專利名稱：：具有抗血栓活性的異喹啉化合物、其制備方法及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及三環(huán)化合物，尤其涉及具有抗血栓活性的異喹啉類化合物，其制備方法，本發(fā)明還涉及該異喹啉類化合物作為抗血栓劑的應(yīng)用，屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：血管栓塞性疾病對心腦血管疾病的高死亡率負(fù)最重要的責(zé)任。血栓形成是血管栓塞性疾病發(fā)病的最重要的病因。尋找抗血栓藥物是新藥研究的熱點之一。血小板聚集與Ca離子濃度有關(guān)。胞漿內(nèi)Ca離子濃度升高，血小板激活并聚集。胞漿內(nèi)Ca離子濃度降低，血小板抑制。四氫異喹啉類化合物大都具有鈣拮抗和抑制血小板聚集活性。此外，四氫異喹啉分子中的苯環(huán)紫外發(fā)色團(tuán)，方便藥物代謝研究。我們的初期研究表明，3S-l，2,3,4-四氫異喹啉-3-羧酸具有明確的抗血栓作用。針對3S-l,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧酸的脂溶性和水溶性都差造成吸收差的事實，我們在3S-l,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧酸的2位N上引入氨基酸殘基，制備了一系列3S-N-L-氨基酰-l,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(彭師奇、趙明、崔國輝、鄭美青，(3S)-N-(L-氨基酰)-l，2,3,4-四氫異喹啉-3-羧酸、其合成及作為抗血栓劑的應(yīng)用，申請?zhí)?00610164978.7)和在3S-l，2,3，4-四氫異喹啉-3-羧酸的3位羧基上引入氨基酸殘基，制備了一系列38-1^-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲?；被?彭師奇、趙明、崔國輝、陳慎令，N-[(3S)-l，2,3,4-四氫異喹啉-3-甲?；鵠氨基酸、其制備方法及應(yīng)用，申請?zhí)?200610144236.8)，它們都是抗血栓劑。在3S-l，2，3,4-四氫異喹啉-3-羧酸中引入L-氨基酸可以提高3S-l,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧酸的脂溶性和水溶性，但同時存在著所引入L-氨基酸在體內(nèi)存在著代謝或易于降解的缺陷，有待克服。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明首先所要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有的將L-氨基酸引入到3S-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸中，存在著L-氨基酸在體內(nèi)代謝或易于降解的缺陷，提供一種新的異喹啉化合物，該異喹啉化合物中所引入的L-氨基酸比較穩(wěn)定，不易在體內(nèi)代謝。本發(fā)明首先所要解決的技術(shù)問題是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)的下述通式I化合物其中，R選自CH2CH(CH3)2、CH(CH3)2、CH(CH3)CH2CH3、CH3、氫、CH2C6H5、CH2C6H4-0H-p、剛哚-5-基-CH2、CH2C02H、CH2CH2C02H、CH2CH2CH2CH2NH2、CH(OH)CH:,、CH2C0NH2、CH2CH2C0NH2、CH2CH2CH2NHC(NH)NH2或CH2CH2SCH3。本發(fā)明依據(jù)和綜合考慮了下述幾方面完成了本發(fā)明血栓形成是血管栓塞性疾病發(fā)病的最重要的病因；3S-1，2，3，4-四氫異啉-3-羧酸是抗血小板聚集活性的天然物質(zhì)；在3S-1，2,3，4-四氫異啉-3-羧酸中引入L-氨基酸生成3S-l，2，3，4-四氫異啉-3-甲酰氨基酸可獲得抗血栓好處；防止引入的L-氨基酸在體內(nèi)代謝可保持獲得的抗血栓好處；防止3S-1，2，3，4-四氫異啉-3-甲酰氨基酸被降解的最直接的辦法是在引入的L-氨基酸與3S-1，2，3，4-四氫異啉環(huán)之間生成第三個環(huán)。本發(fā)明所要解決的另一個技術(shù)問題是提供一種制備上述通式I化合物的方法。本發(fā)明所要解決的另一個技術(shù)問題是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)的一種制備上述通式I化合物的方法，包括(1)按照常規(guī)方法制備3S-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸，然后叔丁氧羰基化制備3S-2-叔丁氧羰基-6，7-二羥基-1，2，3，4-四氫異喹啉--3-羧酸；(2)按照常規(guī)方法先將L-氨基酸甲酯或芐酯連接到3S-2-叔丁氧羰基-6，7-二羥基-l，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸的3位羧基上制備3S-2-叔丁氧羰基-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-甲酰-L-氨基酸甲酯或芐酯。(3)將3S-2-叔丁氧羰基-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-甲酰-L-氨基酸甲酯或芐酯脫去叔丁氧羰基后與丙酮進(jìn)行縮酮化反應(yīng)、再進(jìn)行(在NaOH溶液中)皂化反應(yīng)、脫去所有保護(hù)基，得到通式I化合物。上述制備方法中，步驟(1)所述3S-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸可由L-苯丙氨酸與甲醛縮合制備得到。步驟(2)中所述L-氨基酸甲酯或芐酯優(yōu)選自L-亮氨酸甲酯、L-纈氨酸甲酯、L-異亮氨酸甲酯、L-丙氨酸甲酯、甘氨酸甲酯、L-苯丙氨酸甲酯、L-酪氨酸甲酯、L-色氨酸甲酯、L-天冬氨酸二甲酯、L-谷氨酸二甲酯、L-(N-芐基)賴氨酸芐酯、L-蘇氨酸甲酯、L-天冬酰胺甲酯、L-谷氨酰胺甲酯L-(NG-硝基)精氨酸甲酯或L-蛋氨酸甲酯。在大鼠血栓模型上評價本發(fā)明16種新型3S-1-(S-羧基取代甲基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[1，5-13]異喹啉的抗血栓活性，動物實驗結(jié)果表明，本發(fā)明通式I化合物具有優(yōu)秀的抗血栓活性，在臨床上可作為抗血栓劑應(yīng)用。圖l本發(fā)明通式I化合物的合成路線i)濃鹽酸、甲醛；ii)(Boc)20、飽和NaHC03、THF;iii)DCC、HOBt、NMM;iv)4NHCl/EtOAc、甲醇、丙酮、三乙胺；v)2NNaOH/甲醇.3a-5a中R=CH2CH(CH3)2;3b-5b中R=CH(CH3)2;3c-5c中R=CH(CH3)CH2CH3;3d-5d中R=CH3;3e畫5e中R=H;3f-5f中R=CH2C6H5;3g-5g中R=CH2C6H4-OH-p;3h-5h中R=噴哚-5—基-012;3i和4i中R=CH2C02Me;5i中R=CH2C02H;3j禾P4j中R=CH2CH2C02Me;5j中R=CH2CH2C02H;3k-5k中R=CH2CH2CH2CH2NH2;31-51中R=CH(0H)CH3;3m匿5m中R=CH2CONH23n-5n中R=CH2CH2CONH2;3o-5o中R=CH2CH2CH2NHC(NH)NH2;3p-5p中R=CH2CH2SCH3。具體實施例方式為了進(jìn)一步闡述本發(fā)明，下面給出一系列實施例。這些實施例完全是例證性的，它們僅用來對本發(fā)明進(jìn)行具體描述，不應(yīng)當(dāng)理解為對本發(fā)明的限制。實施例13S-1,2，3，4-四氫異啉-3-羧酸鹽酸鹽(1)的制備將1.65g(10腿ol)L-苯丙氨酸溶解于90mL濃鹽酸，往得到的溶液中加入35mL濃度為35%的甲醛溶液。反應(yīng)混合物在90°C反應(yīng)8-9小時，薄層層析監(jiān)測到L-苯丙氨酸消失，終止反應(yīng)。反應(yīng)冷卻至室溫，析出無色晶體，過濾，用丙酮洗滌濾餅得1.92g(95.4%)標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI/MS:178[M+H]+;實施例23S-N-Boc-l，2，3，4-四氫異啉-3-羧酸(2)的制備將4.0g(18.7ramo1)3S-1，2，3，4-四氫異啉-3-羧酸鹽酸鹽(1)溶于40mlDMF中。冰浴攪拌下往該懸浮液中加入5.2g(23.9腿ol)Boc20。加三乙胺將反應(yīng)混合物的pH值調(diào)至10，反應(yīng)混合物室溫攪拌48小時，薄層層析監(jiān)測至原料消失，終止反應(yīng)。將反應(yīng)液倒入表面皿，在風(fēng)扇下吹約24小時至干。將吹干的油狀物用200mL乙酸乙酯溶解，然后置于250mL分液漏斗中，用KHS04(5%)水溶液洗滌(20mLX3)。分出合并的乙酸乙酯層，在250mL三角瓶中加入無水硫酸鈉干燥0.5h，常壓過濾。濾液減壓濃縮至析出白色固體。減壓過濾，得到4.14g(80%)標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI/MS:278[M+H]+。實施例33S-N-Boc-l，2，3，4-四氫異啉-3_甲酰-L-亮氨酸甲酯(3a)的制備冰浴冷卻下往置于150mL燒瓶中的由2.00g(7.22mmol)3S-N-Boc-1，2，3，4-四氫異啉-3-羧酸、0.97g(7.19腿ol)N-羥基苯并三唑(H0Bt)和1.37g(7.55ramol)鹽酸L-亮氨酸甲酯與70ml無水四氫呋喃(THF)構(gòu)成的溶液中滴入1.70g(8.25腿ol)二環(huán)己基羰二亞胺(DCC)和5mL無水THF構(gòu)成的溶液。往得到的溶液通過滴入麗M與THF的溶液調(diào)pH值到8。反應(yīng)混合物0OC攪拌2小時后抽濾，濾液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮至干。得到的殘余物用150mL乙酸乙酯溶解、置于250mL分液漏斗中、依次用飽和碳酸氫鈉水溶液洗3次(每次30mL)、飽和氯化鈉水溶液洗3次(每次30mL)、5%硫酸氫鉀水溶液洗3次(每次30mL)、飽和氯化鈉水溶液洗3次(每次30mU、飽和碳酸氫鈉水溶液洗3次(每次30mL)、飽和氯化鈉水溶液洗3次(每次30mL)。分離出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮至干，得到2.68g(92%)標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI-MS405[M+H]+;實施例43S-1-(l'-甲氧羰基_3，-甲基-S-正丁基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[l，5-b]異喹啉(4a)的制備將2.00g(4.80腿ol)3S-N-Boc-1,2,3,4-四氫異啉-3-甲酰-L-亮氨酸甲酯置于100mL茄形瓶中并用8mL乙酸乙酯溶解，在冰浴的條件下，緩慢滴入16mL4NHCl/EtOAc。反應(yīng)混合物0°C攪拌1.5小時后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮至干。殘留物溶于40mL甲醇和40mL丙酮的混合溶劑中游離后，補加20mL丙酮，用三乙胺調(diào)整pH值到9、氮氣保護(hù)、避光反應(yīng)7_10天、薄層層析監(jiān)測原料點消失終止反應(yīng)。反應(yīng)混合物用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮至干(低溫25攝氏度左右)、殘留物用200mL乙酸乙酯溶解、溶液置于250mL分液漏斗中并用30mL飽和氯化鈉水溶液洗10次。洗后的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥，半小時后過濾。濾液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮至干(低溫25攝氏度)。殘留物用5mL甲醇溶解、靜置、沉淀，過濾得O.76g(46yo)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp186-188°C;ESI-MS(m/e)345[M+H]+;[<x]D2°=-58.7(c=0.25，氯仿)。實施例51-(l'-羧基-3，-甲基正丁基)-2,2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[l，5-b]-異喹啉(5a)將0.5g(1.45mmol)1_甲氧羰基-甲基-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[l，5-b]-異喹啉溶于10mL甲醇中，在冰浴的條件下，緩慢加入2NNaOH溶液10mL。薄層層析監(jiān)測原料點消失，終止反應(yīng)。用INHC1調(diào)節(jié)pH值到7，減壓濃縮除去甲醇，再用1NHCl調(diào)節(jié)pH值到3，析出無色沉淀。過濾，用蒸餾水洗滌沉淀，干燥，得0.42g(88%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp188-190。C;ESI-MS(m/e)331[M+H]+;[^=-41.23。(c0.25，甲醇)實施例63S-N-Boc-l，2，3，4-四氫異啉-3-甲酰-L-纈氨酸甲酯(3b)的制備按照實施例3制備3a的操作，由2.00g(7.22腿ol)3S-N-Boc-1，2，3，4-四氫異啉-3羧酸與2.75g(7.55腿ol)鹽酸L-纈氨酸甲酯制得2.64g(95%)標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI-MS391[M+H]+。實施例73S-1-(1，-甲氧羰基-2，-甲基-S-正丙基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[l，5-b]異喹啉(4b)的制備按照實施例4制備4a的操作，由1.87g(4.8mmo1)N-Boc-S-異喹啉酰-L-纈氨酸甲酯制得1.44g(66%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp181—183。C;ESI-MS(m/e)451[M+H]+;[aj)^-23.7(c=0.25，氯仿)實施例83S-1-(1，_羧基-2，-甲基-S-正丙基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[1，5-b]異喹啉(5b)的制備按照實施例5制備5a的操作，由0.65g(1.45咖o1)3S-1-(1，-甲氧羰基-2，-甲基-S-正丙基)_2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[l，5-b]異喹啉制得0.41g(92%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp174-176°C;ESI-MS(m/e)317[M+H]+;[a]D2。=-8.9(c=0.25，甲醇)實施例93S-N-Boc-1，2,3，4-四氫異啉-3-甲酰-L-異亮氨酸甲酯(3c)的制備按照實施例3制備3a的操作，由2.00g(7.22mmol)3S-N-Boc-l，2，3，4-四氫異啉-3-羧酸與1.23g(7.34匪o1)鹽酸L-異亮氨酸甲酯制得2.43g(95%)標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI-MS421[M+H]+。實施例103S-1-(1，-甲氧羰基-1，-甲基-S-正丙基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[1，5-b]異喹啉(4c)的制備按照實施例制備4a的操作，由1.94g(4.8腿ol)3S-N-Boc-1，2，3，4-四氫異啉-3-甲酰-L-異亮氨酸甲酯制得L34g(61%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp192-194。C;ESI-MS(m/e)465[M+H]+;WD20=-58.7(c=0.25，氯仿)實施例113S-1-(l'-羧基-1，_甲基-S-正丙基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[1，5-b]異喹啉(5c)的制備按照實施例5制備5a的操作，由0.67g(1.45腿o1)3S-1-(1，-甲氧羰基-1，-甲基-S-正丙基)_2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[1，5-13]異喹啉制得O.43g(93%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp186-188。C;ESI-MS(m/e)331[M+H]+;kV。二-22.5(c=0.25，甲醇)實施例123S-N-Boc-l，2，3，4-四氫異啉-3-甲酰-L-丙氨酸甲酯(3d)的制備按照實施例3制備3a的操作，由2.00g(7.22mmol)3S-N-Boc-l，2，3，4-四氫異啉-3-羧酸與L05g(7.55腿ol)鹽酸L-丙氨酸甲酯制得2.43g(93%)標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI-MS362[M+H]+。實施例133S-1-(l'-甲氧羰基-1，-甲基-S-甲基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[1，5-b]異喹啉(4d)的制備按照實施例4制備4a的操作，由1.73g(4.8mmo1)3S-N-Boc-l，2，3，4-四氫異啉-3-甲酰-L-丙氨酸甲酯制得1.02g(51%)標(biāo)題化合物，為白色固體。Mp201-203。C;ESI-MS(m/e)423[M+H]+;[a]D2。=-39.O(c二O.25，CHC13)。實施例143S-1-(l'-羧基-l，-甲基-S-甲基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[1，5-b]異喹啉(5d)的制備按照實施例5制備5a的操作，由0.61g(1.45mrno1)3S-1-(1，-甲氧羰基-1，-甲基-S-甲基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[l，5-b]異喹啉制得O.37g(92%)標(biāo)題化合物，為白色固體。Mp197-199°C;ESI-MS(m/e)289[M+H]+;[a]D2°=-45.1(c=0.25，CH30H)實施例153S-N-Boc-l，2，3，4-四氫異啉-3-甲酰甘氨酸甲酯(3e)的制備按照實施例3制備3a的操作，由2.00g(7.22腿ol)3S-N-Boc-1，2，3,4-四氫異啉-3-羧酸與0..99g(7.55腿ol)鹽酸L-甘氨酸甲酯制得2.34g(93%)標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI-MS349[M+H]+。實施例163S-l-甲氧羰基甲基-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[l，5-b]異喹啉(4e)的制備按照實施例4制備4a的操作，由1.67g(4.8國1)3S普Boc-1，2，3，4-四氫異啉-3-甲酰甘氨酸甲酯制得1.03g(52%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mpl88-190。C;ESI-MS(m/e)409[M+H]+;。2°=-54.2(c=0.25，CHC13)。實施例173S-1-羧甲基-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[1，5-b]異喹啉(5e)的制備按照實施例5制備5a的操作，由0.59g(1.45mmol)3S-1-甲氧羰基甲基-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[l，5-b]異喹啉制得0.33g(86%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp186-188°C;ESI-MS(m/e)276[M+H]+;[。,]D20=—127.6(c=0.25，CH30H)。實施例183S-N-Boc-1，2，3，4_四氫異啉-3-甲酰-L-苯丙氨酸甲酯(3f)的制備按照實施例3制備3a的操作，由2.00g(7.22腿ol)3S-N-Boc-1，2，3，4-四氫異啉-3-羧酸與2.76g(7.55mmol)鹽酸L-苯丙氨酸甲酯制得2.78g(88%)標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI-MS439[M+H]+;實施例193S-1-(甲氧羰基-苯基-S-甲基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[l，5-b]異喹啉(4f)的制備按照實施例4制備4a的操作，由2.10g(4.8畫1)3S-N-Boc-1，2，3，4-四氫異啉-3-甲酰-L-苯丙氨酸甲酯制得1.44g(51%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp191-193。C;ESI-MS(m/e)499[M+H]+;W。2"二-96.2(c0.25，CHC13)。實施例203S-1-(羧基-苯基-S-甲基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[1，5-b]異喹啉(5f)的制備按照實施例5制備5a的操作，由0.72g(1.45mmol)3S-1-(甲氧羰基-苯基-S-甲基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[1，5-b]異喹啉制得0.48g(94。/。)標(biāo)題化合物，為白色固體。Mp190-192°C;ESI-MS(m/e)364[M+H]+;k]D20=—114.2(c=0.25，CH30H)。實施例213S-N-Boc-l，2，3，4-四氫異啉-3-甲酰-L-酪氨酸甲酯(3g)的制備按照實施例3制備3a的操作，由2.00g(7.22腿ol)3S-N-Boc-1，2，3，4-四氫異啉-3-羧酸與2.02g(7.55畫l)鹽酸L-酪氨酸甲酯制得2.86g(87%)標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI-MS455[M+H]+。實施例223S-1-(甲氧羰基-p-羥基苯基-S-甲基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[l，5-b]異喹啉(4g)的制備按照實施例4制備4a的操作，由2.18g(4.8mmo1)3S-N-Boc-1，2，3，4-四氫異啉-3-甲酰-L-酪氨酸甲酯制得1.31g(53%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp204-207。C;ESI-MS(m/e)514[M+H]+;k]D20=-134.5(c=0.25，CHC13)。實施例233S-1-(羧基-p-羥基苯基-S-甲基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[1，5-b]異喹啉(5g)的制備按照實施例5制備5a的操作，由0.74g(1.45腿ol)3S-1-(甲氧羰基-P-羥基苯基-S-甲基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[1,54]異喹啉制得0.49g(92%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp196-198°C;ESI-MS(m/e)381[M+H]+;[a]D2°=-27.1(c=0.25，CH30H)。實施例243S-N-Boc-l，2，3，4-四氫異啉-3-甲酰-L-色氨酸甲酯(3h)的制備按照實施例3制備3a的操作，由2.00g(7.22mmol)3S-N-Boc-l，2，3，4-四氫異啉-3-羧酸與1.92g(7.55腿ol)鹽酸L-色氨酸甲酯制得3.12g(91%)標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI-MS478[M+H]+。實施例253S-1-(1，-甲氧羰基-2'-吲哚-5-基-S-乙基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[l，5-b]異喹啉(4h)的制備按照實施例4制備4a的操作，由2.29g(4.8,1)3S-N-Boc-1，2，3，4-四氫異啉-3_甲酰-L-色氨酸甲酯制得1.46g(51%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mpl74-176。C;ESI-MS(m/e)538[M+H]+;[oJD2。=-127.8(c=0.25，CHC13)。實施例263S-1-(1，-羧基-2'-吲哚-5-基-S-乙基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[l，5-b]異喹啉(5h)的制備按照實施例5制備5a的操作，由0.78g(1.45,1)3S-1-(1，—甲氧羰基-2，-吲哚-5-基S-乙基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[1，5-b]異喹啉制得0.46g(86%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp175-1770C;ESI-MS(m/e)404[M+H]+;[a]D20=-112.1(c=0.25，CH30H)。實施例273S-N-Boc-1，2，3，4-四氫異啉_3-甲酰-L-天冬氨酸二甲酯(3i)的制備按照實施例3制備3a的操作，由2.00g(7.22mmol)3S-N-Boc-1,2，3，4-四氫異啉-3-羧酸與1.45g(7.34腿o1)鹽酸L-天冬氨酸二甲酯制得2.88g(95%)標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI-MS421[M+H]+。實施例283S-l-(r-甲氧羰基-2，-甲氧羰基-S-乙基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[l，5-b]異喹啉(4i)的制備按照實施例制備4a的操作，由2.00g(4.76腿ol)3S-N-Boc-l，2，3，4-四氫異啉-3_甲酰-L-天冬氨酸甲酯制得1.03g(60%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp134-136。C;ESI-MS(m/e)361[M+H]+;[a]D2°=-131.1(c=0.25，CHCl:i)。實施例293S-1-(1，_羧基-2，-羧基-S-乙基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[l，5-b]異喹啉(5i)的制備按照實施例5制備5a的操作，由O.5g(1.40腿ol)3S-1-(1，-甲氧羰基-2'-甲氧羰基-S-乙基)_2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[1,5-b]異喹啉制得0.40g(85%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp126-128°C;ESI-MS(m/e)333[M+H]+;k]D2。=-120.4(c=0.25，CH3OH)。實施例303S-N-Boc-l，2，3，4-四氫異啉-3-甲酰-L-谷氨酸二甲酯(3j)的制備按照實施例3制備3i的操作，由2.00g(7.22mmol)3S-N-Boc-l，2，3，4-四氫異啉-3-羧酸與1.60g(7.55匪ol)鹽酸L-谷氨酸二甲酯制得2.98g(95%)標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI-MS435畫+。實施例313S-1-(l'-甲氧羰基_2，-甲氧羰基-S-正丙基)-2,2-二甲基-4-氧代_四氫咪唑并[1，5-1)]異喹啉(4j)的制備按照實施例4制備4i的操作，由2.08g(4.8誦ol)3S-N-Boc-l，2，3，4-四氫異啉-3-甲酰-L-谷氨酸二甲酯制得1.34g(56%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp181-182。C;ESI-MS(m/e)495[M+H]+;k]D20=-140,2(c=0.25，CHC13)。實施例323S-1-(1'-羧基-2，-羧基-S-正丙基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[l，5-b]異喹啉(5j)的制備按照實施例5制備5i的操作，由O.72g(L45mmo1)3S-1-(1，-甲氧羰基-2'-甲氧羰基-S-正丙基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[1，5-b]異喹啉制得0.42g(87%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp172-175°C;ESI—MS(m/e)347[M+H]+;k]D20=—74.2(c=0,25，CH30H)。實施例333S-N-Boc-l，2，3，4-四氫異啉-3-甲酰-L-(N-芐基)賴氨酸芐酯(3k)的制備按照實施例3制備3a的操作，由2.00g(7.22匪ol)3S-N-Boc-l，2，3，4-四氫異啉-3-羧酸與2.50g(7.55腿ol)鹽酸L-N-節(jié)基賴氨酸芐酯制得3.41g(85%)標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI-MS554[M+H]+。實施例343S-1-(1，-芐氧羰基-6，-芐氧羰基-S-正丙基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[1，5-b]異喹啉(4k)的制備按照實施例4制備4a的操作，由2.66g(4.8腿ol)3S-N-Boc-1，2，3，4-四氫異啉-3-甲酰-L-(N-芐基)賴氨酸芐酯制得1.24g(42%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp136-1380C;ESI-MS(m/e)614[M+H]+;[a]D2°=-114.3(c=0.25，CHC13)。實施例353S-l-(1，-羧基_6，_氨基-S-正丙基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[l，5-b]異喹啉(5k)的制備按照實施例5制備5a的操作后，將不溶物在30ml甲醇溶解，氫氣/鈀炭條件下反應(yīng)，反應(yīng)1天，直到原料點消失，過濾，低溫下(25攝氏度)旋干即得，由0.89g(1.45匪o1)3S-1-(1，-芐氧羰基-6，-芐氧羰基-S-正丙基)_2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[1，5-b]異喹啉制得0.42g(87%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp141-143。C;ESI-MS(m/e)346[M+H]+;k]D2。=—107.1(c=0.25，CH30H)。實施例363S-N-Boc-l，2，3，4-四氫異啉-3-甲酰-L-蘇氨酸甲酯(31)的制備按照實施例3制備3a的操作，由2.00g(7.22mmol)3S-N-Boc-l，2，3，4-四氫異啉-3-羧酸與1.28g(7.55匪ol)鹽酸L-蘇氨酸甲酯制得2.31g(82%)標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI-MS393[M+H]+。實施例373S-1-(1，-甲氧羰基_2，-羥基-S-正丙基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[l，5-b]異喹啉(41)的制備按照實施例4制備4a的操作，由1.88g(4.8匪o1)3S-N-Boc-1，2，3，4-四氫異啉-3-甲酰-L-蘇氨酸甲酯制得0.94g(42%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp201-203。C;ESI-MS(m/e)453[M+H]+;[oj。20二-59.2(c=0.25，CHC13)。實施例383S-1-(l'-羧基_2，-羥基-S-正丙基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[1，5-b]異喹啉(51)的制備按照實施例5制備5a的操作，由0.66g(1.45腦o1)3S-1-(1，-甲氧羰基-2，-羥基-S-正丙基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[l，5-b]異喹啉制得0.38g(85%)標(biāo)題化合物，為白色固體。Mp196-198。C;ESI—MS(m/e)319[M+H]+;[aJD20=—29.2(c=0.25，CH30H)。實施例393S-N-Boc-l，2，3，4-四氫異啉-3-甲酰-L-天冬酰胺甲酯(3m)的制備按照實施例3制備3a的操作，由2.00g(7.22mmol)3S-N-Boc-1，2，3，4-四氫異啉-3-羧酸與1.38g(7.55腿ol)鹽酸L-天冬酰胺甲酯制得2.13g(72%)標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI-MS406[M+H]+。實施例403S-1-(1，-甲氧羰基-2，-氨羰基-S-乙基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[1，5-b]異喹啉(4m)的制備按照實施例4制備4a的操作，由1.94g(4.8mmo1)3S-N-Boc-l，2，3，4_四氫異啉-3-甲酰-L-天冬酰胺甲酯制得0.96g(42%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp183-185。C;ESI-MS(m/e)466[M+H]+;WD2U=-109.2(c=0.25，CHC13)。實施例413S-1-(1，-羧基_2，-氨羰基-S-乙基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[1，5-b]異喹啉(5m)的制備按照實施例5制備5a的操作，由0.67g(1.45腿ol)3S-1-(1，-甲氧羰基-2，-氨羰基-S-乙基)-2,2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[l，5-b]異喹啉制得0.41g(88%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp192-194°C;ESI-MS(m/e)332[M+H]+;WD2。=-169.1(c=0.25，CH:,OH)。實施例423S-N-Boc-l，2，3，4-四氫異啉-3_甲酰-L-谷氨酰胺甲酯(3n)的制備按照實施例3制備3a的操作，由2.00g(7.22醒ol)3S-N-Boc-l，2，3，4-四氫異啉-3-羧酸與1.48g(7.55腦ol)鹽酸L-谷氨酰胺甲酯制得2.53g(84%)標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI-MS420[M+H]+。實施例433S-l-(l，-甲氧羰基_2，-氨羰基-S-正丙基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[l,5-b]異喹啉(4n)的制備按照實施例4制備4a的操作，由2.01g(4.8腿o1)3S-N-Boc-1，2，3，4-四氫異啉-3-甲酰-L-谷氨酰胺甲酯制得0.98g(42%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp159-161。C;ESI-MS(m/e)480[M+H]+;k]D2。=-140.2(c=0.25，CHC13)。實施例443S-1-(l'-羧基-2，-氨羰基-S-正丙基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[1，5-b]異喹啉(5n)的制備按照實施例5制備5a的操作，由0.69g(1.45腿o1)3S-1-(1，-甲氧羰基-2，-氨羰基-S-正丙基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[1，5-b]異喹啉制得0.43g(89%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp156-158。C;ESI-MS(m/e)346[M+H]+;k]D2°=-24.3(c=0.25，CH30H)。實施例453S-N-Boc-1，2，3，4-四氫異啉-3-甲酰-L-(NG-硝基)精氨酸甲酯(3o)的制備按照實施例3制備3a的操作，由2.00g(7.22mmol)3S-N-Boc-1，2，3，4-四氫異啉-3-羧酸與2.04g(7.55匪o1)鹽酸L-(NG-硝基)精氨酸甲酯制得3.12g(87%)標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI-MS492[M+H]+。實施例463S-1-(l'-甲氧羰基-4，-硝基胍基-S-正丁基)-2，2-二甲基_4-氧代-四氫咪唑并[1，5-異喹啉(4o)的制備按照實施例4制備4a的操作，由2.36g(4.8腿o1)3S-N-Boc-l，2，3，4-四氫異啉-3-甲酰-L-(N°-硝基)精氨酸甲酯制得1.14g(43%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp186-188°C;ESI-MS(m/e)552[M+H]+;W,。二-147.1(c=0.25，CHC13)。實施例473S-l-(1，-羧基_4，_胍基-S-正丁基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[l，5-b]異喹啉(5o)的制備按照實施例5制備5a的操作后，將不溶物在30ml甲醇溶解，氫氣/鈀炭條件下反應(yīng)，反應(yīng)1天，直到原料點消失，過濾，低溫下(25攝氏度)旋干即得。由0.80g(1.45腿ol)3S-1-(1，-甲氧羰基_4，-硝基胍基-S-正丁基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[l，5-b]異喹啉制得0.42g(88%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp181_183°C;ESI-MS(m/e)373[M+H]+;k]D2。=—35.0(c=0.25，CH30H)。實施例483S-N-Boc-l,2，3，4-四氫異啉-3-甲酰-L-蛋氨酸甲酯(3p)的制備按照實施例3制備3a的操作，由2.00g(7.22mmol)3S-N-Boc-l，2，3，4-四氫異啉-3-羧酸與1.50g(7.55誦o1)鹽酸L-蛋氨酸甲酯制得2.35g(77%)標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI-MS423[M+H]+。實施例493S-1-(1，-甲氧羰基_3，-甲硫基-S-正丙基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[l，5-b]異喹啉(4p)的制備按照實施例4制備4a的操作，由2.03g(4.8mrno1)3S-N-Boc-l，2，3，4-四氫異啉-3-甲酰-L-蛋氨酸甲酯制得0.86g(37%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp174-176。C;ESI-MS(m/e)483[M+H]+;[a]D2"=-89.1(c=0.25，CHCl..,)。實施例503S-1-(I'-羧基_3，-甲硫基-S-正丙基)-2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[1，5-b]異喹啉(5p)的制備按照實施例5制備5a的操作，由0.70g(1.45醒o1)3S-1-(1，-甲氧羰基-3，-甲硫基-S-正丙基)_2，2-二甲基-4-氧代-四氫咪唑并[1，5-b]異喹啉制得O.44g(90。/。)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp182-184°C;ESI-MS(m/e)349[M+H]+;[a]D2°=-61.7(c=0,25，CH30H)。試驗例1本發(fā)明化合物(5a-p)的抗血栓活性測定1)實驗動物SD雄性大鼠，體重200-260g(購自北京醫(yī)科大學(xué)實驗動物部，許可證號為醫(yī)動字第0卜3056)2)實驗材料聚乙烯管(外徑1.6mm及1.3腿兩種)、肝素(50IU/ml)、戊巴比妥鈉(5%)。3)測定方法雄性SD大鼠(體重200g至260g)腹腔注射戊巴比妥鈉溶液進(jìn)行麻醉，分離出右頸總動脈和左頸外靜脈，在聚乙烯管的中段放入事先稱重的6cm長的絲線，以肝素生理鹽水(50IU/kg)充滿聚乙烯管，將一端插入左頸外靜脈，用注射器將生理鹽水(3ml/kg)，阿司匹林的生理鹽水溶液(20mg/kg)，分別將本發(fā)明實施例所制備的化合物5a-p(10nmol/kg)的生理鹽水溶液從另一端緩慢注入聚乙烯管中，此時管中原有的肝素已被推入左頸外靜脈中，管內(nèi)大部分為被測化合物溶液，然后將注射藥物端插入右頸總動脈。血液從右頸總動脈經(jīng)聚乙烯管流向左頸外靜脈，15min后中斷血流，取出絲線稱重，總重量減去絲線重量即為血栓濕重，統(tǒng)計各組的血栓濕重的均值和標(biāo)準(zhǔn)差OT士DS)，并作t檢驗。4)結(jié)果見表l。表l5a-p的抗血栓活性<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>n=10，阿司匹林的劑量二20mg/kg;異喹啉羧酸的劑量二5pmol/kg;5a-p的劑量=1Onmol/kg;a)與生理鹽水組比p<0.01;b)與生理鹽水組比pO.05;。試驗例2本發(fā)明化合物3S-1-(l'-羧基-l，-甲基-S-正丙基)-2，2-二甲基一4-氧代-四氫咪唑并[l，5-b]異喹啉(5c)的量效關(guān)系1)實驗動物SD雄性大鼠，體重200-260g(購自北京醫(yī)科大學(xué)實驗動物部，許可證號為醫(yī)動字第01-3056)2)實驗材料聚乙烯管(外徑1.6腿及1.3mm兩種)、肝素(50IU/ml)、戊巴比妥鈉(5%)。3)測定方法雄性SD大鼠(體重200g至260g)腹腔注射戊巴比妥鈉溶液進(jìn)行麻醉，分離出右頸總動脈和左頸外靜脈，在聚乙烯管的中段放入事先稱重的6cm長的絲線，以肝素生理鹽水(50IU/kg)充滿聚乙烯管，將一端插入左頸外靜脈，用注射器將5c(100nmol/kg，10nmol/kg，1,1/kg)的生理鹽水溶液從另一端緩慢注入聚乙烯管中，此時管中原有的肝素已被推入左頸外靜脈中，管內(nèi)大部分為被測化合物溶液，然后將注射藥物端插入右頸總動脈。血液從右頸總動脈經(jīng)聚乙烯管流向左頸外靜脈，15min后中斷血流，取出絲線稱重，總重量減去絲線重量即為血栓濕重，統(tǒng)計各組的血栓濕重的均值和標(biāo)準(zhǔn)差(Y士DS)，并作t檢驗。4)結(jié)果見表2。表25c在不同濃度下的抗血栓活性<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>n=10;a)與lnmol/kg組比p<0.0權(quán)利要求1、通式I化合物通式I其中，R選自CH2CH(CH3)2、CH(CH3)2、CH(CH3)CH2CH3、CH3、氫、CH2C6H5、CH2C6H4-OH-p、吲哚-5-基-CH2、CH2CO2H、CH2CH2CO2H、CH2CH2CH2CH2NH2、CH(OH)CH3、CH2CONH2、CH2CH2CONH2、CH2CH2CH2NHC(NH)NH2或CH2CH2SCH3。2、一種制備權(quán)利要求1所述通式I化合物的方法，包括(1)按照常規(guī)方法制備3S-l,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧酸，然后叔丁氧羰基化制備3S-2-叔丁氧羰基-6,7-二羥基-l,2,3，4-四氫異喹啉-3-羧酸；(2)按照常規(guī)方法先將L-氨基酸甲酯或芐酯連接到3S-2-叔丁氧羰基-6,7-二羥基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧酸的3位羧基上制備3S-2-叔丁氧羰基-1，2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酰-L-氨基酸甲酯或芐酯。(3)將3S-2-叔丁氧羰基-l,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酰-L-氨基酸甲酯或芐酯脫去叔丁氧羰基后與丙酮進(jìn)行縮酮化反應(yīng)、再進(jìn)行皂化反應(yīng)、脫去所有保護(hù)基，得到通式I化合物。3、按照權(quán)利要求2的方法，其特征在于步驟(l)中所述3S-1,2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸由L-苯丙氨酸與甲醛縮合制備得到。4、按照權(quán)利要求2的方法，其特征在于步驟(2)中所述L-氨基酸甲酯或芐酯選自L-亮氨酸甲酯、L-纈氨酸甲酯、L-異亮氨酸甲酯、L-丙氨酸甲酯、甘氨酸甲酯、L-苯丙氨酸甲酯、L-酪氨酸甲酯、L-色氨酸甲酯、L-天冬氨酸二甲酯、L-谷氨酸二甲酯、L-(N-芐基)賴氨酸芐酯、L-蘇氨酸甲酯、L-天冬酰胺甲酯、L-谷氨酰胺甲酯L-(NG-硝基)精氨酸5.一種治療抗血栓藥物組合物,由有效量的權(quán)利要求1所述的通式I化合物和藥學(xué)上可接受的載體或輔料組成。6、權(quán)利要求1所述的通式I化合物在制備抗血栓藥物中的用途。全文摘要本發(fā)明公開了具有抗血栓活性的通式I化合物，其制備方法以及它們作為抗血栓劑的應(yīng)用。采用大鼠血栓模型上評價了通式I化合物的抗血栓活性，實驗結(jié)果表明，本發(fā)明通式I化合物均具有優(yōu)秀的抗血栓活性，臨床上可作為抗血栓劑應(yīng)用。文檔編號C07D235/00GK101318933SQ20071010003公開日2008年12月10日申請日期2007年6月4日優(yōu)先權(quán)日2007年6月4日發(fā)明者崔國輝,彭師奇,樂澎,明趙申請人:北京大學(xué)