專利名稱：：異甜菊醇衍生物及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一類異甜菊醇的衍生物。
背景技術(shù)：
：異甜菊醇((4a鄰，13P)-13-甲基-16-氧代-17-去甲貝殼杉垸-18-酸，3)屬于四環(huán)二萜類化合物，為天然甜味劑甜菊苷的酸水解產(chǎn)物。17pi3已有藥理研究表明異甜菊醇可減少心肌細(xì)胞ATP水平，發(fā)揮抗心肌缺血作用；可降低細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度，使血管舒張，降低血壓；可抑制單糖轉(zhuǎn)運(yùn)，減少葡萄糖生成；可抑制pola活性，預(yù)防腫瘤細(xì)胞生長。且異甜菊醇來源于甜菊苷，甜菊苷作為天然甜味劑具有原料易得、成本低、毒副作用低等特點(diǎn)。但異甜菊醇半衰期僅30min,易被機(jī)體迅速清除；異甜菊醇脂溶性較強(qiáng)，生物利用度并不高。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是選擇異甜菊醇作為先導(dǎo)化合物，利用前藥原理、拼合原理、生物電子等排原理等對(duì)其進(jìn)行合理結(jié)構(gòu)修飾，從而提供一類生物利用度及選擇性高，藥理活性強(qiáng)的異甜菊醇的衍生物。本發(fā)明的另一目的是提供上述異甜菊醇衍生物在調(diào)節(jié)血糖方面或治療心血管疾病方面的應(yīng)用。本發(fā)明的目的可以通過以下措施達(dá)到一種式(I)或式(II)的異甜菊醇衍生物，其中，A為環(huán)戊烷、環(huán)戊酮、戊內(nèi)酰胺、取代環(huán)戊烷、取代環(huán)戊酮或取戊內(nèi)酰胺，其中取代基為羥基、硝基、卣素或含氮雜環(huán)酸基；A優(yōu)選為環(huán)戊垸、環(huán)戊酮、戊內(nèi)酰胺或取代環(huán)戊垸，其中取代基為羥基、硝基、鹵素、吡咯甲酸基、嘧啶甲酸基或吡啶甲酸基；A最優(yōu)選為環(huán)戊垸、環(huán)戊酮、戊內(nèi)酰胺或取代環(huán)戊烷，其中取代基為羥基或吡啶甲酸基；本發(fā)明的A環(huán)特別涉及以下三種R為烷基、取代垸基、《00112或-(:00((:112)11-0-]^,其中取代烷基中的取代基為羥基、硝基或鹵素；R優(yōu)選為烷基、取代烷基、-(:00112或-<:00(<^[2)11-0-114，其中取代烷基中的取代基為羥基、硝基或鹵素；R最優(yōu)選為C14羥垸基、-(:00112或-<:00(012)11-0-114。R2為烷基或取代烷基，其中取代基為羥基、硝基或鹵素；R2優(yōu)選為C16垸基或C16羥垸基。R4為烷基?；?、硝基、雜環(huán)?；⑷〈s環(huán)?；?、芳香?；蛉〈枷沲；渲兴龅娜〈鶠辂u素或硝基；R4優(yōu)選為C16垸基?；⑾趸?、雜環(huán)酰基、苯?；蛉〈锦；?，其中所述的取代基為鹵素或硝基；最優(yōu)選為C4烷基?；⑾趸?、吡啶甲?；?、苯甲?；Ⅺu代苯甲?；蛳趸郊柞；?。n或m分別為16的整數(shù)，優(yōu)選為14的整數(shù)，其中m最優(yōu)選為l。式II化合物中的兩個(gè)A基團(tuán)不必完全相同，即可以分別獨(dú)立地為取代或非取代的環(huán)戊烷、環(huán)戊酮、戊內(nèi)酰胺；其中兩個(gè)母環(huán)中的橋鍵優(yōu)選為C14的直鏈烷基，最優(yōu)選為Cl和C4的直鏈垸基。本發(fā)明中所述的烷基，一般是指C18的垸基，優(yōu)選為C16的垸基，最優(yōu)選為C14垸基，其中并不僅限于直鏈烷基。本發(fā)明中所述的含氮雜環(huán)酸基一般指含氮雜環(huán)的甲酸基，如吡啶甲酸基；而本發(fā)明所涉及到的含氮雜環(huán)是指含有一個(gè)或多個(gè)氮原子的雜環(huán)化合物，如吡咯、咪唑、吡啶、噠嗪、嘧啶、喹啉等，優(yōu)選為吡啶或嘧啶。本發(fā)明所述的雜環(huán)酰基一般是指雜環(huán)甲?；瑑?yōu)選含氮雜環(huán)甲?；渲泻s環(huán)的概念如上所述，具體如吡啶甲酰基、嘧啶甲?；取１景l(fā)明所述的芳香?；侵阜枷慊柞；渲蟹枷慊鶊F(tuán)一僅指苯，還包括非苯芳烴基或萘基等。本發(fā)明中所述的烷基酰基是指烷基甲?；?，其中烷基的概念如上所述。本發(fā)明中所述的羥烷基，含有羥基的烷基，其分子式中并不僅限于一個(gè)羥基，也包含2個(gè)或多于2個(gè)羥基的烷基。本發(fā)明的化合物的制備從異甜菊醇開始，根據(jù)R基團(tuán)的不同，可釆用不同的方法。當(dāng)R基團(tuán)為-COOR;!型時(shí)，可直接采用酯化反應(yīng)制備，如當(dāng)R為-COO(CH2)n-0-R4型時(shí)，可以先將異甜菊醇與橋鍵反應(yīng)后，再加成R4，如也可以先將R4與橋鍵反應(yīng)后再與母環(huán)連接，如R40(CH2)nCl將R基團(tuán)中的-COOR2還原可以得到羥烷基，進(jìn)而得到垸基或取代烷基的R基團(tuán)，以甲基、醇甲基和鹵代甲基為例:戊內(nèi)酰胺環(huán)可以通過環(huán)戊酮的異構(gòu)重排得到，如本發(fā)明的化合物具有調(diào)節(jié)血糖的作用，尤其是具有降血糖作用。本發(fā)明的化合物還具有治療心血管疾病的作用，尤其是心肌保護(hù)作用和抗高血壓作用。以各實(shí)施例所得的如下化合物為代表進(jìn)行初步藥效實(shí)驗(yàn)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>7I6O—CH2OC~^^N02I7—CH2CH2CH2CH2ON02Is0—CH2CH2CH2CH2OC~^^I9—CH2CHOHCH2OHR、R，2I10—OH—CH2OHIu0一COOHI12一OH—COOCH(CH3)2Il318-0—COOCH(CH3)28<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>一、急性降血糖實(shí)驗(yàn)運(yùn)用靜脈葡萄糖耐量試驗(yàn)(intravenousglucosetolerancetest,IVGTT)評(píng)價(jià)異甜菊醇(isosteviol)及其衍生物對(duì)靜脈注射葡萄糖引起的血糖升高的抑制作用，該作用與過氧化物酶體增殖活化受體(PPARy)激動(dòng)劑-羅格列酮(Rosiglitazone)的作用進(jìn)行比較。大鼠在麻醉下(烏拉坦，1.2g/kg，ip),切開頸部正中皮膚，分離血管，于右頸內(nèi)靜脈插入一含0.1%肝素生理鹽水的PE管，供采血樣用。手術(shù)結(jié)束后大鼠穩(wěn)定15、0min，從頸內(nèi)靜脈取0點(diǎn)(藥前基礎(chǔ)值)血樣O.1mL。腹腔注射(iP)用0.5W羧甲基纖維素鈉(CMC)配制異甜菊醇和其衍生物混懸液(濃度為7.8Wnol/ml，劑量為15.6陶ol/kg)，以馬來酸羅格列酮(劑量為4mg/kg)為陽性對(duì)照藥，同等體積的0.5%CMC為空白對(duì)照。腹腔注射25niin后，通過靜脈導(dǎo)管于10s內(nèi)靜脈注射50%葡萄糖(1.0g/kg)，以注射畢開始計(jì)時(shí)，依次取葡萄糖靜注后5、15、30、60min血樣各0.1mL。所取血樣于37r溫浴30min后，離心15min取血清。由葡萄糖試劑盒(上?？迫A東菱診斷用品有限公司)按使用說明書的要求測定各時(shí)間點(diǎn)的血糖含量。通過比較05minAPGC(plasmaglucoseconcentration,血糖濃度)值，015minAPGC，血糖AUC(葡萄糖濃度-時(shí)間變化曲線下面積)及AAIJC(樣品組與空白對(duì)照組AUC差值)對(duì)異甜菊醇及其衍生物的抗急性血糖活性進(jìn)行評(píng)價(jià)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果(表l)表明，異甜菊醇和其衍生物具有一定的急性降血糖作用。表1異甜菊醇及其衍生物在SD大鼠的IVGTT實(shí)驗(yàn)中對(duì)靜脈注射葡萄糖引起的血糖升高的抑制作<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>I915.711.5495.4-233.2Iio14.57.3370.5-358.111215.910.4516.4-212.212.18.6297.8430.81，418.412.5694.4-65.811518.111.8654.6-74Note:APGC?！?-PGC5min-PGC(to，APGC0.15=PGCl5min-PGC。min,AAUC=AUCtest-AUC^ontrol二、對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)的降壓作用研究將SHR大鼠16只，隨機(jī)分為多個(gè)治療組；分別給予苯磺酸氨氯地平10nig/kg/d(陽性對(duì)照藥，鈣通道拮抗劑，降血壓藥)，異甜菊醇和其衍生物16.0Wnol〃kg/d，加生理鹽5ml/kg灌胃，每天1次，雌雄分籠飼養(yǎng)，治療20周。另有，年齡、性別配對(duì)的wistar大鼠作對(duì)照組。各組大鼠均在給藥20周后處死，治療及處死前稱取體重和測尾動(dòng)脈收縮壓。以MRB-niA型大鼠血壓測定儀(上海高血壓研究所制造)f量大鼠安靜、清醒狀態(tài)尾動(dòng)脈收縮壓(imnHg)，連續(xù)測量3次，取均值。所有數(shù)據(jù)均經(jīng)統(tǒng)計(jì)處理，以^士s表示，組間均數(shù)采用t檢驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，異甜菊醇和其衍生物具有較好的降血壓效果，見表2。表2SHR治療前后收縮壓變化組別收縮壓組別收縮壓SHR治療前220.43±7.56Wistar(20周前)128.35±5.38SHR苯磺酸氨氯地174.25±7.33Wistar(20周后)129.73±6.73平I'211.38±5.21工9178.58±6.2712198.36±7.341,0189.35±5.4913199.56±6.47111183.32±6.3114205.34±6.42I12197.48±6.32i5209.49±6.55Il3210.62±6.25i6218.15±7.17工"204.83±7.1717191.70±7.82l恥.11±6.81i8187.40±6.40三、抗心肌缺血實(shí)驗(yàn)大鼠心肌缺血再灌損傷模型制備和分組SPF級(jí)健康成年SD大鼠，250350g，雌雄兼用，大鼠在烏拉坦(l.Og'kg-1，ip)麻醉下，氣管內(nèi)插管，接人工呼吸機(jī)。沿胸骨左緣剪開肋骨，暴露心臟，剪開心包膜，在左冠狀動(dòng)脈下穿一絲線。穩(wěn)定15min后，記錄II導(dǎo)聯(lián)心電圖。將一細(xì)小乳膠管墊于血管與結(jié)扎線之間，拉緊結(jié)扎線閉塞左冠狀動(dòng)脈，以心臟局部發(fā)紺伴隨T波高聳或ST段抬高作為結(jié)扎成功的標(biāo)準(zhǔn)。30min后松開結(jié)扎線再灌注90min。連續(xù)記錄結(jié)扎前后及再灌后II導(dǎo)心電圖，觀察室性心動(dòng)過速和心室纖顫發(fā)生率。偽手術(shù)組在冠狀動(dòng)脈下穿線而不結(jié)扎，連續(xù)觀察120min。大鼠根據(jù)體重、性別分為異甜菊醇和異甜菊醇衍生物6.8nmol/kg組，川芎嗪(Ligustrazine)30mg/kg(陽性對(duì)照藥)組分別于結(jié)扎前10min頸靜脈注射相應(yīng)藥物。偽手術(shù)空白對(duì)照組(Control)和心肌缺血再灌(IR)模型對(duì)照組注射等容積溶劑。給藥體積l.OmL'kg-l。心肌梗死范圍測定再灌注結(jié)束后再次結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈，頸靜脈內(nèi)注入2%伊文思藍(lán)1mL,取心臟。-20'C凍520min，平行房室溝將心臟切成1.52mm厚的切片，共5片。在1%TCCTris2HCl緩沖液中染515min,藍(lán)染區(qū)為非缺血區(qū)，壞死心肌呈白色，缺血未壞死心肌呈紅色，分別稱重，計(jì)算壞死心肌占缺血區(qū)心肌(壞死心肌與缺血未壞死心肌之和)的重量百分比，即心肌梗死范圍。血清乳酸脫氫酶(LDH):和肌酸激酶(creatinekinase，CK)活性測定再灌注結(jié)束后即刻從頸總動(dòng)脈取血約lmL，分離血清，用全自動(dòng)生化分析儀，Beckman分析儀專用試劑盒，分別用NADH和NADPH紫外法測定血清中LDH及CK活性。偽手術(shù)組在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期未發(fā)生室性心律失常和心肌梗死。IR組在心臟缺血及再灌期間頻發(fā)室性心律失常，心肌梗死范圍達(dá)(53.9±4.9)%。異甜菊醇及其衍生物可減少心律失常的發(fā)生，并減少心肌梗死范圍。川芎嗪組心律失常發(fā)生率和心肌梗死范圍也明顯低于IR組(表3)。表3異甜菊醇及其衍生物對(duì)心肌缺血再灌所致室性心律失常和心肌梗死范圍的影響分組數(shù)量心肌梗死率/%具有室性心動(dòng)過速的大鼠數(shù)量具有心室顫動(dòng)的大鼠數(shù)量心肌缺血再灌注損傷心肌缺血再灌注損傷IR1253.9±4.9119107Isosteviol1040.0±2.44221Ligustrazine1036.9±3.33122i'1033.4±2.54121I21038.3±2.63321工31037.8±2.44212141032.7±2.33221I51029.9±3.02111工61034.5±2.52221171035.9±2.73122181038.7±2.63121191037.4±2.44212IlO1037.7±2.73211工ll1033.1±2.74122Il21039.4±2.342221131035.6±3.04221I"1035.8±3.331211151036.4±2.84221與偽手術(shù)組比，IR組再灌末血清中LDH和CK活性明顯升高。異甜菊醇、異甜菊醇衍生物及川芎嗪組(Ligustrazine)再灌末血清中LDH和CK活性均明顯低于IR組(表4)。表4異甜菊醇及其衍生物對(duì)心肌缺血再灌注后血清乳酸脫氫酶和肌酸激酶活性的影響分組LDH(mol/miivUCK(圖l/miivU分組LDH(mol/min-UCK(mol/min-UControl0.42±0.181.60±0.26Isosteviol1.36±0.343.08±0.46IR1.88±0.374.44±0.70Ligustrazine0.90±0.132.70±0.27ii0.77±0.332.98±0.53Is1.19±0.343.11±0.31i20.97±0.362.50±0.371101.36±0.393.25±0.45i30.83±0.352.65±0.311111.44±0.443.07±0.34i41.26±0.433.03±0.341120.95±0.312.40±0.29Is1.64±0.332.77±0.381130.87±0.343.05±0.34工60.87±0.342.59±0.400.99±0.332.73±0.46171.16±0.282.65±0.341.31±0.253.00±0.23I80.80±0.302.32±0.7具體實(shí)施例方式實(shí)施例1:(4a,8P,13P)-13-甲基-16-氧代-17-去甲貝殼杉烷-18-酸正丁酯(I,)將3g(0.0094mol)異甜菊醇溶于80mLDMSO中，加入6g氫氧化鉀，1.4raL(0.013mol)1-溴正丁垸，加熱回流反應(yīng)3h，傾入冰水中，有固體析出，過濾，濾餅用乙醇重結(jié)晶，得淡黃色晶體3.2g，收率91%。'H雨R(300MHz,CDCLO,SH，ppm:0.71(s，3H,20-H3),0.98(s,3H,17—H3),1.19(s,3H'19_H3),0.91-1.88(m，25H，1—H2,2_H2，3-H，5-H,6-H2,7-H2,9-H，11-H2,12_H2，14-It,15-Ho，COOCIfcC^),2.16-2.21(d,1H,3-H叫，,14.91Hz)，2.60-2.67(dd，1H,15—H。，,18.6,3.69Hz)，3.98-4.10(m，2H,COOC,')實(shí)施例2:(4a,8P,13e)-13-甲基-16-氧代-17-去甲貝殼杉烷-18-酸異丙酯(12)于250mL三頸瓶中，將5g(0.016mol)異甜菊醇溶于100mLDMS0中，加入10g氫氧化鉀，2mL(0.021mol)2-溴代丙烷，機(jī)械攪拌，加熱回流3h，傾入冰水中，有白色固體析出，過濾，重結(jié)晶，得白色晶體5.4g，收率95%。'H臓(500MHz,CDC13),SH,ppm:0.73(s,3H,20-H3),0.96(s,3H，17—H3)，1.16(s,3H'19—H3)，1.20-1.22(dd，6H,CH(Qi3)2,,6.27,3.13Hz)，0.86—2.65(m,18H，1-H2，2-H2,34U5—H，6-H2，127—H2，9-H，11—H2,12-H2，14_H2，15_HP)，2.15—2.18(d,1H,3-H叫',15.00Hz)，2.60-2.65(dd,1H,15-H。，,18.59,3.86Hz)，4.93_4.98(m,1H,Qi(CH3)2)實(shí)施例3:二((4a，8e，13e)-13-甲基-16-氧代-17-去甲貝殼杉烷-18-酸)亞甲基酯(13)將0.64g(0.002mol)異甜菊醇，0.68g(0.002mol)四丁基硫酸氫胺溶于5mL2M氫氧化鈉溶液中，二氯甲垸提取有機(jī)層，無水硫酸鎂干燥，過濾，濾液室溫反應(yīng)24h后，洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾，濃縮，柱層析得白色固體0.5g,收率77%。'HNMR(300MHz，CDCl3),SH,ppm:0.73(s,6H'20，20'_H3)，0.98(s，6H,17,17'—H3)，L20(s,6H,19，19'-H3),0.90-1.90(m,36H,1,1'-H2,2，2'_H2,3,3'-H,5，5'-H，6,6'_H2，7,7'-H2,9，9'_H,——11,11'-H2，12，12'-H2，14,14'—H2,15，15'-He),2.15—2.19(d，2H,3,3'—Heq,,13.47Hz)，2.58-2.66(dd,2H，15，15'-H。，>18.59,3.68Hz),5.71(s,2H，OC&O)實(shí)施例4:(4a，8P,13P)-13-甲基-16-氧代-17-去甲貝殼杉垸-18-酸鈉(1。于20mL乙醇中加入2.8g(0.0088mol)異甜菊醇，0.2g氫氧化鈉，滴畢，升溫至100'C反應(yīng)4h,倒入水中，過濾，干燥得黃色固體3.6g，收率95%。苯甲酸氯甲酯(10)于50niL茄形瓶中加入12raL(0.1mol)苯甲酰氯，3g多聚甲醛，少量三氯化鋁，105'C反應(yīng)18h，加入40niL水，室溫?cái)嚢?h后，二氯甲烷提取有機(jī)層，依次用飽和碳酸氫鈉溶液，飽和氯化鈉溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，柱層析得無色液體4g，收率22.8%。lHNMR(300MHz，CDCl3),SH,ppm:5.96(s,2H，-CH2)，7.45-7.50(m,2H，Ph-H),7.59_7.62(m，1H,Ph-H)，8.07-8.10(m，2H,Ph-H)(4a,8e，13P)-13-甲基-16-氧代-17-去甲貝殼杉烷-18-酸苯甲酰氧甲酯(I,)于50niL三頸瓶中加入3.4g(0.01mol)(4a，8P,13e)-13-甲基-16-氧代-17-去甲貝殼杉垸-18-酸鈉(I"),2g(0.012mol)苯甲酸氯甲酯(10),少量碘化鉀，30mL乙腈，加熱回流6h，蒸去乙腈，加水20mL，氯仿提取有機(jī)層，無水硫酸鎂干燥。過濾濃縮得油狀物，重結(jié)晶得白色晶體2.8g，收率62%。'HNMR(300MHz,CDCl3)，5'ppm:0.65(s,3H,20-H3),0.95(s,3H，17_H3),1.23(s,3H，19—H3),0.85-1.91(in,18H,1-H2，2-H2，3-HL,5-H,6-H2,7-H2，9-H,11-H2,12_H2,14-H2,15-He),2.19-2.23(d,1H,3—IU>13.68Hz),2.42-2.50(dd，1H，15—H。，>18.72，3.75Hz),5.97-6.03(q，2H,OC^O,,6.17Hz),7.44-7.49On,2H'Ph_H),7.59—7.63(t,IH,Ph_H,,7.49Hz),8.03—8.06(m,2H,Ph-H)實(shí)施例5:乙酸氯甲酯(ll)于50mL三頸瓶中加入4mL(0.056mol)乙酰氯，2g多聚甲醛，少量氯化鋅，20mLl，4-二氧六環(huán)，回流反應(yīng)12h,待冷，加入10mL水，室溫?cái)嚢鑜h，二氯甲垸提取有機(jī)層，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，直接用于下步反應(yīng)。(4a，8e,13e)-13-甲基-16-氧代-17-去甲貝殼杉烷-18-酸乙酰氧甲酯(15)于50mL茄形瓶中加入1g(0.0029raol)(4a,8P,13P)-13-甲基-16-氧代-17-去甲貝殼杉垸-18-酸鈉(I化)，上步所得油狀物(ll),少量碘化鉀，15mL乙腈，加熱回流3.5h，待冷，傾入冰水中，有白色固體析出，過濾，重結(jié)晶，得白色晶體0.6g，收率53%。'HNMR(300MHz，CDCl3)，SH,ppm:0.71(s,3H，20-H3),0.98(s，3H,17-H3),1.22(s,3H,19-H3),0.85—1.90(m,18H，1—H2,2—H2,3-H叫5—H，6—H2,7—H2,9_H，11-H2,12—H2,14—H2,15—He),2.09(s,3H，C0Qi3)，2.17—2.21(d,1H，3-FU戶13.29Hz)，2.57-2.64(dd,1H'15—H。，>18.71，3.62Hz),5.71-5.75(q,2H,0,,4.57Hz)實(shí)施例6:4-硝基苯甲酸氯甲酯(12)于50mL茄形瓶中加入3.0g(0.018mol)對(duì)硝基苯甲酸，10mL二氯亞砜，加熱回流3h。蒸去二氯亞砜，加入0.6g多聚甲醛，少量氯化鋅，20mLl,4-二氧六環(huán)，回流反應(yīng)12h，待冷，濃縮至1/3體積，加入20mL水，室溫?cái)嚢?h后，氯仿提取有機(jī)層，依次用飽和碳酸鈉溶液，飽和氯化鈉溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，柱層析得4-硝基苯甲酸氯甲酯(12)0.8g。收率20.6%。即83-84。C。'HNMR(300MHz,CDCl3),SH,ppm:5.91(s,2H'-CH2),8.17—8.20(m，2H，Ph-H),8.21-8.27(m，2H,Ph-H)(4ct,8e,13P)-13-甲基-16-氧代-17-去甲貝殼杉烷-18-酸-4'-硝基苯甲酰氧甲酯(16)于50mL茄形瓶中加入0.5g(0.0015mol)(4a,8e,13P)-13-甲基-16-氧代-17-去甲貝殼杉垸-18-酸鈉(La),0.2g(0.00093mol)4-硝基苯甲酸氯甲酯(7)，少量碘化鉀，30mL乙腈，回流反應(yīng)10h,蒸去乙腈，加水20mL，氯仿提取有機(jī)層，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，柱層析得白色固體0.26g，收率56%。'HNMR(500MHz，CDCl3)，SH,ppm:0.54(s,3H,20-H3),0.84(s，3H，17—H3)，1.18(s,3H,19—H3)，0.88—1.81(m,18H，1—H2，2—H2,3—H,5-H，6_H2,7_H2,9_H,12-H2,14—H2,15—H",2.05-2.08(d,1H,3-Heq,,13.38Hz),2.11-2.15(dd,1H，15-H。，,18.35，3.62Hz)，5.96-6.05(q,2H,OQfcO,,8.49Hz),8.19-8.39(m，4H，Ar-H)實(shí)施例7:(4a,8P，13e)-13-甲基-16-氧代-17-去甲貝殼杉烷-18-酸-4'-溴丁酯(I7a)于100mL三頸瓶中加入2.4mL(0.02raol)1，4-二溴丁烷，2.8g氫氧化鉀，加熱至回流，緩慢滴加溶于30mL乙腈中的3.2g(0.01mol)異甜菊醇，滴畢，繼續(xù)回流反應(yīng)2h，待冷，傾入冰水中，氯仿提取有機(jī)層，飽和食鹽水洗漆，無水硫酸鎂干燥，過濾，濃縮，柱層析得白色固體2.7g，收率60%。mp99-100°C。'HNMR(300MHz,CDC13),6H,ppm:0.74(s,3H,20-H3),0.90(s,3H，17-H3)，1.18(s，3H,19-H3),0.96-2.01(m,22H,1-H2,2-Ha，5-H，6-H2,7-H2,9-H,11-H2,12-H2,14-H2,15-HP,C00CH2C迅CH2Br)，2.17-2.22(d,1H'3-Heq，,15.00Hz),2.49—2.56(dd,1H,15-H。，,18.37,3.57Hz),3.53-3.57(t,2H，C&Br,,6.60Hz),4.00-4.14(m,2H,C00Qi2)(4a,8P,13P)-13-甲基-16-氧代-17-去甲貝殼杉烷-18-酸-4'-硝氧基丁酯(I7)于60'C下將1g(0.0022mol)(4a,8P,13e)-13-甲基-16-氧代-17-去甲貝殼杉烷-18-酸-4'-溴丁酯(17,)溶于10mL乙腈中，滴加溶于5mL乙腈中的0.58g(0.0034mol)硝酸銀，避光室溫反應(yīng)6h后，再升溫至回流反應(yīng)3.5h，待冷，過濾，濃縮得棕色固體0.9g，收率94%。rap78-79'C。'HNMR(300MHz,CDC13),S,ppm:0.71(s,3H,20_H3),0.98(s,3H,17-H3),1.20(s,3H,19-H3)，0.85-1.92(m，22H，1-H2,2-H2,3-Ha,'5-H,6-H2,7-H2,9_H,11-H2,12-H2,14-H2,15-He,COOCftC^ClfcO,2.15-2.20(d,1H,3-fU,13.07Hz),2.58-2.66(dd,1H，15—H。，>18.56,3.73Hz),4.01-4.15(m,2H，COOQfe),4.47-4.51(t,2H,CMjONOs,,6.15Hz)實(shí)施例8:(4a,8e，13e)-13-甲基-16-氧代-17-去甲貝殼杉烷-18-酸-4'-(3"-吡啶)甲酰氧丁酯(18)于100mL茄形瓶中加入0.4g(0.00088mol)(4a,8P,13P)_13-甲基-16-氧代-17-去甲貝殼杉烷-18-酸-4'-溴丁酯(I7J，0.1g(0.00081mol)煙酸，0.2g氫氧化鉀，15mL乙腈,回流反應(yīng)14.5h,待冷，傾入水中，乙酸乙酯提取有機(jī)層，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾，濃縮，柱層析得透明油狀物0.3g，收率70%。'HNMR(3OO細(xì)z，CDCL0，S，ppm:0.71(s,3H,20_H3),0.98(s,3H'17-H3),L20(s,3H,19-H3),0.85-1.92(m,22H,1_H2,2—H2，3—H叫5_H,6-H2,7_H2,9—H，11—H2,12-H2,14-H2,15-Ho,COOCH2C2,0)，2.17-2.21(d,1H,3-IU,12.32Hz)'2.57-2.65(dd'1H，15_H。，,18.55,3.70Hz),4.03-4.19(m,2H,C00C旦2),4.38-4.42(t,2H,Cg20N02'>6.21Hz),7.40-7.44(q,1H'Ar-H,戶4.25Hz),8.29-8.33(m,1H,Ar-H，)，8.78-8.79(d，1H,Ar-H,,3.48Hz),9.23(s,1H,Ar-H)實(shí)施例9:2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-甲醇(13)于200mL四頸瓶中加入8mL(0.109mol)甘油，30mL(0.409mol)丙酮，0.3g(0.00158mol)對(duì)甲苯磺酸，30mL石油醚，機(jī)械攪拌，加熱至回流，8h后停止反應(yīng)。待冷，抽濾，濾液干燥后減壓蒸餾，收集103'C餾分(0.1MPa),得無色透明油狀液體10.6g，收率74%(文獻(xiàn)"3]bp80-81"C/11咖)c(4a,8e,13P)-13-甲基-16-氧代-17-去甲貝殼杉烷-18-酸-d,1-2',3'-二羥基丙酯(Is)于50mL茄形瓶中加入1.5g(0.0047mol)異甜菊醇及10mL二氯亞砜，回流1h后，減壓蒸去二氯亞砜得酰氯。于100mL三頸瓶中加入1.2mL(O.0097mol)2,2-二甲基-l，3-二氧戊環(huán)-4-甲醇(13)，及10mL新制四氫呋喃，緩慢滴加溶于10mL新制四氫呋喃中的酰氯。室溫?cái)嚢?h，濃縮，加入10mL鹽酸，30mL氯仿，加熱回流10h。待冷，調(diào)pH至中性，氯仿提取有機(jī)層，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，柱層析得灰白色固體0.33g，收率18%。'HNMR(300MHz,CDCla),5H，ppm:0.70(s，3H,20_H3),0.96(s,3H'17-H3)，1.20(s，3H,19-H3),0.85-1.90(m,18H,1_H2,3-Ha5-H,6-H2,7—Ifc,9-H,11—H2，C,14-H2,15-He),2.15-2.19(d,1H,3-H叫，,13.36Hz),2.57-2.64(m,3H，15-H。，CHOg,CH2Og)，3.55-3.61(m,1H,Q^OH),3.67—3.72(m，1HCg20H),3.90—3.93(m,1H,C旦0H)，4.05—4.19(m,2H'COOQb)實(shí)施例10:(4a，8e,13e，16a)-13-甲基-16-羥基-17-去甲貝殼杉烷-18-醇(I10)于250mL三頸瓶中加入0.9g(0.024g)四氫鋁鋰，40mL新制四氫呋喃，于冰浴條件下緩慢滴加溶于20raL新制四氫呋喃中的1.8g(0.005mol)(4a，8e,13e)-13-甲基-16-氧代_17-去甲貝殼杉垸-18-酸異丙酯(I2)，滴畢，升溫至回流反應(yīng)3h,待冷，加水調(diào)pH至中性，過濾，濃縮，柱層析得白色固體1.2g，收率78%。'HNMR(300MHz,DMSO~D6)，5H,ppm:0.81(s,3H，20-ft),0.82(s,3H,17-H3)，0.84(s,3H,19-H3),0.73-1.78(m,20H,1-H2,2-H2，3-H2,5-H,6-ft,7_H2,9-H,11_H2,12-H2，14-H2,15-H2)，3.08-3.13(q，1H，QfcOH,戶5.36Hz),3.45-3.54(q，1H,C&OH,>5.31Hz)，3.62-3.69(m，1H,CgOH)'4.07-4.11(t,1H,C,，力5.31Hz),4.43-4.44(d,1H,C卿,,4.32Hz)實(shí)施例ll:(4a,8e,13P,16a)-13-甲基-16-羥基-17-去甲貝殼杉烷-18-酸(7)將2g(0.0063mol)異甜菊醇溶于30mL絕對(duì)乙醇中，加入3.6g(0.095mol)硼統(tǒng)化鈉，室溫?cái)嚢?h，滴加稀鹽酸至無氣泡生成，濃縮得白色固體，水洗，過濾，重結(jié)晶得白色晶體1.8g，收率89%。mpl81-183'C(文獻(xiàn)""mpl81_183。C)。(4a，8e，13e,16a)-16-(3'-吡啶)甲酰氧基_13-甲基-17~*甲貝殼杉烷-18-酸(I于50mL茄形瓶中加入1g(0.0081mol)煙酸，8mL二氯亞砜，加熱回流5h。蒸去二氯亞砜后，加15mL吡啶，lg(0.0031mol)(4a,8P,13e,16a)-13-甲基-16-羥基-17-去甲貝殼杉烷-18-酸(7)，加熱至100X:反應(yīng)6h,待冷，減壓蒸餾除去吡啶，再加入100mL水，乙酸乙酯提取有機(jī)層，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，柱層析得白色固體0.8g，收率61%。IR(KBr):r3415.48，2942.99,1710.63,1602.64,1303.71，748.28cm1'HNMR(300MHz,CDC13),SH,ppm:0.80(s，3H,20-H3),0.97(s,3H,17-H3),1.23(s,3H，19_H3)，0.86-2.20(m,20H,1_H2,2_H2，3-H2，5_H,6-H2,7-H2，9_H,11-H2，12-H2,14_H2,15_H2),5.04-5.09(q,1H,COOqp,7.26-7.46(q，1H,Ar-H,,4.29Hz),8.31-8.35(m,1H，Ar_H),8.75—8.77(m,1H,Ar-H)'9.23-9.24(d,1H,Ar-H,>1.95Hz)實(shí)施例12:(4a,8P，13e，16a)-13-甲基-16-羥基-17-去甲貝殼杉烷-18-酸異丙酯(I12)將4g(0.011raol)(4a，8e，136)-13-甲基-16-氧代-17-去甲貝殼杉烷-18-酸異丙酯(12)溶于70mL絕對(duì)乙醇中，加入9.6g(0.25mo1)硼氫化鈉，室溫?cái)嚢?h，滴加稀鹽酸至無氣泡生成，濃縮得白色固體，水洗，過濾，濾餅重結(jié)晶得白色晶體3.8g，收率95%。即116-117'C。'HNMR(300MHz,CDCl3),5，ppm:0.78(s,3H,20_H3),0.91(s，3H,17_H3),1.15(s，3H,19-H3),1.20-1.23(dd,6H，CH(Cg3)2,>6.26,2.44Hz),0.86-2.19(m，20H,1-H2,2-H2,3_H2，5-H,6_H2,7-H2，9-H,11—H2,12-H2,14-H2，15-H2),3.83-3.88(q，1H,CpH,,5.12Hz),4.90_5.03(m，1H,QJ(CH3)2)實(shí)施例13:(4a,8e,13e,16a)-13-甲基-16-(3'-吡啶)甲酰氧基-17-去甲貝殼杉垸-18-酸異丙酯(I)于50mL茄形瓶中加入lg(0.0081mol)煙酸，8mL二氯亞砜，加熱回流5h。蒸去二氯亞砜后，加入15mL吡徒，1.2g(0.0033mol)(4a，8e，13P,16a)-13-甲基_16-羥基-17-去甲貝殼杉烷-18-酸異丙酯(I12)，加熱至100'C反應(yīng)6h，待冷，減壓蒸餾除去吡啶，再加入100mL水，乙酸乙酯提取有機(jī)層，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，柱層析得白色固體1.0g，收率65%。mp:93-94'C。'HNMR(300MHz,CDCl3),SH，ppm:0.73(s，3H，20_H3),0.99(s,3H,n—RO,1.15(s,3H,19-H3),1.18-1.21(q，6H,CH((13)2，,3.10Hz)，0.78—2.17(m,20H,1-H2,2—H2,3-H2,5-H，6_H2，7_H2,9-H,11-ft,12-H2,14-H2,15-H2)，4.89—4.97(m,1H,Cg(CH3)2),5.01-5.06(t,1H,COOC払,7.53Hz),7.39-7.43(q,1H,Ar-H，>4.26Hz),8,28-8.31(d，1H,Ar-H，>7.94Hz)，8.77-8.79(d,1H,Ar-H，,3.61Hz),9.24(s,1H,Ar-H)實(shí)施例14:(4a,80，13P，16E)-13-甲基-16-羥亞氨基-17-去甲貝殼杉烷-18-酸異丙酯(I"a)于500mL三頸瓶中加入8g(0.022mol)(4a,8e,13e)-13-甲基-16-氧代-17-去甲貝殼杉烷-18-酸異丙酯(I2)，3.6g(0.052mol)鹽酸羥胺，40mL吡啶，110mL甲醇，回流反應(yīng)2h。待冷，濃縮至1/2體積，傾入水中，氯仿提取有機(jī)層，依次用10%稀鹽酸(100mLX4)，飽和氯化鈉溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，濃縮得黃色油狀物10g，收率100%。(4a,80)-13,16-斷-13P-甲基-13a-氨基-16-羧基-13，16-內(nèi)酰胺-17-去甲貝殼杉烷-18-酸異丙脂(I")將上步制得的化合物(I他，理論產(chǎn)量0.022mol)溶于60mL新制四氫呋喃中，于室溫下緩慢滴加4mL(0.054mol)二氯亞砜。滴畢，室溫?cái)嚢?h,緩慢滴加碳酸鈉溶液調(diào)pH至中性，濃縮至1/3體積，乙酸乙酯提取有機(jī)層。飽和氯化鈉溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥。過濾，濃縮，柱層析得黃色油狀物，石油醚/乙酸乙酯混合溶劑重結(jié)晶得白色固體4.6g,收率56%。'HNMR(300MHz,CDCl3)，5,ppm:0.83(s，3H,20-H3),1.16(s，3H，17_H3)，1.18(s,3H,19—H3),1.21-1.26(q,6H,CH(Qi3)2,,5.65Hz)，0.85—1.97(m，18H,1—H2，2—H2,3-H叫5—H，6_H2,7-H2,9—H,11-H2,12—H2，14—H2，15—He),2.14—2.19(d,1H,3-H呻戶13.37Hz),2,87—2.94(dd,1H，15—H。，16,18.36,2.10Hz),4.92-5.00(m,1H，CH(CH3)2),5.94(s，1H,CO唯)實(shí)施例15:(4a，8e)-13,16-斷-13P-甲基_13a-氨基_16-羧基-13，16-內(nèi)酰胺-17-去甲貝殼杉烷普醇(1,5)于250mL三頸瓶中加入1.2g(0.032mol)四氫鋁鋰，50mL新制四氫呋喃，緩慢滴加溶于50mL新制四氫呋喃中的1.4g(0.0037mol)(4a，8P)-13，16-斷-13e-甲基-13a-氨基-16_羧基-13,16-內(nèi)酰胺-17-去甲貝殼杉垸-18-酸異丙脂(I"),滴畢，升溫至回流反應(yīng)2.5h，待冷，加水，調(diào)PH值，過濾，濾液濃縮至千，得白色固體l.1g，收率93%。NMR(500MHz,DMS0-D6)，SH，ppm:0.84(s,3H，20_H3),0.85(s，3H,17_H3),1.07(s,3H,19-H3),0.75-1.74(in,19H,1—H2,2-H2,3—H2，5-H,6-H2,7-H2,9-H,11-H2,12—H2，14_H2，15-He),2.56—2.60(dd，1H，15-H。,,17.88,2.08Hz),3.18-3.21(q,1H,CH2OH，,3.21Hz),3.44—3.47(q，1H,C出OH，,3.19Hz),4.11-4.13(t,1H，C,,,3.19Hz),7.19(s,1H,CO,實(shí)施例16:苯甲酸-(4a，8e)-13，16-斷-13P-甲基-13a-羥基-16-羧基-13，16-內(nèi)酯_17-去甲貝殼杉烷-18-酸酐(I16)于50mL茄形瓶中加入0.33g(0.00099mol)(4a,8P)-13，16-斷-13P-甲基-13a-羥基-16-羧基-13，16-內(nèi)酯-17-去甲貝殼杉垸-18-酸(4),10mL二氯甲烷，攪拌至溶，再依次加入0.12mL(0.0015mol)吡啶，0.15mL(0.0013mol)苯甲酰氯，室溫?cái)嚢杓s40h后，依次用稀鹽酸，飽和食鹽水，飽和碳酸氫鈉溶液，飽和食鹽水洗滌，無7K硫酸鎂干燥，過濾，濃縮，柱層析(石油醚/乙酸乙酯=8/1)得白色晶體0.28g，收率65%。即163-164°C。^NMR(300MHz,CDC1》；SH,ppm:0.98(s，3H,20—H3),1.34(s,3H，17-H3),1.39(s,3H,19-H3),0.96-2.05(m,18H，I-H2,2-H2，3-H叫5-H,6-H2,7-H2,9-H,11-H2,12-H2,14-H2,15-H",2.27-2.32(d,1H,3-HM,,13.76Hz),3.03.13(dd,1H,15-H。,,18.59,2.47Hz),7.47-7.52(t，2H,Ph-H，戶7.71Hz)，7.62-7.67(t，2H,Ph-H,戶14.86Hz),7.99-8.02(m,1H,Ph-H，)實(shí)施例17:(4a，8e，13P,15e)-13-甲基-15_溴-16-氧代-17-去甲貝殼杉垸-18-酸異丙酯(I17)于250mL三頸瓶中加入3.6g(0.01mol)(4a，8e,13P)-13-甲基-16-氧代-17-去甲貝殼杉烷-18-酸異丙酯，5.3g(0.03mol)NBS，50mL四氯化碳，加熱回流反應(yīng)ll.5h后，待冷，過濾，濾液濃縮，柱層析(石油醚/乙酸乙酯=60/1)得白色固體4.0g，收率91%。'HNMR(500MHz,CDCl3)，ppm:0.79(s,3H,20-H3),1.10(s,3H,17—&),L19(s，3H,19-H3),1.24—1,26(q,6H，CH(Cg3)2，,6.29Hz),1.09-2.21(m，18H,1-H2,2-H2,3-H2,5_H,6-H2，7-H2,9-H,11—H2，12—H2,14—H2),4.51-4.52(d，1H,CHBr，,2.63Hz),4.96—5.01(m,1H'Qi(CH3)2)權(quán)利要求1、一種式(I)或式(II)的異甜菊醇衍生物，其中，A為環(huán)戊烷、環(huán)戊酮、戊內(nèi)酰胺、取代環(huán)戊烷、取代環(huán)戊酮或取代戊內(nèi)酰胺，其中取代基為羥基、硝基、鹵素或含氮雜環(huán)酸基；R為烷基、取代烷基、-COOR2或-COO(CH2)n-O-R4，其中取代烷基中的取代基為羥基、硝基或鹵素；R2為烷基或取代烷基，其中取代基為羥基、硝基或鹵素；R4為烷基酰基、硝基、雜環(huán)?；?、取代雜環(huán)?；?、芳香酰基或取代芳香?；渲兴龅娜〈鶠辂u素或硝基；n或m分別為1～6的整數(shù)。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的異甜菊醇衍生物，其中A為環(huán)戊烷、環(huán)戊酮、戊內(nèi)酰胺或取代環(huán)戊垸，其中取代基為羥基、硝基、鹵素、吡咯甲酸基、嘧啶甲酸基或tt啶甲酸基。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的異甜菊醇衍生物，其中A為環(huán)戊烷、環(huán)戊酮、戊內(nèi)酰胺或取代環(huán)戊烷；其中取代基為羥基或吡啶甲酸基。4、根據(jù)權(quán)利要求1所述的異甜菊醇衍生物，其中R為C16垸基、Cl6取代烷基、-0)0112或-(:00((^2)11-0-114，其中取代烷基中的取代基為羥基、硝基或鹵素。5、根據(jù)權(quán)利要求4所述的異甜菊醇衍生物，其中R為Cl4羥烷基、-COOR2或-COO(CH2)n-0-R4。6、根據(jù)權(quán)利要求l、4或5所述的異甜菊醇衍生物，其中R2為Cl6烷基或Cl6羥烷基。7、根據(jù)權(quán)利要求l、4或5所述的異甜菊醇衍生物，其中R4為C16烷基酰基、硝基、雜環(huán)酰基、苯酰基或取代苯?；?，其中所述的取代基為鹵素或硝基。8、根據(jù)權(quán)利要求7所述的異甜菊醇衍生物，其中R4為C14烷基?；?、硝基、吡啶甲酰基、苯甲?；Ⅺu代苯甲?；蛳趸郊柞；?。9、根據(jù)權(quán)利要求l、4或5所述的異甜菊醇衍生物，其中n或m分別為1~4的整數(shù)。10、權(quán)利要求l、2或4所述的異甜菊醇衍生物在制備調(diào)節(jié)血糖藥物方面的應(yīng)用。11、權(quán)利要求l、2或4所述的異甜菊醇衍生物在制備治療心血管疾病藥物方面的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明公開了異甜菊醇衍生物及其應(yīng)用，如式(I)或式(II)所示，其中，A為環(huán)戊烷、環(huán)戊酮、戊內(nèi)酰胺、取代環(huán)戊烷、取代環(huán)戊酮或取代戊內(nèi)酰胺；R為烷基、取代烷基、-COOR₂或-COO(CH₂)_n-O-R₄；R₂為烷基或取代烷基；R₄為烷基?；?、硝基、雜環(huán)?；⑷〈s環(huán)?；⒎枷沲；蛉〈枷沲；籲或m分別為1～6的整數(shù)。本發(fā)明的化合物有調(diào)節(jié)血糖的作用和治療心血管疾病的作用。文檔編號(hào)C07C69/00GK101445457SQ20081024295公開日2009年6月3日申請(qǐng)日期2008年12月30日優(yōu)先權(quán)日2008年12月30日發(fā)明者佳余,民吉,文周,陳峻青申請(qǐng)人:東南大學(xué)