專利名稱：：雙羥基油酸及它的制備方法與用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及化學(xué)藥物領(lǐng)域，具體涉及新的十八碳烯酸衍生物，雙羥基油酸及它的制備方法與用途。
背景技術(shù)：
：油酸(Oleicacid)也稱十八碳烯酸，是具有雙鍵的不飽和脂肪酸，分子式AC18H3402。脂肪酸中油酸的含量約占40%50%，在植物油中的油酸的含量視植物油品種而不同，在茶油中油酸含量可高達83%，花生油中約54%，而椰子油中只有5%6%。油酸是一種重要的化學(xué)試劑，它可以廣泛應(yīng)用于化工分析、有機合成和藥物制備等方面,在藥劑中主要是用作軟膏基質(zhì)。有研究報道(中國食物與營養(yǎng)，2005,4:44-46)，油酸具有一些重要的生理功能，如降血脂，調(diào)節(jié)血糖，降膽固醇等。然而，經(jīng)多年研究，人們對油酸功能特性有更進一步了解，但也存在著一定程度分歧。特別是關(guān)于油酸能否有降血脂，降膽固醇作用方面，一直存在著爭議(食品工業(yè)科技，2008,2:294-298)。油酸作為一種天然來源的、具有生物活性的先導(dǎo)化合物，極大地吸引著人們對它的注意，激發(fā)了人們對油酸研究的濃厚興趣。因此，對油酸進行結(jié)構(gòu)修飾和改造，是擴大其功能和用途的重要研究途徑。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種新的油酸衍生物，并提供其制備方法和用途。為實施本發(fā)明的目的，所采用的技術(shù)方案是用由共軛亞油酸或共軛亞油酸酯與二氧化硒反應(yīng)制備得到雙羥基油酸，分子式為C18H3404，形態(tài)為淡黃色的油狀物。為了證明該反應(yīng)產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)，采用正相高效液相色譜法分析，分析條件流動相采用正己烷異丙醇(體積比)為98:2的溶液；流速2mL/min;檢測器采用示差折光檢測器；樣品用正己垸溶解，濃度為20mg/mL;進樣10pL。同時該淡黃色的油狀物用半制備正相高效液相色譜法分離得到四個產(chǎn)物，并用儀器分析證明其結(jié)構(gòu)均為雙羥基油酸，且是四種雙羥基油酸的同分異構(gòu)體化合物，其一為9，10-雙羥基-llE-十八碳烯酸，分子式C18H3404，結(jié)構(gòu)式為其二為10，11-雙羥基-12E-十八碳烯酸，分子式為C18H3404，結(jié)構(gòu)式為:其三為11,12-雙羥基-9E-十八碳烯酸，分子式為C18H3404,.結(jié)構(gòu)式為:其四為12，13-雙羥基-10E沖A碳烯酸，分子式為C18H3404，結(jié)構(gòu)式為:為達到本發(fā)明的另一個目的，制備雙羥基油酸的方法是在容器中加入有機溶劑和二氧化硒，在25-60'C下攪拌0.5-2h后，加入共軛亞油酸或共軛亞油酸酯，繼續(xù)攪拌反應(yīng)12-48h,反應(yīng)結(jié)束后，加水洗漆，收集有機溶劑層，回收溶劑，即得到淡黃色的油狀產(chǎn)物，所述的有機溶劑為二氯甲烷或甲苯或正己烷或環(huán)己垸或石油醚或乙醚或90%以上的乙醇或乙酸乙酯。原料用量二氧化硒共軛亞油酸或共軛亞油酸酯的摩爾比為2:0.5~0.5:2，有機溶劑的用量為共軛亞油酸或共軛亞油酸酯重量的530倍體積，即有機溶劑的用量共軛亞油酸或共軛亞油酸酯量為530mL:lg。如果原料采用共軛亞油酸酯用同樣的反應(yīng)方法和工藝條件可以得到相應(yīng)的雙羥基油酸酯，具體的分法是在容器中加入有機溶劑和二氧化硒，在25-6(TC下攪拌0.5-2h后，加入共軛亞油酸酯，繼續(xù)攪拌反應(yīng)12-48h，反應(yīng)結(jié)束后，加水洗滌，收集有機溶劑層，回收溶劑，即得到相應(yīng)的雙羥基油酸酯的淡黃色的油狀產(chǎn)物，進一步采用常規(guī)酯水解方法得到雙羥基油酸，共軛亞油酸酯采用共軛亞油酸甲酯，經(jīng)反應(yīng)后得到的是相應(yīng)的雙羥基油酸甲酯；共軛亞油酸酯采用共軛亞油酸乙酯，經(jīng)反應(yīng)后得到的是相應(yīng)的雙羥基油酸乙酯；共軛亞油酸酯采用共軛亞油酸甘油，，經(jīng)反應(yīng)后得到的是相應(yīng)的雙羥基油酸甘油酯。如果采用其它的共軛亞油酸fe經(jīng)反應(yīng)后也會得到相應(yīng)的雙羥基油酸酯。本發(fā)明的另一個目的是開發(fā)所提供的雙羥基油酸的用途，用于制備治療肥胖、降血脂、降血糖，提高免疫力的藥物或食品；制備抗氧化和美白的皮膚護C)HqH理外用制劑。為了提高雙羥基油酸的功能，可在雙羥基油酸中添加左旋肉堿，制備治療肥胖、降血脂、降血糖的藥物或食品，用作飼料添加劑，產(chǎn)品中雙羥基油酸與左旋肉堿的重量比為4:18。本發(fā)明的有益效果1、本發(fā)明采用二氧化硒氧化共軛亞油酸或共軛亞油酸酯通過一步反應(yīng)生成雙羥基油酸或雙羥基油酸酯，制備方法易實施工業(yè)化的大批量生產(chǎn)，反應(yīng)條件溫和，產(chǎn)率較高；2、合成得到的雙羥基油酸，是油酸的新衍生物，通過試驗證明它具有減肥，降血脂、降血糖，提高免疫力的作用，并且效果大大超過了油酸，可制備成相關(guān)的藥物或食品或用作飼料添加劑等；3、雙羥基油酸還具有抗氧化和美白的作用，可制備成皮膚護理外用制劑。圖1本發(fā)明的產(chǎn)品正相高效液相的色譜圖分離條件流動相采用正己垸異丙醇(體積比)為98:2的溶液；流速8mL/min;檢測器為示差折光檢測器；樣品用正己烷溶解，濃度為100mg/mL;進樣150pL。峰l為12，13-雙羥基-10E-十八碳烯酸，出峰時間是20.4min峰2為11,12-雙羥基-9E-十八碳烯酸，出峰時間是21.3min峰3為10,11-雙羥基-12E-十八碳烯酸，出峰時間是22.9min峰4為9,10-雙羥基-llE-十八碳烯酸，出峰時間是24.9min下面通過藥效學(xué)試驗來證實其用途試驗例1.減肥、降血脂、降血糖作用1.1實驗動物健康SD大鼠50只，雄性，體重80-100g。1.2實驗樣品樣品1雙羥基油酸20g分散于100mL的1.5%羧甲基纖維素水溶液(WAO中樣品2雙羥基油酸10g+左旋肉堿10g混合分散于100mL的1.5%羧甲基纖維素水溶液中樣品3油酸樣品20g分散于100mL的1.5%羧甲基纖維素水溶液中樣品4空白組樣品5模型組1.3高脂飼料配方基礎(chǔ)飼料(購買根據(jù)美國營養(yǎng)協(xié)會推薦的AIN-93G配方配制而成的純合成飼料)73.8%、豬油10%、蛋黃粉10%、蔗糖1%、膽固醇1%、膽鹽0.2%。1.4實驗方法將大鼠隨機分為5組，分別為空白對照組，模型對照組，雙羥基油酸組，雙羥基油酸+左旋肉堿和油酸組。其中空白對照組給予基礎(chǔ)飼料自由攝食；模型對照組給予高脂詞料自由飲食；試驗組給予高脂飼料自由飲食，每組均以lmL樣品/100g體重灌胃，實驗45天。實驗期間記錄大鼠的給食量、剩食量以及撒食量，每周定期稱體重l次。實驗第45天大鼠禁食12h，測定空腹血糖值，給藥后2h除空白對照組灌胃生理鹽水外，其余各組灌胃葡萄糖溶液lg/kg體重。給糖后30，60min和120min測定尾靜脈血糖值。實驗結(jié)束時(45天)大鼠禁食12小時，稱體重，眼眶取血測血脂中的總膽固醇TC、甘油三酯TG、高密度脂蛋白膽固醇HDL-C和血糖GLU水平，剖腹取體內(nèi)脂肪墊(包括睪丸及腎周圍脂肪墊)并稱重，計算脂體比。1.5試驗結(jié)果與模型對照組相比，雙羥基油酸組動物體重、體脂、脂體比明顯降低，血清總膽固醇和甘油三酯明顯下降，高密度脂蛋白膽固醇有升高趨勢，并且效果明顯比油酸組強，并且雙羥基油酸與左旋肉堿聯(lián)合使用效果更好。結(jié)果見表l和表2。表l::雙羥基油酸對大鼠體重和體脂的影響組別始重(g)末重(g)體脂(g)脂體比(％)空白對照組模型對照組雙羥基油酸組雙羥基油酸+左旋肉堿組油酸組卯±691±588±491±391±5288±18301±13278±14**268±4*300±136.5±1.84**7.卯±1.766.3±1.4**4.5±2"7.9±32.27±0.38**2.63±0.592.33±0.4*2.1±0.22.65±0.59與模型對照組比，/7<0.05;**與模型對照組比，；O.Ol。表2:雙羥基油酸對大鼠血脂的影響組別TCTGHDL-C空白對照組模型對照組1.82土0.32"3.31±0.741.07±0.37**1.64±0.5371.06±0.411.06±0.38雙羥基油酸組2.45士0.41"1.2±0.4*1.3±0.4雙羥基油酸+左旋肉堿組2.21±0.4**0.83±0.1*0.64±0.2油酸組3.11±1.21.4±0.3*1.1±0.51與模型對照組比，p<0.05;**與模型對照組比，/<0.01。表3:雙羥基油酸對大鼠糖耐量的影響—,血糖(mmol/L)班力U0min30min60min120min空白對照組4.59土0.81《M±0.%**4.55±0.67**4.49±0.63**模型對照組5.24±0.9712.95±1.5410.72±1.619.63±1.22,雙羥基油酸組4.76±1.29.50±1.2*8.2±1.16.2±0.7*雙羥基油酸+左旋肉堿組4.9±1.59.97±2*7.斗±1.35.6±1.0*油酸組4.9±0.511.9±1.310.21±1.98.0±2*與模型組相比，/K0.05;**與模型組相比,p<0.01由表3可知，雙羥基油酸組能降低大鼠空腹血糖水平，且在30min時對外源性葡萄糖引起的血糖升高有抵抗作用，并且起效較快。在60min和120min時仍能抵抗外源性葡萄糖引起的血糖升高，并且效果明顯比油酸組強。雙羥基油酸與左旋肉堿聯(lián)合使用，能起到增效的作用。結(jié)論本發(fā)明的雙羥基油酸具有顯著減肥功能和降血脂降血糖作用。可與左旋肉堿聯(lián)合使用，效果更好。試驗例2.測定對小鼠免疫力的作用2.1實驗動物健康雄性Balb/c小鼠30只，體重23-27g。2.1實驗試劑樣品1:雙羥基油酸20g分散于100mL1.5Q/^羧甲基纖維素水溶液中樣品2:油酸樣品20g分散于100mL1.5X羧甲基纖維素水溶液中2.3實驗方法將大鼠按體重隨機分為3組，分別為空白對照組，雙羥基油酸和油酸組。三組均給予基礎(chǔ)飼料自由攝食，其中空白對照組以lmL/100g體重1.5%羧甲基纖維素水溶液經(jīng)口灌胃；雙羥基油酸組和油酸組分別以lmL樣品/100g體重受試物溶液經(jīng)口灌胃，實驗20天。實驗結(jié)束時(20天)，小鼠禁食12小時，稱體重，斷頸處死動物。剖取脾臟測定脾小結(jié)和脾內(nèi)巨噬細胞數(shù)的變化。2.4實驗結(jié)果實驗結(jié)果見表4，表4:雙羥基油酸對小鼠免疫力的作用<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>*與對照組比，p<0.05.結(jié)論由表4可知，本發(fā)明新化合物能顯著降低小鼠的體重和增加脾小結(jié)和脾內(nèi)巨噬細胞數(shù),進一步驗證該類化合物的減肥作用，同時又能提高免疫力。試驗例3.清除超氧陰離子的試驗測定本發(fā)明產(chǎn)品的抗氧化作用試驗樣品樣品l:雙羥基油酸2g溶于100mL的丙酮中，樣品2:油酸2g溶于lOOmL的丙酮中樣品3:維生素E2g溶于100mL的丙酮中將聯(lián)苯三酚用稀鹽酸配成6mmol/L的溶液。將O.lmL的樣品加入到4.1mL的pH8.2緩沖液中,混合均勻。取O.lmL的聯(lián)苯三酚液加到上述混合液中，在紫外分光光度儀上采用時間程序在320nm處連續(xù)測量300s，聯(lián)苯三酚自氧化速率用每分鐘其自氧化產(chǎn)物在波長320nm處的吸光度增加量，表示。樣品對聯(lián)苯三酚自氧化速率的百分抑制率由式(l-l)計算抑制率=(，-爭)/，(1-1)式中，f為對照組聯(lián)苯三酚自氧化速率；l為加入樣品時的聯(lián)苯三酚自氧化速率。結(jié)果見表5:表5:雙羥基油酸對超氧陰離子的抑制率<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>上述結(jié)果表明在聯(lián)苯三酚自氧化體系試驗中，相同濃度下本發(fā)明的雙羥基油酸具有比維生素E和油酸更強的清除超氧陰離子的作用，可用于皮膚的抗氧化保護作用。試驗例4.抑制酪氨酸酶活性試驗測定本發(fā)明產(chǎn)品的美白作用試驗樣品-樣品1:雙羥基油酸6g溶于100mL的無水乙醇中，樣品2:油酸6g溶于100mL的無水乙醇中樣品3:空白組(無水乙醇)將L-多巴用pH6.8磷酸緩沖液配成0.2%的溶液。蘑菇酪氨酸酶用pH6.8磷酸緩沖液配成100U,L—1的溶液。在pH6.8磷酸緩沖液中,用蘑菇酪氨酸酶催化多巴變成多巴醌,有腎上腺素紅色，精確反應(yīng)10min，總反應(yīng)量為2mL.利用分光光度計在475nm時的特定吸收測定生成的多巴醌時的吸光度，以△A/min計算活力,l活力單位(U)為0.001AA/min,結(jié)果見表6。表6:雙羥基油酸對酪氨酸酶的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>上述結(jié)果表明本發(fā)明的雙羥基油酸具有降低酪氨酸酶的活性作用，可用于皮膚的美白作用。下面通過實施例和附圖進一步闡述本發(fā)明的技術(shù)方案具體實施例方式本發(fā)明具體實施例所用到的共軛亞油酸由廣東中山市尤利卡天然藥物有限公司提供。其它試劑購自商店。實施例l在50mL的圓底燒瓶中加入383mgSeO2，lOmL二氯甲垸，在25。C下攪拌l小時，緩慢加入lg共軛亞油酸(共軛亞油酸中含順9,反ll-共軛亞油酸和反10，順12-共軛亞油酸二種異構(gòu)體，純度95%),繼續(xù)攪拌反應(yīng)48小時。反應(yīng)結(jié)束后，加水洗滌，收集二氯甲垸層，回收二氯甲烷，即得到淡黃色的油狀物0.98g，收率為70.8°/。，純度90%(W/W)。產(chǎn)品的分析將反應(yīng)得到的淡黃色的油狀物采用半制備正相高效液相色譜法分離，分離條件流動相為正己垸:異丙醇(體積比)為98:2;流速8mL/min;檢測器為示差折光檢測器；樣品用正己烷溶解，濃度為100mg/mL;進樣150iaL。在該分離條件下，得到四個產(chǎn)物峰(見附圖1)，保留時間分別是20.4min(峰l)，21.3min(峰2),22.9min(峰3)，24.9min(峰4)，用三角瓶分別收集時間段為20.020.7min的餾分1，21.1-22.0min的餾分2,22.2-24.0min的餾分3，24.126.0min的餾分4，連續(xù)進樣10次，分別將四個餾分的溶劑蒸發(fā)，分別得到4個產(chǎn)物，峰l產(chǎn)物是油狀物，共28mg;峰2產(chǎn)物是油狀物，共27mg;峰3產(chǎn)物是白色粉末，共28mg;峰4產(chǎn)物是白色粉末，共27mg。分別采用質(zhì)譜和核磁共振法對單體化合物進行結(jié)構(gòu)確證。峰1產(chǎn)物1.核磁共振氫譜測定結(jié)果(CDC13，300MHz):S5.76(dt，《/=15.6，6.4Hz,1H,H-13),5.45(ddt,/=15.6，7.2,1Hz，1H，H曙12)，3.85(t，《/=6.6Hz，1H，H-ll)，3.42(m，1H,H曙IO)，2.30(t，2H，H-2)，2.05(m，2H，H-14),1.71-1.14(m，20H，)，0.89(t，《/=6.9Hz,3H，H-18);2.核磁共振碳譜測定結(jié)果(CDCl3，75MHz):5174.3(C-l),134.7(C-12)，129.4(C-13),76.2(C-l1)，74.8(C曙IO)，34.1(C-2),33.0，32.3，31.7，29.2，29.1，29.0,28.9,28.8,25.5,24.9(C-16，15，14，9，8，7，6，5，4，3)，22.5(C-17)，14.0(C-18).3.電噴霧質(zhì)譜儀，質(zhì)譜分析條件30兆電荷，進樣量5^L測定結(jié)果ESI-MS/MS(-)m/z313([M-H]—，17%)，295([(M-H20)-H]—，12%),277([(M-2xH20)-H]—，29%),213([(M—CH3(CH2)4CH2OH)—H]—，100%)，183([(M-CH3(CH2)4CH(OH)CHO)—H]—,70%)，129([(M-CH2CH(CH2)8COOH)-H]—，25%).HR-MS(-)測得分子量為313.2375;計算值為313.2384通過以上數(shù)據(jù)確證峰l產(chǎn)物為12，13-雙羥基-10E-十八碳烯酸化合物，性狀是油狀物。峰2產(chǎn)物1.核磁共振氫譜測定結(jié)果(CDCl3，300MHz)55.76(dt，7=15.6，6.4Hz，1H，H-13),5.45(ddt,/=15.6,7.2,1Hz,1H，H-12),3.85(t，J=6.6Hz，1H,H-ll),3.42(m,1H，H-IO)，2.30(t，2H，H-2)，2.05(m，2H，H-14),1.71-1.14(m，20H,)，0.89(t，/=6.9Hz,3H，H-18);2.核磁共振碳譜測定結(jié)果(CDCl3，75MHz):S174.3(C-l)，134.7(C-12),129.4(C-13)，76.2(C-ll)，74.8(C國IO)，34.1(C-2)，33.0,32.3,31.7,29.2,29.1，29.0,28.9，28.8，25.5，24.9(C-16，15，14,9,8，7,6，5，4,3),22.5(C-17)，14.0(C-18).3.電噴霧質(zhì)譜儀，質(zhì)譜分析條件30兆電荷，進樣量5pL測定結(jié)果ESI-MS/MS(-)Wz313([M-H]一，17%),295([(M—H20)—H]一，12%),277([(M—2xH20)-H]—，29%)，199([(M—CH3(CH2)5CH2OH)-H]_，100%)，169([(M-CH3(CH2)5CH(OH)CHO)-H]_，70%),113([(M-CH2CH(CH2)7COOH)-H]—，25%).HR-MS(-)測得分子量為313.2375;計算值為313.2384.通過以上數(shù)據(jù)確證峰2產(chǎn)物為11，12-雙羥基-9E-十八碳烯酸，性狀是油狀物。峰3產(chǎn)物1.核磁共振氫譜測定結(jié)果(CDCl3，300MHz):S5.75(dt,/=15.6，6.4Hz，1H，H-13),5.44(ddt,/=15,6，7.2，1Hz，1H,H-12),3.85(t,6.6Hz，1H，H-ll)，3.42(m，1H，H-IO)，2.30(t，2H，H-2),2.05(m,2H，H畫14)，1.71-1.14(m，20H,)，0.89(t，《/=6.9Hz，3H,H-18);2.核磁共振碳譜-測定結(jié)果(CDCb,75MHz):S174.2(C-l),134.9(C-12)，129.4(C-13),76.0(C-ll)，74.8(C-10),34.1(C-2),33.0，32.3，31.7，29.2,29.1,29.0,28.9，28.8,25.5，24.9(C-16，15，14，9,8，7,6，5，4，3)，22.5(C-17)，14.0(C-18).3.電噴霧質(zhì)譜儀，質(zhì)譜分析條件30兆電荷，進樣量5pL測定結(jié)果ESI-MS/MS(-)w/z313([M-H]—，17%),295([(M-H20)-H]—，12%)，277([(M-2xH20)-H]—，29%),215([(M—CH3(CH2)4CHCH2)—Hf,22%),185([(M-CH3(CH2)4CHCHCH2OH)-H]—，100%)，127([(M—CHO(CH2)8COOH)—H]一,25%).HR-MS(-)測得分子量為313.2382;計算值為313.2384.通過以上數(shù)據(jù)確證峰3產(chǎn)物為10，U-雙羥基-12E-十八碳烯酸，性狀白色粉末，熔點74。C。峰4產(chǎn)物1.核磁共振氫譜測定結(jié)果(CDCl3,300MHz):35.76(dt,/=15.4，6.0Hz，1H，H-12)，5.44(ddt，J=15.4，7.2，1Hz,1H,H-ll),3.86(t，J=6.9Hz，1H,H-IO)，3.43(m，1H，H-9)，2.30(m,2H,H-2)，2.05(m,2H,H國13)，1.72-1.17(m，20H)，0.88(t，《/=6.9Hz，3H,H-18);2.核磁共振碳譜測定結(jié)果(CDCl3，75MHz):S174.2(C-l)，135.0(C-ll)，129.3(C-12)，76.3(C國IO)，74.8(C曙9),34.1(C-2)，33.0，32.3，31.4，29.6，29.3，29.2,29.0，28.8，25.6，25.0(C-16，15,14,13,8，7，6，5，4,3)，22.5(C-17)，13.0(C-18).3.電噴霧質(zhì)譜儀，質(zhì)譜分析條件30兆電荷，進樣量5pL測定結(jié)果ESI-MS/MS(-)w/z313([M-H]-，17%)，295([(M-H20)—H]—，12%)，277([(M-2xH20)-H]_，34%)，201([(M-CH3(CH2)5CHCH2)-HT，24%)，171([M-CH3(CH2)5CHCHCH2OH-H]—，100o/0)，141([(M-CHO(CH2)7COOH)-H]—，25%).HR-MS(-)測得分子量為313.2381;計算值為313.2384.通過以上數(shù)據(jù)確證峰4產(chǎn)物為9，10-雙羥基-llE-十八碳烯酸，性狀白色粉末，熔點68。C。實施例2在50mL的圓底燒瓶中加入200mgSeO2，5mL二氯甲烷，在6(TC下攪拌1小時，緩慢加入2g共軛亞油酸，純度95%，繼續(xù)攪拌反應(yīng)12小時。反應(yīng)結(jié)束后，加水洗滌，收集二氯甲垸層，回收二氯甲垸，即得到淡黃色的油狀物0.8g，收率為40%，純度88%(W/W)。產(chǎn)物采用正相高效液相色譜法分析，分析條件流動相為正己烷/異丙醇(體積比)為98/2;流速2mL/min;檢測器為示差折光檢測器；樣品濃度為20mg/mL;進樣10pL。在該分離條件下，得到四個產(chǎn)物峰，保留時間分別是20.4min(峰l)，21.3min(峰2),22.9min(峰3),24.9min(峰4)圖譜同附圖1，證實為化合物12，13-雙羥基-10E-十八碳烯酸，U，12-雙羥基-9E沖八碳烯酸，10，11-雙羥基-12E沖八碳烯酸，9，10-雙羥基-llE-十八碳烯酸。實施例3在50mL的圓底燒瓶中加入3.83gSeO2，200mL甲苯，在25'C下攪拌2小時，緩慢加入10g共軛亞油酸，純度90%，繼續(xù)攪拌反應(yīng)48小時。反應(yīng)結(jié)束后，加水洗滌，收集甲苯層，回收甲苯,即得到淡黃色的油狀物9g，收率為65.1%，純度84%(W/W)。產(chǎn)物采用正相高效液相色譜法分析，分析條件同實施例2，'得到四個產(chǎn)物峰，保留時間分別是20.4min(峰l)，21.3min(峰2)，22.9min(峰3),24.9miri(峰4)，與四個異構(gòu)體的標準品對照，證實為化合物12,13-雙羥基-10E-十八碳烯酸，11，12-雙羥基-9E-十八碳烯酸，10，11-雙羥基-12E-十八碳烯酸，9，10-雙羥基-UE-十八碳烯酸。實施例4在50mL的圓底燒瓶中加入40gSeO2，lOOOmL乙腈，在5(TC下攪拌l小時，緩慢加入120g共軛亞油酸，純度92%,繼續(xù)攪拌反應(yīng)24小時。反應(yīng)結(jié)束后，加水洗滌，收集乙腈層，回收乙腈，即得到淡黃色的油狀物120g，收率為75%，純度85%(W/W)。產(chǎn)物采用正相高效液相色譜法分析，分析條件同實施例2，得到四個產(chǎn)物峰，保留時間分別是20.4min(峰l)，21.3min(峰2)，22.9min(峰3),24.9min(峰4)，與四個異構(gòu)體的標準品對照，證實為化合物12，13-雙羥基-10E-十八碳烯酸，11，12-雙羥基-9E沖八碳烯酸，10，11-雙羥基-12E-十A碳烯酸，9，10-雙羥基-llE-十A碳烯酸。實施例5'在50mL的圓底燒瓶中加入383mgSeO2，20mL石油醚，在25'C下攪拌1小時，緩慢加入lg共軛亞油酸，純度85%，繼續(xù)攪拌反應(yīng)48小時。反應(yīng)結(jié)束后，加水洗滌，收集石油醚層，回收石油醚，即得到淡黃色的油狀物0.98g，收率為70.8%，純度80°/。(W/W)。產(chǎn)物采用正相高效液相色譜法分析，分析條件同實施例2，得到四個產(chǎn)物峰，保留時間分別是20.4min(峰l)，21.3min(峰2)，22.9min(峰3),24.9min(峰4)，與四個異構(gòu)體的標準品對照，證實為化合物12,13-雙羥基-10E-十八碳烯酸，11,12-雙羥基-9E沖八碳烯酸，IO，Il-雙羥基-12E-十八碳烯酸，9,10-雙羥基-11E-十八碳烯酸。實施例6在50mL的圓底燒瓶中加入383mgSeO2，20mL乙醚，在25。C下攪拌1小時，緩慢加入lg共軛亞油酸，純度78%,繼續(xù)攪拌反應(yīng)48小時。反應(yīng)結(jié)束后，加水洗滌，收集乙醚層，回收乙醚，即得到淡黃色的油狀物0.98g，收率為70.8%,純度75%(W/W)。產(chǎn)物采用正相高效液相色譜法分析，分析條件同實施例2，得到四個產(chǎn)物峰，保留時間分別是20.4min(峰1)，21.3min(峰2)，22.9min(峰3)，24.9min(峰4)，與四個異構(gòu)體的標準品對照，證實為化合物12，13-雙羥基-10E-十A碳烯酸，11，12-雙羥基-9E沖八碳烯酸，10,11-雙羥基-12E-十八碳烯酸，9，10-雙羥基-llE-十八碳烯酸。實施例7在50mL的圓底燒瓶中加入40gSeO2，1000mL卯Q/。乙醇，在5(TC下攪拌1小時，緩慢加入120g共軛亞油酸，純度92%，繼續(xù)攪拌反應(yīng)24小時。反應(yīng)結(jié)束后，加水洗滌，收集乙醇層，回收乙醇，即得到淡黃色的油狀物120g，收率為75°/。，純度85%(W/W)。產(chǎn)物采用正相高效液相色譜法分析，分析條件同實施例2，得到四個產(chǎn)物峰，保留時間分別是20.4min(峰1),21.3min(峰2),22.9min(峰3)，24.9min(峰4)，與四個異構(gòu)體的標準品對照，證實為化合物12,13-雙羥基-10E-十八碳烯酸，11,12-雙羥基-9E-十八碳烯酸，10,11-雙羥基-12E-十八碳烯酸，9，10-雙羥基-11E-十八碳烯酸。實施例8在50mL的圓底燒瓶中加入45gSeO2，800mL無水乙醇，在5(TC下攪拌2小時，緩慢加入115g共軛亞油酸，純度92%,繼續(xù)攪拌反應(yīng)24小時。反應(yīng)結(jié)束后，加水洗滌，收集無水乙醇層，回收無水乙醇，即得到淡黃色的油狀物120g，收率為75%，純度85°/。(W/W)。產(chǎn)物采用正相高效液相色譜法分析，分析條件同實施例2，得到四個產(chǎn)物峰，保留時間分別是20.4min(峰1)，21.3min(峰2),22.9min(峰3)，24.9min(峰4)，與四個異構(gòu)體的標準品對照，證實為化合物12，13-雙羥基-10E-十八碳烯酸，11，12-雙羥基-9E-十八碳烯酸，10,11-雙羥基-12E沖八碳烯酸，9,10-雙羥基-llE沖八碳烯酸。實施例9在50mL的圓底燒瓶中加入40gSeO2，800mL乙酸乙酯，在50。C下攪拌2小時，緩慢加入100g共軛亞油酸，純度90%,繼續(xù)攪拌反應(yīng)24小時。反應(yīng)結(jié)束后，加水洗滌，收集乙酸乙酯層，回收乙酸乙酯，即得到淡黃色的油狀物120g，收率為75%，純度85°/。(W/W)。產(chǎn)物釆用正相高效液相色譜法分析，分析條件同實施例2，得到四個產(chǎn)物峰，保留時間分別是20.4min(峰1)，21.3min(峰2)，22.9min(峰3)，24.9min(峰4)，與四個異構(gòu)體的標準品對照，證實為化合物12,13-雙羥基-10E-十八碳烯酸，11，12-雙羥基-9E-十八碳烯酸，10,11-雙羥基-12E-十八碳烯酸，9，10-雙羥基-llE沖八碳烯酸。實施例IO在50mL的圓底燒瓶中加入700mgSeO2，30mL正己烷，在40'C下攪拌2小時，緩慢加入lg共軛亞油酸甲酯，純度卯％，繼續(xù)攪拌反應(yīng)24小時。反應(yīng)結(jié)束后，加水洗滌，收集正己烷層，回收正己烷，即得到淡黃色的油狀物0.9g，收率為52.9%，純度85%(W/W),得到的產(chǎn)品為雙羥基油酸甲酯。實施例ll在50mL的圓底燒瓶中加入300mgSeO2，lOmL乙酸乙酯，在25。C下攪拌2小時，緩慢加入lg共軛亞油酸乙酯，純度75%,繼續(xù)攪拌反應(yīng)24小時。反應(yīng)結(jié)束后，加水洗滌，收集乙酸乙酯層，回收乙酸乙酯，即得到淡黃色的油狀物0.9g，收率為69.2%，純度65。/。(W/W)。得到的產(chǎn)品為雙羥基油酸乙酯。取0.4g的雙羥基油酸乙酯，加入lmol/L的硫酸甲醇溶液5mL加熱水解反應(yīng)1.5h后加入10mL的乙酸乙酯，加入蒸餾水洗滌2次，收集乙酸乙酯層，回收乙酸乙酯，即得到淡黃色的雙羥基油酸油狀物。取0.4g的雙羥基油酸乙酯，加入2mol/L的氫氧化鈉甲醇溶液5mL加熱水解反應(yīng)1.5h后加入10mL的石油醚，加入蒸餾水洗滌2次，收集石油醚層，回收石油醚，即得到淡黃色的雙羥基油酸油狀物。實施例12在50mL的圓底燒瓶中加入300mgSeO2，10mL乙酸乙酯，在35。C下攪拌2小時，緩慢加入lg共軛亞油酸甘油酯，純度75%，繼續(xù)攪拌反應(yīng)24小時。反應(yīng)結(jié)束后，加水洗滌，收集乙酸乙酯層，回收乙酸乙酯，即得到淡黃色的油狀物0.9g，收率為69.2%，純度65%(W/W)。得到的產(chǎn)品為雙羥基油酸甘油酯。取0.4g的雙羥基油酸甘油酯，加入lmol/L的硫酸甲醇溶液5mL加熱水解反應(yīng)1.5h后加入10mL的正己烷，加入蒸餾水洗滌2次，收集正己烷層，回收正己垸，即得到淡黃色的雙羥基油酸油狀物。取0.4g的雙羥基油酸甘油酯，加入2mol/L的氫氧化鈉甲醇溶液5mL加熱水解反應(yīng)1.5h后加入10mL的乙醚，加入蒸餾水洗滌2次，收集乙醚層，回收石油醚，即得到淡黃色的雙羥基油酸油狀物。.實施例13雙羥基油酸軟膠囊本發(fā)明軟膠囊，以100g制劑計，它是由下列組分組成的雙羥基油酸99g，花生油lg，按常規(guī)軟膠囊工藝制成軟膠囊，規(guī)格為750mg/每粒。使用方法一日三次，每次兩粒。實施例14雙羥基油酸軟膠囊本發(fā)明軟膠囊，以100g制劑計，它是由下列組分組成的雙羥基油酸60g,紅花籽油40g，按常規(guī)軟膠囊工藝制成軟膠囊，規(guī)格為750mg/每粒。使用方法一日三次，每次兩粒。實施例15雙羥基油酸軟膠囊本發(fā)明軟膠囊，以100g制劑計，它是由下列組分組成的雙羥基油酸40g，橄欖油60g，按常規(guī)軟膠囊工藝制成軟膠囊，規(guī)格為750mg/每粒。使用方法一日三次，每次兩粒。實施例16雙羥基油酸甲酯軟膠囊本發(fā)明軟膠囊，以100g制劑計，它是由下列組分組成的雙羥基油酸甲酯60g，植物油40g，按常規(guī)軟膠囊工藝制成軟膠囊，規(guī)格為750mg/每粒。使用方法一日三次，每次兩粒。實施例17雙羥基油酸乙酯軟膠囊本發(fā)明軟膠囊，以100g制劑計，它是由下列組分組成的雙羥基油酸乙酯90g，紅花籽油10g，按常規(guī)軟膠囊工藝制成軟膠囊，規(guī)格為750mg/每粒。使用方法一日三次，每次兩粒。實施例18雙羥基油酸甘油酯軟膠囊本發(fā)明軟膠囊，以100g制劑計，它是由下列組分組成的雙羥基油酸甘油酯90g，紅花籽油10g，按常規(guī)軟膠囊工藝制成軟膠囊，規(guī)格為750mg/每粒。使用方法一日三次，每次兩粒。實施例19雙羥基油酸與L-肉堿軟膠囊本發(fā)明軟膠囊，以100g制劑計，它是由下列組分組成的雙羥基油酸80g，L-肉堿20g，按常規(guī)軟膠囊工藝制成軟膠囊，規(guī)格為750mg/每粒。使用方法一日三次，每次兩粒。實施例20雙羥基油酸與L-肉堿軟膠囊本發(fā)明軟膠囊，以100g制劑計，它是由下列組分組成的雙羥基油酸20g，L-肉堿80g，按常規(guī)軟膠囊工藝制成軟膠囊，規(guī)格為750mg/每粒。使用方法一日三次，每次兩粒。實施例21雙羥基油酸硬膠囊物質(zhì)稱量雙羥基油酸100g，茶多酚0.02g，羥丙纖維素lg，微晶纖維素lg,硬脂酸鎂0.5g。把稱量好的雙羥基油酸，茶多酚，羥丙纖維素和微晶纖維素混合均勻，置流化床制粒機中制粒，顆粒水分小于5%，30目篩整粒，加入硬脂酸鎂，混勻后的顆粒填充膠囊即得。規(guī)格為750mg/每粒。使用方法一日三次，每次兩粒。實施例22雙羥基油酸與L-肉堿硬膠囊物質(zhì)稱量雙羥基油酸50g,L-肉堿酒石酸鹽50g，茶多酚0.02g，羥丙纖維素lg，微晶纖維素lg,硬脂酸鎂0.5g。把稱量好的雙羥基油酸，L-肉堿，茶多酚，羥丙纖維素和微晶纖維素混合均勻，置流化床制粒機中制粒，顆粒水分小于5%，30目篩整粒，加入硬脂酸鎂，混勻后的顆粒填充膠囊即得。規(guī)格為750mg/每粒。使用方法一日三次，每次兩粒。實施例23雙羥基油酸片劑物質(zhì)稱量雙羥基油酸100g，維生素E0.04g，淀粉100g,羥丙纖維素lg。把稱量好的雙羥基油酸，維生素E，淀粉和羥丙纖維素混合均勻，以壓片機壓片，密封包裝即成。規(guī)格為750mg/每片。使用方法一日三次，每次片粒。實施例24雙羥基油酸與L-肉堿片劑物質(zhì)稱量雙羥基油酸50g,L-肉堿50g，維生素E0.04g，淀粉100g，羥丙纖維素lg。把稱量好的雙羥基油酸，L-肉堿，維生素E，淀粉和羥丙纖維素混合均勻，以壓片機壓片，密封包裝即成。規(guī)格為750mg/每片。使用方法一日三次，每次片粒。實施例25雙羥基油酸薄膜包衣片劑物質(zhì)稱量雙羥基油酸100g，茶多酚0.03g，淀粉100g，微晶纖維素2g，硬脂酸鎂0.5g。把稱量好的雙羥基油酸，茶多酚，淀粉和羥丙纖維素混合均勻，按常規(guī)片劑工藝壓片制素片，再用3Q/^HPMC(含1%鈦白粉)進行薄膜包衣，制成薄膜包衣片劑。規(guī)格為750mg/每片。使用方法一日三次，每次片粒。實施例26減肥雙羥基油酸奶粉物質(zhì)稱量脫脂鮮牛奶10L，共軛亞油酸150mL(2.5%V/V)，雙羥基油酸100g(0.3%M/V)，維生素A0.03g、維生素D0.0002g。把稱量好的雙羥基油酸、維生素A、D與共軛亞油酸混合，牛奶加熱至40~45°C，把混合物加入脫脂鮮牛奶中，攪拌，在3540Mpa壓力下均質(zhì)一次。85。C短時殺菌后，以進風溫度控制在160~165°C,出風溫度控制在7580'C左右的條件進行噴霧干燥，采用防水、避光、無污染的包裝材料進行包裝。使用方法..一日三次，每次100g。實施例27雙羥基油酸乳膏取2g雙羥基油酸溶于4mL的丙二醇；將硬脂酸30g、凡士林10g、單甘酯4g混合加熱到70-80。C，攪拌充分，得到A液；將三乙醇胺0.5g，去離子水49.5混合加熱到70-80°C，攪拌充分，得到B液；然后將B液加入到A液中，強力攪拌，配成乳膏基質(zhì)94g，在40。C左右，加入雙羥基油酸液，攪拌均勻，即得。.使用方法取適量涂抹在皮膚上，輕輕按摩直至吸收。一天兩次，早晚各一次。實施例28雙羥基油酸凝膠取0.5g雙羥基油酸溶于4mL的丙二醇；將卡波譜2g在93.5g去離子水中溶脹,配成成凝膠基質(zhì)95.5，然后把雙羥基油酸與凝膠基質(zhì)混合均勻，即得。使用方法取適量涂抹在眼睛周圍，輕輕按摩直至吸收。一天兩次，早晚各一次。實施例29雙羥基油酸透明膏霜取5g雙羥基油酸溶于8mL的50°/。丙二醇乙醇溶液；將透明乳化劑2g、異四十烷35g、去離子水50g混合加熱到70-80。C，攪拌充分，配成透明乳膏基質(zhì)87g,在40。C左右，加入雙羥基油酸液，攪拌均勻，即得。使用方法取適量涂抹在皮膚上，輕輕按摩直至吸收。一天兩次，早晚各實施例30雙羥基油酸滋潤油取20g雙羥基油酸溶于10mL丙二醇中;將葡萄籽油30g、蜂蠟10g、硅油30g混合，加熱到70-80。C，配成油劑基質(zhì)70g，冷至40。C，加入雙羥基油酸液，混合均勻，即得。使用方法取適量于手掌,，在皮膚上輕輕按摩直至吸收。適用干性皮膚。實施例31雙羥基油酸蜜。取2g雙羥基油酸溶于4mL的丙二醇；將化妝白油10g、橄欖油20g、單甘酯5g、乳化劑SQE5g等按一定比例混合加熱到70-80。C，攪拌充分，得到A液；將PEG4004g,去離子水50g混合加熱到70-80。C，攪拌充分，得到B液；然后將B液加入到A液中，強力攪拌，配成乳液94g,在40。C左右，加入雙羥基油酸液，攪拌均勻，即得。使用方法..取適量涂抹在皮膚上，輕輕按摩直至吸收。一天兩次，早晚各權(quán)利要求1、一種雙羥基油酸，其特征在于是用共軛亞油酸或共軛亞油酸酯與二氧化硒反應(yīng)得到的產(chǎn)物，名為雙羥基油酸，分子式為C18H34O4，形態(tài)為淡黃色的油狀物。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的雙羥基油酸，其特征在于雙羥基油酸中含有四個雙羥基油酸的同分異構(gòu)體化合物其一為9，10-雙羥基-llE-十八碳烯酸(1)，結(jié)構(gòu)式為<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>(1)其二為10，11-雙羥基-12E-十八碳烯酸(2)，結(jié)構(gòu)式為:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>(2)其三為11，12-雙羥基-9E-十八碳烯酸(3)，結(jié)構(gòu)式為:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>其四為12,13-雙羥基-10E-十八碳烯酸(4)，結(jié)構(gòu)式為:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>(4)3、一種如權(quán)利要求1所述的雙羥基油酸的制備方法，其特征在于在容器中加入有機溶劑和二氧化硒，在25-60。C下攪拌0.5-2h后，加入共軛亞油酸或共軛亞油酸酯，繼續(xù)攪拌反應(yīng)12-48h，反應(yīng)結(jié)束后，加水洗滌，收集有機溶劑層，回收溶劑，即得到淡黃色的油狀產(chǎn)物，所述的有機溶劑為二氯甲烷或甲苯或正己烷或環(huán)己烷或石油醚或乙醚或90%以上的乙醇或乙酸乙酯囊原料用量二氧化硒共軛亞油酸或共軛亞油酸酯的摩爾ti為2:0.50.5:2，有機溶劑的用量為共軛亞油酸或共軛亞油酸酯重量的5~30倍體積。4、根據(jù)權(quán)利要求3所述的雙羥基油酸的制備方法，其特征在于在容器中加入有機溶劑和二氧化硒，在25-6(TC下攪拌0.5-2h后，加入共軛亞油酸酯，繼續(xù)攪拌反應(yīng)12-48h,反應(yīng)結(jié)束后，加水洗滌，收集有機溶劑層，回收溶劑，即得到相應(yīng)的雙羥基油酸酯的淡黃色的油狀產(chǎn)物，進一步采用常規(guī)酯水解方法得到雙羥基油酸，所說的共軛亞油酸酯是指共軛亞油酸甲酯、共軛亞油酸乙酯或共軛亞油酸甘油酯，經(jīng)反應(yīng)后得到的是相應(yīng)的雙羥基油酸甲酯、雙羥基油酸乙酯或雙羥基油酸甘油酯。5、一種如權(quán)利要求1所述的雙羥基油酸的用途，在于制備治療肥胖、降血脂、降血糖，提高免疫力的藥物或食品；制備抗氧化和美白的皮膚護理外用制劑。6、一種如權(quán)利要求5所述的雙羥基油酸的用途，其特征在于在雙羥基油酸中添加左旋肉堿，制備治療肥胖、降血脂、降血糖的藥物或食品，或用作飼料添加劑，產(chǎn)品中雙羥基油酸與左旋肉堿的重量比為4:1~8。全文摘要雙羥基油酸及它的制備方法與用途，涉及新的十八碳烯酸衍生物，雙羥基油酸及它的制備方法與用途。該化合物是用共軛亞油酸與二氧化硒在25-60℃下攪拌0.5-2h后，繼續(xù)攪拌反應(yīng)12-48h后，加水洗滌，收集有機溶劑層，回收溶劑反應(yīng)得到的雙羥基油酸，分子式為C₁₈H₃₄O₄，形態(tài)為淡黃色的油狀物。雙羥基油酸可用于制備治療肥胖、降血脂、降血糖，提高免疫力的藥物或食品；制備抗氧化和美白的皮膚護理外用制劑。也可在雙羥基油酸中添加左旋肉堿，制備治療肥胖、降血脂、降血糖的藥物或食品，或用作飼料添加劑，產(chǎn)品中雙羥基油酸與左旋肉堿的重量比為4∶1～8。文檔編號C07C59/00GK101613267SQ200810029098公開日2009年12月30日申請日期2008年6月27日優(yōu)先權(quán)日2008年6月27日發(fā)明者冀軍鋒,朱龍平,珍李,杜柯霖,杜若吉,楊得坡,創(chuàng)王,王冬梅,偉馬,魯冰山申請人:中山市尤利卡天然藥物有限公司;中山大學(xué)