專利名稱：：使用結(jié)合wrn的分子的治療方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及用于調(diào)節(jié)信號傳導(dǎo)途徑的組合物和方法。更具體地說，本發(fā)明特別涉及用于調(diào)節(jié)端粒引發(fā)的衰老、細胞程序性凋亡、曬黑和其他DNA損傷應(yīng)答的組合物和方法。相關(guān)申請的交叉引用本申請要求2006年8月29日提交的美國臨時專利申請No.60/823,876的優(yōu)先權(quán)，該申請的內(nèi)容以引用方式并入本文。
背景技術(shù)：
：在發(fā)達國家中，隨著人口的老齡化，人類中癌癥的發(fā)生頻率增加。盡管進行了大量的研究，但是近年來，對于某些類型的癌癥和疾病階段而言，診斷、發(fā)病率和死亡率并沒有得到明顯的改善。在癌癥的進程中，腫瘤細胞變得越來越不受到負調(diào)節(jié)的控制(包括對衰老和細胞程序性凋亡的抗性、正常細胞與其組織特異性環(huán)境間的相互作用是如何被調(diào)節(jié)的重要方面)。在胚胎細胞和大多數(shù)癌細胞中，永生性(immortality)與通過端粒酶而使得端粒的長度得以保持有關(guān)，其中所述的端粒酶為一種酶復(fù)合體，其將TTAGGG重復(fù)序列加入到染色體末端的3'端。端粒(即，TTAGGG的串聯(lián)重復(fù)序列)位于環(huán)結(jié)構(gòu)的末端，其中所述的環(huán)結(jié)構(gòu)具有縮在最近的端粒雙鏈體DNA中且由端粒重復(fù)序列結(jié)合因子(TRF)(特別是TRF2)穩(wěn)定的、大約150-300個堿基的3'單鏈懸端。顯性失活形式的TRF2(TRF2DN)的異常表達破壞了端粒環(huán)結(jié)構(gòu)，暴露出3'懸端，并引起DNA應(yīng)答受到損害。之后，取決于細胞的類型，在一級成纖維細胞、纖維肉瘤細胞和多種其他惡性細胞類型的情況下，細胞發(fā)生衰老，或者在淋巴細胞的情況下細胞發(fā)生細胞程序性凋亡。證據(jù)表明，在衰老過程中發(fā)生了進行性端粒縮短情況(由于不能復(fù)制染色體的3'末端造成)或者一些其他形式的端粒功能障礙。端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶催化亞單元(TERT)(其以酶促方式保持或構(gòu)建端粒的長度)的異常表達可以回避人某些類型細胞的衰老而使其隨后發(fā)生永生，強烈暗示了復(fù)制性衰老的端粒決定性機制。此外，惡性細胞通常表達TERT,和/或包含突變，這種突變使得所述的細胞盡管通常具有比正常衰老細胞更短的端粒，但是其仍能夠回避衰老應(yīng)答并進行不確定的增殖。但是，一些腫瘤細胞會響應(yīng)于多種抗癌劑而發(fā)生衰老，從而表明獲得永生并不一定意味著會喪失這種針對DNA損傷的基礎(chǔ)細胞應(yīng)答。人類細胞的衰老和細胞程序性凋亡很大程度上取決于p53途徑。腫瘤抑制劑p53在細胞應(yīng)激應(yīng)答機制中，通過將多種不同的刺激(例如DNA損傷、轉(zhuǎn)錄或復(fù)制的去調(diào)節(jié)、致癌基因轉(zhuǎn)化以及由一些化療藥物引起的微管去調(diào)節(jié))轉(zhuǎn)變?yōu)榧毎L停滯或細胞程序性凋亡來起到重要的作用。當(dāng)被活化時，p53導(dǎo)致細胞生長停滯或程序性自殺式細胞死亡(細胞程序性凋亡)，這又對基因穩(wěn)定起到重要的調(diào)控機制。特別是，p53通過消除細胞群中的基因受損細胞來調(diào)控基因的穩(wěn)定性，因此，p53的主要功能之一是防止腫瘤形成。完整的腫瘤抑制劑pRb途徑也有助于防止腫瘤發(fā)生。在不包含野生型p53的pRb一腫瘤細胞中，pRb的引入誘導(dǎo)了衰老。雖然宮頸癌細胞通常保留野生型p53和pRb基因，但是HPVE6和E7蛋白質(zhì)會分別干擾p53和pRb途徑。病毒E2蛋白質(zhì)的異常表達抑制了HPVE6和E7基因的轉(zhuǎn)錄，并誘導(dǎo)宮頸癌細胞系的快速且顯著的衰老應(yīng)答，從而再次證明p53和pRb在癌細胞衰老中的重要作用。對于成纖維細胞而言，僅抑制p53或pRb途徑不足以回避復(fù)制性衰老。事實上，由SV40T抗原轉(zhuǎn)染的、或者由腺病毒E1A+E1B或HPVE6+E7的組合轉(zhuǎn)導(dǎo)(它們會抑制p53和pRb途徑)的人成纖維細胞具有延長的壽命期限并避開了復(fù)制性衰老。DNA中雙鏈的斷開對于哺乳動物細胞而言具有極大的細胞毒性。高度保守的Mrell-Rad50-NBS(p95)(MRN)復(fù)合體與真核細胞中雙鏈斷開的修復(fù)有關(guān)。所述的MRN復(fù)合體在形成之后立即附著在雙鏈斷開的位點處。MRN復(fù)合體在細胞周期的S期還會移至端粒處，這與端粒重復(fù)序列結(jié)合因子(TRF)有關(guān)。所述的MRN復(fù)合體由Mrel1、Rad50和NBS(p95)構(gòu)成。在細胞周期的S期中，Mrel1作為Mrel1/p95/Rad50復(fù)合體的一部分，與端粒有關(guān)。Mrel1是一種優(yōu)選針對DNA鏈3'末端的核酸外切酶。據(jù)信，Mrel1的活性取決于與Rad50(其為ATP酶)的相互作用。據(jù)信，Nbsl與MRN復(fù)合體的核內(nèi)定位以及在雙鏈斷開位點處的組裝有關(guān)。已知，在維爾納氏綜合征中突變的蛋白質(zhì)(即，WRN蛋白質(zhì))與MRN復(fù)合體相互作用(Cheng等，2004,Vol.2004)。維爾納氏綜合征是一種常染色體退行性紊亂，其可表征為過早老化、惡性增大以及基因不穩(wěn)定。WRN是核內(nèi)蛋白質(zhì)，其包含解旋酶和3'至5'的核酸外切酶結(jié)構(gòu)域(Oshima,J.，2002，Bioessays22，894-901)。到目前為止，所有的突變都表明，在維爾納氏綜合征中都是WRN平截體，該平截體除去了該蛋白質(zhì)COOH末端的核內(nèi)定位信號(Oshima,J.,2002)。因此，據(jù)信，維爾納氏綜合征中的WRN突變體通過防止所述蛋白質(zhì)到達其核內(nèi)的作用位點而形成功能無義(null)的表型。來自維爾納氏綜合征患者的細胞在基線處以及在DNA損傷后都表現(xiàn)出缺失和易位水平升高，從而表明WRN蛋白質(zhì)參與了DNA的修復(fù)、復(fù)制和重組(Opresko等，2003，Carcinogenesis24，791-802)。與年齡匹配的對照相比，維爾納氏綜合征細胞還會過早衰老(Martin等，1970，LabInvest23,86-92),并且維爾納氏綜合征細胞還證明了加速的端?？s短情況(Schulz等,1996，HumGenet97，750-4)。除了與MRN復(fù)合體相互作用以外，WRN已知還與殘余DNA損傷應(yīng)答和DNA修復(fù)/復(fù)制的其他蛋白質(zhì)相互作用DNA-PK/Ku(Karmakar等，2002,NucleicAcidsRes30，3583-91)、p53(Brosh等，2001:JBiolChem276,35093-102)、以及在過早老化綜合征、Bloom綜合征、BLM中突變的解旋酶(vonKobbe等，2002,JBiolChem277,22035-44)。此外，WRN與端粒重復(fù)序列結(jié)合因子2(TRF2)相互作用，而這種相互作用改變了WRN核酸外切酶活性的特異性，從而有利于端粒DNA的3'至5'的消化(Machwe等，2004，Oncogene23,149-56;Opresko等，2002，JBiolChem277,41110-9)?？傊@些數(shù)據(jù)證明了WRN在DNA代謝和端粒保持中的重要作用。但是仍不了解WRN在這些途徑中的精確的作用。通常，采用諸如化療和放射性療法之類的高毒性療法來治療癌癥，這些高毒性療法會相當(dāng)大地損害所有的增殖細胞而無論這些細胞是正常細胞還是惡性細胞。此類治療的副作用包括嚴(yán)重損害淋巴系統(tǒng)、造血系統(tǒng)和腸上皮、以及脫發(fā)。之前，如PCT/US2005/017553所示，我們公開了篩選可用于誘導(dǎo)生長停滯、細胞程序性凋亡以及增殖性衰老的WRN調(diào)節(jié)劑的方法，所述文獻全文以引用方式并入本文。此外，我們以前還發(fā)現(xiàn)端粒同源寡核苷酸(T-oligo)模擬了端粒環(huán)結(jié)構(gòu)的破壞，由此，當(dāng)提供給處于培養(yǎng)中的細胞或者以局部或系統(tǒng)方式提供給完整動物時，其活化了細胞內(nèi)的固有的癌癥避免機制?；罨瘣盒约毎械倪@些類似于DNA損傷的應(yīng)答使得它們發(fā)生細胞程序性凋亡或者衰老，但是僅僅產(chǎn)生短暫的生長停滯以及正常細胞的"適應(yīng)性分化"。因此，T-oligo似乎提供了新的且非常具有選擇性的抑制和治療多種癌癥的方法，以及通過刺激產(chǎn)生的保護性"分化"應(yīng)答(例如非日光曬黑、增強的DNA修復(fù)能力、以及用于治療銀屑病和濕滲的短期免疫抑制)來解決其他未滿足需要的醫(yī)療和化妝品需要的手段。本發(fā)明涉及治療哺乳動物過度增殖病癥的方法，該方法包括向哺乳動物給藥包含有效量的螺羥吲哚(SPOX)的組合物。所述的SPOX化合物可以為SPOX-l、SPOX-2或者是能夠與WRN結(jié)合或相互作用的SPOX類別中的任何其他成員。本發(fā)明還提供了一種組合物，該組合物包含用于治療哺乳動物過度增殖病癥的有效量的SPOX化合物。優(yōu)選的是，所述的哺乳動物為人。本發(fā)明還提供了新型SPOX化合物。更具體地說，本發(fā)明提供了具有以下通式的化合物或其可藥用的鹽，其中所述通式如下發(fā)明概述其中Rl為可以在鄰位、間位或者優(yōu)選對位的官能團，包括但不限于羥基；低級烷基；低級羥烷基，例如羥曱基或羥乙基；低級烷氧基，例如曱氧基、乙氧基、丙氧基；以及羥基取代的低級烷氧基，例如2-羥基乙氧基；R2為官能團，包括但不限于氫；低級烷基；低級烷基卣化物，例如碘代甲烷；卣素，例如氯、溴或者優(yōu)選碘；低級烯基；并且優(yōu)選為低級炔基，更優(yōu)選為取代的低級炔基，例如包含一個或多個官能團(例如芳基、芳基雜環(huán))的炔基；羥基，氨基，取代的氨基(例如烷基氨基、芳基氨基和甲酰胺基氨基)，酯，甲酰胺基，烷基，環(huán)烷基，烯基和環(huán)烯基；以及R3為官能團，包括但不限于羥基，低級烷基；低級炔基；低級烯基；氨基；取代的氨基，例如烯基氨基、優(yōu)選為烯丙基氨基；雜環(huán)；芳基雜環(huán)；低級烷氧基；以及低級烯氧基，優(yōu)選為烯丙氧基。可以根據(jù)本發(fā)明使用所述的新型SPOX化合物。在另一實施方案中，本發(fā)明提供了包含所述通式的SPOX化合物以及可藥用載體的藥物組合物。在另一實施方案中，本發(fā)明涉及抑制人癌細胞生長的方法，該方法包括向人給藥包含有效量SPOX化合物的組合物。該實施方案的方法可以導(dǎo)致處于治療中的細胞在S期停滯，然后發(fā)生細胞程序性凋亡和/或衰老，該過程不依賴于端粒酶的存在或者其活性，并且所述的方法無需癌細胞中含有p53。可以使用根據(jù)本發(fā)明的SPOX化合物進行治療的示意性癌細胞包括黑素瘤細胞、乳腺癌細胞、淋巴瘤細胞、骨肉瘤細胞、白血病細胞、鱗癌細胞、宮頸癌細胞、卵巢癌細胞、胰腺癌細胞、肺癌細胞和纖維肉瘤細胞。在另一實施方案中，可以將SPOX化合物與優(yōu)先將所述的化合物遞送至所關(guān)注的細胞處的目標(biāo)分子連接。此外，本發(fā)明還提供了用于抑制人癌細胞生長的、包含有效量SPOX化合物的組合物。本發(fā)明還涉及促進人惡性細胞分化的方法，該方法包括向哺乳動物給藥包含有效量SPOX化合物的組合物?？梢詫POX化合物與生長因子結(jié)合，從而在組織工程應(yīng)用中增強干細胞培養(yǎng)物的分化。此外，本發(fā)明還提供用于促進哺乳動物的惡性細胞分化的、包含有效量SPOX化合物的組合物。優(yōu)選的是，所述的哺乳動物為人。本發(fā)明還涉及誘導(dǎo)人癌細胞發(fā)生細胞程序性凋亡的方法，該方法包括向人給藥包含有效量SPOX化合物的組合物。示意性地，由所述方法治療的癌細胞可以為黑素瘤細胞或任何其他癌細胞，例如上文所述的那些。此外，本發(fā)明還提供了用于誘導(dǎo)人癌細胞發(fā)生細胞程序性凋亡的、包含有效量SPOX化合物的組合物。本發(fā)明還涉及誘導(dǎo)人癌細胞發(fā)生衰老的方法，該方法包括向人給藥包含有效量SPOX化合物的組合物。示意性地，采用所述方法治療的癌細胞可以為黑素瘤細胞或任何其他癌細胞，例如上文所述的那些。此外，本發(fā)明還提供了一種用于誘導(dǎo)人癌細胞發(fā)生細衰老的、包含有效量SPOX化合物的組合物。本發(fā)明還涉及治療和/或預(yù)防哺乳動物皮膚病癥的方法，該方法包括向哺乳動物給藥包含有效量SPOX化合物的組合物。所述的皮膚病癥可以包括但不限于海綿層水腫，起皰，角化不良(日曬傷)；黑素瘤；光化性角化??；Bowen疾?。话遵帮L(fēng)；鱗狀細胞癌；或者基底細胞癌。此外，本發(fā)明還提供了用于治療哺乳動物皮膚病癥的、包含有效量SPOX化合物的組合物。本發(fā)明還涉及人類非日光曬黑的方法，該方法包括向人給藥包含有效量SPOX化合物的組合物。此外，本發(fā)明還涉及用于減少光老化(包括曬黑)和減少對皮膚的氧化損傷的、包含SPOX化合物的化妝品組合物。本發(fā)明還涉及鑒定治療劑的方法，該方法包括將候選試劑與WRN蛋白質(zhì)、或者MRN復(fù)合體的一種或多種蛋白質(zhì)接觸，以及測定候選試劑與WRN蛋白質(zhì)、或者MRN復(fù)合體的一種或多種蛋白質(zhì)的結(jié)合情況，由此通過其與WRN、或者MRN復(fù)合體的一種或多種蛋白質(zhì)的結(jié)合能力來鑒定治療劑。本發(fā)明還涉及藥物組合物，其中所述的組合物包含與WRN蛋白質(zhì)、或者MRN復(fù)合體的一種或多種蛋白質(zhì)的結(jié)合的化合物及可藥用載體?？梢愿鶕?jù)之前所述方法中的任何一種方法來使用本發(fā)明的組合物。下文中將進一步詳細描述本發(fā)明的這些或其他實施方案。圖1A-1Z示出了已知與WRN結(jié)合的SPOX化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)。圖2A-2E示出了SPOX畫l、SPOX-2、SPOX-343、SPOX-338和SPOX-337的化學(xué)結(jié)構(gòu)。圖3和4示出了與T-oligo和單獨的稀釋劑相比，通過免疫熒光顯微鏡檢測法在人成纖維細胞中SPOX-l在yH2AX形成方面的作用。圖5示出了與T-oligo相比，SPOX-l和SPOX-2在新生成纖維細胞生長方面的作用。圖6示出了使用單獨的稀釋劑、T-oligo、SPOX-l和SPOX-2治療的、經(jīng)捵化丙啶染色的MM-AN人黑素瘤細胞的FACS分析結(jié)果。圖7示出了SPOX-l和SPOX-2在MM-AN人黑素瘤細胞生長方面的作用。圖8示出了與T-oligo和單獨的稀釋劑相比，SPOX-2在MM-AN人黑素瘤細胞中在絲氨酸1981位處ATM的磷酸化方面的作用。圖9示出了SPOX-l和SPOX-2在MCF-7細胞生長方面的作用。圖10示出了通過蛋白質(zhì)印跡分析得到的SPOX-l和SPOX-2在YH2AX表達方面的作用。圖11示出了通過蛋白質(zhì)印跡分析得到的SPOX-l和SPOX-2在經(jīng)切割和未經(jīng)切割的多(ADP核糖)聚合酶(PARP)表達方面的作用。圖12示出了使用陽性和陰性對照以及SPOX-l治療的、經(jīng)碘化丙啶染色的WRN+和WRN-U20S細胞的FACS分析結(jié)果。圖13示出了SPOX-l和SPOX-2在人皮膚外植體中黑素原生成方面的作用。圖14是圖12所示數(shù)據(jù)的圖形描述。圖15示出了與T-oligo相比，SPOX-l和SPOX-2在H460人肺癌細胞中存活素表達方面的作用。圖16示出了SPOX-l和SPOX-2在H460人肺癌細胞生長方面的作用。圖17示出了SPOX化合物SPOX-337、SPOX-338和SPOX-343在MCF-7細胞生長方面的作用。圖18示出了使用單獨的稀釋劑、T-oligo、SPOX化合物SPOX-337和SPOX-338和SPOX-343治療的、經(jīng)碘化丙。定染色的MM-AN人黑素瘤細胞的FACS分析結(jié)果。發(fā)明詳述雖然本發(fā)明具有多種實施方案，但是對下文列出的實施方案進行描述將會明白，本公開應(yīng)該被理解為是本發(fā)明的示例，并且無意于將本發(fā)明限定于所示的具體實施方案。標(biāo)題僅是為了方便而提供，其不應(yīng)該被解釋為以任何方式限定了本發(fā)明?？梢詫⒃谌魏螛?biāo)題下所述的實施方案與任何其他標(biāo)題下所述的實施方案相結(jié)合。除非明確做出相反說明，否則在本申請所指明的各范圍內(nèi)使用的數(shù)值均被陳述為近似值，如同所陳述范圍內(nèi)的最小值和最大值前均以詞語"大約"來修飾一樣。這樣，在所陳述范圍以上和以下的微小變化值均可用于基本上取得與所述范圍內(nèi)的值所得到的相同的結(jié)果。此外，所公開的范圍將如同包含所述的最小值和最大值之間的每個值的連續(xù)的范圍、以及可由這些值形成的任何范圍。此外，應(yīng)該理解可由本文所示的任何值或數(shù)據(jù)形成的任何范圍、比值和比值范圍代表了本發(fā)明的其他實施方案。這包括了可以形成的許多范圍，這些范圍包括或不包括有限的上限和/或下限。SPOX化合物力來篩選T-oligo的非DNA取代物。采用在(例如)Koehler等，J,AmericanChem.Soc,2003，125,8420-8421和Bradner等,2006，ChemistryandBiology，13,493-504中所述的小分子微陣列測試來篩選與WRN結(jié)合的化合物。簡而言之，根據(jù)Koehler,等和Bradner等中所述的方法，將候選化合物庫印制到載玻片上。使經(jīng)過純化的WRN蛋白質(zhì)暴露于載玻片上的庫中。在經(jīng)過一段合適的溫育時間以后，洗滌載玻片，從而除去任何未結(jié)合的WRN。使用與WRN結(jié)合的抗體來檢測WRN與所述庫中成員的結(jié)合情況。通過它們與WRN的結(jié)合能力來確定候選治療劑。在這些測試中，發(fā)現(xiàn)有26種SPOX化合物特異性且可再現(xiàn)地與WRN結(jié)合。之前并不知道這些化合物會與WRN結(jié)合或者引發(fā)治療應(yīng)答(例如惡性細胞的生長停滯和細胞程序性凋亡)。圖1示出了通過小分子微陣列測試方法確定的多種SPOX化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)。圖2A示出了被稱為"SPOX-l"的化合物?；谧畛鹾Y選的35,000種化合物，選出具有6，000種SPOX化合物的庫，其中所述的35，000種化合物得自許多不同的來源，并且具有若干不同的構(gòu)架(核心結(jié)構(gòu))，另人驚奇地是，在所述的構(gòu)架中確定了35,000種化合物的一個亞類，該亞類的化合物通常都具有與WRN結(jié)合的螺羥吲哚核心。進行比較SPOX-l和某些T-oligo在誘導(dǎo)細胞程序性凋亡、生長停滯和色素表達方面的效力的研究。能夠調(diào)節(jié)WRN活性的T-oligo在2002年4月12日提交的、共同未決的美國專利申請No.10/122,630中有所公開，所述專利以引用方式并入本文。SPOX-l起到了化學(xué)修飾的起點的作用，所述的化學(xué)修飾使得可以對能夠使惡性細胞發(fā)生生長停滯和/或細胞程序性凋亡的若干其他SPOX化合物進行鑒定。圖2B-E示出了這些化合物的實例。圖2B示出了SPOX-2，其為SPOX-l的對映體。SPOX-2作為用于進一步修飾的基礎(chǔ)，所述的修飾特別形成了如圖2C-E所示的SPOX-337、SPOX-338和SPOX-343。SPOX-l和SPOX-2都沒有表現(xiàn)出理想的"可藥性(drugability)"特性，即，與給藥、分布、代謝和排泄有關(guān)的良好的藥物性質(zhì)。例如，SPOX-l的分子量為712,而藥物大多數(shù)分子量為200到500之間。SPOX-l的clog(計算log)P值為6.88,而藥物大多數(shù)表現(xiàn)為2至5之間的clogP值。P為化合物在水中的溶解度相對于其在1-辛醇中的溶解度的比值。因此，clogP為親脂性的量度。通常，水溶性過高(即，低clogP)的化合物將不會進入細胞膜，而親脂性過高(即，高clogP)的化合物將不會離開細胞膜。因此，雖然對于局部應(yīng)用而言，高分子量和親脂性可能是有利的，但是由于SPOX-1和SPOX-2的藥理學(xué)性質(zhì)，使得它們的品質(zhì)劣化。對SPOX-2的修飾進行設(shè)計，從而保留或增強SPOX-l和SPOX-2的生物學(xué)活性，并實現(xiàn)與"可藥性"有關(guān)的理想的性質(zhì)。應(yīng)該理解，clogP值介于2至5之間、以及分子量介于200和500之間為改善候選化合物的"可藥性"的實例?；衔颯POX-337、SPOX-338和SPOX-343具有與SPOX-l和SPOX-2相比降低的分子量和減小的clogP值，并且保留了使惡性細胞的生長發(fā)生停滯的能力。上文所述的方法可用于鑒定根據(jù)本發(fā)明的、與WRN相互作用的其他類別或類型的分子，這些分子可能具有與在T-oligo和SPOX中所見的類似的治療效果，例如抑制腫瘤細胞生長的能力、誘導(dǎo)鐘瘤細胞發(fā)生細胞程序性凋亡的能力、以及誘導(dǎo)黑色原生成的能力。本發(fā)明還涉及根據(jù)治療化合物與WRN蛋白質(zhì)的結(jié)合能力來鑒定該治療化合物的方法，該方法包括使WRN與候選治療化合物接觸，以及測量WRN與所述化合物的結(jié)合情況或未結(jié)合情況。治療劑是通過其與WRN的結(jié)合能力來鑒定的。應(yīng)該注意，與WRN結(jié)合的治療劑還可以在仍然具有與WRN相結(jié)合的能力的同時通過其他的生理學(xué)途徑來發(fā)揮它們的治療效果。已知，MRN復(fù)合體與WRN相互作用?？梢愿鶕?jù)本文所述的諸如小分子微陣列測試之類的方法，通過測量候選治療分子與一種或多種MRN復(fù)合體蛋白質(zhì)(包括MREll、Rad50、NBS(p95))相結(jié)合或相互作用的情況來進行鑒定治療劑的類似篩選方法。本發(fā)明還涉及可以根據(jù)本發(fā)明使用的新型SPOX化合物或其可藥用的鹽，其中所述的化合物具有以下通式其中Rl為可以在鄰位、間位或者優(yōu)選對位的官能團，包括但不限于羥基；低級烷基；低級羥烷基，例如羥甲基或羥乙基；低級烷氧基，例如曱氧基、乙氧基、丙氧基；以及羥基取代的低級烷氧基，例如2-羥基乙氧基；R2為官能團，包括但不限于氫；低級烷基；低級烷基卣化物，例如碘代曱烷；面素，例如氯、溴或者優(yōu)選碘；低級烯基；并且優(yōu)選為低級炔基，更優(yōu)選為取代的低級炔基，例如包含一個或多個官能團(例如芳基、芳基雜環(huán))的炔基；羥基，氨基，取代的氨基(例如烷基氨基、芳基氨基和甲酰胺基氨基)，酯，曱酰胺基，烷基，環(huán)烷基，烯基和環(huán)烯基；以及R3為官能團，包括但不限于羥基，低級烷基；低級炔基；低級烯基;氨基；取代的氨基，例如烯基氨基、優(yōu)選為烯丙基氨基；雜環(huán)；芳基雜環(huán)；低級烷氧基；以及低級烯氧基，優(yōu)選為烯丙氧基。術(shù)語"低級烷基"是指具有直鏈、環(huán)狀或支鏈部分的具有1至6個碳的飽和一價脂肪族基團。可用于本發(fā)明的烷基的實例包括曱基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、戊基、己基等。術(shù)語"低級烯基，，是指具有至少一個碳-碳雙鍵并包括所述烯基部分的E和Z異構(gòu)體的、具有1至6個碳的不飽和脂肪族部分。烯基的實例包括乙烯基、丙烯基、丁烯基等。術(shù)語"低級炔基，，是指具有至少一個碳-碳三鍵并包含直鏈和支鏈炔基的、具有1至6個碳的不飽和脂肪族部分。炔基的實例包括乙炔基、丙炔基、丁炔基等。術(shù)語"低級烷氧基，，是指這樣的-OR基團，其中R為具有1至6個碳的烷基并且其中R可以為取代的低級烷基(例如羥基乙氧基)。術(shù)語"低級烯氧基，，是指這樣的-OR基團，其中R為具有1至6個碳的烯基并且其中R可以為取代的低級烯基。術(shù)語"卣素"在本文中用于指氟、溴、氯和碘原子。術(shù)語"羥基"在本文中用于指基團-OH。術(shù)語"芳基"在本文中用于指具有一個或兩個芳香環(huán)的單環(huán)或雙環(huán)碳環(huán)體系，其包括但不限于苯基、萘基、四氫萘基、2,3-二氫化茚基、茚基等。芳基可以被一個、兩個或三個取代基取代，其中所述的取代基獨立地選自低級烷基、面代烷基、烷氧基(優(yōu)選為曱氧基)、鹵素、羥基、硝基、氨基等。術(shù)語"雜環(huán)"在本文中用于指包含至少一個氧、硫或者優(yōu)選氮原子的任何3-、4-、5-、6-、7-、8-、9-或10-元非芳香飽和或不飽和環(huán)，其中所述的至少一個氧、硫或者優(yōu)選氮原子與并非為雜環(huán)一部分的原子相結(jié)合。所述的雜環(huán)還可以被諸如3，4-亞曱基二氧苯基-2-曱基、節(jié)基、苯氧基、曱氧基之類的其他基團取代。作為雜環(huán)的實例，可以提及八氬吖辛基(octahydroazocinyl)、哌溱基(包括4-(3，4-亞曱基二氧苯基-2-甲基)哌嗪基等)。術(shù)語"芳基雜環(huán)"在本文中用于指包括之前所定義的芳基環(huán)的雙環(huán)或三環(huán)，其中所述的芳基環(huán)通過芳基的兩個相鄰的碳側(cè)接在之前所定義的雜環(huán)上。所述的芳基雜環(huán)還可以被諸如3,4-亞曱基二氧苯基-2-甲基、芐基、苯氧基、甲氧基之類的其他基團取代。作為芳基雜環(huán)的實例，可以提及異喹啉基(包括6,7-二甲氧基異喹啉基)等。在所述的通式范圍內(nèi)，某些實施方案是優(yōu)選的，即以下這些，其中Rl在鄰位、間位或?qū)ξ?，并且?OH或者-0-CH2-CH2-OH;OHNff^NH;:二〈C。OMe;—^R2選自'；—；'c。owe;Meno、fy^-^1,、,;""Ph;H;和I;以及R3選自-OH，-NH2，-0-CH2-CH=CH2，-NH-CH2-CH=CH2,在所述的通式范圍內(nèi)，特別優(yōu)選的為其中Rl在對位、并且為-OH或者-0-CH2-CH2-OH的那些實施方案；其中R2為-H或-I的那些實施方案；以及其中R3為-0-CH2-CH:CH2的那些實施方案。更特別優(yōu)選的是這樣的化合物，其中Rl在對位并且為-0-CH2-CH2-OH;R2為-H;以及R3為-0-CHrCHK:H2。更特別優(yōu)選的是這樣的化合物，其中Rl在對位并且為-OH;R2為-H;以及R3為-0-CH2-CHK:H2。更特別優(yōu)選的是這樣的化合物，其中Rl在對位并且為-0-CH2-CH2-OH;R2為-I;以及R3為-0-CH2-CH-CH2。最特別優(yōu)選的是這樣的化合物，其中Rl在對位并且為-OH;R2為-I;以及R3為Rl為-0-CH2-CH:CH2。應(yīng)該理解，本發(fā)明包括所述通式化合物的所有不同的異構(gòu)體形式、以及它們以任何比例形成的混合物。因此，所述通式化合物的純的對映體、外消旋混合物以及兩種對映體的不等混合物都被包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)，并且可以根據(jù)本發(fā)明使用。還應(yīng)該理解，所有可行的非對映體形式也被包含在本發(fā)明的范圍之內(nèi)?？梢愿鶕?jù)本發(fā)明使用的其他SPOX化合物包括在U.S.6,774,132中公開的那些，此外，該專利文獻以引用方式并入本文?？梢圆捎帽绢I(lǐng)域已知的合成化學(xué)技術(shù)(例如在Lo等，J.Am.Chem.Soc,2004,126,16077-16086中公開的那些，該文獻以引用方式并入本文)來合成可以根據(jù)本發(fā)明使用的SPOX化合物。用于合成羥吲哚的多種可用的方法由G.M.Karp在Org.Prep,Proced.Int.1993，25,481-513中進行了綜述，該文獻以引用方式并入本文。應(yīng)該理解，在反應(yīng)條件下，某些官能團可能會干擾其他反應(yīng)物或試劑，因此可能需要臨時性的保護。保護基團的使用在"ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis",第2版，T.W.Greene&P.G.M.Wutz,Wiley畫Interscience(1991)中有所描述。在一個實施方案中，本發(fā)明的組合物包含一種或多種SPOX化合物或其可藥用的鹽。術(shù)語"非DNASPOX化合物"或者"SPOX化合物"在本文中是指具有能夠與WRN結(jié)合的螺羥吲哚的任何非DNA化合物。在一個實施方案中，所述的SPOX化合物為WRN的激動劑或部分激動劑。取決于處理條件，所得的SPOX化合物可以為中性或鹽形式。鹽形式包括水合物和其他溶劑化物，還包括結(jié)晶多晶型物。這些終產(chǎn)物的游離堿和鹽都被包含在本發(fā)明的范圍內(nèi)?？梢允褂弥T如堿之類的堿性試劑或者通過離子交換來以已知的方式將SPOX化合物的酸加成鹽以本身已知的方式轉(zhuǎn)變?yōu)橛坞x堿。所得的游離堿還可以與有機或無機酸形成鹽。在酸加成鹽的制備過程中，優(yōu)選使用能夠形成合適的可藥用的鹽的一類酸。此類酸的實例為鹽酸、硫酸、磷酸、硝酸、脂肪酸、脂環(huán)族羧酸或磺酸，例如曱酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、葡萄糖醛酸、富馬酸、馬來酸、羥基馬來酸、丙酮酸、天門冬氨酸、谷氨酸、對羥基苯甲酸、樸酸、乙磺酸、羥基乙磺酸、苯基乙酸、扁桃酸、alogenbensenesulfonic酸、曱苯磺酸、半乳糖二酸、半乳糖醛酸或萘磺酸。所有晶形的多晶型物都被包含在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。預(yù)期其中R3為-OH的通式所示的SPOX化合物相對于其相應(yīng)的酯(例如烯丙基酯)而言具有改善的穩(wěn)定性和水溶性。本發(fā)明提供了這些SPOX化合物的可藥用的^5威加成鹽，并且這些加成鹽可以通過將游離酸形式與足量的所需堿接觸、從而以傳統(tǒng)方式形成鹽的方法來制備。游離酸形式可以通過將所述鹽形式與酸接觸、并以傳統(tǒng)方式分離游離酸的方法來再生。使用金屬或胺(例如堿和堿土金屬、或者有機胺)來形成可藥用的堿加成鹽?？捎米麝栯x子的金屬的實例為鈉、鉀、鈣、鎂等。合適的胺的實例為氨基酸(例如賴氨酸)、膽堿、二乙醇胺、乙二胺、N-甲基葡糖胺等。SPOX化合物可以以任何合適的量存在于本發(fā)明的組合物中，所述的量例如為約0.1mg至約1000mg,約0.5mg至約800mg，約1mg至約750mg,或者約5mg至約500mg。在另一實施方案中，SPOX化合物以占本發(fā)明組合物重量的約1%至約75%、約5%至約60%、或者約10%至約50%的量存在于該組合物中。劑型可以將本發(fā)明的組合物配制形成多種劑型，例如固體、液體、半固體或其他劑型。在一個實施方案中，所述的組合物為分散的劑量單位或用量單位形式。術(shù)語"劑量單位"和/或"用量單位"在本文中是指這樣的藥物組合物的部分，該部分包含適用于單次給藥、從而提供治療效果的一定量的治療劑。每天可以一次至少數(shù)幾次(即，l至約6次)給藥這種用量單位，或者根據(jù)需要多次給藥這種用量單位，從而形成治療應(yīng)答?？梢赃x擇具體劑型來提供任何所需的給藥頻率，從而得到指定的每日劑量。通常，一個劑量單位或者少數(shù)幾次(即，至多約6次)的劑量單位會提供產(chǎn)生所需應(yīng)答或效果的足量的活性藥物?？梢砸赃m于口服、腸胃外、透皮、直腸、肌肉或局部給藥的一個或多個劑量單位的形式制備本發(fā)明的組合物。腸胃外給藥包括但不限于:l爭脈內(nèi)、動脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下、月幾肉內(nèi)、推管內(nèi)和關(guān)節(jié)內(nèi)。術(shù)語"口服給藥"或"經(jīng)口傳遞"在本文中包括將治療劑或其組合物傳遞至受試對象的任何傳遞形式，其中將所述的試劑或組合物放置在受試對象的口中，并且與該試劑或組合物是否^皮吞咽無關(guān)。因此，"口服給藥，，包括口腔和舌下給藥、以及食道(例如吸入)給藥。在另一實施方案中，本發(fā)明的組合物被配制成直腸栓劑，其可以包含栓劑基礎(chǔ)物，包括但不限于可可油或甘油酯。本發(fā)明的組合物還可以被配制用于吸入給藥，其可以為這樣的形式，包括但不限于溶液、懸浮液、可以以干態(tài)粉末給藥的乳劑、或者使用推進劑(例如二氯二氟曱烷或三氯氟曱烷)的氣溶膠形式。本發(fā)明的組合物還可以被配制用于透皮傳遞，例如乳劑、軟膏、洗劑、糊劑、凝膠、醫(yī)用藥膏、貼劑或薄膜。這種組合物可以包含任何合適的賦形劑，例如滲透增強劑等。本發(fā)明的組合物還可以被配制用于腸胃外給藥，包括但不限于注射或連續(xù)輸注。用于注射的配制物(formulation)可以為處于油性或水性媒介物(vehicle)中的懸浮液、溶液或乳液形式。此類組合物還可以以粉末形式提供，并使用合適的媒介物(包括但不限于無菌無熱原的水、WFI等)重新構(gòu)成。本發(fā)明的組合物還可以被配制形成緩釋微球(depot)制劑(preparation),其可以通過灌輸或通過肌肉注射方式給藥?？梢允褂煤线m的聚合材料或疏水性材料(例如在可接受的油中形成乳液)、離子交換樹脂、或者微溶衍生物(例如微溶的鹽)配制此類組合物。本發(fā)明的組合物還可以被配制形成脂質(zhì)體制劑。所述的脂質(zhì)體制劑可以包含這樣的脂質(zhì)體，該脂質(zhì)體滲透過所關(guān)注的細胞或角質(zhì)層、并與細胞膜融合，從而將該脂質(zhì)體的內(nèi)容物傳遞至細胞中。例如，可以使用諸如在Yarosh的美國專利No.5,077,211、Redziniak等的美國專利No.4,621,023或Redziniak等的美國專利No.4,508,703中描述的那些脂質(zhì)體。在欲使本發(fā)明的組合物耙向皮膚條件的情況下，可以在將哺乳動物的皮膚暴露于產(chǎn)生氧化損傷的UV或試劑之前、這一過程中或之后給藥此類組合物。其他合適的配制物可以使用嚢泡(niosome)。嚢泡為與脂質(zhì)體類似的脂質(zhì)小泡，其膜主要由非離子脂質(zhì)構(gòu)成，對于輸送化合物穿過角質(zhì)層而言，某些形式的嚢泡是有效的。固體劑型本發(fā)明的組合物可以為固體用量單位的形式，例如片劑(例如懸浮片、咬合(bite)懸浮片、速釋懸浮片(rapiddispersiontablet)、咀嚼片、泡騰片、雙層藥片等)、嚢片、膠嚢(例如軟質(zhì)或硬質(zhì)凝膠膠嚢)、粉末(例如包裝粉末、可分散粉末或泡騰粉末)、錠劑、散劑、嚢包(cachet)、藥片、丸劑、顆粒劑、微粒劑、經(jīng)囊封的微粒劑、粉末氣霧劑配制物或較好地適用于給藥的任何其他固體劑型?？梢愿鶕?jù)許多相關(guān)的、公知的藥劑學(xué)技術(shù)來制備片劑。在一個實施方案中，可以通過使用了以下方法中的一種方法或多種方法的組合的工藝來制備片劑或其他固體劑型，其中所述的方法包括但不限于(1)干燥混合；(2)直接壓制；(3)研磨；(4)干法或非水性方法制粒；(5)濕法制粒；或者(6)熔融。片劑制備的濕法制粒工藝中的各個步驟通常包括對各組分進行研磨和篩分，干粉混合，潤濕結(jié)塊，質(zhì)粒以及最終的磨粉。干法制粒包括在重型回轉(zhuǎn)壓片機上將粉末混合物壓制成粗制藥片或"小塊"(slug)。然后，通常通過穿過震動式制粒機的通道，通過磨粉操作使所述的小塊破碎成粒狀顆粒。所述的各個步驟包括混合粉末、壓制(制塊)和磨粉(減小小塊或制粒)。通常，在任何所述的步驟中都不涉及潤濕粘結(jié)劑或水分。在另一實施方案中，通過將SPOX化合物與一種或多種藥物賦形劑混合、從而形成基本均勻的預(yù)配制共混物來制備固體劑型。然后，可以將所述的預(yù)配制共混物再分以及可任選地進一步加工(例如壓制、嚢封、包裝、分散等)成任何所需的劑型。可以通過將本發(fā)明的粉末或顆粒組合物壓實來制備經(jīng)壓制的片劑。術(shù)語"經(jīng)壓制的片劑"通常是指適用于經(jīng)口攝取的不帶包衣的白色片劑，其是通過單一的壓制過程或者通過預(yù)壓實輕敲、然后通過最終的壓制而制備得到的。本發(fā)明的片劑可以是經(jīng)包衣的或者采用其他方式配混的，從而提供了這樣的劑型，該劑型具有經(jīng)改善的處理或儲存特性的優(yōu)點。在一個實施方案中，對任何所述的包衣進行選擇，使得在對受試對象進行給藥時不會實質(zhì)性地延遲本發(fā)明組合物的治療效果的起效。如本文所述，術(shù)語"懸浮片劑"是指在放置于水中之后會快速分解的經(jīng)壓制的片劑。液體或半固體劑型用于本發(fā)明組合物的合適的液體劑型包括溶液、水性或油性懸浮液、酏劑、糖漿、乳劑、液體氣溶膠配制物、凝膠、霜劑、軟膏等。此類組合物還可以被配制成干態(tài)產(chǎn)物，從而在4吏用前使用水或其他合適的媒介物構(gòu)成。在一個實施方案中，當(dāng)將半固體組合物儲存于被保持在室溫、冷藏溫度(例如約5-10。C)或冰凍溫度下的密封容器中達到約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12個月時，該組合物中的液體表現(xiàn)為占本文所述的原始SPOX化合物的至少約90%、至少約92.5%、至少約95%或者至少約97.5%。藥物賦形劑如果需要，本發(fā)明的組合物可以包含一種或多種可藥用的賦形劑。術(shù)語"賦形劑"在本文中是指以下所述的任何物質(zhì)，但并非為治療劑本身，所述的物質(zhì)被用作載體或媒介物從而用于將治療劑傳遞給受試對象，或者該物質(zhì)纟皮加入到藥物組合物中從而改善該組合物的處理或儲存性質(zhì)，或者允許或有利于形成單位劑量的組合物。舉例而非進行限制，賦形劑包括稀釋劑、分解劑、粘結(jié)劑、粘合劑、潤濕劑、潤滑劑、滑動劑、表面改性劑或表面活性劑、芳香劑、懸浮劑、乳化劑、非水性媒介物、防腐劑、抗氧化劑、粘合劑、調(diào)節(jié)pH和同滲質(zhì)量摩爾濃度的試劑(例如緩沖劑)、防腐劑、增稠劑、甜味劑、調(diào)味劑、矯味劑、著色劑或染料、滲透促進劑、以及被加入以便改善組合物外觀的物質(zhì)。本發(fā)明組合物中可任選使用的賦形劑可以為固體、半固體、液體或它們的組合。包含賦形劑的本發(fā)明的組合物可以通過任何已知的藥劑學(xué)技術(shù)(包括將賦形劑與藥物或治療劑混合)來制備。本發(fā)明的組合物任選地包含一種或多種可藥用的稀釋劑作為賦形劑。合適的稀釋劑示意性地包括(單一一種或者多種稀釋劑的組合)乳糖，包括無水乳糖和乳糖一水合物；淀粉，包括可直接壓制的淀粉和水解淀粉(例如CelutabTM和EmdexTM);甘露糖醇；山梨醇；木糖醇；右旋糖(例如CereloseTM2000)和右旋糖一水合物；磷酸氫鈣二水合物；蔗糖基稀釋劑；糖粉；單價堿式硫酸鈣一水合物；硫酸鈣二水合物；粒狀乳酸鉤三水合物；右旋糖苷；肌糖；經(jīng)水解的谷物固體；直鏈淀粉；纖維素，包括微晶纖維素、食品級來源的cx-和無定形纖維素(例如RexcelTM)以及粉末狀纖維素；碳酸4丐；甘氨酸；膨潤土；聚乙烯吡咯烷酮等。如果需要，此類稀釋劑總體占組合物總重量的約5%至約99%，約10%至約85%,或者約20%至約80%。所選的任何稀釋劑或多種稀釋劑優(yōu)選地都表現(xiàn)出合適的流動性，并且在需要為片劑的情況下，所述的稀釋劑優(yōu)選地都表現(xiàn)出合適的可壓縮性。可以使用超粒狀微晶纖維素(即，在干燥步驟后加入到潤濕粒狀組合物中的微晶纖維素)來改善硬度(片劑)和/或分解時間。本發(fā)明的組合物任選地包含一種或多種特別用于片劑、膠嚢或其23他固體配制物的可藥用的分解劑作為賦形劑。合適的分解劑包括(單——種或者多種分解劑的組合)淀粉，包括羥基乙酸淀粉鈉(例如PenWest的Explotab)和預(yù)糊化玉米淀粉(例如National1551、National1550和ColocomTM1500);粘土(例如VeegumTMHV);纖維素，例如純化的纖維素、微晶纖維素、甲基纖維素、羧曱基纖維素和羧曱基纖維素鈉、交聯(lián)羥曱基纖維素鈉(例如FMC的Ac-Di-SolTM);藻酸鹽；交聯(lián)聚維酮；以及樹膠，例如瓊脂、瓜爾膠、黃原膠、角豆膠、刺梧桐樹膠、果膠和黃蓍膠?？梢栽谒鼋M合物制備過程中的任何合適的步驟中，特別是在制粒步驟之前，或者在壓制之前的潤滑步驟中，加入分解劑。如果這種分解劑存在的話，則其總計占組合物總重量的約0.2%至約30%,約0.2%至約10%，或者約0.2%至約5%。本發(fā)明的組合物任選地包含一種或多種特別用于片劑配制物的可藥用的粘結(jié)劑或粘合劑作為賦形劑。這種粘結(jié)劑和粘合劑優(yōu)選地賦予待制片粉末以足夠的內(nèi)聚性(cohesion),從而可以進行正常的加工操作(例如定尺寸、潤滑、壓制和包裝)，而且可以使片劑仍然能夠分解并使組合物在攝取時能夠被吸收。合適的粘結(jié)劑和粘合劑包括(單一一種或者多種粘結(jié)劑和粘合劑的組合)阿拉伯樹膠；黃芪膠；蔗糖；凝膠；葡萄糖；淀粉，例如但不限于預(yù)糊化淀粉(例如National1511和National1500);纖維素，例如但不限于曱基纖維素和羧曱基纖維素鈉(例如Tylose);藻酸及藻酸鹽；硅酸鋁鎂；PEG;瓜爾膠；多糖酸；膨潤土；聚維酮，例如聚維酮K-15、K-30和K-29/32;聚曱基丙烯酸酯；HPMC;羥丙基纖維素(例如KlucelTM);以及乙基纖維素(例如EthocelTM)。如果這種粘結(jié)劑和/或粘合劑存在的話，則其總計占組合物總重量的約0.5%至約25%，約0.75%至約15%，或者約1%至約10%。本發(fā)明的組合物任選地包含一種或多種可藥用的潤濕劑作為賦形性實;j包括季銨化l物，例如苯/b氯銨、千索氯銨和十六烷基氯化吡啶；二辛基磺基琥珀酸鈉；聚氧乙烯烷基苯基酯，例如壬苯醇醚-9、壬苯醇醚-10和辛苯醇醚-9;泊洛沙姆(聚氧乙烯和聚氧丙烯的嵌段共聚物)；聚氧乙烯脂肪酸甘油酯和油，例如聚氧乙烯(8)辛酸/癸酸單甘油酯和二甘油酯(例如Gattefoss6的Labrasol);聚氧乙烯(35)茺麻油和聚氧乙烯(40)氫化蓖麻油；聚氧乙烯烷基醚，例如聚氧乙烯(20)十六十八烷基醚；聚氧乙烯脂肪酸酯，例如聚氧乙烯(40)硬脂酸酯；聚氧乙烯脫水山梨糖醇酯，例如聚山梨醇酯20和聚山梨醇酯80(例如ICI的Tween80);丙二醇脂肪酸酯，例如丙二醇月桂酸酯(例如Gattefoss^的Lauroglycol);十二烷基碌u酸鈉；脂肪酸及其鹽，例如油酸、油酸鈉和油酸三乙醇胺；甘油基脂肪酸酯，例如甘油基單硬脂酸酯；脫水山梨糖醇酯，例如脫水山梨糖醇單月桂酯、脫水山梨糖醇單油酸酯、脫水山梨糖醇單棕櫚酸酯和脫水山梨糖醇單硬脂酸酯；四丁酚醛；以及它們的混合物。如果這種潤濕劑存在的話，則其總計占組合物總重量的約0，25%至約15%，約0.4%至約10%，或者約0.5%至約5%。本發(fā)明的組合物任選地包含一種或多種可藥用的潤滑劑(包括抗粘附劑和/或滑動劑)作為賦形劑。合適的潤滑劑包括(單——種或者多種潤滑劑的組合)甘油基behapate(例如CompritolTM888);硬脂酸及其鹽，包括鎂(硬脂酸鎂)、硬脂酸鉤和硬脂酸鈉；氬化植物油(例如Sterotex);硅膠；滑石；蠟；硼酸；苯曱酸酸鈉；乙酸鈉；延胡索酸鈉；氯化鈉；DL-亮氨酸；PEG(例如Carbowax4000和Carbowax6000);油酸鈉；十二烷基碌^酸鈉；和十二烷基碌u酸鎂。如果這種潤滑劑存在的話，則其總計占組合物總重量的約0.1%至約10%，約0.2%至約8%，或者約0.25%至約5%。合適的抗粘附劑包括滑石、玉米淀粉、DL-亮氨酸、十二烷基硫酸鈉和金屬硬脂酸鹽?；癁橛糜?例如)減小配制物對設(shè)備表面的粘著、而且還減少共混物中的靜電的抗粘附劑或滑動劑。如果一種或多種抗粘附劑存在的話，則其總計占組合物總重量的約0.1%至約10%，約0.25%至約5%,或者約0.5%至約2%?；瑒觿┛捎糜诖龠M固體配制物的粉末流動性。合適的滑動劑包括膠態(tài)二氧化硅、淀粉、滑石、正磷酸鈣、粉末狀纖維素和三硅酸鎂。膠態(tài)二氧化硅是特別優(yōu)選的。本發(fā)明的組合物可以包含一種或多種抗泡沫劑。二甲硅油(simethicone)是一種示意性的抗泡沫劑。如果這種抗泡沫劑存在的話，則其總計占組合物總重量的約0.001%至約5%,約0.001%至約2%,或者約0.001%至約1%。用于本發(fā)明的示意性抗氧化劑包括但不限于丁基化羥基曱苯、丁基化羥基苯甲醚、偏亞硫酸氫鉀等。如果一種或多種抗氧化劑存在的話，則其在本發(fā)明的組合物中存在的量通常為約0.01重量％至約2.5重量％,例如約0.01重量％、約0.05重量％、約0.1重量％、約0.5重量％、約1重量％、約1.5重量％、約1.75重量％、約2重量％、約2.25重量％、或約2.5重量％。在多種實施方案中，本發(fā)明的組合物可以包含防腐劑。合適的防腐劑包括但不限于苯扎氯銨；甲基、乙基、丙基或丁基對羥基苯甲酸酯；爺基醇；苯基乙基醇；節(jié)索氯銨；曱基或丙基對羥基苯曱酸酯；山梨酸；或它們的組合。通常，可任選的防腐劑所存在的量為約0.01重量％至約0.5重量％，或者約0.01重量％至約2.5重量％。在一個實施方案中，本發(fā)明的組合物任選地包含緩沖劑。緩沖劑包括減小pH變化的試劑。在本發(fā)明多種實施方案中使用的示意性類別的緩沖劑包括IA族金屬，例如包括IA族金屬的碳酸氫鹽、IA族金屬的碳酸鹽；堿金屬或堿土金屬緩沖劑；鋁緩沖劑；鈣緩沖劑；鈉緩沖劑或鎂緩沖劑。合適的緩沖劑包括任何之前所述的碳酸鹽、磷酸鹽、碳酸氫鹽、檸檬酸鹽、硼酸鹽、乙酸鹽、鄰苯二曱酸鹽、酒石酸鹽、琥珀酸鹽，例如磷酸鈉或磷酸鉀、檸檬酸鈉或檸檬酸鉀、硼酸鈉或硼酸鉀、乙酸鈉或乙酸鉀、石友酸氫鈉或石友酸氬鉀、以及石友酸鈉或碳酸鉀。合適的緩沖劑的非限制性實例包括氫氧化鋁、氫氧化鎂、甘氨酸鋁、乙酸鉤、碳酸氬4丐、硼酸4丐、碳酸鈣、檸檬酸鈣、葡萄糖酸鈣、甘油磷酸鈣、氬氧化鉤、乳酸鈣、鄰苯二曱酸鈣、磷酸鈣、琥珀酸鈣、酒石酸鉤、磷酸氫鈉、磷酸氫二鉀、磷酸二鉀、磷酸氫二鈉、琥珀酸二鈉、干態(tài)氫氧化鋁凝膠、醋酸鎂、鋁酸鎂、硼酸鎂、碳酸氬鎂、碳酸鎂、檸檬酸鎂、葡萄糖酸鎂、氬氧化鎂、乳酸鎂、硅酸鋁酸鎂、氧化鎂、鄰苯二曱酸鎂、磷酸鎂、硅酸鎂、琥珀酸鎂、酒石酸鎂、乙酸鉀、碳酸鉀、碳酸氫鉀、硼酸鉀、檸檬酸鉀、偏磷酸鉀、鄰苯二曱酸鉀、磷酸鉀、多磷酸鉀、焦磷酸鉀、琥珀酸鉀、酒石酸鉀、醋酸鈉、碳酸氫鈉、硼酸鈉、碳酸鈉、檸檬酸鈉、葡萄糖酸鈉、磷酸氫鈉、氫氧化鈉、乳酸鈉、鄰苯二甲酸鈉、磷酸鈉、多磷酸鈉、焦磷酸鈉、倍26半碳酸鈉、琥珀酸鈉、酒石酸鈉、三聚磷酸鈉、合成水滑石、焦磷酸四鉀、焦磷酸四鈉、磷酸三鉀、磷酸三鈉、以及氨丁三醇(部分纟艮據(jù)在TheMerckIndex,Merck&Co.Rahway,N丄(2001)中才是供的列表)。此外，任何兩種或更多種上文提及的緩沖劑的組合或混合物都可用于本文所述的藥物組合物中。如果需要，則一種或多種緩沖劑在本發(fā)明組合物中存在的量為約0.01重量％至約5重量％,或者為約0.01重量%至約3重量％。在多種實施方案中，本發(fā)明的組合物可以包含一種或多種增大粘性的試劑。增大粘性的示意性試劑包括但不限于曱基纖維素、羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素、角叉菜膠、卡伯波樹脂(carbopol)、和/或它們的組合。通常，如果需要，則一種或多種粘性增大試劑在本發(fā)明組合物中存在的量為約0.1重量％至約10重量％,或者為約0.1重量％至約5重量％。在多種實施方案中，本發(fā)明的組合物包含"影響感官的(organoleptic)試劑"，從而改善所述組合物的感官性質(zhì)。術(shù)語"影響感官的試劑"在本文中是指可以改善本發(fā)明組合物的風(fēng)味或氣味、或者幫助掩蓋所述組合物的令人厭惡的風(fēng)味或氣味。此類試劑包括甜味劑、調(diào)味劑和/或味道遮掩劑。合適的甜味劑和/或調(diào)味劑包括使藥物組合物變甜或向藥物組合物提供香味的任何試劑。通常，在本發(fā)明組合物中存在可任選的影響感官的試劑的量為約0.1mg/ml至約10mg/ml，約0.5mg/ml至5mg/ml或約1mg/ml。示意性的甜味劑或調(diào)味劑包括但不限于阿拉伯樹膠糖漿、茴香腦、茴香油、芳香酏劑、苯曱醛、苯曱醛酏劑、環(huán)式糊精、藏茴香(caraway)、藏茴香油、豆蔻油、豆蔻種子、豆蔻醑、豆蔻酊、櫻桃汁、櫻桃糖漿、肉桂、肉桂油、肉桂水、檸檬酸、檸檬酸糖漿、丁香油、可可、可可糖漿、芫荽油、右旋糖、圣草、圣草流浸膏、圣草糖漿、芳香物質(zhì)、乙酸乙酯、乙基香蘭素、茴香油、姜、姜流浸膏、姜樹脂油、右旋糖、葡萄糖、蔗糖(sugar)、麥芽糊精、甘油、甘草、甘草酏劑、甘草提取物、甘草提取物純凈物、甘草流體提取物、甘草糖漿、蜂蜜、低醇酏劑(iso畫alcoholicelixir)、薰衣草油、檸檬油、梓檬酊、甘露醇、水楊酸曱基酯、肉豆蔻油、桔子苦汁、桔子苦汁酏劑、桔子苦汁油、桔子花油、桔子花水、桔子油、桔子皮、桔子皮苦27汁、桔子皮甜物質(zhì)、桔子皮酊、桔子醑、桔子糖漿、薄荷、薄荷油、薄荷醑、薄荷水、苯乙基醇、樹莓(raspberry)汁、樹莓糖漿、迷迭香油、玫瑰油、玫瑰水、stronger、糖精、糖精鉤、糖精鈉、菝葜糖漿、菝葜、山梨醇溶液、留蘭香(spearmint)、留蘭香油、蔗糖、三氯蔗糖、三氯蔗糖糖漿、百里香油、妥魯香香液、妥魯香香液糖漿、香草、香草酊、香蘭素、野生櫻桃糖漿、或它們的組合。示意性的味道遮掩劑包括但不限于環(huán)式糊精、環(huán)式糊精乳液、環(huán)式糊精顆粒、環(huán)式糊精復(fù)合體、或者它們的組合。示意性的懸浮劑包括但不限于山梨醇糖漿、甲基纖維素、葡萄糖/蔗糖糖漿、凝膠、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠、以及氫化食用脂肪。示意性的乳化劑包括但不限于卵磷脂、脫水山梨糖醇單油酸酯和阿拉伯樹膠。非水性媒介物包括但不限于食用油、杏仁油、分餾的椰子油、油脂、丙二醇以及乙醇。如本領(lǐng)域所知，之前所述的賦形劑可以具有多種作用。例如，淀粉可以起到填充劑和分解劑的作用。上述賦形劑的分類不應(yīng)該被解釋成以任何方式進行的限定。在一個實施方案中，本發(fā)明的組合物包含核特異性靶向物或載體，例如核蛋白。術(shù)語"核特異性載體或靶向物"在本文中是指能夠?qū)⒎肿虞斔偷郊毎说姆肿?。這種分子包括但不限于內(nèi)皮蛋白質(zhì)C受體、轉(zhuǎn)錄因子、SV-40病毒的核內(nèi)定位信號、SV-40巨大T抗原、HIV-1型的核內(nèi)定位的TAT。給藥本發(fā)明的組合物可以單獨使用或者與其他藥征組合使用，從而治療和/或預(yù)防與生長停滯、細胞程序性凋亡或增殖性衰老的失效有關(guān)的狀況。此類狀況的代表性實例包括但不限于過度增殖疾病，例如癌癥以及細胞超出正常范圍以外的良性生長(例如銀屑病中的角化細胞或者成纖維細胞的肥厚性瘢痕和瘢痕瘤，或者在多種自體免疫病癥情況下的某些亞類的淋巴細胞)?？梢圆捎盟龇椒ㄖ委煹陌┌Y出現(xiàn)于機體的多種類型的細胞和器官中，其中所述的癌癥例如有成神經(jīng)細胞瘤、成視網(wǎng)膜細胞瘤、成膠質(zhì)細胞瘤、呼吸道腫瘤、支氣管肺癌、大細胞癌、泌尿生殖道肺瘤、腺癌、乳頭狀癌、肝細胞癌、宮頸癌、淋巴瘤(例如B細胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、大細胞淋巴瘤或彌漫性淋巴瘤)、骨肉瘤、鱗狀細胞癌、基細胞癌、黑素瘤以及在皮膚中形成的其他癌癥、血細胞和相關(guān)細胞的癌癥(包括急性和慢性白血病)。本發(fā)明的組合物還可以用于治療和/或預(yù)防乳腺癌、肺癌、肝癌、前列腺癌、胰腺癌、卵巢癌、膀胱癌、子宮癌、結(jié)腸癌、腦癌、食道癌、胃癌和曱狀腺癌。本發(fā)明的組合物還可以用于誘導(dǎo)曬黑，從而促進細胞分化以及與(例如)器官移植有關(guān)的免疫抑制。在一個實施方案中，本發(fā)明的組合物包含SPOX-l，并用于治療癌癥，其中所述的癌癥選自淋巴瘤、成膠質(zhì)細胞瘤、骨肉瘤、黑素瘤、白血病、以及皮膚癌、乳腺癌、肺癌、肝癌、前列腺癌、宮頸癌、胰腺癌、卵巢癌、膀胱癌、子宮癌、結(jié)腸癌、食道癌、胃癌和曱狀腺癌。術(shù)語"治療"或"處理"在本文中是指與生長停滯、細胞程序性凋亡或增殖性衰老失效有關(guān)的病癥或疾病的任何治療，其包括但不限于抑制病癥或疾?。?吏病癥或疾病的發(fā)展停滯；減輕病癥或疾病，例如使病癥或疾病衰退；或者減輕由疾病或病癥引起的狀況，減輕疾病或病癥的癥一犬。涉及與生長停滯、細胞程序性凋亡或增殖性衰老有關(guān)的病癥或疾病的術(shù)語"預(yù)防"是指如果病癥或疾病沒有發(fā)生，則為防止病癥或疾病發(fā)展過程開始發(fā)作；或者如果病癥或者疾病已經(jīng)存在，則為防止病癥或疾病的進一步發(fā)展。例如，本發(fā)明的組合物可用于預(yù)防肺瘤的復(fù)發(fā)。由于殘余的多組或多套極小的腫瘤細胞隨后擴大為臨床可檢測的腫瘤，所以可能發(fā)生腫瘤的復(fù)發(fā)。本發(fā)明的組合物可以以任何方式給藥，所述的方式包括但不限于口服給藥、腸胃外給藥、舌下給藥、透皮給藥、直腸給藥、經(jīng)粘膜給藥、局部給藥、通過吸入給藥、經(jīng)口腔給藥、或它們的組合。腸胃外給藥包括但不限于靜脈內(nèi)給藥、動脈內(nèi)給藥、腹膜內(nèi)給藥、皮下給藥、肌肉內(nèi)給藥、鞘內(nèi)給藥、關(guān)節(jié)內(nèi)給藥、腦池內(nèi)給藥和心室內(nèi)給藥。用于治療所需的所述組合物的治療有效量隨著待治療狀況的本性、所需活性的時間的長度、待治療患者的年齡和狀況等的變化而改變，并且最終由巡診醫(yī)生確定。然而，通常，人類治療所用的劑量通常為每天約0.001mg/kg至約200mg/kg,例如每天約1pg/kg至約129頁mg/kg,或者每天約1pg/kg至約100嗎/kg。所需的劑量可以方便地以單劑量給藥，或者在合適的時間間隔時以多劑量(例如每天兩個、三個、四個或多個亞劑量)給藥。示意性地，可以向受試對象給藥本發(fā)明的組合物，從而向受試對象提供量為約1pg/kg體重至約1mg/kg體重的SPOX化合物，例如約1pg/kg,約25[ig/kg,約50(ig/kg，約75jig/kg,約100[xg/kg，約125|ig/kg,約150ng/kg，約175pg/kg,約200^g/kg,約225ng/kg，約250pg/kg，約275(ig/kg,約300pg/kg,約325pg/kg,約350(ig/kg,約375[ig/kg,約400pg/kg，約425pg/kg，約450(ig/kg，約475(ig/kg，約500|ig/kg，約525pg/kg，約550fxg/kg,約575嗎/kg,約600(xg/kg，約625jig/kg，約650|ig/kg,約675嗎/kg,約700^g/kg,約725pg/kg，約750(ig/kg，約775|ag/kg，約800|ig/kg,約825|ag/kg，約850pg/kg，約875pg/kg，約900pg/kg，約925pg/kg，約950pg/kg,約975嗎/kg或約1mg/kg體重。本領(lǐng)域的技術(shù)人員將容易地理解，大量的其他的實施方案、修改方式和等價物都可以被設(shè)想到，并且這些實施方案、修改方式和等價物都被涵蓋在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。由此，本文所引用的所有專利、專利申請和專利公開在此均以引用方式并入專利法所允許的全部內(nèi)容中。實施例以下實施例舉例說明了本發(fā)明的多個方面，并且無論如何都不能解釋成以任何方式限制了本發(fā)明的范圍。實施例1:生長停滯之前，在2002年4月12日提交的美國專利申請No.10/122,633中，示出了與端粒懸端重復(fù)序列(T-oligo)同源的寡核苷酸，從而誘導(dǎo)生長停滯和細胞程序性凋亡，以及促進分化，其中所述文獻以引用方式并入本文。在以下試驗中，將T-oligo與SPOX比較，從而鑒定非DNA小分子是否具有相同的作用。在許多設(shè)置中，組蛋白H2AX的磷酸化(形成了yH2AX)是DNA損傷的標(biāo)志物，并且當(dāng)細胞進入衰老時，還會在端粒處觀察到所述的磷酸化。如圖3和4所示，在人成纖維細胞中，類似濃度的SPOX-l和(llmer:5'GTTAGGGTTAG3';SEQIDNO:l)T-oligo都會誘導(dǎo)YH2AX表達。在這兩個試驗中，在將細胞用于免疫熒光顯微鏡方法進行處理之前，將其在SPOX-l或llmerT-oligo存在下溫育48小時。使用新生成纖維細胞的培養(yǎng)物測試SPOX化合物在人成纖維細胞生長方面的作用。簡而言之，在每個35mm的皿中都置入20,000個細胞。在96小時時引入只包含稀釋劑(二甲基亞砜(DMSO))的培養(yǎng)基、包含SPOX-l(40pM)、SPOX-2(40pM)或1lmerT岡oligo(SEQIDNO:l)的培養(yǎng)基，并且在置入后的第2和4天確定生長情況。如圖5所示，SPOX-l和SPOX-2都抑制了人成纖維細胞的生長。實施例2:SPOX化合物誘導(dǎo)了人黑素瘤細胞的細胞程序性凋亡和生長停滯，并活化了ATM使用單獨的稀釋劑(水或DMSO)、T-oligo(16mer:5'GTTAGGGTTAGGGTTA3';SEQIDNO:2)、SPOX-1或SPOX-2將MM-AN人黑素瘤細胞的培養(yǎng)基處理96小時，然后收集該細胞，并進行處理以用于FACS分析。對一種濃度(20pM)的T-oligo和三種濃度(10|iM、40iaM和80pM)的各種SPOX化合物進行測試。結(jié)果示于圖6中。每根柱為平均值(SEM)的三個重復(fù)皿+Z-的標(biāo)準(zhǔn)偏差的平均值。FACS概況(profile)示于圖6的頂部。如所看到的那樣，兩種SPOX化合物都誘導(dǎo)了細胞程序性凋亡，并且SPOX-1具有更好的效果。該結(jié)果證明，在黑素瘤細胞的細胞程序性凋亡的誘導(dǎo)方面，所述的各種化合物能夠模仿16merT-oligo的作用。使用MM-AN細胞的培養(yǎng)物測試SPOX化合物在人黑素瘤細胞生長方面的作用。簡而言之，在每個35mm的皿中都置入20,000MM-AN個細胞。在96小時時引入只包含稀釋劑(DMSO)的培養(yǎng)基、包含SPOX-1或SPOX-2(40jxM)的培養(yǎng)基，并且在治療后的第2、3和4天確定生長情況。如圖7所示，SPOX-1和SPOX-2都抑制了MM-AN細胞的生長。絲氨酸1981位處毛細血管擴張性共濟失調(diào)癥突變(ATM)激酶的磷酸化為DNA損傷的標(biāo)志物,并且已經(jīng)證明該磷酸化過程在端粒的313'懸端被暴露之后發(fā)生。磷酸化的ATM會進而將p53磷酸化，并由此活化p53。使用單獨的稀釋劑(培養(yǎng)基或DMSO)、40jiM的llmerT陽oligo(SEQIDNO:2)、或40|iM的SPOX-2將MM-AN細胞處理48小時，然后收集該細胞，并使用抗ATM磷酸絲氨酸1981的抗體通過蛋白質(zhì)印跡來進行分析。如圖8所示，近似濃度的SPOX-2和llmerT-oligo都誘導(dǎo)了MM-AN細胞中ATM的磷酸化。實施例3:SPOX化合物誘導(dǎo)了人乳腺癌細胞的生長停滯和細胞程序性凋亡使用MCF-7細胞的培養(yǎng)物測試SPOX化合物在人乳腺癌細胞的生長和細胞程序性凋亡方面的作用。通過在每個35mm的皿中置入20,000個細胞來測試在細胞生長方面的作用。在96小時時引入只包含稀釋劑(DMSO)的培養(yǎng)基、包含SPOX-l或SPOX-2(10|xM，40|iM和80pM)的培養(yǎng)基，并且在置入后的第8天確定生長情況。如圖9所示，SPOX-l和SPOX-2都以劑量依賴的方式抑制了MCF-7細胞的生長，并且40和80的較高濃度使得幾乎完全抑制了生長。組蛋白H2AX的磷酸化(形成yH2AX)被評價為DNA損傷的標(biāo)志物。通過蛋白質(zhì)印跡分析顯示多(ADP核糖)聚合酶(PARP)的酶切情況來測定細胞程序性凋亡。PARP為半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(其為調(diào)節(jié)細胞程序性凋亡的酶)的底物，因此PARP由半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3形成的酶切程度為進行過程中的細胞程序性凋亡的指示。圖10表明，SPOX-l和SPOX-2都會使組蛋白H2AX磷酸化(形成yH2AX)，這與陽性對照16merT-oligo(SEQIDNO:2)相當(dāng)。圖11表明，SPOX-l和SPOX-2同樣都能產(chǎn)生與陽性對照化合物TNF-a相當(dāng)?shù)腜ARP酶切(通過半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3調(diào)節(jié))，其中已知TNF-a會通過上述途徑產(chǎn)生細胞程序性凋亡。因此，兩種SPOX化合物都會在MCF-7乳腺癌細胞系中誘導(dǎo)細胞程序性凋亡和yH2AX的形成(其為類似于DNA損傷的應(yīng)答的標(biāo)志物)。實施例4:SPOX-l不依賴于WRN來誘導(dǎo)細胞程序性凋亡使用單獨的稀釋劑(水或DMSO)、16merT-oligo(SEQIDNO:2)或SPOX-l將WRN+和WRN-U20S人骨肉瘤細胞的培養(yǎng)物處理96小時，然后收集該細胞并進行處理以用于FACS分析。對一種濃度(20liM)的16merT-oligo進行測試，并對三種濃度(10|_iM、40jaM和80pM)的SPOX-l進行測試。圖12示出了以下結(jié)果，其中與具有完整WRN的U20S細胞相比，在WRN-中，16merT-oligo在誘導(dǎo)細胞程序性凋亡方面的效果較差。與此截然不同的是，在SPOX-l以劑量依賴的方式同樣誘導(dǎo)WRN+U20S細胞發(fā)生細胞程序性凋亡的同時，在濃度為40(iM和80jxM的情況下，在WRN-U20S細胞中同樣觀察到了細胞程序性凋亡，這表明SPOX-l能夠通過依賴WRN的途徑和不依賴WRN的途徑誘導(dǎo)細胞程序性凋亡?？晒┻x用的其他方式是，由于WRN-U20S細胞包含可檢測(雖然大量減少)濃度的WRN，所以可能的是，SPOX-l可能通過與MRN復(fù)合體(除了WRN以外)的一種或多種成分相互作用而能夠比T-oligo更有效地利用所述這些細胞中的壽交少量的WRN。實施例5:SPOX化合物誘導(dǎo)了人皮膚中的黑素原生成將在面部除皺(facelift)時取自56歲白種婦女的正常面部皮膚小心切割成大約5mmx5mm的碎片。將所得碎片在組織培養(yǎng)皿的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基中放置至少1個星期，其中使所述的培養(yǎng)基處于這樣的狀態(tài)下，(Arad等，F(xiàn)ASEBJ.2006年7月28日[Epub])。在每35mm的皿中排布至少3個碎片，并在48小時后，向每個皿中提供包含單獨的稀釋劑(DMSO)的新鮮培養(yǎng)基(Dil)、或包含SPOX-l或SPOX-2的新鮮培養(yǎng)基(其中稀釋劑、SPOX-l和SPOX-2均為80uM)，或者包含100uM的胸苷二核苷酸(pTT)的新鮮培養(yǎng)基作為陽性對照。在另外的24、48和72小時后，在各個時間時由代表不同治療組的各亞中取出一塊組織碎片，將該碎片快速冷凍，并用FontanaMasson染色液染色以顯示黑色素(參見圖13),然后經(jīng)過計算機輔助的圖像分析來確定被黑色素占據(jù)的表皮的百分率(參見圖14)。判斷72小時稀釋劑(Dil)對照樣品受到了細菌污染，從而影響了整體組織學(xué)和表觀黑色素的含量，基于早期的試驗，預(yù)計該黑色素含量與24和48小時的黑色素含量相同。認(rèn)為所有其他的樣品都是健康的并且精確地代表了對治療產(chǎn)生的應(yīng)答。由圖13和14可以看出，兩種SPOX化合物都能產(chǎn)生與pTT相當(dāng)?shù)臅窈谇闆r。實施例6:SPOX化合物減少了存活素的表達并誘導(dǎo)了人肺癌細胞的生長停滯通過使用單獨的稀釋劑(DMSO)、SPOX-1(20|liM,40pM)、SPOX-2(20fxM,40fxM)和T畫oligo(16mer:5'GGTTGGTTGGTTGGTT3';SEQIDNO:3)(20^M,40(xM)將H460人肺癌細胞處理兩天，或者使用SPOX-1(80iiM)或SPOX-2(80(iM)將H460人肺癌細胞處理24小時來測定SPOX化合物抑制存活素(其為細胞程序性凋亡蛋白質(zhì)(IAP)家族的抑制劑中的一員)表達的能力。在處理后，收集細胞，計數(shù)，并檢測存活素的表達情況。結(jié)果示于圖15中。觀察到，在使用兩種SPOX化合物的第2天，存活素的表達都呈現(xiàn)劑量依賴性的減少，這種情況與使用16merT-oligo中觀察到的情況相似，其中在劑量為40時，幾乎不能^r測到存活素。在24小時時，劑量為80的兩種SPOX化合物都將存活素的表達減少到幾乎不可檢測的水平。使用H460細胞的培養(yǎng)物測試SPOX化合物在人肺癌細胞生長方面的作用。簡而言之，在每個35mm的皿中都置入20，000個H460細胞。在96小時時引入只包含稀釋劑(DMSO)的培養(yǎng)基、包含SPOX-l或SPOX-2(40!xM)的培養(yǎng)基，并且在置入后的第1、2、3和4天確定生長情況。如圖16所示，SPOX-1和SPOX-2都抑制了H460細胞的生長。實施例7:SPOX-337、SPOX-338和SPOX-343誘導(dǎo)了人乳腺癌細胞的生長停滯以及誘導(dǎo)了人黑素瘤細胞的細胞程序性凋亡使用MCF-7細胞測試SPOX化合物在人乳腺癌細胞生長方面的作用。通過在每個35mm的亞中都置入20,000個細胞來測試在細胞生長方面的作用。在96小時時引入只包含稀釋劑(水或DMSO)的培養(yǎng)基、包含SPOX誦337、SPOX陽388、SPOX-343(10|aM、40(iM和80(iM)或16merT-oligo(SEQIDNO:2)的培養(yǎng)基，并且在置入后的第3天確定生長情況。如圖17所示，SPOX-337、SPOX-338和SPOX-343均以劑量依賴的方式抑制MCF-7細胞的生長，并且80pM的最高濃度使得生長幾乎完全受到了抑制。34使用單獨的稀釋劑(水或DMSO)、16merT-oligo(SEQIDNO:2)、SPOX-337、SPOX-338或SPOX-343將MM-AN人黑素瘤細胞的培養(yǎng)物處理72小時，然后收集并進行處理以用于FACS分析。對一種濃度(20^tM)的T-oligo和三種濃度(10nM、40和80^M)的各種SPOX化合物進行測試。結(jié)果如圖18所示。如所看到的那樣，SPOX-337、SPOX-338和SPOX-343誘導(dǎo)了細胞程序性凋亡，并且SPOX-337和SPOX-343具有最高的效果。所得結(jié)果表明，在誘導(dǎo)黑素瘤細胞的細胞程序性凋亡方面，所述的各種化合物能夠模仿16merT-oligo的作用。實施例8:SPOX-l和SPOX-2誘導(dǎo)了人成纖維細胞中的p53和p21使用單獨的稀釋劑(水或DMSO)、SPOX-l、SPOX-2或16merT-oligo(SEQIDNO:2)將人成纖維細胞處理48小時，此后，收獲全部的細胞內(nèi)蛋白質(zhì)，并使用抗p53和抗p21的抗體進行蛋白質(zhì)印跡分析。與單獨的稀釋劑相比，SPOX-l和SPOX-2誘導(dǎo)了一定水平的p53，并且誘導(dǎo)了一定水平的p53依賴的下游效應(yīng)器蛋白質(zhì)p21,其程度與16merT-oligo相同。權(quán)利要求1.具有以下通式的化合物或其可藥用的鹽，其中R1在鄰位、間位或者對位，并且為選自羥基、低級烷氧基和羥基取代的低級烷氧基中的一員；R2為選自氫、低級烷基鹵化物、鹵素、低級炔基和取代的低級炔基中的一員；以及R3為選自羥基、氨基、取代的氨基、雜環(huán)、芳基雜環(huán)、低級烷氧基和低級烯氧基中的一員。2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中Rl在對位，并且為羥基或羥基取代的低級烷氧基；R2為氫、囟素或取代的低級炔基；以及R3為低級烯氧基或氨基。3.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中Rl在對位，并且為,羥基取代的低級烷氧基；R2為氫或卣素；以及R3為低級烯氧基。4.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中R3為-0-CH2-CH-CH2。5.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中Rl在對位，并且為羥基；R2為氫；以及R3》-0-CH2-CH=CH2。6.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中Rl在對位，并且為-0-CH2-CH2-OH;R2為氫；以及R3為-0-CH2-CH-CH2。7.根椐權(quán)利要求1的化合物，其中Rl在對位，并且為-0-CH2-CH2-OH;R2為不典；以及R3》-0-CH2-CH=CH2。8.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中所述的化合物為SPOX-l。9.外又利要求1-7或8的任意一項中所述化合物的對映體。10.根據(jù)權(quán)利要求9的化合物，其中所述的化合物為SPOX-2。11.藥物組合物，其包含權(quán)利要求l-9或10的任意一項中所述的化合物、以及可藥用載體。12.治療哺乳動物過度增殖病癥的方法，該方法包括向有需要的哺乳動物給藥有效量的包含螺羥吲哚(SPOX)的組合物。13.權(quán)利要求12所述的方法，其中所述的SPOX為根據(jù)權(quán)利要求1的化合物。14.權(quán)利要求12所述的方法，其中所述的SPOX為SPOX-l。15.權(quán)利要求12所述的方法，其中所述的SPOX為SPOX-2。16.權(quán)利要求12所述的方法，其中所述的給藥步驟包括局部給藥、口服給藥或靜脈內(nèi)給藥。17.權(quán)利要求12所述的方法，其中所述的給藥步驟包括口服給藥。18.權(quán)利要求12所述的方法，其中所述的螺羥吲咮與核特異性載體或目標(biāo)分子相連。19.權(quán)利要求18所述的方法，其中所述的核特異性載體或目標(biāo)分子選自魚精蛋白內(nèi)皮蛋白C受體、轉(zhuǎn)錄因子、SV-40巨大T抗原、SV-40病毒的核內(nèi)定位信號、HIV-1型TAT的核內(nèi)定位結(jié)構(gòu)i^。20.權(quán)利要求12所述的方法，其中所述的組合物包含濃度為約1pM至約500的螺羥巧l咮。21.抑制人癌細胞生長的方法，該方法包括向所述的人給藥生理學(xué)有效劑量的螺羥吲哚(SPOX)。22.權(quán)利要求21所述的方法，其中所述的癌細胞選自黑素瘤細胞、乳腺癌細胞、淋巴瘤細胞、骨肉瘤細胞、白血病細胞、鱗癌細胞、宮頸癌細胞、卵巢癌細胞、胰腺癌細胞和纖維肉瘤細胞。23.權(quán)利要求22所述的方法，其中所述的SPOX為根據(jù)權(quán)利要求1的化合物。24.權(quán)利要求22所述的方法，其中所述的SPOX為SPOX-l。25.權(quán)利要求22所述的方法，其中所述的SPOX為SPOX-2。26.誘導(dǎo)哺乳動物惡性細胞分化的方法，所述方法包括向所述的哺乳動物給藥有效量的藥物組合物，該藥物組合物包含螺羥丐l咮和至少一種可藥用的賦形劑。27.權(quán)利要求26所述的方法，其中所述的惡性細胞為黑素瘤細胞。28.權(quán)利要求26所述的方法，其中所述的SPOX為根據(jù)權(quán)利要求1的化合物。29.誘導(dǎo)哺乳動物黑素原生成的方法，所述方法包括向所述的哺乳動物給藥有效量的組合物，該組合物包含螺羥。引咪和至少一種可藥用的賦形劑。30.權(quán)利要求29所述的方法，其中所述的SPOX為根據(jù)權(quán)利要求1的化合物。31.用于誘導(dǎo)人癌細胞發(fā)生細胞程序性凋亡的方法，所述方法包括向所述的人給藥有效量的組合物，該組合物包含螺羥吲哚和至少一種可藥用的賦形劑。32.權(quán)利要求31所述的方法，其中所述的癌細胞為黑素瘤細胞。33.權(quán)利要求31所述的方法，其中所述的SPOX為根據(jù)權(quán)利要求1的化合物。34.用于抑制哺乳動物癌細胞生長的方法，所述方法與端粒酶在所述細胞中的存在或活性無關(guān)，所述方法包括向所述的哺乳動物給藥有效量的包含螺羥p引哚的組合物。35.權(quán)利要求34所述的方法，其中所述的SPOX為根據(jù)權(quán)利要求1的化合物。36.用于抑制哺乳動物癌細胞生長的方法，所述方法包括向所述的哺乳動物給藥有效量的包含螺羥吲哚的組合物，其中所述的給藥步驟無需在所述細胞中存在p53或具有p53的活性。37.權(quán)利要求36所述的方法，其中所述的SPOX為根據(jù)權(quán)利要求1的化合物。38.用于抑制哺乳動物癌細胞生長的方法，所述方法使得至少一些所述的細胞在S期停滯，該方法包括向所述的哺乳動物給藥有效量的組合物，該組合物包含螺羥吲哚和至少一種可藥用的賦形劑。39.權(quán)利要求38所述的方法，其中所述的SPOX為根據(jù)權(quán)利要求1的化合物。40.用于預(yù)防哺乳動物在其皮膚被暴露于紫外光中之后而在皮膚中發(fā)生的皮膚海綿層水腫、起皰或角化不良(日曬傷)的方法，所述方法包括向所述的皮膚施加有效量的組合物，該組合物包含螺羥吲哚和至少一種可藥用的賦形劑。41.權(quán)利要求40所述的方法，其中所述的SPOX為根據(jù)權(quán)利要求1的化合物。42.用于減少人皮膚癌發(fā)生的方法，所述方法包括向所述的皮膚施加有效量的組合物，該組合物包含螺羥巧l哚和至少一種可藥用的賦形劑。43.權(quán)利要求42所述的方法，其中所述的SPOX為根據(jù)權(quán)利要求1的化合物。44.用于減少人皮膚癌發(fā)生的方法，其中所述的人具有可導(dǎo)致皮膚癌的著色性干皮病或其他遺傳性易患病體質(zhì)，所述的方法包括向所述的皮膚給藥有效量的包含螺羥巧l哚的組合物。45.權(quán)利要求44所述的方法，其中所述的SPOX為根據(jù)權(quán)利要求1的化合物。46.用于增強對人皮膚造成的紫外線輻射誘導(dǎo)的損傷進行修復(fù)的方法，該方法包括向所述的皮膚施加有效量的組合物，該組合物包含螺羥吲哚和至少一種可藥用的賦形劑。47.權(quán)利要求46所述的方法，其中所述的SPOX為根據(jù)權(quán)利要求1的化合物。48.用于減少哺乳動物氧化損傷的方法，所述方法包括向所述的哺乳動物給藥有效量的組合物，該組合物包含螺羥巧l哚和至少一種可藥用的賦形劑。49.權(quán)利要求48所述的方法，其中所述的給藥步驟包括向所述哺乳動物的皮膚施加所述的組合物。50.權(quán)利要求48所述的方法，其中所述的SPOX為根據(jù)權(quán)利要求1的化合物。51.用于治療哺乳動物黑素瘤的方法，包括向所述的哺乳動物給藥有效量的組合物，該組合物包舍螺羥。引哚和至少一種可藥用的賦形劑。52.權(quán)利要求51所述的方法，其中所述的SPOX為根據(jù)權(quán)利要求1的化合物。53.用于減少人皮膚中的角化細胞增殖的方法，所述方法包括向所述的皮膚給藥有效量的組合物，該組合物包含螺羥吲哚和至少一種可藥用的賦形劑。54.權(quán)利要求53所述的方法，其中所述的人患有光化性角化病、Bowen疾病、鱗狀細胞癌或基細胞癌。55.權(quán)利要求53所述的方法，其中所述的SPOX為根據(jù)權(quán)利要求1的化合物。56.預(yù)防或減少哺乳動物細胞中的DNA損傷的方法，其中所述的DNA損傷是由照射或DNA損傷性化學(xué)制品引起的，所述的方法包括將所述的細胞與有效量的組合物接觸，該組合物包含螺羥吲咮和至少一種可藥用的賦形劑。57.權(quán)利要求56所述的方法，其中所述的SPOX為根據(jù)權(quán)利要求1的化合物。全文摘要本發(fā)明特別提供了通過向有需要的哺乳動物給藥有效量的組合物來治療哺乳動物的多種疾病和病癥的組合物和方法，其中所述的組合物包含可與WRN結(jié)合的非DNA小分子，例如螺羥吲哚(SPOX)類別中的成員。文檔編號C07D498/04GK101528754SQ200780040055公開日2009年9月9日申請日期2007年8月29日優(yōu)先權(quán)日2006年8月29日發(fā)明者A·N·克勒,B·A·吉爾克雷斯特,C·S·諾伊曼,M·S·埃勒,O·M·麥菲爾森,T·A·路易斯申請人:波士頓大學(xué)信托人;哈佛大學(xué)校長及研究員協(xié)會