(huán)丙基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； N-環(huán)丙基-1-異丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； N-(1-異丁基-3-(吡咯烷-1-羰基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)-4-甲基苯甲酰胺； 1-異丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-(1-(吡啶-3-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； 6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1-苯乙基-N-(1-(吡啶-3-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； N-環(huán)丙基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1-苯乙基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； 4-甲基-N-(1-苯乙基-3-(吡咯烷-1-羰基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)苯甲酰胺； N-(1-(環(huán)丁基甲基)-3-(吡咯烷-1-羰基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)-4-甲基苯甲酰胺； 1-(環(huán)丁基甲基)-N-環(huán)丙基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； N-環(huán)丙基-1-異戊基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； N-(1-異戊基-3-(吡咯烷-1-羰基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)-4-甲基苯甲酰胺； 1-(環(huán)丁基甲基)-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-戊基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-N-環(huán)丙基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-N-異丙基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； N-(1-叔丁基-3-(吡咯烷-1-羰基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-6-基)-4-甲基苯甲酰胺； 1-叔丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-(戊-3-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-N，N-二乙基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-N-異丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-N-環(huán)丙基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-(吡啶-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-(吡啶-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-N-乙基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺 1-叔丁基-N-(2-乙氧基乙基)-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； N-芐基-1-叔丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-((3-甲基吡啶-2-基)甲基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-(1-(吡啶-3-基)乙基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-N，N-二甲基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； (S)-N-仲丁基-1-叔丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-(1-(吡啶-4-基)乙基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； (S)-1-叔丁基-N-(1-甲氧基丙-2-基)-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； (R)-N-(1-叔丁基-3-(2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-羰基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-6-基)-4-甲基苯甲酰胺； 1-叔丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-丙基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-N-環(huán)丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； (R)-1-叔丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-(3-甲基丁-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-(噻唑-2-基甲基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； (R)-N-(1-叔丁基-3-(2-((二甲氨基)甲基)吡咯烷-1-羰基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-6-基)-4-甲基苯甲酰胺； 1-叔丁基-N-(環(huán)丙基甲基)-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； N-(1-叔丁基-3-(嗎啉-4-羰基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-6-基)-4-甲基苯甲酰胺； 1-叔丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-(四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； (S)-1-叔丁基-N-(2-羥基-1-苯基乙基)-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； N-(2-叔丁氧基乙基)-1-叔丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-(1-甲基哌啶-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-N-(呋喃-2-基)-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； (R)-1-叔丁基-N-(己-2-基)-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-N-(噁唑-2-基甲基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； (S)-N-(1-甲氧基丙-2-基)-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1-新戊基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； (R)-1-叔丁基-6-(4-乙基苯甲酰氨基)-N-(1-甲氧基丙-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； (R)-6-(4-乙基苯甲酰氨基)-1-異丁基-N-(1-甲氧基丙-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺； 1-叔丁基-N-(1-甲氧基丙-2-基)-6-(4-甲基苯甲酰氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺；和 (R)-1-叔丁基-6-(N，4-二甲基苯甲酰氨基)-N-(1-甲氧基丙-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酰胺。
本發(fā)明的優(yōu)選化合物是特異性脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白抑制劑。特定特異性脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白抑制劑的PTIC50小于約150，125，100，75，50或25nM。
當(dāng)用下文實施例中所述方法測定時，一些化合物抑制鼠Na+依賴性脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白的IC50小于約150，125，100，75，50或25nM。
一些化合物不顯著抑制多巴胺轉(zhuǎn)運蛋白。例如，當(dāng)用下文實施例中所述測定法測定時，一些特異性脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白抑制劑抑制多巴胺轉(zhuǎn)運蛋白的IC50大于約0.5，1，2.5，5或10μM。
一些化合物不顯著抑制甘氨酸轉(zhuǎn)運蛋白。例如，當(dāng)用下文實施例中所述測定法測定時，一些特異性脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白抑制劑抑制甘氨酸轉(zhuǎn)運蛋白的IC50大于約0.5，1，2.5，5或10μM。
4.3.合成 本發(fā)明的化合物(即，本文所公開的化合物)可以用本領(lǐng)域已知方法及本文所述方法獲得或制備。
例如，吡咯并嘧啶化合物通?？梢园凑找韵铝鞒?br>
圖1中所示方法制備
流程圖1 在該方法中，通過胍與2-烯丙基-丙二酸二乙酯反應(yīng)(例如，在堿中)制備5-烯丙基-2-氨基-嘧啶-4，6-二醇。將該二醇轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的二氯化物(例如，用POC13)，然后氧化(例如，用OsO4)，得到3-(2-氨基-4，6-二氯-嘧啶-5-基)-丙-1，2-二醇，接著將其轉(zhuǎn)化為(2-氨基-4，6-二氯-嘧啶-5-基)-乙醛(例如，用Pb(OAc)4)。將該醛環(huán)化，得到取代的4-氯-吡咯并嘧啶。除去氯(例如，用H2，Pd/C)，將所得化合物與預(yù)期的酰氯反應(yīng)，然后碘化，和最后與預(yù)期的胺反應(yīng)，得到最終產(chǎn)物。
吡咯并吡啶化合物通?？梢园凑找韵铝鞒虉D2中所示方法制備
流程圖2 在該方法中，2，6-二氟-吡啶與草酸二叔丁酯反應(yīng)，得到(2，6-二氟-吡啶-3-基)-氧-乙酸叔丁酯。將其轉(zhuǎn)化為預(yù)期的(2，6-二氟-吡啶-3-基)-亞肼基-乙酸叔丁酯，隨后環(huán)化，得到相應(yīng)的6-氟-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酸叔丁酯。將該叔丁酯除去，得到相應(yīng)的酸，該酸與適當(dāng)?shù)陌贩磻?yīng)，得到預(yù)期的酰胺。該酰胺與預(yù)期的酰氯反應(yīng)，得到最終產(chǎn)物。
吡唑并嘧啶化合物通?？梢园凑樟鞒虉D3中所示方法制備
流程圖3 在該方法中，琥珀腈與甲酸甲酯反應(yīng)，得到2，3-二氰基-丙烯-1-醇鈉，其與胺反應(yīng)，得到預(yù)期的N-取代的5-氨基-1H-吡咯-3-腈。該吡咯與3，3-二甲氧基-丙腈在酸性條件下反應(yīng)，得到6-氨基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-腈，將其轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的乙酯(例如，用H2SO4的EtOH溶液)。然后該乙酯與預(yù)期的酰氯反應(yīng)，最后與預(yù)期的胺反應(yīng)，得到最終產(chǎn)物。
4.治療方法 本發(fā)明的一個實施方案包括抑制脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白的方法，其包括使脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白(體外或體內(nèi)的)與足夠量的本發(fā)明的化合物接觸。優(yōu)選的脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白由人基因SLC6A7，其鼠同源基因(ortholog)，或編碼脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白和在標(biāo)準(zhǔn)條件下與兩者中任一全長雜交的核酸分子編碼。
另一個實施方案包括改善人患者的認知性能的方法，其包括向該患者施予有效量的本發(fā)明的化合物。改善認知性能的例子包括增強學(xué)習(xí)(例如，學(xué)習(xí)得更快)，改善理解力，改善推理及改善短和/或長期記憶。
另一個實施方案包括治療，控制或預(yù)防人患者的疾病或病癥的方法，其包括向該患者施予治療或預(yù)防有效量的本發(fā)明的化合物。疾病和病癥的例子包括阿爾茨海默氏病，孤獨癥，認知障礙(例如，思考，推理或解決問題困難)，癡呆，學(xué)習(xí)障礙(例如，誦讀困難，計算障礙，書寫困難，言語障礙癥，舉名困難)和短期及長期記憶喪失。其它病癥包括由例如缺氧，創(chuàng)傷或中風(fēng)引起的腦損傷的不良后遺癥。
5.藥物組合物 本發(fā)明包括含有本發(fā)明的化合物作為其活性成分的藥物組合物和劑型。本發(fā)明的藥物組合物和劑型可以任選地包含一種或多種藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。某些藥物組合物是適于向患者口服，局部，粘膜(例如，鼻，肺，舌下，陰道，頰或直腸)，腸胃外(例如，皮下，靜脈內(nèi)，推注，肌內(nèi)或動脈內(nèi))或透皮給藥的單一單位劑型。劑型的例子包括但不限于片劑；囊片劑(caplets)；膠囊劑，如彈性軟明膠膠囊；扁囊劑；含片(troches)；錠劑；分散體；栓劑；軟膏劑；巴布劑(cataplasms，poultices)；糊劑；散劑；敷料；乳膏劑；硬膏劑；溶液劑；貼片；氣霧劑(例如，鼻噴霧劑或吸入劑)；凝膠劑；適于向患者口服或粘膜給藥的液體劑型，包括混懸劑(例如，水或非水液體混懸劑，水包油型乳劑或油包水型乳劑)，溶液劑和酏劑；適于向患者腸胃外給藥的液體劑型；和可以復(fù)溶，以提供適于向患者腸胃外給藥的液體劑型的無菌固體(例如，結(jié)晶性或無定形固體)。
制劑應(yīng)該與給藥模式相稱。例如，口服給藥可能需要腸溶衣，以保護活性成分在胃腸道內(nèi)不被降解。在另一個實施例中，活性成分可以在脂質(zhì)體制劑中給藥，以保護其免受降解酶降解，促進在循環(huán)系統(tǒng)的運送和/或完成穿過細胞膜向細胞內(nèi)部位的遞送。
本發(fā)明的劑型的組合物，形狀和類型通常將根據(jù)其應(yīng)用的不同而改變。例如，用于疾病的急性治療的劑型可以含有比用于相同疾病的慢性治療的劑型更大量的一種或多種活性成分。類似地，腸胃外劑型可以含有比用于治療相同疾病的口服劑型更少量的一種或多種活性成分。本發(fā)明所包括的具體劑型各不相同的這些和其它方式對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。參見，例如，Remington’s PharmaceuticalSciences，第18版，Mack Publishing，Easton PA(1990)。

具體實施例方式 下文描述了本發(fā)明的各個方面的一些實施例。在合成實施例中，除非另有說明，均采用以下HPLC條件溶劑A-90％水/10％甲醇/0.1％TFA；溶劑B-20％水/90％甲醇/0.1％TFA；柱-YMC-Pack ODS-A4.6×33mm；梯度時間4min；流速3ml/min。
1.SLC6A7缺陷小鼠 為測定抑制Na+依賴性脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白的作用，用相應(yīng)地來自突變鼠ES細胞克隆的OMNIBANK保藏中心的突變ES細胞克隆產(chǎn)生在人SLC6A7基因的鼠同源基因(ortholog)中的基因工程突變純合子小鼠(“敲除”或“KO”小鼠)(參見美國專利6,080,576)。
通過飼養(yǎng)具有種系傳遞突變等位基因能力的雜合子動物，產(chǎn)生突變等位基因雜合子，純合子或野生型小鼠。突變等位基因根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)孟德爾遺傳學(xué)分類。用所述小鼠進行一系列醫(yī)學(xué)和行為測試，包括下文所述測試。
1.1.痕跡條件作用(Trace Conditioning) 痕跡厭惡條件作用測量了一種經(jīng)典條件作用，在條件刺激(CS)(在本實例中為80分貝的聲音)結(jié)束和無條件刺激(US)(在本實例中為0.7mA電流)開始之間有短暫間隔，分離它們的是短暫“痕跡”(約30秒)。本測定法通過測定試驗受試者學(xué)習(xí)將US與CS聯(lián)系起來的速度有多快來測量高級學(xué)習(xí)(通常與海馬功能或皮質(zhì)有關(guān))。通過比較CS后的百分僵硬率和CS前的百分僵硬率的差異，確定百分僵硬時間，給試驗動物記分。
在SLC6A7基因的鼠同源基因中作為突變純合子的雄性和雌性動物與其野生型對照(16只對照動物的平均值為約30％)相比均顯示出明顯更高的僵硬百分比(16只供試動物的平均值為約50％)。這些結(jié)果表明，純合子突變動物在該良好建立的認知性能試驗中明顯表現(xiàn)得更好。
1.2.水迷宮 Morris水迷宮采用直徑2m，深度40cm的圓形水池。參見，例如，Morris，1984，J.Neurosci.Methods 1147-60，Guillou等人，1999，J.Neurocsci.196183-90。向池中注入溫度為24-26℃的水至深30cm，加入無毒水基顏料，造成不透明?！疤用摗庇闷脚_約30cm高，頂部有直徑18cm的塑料圓盤。將平臺置于水表面下約0.5cm。將小鼠面向標(biāo)記為N(北)，S(南)，W(西)或E(東)的4個起點位置之一池壁放入池中。包括攝像機和WaterMaze成像軟件的視頻跟蹤系統(tǒng)(Actimetrics，Inc.)將水池分成4個相同的扇形區(qū)，命名為SE，SW，NE和NW。軟件計算到達平臺的潛伏時間，離平臺的距離，在各扇形區(qū)中消耗的時間，泳速和其它參數(shù)。
各試驗持續(xù)進行至小鼠爬到平臺上，或時間過去90s。如果小鼠未在90s內(nèi)到達平臺，則實驗者將其從水中取出，輕輕地置于平臺上。各試驗結(jié)束時，讓小鼠在平臺上再停留20s。每天4次平臺試驗，試驗間隔為8-12min。試驗間隔期間，將小鼠置于干凈的籠中和熱燈下。
通常采用兩種基礎(chǔ)方案之一第一種方案包括可見平臺階段和隱藏平臺階段，第二種方案僅采用隱藏平臺階段；兩種方案均以兩天的反轉(zhuǎn)階段結(jié)束。
可見階段通常在隱藏平臺階段之前進行。在可見階段中，為隱藏所有迷宮外的線索/參照，在水池周圍圍上白簾。在可見階段期間，將8cm高×3cm的金屬柱放在平臺上，使平臺可見。各試驗的起點位置相同，而平臺的位置在試驗過程中隨機變化。該階段持續(xù)約3天。
在隱藏平臺階段中，不再標(biāo)記平臺，并取走簾子。各種迷宮外線索任意地在水池周圍放置。這里，每次試驗均改變起點位置，而平臺位置保持不變。該階段通常持續(xù)約7天。
在隱藏階段的第1和5天及可見階段的第1天的培訓(xùn)試驗之前，并且在可見階段的第3天的最后一次試驗之后進行探索試驗。在探索試驗期間，從池中取出平臺，將小鼠置于池中，面向與平臺所在扇形區(qū)相對的扇形區(qū)池壁。小鼠游泳60s，記錄在各扇形區(qū)消耗的時間百分比。
在反轉(zhuǎn)階段中，在兩天中的每一天均進行5次試驗。第1次試驗期間，平臺位置與其在隱藏階段中的相同。在接下來的4次試驗中，將平臺移至相對的扇形區(qū)。第二天，平臺在第一次試驗的位置上，然后在最后4次試驗中重新移至與左側(cè)或右側(cè)的相鄰扇形區(qū)。起點位置總是保持與平臺位置相對。
當(dāng)對SLC6A7 KO小鼠(n＝12)和WT(n＝7)對照采用上述方法時，先用小鼠進行可見平臺任務(wù)。用重復(fù)測量(RM)和方差分析(ANOVA)對11次試驗中基因型對到達平臺的潛伏時間的影響進行分析。
試驗的影響為F(10，170)＝8.57，p＜0.001；基因型的影響F(1，17)＝0.65，p＜0.43，基因型與試驗的交互作用F(10，170)＝0.42，p＜0.93。最初，WT和KO受試者之間無差異，但試驗中觀察到了潛伏時間顯著減少。
當(dāng)試驗進行到隱藏平臺任務(wù)時，RM ANOVA顯示了試驗對到達平臺的潛伏時間的顯著影響F(19，323)＝7.2，p＜0.001?；蛐蛯ο嗤瑓?shù)也有顯著影響F(1，17)＝8.0，p＜0.012；基因型與試驗的交互作用為F(19，323)＝1.16，p＜0.29?？偟膩碚f，KO受試者到達平臺的潛伏時間明顯更短。泳速未檢出無顯著差異，游得更快不是KO動物完成得更快的原因。
在反轉(zhuǎn)階段期間，在兩天中的每一天對平臺轉(zhuǎn)換至另一扇形區(qū)的4次試驗進行RM ANOVA。在反轉(zhuǎn)階段的兩天中，試驗的影響均顯著Fs(3，51)＞6.4，p＜0.001，表明兩種基因型均再學(xué)習(xí)良好。然而，在反轉(zhuǎn)的每一天，盡管KO小鼠確實傾向于更快到達平臺，當(dāng)它們之間無顯著差異Fs(1，17)＜0.75，ps＞0.39。
探索試驗期間，通過非參數(shù)Mann-Whitney檢驗，對于WT和KO小鼠，將在各扇形區(qū)消耗的時間百分比與25％可能性進行比較。在隱藏階段前進行最初兩次探索試驗，兩種基因型在各扇形區(qū)中的時間百分比與可能性無差異。在于隱藏階段的第5天進行的第3次探索試驗中，WT[p＜0.05]和KO小鼠[p＜0.001]的平臺扇形區(qū)時間與可能性相比有顯著不同；并且KO小鼠[p＜0.001]的相對扇形區(qū)時間也有顯著不同。
上述數(shù)據(jù)表明，KO小鼠學(xué)習(xí)隱藏平臺任務(wù)比WT動物更快。這些數(shù)據(jù)還進一步證實了所觀察到的差異不能用基因型之間視覺能力或泳速的不同來解釋。
2.(2-氨基-4，6-二氯-嘧啶-5-基)-乙醛的制備
5-烯丙基-2-氨基-嘧啶-4，6-二醇(3)在氮氣氣氛下，將金屬鈉(4.30g，187mmol)溶解在100ml EtOH中，制成NaOEt。在0℃加入胍(1)(4.80g，50.2mmol)，并將溶液攪拌10min。逐滴加入烯丙基丙二酸二乙酯(2)(10ml，50.4mmol)，然后將混合物溫?zé)嶂潦覝?。攪?5h后，反應(yīng)用20ml濃HCl淬滅。將沉淀物過濾，并用水和乙醇洗滌，得到為白色固體的嘧啶3(4.29g，51％)1H NMR(300MHz，(CD3)2SO)δ10.32(s，2H)6.37(s，2H)，5.81-5.68(m，1H)，4.91-4.78(m，2H)，2.85(d，J＝6.0Hz，2H)；m/z計算值C7H9N3O2167.17實測值(M+H)+168.10；HPLC保留時間＝0.677min(溶劑B的梯度-0-100％；波長220nM)。
5-烯丙基-4，6-二氯-嘧啶-2-基胺(4)在氮氣氣氛下，向10ml POCl3中加入嘧啶3(1.027g，6.15mmol)?；旌衔镌?10℃回流。攪拌30min后，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器除去POCl3。粗制的混合物用15ml熱蒸餾水非常緩慢地淬滅。水性混合物用CH2Cl2萃取兩次。合并有機層，用1∶1的飽和NaHCO3(水溶液)/鹽水混合物洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，濃縮，得到為淺褐色固體的嘧啶4(320mg，26％)1H NMR(300MHz，(CDCl3)δ5.93-5.80(m，1H)，5.20-5.06(m，2H)，3.52-3.49(m，2H)；m/z計算值C7H7Cl2N3204.06實測值204.00；HPLC保留時間＝3.631min(溶劑B的梯度-0-100％；波長220nM)。
3-(2-氨基-4，6-二氯-嘧啶-5-基)-丙-1，2-二醇(5)向攪拌的嘧啶4(320mg，1.58mmol)在15ml THF和3ml水的溶液中加入NMO(370mg，3.15mmol)，并然后加入少量四氧化鋨結(jié)晶。遮蓋反應(yīng)瓶，以阻斷對光的暴露，并將混合物室溫下攪拌。攪拌12h后，向混合物中加入10mlNaHSO3(500mg)水溶液，并攪拌數(shù)分鐘。將混合物過濾，并將沉淀物用水洗滌，和然后與Et2O研磨，得到一些為白色固體的二醇5。濾液用EtOAc萃取3次。合并有機相，用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，并真空濃縮，得到更多的為白色固體的二醇5，與沉淀的固體合并(329mg，88％)1H NMR(300MHz，(CD3)2SO)δ7.29(s，2H)，4.70(d，J＝5.1Hz，1H)，4.62(t，J＝5.9Hz，1H)，3.75-3.65(m，1H)，2.77-2.60(m，2H)；m/z計算值C7H9Cl2N3O2238.07實測值238.10；HPLC保留時間＝1.703min(溶劑B的梯度-0-100％；波長220nM)。
(2-氨基-4，6-二氯-嘧啶-5-基)-乙醛(6)在氮氣氣氛下，于0℃向攪拌的二醇5(329mg，1.39mmol)在10ml THF和5ml甲醇的懸浮液中加入醋酸鉛(700mg，1.58mmol)。將該混合物在0℃攪拌1h，然后用EtOAc稀釋?；旌衔锿ㄟ^C鹽過濾。濾液用1∶1的飽和NaHCO3(水溶液)/鹽水混合物洗滌3次，經(jīng)MgSO4干燥，然后濃縮，得到為白色固體的醛6(253mg，88％)m/z計算值C7H9Cl2N3O2206.03實測值206.00；HPLC保留時間＝2.048min(溶劑B的梯度-0-100％；波長220nM)。
3.N-(7-叔丁基-5-碘-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基)-4-甲基-苯甲酰胺的制備
7-叔丁基-4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基胺(7)在密閉的壓力容器中將醛6(253mg，1.23mmol)懸浮在15ml正丁醇中。向該混合物中加入叔丁基胺(0.30ml，2.78mmol)。室溫攪拌5min后，加入三乙胺(0.80ml，5.56mmol)，并將混合物在密封管中于115℃攪拌。14h后，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器除去正丁醇。粗品經(jīng)硅膠柱層析(100％DCM)純化，得到氯吡咯并嘧啶7(170mg，62％)1H NMR(300MHz，(CDCl3)δ7.05(d，J＝3.6Hz，1H)，6.35(d，J＝3.9Hz，1H)，4.90(bs，2H)；m/z計算值C10H13ClN4224.69實測值225.10；HPLC保留時間＝3.848min (溶劑B的梯度-0-100％；波長220nM)。
7-叔丁基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基胺(8)將氯吡咯并嘧啶7(308mg，1.38mmol)溶解在25ml甲醇中。向其中加入3ml濃氨水和催化量的鈀/碳。將該混合物在氫氣氣氛下室溫攪拌。攪拌2.5h后，混合物經(jīng)C鹽過濾，并將濾液濃縮。粗品通過硅膠柱，得到為黃色固體的吡咯并嘧啶8(240mg，92％)m/z計算值C10H14N4190.25實測值191.00；HPLC保留時間＝2.477min(溶劑B的梯度-0-100％；波長220nM)。
N-(7-叔丁基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基)-4-甲基-苯甲酰胺(10)在氮氣氣氛下，將吡咯并嘧啶8(199mg，1.05mmol)溶解在15ml THF中。向該溶液中加入三乙胺(0.60ml，4.21mmol)和4-甲基苯甲酰氯(9)(0.42ml，3.16mmol)。將該混合物室溫下攪拌。45min后，用NaHCO3(水溶液)飽和溶液和二氯甲烷稀釋該混合物。分層，并將水部分再用二氯甲烷萃取2次。合并有機層，經(jīng)MgSO4干燥，然后濃縮。向攪拌的殘留物在15ml甲醇的溶液中加入3ml 2N NaOH(水溶液)溶液?；旌衔飻嚢?.5h后，用NaHCO3(水溶液)飽和溶液和EtOAc稀釋。分層，并將水部分再用EtOAc萃取1次。合并有機層，經(jīng)MgSO4干燥，然后濃縮。粗品經(jīng)硅膠柱層析(EtOAc∶己烷，1∶4)純化，得到為淺褐色固體的產(chǎn)物10(222mg，69％)m/z計算值C18H20N4O308.39實測值309.05；HPLC保留時間＝3.686min(溶劑B的梯度-0-100％；波長220nM)。
N-(7-叔丁基-5-碘-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基)-4-甲基-苯甲酰胺(11)向酰胺10(222mg，0.72mmol)的THF溶液中加入NIS(202mg，1.25mmol)。遮蓋反應(yīng)瓶，以阻斷對光的暴露，并將混合物室溫攪拌。17.5h后，在真空下除去溶劑，并將殘留物用NaHCO3(水溶液)飽和溶液和二氯甲烷稀釋。分層，并將水部分再用二氯甲烷萃取3次。合并有機相，經(jīng)MgSO4干燥，然后濃縮。粗品經(jīng)硅膠柱層析(EtOAc∶己烷，1∶5)純化，得到為褐色固體的碘化產(chǎn)物11(185mg，59％)m/z計算值C18H19IN4O434.28實測值435.00；HPLC保留時間＝4.031min(溶劑B的梯度-0-100％；波長220nM)。
4.7-叔丁基-2-(4-甲基-苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酸乙基酰胺的制備
在氮氣覆蓋下，和在閃爍瓶中，將酰胺11(35mg，.081mmol)溶解在1ml DMF中。將該溶液用氮氣脫氣，并然后加入反式-二氯雙(三苯基膦)鈀(5.6mg，0.0081mmol)?；旌衔镌俅斡玫獨饷摎夂螅ㄈ胍谎趸?min。向混合物中加入2M乙基胺的THF (0.081ml，0.162mmol)溶液，并密封閃爍瓶。將該混合物在80℃攪拌。攪拌12h后，將該混合物用EtOAc稀釋，并通過C鹽過濾。將濾液濃縮，并將殘留物經(jīng)制備型HPLC純化，得到為白色固體的標(biāo)題化合物(19mg，61％)1H NMR(300MHz，MeOD)δ9.34(s，1H)，8.49(s，1H)，7.99(d，J＝9.0Hz，2H)，7.41(d，J＝8.0Hz，2H)，3.44(q，J＝7.5Hz，2H)，2.46(s，3H)，1.87(s，9H)，1.26(t，J＝7.2Hz，3H)；m/z計算值C21H25N5O2379.47實測值380.25；HPLC保留時間＝3.620min(溶劑B的梯度-0-100％；波長220nM)。
5.7-叔丁基-2-(4-甲基-苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酸(吡啶-3-基甲基)-酰胺的制備
在氮氣覆蓋下，和在閃爍瓶中，將酰胺11(35mg，.081mmol)溶解在1ml DMF中。將該溶液用氮氣脫氣，并然后加入反式-二氯雙(三苯基膦)鈀(5.6mg，0.0081mmol)。混合物再次用氮氣脫氣后，通入一氧化碳3min。向溶液中加入3-(氨基甲基)吡啶(0.017ml，0.162mmol)，并密封閃爍瓶。將該混合物在80℃攪拌。攪拌12h后，將該混合物用EtOAc稀釋，并通過C鹽過濾。將濾液濃縮，并將殘留物經(jīng)制備型HPLC純化，得到為白色固體的標(biāo)題化合物(25mg，70％)1H NMR(300MHz，MeOD)δ9.34(s，1H)，8.79(s，1H)8.67(d，J＝5.1Hz，1H)，8.49(s，1H)，8.37(d，J＝8.0Hz，1H)，7.97(d，J＝8.6Hz，2H)，7.84(dd，J＝5.9，2.4Hz，1H)，7.40(d，J＝8.3Hz，2H)，4.73(s，2H)，2.46(s，3H)，和1.87(s，9H)；m/z計算值C25H26N6O2442.52實測值443.40；HPLC保留時間＝3.196min(溶劑B的梯度-0-100％；波長220nM)。
6.7-叔丁基-2-(4-甲基-苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酸(吡啶-2-基甲基)-酰胺的制備
在氮氣覆蓋下，和在閃爍瓶中，將酰胺11(35mg，0.081mmol)溶解在1ml DMF中。將該溶液用氮氣脫氣，并然后加入反式-二氯雙(三苯基膦)鈀(5.6mg，0.0081mmol)?；旌衔镌俅斡玫獨饷摎夂螅ㄈ胍谎趸?min。向溶液中加入2-(氨基甲基)吡啶(0.017ml，0.162mmol)，并密封閃爍瓶。將該混合物在80℃攪拌。攪拌12h后，將該混合物用EtOAc稀釋，并通過C鹽過濾。將濾液濃縮，并將殘留物經(jīng)制備型HPLC純化，得到為淺褐色固體的標(biāo)題化合物(19mg，52％)1H NMR(300MHz，MeOD)δ9.34(s，1H)，8.65(d，J＝4.5Hz，1H)，8.57(s，1H)，8.19(td，J＝7.8，1.5Hz，1H)，7.98(d，J＝8.1Hz，2H)，7.78(d，J＝7.8Hz，1H)，7.64(app t，J＝6.3Hz，1H)，7.41(d，J＝7.8Hz，2H)，4.81(s，2H)，2.46(s，3H)，和1.89(s，9H)；m/z計算值C25H26N6O2442.52實測值443.35；HPLC保留時間＝3.211min(溶劑B的梯度-0-100％；波長220nM)。
7.7-叔丁基-2-(4-甲基-苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酸(2-二甲氨基-乙基)-酰胺的制備
在氮氣覆蓋下，和在閃爍瓶中，將酰胺11(35mg，.081mmol)溶解在1ml DMF中。將該溶液用氮氣脫氣，并然后加入反式-二氯雙(三苯基膦)鈀(5.6mg，0.0081mmol)?；旌衔镌俅斡玫獨饷摎夂螅ㄈ胍谎趸?min。向混合物中加入N，N-二甲基乙二胺(0.014ml，0.162mmol)，并密封閃爍瓶。將該混合物在80℃攪拌。攪拌12h后，將該混合物用EtOAc稀釋，并通過C鹽過濾。將濾液濃縮，并將殘留物經(jīng)制備型HPLC純化，得到為淺褐色固體的標(biāo)題化合物(8.9mg，26％)1H NMR(300MHz，MeOD)δ9.34(s，1H)，8.36(s，1H)，7.95(d，J＝8.3Hz，2H)，7.39(d，J＝8.0Hz，2H)，3.77(t，J＝5.7Hz，2H)，3.40(t，J＝5.8Hz，2H)，3.02(s，6H)2.46(s，3H)，和1.86(s，9H)；m/z計算值C23H30N6O2422.53實測值423.30；HPLC保留時間＝3.138min(溶劑B的梯度-0-100％；波長220nM)。
8.7-叔丁基-2-(4-甲基-苯甲酰氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-羧酸甲基酰胺的制備
在氮氣覆蓋下，和在閃爍瓶中，將酰胺11(35mg，.081mmol)溶解在1ml DMF中。將該溶液用氮氣脫氣，并然后加入反式-二氯雙(三苯基膦)鈀(5.6mg，0.0081mmol)?；旌衔镌俅斡玫獨饷摎夂?，通入一氧化碳3min。向混合物中加入2M甲胺的THF(0.08ml，0.162mmol)溶液，并密封閃爍瓶。將該混合物在80℃攪拌。攪拌12h后，將該混合物用EtOAc稀釋，并通過C鹽過濾。將濾液濃縮，并將殘留物經(jīng)制備型HPLC純化，得到為白色固體的標(biāo)題化合物(23mg，77％)1H NMR(300MHz，MeOD)δ9.35(s，1H)，8.48(s，1H)，8.00(d，J＝8.6Hz，2H)，7.42(d，J＝7.2Hz，2H)，2.94(s，3H)，2.47(s，3H)，和1.88(s，9H)；m/z計算值C20H23N5O2365.44實測值366.25；HPLC保留時間＝3.443min(溶劑B的梯度-0-100％；波長220nM)。
9.6-氨基-1-叔丁基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-腈的制備
5-氨基-1-叔丁基-1H-吡咯-3-腈(15)向溶解存乙醇中的甲?；?琥珀腈的鈉衍生物(14)(A.Brodrick和D.G.Wibberley，J.C.S.Perkin I，1975，1911)(1.0g，7.7mmol)中加入2ml乙酸，然后加入叔丁胺(0.85ml，8.1mmol)。將該溶液回流攪拌。45min后，將混合物冷卻至室溫。向攪拌的溶液中加入KOH(2.68g，47.7mmol)的乙醇溶液。所得混合物再次回流攪拌。45min后，將該反應(yīng)物冷卻至室溫，并用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器除去溶劑。將殘留物用水和EtOAc稀釋。分層，并將水層再用EtOAc萃取2次。合并有機相，經(jīng)MgSO4干燥，并濃縮，得到吡咯15(791mg，63％)1H NMR(300MHz，(MeOD)δ7.11(d，J＝2.3Hz，1H)，5.67(d，J＝2.2Hz，1H)，1.61(s，9H)；m/z計算值C9H13N3163.22實測值163.95；HPLC保留時間＝1.550min(柱Luna C84.6×50mm，梯度時間3min，流速2ml/min，溶劑B的梯度-0-100％；波長220nM)。
6-氨基-1-叔丁基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-腈(17)向吡咯4(500mg，3.05mmol)在50ml EtOH的溶液中加入3，3-二甲氧基丙腈(16)(350mg，3.05mmol)，并然后加入1ml濃鹽酸。將該溶液回流攪拌。2h后，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器除去溶劑。將殘留物用水稀釋，并然后用1N NaOH(水溶液)中和。將水性混合物用EtOAc萃取。分離有機層，經(jīng)MgSO4干燥，并濃縮。粗品經(jīng)硅膠柱層析純化，得到吡咯并吡啶17(607mg，93％)1HNMR(400MHz，(CDCl3)δ7.93(d，J＝8.8Hz，1H)，7.57(s，1H)，6.60(d，J＝8.8Hz，1H)，1.76(s，9H)；m/z計算值C12H14N4214.27實測值214.90；HPLC保留時間＝3.395min(柱ShimPack VP-ODS 50×4.6，梯度時間4min，流速2.5ml/min，溶劑B的梯度-0-100％；波長220nM)。
10.1-叔丁基-6-(4-甲基-苯甲酰氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酸的制備
6-氨基-1-叔丁基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酸乙酯(18)向吡咯并吡啶17(150mg，0.70mmol)在20ml EtOH的溶液中加入5ml硫酸。將該溶液回流攪拌過夜。然后在真空下除去溶劑。將殘留物用水稀釋，并然后用1N NaOH(水溶液)中和。將水性混合物用EtOAc萃取。分離有機層，經(jīng)MgSO4干燥，并濃縮。粗品經(jīng)制備型HPLC純化，得到酯181H NMR(400MHz，(CDCl3)δ9.35(s，2H)，8.44(d，J＝8.8Hz，1H)，7.71(s，1H)，6.72(d，J＝8.8Hz，1H)，4.36(q，J＝7.2Hz，2H)，1.76(s，9H)，1.39(t，J＝7.2Hz，3H)；m/z計算值C14H19N3O2261.33實測值261.95；HPLC保留時間＝3.625min (柱ShimPack VP-ODS 50×4.6，梯度時間4min，流速2.5ml/min，溶劑B的梯度-0-100％；波長220nM)。
1-叔丁基-6-(4-甲基-苯甲酰氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酸乙酯(20)向酯7(1.2g.5.6mmol)的吡啶溶液中加入對甲苯酰氯(19)(1.02ml，11.2mmol)。將反應(yīng)物室溫攪拌。攪拌2h后，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器除去溶劑。殘留物用EtOAc稀釋，并然后用鹽水洗滌。有機層經(jīng)MgSO4干燥，并濃縮。粗品經(jīng)制備型HPLC純化，得到酰胺20(1.37g，65％)1HNMR(400MHz，(CDCl3)δ8.45(d，J＝8.8Hz，1H)，8.22(d，J＝8.8Hz，1H)，8.00(s，1H)，7.86(d，J＝8.0Hz，2H)，7.28(d，J＝8.0Hz，2H)，4.36(q，J＝7.2Hz，2H)，2.40(s，3H)，1.80(s，9H)，1.41(t，J＝7.6Hz，3H)；m/z計算值C22H25N3O3379.46實測值379.95；HPLC保留時間＝4.590min(柱ShimPack VP-ODS 50×4.6，梯度時間4min，流速3.0ml/min，溶劑B的梯度-0-100％；波長220nM)。
1-叔丁基-6-(4-甲基-苯甲酰氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酸(21)向酯20(83mg，0.218mmol)的乙醇溶液中加入4ml 1N NaOH(水溶液)。將該混合物在70C攪拌過夜。然后將混合物用EtOAc稀釋，并分層。水層用1N HCl(水溶液)酸化。將沉淀物過濾，得到目標(biāo)酸21m/z計算值C20H21N3O3351.41實測值351.95。
11.1-叔丁基-6-(4-甲基-苯甲酰氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酸異丙基酰胺的制備
向酸21(30mg，0.08mmol)的DMF溶液中加入異丙胺(0.015ml，0.17mmol)，然后加入N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)脲六氟磷酸鹽(65mg，0.17mmol)，接著加入三乙胺(0.023ml，0.17mmol)。將該溶液室溫攪拌。12h后，將混合物濃縮。殘留物經(jīng)制備型HPLC純化，得到標(biāo)題化合物(3.4mg，11％)1H NMR(400MHz，(CDCl3)δ8.53(bs，！H)，8.29(d，J＝8.8Hz，1H)，8.17(d，J＝8.8Hz，1H)，7.94(s，1H)，7.86(d，J＝8.0Hz，2H)，7.33(d，J＝8.0Hz，2H)，5.88(bs，1H)，4.39-4.32(m，1H)，2.45(s，3H)，1.79(s，9H)，1.32(d，J＝6.8Hz，6H)；m/z計算值C23H28N4O2392.51實測值393.O0；HPLC保留時間＝4.193min(柱ShimPack VP-ODS 50×4.6，梯度時間4min，流速3.0ml/min，溶劑B的梯度-15-100％；波長220nM)。
12.1-叔丁基-6-(4-甲基-苯甲酰氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酸乙基酰胺的制備
向酸21(50mg，0.14mmol)的DMF溶液中加入乙胺(0.140ml，0.28mmol)，然后加入N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)脲六氟磷酸鹽(108mg，0.28mmol)，接著加入三乙胺(0.041ml，0.28mmol)。將該溶液室溫攪拌。12h后，將混合物濃縮。殘留物經(jīng)制備型HPLC純化，得到標(biāo)題化合物(17mg，32％)1H NMR(400MHz，(CDCl3)δ8.72(bs，1H)，8.21(dd，J＝8.8，6.8Hz，2H)，7.94(s，1H)，7.85(d，J＝8.0Hz，2H)，7.30(d，J＝8.4Hz，2H)，6.36(bs，1H)，3.51(q，J＝7.2Hz，2H)，2.43(s，3H)，1.76(s，9H)，1.26(t，J＝7.2Hz，3H)；m/z計算值C22H26N4O2378.48實測值379.00；HPLC保留時間＝5.168min(柱ShimPackVP-ODS 50×4.6，梯度時間5min，流速3.0ml/min，溶劑B的梯度-10-100％；波長220nM)。
13.1-叔丁基-6-(4-甲基-苯甲酰氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酸異丁基-酰胺的制備
向酸21(50mg，0.14mmol)的DMF溶液中加入異丁胺(0.028ml，0.28mmol)，然后加入N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)脲六氟磷酸鹽(108mg，0.28mmol)，和接著加入三乙胺(0.041ml，0.28mmol)。將該溶液室溫攪拌。12h后，將混合物濃縮。殘留物經(jīng)制備型HPLC純化，得到標(biāo)題化合物(22mg，24％)1H NMR(400MHz，(CDCl3)δ8.60(bs，1H)，8.27(d，J＝8.8Hz，1H)，8.17(d，J＝8.4Hz，1H)，7.97(s，1H)，7.86(d，J＝8.4Hz，2H)，7.33(d，J＝7.6Hz，2H)，6.20(bs，1H)，3.34(d，J＝6.8Hz，2H)，2.45(s，3H)，1.99-1.90(m，1H)，1.76(s，9H)，1.01(d，J＝6.8Hz，3H)；m/z計算值C24H30N4O2406.53實測值407.05；HPLC保留時間＝4.796min(柱ShimPack VP-ODS 50×4.6，梯度時間5min，流速3.0ml/min，溶劑B的梯度-30-100％；波長220nM)。
14.1-叔丁基-6-(4-甲基-苯甲酰氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酸二甲基酰胺的制備
向酸21(50mg，0.14mmol)的DMF溶液中加入二甲胺(0.140ml，0.28mmol)，然后加入N，N，N′，N′-四甲基-0-(7-氮雜苯并三唑-1-基)脲六氟磷酸鹽(108mg，0.28mmol)，和接著加入三乙胺(0.041ml，0.28mmol)。將該溶液室溫攪拌。12h后，將混合物濃縮。殘留物經(jīng)制備型HPLC純化，得到標(biāo)題化合物(5.3mg，10％)1H NMR(400MHz，(CDCl3)δ8.42(bs，1H)，8.26(d，J＝8.8Hz，1H)，8.06(d，J＝9.6Hz，1H)，7.86(d，J＝7.2Hz，2H)，7.64(s，1H)，7.32(d，J＝7.6Hz，2H)，3.17(s，6H)，2.44(s，3H)，1.79(s，9H)；m/z計算值C22H26N4O2378.48實測值379.00；HPLC保留時間＝3.455min(柱ShimPack VP-ODS 50×4.6，梯度時間4min，流速3.0ml/min，溶劑B的梯度-40-100％；波長220nM)。
15.1-叔丁基-6-(4-甲基-苯甲酰氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-羧酸二乙基酰胺的制備
向酸21(50mg，0.14mmol)的DMF溶液中加入二乙胺(0.05ml，0.28mmol)，然后加入N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)脲六氟磷酸鹽(108mg，0.28mmol)，和接著加入三乙胺(0.041ml，0.28mmol)。將該溶液室溫攪拌。12h后，將混合物濃縮。殘留物經(jīng)制備型HPLC純化，得到標(biāo)題化合物(9.9mg，17％)1H NMR(400MHz，(CDCl3)δ8.49(bs，1H)，8.24(d，J＝8.8Hz，1H)，8.00(d，J＝8.8Hz，1H)，7.86(d，J＝8.0Hz，2H)，7.65(s，1H)，7.33(d，J＝8.4Hz，2H)，3.61(q，J＝7.2Hz，4H)，2.45(s，3H)，1.79(s，9H)，1.26(t，J＝7.2Hz，6H)；m/z計算值C24H30N4O2406.53實測值407.00；HPLC保留時間＝4.545min(柱ShimPack VP-ODS 50×4.6，梯度時間5min，流速3.0ml/min，溶劑B的梯度-30-100％；波長220nM)。
16.1-叔丁基-6-氟-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酸的制備
(2，6-二氟-吡啶-3-基)-氧代-乙酸叔丁酯(23)在-78℃向2，6-二氟吡啶(22)(2.7ml，30mmol)在30ml THF的溶液中逐滴加入新制的二異丙胺鋰(32mmol)的溶液。所得溶液在-78℃保持30min。在-78℃向攪拌的該溶液中逐滴加入預(yù)制的草酸二叔丁酯(7.7g，38mmol)在30mlTHF的溶液。將該反應(yīng)混合物在-78℃攪拌30min，并然后在-20℃攪拌20min。溶液用NH4Cl(水溶液)飽和溶液淬滅，并然后用Et2O稀釋。分層，并將有機層經(jīng)Na2SO4干燥，然后真空濃縮，得到為黃色油狀物的產(chǎn)物23(6.93g，95％)1H NMR(300MHz，(CDCl3)δ8.49(dd，1H)，7.04(dd，JHH＝8.2Hz，JHF＝2.9Hz，1H)，1.61(s，9H)。
(叔丁基-亞肼基)-(2，6-二氟-吡啶-3-基)-乙酸叔丁酯(24)向二氟吡啶23(8.0g，32.9mmol)的EtOH溶液中加入叔丁基肼(4.1g，32.9mmol)和三乙胺(4.58ml，32.9mmol)。將反應(yīng)物在60℃攪拌。攪拌2h后，將該混合物真空濃縮。殘留物用鹽水和二氯甲烷稀釋。分層，并將有機層經(jīng)MgSO4干燥，并濃縮。粗品經(jīng)硅膠柱層析純化，得到產(chǎn)物24(2.25g，22％)1H NMR(400MHz，(CDCl3)δ7.82(dd，1H)，7.04(dd，JHH＝8.0Hz，JHF＝3.0Hz，1H)，1.47(s，9H)，1.27(s，9H)。
1-叔丁基-6-氟-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酸叔丁酯(25)向24(2.3g，7.35mmol)的THF溶液中加入氫化鈉(340mg，8.81mmol)。將反應(yīng)物在70℃攪拌，并用TLC監(jiān)控。反應(yīng)完成后，混合物用NH4Cl(水溶液)飽和溶液淬滅，然后用鹽水稀釋。分層，并將有機層經(jīng)MgSO4干燥，并真空濃縮。粗品經(jīng)硅膠柱層析純化，得到酯25(1.2g，56％)1H NMR(300MHz，(CDCl3)δ8.45(dd，1H)，6.90(dd，JHH＝8.6Hz，JHF＝1.4Hz，1H)，1.86(s，9H)，1.70(s，9H)；m/z計算值C15H20FN3O2293.34實測值293.90；HPLC保留時間＝3.726min(梯度時間3min，流速2.5ml/min，溶劑B的梯度-50-100％；波長220nM)。
1-叔丁基-6-氟-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酸(26)向酯25(1.2g，4.1mmol)在40ml二氯甲烷的溶液中加入5ml三氟乙酸。攪拌4h后，將混合物濃縮，得到酸26。
17.1-叔丁基-6-(4-甲基-苯甲酰氨基)-lH-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酸(1-乙基-丙基)-酰胺的制備
6-氨基-1-叔丁基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酸(1-乙基-丙基)-酰胺(27)向酸26(158mg，0.667mmol)，三乙胺(0.1ml，0.733mmol)，EDCI(140mg，0.733mmol)和HOAt(100mg，0.733mmol)的二氯甲烷溶液中加入1-乙基丙烷(58mg，0.667mmol)。將該混合物室溫攪拌過夜。然后用鹽水洗滌反應(yīng)物。合并有機層，經(jīng)MgSO4干燥，并濃縮，得到黃色油狀物。將粗制的中間體溶解在10ml 7N的氨水甲醇溶液中。將該溶液在140℃攪拌。36h后，將混合物濃縮。粗品經(jīng)制備型HPLC純化，得到為澄清油狀物的酰胺27(60mg，30％)m/z計算值C16H25N5O303.41實測值304.20。
1-叔丁基-6-(4-甲基-苯甲酰氨基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酸(1-乙基-丙基)-酰胺(29)向酰胺7(80mg，0.264mmol)在3ml吡啶的溶液中加入對甲苯酰氯(0.087ml，0.66mmol)。將反應(yīng)物室溫攪拌，并用TLC監(jiān)控。攪拌4h后，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器除去溶劑。將殘留物用二氯甲烷稀釋，并然后用NaHCO3(水溶液)飽和溶液和鹽水洗滌。有機層經(jīng)MgSO4干燥，并濃縮。粗品經(jīng)制備型HPLC純化，得到為白色固體的標(biāo)題化合物(57mg，51％)1H NMR(300MHz，(CDCl3)δ8.71(d，J＝9.0Hz，1H)，8.52(bs，1H)，8.39(d，J＝8.7Hz，1H)，7.89(d，J＝8.4Hz，2H)，7.36(d，J＝7.8Hz，2H)，6.75(d，J＝9.5Hz，1H)，4.11-3.97(m，1H)，2.47(s，3H)，1.85(s，9H)，1.71-167(m，2H)，1.61-1.55(m，2H)，1.02(t，J＝7.2Hz，6H)；m/z計算值C24H31N5O2421.55實測值422.30；HPLC保留時間＝4.731min (梯度時間3min，流速3ml/min，溶劑B的梯度-40-100％；波長220nM)。
18.1-叔丁基-6-(4-甲基-苯甲酰氨基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酸異丙基酰胺的制備
6-氨基-1-叔丁基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酸異丙基酰胺(29)向酸26(200mg，0.844mmol)，三乙胺(0.142ml，1.02mmol)，EDCI(198mg，1.02mmol)和HOAt(137mg，1.02mmol)在5ml二氯甲烷的溶液中加入異丙胺(0.072ml，0.844mmol)。將該混合物室溫攪拌過夜。然后反應(yīng)物用NaHCO3(水溶液)飽和溶液和鹽水洗滌。分離有機層，經(jīng)MgSO4干燥，并濃縮，得到黃色固體。將粗制的中間體溶解在7N氨水的甲醇溶液中。將該溶液在140℃攪拌。24h后，將混合物濃縮。粗品經(jīng)制備型HPLC純化，得到為白色固體的酰胺29(99mg，43％)m/z計算值C14H21N5O275.36實測值276.1。
1-叔丁基-6-(4-甲基-苯甲酰氨基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酸異丙基酰胺(30)向酰胺29(60mg，0.218mmol)在4ml吡啶的溶液中加入對甲苯酰氯(0.051ml，0.436mmol)。將該反應(yīng)物室溫攪拌。攪拌4h后，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器除去溶劑。殘留物用50ml二氯甲烷稀釋，并然后用NaHCO3(水溶液)飽和溶液和鹽水洗滌。有機層經(jīng)MgSO4干燥，并濃縮。粗品經(jīng)制備型HPLC純化，得到為白色固體的標(biāo)題化合物(38mg，44％)1H NMR(300MHz，(CDCl3)δ8.70(d，J＝8.7Hz，1H)，8.51(bs，1H)，8.38(d，J＝8.7Hz，1H)，7.89(d，J＝8.4Hz，2H)，7.36(d，J＝7.8Hz，2H)，6.84(d，J＝9.0Hz，1H)，4.42-4.29(m，1H)，2.48(s，3H)，1.85(s，9H)，1.34(d，J＝6.6，6H)；m/z計算值C22H27N5O2393.49實測值394.30；HPLC保留時間＝4.371min(梯度時間3min，流速3ml/min，溶劑B的梯度-50-100％；波長220nM)。
19.6-氨基-1-叔丁基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酸環(huán)丙基酰胺的制備
向酸26(150mg，0.632mol)，三乙胺(0.07ml，0.76mmol)，EDCI(145mg，0.76mmol)和HOAt(103mg，0.76mmol)的二氯甲烷溶液中加入環(huán)丙胺(36mg，0.632mmol)。將該混合物室溫攪拌過夜。然后將該反應(yīng)物用NaHCO3(水溶液)飽和溶液和鹽水洗滌。分離有機層，經(jīng)MgSO4干燥，并濃縮。將粗制的中間體溶解在7N氨水的甲醇溶液中。將該溶液在140℃攪拌。24h后，將混合物濃縮。粗品經(jīng)制備型HPLC純化，得到為白色固體的標(biāo)題酰胺(50mg，27％)m/z計算值C14H19N5O273.34實測值274.2。
1-叔丁基-6-(4-甲基-苯甲酰氨基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酶環(huán)丙基酰胺向6-氨基-1-叔丁基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酸環(huán)丙基酰胺(50mg，0.169mmol)在2ml吡啶的溶液中加入對甲苯酰氯(0.05ml，0.378mmol)。將該反應(yīng)物室溫攪拌過夜。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器除去溶劑。殘留物用50ml二氯甲烷稀釋，并然后用NaHCO3(水溶液)飽和溶液和鹽水洗滌。將有機層經(jīng)MgSO4干燥，并濃縮。粗品經(jīng)制備型HPLC純化，得到為白色固體的標(biāo)題化合物(25mg，38％)1H NMR(300MHz，(CDCl3)δ8.70(d，J＝9.0Hz，1H)，8.51(bs，1H)，8.40(d，J＝9.0Hz，1H)，7.89(d，J＝8.1Hz，2H)，7.36(d，J＝8.1Hz，2H)，7.11(bs，1H)，2.97-2.87(m，1H)，2.47(s，3H)，1.83(s，9H)，0.95-0.88(m，2H)，0.75-0.70(m，2H)；m/z計算值C22H25N5O2391.48實測值392.45；HPLC保留時間＝4.201min(梯度時間3min，流速3ml/min，溶劑B的梯度-50-100％；波長220nM)。
20.1-叔丁基-6-(3-甲基-苯甲酰氨基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-羧酸異丙基酰胺的制備
向間甲苯酰氯(0.025ml，0.18mmol)在0.5ml吡啶的溶液中加入酰胺29(38mg，0.18mmol)在1.5ml吡啶中的溶液。將所得溶液室溫攪拌3h，并然后濃縮。粗品用制備型HPLC純化，得到為白色固體的標(biāo)題化合物1H NMR(300MHz，(CDCl3)δ8.61(d，J＝8.7Hz，1H)，8.39(s，1H)，8.28(d，J＝9.0Hz，1H)，7.72-7.62(m，2H)，7.36-7.31(m，2H)，6.72(d，J＝7.8Hz，1H)，4.33-4.19(m，1H)，2.39(s，3H)，1.75(s，9H)，1.24(d J＝6.6，6H)；m/z計算值C22H27N5O2393.49實測值394.35。
21.人脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白測定 如下測定化合物抑制脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白的能力。將人SLC6A7cDNA克隆入pcDNA3.1載體，并轉(zhuǎn)染入COS-1細胞。本試驗選擇穩(wěn)定表達脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白的細胞克隆。
在384孔板中以15,000個細胞/孔的量接種轉(zhuǎn)染細胞，并過夜培養(yǎng)。然后用含有120mM NaCl，4.7mM KCl，2.2mM CaCl，1.2mM MgSO4.1.2mM KH2PO4，10mM HEPES和5mM Tris的Krebs-Ringer’s-HEPES-Tris(KRHT)緩沖液(pH7.4)洗滌所述細胞。然后將該細胞用50μl含有45nM3H-脯氨酸的KRHT緩沖液室溫孵育20min。通過除去放射標(biāo)記的脯氨酸，并迅速用100μl冰冷的KRHT緩沖液洗滌細胞3次，終止放射標(biāo)記的脯氨酸的攝取。各孔加入閃爍液(50μl)，用Packard TopCount閃爍計數(shù)器測定存在的氚標(biāo)記脯氨酸的量。
通過測量在2mM冷脯氨酸存在下3H-脯氨酸的攝取，來測定非特異性攝取。
通過測量4個獨立樣品在10種濃度下的抑制作用，測定化合物的IC50，所述10種濃度通常由10μM開始，然后是9種3倍稀釋級的濃度(即，10，3.3，1.1，0.37，0.12，0.41，0.014，0.0046，0.0015和0μM)。計算相對于對照的百分抑制率。用10個數(shù)據(jù)點確定化合物的IC50，各數(shù)據(jù)點是4個相應(yīng)測量值的平均值。
22.鼠脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白測定 從野生型小鼠中切取前腦組織，在7ml冰冷的勻漿緩沖液0.32M蔗糖，1mM NaHCO3，蛋白酶抑制劑cocktail(Roche)中勻漿化。
將腦勻漿在1000×g下離心10min，以除去核。收集上清液，再在20000×g下離心20min，以沉淀天然突觸小體。將突觸小體重新懸浮在冰冷的分析緩沖液122mM NaCl，3.1mM KCl，25mM HEPES，0.4mMKH2PO4，1.2mM MgSO4，1.3mM CaCl2，10mM右旋糖(pH7.4)中。重新懸浮的突觸小體再次在20000×g下離心20min，并將沉淀的突觸小體重新懸浮在分析緩沖液中。用DC蛋白質(zhì)分析試劑盒(BioRad)測量蛋白質(zhì)的濃度。
脯氨酸轉(zhuǎn)運測定在室溫下，在100μl由10μg突觸小體，1μCi/0.24μM[H3]-脯氨酸在分析緩沖液中組成的反應(yīng)混合物中進行0-20min的時間。通過用GF/B濾板(Millipore)快速過濾，然后用200ul冰冷的分析緩沖液快速洗滌3次，使反應(yīng)終止。向各反應(yīng)物中加入50μlMicroscint-20，并孵育2h。通過放射性計數(shù)測定[H3]-脯氨酸轉(zhuǎn)運。
為測定化合物對脯氨酸轉(zhuǎn)運的抑制作用，將化合物在0-10μM(11個點，開始于10um；3倍稀釋體；4次重復(fù)測定結(jié)果平均后得到1個點)的濃度下與反應(yīng)混合物一起孵育。在反應(yīng)物中存在0.3mM GGFL(Enkephalin，Sigma)的條件下測定基線活性或非特異性活性。還在SLC6A7敲除小鼠的突觸小體中測量非特異性活性。由兩種方法測得的非特異性活性結(jié)果一致。
23.人多巴胺轉(zhuǎn)運蛋白測定 如下測定化合物抑制多巴胺轉(zhuǎn)運蛋白的能力。將人DAT cDNA(NM_001044)克隆入pcDNA3.1載體，并轉(zhuǎn)染入COS-1細胞。將所得穩(wěn)定表達多巴胺轉(zhuǎn)運蛋白的細胞系用于進一步的實驗。
在384孔板中以15,000個細胞/孔的量接種轉(zhuǎn)染細胞，并過夜培養(yǎng)。然后用含有125mM NaCl，4.8mM KCl，1.3mM CaCl2，1.2mM MgSO4，10mM D-葡萄糖，25mM HEPES，1mM抗壞血酸鈉和1.2mM KH2PO4的Krebs-Ringer’s-HEPES-Tris(KRHT)緩沖液(pH7.4)洗滌所述細胞。然后將該細胞用50μl含有1μM 3H-多巴胺的KRHT緩沖液室溫孵育10min。通過除去放射標(biāo)記的多巴胺，并迅速用100μl冰冷的KRHT緩沖液洗滌細胞3次，終止放射標(biāo)記的多巴胺的攝取。各孔加入閃爍液(50μl)，用Packard TopCount閃爍計數(shù)器測定存在的氚標(biāo)記多巴胺的量。
通過測量在250μM苯扎托品存在下3H-多巴胺的攝取，來測定非特異性攝取。通過測量4個獨立樣品在10種濃度下的抑制作用，測定化合物的IC50，所述10種濃度通常由10μM開始，然后是9種3倍稀釋級的濃度(即，10，3.3，1.1，0.37，0.12，0.41，0.014，0.0046，0.0015和0μM)。計算相對于對照的百分抑制率。計算相對于對照的百分抑制率，IC50的計算采用4次重復(fù)實驗的平均值。
24.人甘氨酸轉(zhuǎn)運蛋白測定 如下測定化合物抑制甘氨酸轉(zhuǎn)運蛋白的能力。將人甘氨酸轉(zhuǎn)運蛋白cDNA(NM_006934)克隆入pcDNA3.1載體，并轉(zhuǎn)染入COS-1細胞。將所得穩(wěn)定表達甘氨酸轉(zhuǎn)運蛋白的細胞系用于進一步的實驗。
在384孔板中以15,000個細胞/孔的量接種轉(zhuǎn)染細胞，并過夜培養(yǎng)。然后用含有120mM NaCl，4.7mM KCl，2.2mM CaCl2，1.2mM MgSO4，1.2mM KH2PO4，10mM HEPES和5mM Tris的Krebs-Ringer’s-HEPES-Tris(KRHT)緩沖液(pH7.4)洗滌所述細胞。然后將該細胞用50μl含有166nM 3H-甘氨酸的KRHT緩沖液室溫孵育10min。通過除去放射標(biāo)記的甘氨酸，并迅速用100μl冰冷的KRHT緩沖液洗滌細胞3次，終止放射標(biāo)記的甘氨酸的攝取。各孔加入閃爍液(50μl)，用Packard TopCount閃爍計數(shù)器測定存在的氚標(biāo)記甘氨酸的量。
通過測量在2mM冷甘氨酸存在下3H-甘氨酸的攝取，來測定非特異性攝取。通過測量4個獨立樣品在10種濃度下的抑制作用，測定化合物的IC50，所述10種濃度通常由10μM開始，然后是9種3倍稀釋級的濃度(即，10，3.3，1.1，0.37，0.12，0.41，0.014，0.0046，0.0015和0μM)。計算相對于對照的百分抑制率。計算相對于對照的百分抑制率，IC50的計算采用4次重復(fù)實驗的平均值。
25.計算IC50值 通過用Levenburg Marquardt算法將相關(guān)數(shù)據(jù)擬合成方程式 y＝A+((B-A)/(1+((C/x)^D))) 確定化合物關(guān)于指定靶點的IC50，其中A是最小y值；B是最大y值；C是IC50；D是斜率。用Microsoft Excel的XLFit4軟件(ID BusinessSolutions Inc.，Bridgewater，NJ 08807)完成IC50的計算(上述方程式是該軟件的205模型)。
權(quán)利要求
1.式I的特異性脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白抑制劑
或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，其中
R1是氫或任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)；
R2是氫或任選取代的烷基；
各R3獨立地為鹵素，胺，羥基，烷氧基或任選取代的烷基，芳基或雜環(huán)；
R4和R5各自獨立地為氫或任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)，或與它們所連接的氮原子合起來形成任選取代的雜環(huán)；和
n是0-5。
2.式I的化合物
或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，其中
R1是氫或任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)；
R2是氫或任選取代的烷基；
各R3獨立地為鹵素，胺，羥基，烷氧基或任選取代的烷基，芳基或雜環(huán)；
R4和R5各自獨立地為氫或任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)，或與它們所連接的氮原子合起來形成任選取代的雜環(huán)；和
n是0-5，
附加條件是，R4和R5與它們所連接的氮原子合起來不形成1，4-二氮雜-二環(huán)[3.2.2]壬烷或哌嗪-C(O)-苯基。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中R1是叔丁基或丙基。
4.權(quán)利要求2的化合物，其中R3是低級烷基。
5.權(quán)利要求2的化合物，其中R4和R5合起來形成任選取代的吡啶或吡咯烷。
6.式I-A的特異性脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白抑制劑
或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，其中
A是雜環(huán)；
R1是氫或任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)；
R2是氫或任選取代的烷基；
各R3獨立地為鹵素，胺，羥基，烷氧基或任選取代的烷基，芳基或雜環(huán)；
R6是任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)；和
n是0-5。
7.式I-A的化合物
或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，其中
A是雜環(huán)；
R1是氫或任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)；
R2是氫或任選取代的烷基；
各R3獨立地為鹵素，胺，羥基，烷氧基或任選取代的烷基，芳基或雜環(huán)；
R6是任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)；和n是0-5，
附加條件是，A不是1，4-二氮雜-二環(huán)[3.2.2]壬烷或哌嗪。
8.權(quán)利要求7的化合物，其中A是任選取代的吡啶或吡咯烷。
9.權(quán)利要求7的化合物，其中R6是吡啶或吡咯烷。
10.式II的化合物
或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，其中
R1是氫或任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)；
R2是氫或任選取代的烷基；
各R3獨立地為鹵素，胺，羥基，烷氧基或任選取代的烷基，芳基或雜環(huán)；
R4和R5各自獨立地為氫或任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)，或與它們所連接的氮原子合起來形成任選取代的雜環(huán)；和
n是0-5。
11.權(quán)利要求10的化合物，其中R1是叔丁基或丙基。
12.權(quán)利要求10的化合物，其中R3是低級烷基。
13.權(quán)利要求10的化合物，其中R4和R5合起來形成任選取代的吡啶或吡咯烷。
14.權(quán)利要求10的化合物，其是特異性脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白抑制劑。
15.式II-A的化合物
或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，其中
A是雜環(huán)；
R1是氫或任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)；
R2是氫或任選取代的烷基；
各R3獨立地為鹵素，胺，羥基，烷氧基或任選取代的烷基，芳基或雜環(huán)；
R6是任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)；和
n是0-5。
16.權(quán)利要求15的化合物，其中A是任選取代的吡啶或吡咯烷。
17.權(quán)利要求15的化合物，其中R6是吡啶或吡咯烷。
18.權(quán)利要求15的化合物，其是特異性脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白抑制劑。
19.式III的化合物
或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，其中
R1是氫或任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)；
R2是氫或任選取代的烷基；
各R3獨立地為鹵素，胺，羥基，烷氧基或任選取代的烷基，芳基或雜環(huán)；
R4和R5各自獨立地為氫或任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)，或與它們所連接的氮原子合起來形成任選取代的雜環(huán)；和
n是0-5。
20.權(quán)利要求19的化合物，其中R1是叔丁基或丙基。
21.權(quán)利要求19的化合物，其中R3是低級烷基。
22.權(quán)利要求19的化合物，其中R4和R5合起來形成任選取代的吡啶或吡咯烷。
23.權(quán)利要求19的化合物，其是特異性脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白抑制劑。
24.式III-A的化合物
或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，其中
A是雜環(huán)；
R1是氫或任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)；
R2是氫或任選取代的烷基；
各R3獨立地為鹵素，胺，羥基，烷氧基或任選取代的烷基，芳基或雜環(huán)；
R6是任選取代的烷基，芳基，雜環(huán)，烷基-芳基或烷基-雜環(huán)；和n是0-5。
25.權(quán)利要求24的化合物，其中A是任選取代的吡啶或吡咯烷。
26.權(quán)利要求24的化合物，其中R6是吡啶或吡咯烷。
27.權(quán)利要求24的化合物，其是特異性脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白抑制劑。
28.含有權(quán)利要求1或6的特異性脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白抑制劑和藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物。
29.含有權(quán)利要求2，7，10，15或19的化合物和藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物。
30.抑制脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白的方法，其包括使脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白與足夠量的權(quán)利要求1或6的特異性脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白抑制劑接觸。
31.權(quán)利要求30的方法，其中所述脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白由人基因SLC6A7編碼。
32.抑制脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白的方法，其包括使脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白與足夠量的權(quán)利要求2，7，10，15或19的化合物接觸。
33.權(quán)利要求32的方法，其中所述脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白由人基因SLC6A7編碼。
34.改善人患者的認知性能的方法，其包括向該患者施予有效量的權(quán)利要求1或6的特異性脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白抑制劑。
35.權(quán)利要求34的方法，其中所述認知性能是學(xué)習(xí)，理解，推理或記憶的迅速程度。
36.改善人患者的認知性能的方法，其包括向該患者施予有效量的權(quán)利要求2，7，10，15或19的化合物。
37.權(quán)利要求36的方法，其中所述認知性能是學(xué)習(xí)，理解，推理或記憶的迅速程度。
38.治療，控制或預(yù)防人患者的疾病或病癥的方法，其包括向該患者施予有效量的權(quán)利要求1或6的特異性脯氨酸轉(zhuǎn)運蛋白抑制劑。
39.權(quán)利要求38的方法，其中所述疾病或病癥是阿爾茨海默氏病，孤獨癥，認知障礙，癡呆，學(xué)習(xí)障礙或記憶喪失。
40.權(quán)利要求39的方法，其中所述學(xué)習(xí)障礙是誦讀困難，計算障礙，書寫困難，言語障礙癥或舉名困難。
41.治療，控制或預(yù)防人患者的疾病或病癥的方法，其包括向該患者施予有效量的權(quán)利要求2，7，10，15或19的化合物。
42.權(quán)利要求41的方法，其中所述疾病或病癥是阿爾茨海默氏病，孤獨癥，認知障礙，癡呆，學(xué)習(xí)障礙或記憶喪失。
43.權(quán)利要求42的方法，其中所述學(xué)習(xí)障礙是誦讀困難，計算障礙，書寫困難，言語障礙癥或舉名困難。
全文摘要
本發(fā)明公開了吡咯并吡啶，吡咯并嘧啶和吡唑并吡啶化合物，包含它們的組合物，以及它們的使用方法。
文檔編號C07D471/04GK101252935SQ200680030962
公開日2008年8月27日 申請日期2006年8月22日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月24日
發(fā)明者辛西婭·安·凡克, 約瑟夫·巴爾博薩, G·格雷戈里·齊普, 王建成 申請人:萊西肯醫(yī)藥有限公司