專(zhuān)利名稱(chēng)：：人glp-1模擬體、組合物、方法和用途的制作方法人GLP-1模擬體、組合物、方法和用途相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用本申請(qǐng)要求2006年7月18日申請(qǐng)的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)順序號(hào)60/831,704權(quán)益的優(yōu)先權(quán)。上述有關(guān)美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)的全部公開(kāi)內(nèi)容通過(guò)引用結(jié)合到本文用于所有目的。
背景技術(shù)：
：發(fā)明領(lǐng)域然而，蛋白酶二肽基肽酶IV(DPP-IV)使GLP-1在體內(nèi)快速失活。因此，涉及GLP-1肽的療法的實(shí)用性受其快速清除和較短半衰期的限制。例如，GLP-1(7-37)的血清半衰期僅有3-5分鐘。當(dāng)皮下給藥時(shí)，GLP-1(7-36)酰胺的作用時(shí)間約為50分鐘。即使對(duì)內(nèi)源蛋白酶切割有抗性的類(lèi)似物和衍生物也沒(méi)有足夠長(zhǎng)的半衰期以避免在24小時(shí)時(shí)間內(nèi)重復(fù)給藥。例如，艾塞那肽是抗DPP-IV的，但由于其半衰期短，體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)特征尤其變化不定，因此仍需要每天兩次餐前給藥。NN2211，另一種目前正在做臨床試驗(yàn)的化合物，是一種脂質(zhì)化GLP-1類(lèi)似物。預(yù)期每日用藥一次。在需要較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)維持藥物高血液水平的情況下，治療藥物的快速清除十分不利，因?yàn)楸厝恍枰貜?fù)給藥。此外，長(zhǎng)效化合物對(duì)于過(guò)往治療方案僅包括口服藥物的糖尿病患者特別重要。這些患者常常對(duì)過(guò)渡到包括多次藥物注射的方案感到極為困難。比起其它GLP-1肽和研發(fā)中的化合物，半衰期延長(zhǎng)的GLP-1療法具有明顯的優(yōu)勢(shì)。0008因此，需要提供改進(jìn)和/或修飾形式的GLP-1治療性蛋白質(zhì)，它能克服上述多個(gè)難題和本領(lǐng)域已知的其它難題。模擬體技術(shù)為肽治療藥物提供了新的遞藥平臺(tái)。GLP-1模擬體可提供以持續(xù)方式遞送GLP-1肽的方法，這就提供了優(yōu)于現(xiàn)行研發(fā)中的GLP-1肽的改進(jìn)方面。此外，根據(jù)其二聚體結(jié)構(gòu)及其組織分布特征，對(duì)于胰島素分泌、卩細(xì)胞維持和食物攝取而言，GLP-1模擬體可具有區(qū)別特征。發(fā)明概述0009按照本文所描述的和/或本文所提供的方法，結(jié)合本領(lǐng)域已知方法，本發(fā)明提供改進(jìn)的人GLP-1模擬體，包括修飾的免疫球蛋白、裂解產(chǎn)物和其它特定部分及其變體，本發(fā)明還提供GLP-1模擬體組合物、編碼核酸或互補(bǔ)核酸、載體、宿主細(xì)胞、組合物、制劑、裝置、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、轉(zhuǎn)基因植物及其制備和使用方法。本發(fā)明還提供至少一種分離的GLP-1模擬體或特定部分或變體，其具有至少一種活性，例如但不限于如本文所描述或本領(lǐng)域已知的至少一種生物活性GLP-1肽或多肽(相當(dāng)于式(I)中的P部分)的已知生物活性。10017一方面，本發(fā)明提供至少一種分離的人GLP-1模擬體，其包含SEQIDNO:l的至少一個(gè)多肽序列，或者任選具有一個(gè)或多個(gè)如本文所描述或如本領(lǐng)域已知的取代、缺失或插入。另一方面，本發(fā)明的至少一種GLP-1模擬體或特定部分或變體模擬至少一種GLP-1肽或多肽(相當(dāng)于式(I)中的模擬體P部分)與至少一個(gè)表位的結(jié)合，該表位包含至少一種配體的至少1-3個(gè)氨基酸至完整氨基酸序列，該配體例如但不限于GLP-1受體或其片段，其中該配體與SEQIDNO:l的至少一部分結(jié)合，或者任選具有一個(gè)或多個(gè)如本文所描述或如本領(lǐng)域已知的取代、缺失或插入。至少一種GLP-1模擬體可任選與GLP-1受體結(jié)合，其結(jié)合親和力為至少10-7m、至少10"m、至少10力m、至少io"gm、至少io-11m或至少10"2m。因此，可按照已知方法篩選GLP-1模擬體的相應(yīng)活性，例如但不限于針對(duì)受體或其片段的結(jié)合活性。本發(fā)明還提供用于生產(chǎn)本發(fā)明的至少一種分離的人GLP-1模擬體或GLP-1抗獨(dú)特型抗體的方法，該方法包括提供能夠按可回收量表達(dá)GLP-1模擬體或GLP-1抗獨(dú)特型抗體的宿主細(xì)胞或轉(zhuǎn)基因動(dòng)物或轉(zhuǎn)基因植物。對(duì)于GLP-lMMB(SEQIDNO:4)，重復(fù)進(jìn)行了同樣的實(shí)驗(yàn)，并得到同樣的結(jié)果。0261實(shí)施例14:GLP-lMMB在長(zhǎng)期給予糖尿病小鼠后對(duì)空腹jMI的作用。每天將溶媒或GLP-lMMB(SEQIDNO:4c)(1mg/kg)皮下給予10周齡糖尿病db/db小鼠達(dá)6周。在整個(gè)研究過(guò)程中，每周兩次測(cè)定了空腹血糖。在整個(gè)研究中相對(duì)于對(duì)照，受治療動(dòng)物的空腹血糖P爭(zhēng)低(圖10)，到第6周時(shí)，空腹血糖的差異超過(guò)200mg/dL(對(duì)照和受治療動(dòng)物分別為466mg/dL與221mg/dL)。02621對(duì)于GLP-lMMB(SEQIDNO:4)，重復(fù)進(jìn)行了同樣的實(shí)驗(yàn)，并得到同樣的結(jié)果。。簡(jiǎn)單地講，用BioMekFx將血漿樣品連續(xù)稀釋成共4種稀釋液，即純血漿、1:8、1:64和1:512。每板包括以同樣方式用血漿稀釋的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。通過(guò)生物素化單克隆抗體(CNT01626)將GLP-1MMB俘獲至MSD各板，該生物素化單克隆抗體被設(shè)計(jì)成用來(lái)檢測(cè)模擬體的完整N端。加入識(shí)別模擬體接頭區(qū)的釕標(biāo)記的單克隆抗體(CNT0712)以便檢測(cè)，用MSD扇形圖像儀6000讀數(shù)器測(cè)定發(fā)光反應(yīng)。應(yīng)用S形劑量反應(yīng)曲線(xiàn)(GraphPadPRISM)計(jì)算出GLP-lMMB(SEQIDNO:4)水平。結(jié)果和討論。GLP-lMMB的藥效動(dòng)力學(xué)各時(shí)間點(diǎn)的ipGTT數(shù)據(jù)按血糖濃度對(duì)時(shí)間繪圖(圖25)。計(jì)算出每條ipGTT曲線(xiàn)的曲線(xiàn)下面積(AUC)(圖26)。相對(duì)于陰性對(duì)照，一次給予GLP-lMMB(SEQIDNO:4)導(dǎo)致注射后長(zhǎng)達(dá)6天AUC呈統(tǒng)計(jì)顯著性地減小。GLP-lMMB的藥代動(dòng)力學(xué)將在每次葡萄糖耐量試驗(yàn)后DIO小鼠中GLP-lMMB(SEQIDNO:4)的血漿濃度繪圖(圖27)。GLP-lMMB的藥效動(dòng)力學(xué)活性與其血漿水平的相關(guān)性在每次葡萄糖耐量試驗(yàn)后，將所有ipGTT數(shù)據(jù)的AUC對(duì)GLP-lMMB(SEQIDNO:4)血漿水平繪圖(圖28)。將數(shù)據(jù)擬合成雙曲線(xiàn)，得出ED50(370ng/ml)。[02781GLP-l模擬體的優(yōu)勢(shì):使用這個(gè)新的分子作為治療2型糖尿病的治療藥提供了若干優(yōu)于其它GLP-l類(lèi)似物的優(yōu)勢(shì)。例如，它很可能延長(zhǎng)GLP-l肽的半衰期。同樣，模擬體支架中的野生型GLP-l肽能抵抗蛋白酶降解，特別是能抵抗DPP-IV的降解。這可供用野生型GLP-l肽而不是突變型肽進(jìn)行治療。由于GLP-l是天然肽，因此用GLP-l模擬體治療的患者比用突變的GLP-l類(lèi)似物治療的患者較少免疫應(yīng)答。另外，可排除大尺寸的模擬體穿過(guò)血腦屏障。這可提供優(yōu)勢(shì)，因?yàn)閻盒暮徒箲]與腦內(nèi)結(jié)合GLP-IR的GLP-l相關(guān)。此外，；溪擬體平臺(tái)導(dǎo)致各個(gè)模擬體分子上兩種肽的表達(dá)。使可使得GLP-l肽彼此相互作用，形成可增加對(duì)細(xì)胞表面GLP-l受體親和力的二聚配體。[0279應(yīng)當(dāng)清楚的是，可采用不同于上文和實(shí)施例中所具體描述的方法實(shí)施本發(fā)明。[0280在上述教導(dǎo)的基礎(chǔ)上，本發(fā)明的多種修改和變化是可行的，因此，這些也都包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage122</column></row><table>權(quán)利要求1.至少一種GLP-1CH1缺失模擬體核酸，其包含至少一種編碼氨基酸序列SEQIDNO2或SEQIDNO4的多核苷酸或與其互補(bǔ)的多核苷酸，所述GLP-1CH1缺失模擬體在體外或體內(nèi)具有至少一種GLP-1生物活性并且還包含至少一個(gè)N-聯(lián)糖基化位點(diǎn)。2.至少一種GLP-1CH1缺失模擬體核酸，其包含至少一種編碼包含選自SEQIDNO:2、4、6或7-14中的至少一個(gè)的氨基酸序列的多核苷酸或與其互補(bǔ)的多核苷酸，其中所述GLP-1CHI缺失模擬體在體外或體內(nèi)具有至少一種GLP-1生物活性并且還包含至少一個(gè)N-聯(lián)糖基化位點(diǎn)。3.權(quán)利要求2的至少一種GLP-1CH1缺失模擬體核酸，其包含至少一種編碼氨基酸序列SEQIDNO:2或SEQIDNO:4的多核苷酸或與其互補(bǔ)的多核苷酸，其中所述GLP-1CHI缺失;f莫擬體在體外或體內(nèi)具有至少一種GLP-1生物活性并且還包含至少一個(gè)N-聯(lián)糖基化位點(diǎn)。4.至少一種GLP-1CH1缺失模擬體核酸，其包含至少一種編碼下式(I)多肽的多核苷酸(Pep(n)-L(o)畫(huà)V(p)-H(q)-CH2(r)-CH3(s))(t),其中P包含至少一種選自SEQIDNO:l或SEQIDNO:6的生物活性GLP-1肽，L是至少一個(gè)包含Ser和Gly的接頭序列，V是免疫球蛋白可變區(qū)C端的至少一部分，H是免疫球蛋白可變鉸鏈區(qū)的至少一部分，CH2是免疫球蛋白CH2恒定區(qū)的至少一部分，CH3是免疫球蛋白CH3恒定區(qū)的至少一部分，n是l-10的整數(shù)，o、p、q、r、s和t可獨(dú)立地為0-10的整數(shù)，其中所述GLP-1CH1缺失模擬體在體外或體內(nèi)具有至少一種GLP-1生物活性并且還包含至少一個(gè)N-聯(lián)糖基化位點(diǎn)。5.至少一種GLP-1CHI缺失模擬體多肽，其包含SEQIDNO:2或SEQIDNO:4的所有連續(xù)氨基酸，其中所述GLP-1CHI缺失模擬體多肽在體外或體內(nèi)具有至少一種GLP-1生物活性并且還包含至少一個(gè)N-聯(lián)糖基化位點(diǎn)。6.至少一種GLP-1CHI缺失模擬體多肽，其包含SEQIDNO:7-14中至少一個(gè)的所有連續(xù)氨基酸，其中所述GLP-1CHI缺失模擬體多肽在體外或體內(nèi)具有至少一種GLP-1生物活性并且還包含至少一個(gè)N-聯(lián)糖基化位點(diǎn)。7.至少一種GLP-1CHI缺失模擬體多肽，其包含下式(I)的多肽(P印(n)匿L(o)-V(p)-H(q)-CH2(r)-CH3(s))(t)，其中P是選自SEQIDNO:l和SEQIDNO:6的至少一種生物活性GLP-1肽，L選自GS、GGS、GGGS(SEQIDNO:16)、GSGGGS(SEQIDNO:17)、GGSGGGS(SEQIDNO:18)、GGSGGGSGG(SEQIDNO:19)和GGGSGGGSGG(SEQIDNO:20)，V選自GTLVTVSS(SEQIDNO:21)、GTLVAVSS(SEQIDNO:22)、GTAVTVSS(SEQIDNO:23)、TVSS(SEQIDNO:24)和AVSS(SEQIDNO:25)，H是EPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGP(SEQIDNO:26)，CH2是SVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVE<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>是ALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQIDNO:44),n是l-10的整數(shù)，o、p、q、r、s和t可獨(dú)立地為0-10的整數(shù)，其中所述GLP-1CHI缺失模擬體在體外或體內(nèi)具有至少一種GLP-1生物活性并且還包含至少一個(gè)N-聯(lián)糖基化位點(diǎn)。8.至少一種GLP-1CHI缺失模擬體多肽，其包含下式(I)的多肽(Pep(n)-L(o)-V(p)-H(q)-CH2(r)-CH3(s))(t)，其中P是SEQIDNO:6的至少一種生物活性GLP-1肽，L選自GS、GGS、GGGS(SEQIDNO:16)、GSGGGS(SEQIDNO:17)、GGSGGGS(SEQIDNO:18)、GGSGGGSGG(SEQIDNO:19)和GGGSGGGSGG(SEQIDNO:20),V選自GTLVTVSS(SEQIDNO:2"、GTLVAVSS(SEQIDNO:22)、GTAVTVSS(SEQIDNO:23)、TVSS(SEQIDNO:24)和AVSS(SEQIDNO:25)，H是ESKYGPPCPSCPAPEFLGGP(SEQIDNO:27)，CH2是SVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAK(SEQIDNO:45),CH3是ALHNHYTQKSLSLSLGK(SEQIDNO:46)，n是l-10的整數(shù)，o、p、q、r、s和t可獨(dú)立地為0-10的整數(shù)，其中所述GLP-lCHI缺失模擬體在體外或體內(nèi)具有至少一種GLP-1生物活性并且還包含至少一個(gè)N-聯(lián)糖基化位點(diǎn)。9.至少一種GLP-1CHI缺失模擬體多肽，其包含下式(I)的多肽(Pep(n)畫(huà)L(o)-V(p)-H(q)-CH2(r)-CH3(s))(t)，其中P是SEQIDNO:6的至少一種生物活性GLP-1肽，L選自GS、GGS、GGGS(SEQIDNO:16)、GSGGGS(SEQIDNO:17)、GGSGGGS(SEQIDNO:18)、GGSGGGSGG(SEQIDNO:19)和GGGSGGGSGG(SEQIDNO:20)，V選自GTLVTVSS(SEQIDNO:21)、GTLVAVSS(SEQIDNO:22)、GTAVTVSS(SEQIDNO:23)、TVSS(SEQIDNO:24)和AVSS(SEQIDNO:25),H是ESKYGPPCPPCPAPEAAGGP(SEQIDNO:28)，CH2是SWLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAK(SEQIDNO:45)，CH3是ALHNHYTQKSLSLSLGK(SEQIDNO:46)，n是l-10的整數(shù)，o、p、q、r、s和t可獨(dú)立地為0-10的整數(shù)，其中所述GLP-1CHI缺失模擬體在體外或體內(nèi)具有至少一種GLP-1生物活性并且還包含至少一個(gè)N-聯(lián)糖基化位點(diǎn)。10.至少一種GLP-1cm缺失模擬體多肽，其包含下式(I)的多肽:(Pep(n)-L(o)-V(p)-H(q)-CH2(r)-CH3(s))(t)，其中P是至少一種生物活性GLP-1肽、變體或衍生物，L是至少一個(gè)接頭序列，該接頭序列可以是通過(guò)使模擬體具有選擇性方向和結(jié)合特性從而提供結(jié)構(gòu)柔性的多肽，V是免疫球蛋白可變區(qū)C端的至少一部分，H是免疫球蛋白可變鉸鏈區(qū)的至少一部分，CH2是SVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEALPAPIEKTISKAK(SEQIDNO:43)CH3疋ALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQIDNO:44)，n是l-10的整數(shù)，o、p、q、r、s和t可獨(dú)立地為0-10的整數(shù)，其中所述GLP-1CH1缺失模擬體在體外或體內(nèi)具有至少一種GLP-1生物活性并且還包含至少一個(gè)N-聯(lián)糖基化位點(diǎn)。11.至少一種GLP-1CH1缺失模擬體多肽，其包含下式(I)的多肽(Pep(n)-L(o)誦V(p)陽(yáng)H(q)-CH2(r)-CH3(s))(t)，其中P是至少一種生物活性GLP-1肽、變體或衍生物，L是至少一個(gè)接頭序列，該接頭序列可以是通過(guò)使模擬體具有選擇性方向和結(jié)合特性從而提供結(jié)構(gòu)柔性的多肽，V是免疫球蛋白可變區(qū)C端的至少一部分，H是免疫球蛋白可變鉸鏈區(qū)的至少一部分，CH2是GLPSSIEKTISKAK(SEQIDNO:45)CH3是ALHNHYTQKSLSLSLGK(SEQIDNO:46),n是l-10的整數(shù)，o、p、q、r、s和t可獨(dú)立地為0-10的整數(shù)，其中所述GLP-1CH1缺失模擬體在體外或體內(nèi)具有至少一種GLP-1生物活性并且還包含至少一個(gè)N-聯(lián)糖基化位點(diǎn)。12.至少一種GLP-1CH1缺失模擬體多肽，其包含下式(I)的多肽(Pep(n)-L(o)-V(p)-H(q)-CH2(r)-CH3(s))(t)，其中P是SEQIDNO:6的至少一種生物活性GLP-1肽，L是至少一個(gè)接頭序列，該接頭序列可以是通過(guò)使模擬體具有選擇性方向和結(jié)合特性從而提供結(jié)構(gòu)柔性的多肽，V是免疫球蛋白可變區(qū)C端的至少一部分，H是免疫球蛋白可變鉸鏈區(qū)的至少一部分，CH2是免疫球蛋白CH2恒定區(qū)的至少一部分，CH3是免疫球蛋白CH3恒定區(qū)的至少一部分，n是l-10的整數(shù)，o、p、q、r、s和t可獨(dú)立地為0-10的整數(shù)，其中所述GLP-1CH1缺失^^莫擬體在體外或體內(nèi)具有至少一種GLP-1生物活性并且還包含至少一個(gè)N-聯(lián)糖基化位點(diǎn)。13.至少一種GLP-1CH1缺失模擬體多肽，所述多肽包含下式(I)的多肽(Pep(n)-L(o)-V(p)-H(q)-CH2(r)-CH3(s))(t),其中P是至少一種生物活性GLP-1肽、變體或衍生物，L選自GS、GGS、GGGS(SEQIDNO:16)、GSGGGS(SEQIDNO:17)、GGSGGGS(SEQIDNO:18)、GGSGGGSGG(SEQIDNO:19)和GGGSGGGSGG(SEQIDNO:20)，V是免疫球蛋白可變區(qū)C端的至少一部分，H是免疫球蛋白可變鉸鏈區(qū)的至少一部分，CH2是免疫球蛋白CH2恒定區(qū)的至少一部分，CH3是免疫球蛋白CH3恒定區(qū)的至少一部分，n是1-10的整數(shù)，o、p、q、r、s和t可獨(dú)立地為0-10的整數(shù)，其中所述GLP-1CH1缺失模擬體在體外或體內(nèi)具有至少一種GLP-1生物活性并且還包含至少一個(gè)N-聯(lián)糖基化位點(diǎn)。14.至少一種GLP-1CHl缺失模擬體多肽，其包含下式(I)的多肽(Pep(n)-L(o)-V(p)-H(q)-CH2(r)-CH3(s))(t),其中P是至少一種生物活性GLP-1肽、變體或衍生物，L是至少一個(gè)接頭序列，該接頭序列可以是通過(guò)使模擬體具有選擇性方向和結(jié)合特性從而提供結(jié)構(gòu)柔性的多肽，V選自GTLVTVSS(SEQIDNO:21)、GTLVAVSS(SEQIDNO:22)、GTAVTVSS(SEQIDNO:23)、TVSS(SEQIDNO:24)和AVSS(SEQIDNO:25)，H是免疫球蛋白可變鉸鏈區(qū)的至少一部分，CH2是免疫球蛋白CH2恒定區(qū)的至少一部分，CH3是免疫球蛋白CH3恒定區(qū)的至少一部分，n是l-10的整數(shù)，o、p、q、r、s和t可獨(dú)立地為0-10的整數(shù)，其中所述GUMCHI缺失模擬體在體外或體內(nèi)具有至少一種GLP-1生物活性并且還包含至少一個(gè)N-聯(lián)糖基化位點(diǎn)。15.至少一種GLP-1CH1缺失模擬體多肽，其包含下式(I)的多肽(Pep(n)-L(o)-V(p)畫(huà)H(q)-CH2(r)-CH3(s))(t)，其中P是至少一種生物活性GLP-1肽、變體或衍生物，L是至少一個(gè)接頭序列，該接頭序列可以是通過(guò)使模擬體具有選擇性方向和結(jié)合特性從而提供結(jié)構(gòu)柔性的多肽，V是免疫球蛋白可變區(qū)C端的至少一部分，H選自EPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGP(SEQIDNO:26)、ESKYGPPCPSCPAPEFLGGP(SEQIDNO:27)和ESKYGPPCPPCPAPEAAGGP(SEQIDNO:28),CH2是免疫球蛋白CH2恒定區(qū)的至少一部分，CH3是免疫球蛋白CH3恒定區(qū)的至少一部分，n是l-10的整數(shù)，o、p、q、r、s和t可獨(dú)立地為0-10的整數(shù)，其中所述GLP-1CH1缺失模擬體在體外或體內(nèi)具有至少一種GLP-1生物活性并且還包含至少一個(gè)N-聯(lián)糖基化位點(diǎn)。16.至少一種GLP-1CH1缺失模擬體多肽，其包含下式(I)的多肽(Pep(n)誦L(o)-V(p)-H(q)-CH2(r)畫(huà)CH3(s))(t),其中P是至少一種生物活性GLP-1肽、變體或衍生物，L是至少一個(gè)接頭序列，該接頭序列可以是通過(guò)使模擬體具有選擇性方向和結(jié)合特性從而提供結(jié)構(gòu)柔性的多肽，v是免疫球蛋白可變區(qū)c端的至少一部分，H選自EPKSADKTHTCPPCPAPEAAGGP(SEQIDNO:29)、EPKSADKTHTCPPCPAPELAGGP(SEQIDNO:30)、EPKSADKTHTCPPCPAPEALGGP(SEQIDNO:31)、EPKSADK丁HTCPPCPAPELEGGP(SEQIDNO:32)、EPKSSDKTHTCPPCPAPEFLGGP(SEQIDNO:33)、EPKSADKTHACPPCPAPELLGGP(SEQIDNO:34)、EPKSADKAHTCPPCPAPELLGGP(SEQIDNO:35)和EPKSADKTHTCPPCPAPELLGGP(SEQIDNO:36)、ADKTHTCPPCPAPELLGGP(SEQIDNO:37)、THTCPPCPAPELLGGP(SEQIDNO:38)、ESKYGPPCPSCPAPEAAGGP(SEQIDNO:39)、ESKYGPPCPPCPAPELLGGP(SEQIDNO:40)、CPPCPAPELLGGP(SEQIDNO:41)和CPPCPAPEAAGGP(SEQIDNO:42)，CH2是免疫球蛋白CH2恒定區(qū)的至少一部分，CH3是免疫球蛋白CH3恒定區(qū)的至少一部分，n是卜10的整數(shù)，o、p、q、r、s和t可獨(dú)立地為0-10的整數(shù)，其中所述GLP-lCHI缺失模擬體在體外或體內(nèi)具有至少一種GLP-1生物活性并且還包含至少一個(gè)N-聯(lián)糖基化位點(diǎn)。17.至少一種下式(I)的GLP-1CHI缺失模擬體多肽(Pep(n)-L(o)-V(p)-H(q)-CH2(r)-CH3(s))(t)，其中P是至少一種生物活性GLP-1肽、變體或衍生物，L是至少一個(gè)接頭序列，該接頭序列可以是通過(guò)使模擬體具有選擇性方向和結(jié)合特性從而提供結(jié)構(gòu)柔性的多肽，V是免疫球蛋白可變區(qū)C端的至少一部分，H是免疫球蛋白可變鉸鏈區(qū)的至少一部分，CH2是免疫球蛋白CH2恒定區(qū)的至少一部分，CH3是免疫球蛋白CH3恒定區(qū)的至少一部分，n是l-10的整數(shù)，o、p、q、r、s和t可獨(dú)立地為0-10的整數(shù)，其中所述GUMCHI缺失^t擬體在體外或體內(nèi)具有至少一種GLP-1生物活性并且還包含至少一個(gè)N-聯(lián)糖基化位點(diǎn)。18.權(quán)利要求1-17中任一項(xiàng)的GLP-1CH1缺失模擬體核酸或GLP-1CH1缺失模擬體多肽，其中所述多肽具有至少一種P多肽的至少一種活性。19.一種抗獨(dú)特型單克隆或多克隆抗體、融合蛋白或它們的片段，其特異性地結(jié)合權(quán)利要求4-17中任一項(xiàng)的至少一種GLP-1CH1缺失模擬體多肽。20.權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的GLP-1CHI缺失模擬體核酸或與其互補(bǔ)的多核苷酸、或編碼權(quán)利要求4-17中任一項(xiàng)的至少一種GLP-1CHI缺失模擬體多肽或GLP-lCHI缺失模擬體抗體的GLP-1CHI缺失模擬體核酸或與其互補(bǔ)的多核苷酸。21.—種GLP-1CH1缺失模擬體載體，其包含權(quán)利要求20的至少一種分離核酸。22.—種GLP-1CHI缺失模擬體宿主細(xì)胞，其包含權(quán)利要求20的分離核酸。23.權(quán)利要求21的GLP-lCHI缺失模擬體宿主細(xì)胞，其中所述宿主細(xì)胞是選自COS-l、COS-7、HEK293、BHK21、CHO、BSC-l、H印G2、653、SP2/0、293、NSO、DG44CHO、CHOKl、HeLa、骨髓瘤或淋巴瘤細(xì)胞或其任何衍生細(xì)胞、無(wú)限增殖化細(xì)胞或轉(zhuǎn)化細(xì)胞中的至少一種。24.—種產(chǎn)生至少一種GLP-1CH1缺失模擬體多肽或GLP-1CHI缺失模擬體抗體的方法，該方法包括在體外、體內(nèi)或原位條件下翻譯權(quán)利要求20的核酸，從而以可檢測(cè)或可回收量表達(dá)GLP-1CHI缺失模擬體或抗體。25.—種組合物，所迷組合物包含權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的至少一種GLP-1CHI缺失模擬體核酸、至少一種GLP-1CHI缺失模擬體多肽或至少一種GLP-1CHI缺失模擬體抗體。26.權(quán)利要求25的組合物，其中所述組合物還包含至少一種藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑。27.權(quán)利要求25的組合物，所述組合物還包含至少一種包含治療有效量的至少一種選自以下的至少一種的化合物、組合物或多肽的組合物糖尿病或胰島素代謝相關(guān)藥物、可檢測(cè)標(biāo)記或報(bào)道分子、TNF拮抗劑、抗感染藥、心血管(CV)系統(tǒng)藥物、中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)藥物、自主神經(jīng)系統(tǒng)(ANS)藥物、呼吸道藥物、胃腸(GI)道藥物、激素類(lèi)藥物、用于體液或電解質(zhì)平衡的藥物、血液系統(tǒng)藥物、抗腫瘤藥、免疫調(diào)節(jié)藥、目艮、耳或鼻用藥物、局部用藥物、營(yíng)養(yǎng)藥、細(xì)胞因子或細(xì)胞因子拮抗劑。28.權(quán)利要求25的組合物，所述組合物呈至少一種選自以下的形式液體制劑、氣體制劑或干的制劑、溶液劑、合劑、混懸劑、乳液劑或膠體、凍干制劑或粉劑。29.—種用于在細(xì)胞、組織、器官或動(dòng)物中診斷或治療GLP-1相關(guān)疾病的方法，該方法包4舌(a)使包含有效量的權(quán)利要求1-19中任一項(xiàng)的至少一種GLP-1CH1缺失模擬體核酸、多肽或抗體的組合物與所述細(xì)胞、組織、器官或動(dòng)物接觸，或者將包含有效量的權(quán)利要求1-19中任一項(xiàng)的至少一種GLP-1CH1缺失模擬體核酸、多肽或抗體的組合物給予所述細(xì)胞、組織、器官或動(dòng)物。30.權(quán)利要求29的方法，其中所述GLP-1相關(guān)疾病是糖尿病或充血性心力衰竭。31.權(quán)利要求29的方法，其中所述有效量為每千克所述細(xì)胞、組織、器官或動(dòng)物0.0001-50mgGLP-lCH1缺失模擬體抗體、0.1-500mg所述GLP-1CH1缺失模擬體或0.0001-100嗎所述GLP-1CH1缺失模擬體核酸。32.權(quán)利要求29的方法，其中所述接觸或所述給予通過(guò)至少一種選自以下的方式進(jìn)行胃腸外、皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、支氣管內(nèi)、腹內(nèi)、嚢內(nèi)、軟骨內(nèi)、腔內(nèi)、體腔內(nèi)、小腦內(nèi)、腦室內(nèi)、結(jié)腸內(nèi)、宮頸內(nèi)、胃內(nèi)、肝內(nèi)、心肌內(nèi)、骨內(nèi)、骨盆內(nèi)、心包內(nèi)、腹膜內(nèi)、胸膜內(nèi)、前列腺內(nèi)、肺內(nèi)、直腸內(nèi)、腎內(nèi)、視網(wǎng)膜內(nèi)、脊柱內(nèi)、滑膜內(nèi)、胸內(nèi)、子宮內(nèi)、膀胱內(nèi)、損害內(nèi)、推注、陰道、直腸、口腔、舌下、鼻內(nèi)或經(jīng)皮。33.權(quán)利要求29的方法，該方法還包括在所述(a)接觸或給予之前、同時(shí)或之后給予至少一種包含有效量的至少一種化合物或多肽的組合物，其中所述化合物或多肽選自糖尿病或胰島素代謝相關(guān)藥物、可檢測(cè)標(biāo)記或報(bào)道分子、TNF拮抗劑、抗感染藥、心血管(CV)系統(tǒng)藥物、中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)藥物、自主神經(jīng)系統(tǒng)(ANS)藥物、呼吸道藥物、胃腸(GI)道藥物、激素類(lèi)藥物、用于體液或電解質(zhì)平衡的藥物、血液系統(tǒng)藥物、抗腫瘤藥、免疫調(diào)節(jié)藥、眼、耳或鼻用藥物、局部用藥物、營(yíng)養(yǎng)藥、細(xì)胞因子或細(xì)胞因子拮抗劑中的至少一種。34.—種裝置，所述裝置包括權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的至少一種分離的GLP-1CH1缺失模擬體多肽、抗體或核酸，其中所述裝置適于通過(guò)至少一種選自以下的方式接觸或給予所述GUMCHI缺失模擬體多肽、抗體或核酸中的至少一種胃腸外、皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、支氣管內(nèi)、腹內(nèi)、囊內(nèi)、軟骨內(nèi)、腔內(nèi)、體腔內(nèi)、小腦內(nèi)、腦室內(nèi)、結(jié)腸內(nèi)、宮頸內(nèi)、胃內(nèi)、肝內(nèi)、心月幾內(nèi)、骨內(nèi)、骨盆內(nèi)、心包內(nèi)、腹膜內(nèi)、胸膜內(nèi)、前列腺內(nèi)、肺內(nèi)、直腸內(nèi)、腎內(nèi)、視網(wǎng)膜內(nèi)、脊柱內(nèi)、滑膜內(nèi)、胸內(nèi)、子宮內(nèi)、膀胱內(nèi)、損害內(nèi)、推注、陰道、直腸、口腔、舌下、鼻內(nèi)或經(jīng)皮。35.—種用于人用藥物或診斷用途的制造品，所述制造品包括包裝材料和裝有權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的至少一種分離的GLP-1CH1缺失模擬體多肽、抗體或核酸的容器。36.權(quán)利要求35的制造品，其中所述容器是以下形式的遞藥裝置或系統(tǒng)的構(gòu)件胃腸外、皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、支氣管內(nèi)、腹內(nèi)、嚢內(nèi)、軟骨內(nèi)、腔內(nèi)、體腔內(nèi)、小腦內(nèi)、腦室內(nèi)、結(jié)腸內(nèi)、宮頸內(nèi)、胃內(nèi)、肝內(nèi)、心月幾內(nèi)、骨內(nèi)、骨盆內(nèi)、心包內(nèi)、腹膜內(nèi)、胸膜內(nèi)、前列腺內(nèi)、肺內(nèi)、直腸內(nèi)、腎內(nèi)、視網(wǎng)膜內(nèi)、脊柱內(nèi)、滑膜內(nèi)、胸內(nèi)、子宮內(nèi)、膀胱內(nèi)、損害內(nèi)、推注、陰道、直腸、口腔、舌下、鼻內(nèi)或經(jīng)皮遞藥裝置或系統(tǒng)。37.—種制備權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的至少一種分離的GUMCH1缺失模擬體多肽、抗體或核酸的方法，該方法包括提供至少一種能夠以可檢測(cè)或可回收量表達(dá)所述多肽、抗體或核酸的宿主細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、轉(zhuǎn)基因植物、植物細(xì)胞。38.通過(guò)權(quán)利要求37的方法制備的至少一種GLP-1CH1缺失模擬體多肽、抗體或核酸。全文摘要本發(fā)明涉及至少一種改進(jìn)的人GLP-1模擬體(mimetibody)或特定部分或變體，包括編碼至少一種GLP-1模擬體或特定部分或變體的分離核酸、GLP-1模擬體或特定部分或變體、載體、宿主細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物或植物及其制備和使用方法，還包括治療組合物、方法和裝置。文檔編號(hào)C07K14/605GK101535341SQ200780034262公開(kāi)日2009年9月16日申請(qǐng)日期2007年7月18日優(yōu)先權(quán)日2006年7月18日發(fā)明者K·T·奧奈爾,K·皮查申請(qǐng)人:森托科爾奧索生物科技公司