專利名稱：：甲基水合鈷啉酸衍生物、烷基化組合物、以及通過(guò)使用該組合物對(duì)有害化合物解毒的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及曱基水合鈷啉酸衍生物、烷基化組合物、以及通過(guò)使用該組合物對(duì)有害化合物解毒的方法。
背景技術(shù)：
：重金屬物質(zhì)例如砷、銻和硒被廣泛用作工業(yè)材料、例如半導(dǎo)體，但是由于其流出至環(huán)境中而對(duì)生物體產(chǎn)生的影響受到關(guān)注，因?yàn)槠涫菍?duì)生物體有害的物質(zhì)。過(guò)去，作為除去這些重金屬的方法，通常已知其中將絮凝劑例如聚合氯化鋁(PAC)加入到含有無(wú)機(jī)砷例如有害亞砷酸的廢水中、然后在無(wú)機(jī)砷聚集、吸附到未凈化水中所含的鐵和所述絮凝劑上和接著沉淀之后經(jīng)由過(guò)濾除去所述無(wú)機(jī)砷的方法，或者其中通過(guò)使用活性氧化鋁、鈰基絮凝劑吸附砷化合物等的方法。另一方面，事實(shí)上已知在諸如海藻等的海產(chǎn)食物中儲(chǔ)存有無(wú)機(jī)砷，一部分無(wú)機(jī)砷通過(guò)生理反應(yīng)轉(zhuǎn)化成有機(jī)砷化合物例如二甲基砷(非專利文獻(xiàn)1)。而且，通常已知這些有機(jī)砷化合物對(duì)于哺乳動(dòng)物而言具有比無(wú)機(jī)砷低的毒性。特別地，海產(chǎn)食物中所含的大部分砷作為砷甜菜堿存在。國(guó)際上認(rèn)為砷甜菜堿是無(wú)害物質(zhì)。非專利文獻(xiàn)1:Kaise等，1998，Orga議et.Chem.，12137-14
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所解決的問(wèn)題然而，在上述以采用過(guò)濾和吸附為特征的重金屬清除方法中，必須在用混凝土等密封該有害化合物以便防止它泄漏到外面的條7件下，存放或回收含有仍然有害的諸如無(wú)機(jī)砷等有害化合物以及其上吸收有有害化合物的吸收劑的被污染淤積物。因此，由于需要存放場(chǎng)所或用于回收區(qū)域的廣大空間，存在難以大量處理的問(wèn)題。因此，為了解決上述問(wèn)題，本發(fā)明的目的在于提供一種有益的組合物和一種對(duì)有害化合物解毒的方法，其通過(guò)使用所述組合物以有效和系統(tǒng)地使包含砷等的有害化合物解毒。解決問(wèn)題的手段為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明人對(duì)通過(guò)釆用具有鈷-碳鍵的有機(jī)金屬絡(luò)合物的化學(xué)反應(yīng)而發(fā)生的所述有害化合物的曱基化反應(yīng)、特別是包含砷等的有害化合物的甲基化、尤其是二甲基化、更優(yōu)選三甲基化進(jìn)行了努力的研究。結(jié)果，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)了本發(fā)明。也就是，本發(fā)明的曱基水合鈷啉酸衍生物(methylaquocobyrinicacidderivative)的特征在于戶斤述f汙生4勿i口下歹'J通式[化學(xué)式l]所示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>(其中，該式中的X為H或Na)。本發(fā)明的用于烷基化的組合物，其中所述組合物包含具有鈷-碳鍵的有機(jī)金屬絡(luò)合物，所述有機(jī)金屬絡(luò)合物為下列通式[化學(xué)式2]所示的甲基水合鈷啉酸衍生物[化學(xué)式2]X:CH3，H，Na(其中，該式中的X為CH3、H或Na)。此外，在本發(fā)明的用于烷基化的組合物的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述有機(jī)金屬絡(luò)合物為甲基水合鈷啉酸七甲基酯高氯酸鹽[(CH3)(H20)Cob(ni)7d酯]C104[化學(xué)式3]:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>此外，在本發(fā)明的用于烷基化的組合物的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中通過(guò)使用所述有機(jī)金屬絡(luò)合物使包含選自砷、銻和硒的至少一種元素的有害化合物烷基化。此外，在本發(fā)明的用于烷基化的組合物的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述組合物進(jìn)一步包含還原劑以還原選自砷、銻和硒的至少一種金屬。此外，在本發(fā)明用于烷基化的組合物的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述還原劑是具有SH基團(tuán)的物質(zhì)。此外，在本發(fā)明的用于烷基化的組合物的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述具有SH基團(tuán)的物質(zhì)為選自谷胱甘肽、還原型谷胱甘肽(GSH)、半胱氨酸、S-腺苷半胱氨酸、1-異硫氰基-411-(甲基亞硫?；?丁烷(又^7才^77V)、二硫蘇糖醇和硫代甘醇中的至少一種。此外，在本發(fā)明的用于烷基化的組合物的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述組合物進(jìn)一步包含具有S-Me基團(tuán)的甲基化加性因子(添加因子)。此外，在本發(fā)明的用于烷基化的組合物的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述甲基化加性因子為選自曱硫氨酸和S-腺苷甲硫氨酸中的至少一種。此外，在本發(fā)明的用于烷基化的組合物的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述組合物進(jìn)一步包含緩沖溶液。此外，在本發(fā)明的用于烷基化的組合物的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述緩沖溶液的pH為5-10。此外，在本發(fā)明的用于烷基化的組合物的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述組合物進(jìn)一步包含有機(jī)卣化物。此外，在本發(fā)明的用于烷基化的組合物的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述有機(jī)卣化物為卣代甲烷。此外，在本發(fā)明的用于烷基化的組合物的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述卣代甲烷為選自碘甲烷、溴甲烷和氯甲烷中的至少一種。此外，在本發(fā)明的用于烷基化的組合物的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述有機(jī)卣化物為卣代乙酸。此外，在本發(fā)明的用于烷基化的組合物的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述鹵代乙酸為選自氯乙酸、溴乙酸和碘乙酸中的至少一種。此外，在本發(fā)明的用于烷基化的組合物的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述有機(jī)卣化物為選自氯甲烷、溴甲烷、碘甲烷、氯乙酸、溴乙酸、碘乙酸、氯乙醇、溴乙醇、碘乙醇、氯丙酸、溴丙酸、碘丙酸、氯乙酸乙酯、溴乙酸乙酯、碘乙酸乙酯中的至少一種。此外，本發(fā)明的對(duì)有害化合物解毒的方法，其中通過(guò)在權(quán)利要求2-17任一項(xiàng)的組合物的存在下烷基化包含選自砷、銻和硒的至少一種元素的有害化合物而使所述有害化合物解毒。此外，在本發(fā)明的對(duì)有害化合物解毒的方法的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中通過(guò)提高所述一種元素的價(jià)數(shù)的氧化值而實(shí)現(xiàn)所述解毒。此外，在本發(fā)明的對(duì)有害化合物解毒的方法的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中使所述一種元素的至少一個(gè)鍵烷基化。此外，在本發(fā)明的對(duì)有害化合物解毒的方法的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述元素為砷。此外，在本發(fā)明的對(duì)有害化合物解毒的方法的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中通過(guò)所述烷基化而解毒的化合物的50。/。致命劑量(LD5。)大于或等于1000mg/kg。此外，在本發(fā)明的對(duì)有害化合物解毒的方法的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中通過(guò)所述烷基化而解毒的化合物的50%細(xì)胞生長(zhǎng)抑制濃度(IC5。)大于或等于lOOOjnM。此外，在本發(fā)明的對(duì)有害化合物解毒的方法的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述有害化合物選自三氧化二砷、五氧化二砷、三氯化砷、五氯化砷、硫化砷化合物、氰基砷化合物、氯砷化合物、和其它砷無(wú)機(jī)鹽。此外，在本發(fā)明的對(duì)有害化合物解毒的方法的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述烷基化是甲基化。此外，在本發(fā)明的對(duì)有害化合物解毒的方法的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述有害化合物通過(guò)甲基化而被轉(zhuǎn)化成二曱基化合物或三甲基化合物。此外，在本發(fā)明的對(duì)有害化合物解毒的方法的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述二甲基化合物為二甲基胂酸基乙醇(->亍>11/7;11/7二^工夕/—，DMAE)、二曱基胂酸基乙酸酯(i^于A7AV二A7行一卜，DMAA)、二甲胂酸(->于^7^、:>>酸)或砷糖。此外，在本發(fā)明的對(duì)有害化合物解毒的方法的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述三甲基化合物為砷膽堿、砷甜菜堿、三甲基砷糖或氧化三曱胂。發(fā)明效果本發(fā)明的用于烷基化的組合物具有可以容易和簡(jiǎn)便地烷基化所述有害化合物、特別是含有砷、銻和竭等的有害化合物的有利效果。此外，根據(jù)本發(fā)明的方法，由于可以無(wú)限制地對(duì)所述有害化合物解毒，它的有利效果在于不需要諸如存放場(chǎng)所之類的廣大空間。此外，根據(jù)本發(fā)明的方法，由于它本質(zhì)上在活性條件中不使用生物材料，因此它的有利效果在于不會(huì)生成不必要的副產(chǎn)物。此外，根據(jù)本發(fā)明的方法，它的有利效果在于可以甚至用簡(jiǎn)單的方法減少有害的無(wú)機(jī)砷。附圖簡(jiǎn)要說(shuō)明[圖l]圖l提供維生素Bu的Co(III)絡(luò)合物的電子光傳(溶劑二氯甲烷)。分別地，A表示(CN)2Cob(III)7d酯的情況，而B表示[(CN)(H20)Cob(III)7Ci酯]C104的情況。圖2提供維生素Bu的Co(II)絡(luò)合物的電子光譜(溶劑二氯甲烷)。分別地，A表示[Cob(II)7C:酯]C104(base-off型)的情況，而B表示[Cob(II)7d酉旨]C104+吡啶(base-on型)的情況。圖3提供維生素Bu的Co絡(luò)合物的電子光譜(溶劑二氯甲烷)。在圖3中，分別地，A表示[(CH》(H20)Cob(ni)7C,酯]C104(溶劑二氯曱烷，光照射之前)，而B表示光照射之后A的光譜的情況。圖4提供根據(jù)[(CH3)(H20)Cob(ni)7d酯]C10,的無(wú)機(jī)砷的曱基化反應(yīng)產(chǎn)物的HPLC-ICP-MS色譜。分別地，(A)表示反應(yīng)后30分鐘的情況，(B)表示反應(yīng)后4小時(shí)的情況。圖5提供HPLC-ICP-MS色譜。(圖上的編號(hào)對(duì)應(yīng)于表3中的編號(hào)。)圖6提供HPLC-ICP-MS色鐠。(圖上的編號(hào)對(duì)應(yīng)于表3中的編號(hào)。)圖7提供反應(yīng)溶液中砷化合物濃度的每小時(shí)變化。(它是根據(jù)表3中編號(hào)1-8的圖。)圖8顯示反應(yīng)溶液中砷化合物百分?jǐn)?shù)的每小時(shí)變化。(它是表3中編號(hào)1-7的圖表。)物百分?jǐn)?shù)的每小時(shí)變化。(它是表3中編號(hào)6-11的圖表。)圖10提供HPLC-ICP-MS色譜。(圖上的編號(hào)對(duì)應(yīng)于表4中的編號(hào)。)圖11提供HPLC-ICP-MS色語(yǔ)。(圖上的編號(hào)對(duì)應(yīng)于表4中的編號(hào)。)圖12提供HPLC-ICP-MS色鐠(在過(guò)氧化氫處理的情況下)。(圖上的編號(hào)對(duì)應(yīng)于表4中的編號(hào)。)圖13提供HPLC-ICP-MS色譜。(圖上的編號(hào)對(duì)應(yīng)于表4中的編號(hào)12-14。)圖14顯示反應(yīng)溶液中砷化合物濃度的每小時(shí)變化(在未用過(guò)氧化氫處理的情況下)。圖15顯示反應(yīng)溶液中砷化合物濃度的每小時(shí)變化(在過(guò)氧化氫處理之后)。圖16顯示反應(yīng)溶液中砷化合物百分?jǐn)?shù)的每小時(shí)變化(在未用過(guò)氧化氫處理的情況下)。圖17顯示反應(yīng)溶液中砷化合物百分?jǐn)?shù)的每小時(shí)變化(在過(guò)氧化氫處理之后)。圖18顯示反應(yīng)溶液中砷化合物百分?jǐn)?shù)的每小時(shí)變化。[圖19]圖19提供HPLC-ICP-MS色譜。圖20提供HPLC-ICP-MS色譜(對(duì)應(yīng)于表6中的編號(hào)10、表7中的編號(hào)10和表8中的編號(hào)10)。圖21提供甲基水合鈷啉酸七甲基酯高氯酸鹽[(CH3)(H20)Cob(III)7d酉旨]C104的電子光語(yǔ)。A:光照射之前，B:光照射之后。圖22提供曱基水合鈷啉酸鈉高氯酸鹽[(CH3)(H20)Cob(III)COONa]C104的電子光鐠。A:光照射之前，B:光照射之后。圖23提供HPLC-ICP-MS色譜。[圖24]圖24提供甲基水合鈷啉酸七甲基酯高氯酸鹽[(CH3)(H20)Cob(III)7C!酉旨]C104的〗H-NMR。圖25提供在甲基水合鈷啉酸七甲基酯高氯酸鹽[(CH3)(H20)Cob(III)7C!酯]Cl(M皮水解的情況下的^-NMR信號(hào)。實(shí)施發(fā)明的最佳方式本發(fā)明的甲基水合鈷啉酸衍生物的特征在于所述衍生物如下列通式[化學(xué)式4]所示[化學(xué)式4]一PH3COOXcio4COOXX:H，Na(其中，該式中的X為H或Na)。在一種優(yōu)選實(shí)施方案中，上式[化學(xué)式4]中的X為H或Na。此外，本發(fā)明的用于烷基化的組合物，其中所述組合物包含具有鈷-碳鍵的有機(jī)金屬絡(luò)合物，所述有機(jī)金屬絡(luò)合物為下列通式[化學(xué)式5]所示的甲基水合鈷啉酸衍生物15<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>(其中，該式中的X為CH3、H或Na)。在一種優(yōu)選實(shí)施方案中，上式[化學(xué)式5]中的X為H或Na。此時(shí)，X優(yōu)選為H或Na的理由取決于發(fā)明人的新認(rèn)識(shí)，即由于那些甲基水合鈷啉酸衍生物的應(yīng)用使得可以增加溶液的溶解性和提高濃度，對(duì)于砷等的甲基化可以在幾乎100%的收率下將三氧化二砷等轉(zhuǎn)化成三甲基砷等。也就是，這是由于本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，與該式[化學(xué)式5]中的X=CH3(疏水性維生素B12(鈷啉酸七曱基酯))的情況相比，那些在X-H或Na的情況下的衍生物具有可溶性羧基，以至于這使得可以提高溶解度而且提供高濃度環(huán)境以便提高曱基化反應(yīng)的效率。另一方面，在疏水性維生素B12([化學(xué)式5]中的X-CH3)的情況下，從所述化合物具有如下作為化合物有利效果的突出益處的觀點(diǎn)來(lái)看，也可以使用該化合物(l)這使得可以通過(guò)有機(jī)溶劑從反應(yīng)溶液的混合物中容易地萃取它并且重復(fù)利用，(2)在同時(shí)存在有機(jī)溶劑的水溶性體系中的反應(yīng)性高于或等于水溶性維生素B12(甲基鈷胺素)的反應(yīng)性。此外，在本發(fā)明的用于烷基化的組合物的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述組合物包含曱基水合鈷啉酸七甲基酯高氯酸鹽CIO,[化學(xué)式63，它為含有鈷-碳鍵的有機(jī)金屬絡(luò)合物[化學(xué)式6]X=CH3，Y=H20[(CH3XH20)Cob(lll)7C，酉旨1CI04此外，可以使用上述化合物作為所述組合物，即使其中上述X-H、CH3或Na的化合物可以單獨(dú)或者與那些化合物組合使用，例如，X-H的化合物與X-CH3的化合物的組合，X=H的化合物與X=Na的化合物的組合，或者X=Na的化合物與X-CH3的化合物的組合，或者即使包括全部化合物、也就是X=H的化合物、X-CH3的化合物和X=Na的化合物在內(nèi)的化合物可以用作所述組合物。也就是，在本發(fā)明的用于烷基化的組合物中，可以通過(guò)使用所述有機(jī)金屬絡(luò)合物烷基化包含選自砷、銻和竭的至少一種元素的有害化合物。本文使用的術(shù)語(yǔ)"有害化合物，，是指當(dāng)它流出至環(huán)境中并且暴露于有機(jī)體時(shí)對(duì)有機(jī)體產(chǎn)生任何不利影響的化合物。作為上述有害化合物中含砷的有害化合物，可以提及亞砷H3C02CCC^CHCIO17酸、五氧化二砷、三氯化砷、五氯化砷、硫化砷化合物、氰基砷化合物、氯砷化合物、和其它砷無(wú)機(jī)鹽等等。在這些砷化合物中，例如，LD5。(50°/。口中致命劑量)小于或等于20，因此，它通常為對(duì)有機(jī)體而言的有毒值。此外，作為含銻的有害化合物，可以提及三氧化二銻、五氧化二銻、三氯化銻和五氯化銻等。此外，作為含硒的有害化合物，可以提及二氧化硒、三氧化硒。在一種優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物可以進(jìn)一步包含還原劑以還原選自砷、銻和硒的至少一種金屬。還原劑的存在使得可以進(jìn)一步加速烷基化。雖然認(rèn)為所述砷的還原能力或曱基轉(zhuǎn)移反應(yīng)可能是向砷甜菜堿轉(zhuǎn)化中的速率控制，但是認(rèn)為可以通過(guò)添加那些物質(zhì)加速向砷甜菜堿等的轉(zhuǎn)化。作為象這樣的還原劑，例如，可以提及具有SH基團(tuán)的物質(zhì)，它可以特別地為選自谷胱甘肽、還原型谷胱甘肽(GSH)、半胱氨酸、S-腺苷半胱氨酸、1-異硫氰基-核-(甲基亞硫?；?丁烷、二硫蘇糖醇和硫代甘醇中的至少一種。此外，在本發(fā)明的用于烷基化的組合物的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述組合物進(jìn)一步包含具有S-Me基團(tuán)的曱基化加性因子。具有S-Me基團(tuán)的曱基化加性因子的存在使得可以產(chǎn)生更多烷基，從而實(shí)現(xiàn)更多烷基化和因此更大的解毒作用。作為曱基化加性因子，可以提及選自甲硫氨酸和S-腺苷甲硫氨酸中的至少一種。此外，本發(fā)明的用于烷基化的組合物可以進(jìn)一步包含緩沖溶液。通常用于生物醫(yī)學(xué)材料的分離、純化或保存的那些可以用作緩沖溶液，而且對(duì)那些緩沖溶液沒(méi)有特別限制，然而可以提及諸如三羥甲基氨基甲烷緩沖液、磷酸鹽緩沖液、碳酸緩沖液和硼酸緩沖液之類的緩沖溶液。此外，從可以更安全地實(shí)現(xiàn)解毒的觀點(diǎn)來(lái)看，所述緩沖溶液的pH優(yōu)選為5-10。此外，本發(fā)明的用于烷基化的組合物可以進(jìn)一步包含有機(jī)卣化物。從可以使得容易將二甲基化合物和/或三甲基化合物轉(zhuǎn)化成砷18甜菜堿的觀點(diǎn)來(lái)看，可以列舉卣代甲烷作為所述有機(jī)卣化物。從甲基化的高反應(yīng)性觀點(diǎn)來(lái)看，作為卣代曱烷，可以提及選自碘曱烷、溴甲烷和氯甲烷中的至少一種。另外，從烷基化的高反應(yīng)性的觀點(diǎn)來(lái)看，作為所述有機(jī)卣化物，可以提及選自碘乙酸、碘乙醇、溴乙酸、溴乙醇、碘丙酸中的至少一種。在一種優(yōu)選實(shí)施方案中，所述有機(jī)卣化物可以是卣代乙酸。作為卣代乙酸的實(shí)例，可以提及選自氯乙酸、溴乙酸和碘乙酸中的至少一種。此外，在一種優(yōu)選實(shí)施方案中，作為所述有機(jī)卣化物，可以提及選自氯曱烷、溴甲烷、碘甲烷、氯乙酸、溴乙酸、碘乙酸、氯乙醇、溴乙醇、碘乙醇、氯丙酸、溴丙酸、碘丙酸、氯乙酸乙酯、溴乙酸乙酯和碘乙酸乙酯中的至少一種。接下來(lái)，說(shuō)明本發(fā)明的對(duì)有害化合物解毒的方法。即，本發(fā)明的對(duì)有害化合物解毒的方法的特征在于，在如上所述的本發(fā)明的用于烷基化的組合物的存在下，通過(guò)烷基化包含選自砷、銻和硒的至少一種元素的有害化合物而使所述有害化合物解毒。這里，本發(fā)明的用于烷基化的組合物和此處所用的有害化合物是指上面說(shuō)明的那些，那些說(shuō)明可以適用于本發(fā)明的對(duì)有害化合物解毒的方法。此外，在本發(fā)明的對(duì)有害化合物解毒的方法的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，從50%細(xì)胞生長(zhǎng)抑制濃度(IC5。)或50%致命劑量(LD50)更大并且因此可以實(shí)現(xiàn)更大解毒作用的觀點(diǎn)來(lái)看，優(yōu)選通過(guò)提高上述有害化合物包含的所述一種元素的價(jià)數(shù)的氧化值而實(shí)現(xiàn)所述解毒。具體地，可以使用如上所述的本發(fā)明組合物作為反應(yīng)催化劑通過(guò)烷基化來(lái)提高所述一種元素的價(jià)數(shù)的氧化值。此外，在所述元素為砷或銻的情況下優(yōu)選使三價(jià)的價(jià)數(shù)的氧化值轉(zhuǎn)變成五價(jià)，在硒的情況下優(yōu)選使四價(jià)的價(jià)數(shù)的氧化值轉(zhuǎn)變成六價(jià)。在本發(fā)明中，通過(guò)烷基化所述有害化合物進(jìn)行有害化合物的解毒。這里，本發(fā)明可以通過(guò)將上述有害化合物包含的所述一種元素的至少一個(gè)鍵烷基化而實(shí)現(xiàn)該解毒。具體地，可以通過(guò)使用如上所述的本發(fā)明用于烷基化的組合物進(jìn)行所述反應(yīng)而將所述一種元素的至少一個(gè)鍵烷基化。作為附加至所述一種元素的烷基，可以提及甲基、乙基、丙基等。從可以更有效地實(shí)現(xiàn)解毒的觀點(diǎn)來(lái)看，曱基優(yōu)選作為烷基。在本發(fā)明的對(duì)有害化合物解毒的方法中，從對(duì)于活體的安全性的觀點(diǎn)來(lái)看，由上述烷基化而解毒的化合物的50y。致命劑量(LDs。)(給予50%口中致命劑量的口服毒性)優(yōu)選大于或等于1000mg/kg,更優(yōu)選大于或等于5000mg/kg。此外，在本發(fā)明的對(duì)有害化合物解毒的方法中，從對(duì)于活體的安全性的觀點(diǎn)來(lái)看，由上述烷基化或芳基化而解毒的化合物的50%細(xì)胞生長(zhǎng)抑制濃度(IC5。)優(yōu)選大于或等于1000uM，更優(yōu)選大于或等于3000|aM。此時(shí)，本文使用的術(shù)語(yǔ)"50。/。細(xì)胞生長(zhǎng)抑制濃度(IC5。)"是指為了使用某一物質(zhì)來(lái)阻礙或抑制100細(xì)胞增殖的50%而提供的該物質(zhì)的必要濃度的數(shù)值。顯示出的是ICs。數(shù)值越小，細(xì)胞毒性越大。此外，由37。C、24小時(shí)的條件下產(chǎn)生質(zhì)粒DNA損傷的細(xì)胞毒性檢驗(yàn)的結(jié)果計(jì)算出IC5。。此時(shí)，每種砷化合物的ICs。示于表l中。<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>*50%生長(zhǎng)抑制從表1中，顯示出含三價(jià)砷(III)的砷糖(III)具有比含五價(jià)砷的單甲基化砷(醒A)和二甲基化砷(DMA)更高的細(xì)胞毒性，然而具有比含三價(jià)砷的單甲基化砷(MMA)和二曱基化砷(DMA)以及亞砷酸更低的細(xì)胞毒性。另一方面，認(rèn)識(shí)到含三價(jià)砷的單曱基化砷(MMA)和二甲基化砷(DMA)具有比亞砷酸(三價(jià)和五價(jià))更高的細(xì)胞毒性，然而總體上，從細(xì)胞毒性的觀點(diǎn)來(lái)看，含五價(jià)砷的砷(V)化合物具有比含三價(jià)砷的砷(III)化合物對(duì)于活體而言更高的安全性。此外，每種砷化合物的LDso示于表2中。<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>*50°/。致命劑量此外，在本發(fā)明的對(duì)有害化合物解毒的方法中，從對(duì)于活體的安全性的觀點(diǎn)來(lái)看，通過(guò)上述烷基化而解毒的化合物的生物半衰期優(yōu)選小于或等于8小時(shí)。在本發(fā)明的對(duì)有害化合物解毒的方法中，從安全和具有較低毒性的觀點(diǎn)來(lái)看，優(yōu)選使有害化合物借助于所述甲基化而被轉(zhuǎn)化成二甲基化合物或三甲基化合物。作為二甲基化合物，可以提及二曱基胂酸基乙醇(DMAE)、二曱基胂酸基乙酸酯(DMAA)、二甲胂酸或砷糖。作為三甲基化合物，可以提及砷膽堿、砷甜菜堿、三甲基砷糖或氧化三曱胂。實(shí)施例將要參照實(shí)施例更詳細(xì)地具體說(shuō)明本發(fā)明，但是本發(fā)明并非意圖解釋成限于下列實(shí)施例。首先，關(guān)于實(shí)施例中所用簡(jiǎn)碼的說(shuō)明如下<簡(jiǎn)碼>C104:甲基水合鈷啉酸七甲基酯高氯酸鹽iAs(III):三價(jià)無(wú)機(jī)砷MMA:單甲基化砷酸DMA:二甲基化次胂酸TMA0:氧化三曱胂AB:砷甜菜堿(三曱基砷乙酸)DMAA:二甲基砷乙酸AS:砷糖MeCo:甲基鈷胺素GSH:谷胱甘肽(還原型)iSe(IV):無(wú)機(jī)硒(四價(jià))MIAA:單多典乙酸<鈷絡(luò)合物的合成>合成[(CH》(H20)Cob(ni)7d酯]C104:甲基水合鈷啉酸七曱基酯高氯酸鹽(1)(CN)2Cob(III)7d酯的合成<反應(yīng)線路>[化學(xué)式7]上述線路[化學(xué)式7]顯示從氰基鈷胺素(化學(xué)式7的左側(cè))到(CN)2Cob(III)7C酯(化學(xué)式7的右側(cè))的反應(yīng)線路。<實(shí)驗(yàn)過(guò)程>將1.0g氰基鈷胺素(7.5x10—4mol)溶解在300mL甲醇中，向如此獲得的混合物中滴入添加50ml冷濃硫酸的150ml曱醇，接著將如此獲得的混合物在遮光條件和氮?dú)夥諊录訜嶂粱亓鬟_(dá)120小時(shí)。此后，在減壓下濃縮該反應(yīng)混合物，接著添加lOOmL冷水并用固體碳酸鈉中和。向其中加入4.0g氰化鉀(6.1x10—2mol),并用四氯化碳萃取(150mLx3)。此外，用二氯曱烷萃取它(150mLx3)。由于二氯甲烷萃取物含有不完全的酯化合物，再次進(jìn)行上述操作。用硫酸鈉干燥四氯化碳萃取物，然后減壓千燥。用苯/正己烷(l:lv/v)進(jìn)行它們的再沉淀從而獲得紫色粉末。(產(chǎn)量777mg0.1x10—4raol)，收率95%)<確認(rèn)>Mp:138-140。C,分解點(diǎn)193-196。C。電子光諳在圖1的A中顯示。IR(KBr壓片法)v(C^N)2130;v(酯C=0)1725cm一1元素分析實(shí)測(cè)值C，58.46;H，6.74;N，7.58%C54H73CoN60『H20計(jì)算值C,58.58;H，6.83;N，7.59%圖1顯示維生素Bu的Co(III)絡(luò)合物的電子光譜。(溶劑二氯甲烷)。分別地，A表示(CN)2Cob(III)7C！酯的情況，而B表示[(CN)(H20)Cob(III)7C!酯]C104的情況。(2)[(CN)(H20)Cob(III)7C酉旨]C104的合成<反應(yīng)線路>上述反應(yīng)線路[化學(xué)式8]顯示從(CN)2Cob(ni)7(^S旨到[(CN)(H20)Cob(111)7C:酯]C104的反應(yīng)。<實(shí)驗(yàn)過(guò)程>將50mg(CN)2Cob(III)7d酯(4.6xl(T5mol)溶解在100mL二氯甲烷中，通過(guò)用30%HC10細(xì)和分液漏斗而搖動(dòng)。用水洗滌混合物，并用無(wú)水硫酸鈉干燥，然后減壓干燥。用苯/正己烷將它再沉淀從而獲得紅色粉末。(產(chǎn)量50mg(3.9xl(T5mol)，收率92%)。<確認(rèn)>Mp:96-98。C，分解點(diǎn)216-220。C。電子光譜在圖1的B中顯示。IR(KBr壓片法):v(C^N)2150;v(酯C-0)1730cnT1元素分析實(shí)測(cè)值C，53.75;H,6.40;N，6.03%C54H75CoN6019計(jì)算值C，53.92;H，6.40;N，5.93%(3)[Cob(II)7d酯]C104的合成<反應(yīng)線路>,C02CH3^CQzCH3H3CQ^CIQ4上述反應(yīng)線路[化學(xué)式9]顯示從(CN)(H20)Cob(III)7d酯到[Cob(II)7d酯]C104的反應(yīng)。<實(shí)驗(yàn)過(guò)程>將50mg(CN)(H20)Cob(III)7C!酉旨(4.2xl(T5mol)溶解在100mL曱醇中，通過(guò)氮?dú)夤呐莩タ諝?。向其中添?00mgNaBH4(1.0Smo1)從而確認(rèn)來(lái)源于Co(I)的綠色。向其中添加3ml60%HC10—。向其中添加50mL水并用二氯甲烷萃取。用水洗滌混合物，并用無(wú)水疏酸鈉干燥，然后減壓千燥。用苯/正己烷將它再沉淀從而獲得橙色粉末。(產(chǎn)量50mg(3.7xl(T5raol)，收率87%)<確認(rèn)>Mp:96-100°C，分解點(diǎn)190°C。電子光譜在圖2的A中顯示。IR(KBr壓片法):v(C2150;v(酯C-0)1725cra1;v(C104—)1100,620cm1元素分析實(shí)測(cè)值C，54.68;H,6.41;N，5.00%C52H73CoN4018計(jì)算值C，54.95;H，6.47;N，4.93%C104的合成25<反應(yīng)線路>上述反應(yīng)線路[化學(xué)式10]顯示從[Cob(II)7d酯]C104到[(CH3)(H20)Cob(III)7d酯]C104的反應(yīng)。<實(shí)驗(yàn)過(guò)程>將30mg[Cob(n)7d酯]C104(2.6xl(T5mol)溶解在100mL曱醇中，通過(guò)氮?dú)夤呐莩タ諝?。向其中添?00mgNaBH,(0.788mol)從而確認(rèn)來(lái)源于Co(I)的綠色。向其中添加37mgCH3I(2.6x10—4mol)并攪拌5分鐘。向其中添加2mL60%HClO4aq。向其中添加SOmL水并用二氯曱烷萃取。在用水洗滌混合物后，用無(wú)水硫酸鈉干燥，然后減壓干燥。用苯/正己烷將它再沉淀從而獲得橙色粉末[(CH3)(H20)Cob(III)7d酯]C10"電子光譜示于圖3(A:光照射之前，B:光照射之后)。由于通過(guò)光照射確認(rèn)Co-Me的甲基的斷裂，確認(rèn)了曱基絡(luò)合物的合成。(4-2)[(CH》(H20)Cob(III)7d酯〗C104的合成<實(shí)驗(yàn)過(guò)程>將50mg[Cob(II)7d酯]C104(4.4xl(T5mol)溶解在30mL乙酸中，通過(guò)氮?dú)夤呐莩タ諝?。此后，向其中添?00mg鋅粉并在氮?dú)饬髦袛嚢鐸O分鐘。在如此獲得的溶液的顏色在暗處變成深綠色之后，向其中添加1.0gCH3I(7.0xl(T3mol)并攪拌5分鐘。在終止反應(yīng)之后，濾出鋅粉，向?yàn)V液中添加50mL15%HC10細(xì)。用二氯甲烷萃取它(50mLx3次)。用5%(w/w)碳酸氫鈉溶液和蒸餾水洗滌萃取物后，用無(wú)水硫酸鈉千燥，然后減壓干燥。用苯/正己烷將它再沉淀從而獲得橙色粉末，43mg(84%)[(CH》(H力)Cob(in)7d酯]C10"<確認(rèn)>IR(KBr壓片法)v(酯C=0)1730cm—1;v(C104—)1100，620cm_11H-NMR(CD30D，TMS):5-0.18(3H，s，CH廣Co)元素分析實(shí)測(cè)值C,54.49;H，6.61;N，4.96%C53H7SCICoN4019計(jì)算值C，54.43;H，6.72;N，4.80%圖2提供維生素Bu的Co(II)絡(luò)合物的電子光譜(溶劑二氯甲烷)。分別地，A表示[Cob(II)7C!酯]C10,(base-off型)的情況，而B表示[Cob(II)7d酯]C104+吡啶(base-on型)的情況。圖3提供維生素Bu的Co絡(luò)合物的電子光譜(溶劑二氯甲烷)。在圖3中，分別地，A表示[(CH》(H20)Cob(ni)7d酉旨]C104(溶劑二氯曱烷，光照射之前)，而B表示光照射之后A的光諳。實(shí)施例1<反應(yīng)線路>C104iAs(in)----------^MMA+DMAGSH<反應(yīng)操作>向1.5mLEppendorf管中加入740jnL反應(yīng)緩沖溶液(lOOraMTris-HC1(三幾曱基氨基甲烷鹽酸鹽，pH7.8))。向其中添加220pLlOOmMGSH水溶液，并用Voltex攪拌30秒。另外向其中添加20juL1000ppm無(wú)機(jī)硒(Se)(IV)標(biāo)準(zhǔn)溶液(用于原子吸收)。在3"C下靜置該溶液60分鐘。向其中添加20mL100ppm無(wú)才幾砷(III)標(biāo)準(zhǔn)溶液(用于原子吸收)并攪拌30秒。向其中添加207.4mM[(CH3)(H20)Cob(in)7d酯]C104(甲基水合鈷啉酸七曱基酯高氯酸鹽)27的甲醇溶液(組合物A)。在保持37°C的恒溫浴中反應(yīng)，檢驗(yàn)定期采樣所得的產(chǎn)物的增加量。<產(chǎn)物分析>通過(guò)使用在線與高效液相色譜(Agilent1100)直接相連的感應(yīng)耦合等離子體離子質(zhì)譜(Agilent7500ce)，以與反應(yīng)產(chǎn)物的停留時(shí)間比較的標(biāo)準(zhǔn)試樣的保留時(shí)間進(jìn)行定性和定量分析。圖4提供HPLC-ICP-MS色譜。(4)分析條件作為有機(jī)砷化合物的標(biāo)準(zhǔn)試樣，使用MMA、DMA、TMAO、TeMA、AB和AC，其是來(lái)自O(shè)ptronicsCo.,Ltd.(trichemicalresearchinstitution)的市售試劑，作為無(wú)機(jī)砷的標(biāo)準(zhǔn)試樣，使用As(III)、As(V)的鈉鹽，其是來(lái)自WakoPureChemicalIndustries,Ltd.的市售高品質(zhì)試劑。通過(guò)用超純水(Mi11ipore)稀釋而制成每種砷化合物的lOOmg/lOOmL標(biāo)準(zhǔn)溶液。ICP-MS裝置的條件如下RF正向功率1.6kWRF反射功率<1W載氣流Ar0.75L/min取樣8.5mm檢測(cè)質(zhì)量m/z-75和35內(nèi)標(biāo)物m/Z-714f留時(shí)間0.5sec0.Olsec0.lsec掃描次數(shù)1次此外，HPLC的條件如下洗脫液5mM硝酸/6mM硝酸銨/1.5mM吡啶二羧酸洗脫液流速0.4mL/min注入量20inL柱陽(yáng)離子交換柱ShodexRSpakNN-414(150mmx4.6mmi.d.)柱溫40°C圖4提供借助[(CH3)(H20)Cob(III)7d酯]C104的無(wú)機(jī)砷的甲基化反應(yīng)產(chǎn)物的HPLC-ICP-MS色譜。分別地，(A)表示反應(yīng)后30分鐘的情況，(B)表示反應(yīng)后4小時(shí)的情況。如圖4所示那樣，清楚的是有害的無(wú)機(jī)三價(jià)砷[iAs(III)]借助[(CH3)(H20)Cob(III)7C,酯]Cl(h轉(zhuǎn)化成寸氐毒性的MMA和DMA。對(duì)比例1除了沒(méi)有添加實(shí)施例1的[(CH》(H20)Cob(III)7C酯]C104以外，用與實(shí)施例1的相同方式進(jìn)行實(shí)驗(yàn)(組合物B)。結(jié)果，確認(rèn)沒(méi)有任何曱基化物質(zhì)的生成。與對(duì)比例l相比，如實(shí)施例1所示，隨著時(shí)間進(jìn)行產(chǎn)生甲基化砷(MMA)和二曱基化砷(DMA)。在[(CHO(H20)Cob(III)酉旨]C104的存在下，確認(rèn)使有害的無(wú)機(jī)砷解毒而且轉(zhuǎn)化成低毒性的曱基化砷和二甲基化砷的顯著效果。實(shí)施例2向1.5mLEppendorf管中取8.6mg甲基水合鈷啉酸七曱基酯高氯酸鹽[(CH》(H20)Cob(III)7d酯]C10,[化學(xué)式1]。向其中添加1fflL超純水(18MQ/cra)以溶解甲基水合鈷啉酸七甲基酯高氯酸鹽C104[化學(xué)式1](7.4mmol/L)(溶液A)。向1.5mLEppendorf管中添加30.7mg谷胱甘肽(還原型)并且溶解在lmL超純水中(100mmol/L)(溶液B)。制備三氧化二砷水溶液(用于原子吸收l(shuí)OOppm:作為金屬砷)(溶液C)。制備亞硒酸水溶液(用于原子吸收l(shuí)OOOppm:作為金屬硒)(溶液D)。制備10029mmol/LTris-HCl緩沖溶液(pH7.8,0.01mol/L，由鹽酸溶液控制pH)(溶液E)。向1.5mLEppendorf管中，添加720jliL溶液E、20uL溶液C和220juL溶液D并且在37。C靜置1小時(shí)。向其中添加20juL溶液A和20jiL溶液B并在保持37°C的恒溫浴中反應(yīng)(表3)。表3顯示反應(yīng)溶液中砷化合物的濃度。No-時(shí)間(hr)濃度("mol/L)As(邁)As(V)MMA(邁)MMA(V)DMA(V)總計(jì)103000003020.518.9370.0271.8764-1891.29326.2933114.3770.0091.9815.8161.99525.4204212.9440.0053.2675.4632細(xì)25.6575411.5840.0243.8195.9482.99925.6456218.5390.2051.9698.9452.99524.7967487.5090.3970.02910.8992.97123.3338723.4510.0770.0004.9471.43716.8569210.0004.3110.00013.9603.18520.74810480扁4.3520.00013.1473.07720.29911720細(xì)3.2690.0009.0292.18113.752*No.l-8是未用過(guò)氧化氫處理的那些，No.9-ll是用過(guò)氧化氫處理后的那些。在定期取樣50nL產(chǎn)物并由超純水將收集的試樣稀釋10倍的情況下通過(guò)使用HPLC-ICP-MS法進(jìn)行定性和定量分析(表3No.1-8)。此外，將50)aL反應(yīng)溶液取作試樣，用50uL過(guò)氧化氬水溶液處理(37。C，l小時(shí))，并由超純水稀釋10倍，以相同方式分析該反應(yīng)產(chǎn)物(表3No.9-11)。HPLC-ICP-MS色i瞽示于圖5和6。反應(yīng)溶液中砷化合物濃度的變化示于圖7。砷化合物的組成百分?jǐn)?shù)示于圖8和9。此外，反應(yīng)條件如下底物濃度[As]=30jumol/L人造維生素B12濃度[MeCo]=150umol/L谷胱甘肽(還原型)濃度[GSH]=22ramol/L30石西濃度[Se]-760|amol/L緩沖溶液100mMTris-HCl緩沖溶液(pH7.8),反應(yīng)溫度37。C圖5提供HPLC-ICP-MS色語(yǔ)(圖上的編號(hào)對(duì)應(yīng)于表3中的編號(hào)。)。圖6提供HPLC-ICP-MS色語(yǔ)(圖上的編號(hào)對(duì)應(yīng)于表3中的編號(hào)。)。圖7提供反應(yīng)溶液中砷化合物濃度的每小時(shí)變化(它是根據(jù)表3中編號(hào)1-8的圖。)。圖8顯示反應(yīng)溶液中砷化合物百分?jǐn)?shù)的每小時(shí)變化(它是表3中編號(hào)1-7的圖表。)。圖9顯示反應(yīng)溶液中砷化合物百分?jǐn)?shù)的每小時(shí)變化(它是表3中編號(hào)6-11的圖表。)。實(shí)施例3除了首先添加溶液B，然后添加溶液A以外，以與實(shí)施例2的相同方式進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。定期取樣反應(yīng)溶液，，并由HPLC-ICP-MS分析。表4所示的實(shí)驗(yàn)號(hào)1-7的試樣沒(méi)有改性的情況下進(jìn)行稀釋并分析。表4所示的實(shí)驗(yàn)號(hào)8-14的試樣用過(guò)氧化氫溶液處理并且如實(shí)施例2所示進(jìn)行分析。如同從表4、圖10-17中顯然的那樣，95%或以上的無(wú)機(jī)砷被甲基化。[表4]<table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>*No.l-7是未用過(guò)氧化氫處理的那些，No.8-14是用過(guò)氧化氫處理后的那些。表4顯示反應(yīng)溶液中砷化合物的濃度。此外，圖10提供HPLC-ICP-MS色譜(圖上的編號(hào)對(duì)應(yīng)于表4中的編號(hào)。)。圖ll提供HPLC-ICP-MS色譜(圖上的編號(hào)對(duì)應(yīng)于表4中的編號(hào)。)。圖12提供HPLC-ICP-MS色譜(在過(guò)氧化氫處理的情況下)(圖上的編號(hào)對(duì)應(yīng)于表4中的編號(hào)。)。圖13提供HPLC-ICP-MS色諳(圖上的編號(hào)對(duì)應(yīng)于表4中的12-14。)。圖14顯示反應(yīng)溶液中砷化合物濃度的每小時(shí)變化(在未用過(guò)氧化氫處理的情況下)。圖15顯示反應(yīng)溶液中砷化合物濃度的每小時(shí)變化(在過(guò)氧化氫處理之后)。圖16顯示反應(yīng)溶液中砷化合物百分?jǐn)?shù)的每小時(shí)變化(在未用過(guò)氧化氫處理的情況下)。圖17顯示反應(yīng)溶液中砷化合物百分?jǐn)?shù)的每小時(shí)變化(在過(guò)氧化氫處理之后)。實(shí)施例4除了在添加溶液A和溶液B之前將每個(gè)試樣在37。C下培養(yǎng)l小時(shí)以外，以與實(shí)施例3的相同方式進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。如表5和圖18所示，95%或以上的無(wú)機(jī)砷被甲基化。還確認(rèn)了三甲基化砷的產(chǎn)生(圖23)。在圖19中顯示HPLC-ICP-MS色鐠。表5顯示反應(yīng)溶液中砷化合物的濃度。<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>圖18顯示反應(yīng)溶液中砷化合物百分?jǐn)?shù)的每小時(shí)變化。圖19提供HPLC-ICP-MS色譜。接下來(lái)，在除了谷胱甘肽(GSH)作為還原劑以外(或者代替它)使用不同種類還原劑的情況下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。具體地，除了谷胱甘肽(GSH)以外(或者代替GSH),檢驗(yàn)半胱氨酸(Cys)、二硫蘇糖醇(DTT)和硫代甘醇(TG)的使用。此外，二甲亞砜(DMS0)用作溶解人造維生素B12(疏水性B12)等的溶劑，以及用作高沸點(diǎn)溶劑(以便避免在反應(yīng)溫度為100。C或以上的情況下水蒸發(fā)而千燥)。首先，向0.lmL玻璃管形瓶(vialtube)(配上硅封)中添加GSH(2mg，6.5umol)、0.5mg甲基水合鈷啉酸七甲基酯高氯酸鹽(0.4jumol)、超純水(1juL)(此外，配有硅封的容器用于避免水蒸發(fā)。向其中添加lyL無(wú)機(jī)砷標(biāo)準(zhǔn)溶液(用于原子吸收，砷5ppm)，放入在于130°C被加熱的烘箱中并且反應(yīng)2小時(shí)。反應(yīng)產(chǎn)物用10%過(guò)氧化氫溶液稀釋10-30倍，由HPLC-ICP-MS分析(HB56的說(shuō)明)。按照表中的其他實(shí)例改變GSH濃度、Cys濃度、砷濃度和溫度，以所述實(shí)施例中的相同方式進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。結(jié)果示于表6-8。分別地，表6顯示在使用不同還原劑的情況下不同種類的試樣號(hào)，表7顯示根據(jù)HPLC-ICP-MS的不同種類試樣的分析結(jié)果(百分?jǐn)?shù))，表8顯示根據(jù)HPLC-ICP-MS的不同種類試樣的分析結(jié)果(濃度)。時(shí)間MeCo(mg)GSH(mg)Cys(mg)DTT(mg)TG(mg)DMSO(wL)H20(WU總計(jì)HB54120.00.0，.O0.01_02HB55120.00.01-01-01-0加3HB560-520-0ao1.00.01jO4HB570.520-00-00-01.01.0zoHB580-520-00.00.01.01.0Zfl6HB610.520.00.00.01.01.020HB640-502.00.00.01.01-0&98HB670-502響00-00.01-01-04.09HB680.502.00-00.01.01-01^510HB69102-00.00.01.01.061-311HB701.502.0ao0-01.01.06l312HB710-500.02-00.00.01.0SOIV/0!MeCo:甲基鈷胺素，GSH:谷胱甘肽(還原型)，Cys:半胱氨酸，DTT:二硫蘇糖醇(還原劑)，TG:疏代甘醇，DMSO:二曱亞砜。[表7]33試樣！反應(yīng)時(shí)間(h)反應(yīng)溫度("C)As(V)MMADMATMAOTeMA總計(jì)121300-1540細(xì)0-072U030-2811.6102啦521300-225ao挑0-1210-5430-7肪1-7613HB5621300-0520—0370-0880-5410-0450.7624HB5721300-077a咖0—0670-2330-034a柳5HB5821300.0800-0460-0640-4250-0380—6546HB6121300_0530.0950.2260.0460-0000-4207HB6421300-0370-0220-0720-5270-0460.7038鵬721300-0480—0910.1230-1780-0150.4549HB6821300—0130-0120-0130.0880-0030.13310HB6921300雄0-0060-0100-1210-0160.15811HB7021300.0290-0160-0150-1170.0200—23112HB712130a0090細(xì)0—1570.1030.0120.814[表8]Nol試樣.,反應(yīng)時(shí)間(h)反應(yīng)溫度('C)As(V)MMADMATMAOTeMA總計(jì)1HB5421309.60-04-568.517-41002HB55213012-84-96-930管944-61003HB5621306-84-9U管570-95—91004HB57213017J7-914-952.27-61005HB5821301237-19-865.05-81006HB61213012—722_55&711-00管0100了HB6421305l23.210l274.96-51008HB672130瓜619.927-039-23_31009HB68213010-18-89-765-92-610010HB6921303_63-66-176.89-9100"HB70213012-57-150-88-610012HB7121301陽(yáng)08-419-312.61-4100此外，圖20提供HPLC-ICP-MS色譜(對(duì)應(yīng)于表6中的編號(hào)10、表7中的編號(hào)IO和表8中的編號(hào)10)。如圖20的HPLC-ICP-MS所示，獲得低毒性的氧化三甲基胂作為反應(yīng)混合物中的主要產(chǎn)物(77%)。實(shí)施例5-10接下來(lái)，制成不同種類的曱基水合鈷啉酸衍生物，并且檢驗(yàn)不同種類的甲基水合鈷啉酸衍生物的效果。以下，將要說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)施例5-10。甲基水合鈷啉酸鈉高氯酸鹽[(CH3)(H20)Cob(III)7C00Na]C104從甲基水合鈷啉酸七甲基酯高氯酸鹽[(CH3)(H20)Cob(III)7d酯]C104的合成。34上述[化學(xué)式ll]顯示從從甲基水合鈷啉酸七甲基酯高氯酸鹽C104到曱基水合鈷啉酸鈉高氯酸鹽[(CH3)(H20)Cob(111)7C00Na]C104的反應(yīng)。準(zhǔn)備6個(gè)用5。/。硝酸預(yù)先洗過(guò)的玻璃小瓶。在其中稱取5mg(4.3umol)疏水性維生素B12。向其中添加10juL甲醇，攪拌，然后使疏水性維生素Bu溶解在甲醇中。向其中添加20juL4mol/L氫氧化鈉水溶液，攪拌，在保持30°C的溫控浴中反應(yīng)預(yù)定時(shí)間。反應(yīng)時(shí)間為l小時(shí)(溶液A-1、溶液B-1)、4小時(shí)(溶液A-2、溶液B-2)、20小時(shí)(溶液A-3、溶液B-3)。如下進(jìn)行實(shí)際獲得的甲基水合鈷啉酸衍生物的確認(rèn)圖21提供甲基水合鈷啉酸七甲基酯高氯酸鹽[(CH3)(H20)Cob(III)7d酯]C104的電子光鐠。分別地，A表示光照射之前的那些，B表示光照射之后的那些。圖22提供甲基水合鈷啉酸鈉高氯酸鹽[(CH0(H20)Cob(III)COONa]C104的電子光譜。在圖22中，分別地，A表示光照射之前的那些，B表示光照射之后的那些。如圖21所示，在光照射之前的那些中，顯示出甲基化鈷絡(luò)合物的吸收光譜(A)。在光照射之后的那些中，顯示出其中甲基斷裂的鈷絡(luò)合物的光鐠(B)。另一方面，如圖22所示，在光照射之前的那些中，顯示出甲基化鈷絡(luò)合物的吸收光i普(A)，即使它是在堿水解反應(yīng)之后的絡(luò)合物。由于在光照射之后的那些中顯示出其中曱基斷裂的鈷絡(luò)合物的光譜(B),確認(rèn)在堿水解反應(yīng)之后保留了Co-CH3鍵。如下進(jìn)行在堿水解反應(yīng)之后甲基水合鈷啉酸鈉高氯酸鹽對(duì)水的可溶解性的確認(rèn)通過(guò)凍干法從溶液A-3中除去溶劑，干燥該溶液。向其中添加50ML超純水并攪拌。沒(méi)有出現(xiàn)沉淀。另一方面，盡管加入并攪拌5mg疏水性維生素B12{甲基水合鈷啉酸七曱基酯高氯酸鹽[(CH3)(H20)Cob(III)7d酯]Cl(M和50nL超純水,但是沒(méi)有完全溶解。從上述結(jié)果的觀點(diǎn)來(lái)看，顯然疏水性維生素Bu的甲基酯(曱基水合鈷啉酸七曱基酯高氯酸鹽[(CH3)(H20)Cob(III)7C酯]C10J通過(guò)堿水解反應(yīng)斷裂，形成水溶性甲基水合鈷啉酸鈉高氯酸鹽[(CH3)(H20)Cob(ni)COONa]C104。此外，由光照射之后的電子光譜確認(rèn)甲基化所需的Co-CH3鍵被保持。曱基水合鈷啉酸七曱基酯高氯酸鹽[(CH3)(H20)Cob(IlinC!酯]C104的H-腿示于圖24。關(guān)于[(CH3)(H20)Cob(III)7d酯〗C104的甲基的4-NMR識(shí)別示于該圖(圖24)的編號(hào)1-9。與Co原子直接結(jié)合的CH3信號(hào)出現(xiàn)在-0.15ppm。[(CH3)(H20)Cob(III)7d酯]C104的七個(gè)甲基酯的質(zhì)子出現(xiàn)作為在3.5ppm-3.8ppm之間的七個(gè)信號(hào)。甲基水合鈷啉酸七甲基酯高氯酸鹽[(Ciy(H20)Cob(III)7d酯]C104水解之后的卞-MR信號(hào)示于圖25。顯然七個(gè)甲基酯基團(tuán)進(jìn)行水解，因?yàn)閳D25中[(CH3)(H20)Cob(III)7d酯]C104的七個(gè)甲基酯基團(tuán)的質(zhì)子信號(hào)消失，這七個(gè)信號(hào)在圖24中分別出現(xiàn)在3.5ppm-3.8ppm之間。此外，可以看出堿水解沒(méi)有引起Co-C鍵的斷裂，因?yàn)榇_認(rèn)了源自與Co原子直接結(jié)合的甲基的信號(hào)。從上述內(nèi)容來(lái)看，可以確認(rèn)[(CH3)(H20)Cob(III)7COONa]C104(甲基水合鈷啉酸鈉高氯酸鹽)。<砷甲基化反應(yīng)溶液的制備>通過(guò)使用6mol/L鹽酸水溶液和0.01raol/L-lraol/L的氫氧化鈉溶液中和溶液A-1、A-2和A-3，以使得總體積不超過(guò)50)aL。向溶液B-l、B-2和B-3中添加20)iL超純水。向容器中添加20mg(65jamol)還原型谷胱甘肽(GSH)并攪拌。向其中添加2yL(三氧化二36砷2.7nmol)三氧化二砷溶液，它是三價(jià)無(wú)機(jī)砷(用于原子吸收的標(biāo)準(zhǔn)溶液，100ppm)。反應(yīng)溶液的濃度如下谷胱甘肽(還原型)(GSH):1.3mmol/L，疏水性維生素B12的水解物質(zhì)(WSHB):0.086mmol/L，三價(jià)無(wú)機(jī)砷5nmol/L。反應(yīng)試劑的預(yù)備條件示于表9。將它裝入恒溫加熱器，在給定溫度下反應(yīng)預(yù)定時(shí)間。反應(yīng)條件示于表IO。<分析>在終止反應(yīng)之后，用10%過(guò)氧化氬溶液處理反應(yīng)溶液，由超純水稀釋500倍，通過(guò)使用HPLC-ICP-MS法進(jìn)行定性和定量分析。預(yù)備5種化學(xué)物種，即五價(jià)砷、五價(jià)單甲基砷MMA)、五價(jià)二甲基砷(DMA)、五價(jià)三甲基砷(TMA0)和四甲基砷(TeMA)，由標(biāo)準(zhǔn)試樣做出分析曲線，進(jìn)行定量測(cè)定。由如下定義的公式計(jì)算反應(yīng)后的相對(duì)濃度。iAs(V)的相對(duì)濃度=100%xUAs(V)/(iAs(V)+MMA+DMA+TMAO+TeMA)〗MMA的相對(duì)濃度-100%x[MMA/(iAs(V)+MMA+DMA+TMAO+TeMA)]DMA的相對(duì)濃度-100%x[DMA/(iAs(V)+MMA+DMA+TMAO+TeMA)]TMAO的相對(duì)濃度-100%x[TMAO/(iAs(V)+MMA+DMA+TMAO+TeMA)〗TeMA的相對(duì)濃度=100%x[TeMA/(iAs(V)+MMA+DMA+TMAO+TeMA)]此外，由如下公式計(jì)算砷的回收百分率回收百分率=ioo%x(反應(yīng)前的砷濃度/反應(yīng)后的砷濃度)=100%x[iAs(III)/(iAs(V)+MMA+DMA+TMAO+TeMA)〗37試樣5(A-1)、試樣6(A-2)、試樣7(A-3)、試樣8(B-1)、試樣9(B-2)、試樣IO(B-3)的結(jié)果示于表11。表9顯示疏水性維生素B12的水解條件。表10顯示反應(yīng)條件。表11顯示產(chǎn)量(相對(duì)收率，絕對(duì)收率)和回收百分率。水解條件中和條件No-曱基化試刑溶劑NaOH水解HCINaOH中和后CoMeOH4N6N1N0—10細(xì)PH(mg)(hr)(//L)(;/L)A—15102011226一45A—251020412—8一45A—3510202010——1056B-1510201B—2510204一—一-B—35102020[表IO]No.溶劑制備條件反應(yīng)前反應(yīng)條件H20手原劑砷GSHiAs咖(100ppm)iAs3溫度時(shí)間(JUL)(mg)UL)(ppm)ra(hr〉A(chǔ)—1—20241002A—2—20241002A—3—20241002B—12020241002B—22020241002B—32020241002[表ll]38<table>tableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table>作為化合物的有益效果，顯示出它具有如下效果(l)易于用有機(jī)溶劑從反應(yīng)混合物溶液中萃取它，而且是可重復(fù)利用的，(2)在與有機(jī)溶劑混合的水溶液體系中的反應(yīng)性等于或高于水溶性維生素B12(甲基鈷胺素)的反應(yīng)性。工業(yè)應(yīng)用性本發(fā)明的組合物使得可以更加實(shí)際和工業(yè)化地產(chǎn)生使含砷等的有害化合物解毒的方法。本發(fā)明在工業(yè)廢棄物等的處理以及關(guān)于污泥或土壤的環(huán)境保護(hù)的廣泛領(lǐng)域中做出顯著貢獻(xiàn)，因?yàn)橥ㄟ^(guò)使含砷等的有害化合物經(jīng)由烷基化轉(zhuǎn)化成無(wú)害化合物而獲得的無(wú)害化合物極其穩(wěn)定和安全。權(quán)利要求1.一種甲基水合鈷啉酸衍生物，其中所述衍生物如下列通式[化學(xué)式12]所示[化學(xué)式12]XH，Na其中，該式中的X為H或Na。2.—種用于烷基化的組合物，其中所述組合物包含具有鈷-碳鍵的有機(jī)金屬絡(luò)合物，所述有機(jī)金屬絡(luò)合物為下列通式[化學(xué)式13]所示的曱基水合鈷啉酸衍生物[化學(xué)式13]<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>其中，該式中的X為CH3、H或Na。3.權(quán)利要求2的用于烷基化的組合物，所述有機(jī)金屬絡(luò)合物為曱基水合鈷啉酸七甲基酯高氯酸鹽[(CH3)(H20)Cob(III)7d酯]C10j化學(xué)式14]:[化學(xué)式14]<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>4.權(quán)利要求2或3的用于烷基化的組合物，其中通過(guò)使用所述有機(jī)金屬絡(luò)合物使包含選自砷、銻和硒的至少一種元素的有害化合物烷基化。5.權(quán)利要求2-4任一項(xiàng)的用于烷基化的組合物，其中所述組合物進(jìn)一步包含還原劑以還原選自砷、銻和硒的至少一種金屬。6.權(quán)利要求5的用于烷基化的組合物，其中所述還原劑是具有SH基團(tuán)的物質(zhì)。7.權(quán)利要求6的用于烷基化的組合物，其中所述具有SH基團(tuán)的物質(zhì)為選自谷胱甘肽、還原型谷胱甘肽(GSH)、半胱氨酸、S-腺苷半胱氨酸、l-異硫氰基-4R-(甲基亞硫?；?丁烷、二硫蘇糖醇和硫代甘醇中的至少一種。8.權(quán)利要求l-7任一項(xiàng)的用于烷基化的組合物，其中所述組合物進(jìn)一步包含具有S-Me基團(tuán)的甲基化加性因子。9.權(quán)利要求8的用于烷基化的組合物，其中所述甲基化加性因子為選自甲硫氨酸和S-腺苷甲硫氨酸中的至少一種。10.權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用于烷基化的組合物，其中所述組合物進(jìn)一步包含緩沖溶液。11.權(quán)利要求10的用于烷基化的組合物，其中所述緩沖溶液的pH為5-10。12.權(quán)利要求l-ll任一項(xiàng)的用于烷基化的組合物，其中所述組合物進(jìn)一步包含有機(jī)囟化物。13.權(quán)利要求12的用于烷基化的組合物，其中所述有機(jī)卣化物為卣代甲烷。14.權(quán)利要求13的用于烷基化的組合物，其中所述g代曱烷為選自碘甲烷、溴甲烷和氯曱烷中的至少一種。15.權(quán)利要求12的用于烷基化的組合物，其中所述有機(jī)面化物為卣代乙酸。16.權(quán)利要求15的用于烷基化的組合物，其中所述卣代乙酸為選自氯乙酸、溴乙酸和碘乙酸中的至少一種。17.權(quán)利要求12的用于烷基化的組合物，其中所述有機(jī)鹵化物為選自氯曱烷、溴甲烷、碘曱烷、氯乙酸、溴乙酸、碘乙酸、氯乙醇、溴乙醇、碘乙醇、氯丙酸、溴丙酸、碘丙酸、氯乙酸乙酯、溴乙酸乙酯、碘乙酸乙酯中的至少一種。18.—種對(duì)有害化合物解毒的方法，其中通過(guò)在權(quán)利要求2-17任一項(xiàng)的組合物的存在下烷基化包含選自砷、銻和竭的至少一種元素的有害化合物而使所述有害化合物解毒。19.權(quán)利要求18的對(duì)有害化合物解毒的方法，其中通過(guò)提高所述一種元素的價(jià)數(shù)的氧化值而實(shí)現(xiàn)所述解毒。20.權(quán)利要求18或19的對(duì)有害化合物解毒的方法，其中使所述一種元素的至少一個(gè)鍵烷基化。21.權(quán)利要求18-20任一項(xiàng)的對(duì)有害化合物解毒的方法，其中所述元素為砷。22.權(quán)利要求18-21任一項(xiàng)的對(duì)有害化合物解毒的方法，其中通過(guò)所述烷基化而解毒的化合物的50%致命劑量(LD5。)大于或等于1000mg/kg。23.權(quán)利要求18-22任一項(xiàng)的對(duì)有害化合物解毒的方法，其中通過(guò)所述烷基化而解毒的化合物的50%細(xì)胞生長(zhǎng)抑制濃度(IC5Q)大于或等于1000/jM。24.權(quán)利要求18-23任一項(xiàng)的對(duì)有害化合物解毒的方法，其中所述有害化合物選自三氧化二砷、五氧化二砷、三氯化砷、五氯化砷、硫化砷化合物、氰基砷化合物、氯砷化合物、和其它砷無(wú)機(jī)鹽。25.權(quán)利要求18-23任一項(xiàng)的對(duì)有害化合物解毒的方法，其中所述烷基化是甲基化。26.權(quán)利要求25的對(duì)有害化合物解毒的方法，其中所述有害化合物通過(guò)甲基化而被轉(zhuǎn)化成二甲基化合物或三曱基化合物。27.權(quán)利要求26的對(duì)有害化合物解毒的方法，其中所述二甲基化合物為二曱基胂酸基乙醇(DMAE)、二甲基胂酸基乙酸酯(DMAA)、二曱胂酸或砷糖。28.權(quán)利要求27的對(duì)有害化合物解毒的方法，其中所述三曱基化合物為砷膽堿、砷甜菜堿、三甲基砷糖或氧化三甲胂。全文摘要公開了用于對(duì)無(wú)機(jī)砷等解毒的烷基化組合物。還公開了使用所述組合物的安全和高效的解毒方法。具體地公開了其特征在于包含具有鈷-碳鍵的有機(jī)金屬絡(luò)合物的烷基化組合物。另外具體地公開了其特征在于通過(guò)烷基化對(duì)包含選自砷、銻和硒的至少一種元素的有害化合物解毒的解毒方法。文檔編號(hào)C07F15/06GK101495492SQ20078002821公開日2009年7月29日申請(qǐng)日期2007年7月24日優(yōu)先權(quán)日2006年7月26日發(fā)明者中村浩一郎,久枝良雄,玲潘申請(qǐng)人:日本板硝子株式會(huì)社;國(guó)立大學(xué)法人九州大學(xué)