專利名稱：從延胡索中同步分離延胡索乙素和原阿片堿的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及的是生物堿的分離的方法，特別是從延胡索中同步分離延胡索乙素和
原阿片堿的方法。
背景技術：
延胡索又稱元胡、玄胡、玄胡索，其基原為罌粟科植物延胡索(Corydalisyanhusuo W.T.Wang)的干燥鱗莖。延胡索性溫，味苦辛，歸于心、肝、脾經，具有活血、利氣、止痛等功 效，臨床主要用于治療各種跌打傷痛、癰疽腫痛、痛經及心血管疾病。在已確定的延胡索近 20種生物堿中，延胡索乙素和原阿片堿為其主要活性成分，因此，延胡索生物堿的分離純 化就成為延胡索研究的一個重要課題。目前，人們從延胡索生物堿中分離純化延胡索乙素 和原阿片堿采的方法是大孔樹脂分離方法，雖然這種方法作為一種經典分離方法能夠將延 胡索乙素和原阿片堿從延胡索中分離出來，但該方法的缺陷主要是固相載體對分離組分的 吸附太嚴重，從而導致被分離組分的損失；其次是大孔樹脂分離時脫析溶劑用量大、耗時較 長，難以實現(xiàn)工業(yè)化生產。 高速逆流色譜(HSCCC)是近年來發(fā)展起來的一種液_液分配色譜新技術，其特點 是被分離物質在兩相液體中進行分配，不需要任何固相載體，具有混合物分離回收率高、快 速、預處理簡單、分離純化與制備同步完成的特點，因而越來越多地應用于天然物質的分 離。在該技術中溶劑系統(tǒng)的選擇和配比是該技術的關鍵因素之一。溶劑系統(tǒng)與被分離物質 種類、結構與性質等因素有關；相同溶劑系統(tǒng)中各組分配比不同，則分離效果、產品組分的 收率和純度亦不同。在《世界科學技術_中醫(yī)藥現(xiàn)代化》2006. 8 (2) ， P. 18-19上，愈雁等人發(fā) 表了一篇"應用高速逆流色譜技術從延胡索中分離延胡索乙素[J]"的論文，文中公開了延 胡索乙素單一組分的分離技術，應用該技術，延胡索乙素的收率為4. 3%，純度為96. 4%。 除此之外，有關從延胡索中同步分離延胡索乙素和原阿片堿的方法不曾有過任何公開文獻 報道。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的在于提出一種同步分離延胡索乙素和原阿片堿兩種組分單體的方 法，采用該方法能夠達到純度高、收率高，過程簡捷的分離效果，適宜工業(yè)應用。
實現(xiàn)上述目的的技術方案是 ①原料處理將干燥的延胡索塊莖粉碎成40目左右的粗粉。 ②醇膏制備粗粉用4 6倍量的70% 90%工業(yè)酒精回流提取1 2h，提取三 次，合并提取液并過濾，減壓濃縮至干，并經5(TC減壓干燥得醇浸膏。 ③生物總堿制備醇浸膏先用10倍量的0. 5 1. 5%鹽酸溶解，過濾，再用10 20%氨水調節(jié)溶解液pH到9. 0，然后用氯仿萃取3次，每次萃取的氯仿用量與溶解液量相 當，收集氯仿層，減壓回收氯仿，真空干燥得到延胡索總堿。
分離采用高速逆流色譜法，兩相溶劑系統(tǒng)采用石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，分配比(體積)為22 26 : 25 30 : 20 23 : 17 20，超聲脫氣30min，以溶劑系 統(tǒng)的上相為固定相，下相為流動相，以7 10mL/min的流速將固定相泵入高速逆流色譜儀 螺旋管中，待固定相充滿整個管路后，停泵，啟動主機，并將轉速調至750 850r/min，以 1. 5 2. OmL/min的流速泵入流動相，當流動相從出口處流出，即表明上下相達到平衡，記 錄固定相被推出的體積，并使固定相保留值在0. 5 0. 58之間。然后用流動相溶液溶解延 胡索總堿，使其濃度為10mg/mL，以2. OmL/min的流速持續(xù)泵入該溶液，分離溫度25°C ，紫外 檢測波長為280nm，在105 120min收集原阿片堿波峰組分；在165 170mim收集延胡索 乙素波峰組分。 本發(fā)明的特點在于①醇浸膏經過凈化處理制備成了生物總堿，所選用的溶劑系 統(tǒng)和配比恰當，不僅提高了高速逆流色譜的分離度，而且使分離組分的純度提高到了98%， 延胡索乙素和原阿片堿的收率分別達到16. 9%和14. 7%。②能夠同步將延胡索總堿中兩 種單體組分延胡索乙素和原阿片堿分離出來，提高了工作效率，減少了生產成本。
具體實施例方式
下面結合實施例對本發(fā)明做進一步說明。
實施例1 ①分離設備HSCCC-TBE300A(高速逆流色譜儀，上海同田生化技術有限公司)。
②原料處理延胡索鮮樣經清水洗去泥土、瀝水、烘干，干燥的延胡索塊莖經藥物 粉碎機粉碎，過40目篩，制得延胡索粗粉。 ③醇膏制備延胡索粗粉用70% 90X工業(yè)酒精溶解，7(TC 8(TC回流提取2 3次，料液比為1 : 4 6，時間1 2h，提取液抽濾后合并一減壓濃縮一5(TC減壓干燥一
醇浸膏。 ④生物總堿制備醇浸膏先用10倍量的0. 5 1. 5%鹽酸溶解，過濾，再用10 20%氨水調節(jié)溶解液pH到9. O，然后用氯仿萃取3次，每次萃取的氯仿用量與溶解液量相 當，收集氯仿層，減壓回收氯仿，真空干燥得到延胡索總堿。
⑤分離按分配比(體積)石油醚乙酸乙酯甲醇水=22 : 25 : 23 : 17，
將各種試劑加入分液漏斗中，充分震蕩后靜置，超聲脫氣30min。以溶劑系統(tǒng)的上相為固定 相，下相為流動相，以7 10mL/min的流速將固定相泵入高速逆流色譜儀螺旋管中，待固定 相充滿整個管路后，停泵，啟動主機，并將轉速調至750 850r/min，以1. 5 2. OmL/min的 流速泵入流動相，當流動相從出口處流出，即表明上下相達到平衡，記錄固定相被推出的體 積，并使固定相保留值在0. 5 0. 58之間。然后用流動相溶液溶解延胡索總堿，使其濃度 為10mg/mL，以2. OmL/min的流速持續(xù)泵入該溶液，分離溫度25。C，紫外檢測波長為280nm， 在105 120min收集原阿片堿波峰組分；在165 170mim收集延胡索乙素波峰組分。
實施例2 按照實施例1的步驟完成延胡索乙素和原阿片堿的同步分離。其中兩相溶劑系統(tǒng)
分配比(體積)為石油醚乙酸乙酯甲醇水=24 : 27 : 21 : 19。 實施例3 按照實施例1的步驟完成延胡索乙素和原阿片堿的同步分離。其中兩相溶劑系統(tǒng)
分配比(體積)為石油醚乙酸乙酯甲醇水=26 : 29 : 20 : 20。
權利要求
一種從延胡索中同步分離延胡索乙素和原阿片堿的方法，其特征在于①原料處理將干燥的延胡索塊莖粉碎成40目左右的粗粉；②醇膏制備粗粉用4～6倍量的70％～90％工業(yè)酒精回流提取1～2h，提取三次，合并提取液并過濾，減壓濃縮至干，并經50℃減壓干燥得醇浸膏；③生物總堿制備醇浸膏先用10倍量的0.5～1.5％鹽酸溶解，過濾，再用10～20％氨水調節(jié)溶解液pH到9.0，然后用氯仿萃取3次，每次萃取的氯仿用量與溶解液量相當，收集氯仿層，減壓回收氯仿，真空干燥得到延胡索總堿；④分離采用高速逆流色譜法，兩相溶劑系統(tǒng)采用石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，分配比(體積)為22～26∶25～30∶20～23∶17～20，超聲脫氣30min，以溶劑系統(tǒng)的上相為固定相，下相為流動相，以7～10mL/min的流速將固定相泵入高速逆流色譜儀螺旋管中，待固定相充滿整個管路后，停泵，啟動主機，并將轉速調至750～850r/min，以1.5～2.0mL/min的流速泵入流動相，當流動相從出口處流出，即表明上下相達到平衡，記錄固定相被推出的體積，并使固定相保留值在0.5～0.58之間。然后用流動相溶液溶解延胡索總堿，使其濃度為10mg/mL，以2.0mL/min的流速持續(xù)泵入該溶液，分離溫度25℃，紫外檢測波長為280nm，在105～120min收集原阿片堿波峰組分；在165～170mim收集延胡索乙素波峰組分。
2. 按照權利要求1所述的同步分離延胡索乙素和原阿片堿的方法，其特征在于所述兩相溶劑系統(tǒng)分配比(體積)為石油醚乙酸乙酯甲醇水=22 : 25 : 23 : 17。
3. 按照權利要求1所述的同步分離延胡索乙素和原阿片堿的方法，其特征在于所述兩相溶劑系統(tǒng)分配比(體積)為石油醚乙酸乙酯甲醇水=24 : 27 : 21 : 19。
4. 按照權利要求i所述的同步分離延胡索乙素和原阿片堿的方法，其特征在于所述 兩相溶劑系統(tǒng)分配比(體積)為石油醚乙酸乙酯甲醇水=26 : 29 : 20 : 20。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從延胡索中同步分離延胡索乙素和原阿片堿的方法。延胡索先制成總堿，然后采用高速逆流色譜法進行分離，兩相溶劑系統(tǒng)采用石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，分配比(體積)為22～26∶25～30∶20～23∶17～20，上相為固定相，下相為流動相，用流動相溶解延胡索總堿，在105～120min收集原阿片堿波峰組分，在165～170mim收集延胡索乙素波峰組分。本發(fā)明由于先將延胡索醇浸膏凈化處理成生物總堿，選用的溶劑系統(tǒng)和配比恰當，因此分離度高，分離組分的純度高達98％，延胡索乙素和原阿片堿的收率分別達到16.9％和14.7％，而且能夠將延胡索總堿中兩種單體組分同步分離出來。
文檔編號C07D491/153GK101768159SQ20081023658
公開日2010年7月7日 申請日期2008年12月30日 優(yōu)先權日2008年12月30日
發(fā)明者馮自立, 吳三橋, 張晨露, 李新生, 江海 申請人:陜西理工學院