專利名稱：：胰島淀粉樣多肽衍生物的制作方法胰島淀粉樣多肽衍生物發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及新型胰島淀粉樣多肽(amylin)衍生物；涉及包含這些衍生物的藥物組合物；并且涉及這些衍生物在治療與肥胖癥、糖尿病和其他代謝紊亂相關(guān)的疾病中的應(yīng)用。發(fā)明背景為數(shù)眾多且日益增加的人患有糖尿病和肥胖癥。糖尿病是一種代謝紊亂，其中利用葡萄糖的能力部分喪失或完全喪失。所有人中約有5%患有糖尿病，而且此紊亂接近流行性的比例。自二十世紀(jì)20年代引入胰島素以來，人們一直在為改進(jìn)糖尿病的治療而堅(jiān)持不懈。糖尿病和肥胖癥兩種病癥是相關(guān)的，/人某種意義來說在肥胖癥患者之中往往患有糖尿病，反之亦然。糖尿病一方面與肥胖癥之間、另一方面與心血管疾病之間也存在非常密切的聯(lián)系。這導(dǎo)致有這些病癥的患者生命周期更短。為人們所熟知并且有資料記錄的是糖尿病和肥胖癥的有效治療可致使并發(fā)癥(例如影響如視覺和腎功能的糖尿病晚期并發(fā)癥)更少。許多治療方法將耙標(biāo)定在過量的血糖上，而其他方法則主要地集中在減輕體重上。用于降低血糖的最有效的抗糖尿病藥是胰島素及其類似物。人們早已知曉當(dāng)用傳統(tǒng)的胰島素來治療糖尿病時，往往會伴隨體重的增加。人們不得不皮下注射胰島素多達(dá)每天若干次。2型糖尿病一般在早期通過飲食和鍛煉來治療。隨著病情的發(fā)展，加入各種口服的抗胰島素藥。在此階段也可使用例如GLP-1類似物的注射劑。一般來說，這些藥劑在具有能夠釋放胰島素和胰島淀粉樣多肽的功能性卩細(xì)胞的患者中最有效。在95%的已發(fā)展的2型糖尿病中，患者的胰島淀粉樣多肽在胰腺中沉淀并可以構(gòu)成最終卩細(xì)胞衰竭的原因之一(L.Yan,PNAS,2006,103(7),2046-2051)。最終，患者再也不能產(chǎn)生胰島淀粉樣多肽和胰島素。然后這些已經(jīng)發(fā)展的2型糖尿病患者就如1型糖尿病患者一樣要用胰島素來治療，而不管實(shí)際上(3細(xì)胞產(chǎn)生胰島素和胰島淀粉樣多肽兩種激素的事實(shí)。僅在最近，代替胰島淀粉樣多肽以及胰島素已經(jīng)成為可能。人胰島淀粉樣多肽是37個氨基酸的長肽，它所具有的物化性質(zhì)使其難以作為藥物使用。特別是它在體外和/或離體(ex-vivo)情況下趨于形成原纖維并由于沉淀而失效。一種稱為醋酸普蘭林肽制劑(Symlin)的含有人胰島淀粉樣多肽類似物(普蘭林肽)的藥品目前在市場上出售，其中37個氨基酸中的3個被脯氨酸取代。這顯著改善了形成原纖維的趨向性。然而，連普蘭林肽都難以在中性pH溶液中保存，因此它以酸性溶液即醋酸普蘭林肽制劑提供。與糖尿病和肥胖癥有關(guān)的胰島淀粉樣多肽的作用是食物攝取減少，導(dǎo)致體重減輕；減慢胃空排；緩和餐后葡萄糖譜以及減少糖尿病患者的過量月夷高血糖素釋力文(A.Young,Amylin:PhysiologyandPharmacology,AcademicPress(2005))。一般而言，胰島淀粉樣多肽的作用通過識別CNS受體介導(dǎo)，而非直接作用于靶器官。醋酸普蘭林肽制劑被批準(zhǔn)作為胰島素的輔助藥物。臨床試驗(yàn)已經(jīng)表明與單獨(dú)使用胰島素治療相比，使HbAlc改善大約0.3-0.6,餐后血糖譜更平滑和更淺以及減輕體重。最近醋酸普蘭林肽制劑作為單獨(dú)注射劑每天3次施用于各別的注射部位。倘若患者也使用每天3次的胰島素注射劑，那么這樣加起來總共多至每天6次注射。醋酸普蘭林肽制劑療法因副作用惡心而受到限制。惡心是劑量相關(guān)性的，但有隨時間減少的趨勢。醋酸普蘭林肽制劑的藥代動力學(xué)分布圖(profile)導(dǎo)致全天內(nèi)血漿水平有相當(dāng)大的變化。皮下注射醋酸普蘭林肽制劑后，只需約2Q分鐘的時間就達(dá)到Cmax(最高濃度)，而血漿t'/2為大約20-50分鐘(Colburn,W.A.J.Clin.Pharmacol.36,13-24(1996)。最終，這導(dǎo)致需要每天注射3次或以上的醋酸普蘭林肽制劑來保持藥理學(xué)的血漿水平而基本上無副作用。即使是每天3次注射，醋酸普蘭林肽制劑仍然不能很好地模仿胰島淀粉樣多肽的自然釋放分布圖。與注射醋酸普蘭林肽制劑分布圖的l-P/2的持續(xù)時間相比，胰島淀粉樣多肽以持續(xù)接近3-6小時的餐后峰值(mealrelatedpeak)釋放。胰島淀粉樣多肽同樣具有醋酸普蘭林肽制劑無法模擬的實(shí)質(zhì)的基石出水平(A.Young，Amylin:PhysiologyandPharmacology,AcademicPress(2005))。1型糖尿病患者基本上無胰島淀粉樣多肽的自然釋放，而2型患者具有比健康個體更低的水平。提供具有天然人胰島淀粉樣多肽活性的衍生物，以及與天然人胰島淀粉樣多肽相比具有延長的PK分布圖、表現(xiàn)出增強(qiáng)的可溶性和/或穩(wěn)定性的衍生物將有所幫助。發(fā)明簡述本發(fā)明在一個方面涉及一種化合物，其為SEQIDNo1的人胰島淀粉樣多肽或其類似物的衍生物，其中a)第2-37位中的氨基酸殘基已被賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代，其中所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，或者b)第1位的賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，或者c)賴氨酸殘基已被添加到第38位，其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接任選通過接頭來連接；其中所述氨基酸編號與SEQIDNo.1中出示的氨基酸編號一致。本發(fā)明在一個方面涉及一種化合物，其為具有SEQIDNo.1的人胰島淀粉樣多肽或其類似物的衍生物，其中a)第2-37位中的氨基酸殘基已被賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代，其中所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，或者b)第1位的賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接；其中所述氨基酸編號與SEQIDNo.1中的氨基酸編號一致。本發(fā)明也提供了一種用于增加人胰島淀粉樣多肽或其類似物在患者中的作用時間的方法，其特征為a)通過用賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代并通過使所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，修飾第2-37位中的氨基酸殘基，或者b)使第1位的賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，或者，c)在第38位添加賴氨酸殘基，其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接；其中所述氨基酸編號與SEQIDNo.1中的氨基酸編號一致。本發(fā)明也提供了包含本發(fā)明的衍生物的藥物組合物以及本發(fā)明的衍生物在制備用于治療疾病的藥物中的應(yīng)用。發(fā)明詳述本文所用的術(shù)語"藥學(xué)上可接受的"指的是適合正常的藥學(xué)應(yīng)用，即不引起例如患者中的有害事件等嚴(yán)重副作用。本文所用的術(shù)語"賦形劑"指的是正常地加入藥物組合物中的化合物，例如緩沖劑、張度劑、防腐劑等。本文所使用的術(shù)語"有效量"指的是與無任何治療相比對于治療患者足夠有效的劑量。本文所使用的術(shù)語"藥物組合物"指的是包含活性衍生物與藥物賦形劑(例如緩沖劑、防腐劑以及任選的張度調(diào)節(jié)劑和/或穩(wěn)定劑)的制品。因此，在本領(lǐng)域中藥物組合物也被稱為藥物制劑。本文所^^用的術(shù)語"疾病的治療"或"治療疾病"指的是處理和護(hù)理已出現(xiàn)疾病、病癥或紊亂的患者。治療的目的是抗擊疾病、病癥或紊亂。治療包括施用活性化合物以消除或控制疾病、病癥或紊亂，以及纟爰解與疾病、病癥或紊亂相關(guān)的癥狀或并發(fā)癥。本發(fā)明在一個方面涉及一種化合物，其為SEQIDNo1的人胰島淀粉樣多肽或其類似物的衍生物，其中a)第2-37位中的氨基酸殘基已被賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代，其中所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，或者b)第1位的賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，或者，c)賴氨酸殘基已被添加到第38位，其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接任選通過接頭來連接；其中所述氨基酸編號與SEQIDNo.1中的氨基酸編號一致。本發(fā)明在一個方面涉及一種化合物，其為SEQIDNo1的人胰島淀粉樣多肽或其類似物的衍生物，其中a)第2-37位中的氨基酸殘基已被賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代，其中所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，或者，b)第1位的賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接；其中所述氨基酸編號與SEQIDNo.1中的氨基酸編號一致。本發(fā)明在另一方面涉及一種化合物，其為SEQIDNo1的人胰島淀粉樣多肽或其類似物的衍生物，其中第2-37位中的氨基酸殘基已被賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代，其中所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接；其中所述氨基酸編號與SEQIDNo.1中的氨基酸編號一致。本發(fā)明在另一方面涉及一種化合物，其為SEQIDNo1的人胰島淀粉樣多肽的衍生物，其中a)人胰島淀粉樣多肽中的第2-37位中的氨基酸殘基已被賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代，其中所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，或者b)人胰島淀粉樣多肽的第1位的賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接；其中所述氨基酸編號與SEQIDNo.1中的氨基酸編號一致。本發(fā)明在另一方面涉及一種化合物，其為SEQIDNo1的人胰島淀粉樣多肽的衍生物，其中人胰島淀粉樣多肽中的第2-37位中的氨基酸殘基已被賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代，其中所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接；其中所述氨基酸編號與SEQIDNo.1中的氨基酸編號一致。本文所使用的術(shù)語"人胰島淀粉樣多肽，，指的是具有如SEQIDNo1中所描述的序列的肽人胰島淀粉樣多肽。此術(shù)語包括〃f旦不限于稱為胰島淀粉樣多肽的37個氨基酸的人肽類激素，其與胰島素一起從胰腺的(3細(xì)胞中共同分泌。人胰島淀粉樣多肽具有以下氨基酸序列Lys-Cys-Asn-Thr-Ala-Thr隱Cys-Ala-Thr-Gln-Arg-Leu-Ala-Asn-Phe-Leu-Val-His-Ser-Ser-Asn-Asn-Phe-Gly-Ala-Ile-Leu-Ser-Ser-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Asn-Thr-Tyr(SEQIDN0:1)。因此，結(jié)構(gòu)式是如下所示的Lys-Cys-Asn-Thr-Ala畫Thr-Cys-Ala-Thr-Gln-Arg-Leu-Ala-Asn-Phe-Leu-Val-His-Ser-Ser-Asn-Asn-Phe-Gly-Ala-Ile-Leu-Ser-Ser-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Asn-Thr-Tyr-NH2(SEQIDNO:1),,其帶有在兩個Cys殘基之間的二硫鍵以及C末端氨基。/s、h-k4J^/I^-Nt-n-^Y"ATQRLANFLVHSSNNFGAILSSTNVGSNT-Y-^、z本文中術(shù)語"人胰島淀粉樣多肽的類似物"用于指明一種肽，其中SEQIDNo1的人胰島淀粉樣多肽中的一個或更多個M酸殘基已獨(dú)立地被其他M酸殘基所取代，和/或其中人胰島淀粉樣多肽中的一個或更多個氨基酸殘基已經(jīng)缺失，和/或其中一個或更多個氨基酸殘基已被添加到人胰島淀粉樣多肽中。本發(fā)明的一方面，所述氨基酸殘基的添加或缺失可以發(fā)生在肽的N末端和/或肽的C末端。人胰島淀粉樣多肽類似物在一方面優(yōu)選具有30-45個天然存在的或非天然存在的氨基酸，優(yōu)選35-40個天然存在的或非天然存在的氨基酸。本文中所使用的術(shù)語"衍生物，，指的是一種肽，其中此肽中的一個或更多個氨基酸殘基已經(jīng)例如通過烷基化、酰化、形成酯、形成酰胺或通過馬來酰亞胺偶聯(lián)而被修飾。術(shù)語"人胰島淀粉樣多肽或其類似物的衍生物"或"胰島淀粉樣多肽衍生物，，在本文中用于指人胰島淀粉樣多肽或其類似物的衍生物。在本發(fā)明的又一方面，人胰島淀粉樣多肽類似物與人胰島淀粉樣多肽具有足夠的同源性，致使其與人胰島淀粉樣多肽相比表現(xiàn)出至少70%的體內(nèi)活性。本發(fā)明的化合物可以能夠與胰島淀粉樣多肽受體、或其他受體、或胰島淀粉樣多肽自身可與之相互作用以激發(fā)生物應(yīng)答(例如減少食物攝取)的受體結(jié)合，或者可以能夠與上述受體直接或間接地相互作用。本發(fā)明的化合物可以以優(yōu)于20nM、10nM或5nM的親和力、更優(yōu)選以優(yōu)于2nM、1nM、0.5nM、0.2nM或0.10nM的親和力，與胰島淀粉樣多肽結(jié)合。本發(fā)明的一個實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物可以保持至少約25%、優(yōu)選約30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、98%或99%的胰島淀粉樣多肽的生物活性百分比。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物表現(xiàn)出提高的生物活性。在又一實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物表現(xiàn)出至少約110%、125%、130%、140%、150%、200%或更高的胰島淀粉樣多肽的生物活性。在一個實(shí)施方案中，術(shù)語"活性，，指的是降低食欲和/或增加飽腹感的能力。在本發(fā)明的一個方面，活性按照例如在標(biāo)題"測定法"下面的藥理學(xué)測定I和II中所描述的通過降j氐食^:的能力來測量。在本發(fā)明的一個實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物可以表現(xiàn)出比施用溶媒或載體高超過5%、優(yōu)選比溶媒或載體高超過15%、更優(yōu)選超過25%，甚至更優(yōu)選超過35%或40%，最優(yōu)選高超過50%的減少累計(jì)食物攝取的能力。在另一個實(shí)施方案中，術(shù)語"活性"指的是在動物模型中延遲胃排空的能力。在另一實(shí)施方案中，術(shù)語"活性"指的是在動物模型中抑制高血糖素釋;^文的能力。術(shù)語"作用時間，，在本文中所指的是藥理學(xué)效果例如食物攝取減少可以祐^企測的時間間隔。本發(fā)明的一個實(shí)施方案中，與人胰島淀粉樣多肽相比，胰島淀粉樣多肽衍生物在體內(nèi)和/或離體形成原纖維的可能性較小。形成原纖維的傾向可以例如通過下文中在術(shù)語"物理穩(wěn)定性，，的定義下面所描述的辟u磺素T試驗(yàn)來評估。在本發(fā)明的一個實(shí)施方案中，根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員所知的標(biāo)準(zhǔn)方法例如ELISA進(jìn)行測量，胰島淀粉樣多肽衍生物與普蘭林肽相比具有延長的藥代動力學(xué)分布圖。在本發(fā)明的另一個實(shí)施方案中，胰島淀粉樣多肽衍生物具有至少1小時的血漿t1/2。在本發(fā)明的另一個實(shí)施方案中，血漿M為至少1.5小時。在本發(fā)明的另一個實(shí)施方案中，胰島淀粉樣多肽衍生物具有至少2小時的血漿ty2。在本發(fā)明的另一個實(shí)施方案中，胰島淀粉樣多肽衍生物具有至少4小時的血漿t1/2。在本發(fā)明的另一個實(shí)施方案中，胰島淀粉樣多肽衍生物具有至少6小時的血漿t1/2。在本發(fā)明的另一個實(shí)施方案中，胰島淀粉樣多肽衍生物具有至少8小時的血漿t1/2。在本發(fā)明的另一個實(shí)施方案中，胰島淀粉樣多肽衍生物具有至少12小時的血漿t1/2。在本發(fā)明的另一個實(shí)施方案中，胰島淀粉樣多肽衍生物具有至少16小時的血漿t1/2。在本發(fā)明的另一個實(shí)施方案中，胰島淀粉樣多肽衍生物具有至少24小時的血漿t1/2。在本發(fā)明的另一個實(shí)施方案中，胰島淀粉樣多肽衍生物具有至少48小時的血漿t1/2。在本發(fā)明的另一個實(shí)施方案中，胰島淀粉樣多肽衍生物具有至少96小時的血漿t1/2。本發(fā)明的再一方面，人胰島淀粉樣多肽類似物具有修飾的人胰島淀粉樣多肽tt酸序列，致使l、2、3、4、5或6或7或8個氨基酸不同于人胰島淀粉樣多肽的相應(yīng)位置上的氨基酸。在本發(fā)明的再一方面，類似物相對于人胰島淀粉樣多肽包含少于8個修飾(置換、缺失、添加)。在本發(fā)明的再一方面，類似物相對于人胰島淀粉樣多肽包含少于7個^f'務(wù)飾(置換、缺失、添加)。在本發(fā)明的再一方面，類似物相對于人胰島淀粉樣多肽包含少于6個修飾(置換、缺失、添加)。在本發(fā)明的再一方面，類似物相對于人胰島淀粉樣多肽包含少于5個修飾(置換、缺失、添加)。在本發(fā)明的再一方面，類似物相對于人胰島淀粉樣多肽包含少于4個修飾(置換、缺失、添加)。在本發(fā)明的再一方面，類似物相對于人胰島淀粉樣多肽包含少于3個修飾(置換、缺失、添加)。在本發(fā)明的再一方面，類似物相對于人胰島淀粉樣多肽包含少于2個修飾(置換、缺失、添加)。在本發(fā)明的再一方面，類似物相對于人胰島淀粉樣多肽包含僅1個修飾(置換、缺失、添加)。本發(fā)明的一個方面，所述修飾是置換。本發(fā)明的一個方面，所述修飾是缺失。本發(fā)明的一個方面，所述修飾是添加。本發(fā)明的一個方面，以賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代第2、3、4、5或6位的氨基酸殘基，而所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。本發(fā)明的一個方面，以賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代第23、24、25、26、27或28位的氨基酸殘基，而所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。本發(fā)明的一個方面，以賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代第32、33、34、35、36或37位的氨基酸殘基，而所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。本發(fā)明的又一方面，以脯氨酸殘基取代第25、28和29位中的1個、2個或全部氨基酸殘基。本發(fā)明的又一方面，以脯氨酸殘基取代第25位的氨基酸殘基。本發(fā)明的又一方面，以脯氨酸殘基取代第28位的氨基酸殘基。本發(fā)明的又一方面，以脯氨酸殘基取代第29位的氨基酸殘基。本發(fā)明的又一方面，以精氨酸殘基取代第18位的氨基酸殘基。本發(fā)明的又一方面，以亮氨酸殘基取代第23位的氨基酸殘基。本發(fā)明的又一方面，以纈氨酸殘基取代第26位的氨基酸殘基。本發(fā)明在另一方面涉及一種化合物，其為具有SEQIDNo.l的人胰島淀粉樣多肽或其類似物的衍生物，其中第2-37位中的氨基酸殘基已被賴氨酸殘基取代，其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接；其中所述氨基酸編號與SEQIDNo1中的氨基酸編號一致。本發(fā)明在另一方面涉及一種化合物，其為具有SEQIDNo.1的人胰島淀粉樣多肽或其類似物的衍生物，其中第1位的賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接；其中所述氨基酸編號與SEQIDNo1中的氨基酸編號一致。本發(fā)明在另一方面涉及一種化合物，其為具有SEQIDNo.l的人胰島淀粉樣多肽或其類似物的衍生物，其中賴氨酸殘基已被添加到第38位，其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接任選通過接頭來連接；其中所述氨基酸編號與SEQIDNo1中的氨基酸編號一致。本發(fā)明在另一方面涉及SEQIDNo1的人胰島淀粉樣多肽的衍生物。本發(fā)明在另一方面涉及人胰島淀粉樣多肽類似物的衍生物。本發(fā)明在另一方面涉及衍生物，其中第2、3、4、5或6位的M酸殘基被賴氨酸殘基取代，并且其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。本發(fā)明在另一方面涉及衍生物，其中第23、24、25、26、27或28位的氨基酸殘基被賴氨酸殘基取代，并且其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。本發(fā)明在另一方面涉及;^汙生物，其中第32、33、34、35、36或37位的氨基酸殘基被賴氨酸殘基取代，并且其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。本發(fā)明在另一方面涉及衍生物，其中第1位的氨基酸殘基被賴氨酸殘基取代，并且其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。本發(fā)明在另一方面涉及衍生物，其中所述白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物經(jīng)由賴氨酸殘基的e-M連接，任選通過接頭來連接。本發(fā)明在另一方面涉及衍生物，其中所述白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物經(jīng)由賴氨酸殘基的a-M連接，任選通過接頭來連接。本發(fā)明在另一方面涉及衍生物，其中第2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36或37位中任一位置的氨基酸殘基被賴氨酸殘基取代，并且其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。本發(fā)明在另一方面涉及衍生物，其中第1、10、11、14、15、16、17、18、21、22、25、28、29、31、35或38位中任一位置的氨基酸殘基被賴氨酸殘基取代，并且其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。本發(fā)明在另一方面涉及衍生物，其中第1、11、17、21、22、25、28、29或31位中任一位置的氨基酸殘基被賴氨酸殘基取代，并且其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。本發(fā)明在另一方面涉及衍生物，其中第1、11、17、21、22、25、28、29或31位的氨基酸殘基被賴氨酸殘基取代，并且其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基連接，任選通過接頭來連接。本發(fā)明在另一方面涉及衍生物，其中第1、11、17、21、22或31位中任一位置的氨基酸殘基被賴氨酸殘基取代，并且其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。本發(fā)明在另一方面涉及衍生物，其中第21位的氨基酸殘基被賴氨酸殘基取代，并且其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。本發(fā)明在另一方面涉及衍生物，其中第22位的氨基酸殘基被賴氨酸殘基取代，并且其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。本發(fā)明在另一方面涉及衍生物，其中第17位的氨基酸殘基被賴氨酸殘基取代，并且其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。本發(fā)明在另一方面涉及衍生物，其中第31位的氨基酸殘基被賴氨酸殘基取代，并且其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。本發(fā)明在另一方面涉及衍生物，其中第11位的氨基酸殘基被賴氨酸殘基取代，并且其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。本發(fā)明在另一方面涉及衍生物，其中第28位的氨基酸殘基被賴氨酸殘基取代，并且其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。本發(fā)明在另一方面涉及衍生物，其中第25位的氨基酸殘基被賴氨酸殘基取代，并且其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。本發(fā)明在另一方面涉及衍生物，其中第29位的氨基酸殘基被賴氨酸殘基取代，并且其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。本發(fā)明在另一方面涉及衍生物，其中所述賴氨酸殘基通過接頭與白蛋白結(jié)合殘基連接。在本發(fā)明的另一方面，衍生物與人胰島淀粉樣多肽相比具有1-6個氨基酸置換。在本發(fā)明的另一方面，衍生物與人胰島淀粉樣多肽相比具有l(wèi)-4個氨基酸置換。在本發(fā)明的又一方面，第23-29位的-FGAILSS-(SEQIDNo.2)被改變成-FGPILPP-(SEQIDNo.3)。在本發(fā)明的又一方面，第23-29位的-FGAILSS-(SEQIDNo.2)被改變成-FGEILSS-(SEQIDNo.4)。在本發(fā)明的又一方面，第23-29位的-FGAILSS-(SEQIDNo.2)被改變成-FGDILSS-(SEQIDNo.5)。本文所用的術(shù)語"連接"指的是通過共價(jià)鍵的化學(xué)連接。例如賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基通過化學(xué)鍵連接。此化學(xué)鍵作為實(shí)例可以通過用白蛋白結(jié)合殘基(例如長鏈脂肪酸)的活性酯進(jìn)行?；瘉韺嚢彼岬膕氨基進(jìn)行衍生化而獲得。烷基化、形成酯、形成酰胺或馬來酰亞胺偶聯(lián)。本發(fā)明的一方面，本文所使用的術(shù)語"白蛋白結(jié)合殘基"指的是與人血清白蛋白非共價(jià)結(jié)合的殘基。與治療性多肽連接的白蛋白結(jié)合殘基對人血清白蛋白的親和力(結(jié)合常數(shù))通常低于10|^M，并優(yōu)選低于1|LiM。一系列白蛋白結(jié)合殘基已知是在含4-40個碳原子的線性和分支的親脂部分、具有環(huán)戊烷并菲骨架的化合物、具有10-30個tt酸殘基的肽等之中。白蛋白結(jié)合親和力可以通過本領(lǐng)域已知的若干方法來測量。在一個方法中，待測量的化合物用例如125I或3H來進(jìn)4亍放射性標(biāo)記并與固定化的白蛋白一起溫育(Kurtzhals等，Biochem丄，312，725-731(1995))。計(jì)算出相對于標(biāo)準(zhǔn)品的化合物的結(jié)合情況。在另一個方法中，對相關(guān)化合物進(jìn)行放射性標(biāo)記，讓待測化合物的系列稀釋液與所述已標(biāo)記的化合物竟?fàn)幗Y(jié)合固定在例如SPA珠上的白蛋白。竟?fàn)幍腅C50值是對化合物的親和力的度量。在第三個方法中，于不同的白蛋白濃度下測量化合物的受體親和力或效能，化合物隨血清濃度變化的相對親和力或效能的變化反映了該化合物對白蛋白的親和力。本文所用的術(shù)語"d-6烷基，，指的是飽和、支鏈、直鏈或環(huán)狀的具有1至6個碳原子的烴基。代表性的實(shí)例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、異戊基、新戊基、叔戊基、正己基、異己基、環(huán)己烷等。本文所用的術(shù)語"接頭(linker)"指的是用來分隔肽與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物的間隔物(在本說明書中，間隔物和接頭兩個術(shù)語可以交換使用)。本文所用的術(shù)語"親水性接頭，，指的是以一個化學(xué)部分將肽與白蛋白結(jié)合殘基分隔的間隔物，所述化學(xué)部分包含至少4個重原子，其中這些重原子中的30-50。/。是N或者O。本發(fā)明的一個方面，接頭包含具有l(wèi)-7個亞曱基、優(yōu)選2個亞曱基的不分支的鏈烷a,co-二羧酸基，此接頭在肽的氨基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物的氨基之間形成橋。本發(fā)明的另一方面，接頭包含一個或更多個亞烷基二醇單元，例如1-5個亞烷基二醇單元。又一方面，亞烷基二醇是乙二醇、丙二醇或丁二醇，但也可以是高級亞烷基二醇。本發(fā)明另一方面，接頭是選自以下的親水性接頭-(CH^DKCH^EUCHOp-Qq-，其中1、m和n獨(dú)立地是l-20,而p是0-10,Q是-Z-(CH2),D[(CH2)nG]m(CH2)p-，q是0-5的整數(shù)，D、E和G各自獨(dú)立地選自-O-、-NR3-、-N(COR4)-、-PR5(0)4。-P(OR6)(0)-,其中R3、R4、R5和R6獨(dú)立地代表氫或C"烷基，Z選自-C(O)NH-、-C(0)NHCHr、-OC(O)NH-、-C(0)NHCH2CH2-、-C(0)CH2-、-C(0)CH=CH-，、-(CH2)s-,、-C(O)-,、-C(O)O-或-NHC(O)陽,其中s是0或1。本發(fā)明的另一方面，接頭是如上文所定義的親水性接頭，其中1是1或2，n和m獨(dú)立地是l-10,而p是0-10。本發(fā)明的另一方面，接頭是如上文所定義的親水性接頭，其中D是-O-。本發(fā)明的另一方面，接頭是如上文所定義的親水性接頭，其中E是-0-。本發(fā)明的又一方面，親水性接頭是-CH20[(CH2)20]m(CH2)pQq-，其中m是l-10，p是l-3，而Q是-Z-CH20[(CH2)20]m(CH2)p-，其中Z如上文所定義。本發(fā)明的另一方面，接頭是如上文所定義的親水性接頭，其中q是l。本發(fā)明的另一方面，接頭是如上文所定義的親水性接頭，其中G是-O-。本發(fā)明的另一方面，接頭是如上文所定義的親水性接頭，其中Z選自-C(O)NH-、《(0)1^1012-和-0(:(0^11畫。本發(fā)明的另一方面，接頭是如上文定義的親水性接頭，其中q是0。本發(fā)明的另一方面，接頭是如上文所定義的親水性接頭，其中1是2。本發(fā)明的另一方面，接頭是如上文所定義的親水性接頭，其中n是2。本發(fā)明的一個方面，使用了以化學(xué)部分使肽與白蛋白結(jié)合殘基分隔的"親水性接頭"B。本發(fā)明的一個方面，親水性接頭B是-C(OHCH2)rO-[(CH2CH2-0]m-(CH2)p-[NHC(0)-(CH2VO-[(CH2)n-0]m-(CH2)p]q-NH-其中1、m、n和p獨(dú)立地是l-5，而q是0-5。本發(fā)明的又一個實(shí)施方案中，親水性接頭B是-(:(0)-012-0-CH2CH2-0-CH2CH2[NHC(0)-CH2-0-CH2CH20-CH2CH2]q-NH-，其中q是0-5。本發(fā)明的又一個實(shí)施方案中，親水性接頭B是-C(0)-CH2-0CH2CH2-0-CH2CH2-NHC(0)-CH2-0-CH2CH20-CH2CH2隱NH-。本發(fā)明的又一個實(shí)施方案中，親水性接頭B是-[CH2CH20]m+1(CH2)pQq-，其中m和p獨(dú)立地是0-10，q是0-5，而Q是如上文所定義的-Z-(CH2;hD[(CH2)nG]m(CH2)p-。本發(fā)明的又一個實(shí)施方案中，親水性接頭BA-(CH2)rO-[(CH2)n-0]m-(CH2)p陽[C(0)NH-(CH2VO-[(CH2)n-OL-(CH2)p]q-，其中1、m、n和p獨(dú)立地是l-5，而q是0-5。本發(fā)明的再一方面，接頭包含除Cys以外的氨基酸殘基，或二肽例如Gly-Lys。在本文中，短語"二肽例如Gly-Lys"用于指肽，其中C末端氨基酸殘基是Lys、His或Trp，優(yōu)選Lys，而其中N末端氨基酸選自Ala、Arg、Asp、Asn、Gly、Glu、Gln、Ile、Leu、Val、Phe和Pro。合適的PEG聚合物通常是市面上可獲得的，或者可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的技術(shù)來制備。本發(fā)明的一個方面，PEG聚合物的分子量高于700D;另一方面，分子量高于5kD;又一方面，高于10kD;再一方面高于20kD。PEG聚合物可以是直鏈或分支的。當(dāng)PEG聚合物高于20KDa時，PEG聚合物優(yōu)選具有分支結(jié)構(gòu)，例如43kD的分支PEG-肽(Shearwater2001產(chǎn)品目錄編號2D3XOT01，mPEG2-MAL)。使PEG連接到完整的肽上可以通過使PEG連接到與受體相互作用的肽表面的相反面來實(shí)現(xiàn)。本發(fā)明的一個方面，PEG的連接將發(fā)生在人胰島淀粉樣多肽或其類似物中的第2、3、4、5或6位的氛基酸殘基上，上述氨基酸殘基被賴氨酸殘基或半胱氨酸取代，任選通過接頭來連接。本發(fā)明的又一方面，PEG的連接將發(fā)生在人胰島淀粉樣多肽或其類似物的第23、24、25、26、27或28位的氨基酸殘基上，上述氨基酸殘基被賴氨酸殘基或半胱氨酸取代，任選通過接頭來連接。本發(fā)明的再一方面，PEG的連接將發(fā)生在人胰島淀粉樣多肽或其類似物的第32、33、34、35、36或37位的氨基酸殘基上，上述氨基酸殘基被賴氨酸殘基或半胱氨酸取代，任選通過接頭來連接。有若干用于使PEG與肽偶聯(lián)的策略(參見例如Veronese,Biomaterials22:405-417,2001),所有這些策略以其全部在此引作參考。因此，本領(lǐng)域的技術(shù)人員將能夠利用熟知的技術(shù)，來使PEG聚合物與本文所描述的人胰島淀粉樣多肽或胰島淀粉樣多肽類似物連接。簡而言之，半胱氨酸的聚乙二醇化(PEGylation)是用于位點(diǎn)特異性聚乙二醇化的一種方法，而且可以通過以下步驟來完成在人胰島淀粉樣多肽或胰島淀粉樣多肽類似物上的特定位置之一引入獨(dú)特的半胱氨酸突變，然后使所產(chǎn)生的肽與半胱氨酸特異性聚乙二醇化試劑(例如PEG-馬來亞胺)反應(yīng)?？赡苡斜匾岆耐蛔円员隳軌蜻M(jìn)行位點(diǎn)特異性聚乙二醇化。例如，如果肽含有半胱氨酸殘基，則這些半胱氨酸殘基將需要用保守的氨基酸來取代，以保證位點(diǎn)特異性聚乙二醇化。此外，可以將包括但不限于"GGS"、"GGSGGS"和"PPPS"的剛性接頭添加到C末端上，但位于PEG連接位點(diǎn)(即獨(dú)特的半胱氨酸殘基)之前。本發(fā)明的一方面，白蛋白結(jié)合殘基是親脂性殘基。另一方面，所述親脂性殘基通過綴合化學(xué)(例如通過烷基化、?；?、形成酯、形成酰胺)與賴氨酸殘基任選經(jīng)由接頭來連接，或通過馬來酰亞胺偶聯(lián)與半胱氨酸連接。本發(fā)明的又一方面，白蛋白結(jié)合殘基在生理pH下帶負(fù)電。本發(fā)明的另一方面，白蛋白結(jié)合殘基包含可以帶負(fù)電的基團(tuán)?？梢詭ж?fù)電的一種優(yōu)選基團(tuán)是羧脧基。本發(fā)明的又一方面，白蛋白結(jié)合殘基與白蛋白非共價(jià)結(jié)合。本發(fā)明的另一方面，白蛋白結(jié)合殘基對人血清白蛋白的結(jié)合親和力優(yōu)于約10pM或優(yōu)于約1pM。本發(fā)明的再一方面，白蛋白結(jié)合殘基選自直連烷基、支鏈烷基、具有co-羧S吏基的基團(tuán)以及部分或完全氬化的環(huán)戊烷并菲骨架。本發(fā)明的又一方面，白蛋白結(jié)合殘基是汽巴克隆基(cibacronyl)殘基。本發(fā)明的又一方面，白蛋白結(jié)合殘基具有6-40個碳原子，8-26個碳原子或8-20個碳原子。本發(fā)明的又一方面，白蛋白結(jié)合殘基是選自CH3(CH2》CO-的?；?，其中r是4-38的整數(shù)，優(yōu)選4-24的整數(shù)；更優(yōu)選選自CH3(CH2)6CO-、CH3(CH2)8CO-、CH3(CH2)10CO-、CH3(CH2)12CO-、CH3(CH2)14CO-、CH3(CH2)16CO-、CH3(CH2)18CO-、CH3(CH2)20CO-和CH3(CH2)22CO-。本發(fā)明的另一方面，白蛋白結(jié)合殘基是直鏈或支鏈鏈烷a，w-二羧酸的?；?。本發(fā)明的另一方面，白蛋白結(jié)合殘基是選自HOOC(CH2)sCO-的?；?，其中s是4-38的整數(shù)，優(yōu)選4-24的整數(shù)；更優(yōu)選選自HOOC(CH2)14CO-、HOOC(CH2)16CO-、HOOC(CH2)18CO-、HOOC(CH2)2。CO-和HOOC(CH2)22CO-。本發(fā)明的另一方面，白蛋白結(jié)合殘基是式CH3(CH2)vCO-NHCH(COOH)(CH2)2CO-的基團(tuán)，其中v是10-24的整數(shù)。本發(fā)明的另一方面，白蛋白結(jié)合殘基是式CH3(CH2)wCO-NHCH((CH2)2COOH)CO-的基團(tuán)，其中w是8-24的整數(shù)。本發(fā)明的另一方面，白蛋白結(jié)合殘基是式COOH(CH2)xCO-的基團(tuán)，其中x為8-24的整數(shù)。本發(fā)明的另一方面，白蛋白結(jié)合殘基是式-NHCH(COOH)(CH2)4麗-CO(CH2)yCH3的基團(tuán)，其中y為8-18的整數(shù)。本發(fā)明的一個方面，白蛋白結(jié)合殘基與接頭聯(lián)合為-C(0)-(CH2)r-[(CH^HrOL^CH^-CNHCXOHCH^-O-KCH^-Ok-CCHWq-NH-W，其中1、m、n和p獨(dú)立地是l-5，而q是0-5，W選自CH3(CH2)6CO-、CH3(CH2)8CO-、CH3(CH2)10CO-、CH3(CH2)12CO-、CH3(CH2)14CO-、CH3(CH2)16CO-、CH3(CH2)18CO-、CH3(CH2)20CO-、CH3(CH2)22CO-、HOOC(CH2)14CO-、HOOC(CH2)16CO-、HOOC(CH2)18CO-、HOOC(CH2)20CO-和HOOC(CH2)22CO-。本發(fā)明的一個方面，白蛋白結(jié)合殘基與接頭聯(lián)合為-C(0)-CH2-OCH2CH2-0-CH2CH2[NHC(0)-CH2-0-CH2CH2陽O-CH2CH2]q畫NH畫Ac,其中q是0-5，而Ac為乙酰基。本發(fā)明的另一方面，白蛋白結(jié)合殘基與接頭聯(lián)合為式<:(0)-012-0-CH2CH2-0-CH2CH2-NHC(0)-CH2-0-CH2CH20-CH2CH2-NH-Ac的基團(tuán)，其中Ac為乙酰基。本發(fā)明的另一方面，白蛋白結(jié)合殘基與接頭聯(lián)合為其中B如上文所定義，而Z、V、q和w如下文所定義。本發(fā)明的另一方面，白蛋白結(jié)合殘基與接頭聯(lián)合為OVHIIo其中Z是CH3或COOH;V是H或COOH;q是7-21;w是0-5;而k是0-5，B是-CXOHCH^-O-KCHzCHrOKCHzVPSfHCCOHCHzVO-KCHA-0]m-(CH2)p]q-NH-，其中l(wèi)、m、n和p獨(dú)立地是l-5，而q是0-5。本發(fā)明的另一方面，白蛋白結(jié)合殘基與接頭聯(lián)合為OVo其中Z是CHs或COOH;V是H或COOH;q是7-21;w是0-5;而k是0-5。本發(fā)明的另一方面，Z是CH3，而V是COOH。本發(fā)明的另一方面，V是H，而Z是COOH。本發(fā)明的另一方面，V是H,而Z是CH3。本發(fā)明的另一方面，V和Z皆是COOH。本發(fā)明的一個優(yōu)選方面，q是13-19;更優(yōu)選q是13-15。本發(fā)明的一個優(yōu)選方面，k是1-4;并更優(yōu)選1-2。本發(fā)明的一個優(yōu)選方面，w是14;而更優(yōu)選1-2。本發(fā)明的另一方面，白蛋白結(jié)合殘基與接頭聯(lián)合為其中Z是CHg或COOH;q是7-21，而k是0-5。本發(fā)明的另一方面，Z是CH3。本發(fā)明的另一方面，Z是COOH。本發(fā)明的一個優(yōu)選方面，q是13-19，而更優(yōu)選q是13、14或15。本發(fā)明的一個優(yōu)選方面，k是l-4，而更優(yōu)選1或2。本發(fā)明的另一方面，白蛋白結(jié)合殘基是肽，例如包含-少40個氨基酸殘基的肽。作為白蛋白結(jié)合殘基的許多小肽以及它們的鑒定方法可以在J.BiolChem.277，38(2002)35035-35043中找到。本發(fā)明的另一方面，白蛋白結(jié)合殘基任選通過接頭經(jīng)由賴氨酸殘基的e-氨基連接。本發(fā)明的另一方面，白蛋白結(jié)合殘基任選通過接頭經(jīng)由半胱氨酸連接。又一方面，本發(fā)明涉及胰島淀粉樣多肽衍生物，其中親脂性殘基通過接頭與母肽連接，所述接頭是除Cys以外的氨基酸殘基，或者是二肽例如Gly-Lys,而其中母肽的氛基與所述賴氨酸殘基或含有賴氨酸殘基的二肽的氨基形成酰胺鍵，而所述賴氨酸殘基或含有賴氨酸殘基的二肽的另一個氛基與親脂性殘基的氣基形成酰胺鍵。又一方面，本發(fā)明涉及胰島淀粉樣多肽衍生物，其中親脂性殘基通過接頭與母肽連接，所述接頭是除Cys以外的氨基酸殘基，或是二肽例如Gly-Lys，而其中母肽的氨基與所述氨基酸殘基或二肽接頭的羧基形成酰胺鍵，而所述氨基酸殘基或二肽接頭的氨基與親脂性殘基的氣基形成酰胺4建。又一方面，本發(fā)明涉及胰島淀粉樣多肽衍生物，其中親脂性殘基通過接頭與母肽連接，所述接頭是除Cys以外的氨基酸殘基，或是二肽例如Gly-Lys，而其中母肽的氣基與氨基酸殘基接頭或二肽接頭的氨基形成酰胺鍵，而所述氨基酸殘基接頭或二肽接頭的羧基與親脂性殘基的氨基形成酰胺鍵。又一方面，本發(fā)明涉及胰島淀粉樣多肽衍生物，其中親脂性殘基通過接頭與母肽連接，所述接頭是除Cys以外的氨基酸殘基，或是二肽例如Gly-Lys,而其中母肽的氣基與為Asp或Glu的4JJ交接頭或含有Asp或Glu殘基的二肽接頭的氛基形成酰胺鍵，而接頭的氣基與親脂性殘基的氛基形成酰胺鍵。本發(fā)明的一方面，胰島淀粉樣多肽衍生物的C末端可以以酸或酰胺終止。優(yōu)選一方面，胰島淀粉樣多肽衍生物的C末端為酰胺。本發(fā)明的一方面，胰島淀粉樣多肽衍生物的M酉餅列選自KCNTATCATQRLANFLVHSSNNFGPILPPTIWGSNTY(SEQIDNo.24),KCNTATCATQRLANFLVHSSNNFGPILPPTKVGSNTY(SEQIDNo.6),KC謹(jǐn)TCATQRLANFLVHSSNNFGPILPPTIWGSNTYK(SEQIDNo.7),KCNTATCATQRLANFLVHSSNNFGPILKPTNVGSNTY(SEQIDNo.8),KCNTATCATQKLANFLVHSSNNFGPILPPTNVGSNTY(SEQIDNo.9),KCNTATCATQRLANFLVHSSKNFGPILPPTNVGSNTY(SEQIDNo.10),KCNTATCATQRLANFLVHSSNKFGPILPPTNVGSNTY(SEQIDNo.11),KCNTATCATQRLANFKVHSSNNFGPILPPTNVGSNTY(SEQIDNo.12),KCNTATCATQRLANFLKHSSNNFGPILPPTNVGSNTY(SEQIDNo.13),KCNTATCATQRLAKFLVHSSNNFGPILPPTNVGSNTY(SEQIDNo.14),KCNTATCATQRLANKLVHSSNNFGPILPPTNVGSNTY(SEQIDNo.15),KCNTATCATKRLANFLVHSSNNFGPILPPTNVGSNTY(SEQIDNo,16),KCNTATCATQRLANFLVHSSNNFGPILPPTNVGSKTY(SEQIDNo.17),KC眼TCATQRLANFLVRSSNNLGPVLPPTNVGSNTYK(SEQIDNo.18),KCNTATCATQRLANFLVKSSNNFGPILPPTNVGSNTY(SEQIDNo.19),KCNTATCATQRLANFLVHSSNNFGPILPKTIWGSNTY(SEQIDNo.20),KCNTATCATQRLANFLVKSSNNLGPVLPPTNVGSNTY(SEQIDNo.21),KC眼TCATQKLANFLVRSSNNLGPVLPPTNVGSNTY(SEQIDNo.22),和KCNTATCATQRLANFLVHSSNNFGKILPPTNVGSNTY(SEQIDNo.23),其中賴氨酸殘基中的至少一個與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。又一方面，胰島淀粉樣多肽衍生物中僅有一個賴氨酸與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。優(yōu)選的一方面，具有SEQIDNo6-24的氨基酸序列中任一個的胰島淀粉樣多肽衍生物的C末端是酰胺。本發(fā)明的又一方面，白蛋白結(jié)合殘基與接頭結(jié)合選自<formula>formulaseeoriginaldocumentpage29</formula>和<formula>formulaseeoriginaldocumentpage29</formula>本發(fā)明的一個方面，胰島淀粉樣多肽衍生物選自KCNTATCATQRLANFLVHSS麗FGPILPPTNVGSNTY(SEQIDNo24)，其中第l位的賴氨酸殘基與結(jié)合了接頭的白蛋白結(jié)合殘基連接，所述白蛋白結(jié)合殘基與接頭結(jié)合為<formula>formulaseeoriginaldocumentpage29</formula>KCNTATCATQRLANFLVHSS麗FGPILPPTKVGSNTY(SEQIDNo.6),其中第31位賴氨酸殘基與結(jié)合了接頭的白蛋白結(jié)合殘基連接，所述白蛋白結(jié)合殘基與接頭結(jié)合選自和<formula>formulaseeoriginaldocumentpage30</formula>7),其中第38位賴氨酸殘基與結(jié)合了接頭的白蛋白結(jié)合殘基連接，所述白蛋白結(jié)合殘基與接頭結(jié)合選自HO,和IDNo.8),其中第28位賴氨酸殘基與結(jié)合了接頭的白蛋白結(jié)合殘基連接，所述白蛋白結(jié)合殘基與接頭結(jié)合選自和KCNTATCATQKLANFLVHSS麗FGPILPPTNVGSNTY(SEQIDNo.9)，其中第11位賴氨酸殘基與結(jié)合了接頭的白蛋白結(jié)合殘基連接，所述白蛋白結(jié)合殘基與接頭結(jié)合選自:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage31</formula>KCNTATCATQRLANFLVHSSKNFGPILPPTNVGSNTY(SEQIDNo.10)，其中第21位賴氨酸殘基與結(jié)合了接頭的白蛋白結(jié)合殘基連接，所述白蛋白結(jié)合殘基與接頭結(jié)合選自KCNTATCATQRLANFLVHSSNKFGPILPPTNVGSNTY(SEQIDNo.11)，其中第22位賴氨酸殘基與結(jié)合了接頭的白蛋白結(jié)合殘基連接，所述白蛋白結(jié)合殘基與接頭結(jié)合選自IDNo,12)，其中第16位賴氨酸殘基與結(jié)合了接頭的白蛋白結(jié)合殘基連接，所述白蛋白結(jié)合殘基與接頭結(jié)合選自和KCNTATCATQRLANFLKHSSNNFGPILPPTNVGSNTY(SEQIDNo.13)，其中第17位賴氨酸殘基與結(jié)合了接頭的白蛋白結(jié)合殘基連接，所述白蛋白結(jié)合殘基與接頭結(jié)合選自KCNTATCATQRLAKFLVHSS麗FGPILPPTNVGSNTY(SEQIDNo.14),其中第14位賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基通過選自以下的接頭連接IDNo.15)，其中第15位賴氨酸殘基與結(jié)合了接頭的白蛋白結(jié)合殘基連接，所述白蛋白結(jié)合殘基與接頭結(jié)合選自O(shè)O;KCNTATCATKRLANFLVHSSNNFGPILPPTNVGSNTY(SEQIDNo.16),其中第IO位賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基通過選自以下的接頭連接HO一KCNTATCATQRLANFLVHSS麗FGPILPPTNVGSKTY(SEQIDNo.17),其中第35位賴氨酸殘基與結(jié)合了接頭的白蛋白結(jié)合殘基連接，所述白蛋白結(jié)合殘基與接頭結(jié)合選自KCNTATCATQRLANFLVRSS麗LGPVLPPTNVGSNTYK(SEQIDNo.18),其中第38位賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基通過選自以下的接頭連接<formula>formulaseeoriginaldocumentpage33</formula>KCNTATCATQRLANFLVKSSNNFGPILPPTNVGSNTY(SEQIDNo.19)，其中第18位賴氨酸殘基與結(jié)合了接頭的白蛋白結(jié)合殘基連接，所述白蛋白結(jié)合殘基與接頭結(jié)合選自<formula>formulaseeoriginaldocumentpage33</formula>IDNo.20)，其中第29位賴氨酸殘基與結(jié)合了接頭的白蛋白結(jié)合殘基連接，所述白蛋白結(jié)合殘基與接頭結(jié)合選自<formula>formulaseeoriginaldocumentpage33</formula>IDNo.21)，其中第18位賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基通過選自以下的接頭連接<formula>formulaseeoriginaldocumentpage33</formula>22)，其中第11位賴氨酸殘基與結(jié)合了接頭的白蛋白結(jié)合殘基連接,所述白蛋白結(jié)合殘基與接頭結(jié)合選自<formula>formulaseeoriginaldocumentpage33</formula>以及<formula>formulaseeoriginaldocumentpage33</formula>(SEQIDNo.23)，其中第25位賴氨酸殘基與結(jié)合了接頭的白蛋白結(jié)合殘基連接，所述白蛋白結(jié)合殘基與接頭結(jié)合選自<formula>formulaseeoriginaldocumentpage33</formula>本發(fā)明在又一方面涉及用于增加人胰島淀粉樣多肽或其類似物在患者中的作用時間的方法，其特征為a)通過用賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代，并通過使所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，來修飾第2-37位中的氨基酸殘基，或者b)使第1位的賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，或者c)將賴氨酸殘基添加到第38位，其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接；其中所述氨基酸編號與SEQIDNo.1中的氨基酸編號一致。本發(fā)明在又一方面涉及一種用于增加人胰島淀粉樣多肽或其類似物在患者中的作用時間的方法，其特征為a)通過用賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代，并通過使所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，來修飾第2-37位中的氨基酸殘基，或者b)使第1位的賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接；其中所述氨基酸編號與SEQIDNo.1中的氨基酸編號一致。另一方面，本發(fā)明涉及一種方法，其中人胰島淀粉樣多肽或其類似物在患者中的作用時間增至超過約40小時。胰島淀粉樣多肽衍生物可以通過包括以下步驟的方法產(chǎn)生在合適的營養(yǎng)培養(yǎng)基中允許肽表達(dá)的條件下，培養(yǎng)含有編碼所述多肽的DNA序列并能表達(dá)所述多肽的宿主細(xì)胞，隨后乂人培養(yǎng)物中回收。用于培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基可以是適合用于培養(yǎng)宿主細(xì)胞的任何常規(guī)的培養(yǎng)基，例如含有合適的補(bǔ)充物的基本培養(yǎng)基或復(fù)合培養(yǎng)基。(例如在美國典型培養(yǎng)物保藏中心(AmericanTypeCultureCollection)的產(chǎn)品目錄中)。然后，細(xì)胞所產(chǎn)生的肽可以通過常規(guī)方法從培養(yǎng)基中回收，所述常規(guī)方法包括經(jīng)離心或過濾將宿主細(xì)胞從培養(yǎng)基中分離；利用鹽(例如硫酸銨)使上清液或?yàn)V出液中的蛋白質(zhì)組分沉淀；通過各種層析法(例如離子交換層析、凝膠過濾層析、親和層析等)來純化，這取決于待純化的肽的類型。編碼治療性多肽的DNA序列可以適當(dāng)?shù)貋碓从诨蚪M或cDNA，例如按照以下步驟獲得制備基因組或cDNA文庫，并依照標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)，通過使用合成的寡核苷酸探針雜交來篩選出編碼全部或部分所述多肽的DNA序列(參見例如Sambrook,J，F(xiàn)ritsch,EF和Maniatis，T,Mo/ectz/arC7函'wg:爿丄a6orato^7M朋wa/，ColdSpringHarborLaboratoryPress,NewYork,1989)。編碼所述多肽的DNA序列也可以通過已制定的才示準(zhǔn)方法來合成制備,，B口在Beaucage和Caruthers,7^ra/et/ra"22(1981),1859-1869中描述的亞磷酰胺(phosphoamidite)法，或在Matthes等，五M50To"/7ia/3(1984),801—805中描述的方法。此DNA序列也可以使用特異性引物通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)來制備，例如在US4,683,202或Saiki等，239(1988),487-491中所描述的?？梢詫NA序列插入任何載體，所述載體可以方i"更地施以重組DNA的方法，載體的選擇往往將取決于它所要引入的宿主細(xì)胞。因此，此載體可以是自主復(fù)制型載體，即作為染色體外的實(shí)體存在的載體，所述載體的復(fù)制獨(dú)立于染色體復(fù)制，例如質(zhì)粒。作為選擇，載體可以是當(dāng)引入到宿主細(xì)胞中時整合到宿主細(xì)胞基因組中并隨它所整合的染色體一起復(fù)制的載體。載體優(yōu)選表達(dá)載體，此載體中編碼所述肽的DNA序列與DNA轉(zhuǎn)錄所需的另外片段(例如啟動子)可操作性地(oprerably)連接。啟動子可以是在所選的宿主細(xì)胞中表現(xiàn)出轉(zhuǎn)錄活性的任何DNA序列，所述DNA序列可以從編碼對于宿主細(xì)胞是同源或異源的蛋白的基因中獲得。用于引導(dǎo)編碼本發(fā)明肽的DNA在各種宿主細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄的合適啟動子的實(shí)例在本領(lǐng)域中眾所周知，參照例如所述的Sambrook等。如有必要，編碼所述肽的DNA序列也可與合適的終止子、聚腺苦酸化信號、轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)子序列和翻譯增強(qiáng)子序列可操作性地連接。本發(fā)明的重組載體可以進(jìn)一步包含使載體能夠在所述宿主細(xì)胞中復(fù)制的DNA序列。載體也可以包含選擇標(biāo)記，例如產(chǎn)物能夠補(bǔ)足宿主細(xì)胞缺陷的基因、或賦予對藥物(例如氨千青霉素、卡那霉素、四環(huán)素、氯霉素、新霉素、潮霉素或氨曱喋呤)抗性的基因。為了引導(dǎo)本發(fā)明的母肽進(jìn)入宿主細(xì)胞的分泌途徑，可以在重組載體中4是供分泌信號序歹ll(也稱為前導(dǎo)序列、前原序列(preprosequence)、前序列(presequence))。分泌信號序列在正確的閱讀框中與編碼所述肽的DNA序列連接。分泌信號序列一般位于編碼肽的序列的5，。分泌信號序列分泌信號序列可以是與肽正常地結(jié)合的分泌信號序列或者可以來自編碼另一種分泌蛋白的基因。用于連接編碼所述肽的DNA序列、啟動子以及任選的終止子和/或分泌信號序列的方法，以及用于將它們插入含有復(fù)制所需信息的合適載體的方法為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所熟知(參照例如上述的Sambrook等)。引入了DNA序列或重組載體的宿主細(xì)胞可以是能夠產(chǎn)生所述肽的任何細(xì)胞，包括細(xì)菌、酵母、真菌和高等真核細(xì)胞。為本領(lǐng)域所熟知并使用的合適宿主細(xì)胞的實(shí)例是而不限于大腸桿菌、釀酒酵母(Sacc/wraw^cascerev^ae)或哺乳動物的BHK或CHO細(xì)月包系。藥物組合物本發(fā)明的一方面，提供了包含本發(fā)明的衍生物和藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物。本發(fā)明的又一方面，所述藥物組合物適用于腸胃外給藥。本發(fā)明的另一個目的是提供包含本發(fā)明化合物的藥物制劑，所述化合物以0.1mg/m卜25mg/ml的濃度存在，其中所述制劑具有3.0-9.0的pH。此制劑可以進(jìn)一步包括緩沖系統(tǒng)、防腐劑、張度劑、螯合劑、穩(wěn)定劑以及表面活性劑。在本發(fā)明的一個實(shí)施方案中，所述藥物制劑是水性制劑，即含水制劑。此制劑通常是溶液或混懸液。在本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，藥物制劑是水溶液。術(shù)語"水性制劑"定義為含有至少50。/。w/w水的制劑。同樣地，術(shù)語"水溶液"定義為含有至少50%w/w水的溶液，而術(shù)語"水性混懸液"定義為含有至少50%w/w水的混懸液。在另一個實(shí)施方案中，所述藥物制劑是凍干制劑，醫(yī)師或患者在使用前向其加入溶劑和/或稀釋劑。在另一個實(shí)施方案中，所述藥物制劑是現(xiàn)成的而無需預(yù)先溶解的干燥制劑(例如冷凍干燥或噴霧干燥的)。又一方面，本發(fā)明涉及包含本發(fā)明化合物的水溶液和緩沖劑的藥物制劑，其中所述化合物以O(shè).lmg/ml或以上的濃度存在，而其中所述制劑具有約3.0—約9.0的pH。在本發(fā)明的另一個實(shí)施方案中，制劑的pH是約3.0-約7.0。在本發(fā)明的另一個實(shí)施方案中，制劑的pH是約4.0-約6.0。在本發(fā)明的另一個實(shí)施方案中，制劑的pH是約4.0-約5.0。在本發(fā)明的另一個實(shí)施方案中，制劑的pH是約7.0-約9.5。在本發(fā)明的另一個實(shí)施方案中，制劑的pH是約3.0-約7.0。在本發(fā)明的另一個實(shí)施方案中，制劑的pH是約5.0-約7.5。在本發(fā)明的另一個實(shí)施方案中，制劑的pH是約7.5-約9.0。在本發(fā)明的另一個實(shí)施方案中，制劑的pH是約7.5-約8.5。在本發(fā)明的另一個實(shí)施方案中，制劑的pH是約6.0-約7.5。在本發(fā)明的另一個實(shí)施方案中，制劑的pH是約6.0-約7.0。在本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，緩沖劑選自醋酸鈉、碳酸鈉、檸檬酸鹽、甘氨酰甘氨酸、組氨酸、甘氨酸、賴氨酸、精氨酸、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸鈉以及三羥曱基氨基曱烷、N-二羥乙基甘氨酸、曲辛、蘋果酸、琥珀酸鹽、馬來酸、延胡索酸、酒石酸、天冬氨酸、或者它們的混合物。這些特定的緩沖劑中的每一種都構(gòu)成了本發(fā)明可供選擇的實(shí)施方案。在本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，所述制劑還包含藥學(xué)上可接受的防腐劑。在本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，所述防腐劑選自苯酚、鄰曱苯酚、間甲苯酚、對甲苯酚、對羥基苯曱酸曱酯、對羥基苯曱酸丙酯、2-苯氧乙醇、對羥基苯曱酸丁酯、2-苯基乙醇、千醇、三氯叔丁醇以及石危柳汞、溴硝丙二醇、苯曱酸、咪脲、氯己定(chlorohexidine)、脫氫醋酸鈉、氯曱酚、對羥基曱酸乙酯、千索氯銨、氯苯甘醚(chlorphenesine)(3對氯苯氧基丙-l,2-二醇)或者它們的混合物。在本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，防腐劑以0.1mg/ml-20mg/ml的濃度存在。在本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，防腐劑以0.1mg/ml-5mg/ml的濃度存在。在本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，防腐劑以5mg/ml-10mg/ml的濃度存在。在本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，防腐劑以10mg/ml-20mg/ml的濃度存在。這些特定防腐劑中的每一種都構(gòu)成了本發(fā)明可供選擇的實(shí)施方案。防腐劑在藥物組合物中的應(yīng)用為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所熟知。為了方便，請參考Remington:77^5""'e"ce/Va"/ceq/T/iarmaqy，19thedition,1995。本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，所述制劑還包含等張劑。本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，所述等張劑選自鹽(例如氯化鈉)、糖或糖醇、氨基酸(例如L-甘氨酸、L-組氨酸、精氨酸、賴氨酸、異亮氨酸、天冬氨酸、色氨酸、蘇氨酸)、糖醇(例如甘油、1,2-丙二醇(丙二醇)、1,3-丙二醇、1，3-丁二醇)、聚乙二醇(例如PEG400)或者它們的混合物?？梢允褂萌魏翁抢鐔翁?、二糖或多糖、或水溶性葡聚糖，包括例如果糖、葡萄糖、甘露糖、山梨糖、木糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖、海藻糖、葡聚糖、普魯蘭(pullulan)、糊精、環(huán)糊精、可溶性淀粉、羥乙基淀粉以及羧甲基纖維素鈉。在一個實(shí)施方案中，糖添加劑是蔗糖。糖醇定義為具有至少一個-OH基的C4-C8碳?xì)浠衔铮ɡ绺事洞?、山梨醇、肌醇、半乳糖醇、衛(wèi)矛醇、木糖醇以及阿拉伯糖醇。在一個實(shí)施方案中，糖醇添加劑是甘露醇。所迷糖或糖醇可以單獨(dú)或聯(lián)合使用。不存在對用量的固定限制，只要糖或糖醇可溶于液體制劑中并且不會負(fù)面影響使用本發(fā)明的方法所實(shí)現(xiàn)的穩(wěn)定效果。在一個實(shí)施方案中，糖或糖醇濃度在約1mg/ml-約150mg/ml之間。在本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，等張劑以1mg/ml-50mg/ml的濃度存在。在本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，等張劑以1mg/ml-7mg/ml的濃度存在。在本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，等張劑以8mg/ml-24mg/ml的濃度存在。在本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，等張劑以25mg/m卜50mg/ml的濃度存在。這些特定的等張劑中的每一種都構(gòu)成了本發(fā)明可供選擇的實(shí)施方案。等張劑在藥物組合物中的應(yīng)用為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所熟知。為了方便，請參考Remington:7TzeiSWewce尸rac"ceo/尸Aawmcy,19edition,1995。在本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，所述制劑還包含螯合劑。在本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，螯合劑選自乙二胺四乙酸(EDTA)、檸檬酸和天冬氨酸的鹽以及它們的混合物。在本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，螯合劑以0.1mg/ml-5mg/ml的濃度存在。在本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，螯合劑以0.1mg/m卜2mg/ml的濃度存在。在本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，螯合劑以2mg/ml-5mg/ml的濃度存在。這些特定的螯合劑中的每一種都構(gòu)成了本發(fā)明可供選擇的實(shí)施方案。螯合劑在藥物組合物中的應(yīng)用為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所熟知。為了方便，請參考Remington:T7e5Wewceawc/7V"Wce0/尸/ar顧qy,19edition,1995。在本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，所述制劑還包含穩(wěn)定劑。穩(wěn)定劑在藥物組合物中的應(yīng)用為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所熟知。為了方^更，請參考Remington:T7e5"c/ewce"wt/尸rac"'ceo/尸/zammqy,19thedition,1995。更詳細(xì)地講，本發(fā)明的組合物是穩(wěn)定的液體藥物組合物，它們的治療活性組分包括多肽，所述多肽在貯存于液體藥物制劑期間可能呈現(xiàn)出形成聚集體。"形成聚集體"指的是多肽分子之間的物理相可見的聚集物。"在貯存期間"指的是制備后的液體藥物組合物或制劑并不馬上施用于受試者。而是在制備完以后，它或以液體形式，或以冷凍狀態(tài)，或以隨后能重新構(gòu)成液體形式的干燥形式或適用于給予受試者的其他形式被包裝以用于貯存。"干燥形式，，指的是液體藥物組合物或制劑或通過冷凍干燥(即凍千法；參見例如Williams和Polli(1984)J.ParenteralSci.Technol.38:48-59)、噴霧干燥(參見Masters(1991)載于Spray-DryingHandbook(5thed;LongmanScientific和Technical,Essez，U.K.),pp.491-676;Broadhead等(1992)DrugDevel.Ind.Pharm.18:1169-1206;以及Mumenthaler等(1994)Pharm.Res.1l:12-20)或風(fēng)干(Carpenter和Crowe(1988)Cryobiology25:459-470;以及Roser(1991)Biopharm.4:47-53)來干燥。在液體藥物組合物的貯存期間多肽形成聚集體，則可以負(fù)面影響肽的生物活性，從而導(dǎo)致藥物組合物治療功效的損失。此外，當(dāng)使用輸液系統(tǒng)來施用含多肽藥物組合物時，聚集體的形成可以引起其他問題，例如阻塞管道、膜或泵。本發(fā)明的藥物組合物可以進(jìn)一步包含在組合物貯存期間足以減少多肽形成聚集體的氨基酸堿(aminoacidbase)。"氨基S臾堿"指的是氨基酸或氨基酸組合，其中任何給出的氨基酸以其游離堿的形式或以其鹽的形式存在。當(dāng)使用氨基酸組合時，這些氨基酸全部可以以其游離堿的形式存在；全部可以其鹽的形式存在；或者一些以其游離堿的形式存在，而另一些以其鹽的形式存在。在一個實(shí)施方案中，制備本發(fā)明的組合物中所用的氨基酸是具有帶電荷側(cè)鏈的氨基酸，例如精氨酸、賴氨酸、天冬氨酸以及谷氨酸。特定氨基酸(例如甲硫氨酸、組氨酸、咪唑、精氨酸、賴氨酸、異亮氨酸、天冬氨酸、色氨酸、蘇氨酸以及它們的混合物)的任何立體異構(gòu)體(即L、D或它們的混合物)或者這些立體異構(gòu)體的組合可以在本發(fā)明的藥物組合物中存在，只要此特定的氨基酸是以其游離堿的形式或以其鹽的形式存在。在一個實(shí)施方案中，使用L-立體異構(gòu)體。本發(fā)明的組合物也可以與這些氨基酸的類似物一起制備。"氨基酸類似物"指的是天然存在的氨基酸的衍生物，其產(chǎn)生在貯存本發(fā)明的液體藥物組合物期間降低多肽形成聚集體的所需效果。合適的精氨酸類似物包括例如氨基胍、鳥氨酸和N-單乙基L-精氨酸；合適的曱硫氨酸類似物包括乙硫氨酸和丁硫氨酸；合適的半胱氨酸類似物包括S-曱基-L半胱氨酸。與其他氨基酸一樣，氨基酸類似物以其游離石咸的形式或以其鹽的形式摻入組合物中。本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，氨基酸或氨基酸類似物以足以阻止或延遲蛋白聚集的濃度使用。本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，如果用作治療劑的多肽是包含至少一個易于氧化的甲硫氨酸殘基的多肽，那么可以加入甲硫氨酸(或其他含硫的氨基酸或氨基酸類似物)來抑制曱硫氨酸殘基氧化為曱硫氨酸亞砜。"抑制"指的是使隨著時間的過去曱硫氨酸氧化種類有最少的積累。抑制曱硫氨酸的氧化可導(dǎo)致多肽更好地以其固有的分子形式保持?？梢允褂脮趿虬彼岬娜魏瘟Ⅲw異構(gòu)體(L或D)或其組合。加入量應(yīng)該是足以抑制曱硫氨酸殘基氧化、以使曱硫氨酸亞砜的量可被接受管理機(jī)構(gòu)的量。一般來說，這意味著組合物中不含有超過約10%-約30%的曱硫氨酸亞砜。通常這可以通過加入曱硫氨酸以致使所加入的曱硫氨酸與曱硫氨酸殘基之比為約1:1-約1000:1(例如10:1-約100:1)來實(shí)現(xiàn)。在本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，所述制劑還包含選自高分子量聚合物或低分子量化合物的穩(wěn)定劑。在本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，穩(wěn)定劑選自聚乙二醇(例如PEG3350)、聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮、羧基-/羥基纖維素或其衍生物(例如HPC、HPC-SL、HPC-L和HPMC)、環(huán)糊精；如二羥基丙硫醇、巰基乙酸和2-曱硫乙醇的含硫物質(zhì)；以及不同的鹽(例如氯化鈉)。這些特定的穩(wěn)定劑中的每一種構(gòu)成了本法明可供選擇的實(shí)施方案。藥物組合物也包含另外的穩(wěn)定劑，所述穩(wěn)定劑進(jìn)一步增強(qiáng)藥物組合物中的治療性活性多肽的穩(wěn)定性。本發(fā)明特別感興趣的穩(wěn)定劑包括但不限于曱硫氨酸和EDTA，其保護(hù)多肽對抗曱硫氨酸氧化；以及非離子表面活性劑，其保護(hù)多肽對抗由于凍融或機(jī)械剪切相關(guān)的聚集。在本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，所述制劑還包含表面活性劑。在本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，表面活性劑選自洗滌劑、乙氧基化蓖麻油、聚乙二醇化甘油酯(polyglycolyzedglycerides)、乙?；瘑嗡岣视王?、山梨坦脂肪酸酯、聚氧丙烯-聚氧乙烯嵌段聚合物(例如泊洛沙姆例如Pluronic⑧F68、泊洛沙姆188和407、TritonX-100)、聚氧乙烯山梨坦脂肪酸酯、聚氧乙烯和聚乙烯衍生物例如烷基化衍生物和烷氧基化衍生物(吐溫，例如吐溫-20、吐溫-40、吐溫-80和Brij-35)、單酸甘油酯或其乙氧基化衍生物、二酯酸甘油酯或其聚氧乙烯衍生物、醇類、甘油、凝集素和磷脂(例如磷脂酰絲氨酸、磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、雙磷脂酰甘油和鞘磷脂)；磷脂衍生物(例如二棕櫚酰磷脂酸)和溶血磷脂衍生物(棕櫚酰溶血磷脂酰-L-絲氨酸；和乙醇胺、膽堿、絲氨酸或蘇氨酸的l-酰基-sn-甘油-3-磷酸酉旨)和溶血磷脂酰膽堿和磷脂酰膽堿的烷基、烷氧基(烷基酯)、烷氧基(烷基醚)衍生物，例如溶血磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰膽堿的月桂酰和肉豆蔻酰衍生物；極性頭基(即膽堿、乙醇胺、磷脂酸、絲氨酸、蘇氨酸、甘油、肌醇)的修飾物；帶正電的DODAC、DOTMA、DCP、BISHOP、溶血磷脂酰絲氨酸和溶血磷脂酰蘇氨酸；甘油磷脂(例如腦磷脂)、甘油糖脂(例如吡喃半乳糖苷)、鞘糖脂(例如神經(jīng)酰胺、神經(jīng)節(jié)苦酯)、月桂基磷酸膽堿、雞蛋溶血卵磷脂、夫西地酸衍生物-(例如牛磺二氫夫西地酸鈉等等)、長鏈脂肪酸及其鹽C6-C12(例如油酸和辛酸)、酰基肉i威和衍生物、賴氨酸或精氨酸或組氨酸的N"-?；苌?、或者賴氨酸或精氨酸的側(cè)鏈?；苌?；包含賴氨酸、精氨酸或組氨酸與中性或酸性氨基酸的任何組合的二肽的N、?；苌?；包含中性氨基酸與兩種帶電氨基酸的任何組合的三肽的Na-?；苌?、DSS(多庫酯鈉(CAS登記號[577-11-7〗))、多庫酯釣(CAS登記號[128-49-4])、多庫酯鉀(CAS登記號[7491-09-0])、SDS(十二烷基硫酸鈉或月桂基硫酸鈉)、辛酸鈉、膽酸或其衍生物、膽汁酸及其鹽和甘氨酸或?；撬岬木Y合物、熊去氧膽酸、膽酸鈉、脫氧膽酸鈉、?；悄懰徕c、甘膽酸鈉、N-十六烷基-N，N-二曱基-3-銨-l-丙磺酸鹽、陰離子(烷基-芳基-磺酸鹽)一價(jià)表面活性劑、兩性離子表面活性劑(例如N-烷基-N,N-二曱銨基-l-丙磺酸鹽、3-膽酰氨基-l-丙基二曱銨基-l-丙磺酸鹽、陽離子表面活性劑(季銨堿)(例如溴化十六烷基三曱基銨、氯化十六烷基吡啶鏡)、非離子表面活性劑(例如十二烷基(3-D-吡喃葡萄糖苷)、poloxamines(通過將環(huán)氧丙烷和環(huán)氧乙烷連續(xù)加入乙二胺而獲得的四官能嵌段共聚物)(例如Tetronic，s),或者表面活性劑可以選自咪唑啉衍生物、或其混合物。這些特定的表面活性劑中的每一種構(gòu)成了本法明可供選擇的實(shí)施方案。表面活性劑在藥物組合物中的應(yīng)用為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所熟知。為了方便，請參考Remington:77e5We"cea"c/尸rac"ceo/尸/m畫qy,19thedition,1995。在本發(fā)明的又一實(shí)施方案中，所述制劑還包含蛋白酶抑制劑，例如EDTA(乙二胺四乙酸)和千脒HC1，但也可以使用其他商業(yè)上可獲得的蛋白酶抑制劑。為了抑制自身催化，蛋白酶抑制劑的使用在包含蛋白酶酶原的藥物組合物中特別有用。有可能其他成分可以存在于本發(fā)明的肽藥物制劑中。這些另外的成分可以包括濕潤劑、乳化劑、抗氧化劑、填充劑、張度添加劑、螯合劑、金屬離子、油質(zhì)溶媒或載體、蛋白質(zhì)(例如人血清白蛋白、明膠或蛋白質(zhì))以及兩性離子(例如氨基酸如甜菜堿、?；撬帷⒕彼?、甘氨酸、賴氨酸和組氨酸)。這些另外的成分理所當(dāng)然地不應(yīng)該負(fù)面影響本發(fā)明藥物組合物的總穩(wěn)定度?？梢詫⒑斜景l(fā)明化合物的藥物組合物在若干部位給予需要該治療的患者，例如在局部部位，例如皮膚和粘膜部位；在避開吸收的部位，例如在動脈、j爭脈、心臟中施用；在與吸收有關(guān)的部位，例如在皮膚中、皮膚下、在肌肉或腹部中施用。本發(fā)明藥物組合物的施用可以通過若干途徑，例如舌、舌下、口腔含化、口中、經(jīng)口服、胃內(nèi)和腸內(nèi)、鼻內(nèi)、肺部(例如通過細(xì)支氣管和肺泡或它們的組合)、表皮、真皮、經(jīng)皮、陰道、直腸、眼(例如通過結(jié)膜)、輸尿管以及腸胃外來給與需要該治療的患者。本發(fā)明的組合物可以以若千劑型來施用，例如作為溶液、混懸液、乳劑、微乳劑、復(fù)合型乳劑、泡沫劑、藥膏、糊劑、硬膏劑、軟膏劑、片劑、包衣片、沖洗劑、膠嚢(例如硬明膠膠嚢和軟明膠膠嚢)、栓劑、直腸用膠嚢劑、滴劑、凝膠劑、噴霧劑、粉劑、氣霧劑、吸入劑、滴眼劑、眼用軟膏、眼用沖洗劑、陰道栓劑、陰道環(huán)、陰道庫欠膏、注射液、原位轉(zhuǎn)化液(insitutransformingsolution)(例如原位膠凝、原位安置、原位沉淀、原位結(jié)晶)、輸液劑以及埋植劑。本發(fā)明的組合物可以進(jìn)一步混入藥物載體、藥物遞送體系和高級藥物遞送體系，或通過例如共價(jià)、疏水或靜電相互作用與藥物載體、藥物遞送體系和高級藥物遞送體系連接(attach)，以進(jìn)一步增強(qiáng)本發(fā)明化合物的穩(wěn)定性；提高生物利用度；提高可溶性；減少不良作用；實(shí)現(xiàn)本領(lǐng)域的技術(shù)人員所熟知的按時療法；和提高患者的順從性；或以上的任何組合。載體、藥物遞送體系和高級藥物遞送體系包括但不限于聚合物例如纖維素及衍生物、多糖例如葡聚糖及衍生物、淀粉和衍生物、聚(乙烯醇)、丙烯酸酯與異丁烯酸酯的聚合物、聚丙交酯與聚乙交酯及其嵌段共聚物、聚乙二醇、載體蛋白例如白蛋白、；疑月交例如熱月交凝體系(thermogellingsystem)、例如本4頁i或的技術(shù)人員所熟知的嵌段共聚物體系；微團(tuán)、脂質(zhì)體、微球體、納米微粒、液晶及其分散體、L2相及其分散體，其為脂質(zhì)-水體系中相行為領(lǐng)域的技術(shù)人員所熟知；聚合微團(tuán)、復(fù)合型乳劑、自乳化、自微乳化、環(huán)糊精及其衍生物、以及樹枝狀大分子。本發(fā)明的組合物可用于配制固體、半固體、粉末以及溶液，用于通過使用例如定量吸入器、干粉吸入器和霧化器(所有的這些都是本領(lǐng)域的技術(shù)人員所熟知的裝置)肺部施用本發(fā)明的化合物。本發(fā)明的組合物具體可用于配制控釋、持續(xù)釋放、延釋、延釋和慢釋藥物遞送體系。更具體地說但不限于，組合物可用于配制胃腸外控釋體系和持續(xù)釋放體系(兩種體系皆導(dǎo)致給藥次數(shù)減低許多倍)，此為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所熟知。甚至更優(yōu)選皮下施用控釋體系和持續(xù)釋放體系。在不限制本發(fā)明范圍的情況下，有用的控釋體系和組合物的實(shí)例為水凝膠、油質(zhì)凝膠、液晶、聚合微團(tuán)、微球體、納米微粒。產(chǎn)生對本發(fā)明組合物有用的控釋體系的方法包括但不限于結(jié)晶、濃縮、共結(jié)晶、沉淀、共沉淀、乳化、分散、高壓均化、膠嚢化、噴霧干燥、微膠嚢化、凝聚、相分離、溶劑蒸發(fā)以產(chǎn)生微球體、擠壓以及超臨界流體法。請廣泛參考HandbookofPharmaceuticalControlledRelease(Wise,D丄,編4專，MarcelDekker，NewYork,2000)和DrugandthePharmaceuticalSciencesvol.99:ProteinFormulationandDelivery(MacNally,E丄編輯，MarcelDekker,NewYork,2000)。胃腸道外給藥可以借助注射器(任選鋼筆狀注射器)通過皮下、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)或靜脈注射來進(jìn)行。可供選擇的是，胃腸道外給藥可以通過輸液泵來進(jìn)行。另一種選擇是一種組合物，所述組合物可以是用于以鼻內(nèi)或肺部噴霧的形式施用本發(fā)明的化合物的溶液或混懸液。作為再一種選擇，含有本發(fā)明化合物的所述藥物組合物也可以適于透皮給藥，例如通過無針注射，或由貼劑任選離子導(dǎo)入貼劑(iontophoreticpatch),或經(jīng)粘膜(例如口腔含化)給藥。本發(fā)明的化合物可以在載體中作為溶液、混懸液或干并分，通過使用任何已知類型的適用于肺部藥物遞送的裝置經(jīng)由肺部途徑來給藥。這些裝置的實(shí)例包括但不限于用于肺部藥物遞送的三種通用型氣霧劑產(chǎn)生裝置，并可以包括噴射式或超聲式霧化器、定量吸入器或干粉吸入器(參見YuJ,ChienYW.Pulmonarydrugdelivery:Physiologicandmechanisticaspects(月申部藥物遞送生理學(xué)與才幾才成學(xué)方面).CritRevTherDrugCarrSys14(4)(1997)395-453)?；跇?biāo)準(zhǔn)化測試方法，粒子的空氣動力學(xué)粒徑(4)定義為單位密度(lg/cm^的參考標(biāo)準(zhǔn)球形粒子的幾何等效粒徑。在最簡單的情況下，對于球形粒子而言，如以下所描述的，da與參考粒徑(d)相關(guān)，為密度比平方根的函數(shù)《=1^對于非球形顆粒則對以上關(guān)系進(jìn)行修改(參考EdwardsDA，Ben-JebriaA,LangerR.Recentadvancesinpulmonarydrugdeliveryusinglarge,porousinhaledparticles(使用大的多孔吸入顆粒進(jìn)行肺部藥物遞送的最新進(jìn)展).JApplPhysiol84(2)(1998)379-385)。術(shù)語"MMAD"和"MMEAD"于本領(lǐng)域有充分描述并且眾所周知(參考EdwardsDA,Ben-JebriaA,LangerR,代表了對空氣動力學(xué)粒徑分布中值的度量。Recentadvancesinpulmonarydrugdeliveryusinglarge,porousinhaledparticles(使用大分多孔吸入顆粒進(jìn)行肺部藥物遞送的最新進(jìn)展).JApplPhysiol84(2)(1998)379-385)。質(zhì)量中值空氣動力學(xué)粒徑(MMAD)和質(zhì)量中值有效空氣動力學(xué)粒徑(MMEAD)可交換使用，是統(tǒng)計(jì)學(xué)參數(shù)，并且從經(jīng)驗(yàn)上描述了與氣溶膠粒子沉積于肺內(nèi)的可能性相關(guān)、而與實(shí)際形狀、大小或密度無關(guān)的氣溶膠粒徑(參考EdwardsDA，Ben-JebriaA,LangerR.Recentadvancesinpulmonarydrugdeliveryusinglarge,porousinhaledparticles("f吏用大的多孔吸入顆粒進(jìn)行肺部藥物遞送的最新進(jìn)展).JApplPhysiol84(2)(1998)379-385)。通常根據(jù)使用撞擊器(impactor)(測量空氣中粒子慣性行為的儀器)的測量結(jié)果計(jì)算MMAD。在又一實(shí)施方案中，可以通過任何已知的氣霧化技術(shù)(例如噴霧)使所述制劑霧化，以實(shí)現(xiàn)氣溶膠粒子的MMAD少于10|um，更優(yōu)選為1-5pm，最優(yōu)選為1-3pm。優(yōu)選的粒徑基于對于將藥物遞送到肺部深處最有效的尺寸，其中蛋白質(zhì)任選#1吸收(參考EdwardsDA,Ben-JebriaA，LangerA,Recentadvancesinpulmonarydrugdeliveryusinglarge,porousinhaledparticles(寸吏用大的多孑L吸入顆粒進(jìn)行肺部藥物遞送的最新進(jìn)展).JApplPhysiol84(2)(1998)379-385)。包含本發(fā)明化合物的肺制劑的肺部深處沉積可以任選通過使用所述吸入技術(shù)的改進(jìn)方法來進(jìn)一步優(yōu)化，例如但不限于放緩吸入流速(例如30L/min)、屏住呼吸以及對刺激計(jì)時。術(shù)語"穩(wěn)定的制劑"指的是物理穩(wěn)定性提高、化學(xué)穩(wěn)定性提高或物理及化學(xué)穩(wěn)定性提高的制劑。本文所使用的蛋白制劑的術(shù)語"物理穩(wěn)定性"指的是蛋白質(zhì)因暴露在熱-機(jī)械應(yīng)力下和/或與被去穩(wěn)定的界面和表面(例如疏水表面和界面)相互作用而導(dǎo)致形成無生物活性和/或不溶性蛋白質(zhì)聚合物的傾向。水性蛋白制劑的物理穩(wěn)定性通過以下方式來進(jìn)行評價(jià)在使裝在合適的容器(例如藥筒或小瓶)中的制劑于不同的溫度在熱-機(jī)械應(yīng)力(例如攪拌)下暴露不同時間之后，進(jìn)行目測檢查和/或濁度測量。制劑的目測檢查在黑暗背景下用銳聚焦光來進(jìn)行。制劑的濁度以目測計(jì)分來表征，目測計(jì)分評定渾濁程度的等級，例如等級為0-3(表現(xiàn)出不渾濁的制劑對應(yīng)于目測計(jì)分0，而在日光下表現(xiàn)出可見渾濁的制劑對應(yīng)于目測計(jì)分3)。當(dāng)制劑在日光下表現(xiàn)出可見的渾濁時，則此制劑被歸類為就蛋白質(zhì)聚集而言物理不穩(wěn)定?？晒┻x擇的是，制劑的濁度可以通過為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的簡單濁度測量值來評價(jià)。水性蛋白制劑的物理穩(wěn)定性也可以通過使用蛋白質(zhì)構(gòu)象狀態(tài)的光譜劑或探針來評價(jià)。探針優(yōu)選是優(yōu)先結(jié)合蛋白質(zhì)的非天然構(gòu)象異構(gòu)體的小分子。蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的小分子光譜探針的一個實(shí)例是硫磺素T。硫磺素T是已被廣泛地用于檢測淀粉狀蛋白原纖維的熒光染料。在所述原纖維以及也可能有其他蛋白質(zhì)構(gòu)型的存在下，當(dāng)硫磺素T與原纖維蛋白形式結(jié)合時，會在約450nm下產(chǎn)生新的激發(fā)最大值以及在約482nm下產(chǎn)生增強(qiáng)的發(fā)射。在這些波長下，未結(jié)合的減磺素T基本上是非熒光的。其他小分子可以用作蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)從天然狀態(tài)變?yōu)榉翘烊粻顟B(tài)的探針。例如優(yōu)先結(jié)合蛋白質(zhì)的外露疏水補(bǔ)片(hydrophobicpatch)的"疏水補(bǔ)片"探針。所述疏水補(bǔ)片通常包埋在以其天然狀態(tài)存在的蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)中，但隨著蛋白質(zhì)開始展開或變性它會轉(zhuǎn)為外露。這些小分子光譜探針的實(shí)例是芳香族疏水染料，例如蒽(antrhacene)、吖啶、菲咯啉等。其他光譜探針是金屬-氨基酸絡(luò)合物，例如疏水性氨基酸(例如苯丙氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、甲硫氨酸和纈氨酸等)的鈷金屬絡(luò)合物。本文所使用的術(shù)語蛋白制劑的"化學(xué)穩(wěn)定性"指的是這樣的蛋白結(jié)構(gòu)的化學(xué)共價(jià)變化，其導(dǎo)致形成與天然蛋白結(jié)構(gòu)相比生物效能可能更低和/或免疫原性特性潛在增強(qiáng)的的化學(xué)降解產(chǎn)物。根據(jù)天然蛋白質(zhì)的類型與性質(zhì)以及蛋白質(zhì)所暴露的環(huán)境，可以形成各種化學(xué)降解產(chǎn)物。正如本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的，化學(xué)降解的消除最可能不能完全避免，而在蛋白制劑貯存或使用期間經(jīng)常看到化學(xué)降解產(chǎn)物數(shù)量的增加。大部分蛋白易于脫酰胺，這是谷氨酰胺酰或天冬酰胺酰殘基中的側(cè)鏈酰氨基水解形成游離羧酸的過程。其他降解途徑包括生成高分子量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，其中兩個或更多個蛋白質(zhì)分子通過轉(zhuǎn)酰胺和/或二硫化物相互作用彼此共價(jià)結(jié)合，從而導(dǎo)致形成共價(jià)結(jié)合的二聚體、寡聚體以及多聚體的降解產(chǎn)物(&ah7—o/"92)。氧化(例如曱硫氨酸殘基的氧化)可以被敘述為化學(xué)降解的另一種變體。蛋白制劑的化學(xué)穩(wěn)定性可以通過以下方法評估在使蛋白制劑暴露于不同的環(huán)境條件下以后，于不同的時間點(diǎn)測量化學(xué)降解產(chǎn)物的量(通?？梢酝ㄟ^例如提高溫度加快降解產(chǎn)物的形成)。每種單個降解產(chǎn)物的量通常通過根據(jù)分子大小和/或電荷使用各種層析技術(shù)(例如SEC-HPLC和/或RP-HPLC)分離降解產(chǎn)物來檢測。因此，如上文所概述的，"穩(wěn)定的制劑"指的是物理穩(wěn)定性提高、化學(xué)穩(wěn)定性提高或物理及化學(xué)穩(wěn)定性提高的制劑。一般來說，制劑必須在使用或貯存(符合所推薦的使用及貯存條件)期間保持穩(wěn)定，直至達(dá)到失效日期。在本發(fā)明的一個實(shí)施方案中，包含本發(fā)明化合物的藥物制劑可在使用超過6周和貯存超過3年期間保持穩(wěn)定。在本發(fā)明的另一個實(shí)施方案中，包含本發(fā)明化合物的藥物制劑可在使用超過4周和貯存超過3年期間保持穩(wěn)定。在本發(fā)明的又一個實(shí)施方案中，包含本發(fā)明化合物的藥物制劑可在使用超過4周和貯存超過2年期間保持穩(wěn)定。在本發(fā)明的再一個實(shí)施方案中，包含本發(fā)明化合物的藥物制劑可在使用超過2周和貯存超過2年期間保持穩(wěn)定。另一方面，本發(fā)明涉及本發(fā)明的化合物在藥物制備中的應(yīng)用。在一個實(shí)施方案中，使用本發(fā)明的化合物來制備用于治療或預(yù)防高血糖、2型糖尿病、葡萄糖耐量減低、1型糖尿病、肥胖癥、高血壓、X綜合征、血脂異常、認(rèn)知障礙、動脈粥樣硬化、心肌梗塞、中風(fēng)、冠心病和其他心血管疾病、炎性腸病、消化不良以及胃潰瘍的藥物。在另一個實(shí)施方案中，使用本發(fā)明的化合物來制備用于延緩或預(yù)防2型糖尿病病情發(fā)展的藥物。在另一個實(shí)施方案中，使用本發(fā)明的化合物制備用于減少食物攝取、減少(3細(xì)胞程序性死亡、增強(qiáng)卩細(xì)胞功能與增加卩細(xì)胞群集、和/或用于恢復(fù)卩細(xì)胞對葡萄糖敏感性的藥物。本發(fā)明的一個方面，提供用作藥物的本發(fā)明的衍生物，所述藥物用于治療或預(yù)防高血糖、2型糖尿病、葡萄糖耐量減低、1型糖尿病、肥胖癥、高血壓、X綜合征、血脂異常、認(rèn)知障礙、動脈粥樣石更化、心力幾梗塞、冠心病和其他心血管疾病、中風(fēng)、炎性腸病、消化不良以及胃潰瘍的藥物，或者被提供用于延緩或預(yù)防2型糖尿病病情發(fā)展，或者用于減少食物攝取、減少(3細(xì)胞程序性死亡、增強(qiáng)(3細(xì)胞功能與增加卩細(xì)胞群集、和/或用于恢復(fù)p細(xì)胞對葡萄糖的敏感性。本發(fā)明的又一方面，提供用于治療或預(yù)防高血糖、2型糖尿病、葡萄糖耐量減低、1型糖尿病、肥胖癥、高血壓、X綜合征、血脂異常、認(rèn)知障礙、動脈粥樣硬化、心肌梗塞、冠心病和其他心血管疾病、中風(fēng)、炎性腸病、消化不良以及胃潰瘍，或者用于延緩或預(yù)防2型糖尿病病情發(fā)展，或者用于減少食物攝取、減少(3細(xì)胞程序性死亡、增強(qiáng)卩細(xì)胞功能與增加p細(xì)胞群集、和/或用于恢復(fù)卩細(xì)胞對葡萄糖的敏感性的方法，所述方法包括給予需要這種治療的患者治療有效量的本發(fā)明衍生物。用本發(fā)明化合物的治療也可以與第二種或更多種藥理活性物質(zhì)聯(lián)合，所述藥理活性物質(zhì)例如選自抗糖尿病、減肥藥、食欲調(diào)節(jié)劑、抗高血壓藥、用于治療和/或預(yù)防因糖尿病產(chǎn)生或與之相關(guān)的并發(fā)癥的藥劑、以及用于治療或預(yù)防因肥胖癥產(chǎn)生或與之相的并發(fā)癥和功能紊亂的藥劑。這些藥理活性物質(zhì)的實(shí)例為胰島素、磺酰脲、雙胍、美格列奈、葡萄糖苷酶抑制劑、胰高血糖素拮抗藥、DPP-IV(二肽基肽酶IV)抑制劑、參與刺激糖異生和/或糖原分解的肝酶的抑制劑、葡萄糖攝取調(diào)節(jié)劑、修飾脂類代謝的化合物例如抗高血脂藥如HMGCoA抑制劑(他汀類)的、降低食物攝取的化合物、RXR激動劑或作用于p細(xì)胞的ATP依賴性鉀通道的藥劑；考來烯胺、考來替泊、氯貝丁酯、吉非貝齊、洛伐他汀、普伐他汀、辛伐他汀、普羅布考、右曱狀腺素、那格列奈(neteglinide)、瑞格列奈；P阻滯藥，例如阿普洛爾、阿替洛爾、噻嗎洛爾、吲哚洛爾、普萘洛爾與美托洛爾；ACE(血管緊張素轉(zhuǎn)化酶)抑制劑，例如貝那普利、卡托普利、依那普利、福辛普利、賴諾普利、alatriopril、喹那普利和雷米普利；鈣通道阻斷劑，例如硝苯地平、非洛地平、尼卡地平、伊拉地平、尼莫地平、地爾硫萆和維拉帕米；以及a-阻斷劑，例如多沙唑嗪、烏拉地爾、哌唑溱和特拉唑。秦；CART(可卡因苯丙胺調(diào)控的轉(zhuǎn)錄物)激動劑、NPY(神經(jīng)肽Y)拮抗劑、MC4(黑皮質(zhì)素4)激動劑、食欲肽(orexin)拮抗劑、TNF(腫瘤壞死因子)激動劑、CRF(促腎上腺皮質(zhì)素釋放因子)激動劑、CRFBP(促腎上腺皮質(zhì)素釋放因子結(jié)合蛋白)拮抗劑、尿皮質(zhì)素(urocortin)激動劑、P3激動劑、MSH(促黑素細(xì)胞激素)激動劑、MCH(黑素細(xì)胞收縮激素(melanocyte-concentratinghormone))拮抗劑、CCK(縮膽嚢素)激動劑、血清素重?cái)z取抑制劑、血清素與去曱腎上腺素?cái)z取抑制劑、混合的血清素與去曱腎上腺素能化合物、5HT(血清素)激動劑、鈴蟾肽激動劑、甘丙肽拮抗劑、生長激素、生長激素釋放化合物、TRH(促曱狀腺素釋放激素)激動劑、UCP2或3(解偶聯(lián)蛋白2或3)調(diào)節(jié)劑、瘦蛋白激動劑、DA激動劑(溴隱亭、doprexin)、脂肪酶/淀粉酶抑制劑、RXR(視黃醇類X受體)調(diào)節(jié)劑、TR(3激動劑；組胺H3拮抗劑、胃泌素和胃泌素類似物。應(yīng)當(dāng)理解的是，本發(fā)明的化合物與一種或更多種上述化合物以及任選的一種或更多種另外的藥理活性物質(zhì)的任何合適的組合，都^L認(rèn)為在本發(fā)明的范圍內(nèi)。本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方案1.具有SEQIDNo.1的人胰島淀粉樣多肽或其類似物的衍生物，其中a)第2-37位中的氨基酸殘基已被賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代，其中所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，或者b)第1位的賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接；其中所述氨基酸編號與SEQIDNo.1中的氨基酸編號一致。2.具有SEQIDNo.1的人胰島淀粉樣多肽或其類似物的實(shí)施方案1的衍生物，其中第2-37位中的氨基酸殘基已被賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代，其中所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。3.實(shí)施方案1或2中任一項(xiàng)的衍生物，其中第2、3、4、5或6位的氨基酸殘基被賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代，其中所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。4.實(shí)施方案1或2中任一項(xiàng)的衍生物，其中第23、24、25、26、27或28位的氨基酸殘基被賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代，其中所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。5.實(shí)施方案1或2中任一項(xiàng)的衍生物，其中第32、33、34、35、36或37位的氨基酸殘基被賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代，其中所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。6.實(shí)施方案1-5中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述衍生物與人胰島淀粉樣多肽相比具有1-6個氨基酸取代。7.實(shí)施方案1-5中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述衍生物與人胰島淀粉樣多肽相比具有1-4個氨基酸取代。8.實(shí)施方案1-7中任一項(xiàng)的衍生物，其中第23-29位的-FGAILSS-(SEQIDNo.2)被改變成-FGPILPP-(SEQIDNo.3)。9.實(shí)施方案1-7中任一項(xiàng)的衍生物，其中第23-29位的-FGAILSS-(SEQIDNo.2)被改變成-FGEILSS-(SEQIDNo.4)。10.實(shí)施方案1-7中任一項(xiàng)的衍生物，其中第23-29位的-FGAILSS-(SEQIDNo.2)被改變成-FGDILSS-(SEQIDNo.5)。11.實(shí)施方案1的衍生物，其中所述衍生物是SEQIDNo.1的人胰島淀粉樣多肽，其中a)人胰島淀粉樣多肽的第2-37位中的氨基酸殘基已被賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代，其中所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，或者b)人胰島淀粉樣多肽的第1位的賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。12.實(shí)施方案11的衍生物，其中所述衍生物是SEQIDNo.1的人胰島淀粉樣多肽，其中人胰島淀粉樣多肽的第2-37位中的氨基酸殘基已被賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代，其中所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。13.實(shí)施方案11或12中任一項(xiàng)的衍生物，其中第2、3、4、5或6位的氨基酸殘基被賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代，其中所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。14.實(shí)施方案11或12中任一項(xiàng)的衍生物，其中第23、24、25、26、27或28位的氨基酸殘基被賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代，其中所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。15.實(shí)施方案11或12中任一項(xiàng)的衍生物，其中第32、33、34、35、36或37位的氨基酸殘基被賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代，其中所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。16.實(shí)施方案11-15中任一項(xiàng)的衍生物，其中第23-29位的-FGAILSS-(SEQIDNo.2)被改變成誦FGPILPP-(SEQIDNo.3)。17.實(shí)施方案11-15中任一項(xiàng)的衍生物，其中第23-29位的-FGAILSS-(SEQIDNo.2)被改變成-FGEILSS.(SEQIDNo.4)。18.實(shí)施方案11-15中任一項(xiàng)的衍生物，其中第23-29位的-FGAILSS-(SEQIDNo.2)被改變成-FGDILSS畫(SEQIDNo.5)。19.實(shí)施方案1-18中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述衍生物與聚乙二醇聚合物連接。20.實(shí)施方案19的衍生物，其中所述聚乙二醇聚合物是具有至少30kD的分子量的聚乙二醇。21.實(shí)施方案18-20中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述聚乙二醇聚合物是支鏈的聚乙二醇。22.實(shí)施方案1-18中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述衍生物與白蛋白結(jié)合殘基連接。23.實(shí)施方案22的衍生物，其中所述白蛋白結(jié)合殘基是親脂性殘基。24.實(shí)施方案22的衍生物，其中所述白蛋白結(jié)合殘基在生理pH值下帶負(fù)電。25.實(shí)施方案22的衍生物，其中所述白蛋白結(jié)合殘基包含可以帶負(fù)電的基團(tuán)。26.實(shí)施方案25的衍生物，其中所述白蛋白結(jié)合殘基包含羧酸基。27.實(shí)施方案22-26中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述白蛋白結(jié)合殘基與白蛋白非共價(jià)結(jié)合。28.實(shí)施方案22-27中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述白蛋白結(jié)合殘基對Ajk清白蛋白的結(jié)合親和力低于約10pM或低于約1pM。29.實(shí)施方案22的衍生物，其中所述白蛋白殘基選自直鏈烷基、支鏈烷基、具有co-羧酸基的基團(tuán)、和部分或完全氫化的環(huán)戊烷并菲骨架。30.實(shí)施方案22的衍生物，其中所述白蛋白結(jié)合殘基是汽巴克隆基殘基。31.實(shí)施方案23的衍生物，其中所述親脂性殘基包含部分或完全氫化的環(huán)戊烷并菲骨架。32.實(shí)施方案23的衍生物，其中所述白蛋白結(jié)合殘基具有6-40個碳原子、8-26個碳原子或8-20個碳原子。33.實(shí)施方案23的衍生物，其中所述白蛋白結(jié)合殘基是選自CH3(CH2)rCO-的?；?，其中r是4-38的整數(shù)，優(yōu)選4-24的整數(shù)，所述白蛋白結(jié)合殘基更優(yōu)選選自CH3(CH2)6CO-、CH3(CH2)8CO-、CH3(CH2)10CO-、CH3(CH2)12CO-、CH3(CH2)14CO-、CH3(CH2)16CO-、CH3(CH2)18CO-、CH3(CH2)2oCO曙和CH3(CH2)22CO-。34.實(shí)施方案23的衍生物，其中所述白蛋白結(jié)合殘基是直鏈或支鏈鏈烷a，w-二羧酸的酰基。35.實(shí)施方案23的衍生物，其中所述白蛋白結(jié)合殘基是選自HOOC(CH2)sCO-的?；?，其中s是4-38的整數(shù)，優(yōu)選4-24的整數(shù)，所述白蛋白結(jié)合殘基更優(yōu)選選自HOOC(CH2)14CO-、HOOC(CH2)16CO-、HOOC(CH2)18CO-、HOOC(CH2)20CO-和HOOC(CH2)22CO-。36.實(shí)施方案23的衍生物，其中所述白蛋白結(jié)合殘基是式CH3(CH2)vCO-NHCH(COOH)(CH2)2CO-的基團(tuán)，其中v為10-24的整數(shù)。37.實(shí)施方案23的衍生物，其中所述白蛋白結(jié)合殘基是式CH3(CH2)wCO-NHCH((CH2)2COOH)CO-的基團(tuán)，其中w為8-24的整數(shù)。38.實(shí)施方案23的衍生物，其中所述白蛋白結(jié)合殘基是式COOH(CH2)xCO-的基團(tuán)，其中x為8-24的整數(shù)。39.實(shí)施方案23的衍生物，其中所述白蛋白結(jié)合殘基是式-麗CH(COOH)(CH2)4NH-CO(CH2)yCH3的基團(tuán)，其中y為8-18的整數(shù)。40.實(shí)施方案22的衍生物，其中所述白蛋白結(jié)合殘基是肽，例如包含少于40個氨基酸殘基的肽。41.實(shí)施方案22-40中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述白蛋由結(jié)合殘基任選通過接頭經(jīng)由賴氨酸殘基的s-氨基連接。42.實(shí)施方案22-40中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述白蛋白結(jié)合殘基任選通過接頭經(jīng)由半胱氨酸殘基連接。43.藥物組合物，其包含實(shí)施方案1-42中任一項(xiàng)的書f生物和藥學(xué)上可接受的賦形劑。44.實(shí)施方案43的藥物組合物，其適用于胃腸道外給藥。45.實(shí)施方案1-42中任一項(xiàng)的衍生物在制備藥物中的應(yīng)用。46.實(shí)施方案1-42中任一項(xiàng)的衍生物在制備用于治療或預(yù)防以下疾病的藥物中的應(yīng)用高血糖、2型糖尿病、葡萄糖耐量減低、1型糖尿病、肥胖癥、高血壓、X綜合征、血脂異常、認(rèn)知障礙、動脈粥樣硬化、心肌梗塞、冠心病和其他心血管疾病、中風(fēng)、炎性腸病、消化不良以及胃潰瘍。47.實(shí)施方案1-42中任一項(xiàng)的衍生物在制備用于延緩或預(yù)防2型糖尿病病情發(fā)展的藥物中的應(yīng)用。48.實(shí)施方案1-42中任一項(xiàng)的衍生物在制備用于減少食物攝取、減少(3細(xì)胞程序性死亡、增強(qiáng)P細(xì)胞功能與增加p細(xì)胞群集、和/或以恢復(fù)J3細(xì)胞對葡萄糖的敏感性的藥物中的應(yīng)用。49.用于增加人胰島淀粉樣多肽或其類似物在患者中作用時間的方法，其特征表現(xiàn)為a)通過用賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代并通過使所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，來修飾第2-37位中的氨基酸殘基，或者b)使第1位的賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接；其中所述氨基酸編號與SEQIDNo.1中的氨基酸編號一致。50.實(shí)施方案49的方法，其中人胰島淀粉樣多肽或其類似物在患者中的作用時間增至超過約40小時。51.實(shí)施方案49或50中任一項(xiàng)的方法，其中人胰島淀粉樣多肽或其類似物如在實(shí)施方案1-41的任一項(xiàng)中所進(jìn)一步定義。前述描述中所公開的特征可以是用于實(shí)現(xiàn)本發(fā)明各種形式的材料及其組合。本文中所引用的所有參考資料(包括出版物、專利申請以及專利)在此引作參考，其程度就如同每一參考資料都個別地并明確地被指明引作參考和全文陳述于此一樣。文中所用到的所有標(biāo)題與小標(biāo)題僅為方便，而不應(yīng)被解釋成以任何方式限制本發(fā)明。本發(fā)明包括上述要素在所有可能的變體中的任何組合，除非在本文中另作指明或相反明顯地與上下文相抵觸。在上下文中用于描述本發(fā)明的術(shù)語"a"和"an"和"所述"以及類似的指示語將被解釋成涵蓋了單數(shù)與復(fù)數(shù)，除非在本文中另作指明或明顯地與上下文相^ii。本文中范圍的記載僅旨在用作個別地提及屬于所述范圍的每個單獨(dú)數(shù)值的簡便方法，除非于此另作指明，而每個單獨(dú)數(shù)值引入說明書中，正如它在本文中單獨(dú)地被記載一樣。除非另有說明，否則本文提供的所有準(zhǔn)確數(shù)值代表的是相應(yīng)的近似值(例如可以認(rèn)為所提供的關(guān)于特定系數(shù)或測量數(shù)值的所有準(zhǔn)確例示性數(shù)值可被認(rèn)為也提供了相應(yīng)的近似測量值，合適時用"約"來修飾)。在本文中所描述的所有方法可以以任何適當(dāng)?shù)捻樞騺磉M(jìn)行，除非在本文中另作指明或明顯地與上下文相抵觸。在本文中所提供的任何和所有實(shí)例或例示性用語(例如"例如")的使用僅旨在以更好地闡明本發(fā)明，而非限制本發(fā)明的范圍，除非另作指明。在本說明書中的任何用語都不應(yīng)被解釋成表明任何要素是實(shí)施本發(fā)明所必需的，除非有同樣的明確敘述。本文中對專利文件的引用以及引入僅為了方便，而并不反映這些專利文件的有效性、專利性和/或可實(shí)施性的任何觀點(diǎn)。在本文中關(guān)于一個或多個要素使用諸如"包含"、"具有"、"包括"、"含有"的術(shù)語來對本發(fā)明的任何方面或?qū)嵤┓桨高M(jìn)行描述時，其意圖在于為"由"所述特定的一個或多個要素"組成"或"基本上由(所述要素)組成"，或者"基本上包含"所述要素的本發(fā)明類似方面和實(shí)施方案提供支持，除非另有說明或明顯地與上下文相抵觸(例如在本文中描述為包含特定要素的制劑應(yīng)該被理解成也描述了由所述要素組成的制劑，除非另有說明或明顯地與上下文相抵觸)。本發(fā)明在適用法律允許的最大范圍包括了本文中提出的方面或求利要求中所記載主題的所有修改與等同方案。在以下代表性的方法和實(shí)施例中進(jìn)一步闡述本發(fā)明，然而所述方法和實(shí)施例并非旨在以任何形式限制本發(fā)明的范圍。測定方法藥理學(xué)測定(I)-用于用胰島淀粉樣多肽衍生物測試對食欲功效的實(shí)驗(yàn)方案，使用隨意喂食的大鼠模型。來自丹麥M&B育種與研究中心A/S(M&BBreedingandResearchCentreA/S,Denmark)的TAC:SPRD@mol大鼠或Wistar大鼠用于此實(shí)驗(yàn)。在實(shí)驗(yàn)開始時，大鼠體重為200-250g。大鼠在實(shí)驗(yàn)開始前至少10-14天達(dá)到，它們的體重為180-200g。以6-8只大鼠的組別測試每一劑量的衍生物。在每個系列的測試中，都使用6-8只大鼠的賦形劑組。當(dāng)這些動物達(dá)到時，將它們單獨(dú)地放在光照/黑暗時間顛倒的室中(早上7:30關(guān)燈，下午7:30關(guān)燈)，亦即日間關(guān)燈而夜間開燈。因?yàn)榇笫笠话闶窃诠饩€移走時開始攝食，并且在夜間完成它們每天攝食的主要部分，所以這種設(shè)置導(dǎo)致其開始攝食時間轉(zhuǎn)變?yōu)樵缟?:30，這時正好關(guān)燈。在10-14天的馴化期間，這些大鼠可以自由地取食和飲水。在此期間對所述動物處理至少3次。實(shí)驗(yàn)在大鼠的養(yǎng)籠中進(jìn)行。臨服藥前根據(jù)體重將大鼠隨機(jī)地分到各個治療組別(n=6-8)。在早上7:00至早上7:45之間根據(jù)體重以0.01-3mg/kg溶液經(jīng)腹膜內(nèi)(ip)、口服(po)或皮下(sc)施用對其給藥。記錄每一組的給藥時間。給藥后，將大鼠放回養(yǎng)籠，在籠中它們?nèi)∈澈惋嬎小Ｍㄟ^聯(lián)機(jī)登記或手工逐個地連續(xù)記錄食物消耗情況，每小時記錄一次持續(xù)7小時，然后24小時以及有時48小時后再進(jìn)行記錄。在實(shí)驗(yàn)期結(jié)束時，處小鼠以無痛死亡。各個數(shù)據(jù)記錄在微軟excel工作表中。在應(yīng)用異常值的Grubbs統(tǒng)計(jì)評估檢驗(yàn)法之后將異常值排除，使用GmphPadPrism程序使結(jié)果以圖來表示。藥理學(xué)測定(II)-用于用胰島淀粉樣多肽衍生物測試對食欲功效的實(shí)驗(yàn)方案，使用定時喂食的大鼠模型。來自丹麥M&B育種與研究中心A/S(M&BBreedingandResearchCentreA/S,Denmark)的TAC:SPRD@mol大鼠或Wistar大鼠用于此實(shí)驗(yàn)。在實(shí)驗(yàn)開始時，大鼠的體重為200-250g。這些大鼠在實(shí)驗(yàn)開始前至少10-14天達(dá)到，它們的體重為180-200g。以6-8只小鼠組別測試每一劑量的衍生物。在每個系列的測試中，都使用了6-8只小鼠的賦形劑組。當(dāng)這些動物達(dá)到時，將它們單獨(dú)關(guān)養(yǎng)。開始研究前至少7天，開始按照喂食時間表對它們進(jìn)行調(diào)馴，使它們以3-7小時的排定時間周期自由飲食。在每天的剩余時間內(nèi)不能讓大鼠取食，而僅能飲水。在一星期之內(nèi)大鼠將每天完全按照設(shè)定的時間表來吃定量的食物。因?yàn)榇笫笠话阍诠饩€移走時開始攝食，并且在夜間完成它們每天攝食的主要部分，所以這種設(shè)置允許在日間監(jiān)測攝食情況，并且將通常意味著與隨意喂食的大鼠相比賦形劑組中變化更少。在10-14天的馴化期間，這些大鼠可以自由地々大食。在此期間對該動物處理至少3次。實(shí)驗(yàn)在大鼠的養(yǎng)籠中進(jìn)行。臨給藥前根據(jù)體重將大鼠隨機(jī)地分到各個治療組(n-6-8)。在給定取食前15至30分鐘之間，才艮據(jù)體重以0.01-3mg/kg溶液經(jīng)腹膜內(nèi)(ip)、口服(po)或皮下(sc)施用以對它們給藥。記錄每一組的給藥時間。給藥后，將大鼠放回養(yǎng)籠中，在籠中它們可以飲食。通過聯(lián)機(jī)登記或手工在時間表內(nèi)每小時逐個地連續(xù)記錄食物消耗情況，在實(shí)驗(yàn)期結(jié)束時，處小鼠以無痛死亡。各個數(shù)據(jù)記錄在微軟excel工作表中。在應(yīng)用異常值的Grubbs統(tǒng)計(jì)評估檢驗(yàn)法之后將異常值排除，使用GraphPadPrism程序使結(jié)果以圖來表示。胰島淀粉樣多肽受體結(jié)合測定使用來自以下描述的胰島淀粉樣多肽3(a)/CRE-luc細(xì)胞的膜進(jìn)行了受體結(jié)合測定。示蹤物是在N末端酪氨酸中用1251碘標(biāo)記的Tyr-普蘭林肽。使SPA-WGA珠(GEHealthcareRPNQ0001)與膜、示蹤物以及胰島淀粉樣多肽類似物的系列稀釋液，在含有50mMHepes、5mMMgCl2、5mMEGTA、0.025%吐溫-20，pH7.4的緩沖液的96孔Optiplate中孵育。于室溫下孵育2小時后，將板離心并在Topcounter上讀數(shù)。計(jì)算EC50作為受體親和力的測量結(jié)果。胰島淀粉樣多肽熒光素酶測定1.胰島淀粉樣多肽測定概述先前業(yè)已7〉開的是(PoynerDR等2002，PharmacologicalReviews54(2)233-246)，胰島淀粉樣多肽激活胰島淀粉樣多肽受體(降鈣素受體和受體激活修飾性肽RAMP的共表達(dá))導(dǎo)致cAMP在細(xì)胞內(nèi)濃度的增加。所以，在含有多拷貝cAMP應(yīng)答元件(CRE)的啟動子處轉(zhuǎn)錄被激活。因此，有可能通過使用引入到也表達(dá)胰島淀粉樣多肽受體的BHK細(xì)胞中的CRE熒光素酶受體基因，來測量胰島淀粉樣多肽的活性。2.構(gòu)建胰島淀粉樣多肽3(a)/CRE-luc細(xì)胞系用人降4丐素受體(CTa)和CRE應(yīng)答性熒光素酶報(bào)告基因穩(wěn)定轉(zhuǎn)染BHK570細(xì)胞系。使用標(biāo)準(zhǔn)方法用RAMP-3進(jìn)一步轉(zhuǎn)染該細(xì)胞系。這使降4丐素受體轉(zhuǎn)變成胰島淀粉樣多肽3(a)受體。氨曱喋呤、新霉素和潮霉素分別是熒光素酶、降鈣素受體和RAMP-3的選擇標(biāo)記。3.胰島淀粉樣多肽熒光素酶測定將BHK胰島淀粉樣多肽3(a)〃CRE-luc細(xì)胞以約20.000個細(xì)胞/孔的密度接種到白色96孔培養(yǎng)板中，以進(jìn)行活性測定。所述細(xì)胞在100pl的生長培養(yǎng)基(含10%FBS、1%Pen/Strep、1mM丙酮酸鈉、250nM氨曱喋呤、500)tig/ml新霉素和400lag/ml潮霉素的DMEM)中。經(jīng)過于37。C和5%C02下孵育過夜之后，用50ial/孔的測定培養(yǎng)基(DMEM(不含酚紅)、Glumamax、10%FBS和10mMHepes，pH7.4)代替生長培養(yǎng)基。再加入50(il含標(biāo)準(zhǔn)品或樣品的測定緩沖液。經(jīng)過于37。C和5%C02下孵育4小時之后，移去含標(biāo)準(zhǔn)品或樣品的測定培養(yǎng)基并用100pl/孔的PBS代替。進(jìn)一步加入100~/孔的LucLite。將板封好并于室溫下孵育30分鐘。最后在TopCounter(Packard)上以SPC(單光子計(jì)數(shù)^莫式測量發(fā)光情況。實(shí)施例肽合成肽合成方法之一是通過在基于微波的Liberty肽合成儀(CEMCorp.,NorthCarolina)上進(jìn)行的Fmoc化學(xué)法。樹脂是TentagdSRAM，其負(fù)載量為0.24mmol/g。偶聯(lián)化學(xué)是NMP中的DIC/HOAt，使用在NMP中的0.4M氨基酸溶液并且有8-10倍摩爾過量。偶4關(guān)條件為5分鐘于直至70°C。用NMP中的5%哌咬于高至70。C下去保護(hù)。當(dāng)需刻匕學(xué)修飾賴氨酸側(cè)鏈時，將賴氨酸以Lys(mtt)摻入，并通過用Boc-碳酸酯處理來保護(hù)N末端的氨基酸。通過將樹脂懸浮在純六氟異丙醇中20分鐘、隨后用DCM和NMP洗滌，恢復(fù)(repomed)mtt基。賴氨酸的化學(xué)修飾可以通過手動合成或通過在Liberty上的一個或多個自動步驟隨后再通過手動偶聯(lián)來進(jìn)行。PEG化也可以通過使純化的肽與例如含PEG2000-SPA(Nektar)的DMSO反應(yīng)來進(jìn)行。另一種肽合成法是在ABI433上使用HBTU偶聯(lián)的Fmoc化學(xué)法。合成后用DCM洗滌樹脂并干燥，用TFA/TIS/水(92.5/5/2.5)處理2小時、隨后用二乙醚沉淀，來將肽/人杉于脂上切下。進(jìn)一步用二乙醚洗滌并干燥后，使肽以1-2mg/ml重新溶解在水中，將pH調(diào)整到約4.5，用1當(dāng)量的[Pt(IV)乙二胺2C12]C12處理過夜以形成二硫4建。經(jīng)凍干后將肽再溶解在30%乙酸中，使用乙腈/TFA在C18柱上通過標(biāo)準(zhǔn)RP-HPLC來純化?？勺鬟x擇的是，省略凍干，將水溶液直接應(yīng)用到HPLC柱中。通過MALDI-MS確認(rèn)了肽的身份。所用的縮寫DMF:N,N二曱基甲酰胺HBTU:六氟合磷酸2-(lH-苯并三唑-l-基-)-l,1，3，3四曱基脲鏡Fmoc:9H-藥-9-基曱氧羰基Boc:叔丁氧羰基Mtt:4-甲基三苯曱基DCM:二氯曱烷TIS:三異丙J^圭烷)TFA:三氟乙酸NMP:l-曱基-p比咯烷-2-酮HOAt:l-羥基-7-氮雜苯并三唑DIC:二異丙基碳二亞胺實(shí)施例1-28如以下表l中所描述的實(shí)施例l-28的衍生物，根據(jù)上文中在"肽合成"下面所描述的來制備。實(shí)施例1-28的^f汙生物在如上文所描述的"胰島淀粉樣多肽熒光素酶測定"中檢測，結(jié)果在表1中出示。實(shí)施例1-28的衍生物的受體親和力在如上文所描述的"胰島淀粉樣多肽受體結(jié)合測定"中檢測，結(jié)果在表1中出示。使用在20分鐘內(nèi)從10%-90%的乙氰/TFA濃度梯度，在分析型HPLC系統(tǒng)中測量表1中的HPLC洗脫數(shù)據(jù)。下面出示了實(shí)施例編號1的結(jié)構(gòu)以作為示例。展開了第2、7、18和37位殘基的完全結(jié)構(gòu)，而其余的氨基酸殘基僅以其單字母代號出示。整條肽序列1-19在兩個半胱氨酸(第2和7位)之間具有二硫鍵，而且全部都是C末端酰胺。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage63</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage64</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage65</column></row><table>表3<table>tableseeoriginaldocumentpage65</column></row><table>在以上表1中，衍生物的功效用"測定方法，，下面的如上文所描述的"胰島淀粉樣多肽熒光素酶測定，，進(jìn)行測量。在以上表l中，衍生物的親和力用"測定方法"下面的如上文所描述的"胰島淀粉樣多肽受體結(jié)合測定"進(jìn)行測量。在以上表l中，"***，，指的是與普蘭林肽相當(dāng)?shù)墓π?親和力，"**，，指的是比普蘭林肽略低的功效/親和力，指的是比普蘭林肽低得多的功效/親和力。權(quán)利要求1.人胰島淀粉樣多肽或其類似物的衍生物，其中a)第2-37位中的氨基酸殘基已被賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代，其中所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，或者b)第1位的賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，或者c)賴氨酸殘基已被添加到第38位，其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接任選通過接頭來連接；其中所述氨基酸編號與SEQIDNo.1中的氨基酸編號一致。2.權(quán)利要求1的人胰島淀粉樣多肽或其類似物的衍生物，其中a)第2-37位中的氨基酸殘基已被賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代，其中所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，或者b)第1位的賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接；其中所述氨基酸編號與SEQIDNo.1中的氨基酸編號一致。3.權(quán)利要求1-2中任一項(xiàng)的人胰島淀粉樣多肽或其類似物的衍生物，其中第2-37位中的氨基酸殘基已被賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代，其中所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接。4.權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的人胰島淀粉樣多肽或其類似物的衍生物，其中第2-37位中的氨基酸殘基已被賴氨酸殘基取代，其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接；其中所述氨基酸編號與SEQIDNo.1中的氨基酸編號一致。5.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的人胰島淀粉樣多肽或其類似物的衍生物，其中第1位的賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接；其中所述氨基酸編號與SEQIDNo.1中的氨基酸編號一致。6.權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的衍生物，所述衍生物是人胰島淀粉樣多肽的衍生物。7.權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的衍生物，所述衍生物是人胰島淀粉樣多肽類似物的衍生物。8.權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的衍生物，其中第1、11、17、21、22、25、28、29或31位的氨基酸被賴氨酸殘基取代，其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基連接，任選通過接頭來連接。9.權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基通過接頭連接。10.權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述衍生物與人胰島淀粉樣多肽相比具有1-6個氨基酸取代。11.權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述衍生物與人胰島淀粉樣多肽相比具有1-4個氨基酸取代。12.權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)的衍生物，其中第23-29位的-FGAILSS-(SEQIDNo.2)被改變?yōu)?FGPILPP-(SEQIDNo.3)。13.權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)的衍生物，其中第23-29位的-FGAILSS-(SEQIDNo.2)被改變?yōu)閊0￡1!^3-(SEQIDNo.4)。14.權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)的衍生物，其中第23-29位的-FGAILSS-(SEQIDNo.2)被改變?yōu)閊0011^5-(SEQIDNo.5)。15.權(quán)利要求1-14中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述衍生物具有至少4小時的血漿t1/2。16.權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述白蛋白結(jié)合殘基是親酯性殘基。17.權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述接頭是具有下式的親水性接頭B:0]m-(CH2)p]q-NH-其中l(wèi)、m、n和p獨(dú)立地是l-5，而q是0-5。18.權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述白蛋白結(jié)合殘基和接頭結(jié)合為-CXOHCH^-O-KCHzCHs-Ok^CHJp-tNHCXOHCHA-O-KCH^n-0]m-(CH2)p]q-NH-W其中l(wèi)、m、n和p獨(dú)立地是l-5，而q是0-5，W選自CH3(CH2)6CO-、CH3(CH2)8CO-、CH3(CH2)10CO-、CH3(CH2)12CO-、CH3(CH2)14CO-、CH3(CH2)16CO-、CH3(CH2)18CO-、CH3(CH2)20CO-、CH3(CH2)22CO-、HOOC(CH2)14CO-、HOOC(CH2)16CO-、HOOC(CH2)18CO-、HOOC(CH2)20CO-和HOOC(CH2)22CO-。19.權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述白蛋白結(jié)合殘基和接頭結(jié)合為其中B如權(quán)利要求17中所定義，Z是CHs或COOH，V是H或COOH，q是7-21，而w是0-5。20.權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述白蛋白結(jié)合殘基和接頭結(jié)合為其中Z是CHs或COOH，V是H或COOH，q是7-21,w是0-5，而k是0-5。21.權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述白蛋白結(jié)合殘基和接頭結(jié)合為其中Z是CH3或COOH，q是7-21，而k是0-5。22.用作藥物的權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)的衍生物，所述藥物用于治療或預(yù)防高血糖、2型糖尿病、葡萄糖耐量減低、1型糖尿病、肥胖癥、高血壓、X綜合征、血脂異常、認(rèn)知障礙、動脈粥樣硬化、心肌梗塞、冠心病和其他心血管疾病、中風(fēng)、炎性腸病、消化不良以及胃潰瘍，或者用于延緩或預(yù)防2型糖尿病病情發(fā)展，或者用于減少食物攝取、減少(3細(xì)胞程序性死亡、增強(qiáng)卩細(xì)胞功能與增加(3細(xì)胞群集、和/或用于恢復(fù)卩細(xì)胞對葡萄糖的敏感性。23.藥物組合物，其包含權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)的衍生物以及藥學(xué)上可接受的賦形劑。24.用于增加人胰島淀粉樣多肽或其類似物在患者中的作用時間的方法，其特征為a)通過用賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基取代，并通過使所述賴氨酸殘基或半胱氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，來修飾第2-37位中的氨基酸殘基，或者b)使第1位的賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，或者c)將賴氨酸殘基添加到第38位，其中所述賴氨酸殘基與白蛋白結(jié)合殘基或聚乙二醇聚合物連接，任選通過接頭來連接；其中所述氨基酸編號與SEQIDNo.1中的氨基酸編號一致。25.權(quán)利要求24的方法，其中人胰島淀粉樣多肽或其類似物在患者中的作用時間增至超過約40小時。26.權(quán)利要求24或25中任一項(xiàng)的方法，其中所述人胰島淀粉樣多肽或其類似物如在權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)所進(jìn)一步定義的。27.用于治療或預(yù)防高血糖、2型糖尿病、葡萄糖耐量減低、1型糖尿病、肥胖癥、高血壓、X綜合征、血脂異常、認(rèn)知障礙、動脈粥樣硬化、心肌梗塞、冠心病和其他心血管疾病、中風(fēng)、炎性腸病、消化不良以及胃潰瘍，或者用于延緩或預(yù)防2型糖尿病病情發(fā)展，或者用于減少食物攝取、減少卩細(xì)胞程序性死亡、增強(qiáng)(3細(xì)胞功能與增加f3細(xì)胞群集、和/或用于恢復(fù)P細(xì)胞對葡萄糖的敏感性的方法，所述方法包括對需要所述治療的患者施用對所述治療有效的量的權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)的衍生物。全文摘要本發(fā)明涉及具有延長的作用分布圖的新型胰島淀粉樣多肽衍生物；涉及包含這些衍生物的藥物組合物；并且涉及這些衍生物在治療與肥胖癥、糖尿病和其他代謝紊亂相關(guān)的疾病中的應(yīng)用。文檔編號C07K14/435GK101400698SQ200780009130公開日2009年4月1日申請日期2007年3月15日優(yōu)先權(quán)日2006年3月15日發(fā)明者J·劉,L·沙弗,T·K·漢森申請人:諾沃-諾迪斯克有限公司