專利名稱：一種抑制癌細(xì)胞生長的短肽及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)醫(yī)藥領(lǐng)域，本發(fā)明更具體涉及了一種抑制癌細(xì)胞生長的短肽及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
在癌癥發(fā)生與治療的過程中，化學(xué)治療一直屬于主體部分?，F(xiàn)有的臨床使用的化療藥物， 如環(huán)磷酰胺、順鉑、阿糖胞苷、阿霧素和長春新堿等，它們主要是用來破壞細(xì)胞的周期的， RNA、 DNA和蛋白質(zhì)都是此類藥物的耙向目標(biāo)。近年來，AsA在對(duì)于白血病的治療上取得了很 大的進(jìn)展，但是，該藥物和其他化療藥物，其本身都有自己的毒性，不管是一種化療藥物單 獨(dú)使用還是幾種化療藥物結(jié)合運(yùn)用在臨床治療上，其在對(duì)癌癥有明顯療效，殺傷殺死癌細(xì)胞 的同時(shí)，也會(huì)損害病人的正常細(xì)胞。化療藥物的副作用最普遍的就是對(duì)病人的骨髓產(chǎn)生極度 抑制，造成病人的極大痛苦，甚至引起死亡。到目前，除了早發(fā)現(xiàn)癌癥病情并實(shí)行手術(shù)切除 腫瘤包塊外，對(duì)于已經(jīng)擴(kuò)散的腫瘤和白血病仍沒有特效藥物去治療[Cancer Biology癌生物 學(xué)，R.J.B金著，劉以訓(xùn)主譯，科學(xué)出版社，2002],現(xiàn)有臨床上用于癌癥治療的藥物大都 是化合物，而短肽在癌癥方面的應(yīng)用尚無文獻(xiàn)報(bào)道。 發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明目的是針對(duì)上述問題，提供一種抑制癌細(xì)胞生長的短肽及其應(yīng)用。本發(fā)明的一種抑制癌細(xì)胞生長的短肽，其特征在于組成短肽的氨基酸主序列a〉和編碼短肽的核苷酸主序列〈2〉如下<1> J-Leu-B-Ser-O"Ala-Lys其中，J代表氨基酸Lys， Thr或lie; B代表貧基黢 Pro或Leu: 0代表氛基酸Ser或Ala;<2> AHA CTG CMT TCA NCT GCC AAA其中，H代表核苷酸T, A或C; M代表核苷酸T 或C; N代表核苷酸T或A。本發(fā)明的抑制癌細(xì)胞生長的短肽片段，其氨基酸主序列具有與該短肽氨i^襯主序列^70%的相同性，>90%的相似性，片段為把所述的7個(gè)氨基酸的序列從任意位置截取成3個(gè) 或4個(gè)或5個(gè)或6個(gè)氣基酸組成的與所述短肽具有同樣生物活性的短肽。本發(fā)明的抑制癌細(xì)胞生長的短肽類似物具有與所述短肽相同的生物活性，所述類似物是 指在用所述短肽和另一種化合物融合或者用所述短肽的氨基酸序列融合另外的多肽或者蛋白 質(zhì)而形成具有生物活性的多肽序列或蛋白質(zhì)。本發(fā)明的抑制癌鎺胞生長的短肽衍生物，其氨基酸序列具有與短肽氨基酸主序列>70% 的相同性，>90%的相似性，該衍生物是指把所述氨基酸的序列中的氛基酸的一個(gè)或者幾個(gè) 氨基酸的某個(gè)基團(tuán)用另外的基團(tuán)取代后與所述短肽具有同樣生物活性的短肽。本發(fā)明的抑制癌細(xì)胞生長的短肽變體，其貧基酸序列具有與短肽氨基酸主序列>70%的 相同性，>90%的相似性，該變體是指一種具有一個(gè)或幾個(gè)氨基酸或核苷酸改變的氨基酸序 列或編碼它的核苷酸序列，所述改變包括在氨基酸序列或核苷酸序列中，在序列中間的任一 位置缺失、插入或替換氨基酸或核苷酸，或在序列兩端添加氨基酸或核苷黢。本發(fā)明的短肽、核苷酸、短肽片段、短肽類似物、短肽衍生物和短肽變體用于制備具有 治療非實(shí)體腫瘤人髄系各類病變細(xì)胞增生引起的白血病、治療人實(shí)體腫瘤痛細(xì)胞增殖的各類 癌癥、抑制高血壓、診斷與檢測(cè)癌癥的發(fā)生以及癌癥發(fā)生的惡性程度藥物的應(yīng)用。本發(fā)明的短肽或核苷酸用于制備具有作為蛋白酶抑制劑或者促進(jìn)劑或者親和試劑的藥物 或者檢測(cè)試劑的應(yīng)用。本發(fā)明的顯審優(yōu)點(diǎn)是本發(fā)明的短肽來自于運(yùn)用生物信息學(xué)的方法把國際蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫 的蛋白進(jìn)行序列比對(duì)，篩選出來的一種新型的具有活性功能的生物活性肽，運(yùn)用本發(fā)明的短 肽抑制或殺傷癌細(xì)胞的同時(shí)對(duì)正常細(xì)胞無顯著傷害作用，解決了現(xiàn)有癌癥藥物在抑制或殺死 癌細(xì)胞的同時(shí)對(duì)人體正常細(xì)胞也有嚴(yán)重傷害的缺陷。


圖1是本發(fā)明的短肽抑制肝癌細(xì)胞生長的試驗(yàn)照片。其中，(a)實(shí)驗(yàn)組(Test)為具有 顯著抑制效果的顯微鏡照片；(b)對(duì)照組(Control)為未加該短肽的陰性對(duì)照試驗(yàn)顯微鏡照片。(Test), (b)對(duì)照組(Control),圖3是運(yùn)用透射電鏡檢驗(yàn)分析宮頸癌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的試驗(yàn)結(jié)果。 圖4是短肽抑制高血壓的試驗(yàn)結(jié)果。
具體實(shí)施方式
短肽的制備方法采用化學(xué)合成的方法，即本領(lǐng)域熟知的已經(jīng)非常成熟的面相肽合成方法， 既可以采用Boc方法也可以采用Fmoc方法。具體做法就是將被保護(hù)的氨基酸逐個(gè)偶聯(lián)到惰性 固相載體上去，然后利用強(qiáng)酸將肽鏈從載體上裂解下來，同時(shí)去除,保護(hù)。短肽的氨基酸主序列為氨基酸位置固定的主序列，其間隔的位置選擇攤列相對(duì)應(yīng)的貧基 酸，例如，在J位置的氨基酸有3種Lys, Thr或Ile，此3種氨基黢都可以單一地安放在<1>中J的位置上，不管選擇其中任何一種，該短肽仍具^^其原有的生物活性，即抑制惡性腫癍 細(xì)胞增長，同樣地B和0所代表的位置的氨基酸也有如此特性。核苷酸采用人工合成方法制備；編碼短肽的核苷酸包含下組中的一種(a) 編碼具有所述氨基酸序列的短肽或其片段、類似物、衍生物或其變體的核苷酸(b) 與(a)所述核苷酸互補(bǔ)的核苷酸(c) 與(a)或(b)中所述核苷酸有>75%相同性的核苷酸；該核苷酸基本由編碼具有〈1〉気基醆序列短肽的核苷酸組成，本發(fā)明的核苷酸序列包括 <2>中的核苷酸序列，其形式為DNA形式包括cDNA或人工合成的DNA。 DNA可以是單鏈的也可 以是雙鏈的。編碼短肽的編碼區(qū)序列可以和〈2〉中的核苷酸相同，也可以不同，稱為變異體， 其中變異體是指具有編碼〈1〉中的氨基酸序列的編碼，但可以和〈2〉中的核苷酸不同。變異體 可以是一個(gè)或幾個(gè)核苷酸取代、插入、缺失的核苷酸序列，但不會(huì)改變編碼〈1〉中氨基酸序列 的短肽的活性功能。該短肽或核苷酸的"變體"是指一種具有一個(gè)或幾個(gè)氨基酸或核苷酸改變的貧基酸序列 或編碼它的核苷酸序列。改變可包括氨基醆序列或核苷黢序列中豕基酸或核苷酸的缺失、插 入、添加或替換。變體可具有"保守性"改變，其中替換的氨基酸具有與原氨基酸相類似的 結(jié)構(gòu)或化學(xué)性質(zhì)，也可以有"非保守性"改變，其中替換的氨基酸不具有與原氨基酸相類似 的結(jié)構(gòu)或化學(xué)性質(zhì)。"缺失"是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一個(gè)或幾個(gè)氣基酸或核苷酸的 缺失；"插入"是指在氨基酸序列或核苷酸序列的中間任意位置插入一個(gè)或幾個(gè)氨基酸"添 加"是指在氨基酸序列或核苷酸序列的N端或C端添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸；"替換"是指用不 同的^基酸或核苷酸替換一個(gè)或幾個(gè)氣基酸或核苷酸。該短肽、核苷酸、短肽片段、短肽類似物、短肽衍生物和短肽變體用于制備具有抑制與 治療包括但不限于下述疾病的藥物的用途1. 非實(shí)體腫痛髄系白血病急性非淋巴細(xì)胞白血病(M1:未分化的原粒細(xì)胞白血??； M2:部分分化的原粒細(xì)胞白血病；M3:急性早幼粒細(xì)胞白血病M4:急性粒、單核 細(xì)胞白血??；M5:急性單核細(xì)胞白血?。籑6:急性紅血病或紅白血??；M7:急性巨 核細(xì)胞白血病)，急性淋巴細(xì)胞白血病，慢性粒細(xì)胞白血病，慢性粒-單細(xì)胞白血病， 慢性單核細(xì)胞白血病以及其他特殊類型的細(xì)胞惡性增殖類型的白血病。2. 實(shí)體腫瘤痛癥肝癌、宮頸癌、乳臃癌、胃癌、腸癌癥以及其他的惡性細(xì)胞增殖類型 的癌癥疾病。3. 商血壓疾病原發(fā)性高血壓和激發(fā)性離血壓。在計(jì)算短肽片段、短肽衍生物和短肽變體的氨基酸主序列具有與短肽氛基酸主序列的相 同性和相似性時(shí)，"相同性百分率"是指兩種或多種貧基酸或核酸序列比較中序列相同的百 分率。根據(jù)Cluster法(Higging D.G. & Sharp P.M.,Gene 1988， 73:234-237 )通過檢査 所有配對(duì)之間的距離將各組序列排列成簇，然后將各簇以成對(duì)或成組分配。兩個(gè)貧基酸序列 如序列A和序列B之間的相同性百分率通過下式計(jì)算_序列A與序列B之間匹配的殘基個(gè)數(shù)X 100%序列A的殘基個(gè)數(shù)-序列A中間隔的殘基個(gè)數(shù)-序列B中間隔的殘基個(gè)數(shù) "相似性"是指在確定兩條氨基酸序列比對(duì)中相同氨基酸序列位置確定后，在相同貧基 酸之間排列的對(duì)應(yīng)的氨基酸的保守性取代程度。根據(jù)生物信息技術(shù)領(lǐng)域周知的氨基酸得分PAM 250 scoring matrix (Dayhoff， M. Schwartz IL M. and Oicutt^ B. C. Atlas of Protein Structure 1978， 345-352: DeLisi， C. and Kanehi叫M. Mathematical Biosciences 1984.69: 77-85: Schwartz R. M. and Dayhoff， M. O. Atl助of Protein Structure, 1979. 353-358),當(dāng)相對(duì)應(yīng)的不同氛基酸比 較得分>0時(shí)，該兩個(gè)氣基酸相似；當(dāng)不同貧基酸得分<0時(shí)，兩個(gè)貧基酸不相似。兩個(gè)氨 基酸序列如序列C和序列D之間的相似性百分率通過下式計(jì)算(序列C與序列D之間匹配的殘基個(gè)數(shù)+序列C與序列D之間相似的殘基個(gè)數(shù))X100*序列C的殘基個(gè)數(shù)-序列C中間隔的殘基個(gè)數(shù)-序列D中間隔的殘基個(gè)數(shù)其中，序列C中間隔的殘基個(gè)數(shù)和序列D中間隔的殘基個(gè)數(shù)都不包括相似氨基酸的個(gè)數(shù)。下面結(jié)合實(shí)施例，進(jìn)一步匍述本發(fā)明。這些實(shí)施舉例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本 發(fā)明的范圍.下辨所有列舉實(shí)旌例所涉及的所有合成^Jft都具有本發(fā)明涉及的藥物功能而不 限于所列舉功能。實(shí)施例l抑制肝癌細(xì)胞的試驗(yàn)(合成本發(fā)明涉及的短肽Lys-Leu-Pro-Ser-Ser-Ala-Lys或 Lys-Leu-Pro-Ser-Ala-Ala-Lys)人肝痛細(xì)胞系Bel-7402細(xì)胞的培養(yǎng)是用含有10%新生牛血淸的RPMI 1640培養(yǎng)基來培 養(yǎng)，以5X107孔的細(xì)胞密度種植入96孔細(xì)胞板，24小時(shí)后，把本發(fā)B月涉及的短肽按照不同 的濃度加入到細(xì)胞培養(yǎng)板中，以等體積的PBS為對(duì)照組，24小時(shí)后用細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，給藥 組和對(duì)照組比較，獲得肝癌細(xì)胞的抑制率。如圖1所示，本發(fā)明涉及的短肽和人肝癌細(xì)胞共 同作用24小時(shí)后的顯微鏡下拍攝的照片，給藥組Test中的細(xì)胞可明顯地觀察到顯著的抑制 效果，癌細(xì)胞在皿藥物的作用下已經(jīng)由貼壁細(xì)胞的"梭"形變成"圓"形，而對(duì)照組Control 中的細(xì)胞形狀仍然為"梭"形。如可以諸如在元數(shù)據(jù)庫30中被聚集為公共的動(dòng)作元數(shù)據(jù)文件。因此， 當(dāng)文件在企業(yè)中各內(nèi)容存儲(chǔ)器上改變狀態(tài)時(shí)，可以跟蹤這些文件。所 有變遷(例如企業(yè)上文件流中的節(jié)點(diǎn))對(duì)于歷史元數(shù)據(jù)是同等重要的。作為一個(gè)說明性示例，電子郵件服務(wù)器可以為每一個(gè)接收的和發(fā) 出的電子郵件消息掃描文件附件。對(duì)于每一個(gè)文件附件，變遷元數(shù)據(jù) 被記錄，例如包括姓名、日期、附件大小。附件的密碼散列 (cryptographic hash )、發(fā)送附件者的地址、發(fā)送附件的服務(wù)器的主 機(jī)地址以及接收附件者的地址也可以與動(dòng)作元數(shù)據(jù)一起被存儲(chǔ)。給定 該數(shù)據(jù)，可以通過從動(dòng)作元數(shù)據(jù)中選擇所有具有給定附件散列值的元 數(shù)據(jù)記錄來確定每個(gè)接收給定附件的處理裝置?？梢酝ㄟ^以日期和/ 或時(shí)間對(duì)具有附件散列值的元數(shù)據(jù)記錄排序而確定第一處理裝置，并 因此確定發(fā)送文件附件的第一操作員。也可以例如通過在適當(dāng)?shù)膭?dòng)作元數(shù)據(jù)上執(zhí)行一個(gè)或多個(gè)查詢而 確定從給定發(fā)送者接收文件的處理裝置的范圍。例如，可以執(zhí)行第一 查詢以識(shí)別感興趣的文件的第一代接收者。然后，可以實(shí)施單獨(dú)查詢 以為每個(gè)第一代接收者找到第二代和隨后的接收者，等等。上述過程 可以被一般地描述為廣度優(yōu)先樹遍歷。但是，可以對(duì)聚集的動(dòng)作元數(shù) 據(jù)實(shí)施交替的或附加的查詢以及其他動(dòng)作，諸如打印報(bào)告、瀏覽元數(shù) 據(jù)歷史、將查詢結(jié)果保存到盤，等等。如這里更詳細(xì)說明的，動(dòng)作元數(shù)據(jù)可以以任何合適的格式被存 儲(chǔ)，諸如被存儲(chǔ)為日志文件、關(guān)系數(shù)據(jù)庫、數(shù)組、鏈接表或其他文件 結(jié)構(gòu)。為了適當(dāng)?shù)卮鎯?chǔ)、檢索、附加或以其他方式操縱存儲(chǔ)在相應(yīng)動(dòng) 作元數(shù)據(jù)中的信息，可以將標(biāo)識(shí)符或其他唯一指示屬性與相應(yīng)的動(dòng)作 元數(shù)據(jù)相關(guān)聯(lián)。因此，可以在被分配的標(biāo)識(shí)符上查詢與感興趣的給定 文件相關(guān)聯(lián)的動(dòng)作元數(shù)據(jù)的生存歷史，以確定哪些系統(tǒng)接收感興趣的 文件。如果需要更新、惡意軟件修復(fù)、錯(cuò)誤補(bǔ)丁或其他必需的修補(bǔ)動(dòng) 作，則更新后的文件可以被傳送到相應(yīng)標(biāo)識(shí)符所標(biāo)識(shí)的該文件之前已 經(jīng)被傳送到的系統(tǒng)。作為另一個(gè)實(shí)例，可以實(shí)現(xiàn)提供授權(quán)審計(jì)追蹤(licensing audit入待測(cè)樣品的混合反應(yīng)液生成的馬尿酸的量與以分離用的洗脫緩沖液為對(duì)照的混合反應(yīng)液生 成的馬尿酸董的比較得出。通過對(duì)照與待擁樣品的反應(yīng)生成的馬尿酸的量，用積分算出馬尿酸的峰面積，利用下式計(jì)算抑制率(Rm) : Rm = [ ( A - B) / A ] X100其中A是空白的混合反應(yīng)液的馬尿酸的峰商或峰面積；B為加入待測(cè)樣品的混合反應(yīng) 液的馬尿酸的峰離或峰面積。把本發(fā)明涉及的短肽制備成濃度為0.216呢/1^ (用PBS溶解)(如圖4),取5 ML, 10 ML, 20 HL， 50叱，100 ML,用等體積的PBS作為對(duì)照組進(jìn)行HPLC色譜分析,試驗(yàn)過程用于溶解酶和底 物的緩沖液為O. 1 M的硼酸和0.5 M的NaCl，用于HPLC洗脫的緩沖液為O. 05 M的翻酸和O. 3 M 的NaCl,底物三肽的濃度為25 mM，取ACE酶5 ML稀釋IOO ML,取該稀釋液5 ML和等體積的樣 品混合，在37TC保溫10 min后加入25 HL底物三肽，371C保溫30 min,加入42.5禮1N的HC1 終止反應(yīng)，離心上樣IO ML。色譜條件為流量O. 25 mL/min，波長228咖。實(shí)施例5抑制肺痛細(xì)胞的試驗(yàn)(合成本發(fā)明涉及的短肽變體，即在序列的N端增加一個(gè)Gla氨基酸 Gla-Ile-L<eu-Pro-Ser~Ala-Ala-Lys)人肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549細(xì)胞的培養(yǎng)是用含有10%新生牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基來培養(yǎng)， 以5X107孔的細(xì)胞密度種植入96孔細(xì)胞板，24小時(shí)后，把本發(fā)明涉及的短肽按照不同的濃 度加入到細(xì)胞培養(yǎng)板中，以等體積的PBS為對(duì)照組，24、 48小時(shí)后分別用細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)， 給藥組和對(duì)照組比較，獲得肺癌細(xì)胞的抑制率達(dá)76%。實(shí)施例6抑制肺癌細(xì)胞的試驗(yàn)(合成本發(fā)明涉及的短肽Ile-Leu-Pro-Ser-Ala-Ala-Lys)人肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549細(xì)胞的培養(yǎng)是用含有10%新生牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基來培養(yǎng)， 以5X10V孔的細(xì)胞密度種植入96孔細(xì)胞板，24小時(shí)后，把本發(fā)明涉及的短肽按照不同的濃 度加入到細(xì)胞培養(yǎng)板中，以等體積的PBS為對(duì)照組，24、 48小時(shí)后分別用細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)， 給藥組和對(duì)照組比較，獲得肺癌細(xì)胞的抑制率達(dá)76%。實(shí)施例7腫癯細(xì)胞凋亡咖A ladder試驗(yàn)(合成本發(fā)明涉及的短肽Ile-Leu-Pro-Ser-Ala-Ala-Lys)白血病HL-60細(xì)胞(5X105)和加上磷酸基團(tuán)的短肽在含有10%新生牛血淸的RPMI 1640培 養(yǎng)基中，共同培養(yǎng)24小時(shí)，然后在50H1的緩沖體系中重懸，在每個(gè)樣品中分別加入RNaseA和 蛋白酶K ，分別在37度的溫度下孵育1個(gè)小時(shí)，在在50度的溫度下孵育1個(gè)半小時(shí)。然后用 EB(ethidium br咖ide)染色，跑瓊脂糖電泳，在熒光顯微鏡下觀察，可容易觀察到發(fā)生凋亡 的腫癯細(xì)胞。核苷酸或気基酸序列表<110>李昊<120>—種抑制癌細(xì)胞生長的短肽及其應(yīng)用<160> 2<210> 1<211> 7<212> PRT<213>人工序列<220><223> J代表氨基酸Lys, Thr或Ile; B代表氨基酸Pro或Leu; 0代表氨基酸Ser或Ala。 <400> 1J-Leu-B-Ser-O-Ala-Lys<210> 2 <211> 21 <212> DNA <213>人工序列 <220><223> h代表核苷酸T，A或C: m代表核苷酸T或C; n代表核苷酸T或A。 <400> 2aha ctg ant tea net gcc aaa
權(quán)利要求
1. 一種抑制癌細(xì)胞生長的短肽，其特征在于組成短肽的氨基酸主序列<1>和編碼短肽的核苷酸主序列<2>如下<1>J-Leu-B-Ser-O-Ala-Lys其中，J代表氨基酸Lys，Thr或Ile；B代表氨基酸Pro或Leu；O代表氨基酸Ser或A1a；<2>AHA CTG CMT TCA NCT GCC AAA其中，H代表核苷酸T，A或C；M代表核苷酸T或C；N代表核苷酸T或A。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抑制癌細(xì)胞生長的短肽，其特征在于所述短肽的氨基酸主 序列為氨基酸位置固定的主序列，其間隔的位置選擇排列相對(duì)應(yīng)的氨基酸。
3. —種如權(quán)利要求1所述的抑制癌細(xì)胞生長的短肽片段，其特征在于短肽片段的氨基酸 主序列具有與所述短肽氣基酸主序列>70%的相同性，>90%的相似性，所述片段為把所 述的7個(gè)氨基酸的序列從任意位置截取成3個(gè)或4個(gè)或5個(gè)或6個(gè)氨基酸組成的與所述 短肽具有同樣生物活性的短肽。
4. —種如權(quán)利要求1所述的抑制痛細(xì)胞生長的短肽類似物，其特征在于所述短肽類似物 具有與所述短肽相同的生物活性，所述類似物是指在用所述短肽和另一種化合物融合或 者用所述短肽的氨基酸序列融合另外的多肽或者蛋白質(zhì)而形成具有生物活性的多肽序列 或蛋白質(zhì)。
5. —種如權(quán)利要求1所述的抑制痛細(xì)胞生長的短肽衍生物，其特征在于所述短肽衍生物 的氨基酸主序列具有與所述短肽氨基酸主序列>70%的相同性，>90%的相似性，所述衍 生物是指把所述短肽的貧基酸的主序列中的氨基酸的一個(gè)或者幾個(gè)貧基酸的某個(gè)基團(tuán)用 另外的基團(tuán)取代后與所述短肽具有同樣生物活性的短肽。
6. —種如權(quán)利要求1所述的抑制癌細(xì)胞生長的短肽變體，其特征在于^短肽變體的氨 基酸主序列具有與所述短肽氨基酸主序列>70%的相同性，>90%的相似性，所述變體是 指一種具有一個(gè)或幾個(gè)氨基酸或核苷酸改變的氨基酸序列或編碼它的核苷酸序列，所述改變包括在氨基酸序列或核苷酸序列中，在序列中間的任一位置缺失、插入或替換氛基 酸或核苷酸，或在序列兩端添加氨基酸或核苷酸。
7. 根據(jù)權(quán)利要求l、 3、 4、 5或6所述的一種抑制癌細(xì)胞生長的短肽，其特征在于所述編 碼短肽的核苷酸包含下組中的一種(a) 編碼具有所述氨基酸序列的短肽或其片段、類似物、衍生物或其變體的核苷酸；(b) 與(a)所述核苷酸互補(bǔ)的核苷酸；(c) 與(a)或(b)中所述核苷酸有^75緗同性的核苷酸；
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抑制癌細(xì)胞生長的短肽，其特征在于所述的短肽采用化學(xué)合成 方法制備。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1或6所述的抑制癌細(xì)胞生長的短肽，其特征在于所迷核苷酸采用人工 合成方法制備。
10. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的抑制癌細(xì)胞生長的短肽，其特征在于所述核苷酸采用人工合成 方法制備。
11. 一種如權(quán)利要求l、 2、 3、 4、 5或6所述的抑制癌細(xì)胞生長的短肽的應(yīng)用，其特征在于所述短肽、核苷酸、短肽片段、短肽類似物、短肽衍生物和短肽變體用于制備具有治療 非實(shí)體腫癯人髄系各類病變細(xì)胞增生引起的白血病、治療人實(shí)體腫癯癌細(xì)胞增殖的各類 癌癥、抑制髙血壓、診斷與檢測(cè)癌癥的發(fā)生以及癌癥發(fā)生的惡性程度藥物的應(yīng)用。
12. —種如權(quán)利要求7所述的抑制癌細(xì)胞生長的短肽的應(yīng)用，其特征在于所述核苷酸用于制備具有治療非實(shí)體腫癯人讎系各類病變細(xì)胞增生引起的白血病、治療人實(shí)體腫瘤癌細(xì) 胞增殖的各類癌癥、抑制離血壓、診斷與檢測(cè)癌癥的發(fā)生以及癌癥發(fā)生的惡性程度藥物 的應(yīng)用。
13. —種如權(quán)利要求8或10所述的抑制癌細(xì)胞生長的短肽的應(yīng)用，其特征在于所述短肽或核苷酸用于制備具有治療非實(shí)體腫癯人健系各類病變細(xì)胞增生引起的白血病、治療人實(shí) 體腫瘤癌細(xì)胞增殖的各類癌癥、抑制高血壓、診斷與檢測(cè)癌癥的發(fā)生以及癌癥發(fā)生的惡 性程度藥物的應(yīng)用。
14. 一種如權(quán)利要求9所述的抑制痛細(xì)胞生長的短肽的應(yīng)用，其特征在于所述核苷酸用于制備具有治療非實(shí)體腫癯人據(jù)系各類病變細(xì)胞增生引起的白血病、治療人實(shí)體腫瘤癌細(xì) 胞增殖的各類癌癥、抑制離血壓、診斷與檢測(cè)癌癥的發(fā)生以及癌癥發(fā)生的惡性程度藥物 的應(yīng)用。
15. —種如權(quán)利要求8或10所述的抑制癌細(xì)胞生長的短肽的應(yīng)用，其特征在于所述短肽或核苷酸用于制備具有作為蛋白酶抑制劑或者促進(jìn)劑或者親和試劑的藥物或者檢測(cè)試劑的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供一種抑制癌細(xì)胞生長的短肽。該短肽的短肽片段、類似物、衍生物、變體的氨基酸主序列具有與該短肽氨基酸主序列≥70％的相同性，≥90％的相似性；短肽、核苷酸、短肽片段、短肽類似物、短肽衍生物和短肽變體用于制備具有治療非實(shí)體腫瘤人髓系各類病變細(xì)胞增生引起的白血病、治療人實(shí)體腫瘤癌細(xì)胞增殖的各類癌癥、抑制高血壓、診斷與檢測(cè)癌癥的發(fā)生以及癌癥發(fā)生的惡性程度藥物的應(yīng)用，短肽或核苷酸用于制備具有作為蛋白酶抑制劑或者促進(jìn)劑或者親和試劑的藥物或者檢測(cè)試劑的應(yīng)用。該技術(shù)能夠解決現(xiàn)有癌癥藥物在抑制或殺死癌細(xì)胞的同時(shí)對(duì)人體正常細(xì)胞也有嚴(yán)重傷害的缺陷。
文檔編號(hào)C07K7/00GK101225106SQ200710008449
公開日2008年7月23日 申請(qǐng)日期2007年1月15日 優(yōu)先權(quán)日2007年1月15日
發(fā)明者昊 李 申請(qǐng)人:昊 李