專利名稱：：可用作蛋白激酶抑制劑的噻吩-甲酰胺類的制作方法可用作蛋白激酶抑制劑的噻吩-甲酰胺類發(fā)明的
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及可用作蛋白激酶抑制劑的化合物。本發(fā)明也涉及包含本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的組合物和在各種疾患的治療中使用這些組合物的方法。本發(fā)明也涉及制備本發(fā)明化合物的方法。
背景技術(shù)：
：近年來，更好地理解與疾病有關(guān)的酶和其他生物分子的結(jié)構(gòu)，大大有助于尋求新的治療劑。已經(jīng)成為廣泛研究的主題的一類重要的酶是蛋白激酶。蛋白激酶構(gòu)成一大家族在結(jié)構(gòu)上相關(guān)的酶，它們負(fù)責(zé)控制細(xì)胞內(nèi)的多種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程(參見Hardie，GandHanks，S.7%e/Vote//A7/Mse5od,/a/3di7，AcademicPress,SanDiego，CA:1995)。蛋白激酶被認(rèn)為從共同的遺傳基因進(jìn)化而來，由于保存了它們的結(jié)構(gòu)和催化功能。幾乎所有的激酶都含有相似的250-300個(gè)氨基酸催化結(jié)構(gòu)功能域。激酶可以根據(jù)它們磷酸化的底物分為若千家族(例如蛋白質(zhì)-酪氨酸、蛋白質(zhì)-絲氨酸/蘇氨酸、脂質(zhì)等)。已經(jīng)鑒別了一般對應(yīng)于每種激酶家族的序列基序(例如參見Hanks,S.K.，Hunter,T.，i^5^S/1995，夕，576-596;Knighton等人，Sc/e"ce1991，2"，407-414;Hiles等人，Ce//1992，M，419-429;Kunz等人，Cell1993，"，585-596;Garcia-Bustos等人，fi^。/1994，"，2352-2361)?！愣?，蛋白激酶通過影響磷酰基從三磷酸核苷轉(zhuǎn)移至參與信號傳遞途徑的蛋白質(zhì)接受體而介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)信號傳遞。這些磷酸化事件充當(dāng)分子開關(guān)，能夠調(diào)控或調(diào)節(jié)靶蛋白的生物功能。這些磷酸化事件最終是響應(yīng)于多種細(xì)胞外與其他刺激而被激發(fā)的。這類刺激的實(shí)例包括環(huán)境與化學(xué)應(yīng)激反應(yīng)信號(例如休克、熱休克、紫外輻射、細(xì)菌內(nèi)毒素和11202)、細(xì)胞因子(例如白介素-l(IL-1)和腫瘤壞死因子ot(TNF-a))和生長因子(例如粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)和成纖維細(xì)胞生長因子(FGF))。細(xì)胞外刺激可以影響一種或多種細(xì)胞應(yīng)答，涉及細(xì)胞生長、移行、分化、激素分泌、轉(zhuǎn)錄因子活化、肌肉收縮、糖代謝、蛋白質(zhì)合成控制和細(xì)胞周期調(diào)節(jié)。很多疾病與由上述蛋白激酶介導(dǎo)的事件引發(fā)的異常細(xì)胞應(yīng)答有關(guān)。這些疾病包括但不限于癌癥、自身免疫疾病、炎性疾病、骨疾病、代謝疾病、神經(jīng)與神經(jīng)變性疾病、心血管疾病、變態(tài)反應(yīng)與津喘、阿爾茨海默氏病和激素相關(guān)疾病。因此，醫(yī)藥化學(xué)界一直努力尋找作為治療劑有效的蛋白激酶抑制劑。Polo樣激酶(Plk)屬于絲氨酸/蘇氨酸激酶家族，它們在從酵母到人類的不同種屬之間是高度保守的(參見LoweryDM等人，^coge;7e2005，W;248-259)。Plk激酶在細(xì)胞周期中扮演多重角色，包括進(jìn)入有絲分裂和通過有絲分裂進(jìn)展的控制。Plkl是Plk家族成員中獲得最充分鑒別的。Plkl被廣泛地表達(dá)，在有絲分裂指數(shù)高的組織中最為豐富。Plkl的蛋白質(zhì)水平在有絲分裂中上升和達(dá)到峰值(Hamanaka,R等人，J貝o71995，2M，21086-21091)。所報(bào)道的Plkl底物是所有已知調(diào)節(jié)進(jìn)入有絲分裂和通過有絲分裂進(jìn)展的分子，包括CDC25C、細(xì)胞周期蛋白B、p53、APC、BRCA2和蛋白酶體。Plkl在多種癌癥類型中被增量調(diào)節(jié)，表達(dá)水平與疾病的嚴(yán)重性相關(guān)(Macmillan，JC等人，j加S"rg^zco/2001，《，729-740)。Plkl是一種致癌基因,能夠轉(zhuǎn)化NIH-3T3細(xì)胞(Smith,MR等人，^2'fcAe/z^io//j^Co邁邊w71997，2J《397—405)。Plkl因siRNA(反義、微量注射的抗體)缺失或抑制或者向細(xì)胞轉(zhuǎn)染Plkl的顯性陰性構(gòu)件會體外減少腫瘤細(xì)胞的增殖和活力(Guan，R等人，Ca，r^y2005，"，2698-2704;Liu，X等人，ProcNatlAcadSciUSA2003，100，5789-5794，F(xiàn)an,Y等人，ror/d/^s"oei^ero/2005，"，4596-4599;Lane，HA等人，JCe〃1996，風(fēng)1701-1713)。缺失Plkl的腫瘤細(xì)胞具有被激活的紡錘體檢查點(diǎn)以及紡錘體生成、染色體排列與分離和胞質(zhì)分裂上的缺陷?；盍适?jù)報(bào)道是細(xì)胞程序死亡誘導(dǎo)的結(jié)果。相反，正常的細(xì)胞據(jù)報(bào)道在Plkl的缺失后維持活力。體內(nèi)Plkl被siRNA擊倒或者顯性陰性構(gòu)件的使用會在異種移植模型中引起腫瘤的生長抑制或消退。Plk2主要在細(xì)胞周期的Gl期被表達(dá)，定位于分裂間期細(xì)胞中的中心體。Plk2剔除的小鼠發(fā)育正常，可生育，具有正常的存活率，但是比野生型小鼠低20%左右。來自剔除動物的細(xì)胞通過細(xì)胞周期進(jìn)展比正常小鼠更加緩慢(Ma，S等人，Ce//》/o/2003，W，6936-6943)。Plk2因siRNA缺失或者向細(xì)胞轉(zhuǎn)染無激酶活性的突變體會阻滯中心粒復(fù)制。Plk2的減量調(diào)節(jié)也使腫瘤細(xì)胞敏感于紫杉醇，促進(jìn)有絲分裂的災(zāi)變，這在部分程度上借助p53應(yīng)答的抑制(BurnsTF等人，#。/2003，"，5556—5571)。Plk3在細(xì)胞周期全程被表達(dá)，從G1增加到有絲分裂。表達(dá)在高度增殖性卵巢腫瘤和乳腺癌中被增量調(diào)節(jié)，與預(yù)后較差有關(guān)(Weichert，W等人，/Ca/2cer2004，卯，815-821;Weichert，W等人，P7rc力ow^rc力2005，《《442-450)。除了有絲分裂的調(diào)節(jié)以外，Plk3被相信參與細(xì)胞周期期間的高爾基體裂殖和DNA-損害應(yīng)答。Plk3被顯性陰性表達(dá)抑制據(jù)報(bào)道促進(jìn)DNA損害后的p53-獨(dú)立性細(xì)胞程序死亡，抑制腫瘤細(xì)胞形成集落(Li,Z等人，J"/'o/C力e/z/2005，，，16843-16850)。Plk4在結(jié)構(gòu)上更不同于其他Plk家族成員。這種激酶的缺失導(dǎo)致癌細(xì)胞的細(xì)胞程序死亡(Li，J等人，Yeo;7/a"a2005，7，312-323)。Plk4剔除的小鼠停止在E7'5，大部分細(xì)胞處于有絲分裂中，染色體被部分隔離(Hudson,JW等人，Ci/rre/7f"/o/o^r2001，"，441-446)。蛋白激酶家族的分子已經(jīng)在腫瘤細(xì)胞的生長、增殖和存活中有牽連。因此，迫切需要開發(fā)可用作蛋白激酶抑制劑的化合物。有確鑿的證據(jù)表明Plk激酶是細(xì)胞分化所必需的。細(xì)胞周期阻滯是經(jīng)過I其中W是H、Ch脂族基或Cw環(huán)脂族基；G是-C(R)2-或-0-；L是Ch脂族基，可選地被0-3個(gè)jl取代；環(huán)A是三唑基，可選地被0-3個(gè)r取代；環(huán)B是5-6元芳族單環(huán)的環(huán)，含有0-3個(gè)選自0、N和S的雜原子；環(huán)B可選地被O-5個(gè)jb取代，并且可選地稠合于環(huán)B。臨床驗(yàn)證的抑制肺瘤細(xì)胞增殖和活力的手段。因此，需要開發(fā)可用作Plk家族蛋白激酶(例如Plkl、Plk2、Plk3和Plk4)抑制劑的化合物，它們將抑制增殖，減少腫瘤細(xì)胞活力，特別是對于開發(fā)新的癌癥治療存在強(qiáng)烈的醫(yī)學(xué)需求。發(fā)明概述本發(fā)明化合物和其藥學(xué)上可接受的組合物可用作蛋白激酶的抑制劑。在有些實(shí)施方式中，這些化合物可用作PLK蛋白激酶的抑制劑；在有些實(shí)施方式中為PLK1蛋白激酶的抑制劑。這些化合物具有如本文定義的式I或是其藥學(xué)上可接受的鹽。這些化合物和其藥學(xué)上可接受的組合物可用于治療或預(yù)防多種疾病、疾患或病癥，包括但不限于自身免疫、炎性、增殖或過度增殖疾病、神經(jīng)變性疾病或者免疫性-介導(dǎo)的疾病。由本發(fā)明提供的化合物也可用于生物與病理現(xiàn)象中的激酶研究；由這類激酶-介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的研究；和新激酶抑制劑的對比評價(jià)。發(fā)明的詳細(xì)說明本發(fā)明描述式I化合物(jA)0-3環(huán)B'是5-8元芳族或非芳族單環(huán)的環(huán)，含有0-3個(gè)選自0、N和S的雜原子；環(huán)B'可選地被0-4個(gè)r'取代；每個(gè)ja、jb和r獨(dú)立地是d—6卣代烷基、閨代基、N02、CN、Q或-Z-Q;Z獨(dú)立地是Ch脂族基，可選地被0-3次出現(xiàn)的-NR-、-0-、-S-、-C(O)-、-C(-NR)-、-C(-NOR)-、-S0-或-S02-中斷;每個(gè)Z可選地被0-2個(gè)r取代；Q是H;d-J旨族基；3-8元芳族或非芳族單環(huán)的環(huán)，具有0-3個(gè)獨(dú)立選自0、N和S的雜原子；或者8-12元芳族或非芳族二環(huán)的環(huán)系，具有0-5個(gè)獨(dú)立選自0、N和S的雜原子；每個(gè)Q可選地被0-5個(gè)"取代；每個(gè)f和jz獨(dú)立地是H、卣代基、C卜6脂族基、Cw環(huán)脂族基、N02、CN、-NH2、-NH(d—4脂族基)、-N(d-4脂族基)2、-OH、-O(d"脂族基)、-C02H、-C02(d-J旨族基)、-0(閨代d-4脂族基)或卣代(d—J旨族基);每個(gè)^獨(dú)立地是M或-Y-M;每個(gè)Y獨(dú)立地是未取代的Ch脂族基，可選地被0-3次出現(xiàn)的-NR-、-O-、-S-、-C(O)-、-SO-或-S02-中斷;每個(gè)M獨(dú)立地是H、d-6脂族基、Ch壞脂族基、面代(Ch脂族基)、-O(卣代d-J旨族基)、Cw雜環(huán)基、卣代基、N02、CN、0H、0R'、SH、SR'、NH2、NHR'、N(R')2、COH、COR'、C0NH2、CONHR'、C0NR、、NHCOR'、N『COIT、NHC0NH2、NHCONHR'、匪CON(R')2、S02NH2、S02NHR'、S02N(R')2、NHS02ir或NR'S02IT;R是H或未取代的d-J旨族基；R'是未取代的C卜J旨族基；或者兩個(gè)R'基團(tuán)與它們鍵合的原子一起構(gòu)成未取代的3-8元非芳族單環(huán)的環(huán)，具有0-1個(gè)獨(dú)立選自0、N和S的雜原子。在本發(fā)明內(nèi)也包括所有式I化合物的藥學(xué)上可接受的鹽，包括但不限于表l化合物。本發(fā)明化合物包括上文一般描述的那些，本文公開的種類、小類和品種會進(jìn)一步闡述。正如本文所用，應(yīng)當(dāng)適用下列定義。出于本發(fā)明的目的，化學(xué)元素將根據(jù)元素周期表CAS版HandbookofChemistryandPhysics,751118過進(jìn)行鑒定。另外，有機(jī)化學(xué)的一般原理描述在"OrganicChemistry",ThomasSorrell，UniversityScienceBooks,Sausalito:1999和"March'sAdvancedOrganicChemistry",5thEd.，Ed.:Smith,M.B.andMarch,J.，JohnWiley&Sons,NewYork:2001中，其完整內(nèi)容引用在此作為參考。正如本文所述，所指定的原子數(shù)量范圍包括其中的任意整數(shù)。例如，具有1-4個(gè)原子的基團(tuán)可能具有1、2、3或4個(gè)原子。正如本文所述，本發(fā)明化合物可以可選地^皮一個(gè)或多個(gè)取代基取代，例如上文概述所闡述的，或者如本發(fā)明的特定大類、小類和品種所例證的。將被領(lǐng)會到，措辭"可選被取代的"與措辭"取代或未取代的"是可互換使用的。一般而言，術(shù)語"取代"無論前面有無術(shù)語"可選"，都表示給定結(jié)構(gòu)中的氫原子團(tuán)被指定取代基的原子團(tuán)所代替。除非另有指示，可選被取代的基團(tuán)可以在該基團(tuán)每個(gè)可取代的位置上具有取代基，若任意給定結(jié)構(gòu)中一個(gè)以上位置可以被一個(gè)以上選自指定組的取代基所取代，則取代基可以在每個(gè)位置上是相同或不同的。本發(fā)明所關(guān)注的取代基組合優(yōu)選地是能形成穩(wěn)定的或化學(xué)上可行的化合物的那些。本文所用的術(shù)語"穩(wěn)定"表示在受到用于它們制備、檢測、優(yōu)選回收、純化的條件和用于一種或多種本文所公開的目的時(shí)基本上不變的化合物。在有些實(shí)施方式中，穩(wěn)定的化合物或化學(xué)上可行的化合物是在沒有水分或其他化學(xué)反應(yīng)性條件的存在下、在40。C或以下的溫度下保持至少一周而基本上不發(fā)生變化的化合物。本文所用的術(shù)語"脂族基"或"脂族基團(tuán)"表示直鏈(即未分支)或支鏈的取代或未取代的烴鏈，它是完全飽和的或者含有一個(gè)或多個(gè)不飽和單元，它具有單一的與分子其余部分連接的點(diǎn)。除非另有指定，脂族基團(tuán)含有1-20個(gè)脂族碳原子。在有些實(shí)施方式中，脂族基團(tuán)含有l(wèi)-10個(gè)脂族碳原子。在其他實(shí)施方式中，脂族基14團(tuán)含有1-8個(gè)脂族碳原子。在其他實(shí)施方式中，脂族基團(tuán)含有1-6個(gè)脂族碳原子，在其他實(shí)施方式中，脂族基團(tuán)含有1-4個(gè)脂族碳原子。適合的脂族基團(tuán)包括但不限于直鏈或支鏈的取代或未取代的烷基、鏈烯基或炔基。具體實(shí)例包括但不限于甲基、乙基、異丙基、正丙基、仲丁基、乙烯基、正丁烯基、乙炔基和叔丁基。術(shù)語"環(huán)脂族基"(或者"碳環(huán)"或"碳環(huán)基"或"環(huán)烷基"等)表示單環(huán)CfC8烴或二環(huán)C8-Cu烴，它是完全飽和的或者含有一個(gè)或多個(gè)不飽和單元，但不是芳族的，具有單一的與分子其余部分連接的點(diǎn)，其中所述二環(huán)環(huán)系中任意單個(gè)的環(huán)具有3-7個(gè)成員。適合的環(huán)脂族基團(tuán)包括但不限于環(huán)烷基和環(huán)烯基。具體實(shí)例包括但不限于環(huán)己基、環(huán)丙烯基和環(huán)丁基。本文所用的術(shù)語"雜環(huán)"、"雜環(huán)基，，或"雜環(huán)的"等表示非芳族的單環(huán)、二環(huán)或三環(huán)環(huán)系，其中一個(gè)或多個(gè)環(huán)成員是獨(dú)立選擇的雜原子。在有些實(shí)施方式中，"雜環(huán)"、"雜環(huán)基"或"雜環(huán)的"基團(tuán)具有三至十四個(gè)環(huán)成員，其中一個(gè)或多個(gè)環(huán)成員是獨(dú)立選自氧、硫、氮或磷的雜原子，系統(tǒng)中每個(gè)環(huán)含有3至7個(gè)環(huán)成員。適合的雜環(huán)包括但不限于3-lH-苯并咪唑-2-酮、3-(1-烷基)-苯并咪唑-2-酮、2-四氫呋喃基、3-四氫呋喃基、2-四氫瘞吩基、3-四氫噻吩基、2-嗎啉代基、3-嗎啉代基、4-嗎啉代基、2-硫嗎啉代基、3-硫嗎啉代基、4-硫嗎啉代基、1-吡咯烷基、2-吡咯烷基、3-吡咯烷基、1-四氫哌嗪基、2-四氫哌，秦基、3-四氫哌"秦基、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、1-吡唑啉基、3-吡唑啉基、4-吡唑啉基、5-吡唑啉基、l-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-哌啶基、2-蕃唑烷基、3-噻唑烷基、4-瘞唑烷基、l-咪唑烷基、2-咪唑烷基、4-咪喳烷基、5-咪唑烷基、二氫吲哚基、四氫喹啉基、四氫異喹啉基、苯并硫雜環(huán)戊烷、苯并二噻烷和1，3-二氫-咪唑-2-酮。環(huán)狀基團(tuán)(例如環(huán)脂族基和雜環(huán))可以是線性稠合的、橋連的或螺環(huán)的。術(shù)語"雜原子"表示一個(gè)或多個(gè)氧、硫、氮或磷(包括氮、硫、磷或硅的任意氧化形式；任意堿性氮或雜環(huán)可取代氮的季銨化形式，例如N(如在3，4-二氫-2H-吡咯基中)、NH(如在吡咯烷基中)或NR+(如在N-取代的吡咯烷基中))。本文所用的術(shù)語"不飽和的"意味著具有一個(gè)或多個(gè)不飽和單元的部分。本文所用的術(shù)語"非芳族"描述飽和或部分不飽和的環(huán)。本文所用的術(shù)語"芳族"描述完全飽和的環(huán)。本文所用的術(shù)語"烷氧基"或"硫代烷基"表示如前文所定義的烷基通過氧("烷氧基")或硫("硫代烷基")原子與主體碳鏈連接。術(shù)語"囟代烷基"、"卣代鏈烯基"和"卣代烷氧基"表示被一個(gè)或多個(gè)囟原子取代的烷基、鏈烯基或烷氧基，視情況而定。術(shù)語"卣素"、"鹵代基，，和"hal"表示F、Cl、Br或I。單獨(dú)或者作為更大部分"芳烷基"、"芳烷氧基"或"芳氧基烷基"的一部分使用的術(shù)語"芳基"表示具有總計(jì)五至十四個(gè)環(huán)成員的單環(huán)、二環(huán)和三環(huán)環(huán)系，其中該系統(tǒng)中至少一個(gè)環(huán)是芳族的，并且其中該系統(tǒng)中每一環(huán)含有3至7個(gè)環(huán)成員。術(shù)語"芳基"可以與術(shù)語"芳基環(huán)"互換使用。術(shù)語"芳基"也表示如下定義的雜芳基環(huán)系。單獨(dú)或者作為更大部分"雜芳烷基"或"雜芳基烷氧基"的一部分使用的術(shù)語"雜芳基"表示具有總計(jì)五至十四個(gè)環(huán)成員的單環(huán)、二環(huán)和三環(huán)環(huán)系，其中該系統(tǒng)中至少一個(gè)環(huán)是芳族的，該系統(tǒng)中至少一個(gè)環(huán)含有一個(gè)或多個(gè)雜原子，并且其中該系統(tǒng)中每一環(huán)含有3至7個(gè)環(huán)成員。術(shù)語"雜芳基"可以與術(shù)語"雜芳基環(huán)"或術(shù)語"雜芳族基"互換使用。適合的雜芳基環(huán)包括但不限于2-呋喃基、3-呋喃基、N-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、5-咪唑基、苯并咪唑基、3-異噁唑基、4-異噁唑基、5-異噁唑基、2-噁唑基、4-噁唑基、5-噁唑基、N-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、2-吡咬基、3-吡咬基、4-吡梵基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基、噠嗪基(例如3-噠嗪基)、2-噻唑基、4-噢唑基、5-瘞唑基、四唑基(例如5-四唑基)、三唑基(例如2-三唑基和5-三唑基)、2-噻吩基、3-噻吩基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基(例如2-吲哚基)、吡唑基(例如2-吡唑基)、異噻唑基、1，2，3-噁二唑基、1，2，5-噁二唑基、1，2，4-噁二唑基、1，2，3-三唑基、1，2，3-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基、嘌呤基、吡嗪基、1，3，5-三溱基、喹啉基(例如2-喹啉基、3-喹啉基、4-喹啉基)和異喹啉基(例如l-異喹啉基、3-異喹啉基或4-異喹啉基)。本文所用的術(shù)語"保護(hù)基團(tuán)，，和"保護(hù)性基團(tuán)"表示用于暫時(shí)封閉多官能化合物中一個(gè)或多個(gè)所需反應(yīng)性位置的成分。在某些實(shí)施方式中，保護(hù)基團(tuán)具有下列特征中的一個(gè)或多個(gè)或者優(yōu)選全部a)以良好的收率選擇性反應(yīng)，得到被保護(hù)的底物，它對發(fā)生在一個(gè)或多個(gè)其他反應(yīng)性位置的反應(yīng)而言是穩(wěn)定的；和b)以良好的收率被不攻擊所再生的官能團(tuán)的試劑所選擇性除去。示范性保護(hù)基團(tuán)參見Greene,T.W.，Wuts，P.G.in"ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis"，ThirdEdition,JohnWiley&Sons,NewYork:1999和本書的其他版本，其完整內(nèi)容引用在此作為參考。本文所用的術(shù)語"氮保護(hù)基團(tuán)"表示用于暫時(shí)封閉多官能化合物中一個(gè)或多個(gè)所需氮反應(yīng)性位置的成分。優(yōu)選的氮保護(hù)基團(tuán)也具備上述特征，某些示范性氮保護(hù)基團(tuán)也參見Chapter7inGreene,T.W.，Wuts，P.G.in"ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis"，ThirdEdition,JohnWiley&Sons,NewYork:1999，其完整內(nèi)容引用在此作為參考。在有些實(shí)施方式中，烷基或脂族鏈可以可選地被另一原子或基團(tuán)中斷。這意味著烷基或脂族鏈的亞甲基單元可選地被所述其他原子或基團(tuán)代替。逸類原子或基團(tuán)的實(shí)例將包括但不限于-NR-、-0-、-S-、-C02-、-OC(O)-、-C(0)C0-、-C(O)-、-C(O)NR-、-C(=N-CN)、-NRC0-、-NRC(0)0-、-S02NR-、-NRSO廣、-NRC(O)NR-、-OC(O)NR-、-NRS02NR-、-30-或-302-,其中R是如本文定義的。除非另有指定，可選的代替生成化學(xué)上穩(wěn)定的化合物?？蛇x的代替可以發(fā)生在鏈內(nèi)，也可以發(fā)生在鏈的末端；也就是在連接點(diǎn)和/或也在末端。兩個(gè)可選的代替也可以在鏈內(nèi)彼此相鄰，只要導(dǎo)致化學(xué)上穩(wěn)定的化合物。可選的中斷或代替也可以完全代替鏈中所有碳原子。例如，C3脂族基可以可選地被-NR-、-C(O)-和-NR-中斷或代替，生成-NRC(O)NR-(脲)。除非另有指定，如果代替或中斷發(fā)生在末端，代替原子鍵合于末端上的H。例如，如果-CH2CH2CH3可選地被-0-中斷，所得化合物可能是-OCH2CH3、-0120(^3或-012012011。除非另有規(guī)定，本文所描繪的結(jié)構(gòu)也意味著包括該結(jié)構(gòu)的所有異構(gòu)(例如對映異構(gòu)、非對映異構(gòu)和幾何異構(gòu)(或構(gòu)象異構(gòu)))形式；例如每一不對稱中心的R與S構(gòu)型，(Z)與(E)雙鍵異構(gòu)體，和(Z)與(E)構(gòu)象異構(gòu)體。因此，這些化合物的單一立體化學(xué)異構(gòu)體以及對映異構(gòu)、非對映異構(gòu)、幾何異構(gòu)、構(gòu)象異構(gòu)或旋轉(zhuǎn)混合物都屬于本發(fā)明的范圍。除非另有規(guī)定，本發(fā)明化合物的所有互變異構(gòu)形式都屬于本發(fā)明的范圍。除非另有規(guī)定，取代基可以圍繞任意可旋轉(zhuǎn)的鍵自由旋轉(zhuǎn)。例如，被描繪為v的取代基也代表v。另外，除非另有規(guī)定，本文所描繪的結(jié)構(gòu)也意味著包括僅在一個(gè)或多個(gè)同位素富集原子的存在上有所不同的化合物。例如，除了氫被氘或氚代替或者碳被"c-或"c-富集的碳代替以外具有本發(fā)明結(jié)構(gòu)的化合物都屬于本發(fā)明的范圍。這類化合物例如可用作生物學(xué)測定法中的分析工具或探針。使用下列縮寫PG保護(hù)基團(tuán)LG離去基團(tuán)DCM二氯甲烷Ac乙酰基DMF二甲基甲酰胺EtOAc乙酸乙酯18DMS0二甲基亞砜MeCN乙腈TCA三氯乙酸ATP腺苷三磷酸EtOH乙醇Ph苯基Me曱基Et乙基Bu丁基DEAD偶氮二甲酸二乙酯HEPES4-(2-羥基乙基)-1-哌溱乙磺酸BSA牛血清白蛋白DTT二石危蘇糖醇MOPS4-嗎啉丙磺酸NMR核磁共振HPLC高效液相色鐠LCMS液相色語-質(zhì)鐠TLC薄層色鐠Rt保留時(shí)間在本發(fā)明的有些實(shí)施方式中，G是-C(R)廣。在其他實(shí)施方式中，G是O。在有些實(shí)施方式中，R'是H。在有些實(shí)施方式中，環(huán)A選自在有些實(shí)施方式中，環(huán)B是5-6元芳族單環(huán)的環(huán)，含有0-3個(gè)選自0、N和S的雜原子。在有些實(shí)施方式中，環(huán)B是5元環(huán)。在其他實(shí)施方式中，環(huán)B是6元環(huán)。在有些實(shí)施方式中，環(huán)B稠合于環(huán)B'。在有些實(shí)施方式中，環(huán)B'是5-6元芳族單環(huán)的環(huán)，含有0-3個(gè)選自0、N和S的雜原子。在全部這些實(shí)施方式中，環(huán)B可選地被o-5個(gè)r取代，環(huán)B'可選地被0-4個(gè)jb'取代。在有些實(shí)施方式中，JA是H、Cw脂族基、C3—6環(huán)脂族基、面代(Ch脂族基)、-O(卣代Ch脂族基)、Cw雜環(huán)基、卣代基、N02、CN、0H、0R、SH、SR、NH2、NHR、N(R)2、COH、COR、CONH2、CONHR、CONR2、NHCOR、NRCOR、NHCONH2、NHCONHR、NHCON(R)2、S02NH2、S02NHR、S02N(R)2、NHS02R或NRS02R。在有些實(shí)施方式中，尸是H。在有些實(shí)施方式中，JB是H、Ch脂族基、Cw環(huán)脂族基、面代(Ch脂族基)、-0(卣代Cw脂族基)、Cw雜環(huán)基、卣代基、N02、CN、0H、0R、SH、SR、冊2、NHR、N(R)2、COH、COR、CONH2、CONHR、CONR2、NHCOR、NRCOR、NHCONH2、NHCONHR、NHCON(R)2、S02NH2、S02NHR、S02N(R)2、NHS。2R或NRS02R。在其他實(shí)施方式中，JB'是H、Ch脂族基、C^環(huán)脂族基、面代(Ch脂族基)、-O(卣代Ch脂族基)、C3—6雜環(huán)基、卣代基、N02、CN、0H、0R、SH、SR、NH2、NHR、N(R)2、COH、COR、CONH2、CONHR、CONR2、NHCOR、NRCOR、NHCONH2、NHCONHR、NHCON(R)2、S02NH2、S02NHR、S02N(R)2、N跳R或NRS02R。在有些實(shí)施方式中，L是C?！?烷基，可選地被0-3個(gè)f取代。在其他實(shí)施方式中，L是Cw烷基，可選地被0-3個(gè)T取代。在其他實(shí)施方式中，L是-CH(CIU-。在有些實(shí)施方式中，環(huán)B是苯基，可選地被0-5個(gè)jB取代。在有些實(shí)施方式中，各變量是如表1中化合物所描繪的。在有些實(shí)施方式中，本發(fā)明化合物如表l所示20<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>通用合成方法本發(fā)明化合物一般可以借助下列通用流程和隨后制備例所描繪的那些方法加以制備。除非另有指示，下列流程中的所有變量都是如本文定義的。流程1ci共軛加成-C02R(JAkA)、OR，Mitsunobu'OR,OH酰胺生成(JA)0-5上述流程1顯示制備本發(fā)明化合物的通用合成途徑，其中環(huán)A經(jīng)由氮原子連接于噻吩核。使Michael受體l(利用與5>/^/"/s，(JA)0-3~^)(10)，847-850，1984的報(bào)道相似的方法制備)共軛加成與反應(yīng)，其中環(huán)A是含氮環(huán)，生成2。2的3-羥基然后用適當(dāng)?shù)墓倌軋F(tuán)在Mitsunobu條件下衍生化，得到3。最后，3中的酯部分在適合的酰胺生成條件下轉(zhuǎn)化為酰胺，得到本發(fā)明化合物。流程2<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>上述流程2顯示制備某些環(huán)A衍生物的通用合成途徑。將氰酰胺5用醛和肼處理(按照與5>/2^es/s，(3)，222-223，1983的報(bào)道相似的方式)，得到氨基三唑6。它可以然后經(jīng)歷如流程1所述的進(jìn)一步官能化，得到本發(fā)明化合物。因此，本發(fā)明也提供制備本發(fā)明化合物的方法。本發(fā)明的一種實(shí)施方式提供制備式I化合物的方法其中G是0，W是H，環(huán)A、環(huán)B、ja、jb和L是如本文定義的，包含使式3化合物其中G是0，W是Ch脂族基，環(huán)A、環(huán)B、ja、jb和L是如本文定義的，在適合的酰胺生成條件下生成式I化合物。適合的酰胺生成條件是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，可以參見"March'sAdvancedOrganicChemistry"。適合的酰胺生成條件的實(shí)例包括但不限于在NH3/MeOH的存在下加熱羧酸甲基酯。本發(fā)明的一種實(shí)施方式提供制備式3化合物的方法3其中G是0，環(huán)A、環(huán)B、JA、JB和L是如本文定義的，包含使式2化合物OCH，LG——L8卜(jB)0-:與V^^^反應(yīng)；其中LG是適合的離去基團(tuán)，L、環(huán)B和'是如本文定義的；在適合的0-C鍵偶聯(lián)條件下生成式3化合物。另一種實(shí)施方式提供制備式2化合物的方法(JA)0-'OCH，包含向式1化合物ciC02(C^-6;烷基)H0加成"3W，其中環(huán)A是含有能夠親核進(jìn)攻的氮原子的芳族環(huán)，JA是如本文定義的；經(jīng)由適合的共軛加成條件生成式2化合物。含有能夠親核進(jìn)攻的氮原子的芳族環(huán)的實(shí)例是Ho適合的共軛加成條件包括但不限于在室溫下合并2當(dāng)量的23(ja)o-3戈ajt;qAnrw士.A11nrirA乂11s必備A^(jA)o-3—A與式8化合物在dcm中；在110x:下合并1.15當(dāng)量的與式8化合物在乙腈/dmf中過夜。另一種實(shí)施方式提供制備式6化合物的方法上，h6包含將式5化合物n-(jq)'0-5用醛和肼處理(按照與5>/7/^ew、(3)，222-223，1983的報(bào)道相似的方式)，生成式6化合物。在有些實(shí)施方式中，(」3"是式6化合物。本發(fā)明提供可用于治療疾病、疾患和病癥的化合物，包括但不限于自身免疫疾病、炎性疾病、增殖與過度增殖疾病、免疫學(xué)-介導(dǎo)的疾病、骨疾病、代謝疾病、神經(jīng)與神經(jīng)變性疾病、心血管疾病、激素相關(guān)疾病、變態(tài)反應(yīng)、孝喘和阿爾茨海默氏病。本發(fā)明的另一方面提供蛋白激酶抑制劑化合物，因而可用于治療疾病、疾患和病癥，以及本文所述的其他用途。在本發(fā)明的另一方面，提供藥學(xué)上可接受的組合物，其中這些組合物包含本文所述的任意化合物，可選地包含藥學(xué)上可接受的載體、助劑或媒介。在某些實(shí)施方式中，這些組合物可選地進(jìn)一步包含一種或多種附加治療劑。也將被領(lǐng)會到，某些本發(fā)明化合物能夠以游離形式存在供治療，或者酌情為其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的衍生物。本文所用的"藥學(xué)上可接受的衍生物"是加合物或衍生物，在對有需要的患者給藥后能夠直接或間接提供本發(fā)明化合物或者其抑制活性代謝產(chǎn)物或殘余物。藥學(xué)上可接受的衍生物的實(shí)例包括但不限24于酯和這類酯的鹽。本文所用的術(shù)語"藥學(xué)上可接受的鹽"表示化合物的鹽，在合理的醫(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)，它們適合用于與人體和低等動物組織接觸，沒有不適當(dāng)?shù)亩拘浴⒋碳ば?、變態(tài)反應(yīng)等，與合理的利益/風(fēng)險(xiǎn)比相稱。藥學(xué)上可接受的鹽是本領(lǐng)域熟知的。例如，S.M.Berge等在/.戶力ar鵬cei/〃cW5^/e/2ces，1977，W，1-19中詳細(xì)描述了藥學(xué)上可接受的鹽，引用在此作為參考。本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的鹽包括從適合的無機(jī)與有機(jī)酸與堿衍生的那些。這些鹽可以是在化合物的最終分離和純化期間被就地制備的。酸加成鹽可以如下制備:l)使純化的化合物的游離堿形式與適合的有機(jī)或無機(jī)酸反應(yīng)，和2)分離所生成的鹽。藥學(xué)上可接受的無毒性酸加成鹽的實(shí)例是與無機(jī)酸或有機(jī)酸生成的氨基鹽，無機(jī)酸例如鹽酸、氫溴酸、磷酸、硫酸和高氯酸，有機(jī)酸例如乙酸、草酸、馬來酸、酒石酸、檸檬酸、琥珀酸或丙二酸，或者利用本領(lǐng)域所用的其他方法，例如離子交換形成的鹽。其他藥學(xué)上可接受的鹽包括己二酸鹽、藻酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬氨酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、檸檬酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、甲酸鹽、富馬酸鹽、葡庚酸鹽、甘油磷酸鹽、葡糖酸鹽、半疏酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、乳糖酸鹽、乳酸鹽、月桂酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、樸酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、對-甲苯磺酸鹽、十一烷酸鹽、戊酸鹽等。從適當(dāng)?shù)膲A衍生的鹽包括堿金屬、堿土金屬、銨和N+(CH烷基)4鹽。本發(fā)明也涵蓋如本文所公開的化合物的任意堿性含氮基團(tuán)的季銨化作用。借助這類季銨化作用可以得到可溶于水或油或可分散在水或油中的產(chǎn)物。堿加成鹽可以如下制備l)使純化的化合物的酸形式與適合的有機(jī)或無機(jī)堿反應(yīng)，和2)分離所生成的鹽。堿加成鹽包括堿金屬或堿土金屬鹽。代表性堿金屬或堿土金屬鹽包括鈉、鋰、鉀、鈣、鎂等。在適當(dāng)時(shí)，其他藥學(xué)上可接受的鹽包括無毒的銨鹽、季銨鹽和胺陽離子鹽，利用抗衡離子生成，例如卣化物、氫氧化物、羧酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、低級烷基磺酸鹽和芳基磺酸鹽。其他酸和堿,盡管本身不是藥學(xué)上可接受的，可以用于制備在獲得本發(fā)明化合物和它們藥學(xué)上可接受的酸或堿加成鹽時(shí)可用作中間體的鹽。正如本文所述，本發(fā)明的藥學(xué)上可接受的組合物另外包含藥學(xué)上可接受的載體、助劑或賦形劑，正如本文所使用的，它們包括適合于所需的特定劑型的任意和所有溶劑、稀釋劑或其他液體賦形劑、分散或懸浮助劑、表面活性劑、等滲劑、增稠或乳化劑、防腐劑、固體津占合劑、潤滑劑等。Remington'sPharmaceuticalSciences,SixteenthEdition,E.W.Martin(MackPublishingCo.,Easton，Pa.,1980)公開了用于配制藥學(xué)上可接受的組合物的各種載體和用于其制備的已知技術(shù)。除了與本發(fā)明化合物不相容以外，例如產(chǎn)生任何不可取的生物學(xué)效應(yīng)或者以有害方式相互作用于藥學(xué)上可接受的組合物的任何其他組分，任何常規(guī)載體介質(zhì)的使用涵蓋在本發(fā)明的范圍內(nèi)。能夠充當(dāng)藥學(xué)上可接受的載體的材料的一些實(shí)例包括但不限于離子交換劑；氧化鋁；硬脂酸鋁；卵磷脂；血清蛋白質(zhì)，例如血清白蛋白；緩沖物質(zhì)，例如磷酸鹽；甘氨酸；山梨酸或山梨酸鉀；飽和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物；水；鹽或電解質(zhì)，例如硫酸魚精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽；膠體二氧化硅；三硅酸鎂；聚乙烯吡咯烷酮；聚丙烯酸酯；蠟類；聚乙烯-聚氧化丙烯-嵌段聚合物；羊毛脂；糖類，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，例如玉米淀粉和馬鈴薯淀粉；纖維素及其衍生物，例如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素和乙酸纖維素；粉碎的黃蓍膠；麥芽；明膠；滑石；賦形劑，例如可可脂和栓劑用蠟；油類，例如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油和大豆油；二醇，例如丙二醇或聚乙二醇；酯類，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；瓊脂；緩沖劑，例如氫氧化鎂和氫氧化鋁；藻酸；無熱原的水；等滲鹽水；林格氏溶液；乙醇；磷酸鹽緩沖溶液；以及其他無毒的可相容的潤滑劑，例如月桂基硫酸鈉和硬脂酸鎂；根據(jù)制劑人員的判斷，在組合物中也可以存在著色劑、釋放劑、包衣劑、甜味劑、調(diào)味劑和香料、防腐劑和抗氧化劑。本發(fā)明的一個(gè)方面提供治療選自如下的疾病或者減輕其嚴(yán)重性的方法自身免疫疾病、炎性疾病、增殖或過度增殖疾病(例如癌癥)、免疫學(xué)-介導(dǎo)的疾病、骨疾病、代謝疾病、神經(jīng)或神經(jīng)變性疾病、心血管疾病、變態(tài)反應(yīng)、哮喘、阿爾茨海默氏病或激素相關(guān)疾病，包含對有此需要的受治療者給予有效量的化合物或包含化合物的藥學(xué)上可接受的組合物。術(shù)語"癌癥"包括但不限于下列癌癥乳腺;卵巢；宮頸；前列腺；睪丸，泌尿生殖道；食道；喉，成膠質(zhì)細(xì)胞瘤；成神經(jīng)細(xì)胞瘤；胃；皮膚，角化棘皮瘤；肺，表皮樣癌、大細(xì)胞癌、小細(xì)胞癌、肺腺癌；骨；結(jié)腸，腺瘤；胰腺，腺癌；甲狀腺，濾泡癌、未分化的癌、乳頭狀癌；精原細(xì)胞瘤；黑素瘤；肉瘤；膀胱癌；肝癌和膽道；腎癌；髓樣疾患；淋巴樣疾患、何杰金氏病、毛發(fā)細(xì)胞；口腔與咽(口)、唇、舌、口、咽；小腸；結(jié)腸-直腸，大腸、直腸；腦與中樞神經(jīng)系統(tǒng)；和白血病。在某些實(shí)施方式中，化合物或藥學(xué)上可接受的組合物的"有效量"是為了治療所述疾病有效的量。根據(jù)本發(fā)明方法的化合物和組合物可以利用就治療所述疾病或者減輕其嚴(yán)重性而言有效的任意量和任意給藥途徑加以給藥。在有些實(shí)施方式中，所述疾病選自增殖疾患、神經(jīng)變性疾患、自身免疫疾患、炎性疾患和免疫學(xué)-介導(dǎo)的疾患。在有些實(shí)施方式中，所述疾病是增殖疾患。在有些實(shí)施方式中是癌癥。在本發(fā)明的其他實(shí)施方式中，所述疾病是蛋白激酶介導(dǎo)的病癥。在有些實(shí)施方式中，所述蛋白激酶是PLK。本文所用的術(shù)語"蛋白激酶-介導(dǎo)的病癥"表示已知蛋白激酶在其中扮演角色的任意疾病或其他有害病癥。這類病癥非限制性地包括自身免疫疾病、炎性疾病、增殖與過度增殖疾病、免疫學(xué)-介導(dǎo)的疾病、骨疾病、代謝疾病、神經(jīng)與神經(jīng)變性疾病、心血管疾病、激27素相關(guān)疾病、變態(tài)反應(yīng)、哮喘和阿爾茨海默氏病。本文所用的術(shù)語"PLK-介導(dǎo)的病癥"表示PLK在其中扮演角色的任意疾病或其他有害病癥。這類病癥非限制性地包括增殖疾患(例如癌癥)、神經(jīng)變性疾患、自身免疫疾患、炎性疾患和免疫學(xué)-介導(dǎo)的疾患。在有些實(shí)施方式中，本發(fā)明的化合物和組合物是蛋白激酶的抑制劑。作為蛋白激酶的抑制劑，本發(fā)明的化合物和組合物特別可用于治療這樣一種疾病、病癥或疾患或者減輕其嚴(yán)重性，其中蛋白激酶在該疾病、病癥或疾患中有牽連。一方面，本發(fā)明提供治療疾病、病癥或疾患或者減輕其嚴(yán)重性的方法，其中蛋白激酶在該疾病狀態(tài)中有牽連。另一方面，本發(fā)明提供治療疾病、病癥或疾患或者減輕其嚴(yán)重性的方法，其中酶活性的抑制在該疾病的治療中有牽連。另一方面，本發(fā)明提供用化合物治療疾病、病癥或疾患或者減輕其嚴(yán)重性的方法，該化合物通過與蛋白激酶結(jié)合而抑制酶活性。在有些實(shí)施方式中，所述蛋白激酶是PLK。在本發(fā)明中用作蛋白激酶抑制劑的化合物的活性可以在體外、體內(nèi)或細(xì)胞系中加以測定。體外測定法包括測定對活化激酶的激酶活性或ATP酶活性的抑制作用。選擇性的體外測定法可定量測定抑制劑與蛋白激酶結(jié)合的能力。抑制劑的結(jié)合可以這樣測量，在結(jié)合之前放射性標(biāo)記抑制劑，分離抑制劑/激酶復(fù)合物，再測定所結(jié)合的放射性標(biāo)記的量，或者進(jìn)行竟?fàn)帉?shí)驗(yàn)，其中將新抑制劑和與已知放射性配體結(jié)合的激酶一起溫育。蛋白激酶抑制劑或其藥物鹽可以被配制成藥物組合物，對動物或人給藥。這些藥物組合物包含有效治療或預(yù)防激酶-介導(dǎo)病癥量的蛋白激酶抑制劑和藥學(xué)上可接受的載體，是本發(fā)明的另一種實(shí)施方式。在有些實(shí)施方式中，所述蛋白激酶-介導(dǎo)的病癥是PLK-介導(dǎo)的病癥。在有些實(shí)施方式中是Plkl-介導(dǎo)的病癥。治療所需化合物的確切的量將因受治療者而異，依賴于受治療者的種類、年齡與一般狀態(tài)、感染的嚴(yán)重性、特定藥物、其給藥的方式等。本發(fā)明化合物優(yōu)選地被配制成劑量單元形式，有易于給藥和劑量的一致性。本文所用的表達(dá)方式"劑量單元形式，，表示物理上離散的藥物單元，對所治療的患者而言是適當(dāng)?shù)摹２贿^將被理解到，本發(fā)明化合物和組合物的總每日用量將由主治醫(yī)師在合理的醫(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)決定。任意特定患者或生物體的具體有效劑量水平將依賴于多種因素，包括所治療的病癥和病癥的嚴(yán)重性；所采用的具體化合物的活性；所采用的具體組合物；患者的年齡、體重、一般健康狀況、性別和飲食；給藥的時(shí)間、給藥的途徑和所采用的具體化合物的排泄速率；治療的持續(xù)時(shí)間；與所采用的具體化合物聯(lián)合或同時(shí)使用的藥物；和醫(yī)藥領(lǐng)域熟知的其他因素。本文所用的術(shù)語"患者"表示動物，優(yōu)選哺乳動物，最優(yōu)選人。本發(fā)明的藥學(xué)上可接受的組合物可以對人和其他動物口服、直腸、腸胃外、腦池內(nèi)、陰道內(nèi)、腹膜內(nèi)、局部(以粉劑、軟骨劑或滴劑)、向頰、以口用或鼻用噴霧劑等方式給藥，這依賴于所治療感染的嚴(yán)重性。在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明化合物可以被口服或腸胃外給藥，劑量水平為每天約0.01mg/kg至約50mg/kg、優(yōu)選約lmg/kg至約25mg/kg受治療者體重，一天一次或多次，以獲得所需的治療效果?？诜o藥的液體劑型包括但不限于藥學(xué)上可接受的乳劑、微乳劑、溶液、懸液、糖漿劑和酏劑。除了活性化合物以外，液體劑型可以含有本領(lǐng)域常用的惰性稀釋劑，例如水或其他溶劑，增溶劑和乳化劑，例如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、節(jié)醇、苯甲酸節(jié)基酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(特別是棉籽油、花生油、玉米油、麥胚油、橄欖油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氫糠醇、聚乙二醇和脫水山梨醇的脂肪酸酯，和它們的混合物。除了惰性稀釋劑以外，口服組合物也可以包括助劑，例如濕潤劑、乳化與懸浮劑、甜味劑、矯味劑和香料。使用適合的分散或濕潤劑和懸浮劑，可以按照已知技術(shù)配制可注射制備物，例如無菌可注射的水性或油性懸液。無菌可注射制29備物也可以是在無毒的腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液、懸液或乳液，例如在1，3-丁二醇中的溶液?？梢圆捎玫目山邮艿妮d體和溶劑有水、林格氏溶液、U.S.P，和等滲氯化鈉溶液。另外，常規(guī)上采用無菌的不揮發(fā)油作為溶劑或懸浮介質(zhì)。為此，可以采用任何溫和的固定油，包括合成的單-或二-甘油酯。另外，在注射劑的制備中也可以使用脂肪酸，例如油酸?？勺⑸渲苿┛梢赃@樣進(jìn)行滅菌，例如通過細(xì)菌截留性濾器過濾，或者摻入無菌固體組合物形式的滅菌劑，可以在使用前將其溶解或分散在無菌的水或其他無菌可注射介質(zhì)中。為了延長本發(fā)明化合物的作用，經(jīng)常需要延緩化合物在皮下或肌內(nèi)注射后的吸收。這可以利用水溶性差的結(jié)晶性或無定形物質(zhì)的液體懸液來實(shí)現(xiàn)?；衔锏奈账俾嗜Q于它的溶解速率，后者反過來又可能取決于晶體大小和晶型。作為替代選擇，將化合物溶解或懸浮在油類載體中，實(shí)現(xiàn)腸胃外給藥化合物形式的延遲吸收?？勺⑸涞膬煨问绞沁@樣制備的，在生物可降解的聚合物中，例如聚交酯-聚乙醇酸交酯，生成化合物的微嚢包封基質(zhì)。根據(jù)化合物與聚合物的比例和所采用特定聚合物的屬性，可以控制化合物的釋放速率。其他生物可降解聚合物的實(shí)例包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。儲庫型可注射制劑也可以將化合物包合在與機(jī)體組織相容的脂質(zhì)體或微乳中來制備。直腸或陰道給藥組合物優(yōu)選地是栓劑，它們可以這樣制備，將本發(fā)明化合物與適合的無刺激性賦形劑或載體混合，例如可可脂、聚乙二醇或栓劑用蠟，它們在環(huán)境溫度下是固體，但是在體溫下是液體，因此在直腸或陰道腔中融化，釋放出活性化合物。口服給藥的固體劑型包括膠嚢劑、片劑、丸劑、粉劑和顆粒劑。在這類固體劑型中，將活性化合物與至少一種惰性的藥學(xué)上可接受的賦形劑或栽體混合，例如檸檬酸鈉或磷酸二釣，和/或a)填充劑或增容劑，例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和硅酸，b)粘合劑，例如羧甲基纖維素、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖30和阿拉伯膠，c)潤濕劑，例如甘油，d)崩解劑，例如瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯淀粉、藻酸、某些硅酸鹽和碳酸鈉，e)溶解遲延劑，例如石蠟，f)吸收促進(jìn)劑，例如季銨化合物，g)濕潤劑，例如鯨蠟醇和甘油單硬脂酸酯，h)吸收劑，例如高嶺土和膨潤土，和i)潤滑劑，例如滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、月桂基硫酸鈉及其混合物。在膠囊劑、片劑和丸劑的情況下，所述劑型也可以包含緩沖劑。也可以釆用相似類型的固體組合物作為軟或硬的填充的明膠膠嚢劑中的填充劑，膠囊所用賦形劑例如乳糖或奶糖以及高分子聚乙二醇等。片劑、錠劑、膠嚢劑、丸劑和顆粒劑等固體劑型可以帶有包衣和外殼，例如腸溶衣和藥物配制領(lǐng)域熟知的其他包衣。它們可以可選地含有遮光劑，也可以是僅僅或優(yōu)先在腸道某一部分釋放活性成分的組合物，可選地為延遲的方式。可以使用的包埋組合物的實(shí)例包括聚合物質(zhì)和蠟類。也可以采用相似類型的固體組合物作為軟與硬的填充的明膠膠嚢劑中的填充劑，膠囊所用賦形劑例如乳糖或奶糖以及高分子聚乙二醇等?；钚曰衔镆部梢允俏鞍獾男问?，其中含有一種或多種上述賦形劑。片劑、錠劑、膠嚢劑、丸劑和顆粒劑等固體劑型可以帶有包衣和外殼，例如腸溶衣、釋放控制性包衣和藥物配制領(lǐng)域熟知的其他包衣。在這類固體劑型中，可以將活性化合物與至少一種惰性稀釋劑混合，例如蔗糖、乳糖或淀粉。在正常情況下，這類劑型也可以包含除惰性稀釋劑以外的其他物質(zhì)，例如壓片潤滑劑和其他壓片助劑，例如硬脂酸鎂和微晶纖維素。在膠嚢劑、片劑和丸劑的情況下，劑型也可以包含緩沖劑。它們可以可選地含有遮光劑，也可以是僅僅或優(yōu)先在腸道某一部分釋放活性成分的組合物，可選地為延遲的方式?？梢允褂玫陌窠M合物的實(shí)例包括聚合物質(zhì)和蠟類。本發(fā)明化合物的局部或透皮給藥劑型包括軟骨劑、糊劑、霜?jiǎng)?、洗劑、凝膠劑、粉劑、溶液、噴霧劑、吸入劑或貼劑。將活性組分在無菌條件下與藥學(xué)上可接受的載體和任何必需的防腐劑或緩沖劑混合，根據(jù)需要而定。眼科制劑、滴耳劑和滴眼劑也被涵蓋在本發(fā)明的范圍內(nèi)。另外，本發(fā)明涵蓋透皮貼劑的使用，它們具有控制化合物向機(jī)體遞送的附加優(yōu)點(diǎn)。這類劑型可以通過將化合物溶解或分散在恰當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)中來制備。也可以使用吸收增強(qiáng)劑以增加化合物穿過皮膚的通量?？梢酝ㄟ^提供速率控制膜或者將化合物分散在聚合物基質(zhì)或凝膠中來控制速率。除了本發(fā)明的化合物以外，在治療或預(yù)防上述疾患的組合物中也可以采用本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的衍生物或前藥。"藥學(xué)上可接受的衍生物或前藥"表示本發(fā)明化合物的任何藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或其他衍生物，在對接受者給藥后物。特別(取的衍^物和前藥是這;羊的，、它們在這類化合物-哺乳動物給藥時(shí)增加本發(fā)明化合物的生物利用度(例如允許口服給藥的化合物更容易吸收進(jìn)入血液)，或者相對于母體品種增強(qiáng)母體化合物向生物體腔的遞送(例如腦或淋巴系統(tǒng))。本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的前藥非限制性地包括酯、氨基酸酯、磷酸酯、金屬鹽和磺酸酯。可以用在這些組合物中的藥學(xué)上可接受的載體包括但不限于離子交換劑、氧化鋁、硬脂酸鋁、卵磷脂、血清蛋白質(zhì)(例如人血清白蛋白)、緩沖物質(zhì)(例如磷酸鹽)、甘氨酸、山梨酸、山梨酸鉀、飽和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、鹽或電解質(zhì)(例如硫酸魚精蛋白)、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、膠體二氧化硅、三硅酸鎂、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素類物質(zhì)、聚乙二醇、羧甲基纖維素鈉、聚丙烯酸酯、蠟類、聚乙烯-聚丙烯-嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。本發(fā)明組合物的給藥可以是口服、腸胃外、吸入噴霧、局部、直腸、鼻、頰、陰道或經(jīng)由植入儲庫。本文所用的術(shù)語"腸胃外"包括皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、滑膜內(nèi)、胸骨內(nèi)、鞘內(nèi)、肝內(nèi)、損傷部位內(nèi)和顱內(nèi)注射或輸注技術(shù)。優(yōu)選地，組合物是口服、腹膜內(nèi)或靜脈內(nèi)給藥的。32本發(fā)明組合物的無菌可注射劑型可以是水性或油性懸液。這些懸液可以按照本領(lǐng)域已知的技術(shù)使用適合的分散或濕潤劑和懸浮劑加以配制。無菌可注射制劑也可以是在無毒的腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液或懸液，例如在1，3-丁二醇中的溶液?？梢圆捎玫目山邮艿妮d體和溶劑有水、林格氏溶液和等滲氯化鈉溶液。另外，常規(guī)采用無菌的固定油作為溶劑或懸浮介質(zhì)。為此，可以采用任意品牌的固定油，包括合成的單-或二-甘油酯。脂肪酸、例如油酸及其甘油酯衍生物，可用于制備注射劑，因?yàn)樗鼈兪翘烊坏乃帉W(xué)上可接受的油，例如橄欖油或蓖麻油，尤其是它們的聚氧乙基化形式。這些油溶液或懸液也可以含有長鏈醇稀釋劑或分散劑，例如羧甲基纖維素或相似的分散劑，它們常用于配制藥學(xué)上可接受的劑型，包括乳劑和懸液。出于配制的目的，也可以使用其他常用的表面活性劑，例如吐溫類、司盤類和其他乳化劑或生物利用度增強(qiáng)劑，它們常用于制造藥學(xué)上可接受的固體、液體或其他劑型。本發(fā)明的藥學(xué)上可接受的組合物可以口服給藥，任意口服可接受的劑型包括但不限于膠囊劑、片劑、水懸液或溶液。在口用片劑的情況下，常用的載體包括乳糖和玉米淀粉。通常也加入潤滑劑，例如硬脂酸鎂。就膠嚢劑型口服給藥而言，有用的稀釋劑包括乳糖和干燥的玉米淀粉。當(dāng)口用需要水懸液時(shí)，將活性成分與乳化及懸浮劑混合。如果需要的話，也可以加入某些甜味劑、矯味劑或著色劑。作為替代選擇，本發(fā)明的藥物組合物可以以檢劑形式給藥，供直腸給藥。它們可以這樣制備，將藥物與適合的無刺激性賦形劑混合，后者在室溫下是固體，但是在直腸溫度下是液體，因此將在直腸內(nèi)熔化，釋放藥物。這類材料包括可可脂、蜂蠟和聚乙二醇。本發(fā)明的藥物組合物也可以局部給藥，尤其當(dāng)治療目標(biāo)包括局部用藥容易達(dá)到的部位或器官時(shí)，包括眼、皮膚或下腸道的疾病。適合的局部制劑容易根據(jù)每個(gè)這些部位或器官加以制備。下腸道局部用藥可以利用直腸栓劑(見上)或適合的灌腸劑進(jìn)行。也可以使用局部透皮貼劑。就局部用藥而言，藥物組合物可以被配制在適合的軟骨中，其中含有懸浮或溶解在一種或多種載體中的活性組分。本發(fā)明化合物的局部給藥載體包括但不限于礦物油、液體礦脂、白礦脂、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯化合物、乳化蠟和水。作為替代選擇，藥物組合物可以被配制成適合的洗劑或霜?jiǎng)?，其中含有懸浮或溶解在一種或多種藥學(xué)上可接受的載體中的活性組分。適合的栽體包括但不限于礦物油、脫水山梨醇單硬脂酸酯、聚山梨醇酯60、鯨蠟酯蠟、鯨蠟硬脂醇、2-辛基十二烷醇、千醇和水。就眼用而言，藥物組合物可以被配制成在等滲的pH調(diào)節(jié)的無菌鹽水中的微粉化懸液或者優(yōu)選地在等滲的pH調(diào)節(jié)的無菌鹽水中的溶液，二者都含有或沒有防腐劑，例如苯扎氯銨。作為替代選擇，就眼用而言，藥物組合物可以被配制在軟骨中，例如礦脂。本發(fā)明的藥物組合物也可以通過鼻氣霧劑或吸入法給藥。這類組合物是按照藥物制劑領(lǐng)域熟知的技術(shù)制備的，可以制成鹽水溶液，采用苯甲醇或其他適合的防腐劑、提高生物利用度的吸收促進(jìn)劑、碳氟化合物和/或其他常規(guī)的增溶劑或分散劑?？梢耘c載體材料合并制成單一劑型的激酶抑制劑的量將因所治療的宿主、特定的給藥方式而異。優(yōu)選地，組合物應(yīng)當(dāng)是這樣配制的，以便可以對接受這些組合物的患者給予劑量在0.01-100mg/kg體重/天之間的抑制劑。也應(yīng)當(dāng)理解，就任意特定患者而言的具體劑量和治療制度將依賴于多種因素，包括所采用的具體化合物的活性、年齡、體重、一般健康狀況、性別、飲食、給藥時(shí)間、排泄速率、藥物組合、主治醫(yī)師的判斷和所治療特定疾病的嚴(yán)重性。抑制劑的量也將依賴于組合物中的特定化合物。按照另一種實(shí)施方式，本發(fā)明提供治療或預(yù)防蛋白激酶-介導(dǎo)病癥(在有些實(shí)施方式中為PLK-介導(dǎo)病癥)的方法，包含對患者給予上述藥物組合物之一的步驟。本文所用的術(shù)語"患者"表示動物3優(yōu)選人034優(yōu)選地，該方法用于治療或預(yù)防選自如下的病癥癌癥，例如乳腺、結(jié)腸、前列腺、皮膚、胰腺、腦、泌尿生殖道、淋巴系統(tǒng)、胃、喉和肺的癌癥，包括肺腺癌和小細(xì)胞肺癌；中風(fēng)、糖尿病、黑素瘤、肝腫大、心肥大、阿爾茨海默氏病、嚢性纖維化和病毒疾病，或者上述任意特定疾病或疾患。本發(fā)明的另一方面涉及抑制患者中的蛋白激酶活性，該方法包含對該患者給予式I化合物或包含所述化合物的組合物。依賴于所要治療或預(yù)防的特定的蛋白激酶-介導(dǎo)病癥，在正常情況下給藥治療或預(yù)防該病癥的附加藥物可以與本發(fā)明的抑制劑一起給藥。例如，化療劑或其他抗增值劑可以與本發(fā)明的蛋白激酶抑制劑聯(lián)合治療增殖疾病。這些附加藥物可以與含有蛋白激酶抑制劑的化合物或組合物分開給藥，作為多元?jiǎng)┝恐贫鹊囊徊糠?。作為替代選擇，這些藥物可以是單一劑型的一部分，與蛋白激酶抑制劑一起混合在單一的組合物中。在有些實(shí)施方式中，所述蛋白激酶抑制劑是PLK激酶抑制劑。在其他實(shí)施方式中，所述蛋白激酶抑制劑是P1kl激酶抑制劑。本發(fā)明也可以用在不牽涉對患者給藥的那些方法中。本發(fā)明的一個(gè)方面涉及抑制生物樣品或患者中的蛋白激酶活性，該方法包含使所述生物樣品接觸式I化合物或包含所述化合物的組合物。本文所用的術(shù)語"生物樣品"表示體外或來自體內(nèi)的樣品，非限制性地包括細(xì)胞培養(yǎng)物及其提取物；從哺乳動物或其提取物獲得的活組織檢查材料；和血液、唾液、尿、糞便、精液、淚液或其他體液或者其提取物。抑制生物樣品中的蛋白激酶活性可用于本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的多種目的。這類目的的實(shí)例包括但不限于輸血、器官移植和生物樣本貯存。本發(fā)明的另一方面涉及生物與病理現(xiàn)象中的蛋白激酶研究；由這類蛋白激酶介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的研究；和新蛋白激酶抑制劑的對比評價(jià)。這類用途的實(shí)例包括但不限于生物測定法，例如酶測定法和細(xì)胞類測定法。本發(fā)明化合物一般可以借助本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法加以制備。這些化合物可以借助已知方法分析，包括但不限于LCMS(液相色i醬質(zhì)語)和NMR(核磁共振)。本發(fā)明化合物也可以按照這些實(shí)施例加以測試。應(yīng)當(dāng)理解，下示具體條件僅為實(shí)例，不表示限制能夠用于制備、分析或測試本發(fā)明化合物的條件的范圍。相反，本發(fā)明也包括本領(lǐng)域技術(shù)人員已知用于制備、分析和測試本發(fā)明化合物的條件。本文所用的術(shù)語"Rt(min)表示HPLC保留時(shí)間，以分鐘計(jì)，與化合物有關(guān)。除非另有指示，用于獲得所報(bào)道的保留時(shí)間的HPLC方法如下柱子ACEC8柱，4.6x150mm梯度0-100%乙腈+甲醇60:40(20mMTris磷酸鹽)流速1.5mL/分鐘檢觀'J:225nm。在MicroMassQuattroMicro質(zhì)傳計(jì)上分析質(zhì)語樣品，以單一MS模式和電噴霧電離方式操作。利用色譜法向質(zhì)譜計(jì)引入樣品。利用BrukerDPX400儀器在400MHz下記錄屮-NMR光鐠。如下制備和分析下列式I化合物。實(shí)施例1:3-[1-(2-氯-苯基)-乙氧基]-5-(3-苯基氨基-[1，2，4]三唑-l-基)-漆吩-2-甲酸酰胺(1-1)實(shí)施例36方法A:3-羥基-5-(3-苯基氨基-[1，2，4]三唑-1-基)-噻吩-2-甲酸甲基酯將苯基-(1^[1，2，4]三唑-3-基)-胺(646mg，4.06mmol，1.15Eq.)和2-氯-3-氧代-2，3-二氫-噻吩-2-甲酸甲基酯(680mg，3.53mmol，1.0Eq.)溶于無水MeCN(10mL)和DMF(3mL)，在回流下加熱18小時(shí)。冷卻至環(huán)境溫度后，過濾分離所得沉淀，用DCM洗滌，得到小標(biāo)題化合物，為褐色固體(415mg,1.31mmol37%);^NMR(400MHz，CDC13)53.77(3H，s)，6.89(1H，t)，7.11(1H，s)，7.31(2H，t)，7.57(2H，t)，9.15(1H，s)，9.70(1H，s)，10.78(1H，s)。方法B:3-[l-(2-氯-苯基)-乙氧基]-5-(3-苯基氨基-[l，2，4]三唑-l-基)-噻吩-2-甲酸甲基酯在0"C氮下，將三苯膦(124mg，0.47mmo1，1.5Eq.)加入到被攪拌的1-(2-氯-苯基)-乙醇(74mg，0.47mmol，1.5Eq.)的無水THF(5mL)溶液中。將反應(yīng)物在該溫度下攪拌30分鐘，然后滴加偶氮二羧酸二乙酯(75juL，0.47mmo1，1.5Eq.)，將反應(yīng)物在0"C下攪拌另外1小時(shí)。加入3-羥基-5-(3-苯基氨基-[l，2，4]三喳-l-基)-噻吩-2-甲酸甲基酯(100mg，0.32睡1，1.0Eq.)的無水DMF(2mU溶液，將反應(yīng)物在ox:下攪拌另外1小時(shí)，然后升溫至環(huán)境溫度過夜。使粗反應(yīng)混合物在EtOAc(50mL)與水(50mL)之間分配。將有機(jī)相用水洗滌(2x20mL)，干燥(MgSOJ,在真空中濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色"i普純化(ISCOCompanion,12g柱，0-100%EtOAc/石油醚)，得到小標(biāo)題化合物，為灰白色固體(88mg，0.19mmo1，73%);'H■(400MHz,CDC13)51.74(3H，d)，3.93(3H，s)，5.84(1H，q)，6.70(lh，brs)，6.74(1H，s)，7.02(IH，t)，7.21-7.40(5H，m)，7.51(IH，d)，7.63(1H，d)，8.12(1H，s)。方法C:3-[1-(2-氯-苯基)-乙氧基]-5-(3-苯基氨基-U，2，4]三唑-l-基)-噻吩-2-甲酸酰胺(I-1)將3-[1-(2-氯-苯基)-乙氧基]-5-(3-苯基氨基-[1，2，4]三唑-l-基)-噻吩-2-甲酸曱基酯(66mg，0.15mmol，1.0Eq.)懸浮在7M冊3的MeOH溶液(lOmL)中，在壓力試管中加熱至IOOX:達(dá)3天。在真空中除去溶劑，借助柱色語分離產(chǎn)物(10%MeOH/DCM)，繼之以從乙醚中研制，得到標(biāo)題化合物，為灰白色固體(17mg，0.04,ol，27%);^NMR(400MHz，d-6DMS0)51.72(3H，d)，5.88(1H，q)，6.88(1H，t)，7.03(1H，brs)，7.26(1H，s)，7.30(2H，t)，7.36-7.43(2H，m)，7.52(1H，dd)，7.57(2H，d)，7.66(1H，dd)，7.75(1H，brs)，9.02(1H，brs)，9.65(1H，s)。實(shí)施例2:3-[1-(2-氯-苯基)—乙氧基]-5-[3-(2，2-二氟-苯并[1，3〗二氧雜環(huán)戊烯-4-基氨基)-[1，2，4]三唑-l-基]-噻吩-2-甲酸酰胺(1-2)方法D:(2，2-二氟-苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-4-基)-(1^[1，2，4]三唑-3-基)-胺38將2，2-二氟-苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-4-基-氰酰胺(cyanamide)(1.0g，5.05mmol，1,0Eq.)溶于MeOH(50mL)和水(10mL)。加入水合肼(245jliL，5.05mmol，1.0Eq.)繼之以32wt%含水甲醛(474mL，5.05mmo1，l.OEq.)，將反應(yīng)物在環(huán)境溫度下攪拌過夜。在真空中除去溶劑，使殘余物從MeOH中重結(jié)晶，得到小標(biāo)題化合物，為灰白色固體(516mg，2.15mmo1，42%);力NMR(400MHz，d-6DMS0)56.88(1H，d)，7.10(1H，t)，7.72(1H，d)，8.09(1H，brs)，9.25(1H，brs)，13.20(1H，brs);19F腿(376MHz，d-6DMS0，去偶的質(zhì)子)5-49.1。這種中間體用于方法A-C所述順序，得到標(biāo)題化合物，為灰白色固體(19mg，0.04ramo1,19%);NMR(400MHz，d-6DMS0)51.72(3H，d)，5.87(1H,q)，7.00(2H，d+brs)，7.18(1H，t)，7.29(1H，s)，7.32—7.42(2H，m)，7.51(1H，dd)，7.64-7.68(2H，m)，7.93(1H，brs)，9.04(1H，s)，9.75(1H，s);19F腿(376MHz，d-6DMS0，去偶的質(zhì)子)5-40.1。實(shí)施例3:5-[3-(3-氯-苯基氨基)-[1，2，4]三唑-1-基]-3-[1-(2-氯-苯基)-乙氧基]-噻吩-2-甲酸酰胺(1-3)利用上述方法A-D從3-氯-苯基-氰酰胺制備，從Et0Ac中研制純化，得到標(biāo)題化合物，為淡黃色固體(5mg，0.Olm邁ol，5%);'HNMR(400MHz，d-6DMSO)51.72(3H，s)，5.89(1H，q)，6.92(1H，dd)，7.04(1H，brs)，7.27(1H，s)，7.29-7.53(5H，m)，7.65-7.70(2H，m)，7.70(lh，brs)，9.05(1H，s)，9.90(1H，s)。39<table>tableseeoriginaldocumentpage40</column></row><table>實(shí)施例4:PLK測定法利用下列測定法，本發(fā)明化合物可以被評價(jià)為人PLK激酶抑制劑。Plkl抑制作用測定法:利用放射性磷酸鹽結(jié)合測定法篩選化合物抑制Plkl的能力。在25mMHEPES(pH7.5)、l(hnMMgCl2與lmMDTT的混合物中進(jìn)行測定。最終的底物濃度為5(vm[y-33P]atp(136mCi33Patp/mmolATP，AmershamPharmaciaBiotech/SigmaChemicals)和lOjuM肽(SAM68蛋白A332-443)。在25C下，在15nMPlkl(A20-K338)的存在下進(jìn)行測定。制備測定儲備緩沖溶液，其中含有如上列舉的全部試劑，ATP和有關(guān)供試化合物除外。將30juL儲備溶液置于96孔平板中，繼之以加入2jaLdmso儲備液，其中含有供試化合物的系列稀釋液(通常始于10jaM的最終濃度，按2倍系列稀釋)，一式兩份(最終DMSO濃度5%)。將平板在25X:下預(yù)溫育10分鐘，加入8pL[y-33P]ATP(最終濃度50nM)引發(fā)反應(yīng)。60分鐘后加入lOOpL0.14M磷酸，終止反應(yīng)。將多篩磷酸纖維素過濾96孔平板(Millipore，Catno.MAPHN0B50)用100jaL0.2M磷酸預(yù)處理，然后加入125juL所終止的測定混合物。將平板用4x200pL0.2M磷酸洗滌。干燥后，向小孔加入1(%LOptiphase'SuperMix'液體閃爍雞尾酒試劑(PerkinElmer)，然后閃爍計(jì)數(shù)(1450MicrobetaLiquidScintillationCounter,Wallac)。除去全部數(shù)據(jù)點(diǎn)的平均背景值后，利用Prism軟件包(GraphPadPrismversion3.OexforMacintosh,GraphPadSoftware，SanDiegoCalifornia,USA)從初始速率數(shù)據(jù)的非線性回歸分析計(jì)算Ki(app)數(shù)據(jù)。Plkl抑制作用測定法利用放射性磷酸鹽結(jié)合測定法篩選化合物抑制Plkl的能力。在25mMHEPES(pH7.5)、10mMMgCl2、0.1%BSA與2mMDTT的混合物中進(jìn)行測定。最終的底物濃度為150|nM[y-33P]ATP(115mCi33PATP/mmolATP，AmershamPharmaciaBiotech/SigmaChemicals)和300]nM肽(KKKISDELMDATFADQEAK)。在25匸下，在4nMPlkl的存在下進(jìn)行測定。制備測定儲備緩沖溶液，其中含有如上列舉的全部試劑，ATP和有關(guān)供試化合物除外。將30jiL儲備溶液置于96孔平板中，繼之以加入2jliLDMSO儲備液，其中含有供試化合物的系列稀釋液(通常始于10jiM的最終濃度，按2倍系列稀釋)，一式兩份(最終DMSO濃度5%)。將平板在25C下預(yù)溫育10分鐘，加入8iliL[y-33P]ATP(最終濃度150jaM)引發(fā)反應(yīng)。90分鐘后加入100jiL0.14M磷酸，終止反應(yīng)。將多篩磷酸纖維素過濾96孔平板(Millipore，Catno.MAPHN0B50)用100pL0.2M磷酸預(yù)處理，然后加入125|aL所終止的測定混合物。將平板用4x200pL0.2M磷酸洗滌。干燥后，向小孔加入100|nLOptiphase'SuperMix'液體閃爍雞尾酒試劑(PerkinElmer)，然后閃爍計(jì)數(shù)(1450MicrobetaLiquidScintillationCounter,Wallac)。41除去全部數(shù)據(jù)點(diǎn)的平均背景值后，利用Prism軟件包(GraphPadPrismversion3.OcxforMacintosh,GraphPadSoftware,SanDiegoCalifornia,USA)從初始速率數(shù)據(jù)的非線性回歸分析計(jì)算Ki(app)數(shù)據(jù)。—般而言，本發(fā)明化合物就Plkl的抑制而言是有效的。下列化合物在放射性結(jié)合測定法中顯示10nM與100nM之間的Ki:I-l、1-2和1-3。Plk2抑制作用測定法利用放射性磷酸鹽結(jié)合測定法篩選化合物抑制Plk2的能力。在25mMHEPES(pH7.5)、10mMMgCl2、0.1%BSA與2mMDTT的混合物中進(jìn)行測定。最終的底物濃度為20(VM[y-33P]ATP(57mCi33PATP/mmolATP，AmershamPharmaciaBiotech/SigmaChemicals)和300^M肽(KKKISDELMDATFADQEAK)。在25。C下，在25nMPlk2的存在下進(jìn)行測定。制備測定儲備緩沖溶液，其中含有如上列舉的全部試劑，ATP和有關(guān)供試化合物除外。將30nL儲備溶液置于96孔平板中，繼之以加入2pLDMSO儲備液，其中含有供試化合物的系列稀釋液(通常始于10jiM的最終濃度，按2倍系列稀釋)，一式兩份(最終DMSO濃度5%)。將平板在25C下預(yù)溫育10分鐘，加入8jliL[Y-33P]ATP(最終濃度200jiM)引發(fā)反應(yīng)。90分鐘后加入100juL0.14M磷酸，終止反應(yīng)。將多篩磷酸纖維素過濾96孔平板(Millipore，Catno.MAPHN0B50)用100pL0.2M磷酸預(yù)處理，然后加入125|iL所終止的測定混合物。將平板用4x200jliL0.2M磷酸洗滌。干燥后，向小孔加入100pLOptiphase'SuperMix'液體閃爍雞尾酒試劑(PerkinElmer)，然后閃爍計(jì)數(shù)(1450MicrobetaLiquidScintillationCounter,Wallac)。除去全部數(shù)據(jù)點(diǎn)的平均背景值后，利用Prism軟件包(GraphPadPrismversion3.OcxforMacintosh,GraphPadSoftware,SanDiegoCalifornia,USA)從初始速率數(shù)據(jù)的非線性回歸分析計(jì)算Ki(app)數(shù)據(jù)。Plk3抑制作用測定法利用放射性磷酸鹽結(jié)合測定法篩選化合物抑制Plk3的能力。在25mMHEPES(pH7.5)、lOmMMgCh與lmMDTT的混合物中進(jìn)行測定。最終的底物濃度為75pM[y-33P]ATP(60mCi33PATP/腿o1ATP，AmershamPharmaciaBiotech/SigmaChemicals)和IOjliM肽(SAM68蛋白A332-443)。在25"C下，在5nMPlk3(S38-A340)的存在下進(jìn)行測定。制備測定儲備緩沖溶液，其中含有如上列舉的全部試劑，ATP和有關(guān)供試化合物除外。將30juL儲備溶液置于96孔平板中，繼之以加入2juLDMSO儲備液，其中含有供試化合物的系列稀釋液(通常始于lOiaM的最終濃度，按2倍系列稀釋)，一式兩份(最終DMSO濃度5%)。將平板在25X:下預(yù)溫育10分鐘，加入8^iL[Y-33P]ATP(最終濃度75yM)引發(fā)反應(yīng)。60分鐘后加入100yL0.14M磷酸，終止反應(yīng)。將多篩磷酸纖維素過濾96孔平板(Millipore，Catno.MAPHN0B50)用100jliL0.2M磷酸預(yù)處理，然后加入125|uL所終止的測定混合物。將平板用4x200pL0.2M磷酸洗滌。干燥后，向小孔加入1(%LOptiphase'SuperMix'液體閃爍雞尾酒試劑(PerkinElmer)，然后閃爍計(jì)數(shù)(1450MicrobetaLiquidScintillationCounter,Wallac)。除去全部數(shù)據(jù)點(diǎn)的平均背景值后，利用Prism軟件包(GraphPadPrismversion3.OcxforMacintosh,GraphPadSoftware,SanDiegoCalifornia,USA)從初始速率數(shù)據(jù)的非線性回歸分析計(jì)算Ki(app)數(shù)據(jù)。Plk4抑制作用測定法利用放射性磷酸鹽結(jié)合測定法篩選化合物抑制Plk4的能力。在8mMMOPS(pH7.5)、10mMMgCl2、0,1%BSA與2mMDTT的混合物中進(jìn)行測定。最終的底物濃度為15|nM[y-33P]ATP(227mCi33PATP/mmolATP，AmershamPharmaciaBiotech/SigmaChemicals)和30(^M肽(KKKMDATFADQ)。在25"C下，在25nMPlk4的存在下進(jìn)行測定。制備測定儲備緩沖溶液，其中含有如上列舉的全部試劑，ATP和有關(guān)供試化合物除外。將30pL儲備溶液置于96孔平板中，繼之以加入2)aLDMS0儲備液，其中含有供試化合物的系列稀釋液(通常始于10jaM的最終濃度，按2倍系列稀釋)，一式兩份(最終DMSO濃度5%)。將平板在25。C下預(yù)溫育10分鐘，加入8pL[y-33P]ATP(最終濃度15jiM)引發(fā)反應(yīng)。180分鐘后加入100jiL0.14M磷酸，終止反應(yīng)。將多篩磷酸纖維素過濾96孔平板(Millipore，Catno.MAPHN0B50)用100luLQ.2M磷酸預(yù)處理，然后加入125jjL所終止的測定混合物。將平板用4x200juL0.2M磷酸洗滌。干燥后，向小孔加入100pLOptiphase'SuperMix'液體閃爍雞尾酒試劑(PerkinElmer)，然后閃爍計(jì)數(shù)(1450MicrobetaLiquidScintillationCounter,Wallac)。除去全部數(shù)據(jù)點(diǎn)的平均背景值后，利用Prism軟件包(GraphPadPrismversion3.OcxforMacintosh,GraphPadSoftware,SanDiegoCalifornia,USA)從初始速率數(shù)據(jù)的非線性回歸分析計(jì)算Ki(app)數(shù)據(jù)。盡管我們已經(jīng)描述了本發(fā)明的大量實(shí)施方式，不過顯然可以改變我們的基本實(shí)例，以提供其他利用本發(fā)明化合物、方法和過程的實(shí)施方式。因此，將被領(lǐng)會到，本發(fā)明的范圍受權(quán)利要求而非借助實(shí)例所代表的具體實(shí)施方式的限制。4權(quán)利要求1.式I化合物其中R1是H、C1-6脂族基或C3-6環(huán)脂族基；G是-C(R)2-或-O-；L是C0-3脂族基，可選地被0-3個(gè)JL取代；環(huán)A是三唑基，可選地被0-3個(gè)JA取代；環(huán)B是5-6元芳族單環(huán)的環(huán)，含有0-3個(gè)選自O(shè)、N和S的雜原子；環(huán)B可選地被0-5個(gè)JB取代，并且可選地稠合于環(huán)B′；環(huán)B′是5-8元芳族或非芳族單環(huán)的環(huán)，含有0-3個(gè)選自O(shè)、N和S的雜原子；環(huán)B′可選地被0-4個(gè)JB′取代；每個(gè)JA、JB和JB′獨(dú)立地是C1-6鹵代烷基、鹵代基、NO2、CN、Q或-Z-Q；Z獨(dú)立地是C1-6脂族基，可選地被0-3次出現(xiàn)的-NR-、-O-、-S-、-C(O)-、-C(＝NR)-、-C(＝NOR)-、-SO-或-SO2-中斷；每個(gè)Z可選地被0-2個(gè)JZ取代；Q是H；C1-6脂族基；3-8元芳族或非芳族單環(huán)的環(huán)，具有0-3個(gè)獨(dú)立選自O(shè)、N和S的雜原子；或者8-12元芳族或非芳族二環(huán)的環(huán)系，具有0-5個(gè)獨(dú)立選自O(shè)、N和S的雜原子；每個(gè)Q可選地被0-5個(gè)JQ取代；每個(gè)JL和JZ獨(dú)立地是H、鹵代基、C1-6脂族基、C3-6環(huán)脂族基、NO2、CN、-NH2、-NH(C1-4脂族基)、-N(C1-4脂族基)2、-OH、-O(C1-4脂族基)、-CO2H、-CO2(C1-4脂族基)、-O(鹵代C1-4脂族基)或鹵代(C1-4脂族基)；每個(gè)JQ獨(dú)立地是M或-Y-M；每個(gè)Y獨(dú)立地是未取代的C1-6脂族基，可選地被0-3次出現(xiàn)的-NR-、-O-、-S-、-C(O)-、-SO-或-SO2-中斷；每個(gè)M獨(dú)立地是H、C1-6脂族基、C3-6環(huán)脂族基、鹵代(C1-4脂族基)、-O(鹵代C1-4脂族基)、C3-6雜環(huán)基、鹵代基、NO2、CN、OH、OR′、SH、SR′、NH2、NHR′、N(R′)2、COH、COR′、CONH2、CONHR′、CONR′2、NHCOR′、NR′COR′、NHCONH2、NHCONHR′、NHCON(R′)2、SO2NH2、SO2NHR′、SO2N(R′)2、NHSO2R′或NR′SO2R′；R是H或未取代的C1-6脂族基；R′是未取代的C1-6脂族基；或者兩個(gè)R′基團(tuán)與它們鍵合的原子一起構(gòu)成未取代的3-8元非芳族單環(huán)的環(huán)，具有0-1個(gè)獨(dú)立選自O(shè)、N和S的雜原子。2.權(quán)利要求l的化合物，其中G是-C(R)2-。3.權(quán)利要求l的化合物，其中G是O。4.權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)的化合物，其中W是H。5.權(quán)利要求l-4任意一項(xiàng)的化合物，其中環(huán)A是6.權(quán)利要求5的化合物，其中環(huán)A是t、n^^^a。7.權(quán)利要求5或權(quán)利要求6的化合物，其中環(huán)B是6元芳族環(huán),含有O-2個(gè)氮原子，并且環(huán)B可選地被0-5個(gè)jb取代。8.權(quán)利要求1-7任意一項(xiàng)的化合物，其中環(huán)B稠合于環(huán)B、并且環(huán)B可選地被0-5個(gè)JB取代，環(huán)B'可選地被0-4個(gè)JB'取代。9.權(quán)利要求9的化合物，其中環(huán)B'是5-6元芳族環(huán)，含有0-3個(gè)選自0、N和S的雜原子，其中環(huán)B'可選地被O-4個(gè)JB'取代。10.權(quán)利要求5-9任意一項(xiàng)的化合物，其中JA是H、Cw脂族基、Cw環(huán)脂族基、卣代(Cw脂族基)、-O(鹵代Ch脂族基)、Cw雜環(huán)基、卣代基、N02、CN、0H、0R、SH、SR、NH2、腿、N(R)2、C0H、C0R、CONH"C0NHR、C0NR2、NHC0R、NRC0R、NHC0NH2、NHCONHR、NHC0N(R)2、S02NH2、S0纖、S02N(R)2、NHS02R或NRS02R。11.權(quán)利要求10的化合物，其中JA是H。12.權(quán)利要求5-ll任意一項(xiàng)的化合物，其中JB是H、Ch脂族基、Cw環(huán)脂族基、面代(Ch脂族基)、-O(卣代Cw脂族基)、Cw雜環(huán)基、卣代基、N02、CN、0H、0R、SH、SR、NH2、■、N(R)2、C0H、C0R、CONH"C0NHR、C0NR2、NHC0R、NRC0R、NHC0NH2、NHCONHR、NHC0N(R)2、S02NH2、S02NHR、S02N(R)2、NHS02R或NRS02R。13.權(quán)利要求5-12任意一項(xiàng)的化合物，其中JB'是H、Cw脂族基、Cw環(huán)脂族基、面代(Ch脂族基)、-0(面代Ch脂族基)、Cs陽6雜環(huán)基、鹵代基、N02、CN、0H、0R、SH、SR、NH2、NHR、N(R)2、C0H、C0R、C0NH2、C0NHR、C0NR2、NHC0R、NRC0R、NHC0NH2、NHC0NHR、NHC0N(R)2、S0具、S02NHR、S02N(R)2、NHS02R或NRS02R。14.選自下組的化合物和15.組合物，包含權(quán)利要求l-14任意一項(xiàng)的化合物和藥學(xué)上可接受的栽體、助劑或媒介。16.抑制患者的蛋白激酶活性的方法，包含對所述患者給予a)權(quán)利要求15的組合物；或者b)權(quán)利要求1-14任意一項(xiàng)的化合物。17.抑制生物樣品的蛋白激酶活性的方法，包含使所述生物樣品接觸a)權(quán)利要求15的組合物；或者b)權(quán)利要求1-14任意一項(xiàng)的化合物。18.權(quán)利要求16或權(quán)利要求17的方法，其中所述蛋白激酶是PLK。19.權(quán)利要求18的方法，其中所述蛋白激酶是Plkl。20.治療患者的增殖疾患、神經(jīng)變性疾患、自身免疫疾患、炎性疾患或免疫學(xué)-介導(dǎo)的疾患的方法，包含對患者給予a)權(quán)利要求15的組合物；或者b)權(quán)利要求1-14任意一項(xiàng)的化合物。21.根據(jù)權(quán)利要求16或權(quán)利要求20的方法，包含對所述患者給予選自如下的附加治療劑化療或抗增殖劑、抗炎劑、免疫調(diào)控或免疫抑制劑、神經(jīng)營養(yǎng)因子、治療心血管疾病的藥物、治療破壞性骨疾患的藥物、治療肝疾病的藥物、抗病毒劑、治療血液疾患的藥物、治療糖尿病的藥物或者治療免疫缺陷疾患的藥物，其中所述另外的治療劑就所治療的疾病而言是適當(dāng)?shù)模灰约八隽硗獾闹委焺┡c所述組合物一起作為單一劑型給藥或者與所述組合物分開作為多元?jiǎng)┬偷囊徊糠纸o藥。22.治療患者的黑素瘤、骨髓瘤、白血病、淋巴瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤或者選自如下的癌癥的方法結(jié)腸、乳腺、胃、卵巢、宮頸、肺、中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)、腎、前列腺、膀胱或胰腺，其中所述方法包含對所述患者給予a)權(quán)利要求15的組合物；或者b)權(quán)利要求1-14任意一項(xiàng)的化合物。23.治療患者的癌癥的方法，其中所述方法包含對所述患者給予a)權(quán)利要求15的組合物；或者b)權(quán)利要求1-14任意一項(xiàng)的化合物。24.權(quán)利要求23的方法，其中所述方法包含破壞癌細(xì)胞的有絲分裂的步驟，這是通過用a)權(quán)利要求15的組合物；或者b)權(quán)利要求1—14任意一項(xiàng)的化合物抑制PLK來實(shí)現(xiàn)的。25.制備式I化合物的方法其中G是0，R'是H，環(huán)A、環(huán)B、JA、JB和L是根據(jù)權(quán)利要求1-14任意一項(xiàng)定義的，包含使式3化合物3其中G是O，環(huán)A、環(huán)B、JA、JB和L是根據(jù)權(quán)利要求l-14任意一項(xiàng)定義的，在適合的酰胺生成條件下生成式I化合物。26.制備式3化合物的方法其中環(huán)A、環(huán)B、JA、JB和L是根據(jù)權(quán)利要求1-14任意一項(xiàng)定義的，包含使式2化合物(JA)o-3~(Al人j0反應(yīng);其中LG是適合的離去基團(tuán)，L、環(huán)B和JB是根據(jù)權(quán)利要求1-14任意一項(xiàng)定義的；在適合的0-C鍵偶聯(lián)條件下生成式3化合物。27.權(quán)利要求26的方法，進(jìn)一步包含如下步驟向式1化合物加成(」3<^，其中環(huán)A是含有能夠親核進(jìn)攻的氮原子的芳族環(huán)，是根據(jù)權(quán)利要求1-14任意一項(xiàng)定義的；經(jīng)由適合的共軛加成條件生成式2化合物。28.權(quán)利要求27的方法，是式6化合物:29.權(quán)利要求28的方法將式5化合物進(jìn)一步包含如下步驟:用醛和肼處理，生成式6化合物。全文摘要本發(fā)明涉及可用作蛋白激酶抑制劑的化合物。本發(fā)明也提供包含本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的組合物和在各種疾患的治療中使用這些組合物的方法。本發(fā)明也提供制備本發(fā)明化合物的方法。文檔編號C07D409/04GK101495474SQ200780025761公開日2009年7月29日申請日期2007年5月22日優(yōu)先權(quán)日2006年5月23日發(fā)明者G·布蘭克雷,J-D·沙里耶,R·克內(nèi)戈泰爾,S·拉瑪雅,S·杜蘭特,S·薩迪克申請人:沃泰克斯藥物股份有限公司