專利名稱：：肽胃泌酸調節(jié)素衍生物的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及肽胃泌酸調節(jié)素(oxyntomodulin)衍生物，其合成，及其用于治療代謝疾病諸如糖尿病和肥胖癥的用途。
背景技術：
：激素肽胃泌酸調節(jié)素(OXM,高血糖素-37)是在腸和中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中處理的前原胰高血糖素(preproglucagon)的翻譯后產(chǎn)物，并且響應食物攝入由內臟的L-細胞分泌。在1983年被發(fā)現(xiàn)后，OXM已經(jīng)牽涉食物攝入和能量消耗的調節(jié)。在大鼠中，中央或外周給藥OXM導致短期食物攝入減少，對胃排空的影響很小(Dakin等，Jocn朋/ogy,142:4244-4250(2001)，Dakin等，五"山c""o/ogy,145:2687-2695(2004》。在大鼠中，重復腦室內給藥OXM與成對飼喂的動物相比導致核心溫度升高和增重減少，暗示了對熱量攝入和能量消耗二者都有影響(Dakin等，爿附.J.尸/zjwo/.五mfoc"，/.A^to6.,283:E1173-E1177(2002》。OXM是37-氨基酸的肽。據(jù)報導OXM抑制胃酸分泌的作用可通過8-殘基的C-末端片段Oxm(30-37),稱為SP-1,進行模擬(Carles-Bonnet等，尸e/"J^,1996,17:557-561)。在人中，在正常體重的健康受試者中單次90分鐘的靜脈內輸注OXM降低饑餓得分和在自助餐時的食物攝入降低~19%。累積12小時的熱量攝入減少~11%,沒有惡心或食物適口性方面改變的報導(Cohen等，J.C/z".五"fifoc"朋/.A/eto/).,88:4696-4701(2003))。最近，膳食前注射OXM在4周內在月巴胖的健康志愿者(BMI-33)中導致在治療的第一天熱量攝入明顯減少(25。/。)，這一作用在研究期間得以保持(在4周后減少35%)(Wynne等，Z)zW"^54:23卯-2395(2005))。在研究結束時在一皮治療受試者中觀察到穩(wěn)固的體重減輕(1.9%,經(jīng)安慰劑校正)。OXM的血漿水平與輸注研究中所觀察到的血漿水平類似(最大濃度950pM)。盡管由于OXM的體內穩(wěn)定性差(血漿t1/2<12分鐘)而需要較高劑量，但是沒有任何轉速反應并且輕微和短暫的惡心事件的發(fā)生率低(~3%),使得該激素成為少數(shù)肥胖癥靶標之一，可被批準用于人用并具有有吸引力的耐受性特性。OXM具有極短的半衰期并且被細胞表面二肽基肽酶IV(下文稱為DP-IV)迅速滅活。然而，DP-IV抑制劑在臨診中的體重效果居中(weight-neutral),暗示了可能需要超生理水平的OXM(900-1000pM)來實現(xiàn)人的體重減輕。因此，肽胃泌酸調節(jié)素顯示了作為代謝疾病諸如糖尿病和肥胖癥的治療手段的潛力。然而，因為OXM的體內穩(wěn)定性差，仍然需要開發(fā)可-陂安全地和有效地給藥用于治療新陳代謝病諸如糖尿病和肥胖癥的OXM衍生物。如果開發(fā)的類似物或衍生物通過綴合到改進穩(wěn)定性和藥代動力學的部分而被修飾，更特別的是賦予對抗DP-IV裂解的抗性的4務飾，則是進一步所希望的。本發(fā)明提供了OXM多肽衍生物，和通過給藥本文所述的衍生物治療或預防4戈謝疾病諸如J巴胖癥和糖尿病的方法。發(fā)明概述本發(fā)明提供了多肽，其包括HxX'XzGTFTSDYX^YLDXsXsXsAXTXsFVXiWLXsXmXuKRNKNNXuXuXM,其中Hx選自His;咪唑-乳酸(ImiH);脫氨基-His(ANH2-H);乙?；鵋is;焦谷氨?；鵋is(PyrH);N-曱基-His(Me畫H);N,N-二曱基-His(Me2-H);苯曱?；鵋is(Bz畫H);千基His(Bzl誦H);和Phe;選自Ser;Gly;Ala;Arg;Asn;Asp;Glu;Gin;His;lie;Lys;Met;Phe;Pro;Thr;Trp;Tyr;Val;D-Ala;D-Ser;和oc-氨基異丁酸；X2是Gln,Asp,Glu,Pro,Leu或L-正亮氨酸；Xs是Ser,Ala,Cys,Cys(mPEG),或Cys(膽甾基)；X4是Lys,Cys,Cys(mPEG),或Cys(膽甾基);X5是Ser或Ala;Xe是任何氨基酸；X7是Gln,Cys,Cys(mPEG),或Cys(月旦甾基)；Xg是Asp,Cys,Cys(mPEG)，或Cys(膽甾基)；X9是Met,Met(O),Val,正亮氨酸，丙氨酸，.a-氨基異丁酸或O-曱基-高絲氨酸；Xw是Asn,Cys,Cys(mPEG),或Cys(膽甾基);Xn是Thr，Cys，Cys(mPEG)，或Cys(膽甾基)；Xu是Ile,Cys,Cys(mPEG),或Cys(膽甾基);Xn是Ala,Cys,Cys(mPEG),或Cys(月旦甾基)；和Xw是酰胺，羧酸S旨，仲酰胺，Ala,K(棕櫚酰基)，Cys,Cys(mPEG)，Cys(膽甾基)或mPEG或膽固醇通過化學鍵與其連接的任何連接基。還涵蓋了其可藥用鹽。另夕卜，X3,X4,X6-X8和XurXM中任何一個或兩個可是Cys(mPEG)或Cys(膽甾基)；Cys(mPEG)還可是d;C2;C3或C6,其中C產(chǎn)Cys(mPEG)5kDa,C2=Cys(MPEG)20kDa，C3=Cys(MPEG)240KDa,C6=Cys(MPEG)260kDa,并且各自對應于通過側鏈硫醇與具有所示分子量的線型曱氧基PEG(mPEG)或支化mPEG2進行PEG化的半胱氨酸殘基。本發(fā)明涉及下式所示的OXM多肽書卞生物HoDGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLmNTKKNKNNIAQ,其中C3=Cys[(mPEG)240kDa],各自對應于通過側鏈石克醇與具有所示MW的支化mPEG[(mPEG)2]進行PEG化的酰胺化半胱氨酸殘基；a是a-氨基異丁酸(aib);和m-蛋氨酸亞砜(Met(O))。在本發(fā)明的另一個實施方案中，提供了多肽，其包括HXSQGTFTSDYSKYIXSRRAQDFVQWLMNTKRNKNK[A,其中Hx選自His,咪唑-乳酸(ImiH);脫氨基-His(ANH2-H),乙?；鵋is,焦谷氨?；鵋is,N-曱基-His(Me-H),N，N-二甲基-His(Me2-H);苯甲?；鵋is(Bz國H),千基His(Bzl-H),和Phe。在本發(fā)明的又一個實施方案中，提供了多肽，其包括HX,QGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNIXRKRNNIA,其中X丄選自Ser,Gly,Ala,Arg;Asn,Asp,Glu,Gin,His,He,Lys,Met,Phe,Pro,Thr,Trp,Tyr,Val,D-Ala,D-Ser，和a陽氨基異丁酸。本發(fā)明進一步提供了多肽，其包括HSX2GTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTKRNKNNIA,X2選自Gin,Asp,Glu,Pro,Leu,和L-正亮氨酸。在本發(fā)明的另一個實施方案中，提供了多肽，其包括HSQGTFTSDYX^YLDSXfiXeAX'XsFVX'WLMXioX],KKNRNNXuXuX,4,其中X3是Ser,Ala，Cys(mPEG)，或Cys(膽甾基);X4是Lys,Cys(mPEG),或Cys(膽甾基)；X6是Arg,Cys(mPEG),或Cys(膽甾基)中任何之一；X是Gln,Cys(mPEG),或Cys(膽甾基)中任何之一；Xs是Asp,Cys(mPEG),或Cys(膽甾基);Xu)是Asn,Cys(mPEG),或Cys(膽甾基);Xn是Thr,Cys(mPEG),或Cys(月旦甾基)；Xu是Ile,Cys(mPEG)，或Cys(膽甾基)；Xu是Ala,Cys(mPEG),或Cys(膽甾基)；和Xw是酰胺，羧酸酯，仲酰胺，Ala,K(棕櫚?；?，Cys(mPEG),Cys(膽甾基)，或mPEG或膽甾醇通過化學鍵與其連接的任何連接基。其中X3,X4,X6-X8和X10-X14中的一個或兩個是Cys(mPEG)或Cys(膽甾基)。在本發(fā)明的一實施方案中，提供了多肽，其包括HaX15GTFTSDYSKYLDSZZAX16DFVQWLX17NTX18，其中Xu是D或Q;Z是任何氨基酸；X16AC8,Cys(N-乙基馬來酰亞胺基)，Q或C;Xn是m或M;X^是酰胺化k或K。在本發(fā)明的另一個實施方案中，提供了多肽，其包括HaDGTFTSDYSKYDSZZAQDFVQWLmNTKJRNRXNIAX19,其中Xw是C或C8，Cys(N-乙基馬來酰亞胺基)。在本發(fā)明的又一個實施方案中，提供了下式的多肽HoDGTFTSDYSKYLDS-TtdsEC-CONH2。在本發(fā)明的一實施方案中，提供了下式的多肽HaDGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLmNTKRNRNNIA-Ttds-EEEEEC-COOH:，其中Ttds是l-氨基-4,7,10-三氧雜-13-十三胺succimmicacid。在本發(fā)明的另一個實施方案中，提供了治療受試者的代謝疾病的方法，包括對該受試者給藥如上所述的多肽。代謝疾病可選自糖尿病、代謝綜合癥、高血糖癥和肥胖癥，并且可通過外周到腦的途徑給藥，所述途徑諸如經(jīng)口，粘膜，頰，舌下，鼻，直腸，皮下，透皮，靜脈內，肌內或腹膜內。在本發(fā)明的又一個實施方案中，提供了包括如上所述的多肽和藥學適當?shù)妮d體的藥物組合物。本發(fā)明進一步涉及本發(fā)明的多肽用于制備在有需要的受試者中通過給藥本發(fā)明的多肽和藥物組合物治療或預防代謝疾病諸如糖尿病或肥胖癥的藥物中的用途。圖1顯示人GLP-1受體的突變形式被(a)天然豬OXM和(b)PEG化OXM2的激活，和由于該肽與DP-IV的預培養(yǎng)導致的功效喪失。圖2顯示在瘦小鼠腹膜內葡萄糖耐量試驗(IPGTT)中豬肽胃泌酸調節(jié)素的腸降血糖素活性。示出了每組的葡萄糖振動(glucoseexcursion)的抑制％。"ctrl"=用媒介物處理的鹽水攻擊小鼠，"veh"=用媒介物處理的葡萄糖攻擊小鼠。圖3顯示由序列OXM2和OXM3表示的多肽在瘦小鼠中降低過夜食物4聶入和體重增加方面的功歲支。*p50.05相對于々某介物組。圖4顯示GLP-1和OXM在小島和MIN6細l包中對葡萄糖刺激的減一島素分泌(GSIS)的作用。圖5顯示GLP-1R刪除和受體拮抗在小島中對OXM、GCG和GLP-1介導的GSIS的作用。圖6顯示OXM在高血糖素受體-A小島中對GSIS的作用。圖7顯示OXM和exendin-4在野生型和GLP-1R-A小鼠中在IPGTT期間對血糖和胰島素水平的作用。圖8顯示OXM99在瘦小鼠IPGTT中的急性葡萄糖降低作用。圖9顯示OXM99在瘦小鼠中的降血糖作用。圖10顯示OXM117在瘦小鼠IPGTT中的葡萄糖降4氐作用。圖11顯示OXM類似物OXM117和OXM99與exendin-4相比的作用持續(xù)時間。圖12顯示在大鼠中使用皮下劑量給藥的OXM117的藥代動力學。圖13顯示證明OXM117肽顯示無體外高血糖素樣活性的研究結果。圖14以列表形式總結了GLP1和GCG受體的體外活性數(shù)據(jù)。圖15顯示(mPEG)240kDa綴合物在DIO小鼠才莫型中對食物攝入和體重減輕的體內活性。圖16顯示在GLP1和GCG受體處起作用的C-末端截短類似物的體外功效數(shù)據(jù)。圖17顯示在GLP1和GCG受體處起作用的所選的PEG化OXM類似物的體外功效數(shù)據(jù)。發(fā)明詳述本發(fā)明涉及經(jīng)修飾的OXM衍生物。通過PEG化或綴合到其它的改進穩(wěn)定性和藥代動力學的部分或載體蛋白質上，和/或通過引入氨基酸殘基的置換而使得肽具有對抗DP-IV裂解的抗性而開發(fā)了OXM衍生物。另外，穩(wěn)定化的OXM衍生物不表現(xiàn)出高血糖素受體激動活性，因此可在糖尿病或前糖尿病受試者中的高血糖和肥胖癥的治療中提供某些優(yōu)點。對于這些受試者，應當避免高血糖素受體信號的上調，因為其可導致血糖水平升高。除非另作說明，術語"多肽，，，"蛋白質"和"肽，，可被本領域技術人員理解為還包括不同的經(jīng)修飾和/或穩(wěn)定化的形式。這些經(jīng)修飾形式可以是化學修飾形式，包括但不限于PEG化形式，棕櫚?；问?，膽甾醇修飾形式等等。修飾還包括分子內交聯(lián)和與諸如脂質、黃素、生物素、聚乙二醇衍生物等的不同部分的共價連接。另外，修飾還可包括環(huán)化、支化和交聯(lián)。進一步地，除了常見的20種氨基酸之外的被基因編碼的氨基酸也可包括在多肽中。OXM書f生物的結構本發(fā)明提供經(jīng)修飾的OXM衍生物。特別地，本發(fā)明涉及下式的新型的穩(wěn)定化的經(jīng)修飾的OXM多肽衍生物其中Hx選自His;咪唑-乳酸(ImiH);脫氨基-His(ANH2-H);乙?；鵋is;焦谷氨?；鵋is(PyrH);N-曱基-His(Me-H);N,N-二曱基-His(Me2-H);苯曱酰基His(Bz-H);千基His(Bzl-H);和Phe;選自Ser;Gly;Ala;Arg;Asn;Asp;Glu;Gin;His;lie;Lys;Met;Phe;Pro;Thr;Trp;Tyr;Val;D誦Ala;D-Ser;和a-氨基異丁酸；X2是Gln,Asp,Glu，Pro,Leu或L陽正亮氨酸；Xg是Ser,Ala,Cys,Cys(mPEG)，或Cys(膽甾基);X4是Lys,Cys,Cys(mPEG),或Cys(膽甾基);X5是Ser或Ala;X6是任何氨基酸；X是Gln，Cys,Cys(mPEG),或Cys(膽甾基);Xs是Asp,Cys,Cys(mPEG)，或Cys(膽甾基);X9是Met,Met(O),Val,正亮氨酸，丙氨酸，ot-氨基異丁酸或0-曱基-高絲氨酸；X工o是Asn,Cys,Cys(mPEG),或Cys(月旦甾基)；Xn是Thr,Cys,Cys(mPEG),或Cys(膽甾基);Xu是Ile,Cys，Cys(mPEG),或Cys(膽甾基)；Xn是Ala,Cys，Cys(mPEG),或Cys(膽甾基);和Xn是酰胺，羧酸酯，仲酰胺，Ala,K(棕櫚?；?，Cys,Cys(mPEG),Cys(膽甾基)或mPEG或膽固醇通過化學鍵與其連接的任何連接基。另外，X3,X4,X6-X8和X10-X14中任何一個或兩個可以是Cys(mPEG)或Cys(膽甾基)；Cys(mPEG)還可是d;C2;C3或C6,其中C!=Cys(mPEG)5kDa,C2=CYS(mPEG)20KDA,C3=Cys(mPEG)240kDa,C6=Cys(mPEG)260kDa,并且各自對應于通過側鏈硫醇與具有所示MW的線型甲氧基PEG(mPEG)或支化mPEG2進行PEG化的半胱氨酸殘基。本發(fā)明進一步提供下式的OXM多肽HctDGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLmNTKRNRNNIAC3其中C3=Cys[(mPEG)240kDa],各自對應于通過側《連石克醇與具有所示MW的支化mPEG[(mPEG)2]進行PEG化的酰胺化半胱氨酸殘基；a是a-氨基異丁酸(aib);和m-蛋氨酸亞石風[Met(O)]。在本發(fā)明的一個實施方案中，提供了多肽，其包括HX,QGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWL畫TKRNRNNIA,其中Xi選自Ser,Gly,Ala,Arg;Asn,Asp,Glu,Gin,His,lie,Lys,Met,Phe，Pro,Thr,Trp,Tyr,Val,D-Ala,D畫Ser,和a-氨基異丁酸。本發(fā)明進一步提供了多肽，其包括HSX2GTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTKJRNRNNIA,Xz選自Gin,Asp,Glu，Pro,Leu,和L-正亮氨酸。在本發(fā)明的另一個實施方案中，提供了多肽，其包括HSQGTFTSDYX3X4YLDSX6X6AX7X8FVX7WLMX'0XKRNTRNNXUX13X14其中X3是Ser,Ala，Cys(mPEG),或Cys(膽甾基)；X4是Lys,Cys(mPEG),或Cys(膽甾基);X6是Arg，Cys(mPEG),或Cys(月旦甾基)；X7是Gln,Cys(mPEG),或Cys(膽甾基)；Xs是Asp,Cys(mPEG),或Cys(膽甾基);Xu)是Asn,Cys(mPEG)，或Cys(膽甾基)；Xn是Thr,Cys(mPEG),或Cys(膽甾基);Xu是Ile，Cys(mPEG),或Cys(月旦甾基)；Xn是Ala,Cys(mPEG),或Cys(膽甾基);和X!4是酰胺，羧酸酯，仲酰胺，Ala，K(棕櫚酰基)，Cys(mPEG),Cys(膽甾基)，或mPEG或膽甾醇通過化學鍵與其連接的任何連接基。其中X3，X4,X6-X8和X10-X14中的一個或兩個是Cys(mPEG)或Cys(膽甾基)。在本發(fā)明的一個實施方案中，提供了多肽，其包括HaX15GTFTSDYSKYLDSZZAX16DFVQWLX17NTX18其中Xm是D或Q;Z是任何氨基酸；X"是C8，Q或C;Xn是m或M;X^是酰胺化k或K。在本發(fā)明的另一個實施方案中，提供了多肽，其包括HtxDGTFTSDYSKYDSZZAQDFVQWLniNTKJRNRNNIAX19,其中x^是c或c8。在本發(fā)明的又一個實施方案中，提供了下式的多肽HaDGTFTSDYSKYLDS-TtdsEC-CONH2在本發(fā)明的一個實施方案中，提供了下式的多肽HoDGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLmNTKRNKNNIA-Ttds-EEEEEC-COOH。本文使用的氨基酸殘基的縮寫如下所示tt酸三字母縮寫一字母縮寫氨基酸三字母縮寫一字母縮寫丙氨酸AlaA亮氨酸LeuL精氨酸ArgR賴氨酸LysK<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>除非另外具體說明，所有的氨基酸殘基為L型。與野生型OXM相比，本發(fā)明的OXM衍生物含有若干個氨基酸置換，和/或可被PEG化或以其它方式被修飾(例如用膽甾醇部分進行修飾)。類似物可以,皮雙重綴合，例如，與膽甾醇和PEG二者綴合。這種OXM衍生物對抗由二肽基肽酶IV(DP-IV)導致的裂解和失活。"受體激動劑"是指任何內源性或外源性的(藥物)物質或化合物，其可與受體例如GLP-1R或高血糖素受體相互作用，從而啟動以受體激活為特征的藥理學或生化應答。通常，本發(fā)明的OXM衍生物的特征在于它們對人GLP-IR具有親合性以及對于這種受體的EC50為0.1pM到1)uM。本發(fā)明的OXM衍生物的特征還在于它們對GcgR具有親合性，顯示的EC50>1|uM。本發(fā)明的OXM書f生物可用于降低食物4聶入和體重，并且可介導胰島的葡萄糖刺激的胰島素分泌(GSIS),從而為罹患代謝疾病諸如肥胖癥、糖尿病、代謝綜合癥X、高血糖癥、空腹葡萄糖受損和其它前糖尿病狀態(tài)的個體提供可供選擇的治療手段。<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>a=a-氨基異丁酸(Aib);a=D-Ala;s=D-Ser;n=L-正亮氨酸(Nle),X二O-甲基-高絲氨酸；d=Cys(mPEG)5kDa,C2=Cys(mPEG)20Kda,C3=Cys(mPEG)240kDa,各自對應于通過側鏈硫醇與具有所示MW的線型甲氧基PEG(mPEG)或支化mPEG[(mPEG)2]進行PEG化的半胱氨酸殘基；C4^Cys(膽甾基)，對應于通過側鏈硫醇與膽甾醇連接的半胱氨酸殘基；C5=Cys(CH2CONH2),對應于其中側鏈硫醇與碘乙酰胺反應的半胱氨酸殘基；C6=Cys(mPEG)260kDa,各自對應于通過側鏈硫醇與具有所示MW的線型曱氧基PEG(mPEG)或支化mPEG2mPEG[(mPEG)2]進行PEG化的半胱氨酸殘基；Kb=咪唑-乳酸(ImiH);H2=脫氨基-His(ANH2-HyAc=乙酰基；Pyr=焦谷氨?；?；Me-H=N-甲基-His;Me2-H^N,N-二甲基-His;Bz=苯曱酰基(C7H50);Bzl=千基(C7H7);m=蛋氨酸亞砜；C7=(Cys)2(mPEG)2-40kDa,各自對應于通過側鏈硫醇與同一個線型甲氧基PEG(mPEG)或一個支化mPEG[(mPEG)2]進行PEG化的兩個半胱氨酸殘基；C8=Cys(N-乙基馬來酰亞胺基)；Ttds,l-氨基-4,7,10-三氧雜-13-十三胺succmimicacid;k,D-賴氨酸。1.1.氨基酸置換和修飾處(OXM的2位)的置換一皮設計用于改善OXM衍生物對抗DP-IV蛋白水解作用的抗性，DP-IV在許多肽(包括OXM和GLP-1)的降解中起重要作用。已經(jīng)報導了在GLP-1中用Gly置換2位的Ser提高了對抗DP-IV裂解的抗性(Lotte,B.K.,J.MedChem.，47:4128-4134(2004))。盡管在OXM和GLP-1之間具有高度的序列同源性，但是在2位的Ser→Gly置換被發(fā)現(xiàn)不能賦予經(jīng)修飾的OXM以類似作用。然而，在2位用Val,lie,Asp，Glu，Met,Trp,Asn,D-Ala，D國Ser,或oc-氨基異丁酸置換Ser使得相應的OXM衍生物比野生型OXM對DP-IV更具抗性，這在以下的實施例中討論。具有X!處(OXM的2位)置換的肽包括OXM4-7，12,23,28-59,以及OXM33-36和OXM55-59的前體。X2處(OXM的3位)的置換一皮設計用于產(chǎn)生作為GLP-1R的選擇性激動劑而對GcgR具有最小激活或無激活的OXM衍生物。這種OXM衍生物當治療肥胖性糖尿病時是有利的。具有X2處(OXM的3位)置換的肽包括OXM8-12,15,23,53,95,96和97。類似地，在X3和Xs處(11位和16位)置換成Ala^f皮設計用于產(chǎn)生對GLP-1R具有選擇性而對GcgR無活性的OXM衍生物。在X3和X5處(l1位和16位)置換成Ala的一個這種例子是OXM24。在X3,X4,X6-Xs和X10-X14中的任何一個或多個位點處置換成半胱氨酸允許在特定位點進行OXM衍生物的PEG化或膽甾基化。其它置換或修飾是本領域已知的并且包括物理粘附于活性劑的表面而不是與活性劑化學結合或相互作用的那些?？刹捎脙煞N或多種這種修飾，并且可選自已知的有機和無機的藥物賦形劑，包括各種聚合物、低分子量低聚物、天然產(chǎn)物和表面活性劑。1.2.PEG化和/或膽甾基化本發(fā)明考慮了多官能聚合物衍生物的使用，通過雙官能和多臂型的N-馬來酰亞胺基PEG衍生物舉例說明。多種聚乙二醇(PEG)物質可用于本發(fā)明的新型OXM衍生物的PEG化。實質上可使用任何適當?shù)姆磻訮EG試劑并且適當?shù)奈镔|包括4旦不限于在NOF公司的DrugDeliverySystems目錄中出售的那些(YebisuGardenPlaceTower,20-3Ebisu4-chome,Shibuya-ku,Tokyo150-6019),和用于示例性目的在NektarTherapeutics的MolecularEngineering目錄中的那些(490DiscoveryDrive,Huntsville,Ala.35806)。例如但非限制性的，在不同的實施方案中通常優(yōu)選以下的PEG試劑多臂型PEG,mPEG(MAL)2，mPEG2(MAL),任何的SUNBRIGHT活化的PEGs(包括但不限于羧基-PEGs，p-NP-PEGs，三氟代乙烷磺酰基(Tresyl)-PEGs,醛PEGs,縮醛-PEGs,氨基-PEGs,硫醇-PEGs，馬來酰亞胺基-PEGs,羥基-PEG-胺，氨基-PEG-COOH,羥基-PEG-醛，羧酸酐型-PEG,官能化PEG-磷脂)，和/或適當?shù)姆磻訮EGs。本發(fā)明的新型OXM衍生物肽還可包含兩個PEG部分，其通過氨基甲酸酯或酰胺鍵與間隔基部分共價連接，其中間隔基部分共價連接到肽的叔酰胺連接基。在本發(fā)明的這種實施方案中使用的兩個PEG部分的每一個可是線型的并且可一起連接在單個連接點。在本發(fā)明的一個實施方案中，每個PEG部分具有的分子量為約10千道爾頓(10K)到約60K(術語"約"是指在PEG的制備中一些分子的分子量將比所述分子量略大和略小)。兩個PEG部分中的每個可具有的分子量為約20K到約40K。本領域的技術人員能夠基于諸如所需劑量；循環(huán)時間；對蛋白水解作用的抗性；如果有的話對生物活性的作用；操作容易性；抗原性的程度或缺乏；和其它已知的PEG對治療肽的作用而選擇所需的聚合物大小。在本發(fā)明的一實施方案中，N-馬來酰亞胺基聚合物衍生物的聚合物骨架是聚(烷撐二醇)，其共聚物，其三元共聚物，或其混合物。例子包括聚(乙二醇)，聚(丙二醇)，以及乙二醇和丙二醇的共聚物。正如下文更詳細描述的，本發(fā)明的更優(yōu)選方案采用PEG聚合物，諸如雙官能PEG,多臂型PEG,叉形PEG，支化PEG,側鏈型PEG,和其中具有可降解鍵的PEG。然而，應該理解的是，其它相關聚合物還可適用于本發(fā)明的實踐中并且術語PEG或聚(乙二醇)在這方面的使用意在表示包含性的而非排它性的含義。術語PEG包括任何形式的聚(乙二醇)，包括雙官能PEG,多臂型PEG,叉形PEG,支化PEG,側鏈型PEG(即具有一個或多個側掛于聚合物骨架的官能團的PEG或相關聚合物)，或其中具有可降解4建的PEG。聚合物骨架可以是線型或支化的。PEG通常以支化形式使用，其可通過環(huán)氧乙烷與多種多元醇諸如甘油，甘油低聚物，季戊四醇和山梨醇的加成反應制備。中央支化部分還可得自若干氨基酸諸如賴氨酸。支化聚(乙二醇)可由通式R(-PEG-OH)m表示，其中R得自核心部分，諸如甘油，甘油低聚物，或季戊四醇，并且m表示臂的數(shù)目。多臂型PEG分用作聚合物骨架。"'^、''口本領域的普通技術人員將認識到，前述關于基本上水溶性的和非肽聚合物骨架的列舉絕不是窮盡的，而僅僅是示例性的，并且所有具有上述性質的聚合物型材料都被考慮在內。本發(fā)明的OXM衍生物上的PEG化位點基于對OXM的結構和其與高血糖素和GLP-1受體的相互作用的考慮進行選擇。因此，PEG化優(yōu)選是位點特異性的。已經(jīng)廣泛報道了在半胱氨酸的硫醇側鏈的PEG化(參見例如Caliceti(feVeronese,2003)。如果在肽中沒有Cys殘基，則可通過置換引入Cys殘基。本發(fā)明的OXM衍生物可通過半胱氨酸的側鏈進4亍PEG化。OXM書t生物可包含Cys(mPEG)。Cys(mPEG)中的mPEG可具有不同的分子量。分子量的范圍優(yōu)選5kDa到200kDa,更優(yōu)選5kDa到100kDa，進一步優(yōu)選20kDa到60kDa。mPEG可以是線型或支化的。例如，本發(fā)明的Cys(mPEG)可是C"C2,C3或C6。如本文舉例說明的，G是具有5kDa分子量的線型mPEG的Cys(mPEG)(Cys(mPEG)5kDa)(例如MPEG-MAL-5000,NEKTAR2F2MOH01);C2是具有20kDa分子量的線型mPEG的Cys(mPEG)(Cys(mPEG)20kDa)(例如MPEG國MAL-20K,NEKTAR2F2M0P01);C3是具有40kDa分子量的支化mPEG的Cys(mPEG)(Cys(mPEG)240kDa)(例如MPEG2-MAL-40K,NEKTAR2D3Y0T01或Y形PEG馬來酰亞胺，MW40K(JenKemTechnology,項目編號Y-MAL-40K或SUNBRIGHTGL2-400MA馬來酰亞胺，(NOFCorporation)和C6是具有60kDa分子量的支化mPEG的Cys(mPEG)(Cys(mPEG)260kDa)(例如MPEG2畫MAL-60K,NEKTAR2D3Y0V01)?；蛘撸琌XM衍生物中的半胱氨酸殘基還可通過側鏈石危醇一皮膽甾醇衍生化。膽甾基OXM衍生物的例子包括OXM36,OXM59,OXM65,OXM70,OXM76，OXM82,OXM88，和OXMIOI。1.3.其它修飾N-末端組氨酸Hx可以用來自以下的衍生物進行突變His,Hi=咪唑-乳酸(ImiH);脫氨基-His(ANH2-H),乙酰基His,焦谷氨?；鵋is(PyrH,N-甲基-His(Me-H),N,N-二甲基-His(Me2-H);苯曱?；鵋is(Bz-H),千基His(Bzl-H)和Phe。N-末端處的N末端封端基團的乙?；推渌揎椏梢苑€(wěn)定OXM抵抗DP-IV的裂解，而C-末端的酰胺化可防止體內可能的通過羧肽酶的降解。具有N-末端+務飾的OXM衍生物包括OXM14和OXM16-22。正如實施例中所舉例說明的，等摩爾劑量的OXM2和OXM3在降低隨意飼喂的小鼠中的過夜體重增加方面是有效的，而類似劑量的OXM1和野生型或天然型(wt)Oxm在該;溪型中無效。OXM3在劑量依賴性降低過夜體重增加發(fā)面具有最高的體內功效，可能反映了OXM3與OXM2相比具有更高的針對GLP-1R的功效，其具有較大體積的PEG部分，該部分可能干擾受體結合。對于PEG化OXM衍生物，相對于wtOXM具有增加的體內功效，暗示了針對蛋白水解作用具有一定的穩(wěn)定性和/或腎清除率通過單獨的PEG化誘導，因為OXM2和OXM3二者針對GLP-1R的體外效力都顯著低于天然OXM。另外，可使用血液組分來穩(wěn)定肽。優(yōu)選的血液組分包括蛋白質，諸如免疫球蛋白，血清清蛋白，鐵蛋白，甾類結合蛋白，鐵傳遞蛋白，甲狀腺素結合蛋白，a-2-巨球蛋白，結合珠蛋白等。2.OXM4汙生物的合成2.1.肽的合成使用以下的一般程序合成一些OXM衍生物。使用PEG-聚苯乙烯樹脂，在間歇流或連續(xù)流條件下使用Fmoc化學進行固相肽合成(參見例如PenningtonandDunn,PeptideSynthesisProtocols(1994),vol.35)。肽從樹脂裂解，并使用三氟乙酸(TFA)和陽離子清除劑諸如苯酚三異丙基硅烷和水進行脫保護。肽使用冷的曱基叔丁基醚進行沉淀，并且沉淀的肽用冷的乙醚洗滌兩次，然后冷凍干燥。通過在C4柱上進行的反相HPLC,〃使用含0.1%TFA的水/乙腈作為典型的流動相，并且通過電噴射質i普學證實肽的身份。通過反相HPLC將肽純化到295%。2.2肽的PEG化首先合成肽，然后在半胱氨酸的硫醇側鏈進行PEG化。使用以下一般程序用于肽的PEG化。在硫醇化肽前體和馬來酰亞胺-mPEG之間進行PEG化反應以形成硫醚鍵。在pH7.3下進行反應，并且馬來酰亞胺-mPEG的量相對于石克醇化肽為0.5到10倍摩爾過量。然后使用反相HPLC或離子交換色譜法，然后通過空間排阻色譜法分離PEG化OXM肽。最后，使用分析性RP-HPLC和MALDItof質譜學表征PEG化肽。3.OXM基治療手段的含義OXM基治療潛在地有利影響肥胖癥和糖尿病二者。在人中已經(jīng)充分馬全證了在外周給藥OXM時的體重減輕功效和食物纟聶入的減少。本發(fā)明人的研究已經(jīng)表明外周給藥豬OXM足以減少小鼠中的短期食物攝入和過夜體重增加。盡管迄今為止還未充分研究OXM的腸降血糖素(抗高血糖)活性，但是第一次在小鼠腹膜內葡萄糖耐量試驗(IPGTT)中證明了OXM的葡萄糖降低活性可與GLP-1的相媲美。與GLP-l相似，OXM誘導來自靜態(tài)分離的鼠小島和灌注大鼠胰腺(pancreata)的穩(wěn)固的葡萄糖刺激的胰島素分泌(GSIS)(Jarrousse等，￡mfocrmo/ogy,115:102-105(1984)),暗示了與常規(guī)的胰島素促泌劑相比具有低的低血糖癥風險。在大鼠中，已經(jīng)報告了OXM對胃排空具有微不足道的作用(Dakin等，五m/ochw/ogy,145:2687-2695(2004))。在小鼠中，在用于葡萄糖降低的最大有效劑量下的OXM使胃排空降低~25%,這低于通過最大有效劑量的GLP-1受體激動劑exendm-4所導致的胃排空降低(47%降低)。OXM對人的胃排空的潛在的良性作用因此可在這種肽類激素與目前的GLP-1才莫仿物相比具有增強的耐受性方面起一定的作用。建議本發(fā)明的多肽可用于治療肥胖癥和/或糖尿病。其次的適應癥是代謝綜合癥，高血糖癥，空腹葡萄糖損傷，和其它前糖尿病狀態(tài)。本發(fā)明的多肽的可供選擇的適應癥包括GLP-1的任何的和所有的適應癥，諸如腸易激綜合征和其它的內臟吸收疾病，缺血，中風，和神經(jīng)病癥包括焦慮癥，認知損傷，和阿爾茨海默氏病。OXM的肽基性質妨礙使用天然激素的口服治療。相反，本文提供的OXM衍生物可作為包括本發(fā)明的多肽之一與適于給藥的可藥用載體結合的藥物組合物通過包括但不限于以下的途徑給藥經(jīng)口，鼻內，舌下，十二指腸內，皮下，頰，結腸內，直腸，陰道，粘膜，肺，透皮，皮內，非腸道，靜脈內，肌肉內和眼內，劑量范圍為0.001毫克/千克到10毫克/千克，更優(yōu)選1微克/千克到200毫克/千克，劑量給藥頻率為每天兩次到每周或更久一次。肽藥物組合物根據(jù)給藥方法可以多種單位劑型給藥。適當?shù)膯挝粍┬桶ǖ幌抻诜勰﹦?，片劑，丸劑，膠嚢，錠劑，栓劑，貼片，鼻噴霧劑，注射劑，可植入的持續(xù)釋放制劑，脂質復合物，等等。肽通常與可包含一種或多種生理學可接受的化合物的可藥用的載體或賦形劑聯(lián)合使用，所述生理學可接受的化合物可用于穩(wěn)定組合物或增加或降#^舌性劑的吸收。生理學可4妻受的化合物可以包^^例如碳水化物諸如葡萄糖、蔗糖、或葡聚糖，抗氧化劑，諸如抗壞血酸或谷胱甘肽，螯合劑，低分子量蛋白質，保護和吸收增強劑諸如脂質，減少活性劑的清除或水解的組合物，或賦形劑或其它穩(wěn)定劑和/或緩沖劑。其它生理學可接受的化合物包括潤濕劑，乳化劑，分散劑，或特別可用于防止微生物生長或起作用的防腐劑。各種防腐劑是公知的并且包括例如酚和抗壞血酸。本領域的技術人員將認識到，可藥用載體(包括生理學可接受的化合物)的選擇依賴于例如活性劑的給藥途徑和活性劑的特定的物理化學性質。肽可以天然形式給藥，或者，如果需要，可以鹽的形式給藥，只要該鹽是可藥用的?；钚詣┑柠}可使用合成有機化學領域的技術人員已知的標準程序制備。本發(fā)明的多肽，如實施例中詳述的，故制成乙酸鹽。本發(fā)明的OXM多肽可與其它的用在牽涉GLP1-R的疾病的治療或預防中的藥劑聯(lián)合使用。用于與本發(fā)明的多肽聯(lián)合使用的具體化合物包括辛伐他汀，美伐他汀，依澤替米貝，阿托伐他汀，西他列汀，二甲雙胍，西布曲明，奧利司他，Qnexa,4乇吡酯，納曲酮，安非他酮(bupriopion),芬特明，和氯沙坦，氯沙坦+氫氯噻嗪。用于與本發(fā)明的多肽聯(lián)合使用的具體CB1拮抗劑/反向激動劑包括在WO03/077847中描述的那些，包括A43-(4-氯苯基)-2(S)-苯基-l(S)-曱基丙基]-2-(4-三氟曱基-2-嘧啶基氧基)-2-曱基丙酰胺，7\43-(4-氯苯基)-2-(3-氰基苯基)-1-甲基丙基]-2-(5-三氟甲基-2-吡啶基氧基)-2-曱基丙酰胺，AA-[3-(4-氯苯基)-2-(5-氯-3-吡啶基)-l-甲基丙基]-2-(5-三氟曱基-2-吡啶基氧基)-2-曱基丙酰胺，及其可藥用鹽；以及在WO05/000809中公開的那些，其包括以下3-{1-[二(4-氯苯基)曱基]氮雜環(huán)丁烷-3-叉基}-3-(3,5-二氟苯基)-2,2-二曱基丙腈，1-{1-[1-(4-氯苯基)戊基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}-1-(3,5-二氟苯基)-2-甲基丙-2-醇，3-((3)-(4-氯苯基){3-[(18)-1-(3,5-二氟苯基)-2-羥基-2-曱基丙基]氮雜環(huán)丁烷-1-基}甲基)苯曱腈，3-((S)-(4-氯苯基){3-[(18)-1-(3,5-二氟苯基)-2-氟-2-甲基丙基]氮雜環(huán)丁烷-1-基}甲基)苯甲腈，3-((4-氯苯基){3-[1-(3,5-二氟苯基)-2,2-二甲基丙基]氮雜環(huán)丁烷-1-基}甲基)苯曱腈，3-((lS)-l-U-[(S)-(3-氰基苯基)(4-氰基苯基)甲基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}-2-氟-2-甲基丙基)-5-氟苯甲腈，3-[(8)-(4-氯苯基)(3-{(13)-2-氟小[3_氟_5_(411-1,2,4-三唑-4-基)苯基]-2-曱基丙基}氮雜環(huán)丁烷-1-基)曱基]苯甲腈，和5-((4-氯苯基)(3-[(lS)-l-(3,5-二氟苯基)-2-氟-2-曱基丙基]氮雜環(huán)丁烷-1-基}甲基)噻吩-3-曱腈，及其可藥用鹽；以及3-_2_曱基丙基}氮雜環(huán)丁烷-1-基)甲基]苯曱腈，3-[(5)-(4-氯苯基)(3-{(15)-2-氟-1-[3-氟-5-(1,3,4-。惡二唑-2-基)苯基]-2-曱基丙基}氮雜環(huán)丁烷-l-基)曱基]苯曱腈，3誦[(5)-(3-{(15)-1-[3-(5-氨基-1,3,4-。惡二唑-2-基)-5-氟苯基]-2-氟-2-甲基丙基}氮雜環(huán)丁烷-l-基)(4-氯苯基)甲基]苯曱腈，3-[(5)-(4-氰基苯基)(3-{(15>2-氟-1-[3-氟-5-(5-氧代-4,5-二氫-1,3,4-噁二唑-2-基)苯基]-2-曱基丙基}氮雜環(huán)丁烷-1-基)甲基]苯甲腈，3-[(5>(3-{(15>1-[3-(5-氨基-1,3,4-噁二唑-2-基)-5-氟苯基]-2-氟-2-甲基丙基}氮雜環(huán)丁烷-l-基)(4-氰基苯基)曱基]苯曱腈，3-[(。-(4-氰基苯基)(3-{(15>2-氟-1-[3-氟-5-(1,3,4-。惡二唑-2-基)苯基]-2-甲基丙基}氮雜環(huán)丁烷-l-基)曱基]苯曱腈，3-[(S)國(4-氯苯基)(3誦((1S)畫2國氟-1國[3-氟-5-(1,2,4-噁二唑-3-基)苯基]-2-曱基丙基}氮雜環(huán)丁烷-1-基)甲基]苯曱腈，3-[(15>1-(1-{(5)-(4-氰基苯基)[3-(1,2,4-噁二唑-3-基)苯基]-甲基}氮雜環(huán)丁烷_3_基)_2_氟_2_曱基丙基]_5-氟苯甲腈，5-(3-{1-[1-(二苯基曱基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]-2-氟-2-曱基丙基}-5-氟苯基)-1//-四唑，5-(3-{1-[1-(二苯基甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]-2-氟-2-甲基丙基}-5-氟苯基)-1-曱基-1//-四唑，5-(3-{1-[1-(二苯基甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]-2-氟-2-甲基丙基}-5-氟苯基)-2-曱基-2H-四唑，3-[(4-氯苯基)(3-{2-氟-1-[3-氟-5-(2-甲基-211-四唑國5-基)苯基]-2-曱基丙基}氮雜環(huán)丁烷-1-基)曱基]苯甲腈，3-[(4-氯苯基)(3-{2-氟-1-[3-氟-5-(1-甲基-1//-四唑-5-基)苯基]-2-曱基丙基}氮雜環(huán)丁烷-1-基)曱基]苯曱腈，3-[(4-氰基苯基)(3-{2-氟-1-[3-氟-5-(1-甲基-1//-四唑-5_基)苯基]-2-甲基丙基}氮雜環(huán)丁烷-1-基)甲基]苯曱腈，3-[(4-氰基苯基)(3-{2-氟_1_[3-氟-5-(2-曱基-2//-四唑-5-基)苯基]-2-曱基丙基}氮雜環(huán)丁烷-1-基)甲基]苯甲腈，5-(3-[(^H3-[(lS)-l-(3-溴-5-氟苯基)-2-氟-2-曱基丙基]氮雜環(huán)丁烷-1-基}(4-氯苯基)甲基]苯基}-1,3,4-。惡二唑-2(3//)-酮，3-[(15)-1-(1-{(5)-(4-氯苯基)[3-(5-氧代-4,5-二氳-1,3,4-噁二唑-2-基)苯基]甲基}氮雜環(huán)丁烷-3-基)-2-氟-2-甲基丙基]-5-氟苯曱腈，3-[(lS)-l-(l-((S)-(4-氰基苯基)[3-(5-氧代-4,5-二氫-l，3,4-。惡二唑-2-基)苯基]曱基}氮雜環(huán)丁烷-3-基)-2-氟-2-甲基丙基]-5_氟苯甲腈，3-[(lS)-l-(l-((S)-(4-氰基苯基)[3-(l,3,4-。惡二唑-2-基)苯基]曱基)氮雜環(huán)丁烷-3-基)-2-氟-2-曱基丙基]-5-氟苯甲腈，3-[(lS)-l-(l-{(5>(4-氯苯基)[3-(1,3,4-。惡二唑-2-基)苯基]曱基}氮雜環(huán)丁烷-3-基)-2-氟-2-甲基丙基]-5-氟苯曱腈，3-((1》-1-{1-[(5)-[3-(5-氨基-1,3,4-噁二唑-2-基)苯基](4-氯苯基)曱基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}-2-氟-2-甲基丙基)-5-氟苯甲腈，3-((15)-1-{1-[(5)-[3-(5-氨基-1,3,4-噁二唑-2-基)苯基](4-氰基苯基)甲基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}-2-氟-2-曱基丙基)-5-氟苯甲腈，3-[(15>1-(1-{(5>(4-氰基苯基)[3-(1,2,4-噁二唑-3-基)苯基]曱基}氮雜環(huán)丁烷-3-基)-2-氟-2-曱基丙基]-5-氟苯曱腈，3-[(lS)-l-(卜((S)-(4-氯苯基)[3-(l,2,4-噁二唑-3-基)苯基]甲基}氮雜環(huán)丁烷-3-基)-2-氟-2-甲基丙基]-5-氟苯曱腈，5-[3-((S)-(4-氯苯基){3-[(15)-1-(3>二氟苯基)-2-氟-2-曱基丙基]氮雜環(huán)丁烷-1-基}曱基)苯基]-1,3,4-噁二唑-2(3//>酮，5-[3-((5>(4-氯苯基){3-[(15>1-(3,5-二氟苯基)-2-氟-2-曱基丙基]氮雜環(huán)丁烷-1-基}曱基)苯基]-1,3,4-。惡二唑-2(3//)-酮，4-((S)-(3-[(15)-l-(3,5-二氟苯基)-2-氟-2-曱基丙基]氮雜環(huán)丁烷-l-基}[3-(5-氧代-4,5-二氫-1,3,4-。惡二唑-2-基)苯基]曱基}-苯甲腈，及其可藥用鹽。用于與本發(fā)明的多肽聯(lián)合使用的具體的NPY5拮抗劑包括3-氧代-^(5-苯基-2-吡溱基)-螺[異苯并呋喃-1(3!1),4，-哌啶]-1，-甲酰胺，3-氧代-N-(7-三氟甲基吡啶并[3,2-b]吡啶-2-基)螺-[異苯并呋喃-1(3H),4，-哌啶]-l，-曱酰胺，N-[5-(3-氟苯基)-2-嘧啶基]-3-氧代螺-[異苯并呋喃-l(3H),4，-哌啶H，-甲酰胺，反式-3，-氧代-N-(5-苯基-2-嘧啶基)螺[環(huán)己烷-1,1'(3，}1)-異苯并呋喃]-4-曱酰胺，反式-3，-氧代-N-[l-(3-喹啉基)-4-咪唑基]螺[環(huán)己烷-U，(3，H)-異苯并呋喃]-4-曱酰胺，反式-3-氧代-N-(5-苯基-2-吡嗪基)螺[4-氮雜異苯并呋喃-l(3H),r-環(huán)己烷]-4，-甲酰胺，反式-^[-[5-(3-氟苯基)-2-嘧啶基]-3-氧代螺[5-氮雜異苯并呋喃-1(3印,1'-環(huán)己烷]-4，-甲酰胺，反式-N-[5-(2-氟苯基)-2-嘧啶基]-3-氧代螺[5-氮雜異苯并呋喃-l(3H),r-環(huán)己烷]-4，-甲酰胺，反式-N-[l-(3,5-二氟苯基)-4-咪唑基]-3-氧代螺[7-氮雜異苯并呋喃-l(3H),l，-環(huán)己烷]-4，-曱酰胺，反式-3-氧代-1^(1-苯基-4-處唑基)螺[4-氮雜異苯并呋喃-1(311),1，-環(huán)己烷]-4，-曱酰胺，反式-N-[l-(2-氟苯基)—3-吡唑基]-3-氧代螺[6-氮雜異苯并呋喃-l(3H),r-環(huán)己烷]-4，-甲酰胺，反式-3-氧代-N-(l-苯基-3-吡唑基)螺[6-氮雜異苯并呋喃-l(:3H),r-環(huán)己烷]-4，-曱酰胺，反式-3-氧代-N-(2-苯基-l,2,3-三唑-4-基)螺[6-氮雜異苯并呋喃-l(3H),l，-環(huán)己烷]-4，-曱酰胺，及其可藥用鹽和酯。用于與本發(fā)明的多肽聯(lián)合使用的具體的ACC-l/2抑制劑包括1'-[(4,8-二曱氧基喹啉-2-基)羰基]-6-(1//-四唑-5-基)螺[苯并二氫吡喃-2,4'-哌啶]-4-酮，(5-{1'-[(4,8-二甲氧基喹啉-2-基)羰基]-4-氧代螺[苯并二氫吡喃-2,4'-哌啶]-6-基}-2//-四唑-2-基)曱基新戊酸酯，5-{1'-[(8-環(huán)丙基-4-甲氧基喹啉-2-基)羰基]-4-氧代螺[苯并二氫吡喃-2,4'-哌啶]-6-基}煙酸，1'-(8-甲氧基-4-嗎啉-4-基-2-萘甲?；?-6-(1H/-四唑-5-基)螺[苯并二氫吡喃-2，4'-哌啶]-4-酮，和1'-[(4-乙氧基-8-乙基喹啉-2-基)羰基]-6-(1//-四唑-5-基)螺[苯并二氫吡喃-2,4'-哌啶]-4-酮，及其可藥用鹽。用于與本發(fā)明的多肽聯(lián)合使用的具體的MCH1R拮抗劑化合物包括1-{4-[(1-乙基氮雜環(huán)丁烷-3-基)氧基]苯基}-4-[(4-氟芐基)氧基]吡啶-2(1H)-酮，4-[(4-氟千基)氧基]-1-{4-[(1-異丙基氮雜環(huán)丁烷-3-基)氧基]苯基)吡啶-2(lH)-酮，l-[4-(氮雜環(huán)丁烷-3-基氧基)苯基]-4-[(5-氯吡啶-2-基)甲氧基]吡啶-2(lH)-酮，4-[(5-氯吡啶-2-基)甲氧基]-1-{4-[(1-乙基氮雜環(huán)丁烷-3-基)氧基]苯基)吡啶-2(lH)-酮，4-[(5-氯吡啶-2-基)甲氧基]-l-(4-[(l-丙基氮雜環(huán)丁烷-3-基)氧基]苯基)吡啶-2(lH)-酮，和4-[(5-氯吡啶-2-基)甲氧基]-l-(4-([(2S)-l-乙基氮雜環(huán)丁烷-2-基]甲氧基)苯基)吡啶-2(lH)-酮，或其可藥用鹽。用于與本發(fā)明的多肽聯(lián)合使用的具體的DP-IV抑制劑選自7-[(3R)-3-氨基-4-(2,4,5-三氟苯基)丁酰基]-3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氪-1,2,4-三唑并[4,3-a]吡嗪。特別地，式I的化合物有利地與7-[(3R)-3-氨基_4-(2,4，5-三氟苯基)丁?；鵠-3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氫-1,2,4-三唑并[4,3-a]吡嗪及其可藥用鹽聯(lián)合使用。另外，腸降血糖素激素胰高血糖素樣肽l(GLP-l)的其它的肽類似物和模擬物還可與本發(fā)明的多肽聯(lián)合使用。本發(fā)明的其它特征和優(yōu)點從本文提供的包括不同實施例的另外的組分和操作法。實施例不限制本發(fā)明的保護范圍。基于本公開內容，熟練技術人員可以確定和使用可用于實施本發(fā)明的其它組分和操作法。實施例不限制本發(fā)明的保護范圍?；诒竟_內容，熟練技術人員可以確定和使用可用于實時本發(fā)明的其它組分和操作法。實施例實施例1肽胃泌酸調節(jié)素(OXM)類似物的合成肽OXM類似物(參見表l)通過使用Fmoc/tBu化學在采用40孔反應塊的肽多合成器APEX396(AdvancedChemtech)上進行固相合成。每個肽在單個孔中合成。對于肽酰胺，使用0.1g的樹脂F(xiàn)moc-LinkerAM-Champion,1%交聯(lián)(BiosearchTechnologies,Inc.)和用改性Rink連接基p-[(R,S)-a-[9H-芴-9-基-甲氧基甲酰胺基]-2,4-二甲氧基芐基]-苯氧乙酸衍生的PEG畫PS基樹月旨(Rink,H.,1987,7Wra/ze^o"28:3787-3789;Bernatowicz,M.S.等，1989,r"ra/^^ow30:4645-4667)。對于肽酸，使用0.1g的Champion樹脂，P/o交聯(lián)(BiosearchTechnologies,Inc.),其事先用羥基曱基苯氧基甲基操作進行衍生化。將全部氨基酸以0.5M的濃度溶解在含0.5MHOBt(羥基苯并三唑)的DMF溶液中。使用相對于無樹脂的氨基使用6倍過量的活化氨基酸進行?；磻_60分鐘。使用等摩爾量的朋丁11(2-(1^苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四曱基脲鏃六氟磷酸鹽)和2倍摩爾過量的DIEA(N，N-二異丙基乙基胺)將氨基酸活化。或者，通過使用Fmoc/t-Bu化學在Pioneer肽合成器(AppliedBiosystems)上固相合成肽。在這種情況下，在合成器上的肽組裝結束后，使用相對于無樹脂的氨基為4倍過量的活化氨基酸進行所有的?；磻_60分鐘。側鏈保護基是對于Asp,Glu,Ser，Thr和Tyr是叔丁基；對于Asn,Cys,Gln和His是三苯甲基；對于Lys,Trp是叔丁氧羰基；和對于Arg是2,2,4,6,7-五甲基二氫苯并呋喃-5-磺酰基。關于OXM2和OXM3肽，在肽組裝結束后通過與在DMF中的10倍過量的醋酐進行乙?；磻?。對于OXM14,通過與等摩爾量的DIPC(二異丙基碳二亞胺)和HOBt(N-羥基苯并三唑)以及相對于無樹脂的氨基為4倍過量的活化?；瘎-焦谷氨酸?；?。對于OXM16,通過與等摩爾量的PyBOP(苯并三唑-l-基-氧基-三-吡咯烷基-鱗六氟磷酸鹽)，HOBt和2倍摩爾過量的DIEA(N,N-二異丙基乙基胺)以及相對于無樹脂的氨基為4倍過量的活化?；瘎⑦溥?乳酸(Imi-H)酰化。對于OXM17，通過與等摩爾量的HBTU(2-(lH-苯并三唑-l-基)-l,l,3,3-四曱基脲镥六氟磷酸鹽)和2倍摩爾過量的D正A將N-曱基-His(Me-H)?；Ｊ褂孟鄬τ跓o樹脂的氨基為3倍過量的活化?；瘎┻M行?；磻_180分鐘。對于OXM18,通過與等摩爾量的HBTU和2倍摩爾過量的DIEA反應將脫氨基-His(ANH2-H)酰化。使用相對于無樹脂的氨基為3倍過量的活化酰化劑進行?；磻_180分鐘。對于OXM19，通過與等摩爾量的HBTU和2倍摩爾過量的DIEA反應將N,N-二甲基-His(Me2-H)?；?。使用相對于無樹脂的氨基為3倍過量的活化酰化劑進行?；磻^夜。對于OXM20,通過與等摩爾量的HBTU和2倍摩爾過量的DIEA反應將苯甲?；?His(Bz-H)?；?。使用相對于無樹脂的氨基為3倍過量的活化?；瘎┻M行?；磻_240分鐘。對于OXM21,通過與等摩爾量的HBTU和2倍摩爾過量的D正A反應將芐基-His(Bzl-H)?；?。使用相對于無樹脂的氨基為3倍過量的活化?；瘎┻M行?；磻^夜。在合成結束時，將干燥的肽-樹脂分別地用20毫升的裂解混合物88%TFA,5%苯酚，2%三異丙基硅烷和5。/o水(Sole,N.A.和G.Barany,1992，丄C/ze脫57:5399-5403)在室溫下處理1.5小時。將每種樹脂過濾，將溶液加入到冷的曱基叔丁基醚中以使肽沉淀。離心后，將肽小球用新鮮的冷的甲基叔丁基醚洗滌以除去有機清除劑。該過程重復兩次。將最終的小球干燥，再懸浮在含20%乙腈的H20中，并凍干。肽OXM54的合成通過將含石危醇的OXM肽前體(SEQIDNO:41)溶解在TrisHCl0.1MpH8,氯化胍6M中進行。加入10摩爾過量的^與乙酰胺。培養(yǎng)l小時后，通過HPLC純化肽溶液。肽OXM55的合成通過將含辟J享的OXM肽前體(SEQIDNO:64)溶解在TrisHCl0.1MpH8,氯化胍6M中進行。向該溶液中加入10摩爾過量的碘乙酰胺。培養(yǎng)l小時后，通過HPLC純化肽溶液。通過反相HPLC純化粗品肽，反相HPLC采用半制備性WatersRCMDelta-PakTMc—4柱(40x200mm,15pm)并使用(A)含0.1%TFA的水和(B)含0.1%TFA的乙腈作為洗脫液。4吏用具有以下梯度的洗脫液B:在5分鐘內為20%-20%,在20分鐘內為20%-35%,流速80毫升/分鐘。在Phenomenex,JupiterC4^i(150x4.6mm,5(im)上進4亍分4斤性HPLC,使用以下梯度的洗脫液B:20%-40%B(在20分鐘內)-80%(在3分鐘內)，流速1毫升/分鐘。純化的肽通過在MicromassLCZ平臺上的電噴射質i普進行表征。實施例2:肽胃泌酸調節(jié)素(OXM)類似物的PEG化在允許硫酯鍵形成的條件下進行PEG化反應。然后使用反相HPLC或離子交換色譜法和空間排阻色譜法(SEC)分離PEG化OXM肽。使用RP-HPLC、HPLC-SEC和MALDI-Tof質譜表征PEG化OXM類似物。從含硫醇的OXM肽前體(SEQIDNO:41)合成OXM33,34,35,36和54肽，從而生成通過石危醚4建與PEG共價連接的書f生物。將10mg的肽前體(2.2微摩爾)溶于0.2mL的HEPES0.1MpH7.3,氯化胍6M,2mMEDTA中。向該溶液中加入溶解在0.4mLHEPES0.1M,pH7.3中的22mg的MPEG國MAL-5000(NEKTAR2F2MOH01)(4.4農(nóng)i摩爾)(l:2摩爾/摩爾比的肽:PEG)。在培養(yǎng)1小時后，通過RP-HPLC純化PEG化肽，并通過MALDI-Tof進行表征。將10mg的肽前體(2.2微摩爾)溶于0.2mL的HEPES0.1MpH7.3,氯化胍6M,2mMEDTA中。向該溶液中加入溶解在0.5mLHEPES0.1M,pH7.3中的80mg的MPEG畫MAL-20K(NEKTAR2F2MOH01)(4.0農(nóng)i摩爾)(l:1.8摩爾/摩爾比的肽:PEG)。在培養(yǎng)l小時后，通過RP-HPLC純化PEG化肽，并通過MALDI-Tof進4于表征。的合4將10mg的肽前體(0.92微摩爾)溶于0.4mL的HEPES0.1MpH7.3,氯化胍6M,2mMEDTA中。向該溶液中加入溶解在0.8mLHEPES0.1M,pH7.3中的70mg的MPEG2-MAL-40K(NEKTAR2D3Y0T01)(1.7微摩爾)(1:1.8摩爾/摩爾比的肽:PEG)。在培養(yǎng)l小時后，通過RP-HPLC純化PEG^i肽，并通過MALDI-Tof進4于表征。通過將含硫醇的肽前體與10當量的碘乙酰胺在O.lM的TrisHClpH7.5,6M氯化胍中培養(yǎng)制備對照肽OXM54。在培養(yǎng)30分鐘后，通過RP-HPLC純化肽，并通過電噴射質i普進4亍表征。從含硫醇的OXM肽前體(SEQIDNO:64)合成OXM56,57,58,從而生成通過硫醚鍵與PEG共價連接的衍生物。^合4將5mg的肽前體(l.l微摩爾)溶于0.2mL的HEPES0.1MpH7.3中。向該溶液中加入溶解在0.4mLHEPES0.1M,pH7.3中的57mg的MPEG-MAL-5000(NEKTAR2F2MOH01)(11.4微摩爾)(1:10摩爾/摩爾比的肽:PEG)。在培養(yǎng)1小時后，用1。/。乙酸將PEG化肽溶液酸化，并通過在fractogelTSKCM-650S上的陽離子交換色譜法(IXC)采用在乙酸鈉50mMpH4.8中的線性梯度的NaCl進行純化。經(jīng)IXC純化的PEG化-肽進一步通過尺寸排阻色譜法(SEC)純化，并通過MALDI-Tof進行表征。將10mg的肽前體(2.2微摩爾)溶于0.2mL的DMSO中。向該溶液中加入溶解在0.6mL的HEPES0.1MpH7.3,0.3MTRIS(2-羧基-乙基)膦中的50mg的MPEG-MAL-20K(NEKTAR2F2M0P01)(2.5微摩爾)(1:1.13摩爾/摩爾比的肽:PEG)。在培養(yǎng)l小時后，通過RP-HPLC純化PEG化肽，并通過MALDI-Tof進4于表征。將10mg的肽前體(0.92微摩爾)溶于0.4mL的HEPES0.1MpH7.3,氯化胍6M,2mMEDTA中。向該溶液中加入溶解在0.8mLHEPES0.1M,pH7.3中的70mg的MPEG2國MAL-40K(NEKTAR2D3Y0T01)(1.7微摩爾)(1:1.8摩爾/摩爾比的肽:PEG)。在培養(yǎng)l小時后，通過RP-HPLC純化PEG化肽，并通過MALDI-Tof進4于表征。通過將含硫醇的肽前體與10當量的碘乙酰胺在O.lM的TnsHClpH7.5,6M氯化胍中培養(yǎng)制備對照肽OXM102,OXM112,和OXM116。在培養(yǎng)30分鐘后，通過RP-HPLC純化肽，并通過電噴射質譜進行表征。OW旭、OYM旭，(9ZM707、^合^將10mg的相應的肽前體(2.26樣i摩爾)溶于2mL的脲8M,HEPES0.1MpH7.3,2mMEDTA中。向該溶液中加入溶解在H20中的109mg的MPEG2-MAL-40K(NEKTAR2D3Y0T01)(2.71微摩爾)(1丄2摩爾/摩爾比的肽:PEG)。在培養(yǎng)l小時后，用1。/。乙酸將PEG化肽溶液酸化，并通過在TSKCM-650S上的陽離子交換色語法(IXC)采用在乙酸鈉50mMpH4.8中的線性梯度的NaCl進行純化。經(jīng)IXC純化的PEG化-肽進一步通過SEC純化，并通過MALDI-Tof進行表征。OW，^合乂將10mg的相應的肽前體(2.25樣吏摩爾)溶于2mL的脲8M，HEPES0.1MpH7.3,2mMEDTA中。向該溶液中加入溶解在2mL的H20中的108mg的MPEG2-MAL-40K(NEKTAR2D3Y0T01)(2.7微摩爾)(l:1.2摩爾/摩爾比的肽:PEG)。在培養(yǎng)l小時后，用1%乙酸將PEG化肽溶液酸化，并通過在TSKCM-650S上的陽離子交換色譜法(IXC)采用在乙酸鈉50mMpH4.8中的線性梯度的NaCl進行純化。經(jīng)IXC純化的PEG化-肽進一步通過SEC純化，并通過MALDI-Tof進行表征。^合4將10mg的相應的肽前體(2.19微摩爾)溶于2mL的脲8M,HEPES0.2MpH6.5,2mMEDTA中。向該溶液中加入溶解在H20中的105mg的MPEG2-MAL-40K(NEKTAR2D3Y0T01)(2.63微摩爾)(1丄2摩爾/摩爾比的肽:PEG)。在培養(yǎng)l小時后，用P/。乙酸將PEG化肽溶液酸化，并通過在TSKCM-650S上的陽離子交換色譜法(IXC)采用在乙酸鈉50mMpH4.8中的線性梯度的NaCl進行純化。經(jīng)IXC純化的PEG化-肽進一步通過SEC純化，并通過MALDI-Tof進行表征。將10mg的相應的肽前體(2.26微摩爾)溶于2mL的脲8M,HEPES0.25MpH6.5,2mMEDTA中。向該溶液中加入溶解在H20中的105mg的MPEG2-MAL-40K(NEKTAR2D3Y0T01)(2.71微摩爾)(1丄2摩爾/摩爾比的肽:PEG)。在培養(yǎng)l小時后，用0.2%乙酸pH2.8將PEG化肽溶液酸化，并通過在TSKSP-5PW上的陽離子交換色譜法(IXC)采用在甲酸0.2%中的線性梯度的NaCl進行純化。經(jīng)IXC純化的PEG化-肽進一步通過SEC純化，并通過MALDI-Tof進行表征。將10mg的相應的肽前體(2.26微摩爾)溶于2mL的脲8M,HEPES0.25MpH6.5,2mMEDTA中。向該溶液中加入溶解在H20中的109mg的MPEG2-MAL-40K(NEKTAR2D3Y0T01)(2.72微摩爾)(1丄2摩爾/摩爾比的肽:PEG)。在培養(yǎng)l小時后，用0.2。/。乙酸將PEG化肽溶液酸化，并通過在TSKSP-5PW上的陽離子交換色譜法(IXC)采用在曱酸0.2%中的線性梯度的NaCl進行純化。經(jīng)IXC純化的PEG化-肽進一步通過SEC純化，并通過MALDI-Tof進行表征。實施例3:肽序列的i殳計和合成在一系歹'J實-瞼中比較了不同的PEG大小(mPEG)5kDa,(mPEG)20kDa，(mPEG)240kDa和(mPEG)260kDa的生物活性，證明了在小鼠中賦予最大和持久活性的最佳的PEG大小通常是40kDa。肽OXM103(2位是Aib(a))浮皮設計用于研究肽胃泌酸調節(jié)素序列內的作為用于與(mPEG)240k綴合的位點的20位。OXM102是對照肽(CH2CONH2),其中側鏈硫醇(20位處的半胱氨酸)與嫌乙酰胺反應。肽OXM105(2位是Aib(a))被設計用于研究肽胃泌酸調節(jié)素序列內的作為用于與(mPEG)240kDa綴合的位點的21位。OXM104是對照肽(CH2CONH2),其中側鏈硫醇(21位處的半胱氨酸的)與碘乙酰胺反應。肽OXM107(2位是Aib(ot),27位是Met(O))被設計用于研究肽胃泌酸調節(jié)素序列內的作為用于與(mPEG)240kDa綴合的位點的24位。OXM106是對照肽(CH2CONH2),其中側鏈硫醇(24位處的半胱氨酸的)與石典乙酰胺反應。肽OXM109(2位是Aib(a))被設計用于研究肽胃泌酸調節(jié)素序列內的作為用于與(mPEG)240kDa綴合的位點的28位。OXM108是對照肽(CH2CONH2)，其中側鏈硫醇(28位處的半胱氨酸的)與碘乙酰胺反應。指定為OXM141的肽在3位具有從Gln到Asp的突變，其賦予了對GLPl-受體的特異性選擇性。肽OXM141,其在3位具有從Gln到Asp的突變，在27位具有Met(O),和在20位和38位具有兩個綴合位點，被設計用于研究獲得在C38與膽甾醇基團綴合和在C20位與PEG綴合的肽的能力。肽OXM142(Aib(a),27位是Met(O),和在20位和38位的兩個綴合位點)被設計用于研究獲得在C38與膽甾醇基團綴合和在C20位與PEG綴合的肽的能力。圖14以列表形式總結了對于GLP1R和GCG受體的體外活性數(shù)據(jù)(還顯示了GLP-1R和GLGR的特異性)。在C20位的(mPEG)240kDa綴合物在兩個受體上保持了活性，因此OXM103被稱為+/+類似物，盡管所有其它的(mPEG)240kDa綴合物在GCG受體處喪失功效。特別地，對于在38、24和28位的(mPEG)240kDa綴合物而言，針對GLP-1受體的選擇性比針對Gcg受體的選擇性高2-3個數(shù)量級。因此，類似物OXM99，107和109稱為+/0類似物。圖15顯示(mPEG)240kDa綴合物在DIO小鼠中對食物攝入和體重減輕的體內活性。隨意飼喂，D10(每只51g),雄性C57BL/6小鼠，在黑暗期開始前39分鐘，使用々某介物(水)或Oxm類似物99、103、105、107、和109進行i.p.劑量給藥。在第1天的~2小時和18小時(過夜)后測量食物攝入，和在第2天的26小時和42小時(過夜)后測量食物攝入。*P<0.05相對于媒介物組，n=5-6/組)。肽OXM110(2位是D-Ser(s))被設計用于研究肽胃泌酸調節(jié)素序列內的作為用于與脂質諸如椋櫚酰基綴合的位點的38位。棕櫚?；货；皆陔奈该谒嵴{節(jié)素序列的C-末端處添加的賴氨酸的S-氨基上。肽OXM113(1位是脫氨基-His(ANHrH),2位是Aib(oc),27位是Met(O),綴合位點38)被設計用于研究用1位的脫氨基-His置換野生型(wt)His用于避免DPPIV蛋白水解作用的潛力。OXM113是(mPEG)240kDa綴合物，OXM114是膽甾基綴合物，和OXM112是對照肽(CH2CONH2),其中側《連發(fā)u醇(38位的半胱氨酸的)與碘乙酰胺反應。(OXM111是》危醇化肽前體)。肽OXM117和OXM118(2位是Aib(ot)，3位是從Gln到Asp的突變，27位是Met(O)，綴合位點38)祐二沒計用于研究在3位用Asp置換野生型Gln的潛力。如上所述，這種突變賦予針對GLP-1R的特異性選擇性。OXM117是(mPEG)240kDa綴合物，和OXM118是膽甾基綴合物。(OXM116是硫醇化的肽前體)。肽OXM121(2位是Aib(a)，27位是Met(0),綴合位點ll)被設計用于研究肽胃泌酸調節(jié)素序列內的作為用于綴合的位點的11位。OXM121是(mPEG)240kDa綴合物，OXM119是硫醇化的肽前體，和OXM120是對照肽(CH2CONH2),其中側鏈硫醇(ll位的半胱氨酸的)與碘乙酰胺反應。肽OXM124(2位是Aib(a),27位是Met(0),綴合位點12)被設計用于研究肽胃泌酸調節(jié)素序列內的作為用于綴合的^f立點的12位。OXM124是(mPEG)240kDa綴合物，OXM122是硫醇化的肽前體，和OXM123是對照肽(CH2CONH2),其中側鏈硫醇(12位的半胱氨酸的)與碘乙酰胺反應。肽OXM125(2位是Aib(oc),3位是從Gln到Asp的突變，27位是Met(O),綴合位點20)被設計用于研究肽胃泌酸調節(jié)素序列內的作為用于(mPEG)240kDa綴合的位點的20位以及賦予針對GLP-1R的選才奪性的在3位的從Gln到Asp的置換。肽OXM127(2位是Aib(a)，27位是Met(O),綴合位點22)被設計用于研究肽胃泌酸調節(jié)素序列內的作為用于綴合膽甾醇的位點的22位。(OXM126是石克醇化的肽前體)。肽OXM129(1位是脫氨基-His(ANHrH)，2位是Aib(a)，3位是從Gln到Asp的突變，27位是Met(O)，綴合位點20)被設計用于研究以下組合的潛力在1位用脫氨基-His置換wtHis用于避免DPPIV的蛋白水解作用，在3位從Gln到Asp的置換賦予針對GLP-lR的選擇性，和在20位的綴合。肽OXM134(2位是Aib(a),27位是Met(O),綴合位點20)是(mPEG)240kDa綴合物，其類似于強力的+/+OXM103類似物，區(qū)別僅僅在于將蛋氨酸置換成蛋氨酸亞砜。該肽在20位綴合，因此顯示對于GLPlR/GcgR選擇性的+/+模式。實施例4:C-末端截短類似物或GcgK類似物C-末端截短類似物設計了一系列的肽OXMC-末端截短類似物。對GLP1受體(GLP1R)和Gcg受體(GcgR)二者的體外活性分析證明，OXM序列可以在C-末端被截短以僅僅具有一種相對于wt高血糖素的額外賴氨酸殘基，得到肽例如OXM93,其對GLP1R和GcgR二者都具有才及強的效力。OXM93的功效比wtOXM的功效高至少一個(并且可能是兩個)數(shù)量級。因為僅僅存在一個相對于Gcg的額外Lys殘基，這種新類型被稱為GcgK類似物。圖16以列表形式說明了在GLP1和GCG受體處起作用的C-末端截短類似物的體外功效數(shù)據(jù)，作為選擇性GcgK類似物的C-末端截短類似物肽OXM130和OXM131被設計用于證實體外分析并且引入其它的已知賦予穩(wěn)定性和適當性質的突變。OXM130和OXM131是長度與OXM93相同的C-末端截短類似物。OXM130在2位具有Aib(a),而OXM131在2位具有Aib(a),和在3位具有從Gln到Asp的突變，以貝武予對GLP1R的選擇性。基于這些截短序列設計了以下的PEG化類似物肽OXM136(2位是Aib(oc),27位是Met(O),綴合位點20)是(mPEG)^OkDa綴合物。從在先的研究(參見上面)已知選擇在SO位的PEG綴合允許對受體GLP1R和GcgR二者都具有活性，因此OXM136可#皮定義為原型Gcg+Z+類似物。(OXM135是硫醇化的肽前體)。設計肽OXM138(2位是Aib(ot),3位是從Gln到Asp的突變，27位是Met(O),綴合位點20)用于研究以下組合的潛力在3位從Gln到Asp的置換賦予針對GLP-1R的選擇性；在20位的綴合和在3位從wtGln到Asp的突變。因此OXM137將被定義為原型GcgK+/0類似物(OXM137是硫醇化的肽前體)。,=44,000+/-5000DaOXM145圖17提供了對于選擇的PEG化0XM類似物在GLP1和GCG受體的體外功效數(shù)據(jù)。實施例5:具有可供選擇的PEG部分的肽制備肽OXM145(2位是Aib(oc),3位是從Gin到Asp的突變，27位是Met(O),綴合位點38,使用得自JenKemTherapeutics的Y形PEG使用得自JenKemTherapeutics的(mPEG)240kDa(Y-形PEG馬來酰亞胺，MW40K,項目編號Y-MAL-40K)獲得的綴合物，并且其結構顯示如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage37</formula>肽OXM146的特征在于2位是Aib(a)，3位是從Gin到Asp的突變，27位是Met(O),綴合位點38,使用得自NOFcorporation的SUNBRIGHTGL2-400MA馬來酰亞胺。這是使用得自NOFCorporation的(mPEG)240kDa(SUNBRIGHTGL2-400MA馬來酰亞胺)獲得的綴合物，并且其結構顯示如下,=48,000+/-5000DaOXM146設計肽OXM151(2位是Aib(oc),3位是從Gin到Asp的哭變，17位是從Arg到Glu的突變，18位是從Arg到Ala的突變，27位是Met(O),綴合位點38)用于賦予該肽序列以增加的體內穩(wěn)定性。進行詳細的研究，其中OXM139在37。C的含10%的小鼠或人血漿的PBS中培養(yǎng)。通過在樣品板上直接混合lpL的試-驗溶液和l(iL的基質(a-氰基)完成樣品制備。結晶后收集Tof光譜在30,60,120和720分鐘的時間點進行分析，并且與相同時間點的對照試驗溶液相比較。在肽序列內，已經(jīng)確認Argl7和Argl8之間的鍵是一級水解位點。Argl8和Alal9之間的鍵也被確認為二級水解位點，因此決定在17位和18位引入突變。具體地"i兌，將17位Arg突變成Glu,將18位Arg突變成Ala。肽OXM153是OXM151的N-乙基馬來酰亞胺類似物。肽OXM154是使用得自NOF公司的(mPEG)240kDa(SUNBRIGHTGL2-400MA馬來酰亞胺)獲得的綴合物。肽OXM152(2位是Aib(a),3位是從Gln到Asp的突變，17位的Ttds作為間隔基，18位的Cys用于綴合)跨越肽胃泌酸調節(jié)素序列的殘基1到16,并且是可與載體蛋白綴合以增加針對1-16序列的抗體特異性的肽。肽OXM155(2位是Aib(oc)，3位是從Gln到Asp的突變，27位是Met(O)，38位是Ttds,39-43位是5個谷氨酸殘基，44位的Cys用于綴合)是另一種可與載體蛋白綴合以增加抗體的肽。在C-末端加成谷氨酸是對pl調控的需要，其將能夠與載體蛋白綴合，如"AMethodtoMakeaPeptide-CarrierConjugatewithaHighImmunogenicity,，，2003年12月18日提交的美國臨時申請60/530867中所述的，其全文引入本文作為參考。實施例6:新型的截短類似物或GcgK類似物肽OXM143(Aib(a),27位是Met(O),綴合位點20)是OXM135的N-乙基馬來酰亞胺類似物。肽OXM144(Aib(a)，3位是從Gin到Asp的突變，27位是Met(O))是OXM137的N-乙基馬來酰亞胺類似物。肽OXM147(2位是Aib(a),綴合位點20)被設計用于在C20具有綴合位點的GcgK類似物系列內的27位具有天然蛋氨酸殘基。這一設計的原理是具有天然蛋氨酸的肽類似物對高血糖素受體具有更大活性。肽OXM148(2位是Aib(oc),綴合位點20)是OXM147的N-乙基馬來酰亞胺類似物。設計肽OXM149(Aib(a)，3位是從Gin到Asp的突變，27位是Met(O),20位是綴合位點，和D-賴氨酸在30位置換)用于提供防止肽的C-末端的體內酶促降解。肽OXM150是OXM149的N-乙基馬來酰亞胺類々乂物。在GcgK系列類似物OXM144上進行了相似的穩(wěn)定性研究以確定由含10%的小鼠或者人血漿的PBS培養(yǎng)時水解的一級位點。在這一情況下，Argl7和Argl8之間的鍵被確認為一級水解位點。Argl8和Alal9之間的鍵也被確認為二級水解位點。為此，決定還在GcgK類似物系列的17位和18位引入突變。將54mg的相應的肽前體(11.8微摩爾)溶于2mL的脲8M,HEPES0.2MpH6.5,2mMEDTA中。向該溶液中加入溶解在H20中的569mg(14.2孩i摩爾)的Y形PEG馬來酰亞胺，MW40K(JenKemTechnology,項目編號Y-MAL-40K)(1:1.2摩爾/摩爾比的肽:PEG)。在培養(yǎng)l小時后，用0.2%甲酸pH2.8將PEG化肽溶液酸化，并通過在TSKSP-5PW上的陽離子交換色譜法(IXC)采用在曱酸0.2%中的線性梯度的NaCl進行純化。經(jīng)IXC純化的PEG化-肽進一步通過SEC純化，并通過MALDI-Tof進行表征。將55mg的相應的肽前體(12微摩爾)溶于2mL的脲8M，HEPES0.2MpH6.5,2mMEDTA中。向該溶液中加入溶解在H20中的531mg(13.2微摩爾)的SUNBRIGHTGL2-400MA馬來酰亞胺(NOFCorporation)(1:1.1摩爾/摩爾比的肽:PEG)。在培養(yǎng)l小時后，用0.2%甲酸pH2.8將PEG化肽溶液酸化，并通過在TSKSP-5PW上的陽離子交換色譜法(IXC)采用在甲酸0.2%中的線性梯度的NaCl進行純化。經(jīng)IXC純化的PEG化-肽進一步通過SEC純化，并通過MALDI-Tof進行表征。實施例7:使用環(huán)腺苷酸(cAMP〗均相時間分辨熒光(HTRF)試驗測量GLP-1受體(GLP-lRVf言號，并評價對DP-IV的抗性將用生物活性類似于天然受體的生物活性的人GLP-1R的突變形式穩(wěn)定轉染的中國倉鼠卵巢(CHO)細胞系保持在全Iscove氏改性Dulbecco氏培養(yǎng)基(IMDM)中，該培養(yǎng)基含胎牛血清(FBS),青霉素-鏈霉素，次黃噤呤-胸苷，和G418。根據(jù)生產(chǎn)商的指導說明(CisBio)使用用于GLP-l受體激活的均相時間分辨熒光(HTRF)試驗測量在由本發(fā)明的肽培養(yǎng)時的-故轉染細胞中的cAMP積聚，不同之處在于細胞由配體、XL-665和抗cAMP穴狀化合物在37。C下培養(yǎng)。在96半孔板形式中進行該試-驗，并且使用PerkinElmerEnvision板讀取器對板進行讀數(shù)。對于本發(fā)明的多肽和多肽片段/衍生物，在cAMPHTRF試驗中GLP-1受體的"激活"是最大活性的誘導，最大活性是由具有至少0.04%到最多約1000%的相對功效的天然人OXM序列誘導的最大活性的至少約60%和最多約200%。"相對功效"是天然人OXM的EC5Q除以本發(fā)明多肽的EC50,乘以IOO。"EC5o，，是達到最大活性的50%時的多肽濃度。為了測量對抗DP-IV裂解的抗性，將5)iM的肽溶液與10nM的重組可溶性人DP-IV在lOOjil的試驗緩沖液(10mMHEPES,pH7.5,0.05%BSA)中在37。C下預培養(yǎng)2小時。隨后使用CisBioHTRFcAMP試驗測量hGLP-lR的激活，并與在無DP-IV存在下在37。C預培養(yǎng)2小時的對照肽相比較。對于本發(fā)明的多肽及其片段/衍生物，在本實驗中的"對抗DP-IV的抗性"被定義為是0.1到最多35的功效比，其中"功效比"是與DP-IV預培養(yǎng)的肽的ECso除以未與DP-IV預培養(yǎng)的本發(fā)明的相同多肽的EC50，2)。實施例8:使用環(huán)腺苷酸快速板試驗測量高血糖素受體(GcgR)信號將表達克隆的人高血糖素受體(CHO-hGCGR)的CHO細胞(Cascieri等，J.Biol.Chem.(1999)，274,8694國8697)保持在IMDM中，IMDM補充有10%FBS,1mML-谷氨酰胺，青霉素-鏈霉素(100U/ml)和G418(500jig/ml)。借助于快速板試驗(SMP-004B,PerkinElmerLifeSciences),根據(jù)生產(chǎn)商的指導說明測定當與本發(fā)明的肽培養(yǎng)時在被轉染細胞中的cAMP水平。通過添加等量的含有細胞溶解劑和1251-標記cAMP示蹤物的檢測緩沖液使細胞刺激停止。使用液體閃爍計數(shù)器測定與板結合的125I-cAMP,并用于定量表示存在于每個樣品中的cAMP的量。對于本發(fā)明的多肽和多肽片段/衍生物，在cAM快速板試驗中Gcg受體的"激活"是最大活性的誘導，最大活性是由具有至少0.04%到最多約10000%的相對功效的天然高血糖素肽-秀導的最大活性的至少約60%和最多約200%。"相對功效"是天然高血糖素的EC5G(EC5o=70pM)除以本發(fā)明多肽的EC50，乘以100。"EC5o"是達到最大活性的50%時的多肽濃度。在本試驗中天然豬OXM激活高血糖素受體的EC5o為2.4nM。實施例9:在瘦小鼠中在腹膜內葡萄糖耐量試驗aPGTD中對血糖振動的影響按重量將雄性C57BL/6N小鼠分配在處理組中，并且在開始研究之前約5小時禁食。從尾切口血液通過糖度計測定基線(t^30分鐘)血糖濃度。然后用媒介物(鹽水)或本發(fā)明的多肽(0.01-10mg/kg)對動物進行腹膜內(i.p.)注射。在處理(t-O分鐘)后30分鐘測量血糖濃度，然后用葡萄糖(2g/kg,10mL/kg)對小鼠進行i.p.攻擊。用i某介物處理的一組小鼠用常規(guī)生理鹽水進行攻擊，作為陰性對照。在葡萄糖攻擊后的20、40、60和120分鐘從尾血測定血糖水平。使用從t=0分鐘到t=120分鐘之間的血糖振動曲線積分求得每個處理的曲線下面積(AUC)。根據(jù)下式，從被歸一化到用水攻擊的對照的AUC數(shù)據(jù)計算每個處理組的葡萄糖振動的抑制％:抑制％xlOO,其中MJCdexAUC膚用J某介物處理的葡萄糖攻擊動物的平均AUC,用肽處理的葡萄糖攻擊動物的平均AUC,和AUCw=用媒介物處理的鹽水攻擊動物的平均AUC。在IPGTT中本發(fā)明多肽的腸降血糖素活性表示為葡萄糖振動抑制%的劑量依賴性增加，在10毫克/千克劑量下達到至少30%(圖2)。實施例10:在瘦小鼠中對食物攝入和體重的敏銳作用將約3個月大的隨意飼喂的雄性C57BL/6N小鼠稱重，并且通過在照明循環(huán)的黑暗期開始之前的-30分鐘i.p.注射給予+某介物(水)或溶解在媒介物中的OXM2或OXM3。在照明循環(huán)的黑暗期開始之前~5分鐘在鋼絲籠頂端的食物加料斗內提供預先稱重的等份的嚙齒動物食物(Teklad7012)并且在照明循環(huán)的黑暗期開始之后的2和18小時(過夜)稱重。通過從相應的初始預稱重等份食物中減去在給定時間點保留在食物加料斗內的食物數(shù)量計算每只動物的食物攝入的絕對改變值。通過從在給定時間點的相應動物體重減去在劑量給用前動物的體重計算每只動物體重的絕對改變值。所有值報導為平均值士SEM,通過雙尾未配對斯的在任何時間點食物攝入的減少和/或過夜體重增加的減少被認為具有統(tǒng)計學意義，并且表示了相應的OXM多肽(OXM2或OXM3)在該模型中的功效(圖3)。實施例11:在小鼠中葡萄糖刺激的胰島素分泌的增強在得自野生型C57BL/6小鼠的小島中，和在MIN6c4細胞中(該MIN6c4細胞是具有穩(wěn)固的GSIS活性的胰島瘤細胞系(MinamiK等，2000AmJPhysiolEndocrinolMetab.279:E773-E781)),在增加濃度的天然OXM肽的存在下，通過測量在16mmol/1葡萄糖下的葡萄糖刺激的胰島素分泌(GSIS)評價在16mmol/1葡萄糖下天然OXM在介導胰島素分泌中的體外功效。郎格罕氏胰島通過膠原酶消解和間歇式菲科爾梯度分離從普通C57BL/6J小鼠的胰腺(JacksonLaboratory,Maine)中分離，該方法是對Lacy和Kostianovsky的最初方法(Lacy等，Diabetes16:35-39,1967)的改進法。小島在RPMI1640培養(yǎng)基(11mM葡萄糖)中在GSIS試-驗之前培養(yǎng)過夜。為了測量GSIS,首先將小島在含2mM葡萄糖的Krebs-Rmger碳酸氳鹽(KRB)緩沖液中(在陪替氏培養(yǎng)皿中)進行預培養(yǎng)。KRB培養(yǎng)基含143.5mMNa+,5.8mMK+，2.5mMCa2+，1.2mMMg2+，124.1mMCI-,1.2mMP043—,1.2mMS042+,25mMC032.,2mg/ml牛血清白蛋白(pH7.4)。然后將小島轉移到96孔板內(每個孔一個小島)并在37。C在200pl的含2或16mM葡萄糖的KRB緩沖液中與其它待測試劑如GLP-1和OXM—起培養(yǎng)60分鐘(Zhou等，J.Biol.Chem.278:51316-51323,2003)。使用商業(yè)試劑盒(ALPCODiagnostics,Windham,NH)通過ELISA測量在等份培養(yǎng)緩沖液中的胰島素。以類似方式測量在96孔板內接種的細胞中的MIN6c4細胞的胰島素分泌。如圖4所示，天然OXM在小鼠小島和MIN6c4細l包中都顯著增強GSIS。OXM對GSIS的EC50分別是在鼠小島中為約2.9nM(圖4A)和155pM(圖4B)。在該實驗中使用天然GLP-1作為陽性對照。兩個肽的最大GSIS作用在小島和MIN6細胞二者中相似。如實施例7和8中所述的，OXM激活在CHO細胞中非均質表達的GLP-1R和GCG-R二者，兩種受體都已知在胰腺(3-細胞中起作用。為了認識這兩種G-蛋白偶聯(lián)受體在OXM的腸降血糖素作用中的潛在作用，檢測了OXM、GLP-l和GCG在得自GLP-lR-A小鼠(ScrocchiLA等，1996NatMed2:1254-1258)和年齡匹配的WTC57BL/6小鼠的小島中對GSIS的作用。與前述結果一致，所有這三種肽(各自為10nM)在得自WT鼠小島的16mmo1/1葡萄糖下的GSIS增強方面的有效性相等(圖5A)。GSIS和由GCG導致的GSIS增強在GLP-lR-Z-小島中未受損，而GLP-1和OXM二者在后者中完全不能增強GSIS。在OXM的腸降血糖素作用中GLP-1R的牽涉還通過這一活性被廣泛使用的GLP-1R的肽拮抗劑exendin-9所拮抗被證明。OXM和GLP-1的GSIS的增強在WT小島中被0.5juM的exendin-9完全阻斷(圖5B)。在OXM的腸降血糖素作用中GCG-R的潛在參與通過在得自WT和GCG-R誦A小鼠(Gelling,XQ等，2003;Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.100:1438-1443)的小島中比較在16mmol/1葡萄糖下的肽介導的GSIS進行檢測。如先前所述的，所有這三種肽(GLP-l,OXM和GCG,各自10nM)在WT小島中以相等功效增強GSIS(圖6A)。然而，與大小匹配的WT小島相比較，在GCG-R-A小島中，在2和16mM葡萄糖下的胰島素分泌降低2倍(圖6A)。小島胰島素含量在GCG-R-A小島中相對于WT也降低〉3倍(圖6B)。GCG(10nM)在GCG-R-A小島中在16mM葡萄糖下未增強GSIS,而GLP-1和OXM(10nM)在該試-險中顯著增加GSIS。當數(shù)據(jù)用分數(shù)GSIS表示時(相對于總的小島胰島素含量的胰島素釋放%)，在GCG-R-A小島中，相對于WT，由OXM介導的GSIS的倍數(shù)增加僅減少32%(1.7倍對2.5倍)(圖6C),而由GLP-1導致的GSIS的倍數(shù)刺激保持相同(2.5倍)。相比之下，在GCG-RV-小島中，GCG不增加相對于基線(DMSO)的GSIS分數(shù)。這些數(shù)據(jù)顯示了GCG-R可能在OXM對GSIS的作用中發(fā)揮有限的作用。為了確定是否OXM的葡萄糖降低作用(如上所述并且如圖2所示)次于OXM的體內增加GSIS作用，在WT和GLP-1R-A小鼠中在IPGTT期間分析了OXM對血漿葡萄糖和胰島素水平的作用。禁食過夜的小鼠在葡萄糖攻擊之前預先劑量給予0.3mpk的(毫克肽/千克體重)的天然OXM(i.p.)。在該研究中使用GLP-1模擬物exendin-4(以0.02mpki.p.劑量給予)(Thorens,B等，1993;Diabetes.42:1678-1682)作為比較。如圖7A所示，exendin-4和OXM二者在WT小鼠中在IPGTT期間都顯著降低葡萄糖水平，exendin-4在抑制葡萄糖振動方面效力更強。相對于々某介物組，在用0.3mpkOXM處理的組中，葡萄糖振動的曲線下面積(AUC)減少約30%[13025±524對19928士811mg/dl/60mm],p<0.001,『IO(媒介物)或r^5(OXM)],而在用exendin-4治療的組中，葡萄糖AUC降低>60%(AUC=6601±179mg/dl/60min)。相比之下，相同劑量的OXM和exendm-4在GLP-lR-Z-小鼠中在IPGTT期間不影響葡萄糖振動(圖7B)。在IPGTT研究中在葡萄糖攻擊之前(在0分鐘)和之后(在10分鐘)通過測量血漿胰島素水平評價i.p.OXM和exendin-4對體內GSIS的作用。在WT小鼠中OXM增加基線(O分鐘)的血漿胰島素水平4倍，并且顯著增強胰島素對i.p.葡萄糖攻擊的應答(圖7C)。在WT小鼠中觀察到exendin-4具有相似作用。相比之下，對GLP-1R-A小鼠給予OXM或exendin-4不影響基線胰島素水平，也不改善胰島素對i.p.葡萄糖攻擊的應答(圖7D)。藥物組合物的實施例作為本發(fā)明新型多肽的口服組合物的具體實施方案，將5mg的下式所示的多肽HaDGTFTSDYSKYLDSRRAQDTFVQWLmNTKRNRNNIACi0-CONH2,與足夠細碎的乳糖進行配制，以提供580到590毫克的總量，用來添充0號硬膠嚢。作為本發(fā)明新型多肽的口服組合物的另一個具體實施方案，將2.5mg的下式所示的多肽HaDGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLmNTKKNTRNNIACio-CONHi與足夠細碎的乳糖進行配制，以提供580到590毫克的總量，用來添充0號硬膠嚢。其它實施方案處在權利要求的范圍內。盡管已經(jīng)表述和描述了若干實施方案，但是可進行多種改變而不脫離本發(fā)明的精神和范圍。權利要求1.多肽，其包括HxX1X2GTFTSDYX3X4YLDX5X6X6AX7X8FVX7WLX9X10X11KRNRNNX12X13X14，其中Hx選自His，咪唑-乳酸(ImiH)；脫氨基-His(ΔNH2-H)，乙?；鵋is，焦谷氨?；鵋is，N-甲基-His(Me-H)，N，N-二甲基-His(Me2-H)；苯甲?；鵋is(Bz-H)，芐基His(Bzl-H)，和Phe；X1選自Ser，Gly，Ala，Arg；Asn，Asp，Glu，Gln，His，Ile，Lys，Met，Phe，Pro，Thr，Trp，Tyr，Val，D-Ala，D-Ser，和α-氨基異丁酸；X2是Gln，Asp，Glu，Pro，Leu或L-正亮氨酸；X3是Ser，Ala，Cys，Cys(mPEG)，或Cys(膽甾基)；X4是Lys，Cys，Cys(mPEG)，或Cys(膽甾基)；X5是Ser或Ala；X6是Arg，Cys，Cys(mPEG)，或Cys(膽甾基)；X6是Arg，Cys，Cys(mPEG)，或Cys(膽甾基)；X7是Gln，Cys，Cys(mPEG)，或Cys(膽甾基)；X8是Asp，Cys，Cys(mPEG)，或Cys(膽甾基)；X9是Met，Met(O)，Val，正亮氨酸，丙氨酸，α-氨基異丁酸或O-甲基-高絲氨酸；X10是Asn，Cys，Cys(mPEG)，或Cys(膽甾基)；X11是Thr，Cys，Cys(mPEG)，或Cys(膽甾基)；X12是Ile，Cys，Cys(mPEG)，或Cys(膽甾基)；X13是Ala，Cys，Cys(mPEG)，或Cys(膽甾基)；和X14是羧酸(COOH)，甲酰胺，仲酰胺，Ala，K(棕櫚?；?，Cys，Cys(mPEG)，Cys(膽甾基)，或mPEG或膽甾醇通過化學鍵與其連接的任何連接基，或其可藥用鹽。2.權利要求l的多肽，其中X3，X4,X6-X8和X,X!4中的一個或多個是Cys(mPEG)或Cys(膽甾基)。3.權利要求1的多肽，其中Cys(mPEG)是d，C2,C3或Q;,其中C尸Cys(mPEG)5kDa，C2=Cys(mPEG)20kDa,C3=Cys(mPEG)240kDa,C6=Cys(mPEG)260kDa，各自對應于通過側鏈硫醇與具有大約所示MW的線型曱氧基PEG(mPEG)或支化mPEG2進行PEG化的半胱氨酸殘基。4.權利要求l的多肽，其組成為HxSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTKKNRNNIA,其中Hx選自His,咪唑-乳酸(ImiH);脫氨基-His(ANH2-H)，乙酰基His,焦谷氨?；鵋is,N-曱基-His(Me-H),N,N-二甲基-His(MerH);苯曱?；鵋is(Bz-H),節(jié)基His(Bzl畫H),和Phe。5.權利要求l的多肽，其包括HXQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTKRNRNNIA,其中X!選自Ser,Gly,Ala,Arg;Asn,Asp,Glu,Gin,His,lie,Lys,Met,Phe,Pro,Thr,Trp,Tyr,Val,D-Ala，D-Ser,和a-氨基異丁酸。6.權利要求l的多肽，其包括HSX2GTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTKKNKNNIA其中X2選自Gin,Asp,Glu,Pro,Leu,和L-正亮氨酸。7.權利要求1的多肽，其包括HSQGTFTSDYX3X4YLDSX6X6AX7X8FVX7WLMXI0XKRNRNNX12X13XI4,其中X3是Ser，Ala,Cys(mPEG),或Cys(膽甾基);X4是Lys，Cys(mPEG),或Cys(膽甾基);Xs是Arg,Cys(mPEG),或Cys(膽甾基);X7是Gln,Cys(mPEG),或Cys(月旦甾基)；Xs是Asp,Cys(mPEG),或Cys(月旦甾基)；Xio是Asn,Cys(mPEG)，或Cys(月旦甾基)；Xn是Thr,Cys(mPEG),或Cys(膽甾基);Xu是Ile,Cys(mPEG),或Cys(月旦甾基)；X!3是Ala,Cys(mPEG)，或Cys(膽甾基);和Xi4是酰胺，羧酸酯，仲酰胺，Ala,K(棕櫚?；?，Cys(mPEG),Cys(膽甾基)，或mPEG或膽固醇通過化學鍵與其連接的任何連接基，和其中X3,X4,X6-X8和X10-X14中的一個或兩個是Cys(mPEG)或Cys(膽甾基)。8.多肽，其包括HaX,5GTFTSDYSKYLl>S2;ZAXl6DFVC2WI>X17NTX，s，其中Xu是D或Q;Z是任何氨基酸；X16是C8，(Cys(N-乙基馬來酰亞胺基)，Q或C;X17是m或M;X18是酰胺化k或K,或其可藥用鹽。9.多肽，其選自以下HaQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLANTKRNRNNIAC3-CONH2;HaDGTFTSDYSKYLDS-TtdsEC-CONH2HaQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLVNTKRNRNNIAC3-CQNH2;HaQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLmNTKRNKNNIAC3-CONH2;HaDGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLmNTKRNRNNIA-Ttds-EEEEEC-COOH;HaQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLXNTKKNKNNIAC3-CONH2;HaDGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLmNTKRNRNNIAC3;和HaDGTFTSDYSKYDSZZAQDFVQWLmNTKRNRNNIAX19其中C3=Cys[(mPEG)240kDa]，對應于通過側鏈石危醇與具有所示MW的支化mPEG[(mPEG)2]進行PEG化的酰胺化半胱氨酸殘基；a是a-氨基異丁酸(aib);和m=蛋氨酸亞砜[Met(O)];X19是C或Cs(Cys(N-乙基馬來酰亞胺基)；及其可藥用鹽。10.多肽，其包括選自SEQIDNO.1-159中任何之一的氨基酸序列及其可藥用鹽。11.治療有需要的受試者中的代謝疾病的方法，包括對該受試者給藥權利要求1的多肽的步驟。12.藥物組合物，其包括權利要求1的多肽和藥學上適當?shù)妮d體。13.降低葡萄糖水平的藥劑，包括權利要求l的多肽。14.降低葡萄糖水平的方法，所述方法包括給藥權利要求1的多肽的步驟。全文摘要本發(fā)明公開了經(jīng)修飾的肽胃泌酸調節(jié)素衍生物。這種衍生物可用于治療代謝疾病如糖尿病和肥胖癥。文檔編號C07K14/575GK101389648SQ200780006185公開日2009年3月18日申請日期2007年2月16日優(yōu)先權日2006年2月22日發(fā)明者A·佩西,D·J·馬什,E·比安奇,G·J·埃爾曼,P·因加萊恩拉,R·S·羅伊,周云平,穆迎軍申請人:默克公司;P.安杰萊蒂分子生物學研究所