專利名稱：用作激酶抑制劑和hsp90抑制劑的大環(huán)化合物的制作方法
相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用
本申請(qǐng)要求2006年8月11日提交的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)60/837,154和2006年11月13日提交的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)60/858,731的優(yōu)先權(quán)。
發(fā)明領(lǐng)域 本發(fā)明涉及天然產(chǎn)物根赤殼菌素和pochonin的新的衍生物、類似物和中間體以及它們的合成。本發(fā)明進(jìn)一步涉及這些化合物作為激酶抑制劑和被稱為熱休克蛋白90(HSP90)的酶家族的抑制劑的用途。

背景技術(shù)：
在20世紀(jì)50年代中期，已發(fā)現(xiàn)磷酸化通過催化磷酸化的蛋白激酶或通過涉及脫磷酸化步驟的蛋白磷酸酯酶可以可逆地改變酶的功能。這些反應(yīng)在調(diào)節(jié)許多細(xì)胞過程(特別是信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑)中起重要作用。在20世紀(jì)70年代后期，發(fā)現(xiàn)勞氏肉瘤病毒(v-Src)轉(zhuǎn)化因子是蛋白激酶，而且也發(fā)現(xiàn)腫瘤促進(jìn)佛波醇酯是蛋白激酶C的有效激活劑，這揭示了首次了解的疾病和異常蛋白質(zhì)磷酸化之間的聯(lián)系。從那以后，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)理的缺陷引起許多致癌過程并且在糖尿病、炎性病癥和心血管疾病中起作用(T.Hunter，Cell，100113-127(2000)；P.Cohen，Nat.Rev.Drug Discov.，1309(2002))。因此，選擇性的激酶和磷酸酶抑制劑已呈現(xiàn)為重要的藥物靶，并且抑制激酶磷酸化活性是化學(xué)治療的最有希望的策略之一。已經(jīng)批準(zhǔn)三種激酶抑制劑藥物格列衛(wèi)(Gleevec，其抑制Ab1)以及易瑞沙(Iressa)和特羅凱(Tarceva)(后兩者均抑制EGFR)。

格列衛(wèi)(伊馬替尼)-STI 571特羅凱(埃羅替尼)-OSI774 埃布爾森激酶抑制劑；R1＝CCH；R2＝H；R3＝R4＝CH2OCH3 批準(zhǔn)用于慢性髓細(xì)胞性白血病 易瑞沙(吉非替尼)-ZD1839R1＝Cl；R2＝F；R3＝H；
表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)的抑制劑；批 準(zhǔn)用于肺癌 通過絲氨酸、蘇氨酸或酪氨酸殘基的激酶介導(dǎo)的磷酸化或磷酸酶介導(dǎo)的去磷酸化來調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)活性是大多數(shù)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)理的核心。(T.Hunter，Cell，100113(2000))。小分子抑制劑(例如6-二甲基氨基嘌呤和星形孢菌素)有助于闡述這樣的磷酸化機(jī)理的重要性，并且闡明了激酶的生物功能。激酶以0.1-10μM的Km結(jié)合于ATP，并將γ-磷酸酯基團(tuán)選擇性地轉(zhuǎn)移至給定蛋白質(zhì)的特定殘基。激酶的核心結(jié)構(gòu)域由所述ATP結(jié)合位點(diǎn)和涉及磷酸轉(zhuǎn)移反應(yīng)的殘基組成，在整個(gè)激酶組中高度保守。(G.Manning等人，Science，2981912(2002))。這導(dǎo)致了以下推測(cè)靶向該高度保守的ATP結(jié)合袋的抑制劑不僅必須與以高濃度(mM)存在的ATP競(jìng)爭(zhēng)，而且必將缺乏選擇性。修飾的嘌呤(例如(R)-roscovitine)是強(qiáng)效并具有相當(dāng)選擇性的抑制劑的發(fā)現(xiàn)(L.Meijer和E.Raymond，Acc.Chem.Res.，36417(2003))駁斥了那種觀點(diǎn)并且激發(fā)了合成圍繞嘌呤骨架的組合庫(kù)(Y.T.Chang等人，Chem.Biol.，6361(1999)；S.Ding等人，J.Am.Chem.Soc.，1241594(2002))，獲得了重要的先導(dǎo)物(lead)(N.S.Gray等人，Science，281533(1998)；M.Knockaert等人，Chem.Biol.，7411(2000))。

在這方面也已研究了大環(huán)二羥基苯甲酸內(nèi)酯。這類化合物的原型(archetype)是根赤殼菌素和相關(guān)的pochonin，它們是從麥角菌目絲孢菌普可尼亞屬(clavicipitaceous hyphomycete Pochonia genus)(例如厚垣孢普可尼亞菌(Pochonia chlamydosporia)變異鏈狀菌株P(guān)0297的培養(yǎng)物分離的次級(jí)代謝物的結(jié)構(gòu)相關(guān)的組。參見例如V.Hellwig等人，J.Natural Prod.，66(6)829-837(2003)。制備根赤殼菌素的鹵代醇和肟衍生物并評(píng)估它們的v-src酪氨酸激酶抑制、抗增殖和抗腫瘤的體外活性(T.Agatsuma等人，Bioorg.& Med.Chem.，10(11)3445-3454(2002)。
像激酶一樣，熱休克蛋白(HSP)與ATP相互作用并且是控制疾病的重要靶，然而它們具有不同的機(jī)理效應(yīng)。接觸應(yīng)激(例如熱、缺氧或酸中毒)后，大多數(shù)組織中的細(xì)胞立即迅速地逐步增加HSP的產(chǎn)生速率。目前認(rèn)為熱HSP是分子伴侶，即它們防止不合適的締合并且?guī)椭_地折疊其他分子蛋白質(zhì)，統(tǒng)稱為客戶(client)和底物。還發(fā)現(xiàn)HSP與腫瘤和其他病理生理學(xué)狀態(tài)有關(guān)。事實(shí)上，伴侶蛋白通過促進(jìn)對(duì)細(xì)胞內(nèi)部變化的耐受性進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞在應(yīng)激環(huán)境中的存活。HSP是普遍存在的，在物種中高度保守，并且通常按照分子量分為以下主要的家族HSP100、HSP90、HSP70、HSP60和小HSP。這些家族具有結(jié)構(gòu)和功能差異，但是它們?cè)诘鞍踪|(zhì)折疊的不同階段協(xié)同工作。HSP90受到了特別的關(guān)注，因?yàn)樗c許多類型的信號(hào)分子(例如v-Src和Raf)有關(guān)，所述信號(hào)分子在惡性轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)移發(fā)展中起重要作用。因此，期望HSP90抑制劑用于設(shè)計(jì)化學(xué)治療，并且還用于闡述復(fù)雜信號(hào)網(wǎng)絡(luò)中的相互作用。
熱休克蛋白90(Hsp90)是普遍存在的伴侶蛋白，其維持許多“客戶”蛋白的合適的構(gòu)象(參見Kamal等人，Trends Mol.Med.2004，10，283-290；Dymock等人，Expert Opin.Ther.Patents 2004，14，837-847；Isaacs等人，Cancer Cell，2003，3，213；Maloney等人，Expert Opin.Biol.Ther.2002，2，3-24和Richter等人，J.Cell.Physiol.2001，188，281-290)并且參與折疊、活化和裝配大范圍的蛋白質(zhì)，包括涉及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期控制和轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)的關(guān)鍵蛋白質(zhì)。研究人員已經(jīng)報(bào)道了HSP90伴侶蛋白與重要的信號(hào)蛋白有關(guān)，所述重要的信號(hào)蛋白諸如類固醇激素受體和蛋白激酶，包括例如Raf-1、EGFR、v-Src家族激酶、Cdk4和ErbB-2(Buchner，TIBS，1999，24，136-141；Stepanova等人，Genes Dev.1996，10，1491-502；Dai等人，J.Biol.Chem.1996，271，22030-4)。研究進(jìn)一步指示某些輔陪伴蛋白(co-chaperone)(例如Hsp70、p60/Hop/Sti1、Hip、Bag1、HSP40/Hdj2/Hsj1、抑免蛋白、p23和p50)促進(jìn)HSP90的功能(參見例如Caplan，Trends in Cell Biol.，1999，9，262-268)。抑制Hsp90引起這些客戶蛋白采用異常構(gòu)象，并且這些異常折疊的蛋白質(zhì)由細(xì)胞經(jīng)由泛素化(ubiquitinylation)和蛋白酶體降解迅速消除。有趣地是，Hsp90客戶蛋白的列表包括一系列眾人皆知的致癌基因。它們中的四種是臨床驗(yàn)證的癌癥靶HER-2/neu(Herceptin

(曲妥著單抗))、Bcr-Abl(Gleevec

(甲磺酸伊馬替尼))、雌激素受體(他莫昔芬)和雄激素受體(Casodex

(比卡魯胺))，而其他基因在癌癥的發(fā)展中起重要的作用。一些最敏感的Hsp90客戶涉及生長(zhǎng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)(Raf-1、Akt、cdk4、Src、Bcr-Abl等)。相比之下，似乎很少有腫瘤抑制基因(如果有)是Hsp90的客戶(客戶蛋白的列表參見Pratt等人，Exp.Biol.Med.2003，228，111-133；Workman等人，Cancer Lett.2004，206，149-157和Zhang等人，J.Mol.Med.2004，82，488-499.)，因此抑制Hsp90具有全面的抗增殖效應(yīng)。此外，一些客戶蛋白涉及腫瘤發(fā)生的其他基本過程，即凋亡逃逸(apoptosis evasion)(例如Apaf-1、RIP、Akt)、永生性(immortality)(例如hTert)、血管發(fā)生(例如VEGFR、Flt-3、FAK、HIF-1)和轉(zhuǎn)移(c-Met)。
然而，藥用的HSP抑制劑必須是選擇性的，因?yàn)镠SP還具有構(gòu)造(constructive)作用。在非應(yīng)激條件下，HSP90是存在于真核細(xì)胞的最大量的蛋白質(zhì)之一，代表1-2％的總細(xì)胞蛋白質(zhì)含量并且當(dāng)細(xì)胞受到應(yīng)激時(shí)僅增加約兩倍。當(dāng)結(jié)合天然客戶時(shí)，HSP90主管例如折疊新生多肽、跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)以及正常蛋白質(zhì)周轉(zhuǎn)。此外，HSP90在翻譯后調(diào)節(jié)信號(hào)分子(導(dǎo)致它們的活化)中起關(guān)鍵作用。HSP90很少單獨(dú)起作用，但其是與輔陪伴蛋白(HSP40、CDC37/p50、AHA1、p23)和與輔助蛋白一起工作，而不是與伴侶蛋白HSP70一起工作。
HSP90的許多客戶蛋白在生長(zhǎng)控制、細(xì)胞存活和發(fā)育過程中起關(guān)鍵作用，且已知那些客戶包括受體酪氨酸激酶、絲氨酸/蘇氨酸激酶、類固醇激素受體、轉(zhuǎn)錄因子和端粒末端轉(zhuǎn)移酶?？蛻舻闹掳┩蛔凅w也是客戶自身，只是對(duì)HSP90的功能具有更高的需求，例如突變體v-SRC酪氨酸激酶需要從蛋白質(zhì)的HSP90協(xié)同裝配中得到更多的蛋白質(zhì)折疊能力(Y.Xu等人，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，96109(1999)；.H.Oppermann等人，同上，781067(1981)；L.Whitesell等人，同上，918324(1994)。同樣，腫瘤抑制蛋白p53的突變導(dǎo)致發(fā)現(xiàn)于人類癌癥中的最普通的分子遺傳缺陷，并且大多數(shù)p53突變導(dǎo)致與HSP90的擴(kuò)大的相互作用(可能由于異常構(gòu)象)，防止了它們通常的泛素化和隨后被蛋白酶體降解(M.V.Blagosklonny等人，同上，938379(1996)。然而，盡管HSP90客戶的普遍參與，但是它們大多數(shù)是前生長(zhǎng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白(pro-growth signaling protein)，并且其伴侶蛋白功能在腫瘤發(fā)生期間被破壞，導(dǎo)致惡性轉(zhuǎn)化的發(fā)展以及所轉(zhuǎn)化表型的維持。
除了抗癌和抗腫瘤形成(antitumorgenic)活性外，HSP90抑制劑還涉及許多其他應(yīng)用，包括用作抗炎劑、抗傳染病劑、治療自身免疫的藥劑、治療缺血的藥劑和用于治療神經(jīng)變性疾病和促進(jìn)神經(jīng)再生的藥劑(參見M.Waza等人，Nature Med.111088(2005)；Rosen等人，WO 02/09696；PCT/US01/23640；Degranco等人，WO 99/51223；PCT/US99/07242；Gold，美國(guó)專利第6,210,974B1號(hào))。文獻(xiàn)報(bào)道了纖維形成病癥(包括但不限于硬皮病、多肌炎、系統(tǒng)性狼瘡(systemic lupus)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、肝硬化、瘢痕形成、間質(zhì)性腎炎和肺纖維化)是可治療的(Strehlow，WO 02/02123；PCT/US01/20578)。
因此，安沙霉素類和其他HSP90抑制劑對(duì)治療和/或預(yù)防許多類型的病癥是很有前途的。然而，許多天然產(chǎn)物衍生的Hsp90抑制劑表現(xiàn)出藥學(xué)上的缺陷；它們相對(duì)的不溶性使它們難以配制和給藥，并且它們不容易合成而且目前必須(至少部分地)通過發(fā)酵生產(chǎn)。此外，安沙霉素的劑量限制毒性與肝有關(guān)。例如，半合成抑制劑17-烯丙基氨基，17-去甲氧基-格爾德霉素(17-AAG)，目前在II期臨床試驗(yàn)中，其造價(jià)昂貴，配制困難(NCI臨床方案由注射17-AAG的DMSO溶液組成)，且目前只能腸胃外給藥。盡管17-二甲基氨基乙基氨基類似物(17-DMAG)更加易溶，但它表現(xiàn)出所有17-AAG的副作用，并且在臨床前毒性研究中出現(xiàn)胃腸出血(Glaze等人.Proc.Am.Assoc.Cancer.Res.2003，44，162-162和Eiseman等人，CancerChemother.Pharmacol.2005，55，21-32)。另一種天然產(chǎn)物Hsp90抑制劑——根赤殼菌素(RC)，水溶性差，并且在腫瘤異種移植模型中沒有活性。根赤殼菌素的半合成肟衍生物提供較好的溶解性并且大大改善了鼠科模型中的藥理學(xué)特征，但是仍然僅限于靜脈內(nèi)給藥(Ikuina等人.J.Med.Chem.2003，46，2534-2541。此外，根赤殼菌素和其肟含有環(huán)氧乙烷環(huán)，所述環(huán)氧乙烷環(huán)被看作對(duì)穩(wěn)定性和毒性負(fù)責(zé)，促進(jìn)環(huán)丙根赤殼菌素(cycloproparadicicol)的合成Yang等人.J.Am.Chem.Soc.2004，126，7881和2003，125，9602-9603)。盡管安沙霉素類具有潛力，但因此需要可選的HSP90抑制劑。
已經(jīng)尋找Hsp90的全合成口服活性抑制劑，以便提供更加靈活的劑量方案選擇，并且可能避免天然產(chǎn)物抑制劑的副反應(yīng)。Chiosis等人描述了嘌呤類似物的設(shè)計(jì)和合成，所述嘌呤類似物模擬格爾德霉素和其他安沙霉素類結(jié)合HSP90的ATP結(jié)合袋并且因此抑制HSP90的能力。參見國(guó)際專利申請(qǐng)PCT/US01/46303(WO 02/36075；Chemistry & Biology(化學(xué)與生物學(xué))8289-299(2001))。Chiosis等人描述的具體化合物包括在3、4和5位取代的三甲氧芐基實(shí)體。使用凝膠結(jié)合測(cè)定，證明這些化合物結(jié)合HSP90，比17-AAG低近20倍。
最近，已經(jīng)報(bào)道了其他新的非天然產(chǎn)物Hsp90抑制劑(例如PU3和CCT018159；參見Chiosis等人，Bioorg.Med.Chem.Lett.2002，10，3555-3564；Vilenchik等人，Chem.Biol.2004，11，787-797；Chiosis等人，WO0236075，2002；Drysdale等人，WO 03/055860 A1，2003；Wright等人，Chem.Biol.2004，11，775-785；Dymock等人，Bioorg.Med.Chem.Lett.2004，14，325-328；Dymock等人，J.Med.Chem.2005，48，4212-4215.Hsp90 incomplex with PU3 pdb code 1UY6，and with PU24FClpdb coad 1UYF，和Clevenger等人，Org.Lett.2004，6，4459-4462)。使用Hsp90與ATP、格爾德霉素或根赤殼菌素的復(fù)合體的晶體結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)這些抑制劑的結(jié)構(gòu)。將8-芐基腺嘌呤(例如PU3)設(shè)計(jì)成采用與格爾德霉素相同的C型構(gòu)象(Chiosis等人.Current Cancer Drug Targets，2003，3，371-376)，其具有指向腺嘌呤結(jié)合位點(diǎn)(鉸鏈區(qū))的腺嘌呤環(huán)，以及模擬格爾德霉素醌環(huán)的氫鍵接受性質(zhì)的三甲氧基苯環(huán)。(PU3的苯環(huán)沒有設(shè)計(jì)成具有與格爾德霉素的醌環(huán)完全相同的方向。而是所述三甲氧基苯部分設(shè)計(jì)成指向相同的一般方向并且與Lys 112形成氫鍵，所述Lys 112是與格爾德霉素的醌環(huán)形成氫鍵的氨基酸。)最近獲得的Hsp90與PU3的復(fù)合體的晶體結(jié)構(gòu)確認(rèn)嘌呤環(huán)占據(jù)了一般由ADP/ATP占據(jù)的位置，但是苯環(huán)指向與預(yù)知相反的方向，以形成與Phe138的r-堆積相互作用(r-stacking interaction)。然而，PU3抑制Hsp90(HER-2降解測(cè)定，HER-2 IC50＝40μM)并提供用于進(jìn)一步優(yōu)化的有價(jià)值的起始點(diǎn)?；赑U3的結(jié)構(gòu)活性研究導(dǎo)致更具有活性的PU24FCl(HER-2IC50＝1.7μM)，其隨后還與Hsp90共結(jié)晶。當(dāng)PU24FCl在DMSO/EtOH/磷酸緩沖鹽水1∶1∶1中配制并向腹膜內(nèi)給藥于荷有(bearing)MCF-7異種移植腫瘤的小鼠時(shí)，它在100-300mg/kg時(shí)誘導(dǎo)HER-2和Raf-1的下調(diào)(一種與Hsp90抑制一致的藥效學(xué)響應(yīng))，并且在200mg/kg時(shí)它顯著抑制了腫瘤生長(zhǎng)。當(dāng)口服給藥時(shí)，需要非常高劑量(500-1000mg/kg)的PU24FCl才能觀察到相似的藥效學(xué)響應(yīng)，并且沒有8-芐基腺嘌呤被報(bào)道通過口服途徑抑制腫瘤的生長(zhǎng)。在我們手中，證實(shí)了PU24FCl太難溶以至于不能有效地配制和口服給藥。目前為止，盡管大量的SAR研究證明了效力和藥學(xué)性質(zhì)，但是當(dāng)口服施用時(shí)，Hsp90抑制劑還是沒有在人類癌癥的動(dòng)物模型(異種移植物)中被證明具活性。
8-芐基腺嘌呤的發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致8-硫烷基腺嘌呤的設(shè)計(jì)(Kasibhatla等人.WO3037860，2003和Llauger等人，J.Med.Chem.2005，48，2892-2905)，以8-(2-碘-5-甲氧基-苯基硫烷基)-9-戊-4-炔基-9H-嘌呤-6-基胺為例，其在幾種基于細(xì)胞的測(cè)定中顯示出色的效能，但是在水中溶解差并且在臨床可接受的制劑中沒有足夠的口服生物利用度。
當(dāng)抑制HSP90時(shí)，其客戶被降解，即未折疊的蛋白質(zhì)被泛素化，隨后是蛋白酶體介導(dǎo)的水解。到目前為止，大多數(shù)報(bào)道的抑制劑結(jié)合于N末端結(jié)構(gòu)域(見下文)，但是報(bào)道了一些抑制劑與C末端結(jié)構(gòu)域相互作用；HSP90在兩個(gè)位置都具有ATP結(jié)合位點(diǎn)。不完全清楚HSP90的C末端功能，但是化合物與該結(jié)構(gòu)域相互作用明顯地?fù)p害了HSP90功能并且具有抗癌效應(yīng)。已發(fā)現(xiàn)一些二羥基苯甲酸內(nèi)酯抑制HSP90，因此天然產(chǎn)物根赤殼菌素和格爾德霉素(分別于P.Delmotte和J.Delmotte-Plaquee，Nature(London)，171344(1953)；和C.DeBoer等人，J Antibiot(Tokyo)，23442(1970))被證明抑制表達(dá)活化的Src的細(xì)胞的轉(zhuǎn)化表型(H.J.Kwon等人，Cancer Research，526926(1992)；Y.Uehara等人，Virology，164294(1988))。已報(bào)道相關(guān)的化合物(例如除莠霉素)具有相似的效應(yīng)(S.Omura等人，JAntibiot(Tokyo)，32255(1979)。

根赤殼菌素格爾德霉素 在這方面研究的其他二羥基苯甲酸內(nèi)酯(RAL)包括17-烯丙基氨基-17-去甲氧基格爾德霉素(17AAG)(D.B.Solit等人，Clin.Cancer Res.，8986(2002)；L.R.Kelland等人，J.Natl.Cancer Inst.，911940(1999))；17DMAG(J.L.Eiseman等人，Cancer Chemother.Pharmacol.，5521-32(2005))；IPI-504(J.Ge等人，J.Med.Chem.，494606(2006)；肟衍生物例如KF25706(S.Soga等人，Cancer Res.，592931(1999))和KF55823(S.Soga等人，CancerChemotherapy and Pharmacology)，48435(2001))；以及Danishefsky等人的環(huán)丙根赤殼菌素(A.Rivkin等人，同上，442838(2005))。結(jié)構(gòu)相關(guān)的變體包括具有根赤殼菌素的羧基間苯二酚和格爾德霉素的苯醌的嵌合抑制劑(R.C.Clevenger和B.S.Blagg，Org.Lett.，64459(2004)；G.Shen和B.S.Blagg，同上，72157(2004)；G.Shen等人，J.Org.Chem.，717618(2006))。

基于根赤殼菌素的HSP90抑制劑
HSP90的嵌合抑制劑 已經(jīng)研究嘌呤(例如PU3)，以便設(shè)計(jì)適合HSP90的ATP結(jié)合位點(diǎn)的小分子(G.Chiosis等人，Chem Biol 8，289-299(2001)；G.Chiosis等人，Bioorg.Med.Chem.，103555(2002)；L.LLauger等人，J.Med.Chem..482892(2005)；H.He等人，同上，49381(2006)；M.A.Biamonte等人，同上，49817(2006))。

基于嘌呤設(shè)計(jì)的HSP90抑制劑 最近還報(bào)道了吡唑(1-35)(M.G.Rowlands等人，Anal.Biochem.，327176(2004)；B.W.Dymock等人，J.Med.Chem.，484212(2005))和苯并噻唑硫-嘌呤(1-36)(L.Zhang等人，J.Med.Chem.，495352(2006))作為這些酶的小分子抑制劑。

其他類的HSP90抑制劑 根赤殼菌素已具有特別意義。根赤殼菌素(一種14元大環(huán)內(nèi)酯并且也稱作單孢菌素(monorden))是HSP90的ATP結(jié)合袋的有效的、高競(jìng)爭(zhēng)性和高選擇性的配體。HSP90是ATP酶而不是激酶，并且它的ATP結(jié)合袋具有Bergerat折疊(A.Bergerat等人，Nature，386414(1997)；R.Dutta和M.Inouye，Trends Biochem.Sci.，2524(2000))，其與激酶的ATP結(jié)合袋不同(S.M.Roe等人，J.Med.Chem.，42260(1999))。在最初發(fā)現(xiàn)后，出現(xiàn)對(duì)根赤殼菌素的藥物應(yīng)用的極大關(guān)注。(參見美國(guó)專利6,946,456和美國(guó)專利申請(qǐng)公布2003-0211469、2004-0102458、2005-0074457、2005-0261263、2005-0267087、2006-0073151、2006-0251574、2006-0269618、2007-0004674和2007-0010432)。

引人注目地，已知一些二羥基苯甲酸(resorcylic)大環(huán)內(nèi)酯類(其為根赤殼菌素的相近類似物)抑制激酶，但不抑制HSP90。確實(shí)，發(fā)現(xiàn)LL-Z1640-2是TAK1激酶的有效和選擇性的抑制劑，而根赤殼菌素和其他二羥基苯甲酸酯(resorcylides)對(duì)所述TAK1激酶沒有活性(J.Ninomiya-Tsuji等人，J.Biol.Chem.，27818485(2003)；P.Rawlins等人，Int.J.Immunopharma.，21799(1999)；K.Takehana等人，Biochem.Biophys.Res.Comm.，25719(1999)；A.Zhao等人，J.Antibiotics，521086(1999))。密切相關(guān)的LL-783，227(其中一個(gè)烯烴被還原)是MEK激酶的有效抑制劑(A.Zhao等人，J.Antibiotics521086(1999))。發(fā)現(xiàn)化合物F87-2509.04誘導(dǎo)含有AU富集元件(ARE)的mRNA的降解(T.Kastelic等人，Cytokine，8751(1996))，并且發(fā)現(xiàn)寄端霉素(hypothemycin)抑制Ras介導(dǎo)的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)(H.Tanaka等人，Jap.J.CancerRes.，901139(1999))。最近，我們已經(jīng)證明aigialomycin D是CDK抑制劑(S.Barluenga等人，Angew.Chem.，Int.Ed.，46(24)3951(2006))。
根赤殼菌素的其他相近類似物確實(shí)抑制HSP90。Pochonin D是HSP90的有效抑制劑。(E.Moulin等人，J.Am.Chem.Soc.，127(19)6999(2005))。并且，已報(bào)道90nM的pochonin A是HSP90的抑制劑。發(fā)現(xiàn)Pochonin C是皰疹的解旋酶-引發(fā)酶的抑制劑，所述解旋酶-引發(fā)酶是ATP酶而不是激酶(V.Hellwig等人，J.Nat.Prod.，66829(2003))。雖然根赤殼菌素和pochonin C在結(jié)構(gòu)上非常相似，但它們?cè)谌芤褐芯哂蟹浅２煌臉?gòu)象，并且具有不同的生物活性(S.Barluenga等人，Chem.Eur.J.，114935(2005)。因此，看來是所述大環(huán)的“松弛(floppiness)”在二羥基苯甲酸大環(huán)內(nèi)酯間的抑制差異中起到了重要的作用，并且在任何情況下使得那些效應(yīng)難以通過理論方法預(yù)測(cè)。
已知一些二羥基苯甲酸大環(huán)內(nèi)酯是激酶或磷酸酯酶的抑制劑(美國(guó)專利5,674,892、5,728,726、5,731,343和5,795,910)，或抑制其他的酶(美國(guó)專利5,710,174，抑制纖維蛋白交聯(lián)的FXIIIa催化)。二羥基苯甲酸大環(huán)內(nèi)酯還用于其他醫(yī)學(xué)適應(yīng)癥(美國(guó)專利3,453,367、3,965,275、4,035,504、4,670,249、4,778,821、4,902,711和6,635,671)。
根赤殼菌素和pochonin是天然產(chǎn)物；用于合成它們的一些類似物的中間體可通過發(fā)酵獲得，然而僅依靠那些天然產(chǎn)物或它們的發(fā)酵衍生物嚴(yán)重地限制了化合物的范圍。因此，已經(jīng)合成了許多新的二羥基苯甲酸大環(huán)內(nèi)酯。這些中的許多是玉米赤霉烷和相關(guān)的化合物，其中所述大環(huán)除了苯環(huán)的幾個(gè)碳之間外，不含有碳-碳雙鍵。(美國(guó)專利序列號(hào)3,373,038；3,586,701；3,621,036；3,631,179；3,687,982；3,704,249；3,751,431；3,764,614；3,810,918；3,836,544；3,852,307；3,860,616；3,901,921；3,901,922；3,903,115；3,957,825；4,042,602；4,751,239；4,849,447；和2005-0256183)。還報(bào)道了具有以下特征的二羥基苯甲酸大環(huán)內(nèi)酯的合成苯環(huán)外的環(huán)上的碳之間存在一個(gè)雙鍵(美國(guó)專利序列號(hào)3,196,019；3,551,454；3,758,511；3,887,583；3,925,423；3,954,805；和4,088,658)。那些二羥基苯甲酸大環(huán)內(nèi)酯中大部分是14元大環(huán)，但是還報(bào)道了12元大環(huán)類似物的合成(美國(guó)專利序列號(hào)5,710,174；6,617,348；和2004-0063778，以及PCT公布WO 02/48135)。
還報(bào)道了根赤殼菌素相關(guān)的化合物的合成，所述化合物在大環(huán)上具有兩個(gè)非芳香雙鍵和鹵化物或1，2-橋氧基(即環(huán)氧化物)。(美國(guó)專利序列號(hào)4,228,079；5,597,846；5,650,430；5,977,165；7,115,651以及日本專利文件號(hào)JP 6-279279A、JP 6-298764A、JP 9-202781A、JP 10-265381A2和JP 2000-236984)。根赤殼菌素相關(guān)化合物的肟的合成公開于美國(guó)專利序列號(hào)5,977,165；6,239,168；6,316,491；6,635,662；2001-0027208；2004-0053990；日本專利文件號(hào)JP 2003-113183A2；和PCT公布號(hào)WO 99/55689。根赤殼菌素的環(huán)丙類似物的合成公開于美國(guó)專利7,115,651和PCT公布WO05/061481。一些其他二羥基苯甲酸大環(huán)內(nèi)酯類似物的合成公開于美國(guó)專利公布2006-0247448和PCT公布WO 02/48135。還合成了根赤殼菌素以及Pochonin A和C(S.Barluenga等人，Angew.Chemie，43(26)3467-3470(2004)；S.Barluenga等人，Chemistry-A European Journal，11(17)4935-4952(2005年8月19日)；E.Moulin等人等人，Organic Letters，7(25)5637-5639(2005年12月8日)。
盡管有以上描述的進(jìn)展，但化學(xué)生物學(xué)家仍就受到敲除特定激酶活性的有限能力的困擾，其中敲除特定激酶活性是為了揭示(deconvolute)特定激酶在復(fù)雜信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)中的作用。可滲入細(xì)胞的小分子有望解決該問題。且越來越明顯的是激酶的生物功能通常受它們的構(gòu)象調(diào)節(jié)，所述構(gòu)象轉(zhuǎn)而由它們的磷酸化水平并且由分子內(nèi)和分子間的締合指示。小分子抑制劑還具有區(qū)別給定激酶的不同構(gòu)象的潛力，因此小分子提供了詳細(xì)分析那些構(gòu)象的各自功能的方法。不幸地是，已知激酶抑制劑的資料(portfolio)還不能支持在分析激酶組的不同成員的作用中所要做的全部工作。這不僅是學(xué)術(shù)追求，因?yàn)樗幬镌O(shè)計(jì)的合理性將繼續(xù)受到困擾，直到了解激酶的機(jī)理和它們的選擇性。
因此對(duì)已經(jīng)改善效能和選擇性的激酶抑制劑和HSP90抑制劑有進(jìn)一步的需求。此外，這樣的抑制劑和抑制劑的靶向庫(kù)的設(shè)計(jì)與合成仍然具有挑戰(zhàn)性，因此對(duì)改善的合成方法有進(jìn)一步的需求。
發(fā)明概述 本發(fā)明提供式I、II、III、IV和V的pochonin大環(huán)內(nèi)酯的新的類似物、其互變異構(gòu)體，其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥和包含所述化合物的用于治療激酶介導(dǎo)或HSP90介導(dǎo)的病癥的藥物組合物。本發(fā)明還提供使用式I、II、III、IV和V的化合物治療激酶介導(dǎo)或HSP90介導(dǎo)的病癥的方法。本發(fā)明的化合物具有作為激酶抑制劑和HSP90抑制劑的活性。此外，本發(fā)明提供服從于(amenable to)自動(dòng)合成技術(shù)的制備所述化合物的改良工藝。
在本發(fā)明第一個(gè)主要的實(shí)施方案中，提供式I的化合物、其互變異構(gòu)體，或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥
其中 R1、R2、R3、R4和R5獨(dú)立地為氫、鹵素、硝基、氰基、烷基、取代的烷基、低級(jí)烷基、烯基、炔基、烷基芳基、芳烷基、芳基、雜烷基、烷基雜芳基、雜環(huán)基、雜芳基、OH、OR、NH2、N(R)2、SR、S(O)R、S(O)2R、-SO2N(R)2、-N(R)SO2R、-N(CO)R、-N(CO)N(R)2、-N(CO)OR、-O(CO)R、-(CO)R、-(CO)OR、-(CO)N(R)2、-O(CO)OR或-O(CO)N(R)2，其中每個(gè)R可以相同或不同； A1和A2一起為-CH2-CH2-、-CH＝CH-、-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(鹵素)-、-CH(鹵素)-CH(OH)-、1，2-環(huán)丙二基(1，2-cyclopropadiyl)或1，2-環(huán)氧乙烷； B1和B2一起為-CH2-CH2-或者B1和B2一起表示共價(jià)鍵，其中每個(gè)R可以相同或不同； X1是氫、鹵素、OH、OR、NH2、N(R)2、NH-OR、SR、S(O)R、S(O)2R、-NH-O-(CH2)n-CO2-R、-NH-O-(CH2)n-CON(R)2；或者X1與X2或X3一起表示共價(jià)鍵，其中每個(gè)R可以相同或不同； X4和X5一起為＝O、＝S、＝N-OR、＝N-O-(CH2)nCOOR、＝N-O-(CH2)nCON(R)2、＝N-N(R)2、＝N-N-SOR或＝N-N-SO2R，其中結(jié)合至氮的基團(tuán)-OR、-O-(CH2)nCOOR、-O-(CH2)nCON(R)2、-N(R)2、-N-SOR或-N-SO2R可以是Z-或E-構(gòu)型；或者X4和X5之一是氫且另一個(gè)是OH、OR、O(CO)R、O(CO)OR、O(CO)N(R)2、-(CH2)nC(O)OR或-(CH2)nC(O)N(R)2，且n是0、1、2或3；或者X4和X5之一與X6一起表示共價(jià)鍵且X4和X5中的另一個(gè)是OH、OR、O(CO)R、O(CO)OR、-N(R)2或O(CO)N(R)2，其中每個(gè)R可以相同或不同； X6是氫或X6與X4和X5之一一起表示共價(jià)鍵；且 R是氫、烷基、取代的烷基、低級(jí)烷基、?；?、芳基、烷芳基、芳基烷基包括芐基、雜烷基、雜芳基、雜環(huán)基、保護(hù)基；或者在同一個(gè)氮上的兩個(gè)R與所述氮一起形成5-8元雜環(huán)或雜芳基環(huán)；且 n是0、1、2或3。
在本發(fā)明第二個(gè)實(shí)施方案中，提供式II的化合物、其互變異構(gòu)體，或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥
其中R、R1、R2、R3、R4、R5、A1、A2、X1、X2和X3如上文式I所定義；且 R7是＝O、＝S、＝N-OR、＝N-O-(CH2)nCOOR、＝N-O-(CH2)nCON(R)2、＝N-N(R)2、＝N-N-SOR或＝N-N-SO2R，其中結(jié)合至氮的基團(tuán)-OR、-O-(CH2)nCOOR、-O-(CH2)nCON(R)2、-N(R)2、-N-SOR或-N-SO2R可以是Z-或E-構(gòu)型；且其中R可以相同或不同。
在式II的一個(gè)子實(shí)施方案中，A1和A2一起是-CH＝CH-。
在式II的另一子實(shí)施方案中，A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(鹵素)-或-CH(鹵素)-CH(OH)-。
在式II的另一子實(shí)施方案中，A1和A2一起是1，2-環(huán)氧乙烷。
在本發(fā)明第三個(gè)實(shí)施方案中，提供式III的化合物、其互變異構(gòu)體，或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥
其中R1、R2、R3、R4、R5、A1、A2、X1、X2和X3如上文式I所定義；且R是氫、烷基、芳基烷基、酰基或保護(hù)基。
在式III的一個(gè)子實(shí)施方案中，A1和A2一起是-CH＝CH-。
在式III的另一子實(shí)施方案中，A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(鹵素)-或-CH(鹵素)-CH(OH)-。
在式III的另一子實(shí)施方案中，A1和A2一起是1，2-環(huán)氧乙烷。
在本發(fā)明第四個(gè)實(shí)施方案中，提供式IV的化合物、其互變異構(gòu)體，或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥
其中R、R1、R2、R3、R4、R5、A1和A2如上文式I所定義；且R6是氫、OR或N(R)2。
在式IV的一個(gè)子實(shí)施方案中，A1和A2一起是-CH＝CH-。
在式IV的另一子實(shí)施方案中，A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(鹵素)-或-CH(鹵素)-CH(OH)-。
在式IV的進(jìn)一步的子實(shí)施方案中，A1和A2一起是1，2-環(huán)氧乙烷。
在本發(fā)明第五個(gè)實(shí)施方案中，提供式V的化合物、其互變異構(gòu)體，或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥
其中R、R1、R2、R3、R4、R5、A1和A2如上文式I所定義；R6是(CH2)nC(O)OR或-(CH2)nC(O)N(R)2；且 n是0、1、2或3。
在式V的一個(gè)子實(shí)施方案中，A1和A2一起是-CH＝CH-。
在式V的另一子實(shí)施方案中，A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(鹵素)-或-CH(鹵素)-CH(OH)-。
在式V的第三個(gè)子實(shí)施方案中，A1和A2一起是1，2-環(huán)氧乙烷。
在另一實(shí)施方案中，提供包含有效激酶抑制量的式I、II、III、IV或V的化合物與藥學(xué)可接受的載體的藥物組合物。
在另一實(shí)施方案中，提供包含有效HSP 90抑制量的式I、II、III、IV或V的化合物與藥學(xué)可接受的載體的藥物組合物。在一些實(shí)施方案中，所述載體適于口服、腸胃外、吸入、局部或真皮內(nèi)給藥。
在其他的實(shí)施方案中，包含式I、II、III、IV或V的化合物的藥物組合物包含平均粒度小于約2微米的顆粒。在其他的實(shí)施方案中，將所述組合物摻至可生物降解或不能生物降解的聚合物中。
在一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物包含選自抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑、液體載體、溶質(zhì)、助懸劑、增稠劑、矯味劑、明膠、甘油、粘合劑、潤(rùn)滑劑、惰性稀釋劑、防腐劑、表面活性劑、分散劑、可生物降解的聚合物或它們的任意組合的添加劑。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供治療患有疾病的患者的方法，其包括向所述患有所述疾病的患者給藥有效量的式I、II、III、IV或V的化合物，其中所述疾病是自身免疫疾病、炎性疾病、神經(jīng)疾病或神經(jīng)變性疾病、癌癥、心血管疾病、變態(tài)反應(yīng)、哮喘或激素相關(guān)的疾病。
在一個(gè)實(shí)施方案中，提供治療癌癥患者的方法，其包括向所述患有所述癌癥的患者給藥有效的癌癥治療量的式I、II、III、IV或V的化合物，其中所述癌癥可以是實(shí)體瘤、血源性腫瘤(blood borne tumor)、乳腺癌、卵巢癌、宮頸癌、前列腺癌、睪丸癌、尿道癌、食管癌、喉癌、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、胃癌、皮膚癌、角化棘皮瘤、肺癌、表皮樣癌、大細(xì)胞癌、小細(xì)胞癌、肺腺癌、骨癌、結(jié)腸癌、腺瘤、胰腺癌、腺癌、甲狀腺癌、濾泡癌、未分化癌、乳頭狀癌、精原細(xì)胞瘤、黑素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝癌和膽道癌、腎癌、骨髓樣病癥、淋巴樣病癥、霍奇金氏病、毛細(xì)胞(hairy cells)、口腔癌、咽癌(pharynx cancer)、唇癌、舌癌、口癌(mouth cancer)、咽癌(cancer of the pharynx)、小腸癌、結(jié)腸-直腸癌、大腸癌、直腸癌、腦癌和中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌癥或白血病。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供治療患有與不期望的新血管形成相關(guān)的疾病的患者的方法，其包括向所述患有所述不期望的新血管形成的患者給藥有效量的式I、II、III、IV或V的化合物。
與不期望的新血管形成相關(guān)的疾病包括眼新生血管性疾病(ocularneovascular disease)、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病、角膜移植物排斥(corneal graft rejection)、新生血管性青光眼和晶狀體后纖維增生癥(retrolental fibroplasias)、流行性角膜結(jié)膜炎、維生素A缺乏病、接觸鏡超帶癥(contact lens overwear)、異位性角膜炎、上角膜緣角結(jié)膜炎(superiorlimbic keratitis)、翼狀胬肉干燥性角膜炎(pterygium keratitis sicca)、干燥綜合征(

syndrome)、紅斑痤瘡、小水皰病(phylectenulosis)、梅毒、分枝桿菌感染、脂質(zhì)變性、化學(xué)燒傷、細(xì)菌性潰瘍、真菌性潰瘍、單純皰疹感染、帶狀皰疹感染、原蟲感染、卡波西肉瘤、莫倫潰瘍、Terrien角膜邊緣性變性(Terrien′s marginal degeneration)、邊緣性角質(zhì)層分離(marginalkeratolysis)、創(chuàng)傷、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性狼瘡、多動(dòng)脈炎、韋格內(nèi)結(jié)節(jié)病(Wegener’s sarcoidosis)、鞏膜炎、多型糜爛性紅斑綜合征(Steven-Johnson disease)、類天皰瘡、放射狀角膜切開術(shù)或角膜移植排斥(cornealgraph rejection)、鐮狀細(xì)胞貧血、結(jié)節(jié)病、彈性假黃色瘤、佩吉特病、靜脈阻塞、動(dòng)脈阻塞、頸動(dòng)脈阻塞性疾病、慢性葡萄膜炎/玻璃體炎、萊姆病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、伊爾斯病、白塞病、引起視網(wǎng)膜炎或脈絡(luò)膜炎的感染、眼假組織胞漿菌病、貝斯特病、近視、視窩、斯塔加特病(Stargart’sdisease)、睫狀體扁平部炎、慢性視網(wǎng)膜脫離、高粘滯綜合征、弓形體病或激光后并發(fā)癥(post-laser complications)。
在另一實(shí)施方案中，提供治療患有炎性疾病的患者的方法，其包括向所述患有所述炎性疾病的患者給藥有效量的式I、II、III、IV或V的化合物。
所述炎性疾病可以是內(nèi)皮細(xì)胞的過度或異常刺激、動(dòng)脈粥樣硬化、血管功能障礙、異常的傷口愈合、炎性和免疫病癥、白塞病、痛風(fēng)或痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、伴隨異常的血管發(fā)生的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、皮膚疾病、銀屑病、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病、晶狀體后纖維增生癥、黃斑變性、角膜移植物排斥、新生血管性青光眼或奧-韋綜合征(Osler Webersyndrome)。
發(fā)明詳述 本發(fā)明提供基于二羥基苯甲酸內(nèi)酯的用作激酶抑制劑和HSP90抑制劑的新的化合物。還提供包含所述化合物的組合物和制備所述化合物的方法。提供所述化合物在抑制激酶和HSP-90中的用途和治療激酶介導(dǎo)或HSP90介導(dǎo)的疾病的方法，所述方法包括向患有激酶介導(dǎo)或HSP90介導(dǎo)的疾病的患者給藥有效的激酶抑制量或有效的HSP90抑制量的式I、II、III、IV或V的化合物。
化合物 在本發(fā)明第一個(gè)實(shí)施方案中，提供式I的化合物、其互變異構(gòu)體，或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥
其中 R1、R2、R3、R4和R5獨(dú)立地為氫、鹵素、硝基、氰基、烷基、取代的烷基、低級(jí)烷基、烯基、炔基、烷基芳基、芳烷基、芳基、雜烷基、烷基雜芳基、雜環(huán)基、雜芳基、OH、OR、NH2、N(R)2、SR、S(O)R、S(O)2R、-SO2N(R)2、-N(R)SO2R、-N(CO)R、-N(CO)N(R)2、-N(CO)OR、-O(CO)R、-(CO)R、-(CO)OR、-(CO)N(R)2、-O(CO)OR或-O(CO)N(R)2，其中每個(gè)R可以相同或不同； A1和A2一起為-CH2-CH2-、-CH＝CH-、-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(鹵素)-、-CH(鹵素)-CH(OH)-、1，2-環(huán)丙二基或1，2-環(huán)氧乙烷； B1和B2一起為-CH2-CH2-或者B1和B2一起表示共價(jià)鍵，其中每個(gè)R可以相同或不同； X1是氫、鹵素、OH、OR、NH2、N(R)2、NH-OR、SR、S(O)R、S(O)2R、-NH-O-(CH2)n-CO2-R、-NH-O-(CH2)n-CON(R)2；或者X1與X2或X3一起表示共價(jià)鍵，其中每個(gè)R可以相同或不同； X2和X3都是氫，或者X2和X3之一是氫且另一個(gè)與X1一起表示共價(jià)鍵； X4和X5一起為＝O、＝S、＝N-OR、＝N-O-(CH2)nCOOR、＝N-O-(CH2)nCON(R)2、＝N-N(R)2、＝N-N-SOR或＝N-N-SO2R，其中結(jié)合至氮的基團(tuán)-OR、-O-(CH2)nCOOR、-O-(CH2)nCON(R)2、-N(R)2、-N-SOR或-N-SO2R可以是Z-或E-構(gòu)型；或者X4和X5之一是氫且另一個(gè)是OH、OR、O(CO)R、O(CO)OR、O(CO)N(R)2、-(CH2)nC(O)OR或-(CH2)nC(O)N(R)2，且n是0、1、2或3；或者X4和X5之一與X6一起表示共價(jià)鍵且X4和X5中的另一個(gè)是OH、OR、O(CO)R、O(CO)OR、-N(R)2或O(CO)N(R)2，其中每個(gè)R可以相同或不同； X6是氫或X6與X4和X5之一一起表示共價(jià)鍵；且 R是氫、烷基、低級(jí)烷基、?；?、芳基、烷芳基、芳基烷基包括芐基、雜烷基、雜芳基、雜環(huán)基、保護(hù)基；或者在同一個(gè)氮上的兩個(gè)R與所述氮一起形成5-8元雜環(huán)或雜芳基環(huán)；且 n是0、1、2或3。
在化合物I的一個(gè)子實(shí)施方案中，R1是H、鹵素或雜環(huán)基。
在化合物I的另一子實(shí)施方案中，R5是H、烷基、低級(jí)烷基、芳基、雜芳基或芳基烷基。
在化合物I的另一子實(shí)施方案中，A1和A2一起是-CH2-CH2-或-CH＝CH-。
在化合物I的又一子實(shí)施方案中，A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(鹵素)-或-CH(鹵素)-CH(OH)-。
在化合物I的進(jìn)一步的子實(shí)施方案中，A1和A2一起是1，2-環(huán)丙二基或1，2-環(huán)氧乙烷。
在本發(fā)明第二個(gè)實(shí)施方案中，提供式II的化合物、其互變異構(gòu)體，或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥
其中 R、R1、R2、R3、R4、R5、X1、X2、X3、A1和A2如上文式I所定義； 且 R7是＝O、＝S、＝N-OR、＝N-O-(CH2)nCOOR、＝N-O-(CH2)nCON(R)2、＝N-N(R)2、＝N-N-SOR或＝N-N-SO2R，其中結(jié)合至氮的基團(tuán)-OR、-O-(CH2)nCOOR、-O-(CH2)nCON(R)2、-N(R)2、-N-SOR或-N-SO2R可以是Z-或E-構(gòu)型；且其中R可以相同或不同。
在化合物II的一個(gè)子實(shí)施方案中，R1是H、鹵素或雜環(huán)基。
在化合物II的另一子實(shí)施方案中，R5是H、烷基、低級(jí)烷基、芳基、雜芳基或芳基烷基。
在化合物II的另一子實(shí)施方案中，A1和A2一起是-CH2-CH2-或-CH＝CH-。
在化合物II的又一子實(shí)施方案中，A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(鹵素)-或-CH(鹵素)-CH(OH)-。
在化合物II的進(jìn)一步的子實(shí)施方案中，A1和A2一起是1，2-環(huán)丙二基或1，2-環(huán)氧乙烷。
在化合物II的另一子實(shí)施方案中 R1是H、Cl或雜環(huán)基； R2和R4獨(dú)立地為OH或OR； R5是氫、烷基、芳基或芳烷基； A1和A2一起是-CH＝CH-； X1與X2一起表示共價(jià)鍵；且 R7是＝O。
在化合物II的另一子實(shí)施方案中 R1是H、Cl或雜環(huán)基； R2和R4獨(dú)立地為OH或OR； R5是氫、烷基、芳基或芳烷基； A1和A2一起是-CH＝CH-； X1與X2一起表示共價(jià)鍵；且 R7是＝N-OR、＝N-O-(CH2)nCOOR、＝N-O-(CH2)nCON(R)2、＝N-N(R)2或＝N-N-SOR，其中結(jié)合至氮的基團(tuán)-OR、-O-(CH2)nCOOR、-O-(CH2)nCON(R)2、-N(R)2、-N-SOR或-N-SO2R可以是Z-或E-構(gòu)型。
在化合物II的另一子實(shí)施方案中 R1是H、Cl或雜環(huán)基； R2和R4獨(dú)立地為OH或OR； R5是氫、烷基、芳基或芳烷基； A1和A2一起是-CH＝CH-或-C(OH)-C(OH)-； X1是氫、鹵素或NH-OR；且 R7是＝O。
在化合物II的另一子實(shí)施方案中 R1是H、Cl或雜環(huán)基； R2和R4獨(dú)立地為OH或OR； R5是氫、烷基、芳基或芳烷基； A1和A2一起是-CH＝CH-或-C(OH)-C(OH)-； X1是氫、鹵素或NH-OR；且 R7是＝N-OR、＝N-O-(CH2)nCOOR、＝N-O-(CH2)nCON(R)2、＝N-N(R)2或＝N-N-SOR。
在化合物II的另一子實(shí)施方案中 R1是H、Cl或雜環(huán)基； R2和R4獨(dú)立地為OH或OR； R5是氫、烷基、芳基或芳烷基； A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(鹵素)-或-CH(鹵素)-CH(OH)-； X1與X2一起表示共價(jià)鍵；且 R7是＝O。
在化合物II的另一子實(shí)施方案中 R1是H、Cl或雜環(huán)基； R2和R4獨(dú)立地為OH或OR； R5是氫、烷基、芳基或芳烷基； A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(鹵素)-或-CH(鹵素)-CH(OH)-； X1與X2一起表示共價(jià)鍵；且 R7是＝N-OR、＝N-O-(CH2)nCOOR、＝N-O-(CH2)nCON(R)2、＝N-N(R)2、＝N-N-SOR、＝N-N-SO2R。
在化合物II的另一子實(shí)施方案中 R1是H、Cl或雜環(huán)基； R2和R4獨(dú)立地為OH或OR； R5是氫、烷基或芳基； A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(鹵素)-或-CH(鹵素)-CH(OH)-； X1是氫、鹵素、NH-O-(CH2)nCOOR或NH-O-(CH2)nCON(R)2NH-OR；且 R7是＝O、＝N-OR、＝N-O-(CH2)nCOOR、＝N-O-(CH2)nCON(R)2、＝N-N(R)2、＝N-N-SOR或＝N-N-SO2R。
在化合物II的又一子實(shí)施方案中 R1是H、Cl或雜環(huán)基； R2和R4獨(dú)立地為OH或OR； R5是氫、烷基、芳基或芳烷基； A1和A2一起是1，2-環(huán)氧乙烷或1，2-環(huán)丙二基； X1與X2一起表示共價(jià)鍵；且 R7是＝O、＝N-OR、＝N-O-(CH2)nCOOR、＝N-O-(CH2)nCON(R)2、＝N-N(R)2、＝N-N-SOR或＝N-N-SO2R。
在化合物II的又一子實(shí)施方案中 R1是H、Cl或雜環(huán)基； R2和R4獨(dú)立地為OH或OR； R5是氫、烷基、芳基或芳烷基； A1和A2一起是1，2-環(huán)氧乙烷或1，2-環(huán)丙二基； X1是氫、鹵素、NH-OR、NH-O-(CH2)nCOOR或NH-O-(CH2)nCON(R)2；且 R7是＝O、＝N-OR、＝N-O-(CH2)nCOOR、＝N-O-(CH2)nCON(R)2、＝N-N(R)2、＝N-N-SOR或＝N-N-SO2R。
在化合物II的進(jìn)一步的子實(shí)施方案中 R1是H或Cl； R2和R4獨(dú)立地為OH或OR； R5是氫； A1和A2一起是-CH＝CH-； X1與X2一起表示共價(jià)鍵；且 R7是＝O。
在化合物II的進(jìn)一步的子實(shí)施方案中 R1是H或Cl； R2和R4獨(dú)立地為OH或OR； R5是氫； A1和A2一起是-CH＝CH-； X1與X2一起表示共價(jià)鍵；且 R7是＝N-OR、＝N-O-(CH2)nCOOR或＝N-O-(CH2)nCON(R)2。
在化合物II的再一子實(shí)施方案中 R1是H或Cl； R2和R4獨(dú)立地為OH或OR； R5是氫； A1和A2一起是1，2-環(huán)氧乙烷； X1與X2一起表示共價(jià)鍵；且 R7是＝O。
在化合物II的再一子實(shí)施方案中 R1是H或Cl； R2和R4獨(dú)立地為OH或OR； R5是氫； A1和A2一起是1，2-環(huán)氧乙烷； X1與X2一起表示共價(jià)鍵；且 R7是＝N-OR、＝N-O-(CH2)nCOOR、＝N-O-(CH2)nCON(R)2。
在式II的進(jìn)一步的子實(shí)施方案中 R1是H或Cl； R2和R4為OH； R5是氫； A1和A2一起是-CH＝CH-； X1與X2一起表示共價(jià)鍵； R7是＝N-O-CH2COOR或＝N-O-CH2CON(R)2；且 R是H、低級(jí)烷基，或在相同氮上的兩個(gè)R一起形成六元雜環(huán)基環(huán)。
在本發(fā)明另一實(shí)施方案中，提供式III的化合物、其互變異構(gòu)體，或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥
其中 R、R1、R2、R3、R4、R5、X1、X2、X3、A1和A2如上文式I所定義。
在化合物III的一個(gè)子實(shí)施方案中，X1和X2一起形成雙鍵。
在化合物III的一個(gè)子實(shí)施方案中，R是氫或?；?。
在化合物III的一個(gè)子實(shí)施方案中，R1是H、鹵素或雜環(huán)基。
在化合物III的另一子實(shí)施方案中，R5是氫、烷基、低級(jí)烷基、芳基、雜芳基或芳基烷基。
在化合物III的另一子實(shí)施方案中，A1和A2一起是-CH2-CH2-或-CH＝CH-。
在化合物III的另一子實(shí)施方案中，A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(鹵素)-或CH(鹵素)-CH(OH)-。
在化合物III的進(jìn)一步的子實(shí)施方案中，A1和A2一起是1，2-環(huán)丙二基或1，2-環(huán)氧乙烷。
在式III的一個(gè)子實(shí)施方案中，提供了化合物，其中 R1是H、Cl或雜環(huán)基； R2和R4獨(dú)立地為OH或OR； R5是氫、烷基、芳基或芳烷基； A1和A2一起是-CH＝CH-；且 X1與X2一起表示共價(jià)鍵。
在式III的另一子實(shí)施方案中，提供了化合物，其中 R1是H、Cl或雜環(huán)基； R2和R4獨(dú)立地為OH或OR； R5是氫、烷基、芳基或芳烷基； A1和A2一起是-CH＝CH-；且 X1是氫、鹵素、NH-OR、NH-O-(CH2)nCOOR或NH-O-(CH2)nCON(R)2。
在式III的再一子實(shí)施方案中，提供了化合物，其中 R1是H、Cl或雜環(huán)基； R2和R4獨(dú)立地為OH或OR； R5是氫、烷基、芳基或芳烷基； A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(鹵素)-或-CH(鹵素)-CH(OH)-；且 X1與X2一起表示共價(jià)鍵。
在式III的進(jìn)一步的子實(shí)施方案中，提供了化合物，其中 R1是H、Cl或雜環(huán)基； R2和R4獨(dú)立地為OH或OR； R5是氫、烷基或芳基； A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(鹵素)-或-CH(鹵素)-CH(OH)-；且 X1是氫、鹵素、NH-OR、NH-O-(CH2)nCOOR或NH-O-(CH2)nCON(R)2。
在式III的又一子實(shí)施方案中，提供了化合物，其中 R1是H、Cl或雜環(huán)基； R2和R4獨(dú)立地為OH或OR； R5是氫、烷基或芳基； A1和A2一起是1，2-環(huán)氧乙烷或1，2-環(huán)丙二基；且 X1與X2一起表示共價(jià)鍵。
在式III的另一子實(shí)施方案中，提供了化合物，其中 R1是H、Cl或雜環(huán)基； R2和R4獨(dú)立地為OH或OR； R5是氫、烷基、芳基或芳烷基； A1和A2一起是1，2-環(huán)氧乙烷或1，2-環(huán)丙二基；且 X1是氫、鹵素、NH-OR、NH-O-(CH2)nCOOR、NH-O-(CH2)nCON(R)2。
在本發(fā)明的第四個(gè)主要實(shí)施方案中，提供式IV的化合物、其互變異構(gòu)體，或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥
其中 R、R1、R2、R3、R4、R5、A1和A2如上文式I所定義；且 R6是氫、OR或N(R)2；且其中R可以相同或不同。
在化合物IV的一個(gè)子實(shí)施方案中，R6是氫。
在化合物IV的另一子實(shí)施方案中，R6是O-乙?；騉-三氟乙?；?br> 在化合物IV的另一子實(shí)施方案中，R1是H、鹵素或雜環(huán)基。
在化合物IV的另一子實(shí)施方案中，R5是氫、烷基、低級(jí)烷基、芳基、雜芳基或芳基烷基。
在化合物IV的另一子實(shí)施方案中，A1和A2一起是-CH2-CH2-或-CH＝CH-。
在化合物IV的另一子實(shí)施方案中，A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(鹵素)-或-CH(鹵素)-CH(OH)-。
在化合物IV的進(jìn)一步的子實(shí)施方案中，A1和A2一起是1，2-環(huán)丙二基或1，2-環(huán)氧乙烷。
在式IV的一個(gè)子實(shí)施方案中，提供了化合物，其中 R1是H、Cl或雜環(huán)基； R2和R4獨(dú)立地為OH或OR； R5是氫、烷基、芳基或芳烷基； R6是氫或OR；且 A1和A2一起是-CH＝CH-。
在化合物IV的另一子實(shí)施方案中 R1是H、Cl或雜環(huán)基； R2和R4獨(dú)立地為OH或OR； R5是氫、烷基、芳基或芳烷基； R6是氫或OR；且 A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(鹵素)-或-CH(鹵素)-CH(OH)-。
在式IV的又一子實(shí)施方案中，提供了化合物，其中 R1是H、Cl或雜環(huán)基； R2和R4獨(dú)立地為OH或OR； R5是R5是氫、烷基、芳基或芳烷基； R6是氫或OR；且 A1和A2一起是1，2-環(huán)氧乙烷或1，2-環(huán)丙二基。
在本發(fā)明的第五個(gè)主要實(shí)施方案中，提供式V的化合物、其互變異構(gòu)體，或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥
其中R、R1、R2、R4、R3、R5、A1和A2如上文式I所定義；且 R6是(CH2)nC(O)OR、-(CH2)nC(O)N(R)2或-(CH2)nC(O)N(R)-OR；其中n是0、1、2或3；且其中R可以相同或不同。
在化合物V的一個(gè)子實(shí)施方案中，R6是-CH2C(O)N(Me)OMe。
在化合物V的一個(gè)子實(shí)施方案中，R1是H、鹵素或雜環(huán)基。
在化合物V的另一子實(shí)施方案中，R5是氫、烷基、低級(jí)烷基、芳基、雜芳基或芳基烷基。
在化合物V的另一子實(shí)施方案中，A1和A2一起是-CH＝CH-。
在化合物IV的又一子實(shí)施方案中，A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(鹵素)-或CH(鹵素)-CH(OH)-。
在化合物V的進(jìn)一步的子實(shí)施方案中，A1和A2一起是1，2-環(huán)丙二基或1，2-環(huán)氧乙烷。
在式V的一個(gè)子實(shí)施方案中，提供了化合物，其中 R1是H、Cl或雜環(huán)基； R2和R4獨(dú)立地為OH或OR； R5是氫、烷基、芳基或芳烷基；且 A1和A2一起是-CH＝CH-或-CH2-CH2-。
在式V的另一子實(shí)施方案中，提供了化合物，其中 R1是H、Cl或雜環(huán)基； R2和R4獨(dú)立地為OH或OR； R5是氫、烷基或芳基；且 A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(鹵素)-或-CH(鹵素)-CH(OH)-。
在式V的又一子實(shí)施方案中，提供了化合物，其中 R1是H、Cl或雜環(huán)基； R2和R4獨(dú)立地為OH或OR； R5是氫、烷基、芳基或芳烷基；且 A1和A2一起是1，2-環(huán)氧乙烷或1，2-環(huán)丙二基。
在本發(fā)明的具體實(shí)施方案中，提供表1所呈現(xiàn)的化合物、它們的互變異構(gòu)體，或它們的藥學(xué)可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥































藥學(xué)可接受的鹽和前藥 術(shù)語“藥學(xué)可接受的鹽”和“前藥”用于整個(gè)說明書以描述化合物的任何藥學(xué)可接受的形式(例如鹽、酯、磷酸酯、酯或相關(guān)的基團(tuán)的鹽)，當(dāng)其一旦向患者給藥時(shí)，就提供本說明書描述的化合物。在其中化合物具有足夠的堿性或酸性以形成穩(wěn)定的無毒性的酸或堿的鹽的情況下，給藥作為鹽的化合物可能是合適的。術(shù)語藥學(xué)可接受的鹽或復(fù)合物指保留本發(fā)明的化合物的預(yù)期生物活性并表現(xiàn)出最小的非預(yù)期的毒理學(xué)效應(yīng)的鹽或復(fù)合物。
此類鹽的非限制性實(shí)例是(a)由無機(jī)酸(例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、硝酸以及類似的酸)形成的酸加成鹽，例如硫酸鹽、硝酸鹽、碳酸氫鹽和碳酸鹽，和由有機(jī)酸形成的鹽，包括甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、丙二酸鹽、酒石酸鹽(tartarate)、琥珀酸鹽、安息香酸鹽、抗壞血酸鹽、α-酮戊二酸鹽和α-甘油磷酸鹽，所述有機(jī)酸為例如乙酸、草酸、酒石酸、琥珀酸、蘋果酸、抗壞血酸、安息香酸、丹寧酸、撲酸、海藻酸、多聚谷氨酸、萘磺酸、萘二磺酸(naphthalenedisulfonic acid)和多聚半乳糖醛酸(polygalcturonic acid)；(b)由以下形成的堿加成鹽金屬陽(yáng)離子(例如鋅、鈣、鉍、鋇、鎂、鋁、銅、鈷、鎳、鎘、鈉、鉀、鋰以及類似金屬陽(yáng)離子)或由氨、N，N-二芐基乙二胺、D-葡糖胺、四乙銨或乙二胺形成的陽(yáng)離子；或者(c)(a)和(b)的組合；例如丹寧酸鋅鹽或類似鹽。所述定義還包括本領(lǐng)域技術(shù)人員所知的藥學(xué)可接受的季鹽，其具體包括式-NR+A-的季銨鹽，其中R如上文定義且A是反離子，包括氯化物、溴化物、碘化物、-O-烷基、甲苯磺酸鹽、甲基磺酸鹽、磺酸鹽、磷酸鹽或羧酸鹽(例如苯甲酸鹽、琥珀酸鹽、乙酸鹽、乙醇酸鹽、馬來酸鹽、蘋果酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、抗壞血酸鹽、苯甲酸鹽、肉桂酸鹽(cinnamoate)、扁桃酸鹽(mandeloate)、芐酸鹽(benzyloate)和二苯基乙酸鹽)。
使用本領(lǐng)域公知的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)可獲得藥學(xué)可接受的鹽，例如通過用提供生理學(xué)可接受的陰離子的合適的酸與具有足夠堿性的化合物(例如胺)反應(yīng)。
藥學(xué)可接受的“前藥”指在宿主中代謝(例如水解或氧化)以形成本發(fā)明的化合物的化合物。前藥的典型實(shí)例包括在所述活性化合物的官能團(tuán)(fuctional moiety)上具有生物學(xué)不穩(wěn)定的保護(hù)基的化合物。前藥包括可以被氧化、還原、氨化、脫氨基化、羥基化、脫羥基化、水解、脫水、烷基化、脫烷基化、?；⒚擋；⒘姿峄?、脫磷酸化以產(chǎn)生所述活性化合物的化合物。例如，合適的前藥可以是被水解以形成酸的羧酸的酯或酰胺。前藥的非限制性實(shí)例包括但不限于烷基或芳烷基酯或酰胺，包括甲基、乙基、丙基、芐基和取代芐基的酯或酰胺。前藥還包括所述化合物的磷酸酯。
立體異構(gòu)和多晶型 具有手性中心的本發(fā)明的化合物可存在旋光和外消旋形式，并以旋光和外消旋形式分離。本發(fā)明涵蓋任何的外消旋、旋光、非對(duì)映異構(gòu)、多晶型或立體異構(gòu)形式的本發(fā)明的化合物或其混合物，其具有本文描述的有用性質(zhì)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，通過不對(duì)稱合成，使用本文描述的方法或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的合成轉(zhuǎn)化來制備旋光形式的化合物。
獲得旋光材料的方法的實(shí)例在本領(lǐng)域已知，并且至少包括下述的 i)晶體的物理分離——手工分離單個(gè)對(duì)映異構(gòu)體的宏觀晶體的技術(shù)。如果存在不同對(duì)映異構(gòu)體的晶體，即所述材料是混合體(conglomerate)并且所述晶體在視覺上不同，可使用這一技術(shù)； ii)同時(shí)結(jié)晶——單個(gè)對(duì)映異構(gòu)體從外消旋物的溶液中分別結(jié)晶的技術(shù)，只有在外消旋物是固態(tài)的混合體時(shí)才可； iii)酶法拆分——根據(jù)對(duì)映異構(gòu)體與酶的不同反應(yīng)速率來部分或完全分離外消旋物的技術(shù)； iv)酶促不對(duì)稱合成——合成的至少一個(gè)步驟使用酶促反應(yīng)以獲得期望的對(duì)映異構(gòu)體的對(duì)映異構(gòu)純的或富集的合成前體的合成技術(shù)； v)化學(xué)不對(duì)稱合成——在產(chǎn)生產(chǎn)品的不對(duì)稱性(即手性)的條件下從非手性前體合成期望的對(duì)映異構(gòu)體的合成技術(shù)，其可通過使用手性催化劑或手性助劑實(shí)現(xiàn)； vi)非對(duì)映異構(gòu)體分離——外消旋化合物與對(duì)映異構(gòu)純的試劑(手性助劑)反應(yīng)的技術(shù)，所述對(duì)映異構(gòu)純的試劑將單個(gè)對(duì)映異構(gòu)體轉(zhuǎn)化為非對(duì)映異構(gòu)體。然后根據(jù)它們目前更加不同的結(jié)構(gòu)差異，通過色譜或結(jié)晶進(jìn)行分離得到的非對(duì)映異構(gòu)體，并移除所述手性助劑以獲得期望的對(duì)映異構(gòu)體； vii)一級(jí)和二級(jí)不對(duì)稱轉(zhuǎn)化——非對(duì)映異構(gòu)體從外消旋物平衡產(chǎn)生在非對(duì)映異構(gòu)體溶液中占優(yōu)勢(shì)的預(yù)期的對(duì)映異構(gòu)體的技術(shù)，或預(yù)期對(duì)映異構(gòu)體的非對(duì)映異構(gòu)體的優(yōu)先結(jié)晶破壞所述平衡以致最終基本上所有所述材料轉(zhuǎn)化為預(yù)期對(duì)映異構(gòu)體的結(jié)晶非對(duì)映異構(gòu)體的技術(shù)。然后從所述非對(duì)映異構(gòu)體中釋放預(yù)期的對(duì)映異構(gòu)體； viii)動(dòng)力學(xué)拆分——該技術(shù)指在動(dòng)力學(xué)條件下根據(jù)所述對(duì)映異構(gòu)體與手性非外消旋的試劑或催化劑的不等反應(yīng)速率來實(shí)現(xiàn)對(duì)外消旋物部分或完全拆分(或被部分拆分的化合物的進(jìn)一步拆分)； ix)源于非外消旋前體的對(duì)映特異性(enantiospecific)合成——從非手性原料獲得預(yù)期對(duì)映異構(gòu)體并在所述合成過程中沒有或僅很少地危及立體化學(xué)完整性的合成技術(shù)； x)手性液相色譜法——由于對(duì)映異構(gòu)體與固定相不同的相互作用，在液體流動(dòng)相中分離外消旋物的對(duì)映異構(gòu)體的技術(shù)。所述固定相可由手性材料制成或者所述流動(dòng)相可含有額外的手性材料以驅(qū)使不同的相互作用； xi)手性氣相色譜法——揮發(fā)所述外消旋物，并由于在氣體流動(dòng)相中的對(duì)映異構(gòu)體與含有不揮發(fā)的非外消旋的手性吸附相的柱的不同相互作用來分離對(duì)映異構(gòu)體的技術(shù)； xii)用手性溶劑萃取——根據(jù)一種對(duì)映異構(gòu)體優(yōu)先溶解在特定手性溶劑來分離所述對(duì)映異構(gòu)體的技術(shù)；或者 xiii)跨手性膜轉(zhuǎn)運(yùn)——將外消旋物與薄膜屏障接觸的技術(shù)。所述屏障通常分離兩種混溶液體，一種含有外消旋物，并且驅(qū)動(dòng)力(例如濃度或壓力差)引起跨膜屏障的優(yōu)先轉(zhuǎn)運(yùn)。發(fā)生分離是由于所述膜的非外消旋手性性質(zhì)，其只允許外消旋物中的一種對(duì)映異構(gòu)體通過。
定義 無論何時(shí)本說明書中的術(shù)語被確定為一個(gè)范圍(即C1-4烷基)，所述范圍獨(dú)立地指所述范圍的每個(gè)要素。作為非限制性實(shí)例，C1-4烷基獨(dú)立地指C1、C2、C3或C4烷基。相似地，當(dāng)一個(gè)或多個(gè)取代基被稱為“獨(dú)立地選自”時(shí)，這是指每個(gè)取代基可以是該組的任何要素，并且這些組的任何組合可從所述組分離。例如，如果R1和R2可獨(dú)立地選自X、Y和Z，這分別包括以下組R1是X且R2是X；R1是X且R2是Y；R1是X且R2是Z；R1是Y且R2是X；R1是Y且R2是Y；R1是Y且R2是Z；R1是Z且R2是X；R1是Z且R2是Y；以及R1是Z且R2是Z。
除非另有說明，如本文所用，術(shù)語“烷基”指飽和直鏈、支鏈或環(huán)狀的伯、仲或叔烴，包括但不限于具有C1至C10的基團(tuán)。
術(shù)語“低級(jí)烷基”指飽和直鏈、支鏈或環(huán)狀的伯、仲或叔烴，包括具有C1至C4的基團(tuán)和如果適當(dāng)?shù)沫h(huán)狀烷基(例如環(huán)丙基)。
烷基的說明性實(shí)例是甲基、乙基、丙基、異丙基、環(huán)丙基、丁基、仲丁基、異丁基、叔丁基、環(huán)丁基、1-甲基丁基、1，1-二甲基丙基、戊基、環(huán)戊基、異戊基、新戊基、環(huán)戊基、己基、異己基和環(huán)己基。除非另有說明，所述烷基可以是未取代的或被選自一個(gè)或多個(gè)的基團(tuán)取代，所述基團(tuán)包括烷基、鹵代、鹵代烷基、羥基、羧基、?；?、酰氧基、氨基、酰氨基、羧基衍生物、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、硫醇、亞胺、磺酸、硫酸酯、磺?；?、硫烷基、亞硫?；?、氨磺?；?sulfamonyl)、酯、羧酸、酰胺、膦?；⒀蹯⒒?、磷?；?、膦、硫酯、硫醚、鹵化?；?、酐、肟、肼(hydrozine)、氨基甲酸酯、膦酸、磷酸酯、膦酸酯或不抑制所述化合物的藥理學(xué)活性的任何其他可行的功能基團(tuán)，其可按照需要未被保護(hù)或被保護(hù)，如本領(lǐng)域技術(shù)人員所知，例如Greene等人在Protective Groups in Organic Synthesis中所教導(dǎo)，John Wiley和Sons，第二版，1991。
如本文所用，術(shù)語“鹵代”或“鹵素”包括氯、溴、碘和氟。
如本文所用，術(shù)語“手性”包括具有與其鏡像不可重疊的性質(zhì)的化合物。
如本文所用，術(shù)語“互變異構(gòu)體”指在本領(lǐng)域中被認(rèn)為與描述的結(jié)構(gòu)處于平衡的代替結(jié)構(gòu)。例如下面的烯醇結(jié)構(gòu)是酮結(jié)構(gòu)的互變異構(gòu)體，并且認(rèn)為其與所述酮結(jié)構(gòu)處于平衡。

如本文所用，術(shù)語“溶劑合物”或“藥學(xué)可接受的溶劑合物”是由一個(gè)或多個(gè)溶劑分子與式I、II、III、IV或V的任何一個(gè)化合物或表1中描述的化合物中的一個(gè)或多個(gè)分子締合形成的溶劑合物。術(shù)語溶劑合物包括水合物(例如半水合物、一水合物、二水合物、三水合物、四水合物以及類似的水合物)。
術(shù)語“烷硫基”指具有特定碳原子數(shù)目的直鏈或支鏈烷硫基化物，比如例如C1-4烷硫基、乙硫基、-S-烷基、-S-烯基、-S-炔基等等。
術(shù)語“烷基氨基”或“芳基氨基”指分別具有一個(gè)或兩個(gè)烷基或芳基取代基的氨基。除非在本申請(qǐng)中另有具體陳述，當(dāng)烷基為合適基團(tuán)時(shí)，則它是低級(jí)烷基(無論是取代的還是未取代的)。
術(shù)語“烷基磺酰基”指具有特定碳原子數(shù)目的直鏈或支鏈烷基砜(alkylsulfone)，例如C1-6烷基磺酰基或甲基磺?；?br> 術(shù)語“烷氧羰基”指具有特定碳原子數(shù)目的羧酸衍生物的直鏈或支鏈酯，比如例如甲氧羰基，MeOCO-。
如本文所用，術(shù)語“硝基”表示-NO2；術(shù)語“巰基”表示-SH；且術(shù)語“磺?；北硎?SO2。
術(shù)語“烯基”和“炔基”指其中至少一個(gè)飽和C-C鍵由雙鍵或三鍵替代的烷基基團(tuán)，包括取代和未取代的形式。因此C2-6的烯基可以是乙烯基、烯丙基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、4-戊烯基、1-己烯基、2-己烯基、3-己烯基、4-己烯基或5-己烯基。相似地，C2-6炔基可以是乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、3-丁炔基、1-戊炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、4-戊炔基、1-己炔基、2-己炔基、3-己炔基、4-己炔基或5-己炔基。
術(shù)語“亞烷基”包括式-(CH2)n-的飽和直鏈的二價(jià)烷基，其中“n”可以是從1到10的任何整數(shù)。
“烷基”、“烷氧基”、“烯基”、“炔基”等包括直鏈和支鏈的基團(tuán)。然而，提及個(gè)別基團(tuán)例如“丙基”時(shí)，僅包括直鏈基團(tuán)，而支鏈異構(gòu)體例如“異丙基”被這樣特別定義。
如本文所用且除非另外指定，術(shù)語“芳基”指每個(gè)環(huán)中至多為8元的任何穩(wěn)定的單環(huán)、雙環(huán)或三環(huán)碳環(huán)，其中至少一個(gè)環(huán)是如休克爾4n+2法則定義的芳環(huán)且特別是苯基、聯(lián)苯基或萘基。該術(shù)語包括取代和未取代的基團(tuán)。所述芳基可被任何描述的基團(tuán)取代，包括但不限于選自下述一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)鹵素(氟、氯、溴或碘)、羥基、氨基、疊氮基、烷基氨基、芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸、硫酸酯、膦酸、磷酸酯或膦酸酯，它們可按照需要被保護(hù)或未被保護(hù)，如本領(lǐng)域技術(shù)人員所知，例如Greene等人在Protective Groups in Organic Synthesis中所教導(dǎo)，John Wiley &Sons，第三版，1999。
術(shù)語“烷芳基”或“烷基芳基”指具有芳基取代基的烷基或通過如本文所定義的芳基連接到分子的烷基。術(shù)語“芳烷基”或“芳基烷基”指被烷基取代基取代的芳基或通過以上定義的烷基連接到分子的芳基。
術(shù)語“環(huán)烷基”包括C3-8的環(huán)，包括但不限于環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基和環(huán)辛基。
術(shù)語“烷氧基”指具有連接的氧基的直鏈或支鏈烷基，所述烷基具有特定數(shù)目或在該范圍內(nèi)的任意數(shù)目的碳原子。例如“O-烷基”、C1-4烷氧基、甲氧基等。
術(shù)語“酰基”包括式C(O)R′的基團(tuán)，其中R′是直鏈、支鏈或環(huán)狀烷基(包括低級(jí)烷基)，氨基酸的羧酸酯殘基(carboxylate residue、芳基(包括苯基)、雜芳基、烷芳基、芳烷基(包括芐基)、烷氧基烷基(包括甲氧基甲基)、芳氧基烷基(例如苯氧基甲基)；或者取代的烷基(包括低級(jí)烷基)、芳基(包括被氯、溴、氟、碘、C1至C4烷基或C1至C4烷氧基任選取代的苯基)、磺酸酯(例如烷基或芳烷基磺酰基，包括甲磺酰基)、單、二或三磷酸酯、三苯甲基或單甲氧基-三苯甲基、取代芐基、烷芳基、芳烷基(包括芐基)、烷氧基烷基(包括甲氧基甲基)、芳氧基烷基(例如苯氧基甲基)。芳基任選地包括苯基。在非限制性實(shí)施方案中，?；ㄒ阴；?、三氟乙酰基、甲基乙酰基、環(huán)丙基乙?；h(huán)丙基-羧基、丙酰基、丁?；惗□；⒓乎；?、庚酰基辛?；?、新庚?；?、苯乙?；?、2-乙酰氧基-2-苯基乙?；?、二苯基乙酰基、α-甲氧基-α-三氟甲基-苯基乙?；?、溴乙酰基、2-硝基-苯乙酰基、4-氯-苯乙?；?、2-氯-2，2-二苯基乙?；?、2-氯-2-苯乙酰基、三甲基乙?；⒙榷阴；⑷阴；⒎阴；?、溴二氟乙?；?、甲氧基乙?；?、2-噻吩乙?；?2-thiopheneacetyl)、氯磺?；阴；?、3-甲氧基苯基乙?；?、苯氧基乙?；?、叔丁基乙?；⑷纫阴；温?乙?；⒍纫阴；?、7H-十二氟-庚酰基、全氟-庚?；?H-十二-氟庚?；?、7-氯十二氟-庚?；?-氯-十二氟-庚?；?、7H-十二氟庚酰基、7H-十二-氟庚?；⒕?氟-3，6-二氧雜-庚?；?、九氟-3，6-二氧雜庚?；?、全氟庚?；?、甲氧基苯甲?；?、甲基3-氨基-5-苯基噻吩-2-羧基、3，6-二氯-2-甲氧基-苯甲?；?、4-(1，1，2，2-四氟-乙氧基)-苯甲?；?、2-溴-丙?；ⅵ?氨基辛?；?、癸?；⒄旃秕；?、硬脂酰、3-環(huán)戊基-丙?；?、1-苯-羧基、O-乙?；馓阴；?O-acetylmandelyl)、特戊?；阴；?、1-金剛烷-羧基、環(huán)己烷-羧基、2，6-吡啶二羧基、環(huán)丙烷-羧基、環(huán)丁烷-羧基、全氟環(huán)己基羧基、4-甲基苯甲?；⒙燃谆悋f唑基羰基、全氟環(huán)己基羧基、巴豆酰、1-甲基-1H-吲唑-3-羰基、2-丙烯基、異戊?；?、1-吡咯烷羰基、4-苯基苯甲?；?。
術(shù)語“?；被卑ň哂小?N(R′)-C(＝O)-R′”結(jié)構(gòu)的基團(tuán)，其中每個(gè)R′獨(dú)立地如上文定義。
術(shù)語“酯”包括結(jié)構(gòu)“-C(＝O)-O-R′”或“-O-C(＝O)-R′”的基團(tuán)，其中R′是直鏈、支鏈或環(huán)狀烷基(包括低級(jí)烷基)、氨基酸的羧酸酯殘基、芳基(包括苯基)、雜芳基、烷芳基、芳烷基(包括芐基)、烷氧基烷基(包括甲氧基甲基)、芳氧基烷基(例如苯氧基甲基)；或者取代的烷基(包括低級(jí)烷基)、芳基(包括被氯、溴、氟、碘、C1至C4烷基或C1至C4烷氧基任選取代的苯基)、磺酸酯(例如烷基或芳烷基磺酰基，包括甲磺酰基)、單、二或三磷酸酯、三苯甲基或單甲氧基-三苯甲基、取代芐基、烷芳基、芳烷基(包括芐基)、烷氧基烷基(包括甲氧基甲基)、芳氧基烷基(例如苯氧基甲基)。芳基任選地包括苯基。
術(shù)語“雜原子”包括在雜環(huán)化合物的結(jié)構(gòu)中碳或氫以外的原子，其非限制性實(shí)例是氮、氧、硫、磷或硼。
術(shù)語“羰基”或“包括結(jié)構(gòu)“-C(＝O)-X-R′”或“X-C(＝O)-R′”的基團(tuán)，其中X是O、S或鍵，且每個(gè)R獨(dú)立地如上文對(duì)“酯”的定義。
如本文所用，術(shù)語“雜環(huán)”、“雜環(huán)基”或“雜環(huán)的”包括具有四到十四元(優(yōu)選五到十)的非芳族環(huán)系統(tǒng)，其中一個(gè)或多個(gè)環(huán)碳原子(優(yōu)選一到四個(gè))各自被雜原子取代。雜環(huán)的實(shí)例包括3-1H-苯并咪唑-2-酮、(1-取代的)-2-氧代-苯并咪唑-3-基、2-四氫-呋喃基、3-四氫呋喃基、2-四氫吡喃基、3-四氫吡喃基、4-四-氫吡喃基、[1，3]-二氧雜環(huán)戊烷基([1，3]-dioxalanyl)、[1，3]-二硫環(huán)戊烷基(dithiolanyl)、[1，3]-二噁烷基、2-四-氫-噻吩基、3-四氫噻吩基、2-嗎啉基、3-嗎啉基、4-嗎啉基、2-硫嗎啉基、3-硫嗎啉基、4-硫嗎啉基、1-吡咯烷基、2-吡咯烷基、3-吡咯烷基、1-哌嗪基、2-哌嗪基、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-哌啶基、4-噻唑烷基、diazolonyl、N-取代diazolonyl、1-苯并[c]吡咯酮基(1-phthalimidinyl)、苯并噁烷基(benzoxanyl)、苯并吡咯烷基、苯并哌啶基、苯并氧戊環(huán)烷基(benzoxolanyl)、苯并硫戊環(huán)烷基和苯并噻烷基(benzothianyl)。如本文所用，術(shù)語“雜環(huán)基”或“雜環(huán)的”的范圍內(nèi)還包括其中非芳族的含有雜原子的環(huán)稠合至一個(gè)或多個(gè)芳香或非芳香的環(huán)的基團(tuán)，例如二氫吲哚基、苯并二氫吡喃基、菲啶基或四氫喹啉基，其中連接的基團(tuán)或點(diǎn)在非芳族的含有雜原子的環(huán)上。無論是飽和的還是部分不飽和的，術(shù)語“雜環(huán)”、“雜環(huán)基”或“雜環(huán)的”還指被任選取代的環(huán)。
單獨(dú)使用或作為如“雜芳烷基”或“雜芳基烷氧基”的較大基團(tuán)的部分使用時(shí)，術(shù)語“雜芳基”指具有五到十四元的雜芳基環(huán)基團(tuán)。雜芳基環(huán)的實(shí)例包括2-呋喃基、3-呋喃基、3-呋咱基、N-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、5-咪唑基、3-異噁唑基、4-異噁唑基、5-異噁唑基、2-噁二唑基(2-oxadiazolyl)、5-噁二唑基、2-噁唑基、4-噁唑基、5-噁唑基、1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、1-吡唑基、2-吡唑基、3-吡唑基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基、3-噠嗪基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、5-四唑基、2-三唑基、5-三唑基、2-噻吩基、3-噻吩基、咔唑基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、苯并三唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、異喹啉基、吲唑基、異吲哚基、吖啶基和苯并異噁唑基。如本文所用，術(shù)語“雜芳基”的范圍內(nèi)還包括其中雜原子的環(huán)稠合至一個(gè)或多個(gè)芳族或非芳族的環(huán)的基團(tuán)，其中連接的基團(tuán)或點(diǎn)在雜芳香的環(huán)上。實(shí)例包括四氫喹啉基、四氫異喹啉基和吡啶并[3，4-d]嘧啶基。術(shù)語“雜芳基”還指被任選取代的環(huán)。術(shù)語“雜芳基”與術(shù)語“雜芳基環(huán)”或術(shù)語“雜芳族的(heteroaromatic)”可以互換使用。
如本文所用，除非另有說明，術(shù)語“氨基”包括由結(jié)構(gòu)“-N(R)2”代表的基團(tuán)，且包括被烷基、芳基、雜環(huán)基和/或磺酰基任選取代的伯、仲和叔胺。因此(R)2可代表兩個(gè)氫原子、兩個(gè)烷基基團(tuán)或一個(gè)氫原子和一個(gè)烷基基團(tuán)。
如本文所用，術(shù)語“酰氨基”包括氨基取代的羰基，而術(shù)語“脒基”指具有結(jié)構(gòu)“-C(＝NH)-NH2”的基團(tuán)。
如本文所用，術(shù)語“季胺”包括具有正電荷的氮的季銨鹽。它們通過所關(guān)注的化合物中的堿性氮原子與合適的季銨化劑(例如碘甲烷或芐基碘)之間的反應(yīng)形成。伴隨著季胺的合適的反離子包括乙酸離子、三氟乙酸離子、氯離子、溴離子和碘離子。
術(shù)語“取代的”包括一種或多種指定的取代基的多種程度的取代，所述取代基諸如鹵代、羥基、硫代、烷基、烯基、炔基、硝基、氰基、疊氮基、氨基、酰胺基(carboxamido)等。在存在多種取代可能性的情況下，所述化合物由一個(gè)或多個(gè)公開的或要求保護(hù)的取代基取代，其相互獨(dú)立，且采用一次或多次。
如本文所用且除非另外定義，術(shù)語“保護(hù)的”指加到氧、氮或磷原子以防止其進(jìn)一步反應(yīng)或?yàn)榱似渌康牡幕鶊F(tuán)。許多氧和氮的保護(hù)基為有機(jī)合成領(lǐng)域的技術(shù)人員所知。
如本文所用，術(shù)語“保護(hù)基”指連接到反應(yīng)基團(tuán)(包括雜原子，例如氧或氮)從而防止所述反應(yīng)基團(tuán)參與反應(yīng)的基團(tuán)?？墒褂肎reene等人，ProtectiveGroups in Organic Synthesis，John Wiley和Sons，第二版，1991中教導(dǎo)的任何保護(hù)基。合適保護(hù)基的實(shí)例包括但不限于烷氧基烷基，諸如乙氧基甲基和甲氧基甲基；甲硅烷基保護(hù)基，諸如叔丁基二甲基甲硅烷基(TBS)、苯基二甲基甲硅烷基、三甲基甲硅烷基(TMS)、2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基(SEM)和2-三甲基甲硅烷基乙基；以及芐基和取代芐基。
要理解，除非另外指定，以上和本文中提及的基團(tuán)的各種可能立體異構(gòu)體在單個(gè)術(shù)語和實(shí)例的含義的范圍內(nèi)。作為說明性實(shí)例，“1-甲基-丁基”存在(R)和(S)的形式，因此除非另外指定，(R)-1-甲基-丁基和(S)-1-甲基-丁基被術(shù)語“1-甲基-丁基”涵蓋。
術(shù)語“患者”包括人類和獸醫(yī)學(xué)的個(gè)體。
“有效量”是當(dāng)向患者給藥所述化合物時(shí)達(dá)到有益結(jié)果的化合物的量或可選地具有預(yù)期的體內(nèi)或體外活性的化合物的量。在增殖性病癥的情況下，有益的臨床結(jié)果包括與疾病或病癥相關(guān)的癥狀的程度上的減少或嚴(yán)重性的降低，和/或與缺少所述治療相比，患者的壽命和/或生活質(zhì)量的提高。例如，對(duì)于患有癌癥的個(gè)體，“有益的臨床結(jié)果”包括腫瘤質(zhì)量的減小、腫瘤生長(zhǎng)速率的減少、轉(zhuǎn)移的減少、與癌癥相關(guān)的癥狀的嚴(yán)重性的降低和/或與缺少所述治療相比，個(gè)體的壽命的增加。向個(gè)體給藥的化合物的精確量將依賴于疾病或疾患的類型和嚴(yán)重性以及患者的特征，例如一般健康、年齡、性別、體重和對(duì)藥物的耐受性。其還會(huì)依賴于增殖性病癥的程度、嚴(yán)重性和類型。技術(shù)人員將能夠根據(jù)這些和其他因素確定合適的劑量。
如本文所用，術(shù)語“激酶抑制量”指與對(duì)照相比，抑制激酶的所述化合物的量(按照本文描述的方法測(cè)試)。
如本文所用，術(shù)語“HSP 90-抑制量”指與對(duì)照相比，抑制HSP90的所述化合物的量(按照本文描述的方法測(cè)試)。
如本文所用，術(shù)語“生物樣品”包括但不限于細(xì)胞培養(yǎng)物或其提取物；適于體外測(cè)定的酶制品；獲自哺乳動(dòng)物的活組織檢查材料或其提取物；以及血液、唾液、尿、糞便、精液、淚液或其他體液或它們的提取物。
術(shù)語“癌癥”包括但不限于實(shí)體瘤和血源性腫瘤并且包括但不限于以下癌癥乳腺癌、卵巢癌、宮頸癌、前列腺癌、睪丸癌、泌尿生殖道癌、食管癌、喉癌、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、胃癌、皮膚癌、角化棘皮瘤、肺癌、表皮樣癌、大細(xì)胞癌、小細(xì)胞癌、肺腺癌、骨癌、結(jié)腸癌、腺瘤、胰腺癌、腺癌、甲狀腺癌、濾泡癌、未分化癌、乳頭狀癌、精原細(xì)胞瘤、黑素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝癌和膽道癌、腎癌、骨髓樣病癥、淋巴樣病癥、霍奇金氏病、毛細(xì)胞、口腔癌和咽(口)癌、唇癌、舌癌、口癌、咽癌、小腸癌、結(jié)腸-直腸癌、大腸癌、直腸癌、腦癌和中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌癥以及白血病。術(shù)語“癌癥”包括原發(fā)性癌癥、治療繼發(fā)性癌癥和轉(zhuǎn)移癌癥。
術(shù)語“藥學(xué)可接受的載體”指可與本發(fā)明的化合物一起向患者給藥并且不破壞其藥理學(xué)活性的無毒載體、佐劑或媒介物(vehicle)。
如本文所用，術(shù)語“GSK-3介導(dǎo)的疾病”或“GSK-3介導(dǎo)的疾患”表示其中已知GSK-3起作用的任何疾病或其他有害的疾患或狀態(tài)。此類疾病或疾患包括但不限于糖尿病、阿爾茨海默病、亨廷頓病、帕金森病、AIDS-相關(guān)的癡呆、肌萎縮性側(cè)索硬化(AML)、多發(fā)性硬化(MS)、精神分裂癥、心肌細(xì)胞肥大(cardiomycete hypertrophy)、再灌注/缺血和脫發(fā)。
如本文所用，術(shù)語“CDK-2介導(dǎo)的疾病”或“CDK-2介導(dǎo)的疾患”指其中已知CDK-2起作用的任何疾病或其他有害的疾患。術(shù)語“CDK-2介導(dǎo)的疾病”或“CDK-2介導(dǎo)的疾患”還指通過用CDK-2抑制劑治療而緩解的那些疾病或疾患。此類疾患包括但不限于癌癥、阿爾茨海默病、再狹窄、血管發(fā)生、腎小球性腎炎、巨細(xì)胞病毒、HIV、皰疹、銀屑病、動(dòng)脈粥樣硬化、脫發(fā)和自身免疫疾病例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，諸如描述于例如Fischer，P.M.和Lane，D.P.，Current Medicinal Chemistry，7，1213-1245(2000)；Mani，S.，Wang，C，Wu，K.，F(xiàn)rancis，R.和Pestell，R.，Exp.Opin.Invest.Drugs，9，1849(2000)；Fry，D.W.和Garrett，M.D.，Current Opinion in Oncologic，Endocrine& Metabolic Investigational Drugs，2，40-59(2000)。
如本文所用，術(shù)語“ERK介導(dǎo)的疾病”或“ERK介導(dǎo)的疾患”指其中ERK可能起作用的任何疾病或其他有害的疾患。術(shù)語“ERK-2介導(dǎo)的疾病”或“ERK-2介導(dǎo)的疾患”還指通過用ERK-2抑制劑治療而緩解的那些疾病或疾患。此類疾患包括但不限于癌癥、中風(fēng)、糖尿病、肝腫大、心血管疾病(包括心肥大)、阿爾茨海默病、囊性纖維化、病毒性疾病、自身免疫疾病、動(dòng)脈粥樣硬化、再狹窄、銀屑病、過敏性病癥(包括哮喘)、炎癥、神經(jīng)學(xué)的病癥和激素相關(guān)的疾病。ERK-2蛋白激酶及其在多種疾病中的牽連已被描述于例如Bokemeyer等人，1996，Kidney Int.49，1187；Anderson等人，1990，Nature 343，651；Crews等人，1992，Science 258，478；Bjorbaek等人，1995，J.Biol.Chem.270，18848；Rouse等人，1994，Cell 78，1027；Raingeaud等人，1996，Mol.Cell Biol.16，1247；Raingeaud等人，1996；Chen等人，1993Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90，10952；Oliver等人，1995，Proc.Soc.Exp.Biol.Med.210，162；Moodie等人，1993，Science 260，1658；Frey和Mulder，1997，Cancer Res.57，628；Sivaraman等人，1997，J Clin.Invest.99，1478；Whelchel等人，1997，Am.J.Respir.Cell Mol.Biol.16，589。
如本文所用，術(shù)語“AKT介導(dǎo)的疾病”或“AKT介導(dǎo)的疾患”指其中已知AKT起作用的任何疾病或其他有害的疾患。術(shù)語“AKT介導(dǎo)的疾病”或“AKT介導(dǎo)的疾患”還指通過用AKT抑制劑治療而緩解的那些疾病或疾患。AKT介導(dǎo)的疾病或疾患包括但不限于增殖性病癥、癌癥和神經(jīng)變性病癥。AKT(也稱為蛋白激酶B)與多種疾病的關(guān)聯(lián)已被描述于例如Khwaja，A.，Nature，第33-34頁(yè)，1990；Zang，Q.Y.等人，Oncogene，192000；Kazuhiko，N.等人，The Journal of Neuroscience，202000。
如本文所用，術(shù)語“Src介導(dǎo)的疾病”或“Src介導(dǎo)的疾患”指其中已知Src起作用的任何疾病或其他有害的疾患。術(shù)語“Src介導(dǎo)的疾病”或“Src介導(dǎo)的疾患”還指通過用Src抑制劑治療而緩解的那些疾病或疾患。此類疾患包括但不限于高鈣血癥、骨質(zhì)疏松癥、骨關(guān)節(jié)炎、癌癥、骨轉(zhuǎn)移的對(duì)癥治療和佩吉特病。Src蛋白激酶和其在多種疾病中的牽連已被描述于例如Soriano，Cell，69，551(1992)；Soriano等人，Cell，64，693(1991)；Takayanagi，J.Clin.Invest.，104，137(1999)；Boschelli，Drugs of the Future 2000，25(7)，717，(2000)；Talamonti，J.Clin.Invest.，91，53(1993)；Lutz，Biochem.Biophys.Res.243，503(1998)；Rosen，J.Biol.Chem.，261，13754(1986)；Bolen，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，84，2251(1987)；Masaki，Hepatology，27，1257(1998)；Biscardi，Adv.Cancer Res.，76，61(1999)；Lynch，Leukemia，7，1416(1993)；Wiener，Clin.Cancer Res.，5，2164(1999)；Staley，Cell Growth Diff.，8，269(1997)。
如本文所用，術(shù)語“Lck介導(dǎo)的疾病”或“Lck介導(dǎo)的疾患”指其中已知Lck起作用的任何疾病狀態(tài)或其他有害的疾患。術(shù)語“Lck介導(dǎo)的疾病”或“Lck介導(dǎo)的疾患”還指通過用Lck抑制劑治療而緩解的那些疾病或疾患。Lck介導(dǎo)的疾病或疾患包括但不限于自身免疫疾病例如移植排斥、變態(tài)反應(yīng)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和白血病。Lck與多種疾病的關(guān)聯(lián)已被描述于例如Molina等人，Nature，357，161(1992)。
如本文所用，術(shù)語“Abl介導(dǎo)的疾病”或“Abl介導(dǎo)的疾患”指其中已知Abl起作用的任何疾病狀態(tài)或其他有害的疾患。術(shù)語“Abl介導(dǎo)的疾病”或“Abl介導(dǎo)的疾患”還指通過用Abl抑制劑治療而緩解的那些疾病或疾患。Abl介導(dǎo)的疾病或疾患包括但不限于白血病，特別是慢性骨髓性白血病。Abl與多種疾病的關(guān)聯(lián)已被描述于例如Druker等人，N.Engl J.Med.2001，344，1038-1042。
如本文所用，術(shù)語“cKit介導(dǎo)的疾病”或“cKit介導(dǎo)的疾患”指其中已知cKit起作用的任何疾病狀態(tài)或其他有害的疾患。術(shù)語“cKit介導(dǎo)的疾病”或“cKit介導(dǎo)的疾患”還指通過用cKit抑制劑治療而緩解的那些疾病或疾患。cKit介導(dǎo)的疾病或疾患包括但不限于肥大細(xì)胞增多癥/肥大細(xì)胞白血病、胃腸基質(zhì)瘤、鼻竇自然殺傷細(xì)胞/T細(xì)胞淋巴瘤、精原細(xì)胞瘤/無性細(xì)胞瘤、甲狀腺癌(throid carcinoma)、小細(xì)胞肺癌、惡性黑素瘤、腺樣囊性癌、卵巢癌、急性骨髓性白血病、退行性(anaplastic)大細(xì)胞淋巴瘤、血管肉瘤、子宮內(nèi)膜癌、小兒T細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病/淋巴瘤、乳腺癌和前列腺癌。cKit與多種疾病的關(guān)聯(lián)已被描述于例如Heinrich等人，J.ClinicalOncology 2002，20，1692-1703。
如本文所用，術(shù)語“Flt3介導(dǎo)的疾病”或“Flt3介導(dǎo)的疾患”指其中已知Flt3起作用的任何疾病狀態(tài)或其他有害的疾患。術(shù)語“Flt3介導(dǎo)的疾病”或“Flt3介導(dǎo)的疾患”還指通過用Flt3抑制劑治療而緩解的那些疾病或疾患。Flt3介導(dǎo)的疾病或疾患包括但不限于急性骨髓性白血病、混合譜系白血病和急性淋巴細(xì)胞性白血病。Flt3與多種疾病的關(guān)聯(lián)已被描述于例如Sternberg和Licht，Curr.Opin Hematol.2004，12，7-13。
如本文所用，術(shù)語“KDR介導(dǎo)的疾病”或“KDR介導(dǎo)的疾患”指其中已知KDR起作用的任何疾病狀態(tài)或其他有害的疾患。術(shù)語“KDR介導(dǎo)的疾病”或“KDR介導(dǎo)的疾患”還指通過用KDR抑制劑治療而緩解的那些疾病或疾患。KDR介導(dǎo)的疾病或疾患包括但不限于肺癌、乳腺癌、胃腸道癌、腎癌、膀胱癌、卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌、顱內(nèi)腫瘤包括(包括多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(glioblatoma multiforme))、偶發(fā)性毛細(xì)血管成血管細(xì)胞瘤(sporadiccapillary hemangioblastoma)、血液系統(tǒng)惡性腫瘤(hematological malignancies)(包括T細(xì)胞淋巴瘤、急性成淋巴細(xì)胞性白血病、Burkitt淋巴瘤和早幼粒細(xì)胞性白血病)、老年性黃斑變性、皰疹性眼病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腦缺血和子宮內(nèi)膜異位。KDR與多種疾病的關(guān)聯(lián)已被描述于例如Ferrara，Endocrine Reviews 2004，25，581-611。
如本文所用，術(shù)語“HSP90介導(dǎo)的疾病”或“HSP90介導(dǎo)的疾患”指其中已知HSP90起作用的疾患。所述疾患包括但不限于炎性病癥、異常細(xì)胞增殖、自身免疫病癥、局部缺血、纖維發(fā)生(fibrogenetic)病癥(包括但不限于硬皮病、多肌炎、系統(tǒng)性狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、肝硬化、瘢痕形成、間質(zhì)性腎炎和肺纖維化)。(Strehlow，WO 02/02123；PCT/US01/20578)。
治療方法 本文描述的化合物特別用于治療或預(yù)防激酶介導(dǎo)的或HSP90介導(dǎo)的病癥。在一個(gè)實(shí)施方案中，本文描述的化合物用于治療或預(yù)防增殖性病癥，包括癌癥轉(zhuǎn)移。在另一實(shí)施方案中，本文描述的化合物用于治療或預(yù)防與激酶或HSP90有關(guān)的炎性病癥。
本發(fā)明的一個(gè)方面涉及用于治療癌癥的化合物和組合物。
本發(fā)明的另一方面涉及治療以下癌癥乳腺癌、卵巢癌、宮頸癌、前列腺癌、睪丸癌、泌尿生殖道癌、食管癌、喉癌、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、胃癌、皮膚癌、角化棘皮瘤、肺癌、表皮樣癌、大細(xì)胞癌、小細(xì)胞癌、肺腺癌、骨癌、結(jié)腸癌、腺瘤、胰腺癌、腺癌、甲狀腺癌、濾泡癌、未分化癌、乳頭狀癌、精原細(xì)胞瘤、黑素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝癌和膽道癌、腎癌、骨髓樣病癥、淋巴樣病癥、霍奇金氏病、毛細(xì)胞、口腔癌和咽(口)癌、唇癌、舌癌、口癌、咽癌、小腸癌、結(jié)腸-直腸癌、大腸癌、直腸癌、腦癌和中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌癥以及白血病。
本發(fā)明的另一方面是治療癌癥的方法，其包括向患有癌癥的患者給藥有效量的本文描述的式I、II、III、IV或V的化合物。
血管發(fā)生的特征為內(nèi)皮細(xì)胞增殖從而形成新血管(通常稱為新血管形成)。抑制內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂導(dǎo)致抑制血管發(fā)生。因此本發(fā)明的另一方面涉及抑制不期望的有絲分裂，包括不期望的血管發(fā)生。如本文定義，以不期望的細(xì)胞有絲分裂為特征的哺乳動(dòng)物疾病包括但不限于內(nèi)皮細(xì)胞的過度或異常刺激(例如動(dòng)脈粥樣硬化)、實(shí)體瘤和腫瘤轉(zhuǎn)移、良性腫瘤(例如血管瘤)、沙眼和化膿性肉芽腫、血管功能障礙、異常的傷口愈合、炎性和免疫病癥、白塞病、痛風(fēng)或痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、伴隨異常的血管發(fā)生的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、皮膚疾病(例如銀屑病)、糖尿病性視網(wǎng)膜病變和其他眼部血管發(fā)生疾病，例如早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病(晶狀體后纖維增生癥)、黃斑變性、角膜移植物排斥、新生血管性青光眼或奧-韋綜合征(Osler-Weber-Rendu病)。
其他非預(yù)期的血管發(fā)生包括包含排卵和囊胚植入的正常過程。以上描述的組合物可用作節(jié)育劑，其減少或防止胚胎植入所需的子宮血管形成。因此，以上描述的組合物可用于阻斷排卵和囊胚的植入或阻斷月經(jīng)(誘導(dǎo)閉經(jīng))。
根據(jù)本發(fā)明，可治療與不期望的有絲分裂相關(guān)的疾病，包括新血管形成。這樣的疾病包括但不限于眼新生血管性疾病、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病、角膜移植物排斥、新生血管性青光眼和晶狀體后纖維增生癥、流行性角膜結(jié)膜炎、維生素A缺乏病、接觸鏡超帶癥、異位性角膜炎、上角膜緣角結(jié)膜炎、翼狀胬肉干燥性角膜炎、干燥綜合征、紅斑痤瘡、小水皰病、梅毒、分枝桿菌感染、脂質(zhì)變性、化學(xué)燒傷、細(xì)菌性潰瘍、真菌性潰瘍、單純皰疹感染、帶狀皰疹感染、原蟲感染、卡波西肉瘤、莫倫潰瘍、Terrien邊緣角膜變性、邊緣性角質(zhì)層分離、創(chuàng)傷、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性狼瘡、多動(dòng)脈炎、韋格內(nèi)結(jié)節(jié)病、鞏膜炎、多型糜爛性紅斑綜合征、類天皰瘡、放射狀角膜切開術(shù)和角膜移植排斥。
根據(jù)本發(fā)明，可治療與不期望的有絲分裂相關(guān)的其他疾病，包括新血管形成。這樣的疾病包括但不限于鐮狀細(xì)胞貧血、結(jié)節(jié)病、彈性假黃色瘤、佩吉特病、靜脈阻塞、動(dòng)脈阻塞、頸動(dòng)脈阻塞性疾病、慢性葡萄膜炎/玻璃體炎、萊姆病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、伊爾斯病、白塞病、引起視網(wǎng)膜炎或脈絡(luò)膜炎的感染、眼假組織胞漿菌病、貝斯特病、近視、視窩、斯塔加特病、睫狀體扁平部炎、慢性視網(wǎng)膜脫離、高粘滯綜合征、弓形體病或激光后并發(fā)癥。其他疾病包括但不限于與發(fā)紅相關(guān)的疾病(虹膜和角的新血管形成)和由纖維血管或纖維組織的異常增殖引起的疾病，包括所有形式的增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病，無論是否與糖尿病相關(guān)。
本發(fā)明的另一方面涉及治療炎性疾病，包括但不限于內(nèi)皮細(xì)胞的過度的或異常的刺激(例如動(dòng)脈粥樣硬化)、實(shí)體瘤和腫瘤轉(zhuǎn)移、良性腫瘤(例如血管瘤、聽神經(jīng)瘤)、沙眼和化膿性肉芽腫、血管功能障礙、異常的傷口愈合、炎性和免疫病癥、白塞病、痛風(fēng)或痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、伴隨異常的血管發(fā)生的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、皮膚疾病(例如銀屑病)、糖尿病性視網(wǎng)膜病變和其他眼部血管發(fā)生疾病，例如早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病(晶狀體后纖維增生癥)、黃斑變性、角膜移植物排斥、新生血管性青光眼或奧-韋綜合征(Osler-Weber-Rendu病)。其他不期望的血管發(fā)生包括包含排卵和囊胚植入的正常過程。因此，以上描述的組合物可用于阻斷排卵和囊胚的植入或阻斷月經(jīng)(誘導(dǎo)閉經(jīng))。
本發(fā)明的另一方面涉及在患者中抑制HSP90活性的方法，其包括向患者給藥有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或前藥。本發(fā)明還提供治療由HSP90介導(dǎo)的疾病的方法。
本發(fā)明的另一方面涉及在患者中抑制Aurora A活性的方法，其包括向患者給藥有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或前藥。
本發(fā)明的另一方面涉及用GSK-3抑制劑治療或預(yù)防GSK-3介導(dǎo)的疾病的方法，其包括向患者給藥有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或前藥。
本發(fā)明的一個(gè)方面涉及在需要其的患者中增強(qiáng)糖原合成和/或降低葡萄糖的血液水平的方法，所述方法包括向所述患者給藥治療有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其藥物組合物。此方法特別用于糖尿病患者。另一方法涉及抑制過度磷酸化的Tau蛋白的產(chǎn)生，其用于中止或延緩阿爾茨海默病的進(jìn)程。另一方法涉及抑制β-連環(huán)蛋白的磷酸化，其用于治療精神分裂癥。
本發(fā)明的另一方面涉及在生物樣品中抑制GSK-3的活性，所述方法包括使式I、II、III、IV或V的GSK-3抑制劑接觸生物樣品。
本發(fā)明的另一方面涉及在患者中抑制GSK-3活性的方法，其包括向所述患者給藥式I、II、III、IV或V的化合物或包含所述化合物的組合物。
本發(fā)明的另一方面涉及治療或預(yù)防CDK-2介導(dǎo)的疾病的方法，其包括向需要此類治療的患者給藥治療有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其藥物組合物。
本發(fā)明的另一方面涉及在生物樣品或患者中抑制CDK-2活性，所述方法包括向所述患者給藥式I、II、III、IV或V的化合物或包含所述化合物的組合物。
本發(fā)明的另一方面涉及治療或預(yù)防ERK-2介導(dǎo)的疾病的方法，其包括向需要此類治療的患者給藥治療有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其藥物組合物。
本發(fā)明的另一方面涉及在生物樣品或患者中抑制ERK-2活性，所述方法包括向所述患者給藥式I、II、III、IV或V的化合物或包含所述化合物的組合物。
本發(fā)明的另一方面涉及治療或預(yù)防AKT介導(dǎo)的疾病的方法，其包括向需要此類治療的患者給藥治療有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其藥物組合物。
本發(fā)明的另一方面涉及在生物樣品或患者中抑制AKT活性，所述方法包括向所述患者給藥式I、II、III、IV或V的化合物或包含所述化合物的組合物。
本發(fā)明的另一方面涉及治療或預(yù)防Src介導(dǎo)的疾病的方法，其包括向需要此類治療的患者給藥治療有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其藥物組合物。
本發(fā)明的另一方面涉及在生物樣品或患者中抑制Src活性，所述方法包括向所述患者給藥式I、II、III、IV或V的化合物或包含所述化合物的組合物。
本發(fā)明的另一方面涉及用Lck抑制劑治療或預(yù)防Lck介導(dǎo)的疾病的方法，所述方法包括向需要此類治療的患者給藥治療有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其藥物組合物。
本發(fā)明的另一方面涉及在生物樣品或患者中抑制Lck活性，所述方法包括向所述患者給藥式I、II、III、IV或V的化合物或包含所述化合物的組合物。
本發(fā)明的另一方面涉及用Abl抑制劑治療或預(yù)防Abl介導(dǎo)的疾病的方法，所述方法包括向需要此類治療的患者給藥治療有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其藥物組合物。
本發(fā)明的另一方面涉及在生物樣品或患者中抑制Abl活性，所述方法包括向所述患者給藥式I、II、III、IV或V的化合物或包含所述化合物的組合物。
本發(fā)明的另一方面涉及治療或預(yù)防cKit介導(dǎo)的疾病的方法，其包括向需要此類治療的患者給藥治療有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其藥物組合物。
本發(fā)明的另一方面涉及在生物樣品或患者中抑制cKit活性，所述方法包括向所述患者給藥式I、II、III、IV或V的化合物或包含所述化合物的組合物。
本發(fā)明的另一方面涉及治療或預(yù)防Flt3介導(dǎo)的疾病的方法，其包括向需要此類治療的患者給藥治療有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其藥物組合物。
本發(fā)明的另一方面涉及在生物樣品或患者中抑制Flt3活性，所述方法包括向所述患者給藥式I、II、III、IV或V的化合物或包含所述化合物的組合物。
本發(fā)明的另一方面涉及治療或預(yù)防KDR介導(dǎo)的疾病的方法，其包括向需要此類治療的患者給藥治療有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其藥物組合物。
本發(fā)明的另一方面涉及在生物樣品或患者中抑制KDR活性，所述方法包括向所述患者給藥式I、II、III、IV或V的化合物或包含所述化合物的組合物。
有效抑制蛋白激酶的量是當(dāng)與缺少抑制劑時(shí)的酶活性比較時(shí)，引起對(duì)所述激酶活性可測(cè)量的抑制的量。任何方法均可用于確定抑制，例如下文描述的生物測(cè)試實(shí)施例。
藥物組合物 通過吸入、全身、口服、局部或經(jīng)皮給藥含有有效量的本文描述的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、酯或前藥(任選地在藥學(xué)可接受的載體或稀釋劑中)的組合物，可治療受呼吸病癥困擾的哺乳動(dòng)物，且特別是人類。
所述化合物或組合物通常通過口服或吸入給藥來給藥?？蛇x地，在有效劑量范圍可由皮下、靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)、腸胃外、口服、粘膜下、通過吸入、經(jīng)由緩釋藥貼經(jīng)皮、或局部給藥化合物來治療目標(biāo)疾患。
通過使用常規(guī)技術(shù)并通過觀察類似情況下獲得的結(jié)果，可容易地確定有效劑量。在確定有效劑量時(shí)，考慮了許多因素，包括但不限于患者的物種；其大小、年齡和一般健康；涉及的具體疾??；所述疾病的牽連程度或其嚴(yán)重性；單個(gè)患者的響應(yīng)；所給藥的特定化合物；給藥方式；所給藥的制劑的生物利用度特征；所選的劑量方案；和伴隨藥物(concomitantmedication)的使用。
在一個(gè)單獨(dú)的實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物是吸入的劑量形式。在此實(shí)施方案中，所述化合物可以是氣溶膠懸浮液、干燥粉末或液體顆粒的形式?？蓪⑺龌衔镏苽涑杀菄婌F劑遞送或可將其制備于吸入器中，例如計(jì)量劑量的吸入器。加壓的計(jì)量劑量的吸入器(“MDI”)通常遞送煙霧化(aerosolized)的顆粒，所述顆粒與或不與表面活性劑和合適的橋鍵形成劑(bridging agent)一起懸浮于含氯氟烴推進(jìn)劑(例如CFC-11、CFC-12)或非含氯氟烴或替代的推進(jìn)劑(例如氟烴、HFC-134A或HFC-227)。還可使用干粉吸入器，不論是呼吸啟動(dòng)的或通過空氣或氣體壓力遞送的，例如公開于1993年1月7日公布的Schering公司的國(guó)際專利申請(qǐng)PCT/US92/05225中的干粉吸入器以及TurbuhalerTM(獲自Astra Pharmaceutical Products，Inc.)或RotahalerTM(獲自Allen & Hanburys)，其可用于遞送煙霧化的顆粒，所述顆粒為單獨(dú)的大聚集體(aggregates)細(xì)微研磨粉末或其與一些藥學(xué)可接受的載體(例如乳糖)的組合；以及霧化器。
通過使用泵式噴瓶，還可按具體測(cè)量量的含水懸浮液的形式給藥本發(fā)明的化合物。本發(fā)明的含水懸浮液組合物可通過將所述化合物與水和其他藥學(xué)可接受的賦形劑混合來制備。依據(jù)本發(fā)明的含水懸浮液組合物其中可含有水、輔料和/或一種或多種賦形劑，例如助懸劑，例如微晶纖維素、羧甲基纖維素納、羥丙基(hydroxpropyl)-甲基纖維素；濕潤(rùn)劑，例如甘油和丙二醇；調(diào)節(jié)pH的酸、堿或緩沖物質(zhì)，例如檸檬酸、檸檬酸鈉、磷酸、磷酸鈉以及檸檬酸鹽和磷酸鹽緩沖劑的混合物；表面活性劑，例如聚山梨酯80；和抗微生物的防腐劑，例如苯扎氯胺、苯基乙醇和山梨酸鉀。
對(duì)于本文描述的所有情況，典型全身劑量的范圍是每天0.01mg/kg到1500mg/kg體重，其作為單次日劑量或分開的日劑量。對(duì)于描述的情況，優(yōu)選的劑量范圍為每天0.5-1500mg。對(duì)于預(yù)期的情況，更特別優(yōu)選的劑量范圍為每天5-750mg。典型劑量范圍還可以為0.01到1500、0.02到1000、0.2到500、0.02到200、0.05到100、0.05到50、0.075到50、0.1到50、0.5到50、1到50、2到50、5到50、10到50、25到50、25到75、25到100、100到150或150或更多mg/kg/天，其作為單次日劑量或分開的日劑量。在一個(gè)實(shí)施方案中，以約1至約5、約5至約10、約10至約25或約25至約50mg/kg之間的劑量提供化合物。用于局部應(yīng)用的典型劑量范圍為按活性化合物的重量計(jì)從0.001至100％。
所述化合物可以任何合適的劑量形式單位方便地給藥，包括但不限于含有每單位劑量形式從約7至3000mg、從約70到1400mg或從約25至1000mg活性成分的劑量形式單位。例如，通常方便的口服劑量從約50至1000mg，包括以50、100、200、250、300、400、500、600、700、800、900或1000mg的一種或多種劑量形式。優(yōu)選較低的劑量，例如從約10-100或1-50mg。還包含0.1-50mg、0.1-20mg或0.1-10mg的劑量。此外，在通過非口服途徑給藥(例如通過注射或吸入)的實(shí)例中，可應(yīng)用較低的劑量。
給藥所述化合物足夠的時(shí)間周期以改善與所治療的疾患相關(guān)的不期望的癥狀和臨床體征。
活性化合物以足以在沒有嚴(yán)重毒性效應(yīng)下將體內(nèi)治療量的化合物遞送給患者的量包含于藥學(xué)可接受的載體或稀釋劑中?？捎糜谶@些藥物組合物的藥學(xué)可接受的載體通常為本領(lǐng)域所知。它們包括但不限于離子交換劑、氧化鋁、硬脂酸鋁、卵磷脂、血清蛋白(例如人血清白蛋白)、緩沖物質(zhì)(例如磷酸鹽)、甘氨酸、山梨酸、山梨酸鉀、飽和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物、水、溶劑、鹽或電解質(zhì)(例如硫酸魚精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、硅酸鹽)、膠態(tài)二氧化硅、三硅酸鎂、聚乙烯吡咯烷酮、基于纖維素的物質(zhì)、聚乙二醇、羧甲基纖維素鈉、聚丙烯酸酯、蠟、油、聚乙烯-聚氧基丙烯-嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。藥學(xué)可接受的媒介物可包含多于一種賦形劑的混合物，其中可選擇組分和比率從而優(yōu)化制劑的預(yù)期特征，包括但不限于儲(chǔ)存期、穩(wěn)定性、藥物裝載、遞送部位、溶出度、自乳化、釋放速率和釋放部位的控制以及代謝。
通過本領(lǐng)域已知的多種技術(shù)可制備制劑。制劑技術(shù)的實(shí)例可參見文獻(xiàn)出版物和教科書，例如“Water-insoluble drug formulation”，Rong Liu編輯，2000，Interpharm Press。
如果靜脈內(nèi)給藥，載體可以是生理鹽水、抑菌水、Cremophor ELTM(BASF，Parsippany，NJ)或磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)。本發(fā)明的無菌可注射形式的組合物可以是水或油的懸浮液。根據(jù)本領(lǐng)域已知的技術(shù)，使用合適的分散劑或潤(rùn)濕劑和助懸劑可配制這些懸浮液。所述無菌可注射制品還可以是在無毒的腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液或懸浮液，例如1，3-丁二醇的溶液?？墒褂玫膶儆诳山邮艿拿浇槲锖腿軇┦撬?、林格氏溶液和等滲氯化鈉溶液。此外，無菌不揮發(fā)油方便地用作溶劑或助懸介質(zhì)。為此目的，可使用任何溫和的不揮發(fā)油，包括合成的單酸甘油酯或甘油二酯。脂肪酸(例如油酸)和其甘油酯衍生物用于制備可注射制劑，由于其為天然藥學(xué)可接受的油，例如橄欖油或蓖麻油，特別是它們的聚氧乙基化的形式。這些油溶液或懸浮液還可包含長(zhǎng)鏈醇稀釋劑或分散劑，例如羧甲基纖維素或相似的分散劑，其通常用于藥學(xué)可接受的劑量形式(包括乳劑和混懸劑)的配制。還可為了制劑而使用其他通常使用的表面活性劑(例如吐溫、司盤和其他的表面活性乳化劑)或者通常用于藥學(xué)可接受的固體、液體或其他劑量形式的制備的生物利用度增強(qiáng)劑。
藥物組合物中活性化合物的濃度依賴于藥物的吸收、失活和排泄的速率以及本領(lǐng)域技術(shù)人員所知的其他因素。應(yīng)注意，劑量值還將依據(jù)待改善的疾患的嚴(yán)重性而變化。應(yīng)進(jìn)一步了解，對(duì)于任何特定的個(gè)體，應(yīng)根據(jù)個(gè)體的需要以及管理或監(jiān)督組合物給藥的人的專業(yè)判斷，隨時(shí)調(diào)整具體的劑量方案，并且本文所述的劑量范圍僅為示例并且無意限制要求保護(hù)的組合物的范圍或?qū)嵺`。所述活性成分可一次給藥或可分為多個(gè)較小劑量以變化的時(shí)間間隔給藥。
口服是用于全身遞送的給藥所述活性化合物的一種模式?？诜M合物通常會(huì)包括惰性稀釋劑或可食用的載體。它們可密封于明膠膠囊劑中或壓制成片劑。為了口服治療給藥，可將所述活性化合物與賦形劑摻在一起，并用于片劑、錠劑或膠囊劑的形式。可包含藥學(xué)相容的粘合劑和/或輔劑材料作為組合物的部分。
片劑、丸劑、膠囊劑、錠劑以及類似劑型可含有任何以下的成分或相似性質(zhì)的化合物粘合劑，例如微晶纖維素、黃蓍樹膠或明膠；賦形劑，例如淀粉或乳糖；崩解劑，例如海藻酸、Primogel或玉米淀粉；潤(rùn)滑劑，例如硬脂酸鎂或Sterotes；助流劑，例如膠體二氧化硅；甜味劑，例如蔗糖或糖精；或者矯味劑，例如薄荷、水楊酸甲酯或橘子香料(orangeflavoring)。
當(dāng)劑量單位形式是膠囊劑時(shí)，除了以上類型的材料，其還可含有液體載體，例如脂肪油。此外，劑量單位形式可含有改良劑量單位的物理形式的多種其他的材料，例如糖包衣、紫膠或其他的腸溶劑。
所述化合物或其鹽可作為酏劑、混懸劑、糖漿劑、糯米紙囊劑(wafer)、口香糖或類似藥劑的組分來給藥。除所述活性化合物以外，糖漿還可含有作為甜味劑的蔗糖和某些防腐劑、染料和著色劑和矯味劑。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述活性化合物與載體一起制備，所述載體會(huì)保護(hù)所述化合物免于從體內(nèi)快速消除，例如控釋制劑，包括植入劑和微膠囊化遞送系統(tǒng)?？墒褂每缮锝到獾摹⑸锵嗳莸木酆衔?，例如乙烯醋酸乙烯酯、聚酐、聚乙醇酸、膠原、聚原酸酯和聚乳酸。制備這樣的制劑的方法對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員是明顯的。所述材料還可從Alza Corporation和Nova Pharmaceuticals，Inc商購(gòu)。還優(yōu)選脂質(zhì)體懸浮液(包括靶向用病毒抗原的單克隆抗體感染的細(xì)胞的脂質(zhì)體)作為藥學(xué)可接受的載體。這些可根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法制備，例如參見美國(guó)專利4,522,811(其通過整體引用在此并入)。例如，脂質(zhì)體制劑可如下制備將合適的脂質(zhì)(例如硬脂酰磷脂酰乙醇胺、硬脂酰磷脂酰膽堿、arachadoyl磷脂酰膽堿(arachadoylphosphatidyl choline)和膽固醇)溶解于無機(jī)溶劑，然后蒸發(fā)所述無機(jī)溶劑，在容器表面上留下干燥脂質(zhì)的薄膜。然后將所述化合物的水溶液引入容器。然后手動(dòng)旋轉(zhuǎn)所述容器從而使脂質(zhì)材料離開所述容器的邊緣并且分散脂質(zhì)聚集體(lipid aggregates)，由此形成脂質(zhì)體懸浮液。
局部應(yīng)用的合適的媒介物或載體可通過常規(guī)技術(shù)制備，例如應(yīng)用于直腸、陰道、鼻或口腔粘膜的洗劑、混懸劑、軟膏劑、乳膏劑、凝膠劑、酊劑、噴霧劑、散劑、糊劑、緩釋透皮藥貼、栓劑。除了以上列舉的用于全身施用的其他材料外，可使用增稠劑、軟化劑和穩(wěn)定劑制備局部用組合物。增稠劑的實(shí)例包括凡士林、蜂蠟、黃原膠或聚乙烯，濕潤(rùn)劑諸如山梨醇、軟化劑諸如礦物油、羊毛脂和其衍生物或角鯊烯。
組合治療 所述化合物還可與不損害預(yù)期作用的其他活性材料或與添加預(yù)期作用的材料混合。所述活性化合物可與用于治療由激酶或HSP90介導(dǎo)的病癥的其他藥物聯(lián)合(即組合或交替)給藥。
所述化合物可與通常用于治療或預(yù)防哮喘的藥物(例如某些抗炎藥物和支氣管擴(kuò)張劑)組合或交替給藥。皮質(zhì)甾類(吸入的和口服的)、肥大細(xì)胞穩(wěn)定劑和白三烯調(diào)節(jié)藥物通常是對(duì)患有哮喘的人有用的抗炎藥物。這些藥物減少氣道的腫脹和粘液產(chǎn)生。支氣管擴(kuò)張劑通常通過松馳緊環(huán)氣道的肌肉帶緩解哮喘的癥狀。該作用迅速打開氣道，使更多的空氣進(jìn)入和離開肺。支氣管擴(kuò)張劑還幫助清除來自肺的粘液。
通常使用的化合物包括吸入的皮質(zhì)甾類，其預(yù)防而不是緩解癥狀。吸入的皮質(zhì)甾類包括Advair(包括皮質(zhì)甾類(氟替卡松)加上長(zhǎng)期作用的支氣管擴(kuò)張藥物(在該實(shí)例中是β-2腎上腺素能受體激動(dòng)劑，沙美特羅)的組合藥物)、aerobid(氟尼縮松)、曲安奈德(azmacort)(曲安西龍)、flovent(氟替卡松)、甲潑尼龍、強(qiáng)的松、普米克(pulmicort)或施立穩(wěn)(serevent diskus)(沙美特羅粉末)、茶堿、qvar和xopenex(左旋沙丁胺醇)。吸入的皮質(zhì)甾類有三種形式計(jì)量劑量的吸入器(MDI)、干粉吸入器(DPI)和噴霧器溶液。系統(tǒng)性類固醇包括甲潑尼龍(Medrol，Methylpred，Solu-Medrol)、強(qiáng)的松(去氫可的松)和潑尼松龍(Prelone，Pediapred，Orapred)。肥大細(xì)胞穩(wěn)定劑包括色甘酸鈉(Intal)和尼多米鈉(Tilade)，其通過防止刺激和炎性物質(zhì)從肥大細(xì)胞釋放而起作用。白三烯調(diào)節(jié)劑包括安可來(accolade)和順爾寧(singular)和安可來(扎魯司特)、順爾寧(孟魯司特)和zyflo(齊留通)。
所述化合物可與非甾類抗炎劑(例如布洛芬、吲哚美辛、非諾洛芬、甲滅酸、氟滅酸、舒林酸)組合給藥。所述化合物還可與皮質(zhì)甾類一起給藥。用于組合或交替治療的本文描述的任何化合物可作為任何前藥給藥，當(dāng)向接受者給藥時(shí)，所述前藥能夠直接或間接提供所述母體化合物。非限制性實(shí)例是藥學(xué)可接受的鹽(可選地稱為“生理學(xué)可接受的鹽”)和在合適位置上烷基化或?；幕衔?。改性可實(shí)現(xiàn)所述化合物的生物活性，在一些情況下增加所述活性使之超越母體化合物。
化合物的制備方法 涉及合成pochonin D和pochonin A的模塊化合成方法適合于合成超出天然二羥基苯甲酸酯(resorcylides)范圍的二羥基苯甲酸內(nèi)酯庫(kù)。開發(fā)的合成利用樹脂輔助的或固相合成從而最簡(jiǎn)化并促進(jìn)中間體和最終產(chǎn)物的分離。首先，提供了涉及天然二羥基苯甲酸(resorsylic acid)內(nèi)酯合成路線的說明，隨后是化合物的庫(kù)的合成。
本文使用以下縮寫。
Ac 乙?；?CH3C＝O) ADP 二磷酸腺苷 AIBN偶氮二(異丁腈) All 烯丙基 ATP 三磷酸腺苷 BER 硼氫化物交換樹脂 BBN 硼雜雙環(huán)壬烷 Bn 芐基 Bz 苯甲?；? CAN 硝酸高鈰銨 CSA 樟腦磺酸 δ 化學(xué)位移(NMR) dba 二亞芐基丙酮 DBU 1，8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯 DDQ 2，3-二氯-5，6-二氰基-1，4-苯醌 DEAD偶氮二羧酸二乙酯 DIAD偶氮二羧酸二異丙酯 d.e.非對(duì)映異構(gòu)體過量 DET 酒石酸二乙酯 DHP 氫吡喃 DIBAL或Dibal-H 二異丁基氫化鋁 DIC N，N′-二異丙基碳二亞胺 DMAP4-二甲基氨基吡啶 DMDO甲基二環(huán)氧乙烷 DMF 二甲基甲酰胺 DMPI戴斯-馬丁試劑(Dess-Martin periodinane) DMSO二甲基亞砜 DNA 脫氧核糖核酸 dppe 1，2-雙(二苯基膦基)乙烷 EC50 獲得50％體內(nèi)最大效應(yīng)所需的血漿濃度 EDC 鹽酸1-乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳二亞胺 EDTA 乙二胺四乙酸 e.e. 對(duì)映異構(gòu)體過量 EOM 氧甲基(CH3CH2OCH2-) FDA 食品與藥品管理局 Fmoc 9-芴基甲氧羰基 GI50 50％抑制細(xì)胞生長(zhǎng)所需濃度 Grubbs′II Grubbs′第二代催化劑(釕[1，3-雙(2，4，6-三甲基苯基)-2-亞咪唑啉基)二氯(苯基亞甲基)(三環(huán)己基磷烷)
HFIP 六氟異丙醇 HMDS 六甲基二硅胺(hexamethyldisilazide) HMPA 六甲基磷酸三酰胺 HOBT N-羥基苯并三唑 HPLC 高效液相色譜(high performance chromatography) HRMS 高分辨質(zhì)譜 HSP90熱休克蛋白90 Hunig堿 二異丙基乙胺 IC50 體外50％抑制所需的藥物濃度 imid.咪唑 Ipc2BH 雙-異松樟腦?；鹜? J偶合常數(shù) KHMDS六甲基二硅基氨基鉀(Potassiumhexamethyldisilylamide) L.C. 液相色譜 LDA 二異丙基氨基鋰 LiHMDS 六甲基二硅基氨基鋰(LiN(SiMe3)2) μM 微摩爾濃度(μmol.l-1) MAP 促分裂原活化蛋白 mCPBA 間氯過氧苯甲酸 MOM 甲氧甲基(CH3OCH2-) mRNA信使核糖核酸 M.S.質(zhì)譜 NaHMDS 六甲基二硅基氨基鈉 NMR 核磁共振 NMM N-甲基嗎啉 NMO N-甲基嗎啉-N-氧化物 NOE(SY) 核奧弗豪澤效應(yīng) PCC 氯鉻酸吡啶鎓 PDC 重鉻酸吡啶鎓 PG 保護(hù)基 PMB 對(duì)甲氧芐基 PNA 肽核酸 Piv 特戊酰基 PS- 聚合物支持 PS-TBD (1，5，7)-三氮雜-二環(huán)并[4.4.0]十二-5-烯-7-甲基聚苯乙 烯 Pyr或Py 吡啶 rac 外消旋 RAL 二羥基苯甲酸內(nèi)酯 RCM 閉環(huán)復(fù)分解(metathesis) RedAl 雙(甲氧乙氧基)氫化鋁鈉 Rf 保留因子 RNA 核糖核酸 RT 室溫 SAE 夏普勒斯不對(duì)稱環(huán)氧化反應(yīng) SAR 構(gòu)效關(guān)系 SEM 2-三甲基甲硅烷基乙氧甲氧基 TBAF 氟化四正丁銨 TBAI 碘化四正丁銨 TBDPS叔丁基二苯基甲硅烷基 TBHP 過氧叔丁醇 TBS 叔丁基二甲基甲硅烷基 Teoc 2-(三甲基甲硅烷基)乙氧羰基 Tf 三氟甲基磺酸酯(CF3SO3)(triflate) TFA 三氟乙酸 TFAA 三氟乙酸乙酸酐 THF 四氫呋喃 THP 四氫吡喃 TLC 薄層色譜 TMS 三甲基甲硅烷基 Ts 甲苯磺?；?p-CH3C6H4SO2) p-TSOH 對(duì)甲苯磺酸 I.Pochonin D的合成 初步研究 描述合成策略的pochonin D(2-85)的逆合成分割(retrosyntheticdisconnection)如下所示。三信酯化(Mitsunobu esterification)、?；烷]環(huán)復(fù)分解顯示為主要的分割，其使用三個(gè)結(jié)構(gòu)單元酸2-87、醇(S)-2-27和Weinreb酰胺2-88。

基于根赤殼菌素和pochonin C合成的pochonin D的逆合成分析 Weinreb酰胺部分2-88按路線1所示合成。因此，用5-碘-1-戊烯將中間體2-7烷基化從苯硫酚兩步產(chǎn)生Weinreb酰胺2-88。

最佳條件X＝I，-78℃LDA 30分鐘，-78℃HMPA 30分鐘，o.n.室溫 路線1第一代Weinreb酰胺的合成 a)苯硫酚(1.0當(dāng)量)，K2CO3(1.0當(dāng)量)，DMF，23℃；2-氯-N-甲氧基-N-甲基乙酰胺(1.0當(dāng)量)，23℃，4h，95％；b)LDA(2.0當(dāng)量)，HMPA(2.0當(dāng)量)，5-碘-1-戊烯(2.0當(dāng)量)，-78→23℃，13h，30％。
同時(shí)，開發(fā)了替代的合成路線，其起始于可商購(gòu)的順式-6-壬烯-1-醇 (路線2)。

路線2第二代Weinreb酰胺的合成 a)PDC(2.0當(dāng)量)，DMF，23℃，12h，定量；b)iPr2NH(2.6當(dāng)量)，nBuLi(2.2當(dāng)量)，HMPA，CCl4(5.0當(dāng)量)，THF，-78→0℃，3h，c)鹽酸N，O-二甲基羥胺(2.0當(dāng)量)，DMAP(催化劑)，EDC(2.0當(dāng)量)，CH2Cl2，23℃，4h，88％(2步)；d)iPr2NEt(0.9當(dāng)量)，苯硫酚(0.9當(dāng)量)，DMF，80℃，12h，84％；e)H2O2(2.0當(dāng)量)，HFIP，23℃，3h；f)甲苯，80℃，8h，2步后75％。
隨后是經(jīng)典氧化過程(PDC在DMF中)，然后通過使用LDA形成烯醇化物和隨后使用四氯化碳的氯加成來α-氯化酸2-89(Snider，B.B.&Kulkarni，Y.S.，J Org Chem 1987，52，307-310)。處理(work-up)后，獲得黑色油狀的化合物2-90，但根據(jù)1H NMR其為純化合物。純化這一酸的努力證明令人失望，并且直接將它用于下一步驟。此后使用N，O-二甲基羥胺和EDC形成酰胺并且用苯硫酚置換氯原子產(chǎn)生化合物2-92，按順式-6-壬烯-1-醇計(jì)總收率74％。經(jīng)由氧化/消除反應(yīng)，硫醚Weinreb酰胺2-92可轉(zhuǎn)化為其密切相關(guān)的衍生物2-93。
由于可商購(gòu)的2，4-二羥基-6-甲基苯甲酸價(jià)格昂貴，因此開發(fā)了允許合成2，4-二羥基-6-甲基苯甲醛的技術(shù)，所述2，4-二羥基-6-甲基苯甲醛使用多種保護(hù)基可進(jìn)一步衍生化為相應(yīng)的酸(路線3)。起始于苔黑酚并按照維爾斯邁爾-哈克過程(Vilsmeier-Haack procedure)，獲得醛2-94a，收率45％(基于回收的S.M.為72％)。如實(shí)驗(yàn)部分所描述，所述醛在pH＝7時(shí)沉淀并且回收時(shí)具有良好的純度(按照1H NMR判斷，＞95％)。

路線3由苔黑酚合成二羥基苯甲酸 a)POCl3(4.0當(dāng)量)，DMF，0→23→80℃，3h，45％；b)通用步驟PGCl，iPr2NEt，CH2Cl2，23℃，1h，參見每個(gè)PG的實(shí)驗(yàn)部分；c)參見下表。
然后化合物2-94a用不同的基團(tuán)保護(hù)從而產(chǎn)生醛2-94c-k，其隨后被氧化從而提供相應(yīng)的酸2-95a-k，收率良好(路線3，表2)。通過變化氧化條件，發(fā)現(xiàn)在一鍋工序(one pot sequence)(氧化/氯化)中，可以氯化環(huán)上合成pochonin D所需的位置。
表2產(chǎn)生各種保護(hù)的二羥基苯甲酸的氧化條件
aAH2O/THF/DMSO(20∶10∶1)或BH2O/THF(2∶1)或CDMSO，b當(dāng)進(jìn)行超過1小時(shí)時(shí)，所述反應(yīng)緩慢地加熱至室溫，c在這種情況下，使用僅2當(dāng)量的酸從而避免過度氯化，d所述化合物先前指定為化合物2-66。
根據(jù)保護(hù)基，使用兩種不同的酸性緩沖劑(NH2SO3H或NaH2PO4)和多種溶劑系統(tǒng)(表2)。為了避免任何的氯化反應(yīng)，小百分比的DMSO與THF/H2O的混合物與氨基磺酸一起((a)Lindgren，B.O.& Nilsson，ActaChem.Scand.27，888-890(1973)，(b)Colombo，L等人，J.Chem.Soc.，Perkin Trans.1，136-140(1980))證明基本上并且十分有效地終止HOCl的反應(yīng)(第a、c、j項(xiàng))(Dalcanale，E.& Montanari，F(xiàn).Selective oxidation ofaldehydes to carboxylic acids with sodium chlorite-hydrogen peroxide.(用亞氯酸鈉-過氧化氫將醛選擇性氧化為羧酸)J Org Chem 51，567-569(1986))。在缺少DMSO時(shí)進(jìn)行一鍋氧化/氯化工序，并且需要較長(zhǎng)時(shí)間完成(第b、d、f、h項(xiàng))。由于EOM保護(hù)基的酸易感性，使用NaH2PO4代替氨基磺酸并且在純DMSO中進(jìn)行氧化。雙保護(hù)的化合物選擇性地脫保護(hù)從而提供化合物2-95g的氯化類似物，其經(jīng)過兩步，收率77％(見下文)。在用于合成所述pochonin的第一個(gè)工序中，使用單MOM保護(hù)的酸2-96。標(biāo)準(zhǔn)條件(DIAD，PPh3)下所述酸2-96和外消旋醇2-27之間的三信酯化提供預(yù)期的酯2-97，其進(jìn)一步被轉(zhuǎn)化為雙保護(hù)的酯2-98(路線4)。

路線4MOM保護(hù)的Monocillin II(2-102)的合成 a)2-27(1.0當(dāng)量)，P(mClPh)3(2.0當(dāng)量)，DIAD(2.0當(dāng)量)，甲苯，23℃，3h，59％；b)MOMCl(4.0當(dāng)量)，EtiPr2N(4.0當(dāng)量)，TBAI(催化劑)，DMF，80℃，3h，78％；c)LDA(2.0當(dāng)量)，THF，-78℃；2-88(1.0當(dāng)量)，10分鐘，50％；d)H2O2(2.0當(dāng)量)，HFIP，23℃，3h；e)甲苯，80℃，4h，68％兩步(路線A)，48％兩步(路線B)；f)Grubbs′II(5％mol)，甲苯(2mM)，回流，15分鐘，63％(路線A，反式/順式4∶1)，定量，(路線B，反式/順式7∶1)。
使用先前優(yōu)化的條件(2當(dāng)量的LDA，-78℃)?；试S形成無環(huán)前體2-99和一些未反應(yīng)的原料。設(shè)想了產(chǎn)生化合物2-102的兩種不同的工序(氧化/消除隨后是閉環(huán)復(fù)分解(路線A)或反之亦然(路線B))。兩種路線證明是相似的(相同的總收率)，盡管當(dāng)按照路線B時(shí)在復(fù)分解反應(yīng)中具有較高的選擇性(順式/反式比7∶1對(duì)路線A的4∶1)。計(jì)劃對(duì)化合物2-102脫保護(hù)MOM和進(jìn)行芳香環(huán)的氯化從而形成pochonin D(2-85，路線5)。

路線5外消旋Monocillin II(2-103)的合成 a)濃HCl(在二噁烷中2.5％)，0→23℃，1h，79％；b)SO2Cl2、Et2O或CH2Cl2，0℃或Ca(OCl)2，丙酮，H2O/AcOH，0℃。
按照公知的程序脫保護(hù)MOM基團(tuán)允許容易地產(chǎn)生外消旋monocillinII(2-103)，但形成pochonin D的氯化證明有問題。
作為代替，以酸2-96的氯化類似物為原料并且按照為MOM保護(hù)的Monocillin II而開發(fā)的兩步工序(路線4)，獲得高質(zhì)量的化合物2-104(路線6)。盡管使用Weinreb酰胺2-7的?；磻?yīng)獲得收率為37％的分離的化合物2-103，但當(dāng)使用Weinreb酰胺2-88時(shí)沒有觀察到反應(yīng)。作為代替，直接使用α，β-共軛類似物2-93。

路線6多種Weinreb酰胺的酰化試驗(yàn) a)LDA(2.0當(dāng)量)，THF，-78℃；2-7或2-88或2-93(1.0當(dāng)量)，10分鐘，37％(2-105)，40％(2-107)。
事實(shí)上，酯2-104的甲苯甲酸陰離子(toluic anion)和Weinreb酰胺2-93之間的?；磻?yīng)獲得收率40％的分離的無環(huán)化合物2-107和一些未反應(yīng)的原料。完成對(duì)氯化甲苯甲酸酯的?；磻?yīng)的可能性使pochonin D合成的完成成為可能。
pochonin D的全合成 選擇EOM保護(hù)基用于苯酚的保護(hù)。使用以上描述的化學(xué)來合成甲苯甲酸，由甲?；诜?-94a經(jīng)三步合成單EOM氯化的酸2-108(路線7)。使用在THF/MeOH混合物中的特定濃度的TFA(THF/TFA/MeOH7∶1.5∶1(體積))完成對(duì)鄰苯酚的選擇性脫保護(hù)，且沒有任何的雙脫保護(hù)。此外，使用標(biāo)準(zhǔn)方案(DIAD，PPh3，甲苯)對(duì)鄰苯酚三信酯化并且對(duì)其再保護(hù)允許由酸2-108形成化合物2-110，收率51％。

路線7pochonin D的第一種全合成 a)EOMCl(4.0當(dāng)量)，iPr2NEt(4.0當(dāng)量)，CH2Cl2，23℃，1h，81％；b)NaH2PO4(5.0當(dāng)量)，NaClO2(5.0當(dāng)量)，H2O/THF 2∶1，0→23℃，12h，89％；c)THF/TFA/MeOH7∶1.5∶1，23℃，45分鐘，80％；d)(S)-2-27(1.0當(dāng)量)，PPh3(2.0當(dāng)量)，DIAD(2.0當(dāng)量)，甲苯，23℃，3h，72％；e)EOMCl(2.0當(dāng)量)，EtiPr2N(2.0當(dāng)量)，TBAI(催化劑)，DMF，80℃，3h，70％；f)LDA(2.0當(dāng)量)，THF，-78℃；2-93(1.0當(dāng)量)，10分鐘，52％；g)Grubbs′II(10％mol)，甲苯(2mM)，80℃，12h，94％；h)TFA(20％)，CH2Cl2，23℃，2h，72％。
甲苯甲酸酯2-110去質(zhì)子化，隨后添加Weinreb酰胺2-93獲得預(yù)期的復(fù)分解前體2-111(收率52％)和一些未反應(yīng)的原料。用Grubbs′第二代催化劑((a)Chatterjee，A.K.，Morgan，J.P.，Scholl，M.& Grubbs，R.H.，JAm Chem Soc 122，3783-3784(2000)，(b)Scholl，M.，Ding，S.，Lee，C.W.& Grubbs，R.H.，Org Lett 1，953-956(1999))在120℃下處理三烯2-11115分鐘以出色的收率產(chǎn)生預(yù)期的環(huán)化產(chǎn)物2-112，盡管是順式/反式烯烴1∶4的不可分的混合物。在熱力學(xué)控制下，80℃過夜的復(fù)分解反應(yīng)(Lee，C.W.& Grubbs，R.H.Stereoselectivity of Macrocyclic Ring-Closing OlefinMetathesis.(大環(huán)閉環(huán)烯烴復(fù)分解的立體選擇性)Org Lett 2，2145-2147(2000))將平衡移至反式中間體2-112，其具有＞95％的選擇性(由1H NMR判斷)和94％的收率。應(yīng)注意，這一反應(yīng)可在毫摩爾濃度下進(jìn)行，且沒有任何可檢測(cè)量的二聚或寡聚。重要地，沒有觀察到10元大環(huán)。此外，使用TFA在二氯甲烷中脫保護(hù)EOM允許第一次全合成pochonin D，發(fā)現(xiàn)其具有與天然產(chǎn)物相同的NMR譜。
為了多樣性導(dǎo)向的合成并且因?yàn)榱蛎焰I的存在導(dǎo)致在芳香環(huán)上不可能具有氯原子，所以開發(fā)了用聚合物支持的(polymer-supported)試劑更加簡(jiǎn)潔地合成pochonin D((a)Ley，S.V.& Baxendale，I.R.，Nat Rev Drug Discov1，573-86(2002)，(b)Ley，S.V.等人，J.Chem.Soc.，Perkin Trans.123，3815-4195(2000))。設(shè)想直接使用2，4-二羥基-6-甲基苯甲酸的三信反應(yīng)產(chǎn)生pochonin D的更加簡(jiǎn)潔的路線。由于(S)-4-戊烯-2-醇((S)-2-27)是可商購(gòu)的，因此進(jìn)行對(duì)產(chǎn)生脂族Weinreb酰胺2-93的工序的改良。開發(fā)了使用固體載體的方案從而將純化中間體和最終產(chǎn)物的需求降至最小?？缮藤?gòu)的2-氯-N-甲氧基-N-甲基乙酰胺(路線8)使用3-巰基苯酚和一當(dāng)量的堿選擇性地S-烷基化，然后通過連續(xù)添加第二個(gè)當(dāng)量的K2CO3、樹脂，將其裝入相同一鍋反應(yīng)中的Merrifield樹脂，并將溫度升至50℃。

路線8Weinreb酰胺2-114的固相合成 a)3-巰基苯酚(1.0當(dāng)量)，K2CO3(1.0當(dāng)量)，DMF，23℃；8小時(shí)后，K2CO3(1.7當(dāng)量)，Merrifield樹脂，TBAI(催化劑)，12h，50℃，98％；b)H2O2(2.0當(dāng)量)，HFIP/CH2Cl2 1∶1，12h；c)tBuOK(1.0當(dāng)量)，5-碘-1-戊烯(1.0當(dāng)量)，DMSO，23℃，3h；d)甲苯，80℃，8h，77％。
這一方法一步形成聚合物結(jié)合的Weinreb酰胺2-49。使用先前提及的涉及在HFIP/CH2Cl2中的H2O2的程序?qū)⒘蛎?-49氧化為相應(yīng)的亞砜2-113(Ravikumar，K.S.，Begue，J.-P.& Bonnet-Delpon，D.A selectiveconversion of sulfde to sulfoxide in hexafluoro-2-propanol.(在六氟-2-丙醇中將硫化物選擇性轉(zhuǎn)化為亞砜)Tetrahedron Letters 39，3141-3144(1998))。發(fā)現(xiàn)這一氧化程序是實(shí)用和可靠的，且沒有過度氧化為砜，并且由于所述反應(yīng)在固相上進(jìn)行，所以容易重復(fù)利用氟化溶劑。然后酰氨基亞砜99用tBuOK去質(zhì)子化，并且產(chǎn)生的烯醇化物用5-碘-1-戊烯終止反應(yīng)。使用DMSO避免了亞砜消除，并且所述反應(yīng)可加熱至60℃。消除后，在甲苯中再懸浮所述樹脂并加熱至80℃釋放預(yù)期的片段2-114，其具有77％的收率和95％的純度(通過1H NMR判斷)。就結(jié)構(gòu)單元2-114的收率和純度而言，發(fā)現(xiàn)這一固體載體的方法十分實(shí)用，因?yàn)槠洳恍枰V。
根據(jù)在溶液中開發(fā)的化學(xué)(路線7)，使用聚合物結(jié)合的DEAD用(S)-4-戊烯-2-醇((S)-2-27)選擇性地三信酯化2，4-二羥基-6-甲基苯甲酸(2-95a)產(chǎn)生酯2-116(路線9)。發(fā)現(xiàn)使用(mClPh)3P對(duì)于抑制任何與對(duì)苯酚競(jìng)爭(zhēng)成醚是關(guān)鍵的。用EOM基團(tuán)保護(hù)兩個(gè)苯酚產(chǎn)生未氯化的酯2-117，其可用于后續(xù)烷基化而不用進(jìn)一步純化。

路線9使用聚合物結(jié)合試劑合成中間體2-110和2-117 a)NaClO2(5.0當(dāng)量)，NH2SO3H(5.0當(dāng)量)，CH3CHO(1.0當(dāng)量)，THF/H2O 5∶1，0℃，0.5h，92％；b)PS-DEAD(2.5當(dāng)量，1.3mmol.g-1)，(S)-4-戊烯-2-醇(1.0當(dāng)量)，P(mClPh)3(2.0當(dāng)量)，CH2Cl2，23℃，0.5h，2-117為68％并且2-110為65％；c)iPr2EtN(4.0當(dāng)量)，EOMCl(4.0當(dāng)量)，TBAI(催化劑)，DMF，80℃，5h，95％。
酯化前，使用HClO導(dǎo)入氯，所述HClO通過用NaClO2/氨基磺酸氧化乙醛就地產(chǎn)生。酸2-95b獲自其未氯化的母體2-95a，收率92％，且未發(fā)現(xiàn)任何過氯化。與2-95a相同的條件下酯化所述產(chǎn)物產(chǎn)生化合物2-115。然后，用EOM基團(tuán)雙保護(hù)產(chǎn)生酯2-110，其不用任何純化也可用于后續(xù)反應(yīng)。對(duì)甲苯甲酸酯2-110和2-117去質(zhì)子化，隨后添加Weinreb酰胺2-114產(chǎn)生預(yù)期的復(fù)分解前體2-118和2-119，其可直接用于后續(xù)步驟(路線10)。當(dāng)對(duì)未氯化的酯2-117進(jìn)行?；磻?yīng)時(shí)，獲得20％的對(duì)Weinreb酰胺1，4-共軛加成產(chǎn)生的產(chǎn)物。

路線10使用支持試劑合成pochonin D(2-85)和monocillin II(2-103)a)LDA(2.0當(dāng)量)，THF，-78℃；2-114(1.0當(dāng)量)，10分鐘，安柏萊特(Amberlite)IRC-50(20.0eq，10.0mmol.g-1)；b)Grubbs′II(10％mol)，甲苯(2mM)，80℃，12h，兩步后2-120為40％并且2-112為44％；c)PS-TsOH(10當(dāng)量，3.2mmol.g-1)，MeOH，40℃，4h，2-85為90％并且2-103為92％。
熱力學(xué)控制下，80℃用Grubbs′第二代催化劑處理粗制的三烯2-118和2-119，過夜，專有地(超過95％的選擇性)產(chǎn)生反式大環(huán)2-112和2-120。然后，使用通過硅膠途徑的簡(jiǎn)單過濾移除所有的催化劑和其副產(chǎn)物，獲得化合物2-112，經(jīng)兩步收率44％。而對(duì)純化的三烯2-118進(jìn)行的復(fù)分解反應(yīng)幾乎是定量的，發(fā)現(xiàn)從化合物2-95a起進(jìn)行全合成工序更加實(shí)用，不用任何純化，由此產(chǎn)生保護(hù)的pochonin D 2-112，經(jīng)五步收率25％。柱色譜純化分離了12元大環(huán)2-121和2-120。使用磺酸樹脂在MeOH中移除大環(huán)2-112和2-120的EOM基團(tuán)，允許合成pochonin D(2-85)和monocillin II(2-103)，收率分別為90％和92％。如為?；磻?yīng)所示，芳香環(huán)上是否存在氯原子似乎影響共軛烯烴的反應(yīng)性。確實(shí)，用HCl(2.5％，在二噁烷中)對(duì)化合物2-120脫保護(hù)產(chǎn)生氯離子的共軛加成，而用HCl對(duì)化合物2-112脫保護(hù)獲得pochonin D(2-85)。使用聚合物支持試劑的這一合成允許分別以六步(收率23％)和五步(收率24％)獲得pochonin D和monocillin II。起始于可商購(gòu)的結(jié)構(gòu)單元，所有合成路線僅需要一次最終化合物的色譜純化，并且這一方法可用于合成庫(kù)。在競(jìng)爭(zhēng)測(cè)定中用格爾德霉素評(píng)估HSP90親和力表明pochonin D是HSP90的良好配體，具有80nM的IC50，相比之下根赤殼菌素為20nM(見下文)。
II pochonin A的合成 獲得了pochonin D(2-85)，然后制備pochonin A(2-122)，不僅確定其結(jié)構(gòu)還要與pochonin D和根赤殼菌素對(duì)比其生物活性。

使用DMDO環(huán)氧化pochonin D允許形成pochonin A，其為1∶1的非對(duì)映異構(gòu)體的混合物，可通過柱色譜分離。一個(gè)替代路線描述于路線11。環(huán)氧化雙EOM保護(hù)的pochonin D(2-112)也獲得為非對(duì)映異構(gòu)體混合物的環(huán)氧化物。

路線11雙EOM的pochonin D(2-112)的直接轉(zhuǎn)化 a)DMDO(1.0當(dāng)量)，CH3CN，0℃→23℃，1.5h，79％；b)PS-TsOH(10.0當(dāng)量，3.2mmol.g-1)，MeOH，40℃，1h。
調(diào)研了基于甲硅烷基的保護(hù)基獲得這一類型的分子的合適性。因此當(dāng)用醇(R)-27酯化時(shí)，全硅烷化苯甲酸81b(路線12)，隨后將甲硅烷基酯“無酸”轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的酰氯產(chǎn)生關(guān)鍵中間體112(Wisnner，A.& Grudzinskas，C.V.，J Org Chem 43，3972-3974(1978))。

路線12使用TBS保護(hù)基的Pochonin A合成 a)iPr2EtN(6.0當(dāng)量)，TBSCl(3.0當(dāng)量)，CH2Cl2，23℃，3h；b)草酰氯(1.0當(dāng)量)，DMF(催化劑)，CH2Cl2 0→23℃，1h；c)Et3N(2.26當(dāng)量)，R-(-)-戊烯-2-醇(3.0當(dāng)量)，DMAP，0→23℃，12h，經(jīng)3步收率29％；d)LDA(2.0當(dāng)量)，THF，-78℃，Weinreib酰胺100(1.0當(dāng)量)，10分鐘，35％；e)Grubbs′II(10％mol)，甲苯(2mM)，80℃，12h，79％；f)CF3COCH3，NaHCO3(7.0當(dāng)量)，過硫酸氫鉀制劑(Oxone)(4.7當(dāng)量)，Na2·EDTA(4 x 10-4M)，CH3CN/二甲氧基甲烷，0℃，2h，83％；g)TBAF(2.2當(dāng)量)，THF，23℃，20分鐘，80％，3∶1非對(duì)映異構(gòu)體的混合物。
對(duì)甲苯甲酸酯2-126去質(zhì)子化，隨后與Weinreb酰胺2-114反應(yīng)產(chǎn)生復(fù)分解前體2-127。在先前提及的熱力學(xué)條件(80℃，過夜)下使用Grubbs’第二代催化劑閉環(huán)復(fù)分解產(chǎn)生良好收率和出色的順式/反式比率(＜5％順式)的大環(huán)2-128。當(dāng)用就地產(chǎn)生的甲基(三氟甲基)-二環(huán)氧乙烷在0℃下進(jìn)行非共軛烯烴的環(huán)氧化時(shí)是最佳的(Yang，D.等人，J.Org.Chem.，60，3887-3889(1995))，其產(chǎn)生TBS保護(hù)的pochonin A(2-129)，其具有出色的收率，為不可分離的3∶1的非對(duì)應(yīng)異構(gòu)體混合物。使用經(jīng)典甲硅烷基脫保護(hù)條件(TBAF于THF中)對(duì)化合物2-129脫保護(hù)產(chǎn)生可分離的非對(duì)映異構(gòu)體混合物并且確定主要產(chǎn)物的確是預(yù)期的pochonin A(2-122)。
評(píng)估替代保護(hù)基從而提高酯化和?；磻?yīng)的收率。根據(jù)它們對(duì)堿性條件的穩(wěn)定性以及它們對(duì)TBAF的易感性，考慮SEM保護(hù)基。按照對(duì)聚合物輔助合成pochonin D所描述的程序，使用聚合物結(jié)合的DEAD的苯甲酸2-95b和手性醇(S)-2-27之間的選擇性三信反應(yīng)和隨后的用SEM-Cl保護(hù)產(chǎn)生酯2-130，收率72％(路線13)。

路線13使用SEM保護(hù)基的Pochonin A合成 a)PS-DEAD(2.5當(dāng)量，1.3mmol.g-1)，S-(-)-4-戊烯-2-醇(2.0當(dāng)量)，P(mClPh)3(2.0當(dāng)量)，甲苯，23℃，10分鐘；b)NaH 60％(4.0當(dāng)量)，SEMCl(4.0當(dāng)量)，THF，0℃，2h，經(jīng)2步收率72％；c)LDA(2.0當(dāng)量)，THF，-78℃，Weinreib酰胺2-114(1.0當(dāng)量)，10分鐘，60％；d)Grubbs′II(10％mol)，甲苯(2mM)，80℃，12h，87％；e)DMDO(1.0當(dāng)量)，CH3CN，0→23℃，1.5h，83％，1∶1非對(duì)應(yīng)異構(gòu)體混合物；f)MgBr2·Et2O(8.0當(dāng)量)，CH2Cl2，23℃，1h，70％。
使用Weinreb酰胺2-114?；妆郊姿狨?-130產(chǎn)生分離的無環(huán)前體2-131，收率60％。在熱力學(xué)條件(80℃，過夜)下用Grubbs’第二代催化劑處理三烯2-131產(chǎn)生相應(yīng)的大環(huán)2-132，收率87％(＜5％順式烯烴)，其在與TBS保護(hù)的化合物2-128相同的條件下[甲基(三氟甲基)-二環(huán)氧乙烷]環(huán)氧化，產(chǎn)生化合物2-133，收率83％，盡管是1∶1的非對(duì)應(yīng)異構(gòu)體的比率(不可分離)。用8.0當(dāng)量的MgBr2·Et2O完成2-133的脫保護(hù)，產(chǎn)生預(yù)期的pochonin A(2-122)和其非對(duì)映異構(gòu)體(2-122b)的可分離混合物。發(fā)現(xiàn)Pochonin A是HSP90的良好配體，具有90nM的IC50(見下文)。
III.Pochonin類似物的多樣性導(dǎo)向的合成 為了擴(kuò)大所述化合物的多樣性從而有望找到新的ATP酶和激酶抑制劑，制備了pochonin類似物的庫(kù)并評(píng)估其生物活性。預(yù)想這一庫(kù)源自二羥基苯甲酸大環(huán)內(nèi)酯骨架的五點(diǎn)多樣性修飾對(duì)苯酚(R1，許多天然二羥基苯甲酸酯在這一位置帶有甲基)、C17上的基團(tuán)(R2，兩種立體化學(xué)均存在于天然二羥基苯甲酸酯；然而，只有甲基取代基)、C14-C15烯烴(R3)、C9羰基(R4)、烯烴C10-C11和芳環(huán)的間位(R5，許多天然二羥基苯甲酸酯在這一位置帶有氯)。為了將常規(guī)的色譜法降至最少，所述合成用聚合物結(jié)合試劑實(shí)施。大環(huán)的裝配取決于為合成pochonin D而開發(fā)的使用聚合物結(jié)合試劑化學(xué)(路線9和路線10)。

所述庫(kù)的一般結(jié)構(gòu)和逆合成分析 制備了在R2上帶有多種取代基的多種高烯丙醇2-134。非可商購(gòu)的高烯丙醇2-134可通過任何合適的方法獲得。在一個(gè)實(shí)施方案中，通過對(duì)外消旋的醇酶法拆分(H.E.Master等人，Tet.Lett.，379253(1996)；S.Singh等人，Tet.Asymm.，132679(2002)或經(jīng)由Brown烯丙基化相應(yīng)的醛(H.C.Brown和P.K.Jadhav J.Am.Chem.Soc.，1052092(1983)獲得最高對(duì)映異構(gòu)體形式的高烯丙醇2-134。通過酶法拆分制備苯基(2-134a)、吡啶基(2-134b)和呋喃基(2-134c)醇(路線14)。在將可商購(gòu)的烯丙基溴化鎂(allylmagnesiumbromide)Grignard加成至它們的相應(yīng)的醛2-134a-c后，獲得外消旋醇2-134a-c。

路線14使用酶法拆分合成手性醇2-134a-c a)烯丙基溴化鎂(1.5當(dāng)量)，THF，0.5h，0℃，71％(2-134a)，41％(2-134b)，74％(2-134c)；b)R2＝Ph醋酸乙烯酯(32.5當(dāng)量)，Amano脂肪酶PS-C II(50mg/mmol的2-134)，23℃，30h(由1H NMR監(jiān)測(cè))，R2＝Pyr，F(xiàn)ur醋酸乙烯酯(10.0當(dāng)量)，Amano脂肪酶PS-C II(50mg/mmol的2-134)，THF，23℃，5-30h(由1H NMR監(jiān)測(cè))；c)K2CO3(0.8當(dāng)量)，MeOH，23℃，98％((R)-2-134a)，92％((R)-2-134b)，84％((R)-2-134c)。
使用高效Amano脂肪酶(洋蔥假單胞菌(Pseudomonas cepacia)的固定形式)實(shí)現(xiàn)動(dòng)力學(xué)酶法拆分外消旋醇2-134a-c。所述酶催化用作為酰基供體的醋酸乙烯酯選擇性反式酯化醇(R)-2-134a-c，所分離的(S)醇2-134a-c具有出色的收率和良好的對(duì)映異構(gòu)體過量(表3)。
表3用脂肪酶反式酯化來對(duì)映異構(gòu)體選擇性?；纪庀?2-134a-c
這一方法獲得的對(duì)映異構(gòu)體過量都在88％以上。然后，乙?；拇?R)-2-137水解為相應(yīng)的醇(R)-2-134a-c，收率出色。此外，開發(fā)了基于Brown烯丙基化的用于合成異丙基(2-134d)、丙基(2-134e)和芐基(2-134f)醇的第二種方法(路線15)。

路線15使用Brown烯丙基化合成手性醇120d-f a)(-)-α-蒎烯(2.4當(dāng)量)，BH3·Me2S(1.0當(dāng)量)，THF，23℃持續(xù)1h然后4℃持續(xù)12h，76％；b)MeOH(1.2當(dāng)量)，Et2O，0℃，2h，94％；c)烯丙基溴化鎂(0.95當(dāng)量)，Et2O，0→23℃，1h，92％；d)122d-f(1.05當(dāng)量)，Et2O，-100℃，0.5h；3N NaOH，H2O235％，回流，3h，77-93％。用3，5-二硝基苯甲酰氯?；?，通過手性HPLC分析確定醇的對(duì)映異構(gòu)體過量。
(-)-B-烯丙基二異松蒎基硼烷(2-139，(-)-Ipc2B烯丙基)由(-)-α-蒎烯經(jīng)三步工序合成，包括硼氫化反應(yīng)、相應(yīng)MeO-硼酸酯(borinic ester)2-138的形成以及用格氏試劑處理它。此后，對(duì)醛2-134d-f縮合，隨后用堿性過氧化氫氧化產(chǎn)生的硼酸酯允許形成良好對(duì)映異構(gòu)體過量的手性高烯丙醇2-134d-f。
pochonin D合成后，依照模型進(jìn)行大環(huán)的裝配(E.Moulin，V.Zoete，S.Barluenga，M.Karplus，N.Winssinger，J.Am.Chem.Soc.，1276999(2005))。因此，如路線16所示，使用聚合物支持的DEAD用多種高烯丙醇酯化可商購(gòu)的苯甲酸2-95a和其氯化的類似物2-95b(酯化前使用HClO將氯原子導(dǎo)入酸2-95a，所述HClO通過用NaClO2/氨基磺酸氧化乙醛就地產(chǎn)生)從而產(chǎn)生出色純度的酯2-115a-g和2-116a-g(E.Moulin等人，J.Am.Chem.Soc.，1276999(2005))。然后產(chǎn)物2-115a-g和2-116a-g在存在Hunig堿時(shí)用乙氧亞甲基氯(EOM-Cl)保護(hù)從而獲得相應(yīng)保護(hù)的甲苯甲酸酯2-110a-g和2-117a-g，其可用于后續(xù)碳?；磻?yīng)，且不用進(jìn)一步純化。

路線16大環(huán)前體2-112a-g、2-120a-g和2-121a-g的合成 a)NaClO2(5.0當(dāng)量)，NH2SO3H(5.0當(dāng)量)，CH3CHO(1.0當(dāng)量)，THF/H2O 5∶1，0℃，0.5h，92％；b)PS-DEAD(2.5當(dāng)量，1.3mmol.g-1)，(R)-2-134a-g或(S)-2-134a-g(1.0當(dāng)量)，P(mClPh)3(2.0當(dāng)量)，CH2Cl2，23℃，0.5h，60-80％；c)iPr2EtN(4.0當(dāng)量)，EOMCl(4.0當(dāng)量)，TBAI(催化劑)，DMF，80℃，5h，80-90％；d)LDA(2.0當(dāng)量)，THF，-78℃，2-114(1.0當(dāng)量)，10分鐘，安柏萊特IRC-50(20.0當(dāng)量，10.0mmol.g-1)；e)Grubbs′II(10％mol)，甲苯(2mM)，80℃，12h，兩步后收率38-70％。
使用兩當(dāng)量的LDA對(duì)甲苯甲酸酯2-110a-g和2-117a-g去質(zhì)子化，隨后加入經(jīng)由固相化學(xué)制備的α，β-不飽和Weinreb酰胺(E.Moulin等人，J.Am.Chem.Soc.，1276999(2005))獲得酰化產(chǎn)物2-118a-g和2-119a-g。所述反應(yīng)用聚合物結(jié)合的酸終止，所述酸還掩蔽(sequestered)所有的二異丙基胺。這一反應(yīng)可產(chǎn)生一定水平的1，4-共軛加成產(chǎn)物(S.Barluenga等人，Chem.Eur.J.，114935(2005))。盡管存在于pochonin D中的大量的氯抑制這一反應(yīng)，但缺少芳基氯的化合物產(chǎn)生20％的共軛加成產(chǎn)物2-140a-g。然而，這些反應(yīng)的粗混合物用于后續(xù)的環(huán)化步驟。然后，在熱力學(xué)條件下(C.W.Lee和R.H.Grubbs，Org.Lett.，22145(2000))，使用Grubbs’第二代催化劑(A.K.Chatterjee等人，J.Am.Chem.Soc.，1223783(2000)；M.Scholl等人，Org.Lett.，1953(1999))進(jìn)行三烯的閉環(huán)復(fù)分解，產(chǎn)生預(yù)期的14元大環(huán)。在用2-118a-g、2-119a-g和2-140a-g的混合物進(jìn)行復(fù)分解反應(yīng)的情況下，除了2-112a-g和2-120a-g之外，還獲得相應(yīng)的12元環(huán)產(chǎn)物2-121a-g，為可分離的混合物。所有成功的反應(yīng)工序通過標(biāo)準(zhǔn)色譜法純化，分別產(chǎn)生大環(huán)2-112a-g和2-120a-g和2-121a-g，從2-95起的總收率為30-60％和8-10％。
然后為了進(jìn)一步的多樣化，使用大環(huán)2-112a-g和2-120a-g作為起點(diǎn)。使用磺酸樹脂對(duì)2-112a-g和2-120a-g脫保護(hù)EOM基團(tuán)產(chǎn)生化合物2-103a-g和2-85a-g，其經(jīng)簡(jiǎn)單過濾樹脂并蒸發(fā)掉溶劑后為純的形式并且產(chǎn)率出色(路線17)。12元環(huán)產(chǎn)物2-121a-g脫保護(hù)非常順利(未顯示)。用還原劑處理2-112a-g和2-120a-g導(dǎo)致使用二異丁基氫化鋁(Dibal)的羰基還原物或羰基和使用NaBH4的1，4-還原物的混合物。已知使用硼氫化物的非配位相反離子可促進(jìn)羰基還原(H.W.Gibson和F.C.Baily，J.Chem.Soc.Chem.Commun.，1977815；A.Kirschning，J.Prakt.Chem.，2000342)。使用聚合物支持的季銨硼氫化物(稱為硼氫化物交換樹脂，BER)，最方便地完成所述還原。因此，使用BER-樹脂可還原酮2-112a-g和2-120a-g從而獲得2-141a-g的兩種非對(duì)映異構(gòu)體，收率～60％。在常規(guī)條件下用磺酸樹脂脫保護(hù)EOM產(chǎn)生化合物2-142a-g。使用PS-NMM/Ac2O乙?；€原的中間體2-141a-g產(chǎn)生化合物2-143a-g，當(dāng)脫保護(hù)時(shí)，其產(chǎn)生消除從而產(chǎn)生為烯烴幾何混合物的三烯2-144。

路線17還原的酮類似物的脫保護(hù)和合成 a)PS-TsOH(10.0當(dāng)量，3.2mmol.g-1)，MeOH，40℃，4h，＞90％；b)BER樹脂(1.0當(dāng)量，2.5mmol.g-1)，MeOH，0℃，12h，～60％；c)Ac2O(1.2當(dāng)量)，PS-NMM(1.2當(dāng)量，3.20mmol.g-1)，DMAP(0.05當(dāng)量)，DMF，23℃，0.5h，～80％。BER樹脂＝硼氫化物交換樹脂，PS-TsOH＝磺酸樹脂MP，DIBAL＝二異丁基氫化鋁，DMAP＝二甲基氨基吡啶，DMF＝二甲基甲酰胺，PS-NMM＝嗎啉代甲基聚苯乙烯。
發(fā)現(xiàn)在存在磺酸樹脂時(shí)將二羥基苯甲酸酯2-112a-g和2-120a-g長(zhǎng)時(shí)間暴露于甲醇產(chǎn)生共軛加成；利用這一發(fā)現(xiàn)以驅(qū)動(dòng)所述反應(yīng)徹底完成。因此，15小時(shí)內(nèi)，苯酚2-85a-g定量地轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物2-145a-g(路線18)。在相同的條件下，這一產(chǎn)物可明顯地可從2-120a-g直接獲得。

路線18通過共軛加成合成類似物2-145 a)PS-TsOH(10.0當(dāng)量，3.2mmol.g-1)，MeOH，40℃，15h，80％。
為了進(jìn)一步的多樣化，化合物2-103a-g和2-85a-g也用作起點(diǎn)(路線19)。因此，用聚合物結(jié)合的氰基硼氫化物處理2-103a-g和2-85a-g產(chǎn)生1，4-還原產(chǎn)物2-146，收率適中。2-103a-g和2-85a-g的酸性更強(qiáng)的對(duì)羥基經(jīng)使用聚合物結(jié)合的DEAD的三信反應(yīng)或使用聚合物結(jié)合的堿的烷基化被取代，從而分別產(chǎn)生具有一般結(jié)構(gòu)2-147和2-148的化合物。用OsO4氧化產(chǎn)生二羥基化產(chǎn)物2-149(其為異構(gòu)體的混合物)以及相當(dāng)于二羥基化共軛烯烴的產(chǎn)物(產(chǎn)物未顯示)。用新鮮制備的二甲基二環(huán)氧乙烷處理2-103a-g和2-85a-g引起選擇性環(huán)氧化非共軛烯烴，其為pochonin A類似物2-150的非對(duì)映異構(gòu)體混合物。盡管如果用TBS保護(hù)苯酚可獲得對(duì)pochonin A的較高非對(duì)映異構(gòu)體選擇性(E.Moulin等人，Org.Lett.，75637(2005))，但是這里不需要保護(hù)。

路線19化合物2-85a-g和2-103a-g的衍生化 a)PS-TMABH3CN(2.0當(dāng)量，3.5mmol.g-1)，CH2Cl2/AcOH 10∶1，23℃，4h，～50％；b)PPh3(2.0當(dāng)量)，R2OH(2.0當(dāng)量)，PS-DEAD(2.0當(dāng)量，1.3mmol.g-1)，CH2Cl2，23℃，8h，～60％；c)R3X(0.9當(dāng)量)，PS-TBD(2.0當(dāng)量，2.9mmol.g-1)，CH2Cl2，23℃，3h，～90％；d)OsO4(0.1當(dāng)量)，NMO(1.0當(dāng)量)，丙酮/H2O 10∶1，23℃，1h，＞70％；e)DMDO(1.2當(dāng)量，0.04M于丙酮中)，CH3CN，0℃，30分鐘，＞90％.AllOH＝烯丙醇，DMDO＝二甲基二環(huán)氧乙烷，NMO＝4-甲基嗎啉N-氧化物，PS-DEAD＝乙氧羰基偶氮羧甲基聚苯乙烯，PS-TBD＝TBD-甲基聚苯乙烯，PS-TMABH3CN＝氰基硼氫化(聚苯乙烯基(polystiryl)甲基)三甲基銨。
有趣地注意到，共軛的烯烴已證明根據(jù)芳環(huán)上氯原子存在與否而具有不同的反應(yīng)性。而化合物2-120(其中X＝Cl并且R＝Me)脫保護(hù)EOM可用HCl在二噁烷中進(jìn)行，用相同的條件處理相應(yīng)的化合物2-112(其中X＝H并且R＝Me)引起脫保護(hù)期間氯離子的共軛加成，產(chǎn)生化合物2-151(路線20)。存在聚合物結(jié)合的堿時(shí)，能夠徹底地消除β-氯，從而回收共軛化合物2-103a-g。

路線20大環(huán)2-120和2-120a-g的衍生化 a)HCl(2.5％的二噁烷溶液)，23℃，3h，＞75％；b)PS-TBD(0.5當(dāng)量，2.6mmol.g-1)，CH2Cl2，23℃，8h，～90％；c)PS-TsOH(1.0當(dāng)量，3.2mmol.g-1)，DHP(1.0當(dāng)量)，CH2Cl2，23℃，5h，～80％；d)R2ONH2HCl(5.0當(dāng)量)，Pyr/AcOH 5∶1，40℃，12h，～90％；e)PS-TsOH(10.0當(dāng)量，3.2mmol.g-1)，MeOH，40℃，4h，～80％f)PS-TsOH(催化劑，3.2mmol.g-1)，DHP(1.0當(dāng)量)，CH2Cl2，23℃，5h，～70％；g)TFA(20％)，CH2Cl2，23℃，2h。DHP＝二氫吡喃，PS-TBD＝TBD-甲基聚苯乙烯，PS-TsOH＝磺酸樹脂。
當(dāng)評(píng)估苯酚的保護(hù)基時(shí)，注意到當(dāng)存在強(qiáng)酸(例如磺酸)時(shí)，二氫吡喃引起親電芳香取代而不是苯酚保護(hù)(參見T.Kometani等人，Synthesis，19881005)。向化合物2-103應(yīng)用這些條件(路線20)產(chǎn)生2-153，其為非對(duì)應(yīng)異構(gòu)體的可分離混合物。
用EOM基團(tuán)保護(hù)的化合物2-120(X＝H，路線20)經(jīng)歷與九種不同的羥胺順利地形成肟從而獲得化合物2-154，其為具有變化比率的E/Z混合物。在甲醇中用磺酸樹脂對(duì)2-154脫保護(hù)EOM，隨后在存在二氫吡喃下在DCM中用磺酸樹脂處理形成在芳香環(huán)上帶有吡喃取代的肟2-155，其為非對(duì)映異構(gòu)體的混合物。在側(cè)鏈含有酸(R2X＝OCH2COOH)的情況下，在甲醇中用磺酸樹脂脫保護(hù)EOM伴隨著羧酸(carboxylate)的酯化。用三氟乙酸處理化合物2-120a和2-112a引起形成三氟乙酸酯2-152。在具有或沒有EOM保護(hù)基的氯化類似物中形成肟主要產(chǎn)生相應(yīng)的羥胺1，4-加成(路線21)。令人驚訝地，當(dāng)pochonin D用TBS基團(tuán)保護(hù)時(shí)(2-128a-g，路線21)，在相同反應(yīng)條件下，形成的預(yù)期的肟2-157a-g是觀察到的唯一產(chǎn)物。然后，使用TBAF完成脫保護(hù)TBS基團(tuán)從而獲得肟2-158a-g。用羥胺處理pochonin D引起形成1，4-加成產(chǎn)物2-156。

路線21用化合物2-85形成肟 a)TBSCl(5.0當(dāng)量)，咪唑(5.0當(dāng)量)，DMF，23℃，3h，～90％；b)RONH2HCl(5.0當(dāng)量)，Pyr/AcOH 5∶1，40℃，12h，～90％；c)TBAF(2.5當(dāng)量)，THF，23℃，2h，～80％.DMF＝二甲基甲酰胺，Imid.＝咪唑，TBAF＝氟化四丁銨，TBS-Cl＝叔丁基二甲基甲硅烷基氯化物。
在另一實(shí)施方案中，制備雙甲基化的化合物2-164(路線22)。酸2-108和醇2-159用于標(biāo)準(zhǔn)三信酯化。將化合物2-160保護(hù)為鄰苯酚，隨后進(jìn)行用Weinreb酰胺2-114的?；磻?yīng)從而產(chǎn)生無環(huán)前體2-162。閉環(huán)復(fù)分解隨后使用磺酸樹脂移除化合物2-163上的EOM保護(hù)基提供雙甲基化的類似物2-164。

路線22pochonin D的雙甲基取代類似物(2-164)的合成 a)乙烯基溴化鎂(2.0當(dāng)量)，CuI(0.3當(dāng)量)，Et2O，-30→23℃，12h，65％；b)2-159(1.0當(dāng)量)，PPh3(2.0當(dāng)量)，DIAD(2.0當(dāng)量)，甲苯，23℃，3h，23％；c)EOMCl(2.0當(dāng)量)，NaH 60％(2.0當(dāng)量)，THF，0℃，2h，66％；d)LDA(2.0當(dāng)量)，THF，-78℃；2-114(1.0當(dāng)量)，10分鐘，57％；e)Grubbs’II(10％mol)，甲苯(2mM)，80℃，12h，57％；f)PS-TsOH(10當(dāng)量，3.2mmol.g-1)，MeOH，40℃，2.5h，40％。
此外，從大環(huán)2-163合成肟衍生物2-165和2-167，其為與1，4-加成產(chǎn)物的可分離混合物(路線23)。然后酯化肟2-167的羧酸部分從而形成相應(yīng)的哌啶酰胺肟2-168。使用磺酸樹脂移除EOM基團(tuán)分別允許將肟2-166和2-167與2-165和2-168分離。

路線23化合物2-164的肟衍生物的合成 a)BnONH2.HCl或NH2OCH2CO2H(5.0當(dāng)量)，Pyr/AcOH 5∶1，40℃，24h，20-35％；b)PS-TsOH(10.0當(dāng)量，3.2mmol.g-1)，MeOH，40℃，2.5h，77-80％；c)哌啶(1.1當(dāng)量)，EDC(1.1當(dāng)量)，HOBt(1.1當(dāng)量)，DMF，23℃，2h，75-80％。
在另一實(shí)施方案中，由如路線24所示的預(yù)先形成的肟環(huán)化制備pochonin肟。例如，使用N，N’-二異丙基碳二亞胺和二甲基氨基吡啶將保護(hù)的預(yù)先形成的肟1結(jié)合于王氏樹脂(Wang resin)。移除烯丙基保護(hù)基并且在三信條件下使苯酚官能化。隨后對(duì)羧酸脫保護(hù)并且用R3OH酯化。使用如前所述的Grubbs II催化劑實(shí)現(xiàn)閉環(huán)，從而提供樹脂結(jié)合的肟5。用三氟乙酸脫保護(hù)并從樹脂移除從而提供肟6。羧酸可與多種基團(tuán)R4XH反應(yīng)從而提供肟7，其中X是氧、硫、氨基或取代的氨基。通常獲得的肟7為E∶Z異構(gòu)體1∶1的混合物，其可通過色譜分離。

路線24 在另一實(shí)施方案中，通過利用三信酯化構(gòu)建大環(huán)的替代方法制備pochonin肟。路線25表示經(jīng)由三信酯化形成大環(huán)2-a1的非限制性實(shí)例。用磷酰氯再DMF中氧化苔黑酚(化合物8)以提供醛9，其被保護(hù)為雙乙氧甲醚并經(jīng)受用NaClO2氧化性氯化從而產(chǎn)生羧酸10。將羧酸保護(hù)為三甲基甲硅烷基乙酯并且用LDA和Weinreb酰胺12處理(路線26)從而提供α，β-不飽和酮13。40℃下，酮13與羧甲氧基胺半鹽酸鹽在吡啶中反應(yīng)以產(chǎn)生相應(yīng)的肟，其為E和Z異構(gòu)體的混合物。通過用EDC和哌啶處理，將肟轉(zhuǎn)化為預(yù)期的酰胺14，其為E和Z異構(gòu)體的混合物。在三信條件下，通過將DIAD緩慢地加入化合物14和PhP3的甲苯溶液將前體14大環(huán)化為保護(hù)的化合物15。40℃下，通過用磺酸樹脂處理將苯酚基團(tuán)脫保護(hù)從而產(chǎn)生2a-1，其為E和Z異構(gòu)體的混合物。分離E和Z異構(gòu)體的混合物從而獲得純E和Z異構(gòu)體2a-1。

路線25三信條件下的環(huán)化 根據(jù)路線26所示的方法制備二烯Weireb酰胺12。將反式-3-己烯二酸二甲酯16用氫化鋁鋰還原為相應(yīng)的二醇。將所述二醇單保護(hù)為叔丁基二苯基甲硅烷基醚17，并且將游離的醇經(jīng)由腈19三步轉(zhuǎn)化為醛20。然后用Weireb酰胺葉立德21處理醛20從而產(chǎn)生二烯Weireb酰胺12，其用于制備化合物13(路線24)。

路線26 獲得了E-異構(gòu)體2a-1和相關(guān)的E-肟2a-13(其在芳環(huán)上缺少氯取代基)的晶體結(jié)構(gòu)。所述晶體結(jié)構(gòu)如

圖1和2所示。
確定化合物2a-1和2a-13的溶解性。確定兩種化合物在DMSO和DMA中高度可溶(＞5g/mL)?；衔镌贒MSO和DMA中的良好溶解性使用于靜脈內(nèi)或腹膜內(nèi)給藥的制劑成為可能。在一個(gè)非限制性實(shí)例中，制備了在DMSO/吐溫 20/0.9％NaCl(10/5/85)中的肟制劑。
生物活性 測(cè)試pochonin類似物庫(kù)的代表性子集(84個(gè)化合物)10μM時(shí)對(duì)一組24激酶(AKT1、ARK5、Aurora-A、Aurora-B、B-RAF-VE、CDK2/CycA、CDK4/CycD1、CK2-α1、FAK、EPHB4、ERB2、EGF-R、IGF1-R、SRC、VEGF-R2、VEGF-R3、FLT3、INS-R、MET、PDGFR-β、PLK1、SAK、TIE2、COT)的抑制。測(cè)定方法和結(jié)果的描述顯示于實(shí)施例24。
明顯地，十二個(gè)化合物表現(xiàn)出超過50％的抑制，其代表對(duì)激酶的命中率a＞14％。令人驚訝地，盡管pochonin D、pochonin A和根赤殼菌素已經(jīng)表現(xiàn)為HSP90的強(qiáng)效抑制劑，但是它們對(duì)這組激酶沒有表現(xiàn)出顯著的活性。選擇九種化合物計(jì)算其對(duì)24個(gè)激酶的每一個(gè)的IC50(表4)。在這一更加詳細(xì)的分析中，根赤殼菌素顯示僅對(duì)VGFR-R2具有非常弱的活性，對(duì)其他二十三個(gè)激酶沒有抑制。幾種pochonin類似物顯示針對(duì)治療相關(guān)的酶(例如Src(對(duì)A2為8μM)、Aurora A(對(duì)A3為12μM)、IGF1-R(對(duì)A5為11μM))有明確模式的活性。重要地，證明是激酶抑制劑的化合物不是HSP90的抑制劑并且不是無差別的ATP替代物。
通過測(cè)量競(jìng)爭(zhēng)測(cè)定中直接的相互作用和測(cè)量細(xì)胞測(cè)定中HSP90客戶蛋白的減少，測(cè)試所述庫(kù)的另一子集對(duì)HSP90的抑制。HSP90的ATP酶袋具有特定的折疊，其存在于超家族中，所述超家族包括功能多樣的蛋白質(zhì)，例如DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶II、解旋酶、MutL和組氨酸激酶(Bergerat折疊)(A.Bergerat等人，Nature，386414(1997)；R.Dutta和M.Inouye，TrendsBiochem.Sci.，2524(2000))。事實(shí)上，已表明根赤殼菌素的確抑制這一家族的其他成員，盡管其具有較低的親和力(D.Gadelle等人，Nucleic AcidsRes.，332310(2005)；P.G.Besant等人，Mol.Pharmacol.，62289(2002)。但明顯地，相對(duì)于激酶組，本發(fā)明的最佳HSP90抑制劑對(duì)HSP90有選擇性。發(fā)現(xiàn)十六種化合物具有IC50＜1μM。

選擇用于IC50確定的Pochonin類似物 表4在一組24個(gè)激酶的測(cè)定中所選的pochonin類似物的抑制活性(IC50μM)(空白代表IC50＞50μM)。
激酶二羥基苯甲酸種類 根赤殼菌素 A-1 A-2 A-3 A-4 A-5 A-6 A-7 A-8 AKT1 ARK5 Aurora-A14 12 30 47 Aurora-B16 14 36 16 B-RAF-VE50 CDK2/CycA CDK4/CycD1 50 30 48 45 37 CK2-α1 FAK 14 9 37 38 34 EPHB4 16 40 49 40 ERBB2 16 24 EGF-R 33 10 14 22 16 32 IGF1-R 23 16 19 13 11 21 SRC 11 8 14 12 12 20 VEGF-R2 49 19 20 30 19 25 VEGF-R3 40 19 31 31 34 FLT323 23 45 44 INS-R 36 44 MET 32 29 36 PDGFR-β PLK1 SAK 17 25 19 20 17 TIE2 72 16 15 25 COT 根赤殼菌素和pochonin D所靶向的HSP90的ATP-結(jié)合袋具有特定的折疊，其存在于超家族中，所述超家族包括功能多樣的蛋白質(zhì)，例如DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶II、解旋酶、MutL和組氨酸激酶(R.Dutta和M.Inouye，Trends Biochem.Sci.，2424(2000))。事實(shí)上，已表明根赤殼菌素的確抑制這一家族的其他成員，盡管其具有較低的親和力(D.Gadelle等人，NucleicAcids Res.，332310(2005)；P.G.Besant等人，Mol.Pharmacol.，62289(2002))。盡管以上描述的pochonin庫(kù)確定地含有一些這樣的化合物——所述化合物是帶有Bergerat折疊的酶的良好抑制劑，但是我們希望評(píng)估pochonin骨架附近的修飾是否可將這些化合物的選擇性從HSP90抑制劑調(diào)整為激酶抑制劑。超過百分之十四的化合物顯示在10mM時(shí)激酶抑制超過50％的事實(shí)清楚地支持RAL是激酶抑制的良好骨架的假說。
在競(jìng)爭(zhēng)測(cè)定中篩選庫(kù)的HSP90親和力導(dǎo)致關(guān)于構(gòu)效關(guān)系的下述一般趨勢(shì)(根據(jù)式A編號(hào)和命名)雖然R1上大型取代基很好地耐受激酶的活性，但是一般發(fā)現(xiàn)甲基或氫具有較好的HSP90親和力；R2上的取代通常導(dǎo)致HSP90親和力的降低；C14-15(AB)上的烯烴的HSP90親和力活性一般與相應(yīng)的環(huán)氧化物相當(dāng)，然而相應(yīng)的二醇一般具有較低的活性，并且反式烯烴好于順式烯烴；一般發(fā)現(xiàn)在C10-11(CD)上存在烯烴的HSP90親和力超過相應(yīng)的烷烴或在C11上取代的產(chǎn)物；C9羰基的還原一般導(dǎo)致較低的HSP90親和力，而一些羥胺的取代增加HSP90親和力；一般發(fā)現(xiàn)在R4處被小基團(tuán)(例如氯)取代改善HSP90活性，除了在R1和R3處的一些取代置換(其中氫優(yōu)于氯)之外；苯酚的取代耐受激酶親和力的增加，但是一般減少對(duì)HSP90的親和力。
值得注意的是，一般來說，表現(xiàn)出對(duì)HSP90的有效親和力的化合物不是激酶的良好抑制劑，這強(qiáng)烈提示該骨架不是無區(qū)別的嘌呤激動(dòng)劑。

式A 抗腫瘤活性 在小鼠中評(píng)估本發(fā)明的化合物的抗腫瘤活性。在健康的CB17/SCID小鼠中通過將HCC1954細(xì)胞注射于70只小鼠的右翼(right flank)，腹膜內(nèi)誘導(dǎo)腫瘤。一旦所述誘導(dǎo)腫瘤的平均大小為80mm，就用25mg/kg、50mg/kg和100mg/kg的化合物a2-1治療小鼠。利用單獨(dú)的媒介物和10mg/kg的

的對(duì)照。觀察到用化合物2a-1治療的小鼠的腫瘤大小的劑量依賴性減小。該結(jié)果優(yōu)于那些在用

治療的小鼠中獲得的結(jié)果，甚至是25mg/kg的劑量持續(xù)三星期。重要地，最后治療后，三到七天內(nèi)沒有出現(xiàn)腫瘤的再生，這表明每周一至三次的給藥時(shí)間表應(yīng)該是有效的。
實(shí)施例26顯示所選pochonin類似物針對(duì)HCC 1954和SK-BR-3腫瘤細(xì)胞的抗腫瘤活性。表現(xiàn)出顯著細(xì)胞毒性的化合物進(jìn)一步檢驗(yàn)其誘導(dǎo)已知HSP90客戶蛋白(例如在SK-BR3中的ErbB2)降解的能力。因此，用化合物處理18小時(shí)后，獲得全部細(xì)胞蛋白溶解產(chǎn)物，將蛋白質(zhì)濃度標(biāo)準(zhǔn)化并且通過蛋白質(zhì)印跡法量化ErbB2的濃度(C.Chavany等人J.Biol.Chem.2714974-4977(1996))。在這一測(cè)定中，化合物2a-1具有的EC50為26nM并且化合物2a-13具有的EC50為12nM，而根赤殼菌素具有的IC50為289nM。值得注意地，一個(gè)肟異構(gòu)體比其他的更具有全身活性。對(duì)于2a-11和2a-13，E-異構(gòu)體的活性比Z-異構(gòu)體多5至10倍。
最大耐受劑量 連續(xù)五天，每天一次用25mg/kg、50mg/kg和100mg/kg的化合物2a-1處理三只健康的CB17/SCID小鼠。以25mg/kg濃度處理的小鼠沒有表現(xiàn)出任何體重減少。以50mg/kg和100mg/kg劑量水平處理的小鼠表現(xiàn)出輕微的但是可接受的體重減少。
實(shí)施例 通用技術(shù)。除非另有說明，所有反應(yīng)在氮?dú)夥罩?，在無水條件下用干燥(無水)溶劑進(jìn)行。通過使溶劑經(jīng)過可商購(gòu)的氧化鋁柱(InnovativeTechnology，Inc.，

VA)來獲得無水溶劑。所有取代的聚苯乙烯樹脂(100-200目，1％DVB)購(gòu)自

或

Grubbs’II催化劑購(gòu)自Materia

固相反應(yīng)在

210或圓底燒瓶中進(jìn)行，并在多孔漏斗(frittedfunnel)中過濾。通過薄層色譜法(TLC)監(jiān)測(cè)反應(yīng)，所述薄層色譜在0.25mmE.

硅膠板(60F-254)上進(jìn)行，使用紫外光作為顯色劑(visualizing agent)和用10％乙醇磷鉬酸或香草醛溶液并加熱作為展開劑。E.

硅膠(60，粒度0.040-0.063mm)用于急驟柱色譜法。在0.25mm E.

硅膠板上進(jìn)行PTLC(制備薄層色譜法)。在Bruker

儀器上記錄NMR波譜，并通過使用殘留的未氘代溶劑作為內(nèi)標(biāo)進(jìn)行校準(zhǔn)。下述縮寫用于解釋多重性s＝單峰，d＝雙峰，t＝三重峰，q＝四重峰，m＝多重峰，b＝寬峰。在Perkin-Elmer 1600系列FT-IR分光計(jì)上記錄IR光譜。使用Agilent

HPLC和

micro-TOF儀器(ESI)記錄LC-MS。除非另有說明，使用Supelco

C8(5cm x 4.6mm，5μm顆粒)柱，在13分鐘內(nèi)按線性洗脫梯度以流速0.5ml/min從100％H2O(0.5％HCO2H)到100％MeCN進(jìn)行。除非另有說明，通過在-78℃用正丁基鋰(1.0當(dāng)量)處理在THF中的二異丙胺(1.0當(dāng)量)的溶液來制備濃度為0.566M的LDA并在使用前于該溫度攪拌30分鐘。
實(shí)施例1合成化合物2-110的通用步驟 如在路線16中所描述，將酸2-95A或2-95b(1.0當(dāng)量)、高烯丙醇(1.0當(dāng)量)和三-(3-氯苯基)膦(2.0當(dāng)量)的無水甲苯(0.05M)溶液在室溫下用PS-DEAD(2.5當(dāng)量，1.3mmol g-1)處理。攪拌10分鐘后，將反應(yīng)混合物在二氧化硅上過濾并用己烷/EtOAc(10/1，100mL)和己烷/EtOAc(3/1，100mL)洗滌。將3/1混合物減壓濃縮以生成化合物2-115(60％-80％)。未經(jīng)進(jìn)一步純化，將化合物2-115(1.0當(dāng)量)和碘化四丁基銨(催化量)溶于DMF(0.15M)，并用二異丙基乙胺(4.0當(dāng)量)和(氯甲基)乙基醚(4.0當(dāng)量)處理。在80℃攪拌過夜后，將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋并用飽和NH4Cl溶液洗滌若干次。將有機(jī)相經(jīng)MgSO4干燥并減壓濃縮以生成化合物2-110(80％-90％)。使用這種方法，制備多種化合物2-110。

1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ7.04(s，1H)，5.89(ddt，J＝17.0，10.5，7.0Hz，1H)，5.31(s，2H)，5.21(s，2H)，5.22-5.06(m，3H)，3.79(q，J＝7.0Hz，2H)，3.72(q，J＝7.0Hz，2H)，2.48-2.44(m，2H)，2.36(s，3H)，2.01(qd，J＝12.4，7.0Hz，1H)，1.25(t，J＝7.0Hz，3H)，1.23(t，J＝7.0Hz，3H)，1.02(d，J＝6.4Hz，3H)，1.01(d，J＝7.0Hz，3H)；13C NMR(CDCl3，100MHz，25℃)δ167.3，154.0，152.9，134.8，，134.1，120.4，117.5，117.1，101.5，93.9，93.4，79.0，64.6，64.3，35.6，30.8，18.4，17.6，17.5，15.0(x 2)；HRMS(ESI-TOF)m/z 437.1574([M+Na+]，C21H31O6ClNa理論值437.1701)。
制備化合物2-217的下述非限制性實(shí)例。

實(shí)施例2用于合成化合物2-118，2-119和2-140的通用步驟 如在路線16中所描述，在-78℃將化合物2-110或2-117(1.0當(dāng)量)的無水THF(0.2M)溶液用新鮮制備的LDA(2.0當(dāng)量)處理。之后立即將α，β-不飽和的Weinreb酰胺(N-甲氧基-N-甲基-3-[(4-氯-3-甲基-5-異噁唑基)-磺酰胺基]-2-噻吩甲酰胺)(S.V.Ley和I.R.Baxendale，Nat.Rev.DrugDiscov.，1573(2002))加入到此冷卻的溶液中(1.0當(dāng)量)。接著將所得到的混合物在-78℃攪拌10分鐘并通過加入

樹脂(20當(dāng)量)終止反應(yīng)。一旦暖至室溫就將反應(yīng)物在二氧化硅墊上過濾并用EtOAc洗滌。減壓濃縮以獲得期望的化合物2-118或2-119。未經(jīng)任何進(jìn)一步純化，該化合物被直接用于復(fù)分解反應(yīng)。當(dāng)X＝H時(shí)，觀察到20％的相應(yīng)1，4-加成化合物并純化一部分混合物用于化合物2-118/2-119和2-140的表征(SiO2，0-20％EtOAc/環(huán)己烷梯度)?；衔?-118/2-119和2-140的說明性實(shí)例如下；它們的表征分別在每張圖下面的正文中。
說明性化合物2-119
1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ6.91(dt，J＝15.8，6.7Hz，1H)，6.87(d，J＝1.8Hz，1H)，6.53(d，J＝1.8Hz，1H)，6.19(d，J＝15.8Hz，1H)，5.91-5.77(m，2H)，5.23(s，2H)，5.22(s，2H)，5.15-5.00(m，5H)，3.87(s，2H)，3.73(q，J＝7.0Hz，4H)，2.45-2.40(m，2H)，2.35-2.29(m，2H)，2.25-2.20(m，2H)，2.00-1.92(m，1H)，1.24(t，J＝7.0Hz，6H)，1.00(d，J＝2.3Hz，3H)，0.98(d，J＝3.0Hz，3H)；13CNMR(CDCl3，100MHz，25℃)δ196.3，167.6，159.0，156.2，147.1，137.0，135.0，134.4，129.5，118.7，117.2，115.5，111.0，102.3，93.3，93.0，78.8，64.4，64.3，45.4，35.8，32.0，31.7，30.8，18.5，17.4，15.0(x 2)；HRMS(ESI-TOF)m/z511.2521([M+Na+]，C28H40O7Na理論值511.2666)。
說明性化合物2-140
1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ6.72(s，1H)，6.57(s，1H)，5.89-5.71(m，2H)，5.20-5.16(m，4H)，5.12-4.90(m，4H)，4.33(t，J＝6.8Hz，2H)，3.69(2 x q，J＝7.0Hz，4H)，3.57(s，3H)，3.13(s，3H)，2.69-2.64(m，1H)，2.53-2.45(m，4H)，2.32(m，2H)，2.08-2.03(m，2H)，1.19(t，J＝6.8Hz，6H)，1.01(t，J＝6.5Hz，2H)；HRMS(ESI-TOF)m/z 508.2873([M+H+]，C27H42O8N理論值508.2905)。
使用上面的步驟，制備下文所示的化合物2-118/2-119的下述非限制性實(shí)例。

化合物2-140的下述非限制實(shí)例可以根據(jù)此處所描述的步驟制備。

實(shí)施例3復(fù)分解反應(yīng)的通用步驟 如在路線16中所描述，將粗制的2-118或2-119(或當(dāng)X＝Cl時(shí)，2-118/2-119和2-140的混合物)的無水甲苯(2mM)溶液用Grubbs第二代催化劑(0.10當(dāng)量)處理并在80℃加熱12小時(shí)。將反應(yīng)物冷卻至室溫并將混合物通過SiO2墊過濾，用CH2Cl2及隨后的EtOAc/環(huán)己烷1/1混合物洗滌，并減壓濃縮。通過急驟色譜法純化(SiO2，0-25％EtOAc/環(huán)己烷梯度)，獲得化合物2-112或2-120或2-140(60％-85％，經(jīng)兩步)，化合物2-112或2-120和2-140的說明性實(shí)例如下；它們的表征分別在每張圖下面的正文中。
說明性化合物2-112/2-120
1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ7.14(s，1H)，6.72-6.66(m，1H)，5.88(d，J＝15.2Hz，1H)，5.33-5.17(m，6H)，4.92-4.88(m，1H)，4.21(d，J＝17.0Hz，1H)，3.92(d，J＝17.0Hz，1H)，3.79-3.67(m，4H)，2.33-2.17(m，5H)，2.07-1.96(m，2H)，1.23(t，J＝7.0Hz，3H)，1.21(t，J＝7.0Hz，3H)，1.00(d，J＝5.8Hz，6H)；13CNMR(CDCl3，100MHz，25℃)δ195.7，167.1，154.7，154.4，147.4，133.7，131.2，128.8，128.4，119.7，118.0，102.7，93.9，93.5，80.0，64.8，64.5，44.1，32.3，31.2，30.7，30.6，18.3，17.2，15.0，14.9；HRMS(ESI)m/z 517.1844([M+Na+]，C26H35O7ClNa理論值517.1964)；[α]25D+21.3(c 1.00，CHCl3)。

1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ7.49-7.47(m，2H)，7.40-7.29(m，3H)，7.10(s，1H)，6.84-6.77(m，1H)，5.98(d，J＝15.2Hz，1H)，5.78(d，J＝8.8Hz，1H)，5.44-5.30(m，4H)，5.15(d，J＝7.0Hz，1H)，5.05(d，J＝6.8Hz，1H)，4.07(d，J＝17.0Hz，1H)，3.90(d，J＝17.0Hz，1H)，3.80(d，J＝7.0Hz，2H)，3.60-3.51(m，2H)，2.68-2.62(m，1H)，2.50-2.47(m，1H)，2.38-2.29(m，2H)，2.14-2.02(m，2H)，1.25(t，J＝7.0Hz，3H)，1.17(t，J＝7.0Hz，3H)；13C NMR(CDCl3，100MHz，25℃)δ195.7，166.7，154.8，154.2，147.3，140.7，133.3，132.1，128.5，128.3(x2)，128.2，127.9，127.7，126.7(x 2)，120.1，118.1，102.9，93.9，93.4，77.4，64.8，64.4，44.5，40.5，30.7，15.0，14.9；HRMS(ESI)m/z 551.1807([M+Na+]，C29H33O7ClNa理論值551.1680)；[α]25D-40.4(c 0.79，CHCl3)。

1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ7.39-7.33(m，4H)，7.31-7.27(m，1H)，6.82(s，1H)，6.82-6.75(m，1H)，6.63(s，1H)，6.02(d，J＝16.4Hz，1H)，5.35-5.29(m，2H)，5.27-5.20(m，5H)，4.16(d，J＝14.6Hz，1H)，3.79-3.70(m，4H)，3.52(d，J＝14.6Hz，1H)，3.37(dd，J＝13.4，4.1Hz，1H)，2.78(dd，J＝13.5，9.4Hz，1H)，2.37-2.12(m，5H)，2.06-2.02(m，1H)，1.26(t，J＝7.0Hz，3H)，1.24(t，J＝7.0Hz，3H)；13C NMR(CDCl3，100MHz，25℃)δ197.6，167.8，159.2，156.5，149.0，137.3，135.5，131.8，129.9，129.5(x 2)，128.6(x 2)，128.4，126.7，118.1，109.9，102.3，93.5，93.1，75.8，64.6，64.4，44.4，41.0，36.2，31.0，30.6，15.0(x 2)；HRMS(ESl)m/z 531.2350([M+Na+]，C30H36O7Na理論值531.2359)；[α]25D-24.1(c 0.33，CHCl3)。

1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ7.56-7.54(m，2H)，7.41-7.29(m，3H)，6.89-6.82(m，1H)，6.78(d，J＝2.3Hz，1H)，6.61(d，J＝1.8Hz，1H)，6.06(d，J＝16.4Hz，1H)，5.98(dd，J＝11.7，2.4Hz，1H)，5.53-5.51(m，2H)，5.20(d，J＝7.0Hz，1H)，5.17(d，J＝6.4Hz，1H)，5.07(d，J＝7.0Hz，1H)，4.96(d，J＝7.0Hz，1H)，4.20(d，J＝14.6Hz，1H)，3.73-3.68(m，2H)，3.54-3.45(m，3H)，2.71-2.66(m，1H)，2.55-2.51(m，1H)，2.38-2.32(m，2H)，2.23-2.06(m，2H)，1.22(t，J＝7.0Hz，3H)，1.14(t，J＝＝7.0Hz，3H)；13C NMR(CDCl3，100MHz，25℃)δ197.6，167.4，159.3，156.6，149.0，140.8，135.6，132.2，129.9，128.5，128.2(x 2)，127.9，126.9(x 2)，117.9，109.9，102.3，93.2，93.0，76.6，64.4，64.3，44.4，40.5，31.0，30.6，15.0，14.9；HRMS(ESI)m/z 517.2062([M+Na]，C29H34O7Na理論值517.2197)。[α]25D-108.3(c 1.00，CHCl3)。
說明性化合物2-121
4種非對(duì)映異構(gòu)體的混合物1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ6.77(s，1H)，6.52(s，0.5H)，6.46(s，0.5H)，5.59-5.37(m，2H)，5.21-5.18(m，4H)，5.09-4.92(m，1H)，3.75-3.70(m，4H)，3.53-3.48(m，3H)，3.38-3.34(m，1H)，3.19-3.10(m，3H)，2.65-2.47(m，3H)，2.29-2.04(m，6H)，1.89-1.72(m，2H)，1.31-1.20(m，6H)，1.06-0.96(m，6H)；HRMS(ESI-TOF)m/z 544.2907([M+Na+]，C28H43O8NNa理論值544.2881)。

4種非對(duì)映異構(gòu)體的混合物1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ7.51-7.42(m，2H)，7.38-7.31(m，3H)，6.73-6.70(m，1H)，6.60-6.49(m，1H)，6.45-6.31(m，1H)，5.73-5.39(m，2H)，5.23-5.00(m，4H)，3.75-3.69(m，2H)，3.56-3.34(m，6H)，3.19-3.09(m，3H)，2.66-2.08(m，8H)，1.31-1.19(m，5H)，1.10-1.04(m，3H)；HRMS(ESI-TOF)m/z 578.2715([M+Na+]，C31H41O8NNa理論值578.2724)。
實(shí)施例4用于EOM脫保護(hù)以生成化合物脫保護(hù)的-2-121和2-85的通用步驟。
如在用于化合物2-103/2-85的路線17中所描述，向相應(yīng)的化合物2-120/2-112或2-121(1.0當(dāng)量)的MeOH(0.03M)溶液中加入PS-TsOH(10.0當(dāng)量，3.2mmol/g)并將懸浮液在40℃振搖1至4小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾并將甲醇溶液減壓濃縮。用急驟色譜法純化(SiO2，0-20％EtOAc/環(huán)己烷梯度)，獲得相應(yīng)的化合物脫保護(hù)的-2-121或化合物2-103/2-85。(＞90％)?；衔锩摫Ｗo(hù)的-2-121和2-103/2-85的說明性實(shí)例如下；它們的表征分別在每張圖下面的正文中。
說明性化合物脫保護(hù)的-2-121
4種非對(duì)映異構(gòu)體的混合物1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ11.54(s，1H)，6.33(d，J＝2.3Hz，1H)，6.25(s，1H)，5.53-5.51(m，1H)，5.44-5.41(m，1H)，5.11-5.08(m，1H)，4.01(d，J＝11.7Hz，2H)，3.45(s，3H)，3.11(s，3H)，2.83-2.73(m，1H)，2.68-2.59(m，1H)，2.27-2.20(m，1H)，2.10-1.87(m，6H)，1.82-1.72(m，1H)，1.01-0.94(m，6H)；HRMS(ESI-TOF)m/z 428.2109([M+Na+]，C22H31O6NNa理論值428.2044)。
說明性化合物2-103/2-85
1H NMR(C6D6，400MHz，25℃)δ12.31(s，1H)，6.83(s，1H)，6.74-6.67(m，1H)，5.84(bs，1H)，5.82(d，J＝15.8Hz，1H)，5.03-4.95(m，1H)，4.88-4.86(m，1H)，4.76-4.70(m，1H)，4.40(d，J＝17.6Hz，1H)，4.15(d，J＝17.5Hz，1H)，2.40-2.34(m，1H)，2.22-2.18(m，1H)，1.87-1.65(m，4H)，1.53-1.48(m，1H)，0.92(d，J＝6.4Hz，3H)，0.66(d，J＝7.0Hz，3H)；13C NMR(C6D6，100MHz，25℃)δ193.7，164.2，156.8，145.8，137.2，131.8，129.3，126.3，115.3，107.9，103.6，82.1，46.4，33.3，30.9，30.7，28.8，20.1，18.5，18.3；HRMS(ESI-TOF)m/z 401.1170([M+Na+]，C20H23ClO5Na理論值401.1126)；[α]25D-35.6(c 0.52，CHCl3)。

1H NMR(C6D6，400MHz，25℃)δ12.0(bs，1H)，7.32-7.29(m，3H)，7.19-7.15(m，2H)，6.86-6.79(m，1H)，6.51(d，J＝2.4Hz，1H)，6.27-6.25(m，1H)，6.11(d，J＝2.4Hz，1H)，6.02(d，J＝＝15.8Hz，1H)，5.49(s，1H)，5.17-5.10(m，1H)，4.97-4.90(m，1H)，4.40(d，J＝16.4Hz，1H)，3.97(d，J＝17.2Hz，1H)，2.83-2.76(m，1H)，2.45-2.38(m，1H)，1.89-1.78(m，2H)，1.67-1.58(m，2H)；13C NMR(C6D6，100MHz，25℃)δ196.5，169.6，166.1，161.3，146.0，140.5，138.8，132.1，130.0，128.6(x 2)，127.3，126.6(x 2)，126.3，112.2，105.9，103.0，77.1，48.6，38.4，30.9，30.3；HRMS(ESI)m/z 401.1271([M+Na+]，C23H22O5Na理論值401.1359)；[α]25D-10.3(c 0.25，CHCl3)。

1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ12.43(s，1H)，6.74(d，J＝1.7Hz，1H)，6.73-6.65(m，1H)，6.48(d，J＝1.7Hz，1H)，5.92(d，J＝15.8Hz，1H)，5.12-5.00(m，2H)，4.91-4.80(m，1H)，4.19(d，J＝17.0Hz，1H)，3.84(d，J＝16.4Hz，1H)，2.77(m，1H)，2.64-2.57(m，1H)，2.01-1.97(m，1H)，1.89-1.70(m，3H)，1.61-1.56(m，2H)，1.30-1.21(m，2H)，0.90(t，J＝6.7Hz，3H)；3C NMR(CDCl3，100MHz，25℃)δ197.5，169.9，165.6，160.6，147.5，140.2，131.9，129.5，127.0，112.8，106.1，102.9，76.2，48.7，35.7，34.3，31.1，29.7，19.4，13.8；HRMS(ESI-TOF)m/z 367.1330([M+Na+]，C20H24O5Na理論值367.1521)；[α]25D+21.6(c 0.36，CHCl3)。

1H NMR(CD3OD，400MHz，25℃)δ6.78-6.71(m，1H)，6.29(d，J＝2.4Hz，1H)，6.22(d，J＝2.0Hz，1H)，5.87(d，J＝15.5Hz，1H)，5.37-5.23(m，3H)，4.01(d，J＝17.2Hz，1H)，3.92(d，J＝17.0Hz，1H)，2.67-2.61(m，1H)，2.29-2.15(m，5H)，1.31(d，J＝6.4Hz，3H)；13C NMR(CD3OD，100MHz，25℃)δ198.5，169.8，164.2，162.3，148.4，139.1，131.6，129.6，127.3，111.7，101.7，72.0，47.7，36.8，30.8，30.7，17.4，(1個(gè)季碳不可見)；HRMS(ESI)m/z 339.1141([M+Na]，C18H20O5Na理論值339.1203)。[α]25D-45.1(c 0.27，CHCl3)。

1H NMR(CD3OD，400MHz，25℃)δ6.74-6.68(m，1H)，6.48(s，1H)，5.86(d，J＝15.2Hz，1H)，5.31-5.25(m，2H)，4.39(t，J＝5.3Hz，2H)，4.27(s，2H)，2.43-2.40(m，2H)，2.25(m，4H)；13C NMR(CD3OD，100MHz，25℃)δ196.9，170.1，161.9，158.1，147.8，135.9，130.9，130.2，129.9，115.2，107.3，102.4，65.9，46.2，31.3，30.9，30.5；HRMS(ESI)m/z 337.0797([M+H+]，C17H18O5Cl理論值337.0837)。
實(shí)施例5合成化合物2-141的通用步驟。
如在路線17中所描述，在0℃，向相應(yīng)的化合物2-120/2-112(1.0當(dāng)量)的MeOH(0.03M)溶液中加入BER-樹脂(

上的硼氫化物，1.0當(dāng)量，2.5mmol g-1)并攪拌反應(yīng)物12小時(shí)以上。接著，過濾反應(yīng)物并減壓濃縮。通過急驟色譜法純化(SiO2，0-20％EtOAc/環(huán)己烷梯度)，獲得兩種非對(duì)映異構(gòu)體的混合物(1∶1)2-141(～60％)?；衔?-141的說明性實(shí)例如下；它的表征數(shù)據(jù)在圖下的正文中。
說明性化合物2-141
1H NMR(CD3Cl，400MHz，25℃)δ7.05(s，1H)，6.99(s，1H)，5.64-5.57(m，2H)，5.54-5.53(m，2H)，5.49-5.35(m，6H)，5.31-5.28(m，4H)，5.24-5.16(m，4H)，5.13-5.08(m，1H，35’)，4.68(m，1H，35’)，4.56(m，1H，35)，3.81-3.69(m，8H)，3.25(dd，J＝13.9，8.0Hz，1H，35)，3.19(dd，J＝13.7，4.8Hz，1H，35’)，3.11(dd，J＝13.5，10.1Hz，1H，35’)，2.90(dd，J＝13.9，5.12Hz，1H，35)，2.35(m，9H)，2.09-1.95(m，1H)，1.80-1.70(m，2H)，1.39(d，J＝2.9Hz，3H，35)，1.37(d，J＝3.2Hz，3H，35’)，1.24(2x q，J＝6.9和5.0Hz，12H，35+35’)；HRMS(ESI)m/z 491.1729([M+Na+]，C24H33ClO7Na理論值491.1807)。
實(shí)施例6合成化合物2-142的通用步驟。
如在路線17中所描述，向相應(yīng)的化合物2-141(1.0當(dāng)量)的MeOH(0.02M)溶液中加入PS-TsOH(10.0當(dāng)量，3.2mmol g-1)并將懸浮液在40℃振搖4小時(shí)。接著將反應(yīng)混合物過濾并減壓濃縮甲醇溶液。通過制備TLC純化(SiO2，25％EtOAc/環(huán)己烷)，獲得2-142(～90％)，為兩種非對(duì)映異構(gòu)體的混合物(1∶1)?；衔?-142的說明性實(shí)例如下；它的表征數(shù)據(jù)在圖下的正文中。
說明性化合物2-142
1H NMR((CD3)2CO，400MHz)δ12.30(s，2H)，11.43(s，2H)，6.75(s，2H)，6.00(bdd，J＝6.4，6.2Hz，1H)，5.97(bdd，J＝＝6.4，6.2Hz，1H)，5.97(bd，J＝6.7Hz，1H)，5.77(bd，J＝6.7Hz，1H)，5.57-5.48(m，4H)，5.18-5.14(m，2H)，3.38-3.28(m，3H)，3.02(dd，J＝16.1，10.5Hz，1H)，2.41-2.09(m，12H)，1.11(d，J＝6.2Hz，6H)；HRMS(ESI)m/z 375.1029([M+Na+]，C18H21ClO5Na理論值375.0970)。
實(shí)施例7合成化合物2-143的通用步驟。
如在路線17中所描述，在23℃，向相應(yīng)的化合物2-141(1.0當(dāng)量)的DMF(0.02M)溶液中加入Ac2O(1.2當(dāng)量)、嗎啉甲基聚苯乙烯(1.2當(dāng)量，3.2mmol g-1)和DMAP(0.05當(dāng)量)，并將混合物攪拌30分鐘，隨后通過TLC直到原料被消耗。接著將樹脂過濾并減壓濃縮有機(jī)相。通過PTLC純化(SiO2，20％EtOAc/環(huán)己烷)，獲得作為兩種非對(duì)映異構(gòu)體混合物(1∶1)的相應(yīng)的2-143(～80％)。化合物2-143的說明性實(shí)例如下；它的表征數(shù)據(jù)在圖下的正文中。
說明性化合物2-143
1H NMR(CD3Cl，400MHz)δ7.04(s，1H)，7.01(s，1H)，5.86(dd，J＝15.0，6.9Hz，1H)，5.67(dd，J＝12.4，6.2Hz，1H)，5.60-5.54(m，4H)，5.48(dd，J＝7.2，7.2Hz，1H)，5.41-5.34(m，3H)，5.32-5.30(m，4H)，5.28-5.23(m，2H)，5.21(dd，J＝11.0，6.7Hz，2H)，5.17(dd，J＝11.8，6.9Hz，2H)，3.81-3.69(m，8H)，3.43(dd，J＝14.2，7.5Hz，1H)，3.23-3.15(m，2H)，2.85(dd，J＝13.9，5.4Hz，1H)，2.30-2.17(m，8H)，2.12(s，3H)，2.06(s，3H)，1.95-2.00(m，4H)，1.39(2x d，J＝5.6Hz，6H)，1.24(m，12H)；HRMS(ESI)m/z 533.1864([M+Na+]，C26H35ClO8Na理論值533.1913)。
實(shí)施例8合成化合物2-144的通用步驟。
如在路線17中所描述，向相應(yīng)的化合物2-143(1.0當(dāng)量)的MeOH(0.02M)溶液中加入PS-TsOH(10.0當(dāng)量，3.2mmol/g)并將懸浮液在40℃振搖4小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾并減壓濃縮甲醇溶液。通過TPLC純化(SiO2，20％EtOAc/環(huán)己烷)，獲得化合物2-144(～60％收率)?；衔?-144的說明性實(shí)例如下；它的表征數(shù)據(jù)在圖下的正文中。
說明性化合物2-144
非對(duì)映異構(gòu)體2∶1的混合物1H NMR(CD3Cl，400MHz)δ12.6(s，1H)，12.12(s，0.5H)，6.93(d，J＝8.7Hz，0.5H)，6.66(s，1H)，6.64(s，0.5H)，6.62-6.60(m，1H)，6.10-6.05(m，3H)，5.47-5.33(m，4.5H)，2.60-2.53(m，1.5H)，2.26-2.02(m，7.5H)，1.44(d，J＝6.2Hz，1.5H)，1.43(d，J＝6.4Hz，3H)；HRMS(ESI)m/z357.0898([M+Na+]，C18H19ClO4Na理論值357.0864)。
實(shí)施例9合成化合物2-145的通用步驟。
如在路線18中所描述，向相應(yīng)的化合物2-85(1.0當(dāng)量)的甲醇(0.03M)溶液中加入氨基磺酸樹脂(10.0當(dāng)量)并將懸浮液在40℃攪拌15小時(shí)。接著將反應(yīng)物過濾，并用CH2Cl2洗滌樹脂若干次。減壓濃縮，接著在PTCL上純化(己烷/EtOAc1/1)，獲得期望的化合物2-145，為非對(duì)映異構(gòu)體混合物(2∶1)?；衔?-145的說明性實(shí)例如下；它的表征數(shù)據(jù)在圖下的正文中。
說明性化合物2-145
1H NMR(C6D6，400MHz，25℃)δ12.28(s，0.4H)，11.91(s，0.6H)，7.21-7.11(m，5H)，6.62(s，1H)，6.03-6.01(m，1H)，5.58(bs，1H)，5.38-5.33(m，1H)，5.27-5.20(m，1H)，4.76(d，J＝17.5Hz，0.6H)，4.02(d，J＝17.0Hz，0.4H)，4.18(d，J＝18.1Hz，0.6H)，4.09(d，J＝17.0Hz，0.4H)，3.87(bs，0.4H)，3.81(bs，0.6H)，3.15(s，1.8H)，3.12(s，1.2H)，2.83-2.78(m，1H)，2.45-2.30(m，2H)，2.18-2.16(m，1H)，2.02-1.97(m，2H)，1.79-1.72(m，2H)；HRMS(ESI-TOF)m/z 467.1366([M+Na+]，C24H25O6ClNa理論值467.1232)。
實(shí)施例10合成化合物2-146的通用步驟。
如在路線19中所描述，23℃下，向相應(yīng)的化合物2-103/2-85(1.0當(dāng)量)的CH2Cl2/AcOH 10/1(0.08M)溶液中加入氰基硼氫化(聚苯乙烯基甲基)三甲基銨(2.0當(dāng)量，3.5mmol g-1)，并通過TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)物直到原料被消耗(4小時(shí))。接著將樹脂過濾并減壓濃縮有機(jī)相。通過PTLC純化(SiO2，30％EtOAc/環(huán)己烷)，獲得化合物2-146(50％-60％)?；衔?-146的說明性實(shí)例如下；它的表征數(shù)據(jù)在圖下的正文中。
說明性化合物15
1H NMR(CD3Cl，400MHz)δ11.75(s，1H)，6.65(s，1H)，5.48(m，2H)，5.49(ddt，J＝6.1，3.5，2.9Hz，1H)，4.53(d，J＝17.5Hz，1H)，4.04(d，J＝17.7Hz，1H)，2.61-2.54(m，2H)，2.48-2.28(m，3H)，2.19-2.14(m，1H)，2.08-1.99(m，1H)，1.72-1.61(m，3H)，1.41(d，J＝6.4Hz，3H)；HRMS(ESI)m/z 375.1050([M+Na+]，C18H21ClO5Na理論值375.0970)。
實(shí)施例11合成化合物2-147的通用步驟。
如在路線19中所描述，向相應(yīng)的化合物2-103/2-85(1.0當(dāng)量)的THF(0.05M)溶液中順序加入相應(yīng)的醇(2.0當(dāng)量)、三苯基膦(2.0當(dāng)量)和乙氧基羰基偶氮羧甲基聚苯乙烯(2.0當(dāng)量，1.3mmol g-1)。將反應(yīng)混合物在室溫下振搖8小時(shí)，并接著過濾樹脂，濾液直接通過PTLC純化(SiO2，10％EtOAc/環(huán)己烷)以獲得伴有雙烯丙基化產(chǎn)物的化合物2-147的混合物(78％)?；衔?-147的說明性實(shí)例如下；它的表征數(shù)據(jù)在圖下的正文中。
說明性化合物2-147
含有相應(yīng)的雙烯丙基化的化合物的混合物(1∶1)1H NMR(CD3Cl，400MHz)δ11.83(s，1H)，6.82(ddd，J＝15.7，8.2，4.6Hz，1H)，6.72-6.65(m，1H)，6.46(s，1H)，6.41(s，1H)，6.09-5.98(m，3H)，5.82(d，J＝15.7Hz，1H)，5.46-5.16(m，8H)，4.57-4.54(m，3H)，4.51-4.49(m，3H)，4.19(d，J＝17.5Hz，1H)，4.11(d，J＝14.6Hz，1H)，3.78(d，J＝17.0Hz，1H)，3.51(d，J＝14.2Hz，1H)，2.76-2.69(m，1H)，2.38-2.05(m，11H)，1.42(d，J＝6.2Hz，3H)，1.35(d，J＝6.3Hz，3H)；單烯丙基化的化合物HRMS(ESI)m/z 413.1103([M+Na+]，C21H23ClO5Na理論值413.1132)；雙烯丙基化的化合物HRMS(ESI)m/z 453.1422([M+Na+]，C24H27ClO5Na理論值453.1449)。
實(shí)施例12合成化合物2-148的通用步驟。
如在路線19中所描述，23℃下，向相應(yīng)的化合物2-103/2-85(1.0當(dāng)量)的CH2Cl2(0.05M)溶液中加入TBD-甲基聚苯乙烯(2.0當(dāng)量，2.9mmolg-1)和相應(yīng)的烷基溴或烷基氯(BrCH2COOtBu，EOMCl)(0.9當(dāng)量)并將混合物振搖3小時(shí)。接著過濾樹脂并減壓濃縮濾液。通過PTLC純化(SiO2，30％EtOAc/環(huán)己烷)，獲得相應(yīng)的化合物2-148(＞90％)。化合物2-148的說明性實(shí)例如下；它們的表征數(shù)據(jù)分別顯示每張圖下的正文中。
說明性化合物2-148
1H NMR(CD3Cl，400MHz，)δ11.84(s，1H)，6.69(m，1H)，6.41(s，1H)，5.76(d，J＝15.0Hz，1H)，5.43(m，1H)，5，26(ddd，J＝15.0，9.1，4.8Hz，1H)，5.18-5.11(m，1H)，4.65(s，2H)，4.33(d，J＝17.7Hz，1H)，4.16(d，J＝17.5Hz，1H)，2.65-2.58(m，1H)，2.37-2.34(m，2H)，2.25-2.21(m，1H)，2.12-2.01(m，2H)，1.53(s，9H)，1.34(d，J＝6.5Hz，3H)；HRMS(ESI)m/z 487.1498([M+Na+]，C24H29ClO7Na理論值487.1494)。

1H NMR(C6D6，400MHz，25℃)δ11.76(s，1H)，6.86(s，1H)，6.70(dt，J＝14.9，7.3Hz，1H)，5.77(d，J＝15.8Hz，1H)，5.46-5.42(m，1H)，5.37(s，2H)，5.30-5.19(m，2H)，4.34(d，J＝17.6Hz，1H)，4.16(d，J＝18.1Hz，1H)，3.80(q，J＝7.0Hz，2H)，2.66-2.59(m，1H)，2.37-2.34(m，2H)，2.26-2.21(m，1H)，2.13-2.06(m，2H)，1.34(d，J＝6.4Hz，3H)，1.27(t，J＝7.0Hz，3H)；HRMS(ESI)m/z([M+Na]，C21H25O6ClNa理論值431.1237)。
實(shí)施例13合成化合物2-149的通用步驟。
如在路線19中所描述，23℃下，向化合物2-103/2-85(1.0當(dāng)量)的丙酮/H2O 10/1(0.05M)溶液中加入OsO4(0.1當(dāng)量)，之后加入NMO(1.0當(dāng)量)，并將混合物攪拌1小時(shí)。將粗制混合物通過硅膠短柱過濾，濃縮并通過PTLC純化(SiO2，30％EtOAc/環(huán)己烷)，以獲得化合物2-149(＞70％)，為兩種非對(duì)映異構(gòu)體的混合物?；衔?-149的說明性實(shí)例如下；它的表征數(shù)據(jù)在圖下的正文中。
說明性化合物2-149
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ7.19(m，1H)，6.89-6.81(m，1H)，6.52(s，1H)，6.47(s，1H)，6.20(d，J＝16.1Hz，1H)，6.04(d，J＝15.6Hz，1H)，5.54-5.49(m，1H)，5.43-5.36(m，1H)，4.50(d，J＝17.7Hz，1H)，4.46(d，J＝17.7Hz，1H)，4.39(d，J＝17.2Hz，1H)，4.07(d，J＝17.2Hz，1H)，3.80-3.64(m，2H)，3.51-3.46(m，2H)，2.62-2.58(m，2H)，2.39-2.30(m，2H)，2.27-2.18(m，2H)，2.08-2.98(m，2H)，2.00-1.85(m，4H)，1.44(d，J＝6.4Hz，6H)；HRMS(ESI)m/z 407.1031([M+Na+]，C18H21ClO7Na理論值407.0868)。
實(shí)施例14合成化合物2-150的通用步驟。
如在路線19中所描述，0℃下，向化合物2-103/2-85(1.0當(dāng)量)的CH3CN(0.03M)溶液中加入新鮮制備的DMDO(1.2當(dāng)量，0.04M，在丙酮中)并將混合物攪拌30分鐘。在減壓蒸發(fā)溶劑后，通過PTLC純化(SiO2，30％EtOAc/環(huán)己烷)，獲得環(huán)氧化物2-150(＞90％)，為兩種非對(duì)映異構(gòu)體的混合物?；衔?-150的說明性實(shí)例如下；它們的表征數(shù)據(jù)分別顯示在每張圖下的正文中。
說明性化合物2-150
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ11.84(s，2H)，6.94-6.82(m，2H)，6.69(s，1H)，6.66(s，1H)，6.23(d，J＝17.1Hz，1H)，6.11(dd，J＝13.2，1.6Hz，1H)，5.39(tdd，J＝7.5，3.2，2.7Hz，1H)，5.32(m，1H)，4.53(d，J＝17.7Hz，2H)，4.27(d，J＝17.7Hz，2H)，2.79-2.76(m，1H)，2.74-2.69(m，1H)，2.58(m，1H)，2.56(m，1H)，2.47-2.24(m，8H)，2.13-2.08(m，1H)，2.05-2.03(m，1H)，1.91(dd，J＝4.3，4.3Hz，1H)，1.87(dd，J＝4.3，4.3Hz，1H)，1.51(d，J＝6.4Hz，3H)，1.35(d，J＝6.4Hz，3H)；HRMS(ESI)m/z 389.0724([M+Na+]，C18H19ClO6Na理論值389.0762)。

1H NMR(C6D6，400MHz，25℃)δ11.56(2 x s，2H)，6.92-6.82(m，2H)，6.71(s，1H)，6.67(s，1H)，6.20(m，3H)，6.06(d，J＝15.8Hz，1H)，5.11(bs，1H)，5.94(m，1H)，4.46(2 x d，J＝18.1Hz，2H)，4.20(2 x d，J＝18.1Hz，2H)，2.72-2.70(m，2H)，2.53-2.48(m，4H)，2.38-2.35(m，3H)，2.25-2.13(m，5H)，1.84-1.77(m，2H)，1.05-1.01(m，6H)，0.91-0.88(m，3H)，0.86-0.84(m，3H)；HRMS(ESI)m/z417.1128([M+Na+]，C20H23O6ClNa理論值417.1075)。

1H NMR(C6D6，400MHz，25℃)δ11.80(2 x s，2H)，7.43-7.18(m，10H)，7.03-6.95(m，2H)，6.69(s，1H)，6.61(s，1H)，6.30(d，J＝16.4Hz，1H)，6.21(d，J＝15.8Hz，1H)，6.15-6.10(m，1H)，6.03(d，J＝11.1Hz，1H)，4.84(2 x d，J＝18.1Hz，2H)，4.41(2 x d，J＝17.6Hz，2H)，2.68-2.60(m，4H)，2.41-2.27(m，8H)，1.83-1.76(m，4H)；HRMS(ESI)m/z 451.1028([M+Na]，C23H21O6ClNa理論值451.0919)。

主要異構(gòu)體1H NMR(C6D6，400MHz，25℃)δ11.94(s，1H)，7.36-7.28(m，5H)，6.95-6.88(m，1H)，6.42(s，1H)，6.22(s，1H)，6.11(d，J＝15.8Hz，1H)，5.47(m，1H)，5.41(bs，1H)，4.43(d，J＝17.5Hz，1H)，3.56(d，J＝17.6Hz，1H)，3.19(dd，J＝13.7，6.0Hz，1H)，3.03(dd，J＝13.7，7.9Hz，1H)，2.87(bs，1H)，2.70-2.28(m，4H)，2.03-1.93(m，2H)；HRMS(ESI)m/z 431.1578([M+Na]，C24H24O6Na理論值431.1465)。

1H NMR(C6D6，400MHz，25℃)δ11.98(s，1H)，6.91-6.83(m，1H)，6.43(d，J＝2.3Hz，1H)，6.24(d，J＝2.4Hz，1H)，6.11(d，J＝15.8Hz，1H)，5.35(bs，1H)，5.29(m，1H)，4.52(d，J＝17.5Hz，1H)，3.63(d，J＝17.5Hz，1H)，2.77(m，2H)，2.57-2.52(m，2H)，2.46-2.27(m，2H)，2.14-2.10(m，1H)，1.93-1.88(m，1H)，1.48(d，J＝6.4Hz，3H)；其他異構(gòu)體1H NMR(C6D6，400MHz，25℃)δ11.67(s，1H)，6.89-6.83(m，1H)，6.40(d，J＝2.4Hz，1H)，6.24(d，J＝2.9Hz，1H)，6.21(d，J＝16.4Hz，1H)，5.37(bs，1H)，5.22(m，1H)，4.20(d，J＝17.0Hz，1H)，4，06(d，J＝17.0Hz，1H)，2.74(m，2H)，2.57-2.20(m，4H)，1.80-1.76(m，1H)，1.68-1.60(m，1H)，1.37(d，J＝6.4Hz，3H)；HRMS(ESI)m/z 355.1249([M+Na]，C18H20O6Na理論值355.1152)。
實(shí)施例15合成化合物2-151的通用步驟。
如在路線20中所描述，23℃下，向化合物2-120(1.0當(dāng)量)的二噁烷(0.05M)溶液中加入濃HCl(20當(dāng)量)，并將混合物攪拌3小時(shí)。之后通過硅膠短柱過濾反應(yīng)物，減壓蒸發(fā)溶劑，并通過PTLC純化(SiO2，30％EtOAc/環(huán)己烷)以獲得化合物2-151(＞75％)，為兩種非對(duì)映異構(gòu)體的混合物。化合物2-151的說明性實(shí)例如下；它們的表征數(shù)據(jù)分別顯示在每張圖下的正文中。
說明性化合物2-151
1NMR(CDCl3，400MHz)δ12.11(s，1H)，11.78(s，1H)，6.51(s，1H)，6.43(s，1H)，6.41(d，J＝2.4Hz，1H)，6.37(d，J＝2.7Hz，1H)，6.21(d，J＝2.4Hz，1H)，6.11(d，J＝2.4Hz，1H)，5.59-5.51(m，3H)，5.40-5.32(m，3H)，4.54(d，J＝17.2Hz，1H)，4.42(d，J＝17.2Hz，1H)，3.60(d，J＝17.2Hz，1H)，3.45(d，J＝17.0Hz，1H)，3.28(dd，J＝18.5，9.4Hz，1H)，3.11(dd，J＝13.7，6.2Hz，1H)，3.07(dd，J＝13.4，4.6Hz，1H)，2.76(dd，J＝19.0，6.2Hz，1H)，2.62(ddd，J＝15.5，8.8，4.0Hz，1H)，2.54(ddd，J＝15.3，6.2，3.2Hz，1H)，2.40-2.26(m，4H)，2.25-2.13(m，4H)，2.03-1.91(m，2H)，1.42(d，J＝6.4Hz，3H)，1.40(d，J＝6.4Hz，3H)；HRMS(ESI)m/z375.0928([M+Na+]，C18H21ClO5Na理論值375.0970)。

1H NMR(C6D6，400MHz，25℃)δ11.76(s，0.5H)，11.36(s，0.5H)，7.40-7.29(m，5H)，6.65(s，0.5H)，6.62(s，0.5H)，6.18(t，J＝5.8Hz，1H)，6.14(s，0.5H)，6.12(s，0.5H)，5.67-5.62(m，1H)，5.55-5.49(m，1H)，4.93(d，J＝18.1Hz，0.5H)，4.80(d，J＝17.1Hz，0.5H)，4.58-4.56(m，1H)，4.38(d，J＝18.1Hz，0.5H)，4.18(d，J＝17.1Hz，0.5H)，3.33-3.27(m，1H)，3.10(dd，J＝18.4，3.8Hz，0.5H)，2.84-2.68(m，2.5H)，2.42-2.32(m，2H)，2.23-2.17(m，1H)，2.13-2.04(m，1H)；HRMS(ESI-TOF)m/z 471.0754([M+Na+]，C23H22O5Cl2Na理論值471.0737)。
實(shí)施例16從化合物2-151消除β-Cl的通用步驟。
如在路線20中所描述，23℃下，向化合物2-151(95mg，270μmol)的CH2Cl2(5mL)溶液中加入PS-TBD(51mg，2.6mmol/g)，并將混合物攪拌8小時(shí)。之后過濾反應(yīng)物，減壓蒸發(fā)溶劑，并用急驟色譜法純化(SiO2，0-30％EtOAc/環(huán)己烷梯度)，獲得2-103(X＝Cl，R＝Me)(84mg，98％)。
實(shí)施例17合成化合物2-153的通用步驟。
如在路線20中所描述，23℃下，向化合物2-103(X＝Cl，R＝Me)(12.9mg，40.8μmol)的CH2Cl2(1ml)溶液中加入DHP(3.7μL，40.8μmol)和PS-TsOH(12.7mg，40.8μmol，3.2mmol/g)，并將混合物攪拌5小時(shí)。之后過濾反應(yīng)物并減壓蒸發(fā)溶劑。通過PTLC純化(SiO2，30％EtOAc/環(huán)己烷)，獲得2-153(13.8mg，85％)，為兩種非對(duì)映異構(gòu)體的混合物?；衔?-153的說明性實(shí)例如下；它的表征數(shù)據(jù)在圖下的正文中。
說明性化合物2-153
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ12.33(s，1H)，12.11(s，1H)，9.45(s，1H)，9.40(s，1H)，6.67(m，2H)，6.28(2 x s，2H)，5.83(d，J＝13.2Hz，1H)，5.79(d，J＝12.9Hz，1H)，5.35-5.30(m，3H)，5.27-5.22(m，3H)，5.06(bd，J＝8.2Hz，2H)，4.10(d，J＝17.5Hz，2H)，3.90-3.85(m，1H)，3.80-3.76(m，1H)，3.65(d，J＝17.7Hz，2H)，3.57-3.52(m，2H)，3.46-3.41(m，2H)，2.77-2.71(m，3H)，2.53-2.49(m，3H)，2.36-2.29(m，4H)，2.24-1.56(m，12H)，1.31(d，J＝6.4Hz，3H)，1.28(d，J＝6.4Hz，3H)；HRMS(ESI)m/z 423.1778([M+Na+]，C23H28O6Na理論值423.1778。
實(shí)施例18合成化合物2-154的通用步驟。
如在路線20中所描述，向相應(yīng)的化合物2-120(1.0當(dāng)量)的吡啶/AcOH(5/1，0.03M)溶液中加入相應(yīng)的羥胺(5.0當(dāng)量)并將混合物加熱至40℃。攪拌過夜后，伴有SiO2減壓蒸發(fā)溶劑。用30％的EtOAc/環(huán)己烷混合物在SiO2短程上洗脫化合物，在蒸發(fā)之后獲得為兩種非對(duì)映異構(gòu)體混合物(順式/反式)的2-154(～99％)。化合物2-154的說明性實(shí)例如下；它的表征數(shù)據(jù)在圖下的正文中。
說明性化合物2-154
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.50-7.25(m，10H)，6.82(s，1H)，6.75(s，1H)，6.66(s，1H)，6.48(s，1H)，6.24-6.11(m，2H)，6.11-6.05(m，2H)，5.45-5.38(m，4H)，5.34-5.31(m，14H)，4.50(d，J＝17.2Hz，1H)，3.38-3.65(m，8H)，3.60(d，J＝17.1Hz，1H)，3.54(d，J＝17.1Hz，1H)，3.24(d，J＝17.2Hz，1H)，2.48-2.36(m，4H)，2.17-2.21(m，2H)，2.04-2.11(m，2H)，1.95-1.83(m，2H)，1.62-1.51(m，2H)，1.49(d，J＝6.4Hz，6H)，1.20-1.32(m，12H)；13C NMR(CDCl3，100MHz)δ168.02，167.85，159.08，158.83，157.23，155.55，155.36，154.19，140.75，138.23，138.19，137.75，136.93，136.74，132.32，132.28，128.34(x 2)，128.31(x2)，128.18，128.09(x 2)，127.99(x 2)，127.71，127.63，125.50，118.82，118.56，118.34，108.84，108.50，101.72，101.68，93.49，93.44，93.12(x 2)，77.21，76.02，75.88，71.18，70.99，64.47，64.45，64.33，64.31，39.99，39.96，34.87，32.42，32.31，31.63，31.09，28.86，20.25，20.19，15.04(x 2)，14.98(x 2)；HRMS(ESI)m/z 560.2627([M+Na+]，C31H39NO7Na理論值560.2619。
實(shí)施例19合成化合物2-155的通用步驟。
如在路線20中所描述，向化合物2-154(1.0當(dāng)量)的MeOH(0.02M)溶液中加入PS-TsOH(10.0當(dāng)量，3.2mmol/g)并將懸浮液在40℃下振搖4小時(shí)。過濾反應(yīng)混合物并減壓濃縮甲醇溶液。獲得的粗產(chǎn)物未經(jīng)進(jìn)一步純化而用于下一步驟。然后，23℃下，向該粗制品的CH2Cl2(0.02M)溶液中加入DHP(1.0當(dāng)量)和PS-TsOH(催化劑，3.2mmol/g)，并將混合物攪拌5小時(shí)。之后過濾混合物，減壓蒸發(fā)溶劑，并通過PTLC純化(SiO2，30％EtOAc/環(huán)己烷)，獲得2-155的兩種不同的非對(duì)映異構(gòu)體1∶1(～65％)。化合物2-155的說明性實(shí)例如下；它的表征數(shù)據(jù)在圖下的正文中。
說明性化合物2-155
較小極性的非對(duì)映異構(gòu)體1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ9.25(s，1H)，9.24(s，1H)，7.46-7.33(m，10H)，6.29(s，1H)，6.26(s，1H)，6.07-6.02(m，2H)，5.75(d，J＝15.8Hz，1H)，5.69(d，J＝15.8Hz，1H)，5.44-5.38(m，6H)，5.23(s，4H)，5.03(d，J＝8.8Hz，2H)，4.34-4.13(m，6H)，3.69-3.63(m，2H)，2.70-2.67(m，2H)，2.30-2.16(m，6H)，2.08-1.94(m，8H)，1.73-1.65(m，8H)，1.42(t，J＝6.4Hz，3H)，1.39(t，J＝7.0Hz，3H)；HRMS(ESI)m/z 528.2562([M+Na+]，C30H35NO6Na理論值528.2357。
較大極性的非對(duì)映異構(gòu)體1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ11.61(s，1H)，9.27(s，1H)，7.41-7.33(m，5H)，6.62(d，J＝16.4Hz，1H)，6.47(s，1H)，6.15-6.07(m，1H)，5.50-5.38(m，3H)，5.16(s，2H)，5.04(d，J＝10.5Hz，1H)，4.30(d，J＝15.2Hz，1H)，4.24(d，J＝10.5Hz，1H)，3.84(d，J＝15.2Hz，1H)，3.66(t，J＝11.4Hz，1H)，2.71-2.65(m，1H)，2.28-2.08(m，6H)，1.73-1.64(m，5H)，1.38(t，J＝7.0Hz，3H)；HRMS(ESI)m/z 528.2494([M+Na+]，C30H35NO6Na理論值528.2357。
實(shí)施例20合成化合物2-128的通用步驟。
如在路線21中所描述，向pochonin D(2-85，X＝Cl且R＝Me)(25mg，71.2μmol)的DMF(5mL)溶液中加入TBSCl(53.6mg，356μmol)和咪唑(23.6mg，356μmol)并將混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)。用柱色譜法純化(SiO2，0-30％EtOAc/環(huán)己烷梯度)，在蒸發(fā)后獲得2-128(40mg，98％)?；衔?-128的說明性實(shí)例如下；它的表征數(shù)據(jù)在圖下的正文中。
說明性化合物2-128
1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ6.71(dt，J＝15.3，7.3Hz，1H)，6.45(s，1H)，5.81(d，J＝15.3Hz，1H)，5.25(s，2H)，5.04-5.03(m，1H)，3.89(d，J＝17.4Hz，1H)，3.57(d，J＝17.4Hz，1H)，2.31-2.04(m，6H)，1.35(d，J＝6.4Hz，3H)，1.03(s，9H)，0.99(s，9H)，0.28-0.24(m，12H)；13C NMR(CDCl3，100MHz，25℃)δ195.8，166.8，152.9，151.7，146.5，132.7，131.9，128.6，126.8，122.8，119.7，110.7，71.9，45.6，38.5，30.9，25.7(x 4)，25.6(x 4)，18.7，18.3，-4.1(x 2)，-4.4(x2)；HRMS(ESI)m/z 601.2568([M+Na]，C30H47ClO5Si2Na理論值601.2543)。
實(shí)施例21合成化合物2-157的通用步驟。
如在路線21中所描述，向化合物2-128(1.0當(dāng)量)的吡啶/AcOH(5/1，250μl)溶液中加入相應(yīng)的羥胺(5.0當(dāng)量)并將混合物加熱至40℃。攪拌過夜后，減壓蒸發(fā)溶劑，并用30％的EtOAc/環(huán)己烷混合物在SiO2上過濾，在蒸發(fā)后獲得2-157的兩種異構(gòu)體(～90％)?；衔?-157的說明性實(shí)例如下；它的表征數(shù)據(jù)在圖下的正文中。
說明性化合物2-157
順式肟1H NMR(CDCl3，400MHz，)δ7.42(bd，J＝6.4Hz，2H)，7.36(bdd，J＝7.5，6.9Hz，2H)，7.34-7.32(m，1H)，6.52(d，J＝16.1Hz，1H)，6.38(s，1H)，6.18-6.10(m，1H)，5.36-5.32(m，2H)，5.16(bs，2H)，4.99-4.95(m，1H)，3.79-3.76(m，2H)，2.40-1.99(m，6H)，1.45(d，J＝6.2Hz，3H)，1.03(s，9H)，0.99(s，9H)，0.28(s，3H)，0.26(s，3H)，0.20(s，6H)；反式肟1H NMR(CDCl3，400MHz，)δ7.44(bd，J＝6.5Hz，2H)，7.37(bdd，J＝7.6，6.9Hz，2H)，7.33-7.31(m，1H)，6.41(s，1H)，6.04-5.97(m，1H)，5.48(bd，J＝15.0Hz，1H)，5.29-5.27(m，1H)，5.22(bs，2H)，5.00-4.95(m，1H)，3.98-3.89(m，2H)，2.39-2.02(m，6H)，1.37(d，J＝5.9Hz，3H)，1.04(s，9H)，0.99(s，9H)，0.28(s，3H)，0.27(s，3H)，0.23(s，3H)，0.22(s，3H)。
實(shí)施例22合成化合物2-158的通用步驟。
如在路線21中所描述，向相應(yīng)的化合物2-157(1.0當(dāng)量)的THF溶液中加入TBAF(2.5當(dāng)量，1M的THF溶液)并將混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)。接著減壓蒸發(fā)溶劑，并用30％的EtOAc/環(huán)己烷混合物在SiO2上過濾，在蒸發(fā)后得到＞85％收率的化合物2-158?；衔?-158的說明性實(shí)例如下；它的表征數(shù)據(jù)在圖下的正文中。
說明性化合物2-158
順式1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ11.52(s，1H)，7.45-7.34(m，5H)，6.64(s，1H)，6.09-6.02(m，2H)，5.34-5.25(m，4H)，5.18-5.08(m，2H)，4.33(d，J＝17.0Hz，1H)，4.15(d，J＝17.6Hz，1H)，2.65-2.59(m，1H)，2.27-2.14(m，3H)，2.04-2.00(m，1H)，1.88-1.83(m，1H)，1.30(t，J＝6.4Hz，3H)；HRMS(ESI)m/z478.1372([M+Na+]，C25H26ClNO5Na理論值478.1392)。
反式1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ11.73(s，1H)，7.32-7.26(m，5H)，6.64(s，1H)，6.50(d，J＝16.4Hz，1H)，6.06-5.98(m，2H)，5.43-5.24(m，3H)，4.91(s，2H)，4.22(s，2H)，2.61-2.55(m，1H)，2.46-2.33(m，2H)，2.20-2.02(m，3H)，0.98(t，J＝6.4Hz，3H)；HRMS(ESI)m/z 478.1522([M+Na+]，C25H26ClNO5Na理論值478.1392)。
實(shí)施例23經(jīng)由三信環(huán)化(Mitsunobu cyclization)合成化合物2a-1的通用步驟。
如在路線25中所描述，由可商購(gòu)的苔黑酚8開始制備化合物2a-1。以下的說明并非意在限制，且可以用相同的通用步驟制備可替換的類似物。
苔黑酚的甲?；?的合成。0℃下，向裝有DMF(100mL)的燒瓶中緩慢加入POCl3(54.9mL，600mmol，2.0當(dāng)量)。接著向該混合物中加入作為在DMF(100mL)中的溶液的苔黑酚(42.65g，300mmol，1.0當(dāng)量)溶液，并使反應(yīng)物暖至23℃并攪拌過夜。接著將反應(yīng)物冷卻至0℃并加入200mL冰水。通過加入10％的NaOH將混合物的pH值調(diào)節(jié)至6和7之間。將混合物靜置30分鐘，并接著過濾沉淀以獲得期望的醛9(29.2g，64％)，為白色固體，其被用于隨后的步驟而未經(jīng)進(jìn)一步純化Rf＝0.31(己烷/EtOAc 3/1)；1H NMR((CD3)2CO，400MHz，25℃)δ12.48(s，1H)，10.10(s，1H)，9.53(s，1H)，6.30(d，J＝2.4Hz，1H)，6.17(d，J＝2.0Hz，1H)，2.54(s，3H)；13C NMR((CD3)2CO，100MHz，25℃)δ194.3，167.3，166.2，146.1，113.8，111.5，101.4，18.2；HRMS(MALDI-TOF)m/z 175.0373([M+Na+]，C8H8O3Na理論值175.0371)。

雙-E0M-保護(hù)，醛9b的合成。0℃下，向雙-苯酚(bis-phenol)9(29.2g，191.9mmol)的DMF(400mL)溶液中依次加入iPr2NEt(95.2mL，575.7mmol，3.0當(dāng)量)和EOMCl(52.3mL，575.7mmol，3.0當(dāng)量)。將反應(yīng)物暖至23℃并攪拌過夜。隨后用飽和NH4Cl水溶液(100mL)終止反應(yīng)，再用CH2Cl2(400mL)稀釋。將有機(jī)層分離，用飽和NH4Cl水溶液(100mL×2)、鹽水(100mL×2)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4(5.0g)干燥。過濾并減壓蒸發(fā)溶劑，隨后用急驟色譜法(SiO2，己烷/EtOAc 8/1)獲得為無色油的被保護(hù)的醛9b(46.5g，90％)Rf＝0.51(己烷/EtOAc 3/1)；1HNMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ10.48(s，1H)，6.71(d，J＝2Hz，1H)，6.49(d，J＝2Hz，1H)，5.27(s，2H)，5.22(s，2H)，3.72(q，J＝6.9Hz，2H)，3.69(q，J＝6.9Hz，2H)，2.54(s，3H)，1.20(t，J＝7.0Hz，3H)，1.19(t，J＝7.0Hz，3H)；13CNMR(CDCl3，100MHz，25℃)δ190.6，163.0，162.1，144.2，118.6，112.3，100.6，93.6，92.8，64.8，64.7，22.2，15.1(x 2)；HRMS(MALDI-TOF)m/z 291.1224([M+Na+]，C14H20O5Na理論值291.1209)。

氧化-氯化反應(yīng)，酸10的合成。向醛9b(46.5g，173mmol)的THF(200mL)溶液中加入NaH2PO4(67.5g，433mmol，2.5當(dāng)量)的H2O(200mL)溶液，并將混合物冷卻至0℃。隨后，向反應(yīng)物中緩慢加入NaClO2(48.9g，85％，433mmol，2.5當(dāng)量)的H2O(200mL)溶液。攪拌過夜后將混合物用EtOAc(500mL)稀釋，用鹽水(200mL×3)洗滌并經(jīng)Na2SO4(5.0g)干燥。過濾并減壓蒸發(fā)溶劑，獲得為白色固體的酸10(49.6g，90％)，其被用于下一步驟而未經(jīng)進(jìn)一步純化Rf＝0.66(CH2Cl2/MeOH 9/1)；1H NMR((CD3)2CO，400MHz，25℃)δ7.08(s，1H)，5.34(s，2H)，5.25(s，2H)，3.75(q，J＝7.1Hz，2H)，3.71(q，J＝7.1Hz，2H)，2.34(s，3H)，1.19(t，J＝7.1Hz，3H)，1.17(t，J＝7.1Hz，3H)；13C NMR((CD3)2CO，100MHz，25℃)δ168.1，154.9，153.9，135.1，121.8，117.3，102.8，94.7，94.6，65.2，65.0，17.6，15.4，15.4；HRMS(MALDI-TOF)m/z 341.0713([M+Na+]，C14H19ClO6Na理論值341.0768)。

三信酯化，酯11的合成。0℃下，向酸10(23.5g，73.7mmol)的甲苯(300mL)溶液中依次加入三甲基甲硅烷基乙醇(trimethylsilylethanol)(12.7mL，88.5mmol，1.2當(dāng)量)、PPh3(28.9g，110.5mmol，1.25當(dāng)量)和DIAD(21.7ml，110.5mmol，1.25當(dāng)量)。允許將反應(yīng)物暖至23℃并攪拌3小時(shí)。減壓蒸發(fā)溶劑，隨后用急驟色譜法(SiO2，己烷/EtOAc20/1和10/1)獲得為白色固體的酯11(24.7g，80％)Rf＝0.60(己烷/EtOAc 3/1)；1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ6.98(s，1H)，5.28(s，2H)，5.18(s，2H)，4.41-4.36(m，2H)，3.75(q，J＝6.9Hz，2H)，3.70(q，J＝6.9Hz，2H)，2.32(s，3H)，1，21(t，J＝7.1Hz，3H)，1，20(t，J＝7.1Hz，3H)，1.12-1.07(m，2H)，0.06(s，3H)；13C NMR(CDCl3，100MHz，25℃)δ167.7，154.2，153.1，135.0，120.5，117.3，102.0，94.0，93.9，64.7，64.5，63.8，17.6，15.1(x 2)，-1.41(x 3)；HRMS(MALDI-TOF)m/z 441.1487([M+Na+]，C19H31ClO6SiNa理論值441.1476)。

二酯16的還原，二醇17a的合成。0℃下，向LiAlH4(15.2g，400mmol，4當(dāng)量)的THF(300mL)懸浮液中滴加反式-3-己烯二酸二甲酯(17.2g，100mmol)的THF(100mL)溶液。將反應(yīng)物攪拌2小時(shí)。之后通過加入H2O(15.2mL)、15％的NaOH(15.2mL)、以及再次加入H2O(45.6mL)終止反應(yīng)。接著，將混合物傾至Et2O(150mL)中，攪拌30分鐘，并經(jīng)Na2SO4(5g)過濾。減壓蒸發(fā)溶劑得到二醇17a(11.0g，95％)，其未經(jīng)進(jìn)一步純化而使用Rf＝0.53(CH2Cl2/MeOH 9/1)；1HNMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ5.55-5.52(m，2H)，3.66(dt，J＝5.6，5.2Hz，2H)，2.33-2.28(m，4H)，OH不明顯；13C NMR(CDCl3，100MHz，25℃)δ129.8(x2)，62.0(x 2)，36.16(x 2)；HRMS(MALDI-TOF)m/z 139.0734([M+Na+]，C6H12O2Na理論值139.0735)。

17a的TBOPS-單保護(hù)反應(yīng)，醇17的合成。0℃下，向NaH(1.90g，47.4mmol，1.0當(dāng)量)的THF(100mL)懸浮液中加入二醇17a(5.5g，47.4mmol，1.0當(dāng)量)的THF(20mL)溶液。攪拌45分鐘之后，加入TBDPSCl(12.4mL，47.4mmol，1.0當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物暖至23℃并攪拌1小時(shí)。隨后用飽和NH4Cl水溶液(200mL)終止反應(yīng)并用EtOAc(150mL×3)萃取，用鹽水(200mL×2)洗滌合并的有機(jī)層并經(jīng)Na2SO4(10g)干燥。過濾并減壓蒸發(fā)溶劑，隨后通過急驟色譜法(SiO2，己烷/EtOAc 20/1、10/1和5/1)獲得期望的為無色油的醇17(11.5g，68％)Rf＝0.46(己烷/EtOAc 3/1)；1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ7.68-7.65(m，4H)，7.43-7.36(m，6H)，5.56(dt，J＝15.2，6.4Hz，1H)，5.44(dt，J＝15.2，6.8Hz，1H)，3.69(t，J＝6.4Hz，2H)，3.62(t，J＝6.3Hz，2H)，2.31-2.24(m，4H)，1.05(s，9H)，OH不可見；HRMS(MALDI-TOF)m/z 377.1927([M+Na+)，C22H30O2SiNa理論值377.1913)。

腈19的合成。0℃下，向醇17(11.5g，32.4mmol)的CH2Cl2(150mL)溶液中加入咪唑(4.30g，47.0mmol，1.45當(dāng)量)、三苯基膦(9.35g，35.7mmol，1.1當(dāng)量)和碘(9.06g，35.7mmol，1.1當(dāng)量)，并將所得溶液在0℃攪拌6小時(shí)。隨后將混合物用Et2O/己烷1/1(300mL)稀釋，用飽和NaHCO3水溶液(150mL×2)、飽和Na2S2O5水溶液(150mL)、鹽水(150mL)洗滌，并經(jīng)Na2SO4(5.0g)干燥。蒸發(fā)溶劑并將所得的油狀固體用己烷(200mL×2)研磨。過濾并蒸發(fā)己烷，獲得相應(yīng)的無色油狀的烷基碘18，其直接用于下一步驟而未經(jīng)進(jìn)一步純化Rf＝0.46(己烷/EtOAc 3/1)；1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ7.70-7.67(m，4H)，7.45-7.36(m，6H)，5.58(dt，J＝15.2，6.8Hz，1H)，5.44-5.37(dt，J＝15.2，6.4Hz，1H)，3.69(t，J＝6.4Hz，2H)，3.11(t，J＝7.2Hz，2H)，2.54(dt，J＝7.2，6.8Hz，2H)，2.26(dt，J＝6.4，6.4Hz，2H)，1.05(s，9H)；HRMS(MALDI-TOF)m/z 487.0923([M+H+]，C22H29IOSiH理論值487.0930)。
向粗制的烷基碘18的DMSO(200mL)溶液中加入KCN(21.0g，324mmol，1.0當(dāng)量)。將所得混合物在60℃攪拌2小時(shí)，隨后將反應(yīng)混合物冷卻至23℃，用EtOAc(200mL)稀釋，用水(200mL)、鹽水(100mL)洗滌，并用Na2SO4(5.0g)干燥。過濾并減壓蒸發(fā)溶劑，隨后通過急驟色譜法(SiO2，己烷/EtOAc 20/1和10/1)獲得期望的為無色油的腈19(10.6g，90％)Rf＝0.46(己烷/EtOAc 3/1)；1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ7.71-7.69(m，4H)，7.45-7.39(m，6H)，5.60(dt，J＝15.2，6.4Hz，1H)，5.52-545(m，1H)，3.73(t，J＝6.4Hz，2H)，2.36-2.28(m，6H)，1.08(s，9H)；13CNMR(CDCl3，100MHz，25℃)135.7(x 4)，134.0(x 2)，130.5，129.7(x 2)，127.8，127.7(x 4)，119.4，63.6，35.9，28.6，27.0(x 3)，19.3，17.6；HRMS(MALDI-TOF)m/z 386.1962([M+Na+]，C23H29OSiNNa理論值386.1916)。

葉立德21的合成。0℃下，向N-甲氧基-N-甲基羥胺鹽酸鹽(48.52g，500mmol，1.0當(dāng)量)的CH2Cl2(1.0L)溶液中加入吡啶(80.63mL，1.0mol)和氯乙酸酐(85.14g，500mmol，1.0當(dāng)量)。將所得混合物在0℃攪拌15分鐘，接著暖至23℃并攪拌過夜。隨后將反應(yīng)混合物小心地倒入飽和NaHCO3水溶液(1.0L)中并攪拌1小時(shí)，之后分離各層，用CH2Cl2(400mL)萃取水相，并將合并的有機(jī)層用1N HCl(200mL×2)、鹽水(200mL×2)洗滌，經(jīng)Na2SO4(10g)干燥并過濾。減壓蒸發(fā)溶劑獲得相應(yīng)的為綠色油的乙酰胺(N-甲氧基-N-甲基乙酰胺-2-氯化物)，其用于下一步驟而未經(jīng)進(jìn)一步純化。向該乙酰胺的CH3CN(800mL)溶液中加入Ph3P(107.98g，411.7mmol，0.82當(dāng)量)，并將所得混合物回流18小時(shí)。隨后在真空下去除溶劑，并將所得粘性油溶于CH2Cl2(1.0L)，用2NKOH(400mL×2)、鹽水(400mL)洗滌并經(jīng)Na2SO4(10.0g)干燥。過濾并減壓蒸發(fā)溶劑，獲得為粘稠油的葉立德21，其通過靜置固化(146.5g，80％經(jīng)兩步)。該化合物用于下一步驟而未經(jīng)進(jìn)一步純化Rf＝0.85(己烷/EtOAc 3/1)；1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ7.71-7.65(m，6H)，7.55-7.50(m，3H)，7.48-7.42(m，6H)，3.74(s，3H)，3.08(s，3H)，1.86(s，1H)；13CNMR(CDCl3，100MHz，25℃)δ133.3(x 3)，133，2(x 3)，131.9(x 3)，128.9(x3)，128.8(x 3)，127.9，61.3，35.9。

Weinreb酰胺12的合成。-78℃下，向腈19(22.94g，63.0mmol，1.0當(dāng)量)的CH2Cl2(250mL)溶液中加入DIBAL(66.3mL，1M，在甲苯中，1.05當(dāng)量)并將反應(yīng)物攪拌30分鐘。為了終止反應(yīng)，加入飽和K/Na(酒石酸鹽)水溶液(300mL)并攪拌兩相混合物直至其成為澄清的兩相系統(tǒng)(經(jīng)2小時(shí))。分離兩相并將水相用CH2Cl2(200mL×3)進(jìn)一步萃取。隨后將合并的有機(jī)層用鹽水(200mL)洗滌并經(jīng)Na2SO4(10g)干燥。過濾并隨后減壓蒸發(fā)溶劑獲得相應(yīng)的醛20，其用于下一步驟而未經(jīng)進(jìn)一步純化。然后，在23℃，將粗制的醛20溶于CH2Cl2(200mL)并加入葉立德21(30g，81.9mmol，1.3當(dāng)量)。隨后將反應(yīng)物攪拌過夜。減壓蒸發(fā)溶劑，隨后用急驟色譜法(SiO2，己烷/EtOAc 20/1、10/1和3/1)獲得期望的無色油狀的Weinreb酰胺12(14.5g，61％經(jīng)兩步)Rf＝0.30(己烷/EtOAc 3/1)；1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ7.69-7.67(m，4H)，7.43-7.36(m，6H)，6.98(dt，J＝15.3，7.1Hz，1H)，6.40(d，J＝15.3Hz，1H)，5.48-5.46(m，2H)，3.68(t，J＝6.6Hz，2H)，3.67(s，3H)，3.24(s，3H)，2.32-2.24(m，4H)，2.19-2.14(m，2H)，1.06(s，9H)；13C NMR(CDCl3，100MHz，25℃)167.1，147.2，135.7(x 4)，134.1，131.0(x 2)，129.6(x 2)，127.8(x 4)，127.7，119.0，64.0，61.7，36.1，32.6，32.5，31.5，27.0(x 3)，19.3；HRMS(MALDI-TOF)m/z 474.2432([M+Na+]，C27H37NO3SiNa理論值474.2440)。

甲苯甲酸酯11和Weinreb酰胺12的偶聯(lián)，酮13的合成。-78℃下，將化合物11(8.38g，20.0mmol，1.0當(dāng)量)的無水THF(120mL)溶液用經(jīng)由套管加入的新鮮制備的LDA(71.4mL，0.56M，40.0mmol，2.0當(dāng)量)處理。之后立即經(jīng)由套管加入-78℃的Weinreb酰胺12(8.13g，18mmol，0.9當(dāng)量)的THF(15mL)溶液。隨后將所得混合物攪拌15分鐘并通過加入飽和NH4Cl水溶液(20mL)終止反應(yīng)。一旦暖至23℃，就用EtOAc(200mL×2)萃取反應(yīng)混合物，接著將合并的有機(jī)層用鹽水(100mL)洗滌并經(jīng)Na2SO4(5.0g)干燥。過濾并減壓蒸發(fā)溶劑，隨后用急驟色譜法(SiO2，己烷/EtOAc 20/1、10/1和5/1)獲得期望的酮13(20.7g，65％)Rf＝0.48(己烷/EtOAc 3/1)；1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ7.70-7.68(m，4H)，7.42-7.38(m，6H)，7.10(s，1H)，6.94(dt，J＝15.8，6.7Hz，1H)，6.19(d，J＝15.8Hz，1H)，5.49-5.46(m，2H)，5.30(s，2H)，5.22(s，2H)，4.36-4.32(m，2H)，4.06(s，2H)，3.79-3.68(m，6H)，2.30-2.25(m，4H)，2.18-2.13(m，2H)，1.23(t x 2，J＝7.1Hz，6H)，1.07(s，9H)，1.08-1.03(m，2H)，0,06(s，9H)；13C NMR(CDCl3，100MHz，25℃)δ194.5，167.0，154.6，153.9，147.1，135.5(x 4)，133.9(x 2)，132.8，130.5，129.5(x 2)，129.1，127.9，127.6(x 4)，120.3，117.7，103.1，93.9，93.8，64.6，64.4，63.8，63.6，60.3，59.9，43.0，35.9，32.4，31.1，26.8(x 3)，22.6，22.0，19.2，17.4，15.0，14.2，14.1，-1.40(x 3)；HRMS(MALDT-TOF)m/z831.3380([M+Na+]，C44H61ClO8Si2Na理論值831.3491)。

肟14a的合成。40℃下，向酮13(18.6g，25.5mmol)的吡啶(50mL)溶液中加入羧甲氧基胺半鹽酸鹽(13.98g，127.5mmol)并將反應(yīng)物在此溫度下攪拌24小時(shí)。蒸發(fā)吡啶后，將殘留物溶于CH2Cl2(200mL)，用飽和NH4Cl水溶液(50mL×2)、鹽水(50mL×2)洗滌，并經(jīng)無水Na2SO4(2.0g)干燥。過濾并減壓蒸發(fā)溶劑，隨后用急驟色譜法(SiO2，己烷/EtOAc 5/1和1/1)獲得比率為1/1的E/Z異構(gòu)體的混合物的期望的肟14a(10.1g，50％)Rf＝0.51(CH2Cl2/MeOH 19/1)；1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ7.69-7.65(m，8H)，7.42-7.35(m，12H)，7.07(s，1H)，7.05(s，1H)，6.74(d，J＝15.8Hz，1H)，6.36(dt，J＝15.8，6.8Hz，1H)，6.07(dt，J＝15.8，6.8Hz，1H)，5.79(d，J＝15.8Hz，1H)，5.48-5.43(m，2H)，5.39-5.34(m，2H)，5.30(s，2H)，5.28(s，2H)，5.21(s，2H)，5.19(s，2H)，4.63(s，2H)，4.46(s，2H)，4.35-4.29(m，4H)，4.03(s，2H)，3.88(s，2H)，3.80-3.60(m，12H)，2.31-2.25(m，6H)，2.17-2.15(m，2H)，2.10-2.06(m，2H)，2.00-1.97(m，2H)，1.27-1.21(m，12H)，1.08(s，9H)，1.07(s，9H)，1.07-1.05(m，4H)，0.09(s，9H)，0.08(s，9H)，來自酸的OH不可見；13C NMR(CDCl3，100MHz，25℃)δ172.0，171.9，167.9，167.3，157.0，155.6，154.6，154.5，153.7，153.7，141.4，137.8，135.7(x 8)，134.6，131.4(x 4)，133.7，131.2，130.8，129.7(x 4)，127.9，127.7(x 8)，127.5，124.2(x 2)，120.4，119.1，117.5，117.4，103.2，102.8，94.1，94.0，93.9，93.8，71.1，70.5，64.9，64.9，64.7，64.6，64.5，64.0，64.0，63.9，36.1(x 2)，33.5，33.1，32.9，31.9，31.9，29.4，27.0(x 6)，19.3(x 2)，17.5，17.3，15.1(x 4)，-1.4(x 6)。

酰胺14的合成。0℃下，向酸14a(10.0g，11.33mmol，1.0當(dāng)量)的CH2Cl2(60mL)溶液中加入EDC.HCl(2.6g，13.6mmol，1.2當(dāng)量)，隨后加入哌啶(1.34mL，13.6mmol，1.2當(dāng)量)的CH2Cl2(10mL)溶液。將反應(yīng)物暖至23℃，并攪拌3小時(shí)。隨后將反應(yīng)混合物用CH2Cl2(200mL)稀釋，用飽和NH4Cl水溶液(100mL)、鹽水(100mL)洗滌，并經(jīng)無水Na2SO4(5g)干燥。過濾并減壓蒸發(fā)溶劑，隨后通過急驟色譜法(SiO2，己烷/EtOAc 2/1和1/1)獲得比率為1/1的兩種異構(gòu)體的混合物的期望的酰胺14a(6.60g，63％)Rf＝0.31(己烷/EtOAc 3/1)；1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ7.68-7.64(m，8H)，7.41-7.33(m，12H)，7.04(s x 2，2H)，6.71(d，J＝16.0Hz，1H)，6.21(dt，J＝16.0，6.7Hz，1H)，6.07(dt，J＝16.0，6.7Hz，1H)，5.73(d，J＝16.0Hz，1H)，5.45-5.39(m，2H)，5.37-5.32(m，2H)，5.28(s，2H)，5.25(s，2H)，5.19(s，4H)，4.73(s，2H)，4.60(s，2H)，4.37-4.27(m，4H)，3.95(s，2H)，3.87(s，2H)，3.80-3.60(m，12H)，3.55-3.52(m，2H)，3.51-3.48(m，2H)，3.38-3.35(m，2H)，3.32-3.29(m，2H)，2.26-2.16(m，6H)，2.09-2.06(m，2H)，2.01-1.98(m，2H)，1.95-1.91(m，2H)，1.61-1.46(m，12H)，1.28-1.17(m，12H)，1.05-1.01(m，4H)，1.04(s，9H)，1.03(s，9H)，0.05(s，9H)，0.04(s，9H)；13C NMR(CDCl3，100MHz，25℃)δ167.1，167.0(x 2)，166.8，155.6，154.3，154.2，153.5，153.4，153.1，139.2，136.5，135.6(x 8)，134.7，134.6，134.1(x 4)，131.4，131.1，129.6(x 4)，127.6(x 8)，127.6，127.1，124.1，121.0，120.9，119.5，117.9，117.7，103.1，102.9，94.1，94.0，93.9，73.1，73.0，64.8，64.7，64.6，64.5，64.0，63.9，63.9，63.6，60.4，53.5，46.4，46.2，43.0，42.9，36.1，33.4，33.0，32.9，32.0，31.9，30.0，26.9(x 6)，26.6，26.5，25.6，24.6，19.3(x 2)，17.4，17.3，15.1(x6)，-1.42(x 6)。

甲硅烷基脫保護(hù)，大環(huán)化前體14b的合成。23℃下，向酯14(6.60g，6.9mmol，1.0當(dāng)量)的THF(70mL)溶液中滴加TBAF(17.3mL，1M，在THF中，2.5當(dāng)量)并將所得混合物攪拌3小時(shí)。隨后，向反應(yīng)物中加入EtOAc(100mL)，并將所得混合物用1M HCl(60mL×3)、鹽水(60mL)洗滌，并經(jīng)Na2SO4(1.0g)干燥。過濾并減壓蒸發(fā)溶劑，隨后用急驟色譜法(SiO2、EtOAc和EtOAc/MeOH 4/1)獲得比率為1/1的兩種異構(gòu)體混合物的期望的酸14b(3.78g，89％)Rf＝0.35(CH2Cl2/MeOH 9/1)；1HNMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ7.03(s，1H)，6.99(s，1H)，6.62(d，J＝16.1Hz，1H)，6.23(dt，J＝16.1，6.9Hz，1H)，6.11(dt，J＝16.1，6.9Hz，1H)，5.95(d，J＝16.1Hz，1H)，5.55-5.30(m，4H)，5.26(s x 2，4H)，5.21(s，2H)，5.20(s，2H)，4.72(s，2H)，4.63(s，2H)，4.05(s，2H)，4.00(s，2H)，3.81-3.66(m，8H)，3.65-3.57(m，4H)，3.54(t，J＝5.4Hz，2H)，3.44(t，J＝5.4Hz，2H)，3.31(t，J＝5.4Hz，2H)，3.24(t，J＝5.4Hz，2H)，2.23(dt，J＝6.5，6.5Hz，4H)，2.18-2.04(m，8H)，1.67-1.49(m，10H)，1.42-1.40(m，2H)，1.25-1.16(m，12H)，來自醇和酸的OH不可見；13C NMR(CDCl3，100MHz，25℃)δ168.73，168.03，156.47，154.19，152.99，152.94，140.23，136.77，134.37，134.18，132.45，132.11，127.53，127.23，125.91，122.46，119.28，116.76，102.91，102.80，94.16，94.02，93.96，71.51，71.25，64.92，64.82，64.54，64.46，62.11，46.24，45.60，43.39，43.27，36.06，35.98，33.08，32.80，32.09，31.86，31.61，29.20，26.26，26.18，25.38，25.30，24.41，24.30，15.28，15.16；HRMS(MALDI-TOF)m/z 633.2562([M+Na+]C30H43ClN2O9Na理論值633.2555)。

14b的大環(huán)化反應(yīng)，化合物15的合成。0℃下，向酸14b(3.78g，6.18mmol)的甲苯(200mL)溶液中，加入PPh3(2.43g，9.27mmol)，隨后緩慢加入DIAD(1.83mL，9.3mmol)。將反應(yīng)物暖至23℃并攪拌5小時(shí)。減壓蒸發(fā)溶劑，隨后用急驟色譜法(SiO2，己烷/EtOAc 4/1和1/1)獲得比率為1/1的兩種異構(gòu)體混合物的期望的大環(huán)15(2.09g，60％)Rf＝0.50(己烷/EtOAc 1/1)；1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ7.05(s，1H)，7.03(s，1H)，6.51(d，J＝16.0Hz，1H)，6.16(dt，J＝15.8，6.5Hz，1H)，6.00(dt，J＝15.8，7.7Hz，1H)，5.44(d，J＝16.0Hz，1H)，5.32(m，4H)，5.28(s，2H)，5.26(s，2H)，5.21(s，2H)，5.20(s，2H)，4.80(s，2H)，4.71(s，2H)，4.23(t，J＝5.1Hz，2H)，4.18(t，J＝5.1Hz，2H)，3.91(bs，2H)，3.80-3.66(m，10H)，3.60-3.51(m，4H)，3.48-3.46(m，2H)，3.41-3.38(m，2H)，2.40-2.32(m，4H)，2.19-2.16(m，1H)，2.11-2.00(m，7H)，1.67-1.51(m，12H)，1.23-1.19(12H)；13C NMR(CDCl3，100MHz，25℃)δ167.5，166.9，154.8，154.6，154.4，153.2，141.0，136.6，134.1，132.6，128.5，127.6；124.6，121.6，119.5，117.5，102.94(x 2)，94.1(x 2)，93.8(x 2)，73.4，73.2，72.8，72.7，64.9，64.8，64.7(x 2)，64.3(x 2)，46.5，46.3，43.1(x 2)，35.7，35.6，32.5，32.4，32.2，32.1，31.9，31.7，30.2(x 2)，26.7(x 2)，26.6(x 2)，25.7(x 2)，24.7(x 4)，15.2(x 2)，15.1(x 2)；HRMS(MALDI-TOF)m/z615.2438([M+Na+]，C30H41ClN2O8Na理論值615.2450)。

脫保護(hù)，作為E/Z混合物的2a-1的合成，E異構(gòu)體的分離和Z異構(gòu)體的異構(gòu)化。40℃下，向大環(huán)15(2.8g，4.72mmol)的MeOH(60mL)溶液中加入磺酸樹脂(7.87g，3.0mmol/g，23.6mmol)并將懸浮液攪拌2小時(shí)?；旌衔镉肅H2Cl2(60mL)稀釋、過濾，并將樹脂用CH2Cl2(20mL×2)清洗一次。除去溶劑后，將殘留物再溶于MeOH(50mL)中并進(jìn)行超聲處理。沉淀開始形成，將溶液靜置12小時(shí)。過濾溶液并用MeOH(30mL)清洗，蒸發(fā)合并的溶液獲得2a-1(1.13g，經(jīng)LCMS分辨E∶Z為9∶1)。23℃下，將剩余的固體(純Z-異構(gòu)體，900mg)溶于CH2Cl2(180mL)并用TFA(1.4mL，18.8mmol)處理。將混合物攪拌12小時(shí)，之后加入甲苯(50mL)并蒸發(fā)溶劑(該粗制品的LCMS指示1∶1的E/Z異構(gòu)體混合物)。將獲得的殘留物重新溶于CH2Cl2(30mL)中。過濾不溶的沉淀并用MeOH(20mL)清洗。蒸發(fā)合并的溶液，再次獲得更多有利于期望的E異構(gòu)體的為9∶1的混合物的化合物2a-1(450mg)。再使剩余的固體(Z-異構(gòu)體，450mg)經(jīng)受兩次或多次同樣的異構(gòu)化條件。接著用急驟色譜法將合并的8批次純化(70g的C18、CH3CN/H2O 35/65和0.01％TFA，50mL/分鐘)以獲得為白色粉末的純E異構(gòu)體(1.10g，51％總收率)；Rf＝0.44(己烷/EtOAc 1/2)；1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ11.64(s，1H)，6.64(s，1H)，6.01(td，J＝15.57.5Hz，1H)，5.11(d，J＝15.5Hz，1H)，5.10-5.03(m，2H)，4.85(s，2H)，4.37(t，J＝4.8Hz，2H)，4.17(s，2H)，3.60(t，J＝5.0Hz，2H)，3.46(t，J＝5.0Hz，2H)，2.34(q，J＝5.4Hz，2H)，2.10-2.02(m，2H)，1.99-1.92(m，2H)，1.70-1.54(m，6H)；13C NMR(CDCl3，100MHz，25℃)δ170.27，167.42，163.21，157.38，155.18，138.21，135.62，131.82，129.13，124.76，115.55，107.60，103.47，72.63，65.03，46.38，43.31，33.21，32.76，31.94，31.84，26.65，25.64，24.57；HRMS(MALDI-TOF)m/z 499.1638([M+H+]，C24H29ClN2O6H理論值499.1612)。
化合物a2-13
1H NMR(CDCl3，400MHz，25℃)δ11.65(s，1H)，6.86(d，J＝1.8Hz，1H)，6.33(d，J＝1.8Hz，1H)，6.14(td，J＝15.8，7.6Hz，1H)，5.82(d，J＝15.7Hz，1H)，5.33(bs，2H)，4.85(s，2H)，4.53(bs，2H)，4.33(s，2H)，3.57(t，J＝5.0Hz，2H)，3.39(t，J＝5.0Hz，2H)，2.50(bs，2H)，2.11-2.06(m，4H)，1.66-1.58(m，6H)；13CNMR(DMSO-d6，100MHz，25℃)δ168.5，166.3，159.3，157.1，156.2，137.6，136.0，131.5，129.5，124.9，113.1，105.9，100.9，71.9，63.7，45.2，42.1，32.3，31.8，30.5，28.1，26.0，25.3，24.0；HRMS(MALDI-TOF)m/z 465.2054([M+Na+]C24H30N2O6H理論值465.2002)。
實(shí)施例24示例性化合物的激酶抑制 使用下述操作，測(cè)試Pochonin類似物庫(kù)(84個(gè)化合物)中的代表性子集在10μM對(duì)于一組24種激酶(AKT1、ARK5、Aurora-A(有絲分裂酶A)、Aurora-B(有絲分裂酶B)、B-RAF-VE、CDK2/CycA、CDK4/CycD1、CK2-α1、FAK、EPHB4、ERB2、EGF-R、IGF1-R、SRC、VEGF-R2、VEGF-R3、FLT3、INS-R、MET、PDGFR-β、PLK1、SAK、TIE2、COT)中的抑制。
所有的蛋白激酶都是作為人類重組GST-融合蛋白或His-標(biāo)記的蛋白質(zhì)通過桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)在Sf9昆蟲細(xì)胞中表達(dá)。使用GSH-瓊脂糖(Sigma)或Ni-NTH-瓊脂糖(Qiagen)通過親和色譜法純化激酶。通過SDS-PAGE/銀染檢驗(yàn)每種激酶的純度并通過使用激酶特異性抗體的蛋白質(zhì)印跡分析或通過質(zhì)譜法來檢驗(yàn)每種激酶的同一性(identity)。
蛋白激酶分析 使用放射測(cè)量的蛋白激酶分析(33Pan

活性分析)來測(cè)量24種蛋白激酶的激酶活性。所有的激酶分析都以50μl的反應(yīng)體積在來自PerkinElmer(波士頓，MA，USA)的96孔FlashPlateTM中進(jìn)行。按下述順序以4步移液反應(yīng)混合液(cocktail) ·20μl分析緩沖液 ·5μl ATP溶液(在水中) ·5μl測(cè)試化合物(在10％DMSO中) ·10μl底物/10μl酶溶液(預(yù)混合的) 對(duì)所有酶的測(cè)定都含有60mM HEPES-NaOH，在pH 7.5，3mMMgCl2、3mM MnCl2、3μM原釩酸鈉、1.2mM DTT、50μg/ml PEG20000、1μM[γ-33P]-ATP(約每孔5×1005cpm)。
對(duì)于24種激酶測(cè)定，每孔使用下述量的酶和底物 # 激酶 激酶 激酶 底物 底物 Lot# ng/50μlng/50μl 1 AKT1 SP007100 GSK3(14-27)，Lot 005 1000 2 ARK5 002 100 自身磷酸化(Autosphos.)- 3 Aurora-A SP00450四(LRRWSLG) 500 4 Aurora-B SP007100 四(LRRWSLG) 250 5 B-RAF-VE 001 20MEK1-KM(Lot 013) 250 6 CDK2/CycA SP005100 組蛋白H1 125 7 CDK4/CycD1 006 50Rb-CTF，Lot 010 500 8 COT017 400 自身磷酸化- 9 EGF-R SP01425聚(Glu，Tyr)4∶1 125 10 EPHB4 SP00610聚(Glu，Tyr)4∶1 125 11 ERBB2 SP011200 聚(Glu，Tyr)4∶1 125 12 FAKSP006100 聚(Glu，Tyr)4∶1 125 13 IGF1-R 012 20聚(Glu，Tyr)4∶1 125 14 SRC004 10聚(Glu，Tyr)4∶1 125 15 VEGF-R2011 50聚(Glu，Tyr)4∶1 125 16 VEGF-R3SP011100 聚(Glu，Tyr)4∶1 125 17 FLT3 SP007100 聚(Ala，Glu，Lys，Tyr)6∶ 1252∶5∶1 18 INS-R SP00525聚(Ala，Glu，Lys，Tyr)6∶ 1252∶5∶1 19 METSP011100 聚(Ala，Glu，Lys，Tyr)6∶ 1252∶5∶1 20 PIDGFR-β SP01250聚(Ala，Glu，Lys，Tyr)6∶ 1252∶5∶1 21 PLK1 007 50酪蛋白250 22 SAK002 200 自身磷酸化(Autosphosphorylation) - 23 TIE2 SP006200 聚(Glu，Tyr)4∶1 250 24 CK2-α1SP003200 酪蛋白1000 反應(yīng)混合液在30℃溫育80分鐘，用50μl 2％(v/v)的H3PO4終止反應(yīng)，吸出(aspirate)板中液體并用200μl 0.9％(w/v)的NaCl或者200μlH2O洗滌兩次。用微板閃爍計(jì)數(shù)器(Microbeta Trilux，Wallac)測(cè)定33Pi的結(jié)合。
所有的分析都采用BeckmanCoulter/Sagian機(jī)器人系統(tǒng)進(jìn)行。
原始數(shù)據(jù)評(píng)估 每塊測(cè)定板的第1列(n＝8)中的計(jì)數(shù)的中值(median)被定義為“低對(duì)照”，該值反映了在沒有蛋白激酶存在但是有底物存在時(shí)放射性對(duì)板的非特異結(jié)合。每塊測(cè)定板的第7列(n＝8)中的計(jì)數(shù)的中值被作為“高對(duì)照”，即，沒有任何抑制劑存在時(shí)的完全活性。高對(duì)照和低對(duì)照之間的差值被作為100％活性。
作為數(shù)據(jù)評(píng)估的一部分，特定板的低對(duì)照值被從相應(yīng)板的高對(duì)照值以及所有80個(gè)“化合物值”中減去。使用如下公式計(jì)算特定板的每個(gè)孔的殘留活性(以％表示) 殘留活性(％)＝100×[(化合物的cpm-低對(duì)照)/(高對(duì)照-低對(duì)照)] 使用Quattro Workflow V2.1.0.0(Quattro Research GmbH，慕尼黑，德國(guó)；www.quattro-research.com)計(jì)算每種濃度的殘留活性和化合物IC50值。所使用的模型是具有確定在100％的參數(shù)“最高值”和在0％的“最低值”的“Sigmoidal響應(yīng)曲線(可變的斜率)”。
值得注意的是，十二種化合物表現(xiàn)出超過50％的抑制作用，其代表了對(duì)于激酶＞14％的命中率。出人意料的是，盡管已證明pochonin D、pochoninA和根赤殼菌素為HSP90的強(qiáng)抑制劑，但是卻沒有對(duì)這組激酶顯示顯著活性。挑選出九種化合物來計(jì)算它們對(duì)24種激酶中每種的IC50(表4)。在此更詳細(xì)的分析中，根赤殼菌素只對(duì)VGFR-R2顯示非常輕微的活性而對(duì)其他23種激酶沒有抑制。幾種pochonin類似物顯示出對(duì)治療相關(guān)的酶例如Src(對(duì)于A2為8μM)、Aurora(對(duì)于A3為12μM)、IGF1-R(對(duì)于A5為11μM)的活性的清晰明確。重要的是，已證明是激酶抑制劑的化合物不是HSP90的抑制劑并且不是無差別的ATP-替代物。
通過測(cè)量在競(jìng)爭(zhēng)性測(cè)定中的直接相互作用以及測(cè)量在細(xì)胞測(cè)定中的HSP90底物蛋白(client protein)的消耗，測(cè)試了庫(kù)中的另一個(gè)子集對(duì)HSP90的抑制。HSP90的腺苷三磷酸酶袋具有一種特殊的折疊，這種折疊存在于超家族中，所述超家族包括功能多樣化的蛋白質(zhì)諸如DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶II、解旋酶、MutL和組氨酸激酶(Bergerat折疊)。(A.Bergerat等人，Nature，386414(1997)；R.Dutta和M.Inouye，Trends Biochem.Sci.，2524(2000))。事實(shí)上，已證明盡管根赤殼菌素具有較低的親和力，但其確實(shí)抑制了該家族的其他成員(D.Gadelle等人，Nucleic Acids Res.，332310(2005)；P.G.Besant等人，Mol.Pharmacol.，62289(2002))。然而值得注意的是，相對(duì)于該組激酶，本發(fā)明中最好的HSP90抑制劑對(duì)HSP90是選擇性的。已發(fā)現(xiàn)十六種化合物具有IC50＜1μM。

被選擇用于IC50測(cè)定的Pochonin類似物 表4所選擇的pochonin類似物在一組24種激酶分析中的抑制活性(IC50μM)(空白代表IC50＞50μM)。
激酶 二羥基苯甲酸類型 根赤殼 A1 A2 A3 A4 A5 A6 A7 A8 AKT1 菌素 ARK5 Aurora-A 14 12 30 47 Aurora-B 16 14 36 16 B-RAF-VE 50 CDK2/CycA CDK4/CycD150 30 48 45 37 CK2-α1 FAK 14 9 37 38 34 EPHB4 16 40 49 40 ERBB2 16 24 EGF-R 33 10 14 22 16 32 IGF1-R23 16 19 13 11 21 SRC 11 8 14 12 12 20 VEGF-R249 19 20 30 19 25 VEGF-R3 40 19 31 31 34 FLT3 23 23 45 44 INS-R 36 44 MET 32 29 36 PDGFR-β PLK1 SAK 17 25 19 20 17 TIE2 72 16 15 25 COT 在此詳細(xì)分析中，根赤殼菌素顯示僅對(duì)VGFR-R2有非常弱的活性且對(duì)其他23種激酶沒有抑制。幾種pochonin類似物顯示出對(duì)治療相關(guān)的酶例如Src(對(duì)于A2為8μM)、Aurora(對(duì)于A3為12μM)和IGF1-R(對(duì)于A5為11μM)的活性的明確模式。重要的是，已發(fā)現(xiàn)為激酶抑制劑的化合物不是HSP90的抑制劑(數(shù)據(jù)未顯示)并且不是無差別的ATP-替代物。根赤殼菌素和pochonin所靶定的HSP90的ATP-結(jié)合袋具有特殊的折疊，該折疊存在于超家族中，所述超家族包括功能多樣化的蛋白質(zhì)諸如DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶II、解旋酶、MutL和組氨酸激酶(R.Dutta和M.Inouye，Trends Biochem.Sci.，2424(2000))。事實(shí)上，已證明盡管根赤殼菌素具有較低的親和力，但其確實(shí)抑制這一家族的其他成員(D.Gadelle等人，Nucleic Acids Res.，332310(2005)；P.G.Besant等人，Mol.Pharmacol.，62289(2002))。盡管上文所描述的pochonin庫(kù)會(huì)必定包含一些化合物，這些化合物是具有Bergerat折疊的酶的良好抑制劑，我們希望評(píng)估pochonin骨架周圍的修飾是否能夠?qū)⑦@些化合物的選擇性從HSP90抑制劑重新調(diào)整為激酶抑制劑。超過百分之十四的化合物在10mM顯示出大于50％的激酶抑制的事實(shí)清楚地支持了RAL是激酶抑制的良好骨架的假說。
實(shí)施例25對(duì)庫(kù)中示例性化合物的HSP90抑制測(cè)試。
用先前描述過的方法(V.Zhou等人，Anal.Biochem.，331，349(2004))，首先評(píng)估了用格爾德霉素的競(jìng)爭(zhēng)測(cè)定中根赤殼菌素(2-1)、pochpnin D(2-85)和pochonin A(2-122)及其一些密切相關(guān)的類似物例如monocillin II(2-103)或者pochonin A的二醇類似物(2-125)對(duì)HSP90的親和力。結(jié)果在下面顯示。
根赤殼菌素類似物的結(jié)構(gòu)和對(duì)HSP90的親和力
如前所述，同根赤殼菌素的20nM相比，pochonin D(2-85)已發(fā)現(xiàn)為具有IC50為80nM的HSP90的良好的配體。該活性差異小于一個(gè)數(shù)量級(jí)，但是不受理論的限制，其被對(duì)pochonin D的分子模型研究合理化。由Pearl及合作者報(bào)道的HSP90-根赤殼菌素的共結(jié)晶結(jié)構(gòu)顯示緊固結(jié)合的水分子在鄰苯酚、酯和Asp79間形成氫鍵橋，且第二個(gè)水分子在對(duì)苯酚和Leu34間形成橋(S.M.Roe等人，J.Med.Chem.，42260(1999))。同該假說一致，具有受保護(hù)的酚的化合物2-112和2-120沒有顯示對(duì)HSP的親和力。比較pochonin D(2-85，80nM)和monocillin II(2-103，＞50μM)可知，氯原子的重要性也是明顯的。體積大的氯不僅進(jìn)入Phe124的范德華接觸(van der wasls contact)的范圍內(nèi)而且填充了疏水袋。值得注意地，pochonin A(2-122)是良好的配體(90nM)，而類似物2-111是無活性的。根赤殼菌素、pochpnin D和pochonin A間的比較證實(shí)了環(huán)氧部分對(duì)于HSP90抑制是必需的而且確定了γ，δ-共軛烯烴并不是效力的前提。這些天然產(chǎn)物(2-1、2-85、2-122)對(duì)抗HSP90的N-末端結(jié)構(gòu)域中的ATP的能力以及抑制腺苷三磷酸酶活性的能力可能同它們的HSV(單純皰疹病毒)解旋酶抑制作用有關(guān)。類似地，評(píng)價(jià)相應(yīng)于雙甲基化類似物的化合物2-164，2-166和2-169的HSP90抑制。
實(shí)施例26庫(kù)中示例性化合物抗HCC1954和SK-BR-3腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性。
37℃下，腫瘤細(xì)胞在潮濕大氣(5％CO2，95％空氣)中以粘附的單層細(xì)胞生長(zhǎng)。培養(yǎng)基是含有2mM L-谷氨酰胺(參考BE12-702F，Cambrex，韋爾維耶，比利時(shí))并添加10％胎牛血清(參考DE14-801E，Cambrex)的RPMI 1640。為了試驗(yàn)使用，通過用胰蛋白酶-乙二胺四乙酸(參考02-007E，Cambrex)處理5分鐘將粘附的腫瘤細(xì)胞從培養(yǎng)瓶上分離，用不含鈣或鎂的Hanks培養(yǎng)基(Hanks’medium)(參考BE10-543F，Cambrex)稀釋并通過加入完全培養(yǎng)基(complete culture medium)中和。使用前，采用血球計(jì)數(shù)器對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)并用25％的臺(tái)盼藍(lán)拒染(trypan blueexclusion)評(píng)估它們的存活力。按照制造商的說明書使用

支原體檢測(cè)試劑盒(參考LT07-318，Cambrex)進(jìn)行支原體檢測(cè)。

測(cè)定是利用支原體酶活性的選擇性的生物化學(xué)測(cè)試。有活力的支原體屬被溶解，且酶與催化ADP轉(zhuǎn)化為ATP的

底物作用。通過測(cè)量在加入

底物之前和之后的樣品中的ATP水平，可以獲得指示支原體屬存在或者不存在的比率。從該細(xì)胞系的培養(yǎng)基上清液重復(fù)測(cè)定支原體屬測(cè)試并與陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照(

測(cè)定對(duì)照組(Assay ControlSet)，參考LT07-518，Cambrex)(Internal Standard Operating Procedure NoTEC-007/002)比較。將HCC1954和SK-BR-3腫瘤細(xì)胞(每孔5000個(gè)細(xì)胞)鋪在96孔平底微量滴定板上(參考167008，Nunc，Dutscher，Brumath，法國(guó))并在37℃溫育24小時(shí)，之后在190μl添加10％FBS的無藥培養(yǎng)基中處理。將HCC1954和SK-BR-3腫瘤細(xì)胞系用在1/4稀釋步驟(1/4 dilution steps)中將要測(cè)試的測(cè)試底物(從10-6到10-11M的范圍)以及紫杉醇(從10-7到10-12M的范圍)用5種濃度溫育72小時(shí)。在37℃、在5％CO2下，細(xì)胞(190μl)在添加含有測(cè)試底物的10％FBS的最終體積為200μl的培養(yǎng)基中溫育。進(jìn)行一次實(shí)驗(yàn)，由四組重復(fù)產(chǎn)生每個(gè)濃度的結(jié)果。用相應(yīng)的賦形劑單獨(dú)處理對(duì)照細(xì)胞。在處理的最后，用MTS測(cè)定評(píng)價(jià)細(xì)胞毒性。使用四唑鎓化合物(MTS，3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑鎓)和命名為PMS(吩嗪硫酸甲酯)的電子偶聯(lián)試劑由MTS測(cè)定來揭示測(cè)試底物的體外細(xì)胞毒性。類似于MTT，通過細(xì)胞將MTT生物還原為一種甲臜產(chǎn)物，該產(chǎn)物不同于MTT，在培養(yǎng)基中無需加工直接溶解。
在細(xì)胞處理的最后，在每個(gè)孔中加入用0.22μm過濾的在杜伯科磷酸緩沖鹽溶液(DPBS，參考17-513F，Cambrex)中的MTS(20mL，2mg/ml，參考G1111A，Promega，Charbonnières，法國(guó))和PMS(1ml，0.92mg/ml，參考P9625，Sigma)的新鮮混合的溶液40μl。在37℃溫育培養(yǎng)板2小時(shí)。用VICTOR3TM 1420多標(biāo)記計(jì)數(shù)器(multilabeled counter)(Wallac，PerkinElmer，Courtaboeuf，法國(guó))在每個(gè)孔中測(cè)量在490nm的吸光度(OD)。
表5所選擇的pochonin類似物的抗HCC1954和SK-BR-3腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性



示例性化合物的實(shí)驗(yàn)步驟和表征數(shù)據(jù)如下。下述化合物和數(shù)據(jù)被理解為非限制性的。

使用溶劑體系A(chǔ)氧化的通用步驟0℃下，依次用氨基磺酸(3.5當(dāng)量)和亞氯酸鈉(3.25當(dāng)量)的水溶液處理醛2-94(1.0當(dāng)量)的H2O/THF/DMSO(20∶10∶1，0.03M)溶液。在此溫度下攪拌0.5-1小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用Et2O稀釋，用飽和NH4Cl水溶液洗滌并經(jīng)MgSO4干燥。減壓濃縮獲得相應(yīng)的酸2-95，其用于下一步驟而未經(jīng)任何進(jìn)一步純化。2-95c1H NMR(400MHz，(CD3)2CO，25℃)δ＝6.48(d，J＝2.2Hz，1H)，6.45(d，J＝2.2Hz，1H)，3.84(s，3H)，3.83(s，3H)，2.33(s，3H)。
2-94j1H NMR(400MHz，(CD3)2CO，25℃)δ＝7.58(d，J＝7.0Hz，4H)，7.47-7.35(m，10H)，7.31-7.21(m，6H)，6.31(s，1H)，5.89(s，1H)，2.35(s，3H)，1.05(s，9H)，0.93(s，9H)。

使用溶劑體系B氧化的通用步驟0℃下，依次用氨基磺酸(3.5當(dāng)量)和亞氯酸鈉(3.25當(dāng)量)的水溶液處理醛2-94(1.0當(dāng)量)的H2O/THF(20∶10，0.03M)溶液。室溫下攪拌12小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用Et2O稀釋，用飽和NH4Cl水溶液洗滌并經(jīng)MgSO4干燥。減壓濃縮獲得相應(yīng)的酸2-95，其用于下一步驟而未經(jīng)任何進(jìn)一步純化。對(duì)于2-95b，2.0當(dāng)量的氨基磺酸對(duì)于避免過度氯化是必需的。對(duì)于2-95i和2-95k，0℃下，30分鐘后完成反應(yīng)。
2-95b1H NMR(400MHz，(CD3)2CO，25℃)δ＝6.48(s，1H)，2.70(s，3H)。
2-95d1H NMR(400MHz，(CD3)2CO，25℃)δ＝6.77(s，1H)，3.97(s，3H)，3.89(s，3H)，2.35(s，3H)。
2-95h1H NMR(400MHz，(CD3)2CO，25℃)δ＝6.71(s，1H)，5.43(s，2H)，3.85(t，J＝8.2Hz，2H)，2.71(s，3H)，1.00(t，J＝8.2Hz，2H)，0.04(s，9H)。
2-95i1H NMR(400MHz，(CD3)2CO，25℃)δ＝7.82-7.80(m，4H)，7.55-7.48(m，6H)，6.02(s，1H)，2.74(s，3H)，1.17(s，9H)。
2-95k1H NMR(400MHz，(CD3)2CO，25℃)δ＝7.48-7.34(m，12H)，7.23-7.16(m，8H)，5.93(s，1H)，2.54(s，3H)，1.05(s，9H)，1.02(s，9H)。

使用溶劑體系C氧化的通用步驟0℃下，向醛2-94(1.0當(dāng)量)的DMSO(0.4M)溶液中依次緩慢加入溶于H2O(3M)的NaH2PO4·H2O(5.0當(dāng)量)和溶于H2O(3M)NaClO2(5.0當(dāng)量)。攪拌12小時(shí)后，將反應(yīng)物用Et2O稀釋，用飽和NH4Cl水溶液洗滌并經(jīng)MgSO4干燥。減壓濃縮得到相應(yīng)的酸2-95，其用于下一步驟而未經(jīng)進(jìn)一步純化。
2-95e1H NMR(400MHz，(CD3)2CO，25℃)δ＝6.76(d，J＝1.9Hz，1H)，6.60(d，J＝1.6Hz，1H)，5.25(s，4H)，3.75-3.69(m，4H)，2.31(s，3H)，1.18(t，J＝7.0Hz，6H)。
2-95g1H NMR(400MHz，(CD3)2CO，25℃)δ＝12.13(bs，1H)，6.46(s，2H)，5.30(s，2H)，3.73(q，J＝7.0Hz，4H)，2.58(s，3H)，1.19(t，J＝7.0Hz，3H)。

1-氯-2，4-雙-乙氧基甲氧基-7-甲基-7，8，11，12-四氫-16H-6-氧雜-苯并環(huán)十四烯-5m15-二酮(2-112)用10％mol的催化劑Grubbs’II(30mg，0.038mmol)處理2mM的化合物2-111(200mg，0.38mmol)的無水甲苯(190mL)溶液并在80℃加熱過夜。隨后將反應(yīng)混合物通過二氧化硅墊，用CH2Cl2洗滌所述二氧化硅墊。減壓濃縮合并的濾液。用急驟色譜法純化(硅膠，0-25％EtOAc/己烷梯度)獲得純的大環(huán)2-112(167mg，94％)。
1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝7.27(s，1H)，6.85(dt，J＝15.2，7.6Hz，1H)，6.15(d，J＝15.8Hz，1H)，5.16-4.94(m，7H)，4.41(d，J＝17.0Hz，1H)，4.13(d，J＝17.0Hz，1H)，3.61-3.45(m，4H)，2.18-2.07(m，2H)，1.86-1.62(m，4H)，1.38(d，J＝5.8Hz，3H)，1.11(t，J＝7.0Hz，3H)，1.04(t，J＝7.0Hz，3H)；13C NMR(100MHz，C6D6，25℃)δ＝193.5，166.4，155.0，154.1，146.0，133.7，131.5，128.8，127.7，121.2，118.1，102.9，93.7，93.6，71.6，64.4，64.4，45.0，39.2，30.7，30.4，19.3，14.9，14.8；I.R.(薄膜)vmax＝2917，1720，1690，1622，1591，1320，1255，1120，1037cm-1；HRMS(ESI-TOF)m/zC24H31O7ClNa的計(jì)算值489.1651，測(cè)定值489.1737[M+Na+]。(-)-(2R)[α]25D＝-24.0(c 0.59，CHCl3)。

Pochonin D(2-85)將化合物2-112(50mg，0.1mmol)在CH2Cl2/TFA的5∶1混合物(3mL)中攪拌2小時(shí)。減壓濃縮，隨后用急驟色譜法(硅膠，0-33％EtOAc/己烷梯度)獲得合成的pochonin D 2-85(25mg，72％)。已發(fā)現(xiàn)合成的pochonin D具有與天然pochonin D完全一致的1HNMR。pochonin D.1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝12.42(s，1H)，6.89(s，1H)，6.67-6.62(m，1H)，5.82(d，J＝15.6Hz，1H)，5.17-5.12(m，1H)，5.00-4.92(m，1H)，4.76-4.69(m，1H)，4.28(d，J＝17.2Hz，1H)，4.18(d，J＝17.7Hz，1H)，2.54-2.47(m，1H)，1.93-1.77(m，5H)，0.98(d，J＝6.4Hz，3H)；1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝11.73(s，1H)，6.76-6.69(m+s，2H)，6.19(s，1H)，5.82(d，J＝15.2Hz，1H)，5.46-5.40(m，1H)，5.31-5.15(m，2H)，4.37(d，J＝17.6Hz，1H)，4.09(d，J＝17.0Hz，1H)，2.68-2.61(m，1H)，2.39-2.03(m，5H)，1.34(d，J＝7.0Hz，3H)；1H NMR(400MHz，CD3OD，25℃)δ＝6.74(dt，J＝15.5，7.6Hz，1H)，6.51(s，1H)，5.83(d，J＝15.5Hz，1H)，5.36-5.22(m，3H)，4.25(d，J＝17.7Hz，1H)，4.13(d，J＝17.7Hz，1H)，2.54-2.47(ddd，J＝14.5，8.0，4.0Hz，1H)，2.31-2.15(m，5H)，1.31(d，J＝6.6Hz，3H)；13C NMR(100MHz，C6D6，25℃)δ＝194.2，169.9，164.3，157.3，146.1，137.1，131.9，128.1，126.2，115.5，107.5，103.6，72.4，45.0，36.4，31.0，30.8，17.2；I.R.(KBr)vmax＝2936，1654，1603，1347，1313，1239cm-1；HRMS(ESI-TOF)m/zC18H19O5ClNa的計(jì)算值373.0813，測(cè)定值373.0903[M+Na+]。(+)-(2R)[α]25D＝+11.1(c 0.72，CHCl3)。

庚-，6-二烯酸甲氧基-甲基-酰胺(2-114)23℃下，向2-氯-N-甲氧基-N-甲基乙酰胺(6.0g，48.8mmol)的無水DMF(20mL)溶液中加入3-巰基苯酚(4.44mL，48.8mmol)和K2CO3(6.7g，48.8mmol)。所得的懸浮液在23℃下攪拌過夜。在該時(shí)間段后，向混合物中加入Merrifield樹脂(24g，＜2mmol.g-1，＜48.8mmol)，之后加入K2CO3(11.4g，83.0mmol)和TBAI(催化量)，并將懸浮液加熱至50℃。在此溫度12小時(shí)后，將樹脂過濾并洗滌若干次用HCl水溶液(50mL)、MeOH(50mL)、CH2Cl2(50mL)和Et2O(50mL)洗滌。在減壓下干燥樹脂至恒定質(zhì)量29.2g。最終的增重(mass gain)(5.2g，27.3mmol)指示0.81mmol.g-1的估測(cè)的負(fù)載(loading)。樹脂2-49(10g，0.81mmol.g-1)被懸浮于HFIP/CH2Cl2 1∶1的混合物(50mL)中。23℃下，向此懸浮液中加入H2O2(3mL，16.0mmol)并將所得混合物振搖12小時(shí)。隨后將樹脂2-113過濾，用MeOH(50mL)、CH2Cl2(50mL)和Et2O(50mL)洗滌并在隨后的使用之前在減壓下干燥至恒定質(zhì)量。將樹脂2-113(4.0g，＜0.81mmol.g-1)懸浮于DMSO(40mL)中，隨后加入tBuOK(336mg，3.0mmol)。室溫下振搖反應(yīng)物1小時(shí)后，向懸浮液中加入5-碘-1-戊烯(588mg，3.0mmol)并將混合物振搖3小時(shí)。如前面的方法將樹脂過濾，洗滌并干燥。隨后，將其懸浮于甲苯中并加熱至80℃。在此溫度8小時(shí)之后，將樹脂過濾并用更多的甲苯洗滌若干次。蒸發(fā)合并的甲苯溶液獲得經(jīng)NMR鑒定為純度95％的無色油狀的純化合物2-114(321mg，77％)。1HNMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝6.94(dt，J＝15.7，6.7Hz，1H)，6.39(d，J＝15.2Hz，1H)，5.84-5.74(m，1H)，5.02(dd，J＝17.4，1.7Hz，1H)，4.97(d，J＝10.1Hz，1H)，3.67(s，3H)，3.21(s，3H)，2.34-2.29(m，2H)，2.23-2.18(m，2H)；13C NMR(100MHz，CDCl3，25℃)δ＝166.8，146.7，137.3，119.1，115.3，61.6，32.3，31.7，(有一個(gè)碳未檢測(cè)到)；I.R.(薄膜)vmax＝2934，1681，1638，1378，1179cm-1。

2，4-雙-乙氧基甲氧基-7-甲基-7，8，11，12-四氫-16H-6-氧雜-苯并環(huán)十四烯-5，15-二酮(2-120)。用10％mol的催化劑Grubbs’II(139mg，0.15mmol)處理2mM的粗制2-119(1.5mmol)在無水甲苯(750mL)中的溶液，并在80℃加熱過夜。接著，將粗制的反應(yīng)混合物通過二氧化硅墊，用CH2Cl2洗滌所述二氧化硅墊。減壓濃縮合并的濾液。用急驟色譜法純化(硅膠，0-25％EtOAc/環(huán)己烷梯度)，獲得純的2-120(260mg，40％經(jīng)兩步)。1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝7.08(d，J＝2.2Hz，1H)，7.01(d，J＝2.2Hz，1H)，6.93-6.86(m，1H)，6.17(d，J＝16.1Hz，1H)，5.34-4.90(m，7H)，4.41(d，J＝14.5Hz，1H)，3.75(d，J＝14.5Hz，1H)，3.59-3.45(m，4H)，2.27-2.12(m，2H)，1.95-1.61(m，4H)，1.45(d，J＝6.2Hz，3H)，1.07(t，J＝7.0Hz，3H)，1.07(t，J＝7.0Hz，3H)；13C NMR(100MHz，C6D6，25℃)δ＝196.0，167.2，159.5，156.6，147.6，135.8，131.5，130.2，128.5，119.1，109.7，102.3，93.3，92.9，71.0，64.2，64.0，44.5，39.6，30.9，30.2，20.1，14.8，14.8；I.R.(薄膜)vmax＝2976，1717，1602，1438，1284，1155，1110，1036，1018cm-1；HRMS(ESI-TOF)m/zC24H32O7Na的計(jì)算值455.2040，測(cè)定值455.2135[M+Na+]。(-)-(2R)[α]25D＝-50.3(c 1.00，CHCl3)。

使用聚合物結(jié)合的試劑(polymer-bound reagent)的pochonin D(2-85)向化合物2-112(50mg，0.1mmol)的MeOH(3mL)溶液中加入PS-TsOH(300mg，3.2mmol.g-1)，并將懸浮液在40℃下振搖4小時(shí)。隨后將反應(yīng)混合物過濾并減壓濃縮甲醇溶液。用急驟色譜法純化(硅膠，0-20％EtOAc/環(huán)己烷梯度)獲得合成的pochonin D 2-85(32mg，90％)。

使用聚合物結(jié)合的試劑的monocillin II(2-103)向化合物2-120(20mg，0.05mmol)MeOH(1.5mL)溶液中加入PS-TsOH(145mg，3.2mmol.g-1)，并將懸浮液在40℃下振搖4小時(shí)。隨后將反應(yīng)混合物過濾并減壓濃縮甲醇溶液。用急驟色譜法純化(硅膠，0-20％EtOAc/環(huán)己烷梯度)獲得合成的monocillin II 2-103(14mg，92％)。1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝12.49(s，1H)，6.70-6.62(m，1H)，6.49(d，J＝2.9Hz，1H)，6.09(d，J＝2.4Hz，1H)，5.86(d，J＝15.2Hz，1H)，5.08-4.95(m，2H)，4.82-4.75(m，1H)，4.14(d，J＝16.8Hz，1H)，3.71(d，J＝17.0Hz，1H)，2.64-2.57(m，1H)，1.83-1.76(m，3H)，1.74-1.66(m，2H)，0.97(d，J＝6.4Hz，3H)；13C NMR(100MHz，C6D6，25℃)δ＝195.7，170.3，166.5，161.3，146.1，140.5，131.7，129.9，126.5，112.4，102.8，72.2，49.1，36.6，31.0，30.6，17.5，(有一個(gè)碳未檢測(cè)到)；I.R.(KBr)vmax＝2936，1654，1603，1347，1313，1239cm-1；HRMS(ESI-TOF)m/z對(duì)C18H21O5計(jì)算理論值317.3980，測(cè)定值317.3978[M+H+]。(+)-(2R)[α]25D＝+40.6(c 0.18，CHCl3)。

大環(huán)2-1220℃下，向化合物2-112(50mg，0.11mmol)的CH3CN(5mL)溶液中加入新制備的DMDO(275μL，0.11mmol，0.04M，在丙酮中)并將混合物攪拌1.5小時(shí)。減壓蒸發(fā)溶劑后，用急驟色譜法純化(硅膠，0-70％Et2O/己烷梯度)獲得兩種非對(duì)映異構(gòu)體混合物(1∶1)的化合物2-122(41mg，79％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝7.12(s，1H)，7.11(s，1H)，6.90-6.76(m，2H)，6.11(d，J＝15.6Hz，1H)，6.05(d，J＝15.8Hz，1H)，5.37-5.27(m，6H)，5.26-5.21(m，4H)，4.14(d，J＝16.9Hz，1H)，4.12(d，J＝17.4Hz，1H)，4.04(d，J＝17.2Hz，1H)，3.82-3.70(m，9H)，2.81-2.78(m，1H)，2.74-2.72(m，1H)，2.67-2.62(m，2H)，2.38-2.11(m，8H)，2.05-2.03(m，1H)，2.03-2.00(m，1H)，1.74-1.60(m，2H)，1.41(d，J＝7.2Hz，3H)，1.39(d，J＝6.2Hz，3H)，1.27-1.22(m，12H)；13C NMR(100MHz，CDCl3，25℃)δ＝195.1(x 2)，166.7，166.3，154.9，154.8，154.0，153.5，147.8，147.4，132.9，132.4，129.1，129.0，119.7(x 2)，118.0，117.9，102.9，102.8，93.9(x 2)，93.6(x 2)，71.1，70.4，64.8(x2)，64.6(x 2)，58.4，57.6，56.9，55.1，43.4(x2)，39.0，37.9，29.9，29.7，27.9(x 2)，18.4，18.0，15.0(x 4)；HRMS(ESI-TOF)m/zC24H32ClO8的計(jì)算值483.1780，測(cè)定值483.1814[M+H+]。

大環(huán)2-124和2-125向化合物2-123(41mg，85μmol)的MeOH(3mL)溶液中加入PS-TsOH(264mg，3.2mmol.g-1)并在40℃下振搖懸浮液直到所有的原料消耗(～1小時(shí))。過濾反應(yīng)混合物并減壓濃縮甲醇溶液，粗制混合物的L.C./M.S.分析顯示出對(duì)應(yīng)于共軛烯烴上的甲醇加成(2-124)和環(huán)氧打開為二醇(2-125)的兩個(gè)清晰的峰。
2-1251H NMR(400MHz，CD3OD，25℃)δ＝7.19(m，1H)，6.89-6.81(m，1H)，6.52(s，1H)，6.47(s，1H)，6.20(d，J＝16.1Hz，1H)，6.04(d，J＝15.6Hz，1H)，5.54-5.49(m，1H)，5.43-5.36(m，1H)，4.50(d，J＝17.7Hz，1H)，4.46(d，J＝17.7Hz，1H)，4.39(d，J＝17.2Hz，1H)，4.07(d，J＝17.2Hz，1H)，3.80-3.64(m，2H)，3.51-3.46(m，2H)，2.62-2.58(m，1H)，2.39-2.30(m，2H)，2.27-2.18(m，1H)，2.08-2.00(m，2H)，2.00-1.85(m，4H)，1.44(d，J＝6.4Hz，6H)；HRMS(ESI-TOF)m/zC18H22ClO7的計(jì)算值385.1054，測(cè)定值385.0944[M+H+]。
2-124化合物2-124表征為基于NMR中松散的(loose)烯烴質(zhì)子的α，β-共軛體系的甲醇加成。(由于2-124代表四種化合物的混合物，不可能詳細(xì)指認(rèn))。HRMS(ESI-TOF)m/zC19H24ClO7的計(jì)算值399.1211，測(cè)定值399.1030[M+H+]。

大環(huán)2-128用10％mol的催化劑Grubbs’II(18.4mg，0.023mmol)處理2mM的化合物2-127(140mg，0.23mmol)的無水甲苯(115mL)溶液并加熱至80℃達(dá)12小時(shí)。隨后，將反應(yīng)混合物通過二氧化硅墊，用CH2Cl2洗滌所述二氧化硅墊。減壓濃縮合并的濾液。用急驟色譜法純化(硅膠，0-25％EtOAc/己烷梯度)獲得大環(huán)2-128(116mg，87％)。1HNMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝6.71(dt，J＝15.3，7.3Hz，1H)，6.45(s，1H)，5.81(d，J＝15.3Hz，1H)，5.25(s，2H)，5.04-5.03(m，1H)，3.89(d，J＝17.4Hz，1H)，3.57(d，J＝17.4Hz，1H)，2.31-2.04(m，6H)，1.35(d，J＝6.4Hz，3H)，1.03(s，9H)，0.99(s，9H)，0.28-0.24(m，12H)；13C NMR(100MHz，CDCl3，25℃)δ＝195.8，166.8，152.9，151.7，146.5，132.7，131.9，128.6，126.8，122.8，119.7，110.7，71.9，45.6，38.5，30.9，25.7(x 4)，25.6(x 4)，18.7，18.3，-4.1(x 2)，-4.4(x 2)；HRMS(ESI-TOF)m/zC30H47ClO5Si2Na的計(jì)算值601.2543，測(cè)定值601.2568[M+Na+]。

大環(huán)2-129向化合物2-128(80mg，0.14mmol)溶于二甲氧基甲烷/乙腈的2∶1混合物(2.1mL)的溶液中加入Na2·EDTA水溶液(700μL，4×10-4M)。將所得混合物冷卻至0℃并用經(jīng)由預(yù)冷的注射器加入的三氟丙酮(150μL)來處理。在約1小時(shí)的時(shí)間段內(nèi)將碳酸氫鈉(88mg，1.05mmol)和過硫酸氫鉀制劑(Oxone)(430mg，0.70mmol)的混合物分批加至該均相溶液。接著對(duì)反應(yīng)物使通過TLC并發(fā)現(xiàn)反應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)完成。然后將反應(yīng)混合物倒入水(10mL)中，用CH2Cl2(20mL)萃取并用Na2SO4干燥。在減壓下除去溶劑，獲得2種非對(duì)映異構(gòu)體的混合物(比率為3∶1)的純的化合物2-129(66mg，93％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝6.90-6.77(m，1.33H)，6.45(s，1.33H)，6.06(d，J＝15.8Hz，1.33H)，5.31-5.29(m，1H)，5.29-5.21(m，0.33H)，4.03(d，J＝18.1Hz，1.33H)，3.63(d，J＝17.6Hz，1H)，2.82-2.80(m，1.33H)，2.74-2.71(m，1.33H)，2.62-2.60(m，1.33H)，2.41-2.11(m，4.6H)，2.02-1.95(m，0.33H)，1.80-1.78(m；1H)，1.78-1.68(m，0.7H)，1.41(d，J＝6.4Hz，3.9H)，1.05(s，12H)，0.97(s，12H)，0.26(s，16H)；13C NMR(100MHz，CDCl3，25℃)δ＝195.4，195.1，167.0，166.2，153.1(x 2)，152.1，151.5，147.8，146.9，132.9，132.2，129.0，128.3，122.2，121.4，120.0，119.7，110.6，110.3，71.3，70.1，58.2，57.9，56.6，55.2，44.7，43.9，38.7，37.6，30.1，29.4，28.3，27.5，25.7(x 4)，25.6(x 4)，25.5(x 4)，25.4(x 4)，20.8，17.8，-3.9，-4.0，-4.3(x 3)，-4.4(x 3)；HRMS(ESI-TOF)m/zC30H48O6ClSi2的計(jì)算值595.2672，測(cè)定值595.2698[M+H+]。

Pochonin A Pochonin A(2-122)向化合物2-129(66mg，0.11mmol)的THF(2mL)溶液中加入TBAF(244μL，溶于己烷的1M溶液，0.24mmol)并將混合物在室溫下攪拌20分鐘。接著用飽和NH4Cl水溶液(8mL)終止反應(yīng)物的反應(yīng)，用EtOAc(10mL)萃取若干次并用Na2SO4干燥。減壓濃縮，隨后用急驟色譜法純化(硅膠，0-70％Et2O/己烷梯度)，獲得兩種不同的非對(duì)映異構(gòu)體pochonin A(2-122)和它的非對(duì)映異構(gòu)體2-122b的3∶1的混合物(80％的收率)。通過制備TLC用Et2O/己烷的3∶1混合物將異構(gòu)體分離。1H NMR(400MHz，[D6]DMSO，25℃)δ＝10.81(s，1H)，10.74(s，1H)，6.97-6.89(m，1H)，6.53(s，1H)，6.08(d，J＝15.8Hz，1H)，5.15-5.13(m，1H)，4.19(d，J＝17.5Hz，1H)，4.09(d，J＝17.5Hz，1H)，2.81(s，1H)，2.60(m，1H)，2.44-2.40(m，2H)，2.30-2.22(m，2H)，1.80-1.78(m，2H)，1.32(d，J＝6.4Hz，3H)；1HNMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝11.85(s，1H)，6.94-6.87(m，1H)，6.70(s，1H)，6.14(s，1H)，6.12(d，J＝16.4Hz，1H)，5.32-5.31(m，1H)，4.53(d，J＝18.1Hz，1H)，4.27(d，J＝18.1Hz，1H)，2.77(s，1H)，2.58-2.56(m，2H)，2.47-2.43(m，1H)，2.35-2.28(m，1H)，2.11-2.07(m，1H)，1.93-1.86(m，1H)，1.51(d，J＝6.4Hz，3H)，0.94-0.90(m，1H)；13C NMR(100MHz，CDCl3，25℃)δ＝195.0，170.0，164.1，156.4，147.5，135.7，129.9，115.0，107.3，103.8，72.2，57.0，55.5，45.1，36.3，30.9，29.1，17.9；HRMS(ESI-TOF)m/zC18H19ClO6Na的計(jì)算值389.0762，測(cè)定值389.0724[M+Na+]。(-)-(2R，4R，5R)[α]25D＝-7.0(c 0.11，CHCl3)。

化合物2-122b1H NMR(400MHz，[D6]DMSO，25℃)δ＝10.74(s，1H)，10.39(s，1H)，6.94-6.89(m，1H)，6.52(s，1H)，6.02(d，J＝16.4Hz，1H)，5.18(m，1H)，4.32(d，J＝17.5Hz，1H)，3.96(d，J＝17.5Hz，1H)，2.82(s，1H)，2.68(s，1H)，2.34-2.26(m，3H)，1.86-1.83(m，1H)，1.70-1.63(m，1H)，1.22(d，J＝5.8Hz，3H)，1H被溶劑峰掩蓋；1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝11.37(s，1H)，6.90-6.83(m，1H)，6.67(s，1H)，6.24(d，J＝16.4Hz，1H)，6.08(s，1H)，5.39-5.37(m，1H)，4.52-4.36(m，2H)，2.72-2.62(m，2H)，2.56-2.52(m，1H)，2.45-2.40(m，1H)，2.40-2.37(m，1H)，2.08-2.04(m，1H)，1.91-1.86(m，1H)，1.35(d，J＝6.4Hz，3H)，1H被溶劑峰掩蓋；HRMS(ESI-TOF)m/zC18H19ClO6Na的計(jì)算值389.0762；測(cè)定值389.0796[M+Na+]。(+)-(2R，4S，5S)[α]25D＝+13.8(c 0.13，CHCl3)。

大環(huán)2-132用10％mol的Grubbs’II(20.8mg，0.026mmol)處理2mM的化合物2-131(166mg，0.26mmol)的無水甲苯(130mL)溶液并加熱至80℃達(dá)12小時(shí)。隨后，將反應(yīng)混合物通過二氧化硅墊，用CH2Cl2洗滌所述二氧化硅墊。減壓濃縮合并的濾液。用急驟色譜法純化(硅膠，0-25％EtOAc/己烷梯度)獲得大環(huán)2-132(136mg，87％)。1H NMR (400MHz，CDCl3，25℃)δ＝7.08(s，1H)，6.77-6.71(m，1H)，5.89(d，J＝15.2Hz，1H)，5.35-5.24(m，6H)，5.09-5.05(m，1H)，4.02(d，J＝17.0Hz，1H)，3.85-3.78(m，5H)，2.37-2.08(m，6H)，1.39(d，J＝5.8Hz，3H)，1.02-0.97(m，4H)，0.04(s，18H)；13C NMR(100MHz，CDCl3，25℃)δ＝195.7，166.8，154.6，153.9，147.0，132.8，131.7，128.6，127.5，120.6，117.8，102.7，93.7，93.3，71.9，66.9，66.6，44.7，39.2，30.8(x 2)，19.5，18.0，17.9，-1.4(x 6)；HRMS(ESI-TOF)m/zC30H47O7ClSi2H2O的計(jì)算值628.2649，測(cè)定值628.2870[M+H2O]。(-)-(2R)[α]25D＝-16.3(c 0.85，CHCl3)。

大環(huán)2-133向化合物2-132(40mg，65μmol)溶于二甲氧基甲烷/乙腈2∶1的混合物(1.1mL)的溶液中加入Na2·EDTA水溶液(350μL，4×10-4M)。將所得的溶液冷卻至0℃并經(jīng)由預(yù)冷的注射器加入三氟丙酮(75μL)處理。隨后，在約1小時(shí)的時(shí)間段內(nèi)將碳酸氫鈉(44mg，0.5mmol)和過硫酸氫鉀制劑(215mg，0.35mmol)的混合物分批加入到該均相溶液。接著對(duì)反應(yīng)物使通過TLC并發(fā)現(xiàn)反應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)完成。然后將反應(yīng)混合物倒入水(5mL)中，用CH2Cl2(10mL)萃取并用Na2SO4干燥。在減壓下去除溶劑獲得純的2種非對(duì)映異構(gòu)體的1∶1混合物的化合物2-133(34mg，82％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝7.11(s，1H)，7.09(s，1H)，6.91-6.76(m，2H)，6.12(d，J＝15.8Hz，1H)，6.06(d，J＝15.8Hz，1H)，5.36-5.31(m，6H)，5.23-5.22(m，4H)，4.15(d，J＝16.9Hz，1H)，4.13(d，J＝16.0Hz，1H)，4.05(d，J＝17.5Hz，1H)，3.85-3.75(m，9H)，2.81-2.79(m，1H)，2.75-2.73(m，1H)，2.68-2.62(m，2H)，2.42-2.29(m，10H)，1.72-1.60(m，2H)，1.41(d，J＝7.6Hz，3H)，1.39(d，J＝6.4Hz，3H)，1.02-0.96(m，8H)，0.03(s，36H)；13C NMR(100MHz，CDCl3，25℃)δ＝195.1(x 2)，166.8，166.3，154.9(x 2)，154.2，153.7，147.8，147.4，132.9，132.4，129.1，129.0，119.8，119.6，117.9，117.8，102.8，102.7，93.7(x 2)，93.4(x2)，71.1，70.3，66.9，66.8，66.6，66.5，58.4，57.6，56.9，55.1，43.5(x 2)，38.9，37.9，29.9，29.7，27.9(x 2)，20.7(x 2)，18.4，18.0，17.9(x 2)，-1.40(x 12)；HRMS(ESI-TOF)m/zC30H48O8ClSi2的計(jì)算值627.2571，測(cè)定值627.2551[M+H+]。

來自大環(huán)2-133的Pochonin A(2-122)室溫下，用MgBr2·Et2O(69mg，0.27mmol)處理化合物2-133(21mg，33μmol)的CH2Cl2(2.5mL)溶液。隨后對(duì)反應(yīng)物使用L.C./M.S.直到溴代(bromohydrine)開始出現(xiàn)(～1小時(shí))。接著將反應(yīng)物用EtOAc(5mL)稀釋，用飽和NH4Cl水溶液(5mL)洗滌并經(jīng)MgSO4干燥。減壓濃縮后，用急驟色譜法純化(硅膠，0-70％Et2O/己烷梯度)獲得非對(duì)映異構(gòu)體的1∶1混合物的pochonin A(2-122)(8.6mg，70％)。
合成化合物2-110a-g和2-117a-g的通用步驟在室溫下，將酸2-95a或2-95b(1.0當(dāng)量)、高烯丙醇(R)-120a-g或者(S)-120a-g(1.0當(dāng)量)和三-(3-氯苯基)膦(2.0當(dāng)量)的無水甲苯(0.05M)溶液用PS-DEAD(2.5當(dāng)量，1.3mmol.g-1)處理。攪拌30分鐘后，將反應(yīng)混合物在二氧化硅上過濾并用己烷/EtOAc(10∶1，100mL)和己烷/EtOAc(3∶1，100mL)洗滌。將3∶1混合物減壓濃縮，產(chǎn)出化合物2-115a-g或者2-116a-g(60％-80％)。未經(jīng)進(jìn)一步純化，將化合物2-115a-g或者2-116a-g(1.0當(dāng)量)和TBAI(催化量)溶于DMF(0.15M)中，并用二異丙基乙胺(4.0當(dāng)量)和氯甲基乙基醚(4.0當(dāng)量)處理。在80℃攪拌過夜后，將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋并用飽和NH4Cl水溶液洗滌若干次。將有機(jī)相經(jīng)MgSO4干燥并減壓濃縮以產(chǎn)出化合物2-110a-g和2-117a-g(80％-90％)。合成化合物2-119a-g和2-140a-g的通用步驟將在-78℃冷卻的化合物2-110a-g或2-117a-g(1.0當(dāng)量)的無水THF(0.2M)溶液用新制備的LDA(2.0當(dāng)量)處理。之后立即將α，β-不飽和Weinreb酰胺2-114加入到冷卻的溶液(1.0當(dāng)量)中。接著將所得混合物在-78℃攪拌10分鐘并通過加入Amberlite樹脂(20當(dāng)量)來終止反應(yīng)。一旦暖至室溫，就將反應(yīng)物在二氧化硅墊上過濾并用EtOAc洗滌。減壓濃縮獲得期望的化合物2-118a-g或2-119a-g。該化合物被直接用于復(fù)分解反應(yīng)而未經(jīng)任何進(jìn)一步純化。當(dāng)X＝H時(shí)，觀察到20％的相應(yīng)1，4-加成化合物，該混合物的一小部分被純化用于表征化合物2-119a-g和2-140a-g(硅膠，0-20％EtOAc/己烷梯度)。復(fù)分解反應(yīng)的通用步驟將粗制的2-118a-g或2-119a-g(或當(dāng)X＝H時(shí)，2-119a-g和2-140a-g的混合物)的無水甲苯(2mM)溶液用Grubbs’II(0.10當(dāng)量)處理并在80℃加熱12小時(shí)。將反應(yīng)物冷卻至室溫并將混合物通過硅膠墊過濾，用CH2Cl2洗滌，隨后用EtOAc/環(huán)己烷1∶1的混合物洗滌，并減壓濃縮。用急驟色譜法純化(硅膠，0-25％EtOAc/環(huán)己烷梯度)，獲得化合物2-112a-g或2-120a-g(和2-121a-g)(38％-70％，經(jīng)兩步)。

化合物(S)-2-1121H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝7.10(s，1H)，6.75-6.71(m，1H)，5.88(d，J＝15.8Hz，1H)，5.32(s，2H)，5.27-5.20(m，2H)，5.25(s，2H)，5.08-5.04(m，1H)，4.01(d，J＝17.0Hz，1H)，3.82-3.73(m，5H)，2.36-2.32(m，2H)，2.26-2.20(m，3H)，2.12-2.05(m，2H)，1.38(d，J＝5.8Hz，3H)，1.25(t，J＝7.0Hz，3H)，1.24(t，J＝7.0Hz，3H)；13C NMR(100MHz，CDCl3，25℃)δ＝195.5，166.7，154.6，153.8，147.1，132.8，131.6，128.6，127.5，120.7，117.8，103.0，94.0，93.7，72.0，64.8，64.6，44.7，39.1，30.8，19.4，15.0，2C消失；HRMS(ESI-TOF)m/zC24H31O7ClNa的計(jì)算值489.1551，測(cè)定值489.1651[M+Na+]。(+)-(2S)[α]25D＝+25.0(c 1.00，CHCl3)。

化合物(R)-2-112a1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝7.49-7.47(m，2H)，7.40-7.29(m，3H)，7.10(s，1H)，6.84-6.77(m，1H)，5.98(d，J＝15.2Hz，1H)，5.78(d，J＝8.8Hz，1H)，5.44-5.30(m，4H)，5.15(d，J＝7.0Hz，1H)，5.05(d，J＝6.8Hz，1H)，4.07(d，J＝17.0Hz，1H)，3.90(d，J＝17.0Hz，1H)，3.80(d，J＝7.0Hz，2H)，3.60-3.51(m，2H)，2.68-2.62(m，1H)，2.50-2.47(m，1H)，2.38-2.29(m，2H)，2.14-2.02(m，2H)，1.25(t，J＝7.0Hz，3H)，1.17(t，J＝7.0Hz，3H)；13C NMR(100MHz，CDCl3，25℃)δ＝195.7，166.7，154.8，154.2，147.3，140.7，133.3，132.1，128.5，128.3(x 2)，128.2，127.9，127.7，126.7(x 2)，120.1，118.1，102.9，93.9，93.4，77.4，64.8，64.4，44.5，40.5，30.7，15.0，14.9；HRMS(ESI-TOF)m/zC29H33O7ClNa的計(jì)算值551.1680，測(cè)定值551.1807[M+Na+]。[α]25D＝-40.4(c 0.79，CHCl3)。

化合物(S)-2-112a1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝7.53-7.51(m，2H)，7.44-7.33(m，3H)，7.14(s，1H)，6.88-6.81(m，1H)，6.02(d，J＝15.2Hz，1H)，5.78(dd，J＝10.5，1.8Hz，1H)，5.46-5.33(m，4H)，5.19(d，J＝7.0Hz，1H)，5.09(d，J＝7.6Hz，1H)，4.10(d，J＝17.0Hz，1H)，3.94(d，J＝17.5Hz，1H)，3.83(d，J＝7.0Hz，2H)，3.64-3.55(m，2H)，2.70-2.64(m，1H)，2.54-2.50(m，1H)，2.37-2.33(m，2H)，2.15-2.08(m，2H)，1.29(t，J＝7.3Hz，3H)，1.21(t，J＝7.0Hz，3H)；13C NMR(100MHz，CDCl3，25℃)δ＝195.7，166.7，154.8，154.2，147.3，140.7，133.2，132.1，128.5，128.2，127.9，127.7，126.7，120.1，118.0，102.8，93.9，93.5，77.4，64.8，64.4，44.5，40.5，30.7，15.0，14.9，(有一個(gè)碳未檢測(cè)到)；HRMS(ESI-TOF)m/zC29H33O7ClNa的計(jì)算值551.1680，測(cè)定值551.1704[M+Na+]。[α]25D＝+48.8(c 1.00，CHCl3)。

化合物(R)-2-112d1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝7.14(s，1H)，6.72-6.66(m，1H)，5.88(d，J＝15.2Hz，1H)，5.33-5.17(m，6H)，4.92-4.88(m，1H)，4.21(d，J＝17.0Hz，1H)，3.92(d，J＝17.0Hz，1H)，3.79-3.67(m，4H)，2.33-2.17(m，5H)，2.07-1.96(m，2H)，1.23(t，J＝7.0Hz，3H)，1.21(t，J＝7.0Hz，3H)，1.00(d，J＝5.8Hz，6H)；13C NMR(100MHz，CDCl3，25℃)δ＝195.7，167.1，154.7，154.4，147.4，133.7，131.2，128.8，128.4，119.7，118.0，102.7，93.9，93.5，80.0，64.8，64.5，44.1，32.3，31.2，30.7，30.6，18.3，17.2，15.0，14.9；HRMS(ESI-TOF)m/zC26H35O7ClNa的計(jì)算值517.1964，測(cè)定值517.1844[M+Na+]。[α]25D＝+21.3(c 1.00，CHCl3)。

化合物2-112g1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝7.12(s，1H)，6.76-6.70(m，1H)，5.87(d，J＝15.0Hz，1H)，5.33(s，2H)，5.26(s，2H)，5.24-5.16(m，2H)，4.25(t，J＝5.1Hz，2H)，3.82-3.73(m，6H)，2.40-2.36(m，2H)，2.16-2.13(m，4H)，1.27-1.23(m，6H)；13C NMR(100MHz，CDCl3，25℃)δ＝195.2，167.2，154.6，153.4，146.8，132.3，131.3，128.9，128.5，121.0，117.8，103.0，94.0，93.7，64.8，64.7，64.6，45.4，31.9，31.0，30.7，15.0，15.0；HRMS(ESI-TOF)m/zC23H30O7Cl的計(jì)算值453.1675，測(cè)定值453.1672[M+H+]。

化合物(S)-2-1201H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝6.81-6.72(m，1H)，6.74(d，J＝1.8Hz，1H)，6.56(d，J＝1.8Hz，1H)，5.98(d，J＝15.8Hz，1H)，5.38-5.33(m，2H)，5.22-5.13(m，5H)，4.06(d，J＝14.6Hz，1H)，3.75-3.65(m，4H)，3.46(d，J＝14.6Hz，1H)，2.37-2.22(m，4H)，2.18-2.02(m，2H)，1.39(d，J＝5.8Hz，3H)，1.22(t，J＝7.0Hz，3H)，1.18(t，J＝7.0Hz，3H)；13C NMR(100MHz，CDCl3，25℃)δ＝197.4，167.7，159.0，156.1，148.9，135.0，131.7，129.8，128.5，118.5，109.7，102.2，93.4，93.0，71.5，64.5，64.4，44.3，39.5，30.9，30.6，20.2，15.0(x 2)；HRMS(ESI-TOF)m/zC24H32O7Na的計(jì)算值455.2040，測(cè)定值455.1901[M+Na+]。(+)-(2S)[α]25D＝+59.5(c 1.00，CHCl3)。

化合物(R)-2-120a1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝7.56-7.54(m，2H)，7.41-7.29(m，3H)，6.89-6.82(m，1H)，6.78(d，J＝2.3Hz，1H)，6.61(d，J＝1.8Hz，1H)，6.06(d，J＝16.4Hz，1H)，5.98(dd，J＝11.7，2.4Hz，1H)，5.53-5.51(m，2H)，5.20(d，J＝7.0Hz，1H)，5.17(d，J＝6.4Hz，1H)，5.07(d，J＝7.0Hz，1H)，4.96(d，J＝7.0Hz，1H)，4.20(d，J＝14.6Hz，1H)，3.73-3.68(m，2H)，3.54-3.45(m，3H)，2.71-2.66(m，1H)，2.55-2.51(m，1H)，2.38-2.32(m，2H)，2.23-2.06(m，2H)，1.22(t，J＝7.0Hz，3H)，1.14(t，J＝7.0Hz，3H)；13C NMR(100MHz，CDCl3，25℃)δ＝197.6，167.4，159.3，156.6，149.0，140.8，135.6，132.2，129.9，128.5，128.2(x 2)，127.9，126.9(x 2)，117.9，109.9，102.3，93.2，93.0，76.6，64.4，64.3，44.4，40.5，31.0，30.6，15.0，14.9；HRMS(ESI-TOF)m/zC29H34O7Na的計(jì)算值517.2197，測(cè)定值517.2062[M+Na+]。[α]25D＝-108.3(c 1.00，CHCl3)。

化合物(S)-2-120a1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝7.56-7.54(m，2H)，7.41-7.29(m，3H)，6.90-6.82(m，1H)，6.78(d，J＝2.4Hz，1H)，6.61(d，J＝1.8Hz，1H)，6.07(d，J＝16.4Hz，1H)，5.98(dd，J＝11.4，2.0Hz，1H)，5.53-5.51(m，2H)，5.20(d，J＝7.0Hz，1H)，5.18(d，J＝7.0Hz，1H)，5.07(d，J＝7.0Hz，1H)，4.97(d，J＝7.0Hz，1H)，4.20(d，J＝14.6Hz，1H)，3.74-3.69(m，2H)，3.55-3.46(m，3H)，2.71-2.66(m，1H)，2.55-2.52(m，1H)，2.38-2.33(m，2H)，2.23-2.09(m，2H)，1.22(t，J＝7.0Hz，3H)，1.15(t，J＝7.0Hz，3H)；13C NMR(100MHz，CDCl3，25℃)δ＝197.6，167.5，159.3，156.6，149.0，140.8，135.6，132.2，129.9，128.5，128.2(x 2)，127.9，126.9(x 2)，117.9，110.0，102.3，93.2，93.0，76.6，64.4，64.3，44.4，40.5，31.0，30.6，15.0，14.9；HRMS(ESI-TOF)m/zC29H34O7Na的計(jì)算值517.2197，測(cè)定值517.2049[M+Na+]。[α]25D＝+81.6(c 1.00，CHCl3)。

化合物(R)-2-120d1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝6.83(d，J＝1.7Hz，1H)，6.79-6.72(m，1H)，6.61(d，J＝1.2Hz，1H)，6.00(d，J＝16.4Hz，1H)，5.38-5.36(m，2H)，5.26-5.09(m，5H)，4.30(d，J＝14.6Hz，1H)，3.74-3.67(m，4H)，3.46(d，J＝14.6Hz，1H)，2.33-2.26(m，4H)，2.18-2.14(m，2H)，2.06-2.01(m，1H)，1.23(t，J＝7.0Hz，3H)，1.21(t，J＝7.0Hz，3H)，1.06(d，J＝6.6Hz，3H)，1.05(d，J＝7.0Hz，3H)；13C NMR(100MHz，CDCl3，25℃)δ＝197.9，167.6，159.2，156.9，149.2，136.4，131.5，129.9，129.2，117.4，109.8，102.0，93.3，93.0，78.9，64.4(x 2)，44.2，33.0，32.0，31.0，30.4，18.3，17.2，15.0(x 2)；HRMS(ESI-TOF)m/zC26H36O7Na的計(jì)算值483.2353，測(cè)定值483.2215[M+Na+]。[α]25D＝+52.8(c 1.00，CHCl3)。

化合物(R)-2-120e1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝6.77(d，J＝1.8Hz，1H)，6.77-6.70(m，1H)，6.57(d，J＝1.7Hz，1H)，5.97(d，J＝16.4Hz，1H)，5.37-5.32(m，2H)，5.21-5.14(m，5H)，4.17(d，J＝14.6Hz，1H)，3.73-3.65(m，4H)，3.45(d，J＝14.6Hz，1H)，2.39-2.20(m，4H)，2.17-2.00(m，2H)，1.78-1.72(m，1H)，1.69-1.60(m，1H)，1.54-1.44(m，2H)，1.22(t，J＝7.0Hz，3H)，1.18(t，J＝7.0Hz，3H)，0.97(d，J＝7.3Hz，3H)；13C NMR(100MHz，CDCl3，25℃)δ＝197.7，167.6，159.1，156.6，149.0，135.8，131.5，129.9，128.7，117.9，109.8，102.1，93.3，93.0，74.5，64.4，64.3，44.2，37.3，37.0，31.0，30.5，18.2，15.0，14.9，14.2。[[α]25D＝-1.3(c 1.00，CHCl3)。

化合物(R)-2-120f1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝7.39-7.33(m，4H)，7.31-7.27(m，1H)，6.82(s，1H)，6.82-6.75(m，1H)，6.63(s，1H)，6.02(d，J＝16.4Hz，1H)，5.35-5.29(m，2H)，5.27-5.20(m，5H)，4.16(d，J＝14.6Hz，1H)，3.79-3.70(m，4H)，3.52(d，J＝14.6Hz，1H)，3.37(dd，J＝13.4，4.1Hz，1H)，2.78(dd，J＝13.5，9.4Hz，1H)，2.37-2.12(m，5H)，2.06-2.02(m，1H)，1.26(t，J＝7.0Hz，3H)，1.24(t，J＝7.0Hz，3H)；13C NMR(100MHz，CDCl3，25℃)δ＝197.6，167.8，159.2，156.5，149.0，137.3，135.5，131.8，129.9，129.5(x 2)，128.6(x 2)，128.4，126.7，118.1，109.9，102.3，93.5，93.1，75.8，64.6，64.4，44.4，41.0，36.2，31.0，30.6，15.0(x 2)；HRMS(ESI-TOF)m/zC30H36O7Na的計(jì)算值531.2359，測(cè)定值531.2350[M+Na+]。[α]25D＝-24.1(c 0.33，CHCl3)。

化合物2-120g1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝6.85-6.78(m+s，2H)，6.56(d，J＝2.1Hz，1H)，6.00(d，J＝16.1Hz，1H)，5.38-5.34(m，2H)，5.23(s，2H)，5.19(s，2H)，4.33(t，J＝5.4Hz，2H)，3.75-3.70(m，6H)，2.45-2.41(m，2H)，2.19(bs，4H)，1.27-1.20(m，6H)；13C NMR(100MHz，CDCl3，25℃)δ＝197.2，168.1，159.1，155.8，148.6，134.5，131.7，129.8，129.1，118.9，109.9，102.4，93.6，93.1，64.5，64.5，64.4，45.4，31.9，31.1，30.8，15.0，15.0；HRMS(ESI-TOF)m/zC23H30O7Na的計(jì)算值441.1884，測(cè)定值441.1888[M+Na+]。

化合物(S)-2-121四種非對(duì)映異構(gòu)體的混合物；1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝6.77-6.72(m，1H)，6.57-6.47(m，1H)，5.62-5.35(m，3H)，5.24-5.16(m，4H)，3.77-3.70(m，4H)，3.62-3.60(m，1.5H)，3.53-3.49(m，1.5H)，3.17-3.11(m，3H)，3.04-2.97(m，1H)，2.57-2.44(m，2H)，2.36-1.99(m，6H)，1.37-1.33(m，3H)，1.28-1.21(m，8H)；HRMS(ESI-TOF)m/zC26H39O8NNa的計(jì)算值516.2568，測(cè)定值516.2596[M+Na+]。

化合物(R)-2-121a四種非對(duì)映異構(gòu)體的混合物；1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝7.51-7.42(m，2H)，7.38-7.31(m，3H)，6.73-6.70(m，1H)，6.60-6.49(m，1H)，6.45-6.31(m，1H)，5.73-5.39(m，2H)，5.23-5.00(m，4H)，3.75-3.69(m，2H)，3.56-3.34(m，6H)，3.19-3.09(m，3H)，2.66-2.08(m，8H)，1.31-1.19(m，5H)，1.10-1.04(m，3H)；HRMS(ESI-TOF)m/zC31H41O8NNa的計(jì)算值578.2724，測(cè)定值578.2715[M+Na+]。

化合物(S)-2-121a四種非對(duì)映異構(gòu)體的混合物；1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝7.51-7.42(m，2H)，7.38-7.29(m，3H)，6.73-6.70(m，1H)，6.60-6.49(m，1H)，6.45-6.31(m，1H)，5.73-5.42(m，2H)，5.25-5.01(m，4H)，3.76-3.69(m，2H)，3.62-3.34(m，6H)，3.20-3.09(m，3H)，2.66-2.50(m，2H)，2.22-2.12(m，4H)，1.72-1.66(m，2H)，1.31-1.19(m，5H)，1.10-1.04(m，3H)；HRMS(ESI-TOF)m/zC31H41O8NNa的計(jì)算值578.2724，測(cè)定值578.2720[M+Na+]。

化合物(R)-2-121d四種非對(duì)映異構(gòu)體的混合物；1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝6.77(s，1H)，6.52(s，0.5H)，6.46(s，0.5H)，5.59-5.37(m，2H)，5.21-5.18(m，4H)，5.09-4.92(m，1H)，3.75-3.70(m，4H)，3.53-3.48(m，3H)，3.38-3.34(m，1H)，3.19-3.10(m，3H)，2.65-2.47(m，3H)，2.29-2.04(m，6H)，1.89-1.72(m，2H)，1.31-1.20(m，6H)，1.06-0.96(m，6H)；HRMS(ESI-TOF)m/zC28H43O8NNa的計(jì)算值544.2881，測(cè)定值544.2907[M+Na+]。

化合物2-121g兩種非對(duì)映異構(gòu)體的混合物；1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝6.74-6.72(m，1H)，6.54(d，J＝1.8Hz，0.6H)，6.50(d，J＝1.7Hz，0.4H)，5.52-5.41(m，2H)，5.21(s，2H)，5.19(s，2H)，4.69-4.65(m，1H)，4.58-4.47(m，1H)，3.74-3.68(m，4H)，3.55(s，3H)，3.13(s，3H)，2.97-2.94(m，1H)，2.52-2.40(m，2H)，2.26-1.98(m，6H)，1.72-1.58(m，2H)，1.24-1.20(m，6H)；HRMS(ESI-TOF)m/zC25H38O8N的計(jì)算值480.2567，測(cè)定值480.2592[M+H+]。
用于EOM脫保護(hù)以生成化合物脫保護(hù)的-2-121a-g、2-85a-g和2-103a-g的通用步驟向相應(yīng)的化合物2-121a-g或2-112a-g或2-120a-g(1.0當(dāng)量)的MeOH(0.03M)溶液中加入PS-TsOH(10.0當(dāng)量，3.2mmol.g-1)并將所得的懸浮液在40℃振搖1至4小時(shí)。在此之后，將反應(yīng)混合物過濾并在減壓下將甲醇溶液濃縮。用急驟色譜法純化(硅膠，0-33％EtOAc/環(huán)己烷梯度)，獲得相應(yīng)的化合物脫保護(hù)的-2-121a-g或2-85a-g或2-103a-g(＞90％)。

脫保護(hù)的化合物(S)-2-121四種非對(duì)映異構(gòu)體的混合物；1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝12.90(s，0.5H)，12.83(s，0.5H)，12.12(s，0.5H)，12.02(s，0.5H)，6.92(s，0.5H)，6.84(s，0.5H)，6.83(s，1H)，6.79(s，0.5H)，6.60(s，1H)，6.54(s，0.5H)，5.60-5.29(m，4H)，5.17-4.99(m，2H)，4.14-3.99(m，2H)，2.98-2.72(m，12H)，2.60-1.92(m，16H)，1.31(d，J＝6.4Hz，1.5H)，1.22(d，J＝8.7Hz，1.5H)，1.13-1.02(m，7H)；HRMS(ESI-TOF)m/zC20H27O6NNa的計(jì)算值400.1851，測(cè)定值400.1731[M+Na+]。

脫保護(hù)的化合物(R)-2-121a四種非對(duì)映異構(gòu)體的混合物；1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝11.90(s，0.25H)，11.08(s，0.5H)，10.98(s，0.25H)，7.38-7.29(m，5H)，6.39(s，0.25H)，6.33(s，0.25H)，6.29(s，1.25H)，6.26(s，0.25H)，6.05-5.95(m，1H)，5.70-5.52(m，2H)，4.18-4.03(m，1H)，3.51-3.49(m，3H)，3.16-3.14(m，3H)，2.75-2.62(m，2H)，2.36-.29(m，2H)，2.12-1.96(m，4H)，1.81-1.73(m，2H)，未檢測(cè)到對(duì)苯酚；HRMS(ESI-TOF)m/zC25H30O6N的計(jì)算值440.2068，測(cè)定值440.2103[M+H+]。

脫保護(hù)的化合物(S)-2-121a四種非對(duì)映異構(gòu)體的混合物；1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝11.90(s，0.25H)，11.08(s，0.5H)，10.98(s，0.25H)，7.38-7.31(m，5H)，6.38(s，0.25H)，6.33(s，0.25H)，6.29(s，1.25H)，6.26(s，0.25H)，6.05-5.95(m，1H)，5.71-5.54(m，2H)，4.13-4.04(m，1H)，3.53-3.50(m，3H)，3.19-3.14(m，3H)，2.78-2.63(m，2H)，2.33-2.29(m，2H)，2.16-2.04(m，4H)，1.81-1.68(m，2H)，未檢測(cè)到對(duì)苯酚；HRMS(ESI-TOF)m/zC25H29O6NNa的計(jì)算值462.1887，測(cè)定值462.2080[M+Na+]。

脫保護(hù)的化合物(R)-2-121d四種非對(duì)映異構(gòu)體的混合物；1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝11.54(s，1H)，6.33(d，J＝2.3Hz，1H)，6.25(s，1H)，5.53-5.51(m，1H)，5.44-5.41(m，1H)，5.11-5.08(m，1H)，4.01(d，J＝11.7Hz，2H)，3.45(s，3H)，3.11(s，3H)，2.83-2.73(m，1H)，2.68-2.59(m，1H)，2.27-2.20(m，1H)，2.10-1.87(m，6H)，1.82-1.72(m，1H)，1.01-0.94(m，6H)，未檢測(cè)到對(duì)苯酚；HRMS(ESI-TOF)m/zC22H31O6NNa的計(jì)算值428.2044，測(cè)定值428.2109[M+Na+]。

脫保護(hù)的化合物2-121g兩種非對(duì)映異構(gòu)體的混合物；1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝12.33(s，0.5H)，11.85(s，0.5H)，6.34-6.32(m，1H)，6.25-6.22(m，1H)，5.62-5.45(m，2H)，4.54-4.37(m，1H)，4.29-4.21(m，1H)，3.53-3.49(m，3H)，3.15-3.12(m，3.5H)，2.95-2.86(m，0.5H)，2.67-2.52(m，2H)，2.39-1.96(m，8H)，未檢測(cè)到對(duì)苯酚；HRMS(ESI-TOF)m/zC19H26O6N的計(jì)算值364.1755，測(cè)定值364.1715[M+H+]。

化合物(S)-2-851H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝12.40(s，1H)，6.83(s，1H)，6.66-6.61(m，1H)，5.96(bs，1H)，5.80(d，J＝15.2Hz，1H)，5.16-5.12(m，1H)，4.99-4.91(m，1H)，4.75-4.68(m，1H)，4.26(d，J＝17.5Hz，1H)，4.13(d，J＝17.5Hz，1H)，2.52-2.45(m，1H)，1.86-1.79(m，3H)，1.75-1.67(m，1H)，1.54-1.49(m，1H)，0.97(d，J＝7.0Hz，3H)；13C NMR(100MHz，C6D6，25℃)δ＝193.8，169.8，164.3，156.8，146.0，137.1，131.9，128.1，126.2，115.2，107.6，103.6，72.4，46.2，36.3，31.0，30.8，17.2。(-)-(2S)[α]25D＝-21.9(c 0.62，CHCl3)。

化合物(R)-2-85a1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝12.25(bs，1H)，7.32-7.29(m，2H)，7.19-7.15(m，3H)，6.80(s，1H)，6.81-6.75(m，1H)，6.29-6.26(m，1H)，5.92(d，J＝15.8Hz，1H)，5.80(s，1H)，5.05-4.99(m，1H)，4.81-4.75(m，1H)，4.56(d，J＝17.6Hz，1H)，4.12(d，J＝17.5Ha，1H)，2.73-2.66(m，1H)，2.39-2.35(m，1H)，1.86-1.76(m，2H)，1.64-1.49(m，2H)；13C NMR(100MHz，C6D6，25℃)δ＝194.2，169.8，164.4，156.8，145.5，138.3，137.0，132.9，129.9(x 2)，128.6，127.3，126.6(x 2)，125.8，115.2，107.5，103.6，77.6，46.6，38.3，31.0，30.6；HRMS(ESI-TOF)m/zC23H21O5ClNa的計(jì)算值435.0970，測(cè)定值435.0914[M+Na+]。[α]25D＝-12.0(c 0.55，CHCl3)。

化合物(S)-2-85a1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝12.20(bs，1H)，7.15-7.09(m，3H)，6.75(s，1H)，6.77-6.71(m，1H)，6.25-6.22(m，1H)，5.88(d，J＝15.2Hz，1H)，5.72(s，1H)，5.00-4.95(m，1H)，4.77-4.73(m，1H)，4.52(d，J＝17.6Hz，1H)，4.08(d，J＝17.5Hz，1H)，2.68-2.62(m，1H)，2.35-2.31(m，1H)，1.81-1.78(m，2H)，1.56-1.49(m，2H)，2H被溶劑峰掩蓋；13C NMR(100MHz，C6D6，25℃)δ＝194.2，169.8，164.4，156.8，145.5，138.3，137.0，132.2，129.9(x2)，128.5，127.3，126.5(x 2)，125.8，115.2，107.5，103.6，77.5，46.6，38.2，31.0，30.6；HRMS(ESI-TOF)m/zC23H21O5ClNa的計(jì)算值435.0970，測(cè)定值435.0885[M+Na+]。[α]25D＝+11.6(c 0.51，CHCl3)。

化合物(R)-2-85d1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝12.31(s，1H)，6.83(s，1H)，6.74-6.67(m，1H)，5.84(bs，1H)，5.82(d，J＝15.8Hz，1H)，5.03-4.95(m，1H)，4.88-4.86(m，1H)，4.76-4.70(m，1H)，4.40(d，J＝17.6Hz，1H)，4.15(d，J＝17.5Hz，1H)，2.40-2.34(m，1H)，2.22-2.18(m，1H)，1.87-1.65(m，4H)，1.53-1.48(m，1H)，0.92(d，J＝6.4Hz，3H)，0.66(d，J＝7.0Hz，3H)；13C NMR(100MHz，C6D6，25℃)δ＝193.7，164.2，156.8，145.8，137.2，131.8，129.3，126.3，115.3，107.9，103.6，82.1，46.4，33.3，30.9，30.7，28.8，20.1，18.5，18.3；HRMS(ESI-TOF)m/zC20H23ClO5Na的計(jì)算值401.1126，測(cè)定值401.1170[M+Na+]。[α]25D＝-35.6(c 0.52，CHCl3)。

化合物2-85g1H NMR(400MHz，CD3OD，25℃)δ＝6.74-6.68(m，1H)，6.48(s，1H)，5.86(d，J＝15.2Hz，1H)，5.31-5.25(m，2H)，4.39(t，J＝5.3Hz，2H)，4.27(s，2H)，2.43-2.40(m，2H)，2.25(m，4H)，未檢測(cè)到酚；13C NMR(100MHz，CD3OD，25℃)δ＝196.9，170.1，161.9，158.1，147.8，135.9，130.9，130.2，129.9，115.2，107.3，102.4，65.9，46.2，31.3，30.9，30.5；HRMS(ESI-TOF)m/zC17H18O5Cl的計(jì)算值337.0837，測(cè)定值337.0797[M+H+]。

化合物(S)-2-1031H NMR(400MHz，CD3OD，25℃)δ＝6.78-6.71(m，1H)，6.29(d，J＝2.4Hz，1H)，6.22(d，J＝2.0Hz，1H)，5.87(d，J＝15.5Hz，1H)，5.37-5.23(m，3H)，4.01(d，J＝17.2Hz，1H)，3.92(d，J＝17.0Hz，1H)，2.67-2.61(m，1H)，2.29-2.15(m，5H)，1.31(d，J＝6.4Hz，3H)，酚未檢測(cè)；13C NMR(100MHz，CD3OD，25℃)δ＝198.5，169.8，164.2，162.3，148.4，139.1，131.6，129.6，127.3，111.7，101.7，72.0，47.7，36.8，30.8，30.7，17.4，(有一個(gè)季碳未檢測(cè)到)；HRMS(ESI-TOF)m/zC18H20O5Na的計(jì)算值339.1203，測(cè)定值339.1141[M+Na+]。(-)-(2S)[α]25D＝-45.1(c 0.27，CHCl3)。

化合物(R)-2-103a1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝12.0(bs，1H)，7.32-7.29(m，3H)，7.19-7.15(m，2H)，6.86-6.79(m，1H)，6.51(d，J＝2.4Hz，1H)，6.27-6.25(m，1H)，6.11(d，J＝2.4Hz，1H)，6.02(d，J＝15.8Hz，1H)，5.49(s，1H)，5.17-5.10(m，1H)，4.97-4.90(m，1H)，4.40(d，J＝16.4Hz，1H)，3.97(d，J＝17.2Hz，1H)，2.83-2.76(m，1H)，2.45-2.38(m，1H)，1.89-1.78(m，2H)，1.67-1.58(m，2H)；13C NMR(100MHz，C6D6，25℃)δ＝196.5，169.6，166.1，161.3，146.0，140.5，138.8，132.1，130.0，128.6(x 2)，127.3，126.6(x 2)，126.3，112.2，105.9，103.0，77.1，48.6，38.4，30.9，30.3；HRMS(ESI-TOF)m/zC23H22O5Na的計(jì)算值401.1359，測(cè)定值401.1271[M+Na+]。[α]25D＝-10.3(c 0.25，CHCl3)。

化合物(S)-2-103a1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝12.0(bs，1H)，7.27-7.21(m，3H)，7.17-7.13(m，2H)，6.87-6.79(m，1H)，6.55(d，J＝2.3Hz，1H)，6.29-6.26(m，1H)，6.16(d，J＝2.3Hz，1H)，6.03(d，J＝15.8Hz，1H)，5.74(s，1H)，5.18-5.12(m，1H)，4.98-4.91(m，1H)，4.41(d，J＝15.8Hz，1H)，3.99(d，J＝16.9Hz，1H)，2.84-2.77(m，1H)，2.46-2.43(m，1H)，1.85-1.79(m，2H)，1.70-1.58(m，2H)；13C NMR(100MHz，C6D6，25℃)δ＝196.9，169.6，166.2，161.5，146.3，140.5，138.9，132.1，130.0，128.6(x 2)，127.3，126.6(x 2)，126.3，112.2，105.8，103.0，77.1，48.6，38.4，30.9，30.4；HRMS(ESI-TOF)m/zC23H22O5Na的計(jì)算值401.1359，測(cè)定值401.1264[M+Na+]。[α]25D＝+11.9(c 0.51，CHCl3)。

化合物(R)-2-103d1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝12.10(s，1H)，6.79(dt，J＝15.2，7.6Hz，1H)，6.59(d，J＝2.4Hz，1H)，6.22(d，J＝2.3Hz，1H)，5.96(d，J＝15.8Hz，1H)，5.88(bs，1H)，5.13-5.05(m，1H)，4.92-4.85(m，2H)，4.27(d，J＝15.8Hz，1H)，4.03(d，J＝15.8Hz，1H)，2.50-2.44(m，1H)，2.24-2.20(m，1H)，1.96-1.71(m，4H)，1.63-1.56(m，1H)，0.91(d，J＝6.3Hz，3H)，0.71(d，J＝6.4Hz，3H)；13C NMR(100MHz，C6D6，25℃)δ＝196.5，169.7，166.0，161.4，146.8，140.8，131.7，129.5，126.9，112.3，106.0，103.0，81.3，48.5，33.7，30.9，30.4，29.6，19.7，18.4；HRMS(ESI-TOF)m/zC20H24O5Na的計(jì)算值367.1516，測(cè)定值367.1424[M+Na+]。[α]25D＝-31.9(c 0.50，CHCl3)。

化合物(R)-2-103e1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝12.43(s，1H)，6.74(d，J＝1.7Hz，1H)，6.73-6.65(m，1H)，6.48(d，J＝1.7Hz，1H)，5.92(d，J＝15.8Hz，1H)，5.12-5.00(m，2H)，4.91-4.80(m，1H)，4.19(d，J＝17.0Hz，1H)，3.84(d，J＝16.4Hz，1H)，2.77(m，1H)，2.64-2.57(m，1H)，2.01-1.97(m，1H)，1.89-1.70(m，3H)，1.61-1.56(m，2H)，1.30-1.21(m，2H)，0.90(t，J＝6.7Hz，3H)，未檢測(cè)到對(duì)苯酚；13C NMR(100MHz，CDCl3，25℃)δ＝197.5，169.9，165.6，160.6，147.5，140.2，131.9，129.5，127.0，112.8，106.1，102.9，76.2，48.7，35.7，34.3，31.1，29.7，19.4，13.8；HRMS(ESI-TOF)m/zC20H25O5的計(jì)算值345.1697，測(cè)定值345.1739[M+H+]。[α]25D＝+21.6(c 0.36，CHCl3)。

化合物(R)-2-103f1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝12.31(s，1H)，7.19-7.13(m，5H)，6.80-6.72(m，1H)，6.53(d，J＝＝1.8Hz，1H)，6.05(s，1H)，5.89(d，J＝15.8Hz，1H)，5.47-5.44(m，1H)，5.11-5.05(m，1H)，4.85-4.81(m，1H)，4.10(d，J＝17.0Hz，1H)，3.62(d，J＝17.0Hz，1H)，2.89-2.84(m，1H)，2.67-2.60(m，2H)，2.08-2.04(m，1H)，1.90-1.69(m，3H)，1.52-1.44(m，1H)，未檢測(cè)到對(duì)苯酚；13C NMR(100MHz，CDCl3，25℃)δ＝197.7，169.9，165.7，160.7，147.4，140.2，137.2，132.2，129.5，128.8(x 2)，128.7(x 3)，126.8，112.4，105.9，102.9，48.9，38.5，35.3，31.1(x 2)，29.7；HRMS(ESI-TOF)m/zC24H25O5的計(jì)算值393.1697，測(cè)定值393.1765[M+H+]。[α]25D＝+25.4(c 0.41，CHCl3)。

化合物2-103g1H NMR(400MHz，CD3OD，25℃)δ＝6.75-6.69(m，1H)，6.29(s，1H)，6.29(d，J＝2.3Hz，1H)，5.90(d，J＝15.8Hz，1H)，5.30-5.28(m，2H)，4.39(t，J＝5.2Hz，2H)，4.02(s，2H)，2.45-2.41(m，2H)，2.28-2.24(m，4H)，未檢測(cè)到酚；13C NMR(100MHz，CD3OD，25℃)δ＝198.4，170.6，164.9，162.5，148.1，139.2，130.7，130.6，130.2，112.2，105.0，101.6，65.7，47.7，31.4，30.9，30.5；HRMS(ESI-TOF)m/zC17H19O5的計(jì)算值303.1227，測(cè)定值303.1179[M+H+]。
合成化合物2-141的通用步驟0℃下，向相應(yīng)的化合物2-112a-g或2-120a-g(1.0當(dāng)量)的MeOH(0.03M)溶液中加入BER-樹脂(Amberlite上的硼氫化物，1.0當(dāng)量，2.5mmol.g-1)并攪拌反應(yīng)物12小時(shí)。接著，將反應(yīng)混合物過濾并減壓濃縮。用急驟色譜法純化(硅膠，0-20％EtOAc/環(huán)己烷梯度)，獲得兩種非對(duì)映異構(gòu)體1∶1的混合物的2-141(～60％的收率)。

化合物2-141的選擇實(shí)例1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝7.05(s，1H)，6.99(s，1H)，5.64-5.57(m，2H)，5.54-5.53(m，2H)，5.49-5.35(m，7H)，5.31-5.28(m，4H)，5.24-5.16(m，4H)，5.13-5.08(m，1H)，4.68(m，1H)，4.56(m，1H)，3.81-3.69(m，8H)，3.25(dd，J＝13.9，8.0Hz，1H)，3.19(dd，J＝13.7，4.8Hz，1H)，3.11(dd，J＝13.5，10.1Hz，1H)，2.90(dd，J＝13.9，5.1Hz，1H)，2.35(m，9H)，2.09-1.95(m，1H)，1.80-1.70(m，2H)，1.39(d，J＝2.9Hz，3H)，1.37(d，J＝3.2Hz，3H，)，1.24(2 x q，J＝6.9，5.0Hz，12H)；HRMS(ESI-TOF)m/zC24H33ClO7Na的計(jì)算值491.1807，測(cè)定值491.1729[M+Na+]。
合成化合物2-142的通用步驟向相應(yīng)的化合物2-141(1.0當(dāng)量)的MeOH(0.02M)溶液中加入PS-TsOH(10.0當(dāng)量，3.2mmol.g-1)并將懸浮液在40℃振搖4小時(shí)。接著將反應(yīng)混合物過濾并在減壓下將甲醇溶液濃縮。用制備TLC純化(硅膠，25％EtOAc/環(huán)己烷)，獲得兩種非對(duì)映異構(gòu)體1∶1的混合物的2-142(～90％的收率)。

化合物2-142的選擇實(shí)例1H NMR(400MHz，(CD3)2CO，25℃)δ＝12.30(s，2H)，11.43(s，2H)，6.75(s，2H)，6.00(bdd，J＝6.4，6.2Hz，1H)，5.97(bdd，J＝6.4，6.2Hz，1H)，5.97(bd，J＝6.7Hz，1H)5.77(bd，J＝6.7Hz，1H)，5.57-5.48(m，4H)，5.18-5.14(m，2H)，3.38-3.28(m，3H)，3.02(dd，J＝16.1，10.5Hz，1H)，2.41-2.09(m，12H)，1.11(d，J＝6.2Hz，6H)，未檢測(cè)到醇；HRMS(ESI-TOF)m/zC18H21ClO5Na的計(jì)算值375.0970，測(cè)定值375.1029[M+Na+]。
合成化合物2-143的通用步驟23℃下，向相應(yīng)的化合物2-141(1.0當(dāng)量)的DMF(0.02M)溶液中加入Ac2O(1.2當(dāng)量)、嗎啉甲基聚苯乙烯(1.2當(dāng)量，3.2mmol.g-1)和DMAP(0.05當(dāng)量)，并將混合物攪拌30分鐘，隨后使通過TLC直到原料消耗。接著將樹脂過濾并在減壓下將有機(jī)相濃縮。用制備TLC純化(硅膠，20％EtOAc/環(huán)己烷)獲得兩種非對(duì)映異構(gòu)體1∶1的混合物的相應(yīng)的化合物2-143(～80％的收率)。

化合物2-143的選擇實(shí)例1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝7.04(s，1H)，7.01(s，1H)，5.86(dd，J＝15.0，6.9Hz，1H)，5.67(dd，J＝12.4，6.2Hz，1H)，5.60-5.54(m，4H)，5.48(dd，J＝7.2，7.2Hz，1H)，5.41-5.34(m，3H)，5.32-5.30(m，4H)，5.28-5.23(m，2H)，5.21(dd，J＝11.0，6.7Hz，2H)，5.17(dd，J＝11.8，6.9Hz，2H)，3.81-3.69(m，8H)，3.43(dd，J＝14.2，7.5Hz，1H)，3.23-3.15(m，2H)，2.85(dd，J＝13.9，5.4Hz，1H)，2.30-2.17(m，8H)，2.12(s，3H)，2.06(s，3H)，2.00-1.95(m，4H)，1.39(2 x d，J＝5.6Hz，6H)，1.24(m，12H)；HRMS(ESI-TOF)m/zC26H35ClO8Na的計(jì)算值533.1913，測(cè)定值533.1864[M+Na+]。
合成化合物2-144的通用步驟向相應(yīng)化合物2-143(1.0當(dāng)量)的MeOH(0.02M)溶液中加入PS-TsOH(10.0當(dāng)量，3.2mmol.g-1)并將懸浮液在40℃振搖4小時(shí)。在此之后，將反應(yīng)混合物過濾并在減壓下將甲醇溶液濃縮。用制備TLC純化(硅膠，20％EtOAc/環(huán)己烷)獲得化合物2-144(～60％的收率)。

化合物2-144的選擇實(shí)例非對(duì)映異構(gòu)體2∶1的混合物；1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝12.60(s，1H)，12.12(s，0.5H)，6.93(d，J＝8.7Hz，0.5H)，6.66(s，1H)，6.64(s，0.5H)，6.62-6.60(m，1H)，6.10-6.05(m，3H)，5.47-5.33(m，6H)，2.60-2.53(m，1.5H)，2.26-2.02(m，7.5H)，1.44(d，J＝6.2Hz，1.5H)，1.43(d，J＝6.4Hz，3H)，未檢測(cè)到對(duì)苯酚；HRMS(ESI-TOF)m/zC18H19ClO4Na的計(jì)算值357.0864，測(cè)定值357.0898[M+Na+]。
制備化合物2-145的通用步驟向相應(yīng)化合物2-85a-g(1.0當(dāng)量)的甲醇(0.03M)溶液中加入PS-TsOH(10.0當(dāng)量)并將懸浮液在40℃攪拌15小時(shí)。接著將反應(yīng)物過濾，并用CH2Cl2洗滌樹脂若干次。減壓濃縮，接著用制備TLC純化(硅膠，50％的己烷/EtOAc)，獲得非對(duì)映異構(gòu)體2∶1的混合物的期望的化合物2-145。

化合物2-145的選擇實(shí)例1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝12.28(s，0.4H)，11.91(s，0.6H)，7.21-7.11(m，5H)，6.62(s，1H)，6.03-6.01(m，1H)，5.58(bs，1H)，5.38-5.33(m，1H)，5.27-5.20(m，1H)，4.76(d，J＝17.5Hz，0.6H)，4.02(d，J＝17.0Hz，0.4H)，4.18(d，J＝18.1Hz，0.6H)，4.09(d，J＝17.0Hz，0.4H)，3.87(bs，0.4H)，3.81(bs，0.6H)，3.15(s，1.8H)，3.12(s，1.2H)，2.83-2.78(m，1H)，2.45-2.30(m，2H)，2.18-2.16(m，1H)，2.02-1.97(m，2H)，1.79-1.72(m，2H)；HRMS(ESI-TOF)m/zC24H25O6ClNa的計(jì)算值467.1232，測(cè)定值467.1366[M+Na+]。
合成化合物2-146的通用步驟23℃下，向相應(yīng)的化合物2-85a-g或2-103a-g(1.0當(dāng)量)的CH2Cl2/AcOH 10∶1(0.08M)的溶液中加入氰基硼氫化(聚苯乙烯基甲基)三甲基銨(2.0當(dāng)量，3.5mmol.g-1)，并通過TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)物直到原料被消耗(4小時(shí))。接著將樹脂過濾并減壓濃縮有機(jī)相。用制備TLC純化(硅膠，30％EtOAc/環(huán)己烷)獲得化合物2-146(50％-60％的收率)。

化合物2-146的選擇實(shí)例1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝11.75(s，1H)，6.65(s，1H)，5.48(m，2H)，5.49(ddt，J＝6.1，3.5，2.9Hz，1H)，4.53(d，J＝17.5Hz，1H)，4.04(d，J＝17.7Hz，1H)，2.61-2.54(m，2H)，2.48-2.28(m，3H)，2.19-2.14(m，1H)，2.08-1.99(m，1H)，1.72-1.61(m，3H)，1.41(d，J＝6.4Hz，3H)，未檢測(cè)到對(duì)苯酚；HRMS(ESI-TOF)m/zC18H21ClO5Na的計(jì)算值375.0970，測(cè)定值375.1050[M+Na+]。
合成化合物2-147的通用步驟向相應(yīng)的化合物2-85a-g或2-103a-g(1.0當(dāng)量)的THF(0.05M)溶液中依次加入相應(yīng)的醇R2OH(2.0當(dāng)量)、三苯基膦(2.0當(dāng)量)和PS-DEAD(2.0當(dāng)量，1.3mmol.g-1)。將反應(yīng)混合物在室溫下振搖8小時(shí)，并接著將樹脂過濾，濾液直接用制備TLC純化(硅膠，10％EtOAc/環(huán)己烷)以獲得化合物2-147連同雙烷基化產(chǎn)物的混合物。(78％的收率)
化合物2-147的選擇實(shí)例與相應(yīng)的雙烯丙基化化合物的1∶1的混合物；1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝11.83(s，1H)，6.82(ddd，J＝15.7，8.2，4.6Hz，1H)，6.72-6.65(m，1H)，6.46(s，1H)，6.41(s，1H)，6.09-5.98(m，3H)，5.82(d，J＝15.7Hz，1H)，5.46-5.16(m，8H)，4.57-4.54(m，3H)，4.51-4.49(m，3H)，4.19(d，J＝17.5Hz，1H)，4.11(d，J＝14.6Hz，1H)，3.78(d，J＝17.0Hz，1H)，3.51(d，J＝14.2Hz，1H)，2.76-2.69(m，1H)，2.38-2.05(m，11H)，1.42(d，J＝6.2Hz，3H)，1.35(d，J＝6.3Hz，3H)；單烯丙基化的化合物HRMS(ESI-TOF)m/zC21H23ClO5Na的計(jì)算值413.1132，測(cè)定值413.1103[M+Na+]；雙烯丙基化的化合物HRMS(ESI-TOF)m/zC24H27ClO5Na的計(jì)算值453.1449，測(cè)定值453.1422[M+Na+]。
合成化合物2-148的通用步驟23℃下，向相應(yīng)的化合物2-85a-g或2-103a-g(1.0當(dāng)量)的CH2Cl2(0.05M)溶液中加入TBD-甲基聚苯乙烯(2.0當(dāng)量，2.9mmol.g-1)和相應(yīng)的烷基溴或烷基氯(BrCH2COOtBu、EOMCl，0.9當(dāng)量)并將混合物振搖3小時(shí)。接著將樹脂過濾并減壓濃縮濾液。用制備TLC純化(硅膠，30％EtOAc/環(huán)己烷)獲得相應(yīng)的化合物2-148(＞90％的收率)。

化合物2-148的選擇實(shí)例1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝11.84(s，1H)，6.69(m，1H)，6.41(s，1H)，5.76(d，J＝15.0Hz，1H)，5.43(m，1H)，5.26(ddd，J＝15.0，9.1，4.8Hz，1H)，5.18-5.11(m，1H)，4.65(s，2H)，4.33(d，J＝17.7Hz，1H)，4.16(d，J＝17.5Hz，1H)，2.65-2.58(m，1H)，2.37-2.34(m，2H)，2.25-2.21(m，1H)，2.12-2.01(m，2H)，1.53(s，9H)，1.34(d，J＝6.5Hz，3H)；HRMS(ESI-TOF)m/zC24H29ClO7Na的計(jì)算值487.1494，測(cè)定值487.1498[M+Na+]。

1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝11.76(s，1H)，6.86(s，1H)，6.70(dt，J＝14.9，7.3Hz，1H)，5.77(d，J＝15.8Hz，1H)，5.46-5.42(m，1H)，5.37(s，2H)，5.30-5.19(m，2H)，4.34(d，J＝17.6Hz，1H)，4.16(d，J＝18.1Hz，1H)，3.80(q，J＝7.0Hz，2H)，2.66-2.59(m，1H)，2.37-2.34(m，2H)，2.26-2.21(m，1H)，2.13-2.06(m，2H)，1.34(d，J＝6.4Hz，3H)，1.27(t，J＝7.0Hz，3H)；HRMS(ESI-TOF)m/zC21H25O6ClNa的計(jì)算值431.1237，測(cè)定值431.1257[M+Na+]。
合成化合物2-149的通用步驟23℃下，向化合物2-85a-g或2-103a-g(1.0當(dāng)量)的丙酮/H2O 10∶1(0.05M)的溶液中加入OsO4(0.1當(dāng)量)和NMO(1.0當(dāng)量)，并將混合物攪拌1小時(shí)。將粗制混合物通過二氧化硅墊過濾，濃縮并用制備TLC純化(硅膠，30％EtOAc/環(huán)己烷)以獲得兩種非對(duì)映異構(gòu)體1∶1的混合物的2-149(＞70％的收率)。

化合物2-149的選擇實(shí)例1H NMR(400MHz，CD3OD，25℃)δ＝7.19(m，1H)，6.89-6.81(m，1H)，6.52(s，1H)，6.47(s，1H)，6.20(d，J＝16.1Hz，1H)，6.04(d，J＝15.6Hz，1H)，5.54-5.49(m，1H)，5.43-5.36(m，1H)，4.50(d，J＝17.7Hz，1H)，4.46(d，J＝17.7Hz，1H)，4.39(d，J＝17.2Hz，1H)，4.07(d，J＝17.2Hz，1H)，3.80-3.64(m，2H)，3.51-3.46(m，2H)，2.62-2.58(m，2H)，2.39-2.30(m，2H)，2.27-2.18(m，2H)，2.08-1.98(m，2H)，2.00-1.85(m，4H)，1.44(d，J＝6.4Hz，6H)，未檢測(cè)到酚和醇；HRMS(ESI-TOF)m/zC18H21ClO7Na的計(jì)算值407.0868，測(cè)定值407.1031[M+Na+]。
合成化合物2-150的通用步驟0℃下，向化合物2-85a-g或2-103a-g(1.0當(dāng)量)的CH3CN(0.03M)溶液中加入新制備的DMDO(1.2當(dāng)量，0.04M(溶于丙酮))并將混合物攪拌30分鐘。減壓蒸發(fā)溶劑之后，用制備TLC純化(硅膠，30％EtOAc/環(huán)己烷)獲得兩種非對(duì)映異構(gòu)體混合物(1∶1至3∶1)的環(huán)氧化物2-150(＞90％的收率)。

化合物2-150的選擇實(shí)例1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝11.85(s，1H)，6.94-6.87(m，2H)，6.69(s，1H)，6.65(s，1H)，6.24(bd，J＝15.2Hz，2H)，6.12(d，J＝15.8Hz，1H)，5.41-5.37(m，1H)，5.33-5.30(m，1H)，4.54(bd，J＝18.1Hz，2H)，4.52-4.48(m，1H)，4.40-4.34(m，1H)，4.27(d，J＝17.5Hz，1H)，2.78-2.72(m，2H)，2.58-2.55(m，4H)，2.47-2.28(m，5H)，2.07(m，2H)，1.92-1.86(m，3H)，1.51(d，J＝6.4Hz，3H)，1.35(d，J＝6.4Hz，3H)，未檢測(cè)到對(duì)苯酚；HRMS(ESI-TOF)m/zC18H19O6ClNa的計(jì)算值389.0762，測(cè)定值389.0844[M+Na+]。

1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝11.80(2 x s，2H)，7.43-7.18(m，10H)，7.03-6.95(m，2H)，6.69(s，1H)，6.61(s，1H)，6.30(d，J＝16.4Hz，1H)，6.21(d，J＝15.8Hz，1H)，6.15-6.10(m，1H)，6.03(d，J＝11.1Hz，1H)，4.84(2 x d，J＝18.1Hz，2H)，4.41(2 x d，J＝17.6Hz，2H)，2.68-2.60(m，4H)，2.41-2.27(m，8H)，1.83-1.76(m，4H)，未檢測(cè)到對(duì)苯酚；HRMS(ESI-TOF)m/zC23H21O6ClNa的計(jì)算值451.0919，測(cè)定值451.1028[M+Na+]。

1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝11.56(2 x s，2H)，6.92-6.82(m，2H)，6.71(s，1H)，6.67(s，1H)，6.20(m，3H)，6.06(d，J＝15.8Hz，1H)，5.11(bs，1H)，5.94(m，1H)，4.46(2 x d，J＝18.1Hz，2H)，4.20(2 x d，J＝18.1Hz，2H)，2.72-2.70(m，2H)，2.53-2.48(m，4H)，2.38-2.35(m，3H)，2.25-2.13(m，5H)，1.84-1.77(m，2H)，1.05-1.01(m，6H)，0.91-0.88(m，3H)，0.86-0.84(m，3H)，未檢測(cè)到對(duì)苯酚；HRMS(ESI-TOF)m/zC20H23O6ClNa的計(jì)算值417.1075，測(cè)定值417.1128[M+Na+]。

1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝11.98(s，1H)，6.91-6.83(m，1H)，6.43(d，J＝2.3Hz，1H)，6.24(d，J＝2.4Hz，1H)，6.11(d，J＝15.8Hz，1H)，5.35(bs，1H)，5.29(m，1H)，4.52(d，J＝17.5Hz，1H)，3.63(d，J＝17.5Hz，1H)，2.77(m，2H)，2.57-2.52(m，2H)，2.46-2.27(m，2H)，2.14-2.10(m，1H)，1.93-1.88(m，1H)，1.48(d，J＝6.4Hz，3H)；其他異構(gòu)體1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝11.67(s，1H)，6.89-6.83(m，1H)，6.40(d，J＝2.4Hz，1H)，6.24(d，J＝2.9Hz，1H)，6.21(d，J＝16.4Hz，1H)，5.37(bs，1H)，5.22(m，1H)，4.20(d，J＝17.0Hz，1H)，4.06(d，J＝17.0Hz，1H)，2.74(m，2H)，2.57-2.20(m，4H)，1.80-1.76(m，1H)，1.68-1.60(m，1H)，1.37(d，J＝6.4Hz，3H)，未檢測(cè)到對(duì)苯酚；HRMS(ESI-TOF)m/zC18H20O6Na的計(jì)算值355.1152，測(cè)定值355.1249[M+Na+]。

1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝11.98(s，1H)，6.91-6.83(m，1H)，6.43(d，J＝2.3Hz，1H)，6.24(d，J＝2.4Hz，1H)，6.11(d，J＝15.8Hz，1H)，5.35(bs，1H)，5.29(m，1H)，4.52(d，J＝17.5Hz，1H)，3.63(d，J＝17.5Hz，1H)，2.77(bs，1H)，2.57-2.52(m，2H)，2.46-2.27(m，2H)，2.14-2.10(m，1H)，1.93-1.88(m，1H)，1.48(d，J＝6.4Hz，3H)。

主要異構(gòu)體1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝11.90(s，1H)，7.41-7.23(m，5H)，6.95-6.89(m，1H)，6.42(d，J＝2.8Hz，1H)，6.27(d，J＝2.9Hz，1H)，6.20(d，J＝15.8Hz，1H)，6.13(d，J＝4.1Hz，1H)，5.51(m，1H)，4.79(d，J＝17.5Hz，1H)，3.79(d，J＝17.0Hz，1H)，2.68-2.55(m，3H)，2.44-2.25(m，4H)，未檢測(cè)到對(duì)苯酚；HRMS(ESI-TOF)m/zC23H22O6Na的計(jì)算值417.1309，測(cè)定值417.1399[M+Na+]。

1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝11.77(s，1H)，6.92-6.82(m，1H)，6.44(d，J＝2.3Hz，1H)，6.28(d，J＝2.4Hz，1H)，6.09(d，J＝15.8Hz，1H)，5.40(bs，1H)，4.92(m，1H)，4.50(d，J＝17.5Hz，1H)，3.61(d，J＝17.5Hz，1H)，2.72-2.70(m，1H)，2.56-2.45(m，2H)，2.38-2.15(m，4H)，1.91-1.85(m，1H)，1.05-1.01(m，6H)，未檢測(cè)到對(duì)苯酚；其他異構(gòu)體1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝11.55(s，1H)，6.86-6.79(m，1H)，6.42(s，1H)，6.29(s，1H)，6.20(d，J＝15.8Hz，1H)，5.40(m，1H)，5.16(m，1H)，4.14(s，1H)，4.12(s，1H)，2.72-2.70(m，1H)，2.53-2.37(m，4H)，2.18-2.10(m，2H)，1.92-1.86(m，1H)，0.91-0.85(m，6H)，未檢測(cè)到對(duì)苯酚；HRMS(ESI-TOF)m/zC20H24O6Na的計(jì)算值383.1465，測(cè)定值383.1574[M+Na+]。

1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝11.87(s，1H)，6.90-6.82(m，1H)，6.43(s，1H)，6.26(s，1H)，6.10(d，J＝15.2Hz，1H)，5.31(bs，1H)，5.18(bs，1H)，4.46(d，J＝17.5Hz，1H)，3.60(d，J＝17.6Hz，1H)，2.74(bs，1H)，2.57-2.38(m，3H)，2.32-2.22(m，1H)，2.08-1.82(m，2H)，1.73-1.67(m，1H)，1.42-1.37(m，2H)，1.33-1.28(m，2H)，1.01(t，J＝7.3Hz，3H)；其他異構(gòu)體1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝11.72(s，1H)，6.86-6.80(m，1H)，6.41(s，1H)，6.27(s，1H)，6.21(d，J＝16.4Hz，1H)，5.37(m，1H)，5.22(m，1H)，4.25(d，J＝16.4Hz，1H)，3.96(d，J＝16.4Hz，1H)，2.74(bs，1H)，2.60-2.37(m，4H)，1.87-1.78(m，2H)，1.70-1.58(m，3H)，1.38-1.22(m，2H)，0.95(t，J＝7.3Hz，3H)；HRMS(ESI-TOF)m/zC20H24O6Na的計(jì)算值383.1465，測(cè)定值383.1492[M+Na+]。

主要異構(gòu)體1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝11.94(s，1H)，7.36-7.28(m，5H)，6.95-6.88(m，1H)，6.42(s，1H)，6.22(s，1H)，6.11(d，J＝15.8Hz，1H)，5.47(m，1H)，5.41(bs，1H)，4.43(d，J＝17.5Hz，1H)，3.56(d，J＝17.6Hz，1H)，3.19(dd，J＝13.7，6.0Hz，1H)，3.03(dd，J＝13.7，7.9Hz，1H)，2.87(bs，1H)，2.70-2.28(m，4H)，2.03-1.93(m，2H)，未檢測(cè)到對(duì)苯酚；HRMS(ESI-TOF)m/zC24H24O6Na的計(jì)算值431.1465，測(cè)定值431.1578[M+Na+]。
制備化合物2-151的通用步驟23℃下，向化合物2-120(1.0當(dāng)量)的二噁烷(0.05M)溶液中加入濃HCl(20.0當(dāng)量)，并將混合物攪拌3小時(shí)。在此之后通過二氧化硅墊將反應(yīng)物過濾，減壓蒸發(fā)溶劑，并用制備TLC純化(硅膠，30％EtOAc/環(huán)己烷)獲得兩種非對(duì)映異構(gòu)體1∶1的混合物的化合物2-151(＞75％的收率)。

化合物2-151的選擇實(shí)例1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝12.11(s，1H)，11.78(s，1H)，6.51(s，1H)，6.43(s，1H)，6.41(d，J＝2.4Hz，1H)，6.37(d，J＝2.7Hz，1H)，6.21(d，J＝2.4Hz，1H)，6.11(d，J＝2.4Hz，1H)，5.59-5.51(m，3H)，5.40-5.32(m，3H)，4.54(d，J＝17.2Hz，1H)，4.42(d，J＝17.2Hz，1H)，3.60(d，J＝17.2Hz，1H)，3.45(d，J＝17.0Hz，1H)，3.28(dd，J＝18.5，9.4Hz，1H)，3.11(dd，J＝13.7，6.2Hz，1H)，3.07(dd，J＝13.4，4.6Hz，1H)，2.76(dd，J＝19.0，6.2Hz，1H)，2.62(ddd，J＝15.5，8.8，4.0Hz，1H)，2.54(ddd，J＝15.3，6.2，3.2Hz，1H)，2.40-2.26(m，4H)，2.25-2.13(m，4H)，2.03-1.91(m，2H)，1.42(d，J＝6.4Hz，3H)，1.40(d，J＝6.4Hz，3H)，未檢測(cè)到對(duì)苯酚；HRMS(ESI-TOF)m/zC18H21ClO5Na的計(jì)算值375.0970，測(cè)定值375.0928[M+Na+]。

1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝11.76(s，0.5H)，11.36(s，0.5H)，7.40-7.29(m，5H)，6.65(s，0.5H)，6.62(s，0.5H)，6.18(t，J＝5.8Hz，1H)，6.14(s，0.5H)，6.12(s，0.5H)，5.67-5.62(m，1H)，5.55-5.49(m，1H)，4.93(d，J＝18.1Hz，0.5H)，4.80(d，J＝17.1Hz，0.5H)，4.58-4.56(m，1H)，4.38(d，J＝18.1Hz，0.5H)，4.18(d，J＝17.1Hz，0.5H)，3.33-3.27(m，1H)，3.10(dd，J＝18.4，3.8Hz，0.5H)，2.84-2.68(m，2.5H)，2.42-2.32(m，2H)，2.23-2.17(m，1H)，2.13-2.04(m，1H)，未檢測(cè)到對(duì)苯酚；HRMS(ESI-TOF)m/zC23H22O5Cl2Na的計(jì)算值471.0737，測(cè)定值471.0754[M+Na+]。
從化合物2-151消除β-Cl23℃下，向化合物2-151(95mg，270μmol)的CH2Cl2(5mL)溶液中加入PS-TBD(51mg，2.6mmol.g-1)，并將混合物攪拌8小時(shí)。在此之后將反應(yīng)物過濾，減壓蒸發(fā)溶劑，并將剩余的殘留物用急驟色譜法純化(硅膠，0-30％EtOAc/環(huán)己烷梯度)以獲得2-103(84mg，98％)。
合成化合物2-152的通用步驟將化合物2-120a或2-112a(1.0當(dāng)量)溶于TFA/CH2Cl2的1∶5的混合物中，并在室溫下攪拌2小時(shí)。蒸發(fā)溶劑；隨后用急驟色譜法(硅膠，0-50％Et2O/己烷)，獲得化合物2-152(～70％的收率)。

化合物2-152的選擇實(shí)例1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)δ＝11.74(s，1H)，7.22-7.14(m，5H)，6.52(s，1H)，6.46(dt，J＝15.2，7.3Hz，1H)，6.28(s，1H)，5.89(t，J＝7.0Hz，1H)，5.76(s，1H)，5.59(d，J＝15.2Hz，1H)，5.37(ddd，J＝15.2，6.9，6.9Hz，1H)，5.24(ddd，J＝15.2，7.3，7.0Hz，1H)，2.56-2.49(m，1H)，2.44-2.39(m，1H)，2.01-1.92(m，4H)；13C NMR(100MHz，C6D6，25℃)δ＝164.8，162.8，158.7，153.1，137.6，136.9，136.1，133.9，128.7(x 2)，126.5(x 2)，124.2，122.0，102.4，100.8，79.9，39.0，32.3，31.4，未檢測(cè)到四個(gè)季碳；HRMS(ESI-TOF)m/zC25H20ClF3O6Na的計(jì)算值531.0793，測(cè)定值531.0992[M+Na+]。

大環(huán)2-15323℃下，向化合物2-103(12.9mg，40.8μmol)的CH2Cl2(1mL)溶液中加入DHP(3.7μL，40.8μmol)和PS-TsOH(12.7mg，40.8μmol，3.2mmol.g-1)，并將混合物攪拌5小時(shí)。在此之后將反應(yīng)物過濾并減壓蒸發(fā)溶劑。用制備TLC純化(硅膠，30％EtOAc/環(huán)己烷)獲得兩種非對(duì)映異構(gòu)體混合物的2-153(13.8mg，85％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝12.33(s，1H)，12.11(s，1H)，9.45(s，1H)，9.40(s，1H)，6.67，(m，2H)，6.28(2 x s，2H)，5.83(d，J＝13.2Hz，1H)，5.79(d，J＝12.9Hz，1H)，5.35-5.30(m，3H)，5.27-5.22(m，3H)，5.06(bd，J＝8.2Hz，2H)，4.10(d，J＝17.5Hz，2H)，3.90-3.85(m，1H)，3.80-3.76(m，1H)，3.65(d，J＝17.7Hz，2H)，3.57-3.52(m，2H)，3.46-3.41(m，2H)，2.77-2.71(m，3H)，2.53-2.49(m，3H)，2.36-2.29(m，4H)，2.24-1.56(m，12H)，1.31(d，J＝6.4Hz，3H)，1.28(d，J＝6.4Hz，3H)；HRMS(ESI-TOF)m/zC23H28O6Na的計(jì)算值423.1778，測(cè)定值423.1778[M+Na+]。
合成化合物2-154的通用步驟向化合物2-120(1.0當(dāng)量)的吡啶/AcOH(5∶1 0.03M)溶液中加入羥胺R2ONH2(5.0當(dāng)量)并將混合物加熱至40℃。攪拌過夜后，在有硅膠的情況下在減壓下用蒸發(fā)溶劑。用30％的EtOAc/環(huán)己烷混合物通過一小段硅膠墊上來純化，獲得兩種非對(duì)映異構(gòu)體(順式/反式)混合物的化合物2-154(～99％)。

化合物2-154的選擇實(shí)例1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝7.50-7.25(m，10H)，6.82(s，1H)，6.75(s，1H)，6.66(s，1H)，6.48(s，1H)，6.24-6.11(m，2H)，6.11-6.05(m，2H)，5.45-5.38(m，4H)，5.34-5.31(m，14H)，4.50(d，J＝17.2Hz，1H)，3.65-3.38(m，8H)，3.60(d，J＝17.1Hz，1H)，3.54(d，J＝17.1Hz，1H)，3.24(d，J＝17.2Hz，1H)，2.48-2.36(m，4H)，2.21-2.17(m，2H)，2.11-2.04(m，2H)，1.95-1.83(m，2H)，1.62-1.51(m，2H)，1.49(d，J＝6.4Hz，6H)，1.32-1.20(m，12H)；13C NMR(100MHz，CDCl3，25℃)δ＝168.1，167.9，159.1，158.8，157.2，155.6，155.4，154.2，140.8，138.2，138.2，137.8，136.9，136.7，132.3，132.3，128.3(x 2)，128.3(x 2)，128.2，128.1(x 2)，128.0(x 2)，127.7，127.6，125.5，118.8，118.6，118.3，108.8，108.5，101.7，101.7，93.5，93.4，93.1(x 2)，77.2，76.0，75.9，71.2，71.0，64.5，64.5，64.3，64.3，40.0，40.0，34.9，32.4，32.3，31.6，31.1，28.9，20.3，20.2，15.0(x2)，15.0(x 2)；HRMS(ESI-TOF)m/zC31H39NO7Na的計(jì)算值560.2619，測(cè)定值560.2627[M+Na+]。
合成化合物2-155的通用步驟向化合物2-154(1.0當(dāng)量)的MeOH(0.02M)溶液中加入PS-TsOH(10.0當(dāng)量，3.2mmol.g-1)并將懸浮液在40℃下振搖4小時(shí)。在此之后，將反應(yīng)混合物過濾并減壓濃縮甲醇溶液。所得粗產(chǎn)品用于下一步驟而未經(jīng)進(jìn)一步純化。接著，23℃下，向此粗產(chǎn)品的CH2Cl2(0.02M)溶液中加入DHP(1.0當(dāng)量)和PS-TsOH(催化量，3.2mmol.g-1)，并將混合物攪拌5小時(shí)。在此之后，將混合物過濾，減壓蒸發(fā)溶劑，并將剩余的殘留物用制備TLC純化(硅膠，30％EtOAc/環(huán)己烷)以獲得2-155的1∶1的兩種不同的非對(duì)映異構(gòu)體(～65％的收率)。

化合物2-155的選擇實(shí)例極性較小的非為映異構(gòu)體1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝9.25(s，1H)，9.24(s，1H)，7.46-7.33(m，10H)，6.29(s，1H)，6.26(s，1H)，6.07-6.02(m，2H)，5.75(d，J＝15.8Hz，1H)，5.69(d，J＝15.8Hz，1H)，5.44-5.38(m，6H)，5.23(s，4H)，5.03(d，J＝8.8Hz，2H)，4.34-4.13(m，6H)，3.69-3.63(m，2H)，2.70-2.67(m，2H)，2.30-2.16(m，6H)，2.08-1.94(m，8H)，1.73-1.65(m，8H)，1.42(t，J＝6.4Hz，3H)，1.39(t，J＝7.0Hz，3H)；HRMS(ESI-TOF)m/zC30H35NO6Na的計(jì)算值528.2357，測(cè)定值528.2562[M+Na+]。
極性較大的非對(duì)映異構(gòu)體1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝11.61(s，1H)，9.27(s，1H)，7.41-7.33(m，5H)，6.62(d，J＝16.4Hz，1H)，6.47(s，1H)，6.15-6.07(m，1H)，5.50-5.38(m，3H)，5.16(s，2H)，5.04(d，J＝10.5Hz，1H)，4.30(d，J＝15.2Hz，1H)，4.24(d，J＝10.5Hz，1H)，3.84(d，J＝15.2Hz，1H)，3.66(t，J＝11.4Hz，1H)，2.71-2.65(m，1H)，2.28-2.08(m，6H)，1.73-1.64(m，5H)，1.38(t，J＝7.0Hz，3H)；HRMS(ESI-TOF)m/zC30H35NO6Na的計(jì)算值528.2357，測(cè)定值528.2494[M+Na+]。

源自pochonin D(2-85)的大環(huán)2-128向pochonin D(2-85，25mg，71.2μmol)的DMF(5mL)溶液中加入TBSCl(53.6mg，356μmol)和咪唑(23.6mg，356μmol)并將混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)。用柱色譜法純化(硅膠，0-30％EtOAc/環(huán)己烷梯度)獲得化合物2-128(40mg，98％)。
合成化合物2-157的通用步驟向化合物2-128(1.0當(dāng)量)的吡啶/AcOH(5∶1，250μL)的溶液中加入羥胺RONH2(5.0當(dāng)量)并將混合物加熱至40℃。攪拌過夜后，減壓蒸發(fā)溶劑，并用30％的EtOAc/環(huán)己烷混合物在硅膠上過濾，獲得2-157的兩種異構(gòu)體(～90％的收率)。

化合物2-157的選擇實(shí)例順式肟1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝7.42(bd，J＝6.4Hz，2H)，7.36(bdd，J＝7.5，6.9Hz，2H)，7.34-7.32(m，1H)，6.52(d，J＝16.1Hz，1H)，6.38(s，1H)，6.18-6.10(m，1H)，5.36-5.32(m，2H)，5.16(bs，2H)，4.99-4.95(m，1H)，3.79-3.76(m，2H)，2.40-1.99(m，6H)，1.45(d，J＝6.2Hz，3H)，1.03(s，9H)，0.99(s，9H)，0.28(s，3H)，0.26(s，3H)，0.20(s，6H)； 反式肟1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δS＝7.44(bd，J＝6.5Hz，2H)，7.37(bdd，J＝7.6，6.9Hz，2H)，7.33-7.31(m，1H)，6.41(s，1H)，6.04-5.97(m，1H)，5.48(bd，J＝15.0Hz，1H)，5.29-5.27(m，1H)，5.22(bs，2H)，5.00-4.95(m，1H)，3.98-3.89(m，2H)，2.39-2.02(m，6H)，1.37(d，J＝5.9Hz，3H)，1.04(s，9H)，0.99(s，9H)，0.28(s，3H)，0.27(s，3H)，0.23(s，3H)，0.22(s，3H)。
合成化合物2-158的通用步驟向相應(yīng)的化合物2-157(1.0當(dāng)量)的THF溶液中加入TBAF(2.5當(dāng)量，溶于THF的1M溶液)并將混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)。接著減壓蒸發(fā)溶劑，并用30％的EtOAc/環(huán)己烷混合物在硅膠上過濾，獲得收率＞85％的化合物2-158。

化合物2-158的選擇實(shí)例順式肟1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝11.52(s，1H)，7.45-7.34(m，5H)，6.64(s，1H)，6.09-6.02(m，2H)，5.34-5.25(m，4H)，5.18-5.08(m，2H)，4.33(d，J＝17.0Hz，1H)，4.15(d，J＝17.6Hz，1H)，2.65-2.59(m，1H)，2.27-2.14(m，3H)，2.04-2.00(m，1H)，1.88-1.83(m，1H)，1.30(t，J＝6.4Hz，3H)；HRMS(ESI-TOF)m/zC25H26ClNO5Na的計(jì)算值478.1392，測(cè)定值478.1372[M+Na+]。
反式肟1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝11.73(s，1H)，7.32-7.26(m，5H)，6.64(s，1H)，6.50(d，J＝16.4Hz，1H)，6.06-5.98(m，2H)，5.43-5.24(m，3H)，4.91(s，2H)，4.22(s，2H)，2.61-2.55(m，1H)，2.46-2.33(m，2H)，2.20-2.02(m，3H)，0.98(t，J＝6.4Hz，3H)；HRMS(ESI-TOF)m/zC25H26ClNO5Na的計(jì)算值478.1392，測(cè)定值478.1522[M+Na+]。

化合物(±)-2-159將順式-丁烯氧化物(1.75mL，20mmol)的Et2O(10mL)溶液冷卻至-30℃。向該溶液中加入碘化亞銅(11.4g，6mmol)，并隨后在1小時(shí)的時(shí)間段內(nèi)滴加乙烯基溴化鎂(40mL，溶于THF的1M溶液，40mmol)。接著將混合物暖至室溫12小時(shí)以上，反應(yīng)物變黑。用飽和NH4Cl水溶液(20mL)緩慢終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)，攪拌2小時(shí)，用Et2O(20mL)萃取并經(jīng)MgSO4干燥。減壓濃縮獲得化合物(±)-2-159(1.3g，65％)。1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝5.81-5.72(m，1H)，5.15(d，J＝13.2Hz，2H)，3.59(m，1H)，2.23-2.10(m，1H)，1.21(d，J＝6.4Hz，3H)，1.05(d，J＝7.0Hz，3H)。

化合物(±)-2-163以與對(duì)化合物2-112所描述的方法類似的方式，以57％的收率從(±)-2-162制備了化合物(±)-2-163。1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝7.10(s，1H)，6.76-6.71(m，1H)，5.87(d，J＝15.8Hz，1H)，5.32(s，2H)，5.25-5.18(s+m，4H)，4.87-4.80(m，1H)，3.99(d，J＝16.9Hz，1H)，3.80-3.71(m，5H)，2.32-2.26(m，2H)，2.20-2.11(m，3H)，1.36(d，J＝6.4Hz，3H)，1.25(t，J＝7.0Hz，6H)，1.04(d，J＝7.0Hz，3H)；13C NMR(100MHz，CDCl3，25℃)δ＝195.7，166.6，154.6，153.8，147.1，133.3，132.8，120.7，117.7，102.9，93.9，93.6，76.2，64.8，64.6，45.1，41.6，30.7，30.7，18.2，16.9，15.0，15.0。

化合物(±)-2-164以與對(duì)化合物2-85所描述的類似方式，使用PS-TsOH，以40％的收率從(±)-2-163制備化合物(±)-2-164。1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)δ＝11.52(s，1H)，6.78-6.69(m，1H)，6.67(s，1H)，6.05(s，1H)，5.93(d，J＝16.4Hz，1H)，5.47-5.45(m，1H)，5.37-5.33(m，1H)，5.16(dd，J＝15.8，7.0Hz，1H)，4.48(bs，1H)，4.35(d，J＝17.6Hz，1H)，2.45-2.26(m，5H)，1.27(d，J＝6.4Hz，3H)，1.10(d，J＝7.0Hz，3H)；ESIm/zC18H21ClO5的計(jì)算值365.12，測(cè)定值365.22[M+H+]。
本文所提供的描述和實(shí)施例僅是說明性的，且本發(fā)明并不受此限制。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員會(huì)想到這些化合物，步驟和應(yīng)用的許多變化、置換和演化，并且這些變化、置換和演化涵蓋在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.式I的化合物、其互變異構(gòu)體，或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥
其中
R1、R2、R3、R4和R5獨(dú)立地為氫、鹵素、硝基、氰基、烷基、低級(jí)烷基、取代的烷基、烯基、炔基、烷基芳基、芳烷基、芳基、雜烷基、烷基雜芳基、雜環(huán)基、雜芳基、OH、OR、NH2、N(R)2、SR、S(O)R、S(O)2R、-SO2N(R)2、-N(R)SO2R、-N(CO)R、-N(CO)N(R)2、-N(CO)OR、-O(CO)R、-(CO)R、-(CO)OR、-(CO)N(R)2、-O(CO)OR或-O(CO)N(R)2，其中每個(gè)R可以相同或不同；
A1和A2一起為-CH2-CH2-、-CH＝CH-、-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(鹵素)-、-CH(鹵素)-CH(OH)-、1，2-環(huán)丙二基或1，2-環(huán)氧乙烷；
B1和B2一起為-CH2-CH2-或者B1和B2一起表示共價(jià)鍵；
X1是氫、鹵素、OH、OR、NH2、N(R)2、NH-OR、SR、S(O)R、S(O)2R、-NH-O-(CH2)n-CO2-R、-NH-O-(CH2)n-CON(R)2；或者X1與X2或X3一起表示共價(jià)鍵，其中每個(gè)R可以相同或不同；
X2和X3都是氫，或者X2和X3之一是氫且另一個(gè)與X1一起表示共價(jià)鍵；
X4和X5一起為＝O、＝S、＝N-OR、＝N-O-(CH2)nCOOR、＝N-O-(CH2)nCON(R)2、＝N-N(R)2、＝N-N-SOR或＝N-N-SO2R；或者X4和X5之一是氫且另一個(gè)是OH、OR、O(CO)R、O(CO)OR、O(CO)N(R)2、-(CH2)nC(O)OR或-(CH2)nC(O)N(R)2，且n是0、1、2或3；或者X4和X5之一與X6一起表示共價(jià)鍵且X4和X5中的另一個(gè)是OH、OR、O(CO)R、O(CO)OR、-N(R)2或O(CO)N(R)2，其中每個(gè)R可以相同或不同；
X6是氫或X6與X4和X5之一一起表示共價(jià)鍵；且
R是氫、烷基、低級(jí)烷基、?；⒎蓟?、烷芳基、芳基烷基包括芐基、雜烷基、雜芳基、雜環(huán)基、保護(hù)基；或者在同一個(gè)氮上的兩個(gè)R與所述氮一起形成5-8元雜環(huán)或雜芳基環(huán)；且
n是0、1、2或3。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中所述化合物具有式II的結(jié)構(gòu)
其中，R7是＝O、＝S、＝N-OR、＝N-O-(CH2)nCOOR、＝N-O-(CH2)nCON(R)2、＝N-N(R)2、＝N-N-SOR或＝N-N-SO2R；且其中每個(gè)R可以相同或不同。
3.如權(quán)利要求2所述的化合物，其中R1是H、鹵素或雜環(huán)基。
4.如權(quán)利要求2所述的化合物，其中R5是氫、烷基、低級(jí)烷基、芳基、雜芳基或芳基烷基。
5.如權(quán)利要求2所述的化合物，其中A1和A2一起是-CH＝CH-。
6.如權(quán)利要求2所述的化合物，其中A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(鹵素)-或-CH(鹵素)-CH(OH)-。
7.如權(quán)利要求2所述的化合物，其中A1和A2一起是1，2-環(huán)氧乙烷。
8.如權(quán)利要求2所述的化合物，其中
R1是H、Cl或雜環(huán)基；
R2和R4獨(dú)立地為OH或OR；
R5是氫、烷基、芳基或芳烷基；
A1和A2一起是-CH＝CH-或-C(OH)-C(OH)-；
X1是氫、鹵素或NH-OR；且
R7是＝O、＝S、＝N-OR、＝N-O-(CH2)nCOOR、＝N-O-(CH2)nCON(R)2、＝N-N(R)2、＝N-N-SOR、＝N-N-SO2R。
9.如權(quán)利要求2所述的化合物，其中
R1是H、Cl或雜環(huán)基；
R2和R4獨(dú)立地為OH或OR；
R5是氫、烷基、芳基或芳烷基；
A1和A2一起是1，2-環(huán)氧乙烷；
X1是氫、鹵素或NH-OR；且
R7是＝O、＝S、＝N-OR、＝N-O-(CH2)nCOOR、＝N-O-(CH2)nCON(R)2、＝N-N(R)2、＝N-N-SOR、＝N-N-SO2R。
10.如權(quán)利要求2所述的化合物，其中
R1是H、Cl或雜環(huán)基；
R2和R4獨(dú)立地為OH或OR；
R5是氫、烷基、芳基或芳烷基；
A1和A2一起是-CH＝CH-或-C(OH)-C(OH)-；
X1與X2一起表示鍵；且
R7是＝O、＝S、＝N-OR、＝N-O-(CH2)nCOOR、＝N-O-(CH2)nCON(R)2、＝N-N(R)2、＝N-N-SOR、＝N-N-SO2R。
11.如權(quán)利要求2所述的化合物，其中
R1是H、Cl或雜環(huán)基；
R2和R4獨(dú)立地為OH或OR；
R5是氫、烷基、芳基或芳烷基；
A1和A2一起是1，2-環(huán)氧乙烷；
X1與X2一起表示鍵；且
R7是＝O、＝S、＝N-OR、＝N-O-(CH2)nCOOR、＝N-O-(CH2)nCON(R)2、＝N-N(R)2、＝N-N-SOR、＝N-N-SO2R。
12.如權(quán)利要求10所述的化合物，其中
R1是H或Cl；
R5是氫、甲基、丙基、異丙基或苯基；且
R7是＝N-OR、＝N-O-(CH2)nCOOR或＝N-O-(CH2)nCON(R)2。
13.如權(quán)利要求12所述的化合物，其中R1是Cl且R5是氫。
14.如權(quán)利要求12所述的化合物，其中R7是＝N-O-(CH2)nCOOR或＝N-O-(CH2)nCON(R)2；且n是1。
15.如權(quán)利要求12所述的化合物，其中R5是氫且R7是＝N-O-(CH2)nCOOR或＝N-O-(CH2)nCON(R)2。
16.如權(quán)利要求12所述的化合物，其中R5是氫且R7是＝N-OR。
17.如權(quán)利要求8所述的化合物，其中R7是＝O。
18.如權(quán)利要求8所述的化合物，其中R7是＝N-OR、＝N-O-(CH2)nCOOR或＝N-O-(CH2)nCON(R)2。
19.如權(quán)利要求11所述的化合物，其中R7是＝O。
20.如權(quán)利要求11所述的化合物，其中R7是＝N-OR、＝N-O-(CH2)nCOOR或＝N-O-(CH2)nCON(R)2。
21.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中所述化合物具有式III
其中R是氫、烷基、芳基烷基、酰基或保護(hù)基。
22.如權(quán)利要求21所述的化合物，其中R是氫或酰基；且R1是H、鹵素或雜環(huán)基。
23.如權(quán)利要求21所述的化合物，其中R5是氫、烷基、低級(jí)烷基、芳基、雜芳基或芳基烷基。
24.如權(quán)利要求21所述的化合物，其中X1與X2一起表示共價(jià)鍵。
25.如權(quán)利要求21所述的化合物，其中X1是氫、鹵素、NH-OR NH-O-(CH2)nCOOR或NH-O-(CH2)nCON(R)2。
26.如權(quán)利要求21所述的化合物，其中A1和A2一起是-CH＝CH-。
27.如權(quán)利要求21所述的化合物，其中A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(鹵素)-或-CH(鹵素)-CH(OH)-。
28.如權(quán)利要求21所述的化合物，其中A1和A2一起是1，2-環(huán)氧乙烷。
29.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中所述化合物具有式IV
其中R6是氫、OR或N(R)2。
30.如權(quán)利要求29所述的化合物，其中R是氫或酰基。
31.如權(quán)利要求29所述的化合物，其中R1是H、鹵素或雜環(huán)基。
32.如權(quán)利要求29所述的化合物，其中R5是氫、烷基、低級(jí)烷基、芳基、雜芳基或芳基烷基。
33.如權(quán)利要求29所述的化合物，其中A1和A2一起是-CH＝CH-。
34.如權(quán)利要求29所述的化合物，其中A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(鹵素)-或-CH(鹵素)-CH(OH)-。
35.如權(quán)利要求29所述的化合物，其中A1和A2一起是1，2-環(huán)氧乙烷。
36.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中所述化合物具有式V
其中R6是(CH2)nC(O)OR或-(CH2)nC(O)N(R)2；且
n是0、1、2或3。
37.如權(quán)利要求36所述的化合物，其中R6是-CH2C(O)N(Me)OMe。
38.如權(quán)利要求36所述的化合物，其中R1是H、鹵素或雜環(huán)基。
39.如權(quán)利要求36所述的化合物，其中R5是氫、烷基、低級(jí)烷基、芳基、雜芳基或芳基烷基。
40.如權(quán)利要求36所述的化合物，其中A1和A2一起是-CH＝CH-。
41.如權(quán)利要求36所述的化合物，其中A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(鹵素)-或-CH(鹵素)-CH(OH)-。
42.如權(quán)利要求36所述的化合物，其中A1和A2一起是1，2-環(huán)氧乙烷。
43.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中所述化合物選自

44.藥物組合物，其包含有效激酶抑制量的權(quán)利要求1、2、21、29、36或43中任一項(xiàng)的化合物與藥學(xué)可接受的載體。
45.藥物組合物，其包含有效HSP 90抑制量的權(quán)利要求1、2、21、29、36或43中任一項(xiàng)的化合物與藥學(xué)可接受的載體。
46.如權(quán)利要求44或45所述的組合物，其中所述組合物包含平均粒度小于約2微米的顆粒。
47.如權(quán)利要求44或45所述的組合物，其中所述組合物被摻至可生物降解或不能生物降解的聚合物中。
48.如權(quán)利要求44或45所述的組合物，其進(jìn)一步包含添加劑。
49.如權(quán)利要求48所述的組合物，其中所述添加劑選自抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑、液體載體、溶質(zhì)、助懸劑、增稠劑、矯味劑、明膠、甘油、粘合劑、潤(rùn)滑劑、惰性稀釋劑、防腐劑、表面活性劑、分散劑、可生物降解的聚合物或它們的任意組合。
50.如權(quán)利要求44或45所述的組合物，其中所述載體適于口服、腸胃外、吸入、局部或真皮內(nèi)給藥。
51.治療患有疾病的患者的方法，其包括向所述患有所述疾病的患者給藥有效量的權(quán)利要求1的化合物，其中所述疾病是自身免疫疾病、炎性疾病、神經(jīng)疾病或神經(jīng)變性疾病、癌癥、心血管疾病、變態(tài)反應(yīng)、哮喘或激素相關(guān)的疾病。
52.治療患有癌癥的患者的方法，其包括向所述患有所述癌癥的患者給藥有效癌癥治療量的權(quán)利要求1的化合物。
53.如權(quán)利要求52所述的方法，其中所述癌癥是實(shí)體瘤、血源性腫瘤、乳腺癌、卵巢癌、宮頸癌、前列腺癌、睪丸癌、泌尿生殖道癌、食管癌、喉癌、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、胃癌、皮膚癌、角化棘皮瘤、肺癌、表皮樣癌、大細(xì)胞癌、小細(xì)胞癌、肺腺癌、骨癌、結(jié)腸癌、腺瘤、胰腺癌、腺癌、甲狀腺癌、濾泡癌、未分化癌、乳頭狀癌、精原細(xì)胞瘤、黑素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝癌和膽道癌、腎癌、骨髓樣病癥、淋巴樣病癥、霍奇金氏病、毛細(xì)胞、口腔癌、咽癌、唇癌、舌癌、口癌、咽癌、小腸癌、結(jié)腸-直腸癌、大腸癌、直腸癌、腦癌和中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌癥或白血病。
54.治療患有與不期望的新血管形成相關(guān)的疾病的患者的方法，其包括向所述患有所述不期望的新血管形成的患者給藥有效量的權(quán)利要求1的化合物。
55.如權(quán)利要求54所述的方法，其中所述與不期望的新血管形成相關(guān)的疾病包括眼新生血管性疾病、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病、角膜移植物排斥、新生血管性青光眼和晶狀體后纖維增生癥、流行性角膜結(jié)膜炎、維生素A缺乏病、接觸鏡超帶癥、異位性角膜炎、上角膜緣角結(jié)膜炎、翼狀胬肉干燥性角膜炎、干燥綜合征、紅斑痤瘡、小水皰病、梅毒、分枝桿菌感染、脂質(zhì)變性、化學(xué)燒傷、細(xì)菌性潰瘍、真菌性潰瘍、單純皰疹感染、帶狀皰疹感染、原蟲感染、卡波西肉瘤、莫倫潰瘍、Terrien角膜邊緣性變性、邊緣性角質(zhì)層分離、創(chuàng)傷、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性狼瘡、多動(dòng)脈炎、韋格內(nèi)結(jié)節(jié)病、鞏膜炎、多型糜爛性紅斑綜合征、類天皰瘡、放射狀角膜切開術(shù)或角膜移植排斥、鐮狀細(xì)胞貧血、結(jié)節(jié)病、彈性假黃色瘤、佩吉特病、靜脈阻塞、動(dòng)脈阻塞、頸動(dòng)脈阻塞性疾病、慢性葡萄膜炎/玻璃體炎、萊姆病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、伊爾斯病、白塞病、引起視網(wǎng)膜炎或脈絡(luò)膜炎的感染、眼假組織胞漿菌病、貝斯特病、近視、視窩、斯塔加特病、睫狀體扁平部炎、慢性視網(wǎng)膜脫離、高粘滯綜合征、弓形體病或激光后并發(fā)癥。
56.治療患有與炎癥相關(guān)的炎性疾病的患者的方法，其包括向所述患有所述炎性疾病的患者給藥有效量的權(quán)利要求1的化合物。
57.如權(quán)利要求56所述的方法，其中所述炎性疾病是內(nèi)皮細(xì)胞的過度或異常刺激、動(dòng)脈粥樣硬化、血管功能障礙、異常的傷口愈合、炎性和免疫病癥、白塞病、痛風(fēng)或痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、伴隨異常的血管發(fā)生的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、皮膚疾病、銀屑病、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病、晶狀體后纖維增生癥、黃斑變性、角膜移植物排斥、新生血管性青光眼或奧-韋綜合征。
全文摘要
本發(fā)明公開了pochonin二羥基苯甲酸內(nèi)酯的類似物的式I-V的大環(huán)化合物和制備所述化合物的方法。所公開的化合物用作激酶的抑制劑和熱休克蛋白90(HSP 90)的抑制劑。本發(fā)明還公開了包含有效激酶抑制量或有效HSP90抑制量的所述化合物的藥物組合物和治療由激酶和HSP90介導(dǎo)的病癥的方法。
文檔編號(hào)C07D313/00GK101588799SQ200780038141
公開日2009年11月25日 申請(qǐng)日期2007年8月10日 優(yōu)先權(quán)日2006年8月11日
發(fā)明者N·溫辛格爾, S·巴爾呂埃娜, M·卡爾普拉斯 申請(qǐng)人:斯特拉斯堡大學(xué)