專利名稱：作為抗糖尿病藥的含噻吩基的吡喃葡糖基衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有對抗小腸或腎臟中出現(xiàn)的鈉依賴性葡萄糖轉(zhuǎn)運(SGLT)的抑制活性的新化合物。

背景技術(shù)：
飲食療法和運動療法是糖尿病治療中的基本方法。當這些方法不能有效控制患者的病癥時，胰島素或口服降糖藥作為另外的方法用于治療糖尿病。目前，被用作降糖藥的有雙胍類化合物、磺酰脲類化合物、胰島素抵抗改善劑和α-葡萄糖苷酶抑制劑。然而，這些降糖藥均具有不同的副作用。例如，雙胍類化合物引起乳酸酸中毒，磺酰脲類化合物導致嚴重的低血糖，胰島素抵抗改善劑引起水腫和心衰、而α-葡萄糖苷酶抑制劑引起腹脹和腹瀉。在這樣的情況下，渴望開發(fā)沒有此類副作用的治療糖尿病的新藥。
最近，有報道稱高血糖參與了糖尿病的發(fā)生和進行性損害的過程，即，萄萄糖毒性理論。也就是說，慢性高血糖導致胰島素分泌減少，并進而導致胰島素敏感性降低，其結(jié)果是血糖濃度增高，因此糖尿病是自我惡化的疾病[cf.，Diabetologia，vol.28，p.119(1985)；Diabetes Care，vol.13，p.610(1990)等]。因此，通過治療高血糖，前述的自我惡化的循環(huán)將被中止，這樣，使預防或治療糖尿病成為可能。
通常認為作為一種治療高血糖的方法，是將過量的葡萄糖直接排泄到尿中以使血糖濃度正常。例如，通過抑制存在于腎近曲小管的鈉依賴性葡萄糖轉(zhuǎn)運，抑制腎臟的葡萄糖重吸收，這樣可促進過量的葡萄糖向尿中排泄，從而降低血糖的濃度。事實上，通過給糖尿病動物模型持續(xù)皮下注射具有SGLT抑制活性的根皮苷，證實高血糖恢復正常，而且其血糖水平可長時間維持正常，并使胰島素分泌和胰島素抵抗得到改善[參照Journal of Clinical Investigation，vol.79，p.1510(1987))；ibid.，vol.80，p.1037(1987)；ibid.，vol.87，p.561(1991)等]。
此外，用SGLT抑制劑長期治療糖尿病模型動物，動物的胰島素分泌反應和胰島素敏感性得到改善，而未引起任何腎臟的副作用或血液電解質(zhì)水平的紊亂，這一結(jié)果預防了糖尿病性腎病和糖尿病性神經(jīng)病變的發(fā)生和發(fā)展[cf.，Journal of Medicinal Chemistry，vol.42，p.5311(1999)；British Journal of Pharmacology，vol.132，p.578(2001)，Ueta，Ishihara，Matsumoto，Oku，Nawano，F(xiàn)ujita，Saito，Arakawa，Life Sci.，76(23)2655-68(2005)等]。
由上文得知，期望SGLT抑制劑可通過降低糖尿病患者的血糖水平，改善胰島素分泌和胰島素抵抗，從而進一步預防糖尿病和糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展。
WO 01/27128公開了具有下述結(jié)構(gòu)的芳基C-糖苷化合物
公開該化合物作為一種SGLT抑制劑，用于預防和治療糖尿病。
發(fā)明簡述 在一個方面，本發(fā)明涉及式(I)的化合物
其中， RA是鹵原子，或低級烷基；和 環(huán)c是被1-3個取代基取代的苯基，所述取代基選自鹵原子、氰基、低級烷基、鹵代-低級烷基、低級烷氧基、鹵代-低級烷氧基、亞甲基二氧基、亞乙基氧基、單-或二-低級烷基氨基、氨基甲?；约皢?或二-低級烷基氨基甲?；?；或者被1-3個取代基取代的雜環(huán)基，所述取代基選自鹵原子、氰基、低級烷基、鹵代-低級烷基、低級烷氧基、鹵代-低級烷氧基、單-或二-低級烷基氨基、氨基甲?；约皢?或二-低級烷基氨基甲?；?； 或其藥學上可接受的鹽，或其前藥。
在另一方面，本發(fā)明涉及含有一種或多種式(I)化合物、其藥學上可接受的鹽，或其前藥的藥用組合物。
在還一方面，本發(fā)明涉及治療或延遲糖尿病、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、糖尿病性神經(jīng)病變、糖尿病性腎病、延遲的傷口愈合、胰島素抵抗、高血糖癥、高胰島素血癥、血液脂肪酸水平增高、血液甘油水平增高、高脂血癥、肥胖癥、高甘油三酯血癥、X綜合征、糖尿病并發(fā)癥、動脈粥樣硬化或高血壓的發(fā)生和發(fā)展的方法，所述方法包括對需要治療的哺乳動物種群(species)給予治療有效量的本文所述的式(I)化合物、其藥學上可接受的鹽，或其前藥。
發(fā)明詳述 本發(fā)明涉及下式(I)的化合物，或其藥學上可接受的鹽，或其前藥
其中 RA是鹵原子，或低級烷基，和 環(huán)c是被1-3個取代基取代的苯基，所述取代基選自鹵原子、氰基、低級烷基、鹵代-低級烷基、低級烷氧基、鹵代-低級烷氧基、亞甲基二氧基、亞乙基氧基、單-或二-低級烷基氨基、氨基甲?；约皢?或二-低級烷基氨基甲酰基；或者被1-3個取代基取代的雜環(huán)基，所述取代基選自鹵原子、氰基、低級烷基、鹵代-低級烷基、低級烷氧基、鹵代-低級烷氧基、單-或二-低級烷基氨基、氨基甲?；约皢?或二-低級烷基氨基甲酰基。
所述式(I)化合物表現(xiàn)出對抗哺乳動物種群的小腸和腎臟中存在的鈉依賴性葡萄糖轉(zhuǎn)運的抑制活性，因此可將其用于治療糖尿病或糖尿病并發(fā)癥，如糖尿病性視網(wǎng)膜病變、糖尿病性神經(jīng)病變、糖尿病性腎病、肥胖癥和延遲的傷口愈合。
下文對本發(fā)明式(I)化合物有更多的詳細說明。
本發(fā)明中用于描述的各術(shù)語的定義列出如下。
術(shù)語“鹵原子”或“鹵代”表示氯、溴、氟和碘，優(yōu)選氯和氟。
術(shù)語“烷基”和“烷基基團”表示直鏈或支鏈的、單價飽和的、具有1到12個碳原子的一價烴鏈。優(yōu)選具有1到6個碳原子的直鏈烷基或支鏈烷基，更優(yōu)選具有1到4個碳原子的直鏈烷基或支鏈烷基。其實例為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、叔-丁基、異丁基、戊基、己基、異己基、庚基、4，4-二甲基戊基、辛基、2，2，4-三甲基戊基、壬基、癸基及其各種支鏈的異構(gòu)體。
術(shù)語“亞烷基基團”或“亞烷基”表示具有1到12個碳原子的直鏈或支鏈的二價飽和烴鏈。優(yōu)選具有1到6個碳原子的直鏈或支鏈亞烷基，且更優(yōu)選具有1到4個碳原子的直鏈或支鏈亞烷基。其實例為亞甲基、亞乙基、亞丙基、三亞甲基(trimethylene)等。
當上述亞烷基連接在苯環(huán)的兩個不同的碳原子上時，它們可與其連接的碳原子一起形成五元、六元或七元的碳環(huán)，并且可被一個或多個下述定義的取代基任選取代。
術(shù)語“雜環(huán)基”或“雜環(huán)基團”表示單價的不飽和的單環(huán)雜環(huán)或不飽和的稠合雜雙環(huán)的單價基團，以及不飽和的單環(huán)雜環(huán)或不飽和的稠合雜雙環(huán)的單價基團。
術(shù)語“不飽和的單環(huán)雜環(huán)”表示含有1-4個雜原子的不飽和烴環(huán)，所述雜原子獨立選自氮原子、氧原子和硫原子，優(yōu)選其為含有1-4個獨立選自氮原子、氧原子和硫原子的雜原子的4-7元飽和或不飽和烴環(huán)。其實例為吡啶、嘧啶、吡嗪、呋喃、噻吩、吡咯、咪唑、吡唑、噁唑、異噁唑、4，5-二氫噁唑、噻唑、異噻唑、噻二唑、三唑、四唑等。其中，優(yōu)選應用吡啶、嘧啶、吡嗪、呋喃、噻吩、吡咯、咪唑、噁唑以及噻唑。
術(shù)語“不飽和的稠合雜環(huán)”表示由與上述不飽和單環(huán)雜環(huán)稠合的飽和或不飽和烴環(huán)組成的烴環(huán)，其中，如果需要，所述飽和烴環(huán)和所述不飽和烴環(huán)在環(huán)上可任選含有氧原子、氮原子、硫原子、SO或SO2。所述“不飽和的稠合雜環(huán)”包括，例如，苯并噻吩、吲哚、四氫苯并噻吩、苯并呋喃、異喹啉、噻吩并噻吩、噻吩并吡啶、喹啉、二氫吲哚、異二氫吲哚、苯并噻唑、苯并噁唑、吲唑、二氫-異喹啉等。此外，所述“雜環(huán)”還可以包括它們的可能的N-氧化物或S-氧化物。
術(shù)語“烷氧基”表示“烷基”與氧原子結(jié)合形成的基團。
術(shù)語如鹵代烷基、鹵代-低級烷基、鹵代-烷氧基、鹵代-低級烷氧基、鹵代苯基或鹵代雜環(huán)基表示烷基、低級烷基、烷氧基、低級烷氧基、苯基或雜環(huán)基(此后以烷基等為例)分別被一個或多個鹵原子取代。其中優(yōu)選烷基等被1到7個鹵原子所取代，更優(yōu)選烷基等被1到5個鹵原子所取代。
用于本申請中結(jié)構(gòu)式的定義的術(shù)語“低級”除非另外限定，表示具有1到6個碳原子的直鏈或支鏈碳鏈。更優(yōu)選，表示具有1到4個碳原子的直鏈或支鏈碳鏈。
術(shù)語“前藥”表示酯或碳酸酯，其通過常規(guī)方法由式(I)化合物的一個或多個羥基與被烷基、烷氧基或芳基取代的?；瘎┓磻纬桑玫酱姿狨?、新戊酸酯、甲基碳酸酯、苯甲酸酯等。此外，前藥還包括酯或酰胺，所述酯或酰胺同樣由式(I)化合物的一個或多個羥基與α-氨基酸或β-氨基酸等，通過常規(guī)方法用縮合劑反應形成。
式(I)化合物藥學上可接受的鹽包括，例如與堿金屬如鋰、鈉、鉀等所成的鹽；與堿土金屬如鈣、鎂等所成的鹽；與鋅或鋁所成的鹽；與有機堿如銨、膽堿、二乙醇胺、賴氨酸、乙二胺、叔-丁胺、叔-辛胺、三(羥甲基)氨基甲烷、N-甲基葡糖胺、三乙醇胺和脫氫樅胺所成的鹽；與無機酸如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、硝酸、磷酸等形成的鹽；或與有機酸如甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸等形成的鹽；或與酸性氨基酸如天門冬氨酸、谷氨酸等形成的鹽。
本發(fā)明的化合物還包括立體異構(gòu)體的混合物，或每一種純或大致純的異構(gòu)體。例如，本發(fā)明化合物可在含有任一取代基的碳原子上任選含有任一或多個不對稱中心。因此，式(I)化合物可以對映異構(gòu)體或非對映異構(gòu)體，或其混合物的形式存在。當本發(fā)明的式(I)化合物含有雙鍵時，本發(fā)明化合物可以幾何異構(gòu)體形式(順式-化合物，反式-化合物)存在，而當本發(fā)明的式(I)化合物含有不飽和鍵如羰基時，本發(fā)明的化合物可以互變異構(gòu)體形式存在，并且本發(fā)明的化合物還包括這些異構(gòu)體或其混合物?？蓪⑼庀旌衔?、對映異構(gòu)體或非對映異構(gòu)體形式的起始化合物用于制備本發(fā)明化合物的方法中。當以非對映異構(gòu)體或?qū)τ钞悩?gòu)體形式獲得本發(fā)明的化合物時，可通過常規(guī)方法如色譜法或分級結(jié)晶法將其分離。
此外，本發(fā)明的式(I)化合物包括分子內(nèi)鹽、水合物、溶劑化物或其多晶形。
在一個優(yōu)選的實施方案中，環(huán)c是被1-3個取代基取代的苯基，所述取代基選自鹵原子、氰基、低級烷基、鹵代-低級烷基、低級烷氧基、鹵代-低級烷氧基、和單-或二-低級烷基氨基，或者被取代基取代的雜環(huán)基，所述取代基選自鹵原子、氰基、低級烷基、鹵代-低級烷基、低級烷氧基、鹵代-低級烷氧基。特別是，環(huán)c是被鹵原子、氰基、低級烷基、鹵代-低級烷基、低級烷氧基或鹵代-低級烷氧基取代的苯基，或者被鹵原子、氰基、低級烷基或低級烷氧基取代的雜環(huán)基。更尤其是，環(huán)c是被鹵原子或氰基取代的苯基，或者被鹵原子取代的吡啶基。
在另一個優(yōu)選的實施方案中，所述雜環(huán)基是噻吩基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、吡唑基、噻唑基、喹啉基、四唑基或噁唑基。
在另一個優(yōu)選的實施方案中，RA是C1-3烷基。更尤其是，RA是甲基。
在另一個優(yōu)選的實施方案中，RA是鹵素。更尤其是，RA是氯代。
在另一個優(yōu)選的實施方案中，環(huán)c是被鹵原子取代的苯基。更尤其是，所述鹵素是F。
在另一個優(yōu)選的實施方案中，環(huán)c是被鹵原子取代的吡啶基。更尤其是，所述鹵素是氟。
特別是，RA是C1-3烷基并且環(huán)c是被鹵原子取代的苯基。更尤其是，RA是甲基并且環(huán)c是被F取代的苯基。
在另一個優(yōu)選的實施方案中，RA個是鹵素并且環(huán)c是被鹵素取代的吡啶基。更尤其是，RA是氯代并且環(huán)c是被F取代的吡啶基。
在另一個優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的化合物選自6-{3-[5-(4-氟-苯基)噻吩-2-基甲基]-4-甲基-苯基}-3，4，5-三羥基-四氫-吡喃-2-羧酸和6-{4-氯-3-[5-(6-氟-吡啶-3-基)-噻吩-2-基甲基]-苯基}-3，4，5-三羥基-四氫-吡喃-2-羧酸；或其藥學上可接受的鹽，或其前藥。
此外，具有下述結(jié)構(gòu)的所述化合物
是本發(fā)明優(yōu)選的實施方案。
此外，具有下述結(jié)構(gòu)的所述化合物
是本發(fā)明優(yōu)選的實施方案。
本發(fā)明的式(I)化合物表現(xiàn)出一種抗鈉依賴性葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白的抑制活性，以及降低血糖的作用。因此，本發(fā)明的化合物可用于治療或延緩糖尿病、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、糖尿病性神經(jīng)病變、糖尿病性腎病、延遲的傷口愈合、胰島素抵抗、高血糖癥、高胰島素血癥、血液脂肪酸水平增高、血液甘油水平增高、高脂血癥、肥胖癥、高甘油三酯血癥、X綜合征、糖尿病并發(fā)癥、動脈粥樣硬化或高血壓的發(fā)生和發(fā)展。特別是，將本發(fā)明化合物用于治療或預防糖尿病1型和2型糖尿病等)、糖尿病并發(fā)癥(如糖尿病性視網(wǎng)膜病變、糖尿病性神經(jīng)病變、糖尿病性腎病)或肥胖癥，或者將其用于治療餐后高血糖癥。
本發(fā)明的式(I)化合物、其藥學上可接受的鹽、或其前藥可口服給予或者不經(jīng)腸道給予，并且可以合適的藥用組合物形式應用。合適的用于口服的藥用組合物包括，例如，固體制劑如片劑、顆粒劑、膠囊劑、散劑等；或溶液制劑、懸液制劑或乳液制劑等。合適的用于不經(jīng)腸道給予的藥用組合物包括，例如，栓劑、注射劑以及采用用于注射的蒸餾水、生理鹽水、葡萄糖水溶液制備的靜脈滴注制劑；或者吸入劑。通常，將所述化合物與藥用載體、賦形劑或稀釋劑的混合物給藥，所述賦形劑或稀釋劑根據(jù)意欲的給藥途徑選擇。例如，在本發(fā)明的藥用組合物中，可將本發(fā)明的化合物與任何合適的結(jié)合劑、潤滑劑、懸浮劑、包衣劑和/或溶解劑混合。本發(fā)明的片劑或膠囊劑可酌情一次服用一片或兩片或更多片。本發(fā)明的化合物也可以緩釋劑型給予。
本發(fā)明的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽的劑量可根據(jù)給藥途徑、年齡、體重、患者病情或被治療的疾病的種類和嚴重程度而變化，所述劑量的范圍通常在約0.1到50mg/Kg/天，優(yōu)選范圍在約0.1到30mg/Kg/天。
需要時，可將所述式I化合物與一種或多種其它抗糖尿病藥物、一種或多種治療糖尿病并發(fā)癥的藥物、以及/或者與一種或多種治療其它疾病的藥物聯(lián)合應用。本發(fā)明化合物和這些其它的藥物可為以相同的劑型給予，或以分開的口服劑型或通過注射給予。
所述其它抗糖尿病藥物包括，例如，抗糖尿病或抗高血糖藥物包括胰島素、促胰島素分泌劑或胰島素增敏劑；或其它具有不同于SGLT抑制的作用機制的抗糖尿病藥物，可優(yōu)選使用這些其它的抗糖尿病藥物的1、2、3或4種。其實例包括雙呱類化合物、磺脲類化合物、α-葡萄糖苷酶抑制劑、PPAR-γ激動劑(如噻唑烷二酮化合物)、PPAR-α/γ雙重激動劑、二肽基肽酶IV(DPP4)抑制劑、米格列奈化合物，和/或那格列奈化合物，以及胰島素、胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)、PTP1B抑制劑、糖原磷酸化酶抑制劑、RXR調(diào)節(jié)劑和/或葡萄糖6-磷酸酶抑制劑。
所述治療其它疾病的藥物包括，例如，減肥藥、抗高血壓藥物、抗血小板藥物、抗動脈粥樣硬化藥物和/或降血脂藥物。
需要時，可將式(I)的SGLT抑制劑與治療糖尿病并發(fā)癥的藥物聯(lián)合應用。這些藥物包括，例如，PKC抑制劑和/或ACE抑制劑。
這些藥物的劑量可根據(jù)患者的年齡、體重和病癥以及給藥途徑、劑型等而變化。
這些藥用組合物可通過口服例如以片劑、膠囊劑、顆粒劑或散劑的劑型給予哺乳動物類包括人、猿、狗等，或者以注射劑、鼻內(nèi)使用的劑型、透皮貼劑等劑型不經(jīng)腸道給予。
本發(fā)明還涉及治療或延緩糖尿病、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、糖尿病性神經(jīng)病變、糖尿病性腎病、延遲的傷口愈合、胰島素抵抗、高血糖癥、高胰島素血癥、血液脂肪酸水平增高、血液甘油水平增高、高脂血癥、肥胖癥、高甘油三酯血癥、X綜合征、糖尿病并發(fā)癥、動脈粥樣硬化或高血壓的發(fā)生和發(fā)展的方法，所述方法包括給予需要治療的哺乳動物種群治療有效量的式(I)化合物、及其藥學上可接受的鹽，或其前藥。
本發(fā)明還涉及治療1型和2型糖尿病的方法，所述方法包括單獨給予需要治療的哺乳動物種群治療有效量的式(I)化合物、或其藥學上可接受的鹽，或其前藥，或者與另一種抗糖尿病藥物、治療糖尿病并發(fā)癥的藥物、減肥藥、抗高血壓藥、抗血小板藥、抗動脈粥樣硬化藥和/或降血脂藥的聯(lián)合給予。
本發(fā)明的式(I)化合物可從下述化合物制備
而這些化合物的制備可依次根據(jù)授權(quán)于Nomura等的US20050233988(其全文通過引用結(jié)合到本文中)制備。
具體地，可通過下述流程A的方法制備式(I)化合物，其中RA和環(huán)c如上所述
通過處理市售的式A1化合物可獲得式(I)化合物，所述處理優(yōu)選在常溫下，用催化劑如N，N-二甲基甲酰胺(DMF)和草酰氯在二氯甲烷中進行，獲得相應的酰基氯，使所述?；扰c式A2化合物優(yōu)選在Friedel-Craft條件下反應，獲得式A3化合物。用還原劑如三乙基硅烷處理式A3化合物，所述處理優(yōu)選在0-20℃時，優(yōu)選在含有催化劑如三氟化硼合乙醚的二氯甲烷或乙腈或其混合物的溶劑中進行。優(yōu)選在-60℃到-70℃時，在預先加入內(nèi)酯A5的溶劑如THF、庚烷、甲苯、甲基環(huán)己烷或其混合物中，通過最好用n-BuLi處理，式A4化合物被激活用于偶合。接著在甲醇中與甲磺酸反應提供式A7化合物。優(yōu)選在-30℃到室溫下，優(yōu)選在含有催化劑如三氟化硼合乙醚、三氟醋酸的二氯甲烷、乙腈或甲苯或其混合物的溶劑中，用還原劑如三乙基硅烷處理式A7化合物。通過柱層析和從溶劑如乙酸乙酯、乙醇、甲醇或庚烷或其混合物中結(jié)晶，可純化式A8化合物，所述溶劑。用催化量的4-甲氧基-TEMPO自由基和次氯酸鈉在溴化鉀和飽和碳酸氫鈉溶液的存在下處理式A9化合物，得到粗制的式A10化合物的混合物，所述化合物可通過柱層析純化得到標題化合物。
上述方法中的起始化合物和試劑均為市售商品或本領(lǐng)域內(nèi)所熟知的，或者可以被本領(lǐng)域普通技術(shù)人員很容易地通過已知的標準方法，從一個或多個市售可獲得的或已知化合物制備。
在下文中，本發(fā)明將通過實施例具體闡述，但不應視為本發(fā)明受此限制。
實施例1 6-{3-[5-(4-氟-苯基)噻吩-2-基甲基]-4-甲基-苯基}-3，4，5-三羥基-四氫-吡喃-2-羧酸
根據(jù)授權(quán)于Nomura等的US20050233988A1(其全文通過引用結(jié)合到本文中)公開的方法和實施例制備以上式(a)化合物。
將冷卻(0℃)的在乙酸乙酯(160mL)中的含有4-甲氧基-TEMPO(200.0mg，1.06mmol)和溴化鉀(556mg，4.66mmol)的化合物(a)(20.0g，44.8mmol)的混合物滴加入到飽和的碳酸氫鈉水溶液(100ml)和次氯酸鈉溶液(28.0ml，37.6-48.8mmol)中，使得所述溫度不超過10℃。滴加結(jié)束30分鐘后取樣品，用1N鹽酸稀釋并用乙酸乙酯萃取。HPLC分析(35SGLT)顯示化合物(a)和化合物1的混合物的比例為1∶1。在0-15℃溫度間攪拌1小時后，滴加另外的次氯酸鈉(10-13％，5.00ml，6.71-8.73mmol)。繼續(xù)攪拌另外1-1.5小時。HPLC分析顯示起始物質(zhì)仍然存在。緩慢加入另外的次氯酸鈉(10-13％，5.00ml，6.71-8.73mmol)。30分鐘后取樣品。緩慢加入另外的次氯酸鈉(10-13％，5.00ml，6.71-8.73mmol)。移去冰浴，繼續(xù)在室溫下攪拌不透明的黃色混合物1.0小時。所述混合物用0.5N鹽酸(200ml)和乙酸乙酯(100ml)稀釋。出現(xiàn)乳液；將該混合物放置過夜以便分離。
分離各層并用乙酸乙酯(3×100ml)萃取所述水相。干燥有機層并濃縮至剩余溶劑大約為100ml，然后加入80g硅膠并濃縮所述混合物至干燥。在220g硅膠柱上用2％甲醇/乙酸乙酯進行快速層析，得到6.49g(得率31.81％)黃色固體(化合物1)。
實施例2 生物學實施例 方法 將表達人SGLT2的CHOK1細胞以50,000個細胞/每孔的密度種植于96孔白色孔壁的培養(yǎng)板上，培養(yǎng)基為含有10％胎牛血清、400μg/ml Geneticin、50單位/ml青霉素G鈉(Gibco-BRL)和50μg/ml硫酸鏈霉素的F-12營養(yǎng)混合液(Ham’s F-12)。于37℃，含5％CO2的濕潤氣氛下培養(yǎng)2天后，用檢測緩沖液(137mM氯化鈉、5mM氯化鉀、1mM氯化鈣、1mM氯化鎂、50mM Hepes以及20mM Tris，pH 7.4)洗滌所述細胞1次，然后加入含有試驗化合物的所述緩沖液80μl，在37℃下孵育10分鐘。所述試驗化合物溶解于DMSO中。DMSO的終濃度為0.5％。通過加入20μl的[14C]-甲基-α-D-吡喃葡糖苷(14C-AMG，0.08μCi/每孔)溶液(終濃度0.5mM)啟動轉(zhuǎn)移反應。在37℃下孵育2小時后，通過所述孵育混合物的吸收中止了所述攝取，然后用冰冷的PBS洗滌所述細胞3次。接著，將所述細胞用0.3N氫氧化鈉增溶，并加入閃爍劑(scintalin)，用液閃計數(shù)儀進行放射性的檢測。將非特異性的AMG攝取定義為在100μM根皮苷(一種鈉依賴性葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白的特異性抑制劑)的存在下AMG的存在。將特異性攝取標準化為用Bradford法測定的蛋白質(zhì)濃度。通過最小二乘法，從劑量-反應曲線中計算50％抑制濃度(IC50)值。
用上述測定法檢測化合物1，結(jié)果如下 結(jié)果人SGLT2抑制IC50＝1.1μM 雖然前面的說明書講述了本發(fā)明的原理，并用實施例證明了例證的目的，因此可以理解本發(fā)明的實踐包括落入下述權(quán)利要求以及其等同物的要求范圍內(nèi)的所有的常規(guī)變化、改變和/或修改。
權(quán)利要求
1.一種式(I)的化合物，
其中，
RA是鹵原子，或低級烷基；和
環(huán)c是被1-3個取代基取代的苯基，所述取代基選自鹵原子、氰基、低級烷基、鹵代-低級烷基、低級烷氧基、鹵代-低級烷氧基、亞甲基二氧基、亞乙基氧基、單-或二-低級烷基氨基、氨基甲酰基，以及單-或二-低級烷基氨基甲酰基；或者被1-3個取代基取代的雜環(huán)基，所述取代基選自鹵原子、氰基、低級烷基、鹵代-低級烷基、低級烷氧基、鹵代-低級烷氧基、單-或二-低級烷基氨基、氨基甲?；约皢?或二-低級烷基氨基甲?；?；
或其藥學上可接受的鹽，或其前藥。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物、其藥學上可接受的鹽，或其前藥，其中環(huán)c是被1-3個取代基所取代的苯基，所述取代基選自鹵原子、氰基、低級烷基、鹵代-低級烷基、低級烷氧基、鹵代-低級烷氧基、和單-或二-低級烷基氨基；或者被取代基取代的雜環(huán)基，所述取代基選自鹵原子、氰基、低級烷基、鹵代-低級烷基、低級烷氧基和鹵代-低級烷氧基。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物、其藥學上可接受的鹽，或其前藥，其中環(huán)c是被鹵原子、氰基、低級烷基、鹵代-低級烷基、低級烷氧基或鹵代-低級烷氧基取代的苯基；或者被鹵原子、氰基、低級烷基或低級烷氧基取代的雜環(huán)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物、其藥學上可接受的鹽，或其前藥，其中所述雜環(huán)基是噻吩基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、吡唑基、噻唑基、喹啉基、四唑基或噁唑基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物、其藥學上可接受的鹽，或其前藥，其中環(huán)c是被鹵原子或氰基取代的苯基，或者被鹵原子取代的吡啶基。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物、其藥學上可接受的鹽，或其前藥，其中RA是C1-3烷基。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物、其藥學上可接受的鹽，或其前藥，其中環(huán)c是被鹵原子取代的苯基。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物、其藥學上可接受的鹽，或其前藥，其中RA是C1-3烷基并且環(huán)c是被鹵素取代的苯基。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的化合物、其藥學上可接受的鹽，或其前藥，其中RA是甲基和環(huán)c是被F取代的苯基。
10.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物、其藥學上可接受的鹽，或其前藥，其中所述化合物是6-{3-[5-(4-氟-苯基)噻吩-2-基甲基]-4-甲基-苯基}-3，4，5-三羥基-四氫-吡喃-2-羧酸；其藥學上可接受的鹽，或其前藥。
11.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物、其藥學上可接受的鹽，或其前藥，其中RA是鹵素。
12.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物、其藥學上可接受的鹽，或其前藥，其中環(huán)c是被鹵原子取代的吡啶基。
13.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物、其藥學上可接受的鹽，或其前藥，其中RA是氯和環(huán)c是被F取代的吡啶基。
14.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物、其藥學上可接受的鹽，或其前藥，其中所述化合物是6-{4-氯-3-[5-(6-氟-吡啶-3-基)-噻吩-2-基甲基]-苯基}-3，4，5-三羥基-四氫-吡喃-2-羧酸；其藥學上可接受的鹽，或其前藥。
15.一種藥用組合物，其含有與藥用載體、賦形劑或稀釋劑混合的如權(quán)利要求1中所述的化合物、或其藥學上可接受的鹽，或其前藥。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的藥用組合物，其還含有另外的抗糖尿病藥物。
17.一種治療或延緩糖尿病、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、糖尿病性神經(jīng)病變、糖尿病性腎病、延遲的傷口愈合、胰島素抵抗、高血糖癥、高胰島素血癥、血液脂肪酸水平增高、血液甘油水平增高、高脂血癥、肥胖癥、高甘油三酯血癥、X綜合征、糖尿病并發(fā)癥、動脈粥樣硬化或高血壓的發(fā)生和發(fā)展的方法，其包括給予需要治療的哺乳動物種群治療有效量的如權(quán)利要求1中所述的化合物、其藥學上可接受的鹽，或其前藥。
18.一種治療1型和2型糖尿病的方法，其包括單獨或與另一種抗糖尿病藥物、治療糖尿病并發(fā)癥的藥物、減肥藥、抗高血壓藥、抗血小板藥、抗動脈粥樣硬化藥和/或降血脂藥的聯(lián)合給予需要治療的哺乳動物種群治療有效量的如權(quán)利要求1中所述的化合物，或其藥學上可接受的鹽，或其前藥。
全文摘要
本發(fā)明涉及本文所述的式(I)化合物、其藥學上可接受的鹽，或其前藥，以及藥用組合物和治療方法。
文檔編號C07D409/06GK101611032SQ200780050893
公開日2009年12月23日 申請日期2007年12月3日 優(yōu)先權(quán)日2006年12月4日
發(fā)明者K·L·庫克, 林廷強, F·J·維拉尼, L·斯科特, C·A·鮑曼 申請人:詹森藥業(yè)有限公司, 田邊三菱制藥株式會社