專利名稱：：新型羥基吲哚衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及羥基吲哚衍生物及其醫(yī)藥用途。
背景技術(shù)：
：激酶是將磷酸基從ATP等具有高能磷酸鍵的分子上轉(zhuǎn)移(磷酸化)到基質(zhì)或者靶分子上的酶，其中，將蛋白質(zhì)分子磷酸化的酶即蛋白激酶作為細(xì)胞內(nèi)的各種信號傳導(dǎo)途徑及代謝途徑的調(diào)節(jié)因子起作用。但是，激酶的功能異常多成為癌等疾病的原因，期待通過開發(fā)具有抑制特定的激酶的功能的藥物來用于治療或預(yù)防疾病。作為絲氨酸/蘇氨酸激酶的Pim-l，最初是在由小鼠白血病病毒(MuLV)引起的T細(xì)胞淋巴瘤內(nèi)作為由于白血病病毒的插入而時(shí)常被活化的基因而被識別的(非專利文獻(xiàn)1)。另夕卜，報(bào)告有細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的Pim-l在各種造血細(xì)胞內(nèi)作為用于抑制細(xì)胞凋亡的因子起作用(非專利文獻(xiàn)2)。已知Pim-l的發(fā)現(xiàn)不僅局限于造血細(xì)胞內(nèi)，還遍及從淋巴系統(tǒng)到前列腺、睪丸、口腔上皮細(xì)胞的部位，關(guān)于與Pim-l具有明顯的序列相同性的絲氨酸/蘇氨酸激酶的Pim-2和Pim-3，大部分功能與Pim-l相同(非專利文獻(xiàn)3)。另外，已知在胰腺及肝細(xì)胞的惡性病變中發(fā)現(xiàn)Pim-3，但在正常的胰腺組織中沒有發(fā)現(xiàn)Pim-3，報(bào)道了Pim-3在人的胰腺癌細(xì)胞內(nèi)及肝細(xì)胞癌細(xì)胞株中作為用于抑制細(xì)胞凋亡的因子起作用(非專利文獻(xiàn)4、非專利文獻(xiàn)5)。非專利文獻(xiàn)1:Cuypers,H.T.，Sdten,G.，Quint,W.,Zijlstra，M.,Maandag，E.R.，Boelens，W.,vanWezenbeek,P.，Melief，C.,Berns，A.Murineleukemiavirus-inducedT-celllymphomagenesis:integrationofprovirusesinadistinctchromosomalregion.Cell,37:141-150，1984非專利文獻(xiàn)2:Selten，G.，Cuypers,H.T.&Berns，A.ProviralactivationoftheputativeoncogenePim-1inMuLVinducedT-celllymphomas.EMBOJ,4:1793-1798,1985非專利文獻(xiàn)3:MalteBachmann，TarikMoroy,Theserine/threoninekinasePim-1,TheInternationalJournalofBiochemistry&CellBiology37(2005)726-730非專禾U文獻(xiàn)4:ChifumiFujii,YasunariNakamoto,Peironglu,KoichiTsuneyama，BoryanaK.Popivanova,ShuichiKanekoandNaofumiMukaida,Aberrantexpressionofserine/threoninekinasePim-3inhepatocellularcarcinomadevelopmentanditsroleintheproliferationofhumanhepatomacelllines,Int丄Cancer:114,209-218(2005)非專利文獻(xiàn)5:Ying-YiLi,BoryanaK.Popivanova,YouichiroNagai,hiroshiIshiokura，ChifumiFujii,andNaofumiMukaida，Pim-3,aProto-Oncogenewithserine/threoninekinaseActivity,IsAberrantlyExpressedinHumanPancreaticCancerandPhosphorylatesBadtoBlockBad-MediatedApoptosisinHumanPancreaticCanerCellLine,CancerRes2006;66:(13).July1，2006;6741-7.
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的課題在于，提供作為抑制激酶活性的藥物有用的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、以及作為治療和/或預(yù)防癌等與激酶相關(guān)的疾病的藥物有用的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。為了解決上述課題，本發(fā)明人進(jìn)行了專心研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，可使Pim激酶等某種激酶失活的特定的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，有效地用于以實(shí)體癌為主的由激酶引起的各種疾病的預(yù)防和/或治療，從而完成了本發(fā)明。即，本發(fā)明包含以下內(nèi)容。(l)一種化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中，所述化合物用下述通式(I)表示，R4。(2)如(1)所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中，Ri、R2、R4、Rs分別獨(dú)立地為氫原子或COOR9(式中，R9表示氫原子、Cl-C6烷基或C2-C8鏈烯基)。(3)如(1)或(2)所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中，R3、R6分別獨(dú)立地為氫原子或Cl-C6垸基羰基。(4)如(1)(3)中任一項(xiàng)所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中，R7、Rs為氫原子。(5)如(1)(4)中任一項(xiàng)所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中，X為氧原子。(6)由下述式(1)(7)表示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>GO《CH^CH3(7》(7)—種激酶抑制劑，含有(1)(6)中任一項(xiàng)所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽作為有效成分。(8)如(7)所述的激酶抑制劑，其中，所述激酶抑制劑為Pim激酶抑制劑。(9)如(7)或(8)所述的激酶抑制齊U，其中，所述激酶抑制劑為細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑。(10)—種激酶相關(guān)疾病的預(yù)防和/或治療劑，其中，含有(1)(6)中任一項(xiàng)所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽作為有效成分。(11)如(10)所述的預(yù)防和/或治療齊U，其中，所述激酶相關(guān)疾病為癌、細(xì)胞增殖異常、心功能障礙、心肌梗塞、動脈硬化癥、閉塞性心血管障礙、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、老年性黃斑變性視網(wǎng)膜病變、神經(jīng)變性疾病、自身免疫病、炎性疾病、糖尿病或病毒性疾病。(12)如(ll)所述的預(yù)防和/或治療劑，其中，所述癌為實(shí)體癌。(13)—種激酶相關(guān)疾病的預(yù)防和/或治療方法，其中，包括將有效劑量的(1)(6)中任一項(xiàng)所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽向激酶相關(guān)疾病的患者給藥。(14)一種(1)(6)中任一項(xiàng)所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的應(yīng)用，其中，用于激酶相關(guān)疾病的預(yù)防和/或治療劑的制造。以下對本說明書中記載的術(shù)語、符號等的含義進(jìn)行說明，詳細(xì)地說明本發(fā)明。本發(fā)明中，所謂"激酶活性"，是指利用各種激酶使靶蛋白磷酸化。該"激酶活性"中包含利用絲氨酸/蘇氨酸激酶使靶蛋白磷酸化、以及利用Pim激酶使靶蛋白磷酸化。本發(fā)明中的"Pim激酶"是具有絲氨酸/蘇氨酸激酶活性的蛋白質(zhì)，具體而言，可以列舉Pim-l激酶、Pim-2激酶、Pim-3激酶等。本發(fā)明中，所謂"Pim-l激酶"，是在由小鼠白血病病毒(MuLV)引起的T細(xì)胞淋巴瘤內(nèi)作為通過MuLV的插入而活化的基因被識別的、具有絲氨酸/蘇氨酸激酶活性的蛋白質(zhì)(Cuypers，H.T.,Selten，G.,Quint，W.，Zijlstra,M.,Maandag,E.R.,Bodens，W.,vanWezenbeek,P.,Melief，C.,Berns,A.Murineleukemiavirus-inducedT-celllymphomagenesis:integrationofprovirusesinadistinctchromosomalregion.Cell,37:141-150,1984)本發(fā)明中，所謂"Pim-2激酶"，與"Pim-l激酶"同樣，是在由小鼠白血病病毒(MuLV)引起的T細(xì)胞淋巴瘤內(nèi)作為通過MuLV的插入而活化的基因被識別的、具有絲氨酸/蘇氨酸激酶活性的蛋白質(zhì)(AndrewMacdonald,DavidGCampbell,RachelToth,HilaryMclauchlan,CJames,Hastie,andJSimonCArthur,BMCCellBiol.2006;7:1)。本發(fā)明中，所謂"Pim-3激酶"，是作為由大鼠的嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞系的PC12細(xì)胞的去極化誘發(fā)的基因(KID-1)被識別的、具有絲氨酸/蘇氨酸激酶活性的蛋白質(zhì)(FeldmanJD,VicianL，CrispinoM,ToccoG,MarcheselliVL，BazanNG，BaudryM,HerschmanHR.，JBiolChem.1998Jun26;273(26):16535-43.)。本發(fā)明中，所謂"激酶抑制"，是指抑制通過各種激酶將靶蛋白磷酸化的功能。其包含細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)，即在耙蛋白磷酸化之后，在引起細(xì)胞的細(xì)胞凋亡抑制反應(yīng)的情況下，阻礙細(xì)胞凋亡的抑制能力。本發(fā)明中，所謂"絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制"，是指在上述激酶抑制的定義中激酶為絲氨酸/蘇氨酸激酶的情況。本發(fā)明中，所謂"Pim激酶抑制"，是指在上述激酶抑制的定義中激酶為Pim激酶的情況。本發(fā)明中，所謂"激酶抑制劑"，是指含有具有抑制由激酶引起的靶蛋白磷酸化的作用及細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)能力的化合物作為有效成分的藥物組合物。本發(fā)明中，所謂"絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑"，是指含有具有絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制能力的化合物作為有效成分的藥物組合物。本發(fā)明中，所謂"Pim激酶抑制劑"，是指含有具有Pim激酶抑制能力的化合物作為有效成分的藥物組合物。本發(fā)明中的"激酶抑制劑"優(yōu)選為"絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑"，更優(yōu)選為"Pim激酶抑制劑"，特別優(yōu)選為"Pim-l活性抑制劑"。本發(fā)明中，所謂"激酶相關(guān)疾病"，是指"由激酶活性引起的疾病"，至少是指包含由激酶活性引起的靶蛋白磷酸化及其后的細(xì)胞的細(xì)胞凋亡抑制的各種反應(yīng)與疾病的原因或疾病的惡化有關(guān)的疾病。本發(fā)明中，所謂"Pim相關(guān)疾病"，是指"由Pim激酶活性引起的疾病"，至少是指包含由Pim激酶活性引起的靶蛋白磷酸化及其后的細(xì)胞的細(xì)胞凋亡抑制的各種反應(yīng)與疾病的原因或疾病的惡化有關(guān)的疾病。作為這樣的"激酶相關(guān)疾病"、或者"Pim相關(guān)疾病"，具體而言，可以列舉癌、細(xì)胞增殖異常、心功能障礙、心肌梗塞、動脈硬化、閉塞性心血管障礙、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、老年性黃斑變性視網(wǎng)膜病變、神經(jīng)變性疾病、自身免疫病、炎性疾病、糖尿病或病毒性疾病等。本發(fā)明中，所謂"實(shí)體癌"，是指除血液癌之外的所有癌，例如是指胃癌、肺癌、乳癌、食道癌、大腸癌、肝癌、胰腺癌、腎癌、卵巢癌、子宮癌、皮膚癌、腦瘤、前列腺癌等。本發(fā)明中，所謂"垸基"，是從脂肪族烴中除去任意1個(gè)氫原子而衍生的一價(jià)基團(tuán)，在骨架中不含有雜原子或不飽和碳-碳鍵，具有含氫及碳原子的烴基或烴的部分集合。烷基包含直鏈狀或支鏈狀的結(jié)構(gòu)。"C1-Cn烷基"表示碳原子數(shù)為l~n。具體而言，可以列舉例如甲基、乙基、l-丙基、2-丙基、2-甲基-l-丙基、2-甲基-2-丙基、l-丁基、2-丁基、l-戊基、2-戊基、3-戊基、2-甲基-l-丁基、3-甲基-l-丁基、2-甲基-2-丁基、3-甲基-2-丁基、2,2-二甲基-l-丙基、l-己基、2-己基、3-己基、2-甲基-l-戊基、3-甲基-1-戊基、4-甲基-l-戊基、2-甲基-2-戊基、3-甲基-2-戊基、4-甲基-2-戊基、2-甲基-3-戊基、3-甲基-3-戊基、2，3-二甲基-1-丁基、3，3-二甲基-1-丁基、2,2-二甲基-1-丁基、2-乙基-l-丁基、3,3-二甲基-2-丁基、2,3-二甲基-2-丁基等，優(yōu)選為甲基。本說明書中的"鏈烯基"是具有至少1個(gè)雙鍵(2個(gè)鄰接SP2碳原子)的1價(jià)基團(tuán)。通過配置雙鍵及取代成分(存在的情況)，雙鍵的幾何學(xué)形態(tài)可以采用異側(cè)(Entgegen)(E)或同側(cè)(Zusammen)(Z)、順或反配置。"C1-Cn鏈烯基"表示碳原子數(shù)為1n。作為鏈烯基，可以列舉直鏈狀或支鏈狀的鏈烯基。這樣的鏈烯基，具體而言，可以列舉例如乙烯基、烯丙基、1-丙烯基、2-丙烯基、l-丁烯基、2-丁烯基(包含順、反結(jié)構(gòu))、3-丁烯基、戊烯基、己烯基等，優(yōu)選為乙烯基。本發(fā)明中，所謂C1-Cn垸基羰基，是指在羰基上鍵合有上述定義的"C1-Cn烷基"的基團(tuán)。具體而言，可以列舉例如甲基羰基、乙基羰基、l-丙基羰基、2-丙基羰基、2-甲基-l-丙基羰基、2-甲基-2-丙基羰基、l-丁基羰基、2-丁基羰基、l-戊基羰基、2-戊基羰基、3-戊基羰基、2-甲基-l-丁基羰基、3-甲基-l-丁基羰基、2-甲基-2-丁基羰基、3-甲基-2-丁基羰基、2,2-二甲基-1-丙基羰基等，優(yōu)選為甲基羰基或l-丙基羰基。本發(fā)明中，所謂"C1-Cn烷氧基"，是指上述定義的"C1-Cn烷基"鍵合的氧基。具體而言，可以列舉例如甲氧基、乙氧基、1-丙氧基、2-丙氧基、2-甲基-l-丙氧基、2-甲基-2-丙氧基、l-丁氧基、2-丁氧基、l-戊氧基、2-戊氧基、3-戊氧基、2-甲基-l-丁氧基、3-甲基-l-丁氧基、2-甲基-2-丁氧基、3-甲基-2-丁氧基、2,2-二甲基-1-丙氧基、1-己氧基、2-己氧基、3-己氧基、2-甲基-l-戊氧基、3-甲基-l-戊氧基、4-甲基-l-戊氧基、2-甲基-2-戊氧基、3-甲基-2-戊氧基、4-甲基-2-戊氧基、2-甲基-3-戊氧基、3-甲基-3-戊氧基、2,3-二甲基-1-丁氧基、3,3-二甲基-1-丁氧基、2,2-二甲基-1-丁氧基、2-乙基-l-丁氧基、3,3-二甲基-2-丁氧基、2,3-二甲基-2-丁氧基等，優(yōu)選為甲氧基。本發(fā)明中，所謂"鹵原子"，是指氟原子、氯原子、溴原子或碘原子，優(yōu)選為溴原子。本說明書中的"鹽"，只要是與本發(fā)明的化合物形成的鹽、且藥理學(xué)上可接受的鹽即可，沒有特別限定，可以列舉例如無機(jī)酸鹽、有機(jī)酸鹽、無機(jī)堿鹽、有機(jī)堿鹽、酸性或堿性氨基酸鹽等。作為無機(jī)酸鹽的優(yōu)選例子，可以列舉例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽等，作為有機(jī)酸鹽的優(yōu)選例子，可以列舉例如醋酸鹽、琥珀酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、硬脂酸鹽、苯甲酸鹽、甲磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽等。作為無機(jī)堿鹽的優(yōu)選例子，可以列舉例如鈉鹽、鉀鹽等堿金屬鹽；鈣鹽、鎂鹽等堿土類金屬鹽；鋁鹽、銨鹽等，特別優(yōu)選為鈉鹽。作為有機(jī)堿鹽的優(yōu)選例子，可以列舉例如二乙基胺鹽、二乙醇胺鹽、葡甲胺鹽、N,N，-二芐基乙二胺鹽等。作為酸性氨基酸鹽的優(yōu)選例子，可以列舉例如天冬氨酸鹽、谷氨酸鹽等，作為堿性氨基酸鹽的優(yōu)選例子，可以列舉例如精氨酸鹽、賴氨酸鹽、鳥氨酸鹽等。本說明書中，為了方便，化合物的結(jié)構(gòu)式有時(shí)表示一定的異構(gòu)體，本發(fā)明中，包含化合物的結(jié)構(gòu)上產(chǎn)生的所有幾何異構(gòu)體、基于手性碳的光學(xué)異構(gòu)體、立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體等異構(gòu)體及異構(gòu)體混合物，并不限定于為了方便而記載的式子，可以為任一種異構(gòu)體，也可以為混合物。因此，在本發(fā)明的化合物中，可以存在分子內(nèi)具有手性碳原子的光學(xué)活性體及外消旋體，本發(fā)明中沒有限定，均可以含有。另外，有時(shí)也存在多晶型，但同樣沒有限定，任一種晶型可以為單一的，也可以為晶型混合物，并且，本發(fā)明的化合物中包含酐和水合物。另外，本發(fā)明的化合物在體內(nèi)分解而產(chǎn)生的代謝物也包括在本發(fā)明的權(quán)利要求的范圍內(nèi)。本發(fā)明的化合物及其優(yōu)選的形態(tài)如下。下述通式(I)表示的化合物。R3(!)式中，R^R8表示氫原子、鹵原子、羥基、Cl-C6烷基、C2-C8鏈烯基、Cl-C6烷基羰基或-COOR9(式中，R9表示氫原子、Cl-C6垸基或C2-C8鏈烯基)。Rj、R2、R4、R5優(yōu)選分別獨(dú)立地為氫原子或-COOR9(式中，R9表示氫原子、C1-C6垸基或C2-C8鏈烯基)，更優(yōu)選分別獨(dú)立地為氫原子或-COOH。1^或R4中的任一個(gè)或兩個(gè)為COOR9時(shí)，該取代基的位置優(yōu)選至少存在于式(I)中的5位或5'位或者6位或6'位。R3、R6優(yōu)選分別獨(dú)立地為氫原子或C1-C6烷基羰基，更優(yōu)選分別獨(dú)立地為氫原子、甲基羰基或l-丙基羰基。R7、r8優(yōu)選分別獨(dú)立地為氫原子。式中，x表示硫原子、氧原子或NRk)(式中，rk)表示氫原子、鹵原子、羥基、Cl-C6垸基、C2-C8鏈烯基或C1-C6垸氧基)，優(yōu)選為氧原子。上述式(I)中，取代基R廣R8的優(yōu)選形態(tài)如下。(1)R嚴(yán)RfR4-Rf氫原子、113=116=氫原子、R產(chǎn)R^氫原子。(2)RfRfR4二Rf氫原子、R3=R6=C1-C6垸基羰基、RfRf氫原子。(3)R產(chǎn)R^R4-R^氫原子、R^氫原子、R6=C1-C6烷基羰基、R7=R8=氫原子。(4)R產(chǎn)R^-COOR9(式中，R9表示氫原子、Cl-C6烷基、C2-C8鏈烯基或Cl-C6垸氧基)、RfR^氫原子、R^R^氫原子、RfRf氫原子。(5)R產(chǎn)RfR^氫原子、R^-COOR9(式中，R9表示氫原子、Cl-C6垸基、C2-C8鏈烯基或C1-C6烷氧基)、RfCl-C6烷基羰基、116=氫原子、117=118=氫原子。作為表示這樣的式(I)的化合物，具體可以列舉例如下述化合物(1)~(7)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>上述本發(fā)明中使用的化合物及它們的優(yōu)選的化合物，可以利用例如下述合成方法來得到。在以下的合成例中，R廣Rs、X與上述式(I)中的取代基R廣R8、X表示相同含義。方法A:在方法A中，在羥基吲哚衍生物(la)中添加二甲?；秽苌?2a)和堿，并在-784(TC下攪拌10分鐘72小時(shí)，進(jìn)行分離和精制，由此可以得到目標(biāo)化合物(3a)。所使用的溶劑，只要不參與本反應(yīng)即可，沒有特別限定，例如為:甲醇、乙醇、正丙醇這樣的醇類溶劑；THF、二嚼院這樣的醚類溶劑；苯、甲苯、二甲苯這樣的芳香族類溶劑；乙腈這樣的腈類溶劑；二氯甲烷這樣的鹵類溶劑；二甲基亞砜(DMSO)或二甲基甲酰胺(DMF)，優(yōu)選為乙醇。作為所使用的堿，可以列舉例如三乙胺、吡啶、哌啶、咪唑等有機(jī)堿類；氫化鋰、氫化鈉等堿金屬或堿土金屬的氫化物類；甲醇鈉、乙醇鈉等堿金屬垸醇類；碳酸鈉、碳酸鉀這樣的堿金屬碳酸鹽類；碳酸氫鈉、碳酸氫鉀這樣的堿金屬碳酸氫鹽類；氫氧化鈉、氫氧化鉀這樣的堿金屬氫氧化物類，優(yōu)選為有機(jī)堿類，更優(yōu)選為哌啶。反應(yīng)溫度通常為-784(TC，優(yōu)選為03(TC。反應(yīng)時(shí)間根據(jù)反應(yīng)溫度而不同，通常為10分鐘24小時(shí)，優(yōu)選為24~48小時(shí)。22M、_|,r~:，*》《n堿I:!*'、HZ闊錢，，,分離和精制采用萃取、濃縮、蒸餾、結(jié)晶、過濾、再結(jié)晶、各種色譜等通常的科學(xué)操作來進(jìn)行，優(yōu)選為過濾。在方法B中，使二甲酰基呋喃衍生物(2b)溶于溶劑中，向其中緩慢添加在溶劑中溶解有羥基吲哚衍生物(lb)的溶液。添加結(jié)束后，在-783(TC下攪拌10分鐘2小時(shí)，進(jìn)行分離和精制，由此可以得到中間體(3b)。然后，在溶劑存在下，在上述中間體(3b)中添加羥基ti引哚衍生物(4b)和堿，在030"C下攪拌10分鐘24小時(shí)，進(jìn)行分離和精制，由此可以得到目標(biāo)化合物(5b)。所使用的溶劑，只要不參與本反應(yīng)即可，沒有特別限定，例如為甲醇、乙醇、正丙醇這樣的醇類溶劑；THF、二噁烷這樣的醚類溶劑；苯、甲苯、二甲苯這樣的芳香族類溶劑；乙腈這樣的腈類溶劑；二氯甲烷這樣的鹵類溶劑；二甲基亞砜(DMSO)或二甲基甲酰胺(DMF)，優(yōu)選為乙醇。作為所使用的堿，可以列舉例如三乙胺、吡啶、哌啶、咪唑等方法B:有機(jī)堿類；氫化鋰、氫化鈉等堿金屬或堿土金屬的氫化物類；甲醇鈉、乙醇鈉等堿金屬垸醇類；碳酸鈉、碳酸鉀這樣的堿金屬碳酸鹽類；碳酸氫鈉、碳酸氫鉀這樣的堿金屬碳酸氫鹽類；氫氧化鈉、氫氧化鉀這樣的堿金屬氫氧化物類，優(yōu)選為有機(jī)堿類，更優(yōu)選為哌啶。反應(yīng)溫度通常為-7840。C，優(yōu)選為030。C。反應(yīng)時(shí)間根據(jù)反應(yīng)溫度而不同，通常為10分鐘24小時(shí)，優(yōu)選為6小時(shí)18小時(shí)。分離和精制采用萃取、濃縮、蒸餾、結(jié)晶、過濾、再結(jié)晶、各種色譜等通常的科學(xué)操作來進(jìn)行，優(yōu)選為過濾。羥基吲哚衍生物可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員常用的方法來合成，例如，N-乙酰基物或羧基取代物可以通過下述方法來合成。N-乙酰基物(2c)的合成:Ft20使羥基吲哚衍生物(lc)溶于醋酸酐中，回流2472小時(shí)后，進(jìn)行分離和精制，由此可以合成N-乙?；?2c)。反應(yīng)時(shí)間根據(jù)反應(yīng)溫度而不同，通常為10分鐘24小時(shí)，優(yōu)選為6小日寸~18小時(shí)。分離和精制采用萃取、濃縮、蒸餾、結(jié)晶、過濾、再結(jié)晶、各種色譜等通常的科學(xué)操作來進(jìn)行，優(yōu)選為過濾。羧基取代物(3d)的合成使氯化鋁(無水)懸浮在二氯甲烷中，進(jìn)行攪拌，向該溶液中添加羥基吲哚衍生物(ld)。向該溶液中滴加氯乙酰氯并攪拌，進(jìn)行分離和精制，由此可以合成氯乙?；〈?2d)。再利用通常的方法，用堿對鍵合在苯基上的氯乙?；M(jìn)行處理，由此可以得到羧基取代物(3d)。反應(yīng)溫度為0~50°C，優(yōu)選為40~50°C。反應(yīng)時(shí)間根據(jù)反應(yīng)溫度而不同，通常為1~5小時(shí)，優(yōu)選為12小時(shí)。分離和精制采用萃取、濃縮、蒸餾、結(jié)晶、過濾、再結(jié)晶、各種色譜等通常的科學(xué)操作來進(jìn)行，優(yōu)選為過濾。羧基取代物(4e)的合成:向氫化鈉中添加DMSO，攪拌的同時(shí)緩慢添加丙二酸二甲酯。向該溶液中添加(le)，進(jìn)行分離精制，由此可以得到二甲酯體(2e)。向二甲酯體(2e)中添加鹽酸溶液，進(jìn)行分離和精制，由此可以得到羧酸物(3e)。用鈀碳將羧酸物(3e)還原，進(jìn)行分離和精制，由此可以得到羥基口引哚乙酯體(4e)。使(4e)溶于乙醇性氫氧化鉀溶液后，再添加鹽酸水溶液，進(jìn)行分離和精制，由此可以得到羧基取代物(5e)。反應(yīng)溫度為0~100°C，優(yōu)選為20~50°C。分離和精制可以采用萃取、濃縮、蒸餾、結(jié)晶、過濾、再結(jié)晶、各種色譜等通常的科學(xué)操作來進(jìn)行。本發(fā)明所使用的化合物的制造中的原料化合物和各種試劑，可以形成鹽或水合物或者溶劑化物，其均根據(jù)初始原料、所使用的溶劑等而不同，另外只要不阻礙反應(yīng)就沒有特別限定。關(guān)于所使用的溶劑，也根據(jù)初始原料、試劑等而不同，另外只要不阻礙反應(yīng)并一定程度地溶解初始物質(zhì)就沒有特別限定。以游離體得到本發(fā)明中使用的化合物時(shí)，可以利用常用方法將其變換成上述化合物可以形成的鹽或它們的水合物的狀態(tài)。以化合物的鹽或水合物得到本發(fā)明中使用的化合物時(shí)，可以利用常用方法將其變換成上述化合物的游離體。另外，由本發(fā)明中使用的化合物得到的各種異構(gòu)體(例如幾何異構(gòu)體、基于手性碳的光學(xué)異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體等)，可以通過使用通常的分離方法例如再結(jié)晶、非對映異構(gòu)體鹽法、酶拆分法、各種色譜法(例如薄層色譜法、柱色譜法、氣相色譜法等)進(jìn)行精制、分離。本發(fā)明中使用的化合物具有激酶抑制活性。該化合物特別具有絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制活性，其中，特別是具有Pim激酶抑制活性。作為Pim激酶抑制活性，可以列舉例如Pim-l激酶抑制活性、Pim-2激酶抑制活性、Pim-3激酶抑制活性等。由于本發(fā)明中使用的化合物具有激酶抑制活性，因此，作為含有該化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽為有效成分的激酶抑制劑、特別是Pim激酶抑制劑是有用的。由于本發(fā)明中使用的化合物具有激酶抑制活性，因此，作為激酶相關(guān)疾病、特別是Pim激酶相關(guān)疾病的預(yù)防和/或治療劑是有效的。作為具體的疾病，可以列舉例如癌、細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)、抗癌劑增強(qiáng)、抗癌劑耐性解除、或者細(xì)胞增殖異常、心功能障礙、心肌梗塞、動脈硬化、閉塞性心血管障礙、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、老年性黃斑變性視網(wǎng)膜病變、神經(jīng)變性疾病、自身免疫病、炎性疾病、糖尿病、病毒性疾病等，其特別是作為癌的預(yù)防和/或治療劑有效地作用。由于本發(fā)明中使用的化合物可以成為誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的藥物，因此，作為由細(xì)胞凋亡抑制引起的疾病、具體例如閉塞性心血管障礙、動脈硬化、心肌梗塞等的預(yù)防和/或治療劑也是有用的。作為抑制本發(fā)明的激酶活性的方法，可以列舉將上述本發(fā)明中使用的化合物的藥物有效劑量向激酶相關(guān)疾病患者給藥的方法。另外，本發(fā)明的激酶相關(guān)疾病的預(yù)防和/或治療方法，包括將上述本發(fā)明中使用的化合物的藥物有效劑量向激酶相關(guān)疾病患者給藥。另外，對于化合物優(yōu)選的形態(tài)如上所述。本發(fā)明的應(yīng)用包括將本發(fā)明中使用的化合物用于激酶抑制劑的制造。并且包括將本發(fā)明中使用的化合物用于激酶相關(guān)疾病的預(yù)防和/或治療劑的制造。將本發(fā)明中使用的化合物與目前具有抗癌效果的化合物、例如順鉬、5-氟尿嘧啶、吉西他濱、多柔比星(阿霉素)等并用時(shí)，特別是抗癌效果顯著增強(qiáng)。因此，作為本發(fā)明的其它方式，可以列舉將本發(fā)明中使用的化合物與化學(xué)療法治療劑組合而成的并用癌癥治療劑。這樣的并用癌癥治療劑，可以是上述式中任一種表示的化合物或其優(yōu)選方式中任一種表示的化合物與公知的具有抗癌效果的化合物(抗癌化合物)的配合劑，也可以是由包含上述式中任一種表示的化合物或其優(yōu)選方式的藥物與包含公知的具有抗癌效果的化合物的藥物(化學(xué)療法治療劑)構(gòu)成的試劑盒(kit)。本發(fā)明中使用的化合物可以直接給藥，或者與用于促進(jìn)吸收的輔助劑等生理學(xué)上認(rèn)可的載體一同形成制劑來給藥。將上述化合物用于激酶相關(guān)疾病的預(yù)防和/或治療時(shí)，優(yōu)選使用優(yōu)選卯。/。、更優(yōu)選95%以上、進(jìn)一步優(yōu)選98%以上、最優(yōu)選99%以上進(jìn)行精制而成的化合物。對上述化合物而言，例如，根據(jù)需要，可以作為外包有糖衣的片劑、膠囊劑、酏劑、微囊劑等口服使用，或者進(jìn)行氣霧化以吸入劑的形式、或以與水或者其以外的藥學(xué)上可接受的液體的無菌性溶液或混懸液制劑等注射劑的形式非口服地使用。例如，可以在通常認(rèn)可的制劑制造中所要求的單位用量形態(tài)下將本發(fā)明的化合物與生理學(xué)上可接受的載體、增香劑、賦形劑、媒介物(vehicle)、防腐劑、穩(wěn)定劑、粘合劑等一同混合來制造。這些制劑中的有效成分量是以得到指定范圍的適當(dāng)?shù)挠昧康姆绞竭M(jìn)行設(shè)定。作為可以混合在片劑、膠囊劑等中的添加劑，例如使用明膠、玉米淀粉、黃蓍膠、阿拉伯膠等粘合劑；結(jié)晶纖維素等賦形劑；玉米淀粉、明膠、海藻酸等膨化劑；硬脂酸鎂等潤滑劑；蔗糖、乳糖或糖精等甜味劑；薄荷、白珠樹(7力壬7)油或櫻桃等增香劑等。在制劑單位形態(tài)為膠囊時(shí)，上述類型的材料中可以進(jìn)一步含有油脂等液狀載體。注射劑可以通過使本發(fā)明的多肽在注射劑通常使用的無菌的水性或者油性液中溶解、懸浮或者乳化來制備。作為注射用的水性液，可以使用例如生理鹽水、葡萄糖或包含其它輔助藥物的等張溶液等，也可以并用適當(dāng)?shù)娜芙廨o助劑例如醇(例如乙醇)、多元醇(例如丙二醇、聚乙二醇)、非離子表面活性劑[例如聚山梨酸酯80、HCO-50(氫化蓖麻油的聚氧乙烯(50摩爾)加合物)]等。作為油性液，可以使用例如芝麻油、大豆油等，作為溶解輔助劑，也可以并用苯甲酸芐酯、芐醇等。另外，還可以配合緩沖劑(例如磷酸鹽緩沖液、醋酸鈉緩沖液等)、止痛劑(例如苯扎氯銨、鹽酸普魯卡因等)、穩(wěn)定劑(例如人體血清白蛋白、聚乙二醇等)、保存劑(例如芐醇、酚等)、抗氧化劑等。制備的注射液通常裝填在適當(dāng)?shù)陌碴持?。由于由此得到的制劑安全且為低毒性，因此，可以例如向恒溫動?例如人、大鼠、小鼠、土撥鼠、兔子、鳥、羊、豬、牛、馬、貓、狗、猴、猩猩等)給藥，可以用作癌的預(yù)防和/或治療劑、細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑或抗癌劑增強(qiáng)劑、或者用于細(xì)胞增殖異常、心功能障礙、心血管障礙、心肌梗塞、動脈硬化、閉塞性心血管障礙、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、老年性黃斑變性視網(wǎng)膜病變、神經(jīng)變性疾病、自身免疫病、炎性疾病、糖尿病、病毒性疾病的預(yù)防和/或治療。給藥量根據(jù)疾病的種類、癥狀的程度、患者的年齡、性別差異、對藥物的敏感性差異等而明顯不同，通常，成人以每1日分為1-數(shù)次給藥約0.03-1000mg、優(yōu)選0.1-500mg、進(jìn)一步優(yōu)選0.1-100mg。在注射劑的情況下，通常為約1itig/kg-3000嗎/kg、優(yōu)選為約3嗎/kg-1000嗎/kg。另外，本說明書中引用的所有之前的技術(shù)文獻(xiàn)均作為參照編入到本說明書中。圖1-1是表示化合物(l)的Pim-l激酶抑制活性的圖。柱狀圖表示化合物(l)的Pim-l激酶抑制活性的濃度依賴性，橫軸表示化合物的濃度OiM)，縱軸表示波長450nm處的吸光度，代表Pim-l激酶活性。曲線圖是用于解析化合物(l)的Pim-l激酶抑制活性的IC50的圖，橫軸表示化合物的濃度(liM)，縱軸表示將DMSO溶劑對照設(shè)為100%時(shí)Pim-l激酶活性抑制率(％)。圖1-2是表示化合物(2)的Pim-l激酶抑制活性的圖。柱狀圖表示化合物(2)的Pim-l激酶抑制活性的濃度依賴性，橫軸表示化合物的濃度((iM)，縱軸表示波長450nm處的吸光度，代表Pim-l激酶活性。曲線圖是用于解析化合物(2)的Pim-l激酶抑制活性的IC50的圖，縱軸表示化合物的濃度OiM)，縱軸表示將DMSO溶劑對照設(shè)為100M時(shí)Pim-l激酶活性抑制率(％)。圖1-3是表示化合物(3)的Pim-l激酶抑制活性的圖。柱狀圖表示化合物(3)的Pim-l激酶抑制活性的濃度依賴性，橫軸表示化合物的濃度OiM)，縱軸表示波長450nm處的吸光度，代表Pim-l激酶活性。曲線圖是用于解析化合物(3)的Pim-l激酶抑制活性的IC50的圖，縱軸表示化合物的濃度OiM),縱軸表示將DMSO溶劑對照設(shè)為100。/。時(shí)Pim-l激酶活性抑制率(％)。圖1-4是表示化合物(9)的Pim-l激酶抑制活性的圖。柱狀圖表示化合物(9)的Pim-l激酶抑制活性的濃度依賴性，橫軸表示化合物的濃度OiM)，縱軸表示波長450nm處的吸光度，代表Pim-l激酶活性。曲線圖是用于解析化合物(9)的Pim-l激酶抑制活性的IC50的圖，縱軸表示化合物的濃度OiM)，縱軸表示將DMSO溶劑對照設(shè)為100。/。時(shí)Pim-l激酶活性抑制率(％)。圖1-5是表示化合物(10)的Pim-l激酶抑制活性的圖。柱狀圖表示化合物(10)的Pim-l激酶抑制活性的濃度依賴性，橫軸表示化合物的濃度OiM)，縱軸表示波長450nm處的吸光度，代表Pim-l激酶活性。曲線圖是用于解析化合物(10)的Pim-l激酶抑制活性的IC50的圖，縱軸表示化合物的濃度OiM)，縱軸表示將DMSO溶劑對照設(shè)為100%時(shí)Pim-l激酶活性抑制率(％)。圖1-6是表示化合物(7)的Pim-l激酶抑制活性的圖。柱狀圖表示化合物(7)的Pim-l激酶抑制活性的濃度依賴性，橫軸表示化合物的濃度OiM)，縱軸表示波長450nm處的吸光度，代表Pim-l激酶活性。曲線圖是用于解析化合物(7)的Pim-l激酶抑制活性的IC50的圖，縱軸表示化合物的濃度OiM)，縱軸表示將DMSO溶劑對照設(shè)為100y。時(shí)Pim-l激酶活性抑制率(％)。圖2-1是表示化合物(l)對胰腺癌細(xì)胞株(MiaPaCa-2)的細(xì)胞抑制性的圖，橫軸表示化合物的濃度OM),縱軸為波長4卯nm處的吸光度值，表示活細(xì)胞數(shù)，代表抑制活性。另外，圖中的CDDP表示比較對象順鉑。圖2-2是表示化合物(1)對肺癌細(xì)胞株(A549)的細(xì)胞抑制性的圖，橫軸表示化合物的濃度OiM)，縱軸為波長490nm處的吸光度值，表示活細(xì)胞數(shù)，代表抑制活性。另外，圖中的CDDP表示比較對象順鉑。圖2-3是表示化合物(l)對口腔鱗狀上皮癌細(xì)胞株(HSC-3)的細(xì)胞抑制性的圖，橫軸表示化合物的濃度()iM)，縱軸為波長490nm處的吸光度值，表示活細(xì)胞數(shù)，代表抑制活性。另外，圖中的CDDP表示比較對象順鉑。圖2-4是表示化合物(l)對食道鱗狀上皮癌細(xì)胞株(T.Tn)的細(xì)胞抑制性的圖，橫軸表示化合物的濃度OiM)，縱軸為波長490nm處的吸光度值，表示活細(xì)胞數(shù)，代表抑制活性。另外，圖中的CDDP表示比較對象順鉑。圖2-5是表示化合物(l)對子宮癌細(xì)胞株(HeLa)的細(xì)胞抑制性的圖，橫軸表示化合物的濃度OiM)，縱軸為波長490nm處的吸光度值，表示活細(xì)胞數(shù)，代表抑制活性。圖2-6是表示化合物(1)對正常腎細(xì)胞株(293)的細(xì)胞抑制性的圖，橫軸表示化合物的濃度OiM)，縱軸為波長490nm處的吸光度值，表示活細(xì)胞數(shù)，代表抑制活性。圖3的柱狀圖是表示化合物(l)對前列腺癌細(xì)胞株(PC-3)的細(xì)胞抑制性的圖，橫軸表示化合物的濃度OiM)，縱軸為波長4卯nm處的吸光度值，表示活細(xì)胞數(shù)，代表抑制活性。曲線圖為觀察活細(xì)胞數(shù)的經(jīng)時(shí)變化的圖，橫軸為時(shí)間(小時(shí))，縱軸為波長490nm處的吸光度值，表示活細(xì)胞數(shù)，代表細(xì)胞致死效果。圖4-1的柱狀圖是表示化合物(2)對胰腺癌細(xì)胞株(BxPC-3)的細(xì)胞抑制性的圖，橫軸表示化合物的濃度OiM)，縱軸為波長490nm處的吸光度值，表示活細(xì)胞數(shù)，代表抑制活性。曲線圖為觀察活細(xì)胞數(shù)的經(jīng)時(shí)變化的圖，橫軸為時(shí)間(小時(shí))，縱軸為波長490nm處的吸光度值，表示活細(xì)胞數(shù)，代表細(xì)胞增殖抑制以及細(xì)胞致死效果。圖4-2的柱狀圖是表示化合物(2)對肺癌細(xì)胞株(A549)的細(xì)胞抑制性的圖，橫軸表示化合物的濃度(liM)，縱軸為波長490nm處的吸光度值，表示活細(xì)胞數(shù)，代表抑制活性。曲線圖為觀察活細(xì)胞數(shù)的經(jīng)時(shí)變化的圖，橫軸為時(shí)間(小時(shí))，縱軸為波長490nm處的吸光度值，表示活細(xì)胞數(shù)，代表細(xì)胞增殖抑制以及細(xì)胞致死效果。圖4-3的柱狀圖是表示化合物(2)對食道鱗狀上皮癌細(xì)胞株(T.Tn)的細(xì)胞抑制性的圖，橫軸表示化合物的濃度OiM)，縱軸為波長490nm處的吸光度值，表示活細(xì)胞數(shù)，代表抑制活性效果。曲線圖為觀察活細(xì)胞數(shù)的經(jīng)時(shí)變化的圖，橫軸為時(shí)間(小時(shí))，縱軸為波長490nm處的吸光度值，表示活細(xì)胞數(shù)，代表細(xì)胞增殖抑制以及細(xì)胞致死效果。具體實(shí)施例方式以下列舉實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行更具體地說明，但本發(fā)明不限定于這些實(shí)施例。以下使用的羥基吲哚、二甲?；秽仍匣衔锸枪模?，作為市售品可以容易地獲得羥基吲哚(東京化成、002721)、二甲?；秽?東京化成、D2408)。實(shí)施例1(3E)-3-[(5-((E)-(2-吲哚酮-3-甲叉基)甲基)呋喃-2-基)亞甲基]卩引哚啉-2-酮(1)將羥基吲哚(l當(dāng)量)、二甲?；秽?0.5當(dāng)量)及哌啶(0.2當(dāng)量)每lpmol溶于lmL的乙醇中，在室溫下攪拌12小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，過濾析出物，用冷卻的乙醇清洗數(shù)次，并進(jìn)行干燥，以45%的收率得到目標(biāo)化合物。'H-畫R(d-DMSO,400Mz):13.20(s,1H),13.18(s'1H),11,01(d,J=7.84Hz，16H)，10,98(d,J=3.92Hz)'10.43(d'J二7.84Hz，1H),10.10(d,J=7.35Hz,1H)，10.08(s'1H),9.96(d'J=3.92Hz'1H)'9.82(s,1H)，9.80-9.65(m，2H)'9.52(t，J=7.84Hz,IH-),9.37(t,J=7,84Hz'IH)，9.11(t,J=7.84Hz，IH)、MSm/z:355(M)實(shí)施例2(3E)-l-乙?；?3-[((5EH(l-乙?；?2-吲哚酮-3-甲叉基)甲基)呋喃-2-基)亞甲基]吲哚啉-2-酮(2)將羥基吲哚(l當(dāng)量)溶于醋酸酐中，加熱回流3天。冷卻后，將反應(yīng)液注入冰水中，過濾析出物，水洗后進(jìn)行干燥，得到1-乙?；u基吲哚。通過與實(shí)施例1相同的方法，由1-乙?；u基吲哚和二甲?；秽玫侥繕?biāo)物。NMR(d—DMSO，400Mz):11.05(d,J=7.84Hz，1H),11.00(d，J=3,92Hz),10.646(d,J=7.84Hz,1H)，10.13(d,J=7.35Hz,IH)'10.04(s,IH)'9,94(d，J=3.92Hz，IH),9.80(s，IH)'9.78-9,63(m,2H),9.43(t,J=7.84Hz,IH-),9.30(t，J=784Hz,IH)'9.08(t,J=7.84Hz，IH),2.38(s,3H)'2.36(s,3H)。MSm/z:438(M)+。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage34</formula>實(shí)施例3(3E)-3-((5-((E)-(l-乙?；?2-吲哚酮-3-甲叉基)甲基)呋喃-2-基)亞甲基)B引哚啉-2-酮(3)將二甲酰基呋喃(l當(dāng)量)溶于乙醇中，向其中緩慢添加在乙醇中溶解有羥基吲哚(0.5當(dāng)量)及哌啶(O.l當(dāng)量)的溶液。添加結(jié)束后，在室溫下攪拌2小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，過濾析出物并除去，向?yàn)V液中添加丙酮，并用1N-鹽酸溶液使其呈酸性，在減壓下進(jìn)行干燥固化，得到5-((E)-(口引哚啉-3-甲叉基)甲基)呋喃-2-甲醛(收率31%)。然后將5-((￡)-(吲哚啉-3-甲叉基)甲基)呋喃-2-甲醛(1.2當(dāng)量)、l-乙酰基羥基吲哚(l當(dāng)量)及哌啶(0.1當(dāng)量)溶于乙醇中，在室溫下攪拌12小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，過濾析出物，用冷乙醇清洗，并進(jìn)行干燥，得到目標(biāo)物。NMR(d—DMSO,400Mz):10.68(d，J=7.84Hz,1H),10.62(d'J=3.92Hz'1H),160.45(s,1H),8.51(m,1H),8.02(t,J=8.55Hz'IH)，8.01(s，IH),7.52(s,lH)，7.05(d,J=3.66Hz,IH),6.88(d,J=8.55Hz，IH),6.83(t，J=7.08Hz),6.61(t,J=7.57,IH)'6.51(t，J=7.57Hz，IH),2.67(s，3H)、MSm/z:396(M)+。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage35</formula>實(shí)施例4(3E)-3-[(5-((E)-(5-羧基-2-吲哚酮-3-甲叉基)甲基)呋喃-2-基)亞甲基]-2-吲哚酮-5-羧酸(4)冰冷卻下，使氯化鋁(無水)(3.5當(dāng)量)懸浮于二氯甲垸中，進(jìn)行攪拌，向該溶液中添加羥基吲哚(l當(dāng)量)。向該溶液中緩慢滴加氯乙酰氯(2當(dāng)量)，在氯化氫氣體的產(chǎn)生結(jié)束后攪拌約IO分鐘。其后，將反應(yīng)液加熱至405(TC，攪拌2小時(shí)。冷卻后，將反應(yīng)液注入到冰水中，過濾析出物，水洗后進(jìn)行干燥，得到5-氯乙?；胚徇?2-酮。將5-氯乙?；胚徇苡谶拎ぶ?，在809(TC下加熱攪拌3小時(shí)。冷卻后，過濾析出物，用乙醇清洗數(shù)次，將該析出物溶于2.5N氫氧化鈉中，在70~75'C下進(jìn)行攪拌。冷卻后，用鹽酸使反應(yīng)液呈酸性，過濾析出物，水洗、干燥，得到5-羧基吲哚啉-2-酮。通過與實(shí)施例1相同的方法，由5-羧基吲哚啉-2-酮和二甲酰基呋喃得到目標(biāo)物。^-畫R(d-DMSO'400Mz):12.30(s,br,2H),11.15(d'J=7.84Hz，1H),11.02(d6，J=3.92Hz)，10.46(d'J=7.84Hz'1H),10.13(d,J=7,35Hz'1H)'10.04(s,1H)'9.98(d'J=3.92Hz，1H),9.80(s'1H)'9.88-9.73(m，2H)，9.53(t,J=7.84Hz,1H)，MSm/z:442(M)+。實(shí)施例5(3E)-3-[(5-((E)-(5-羧基-2-吲哚酮-3-甲叉基)甲基)呋喃-2-基)亞甲基]-2-吲哚酮-5-羧酸二鈉(8)將化合物(4)(1當(dāng)量)和氫氧化鈉(2當(dāng)量)溶于乙醇中，過濾析出物，用乙醇清洗數(shù)次，并進(jìn)行干燥，由此得到上述化合物(4)的鈉鹽。實(shí)施例6(3E)-3-((5-((E)-(l-乙?；?2-吲哚酮-3-甲叉基)甲基)呋喃-2-基)亞甲基)-2-吲哚酮-5-羧酸(5)將5-羧基吲哚啉-2-酮(1當(dāng)量)和3-((5-甲?；秽?2-基)亞甲基)-^乙?；?2-吲哚酮(1.2當(dāng)量)和哌啶(0.2當(dāng)量)每lpmol溶解于lmL的乙醇中，在室溫下攪拌2小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，過濾析出物，用冷卻的乙醇清洗數(shù)次，并進(jìn)行干燥，得到目標(biāo)化合物。LH-NMR(d-DMSO'400Mz):9.41(s'1H)'9.39(s，1H),8.42(d,J=3.91Hz,1H)'8.632(d'J=3.91Hz'1H),8.07(s，1H)'7.98(s,1H),7.92(d'J=8,05Hz,1H)，7.82(d，』=8.05Hz，1H),7.60(s,1H)'7.55(dd,J=8.21Hz,1.72Hz,IH),7.36(d'J=7.22Hz,IH)'7.26(d'J=7.22Hz'IH)'6.87(m'IH)，2.66(s'3H)、MSm/z:440(M)1CO。H/eow3.(5》實(shí)施例7(3E)-3-((5-((E)-(l-乙?；?2-吲哚酮-3-甲叉基)甲基)呋喃-2-基)亞甲基)-2-吲哚酮-5-羧酸鈉(9)將化合物(5)(1當(dāng)量)和氫氧化鈉(l當(dāng)量)溶于乙醇中，過濾析出物，用乙醇清洗數(shù)次，并進(jìn)行干燥，由此得到上述化合物(5)的鈉鹽(9)。說COOWa實(shí)施例8(3E)-3-((5-((E)-(l-乙?；?2-吲哚酮-3-甲叉基)甲基)呋喃-2-基)亞甲基)-2-吲哚酮-6-羧酸(6)1.將4-氟-3-硝基苯甲酸1當(dāng)量溶解于乙醇5.3當(dāng)量中，添加濃硫酸0.25當(dāng)量，加熱回流5小時(shí)。將反應(yīng)液冷卻后，在減壓下將反應(yīng)液濃縮至約一半的量，向其中添加碳酸鈉進(jìn)行中和后，用乙醚對其萃取3次。萃取液用飽和食鹽水清洗，接著用水清洗，用無水硫酸鈉干燥乙醚層，之后在減壓下進(jìn)行干燥固化，得到4-氟-3-硝基苯甲酸乙酯。2.在用己烷脫脂后的氫氧化鈉0.98g中添加無水二甲基亞砜30mL，在室溫下在該溶液中進(jìn)行攪拌的同時(shí)緩慢添加丙二酸二甲酯2.98g。滴加結(jié)束后，在IO(TC下攪拌1小時(shí)。將該溶液冷卻至室溫，向其中添加4-氟-3-硝基苯甲酸乙酯3g(14mmo1)，在室溫下攪拌30分鐘后，在IO(TC下攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)液冷卻后，向反應(yīng)液中添加飽和氯化銨，用醋酸乙酯萃取。用飽和食鹽水、水依次清洗醋酸乙酯層，用無水硫酸鈉進(jìn)行干燥，之后在減壓下進(jìn)行干燥固化，得到4-(二(甲氧基羰基)甲基)-3-硝基苯甲酸乙酯。3.向4-(二(甲氧基羰基)甲基)-3-硝基苯甲酸乙酯5.58g中添加6N鹽酸溶液9mL，加熱回流12小時(shí)。將反應(yīng)液冷卻后，向反應(yīng)液中添加水，過濾析出物并除去，濾液用乙醚萃取。將乙醚層水洗后，用無水硫酸鈉進(jìn)行干燥，之后在減壓下進(jìn)行干燥固化，得到4-(羧基甲基)-3-硝基苯甲酸乙酯。4.使4-(羧基甲基)-3-硝基苯甲酸乙酯4g(15.8mmol)和10%靶碳0.45g懸浮在醋酸15mL中，在氫氣氛圍下，在室溫下攪拌23小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，向反應(yīng)液中添加水，進(jìn)行過濾，除去不溶物，用氯仿進(jìn)行萃取。在減壓下將氯仿層干燥固化，向其中添加水，將析出的2-吲哚酮-6-羧酸乙酯過濾而得到。5.將2-吲哚酮-6-羧酸乙酯300mg溶于乙醇性氫氧化鉀溶液4mL中，在100"C下攪拌6小時(shí)。將反應(yīng)液冷卻至室溫，添加6N鹽酸水溶液lmL，使其呈酸性，然后再在IO(TC下加熱IO分鐘。將反應(yīng)液冷卻后，過濾析出的2-吲哚酮-6-羧酸。6.將N-乙酰基羥基吲哚(l當(dāng)量)、5-羥甲基-2-糠醛(0.5當(dāng)量)和哌啶(0.2當(dāng)量)每lpmol溶于lmL的乙醇中，在室溫下攪拌12小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，過濾析出物，用冷卻的乙醇清洗數(shù)次，并進(jìn)行干燥，得到3-((5-羥甲基)呋喃-2-基)亞甲基)-N-乙酰基-2-吲哚酮。7.將3-((5-羥甲基)呋喃-2-基)亞甲基)-N-乙?；?2-吲哚酮1當(dāng)量和氯鉻酸吡啶1.5當(dāng)量溶解于二氯甲烷中，在室溫下攪袢2小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，在減壓下將反應(yīng)液干燥固化，向殘留物中添加醋酸乙酯，將不溶物進(jìn)行硅藻土過濾，在減壓下將濾液干燥固化，得到目標(biāo)物。8.將2-吲哚酮-6-羧酸(1當(dāng)量)和3-((5-甲酰基呋喃-2-基)亞甲基)-N-乙?；?2-吲哚酮(1.2當(dāng)量)和哌啶(0.2當(dāng)量)每lpmol溶于lmL的乙醇中，在室溫下攪拌2小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，過濾析出物，用冷卻的乙醇清洗數(shù)次，并進(jìn)行干燥，得到(3E)-3-((5-((E)-(l-乙?；?2-吲哚酮-3-甲叉基)甲基)呋喃-2-基)亞甲基)-2-卩引哚酮-6-羧酸(6)。^-醒R(d-DMSO，400Mz):10.72(s，br,1H)'8.77(s，1H)，8.40(d，J=3.91Hz，1H6),8.25(m,1H)，8.03(s,1H)，8.17(t,J=7.81Hz，1H),7.90(s，1H)，7.71(s,1H)，7,65(d，J=3.91Hz，1H)，7.63(d，J=7,80Hz，1H)，7.60(d，J=7.80Hz，1H)，7.11(d'J=7.80Hz，1H)，6.88(t，J=7.81Hz，1H)，2.66(s，3H)、MSm/z:440(M)+。實(shí)施例9(3E)-3-((5-((E)-(l-乙?；?2-吲哚酮-3-甲叉基)甲基)呋喃-2-基)亞甲基)-2』引哚酮-6-羧酸鈉(10)將化合物(6)(1當(dāng)量)和氫氧化鈉(l當(dāng)量)溶于乙醇中，過濾析出物，用乙醇清洗數(shù)次，并進(jìn)行干燥，由此得到上述化合物(6)的鈉鹽(10)。OXH3(6》NaOOCcoca《10〕實(shí)施例10(3E)-l-丁?；?3-[((5E)-((l-丁酰基-2-吲哚酮-3-甲叉基)甲基)呋喃-2-基)亞甲基]吲哚啉-2-酮(7)將羥基吲哚(7.56mmol)溶于丁酸酐(11.39mmol)中，在12(TC下加熱攪拌24小時(shí)。冷卻后，將反應(yīng)液注入冰水中，過濾析出物，水洗后進(jìn)行干燥，得到l-丁?；胚徇?2-酮。將1-丁?；胚徇?2-酮(1當(dāng)量)、二甲?；秽?0.5當(dāng)量)和哌啶(0.2當(dāng)量)每lpmol溶于lmL的乙醇中，在室溫下攪拌12小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，過濾析出物，用冷卻的乙醇清洗數(shù)次，并進(jìn)行干燥，得到目標(biāo)化合物。丄H—NMR(d_DMSO，400Mz):11.02(d'J=7.84Hz,1H)'10.98(d'J二3.92Hz)，10.636(d，J=7.84Hz,1H),10.23(d，J=7.35Hz'IH)'9.98(s'IH)，9.90(d,J=3.92Hz,1H),9.76(s，1H),9.76-9.62(m，2H),9.41(t,J=7.84Hz'1H-),9.27(t'J=7.84Hz,IH)，9.07(t,J=7.84Hz，1H),2.23(m，4H)'1.82(m，4H),1.02(m'6H)、MSm/z:494(M)+。實(shí)施例11為鑒定新型Pim-1激酶抑制劑，利用在體外的Pim-1激酶測定系統(tǒng)(參照以下)，通過絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制化合物衍生物(library)(ChemDiv公司制)來尋找抑制劑候補(bǔ)化合物。以得到的候補(bǔ)化合物的結(jié)構(gòu)活性相關(guān)的信息為基礎(chǔ)，進(jìn)行超過55種化合物的合成，得到表l所示的6個(gè)新型化合物(1)、(2)、(3)、(9)、(10)、(7)。研究這些新型化合物對Pim-l活性抑制的敏感度(IC50:50%活性抑制濃度)和濃度依賴性(使用下述的系統(tǒng))。如圖1所示，新型化合物(l)和(2)在lnM100nM的范圍、(3)在0.1(iM10^M的范圍、(9)和(10)在0.15pM5^iM的范圍、另外(7)在0.0078^iM1jiM的范圍中顯示濃度依賴性的抑制效果。對50。/。抑制濃度(IC50)而言，(1)、(2)、(3)、(9)、(10)、(7)分別為50nM，10nM，0.8,，1.4|iM，0.58拜，0.026,，表明在低濃度下抑制Pim-l激酶活性。在體外的Pim-l激酶活性測定系統(tǒng)(1)向激酶緩沖液中添加生物素化后的Pim-l磷酸化基質(zhì)p21肽(lmM)和重組GST-Pim-l激酶(18嗎/ml)。(2)添加被檢化合物(溶解于2%DMSO中)或者2%DMSO(溶劑對照)。(3)添加ATP(10pM)，在25。C下進(jìn)行30分鐘培養(yǎng)(incubation)(激酶反應(yīng)開始)。(4)添加EDTA(1OmM)，終止反應(yīng)。(5)在用抗生物素蛋白涂布后的96孔板(完成模塊化(blocking))上添加激酶反應(yīng)液10pl，在室溫下培養(yǎng)60分鐘。(6)用清洗用緩沖液清洗孔3次。(7)以10(Hil/孔添加磷酸化p21(Thrl45)識別抗體稀釋液(l:500)，培(8)用清洗用緩沖液清洗孔3次。(9)以100^1/孔添加過氧化物酶(HRP)識別二次抗體稀釋液(1:2000)，培養(yǎng)60分鐘。(10)用清洗用緩沖液清洗孔5次。(11)添加過氧化物酶的基質(zhì)(TMB)，培養(yǎng)8分鐘，用2MH2S04終止反應(yīng)，用酶標(biāo)儀進(jìn)行比色定量(OD450)。新型Pim-l激酶抑制化合物表1樣品ID結(jié)構(gòu)(1)(2)n。o<table>tableseeoriginaldocumentpage44</column></row><table>抑制性(細(xì)胞增殖抑制、細(xì)胞致死)。以3~5000個(gè)細(xì)胞/孔的濃度在96孔板上接種各種癌細(xì)胞株，次日，以新型化合物濃度為0100(iM(溶劑DMSO為0.5%)進(jìn)行添加，培養(yǎng)24~72小時(shí)。培養(yǎng)后，用MTS法(CellTiter96Aqueous單溶液細(xì)胞增殖分析(OneSolutionCellProliferationAssay)，Promega公司)求出f舌細(xì)胞數(shù)，由此可以考察出對癌細(xì)胞的細(xì)胞抑制性。在此，所謂MTS法，是利用四唑化合物(MTS)通過活細(xì)胞的氧化還原酶而變換成顯色性的甲臜(formazane)產(chǎn)物的活細(xì)胞數(shù)計(jì)算法。測定法中，在lOOpl的培養(yǎng)基中，在包含樣品細(xì)胞的96孔板的各孑L中添力口20^1的CellTiter96AqueousOneSolutionReagent(光敏感的試劑)，在37。C的培養(yǎng)器中培養(yǎng)90120分鐘，使用96孔板儀(96WellPlateReader)測定490nm處的吸光度。如圖2所示，對于胰腺癌細(xì)胞株(MiaPaCa-2)、肺癌細(xì)胞株(A549)、口腔鱗狀上皮癌細(xì)胞株(HSC-3)、食道鱗狀上皮癌細(xì)胞株(T.Tn)、子宮癌細(xì)胞株(HeLa)、正常腎細(xì)胞株(293)，化合物(l)在100pM、10pM時(shí)表現(xiàn)出顯著的細(xì)胞抑制性，根據(jù)細(xì)胞株的不同，即使在1^M時(shí)也表現(xiàn)出顯著的細(xì)胞抑制性。另夕卜，如圖3所示，通過對前列腺癌細(xì)胞株(PC-3)的經(jīng)時(shí)觀察，確認(rèn)化合物(l)具有細(xì)胞致死效果。另外，如圖4所示，確認(rèn)化合物(2)對胰腺癌細(xì)胞株(BxPC-3)、肺癌細(xì)胞株、食道鱗狀上皮癌細(xì)胞株也具有細(xì)胞增殖抑制及細(xì)胞致死效果。產(chǎn)業(yè)上的可利用性的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，由于具有優(yōu)異的抗癌作用、激酶抑制作用、細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)能力，因此，作為藥物、例如癌、心功能障礙、心肌梗塞、動脈硬化、閉塞性心血管障礙、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、老年性黃斑變性視網(wǎng)膜病變、神經(jīng)變性疾病、自身免疫病、炎性疾病、糖尿病或病毒性疾病的治療藥物、預(yù)防藥物是有用的。另外，含有具有上述通式(I)的化合物作為有效成分的激酶抑制劑也可以用作這些各種疾病的治療或預(yù)防劑。權(quán)利要求1.一種化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中，所述化合物用下述通式(I)表示，式(I)中，R1-R8表示氫原子、鹵原子、羥基、C1-C6烷基、C2-C8鏈烯基、C1-C6烷基羰基或-COOR9，其中，R9表示氫原子、C1-C6烷基或C2-C8鏈烯基，X表示硫原子、氧原子或NR10，其中，R10表示氫原子、鹵原子、羥基、C1-C6烷基、C2-C8鏈烯基或C1-C6烷氧基。2.如權(quán)利要求1所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中，Rj、R2、R4、R5分別獨(dú)立地為氫原子或COOR9，其中，R9表示氫原子、C1-C6烷基或C2-C8鏈烯基。3.如權(quán)利要求1或2所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中，R3、R6分別獨(dú)立地為氫原子或C1-C6烷基羰基。4.如權(quán)利要求1~3中任一項(xiàng)所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中，R7、Rs為氫原子。5.如權(quán)利要求1~4中任一項(xiàng)所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中，x為氧原子。6.由下述式(1)(7)表示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>7.—種激酶抑制劑，其含有權(quán)利要求16中任一項(xiàng)所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽作為有效成分。8.如權(quán)利要求7所述的激酶抑制劑，其中，所述激酶抑制劑為Pim激酶抑制劑。9.如權(quán)利要求7或8所述的激酶抑制劑，其中，所述激酶抑制劑為細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑。10.—種激酶相關(guān)疾病的預(yù)防和/或治療劑，其中，含有權(quán)利要求16中任一項(xiàng)所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽作為有效成分。11.如權(quán)利要求10所述的預(yù)防和/或治療劑，其中，所述激酶相關(guān)疾病為癌、細(xì)胞增殖異常、心功能障礙、心肌梗塞、動脈硬化、閉塞性心血管障礙、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、老年性黃斑變性視網(wǎng)膜病變、神經(jīng)變性疾病、自身免疫病、炎性疾病、糖尿病或病毒性疾病。12.如權(quán)利要求11所述的預(yù)防和/或治療劑，其中，所述癌為實(shí)體癌。13.—種激酶相關(guān)疾病的預(yù)防和/或治療方法，其中，包括將有效劑量的權(quán)利要求1~6中任一項(xiàng)所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽向激酶相關(guān)疾病的患者給藥。14.一種權(quán)利要求1~6中任一項(xiàng)所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的應(yīng)用，其中，用于激酶相關(guān)疾病的預(yù)防和/或治療劑的制造。全文摘要本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽用下述通式(I)表示，式中，R₁-R₈可以在取代基中具有氫原子、鹵原子、羥基、C1-C6烷基、C2-C8鏈烯基、C1-C6烷基羰基或-COOR₉(式中，R₉表示氫原子、C1-C6烷基或C2-C8鏈烯基)，X表示硫原子、氧原子或NR₁₀(式中，R₁₀表示氫原子、鹵原子、羥基、C1-C6烷基、C2-C8鏈烯基或C1-C6烷氧基)。文檔編號C07D405/14GK101535302SQ20078004124公開日2009年9月16日申請日期2007年11月5日優(yōu)先權(quán)日2006年11月6日發(fā)明者小林正孝,忍典昭,盛孝男,軍邵申請人:株式會社泰麗巴镠斯