專利名稱：靈芝三萜類化合物的快速制備方法及其產(chǎn)品的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生物技術(shù)領(lǐng)域的靈芝三萜類化合物，特別是公開一種靈芝三萜類化合 物的快速制備方法及其產(chǎn)品，尤其是指應(yīng)用葡聚糖凝膠色譜分離技術(shù)對靈芝中三砲類化合 物進(jìn)行快速富集、純化的方法。
背景技術(shù)：
靈芝[赤芝Ga"^m^/M"'^w(Fr.)Karst]自古以來就被認(rèn)為是吉祥、富貴、美好、長壽 的象征，有"仙草"、"瑞草"之稱，中華傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)長期以來一直視為滋補(bǔ)強(qiáng)壯、固本扶正的珍 貴中草藥，在我國已有三千年以上的藥用歷史。
民間傳說靈芝有起死回生、長生不老之功效。家喻戶曉，廣為流傳的神話故事《白蛇 傳》中就描述了白娘子為救許仙而盜取"仙草"的故事。兩千年前東漢時期的《神農(nóng)本草 經(jīng)》中將靈芝列為上品，認(rèn)為"久食，輕身不老，延年神仙"。明朝李時珍編著的《本草綱 目》中記載靈芝味苦、平，無毒，益心氣，活血，入心充血，助心充脈，安神，益肺氣， 補(bǔ)肝氣，補(bǔ)中，增智慧，好顏色，利關(guān)節(jié)，堅筋骨，祛痰，健胃。
現(xiàn)代醫(yī)學(xué)證明靈芝含有多種生理活性物質(zhì)，能夠調(diào)節(jié)、增強(qiáng)人體免疫力，對神經(jīng)衰
弱、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、冠心病、高血壓、肝炎、糖尿病、腫瘤等有良好的協(xié)同治療作用。最
新研究表明靈芝還具有抗疲勞，美容養(yǎng)顏，延緩衰老，防治艾滋病等功效。
靈芝孢子是靈芝成熟后產(chǎn)生的種子，是靈芝的精華。孢子內(nèi)富含多種化學(xué)成分，如三 萜類、甘油三酯類、脂肪酸類、蛋白質(zhì)和氨基酸類、糖肽類、維生素類、胡蘿卜素、甾醇 類、生物堿類和無機(jī)離子等。由于靈芝孢子的外部包裹了兩層堅韌的外壁，必須破壁后才 能對其中的生物活性成分進(jìn)行充分提取、利用。
近年來的研究表明，三萜類化合物(Triterpenoid Components, TC)是靈芝具有廣泛生 理活性的重要物質(zhì)基礎(chǔ)，它有很強(qiáng)的抗腫瘤和保肝活性。靈芝三萜類化合物(TC)有針對腫 瘤細(xì)胞的特異性的細(xì)胞毒作用，直接毒殺腫瘤細(xì)胞以及隱藏在體內(nèi)、不易被發(fā)覺的Go期(休 眠期)腫瘤細(xì)胞。抑制腫瘤蛋白金合歡酯轉(zhuǎn)移酶(FPT)的活性，阻斷腫瘤DNA的金合歡 酯化修飾，阻止腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)化和膜融合，從而抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移。靈芝三萜類成分對四 氯化碳(CC14)誘發(fā)的小鼠肝損傷有明顯的保護(hù)作用。體內(nèi)實(shí)驗表明TCIO， 20， 40mg/kg 均明顯降低BCG + LPS引起的小鼠免疫性肝損傷模型動物的血清ALT、 NO和肝臟TG含 量，并不同程度地減輕動物肝損傷程度。TC0.5, 5， 50， 100嗎/ml均不同程度地使升高
的ALT和NO明顯下降。TC的以上作用與陽性對照藥馬洛替酯(Mai)相似。TC (10， 20， 40， 80mg/kg)與陽性對照藥馬洛替酯(91 mg/kg)相仿，均明顯降低CCU， D-Gal及BCG + LPS引起的小鼠肝損傷模型動物的血清ALT和肝臟TG含量，并不同程度減輕動物肝損 傷的程度。此外，靈芝三萜類化合物還有抗病毒、抗過敏、降血壓、降血脂、抗血栓和抗 動脈粥樣硬化等活性。
超臨界C02萃取技術(shù)(Supercritical Fluid Extraction, SFE)，系指以超臨界狀態(tài)的C02 為萃取劑，從液體或固體中萃取有效成分并進(jìn)行分離的方法。超臨界C02系指處于臨界壓
力和臨界溫度以上的C02液體，因其具有和液體相近的密度，而其粘度與氣體相近，擴(kuò)散
系數(shù)為液體的10 100倍，因此對許多物質(zhì)特別是親脂性成分具有較好的滲透性和較強(qiáng)的
溶解能力。當(dāng)待處理的物料與超臨界流體接觸時，能選擇性地溶解某些組分，進(jìn)而通過減 壓、升溫，使超臨界流體迅速汽化，被溶解的物質(zhì)就以固態(tài)或液態(tài)形式析出，從而達(dá)到分
離某些化合物的目的。與傳統(tǒng)溶劑萃取法或水蒸氣蒸餾法相比，SFE技術(shù)優(yōu)勢明顯，具有 適用范圍廣、對原料成分無破壞、對產(chǎn)品和環(huán)境無污染、提取效率高和操作方便等優(yōu)點(diǎn)， 被稱為"綠色，可持續(xù)發(fā)展技術(shù)"，在中藥現(xiàn)代化進(jìn)程中具有巨大的潛在應(yīng)用價值。
葡聚糖凝膠色譜技術(shù)是六十年代初發(fā)展起來的一種快速而又簡單的分離技術(shù)，由于設(shè) 備簡單、操作方便，目前已經(jīng)被藥學(xué)、生物化學(xué)、分子生物學(xué)、生物工程學(xué)以及分子免疫 學(xué)等有關(guān)領(lǐng)域廣泛采用，不但應(yīng)用于科學(xué)實(shí)驗研究，而且已經(jīng)大規(guī)模地用于工業(yè)生產(chǎn)。
葡聚糖凝膠是用膠聯(lián)劑將多個葡聚糖膠聯(lián)而成的高分子聚合物，膠聯(lián)劑或膠聯(lián)度不同 就得到不同型號的產(chǎn)品。葡聚糖凝膠色譜對樣品的分離是凝膠過濾、吸附色譜和分配色譜 三種色譜原理的綜合效應(yīng)的體現(xiàn)。凝膠過濾，即分子篩效應(yīng)，取決于被分離化合物分子大 小和形狀化合物分子越大，下移速度越快，越容易流出色譜柱；鏈狀的脂肪族化合物較 脂環(huán)族和芳香族化合物更易出柱。吸附色譜，取決于被分離化合物與凝膠之間氫鍵的數(shù)量 和質(zhì)量化合物的極性基團(tuán)越多，與凝膠之間形成的氫鍵數(shù)量就越多，化合物就越難流出 色譜柱；化合物的酸性或堿性越強(qiáng)，與凝膠之間形成的氫鍵就越牢固，化合物就越難流出 色譜柱。分配色譜，取決于被分離化合物在流動相和固定相之間的分配，這主要由樣品的 極性和溶劑的極性決定的。葡聚糖凝膠色譜的三種作用中，分子篩效應(yīng)的影響因素最大， 其次是吸附原理和分配原理。
在制備靈芝三萜類化合物的現(xiàn)有技術(shù)中，都是以氯仿或甲醇等有機(jī)試劑對靈芝藥材或 孢子粉提取而得粗提物，再用飽和NaHC03溶液萃取出其中的酸性成分，鹽酸酸化，氯仿 萃取出游離的酸性成分，得到含量較高的三萜類成分；或?qū)⒋痔嵛镆怨枘z色譜柱分離，不
同濃度的氯仿/甲醇混合溶液梯度洗脫，收集極性較大部分。
現(xiàn)有技術(shù)中大量使用的氯仿、甲醇等有機(jī)試劑對人體有較大毒性，對環(huán)境也有較大污 染。由于天然產(chǎn)物中部分化合物的官能團(tuán)(如過氧橋等)對酸、堿較敏感，在用飽和NaHC03 溶液萃取、鹽酸酸化的過程中易造成溶液局部過堿、過酸，會導(dǎo)致不穩(wěn)定化合物的化學(xué)結(jié) 構(gòu)發(fā)生異構(gòu)化，進(jìn)而影響產(chǎn)品的生物活性?，F(xiàn)有技術(shù)用飽和NaHC03溶液萃取三萜類化合 物的過程中，同時把酸性的游離脂肪酸等雜質(zhì)堿化后也萃取進(jìn)來，影響了產(chǎn)品中三萜類化 合物的含量?，F(xiàn)有技術(shù)用飽和NaHC03溶液萃取三萜類化合物的過程中，把經(jīng)藥理研究證 明具有重要生物活性的非酸性三萜類化合物，如三萜醛、三萜醇、三萜內(nèi)酯及三萜過氧化 物等當(dāng)作雜質(zhì)而去除，影響了產(chǎn)品的生物活性?，F(xiàn)有技術(shù)NaHC03溶液萃取時，由于在堿 性條件下體系乳化現(xiàn)象嚴(yán)重，低溫時尤其如此，靜置分層所需時間較長，且分層不明顯， 因此不能充分將樣品中酸性成分和非酸性成分分離，影響產(chǎn)品收率和質(zhì)量，且工作效率低 下。現(xiàn)有的萃取技術(shù)或硅膠色譜技術(shù)中使用了酸、堿、硅膠等消耗性材料，致使產(chǎn)品的生 產(chǎn)成本較高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于建立一種應(yīng)用超臨界C02萃取技術(shù)和葡聚糖凝膠色譜技術(shù)制備靈芝 三萜類化合物的方法。
本發(fā)明所用器材包括超臨界流體萃取儀，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，循環(huán)水真空泵。
本發(fā)明所用材料包括98X破壁的靈芝[赤芝G朋(^mwfl/wci山m(Fr.)Karst]孢子粉，液 化C02，乙醇，葡聚糖凝膠。
本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的應(yīng)用超臨界C02萃取技術(shù)和葡聚糖凝膠色譜技術(shù)制備靈芝三砲 類化合物方法的實(shí)施方案主要包括如下4個步驟C02超臨界流體萃取技術(shù)萃??；萃取物 乙醇溶解；葡聚糖凝膠色譜柱富集、純化；減壓濃縮。
1. 超臨界C02萃取技術(shù)萃取揀選破壁率達(dá)98%的赤芝孢子粉，以C02超臨界流體萃取 技術(shù)萃??；萃取壓力20 30MPa，萃取溫度60 70。C，萃取時間2 4小時，反復(fù)萃取 2次。
2. 萃取物乙醇溶解用乙醇將萃取物在熱水浴中加熱溶解；乙醇的用量(ml):萃取物的
量(ml) =1:1 10:1;乙醇濃度為70% 100%;熱水浴的溫度為20 100°C 。
3. 葡聚糖凝膠色譜柱富集、純化經(jīng)乙醇溶脹后的葡聚糖凝膠裝入色譜柱，將樣品的乙醇
溶液在葡聚糖凝膠色譜柱中濕法上樣，用乙醇洗脫，洗脫液分部收集，將第3 10柱體 積(BV)洗脫液合并，減壓濃縮；上樣量為樣品乙醇溶液(ml):色譜柱體積=0.01:100 20:100;洗脫液流速為0.5BV/h 10BV/h;乙醇濃度為70% 100%;葡聚糖凝膠型 號為SephadexLH-20， LH-60, SP-C25, CM-C25或CM-C50;色譜柱的徑高比為1:5 1:100;色譜柱材質(zhì)為玻璃、不銹鋼或耐酸、堿及有機(jī)溶劑的有機(jī)高分子。 4.洗脫液減壓濃縮水浴溫度為20 100°C;真空度0 0.9atm。
本發(fā)明將超臨界C02萃取技術(shù)和葡聚糖凝膠色譜技術(shù)應(yīng)用到上述提取、分離方法中，
建立了一種新的靈芝三萜類化合物的制備方法。超臨界C02萃取技術(shù)所用的試劑為C02， 提取后能完全回收循環(huán)利用，既降低了生產(chǎn)成本，又對人體和環(huán)境無害，是"綠色，可持 續(xù)發(fā)展"工藝。99%破壁的靈芝孢子粉經(jīng)超臨界C02萃取后的產(chǎn)物為淡黃色油狀液體，主 要含有三萜、甘油三酯、游離脂肪酸等親脂性成分。其中有生物活性的三萜類化合物約占 20%，其余80%大都為甘油三酯及少量游離脂肪酸等無效成分。由于靈芝三萜類化合物母
核為不同氧化程度的C24、 C27和C3Q三種基本骨架，其分子量介于400和600之間；靈芝孢
子中絕大部分的脂肪酸為C18 C24酸，分子量介于250 350之間，由其組成的甘油三酯 分子量就達(dá)800 1100。根據(jù)葡聚糖凝膠色譜的分子篩效應(yīng)，分子量較大的甘油三酯就較分 子量相對較小的三萜類化合物先流出色譜柱；同時，分子量與三萜類化合物相近的甘油三 酯和游離脂肪酸由于其分子結(jié)構(gòu)為鏈狀，且化學(xué)結(jié)構(gòu)中氧化程度較低，根據(jù)凝膠色譜的分 子篩效應(yīng)和吸附色譜原理，它們在色譜柱中也應(yīng)比三萜類化合物先流出柱；另外，分子量 與三萜類化合物相差懸殊的低級脂肪酸及其甘油三酯和其它小分子化合物，根據(jù)色譜柱的 分子篩效應(yīng)，其流出色譜柱的速度最慢，應(yīng)在三蔽類化合物之后才流出色譜柱。因此運(yùn)用 葡聚糖凝膠色譜分離技術(shù)處理經(jīng)超臨界C02萃取而得的靈芝孢子油，收集色譜柱中間流出 的組分，就能得到含量很高的總?cè)h類化合物。
試驗結(jié)果顯示，該方法快速、簡單；對人體和環(huán)境無損害；生產(chǎn)成本低；產(chǎn)品質(zhì)量好， 有效的三萜類化合物種類和含量都有明顯提高。
本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比的創(chuàng)新點(diǎn)在于
1. 保留了有重要生物活性的靈芝三萜類化合物，如三萜醛、三萜醇、三萜內(nèi)酯及三 萜過氧化物。本發(fā)明采用葡聚糖凝膠色譜技術(shù)，收集色譜柱中間流出的組分，使酸性和非 酸性三萜類組分都能保留；現(xiàn)有技術(shù)用飽和NaHC03溶液萃取方法只能使酸性的三萜類化 合物離子化而被萃取，而部分非酸性的三萜類化合物就不能被萃取到NaHC03溶液中，造 成產(chǎn)品中部分有效成分的缺失，從而影響了產(chǎn)品的整體生物活性。
2. 最大限度除去了游離脂肪酸等無生物活性的酸性雜質(zhì)。本發(fā)明的葡聚糖凝膠色譜 技術(shù)分離純化過程中，分子量較小的游離脂肪酸在色譜柱中滯留時間較三萜類化合物長，
而分子量與三萜相近或比三萜大的游離脂肪酸或甘油三酯在色譜柱中滯留時間則比三萜類 化合物短，因此只要選擇合適的時機(jī)收集樣品，就能將大部分無生物活性的游離脂肪酸等 酸性雜質(zhì)除去；現(xiàn)有技術(shù)用飽和NaHC03溶液萃取酸性三瞎類化合物時，同時也把游離脂 肪酸等無生物活性的酸性雜質(zhì)也萃取入NaHC03溶液，影響了產(chǎn)品中有效成分總?cè)祁惢?合物的含量。
3. 提高了產(chǎn)品的收率和質(zhì)量?，F(xiàn)有技術(shù)用飽和NaHC03溶液萃取時，由于在堿性條 件下體系乳化現(xiàn)象嚴(yán)重，低溫時尤其如此，靜置分層所需時間較長，且分層不明顯，因此 不能充分將樣品中酸性成分和非酸性成分分離，影響了產(chǎn)品的收率和質(zhì)量；本發(fā)明無萃取 這一操作步驟，因此不存在因體系乳化而導(dǎo)致活性物質(zhì)與非活性物質(zhì)無法較好分離的現(xiàn)象。
4. 本發(fā)明為綠色、環(huán)保技術(shù)。本發(fā)明的超臨界C02萃取技術(shù)和葡聚糖凝膠色譜技術(shù) 所用的試劑為對人體和環(huán)境無害的C02和藥用乙醇，提取、分離后能完全回收循環(huán)利用， 是"綠色，可持續(xù)發(fā)展"技術(shù)；現(xiàn)有技術(shù)中大量使用的氯仿、甲醇等有機(jī)試劑對人體有較大 毒性，對環(huán)境也有較大污染。
5. 靈芝三萜類化合物中無酸無堿，能最大程度保持天然產(chǎn)物化學(xué)結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性。天 然產(chǎn)物中部分化合物的官能團(tuán)(如過氧橋等)對酸、堿較敏感?，F(xiàn)有技術(shù)用飽和NaHC03 溶液萃取、鹽酸酸化的過程中造成溶液局部過堿、過酸，會導(dǎo)致不穩(wěn)定化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu) 發(fā)生異構(gòu)化，進(jìn)而影響產(chǎn)品的生物活性；本發(fā)明操作中避免了使用酸、堿等試劑，最大程 度保持了天然產(chǎn)物化學(xué)結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性
6. 生產(chǎn)成本低。本發(fā)明的超臨界C02萃取技術(shù)和葡聚糖凝膠色譜技術(shù)所用的C02、 藥用乙醇和葡聚糖凝膠等試劑和填料，能完全回收循環(huán)利用，大幅降低了生產(chǎn)成本；現(xiàn)有 的萃取技術(shù)或硅膠色譜技術(shù)中使用了酸、堿、硅膠等消耗性材料，致使產(chǎn)品的生產(chǎn)成本較 咼。
7. 生產(chǎn)周期短，工作效率高。本發(fā)明的葡聚糖凝膠色譜技術(shù)使從靈芝孢子油制備三 萜類成分時間縮短到2 3小時;現(xiàn)有技術(shù)飽和NaHC03溶液萃取法由于體系乳化而需靜置、 分層的時間較長， 一般每次需靜置12小時以上，萃取3 4次所需時間就是2 3天，氣溫 低時每次所需靜置的時間就更長；而硅膠色譜技術(shù)分離法則由于樣品在色譜柱中滯留時間 較長， 一個硅膠柱的生產(chǎn)周期最少需要3 4天。
8. 產(chǎn)品的安全性高。本發(fā)明的超臨界C02萃取技術(shù)得到的產(chǎn)物中C02完全揮發(fā)，無 任何有機(jī)溶劑殘留，而葡聚糖凝膠色譜技術(shù)所用的試劑為藥用乙醇，即使產(chǎn)品中有少量藥 用乙醇?xì)埓妫膊挥绊懏a(chǎn)品使用的安全性；現(xiàn)有技術(shù)中使用的是有較大毒性的氯仿、甲醇
等有機(jī)試劑，若產(chǎn)品中有少量殘存，使用后就會對人體健康產(chǎn)生重大的安全隱患。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1
揀選破壁率達(dá)98%的赤芝孢子粉1 kg，以C02超臨界流體萃取技術(shù)萃取，在25MPa 和65X:的條件下萃取時間2小時，反復(fù)萃取2次，得98g (102 ml)淡黃色油狀液體。取2 ml孢子油，加入4 ml無水乙醇，在60。C水浴中加熱使之完全溶解。將顆粒狀Sephadex LH-20 固體100 g在無水乙醇中溶脹24 h，裝入直徑2.5 cm，高1.2 m的玻璃柱中。待Sephadex LH-20 顆粒完全沉降后，把上述樣品的乙醇溶液濕法上樣裝入色譜柱中，用無水乙醇洗脫，洗脫 液流速2BV/h， 50 ml/流分進(jìn)行收集。合并第5至第11流分，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中減壓濃縮， 水浴溫度60'C，得微黃色半固體0.5g。
實(shí)施例2
揀選破壁率達(dá)99%的赤芝孢子粉2 kg，以C02超臨界流體萃取技術(shù)萃取，在20MPa 和6(TC的條件下萃取時間3小時，反復(fù)萃取2次，得210g (215 ml)淡黃色油狀液體。取 3 ml孢子油，加入5 ml 95%乙醇，在70。C水浴中加熱使之完全溶解。將顆粒狀Sephadex LH-20固體125 g在95 %乙醇中溶脹24 h，裝入直徑3.5 cm，高1.2 m的玻璃柱中。待Sephadex LH-20顆粒完全沉降后，把上述樣品的乙醇溶液濕法上樣裝入色譜柱中，用無水乙醇洗脫， 洗脫液流速3 BV / h， 100 ml /流分進(jìn)行收集。合并第7至第12流分，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中減 壓濃縮，水浴溫度40。C，得微黃色半固體1.2g。
實(shí)施例3
揀選破壁率達(dá)98%的赤芝孢子粉1.5 kg，以C02超臨界流體萃取技術(shù)萃取，在30MPa 和7(TC的條件下萃取時間4小時，反復(fù)萃取2次，得165 g (172 ml)淡黃色油狀液體。取 5ml孢子油，加入15ml90X乙醇，在60。C水浴中加熱使之完全溶解。將顆粒狀Sephadex LH-60固體100g在90X乙醇中溶脹24 h，裝入直徑2.5 cm,高1.2 m的玻璃柱中。待Sephadex LH-60顆粒完全沉降后，把上述樣品的乙醇溶液濕法上樣裝入色譜柱中，用無水乙醇洗脫， 洗脫液流速2BV/h， 50ml/流分進(jìn)行收集。合并第6至第10流分，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中減壓 濃縮，水浴溫度50'C，得微黃色半固體1.8g。
權(quán)利要求
1.一種靈芝三萜類化合物的快速制備方法，其特征在于用葡聚糖凝膠色譜分離技術(shù)對靈芝中三萜類化合物進(jìn)行快速富集、純化；其主要步驟包括CO2超臨界流體萃取技術(shù)萃取，萃取物乙醇溶解，葡聚糖凝膠色譜柱富集、純化，減壓濃縮。
2. 如權(quán)利要求1所述的靈芝三萜類化合物的快速制備方法，其特征在于所述C02超臨界 流體萃取技術(shù)萃取步驟，揀選破壁率達(dá)98%的赤芝孢子粉，以C02超臨界流體萃取技術(shù)萃?。惠腿毫?0 30MPa，萃取溫度60 70'C，萃取時間2 4小時，反復(fù)萃取2次。
3. 如權(quán)利要求1所述的靈芝三萜類化合物的快速制備方法，其特征在于所述的萃取物乙 醇溶解步驟，用乙醇將萃取物在熱水浴中加熱溶解；乙醇的用量(ml):萃取物的量(ml) 二l:l 10:h熱水浴的溫度為20 100°C。
4. 如權(quán)利要求1所述的靈芝三萜類化合物的快速制備方法，其特征在于葡聚糖凝膠色譜柱富集、純化步驟，經(jīng)乙醇溶脹后的葡聚糖凝膠裝入色譜柱，將萃取物乙醇溶液在葡聚糖凝膠色譜柱中濕法上樣，用乙醇洗脫，洗脫液分部收集，將第3 10柱體積(BV)洗 脫液合并，減壓濃縮；上樣量為萃取物乙醇溶液(ml):色譜柱體積=0.01:100 20:100; 洗脫液流速為0.5BV/h 10BV/h。
5. 如權(quán)利要求1所述的靈芝三萜類化合物的快速制備方法，其特征在于所述減壓濃縮步 驟，水浴溫度為20 100°C;真空度0 0.9atm。
6. 如權(quán)利要求3和4所述靈芝三萜類化合物的快速制備方法，其特征在于所述乙醇濃度 為70% 100%。
7. 如權(quán)利要求4所述靈芝三萜類化合物的快速制備方法，其特征在于所述葡聚糖凝膠型 號為SephadexLH-20、 LH-60、 SP-C25、 CM-C25或CM-C50中選擇一種。
8. 如權(quán)利要求4所述靈芝三萜類化合物的快速制備方法，其特征在于所述色譜柱材質(zhì)為玻璃、不銹鋼或陶瓷材料。
9. 如權(quán)利要求4所述靈芝三萜類化合物的快速制備方法，其特征在于所述色譜柱的徑高比為1:5 1:亂
10. —種權(quán)利要求1制備方法獲得的靈芝三萜類化合物，其特征在于靈芝三萜類化合物中的三萜醛、三萜醇、三萜內(nèi)酯及三萜過氧化物無酸、無堿，保留了生物活性。
全文摘要
本發(fā)明為一種靈芝三萜類化合物的快速制備方法及其產(chǎn)品。其特征在于用葡聚糖凝膠色譜分離技術(shù)對靈芝中三萜類化合物進(jìn)行快速富集、純化；其主要步驟包括CO₂超臨界流體萃取技術(shù)萃取，萃取物乙醇溶解，葡聚糖凝膠色譜柱富集、純化，減壓濃縮；本發(fā)明靈芝三萜類化合物，靈芝三萜類化合物中的三萜醛、三萜醇、三萜內(nèi)酯及三萜過氧化物無酸、無堿，保留了生物活性。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是制備方法快速、簡單；對人體和環(huán)境無損害；生產(chǎn)成本低；產(chǎn)品質(zhì)量好，有效的三萜類化合物種類和含量都有明顯提高。
文檔編號C07J9/00GK101186630SQ20071009445
公開日2008年5月28日 申請日期2007年12月13日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月13日
發(fā)明者耘 周 申請人:上?？砌紊锕こ逃邢薰?br>