專(zhuān)利名稱(chēng)：：吡唑并[1，5-a]嘧啶類(lèi)、方法、用途及組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及對(duì)GABAA受體具有親和力的藥劑，具體涉及吡唑并[1，5-s]嗜啶類(lèi)，更具體涉及N-{2-取代-5-[3-取代-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺和N-{2-取代-5-[3-取代-吡唑并[1，5-a]嘧淀-7-基]-笨基}-N-甲基-甲基磺酰胺。
背景技術(shù)：
：GABAA受體(Y-氨基丁酸a)是形成膜離子通道的五聚體蛋白。GABAA受體與鎮(zhèn)靜、焦慮、肌緊張、致癲癇活性和記憶功能的調(diào)節(jié)有關(guān)。這些作用歸因于GABA,受體確定的亞單位，特別是od-和a廣亞單位。鎮(zhèn)靜受a「亞單位的調(diào)節(jié)。唑吡坦的特征在于在體內(nèi)對(duì)a廣受體具有高親和力并且其鎮(zhèn)靜和催眠作用由這些受體所介導(dǎo)的。同樣地，扎來(lái)普隆的催眠作用也是由Od-受體所介導(dǎo)的。地西泮的抗焦慮作用是由GABA能傳遞在表達(dá)a廠受體的一組神經(jīng)元中的增強(qiáng)所介導(dǎo)的。這表明a廣受體是治療焦慮的高度特異性耙點(diǎn)。由于這些受體表現(xiàn)出在脊髓中高度特異性的表達(dá)，因此地西泮中的肌松弛主要是由a「受體所介導(dǎo)的。地西泮的抗驚厥作用部分歸因于a「受體。在地西泮(一種記憶損傷化合物)中，順行性遺忘是由a「受體所介導(dǎo)的。GABAA受體以及它的a廣和a2-亞單位被H.M6hler等(J.Pharmacol.Exp.Ther.，300，2-8，2002);H.M6hler等(Curr.Opin.Pharmacol.,1，22-25，2001);U.Rudolph等(Nature,401，796—800，1999);以及D.J.Nutt等(Br.J.Psychiatry,179，390-396，2001)廣泛地綜述。地西泮和其它經(jīng)典的苯二氮卓類(lèi)被廣泛作為抗焦慮藥、安眠藥、抗驚厥藥和肌肉松弛劑。它們的副作用包括順行性遺忘、運(yùn)動(dòng)活動(dòng)減少以及乙醇作用的增強(qiáng)作用。在本文上下文中，本發(fā)明的化合物是用于在睡眠障礙，優(yōu)選為失眠癥、焦慮癥和癲癇癥中臨床應(yīng)用的od-和a廣GABAA受體的配體。失眠癥是非常普遍的疾病。慢性失眠癥影響10%的人群并且當(dāng)還計(jì)算短暫性失眠癥時(shí)影響30%的人群。失眠癥描述為入睡困難或保持熟睡困難，并且與隔日宿醉效應(yīng)(例如疲倦、能量缺乏、低下的注意力和應(yīng)激性)有關(guān)。這種疾病的社會(huì)影響和健康影響是重大的并且會(huì)帶來(lái)明顯的社會(huì)經(jīng)濟(jì)影響。處理失眠癥的藥理學(xué)治療最初包括巴比妥酸鹽和水合氯醛，但是這些藥物引起許多已知不良反應(yīng)，例如服藥過(guò)量毒性、代謝誘導(dǎo)以及依賴(lài)和耐受增強(qiáng)。此外，它們通過(guò)減少上述所有的持續(xù)時(shí)間和REM睡眠階段的數(shù)目影響睡眠結(jié)構(gòu)。后來(lái)，由于它們的低毒性苯二氮卓類(lèi)意味著一個(gè)重要的治療進(jìn)步，但是它們?nèi)燥@示出依賴(lài)、肌肉松弛、健忘和在該藥中斷后的反彈性失眠的嚴(yán)重問(wèn)題。最新的已知治療方法為引進(jìn)非苯二氮卓類(lèi)安眠藥，例如吡咯并[3，4-6]吡溱類(lèi)(佐匹克隆)、咪唑并[l，2i]吡啶類(lèi)(唑吡坦)和，最后吡唑并[l，5-a]嘧咬類(lèi)(扎來(lái)普隆)。隨后，兩個(gè)新的吡唑并[l，5-a]嘧啶類(lèi)(茚地普隆(indiplon)和奧西普隆)已經(jīng)進(jìn)入開(kāi)發(fā)，后者具有一定抗焦慮作用。所有這些化合物顯示出快速睡眠誘導(dǎo)作用并且相對(duì)于苯二氮卓類(lèi)具有較少的隔日宿醉效應(yīng)、更低的濫用可能性和更低的反彈性失眠的風(fēng)險(xiǎn)。這些化合物作用的機(jī)制是通過(guò)其結(jié)合到苯二氮卓結(jié)合位點(diǎn)使GABAA受體的變構(gòu)活化(C.F.P.George,TheLancet,358，1623-1626，2001)。苯二氮卓類(lèi)是GABAA受體結(jié)合位點(diǎn)的非特異性配體，而唑吡坦和扎來(lái)普隆顯示出對(duì)Od-亞單位更高的選擇性。盡管這樣，這些藥物仍影響睡眠結(jié)構(gòu)并且在長(zhǎng)期治療中可誘導(dǎo)依賴(lài)。許多相關(guān)的吡唑并[l，5-a]嘧啶類(lèi)已經(jīng)在專(zhuān)利公開(kāi)US4178449、US4281000、US4521422(2-吡啶基[7-(4-吡咬基)吡唑并[1，5-a]嘧咬-3-基]曱酮，奧西普隆)、US4576943,US4626538(N-{3-[3-(氰基6吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基)-N-乙基-乙酰胺，扎來(lái)普隆)、US4654347,US6399621(N-{3-[3-(虔吩-2-羰基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基)-N-曱基-乙酰胺，茚地普隆)、WO2005014596、WO2005014597和W02006136530中公開(kāi)。對(duì)處理失眠癥的新的活性化合物的研究符合潛在的健康需求，因?yàn)榧词棺罱M(jìn)的安眠藥仍影響睡眠結(jié)構(gòu)并且在長(zhǎng)期治療中可引起依賴(lài)。因此，需要集中于開(kāi)發(fā)具有更低副作用風(fēng)險(xiǎn)的新的安眠藥劑。
發(fā)明內(nèi)容發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)新的吡唑并[1，5-a]嘧啶類(lèi)，其對(duì)GABAa有活性，特別是對(duì)GABAA的oc廣和ot廣亞單位有活性。因此，本發(fā)明的化合物在治療和預(yù)防所有那些由GABAA受體a,-和a廣亞單位所介導(dǎo)的疾病中是有益的。所述疾病的非限制性的實(shí)例是睡眠障礙，優(yōu)選為失眠癥、焦慮癥和癲癇癥。本發(fā)明化合物的相關(guān)適應(yīng)癥的非限制性的實(shí)例是所有那些需要誘導(dǎo)睡眠、誘導(dǎo)鎮(zhèn)靜或誘導(dǎo)肌肉松弛的疾病或病癥，例如失眠癥或麻醉。扎來(lái)普隆(吡唑并[1，5-a]嘧啶類(lèi)參考化合物)是與本發(fā)明化合物結(jié)構(gòu)類(lèi)似的化合物。但是，由于趁氧化酶，扎來(lái)普隆表現(xiàn)出廣泛的生物轉(zhuǎn)化(B.G.Lakeetal.,Metabolismofzaleplonbyhumanliver:evidenceforinvolvementofaldehydeoxidase,Xenobiotica,2002Oct;32(10):835-47;和K.Kawashimaetal.，Aldehydeoxidase—dependentmarkedspeciesdifferenceinhepaticmetabolismofthesedative—hypnoticzaleplon,betweenmonkeys和rats，DrugMetabDispos.1999Mar;27(3):422-8)。盡管另一個(gè)吡唑并[1，5-a]嘧啶類(lèi)(茚地普隆)相對(duì)于扎來(lái)普隆具有更好的代謝穩(wěn)定性在本領(lǐng)域中是公知的，但是該化合物正如細(xì)胞活性實(shí)驗(yàn)所顯示的具有更高毒理學(xué)效應(yīng)的缺點(diǎn)?；衔飳?duì)生物轉(zhuǎn)化的敏感性是與它們的代謝穩(wěn)定性，即藥物在體7內(nèi)的半衰期以及它是否形成代謝產(chǎn)物有關(guān)。這些是評(píng)價(jià)生物利用度、毒性以及對(duì)于藥物-藥物相互作用的給藥可能性的重要參數(shù)，同樣也是確定用于人類(lèi)使用潛力的重要參數(shù)。在這方面，具有最高代謝穩(wěn)定性的化合物使藥物-藥物相互作用的可能性減少到最小，并且需要更低頻繁的給藥間隔。本發(fā)明化合物顯示出意想不到地更少的生物轉(zhuǎn)化，即相對(duì)于其它已知相關(guān)的吡唑并[1，5-a]嘧啶類(lèi)具有更高的代謝穩(wěn)定性，這改善了有助于維持藥理學(xué)作用的藥物代謝動(dòng)力學(xué)特征并提供了未被預(yù)料的用于維持完整夜間睡眠的適應(yīng)癥。所述特性涉及在苯環(huán)，即取代基R3和R4上取代。特別適合的是在苯環(huán)上具有吸電子取代基的化合物。此外，如在實(shí)施例中所說(shuō)明的，本發(fā)明化合物還顯示出良好的體內(nèi)鎮(zhèn)靜/催眠治療活性和如在細(xì)胞活性實(shí)驗(yàn)中表明的低毒理學(xué)效應(yīng)。因此，本發(fā)明涉及式(I)的化合物和其藥學(xué)上可接受的鹽和水合物，它們是GABAa受體的配體，其中R和R,代表烷基(d-C6)，R2選自氰基、硝基和噻吩-2-羰基，l選自氫和囟素，l選自氫、卣素、烷基(C廣C6)和烷氧基(d-C6)，R5選自氫和烷基(C廣C6)，并且Y選自-C0-和-SO廣；和其藥學(xué)上可接受的鹽和水合物。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供治療或預(yù)防焦慮癥、癲癇癥和包括失眠癥的睡眠障礙的新方法，和通過(guò)給予治療有效量的所述化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物誘導(dǎo)鎮(zhèn)靜催眠、麻醉、睡眠和肌肉松弛。發(fā)明詳述如上所述，本發(fā)明涉及式(I)化合物;和其藥學(xué)上可接受的鹽和水合物，其中R、^、R2、R3、R4、R5和Y如上所述。在本文中所使用的術(shù)語(yǔ)"藥學(xué)上可接受的鹽"包括由有機(jī)酸和無(wú)機(jī)酸所形成的任何形式的鹽，所述有機(jī)酸和無(wú)機(jī)酸例如氫溴酸、鹽酸、磷酸、硝酸、硫酸、醋酸、脂肪酸、天門(mén)冬氨酸、苯磺酸、苯甲酸、檸檬酸、乙磺酸、甲酸、富馬酸、谷氨酸、乳酸、馬來(lái)酸、蘋(píng)果酸、丙二酸、扁桃酸、甲磺酸、1,5-萘二磺酸、草酸、新戊酸、丙酸、對(duì)甲苯磺酸、琥珀酸、酒石酸等。式(I)的具體化合物選自N-{2-氟-5-[3-硝基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-曱基-乙酰胺；N-{2-氟-5-[3-氰基-吡唑并[1，5-s]嘧啶-7-基]-苯基}-N-曱基-乙酰胺；N-{2-氯-5-[3-硝基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺；N-{2-氯-5-[3-氰基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-曱基-乙酰胺；N-(2-氟-5-[3-硝基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-甲基磺酰胺；N-(2-氟-5-[3-氰基-吡唑并[l,5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-甲基磺酰胺；N-{2-氯-5-[3-硝基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-曱基磺酰胺；N-U-氯-5-[3-氰基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-曱基磺酰胺；N-(2-氟-5-[3-氰基-2-甲基-吡唑并[l，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺；N-{2-氯-5-[3-氰基-2-曱基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-曱基-乙酰胺；N-(2-氟-5-[3-氰基-2-曱基-吡唑并[l，5-a]嘧啶-7-基]-苯基)-N-甲基-甲基磺酰胺；N-(2-氯-5-[3-氰基-2-甲基-吡唑并[l，5-a]嘧啶-7-基]-苯基)-N-甲基-曱基磺酰胺；N-{2-甲基-5-[3-(噻吩-2-羰基)-吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-曱基-乙酰胺；N-{2-甲氧基-5-[3-(噻吩-2-羰基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺；N-{2，4-二氟-5-[3-(噻吩-2-羰基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基)-N-甲基-乙酰胺；和N-{5-氟-2-曱氧基-3-[3-(噻吩-2-羰基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基)-N-甲基-乙酰胺。下述反應(yīng)方案說(shuō)明了制備本發(fā)明的化合物。10<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>方案1R、R!、R2、R3、R4、Rs和Y如上所述，并且Q是選自下述基團(tuán)的適當(dāng)?shù)碾x去基團(tuán):N(二烷基(C廣a))、烷硫基(C]-Cj和烷氧基(d-C6)。優(yōu)選地，Q選自二曱氨基、甲硫基或甲氧基。通式(III)的氨基吡唑與適當(dāng)被取代的1-芳基-2-丙烯-l-酮(II)的反應(yīng)在5(TC-130'C的溫度范圍內(nèi)在惰性極性質(zhì)子或非質(zhì)子溶劑，例如冰醋酸、乙醇、甲醇、二甲基甲酰胺或二曱基亞砜中進(jìn)行。經(jīng)過(guò)幾個(gè)小時(shí)(反應(yīng)時(shí)間)，除去溶劑并且所獲得的殘佘物在碳酸氫鈉的水溶液和二氯曱烷間分配。由蒸發(fā)有機(jī)層至干燥所獲得的粗物質(zhì)可通過(guò)下述方法之一純化(a)使用醋酸乙酯或二氯甲烷/甲醇作為洗脫液的硅膠色語(yǔ)；或(b)在合適的溶劑(醋酸乙酯、乙醇、甲醇等)中結(jié)晶。當(dāng)Q是二甲氨基[中間體(VI)]時(shí)，式(II)的中間體可按照如在方案2中所顯示的反應(yīng)順序獲得。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>(v')方案2，其中R、R,、R3、L和Y如上所述。當(dāng)Y是磺?；鶗r(shí)，式(IV)的中間體根據(jù)R.H.Uloth等(J.Med.Chem.9，88-96，1966)所描述的方法制備。根據(jù)有機(jī)化學(xué)中技術(shù)人員所公知的方法，經(jīng)過(guò)陰離子形成和隨后與卣代烷反應(yīng)進(jìn)行中間體(IV)的烷基化產(chǎn)生式(V)的中間體。式(V，)和(VI)的烯胺酮根據(jù)J.M.Domagala等(J.HeterocyclicChem.,26(4),1147-58，1989);和K.Sawada等(Chem.Pharm.Bull.，49(7)，799-813，2001)所描述的烯胺的一般合成操作通過(guò)使乙酰苯與N，N-二曱基曱酰胺二曱基乙縮醛(DMFDMA)或Bredereck試劑(炎-丁氧雙(二甲氨基)甲烷)反應(yīng)制備。當(dāng)Q是二甲氨基，Y是磺?；⑶襌i是曱基(VII)時(shí)，式(II)的中間體可根據(jù)方案3替代制備，CISO。R(IV)(VII)方案3其中R、R3和L如上所定義。(IV)轉(zhuǎn)化為(VII)導(dǎo)致烯胺酮形成，并且同時(shí)由于應(yīng)用作為甲基化試劑的N，N-二曱基甲酰胺二甲基乙縮醛的性質(zhì)，形成N-甲基-磺酰胺。當(dāng)Q是二甲氨基，并且R!是甲基(X)時(shí)，式(n)的中間體還可根據(jù)方案4制備，Ooo-CF3-CF3DMFDMA(VIII)—-CRRiiNHHCIcHH7C12<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>方案4其中R、R3、l和Y如上所定義。所述方法的優(yōu)點(diǎn)是基于下述事實(shí)，即磺酰胺或羧酰胺的形成發(fā)生在該方法的最后階段。因此，反應(yīng)步驟的總數(shù)目在制備大批量產(chǎn)物中減少。此外，如在方案中所顯示地，(VIII)轉(zhuǎn)化為(IX)導(dǎo)致在一鍋法(one—potprocess)中存在下述三個(gè)反應(yīng)(a)烯胺酮的形成；(b)三氟乙酰胺的曱基化；和(c)脫酰基產(chǎn)生N-甲基化胺。(IX)與相應(yīng)的磺酰氯或羧酰氯的隨后反應(yīng)導(dǎo)致獲得中間體(X)。本發(fā)明的化合物或它們藥學(xué)上可接受的鹽或水合物可用于制備用于在人類(lèi)或非人哺乳動(dòng)物中治療或預(yù)防與GABAA受體調(diào)節(jié)有關(guān)的疾病的藥物。更具體地，與GABAA受體調(diào)節(jié)有關(guān)的疾病包括疾病與od-GABAA受體調(diào)節(jié)和/或a廣GABA,受體調(diào)節(jié)有關(guān)的疾病。這種疾病的非限制性目錄包括焦慮癥、癲癇癥、包括失眠癥的睡眠障礙等。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是提供本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物用于制備用于在人類(lèi)或非人哺乳動(dòng)物中治療或預(yù)防焦慮癥的藥物的用途。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是提供本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物用于制備用于在有此需要的人類(lèi)或非人哺乳動(dòng)物中治療或預(yù)防癲癇癥的藥物的用途。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是提供本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物用于制備用于在有此需要的人類(lèi)或非人哺乳動(dòng)物中治療或預(yù)防睡眠障礙的藥物的用途。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是提供本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接療或預(yù)防失眠癥的藥物的用途。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是提供本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物用于制備用于在有此需要的人類(lèi)或非人哺乳動(dòng)物中誘導(dǎo)鎮(zhèn)靜-催眠的藥物的用途。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是提供本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物用于制備用于在有此需要的人類(lèi)或非人哺乳動(dòng)物中誘導(dǎo)麻醉的藥物的用途。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是提供本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物用于制備用于在有此需要的人類(lèi)或非人哺乳動(dòng)物中調(diào)節(jié)誘導(dǎo)睡眠的必要時(shí)間和它的持續(xù)時(shí)間的藥物的用途。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是提供本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物用于制備用于在有此需要的人類(lèi)或非人哺乳動(dòng)物中誘導(dǎo)肌肉松弛的藥物的用途。本發(fā)明還涉及治療或預(yù)防急有與在人類(lèi)或非人哺乳動(dòng)物中GABAA受體調(diào)節(jié)有關(guān)的疾病的人類(lèi)或非人哺乳動(dòng)物的方法，該方法包括給予有此需要的所述人類(lèi)或非人哺乳動(dòng)物治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物以及藥學(xué)上可接受的稀釋劑或載體。更具體地，與GABAA受體調(diào)節(jié)有關(guān)的疾病包括與a廣GABAA受體調(diào)節(jié)和/或oc2-GABAA受體調(diào)節(jié)有關(guān)的疾病。這種疾病的非限制性目錄包括包括焦慮癥、癲癇癥、包括失眠癥的睡眠障礙等。如本文所用的，術(shù)語(yǔ)"哺乳動(dòng)物"指高級(jí)脊推動(dòng)物的哺乳動(dòng)物類(lèi)。該術(shù)語(yǔ)"哺乳動(dòng)物"包括但不限于人類(lèi)。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是提供藥物組合物，該藥物組合物含有本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和水合物以及治療上惰性的載體。所述組合物包括適合于口服給藥、直腸給藥和非腸道給藥(包括皮下給藥、肌肉內(nèi)給藥和靜脈內(nèi)給藥)的那些，盡管最適合的途徑將取決14于待治療病癥的性質(zhì)和嚴(yán)重性。本發(fā)明最優(yōu)選的途徑是經(jīng)口進(jìn)入。所述組合物通?？梢詥挝粍┬统尸F(xiàn)，并且可通過(guò)藥學(xué)領(lǐng)域中任何公知的方法制備。根據(jù)常規(guī)藥物配料技術(shù)，可將活性化合物與藥物栽體組合。所述載體可以釆取多種多樣的形式，這取決于所需給藥的制劑形式，例如口服或非腸道給藥(包括靜脈內(nèi)注射或輸注)?？墒褂萌魏纬Ｓ盟幬锝橘|(zhì)用于制備口服劑型組合物。常用藥物介質(zhì)包括，在口服液體制劑的情況下(例如，懸浮液、溶液、乳液和酏劑)，例如水、二醇類(lèi)、油類(lèi)、醇類(lèi)、調(diào)味劑、防腐劑、著色劑等；氣霧劑；或在口服固體制劑的情況下(例如粉末、膠囊和片劑)載體，例如淀粉、糖、微晶纖維素、稀釋劑、?；瘎?、潤(rùn)滑劑、粘合劑、崩解劑等，相對(duì)于口服液體制劑更優(yōu)選口服固體制劑。由于它們給藥的容易性，片劑和膠囊代表了最有利的口服劑量單位形式，在這種情況下，使用固體藥物載體。如果需要，片劑可通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)的含水或不含水技術(shù)包衣。、~~^:每日給藥一次，或者如果需要以分開(kāi)的劑量，適合使用的劑量范圍是每日總劑量從約0.Qlmg-約100.Q0mg。本發(fā)明的化合物對(duì)oc廣和afGABAA受體具有高親和力。這些體外結(jié)果與那些在鎮(zhèn)靜-催眠試驗(yàn)所獲得的體內(nèi)結(jié)果一致。本發(fā)明的化合物的藥理學(xué)活性如下述所顯示地進(jìn)行測(cè)定。a)配體-結(jié)合測(cè)定。受試化合物對(duì)a廣和a廣GABAA受體的親和力的測(cè)定在實(shí)驗(yàn)期間使用雄性Sprague-Dawley大鼠(體重200-25(^)。動(dòng)物斷頭處死后，取走小腦(含od-GABAA受體最多的組織)和脊髓(含cx廣GABAa受體最多的組織)。根據(jù)J.Lameh等(Prog.Neuro-Psychopha纖col.Biol.Psychiatry,24，979-991，2000)和H.Noguchi等(Eur.J.Pharm.，434，21-28，2002)的方法稍作改動(dòng)制備膜。組織一旦稱(chēng)重后，就將它們懸浮在50mMTrisHC1(pH7.4)，1:40(v/v)中，或就脊髓而言將其懸浮在0.32M蔗糖中，勻漿，15然后在7'C以20000g離心10min。所得的沉淀在相同的條件下重懸并再次離心。最后沉淀以最小體積重懸并保存在-8(TC過(guò)夜。在第二天，重復(fù)上述過(guò)程直至終沉淀就小腦而言以1:10(v/v)的比例重懸，并且就脊髓而言以1:5(v/v)的比例重懸。通過(guò)竟?fàn)幵囼?yàn)使用放射性標(biāo)記的氟馬西尼作為配體測(cè)定親和力。所述試驗(yàn)根據(jù)S.Arbilla等(Eur.J.Pharmacol.,130，257-263，1986);和Y.Wu等(Eur.J.Pharmacol.,278，125-132，1995)的方法使用96-孔微量滴定板進(jìn)行。將含有實(shí)驗(yàn)受體的膜、氟馬西尼(以lnM終濃度放射性標(biāo)記)和升高濃度的受試化合物(以230laL的總體積存在于50mM[ph7.4]Tris.HC1緩沖液中)溫孵。同時(shí)，在存在未標(biāo)記的氟馬西尼的增高濃度(非特異性結(jié)合，放射性標(biāo)記的配體的評(píng)價(jià)％)下，所述膜僅僅與放射性標(biāo)記的氟馬西尼(總結(jié)合，ioow溫孵。所述反應(yīng)在加入放射性配體后開(kāi)始，隨后在4。C溫孵60分鐘。在溫孵時(shí)間段結(jié)束時(shí)，將200jiL反應(yīng)液轉(zhuǎn)移到細(xì)篩過(guò)濾板(multiscreenplate)(Millipore)并且使用真空歧管(vacuummanifold)過(guò)濾，然后用冷的試驗(yàn)緩沖液洗滌三次。所述細(xì)篩過(guò)濾板配備有GF/B過(guò)濾器，該過(guò)濾器保留含有受體和已經(jīng)結(jié)合到該受體的放射性標(biāo)記的配體的膜。洗滌之后，所述板放置干燥。一旦干燥后，就加入閃爍液并放置攪拌過(guò)夜。第二天，使用Perkin-ElmerMicrobeta閃爍計(jì)數(shù)器對(duì)所述板計(jì)數(shù)。為了對(duì)受試化合物每一個(gè)濃度的特異性結(jié)合的百分比的結(jié)果分析，如下進(jìn)行計(jì)算%特異性結(jié)合=(X-N/T-N)x100其中，X:化合物每一個(gè)濃度的結(jié)合配體的量。T:總結(jié)合，結(jié)合到放射性標(biāo)記的配體的最大量。N:非特異性結(jié)合，放射性標(biāo)記的配體與所使用的受體無(wú)關(guān)以非特異方式結(jié)合的量?；衔锏拿恳粋€(gè)濃度測(cè)定三次，并且它們的平均值用于測(cè)定相對(duì)于化合物的濃度特異性結(jié)合(％)的實(shí)驗(yàn)值。親和力數(shù)據(jù)對(duì)于Od亞單位而言以在10,和10,濃度的抑制％表示，并且對(duì)于a2亞單位而言以在10—"濃度的％抑制表示。這些試驗(yàn)的結(jié)果分別在表i和2中給出。表l.對(duì)GABAA受體的od亞單位的親和力<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>b)體內(nèi)預(yù)言性的鎮(zhèn)靜-催眠作用的測(cè)定通過(guò)在小鼠中的預(yù)言性鎮(zhèn)靜-催眠試驗(yàn)評(píng)價(jià)這些化合物的體內(nèi)作用(D.J.Sanger等，Eur.J.Pharmacol.,313，35-42，1996;和G.Griebel等，Psychopha函cology，146，205-213，1999)。在試驗(yàn)期間使用5-8只雄性CDl小鼠的組(體重22-26g)。受試化合物以單一等摩爾的腹腔內(nèi)劑量給藥，該受試化合物懸浮在含有一滴吐溫80的0.25%瓊脂中以10mL/kg體積給藥。在每個(gè)途徑中測(cè)定兩種劑量。對(duì)照動(dòng)物單獨(dú)接受媒介物。使用SmartSystem(Panlab，S.L.,Spain)按cm記錄在腹腔內(nèi)(ip)給藥后的30分鐘時(shí)間段內(nèi)每5-min間隔小鼠的移動(dòng)距離。計(jì)算處理組動(dòng)物相對(duì)于對(duì)照組動(dòng)物的移動(dòng)距離的抑制百分比(排除最初5min)和ED;。值。該試驗(yàn)的結(jié)果在表3和4中給出。17表3.測(cè)定小鼠體內(nèi)鎮(zhèn)靜-催眠活性<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>表4.測(cè)定小鼠誘導(dǎo)鎮(zhèn)靜的ED5。值<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>與現(xiàn)有技術(shù)的其它有代表性的吡唑并[1，5-a]嘧啶類(lèi)相比，本發(fā)明實(shí)施例11的化合物顯示出明顯更低的ED5。。這暗示由于所需誘導(dǎo)治療作用的劑量更低，因此實(shí)施例11的化合物在體內(nèi)具有更強(qiáng)的效力。c)體外測(cè)定在人類(lèi)肝細(xì)胞胞漿部分中的代謝穩(wěn)定性化合物溶解在二曱基亞砜中獲得10mM的初始濃度。然后，所述儲(chǔ)備溶液經(jīng)溶劑和緩沖液稀釋以獲得5^iM的最終測(cè)定濃度?；衔锱c1.0mg/mL混合的人胞漿(由Xenotechplc獲得)在37。C溫孵在5jiM的單一濃度一式兩份測(cè)定。在存在或未存在輔因子時(shí)評(píng)價(jià)代謝，并且通過(guò)LC/MS在0、60和120-分鐘時(shí)間點(diǎn)的分析檢測(cè)母體化合物的損失。然后計(jì)算殘余母體化合物的百分比。結(jié)果在表5顯示。使用普通的LC方法流動(dòng)相A-含0.1%甲酸的水B-含0.1%甲酸的乙腈HPLC柱HigginsClipiusC185jum，50x3mm流速梯度洗脫:2ml.miiT1時(shí)間%A%B0.009552.005952.505952.609553.00955表5.在人類(lèi)肝細(xì)胞胞漿部分中的代謝穩(wěn)定性<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>出人意料地，在溫孵60和120min后制備實(shí)施例6和11的化合物與扎來(lái)普隆和WO2005014596的現(xiàn)有^支術(shù)的化合物相比顯示出更高的殘余母體化合物的百分比(10-20%)。在另一方面，扎來(lái)普隆在任何時(shí)間點(diǎn)具有更低的殘余母體化合物的百分比并且從60-120分鐘具有更高的生物轉(zhuǎn)化。d)體外測(cè)定在24h時(shí)在HepG2、CHO-Kl和HeLa細(xì)胞中的細(xì)胞毒性HepG2(人類(lèi)肝癌細(xì)胞)和CHO-Kl(中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞)均由美國(guó)菌種保存中心(ATCC)獲得。HepG2在極限必需培養(yǎng)基中培養(yǎng)(MEM)，該培養(yǎng)基包含含有1.87mMGlutamax的Earl鹽溶液，并且補(bǔ)充有l(wèi)mM丙酮酸鈉、0.lmM非必需氨基酸、100000U/L青霉素、100000pig/L鏈霉素和10%胎牛血清。CHO-K1保存在HamF-12培養(yǎng)基中，該培養(yǎng)基包含lmMGlutamax并且補(bǔ)充有l(wèi)mML-谷氨酰胺、100000U/L青霉素、100000jug/L鏈霉素和10%胎牛血清。PromegaCellTiter96含水單一溶液細(xì)胞活性測(cè)定包含四唑鹽(MTS)，該鹽被在代謝活性細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的脫氫酶轉(zhuǎn)化為水溶性曱臢(formazan)產(chǎn)物。甲臜產(chǎn)物的數(shù)量與培養(yǎng)液中的活細(xì)胞數(shù)量是成比例的。化合物溶解在DMS0中以獲得lOOmM的初始濃度。從所述儲(chǔ)備溶液在DMS0中進(jìn)行連續(xù)稀釋以獲得從50-0.25mM的濃度范圍。然后，所述儲(chǔ)備溶液和連續(xù)稀釋液用各自的細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋1:100。就CH0-K1細(xì)胞而言，制備1000、500、250、100、50、25、10、5和2.5fiM的濃度以評(píng)價(jià)ic5。，而就HepG2而言，測(cè)定1000、100、10和ljiM的終濃度為了計(jì)算細(xì)胞的百分比。在所有孔中，DMSO終濃度為l%v/v。細(xì)胞系均與受試化合物溫孵24小時(shí)。在加入MTS染料并再溫孵1小時(shí)后，經(jīng)分光光度計(jì)在490nm測(cè)定相對(duì)細(xì)胞活性。他莫昔芬作為陽(yáng)性對(duì)照使用。使用相似的方案測(cè)定在24h在HeLa細(xì)胞中的細(xì)胞毒性。結(jié)果在表6中顯示。表6.在24h時(shí)在HepG2、CH0-K1和HeLa細(xì)胞中的細(xì)胞毒性化合物細(xì)胞活性的y。I"HepG2(100pM)HeLa(IOOjjM)CHO制備實(shí)施例1184.5°/。83.9%185.6iaMUS6399621的實(shí)施例1(茚地普隆)70%67.9%108.4uM這些結(jié)果顯示本發(fā)明實(shí)施例11的化合物與參考化合物茚地普隆相比毒性更低，其原因是在HepG2細(xì)胞系中實(shí)施例11的化合物的細(xì)胞存活比茚地普隆高(84.5%對(duì)70%)。這些結(jié)果還在另兩個(gè)所測(cè)定細(xì)胞系中得到證實(shí)。制備實(shí)施例1:N-(2-氟-5-[3-硝基-吡唑并[l，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-曱基-乙酰胺0.048g(0.38mmol)的4-硝基-2#-吡唑-3-基胺和0.lg(0.38mmo1)的N-[5-(3-二曱氨基-丙烯酰基)-2-氟-苯基]-N-甲基-乙酰胺在10mL冰醋酸中的混合物回流2.5小時(shí)，然后通過(guò)減壓蒸餾除去溶劑。向所得的殘余物中加入15mL二氯甲烷和10mL飽和碳酸氫鈉溶液。兩層分離，并用lOmL二氯曱烷洗滌水層。有機(jī)層經(jīng)10mL水洗滌并經(jīng)硫20酸鎂干燥。蒸干二氯曱烷層產(chǎn)生油狀物，該油狀物使用醋酸乙酯-二氯甲烷作為洗脫液進(jìn)行色譜(硅膠)，從而產(chǎn)生61mg相當(dāng)于N-{2-氟-5-[3-硝基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺的固體(產(chǎn)率為49W。'HNMR(400MHz，CDCh):51.97(3H，s)，3.29(3H，s)，7.29(1H，d，J=4.4Hz)，7.45(1H，t，J=8.4Hz)，7.89-8.02(1H，m),8.07-8.09(1H，m)，8.83(1H，s)，9.0(1H，d，J=4.4Hz)。MS(ES)/Z7々=330(MH+)HPLC=95.7%制備實(shí)施例2:N-{2-氟-5-[3-氰基-吡唑并[l，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-曱基-乙酰胺0.041g(0.38mmol)的5-氨基-1#-p比唑-4-甲腈和0.lg(0.38雖ol)的N-[5-(3-二甲氨基-丙烯?；?-2-氟-苯基]-N-曱基-乙酰胺在10mL冰醋酸中的混合物回流2.5小時(shí)，然后通過(guò)減壓蒸餾除去溶劑。向所得的殘余物中加入二氯曱烷(15mL)和飽和碳酸氫鈉溶液(10mL)。兩層分離，并且用10mL二氯曱烷洗滌水層。有機(jī)層經(jīng)10mL水洗滌并經(jīng)硫酸鎂干燥。蒸干二氯曱烷層產(chǎn)生油狀物，在醋酸乙酯的存在下，該油狀物產(chǎn)生95mgN-{2-氟-5-[3-氰基-吡唑并[l，5-a]嘧啶-7-基]-苯基)-N-曱基-乙酰胺的固體(產(chǎn)率為81%)。卞腿(400MHz，CDC1》51.96(3H，s)，3.28(3H，s)，7.18(1H，d，J=4.4Hz)，7.42(1H，t，J=8.8Hz)，7.99—8.02(1H,m)，8.09-8.12(1H，m),8.42(1H，s),8.79(1H，d，J=4.4Hz)。MS(ES)歷々=310(MH+)HPLC=97.8%制備實(shí)施例3:N-(2-氯-5-[3-硝基-吡唑并[l，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺0.054g(0.43mrao1)的4-硝基-2#-吡唑-3-基胺和0.12021g(0.43mmol)的N-[5-(3-二甲氨基-丙烯?；?-2-氯-苯基]-N-甲基-乙酰胺在IOmL水醋酸中的混合物回流2.5小時(shí)，然后通過(guò)減壓蒸餾除去溶劑。向所得的殘余物中加入二氯曱烷(15mL)和飽和碳酸氫鈉溶液(1QniL)。兩層分離，并且用lOmL二氯甲烷洗滌水層。有機(jī)層經(jīng)10mL水洗滌并經(jīng)硫酸鎂干燥。蒸干二氯甲烷層產(chǎn)生油狀物，該油狀物使用醋酸乙酯-二氯甲烷作為洗脫液進(jìn)行色譜(硅膠)，從而產(chǎn)生35mg相當(dāng)于N-{2-氯-5-[3-硝基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺的固體(產(chǎn)率為24%)。'HNMR(400MHz，CDCU:51.90(3H，s)，3.26(3H，s)，7.30(1H，d，J=4.4Hz)，7.77(1H，d，J=8Hz)，7.93(1H，dd，J=2.4和8.4Hz)，8.08(1H，d，J=2Hz)，8.83(1H，s)，9.01(1H，d，J=4.8Hz)。MS(ES)/Z7々=346(MH+)HPLC=91%制備實(shí)施例4:N-{2-氯-5-[3-氰基-吡唑并[l，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺0.046g(0.43mmol)的5-氨基-1V"^比唑一4-曱腈和0.120g(0.43mmo1)的N-[5-(3-二曱氨基-丙烯酰基)-2-氯-苯基]-N-甲基-乙酰胺在10mL冰醋酸中的混合物回流2.5小時(shí)，然后通過(guò)減壓蒸餾除去溶劑。向所得的殘余物中加入二氯曱烷(15mL)和飽和碳酸氫鈉溶液(lOmL)。兩層分離，并且用10mL二氯曱烷洗滌水層。有機(jī)層經(jīng)10mL水洗滌并經(jīng)硫酸鎂干燥。蒸干二氯曱烷層產(chǎn)生油狀物，在醋酸乙酯存在下，該油狀物產(chǎn)生108mgN-(2-氯-5-[3-氰基-吡唑并[l，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺的固體(產(chǎn)率為77%)。力腿(400MHz，CDCh):51.90(3H，s)，3.25(3H，s)，7.20(1H，d，J=4.4Hz),7.74(1H，d，J=8.8Hz)，7.94(1H，dd，J=2.4和8.4Hz),8.10(1H，d，J=2Hz),8.43(1H，s)，8.80(1H，d，J=4.8Hz)。MS(ES)邁々-326(MH+)HPLC=97.7%制備實(shí)施例5:N-{2-氟-5-[3-硝基-吡唑并[l，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-曱基磺酰胺0.043g(0.33imnol)的4-硝基-2^4比峻-3-基胺和0.lg(0.33mmol)的N-[5-(3-二甲氨基-丙烯?；?-2-氟-苯基]-N-甲基-甲基磺酰胺在10mL冰醋酸中的混合物回流2.5小時(shí)，然后通過(guò)減壓蒸餾除去溶劑。向所得的殘余物中加入二氯甲烷(15mL)和飽和碳酸氫鈉溶液(10mL)。兩層分離，并且用10mL二氯甲烷洗滌水層。有機(jī)層經(jīng)10mL水洗滌并經(jīng)硫酸鎂干燥。蒸干二氯曱烷層產(chǎn)生油狀物，該油狀物使用醋酸乙酯-二氯曱烷作為洗脫液進(jìn)行色譜(硅膠)，從而產(chǎn)生58mg相當(dāng)于N-(2-氟-5-[3-硝基-吡唑并[l，5-a]嗜啶-7-基]-苯基)-N-甲基-甲基磺酰胺的固體(產(chǎn)率為48%)。力NMR(楊MHz，CDCU:53.02(3H，s)，3.39(3H，s),7.29(1H，d，J=4.4Hz)，7.38—7.42(1H，m)，8.05-8.13(2H，m)，8.83(1H，s)，8.98(1H，d,J=4.4Hz)。MS(ES)/々=366(MH+)HPLC=97.6%制備實(shí)施例6:N-{2-氟-5-[3-氰基-吡唑并[l，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-曱基磺酰胺0.036g(0.33mmol)的5-氨基-1〃—比唑-4-曱腈和0.lg(0.33mmol)的N-[5-(3-二曱氨基-丙烯?；?-2-氟-苯基]-N-曱基-曱基磺酰胺在10mL水醋酸中的混合物回流2.5小時(shí)，然后通過(guò)減壓蒸餾除去溶劑。向所得的殘余物中加入二氯曱烷(15fflL)和飽和碳酸氫鈉溶液(10raL)。兩層分離，并且用10邁L二氯甲烷洗滌水層。有機(jī)層經(jīng)10mL水洗滌并經(jīng)硫酸鎂干燥。蒸干二氯甲烷層產(chǎn)生油狀物，在醋酸乙酯的存在下，該油狀物產(chǎn)生81mgN-{2-氟-5-[3-氰基-吡唑并[l，5-a]嘧啶-7-基]-苯基)-N-曱基-甲基磺酰胺的固體(產(chǎn)率為70%)。^NMR(400MHz，CDC1》53.01(3H，s),3.38(3H，s)，7.29(1H，d，J=4.4Hz)，7.36-7.41(1H，m)，8.08-8.15(2H，m)，8.42(1H，s)，8.77(1H，d，J=4.4Hz)。MS(ES)邁/z=346細(xì)+)HPLC=99.1%制備實(shí)施例7:N-(2-氯-5-[3-硝基-吡唑并[l，5-(2]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-甲基磺酰胺0.050g(0.39mmo1)的4-硝基-2^-吡唑-3-基胺和0.124g(0.39ramo1)的N-[5-(3-二曱氨基-丙烯?；?-2-氯-苯基]-N-曱基-曱基磺酰胺在12mL冰醋酸中的混合物回流1.5小時(shí)，然后通過(guò)減壓蒸餾除去溶劑。向所得的殘余物中加入二氯甲烷(15mL)和飽和碳酸氫鈉溶液(IOmL)。兩層分離，并且用10mL二氯曱烷洗滌水層。有機(jī)層經(jīng)lOmL水洗滌并經(jīng)硫酸鎂干燥。蒸干二氯曱烷層產(chǎn)生油狀物，在醋酸乙酯的存在下，該油狀物產(chǎn)生56mgN-U-氯-5-[3-硝基-吡唑并[l，5-a]嘧啶-7-基]-苯基)-N-曱基-甲基磺酰胺的固體(產(chǎn)率為77%)。力靈(400MHz，CDCU:53.08(3H，s)，3.38(3H，s)，7.30(1H，d，J-4.4Hz)，7.71(1H，d，J=8.4Hz)，8.04(1H，dd，J=2和8.4Hz)，8.14(1H，d，J=2.4Hz)，8.83(1H，s)，8.99(1H，d，J=4.4Hz)。MS(ES)邁々=382(MH+)HPLC=98.5%制備實(shí)施例8:N-(2-氯-5-[3-氰基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-曱基磺酰胺0.042g(0.39mmol)的5-氨基-l"-吡唑-4-甲腈和0.124g(0.39mmol)的N-[5-(3-二甲氨基-丙烯?；?-2-氯-苯基]-N-甲基-甲基磺酰胺在12mL冰醋酸中的混合物回流1.5小時(shí)，然后通過(guò)減壓蒸餾24除去溶劑。向所得的殘余物中加入二氯曱烷(15mL)和飽和碳酸氫鈉溶液(IOmL)。兩層分離，并且用10mL二氯曱烷洗滌水層。有機(jī)層經(jīng)10mL水洗滌并經(jīng)硫酸鎂千燥。蒸干二氯曱烷層產(chǎn)生油狀物，在醋酸乙酯的存在下，該油狀物產(chǎn)生99mgN-(2-氯-5-[3-氰基-吡唑并[l，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-甲基磺酰胺的固體(產(chǎn)率為70%)。'H腿(400MHz，CDCU:53.08(3H，s)，3.37(3H，s)，7.20(1H，d，J-4'4Hz)，7.69(1H，d，J-8.8Hz)，8.05(1H，dd，J-2.4和8.8Hz)，8.16(1H，d，J=1.6Hz)，8.42(1H，s)，8.78(1H，d，J=4.4Hz)。MS(ES)邁々=362(MH+)HPLC=93.7%制備實(shí)施例9:N-{2-氟-5-[3-氰基-2-甲基-吡唑并[l，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺0.046g(0.38mmol)的5-氨基-3-甲基-1#-吡唑-4-甲腈和0.lg(O.38mmol)的N-[5-(3-二甲氨基-丙烯?；?-2-氟-苯基]-N-曱基-乙酰胺在10mL冰醋酸中的混合物回流2.5小時(shí)，然后通過(guò)減壓蒸餾除去溶劑。向所得的殘佘物中加入二氯甲烷(15mL)和飽和碳酸氫鈉溶液(IOmL)。兩層分離，并且用10mL二氯曱烷洗滌水層。有機(jī)層經(jīng)lOmL水洗滌并經(jīng)硫酸鎂干燥。蒸干二氯甲烷層產(chǎn)生油狀物，在醋酸乙酯的存在下，該油狀物產(chǎn)生92mgN-(2-氟-5-[3-氰基-2-甲基-吡唑并[1，5-<s]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺的固體(產(chǎn)率為75%)。;HNMR(400MHz，CDCU:51.98(3H，s)，2.61(3H，s)，3.3(3H，s)，7.09(1H，d，J=4Hz)，7.39-7.44(1H，m)，7.89-8.02(1H，in)，8.08-8.11(1H，m),8.70(1H，d，J-4.4Hz)。MS(ES)邊々=324(MH+)HPLC-98.4%制備實(shí)施例10:N-{2-氯-5-[3-氰基-2-甲基-吡唑并[l，5i]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺0.055g(0.43mmol)的5-氨基-3-甲基-1^-吡唑-4-曱腈和0.120g(0.43mmol)的N-[5-(3-二甲氨基-丙烯?；?-2-氯-苯基]-N-甲基-乙酰胺在12mL水醋酸中的混合物回流1.5小時(shí)，然后通過(guò)減壓蒸餾除去溶劑。向所得的殘余物中加入二氯甲烷(15mL)和飽和碳酸氫鈉溶液(IOmL)。兩層分離，并且用10mL二氯曱烷洗滌水層。有機(jī)層經(jīng)lOmL水洗滌并經(jīng)硫酸鎂干燥。蒸干二氯甲烷層產(chǎn)生油狀物，在醋酸乙酯的存在下，該油狀物產(chǎn)生106mgN-{2-氯-5-[3-氰基-2-甲基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺的固體(產(chǎn)率為73%)。力靈(400MHz，CDCU:51.91(3H，s)，2.61(1H，s)，3.25(3H，s),7.10(1H，d,J-4.8Hz)，7.73(1H，d，J=8.4Hz)，7.97(1H，dd，J=2和J-8Hz),8.08(1H，d，J=2.4Hz)，8.71(1H，d，J-4.4Hz)。MS(ES)頂々=340(MH+)HPLC=99.6%制備實(shí)施例11:N-{2-氟-5-[3-氰基-2-曱基-吡唑并[l，5-a]嘧咬-7-基]-苯基}-N-曱基-甲基磺酰胺0.041g(0.33mniol)的5-氨基-3-甲基-1#-吡唑-4-曱腈和0.lg(0.33畫(huà)1)的N-[5-(3-二甲氨基-丙烯?；?-2-氟-苯基]-N-甲基-甲基磺酰胺在10mL冰醋酸中的混合物回流2.5小時(shí)，然后通過(guò)減壓蒸餾除去溶劑。向所得的殘余物中加入二氯甲烷U5mL)和飽和碳酸氫鈉溶液(IOraL)。兩層分離，并且用lOmL二氯甲烷洗滌水層。有機(jī)層經(jīng)10mL水洗滌并經(jīng)硫酸鎂千燥。蒸干二氯甲烷層產(chǎn)生油狀物，在醋酸乙酯的存在下，該油狀物產(chǎn)生66ragN-{2-氟-5-[3-氰基-2-甲基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-甲基磺酰胺的固體(產(chǎn)率為55%)。HNMR(400MHz，CDC1》52,78(3H，s)，3.17(3H，s)，3.54(3H，s)，7.24(1H，d，J=4.4Hz)，7.51—7.56(1H，m)，8.25—268.31(2H，m),8.84(1H，d，J-4.4Hz)。MS(ES)/々=360(MH+)HPLC=98.9%制備實(shí)施例12:N-(2-氯-5-[3-氰基-2-甲基-吡唑并[l，5i]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-甲基磺酰胺0.048g(0.39mmol)的5-氨基-3-甲基-1#-吡哇-4-甲腈和0.124g(0.39mmol)的N-[5-(3-二甲氨基-丙烯?；?-2-氯-苯基]-N-曱基-甲基磺酰胺在12mL冰醋酸中的混合物回流1.5小時(shí)，然后通過(guò)減壓蒸餾除去溶劑。向所得的殘余物中加入二氯甲烷(15mL)和飽和碳酸氫鈉溶液(IOmL)。兩層分離，并且用lOmL二氯甲烷洗滌水層。有機(jī)層經(jīng)lOmL水洗涂并經(jīng)硫酸鎂干燥。蒸干二氯甲烷層產(chǎn)生油狀物，在醋酸乙酯的存在下，該油狀物產(chǎn)生89mgN-{2-氯-5-[3-氰基-2-曱基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-甲基磺酰胺的固體(產(chǎn)率為60.5%)。!HNMR(400MHz，CDCU:52.61(3H，s)，3.08(1H，s)，3.66(3H，s)，7.10(1H，d，J-4.8Hz),7.68(1H，d，J=8.8Hz)，8.04(1H，dd，J=2.4和J=8.8Hz),8.15(1H，d，J=2.4Hz)，8.70(1H，d，J=4.4Hz)。MS(ES)邁々=376(MH+)HPLC=98.1%制備實(shí)施例13:N-(2-曱基-5-[3-(噻吩-2-羰基)-吡唑并[l，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺0.074g(0.38mraol)的(5-氨基-1#—比唑-4-基)-噻吩-2-基-甲酉同和0.lg(O.38mmol)的N-[5-(3-二甲氨基-丙烯?；?_2-甲基-苯基]-N-甲基-乙酰胺在10mL水醋酸中的混合物回流2.5小時(shí)，然后通過(guò)減壓蒸餾除去溶劑。向所得的殘余物中加入二氯甲烷(15raL)和飽和碳酸氫鈉溶液(IOmL)。兩層分離，并且用lOmL二氯曱烷洗滌水層。有機(jī)層經(jīng)10mL水洗滌并經(jīng)硫酸鎂干燥。蒸干二氯曱烷層產(chǎn)生油狀物，在醋酸乙酯的存在下，該油狀物產(chǎn)生132mg的N-(2-曱基-5-[3-(噻吩-2-羰基)-吡唑并[1，5-s]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺的固體(產(chǎn)率為88%)。卞NMR(400MHz，CDC1》51.87(3H，s)，2.37(3H,s)，3.25(3H，s)，7.13(1H，d，J=4Hz)，7.18-7.20(1H，m)，7.54(1H，D，J=7.6Hz)，7.70(1H，d，J=5.2Hz)，7.94-7.98(2H，m)，8.08(1H，d，J=2.8Hz)，8.71(1H，s)，8.81(1H，d,J=4Hz)。MS(ES)范/z=391(MH+)HPLC=98.3%制備實(shí)施例14:N-(2-甲氧基-5-[3-(噻吩-2-羰基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺0.070g(0.36mmol)的(5-氨基-1#-處唑-4-基)-噻吩-2-基-甲酮和0.lg(O.38mmol)的N-[5-(3-二甲氨基-丙烯酰基)-2-曱氧基-苯基]-N-甲基-乙酰胺在10mL水醋酸中的混合物回流2.5小時(shí)，然后通過(guò)減壓蒸餾除去溶劑。向所得的殘余物中加入二氯甲烷U5mL)和飽和碳酸氫鈉溶液(IOmL)。兩層分離，并且用lOmL二氯曱烷洗滌水層。有機(jī)層經(jīng)10mL水洗滌并經(jīng)硫酸鎂干燥。蒸干二氯甲烷層產(chǎn)生油狀物，在醋酸乙酯的存在下，該油狀物產(chǎn)生135mgN-(2-曱氧基-5-[3-(噻吩-2-羰基)-吡唑并[1，5-s]嘧啶-7-基]-苯基}-N-曱基-乙酰胺的固體(產(chǎn)率為92%)。力腿(400MHz，CDC1》51.90(3H，s)，3.23(3H，s)，3.97(3H，s)，7.12(1H，d，J=4.8Hz)，7.17-7.21(2H，m)，7.70(1H，d，J-4.4Hz)，8.02(1H，S)，8.09(1H，d，J=4Hz)，8.15(1H，d，J=8.8Hz)，8.71(1H，s)，8.79(1H，d，J=4.4Hz)。MS(ES)邁々=407(MH+)HPLC=100%制備實(shí)施例15:N-{2，4-二氟-5-[3-(噻吩-2-羰基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-曱基-乙酰胺0.217g(1.12mmol)的(5-氨基-l^—比唑-4-基)-噻吩-2-基-甲酮和0.3g(1.12醒ol)的N-[5-(3-二曱氨基-丙烯?；?-2，4-二氟-苯基]-N-甲基-乙酰胺在10mL水醋酸中的混合物回流2.5小時(shí)，然后通過(guò)減壓蒸餾除去溶劑。向所得的殘余物中加入二氯甲烷U5mL)和飽和碳酸氫鈉溶液(IOmL)。兩層分離，并且用10raL二氯甲烷洗滌水層。有機(jī)層經(jīng)10mL水洗滌并經(jīng)硫酸鎂干燥。蒸干二氯甲烷層產(chǎn)生油狀物，在醋酸乙酯的存在下，該油狀物產(chǎn)生320mgN-(2，4-二氟-5-[3-(噻吩-2-羰基)-吡唑并[1，5-3]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺的固體(產(chǎn)率為69%)。!HNMR(250MHz，CDCU:51.82(3H，s)，3.11(3H，s)，6，96-7，06(3H，m)，7，55(1H，d，J=4，9Hz)，7.76(1H，t，J-8，2Hz),7.91(1H，dd，J-1和3.6Hz),8，52(1H，s)，8.68(1H，d,J=4.1Hz)。MS(ES)邁々=413(M『)HPLC=99.0%制備實(shí)施例16:N-{5-氟-2-甲氧基-3-[3-(噻吩-2-羰基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺0.180g(0.93mmol)的(5-氨基-1^-他唑-4-基)-噻吩-2-基-曱酮和0.275g(0.93mmol)的N-[3-(3-二甲氨基-丙烯?；?-5-氟-2-甲氧基-苯基]-N-甲基-乙酰胺在10mL冰醋酸中的混合物回流2.5小時(shí)，然后通過(guò)減壓蒸餾除去溶劑。向所得的殘余物中加入二氯甲烷(15niL)和飽和碳酸氫鈉溶液(IOmL)。兩層分離，并且用lOraL二氯甲烷洗滌水層。有機(jī)層經(jīng)10mL水洗滌并經(jīng)硫酸鎂干燥。蒸干二氯甲烷層產(chǎn)生油狀物，在醋酸乙酯的存在下，該油狀物產(chǎn)生160mgN-(5-氟-2_甲氧基-3-[3-(噻吩-2-羰基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]_苯基}-N-曱基-乙29<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>組合物實(shí)施例3:經(jīng)口滴劑_活性成分丙二醇甘油糖精鈉聚山梨酯80檸檬調(diào)味劑乙醇純凈水適量至0.5g10.0g5.0g0.1g1.0g0.2g25.0100.0mL組合物實(shí)施例4:2.5mg片劑活性成分2.5mg膠體二氧化硅0.6mg交聯(lián)羧甲纖維素鈉12.0mg滑石4.0mg硬脂酸鎂1.5mg聚山梨酯801.0mg乳糖75.0mg羥丙基甲基纖維素3.0mg聚乙二醇40000.5mg二氧化鈦E1711.5mg微晶纖維素適量至125.0mg31組合物實(shí)施例5:5mg膠囊活性成分5.0mg膠體二氧化硅0.6mg交聚維酮12.0mg滑石4.0mg硬脂酸鎂1.5mg十二烷基硫酸鈉1.5mg乳糖77.0rag明膠28.5mg二氧化鈦E1711.5mg靛藍(lán)E1320.02mg微晶適量至155.0mg組合物實(shí)施例6:經(jīng)口滴劑活性成分0.25g丙二醇10.0g甘油5.0g糖精鈉0.1g聚山梨酯801.0g檸檬調(diào)味劑0.2g乙醇25.0純凈適量至100.0權(quán)利要求1.化合物，其選自a)N-{2-氟-5-[3-硝基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺；b)N-{2-氟-5-[3-氰基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺；c)N-{2-氯-5-[3-硝基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺；d)N-{2-氯-5-[3-氰基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺；e)N-{2-氟-5-[3-硝基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-甲基磺酰胺；f)N-{2-氟-5-[3-氰基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-甲基磺酰胺；g)N-{2-氯-5-[3-硝基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-甲基磺酰胺；h)N-{2-氯-5-[3-氰基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-甲基磺酰胺；i)N-{2-氟-5-[3-氰基-2-甲基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺；j)N-{2-氯-5-[3-氰基-2-甲基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺；k)N-{2-氟-5-[3-氰基-2-甲基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-甲基磺酰胺；l)N-{2-氯-5-[3-氰基-2-甲基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-甲基磺酰胺；m)N-{2-甲基-5-[3-(噻吩-2-羰基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺；n)N-{2-甲氧基-5-[3-(噻吩-2-羰基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺；o)N-{2，4-二氟-5-[3-(噻吩-2-羰基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺；和p)N-{5-氟-2-甲氧基-3-[3-(噻吩-2-羰基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-苯基}-N-甲基-乙酰胺；以及其藥學(xué)上可接受的鹽和水合物。2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物在制備藥物中的用途，該所述藥物用于在有此需要的人類(lèi)或非人哺乳動(dòng)物中治療或預(yù)防與GABAA受體調(diào)節(jié)有關(guān)疾病。3.權(quán)利要求2的用途，其中所述GABAa受體是oc廣GABAa受體。4.權(quán)利要求2的用途，其中所述GABAa受體是oc廣GABAa受體。5.權(quán)利要求1的化合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于在有此需要的人類(lèi)或非人哺乳動(dòng)物中治療或預(yù)防焦慮癥。6.權(quán)利要求1的化合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于在有此需要的人類(lèi)或非人哺乳動(dòng)物中治療或預(yù)防癲癇癥。7.權(quán)利要求1的化合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于在有此需要的人類(lèi)或非人哺乳動(dòng)物中治療或預(yù)防睡眠障礙。8.權(quán)利要求1的化合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于在有此需要的人類(lèi)或非人哺乳動(dòng)物中治療或預(yù)防失眠癥。9.權(quán)利要求1的化合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于在有此需要的人類(lèi)或非人哺乳動(dòng)物中誘導(dǎo)鎮(zhèn)靜-催眠。10.權(quán)利要求1的化合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于在有此需要的人類(lèi)或非人哺乳動(dòng)物中誘導(dǎo)麻醉。11.權(quán)利要求1的化合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于在有此需要的人類(lèi)或非人哺乳動(dòng)物中調(diào)節(jié)誘導(dǎo)睡眠的必要時(shí)間和它的持續(xù)時(shí)間。12.權(quán)利要求1的化合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于在有此需要的人類(lèi)或非人哺乳動(dòng)物中誘導(dǎo)肌肉松弛。13.藥物組合物，其包含治療有效量的如在權(quán)利要求1中所定義的化合物，以及適合量的藥物賦形劑或載體。全文摘要本發(fā)明提供新的吡唑并[1，5-a]嘧啶類(lèi)，其可用于治療或預(yù)防焦慮癥、癲癇癥和包括失眠癥的睡眠障礙，以及用于誘導(dǎo)鎮(zhèn)靜-催眠、麻醉、睡眠和肌肉松弛。文檔編號(hào)C07D487/04GK101641359SQ200780037178公開(kāi)日2010年2月3日申請(qǐng)日期2007年8月2日優(yōu)先權(quán)日2006年8月4日發(fā)明者A·古格里塔,A·帕羅米爾,L·安格拉達(dá)申請(qǐng)人:菲爾若國(guó)際公司