專利名稱：：一種抑制血管新生的硝酸酯藥物的制作方法
技術(shù)領域：
：本發(fā)明屬于醫(yī)藥領域，特別涉及式(I)化合物及其合成方法。本發(fā)明也涉及該化合物在藥物上的用途和藥用制劑，特別是針對腫瘤、眼部血管新生的治療。
背景技術(shù)：
：血管新生包括兩個概念胚胎期的血管發(fā)生(vasculogenesis，VG)和出生后的血管生成(anglogenesis，AG)。VG指的是在沒有血管系統(tǒng)的情況下，由血管內(nèi)皮袓細胞(Endothelialprogenitorcell,EPCs)或成血管細胞(angloblasts)分化成內(nèi)皮細胞，并形成血管網(wǎng)。AG指的是在成體血管，由已經(jīng)存在的成熟內(nèi)皮細胞沖破管壁基質(zhì)遷移，增殖和重構(gòu)，以發(fā)芽方式使血管樹枝持續(xù)延長。本發(fā)明中的血管新生是指出生后的血管生成(anglogenesis，AG)。血管新生(anglogenesis)不但是正常生理變化中(如生長、傷口愈合)所必需有的過程，近年來科學家們也發(fā)現(xiàn)它和腫瘤、老年性黃斑變性、惡性血液病等許多疾病的發(fā)展有密切的關(guān)系。抑制病理性的血管新生，可以治療或減緩腫瘤、老年性黃斑變性、惡性血液病等許多疾病。目前臨床治療腫瘤的方法大多是針對不同腫瘤采用不同的方法，并且絕大部分是針對腫瘤細胞進行治療。而腫瘤生長是一個復雜的過程，它受到多種因素的影響，其中包括腫瘤血管網(wǎng)的建立。許多研究已經(jīng)證明腫瘤生長必須依賴血管生成，通過抑制血管生成的某些環(huán)節(jié)或整個過程，進而控制腫瘤的生長，對腫瘤治療和防止腫瘤遠處轉(zhuǎn)移有重要意義。70年代初隨著腫瘤生長依賴于血管形成概念的提出，也相應提出了抗血管形成治療的概念，即通過阻止新生血管的發(fā)生和/或新生血管網(wǎng)的擴展和/或破壞新生血管來阻止小的實體瘤的產(chǎn)生或建立，以阻止腫瘤生長、發(fā)展和轉(zhuǎn)移。國外報道較多的肝素加氫化可的松.被公認為能有效地抑制血管生成。實驗證實，其二者聯(lián)合應用能抑制雞胚絨毛尿囊膜上血管的生成，井能使腫瘤消退和阻止轉(zhuǎn)移，還可抑制腫瘤引起的兔角膜血管新生。而血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)是一類多功能的生長因子，具有促進內(nèi)皮細胞增殖、誘導血管形成的作用，一般認為抑制血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)可以治療或減緩病理性血管新生。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)與新生血管有關(guān)的疾病如腫瘤、眼部新生血管疾病、惡性血液病、支氣管哮喘等疾病有密切關(guān)系，通過抑制血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)，可以治療或減緩這些疾病，大量文獻均有這方面的報道如《綜述VEGF的結(jié)構(gòu)特征及生物學功能》(中華臨床醫(yī)學研究雜志，2007年13巻3期，388)、《血管內(nèi)皮生長因子及其受體在婦科疾病中的研究進展》(河北醫(yī)藥2006年28巻12期，1192-1194)、《血管內(nèi)皮生長因子與腫瘤關(guān)系研究進展》(廣西醫(yī)科大學學報，2006年23巻2期，333-335)、《VEGF相關(guān)抗腫瘤治療的研究現(xiàn)狀》(吉林醫(yī)學，2006年27巻5期，454-457)、《靶向VEGF治療惡性腫瘤的研究進展》(現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學，2006年14巻3期，370-372)、《VEGF和PEDF對眼底新生血管的共同調(diào)節(jié)作用》(國外醫(yī)學臨床生物化學與檢驗學分冊,2005年26巻11期，819-821)、《眼底新生血管防治的研究進展》(眼科新進展,2000年20巻6期，449-451)、《血管內(nèi)皮生長因子及其受體與眼內(nèi)新生血管性疾病》(眼科研究，2003年21巻l期，103-106)、《VEGF與惡性血液病的關(guān)系》(國外醫(yī)學生理病理科學與臨床分冊，2004年24巻2期，183-185)、《腦白質(zhì)疏松患者血清VEGF水平的研究》(疑難病雜志，2007年6巻1期，10-11)、《血管內(nèi)皮生長因子與支氣管哮喘》(實用醫(yī)學雜志，2007年第23巻第3期，433)。已知有多種藥物可抑制新血管的形成(血管生成或新生血管形成)。例如，在Crum等人的"一類新的類固醇在肝素或肝素片段的存在下抑制血管生成"(Science,Vol.230:1375-1378:1985年12月20日)一文中，公開了可在肝素或特定肝素片段的存在下抑制血管生成的類固醇。作者將所述類固醇稱為"血管抑制(anglostatic)"類固醇。此類被發(fā)現(xiàn)具有血管抑制作用的類固醇中所包括的有可的松和去氧可的松的二氫和四氫代謝物。在測試有關(guān)所述機理的假說的后續(xù)研究中證明肝素/血管抑制類固醇組合物導致基底膜支架溶解，在所述支架上連接有貼壁依賴性內(nèi)皮，從而導致毛細管萎縮(involution);其中所述機制是類固醇通過其來抑制血管生成的機制；參見lngber等人的"通過血管抑制類固醇來抑制血管生成的可能機理毛細管基底膜溶解的誘導"(EndocrinologyVol.119:1768-1775，1986)。在Aristoff等人的美國專利US4，975,537中公開了一組可用于抑制血管生成的四氫類固醇.該專利公開所述化合物可用于治療頭部創(chuàng)傷、脊柱創(chuàng)傷、敗血癥性休克或創(chuàng)傷性休克、中風和出血性休克。此外，該專利還討論了這些化合物在胚胎植入以及在治療癌癥、關(guān)節(jié)炎和動脈硬化中的作用。在美國專利us4771,042中公開了Arlstoflf^人的專利中所公開的某些類固醇與肝素或肝素片段組合來抑制溫血動物的血管生成。LI等人，"通過硫酸化環(huán)糊精而增強效力的血管抑制類固醇抑制角膜新生血管形成"(InvestigativeophthalmologyandVisualScience,Vol32(11):2898-2卯5,1991年10月)。類固醇單獨使用可使新生血管形成多少減輕一些，但是僅單獨使用不能有效消退新生血管形成。四氫可的松已經(jīng)作為血管抑制類固醇，在Folkman等人的"血管抑制類固醇，，(Anglostaticsteroids,Ann.Surg,Vol.206(3),1987)—文中公開，其中該文獻提出血管抑制類固醇可能可用于治療由新生血管形成異常所控制的疾病，包括糖尿病性視網(wǎng)膜病、新生血管性青光眼以及晶狀體后纖維組織形成。CN03818826中介紹了乙酸阿奈可他是一種開發(fā)用于抑制眼睛新血管生成的血管抑制劑。該發(fā)明涉及用于預防AMD相關(guān)性視力喪失、維持AMD患者的視力以及抑制AMD相關(guān)性損害發(fā)展的制劑和方法。該制劑和方法涉及鞏膜旁施用3-30mg的乙酸阿奈可他或其相應的醇以提供經(jīng)鞏膜的藥物釋放。
發(fā)明內(nèi)容一種如下通式的化合物(I)或其酯或鹽T-(B-M)tl，tl為l或2，T-Hu為甾體化合物，T與H是以T上的氧原子與H相連，形成羥基即O-H的形式相連。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>其中，T中的9，ll位必為雙鍵其中，取代通式中所述的CH基中的H或CH2中的二個氫H2的取代基可如下-在1,2位，可以是雙鍵在2位，可以是F，Cl，Br，OCH3在3位，可以是，二O(酮基)，—0—CH2—CH2—C1，OH在4-5位，可以是雙鍵；在5-6位，可以是雙鍵-，在6位，可以是C1，F(xiàn)，CH3，一CHO;在7位，可以是C1，Br，9-(4，4，5,5，5-五氟戊亞磺?；?壬烷基在16位可以是CH3，0H，二CH2在17位，可以是OH，CH3，OCO(0)x(CH2)yCH3，或<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>即糠?；渲衳為0或1的整數(shù)，y是0至4的整數(shù)，在16-17位置，可以是下述基團；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>其中，R'和R"可以相同或不同，并可以為氫或1至8個碳的飽和或不飽和烴基，可以為直鏈支鏈，或環(huán)。R1,R2可以相同或彼此不同，可以為氫或具有1至4個碳原子的直鏈或支鏈垸基R3可為-CO-L-Q，L為陽(CR4R5)b"0)b2(CR4R5)b2(CO)b3(0)b4(CO)b5(CR4R5)b6-Q為H，OH，CH3，Cl，OCH2CN，SCH2CN，SH，SCH2F，1至16碳的碳氫化合物bl,b2,b3，b4,b5，b6可以相同或不同，并為0至6的整數(shù)，R4，R5相同或不同，并選自H，1至6碳的碳氫化合物，R4，R5在不同的基團中的定義可以不同。B為-〇0(0)3(014115)1)'0(。114115)1)<:0-117-&=0或1，b，,b"可以相同或不同，并為0至6的整數(shù)，R4，R5相同或不同，并選自H，l至6碳的碳氫化合物，D可以不存在也可以為含有O至兩個雜原子的1至8碳的碳氫化合物，雜原子為N，O，S中的一種或兩種，B與T上的tl個羥基以酯鍵形式相連，即T上的tl個取代基的-OH中的O分別與tl個B上的-OO-相連形成-O-CO-，當tl為2時，與T上的tl個羥基以酯鍵形式相連的兩個B基團可以相同或不同。R7選自下列基團中的一種—0(R8)0—(與M相連)，R8為C1C4的亞烷基一0(CH2)20(CH2)2O—(與M相連)，一NHCH2CH20—(與M相連)，或者一OCH2C(Ph)0—(與M相連)，—0(CH2)2C(Ph)0—(與M相連)，Ph代表苯基。M是釋放一氧化氮的功能基團，選自<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>R3和B中所述的任一R4，R5取代基在其定義的范圍內(nèi)可以相同或不同。R3和B中所述的任一R4取代基在其定義的范圍內(nèi)可以相同或不同。R3和B中所述的任一R5取代基在其定義的范圍內(nèi)可以相同或不同。優(yōu)選R1，R2均為甲基。優(yōu)選tl為1時，B與17位或R3上的羥基以酯鍵形式相連，即17位或R3上-OH中的0與B上的-C二O-相連形成-OCO-。優(yōu)選tl為l時，17位為OH，B與17位以酯鍵形式相連，即17位中的0與B上的-C=0-相連形成-OCO-優(yōu)選tl為1時，R3為-CO-CH20H，B與R3上的羥基以酯鍵形式相連，即THti的R3上-OHR6為H或C1C8的飽和或不飽和的烴基其中B與M按照以下方式相連，B與M相連的氧是上述R7基團的<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>中的O與B上的-C-O-相連形成-OCO-優(yōu)選tl為2時，2個B分別與17位和R3上的羥基以酯鍵形式相連，艮卩17位禾卩R3上-OH中的O分別與B上的-C二O-相連形成-OCO-。優(yōu)選tl為2時，17位為OH，R3為-CO-CH20H,兩個B分別與17位、R3上的羥基以酯鍵形式相連，即17位和R3上-OH中的O分別與兩個B上的-CW-相連形成-OCO-。優(yōu)選R3為-CO-CH20H或17位為OH優(yōu)選R3可為-CO-L-Q，L不存在時Q為OCH2CN，SCH2CN，SH，SCH2F,17位為OH,B與17位以酯鍵形式相連，即17位中的O與B上的-CO-相連形成-OCO-。優(yōu)選R3可為-CO-L-Q，L為CH2，CH20，CH20C=0，CH20COO,CH20COOC=0時，Q為H，OH，CH3，Cl，1至16碳的碳氫化合物。優(yōu)選R3可為CO-CH3,CO-CH20H,CO-CH20COCH3，CO-CH20COCH2CH3,CO-CH2Cl，CO-CH20COOCH3,CO-CH20COOCH2CH3，CO-OCH2CN，CO-SCH2CN,CO-SH,CO-SCH2F,CO-CH20CO(CH2)3CH3,，CO-CH20CO(CH2)14CH3優(yōu)選THu為阿奈可他及其酯或鹽<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>優(yōu)選B為-<:0(0)8(014115)|3'0(014]15)1)"-R7習a為0時,R4，R5相同或不同，并選自H，1至6碳的直鏈或支鏈烴類，D可以不存在也可以為含有0至2個雜原子的1至8碳的烴。優(yōu)選B為-CO(0)a(CR4R5)b'D(CR4R5)b"-R7-a為l時，R4，R5相同或不同，并選自H，1至6碳的碳氫化合物，D可以不存在也可以為含有0至2個雜原子的1至8碳的五元或六元環(huán)碳氫化合物。優(yōu)選B為-CO(0)a(CR4R5)b'D(CR4R5)b"-R7-a為0或1時，b',b"為0，D為含有0至兩個雜原子的1至8碳的五元或六元環(huán)烴，雜原子在環(huán)上。優(yōu)選B為-<:0(0)30:114115)13'0(014115)15"-117-a為0時,D可以不存在也可以為含有1至兩個雜原子的1至8碳的五元或六元環(huán)烴，雜原子在環(huán)上。優(yōu)選THu的H,H2，Rl，R2，R3具有下面所列的化合物所定義的結(jié)構(gòu)；氫化可的松，阿氯米松，倍氯米松，倍他米松，氯潑尼松，氯倍他索，氯倍他松，氯潑尼醇，可的松，可的松龍，地塞米松，二氟拉松，二氟可龍，氟米松，氟潑尼松龍，鹵米松，鹵潑尼松，氯替潑諾，甲羥松，甲潑尼松，甲潑尼龍，莫米他松，帕拉米松，潑尼松龍，潑尼松龍磷酸鈉，潑尼松，強的松龍戊酸酯，利美索龍，曲安西龍，氟替卡松，布地奈德，環(huán)索奈德、曲安奈德、曲安西龍、氟輕松。優(yōu)選式(I)化合物為4_(孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-21-羥基-21-醋酸酯-17-氧)-4-氧代-丁酸-2-[2-(3-苯磺酰基-1，2，5-惡二唑-2-氧化物-4-氧)乙氧基]乙酯4_(孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-21-羥基-17-氧)-4-氧代-丁酸-2-[2-(3-苯磺?；?l，2，5-惡二唑-2-氧化物-4-氧)乙氧基]乙酯2-(孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17-羥基-21-氧-)-2-氧代一乙酸—2—[2-(3-苯磺?；籰,2，5—惡二唑一2—氧化物一4一氧一)乙氧基]乙酯4-(孕甾-l，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-16，17-22R-環(huán)己基亞甲基二氧-21-氧)-4-氧代-丁酸[2-(3-苯磺?；?，2，5—惡二唑一2—氧化物—4一氧一)乙氧基]乙酯6-(孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17-羥基-6-a甲基-21-氧)-6-氧代-己酸-[2-(3-苯磺酰基一l，2，5—惡二唑一2—氧化物一4一氧一)乙胺基]一乙酯上述式(I)化合物或其生理學上可接受的鹽或溶劑合物在抑制哺乳類動物血管內(nèi)皮生長因子的藥物中的應用，哺乳類動物優(yōu)選人類。上述式(I)化合物或其生理學上可接受的鹽或溶劑合物在治療哺乳類動物血管新生性疾病的藥物中的應用，哺乳類動物優(yōu)選人類。血管新生性疾病，主要涉及腫瘤、眼部新生血管、惡性血液病、支氣管哮喘、腦白質(zhì)疏松疾病。腫瘤主要是各種實體腫瘤如胃部腫瘤、肺部腫瘤、肝部腫瘤、各種腺體腫瘤、鼻部腫瘤、眼部腫瘤、咽部腫瘤、喉部腫瘤等；惡性血液病是指血液系統(tǒng)的惡性腫瘤，主要包括白血病、淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤及惡性組織細胞病等。本化合物還可在眼部新生血管生成造成的疾病中應用眼部新生血管生成造成的疾病涉及角膜、虹膜、脈絡膜及視網(wǎng)膜等，其造成的滲出、出血和增生等病理改變對眼部結(jié)構(gòu)和功能的損害，是引起視力障礙的重要原因。大部分眼疾病均存在炎癥、缺血、缺氧等病理過程；因此，眼病與眼部新生血管形成有密切的關(guān)系。其中眼部新生血管生成造成的疾病包括角膜新生血管性眼病在與角膜新生血管相關(guān)的眼部疾病中，最常見的是配戴角膜接觸鏡所致的角膜新生血管性疾病，其他引起角膜新生血管的眼部疾病有角膜外傷，堿及其他化學物質(zhì)燒傷，角膜手術(shù)，各種感染包括細菌感染、衣原體感染、病毒感染(單皰病毒和帶狀皰疹病毒等)、原蟲感染(利什曼原蟲)等。虹膜新生血管性眼病常見有新生血管性青光眼，而視網(wǎng)膜脫離、創(chuàng)傷、糖尿病視網(wǎng)膜病變、腫瘤(視網(wǎng)膜母細胞瘤)、視網(wǎng)膜中央靜脈栓塞等是其常見的誘因。視網(wǎng)膜新生血管性眼病糖尿病、腫瘤、視網(wǎng)膜脫離、視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞、視網(wǎng)膜靜脈周圍炎、全身性紅斑狼瘡、Eales病、Coat病、Takavas病等均可引起。脈絡膜新生血管性眼病老年性黃斑變性、高度近視、中心性滲出性視網(wǎng)膜脈絡膜炎、創(chuàng)傷、腫瘤、眼組織胞漿菌病綜合征、匍行性脈絡膜病變等均可引起該種眼病。本領域的技術(shù)人員可以認為，本文所涉及的"治療"可以延伸為疾病的預防和以確定疾病的治療。式(I)化合物在治療哺乳動物的疾病中的劑量以THtl的計為0.001mg-5mg/kg/天，優(yōu)選0.005mg-2mg/kg/天。式(I)化合物在治療抑制哺乳類動物血管內(nèi)皮生長因子的藥物劑量以THu的計為0.001mg-5mg/kg/天，優(yōu)選0.005mg-2mg/kg/天。式(I)化合物在治療哺乳類動物血管新生性疾病藥物的劑量以THu的計為0.001mg-5mg/kg/天，優(yōu)選0.005mg-2mg/kg/天。作為治療人的疾病時，人的體重一般按照50Kg計算，所以本發(fā)明中所述人用劑量可以按照人的實際體重計算，也可以按照上述劑量X50計算。本發(fā)明中式(I)化合物可配制成任何便于用藥的制劑，因此本發(fā)明在其范圍內(nèi)也包含本發(fā)明化合物，可與一種或多種生理學上可接受的稀釋劑或載體混合的藥物組合物。本發(fā)明中式(I)化合物可配制成任何便于人用藥的制劑，該制劑治療疾病中其活性成分的用量為以THtl的計為0.001mg-5mg/kg/天，優(yōu)選0.005mg-2mg/kg/天。作為治療人的疾病時，人的體重一般按照50Kg計算，所以本發(fā)明中所述人用量可以按照人的實際體重計算，也可以按照上述用量X50計算。一種藥用組合物，該組合物包含任一項定義的式(I)化合物或其生理學上可接受的鹽或溶劑合物。上述藥用組合物包含式(I)化合物或其生理學上可接受的鹽或溶劑合物與一種或多種生理學上可接受的藥物輔料混合。上述藥用組合物可以配制成液體制劑、滅菌制劑與無菌制劑、固體制劑、半固體制劑、氣霧劑，上述制劑類型可以按照藥劑學(第五版，人民衛(wèi)生出版社，崔福德主編)中的相關(guān)定義理解。式(I)化合物或其生理學上可接受的鹽或溶劑合物可以作為治療眼部新生血管生成造成的疾病的藥物。一種眼用制劑，該制劑含有式(I)化合物或其生理學上可接受的鹽或溶劑合物，以及作為載體的藥用輔料。該眼用制劑可以制成滴眼劑、注射劑、埋植劑，具體方法可以按照阿奈可他及其酯的制劑方法制備或按照藥劑學(第五版，人民衛(wèi)生出版社，崔福德主編)中的相關(guān)制劑的方法配制。一種眼用注射劑注射的位置與阿奈可他及其酯作用的位置相同。一種注射制劑，該制劑中含有任一項定義的式(I)化合物或其生理學上可接受的鹽或溶劑合物，以及作為載體的藥用輔料。注射制劑中的非活性成分含有注射用水或注射用油。一種口服制劑，該制劑含有式(I)化合物或其生理學上可接受的鹽或溶劑合物，以及作為載體的藥用輔料。該口服制劑可以按照藥劑學(第五版，人民衛(wèi)生出版社，崔福德主編)中的相關(guān)制劑的方法配制。本發(fā)明進一步提供制備這樣的藥物組合物的方法，該方法包括將各種組分混合。本發(fā)明(I)化合物可按常規(guī)方法(例如)配制成口服、口腔、舌下、非腸道、注射、埋植、局部用藥或直腸給藥的制劑，尤其是口服或注射的制劑。其中口服制劑包括而不僅限于片劑、膠囊劑、散劑、顆粒劑等口服的固體及口服液等可口服的液體；注射劑包括而不僅限于針劑、混懸劑、輸液劑等可注射的液體或粉針劑等可用于注射的固體?？诜苿┲械姆腔钚猿煞趾械矸?、乳糖、水中的一種或幾種。本發(fā)明的化合物和藥物制劑可以與一種或多種選自以下的其他治療劑聯(lián)合使用或是包含一種或幾種這樣的治療劑抑制腫瘤的藥物、治療眼部新生血管生成造成的疾病的藥物、治療哮喘的藥物。抑制腫瘤的藥物包括而不限于作用于DNA化學結(jié)構(gòu)的藥物(包括烷化劑、蒽環(huán)類和鉑類化合物)；影響核酸合成的藥物(主要是抗代謝物)；作用于DNA模板影響DNA轉(zhuǎn)錄或抑制DNA依賴RNA聚合酶而抑制RNA合成的藥物；影響蛋白質(zhì)合成的藥物(如高三尖杉酯堿、紫杉類、長春花堿和鬼臼堿類等)；紫杉醇類化合物；其他類型的藥物(如激素、門冬酰胺酶、維甲類化合物等)。抑制腫瘤的藥物優(yōu)選順鉑。治療眼部新生血管生成造成的疾病的藥物包括而不限于內(nèi)皮抑素(Endostatln)、血管生成抑制因子、阿奈可他等。治療哮喘的藥物包括而不僅限于糖皮質(zhì)激素，白三烯抑制劑、(32-受體激動劑、黃嘌呤類藥物、抗膽堿藥、抗過敏藥。一種制備上述式(I)化合物方法，在11=1時，其包括1)將作為皮質(zhì)激素殘基T所代表的皮質(zhì)激素即T一H在堿性有機溶劑中與?；瘎┒狒?2)反應得到中間體(3)，催化劑可以存在或不存在，(CR4R5)b'D(CR4R5)b;'OO-(CR4R5)b'D(CR4R5)b丄(3)-OH2)中間體(3)再和NO供體(8)經(jīng)酯化反應生成目標產(chǎn)物相應的一氧化氮供體型糖皮質(zhì)激素式(I)化合物HR7、，S02R4//\、VN、o(8)上述第(1)步反應中的堿性有機溶媒為三垸基胺或吡啶等，催化劑為DMAP，第(2)步反應中的需要加入DCC和DMAP，有機溶媒為二氯甲烷。一種制備上述式(I)化合物方法，其中B與THu的21位的羥基相連的式(I)化合物方法，當《=1時，其包括1)將作為皮質(zhì)激素殘基T所代表的皮質(zhì)激素即T-H在堿性有機溶劑中與?；瘎┒狒?2)反應得到中間體(3)，催化劑可以存在或不存在，(CR4R5)b'D(CR4R5)b'、'0=COO(CR4R5)b'D(CR4R5)b^(3)-OH2)中間體(3)再和NO供體(8)經(jīng)酯化反應生成目標產(chǎn)物相應的一氧化氮供體型糖皮質(zhì)激素式(I)化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>(8)一種制備式(I)化合物中tl為2的式(I)化合物，相同或不同的B分別與THtl的R3和17位的羥基相連的，其包括-(1)將THt!在堿性有機溶媒存在下與第一種?；瘎┒狒?2)反應得到中間體(3);催化劑可以存在或不存在，然后<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>(2)將上述中間體(3)在堿性有機溶媒存在下與上步中相同或不同的?；瘎┒狒?2，)反應得到中間體(3');催化劑可以存在或不存在，然后<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>(3')(3)將上述反應中得到的中間體(3')再和NO供體(8)在有機溶媒中經(jīng)酯化反應生成目標產(chǎn)物相應的一氧化氮供體型糖皮質(zhì)激素式(I)化合物其中上述(1)至(3)步中的?；瘎┒狒?2)和(2')，中間體(3)和(3')中的各取代基在其定義范圍內(nèi)可以相同或不同。上述第(1)(2)步反應中的堿性有機溶媒為三垸基胺或吡啶等，催化劑為DMAP，第(3)步反應中的需要加入DCC和DMAP,有機溶媒為二氯甲垸。式(I)化合物的鹽是指R3-CO-CH20H時與之相連接形成的藥用鹽，藥用鹽優(yōu)選磷酸、琥珀酸、馬來酸、硫酸的鹽，更優(yōu)選指磷酸、琥珀酸、馬來酸、硫酸的鈉、鉀、鎂、f丐鹽。本發(fā)明提到的相應的THu，即A9(ll)甾體類化合物，可以通過CN200510014479.5"A9(11)甾體類化合物的制備方法"專利申請?zhí)岬降姆椒ㄖ苽?。?I)化合物相應的酯化物的17或21位酯化物可以常規(guī)的方法合成，例如按照楊健等人報道(潑尼卡酯的合成，中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，1999,30(11)，490，)的合成方法得到，也可以通過向企業(yè)如天津天藥藥業(yè)股份有限公司購買。按照中國專利申請CN200510014479.5"A9(ll)甾體類化合物的制備方法"專利申請中實施例7得到的孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17a-羥基-6a-甲基、實施例9得到的孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17a-羥基、實施例10得到的孕甾-1,4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-1701-羥基、實施例4得到的孕甾-l，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17a-羥基-6a-甲基。上述化合物可以常規(guī)的方法合成，例如通過中國專利申請CN200510122249.0"糠酸莫美他松中間體21-羥的制備方法"的方法制備以上化合物的21-羥基物孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17a,21-雙羥基-6a-甲基、孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17a，21-雙羥基、孕甾-1,4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17a，21-雙羥基、孕甾-1，4,9(11)-三烯-3，20-雙酮-17a，21-雙羥基-6a-甲基。2-甲氧基化合物THu的制法可以參見中國專利申請200710058414.X"—種治療腫瘤的孕甾藥物"中的方法。一種藥用組合物，該組合物包含上述本發(fā)明所述的任一式(I)化合物或其生理學上可接受的鹽或溶劑合物，及其與一種或多種生理學上可接受的藥物輔料混合。該組合物還包含另一種治療炎性、變應性或過敏性疾病的藥物。另一種炎性、變應性或過敏性疾病的藥物可以為(32腎上腺素受體激動劑。該組合物還可以包含抑制或殺死微生物的藥物，抑制或殺死微生物的藥物是指抗菌素。上述的藥用組合物，可以配制成液體制劑、滅菌制劑與無菌制劑、固體制劑、半固體制劑、氣霧劑、噴霧劑與粉霧劑。上述制劑類型的定義由藥劑學(第五版，崔福德主編，人民衛(wèi)生出版社出版)中的相關(guān)劑型定義。一種藥用粉霧劑制劑，該制劑含有上述任一項定義的式(I)化合物或其生理學上可接受的鹽或溶劑合物，以及作為載體的乳糖或氨基酸。本發(fā)明的化合物可以由下列方法制備得到將作為皮質(zhì)激素殘基T所代表的皮質(zhì)激素即T一H(1)，H與T相應的O相連，與相應酰化劑二酸酐(2)反應得到中間體(3)，(3)再和NO供體(8)經(jīng)酯化反應生成目標產(chǎn)物相應的一氧化氮供體型糖皮質(zhì)激素(9)。NO供體(8)是以R6—SH(4)為起始原料，與氯乙酸縮合、經(jīng)過過氧化氫氧化、再與硝酸作用、再和H—R7—H反應得到。具體工藝流程如下溶媒A-20*C20*CCl^^COOH、R^—SH-(4)(6)(CR4R5)b'D(CR4R5)b"(3)H202R4—SCH2COOH~ch3c5ohOHDCCHNC^(5)R4O2SS02R4Y、、0(7)DMAP(CR4R5)b'D(CR4R5)b"(9)即(l)NYN、0S02R4夕一R廣H,S。2R4-^VN、o(8)由(1)至lj(3)的反應可以選用的溶媒A選自吡啶、DMF、DMSO、四氫呋喃、C1C6的胺類、酮類、醚類中的一種或幾種。優(yōu)選吡啶、三乙胺。由(4)到(5)的縮和反應可以選用的溶媒選自水、吡啶、DMF、DMSO、四氫呋喃、C1C4的酮類、氯代烴類、醚類中的一種或幾種，優(yōu)選C1C4的，反應時加入適量的堿的水溶液，所述的堿為NaOH，KOH，碳酸鈉、碳酸鉀、優(yōu)選NaOH和碳酸鉀。加入的堿與化合物(2)的摩爾比為1.53:1。反應溫度為050'C。由(5)到(7)的反應中，將化合物(5)溶于210倍(重量體積比)溶媒中，所述的溶媒選自四氫呋喃、C1C4酮類、酯類、氯代烴類、醚、羧酸類中的一種或幾種。加入1.55倍(摩爾比)的11202，攪拌反應l10h，不經(jīng)分離，向反應物中加入515倍(摩爾比)的發(fā)煙硝酸，升溫至50ll(TC反應l6h，冷卻過濾得到化合物(7)。化合物(8)的制備將摩爾比26:1的H—R7—H和化合物(7)溶于適量溶媒中，所用溶媒選自水、吡啶、DMF、DMSO、四氫呋喃、C1C4的醇類，酮類、酯類、氯代烴類、醚類中的一種或幾種，優(yōu)選THF、吡啶、DMF、DMSO、C1C4的氯代烴中的一種或幾種。加入1050%的堿溶液，所述的堿選自NaOH、KOH、碳酸鈉、碳酸鉀中的一種或幾種、優(yōu)選碳酸鈉，所用的堿溶液的與化合物(7)的摩爾比(以所用的堿計)為0.52:1，反應16小時后用水稀釋、溶媒萃取。干燥后用柱層析[(乙酸乙酯石油醚(60卯°0=1:2(V/V)]分離?；衔?9)的制備，摩爾比為(0.51.5):(0.51.5):1:的DCC、化合物(3)和(8)溶于適量溶媒中，加入DMAP適量(與化合物(8)摩爾比為0.010.1)所用溶媒選自吡啶、DMF、DMSO、四氫呋喃、C1C4的酮類、酯類、氯代烴類、醚類中的一種或幾種，優(yōu)選氯代烴，在040。C下反應210小時，過濾，濾液濃縮。柱層析[(乙酸乙酯石油醚(609(TC)=1:2(V/V)]即得目標產(chǎn)物化合物(9)本發(fā)明所制得的化合物及其生理學上可接受的鹽或溶劑合物與至少一種藥學上可接受的輔料制成各種適用于口服、局部(如滴鼻、滴眼、吸入、腔道)及各種注射液形式的藥物?？梢灾瞥善瑒?、膠囊劑、乳膏劑、軟膏劑、搽劑、膜劑、栓劑、吸入劑、注射液、脂質(zhì)體注射液，液體制劑、滅菌制劑與無菌制劑，、固體制劑、半固體制劑、氣霧劑、噴霧劑與粉霧劑等藥劑。粉霧劑的載體為優(yōu)選為乳糖或氨基酸。具體實施例方式本發(fā)明中柱層析方法層析柱的長度最少70cm，內(nèi)部裝填254-硅膠，并將需要分離的有機物全溶于最少量的氯仿甲醇=1:1中，用最少量254-硅膠將該溶液吸收后置于層析柱內(nèi)硅膠的上部，使用流動相洗脫，層析柱下用若干個10ml試管接經(jīng)過柱層析得到的溶液，控制流速為10ml/3min，將每個試管的溶液用HPLC進行分析，將保留時間相同的試管溶液合并，取主點的化合物進行重結(jié)晶，得到相應的產(chǎn)物。確定主點的方法將需要分離的有機物用HPLC進行分析，除原料點外峰面積最大的點確定為主點，其保留時間為主點的保留時間。HPLC可以按照T-(COCH3)tl(T和COCH3相連的方式與T和B相連的方式相同)的相應方法測定，也可以通過以下條件測定，以主點含量最低的方法為準設備HP1084B液相色譜儀，HP79850BLC終端和UV檢測器柱材料HypersllC18，5um，125x4.6mm檢測波長242nm流動相甲醇水=5.3:4.7柱溫40。C流速約1.1ml/分DCC是二環(huán)己基碳二酰亞胺DMAP是4—N，N二甲基氨基吡啶，NO供體的合成1)苯巰基乙酸(5.1)的合成將苯硫酚(4.1)24.2gC0.22mo1)，氫氧化鈉8.8g(0.22mol)溶于150ml乙醇中，加入由氯乙酸22.78g(0.24mol)和碳酸鈉12.7gC0.12mo1)配成得200ml水溶液，室溫攪拌3h，回流lh。冷卻至室溫后加入6mol/L鹽酸調(diào)pH等于2，減壓蒸去乙醇，有白色沉淀生成，過濾，得白色棒狀晶體33.3g，收率90%，m.p.62~63°C。2)3，4一二苯磺?；?，2，5—惡二唑一2—氧化物(7.1)的合成將(5.1)20.16gC0.12mo1)溶于90ml冰醋酸中，滴加24.3ml30%H202，室溫攪拌3h，得(6.1)。產(chǎn)物不經(jīng)分離。直接向反應液中緩慢滴加發(fā)煙硝酸48ml，內(nèi)溫不超過4(TC，lh內(nèi)滴完。升溫至10(TC反應，有大量紅棕色氣體產(chǎn)生，溶液從無色逐漸變?yōu)辄S色，紅棕色。4h后反應液冷卻至室溫，有白色針狀晶體析出，過濾，干燥得16.8g，收率76%，m.p.153—155°C3.1)2-[2-(3-苯磺?；?,2，5—惡二唑一2—氧化物一4一氧一)乙氧基]乙醇(8.1)的合成將二甘醇1.06g(10mmol)和(7.1)lg(2.7mmo1)溶于10mlTHF中，滴入25%氫氧化鈉水溶液(0.5ml，3mo1)，2小時后，反應液從淡黃色變?yōu)槌赛S色。將反應液傾入20ml水中，用乙酸乙酪(3x20ml)萃取，有機層合并后加飽和食鹽水洗一次，用無水硫酸鈉干燥。過濾后將濾液濃縮。柱層析[乙酸乙酯石油醚(60~90°C)=1:2(V:V)]得油狀物0.32g，收率30%。ESLMS:[M十H1,二331。3.2)2-[2-(3-苯磺?；?，2，5—惡二唑—2—氧化物—4—氧—)乙胺基]乙醇(8.2)的合成將乙醇胺0.6g(10mmol)和(7.1)lg(2.7mmo1)溶于10mlTHF中，滴入25%氫氧化鈉水溶液(0.5ml，3mmo1)，2小時后，反應液從淡黃色變?yōu)槌赛S色。將反應液傾入20ml水中，用乙酸乙酯(3x20ml)萃取，有機層合并后加飽和食鹽水洗一次，用無水硫酸鈉干燥。過濾后將濾液濃縮。柱層析[乙酸乙酯石油醚(60~9(TC)=1:2(V:V)]得淡黃色油狀物0.26g，收率35%。ESLMS:[M+H]，=331。實施例中合成的式(I)化合物如下4-(孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-21-羥基-21-醋酸酯-17-氧)-4-氧代-丁酸-2-[2-(3-苯磺?；?1，2，5-惡二唑-2-氧化物-4-氧)乙氧基]乙酯4-(孕甾-4，9(11)-雙烯-3,20-雙酮-21-羥基-17-氧)-4-氧代-丁酸-2-[2-(3-苯磺?；?l，2，5-惡二唑-2-氧化物-4-氧)乙氧基]乙酯M、，M、Y、o2國(孕甾-l，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17-羥基-21-氧-)-2-氧代一乙酸—2—[2-(3-苯磺?；?，2，5—惡二唑—2—氧化物—4—氧—)乙氧基]乙酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>4—(孕甾-l，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-16，17-22R-環(huán)己基亞甲基二氧-21-氧)-4-氧代-丁酸[2-(3-苯磺?；?，2，5—惡二唑—2—氧化物—4—氧一)乙氧基]乙酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>6—(孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17-羥基-6-a甲基-21-氧)-6-氧代-己酸曙[2-(3-苯磺?；籰，2，5—惡二唑一2—氧化物一4一氧一)乙胺基]一乙酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>實施例14-(孕甾-4，9(11)-雙烯-3,20-雙酮-21-羥基-21-醋酸酯-17-氧)-4-氧代-丁酸-2-[2-(3-苯磺?；?l，2，5-惡二唑-2-氧化物-4-氧)乙氧基]乙酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>1)4-(孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-21-羥基-21-醋酸酯-17-氧)-4-氧代-丁酸(3.1)的合成將15mmol孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21-醋酸酯溶于80ml吡啶中，0.30mmolDMAP，加入3Ommo1丁二酸酐，加熱回流5小時后停止反應，冷卻后倒入200ml飽和冰鹽水中，用鹽酸調(diào)pH^5，靜止析出白色固體，過濾、水洗，得到產(chǎn)物8.1mmo1。2)4-(孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-21-羥基-21-醋酸酯-17-氧)-4-氧代-丁酸-2-[2-(3-苯磺酰基-1，2，5-惡二唑-2-氧化物-4-氧-)乙氧基]乙酯(9.1)的合成將步驟l)得到的化合物8mmol溶于300ml無水二氯甲烷中，加入化合物(8.1)llmmol,DCClOmmol，DMAP0.3g,室溫下反應15h，至反應液中有白色絮狀產(chǎn)物生成，過濾，濃縮。柱層析乙酸乙酯石油醚(6090°C)=1:2(V:V)]，得到目標化合物4.1mmol。元素分析計算值(％):C,58.64;H,5.80;N，3.51;O，28.04;S，4.01元素分析測定值(％):C39H46N2014SC,58.59;H,5.83;N,3.49;O，28.13;S,4.0513C-NMR(CDC13):1位至39位碳的數(shù)值<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>實施例24-(孕甾-4，9(11)-雙烯-3,20-雙酮-21-羥基-17-氧)-4-氧代-丁酸-2-[2-(3-苯磺?；?1，2，5-惡二唑-2-氧化物-4-氧)乙氧基]乙酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>將401!11014-(孕甾-4，9(11)-雙烯-3,20-雙酮-21-羥基-21-醋酸酯-17-氧)-4-氧代—丁酸—2—[2-(3-苯磺?；?，2，5—惡二唑—2—氧化物—4—氧一)乙氧基]乙酯溶于甲醇和氯仿(l:1)10ml中，氮氣保護下于O度滴加O度下飽和的的碳酸鈉(0.0045mol)水溶液，攪拌10小時后，用鹽酸調(diào)節(jié)反應體系PH為中性后加壓濃縮，除去氯仿，將該溶液稀釋于40ml冰水中，過濾，干燥得標題化合物粗品。將粗品進行柱層析，用甲醇和氯仿(h4)為流動相洗脫，取其中主點化合物進行減壓濃縮，沖入甲醇進行重結(jié)晶，得目標化合物0.0021mo1。元素分析計算值(％):C，58.72;H，5.86;N，3.70;0,27.48;S，4.24元素分析測定值(％):C37H44N2013SC，58.88;H,5.89;N，3.67;O，27.39;S,4.1713C-NMR(CDC13):1位至37位碳的數(shù)值<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>實施例32-(孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17-羥基-21-氧-)-2-氧代—乙酸—2—[2-(3隱苯磺?；?，2，5—惡二唑一2—氧化物—4—氧-)乙氧萄乙酯1)2-(孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17-羥基-21-氧-)-2-氧代一乙酸(3.3)的合成將15證o1孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基溶于80ml吡啶中，加入30mmo1乙二酸酐，加熱回流5小時后停止反應，冷卻后倒入200ml飽和冰鹽水中，用鹽酸調(diào)pH:5，靜止析出白色固體，過濾、水洗，得到產(chǎn)物10.3mmo1。2)2-(孕甾-4，9(II)-雙烯-3，20-雙酮-17-羥基-21-氧-)-2-氧代一乙酸—2—[2-(3-苯磺酰基一1，2，5—惡二唑一2—氧化物一4一氧一)乙氧基]乙酯(9.3)的合成將步驟l)得到的化合物10mmol溶于300ml無水二氯甲烷中，加入化合物(8.1)llmmol，DCC10mmo1，DMAP0.3g，室溫下反應15h,至反應液中有白色絮狀產(chǎn)物生成，過濾，濃縮。柱層析乙酸乙酯石油醚(6090°C)=1:2(V:V)]，得到目標化合物4.8mmol。元素分析計算值(％):C,57.68;H,5.53;N,3.84;0,28.54;S，4.40元素分析測定值(％):C35H40N2O13SC,57.60;H，5.52;N，3.86;O，28.61;S,4.4113C-NMR(CDC13):1位至35位碳的數(shù)值:<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>實施例44一(孕甾-l，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-16，17-22R-環(huán)己基亞甲基二氧-21-氧)-4-氧代-丁酸[2-(3-苯磺?；?，2，5—惡二唑—2—氧化物—4一氧—)乙氧基]乙酯以為孕甾-1，4，9(11)-三烯-3,20-雙酮-16，17-22R-環(huán)己基亞甲基二氧-2I-羥基為原料，按照實施例3的方法與丁二酸酐、化合物(8.1)反應得到目標化合物。元素分析計算值(％):C,61.10;H，6.06;N,3.24;0,25.卯;S，3.71元素分析測定值(％):C44H52N2014SC，60.99;H，6.02;N,3.30;0,25.97;S，3.7213C-NMR(CDC13):1位至44位碳的數(shù)值<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>實施例56—(孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17-羥基-6-a甲基-21-氧)-6-氧代-己酸-[2-(3-苯磺?；籰，2，5—惡二唑一2—氧化物一4—氧一)乙胺基]一乙酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-6-a甲基為原料，按照實施例3的方法與己二酸酐、化合物(8.2)反應得到目標化合物。元素分析計算值(％):C，60.21;H,6.44;N,5.27;0,24.06;S,4.02元素分析測定值(％):C40H51N3O12SC，60.29;H,6.48;N,5.24;O，23.99;S，4.0013C-NMR(CDC13):1位至40位碳的數(shù)值主藥4-(孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-21-羥基-21-醋酸酯-17-氧)-4-氧代-丁酸-2-[2-(3-苯磺?；?1，2，5-惡二唑-2-氧化物-4-氧)乙氧基]乙酯5g輔料煙酰胺70g苯甲醇7.5ml注射用水加至1000ml制備將4-(孕甾-4，9(11)墨雙烯-3,20-雙酮-21-羥基-21-醋酸酯-17-氧)-4-氧代-丁酸-2-[2-(3-苯磺酰基-l，2，5-惡二唑-2-氧化物-4-氧)乙氧基]乙酯先用少量注射用水調(diào)勻作為藥液(1)待用，再將煙酰胺溶于適量注射用水中，加入活性炭O.lg，攪拌均勻后放置15mln，粗濾脫碳，加注射用水至約卯0ml，水浴上加熱至8090°C，慢慢加入藥液(1)，保溫20-30mln，完全溶解后冷卻至室溫。加入苯甲醇，調(diào)節(jié)pH至6.56.0，調(diào)整體積至1000ml，然后在1(TC以下放置8h，過濾至澄明、灌封，100'C流通蒸氣滅菌15min即可。實施例7:吸入粉霧劑膠囊用細碎的乳糖將201!^4-(孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-21-羥基-21-醋酸酯-17-氧)-4-氧代-丁酸-2-[2-(3-苯磺?；?1，2，5-惡二唑-2-氧化物-4-氧)乙氧基]乙酯稀釋混合成200mg的藥物組合物，裝入4號硬膠囊中。實施例8:口服膠囊用細碎的淀粉將2011^4-(孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-21-羥基-21-醋酸酯-17-氧)-4-氧代-丁酸-2-[2-(3-苯磺酰基-1，2，5-惡二唑-2-氧化物-4-氧)乙氧基]乙酯稀釋混合成200mg的藥物組合物，裝入4號硬膠囊中。藥理實施例1:體外實驗采用生長因子誘導的雞胚絨毛尿囊膜(CAM)血管增生模型觀察式(I)化合物對血管增生的影響，了解式(I)化合物對血管生成的作用。實驗材料受精3日齡雞胚玻璃纖維濾紙血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)Chemlcon公司產(chǎn)品將實施例1-10所制成的化合物先用DMSO溶解，再用PBS稀釋至所需要的濃度(DMSO濃度<0.1%)實驗方法1.CAM模型的建立75%乙醇清洗雞胚卵殼于超凈臺中吹干，水平放置5min后，在100mm培養(yǎng)皿邊緣小心將卵殼敲碎，卵內(nèi)容物置于培養(yǎng)皿中(培養(yǎng)皿中預先加有10mlDMEM培養(yǎng)基)。將此培養(yǎng)皿放入150mm大培養(yǎng)皿中(大培養(yǎng)皿中加少許水)，蓋上皿蓋，置于37。C、5%(:02的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。2.對CAM血管增生的影響用打孔機將玻璃纖維濾紙制成直徑3mm的小圓片，濕熱滅菌,將試劑各10pl滴于玻璃纖維濾紙上，制成藥膜，吹干備用。雞胚培養(yǎng)3d后，隨機分成7組，每組10個，將實施例l-5所得的化合物設為5個給藥組(lg/L)，同時給予生長因子(2pg/L)，以及生長因子(VEGF)單獨刺激組(陽性對照組)和PBS(磷酸鹽緩沖液，PH7.4)刺激組(陰性對照組)。將藥膜貼于CAM和卵黃囊膜(yolksacmembrane，YSM)外2/3處血管較少的部位。加藥48h后，顯微鏡下觀察，計數(shù)藥膜周圍5mm內(nèi)大、中、小血管數(shù)。<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>注統(tǒng)計學方法數(shù)據(jù)以^tS表示.組間比較應用t檢驗3.結(jié)果l式(I)化合物對VEGF誘導的CAM血管增生的影響結(jié)果見表l，PBS組血管生長良好.VEGF組小血管增生明顯，式(I)化合物的各組血管增生明顯受到抑制.小血管顯著減少，基本回到正常水平。CAM是經(jīng)典的血管生成評價模型，具有方法簡便、易觀察、價廉等優(yōu)點.是目前最常用的在體模型。VEGF是重要的促血管生成因子，能刺激內(nèi)皮細胞的增生和遷移，促進血管生成，且在多種腫瘤組織中發(fā)現(xiàn)過度表達。本研究表明式(I)化合物抑制VEGF誘導的CAM血管增生，表明式(I)化合物具有抑制VEGF的促血管生成作用。式(I)化合物對血管生成有抑制作用，進一步證實了具有抑制腫瘤血管生成的潛力。藥理實施例2:體內(nèi)實驗1.實驗動物及瘤株實驗選用昆明種小鼠，雄性，體重(20士2)g，MO只，分14組，每組10只。小鼠肉瘤瘤株S1802.藥品順鉑(DDP)注射液20ml:20mg/支。3.方法3.1瘤鼠模型的建立小鼠肉瘤S180瘤株，腹腔傳代接種。待腹水生長良好時，抽出腹水，細胞計數(shù)，調(diào)整細胞濃度為2xl07個細胞/ml，在小鼠腋下皮下注射S180肉瘤細胞，每只接種0.25ml，于第ll天觀察局部腫瘤生長情況。3.2治療及分組140只小鼠于接種當天隨機分為14組。按下列表格給與藥物試驗分組情況表<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>注實施例試驗組中給藥量按活性成分計。根據(jù)文獻"順鉑對小鼠骨髓遺傳毒性的研究"(《癌變.畸變.突變》，1996年8巻6期，362-365)中的介紹，對小鼠采用0.5mg/kg的給藥量。用藥10d，末次灌胃后60min，處死各組小鼠，剝?nèi)×鰤K、稱重，瘤塊作病理組織切片。按公式計算抑瘤率抑瘤率=(對照組平均瘤重-實驗組平均瘤重)/對照組平均瘤重xlOOX。3.3微血管染色免疫組化SABC法染色血管，即用型微血管染色試劑盒(CD31)為武漢博士德生物公司產(chǎn)品。各組瘤體剝離后，切取標本，固定，包埋，切片。經(jīng)染色后的切片，內(nèi)皮細胞褐染，血管呈黃褐色，易于辨認。MVD(微血管密度，microvesseldensity)的測定MVD按照Weldner等人(WeldnerN，SempleJP，WelchWR。etal.TumoranglogenesisandMetastastasiscorrelationininvasivebreastcarcino歸a,NEnglJMed，1991，324，1-8)的方法及判斷標準進行，計算腫瘤內(nèi)著色的毛細血管和微小血管，即在低倍鏡視野下掃視整個腫瘤組織切片，選擇最密集的微血管標記區(qū)，凡呈現(xiàn)黃褐色標記清晰的單個內(nèi)皮細胞或內(nèi)皮細胞串均作為一個可計數(shù)的微血管，有較厚肌壁的大血管及管腔面積大于8個紅細胞直徑的血管不計數(shù)。計數(shù)方法先在低倍鏡(10xl0)視野下掃視整個組織切片，在腫瘤浸潤區(qū)選擇最密集的3個微血管標記區(qū)視野，即所謂的"新生血管熱點區(qū)"，然后在相同的背底、背體條件下，以高倍鏡(20x20)視野(0.72mm"為標準計數(shù)所有染色的微血管數(shù)，取其平均值作為該樣本的測定值。3.4VEGF免疫組化VEGF免疫組化檢測試劑盒(即用型)，光學顯微鏡下觀察VEGF陽性染色以腫瘤細胞及其附近的血管內(nèi)皮細胞漿或胞膜出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性表達。然后每張染色切片通過MP1AS—1000高清晰度彩色病理圖像分析系統(tǒng)進行吸光度(面密度)和強度(灰度)測定。3.5統(tǒng)計方法運用SPSS統(tǒng)計軟件，采用q檢驗。PO.05為差異有統(tǒng)計學意義。4.結(jié)果4.1S180各組小鼠移植瘤重變化比較瘤重的變化各治療組瘤重均顯著低于對照組，與對照組比較，差異均有統(tǒng)計學意義，實驗結(jié)果表明各種式(I)化合物對S180移植瘤有明顯抑制作用，與DDP合用具有增效作用，而不同劑量的式(I)化合物對S180移植瘤也具有劑量正相關(guān)的抑制作用，具體情況見表2。表2式(I)化合物對S180移植瘤的抑制作用U土"彌)<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>4.2式(I)化合物對S180瘤體微血管密度(MVD)的影響各組腫瘤病理標本經(jīng)CD31染色，腫瘤組織間質(zhì)血管均有著色，以內(nèi)皮細胞被染成黃褐色為陽性表達，微血管的大小、形態(tài)差異較大，有的僅為單個內(nèi)皮細胞和內(nèi)皮細胞族，有的管腔不明顯或形態(tài)不規(guī)則，腫瘤邊緣組織的MVD高于中央。對照組腫瘤內(nèi)見大量的新生毛細胞血管，陽性目標為位于腫瘤組織及間質(zhì)成片狀或團塊狀分布的黃褐色顆粒，各用藥組陽性表達細胞顆粒減少，見表3。表3S180瘤體平均微血管密度(MVD)<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>4.3式(I)化合物對小鼠S180肉瘤組織VEGF表達的影響免疫組化結(jié)果顯示，光學顯微鏡下觀察對照組腫瘤組織及其間質(zhì)見大量呈片狀或團塊狀分布的棕黃色顆粒，各用藥組陽性表達細胞明顯減少。對VEGF表達平均面積密度和平均灰度結(jié)果見表4。表4S180肉瘤組織VEGF表達數(shù)據(jù)表"*"免》<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>5結(jié)論侵襲性生長和轉(zhuǎn)移潛能是惡性腫瘤的基本特征，也是惡性腫瘤患者致死的主要原因，有確切證據(jù)表明，90%以上的惡性腫瘤患者最終死于腫瘤轉(zhuǎn)移和復發(fā)，而且轉(zhuǎn)移通常早期發(fā)生，在臨床診斷出原發(fā)瘤時約50%的患者已產(chǎn)生遠處轉(zhuǎn)移。對于快速增殖、極少凋亡、多灶性分布、異質(zhì)性生長的轉(zhuǎn)移瘤，目前的手術(shù)、放療、化療等常規(guī)治療手段常遭失敗，最終患者死亡。轉(zhuǎn)移實乃惡性腫瘤頑固性和難治性的根本原因。研究表明在實體瘤的生長、浸潤和轉(zhuǎn)移中，持續(xù)的血管生成是一個關(guān)鍵因素。當瘤細胞分裂增值到一定的體積時(一般不超過12mm2)，如果仍無血管長入提供必須的營養(yǎng)物質(zhì)和氧以及增殖所需要的各種因子，其死亡的細胞數(shù)和增生的細胞數(shù)大致相等，瘤細胞團停止擴張達到相對穩(wěn)定的狀態(tài)。當腫瘤誘發(fā)宿主的血管增殖，一些新生血管長入腫瘤組織后，腫瘤細胞群迅速增加，體積增大，向周圍組織浸潤，并具有轉(zhuǎn)移傾向。藥理實施例l表明，式(1)化合物對VEGF誘導的CAM血管增生存在這明顯的抑制作用，進一步證實了該化合物具有抑制腫瘤血管生成的潛力。通過藥理實施例2體內(nèi)實驗結(jié)果表明，式(l)化合物能夠抑制腫瘤的生長，并且，式(1)化合物與DDP聯(lián)用的DDP聯(lián)合組(抑瘤率61.2%)與試驗組l(抑瘤率51.0%)禾BDDP組(抑瘤率54.4%)相比，抑瘤率有明顯的提高，與相同劑量的DDP和(I)化合物組與對照組的MVD、VEGF表達相比均明顯降低，而且DDP聯(lián)合組的MVD、VEGF值降低更明顯，這表明式(I)化合物和順鉑聯(lián)合治療腫瘤，具有協(xié)同作用，減少血管新生，提高了抗癌效果。通過藥理實施例1和2中的數(shù)據(jù)可以證明，式(I)化合物對哺乳動物的血管新生和VEGF具有抑制作用，可以治療或預防與此有關(guān)的疾病能夠抑制腫瘤的生長與增殖。權(quán)利要求1.一種如下通式的化合物(I)或其酯或鹽T-(B-M)t1，t1為1或2，T-Ht1為甾體化合物，T與H是以T上的氧原子與H相連，形成羥基即O-H的形式相連。其中，T中的9，11位必為雙鍵其中，取代通式中所述的CH基中的H或CH2中的二個氫H2的取代基可如下在1，2位，可以是雙鍵在2位，可以是F，Cl，Br，OCH3在3位，可以是，＝O(酮基)，-O-CH2-CH2-Cl，OH在4-5位，可以是雙鍵；在5-6位，可以是雙鍵；在6位，可以是Cl，F(xiàn)，CH3，-CHO；在7位，可以是Cl，Br，9-(4，4，5，5，5-五氟戊亞磺?；?壬烷基在16位可以是CH3，OH，＝CH2在17位，可以是OH，CH3，OCO(O)x(CH2)yCH3，或即糠?；渲衳為0或1的整數(shù)，y是0至4的整數(shù)，在16-17位置，可以是下述基團；其中，R’和R”可以相同或不同，并可以為氫或1至8個碳的飽和或不飽和烴基，可以為直鏈、支鏈，或環(huán)；R1，R2可以相同或彼此不同，可以為氫或具有1至4個碳原子的直鏈或支鏈烷基R3可為-CO-L-Q，L為-(CR4R5)b1(O)b2(CR4R5)b2(CO)b3(O)b4(CO)b5(CR4R5)b6-Q為H，OH，CH3，Cl，OCH2CN，SCH2CN，SH，SCH2F，1至16碳的碳氫化合物b1，b2，b3，b4，b5，b6可以相同或不同，并為0至6的整數(shù)，R4，R5相同或不同，并選自H，1至6碳的碳氫化合物，R4，R5在不同的基團中的定義可以不同，B為-CO(O)a(CR4R5)b’D(CR4R5)b”CO-R7-a＝0或1，b’，b”可以相同或不同，并為0至6的整數(shù)，R4，R5相同或不同，并選自H，1至6碳的碳氫化合物，D可以不存在也可以為含有0至兩個雜原子的1至8碳的碳氫化合物，雜原子為N，O，S中的一種或兩種，B與T上的t1個羥基以酯鍵形式相連，即T上的t1個取代基的-OH中的O分別與t1個B上的-C＝O-相連形成-O-CO-，當t1為2時，與T上的t1個羥基以酯鍵形式相連的兩個B基團可以相同或不同；R7選自下列基團中的一種-O(R8)O-(與M相連)，R8為C1～C4的亞烷基-O(CH2)2O(CH2)2O-(與M相連)，-NHCH2CH2O-(與M相連)，或者-OCH2C(Ph)O-(與M相連)，-O(CH2)2C(Ph)O-(與M相連)，Ph代表苯基；M是釋放一氧化氮的功能基團，選自R6為H或C1～C8的飽和或不飽和的烴基其中L與M按照以下方式相連，B與M相連的氧是上述R7基團的R3和B中所述的任一R4，R5取代基在其定義的范圍內(nèi)可以相同或不同R3和B中所述的任一R4取代基在其定義的范圍內(nèi)可以相同或不同R3和B中所述的任一R5取代基在其定義的范圍內(nèi)可以相同或不同。2R3和B中所述的任一R4，R5取代基在其定義的范圍內(nèi)可以相同或不同R3和B中所述的任一R4取代基在其定義的范圍內(nèi)可以相同或不同R3和B中所述的任一R5取代基在其定義的范圍內(nèi)可以相同或不同。2.如權(quán)利要求l所述的式(I)化合物為4-(孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-21-羥基-21-醋酸酯-17-氧)-4-氧代-丁酸-2-[2-(3-苯磺?；?1，2，5-惡二唑-2-氧化物-4-氧)乙氧基]乙酯R6為H或C1C8的飽和或不飽和的烴基其中L與M按照以下方式相連,B與M相連的氧是上述R7基團的4-(孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-21-羥基-17-氧)-4-氧代-丁酸-2-[2-(3-苯磺?；?l，2，5-惡二唑-2-氧化物-4-氧)乙氧基]乙酯2_(孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17-羥基-21-氧-)-2-氧代一乙酸一2—[2-(3-苯磺?；籰，2，5—惡二唑一2—氧化物一4一氧一)乙氧基]乙酯4_(孕甾-l，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-16，17-22R-環(huán)己基亞甲基二氧-21-氧)-4-氧代-丁酸[2-(3-苯磺?；?，2，5—惡二唑—2—氧化物—4—氧一)乙氧基]乙酯6—(孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17-羥基-6-a甲基-21-氧)-6-氧代-己酸-[2-(3-苯磺?；鵢1，2，5—惡二唑一2—氧化物—4—氧一)乙胺基]一乙酯。3.如權(quán)利要求1-2中任一項定義的式(I)化合物或其生理學上可接受的鹽或溶劑合物作為治療哺乳動物疾病的藥物中的應用。4.如權(quán)利要求3所述的式(I)化合物或其生理學上可接受的鹽或溶劑合物作為治療哺乳動物疾病的藥物中的應用，其特征在于所述藥物為抑制哺乳類動物血管內(nèi)皮生長因子的藥物。5.如權(quán)利要求3所述的式(I)化合物或其生理學上可接受的鹽或溶劑合物作為治療哺乳動物疾病的藥物中的應用，其特征在于所述藥物為血管生成抑制劑的藥物。6.—種藥用組合物，該組合物包含權(quán)利要求1-2中任一項定義的式(I)化合物或其生理學上可接受的鹽或溶劑合物。7.如權(quán)利要求6的藥用組合物，其特征是所述的藥用組合物還含有一種或多種生理學上可接受的藥物輔料。8.—種注射制劑，該制劑含有權(quán)利要求1或2中任一項定義的式(I)化合物或其生理學上可接受的鹽或溶劑合物，以及作為載體的藥用輔料。9.一種口服制劑，該制劑含有權(quán)利要求1或2中任一項定義的式(I)化合物或其生理學上可接受的鹽或溶劑合物，以及作為載體的藥用輔料。10.如權(quán)利要求1或2的任一項定義的式(I)化合物，在治療哺乳動物的疾病中的劑量以THtl計為0.001mg-5mg/kg/天。全文摘要一種抑制血管新生的硝酸酯藥物，如通式(I)所示T-(B-M)_t1，t1為1或2，T-H_t1為甾體化合物，T與H是以T上的氧原子與H相連，形成羥基即O-H的形式相連。式(I)化合物可以采用甾體化合物T-H_t1為原料合成，并可以用于制備治療人或哺乳動物血管新生性疾病的藥物，主要涉及制備治療腫瘤、眼部新生血管、惡性血液病、支氣管哮喘、腦白質(zhì)疏松等疾病的藥物。文檔編號C07J43/00GK101624414SQ20081005376公開日2010年1月13日申請日期2008年7月7日優(yōu)先權(quán)日2008年7月7日發(fā)明者盧彥昌,亮孫,胡筱蕓,松陳,陳立營申請人:天津金耀集團有限公司