專利名稱：一種天然紅景天苷的分離純化方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種天然紅景天苷的分離純化方法，具體地說是屬于植物提 取深加工技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
紅景天苷(saliroside)是紅景天屬植物的主要活性成分之一，具有抗 脂質(zhì)過氧化作用、對(duì)大鼠皮層神經(jīng)細(xì)胞的自由基損傷、對(duì)心血管系統(tǒng)有保護(hù) 作用、有保肝和抗肝纖維化、去疲勞、抗抑郁、抗癌和抗衰老等作用。紅景 天苷在藥品和保健食品行業(yè)具有廣泛應(yīng)用價(jià)值。已有的對(duì)高純度紅景天苷的 制備方法主要是一些傳統(tǒng)的方法，缺少適合工業(yè)化的高純度產(chǎn)品的制備工藝。 傳統(tǒng)方法采用多步溶劑萃取并結(jié)合硅膠柱和聚酰胺柱層析，具有浪費(fèi)有機(jī)溶 劑、高的能量消耗、分離效率低、有機(jī)溶劑殘留和高勞動(dòng)強(qiáng)度的缺點(diǎn)。雖然 高速逆流色譜(HSCCC)可以用來制備高純度的紅景天苷，但該法也具有高成 本、有機(jī)溶劑殘留和不適合工業(yè)化實(shí)際的缺點(diǎn)。因此需要探索簡(jiǎn)單且適合工 業(yè)化實(shí)際的分離純化工藝。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服上述不足之處，從而提供一種天然紅景天苷的分 離純化方法，利用紅景天為原料，可獲得高純度紅景天苷產(chǎn)品；分離純化工 藝簡(jiǎn)便，處理量大，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
按照本發(fā)明提供的技術(shù)方案， 一種天然紅景天苷的分離純化方法，采用 以下工藝步驟
1、 原料取天然紅景天為原料進(jìn)行粉碎，粉碎粒度為O. 1 2腿；
2、 提取粉碎后的紅景天粉狀料在溫度為25 75 'C的條件下用乙醇水
溶液進(jìn)行提取；乙醇水溶液的質(zhì)量百分濃度為0 95%，紅景天粉狀料與乙醇 水溶液比為1:5 1:20,提取2 4次，每次提取時(shí)間0. 5 8 h，得到紅景天 提取液；
3、 第一步大孔樹脂分離純化在常溫下，將紅景天提取液進(jìn)行濃縮，濃 縮物用水稀釋成上樣紅景天苷澄清液，上樣紅景天苷澄清液以上樣流速為
0. 5 4. 0 BV /h通過裝有大孔吸附樹脂的層析柱吸附；達(dá)飽和吸附時(shí)停止上 樣，用1 3倍柱床體積(BV)的去離子水頂洗雜質(zhì)，然后用質(zhì)量百分濃度為 0 30%、 30 80%的乙醇進(jìn)行解吸，解吸體積分別為1 6 BV、 1 8 BV，收 集0 30%的乙醇洗脫物；
4、 第二步大孔樹脂分離純化
將上述0 30%乙醇洗脫物蒸千乙醇后加水稀釋成上樣紅景天苷澄清液， 在常溫下，上樣紅景天苷澄清液上樣流速為0. 5 4. 0 BV /h通過裝有大孔吸 附樹脂的層析柱吸附，當(dāng)處理量為0.5 3 BV時(shí)停止上樣，然后用質(zhì)量百分 濃度的乙醇0% 15%、15% 30%、30% 60%進(jìn)行解吸，解吸體積分別為1 6 BV、 1 6 BV和1 8 BV，收集15°/。 30%乙醇洗脫物；
5、 減壓濃縮將上述15% 30%乙醇洗脫物在真空度為0. 05 0. lMPa、 溫度為50 80'C下減壓濃縮至干得到紅景天苷粗品；
6、 結(jié)晶純化取紅景天苷粗品用無水乙醇結(jié)晶得到紅景天苷純品。 所述第一步大孔樹脂分離純化中，大孔吸附樹脂為HPD-200、 HP-20、
AB-8、 DlOl、 LSA-7，上樣澄清液中紅景天苷的溶液濃度為0. 05 5 mg/ml， 上樣體積1 8 BV;
所述第二步大孔樹脂分離純化中，吸附樹脂為HPD-200、 HP-20、 AB-8、 DlOl、 LSA-7，上樣澄清液中紅景天苷的溶液濃度為O. 5 20mg/ml，上樣流 速為0. 5 4. 0 BV /h。
所述無水乙醇結(jié)晶，用10 60倍體積的無水乙醇(g紅景天苷粗品/ml無 水乙醇，1:60 1:10)在0 20。C下進(jìn)行結(jié)晶，晶漿離心分離，無水乙醇洗 滌后真空干燥，真空度為0.05 0. lMPa，溫度為40 70°C，得到天然紅景天 苷產(chǎn)品。
所述天然紅景天是玫瑰紅景天、大花紅景天、高山紅景天、西藏紅景天 或狹葉紅景天。
本發(fā)明與己有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn)
本發(fā)明在分離純化過程中沒有使用有害的有機(jī)溶劑，得到的產(chǎn)品安全； 大孔樹脂的吸附和解吸，還可分離純化得到紅景天多糖產(chǎn)品，可以進(jìn)一步對(duì) 紅景天資源進(jìn)行綜合利用；大孔吸附樹脂再生性能好，可再生多次使用；無 水乙醇結(jié)晶后得到天然紅景天苷的純度大于99%，整個(gè)過程中紅景天苷總的 回收率達(dá)到40%以上；分離純化工藝簡(jiǎn)便，處理量大，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例一
本發(fā)明一種天然紅景天苷的分離純化方法，采用以下工藝步驟 1、提取把玫瑰紅景天原料粉碎成紅景天粉狀料，紅景天粉狀料粒度 為0.1 5mm，粉碎后的紅景天粉狀料用一定濃度的乙醇提取，提取條件為 乙醇水溶液的質(zhì)量百分濃度為70%，紅景天粉狀原料與乙醇水溶液比為1:6， 提取溫度為60℃，提取二次，每次提取時(shí)間lh，得到紅景天提取液；
2、 第一步大孔樹脂分離純化在常溫下，將紅景天提取液濃縮到無醇味
后加水稀釋成濃度為1.89mg/ml的上樣紅景天苷澄清液(體積稀釋比為1:8)， 上樣紅景天苷澄清液以流速為0.5~4.0 BV /h通過裝有HPD-200大孔吸附樹 脂的層析柱吸附，當(dāng)處理量為3倍柱體積后停止上樣，用1.5倍柱床體積的 去離子水頂洗，然后依次用10%、 20%的質(zhì)量百分濃度乙醇進(jìn)行解吸，解吸 體積分別為3BV和4BV，收集20%乙醇洗脫物。
3、 將20%乙醇洗脫物濃干乙醇后加水稀釋成9.13mg/ml的上樣紅景天苷 澄清液(濃干乙醇的洗脫物與水稀釋比例為1: 2)，在常溫下，上樣紅景天 苷澄清液以流速為0.5 4.0BV/h通過裝有大孔吸附樹脂的層析柱吸附，當(dāng)處 理量為1BV時(shí)停止上樣，然后依次用10%、 20%和40%的質(zhì)量百分濃度乙醇 進(jìn)行解吸，解吸體積分別為2BV、 2.5 BV和3 BV，收集20%乙醇洗脫物。
4、 減壓濃縮將20%乙醇洗脫物在真空度為0.08MPa、溫度為6(TC下 減壓濃縮至干得到紅景天苷粗品；
5、 無水乙醇結(jié)晶用10倍體積的無水乙醇(g紅景天苷粗品/ml無水乙 醇，1: IO)在l0℃下進(jìn)行結(jié)晶，晶漿離心分離，無水乙醇洗滌后，在0.1MPa， 50℃下，真空干燥得到純度>99%的天然紅景天苷產(chǎn)品。
本實(shí)施例中涉及的濃縮、濃干、水稀釋、結(jié)晶、晶漿離心分離、無水乙 醇洗滌后，真空干燥均為常規(guī)工藝。 實(shí)施例二
本發(fā)明一種天然紅景天苷的分離純化方法，采用以下工藝步驟
1、提取以高山紅景天為原料粉碎成紅景天粉狀料，紅景天粉狀料粒
度為O. 1 5mm，粉碎后的紅景天粉狀料用一定濃度的乙醇提取，提取條件
為
乙醇水溶液的質(zhì)量百分濃度為0 95%，紅景天粉狀原料與乙醇水溶液比為 1:6 1:20，提取溫度為25 100℃，提取二次，每次提取時(shí)間 0.5 2h， 得到紅景天提取液；
2、 第一步大孔樹脂分離純化在常溫下，將紅景天提取液濃縮到無醇味
后加水稀釋成濃度為3.91mg/ml的上樣紅景天苷澄清液，上樣紅景天苷澄清 液以以上樣流速為0.5 4.0 BV /h通過裝有LSA-7大孔吸附樹脂的層析柱吸 附；處理量為2 BV時(shí)停止上樣，用2倍柱床體積的去離子水頂洗，然后依 次用10。/。、20。/。質(zhì)量百分濃度的乙醇進(jìn)行解吸，解吸體積分別為3BV和4BV， 收集20。/。乙醇洗脫物。
3、 第二步大孔樹脂分離純化將20%乙醇洗脫物濃干乙醇后加水稀釋 成6.43mg/ml的上樣紅景天苷澄清液，在常溫下，上樣紅景天苷澄清液以流 速為0.5 4.0 BV /h通過裝有LSA-7大孔吸附樹脂的層析柱吸附，當(dāng)處理量 為1.5BV停止上樣，然后依次用15%、 25%和50%質(zhì)量百分濃度的乙醇進(jìn)行 解吸，解吸體積分別為2BV、 2.5BV和3BV，收集25°/。乙醇洗脫物。
4、 減壓濃縮將25%乙醇洗脫物在真空度為0. 08MPa、溫度為6(TC下減 壓濃縮至千得到紅景天苷粗品；
5、 無水乙醇結(jié)晶用15倍體積的無水乙醇(g紅景天苷粗品/ml無水乙 醇，1: 15)在l(TC下進(jìn)行結(jié)晶，晶漿離心分離，無水乙醇洗滌后，在O. lMPa， 4(TC下，真空干燥得到純度>99%天然紅景天苷產(chǎn)品。
實(shí)施例三
本發(fā)明一種天然紅景天苷的分離純化方法，采用以下工藝步驟
1、提取以高山紅景天為原料粉碎成紅景天粉狀料，紅景天粉狀料粒
度為0.1 0.8mm，粉碎后的紅景天粉狀料用一定濃度的乙醇提取，提取條 件為乙醇水溶液的質(zhì)量百分濃度為20%，紅景天粉狀原料與乙醇水溶液比 為l: 20，提取溫度為75'C，提取二次，每次提取時(shí)間lh，得到紅景天提取 液；
2、 第一步大孔樹脂分離純化在常溫下，將紅景天提取液濃縮到無醇味 后加水稀釋成濃度為5mg/ml的上樣紅景天苷澄清液，上樣紅景天苷澄清液 以上樣流速為1.5BV/h通過裝有HP-20大孔吸附樹脂的層析柱吸附；處理量 為2 BV時(shí)停止上樣，用2倍柱床體積的去離子水頂洗，然后依次用5%、 30% 質(zhì)量百分濃度的乙醇進(jìn)行解吸，解吸體積分別為3BV和4BV，收集30%乙 醇洗脫物。
3、 第二步大孔樹脂分離純化將30%乙醇洗脫物濃干乙醇后加水稀釋 成16mg/ml的上樣紅景天苷澄清液，在常溫下，上樣紅景天苷澄清液以流速
為1 BV/h通過裝有HP-20大孔吸附樹脂的層析柱吸附，當(dāng)處理量為0.5 BV 停止上樣，然后依次用15%、 25%和50%質(zhì)量百分濃度的乙醇進(jìn)行解吸，解 吸體積分別為3BV、 3BV和4BV，收集25%乙醇洗脫物。
4、 減壓濃縮將25%乙醇洗脫物在真空度為0. lMPa、溫度為60。C下減 壓濃縮至干得到紅景天苷粗品；
5、 無水乙醇結(jié)晶用20倍體積的無水乙醇(g紅景天苷粗品/ml無水乙 醇，1: 20)在15。C下進(jìn)行結(jié)晶，晶漿離心分離，無水乙醇洗滌后，在0.1MPa， 5(TC下，真空干燥得到純度〉99%天然紅景天苷產(chǎn)品。
權(quán)利要求
1、一種天然紅景天苷的分離純化方法，其特征是采用以下工藝步驟(1)、原料取天然紅景天為原料進(jìn)行粉碎，粉碎粒度為0.1～5mm；(2)、提取粉碎后的紅景天粉狀料在溫度為25～75℃的條件下用乙醇水溶液進(jìn)行提?。灰掖妓芤旱馁|(zhì)量百分濃度為0～95％，紅景天粉狀料與乙醇水溶液比為15～120，提取2～3次，每次提取時(shí)間0.5～8h，得到紅景天提取液；(3)、第一步大孔樹脂分離純化在常溫下，將紅景天提取液進(jìn)行濃縮，濃縮物用水稀釋成紅景天苷澄清液，紅景天苷澄清液以上樣流速為0.5～4.0BV/h通過裝有大孔吸附樹脂的層析柱吸附；達(dá)飽和吸附時(shí)停止上樣，用1～3倍柱床體積的去離子水頂洗雜質(zhì)，然后用質(zhì)量百分濃度的乙醇0～30％、30～80％進(jìn)行解吸，解吸體積分別為1～6BV、1～8BV，收集0～30％的乙醇洗脫物；(4)、第二步大孔樹脂分離純化將上述0～30％乙醇洗脫物濃干乙醇后加水稀釋成紅景天苷澄清液，在常溫下，紅景天苷澄清液上樣流速為0.5～4.0BV/h通過裝有大孔吸附樹脂的層析柱吸附，當(dāng)處理量為0.5～3BV時(shí)停止上樣，然后用質(zhì)量百分濃度的乙醇0％～15％、15％～30％、30％～60％進(jìn)行解吸，解吸體積分別為1～6BV、1～6BV和1～8BV，收集15％～30％乙醇洗脫物；(5)、減壓濃縮將上述15％～30％乙醇洗脫物在真空度為0.05～0.1MPa、溫度為50～80℃條件下減壓濃縮至干，得到紅景天苷粗品；(6)、結(jié)晶純化取紅景天苷粗品用無水乙醇結(jié)晶得到紅景天苷純品。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種天然紅景天苷的分離純化方法，其特征在 于所述第一步大孔樹脂分離純化中，大孔吸附樹脂為HPD-200、 HP-20、 AB-8、 D101或LSA-7，所述上樣澄清液中紅景天苷的溶液濃度為0.05 5 mg/ml， 上樣體積1 8 BV。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種天然紅景天苷的分離純化方法，其特征在 于所述第二步大孔樹脂分離純化中，大孔吸附樹脂為HPD-200、 HP-20、 AB-8、 D101或LSA-7，所述上樣澄清液中紅景天苷的溶液濃度為0. 5 20 mg/ml， 上樣流速為0. 5 4. 0 BV /h。
4、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種天然紅景天苷的分離純化方法，其特征在于所述無水乙醇結(jié)晶，用10 60倍體積的無水乙醇在0 20°C下進(jìn)行結(jié)晶， 晶漿離心分離，無水乙醇洗滌后真空干燥得到天然紅景天苷產(chǎn)品。
5、 根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種天然紅景天苷的分離純化方法，其特征在 于所述真空干燥中，真空度為0. 05 0. lMPa，溫度為40 70°C 。
6、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種天然紅景天苷的分離純化方法，其特征在 于所述天然紅景天是玫瑰紅景天、大花紅景天、高山紅景天、西藏紅景天或 狹葉紅景天。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種天然紅景天苷的分離純化方法，具體地說是屬于植物提取深加工技術(shù)領(lǐng)域。特征是取天然紅景天為原料進(jìn)行粉碎，經(jīng)含醇溶劑提取、兩步大孔樹脂吸附和解吸、無水乙醇結(jié)晶、晶漿離心分離、無水乙醇洗滌后，真空干燥得到高純度的天然紅景天苷產(chǎn)品。本發(fā)明提取的紅景天苷的純度可以達(dá)到99％以上，整個(gè)過程中紅景天苷總的回收率達(dá)到40％以上；分離純化工藝簡(jiǎn)便，處理量大，適合工業(yè)化生產(chǎn)；且可以為紅景天資源的深度開發(fā)利用提供技術(shù)支撐以及其為醫(yī)藥和功能食品工業(yè)提供天然優(yōu)質(zhì)原料。
文檔編號(hào)C07H1/00GK101392011SQ20081019507
公開日2009年3月25日 申請(qǐng)日期2008年11月5日 優(yōu)先權(quán)日2008年11月5日
發(fā)明者杭曉敏, 殷夢(mèng)龍, 王洪新, 馬朝陽 申請(qǐng)人:江南大學(xué)