專利名稱：：一種基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑及合成方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑及合成方法。
背景技術(shù)：
：隨著社會老齡化的加劇，全球腫瘤患者日益增多，研究開發(fā)具有自主知識產(chǎn)權(quán)的抗腫瘤藥物的社會效益和經(jīng)濟效益顯著。侵襲與轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤最顯著的生物特征，是導(dǎo)致癌癥患者臨床死亡的主要原因。基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)是一類能夠催化降解基底膜和細胞外基質(zhì)的重要金屬蛋白酶，抑制該酶的活性就可以控制腫瘤的發(fā)生與轉(zhuǎn)移。MMPs是一個鋅離子依賴型的內(nèi)肽酶家族，它們幾乎能降解細胞外基質(zhì)的所有成分。研究發(fā)現(xiàn)，惡性腫瘤細胞的侵襲轉(zhuǎn)移與腫瘤細胞及其基質(zhì)誘導(dǎo)產(chǎn)生的MMPs的水平呈正相關(guān)。MMPs的催化結(jié)構(gòu)域?qū)τ贛MPs水解活性是至關(guān)重要的，它具有球狀的空間結(jié)構(gòu)，由五股P片層(四股平行和一股反平行)和三條長的a螺旋構(gòu)成。催化區(qū)域中含有兩個鋅離子，一個是與結(jié)構(gòu)有關(guān)的，另一個鋅離子則是催化必須的，它位于活性中心，又被稱為催化鋅離子。但自從1962年Gross和Lapierre在蝌鈄體內(nèi)發(fā)現(xiàn)能夠降解尾巴的膠原酶(MMP-1)，現(xiàn)在仍無理想的麗Ps抑制劑應(yīng)用于臨床。因此，此類藥物的研究開發(fā)迫在眉睫。根據(jù)麗Ps的三維結(jié)構(gòu)特征，采用近年新發(fā)展的計算機輔助藥物設(shè)計技術(shù)，合理設(shè)計與合成理想的腿Ps抑制劑，通過抑制腫瘤細胞表面的基質(zhì)金屬蛋白酶活性，達到抑制腫瘤細胞侵襲與轉(zhuǎn)移的目的，是發(fā)現(xiàn)新型抗癌藥物有效的策略。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑。本發(fā)明的另一目的是提供上述基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑的合成方法。本發(fā)明是這樣來實現(xiàn)的，該基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑的化學(xué)通式為R2=-H，l至5個碳原子的直鏈或支鏈垸烴或烯烴R3=-H，-OH,OCH3R4==-H，-F，-Cl,-Br,I，-N02，-CH3.-OCH3x=so2n=0，l至3個碳原子的烷烴或烯烴或？R2=-H，l至5個碳t子的直鏈或支鏈烷烴或烯烴R3=-H,-OH,OCH3X二COn=0,l至3個碳原子的烷烴或烯烴。本發(fā)明的合成方法步驟是(1)首先合成苯磺酰-D-丙氨酸將苯磺酰氯加入D-丙氨酸的Na2C03溶液中，在激烈攪拌下，7(TC反應(yīng)0.5hr。反應(yīng)畢，冰浴冷卻，用濃鹽酸調(diào)PH值至2.5，置冰箱中過夜，析出白色沉淀，過濾，濾餅用少量冰水選滌，蒸餾水重結(jié)晶，干燥，得目的物；(2)合成基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑將苯磺酰-D-丙氨酸和N-羥基丁二酰亞胺溶于二氧六環(huán)中，室溫加入DCC的二氧六環(huán)溶液，室溫反應(yīng)4hr，反應(yīng)畢，濾除白色沉淀，濾液中加入5-苯基-2-氨基-l,3,4-噻二唑，室溫反應(yīng)48hr，濾除白色沉淀，真空融縮濾液，余物溶于EtOAc中，并用飽和Na2C03溶液、水、0.1MHC1和水各洗三次，收集有機相，減壓蒸除溶劑，余物溶于MeOH中，緩慢加入水使析出白色沉淀，過濾，濾餅用MeOH-乙腈重結(jié)晶，得目的物。本發(fā)明的優(yōu)點是所設(shè)計的化合物均為小分子擬肽類化合物，合成工藝路線短，原材料易得，生產(chǎn)成本低。具體實施方式實施例苯磺酰-D-丙氨酸的合成<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>將2.56ml(20mmol)苯磺酰氯加入1.96g(22mmol)D-丙氨酸的Na2C03溶液(4.45gNa2C03溶于30ml水)中，在激烈攪拌下，7(TC反應(yīng)0.5hr。反應(yīng)畢，冰浴冷卻，用濃鹽酸調(diào)PH值至2.5，置冰箱中過夜，析出白色沉淀，過濾，濾餅用少量冰水選滌，蒸餾水重結(jié)晶，干燥，得1.58g目的物，產(chǎn)率34.5%，mp:126-128。C，[a〗=+32.2。(0.025g/ml甲醇溶液，室溫)(尺)-5國苯基隱>1-((2-苯磺酰胺)陽l-氧-丙基)陽l,3，4-噻二唑匿2-胺的合成<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>將L37g(6mmo1)苯磺酰-D-丙氨酸和0.69g(6mmol)N-羥基廠二酰亞胺溶于二氧六環(huán)中，室溫加入DCC的二氧六環(huán)溶液，室溫反應(yīng)4hr，反應(yīng)畢，濾除白色沉淀，濾液中加入1.0g(5.6mmo1)5-苯基-2-氨基-l,3,4-噻二唑，室溫反應(yīng)48hr，濾除白色沉淀，真空融縮濾液，余物溶于EtOAc中，并用飽和Na2C03溶液、水、0.1MHC1和水各洗三次，收集有機相，減壓蒸除溶劑，余物溶于MeOH中，緩慢加入水使析出白色沉淀，過濾，濾餅用MeOH-乙腈重結(jié)晶，得0.56g目的物，產(chǎn)率25.6%，mp:248-249°C)H-醒R(山-函S0)Sppm:12.72(s，1H),8.42-8.40(d,1H)，7.94-7.92(m，2H)，7.82-7.79(dd，2H)，7.56-7.51(m，6H)，4.23—4.16(m，1H),1.25—1.24(d'1H)MS(ESI)，m/z389(顧+)體外抑酶活性原理琥珀酰明膠已被證明能被明膠酶(包括MMP-2，MMP-9)水解，肽鍵水解產(chǎn)生的游離伯氨基濃度的高低與酶活性呈正相關(guān)。琥珀酸酣保護明膠中的游離氨基，水解后暴露的伯胺與2，4,6-三硝基苯磺酸(TNBSA)反應(yīng)顯色，通過檢測450nm波長處的吸收度來確定氨基含量，從而確定明膠酶的活性，間接反映出化合物對明膠酶的抑制情況。方法96孔板中分別加入不同濃度(1280|jg/mL、3200|jg/mL、80|jg/mL、20pg/mL、5pg/mL、1.25|jg/mL)的化合物40|jl，明膠酶溶液lOjjl,琥珀酰明膠溶液50iJl，50mmol/L硼酸鈉緩沖液(pH8.5)補足200lJl;100%組不含抑制劑，空白組不含明膠酶，均用硼酸鈉緩沖液補足200iJl，再加入0.03。/。TNBS溶液50iJl，37"C下孵化60min，于450nm波長處測定吸收度。按照如下公式計算抑制率抑制率二(100%吸收度一化合物吸收度)/(100%吸收度一空白吸收度)根據(jù)化合物的濃度與相應(yīng)的抑制率，計算得到各化合物的IC5()表l.化合物的抑酶活性<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>權(quán)利要求1.一種基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑，其特征是通式為id="icf0001"file="S2008101068237C00011.gif"wi="48"he="19"top="42"left="82"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="no"/>id="icf0002"file="S2008101068237C00012.gif"wi="48"he="12"top="62"left="23"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="no"/>R2＝-H，1至5個碳原子的直鏈或支鏈烷烴或烯烴R3＝-H，-OH，OCH3R4＝＝-H，-F，-Cl，-Br.-I，-NO2，-CH3.-OCH3X＝SO2n＝0，1至3個碳原子的烷烴或烯烴。2、根據(jù)權(quán)利要求l所述的基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑，其特征是:R3=-H,-OH,OCH3X=COn=0，l至3個碳原子的烷烴或烯烴。3、一種權(quán)利要求l所述的基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑的合成方法，其特征是(1)首先合成苯磺酰-D-丙氨酸將苯磺酰氯加入D-丙氨酸的Na2C03溶液中，在激烈攪拌下，7(TC反應(yīng)0.5hr。反應(yīng)畢，冰浴冷卻，用濃鹽酸調(diào)ra值至2.5，置冰箱中過夜，析出白色沉淀，過濾，濾餅用少量冰水選滌，蒸餾水重結(jié)晶，干燥，得目的物；(2)合成基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑將苯磺酰-D-丙氨酸和N-羥基丁二酰亞胺溶于二氧六環(huán)中，室溫加入DCC的二氧六環(huán)溶液，室溫反應(yīng)4hr，反應(yīng)畢，濾除白色沉淀，濾液中加入5-苯基-2-氨基-l,3,4-噻二唑，室溫反應(yīng)48hr，濾除白色沉淀，真空融縮濾液，余物溶于EtOAc中，并用飽和Na2C03溶液、水、O.lMHCl和水各洗三次，收集有機相，減壓蒸除溶劑，余物溶于MeOH中，緩慢加入水使析出白色沉淀，過濾，濾餅用MeOH-乙腈重結(jié)晶，得目的物。R2=-H,l至5個碳原子ll直鏈或支鏈烷烴或烯烴全文摘要一種基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑，其特征是通式為(Ⅰ)的本發(fā)明還公開了基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑的合成方法，本發(fā)明的優(yōu)點是所設(shè)計的化合物均為小分子擬肽類化合物，合成工藝路線短，原材料易得，生產(chǎn)成本低。文檔編號C07D285/00GK101279956SQ20081010682公開日2008年10月8日申請日期2008年4月25日優(yōu)先權(quán)日2008年4月25日發(fā)明者匡濱海,吳淑芳,剛李,李東燕,李少華,玢汪,涂國剛,芳熊,黃惠明申請人:南昌大學(xué)