專利名稱：胰高血糖素樣蛋白-1受體glp-1r激動(dòng)劑化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及促進(jìn)胰島素分泌和較低的血糖水平的新型化合物，以及制造和使用這些化合物的方法。具體而言，本發(fā)明涉及結(jié)合并激活胰高血糖素樣蛋白1受體(GLP-1R)的化合物。

背景技術(shù)：
II型糖尿病是最流行的糖尿病類型。該疾病是由胰島素抵抗和胰腺β細(xì)胞衰竭造成的，這導(dǎo)致了葡萄糖刺激的胰島素分泌降低。刺激葡萄糖依賴的胰島素分泌和抑制胰高血糖素分泌的化合物腸促胰島素(incretin)作為治療II型糖尿病的有吸引力的候選物而出現(xiàn)。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)可以在體外改善β細(xì)胞功能的兩種腸促胰島素是葡萄糖促胰島素多肽(GIP)和胰高血糖素樣肽(7-36)酰胺(GLP-1)。GIP似乎不是有吸引力的治療候選物，因?yàn)樘悄虿ˇ录?xì)胞相對(duì)比較抵抗它的作用。然而，糖尿病β細(xì)胞對(duì)GLP-1的效果敏感。
除了增加胰島素分泌和減少胰高血糖素分泌以外，30-氨基酸的GLP-1肽還刺激前胰島素基因轉(zhuǎn)錄、減緩胃排空時(shí)間和減少食物攝取。GLP-1通過(guò)與胰高血糖素樣肽1受體(GLP-1R，一種推定可能的7-跨膜域受體)結(jié)合來(lái)發(fā)揮其生理效果。
GLP-1的治療應(yīng)用的缺點(diǎn)是它較短的體內(nèi)半衰期(1分鐘～2分鐘)。該較短的半衰期是該肽受二肽基肽酶4(DPP-IV)的快速降解的結(jié)果。這導(dǎo)致對(duì)表現(xiàn)出延長(zhǎng)的半衰期而同時(shí)保持刺激GLP-1R活性的能力的GLP-1類似物的鑒定或開(kāi)發(fā)。這些類似物的實(shí)例包括腸促胰島素類似物-4(exendin-4)和GLP-1-Gly8。
盡管已經(jīng)開(kāi)發(fā)了幾種保持促胰島素活性同時(shí)表現(xiàn)出延長(zhǎng)的半衰期的GLP-1類似物，但仍然需要帶有改善的藥物代謝動(dòng)力學(xué)特征的GLP-1R激動(dòng)劑。
本說(shuō)明書(shū)中對(duì)任何技術(shù)的參考不是也不應(yīng)被當(dāng)作是對(duì)所參考的技術(shù)構(gòu)成普遍性一般知識(shí)的一部分的任何形式的認(rèn)同或建議。


發(fā)明內(nèi)容
本文公開(kāi)了通過(guò)將一個(gè)或多個(gè)GLP-1R激動(dòng)劑肽與一個(gè)或多個(gè)抗體的結(jié)合位點(diǎn)共價(jià)連接而形成的組合物，以及制造和使用這些組合物的方法。在某些實(shí)施方式中，提供了帶有改善的體內(nèi)半衰期的GLP-1R激動(dòng)劑(GA)化合物。GA靶向化合物通過(guò)將GA靶向劑直接或經(jīng)介入接頭與抗體結(jié)合位點(diǎn)共價(jià)連接而形成。還提供了包含本發(fā)明的靶向化合物和可藥用載體的藥物組合物。
在某些實(shí)施方式中，提供了GLP-1R激動(dòng)劑(GA)肽。在某些方面，本發(fā)明提供了GA靶向劑，其中所述GA靶向劑是GLP-1受體的肽激動(dòng)劑，所述GA靶向劑包括包含與下列序列基本同源的序列的肽 R1-H1x2E3G4T5F6T7S8D9x10S11x12x13x14E15x16x17A18x19x20x21F22x23x24x25x26x27x28x29x30x31x32x33x34x35x36x37x38x39-R2， 其中 R1缺失或者是CH3、C(O)CH3、C(O)CH2CH3、C(O)CH2CH2CH3或C(O)CH(CH3)CH3； R2缺失或者是OH、NH2、NH(CH3)、NHCH2CH3、NHCH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH3、NHCH2CH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH2CH3、NHC6H5、NHCH2CH2OCH3、NHOCH3、NHOCH2CH3、羧基保護(hù)基、脂類脂肪酸基或糖，且 x2是諸如Aib、A、S、T、V、L、I或D-Ala等阻斷基團(tuán)(其中術(shù)語(yǔ)“阻斷基團(tuán)”在x2的上下文中是指能阻斷諸如DPP-4切割的某些切割反應(yīng)的殘基或基團(tuán))，x10是V、L、I或A，x12是S或K，x13是Q或Y，x14是G、C、F、Y、W、M或L，x16是K、D、E或G，x17是E或Q，x19是L、I、V或A，x20是Orn、K(SH)、R或K，x21是L或E，x23是I或L，x24是A或E，x25是W或F，x26是L或I，x27是I、K或V，x28是R、Orn、N或K，x29是Aib或G，x30是任何氨基酸且優(yōu)選為G或R，x31是P或缺失，x32是S或缺失，x33是S或缺失，x34是G或缺失，x35是A或缺失，x36是P或缺失，x37是P或缺失，x38是P或缺失，x39是S或缺失，x40是連接殘基或缺失，此外，其中x10、x11、x12、x13、x14、x16、x17、x19、x20、x21、x24、x26、x27、x28、x32、x33、x34、x35、x36、x37、x38、x39或x40之一由連接殘基(-[LR]-)取代，所述連接殘基包含可與抗體結(jié)合位點(diǎn)經(jīng)中間接頭共價(jià)連接的親核側(cè)鏈，且其中所述連接殘基是K(SH)。在這些實(shí)施方式中，x2可以是Aib。
本發(fā)明的化合物可以包含肽，所述肽包含與選自下列化合物的一個(gè)或多個(gè)化合物基本同源的序列 R1-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO172)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO173)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPK(SH)S-R2(SEQ ID NO99)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAK(SH)PPS-R2(SEQ ID NO100)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSK(SH)APPPS-R2(SEQ ID NO101)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPK(SH)SGAPPPS-R2(SEQ ID NO168)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKK(SH)GGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO102)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK(SH)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO170)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWK(SH)KNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO103)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIK(SH)WLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO104)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFK(SH)EWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO105)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(SH)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO106)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVK(SH)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO107)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAK(SH)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO108)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEK(SH)AVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO109)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEK(SH)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO110)， R1-HAibEGTFTSDLSKQK(SH)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO111)， R1-HAibEGTFTSDLSKK(SH)MEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO112)， R1-HAibEGTFTSDLSK(SH)QMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO169)， R1-HAibEGTFTSDLK(SH)KQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO113)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGK(SH)-R2(SEQ ID NO114)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLK(SH)NGGPSS-R2(SEQ ID NO115)， R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK(SH)-R2(SEQ ID NO38)， R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAK(SH)EFIAWLVKGR-R2(SEQ ID NO39)， R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVK(SH)EFIAWLIKAibRPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO171)， R1-HAibEGTFTSDK(SH)SSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO116)， R1-HAibEGTFTSDVSK(SH)YLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO117)， R1-HAibEGTFTSDVSSYK(SH)EEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO118)， R1-HAibEGTFTSDVSSYLEK(SH)QAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO119)， R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQK(SH)VKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO120)， R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVK(SH)EKIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO121)， R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIK(SH)WLIKAibR-R2(SEQ ID NO122)， R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWK(SH)IKAibR-R2(SEQ ID NO123)和 R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibRPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO124)。
本發(fā)明的化合物可以包含肽，所述肽包含與選自下列化合物的一個(gè)或多個(gè)化合物基本同源的序列 R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK(SH)-R2(SEQ ID NO38)， R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAK(SH)EFIAWLVKGR-R2(SEQ ID NO39)， R1-HAibEGTFTSDK(SH)SSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO116)， R1-HAibEGTFTSDVSK(SH)YLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO117)， R1-HAibEGTFTSDVSSYK(SH)EEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ IDNO118)， R1-HAibEGTFTSDVSSYLEK(SH)QAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO119)， R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQK(SH)VKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO120)， R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVK(SH)EKIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO121)， R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIK(SH)WLIKAibR-R2(SEQ ID NO122)和 R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWK(SH)IKAibR-R2(SEQ ID NO123)。
本發(fā)明的化合物可以包含肽，所述肽包含與選自下列化合物的一個(gè)或多個(gè)化合物基本同源的序列 R1-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO172)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO173)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPK(SH)S-R2(SEQ ID NO99)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAK(SH)PPS-R2(SEQ ID NO100)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSK(SH)APPPS-R2(SEQ ID NO101)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPK(SH)SGAPPPS-R2(SEQ ID NO168)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKK(SH)GGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO102)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK(SH)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO170)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWK(SH)KNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO103)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIK(SH)WLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO104)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFK(SH)EWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO105)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(SH)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO106)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVK(SH)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO107)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAK(SH)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO108)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEK(SH)AVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO109)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEK(SH)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO110)， R1-HAibEGTFTSDLSKQK(SH)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO111)， R1-HAibEGTFTSDLSKK(SH)MEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO112)， R1-HAibEGTFTSDLSK(SH)QMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO169)， R1-HAibEGTFTSDLK(SH)KQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO113)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGK(SH)-R2(SEQ ID NO114)和 R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLK(SH)NGGPSS-R2(SEQ ID NO115)。
本發(fā)明的化合物可以包含肽，所述肽包含與選自下列化合物的一個(gè)或多個(gè)化合物基本同源的序列 R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPK(SH)S-R2(SEQ ID NO99)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAK(SH)PPS-R2(SEQ ID NO100)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSK(SH)APPPS-R2(SEQ ID NO101)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPK(SH)SGAPPPS-R2(SEQ ID NO168)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKK(SH)GGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO102)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK(SH)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO170)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWK(SH)KNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO103)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIK(SH)WLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO104)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFK(SH)EWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO105)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(SH)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO106)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVK(SH)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO107)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAK(SH)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO108)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEK(SH)AVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO109)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEK(SH)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO110)， R1-HAibEGTFTSDLSKQK(SH)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO111)， R1-HAibEGTFTSDLSKK(SH)MEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO112)， R1-HAibEGTFTSDLSK(SH)QMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO169)， R1-HAibEGTFTSDLK(SH)KQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO113)和 R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLK(SH)NGGPSS-R2(SEQ ID NO115)。
本發(fā)明的化合物可以包含肽，所述肽包含選自下列序列的序列 R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPK(SH)S-R2(SEQ ID NO99)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAK(SH)PPS-R2(SEQ ID NO100)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSK(SH)APPPS-R2(SEQ ID NO101)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPK(SH)SGAPPPS-R2(SEQ ID NO168)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKK(SH)GGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO102)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK(SH)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO170)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(SH)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO106)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVK(SH)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO107)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAK(SH)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO108)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEK(SH)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO110)， R1-HAibEGTFTSDLSKQK(SH)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO111)， R1-HAibEGTFTSDLSKK(SH)MEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO112)， R1-HAibEGTFTSDLSK(SH)QMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO169)， R1-HAibEGTFTSDLK(SH)KQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO113)和 R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLK(SH)NGGPSS-R2(SEQ ID NO115)。
本發(fā)明的化合物可以包含肽，所述肽包含選自下列序列的序列 R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(SH)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO106)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVK(SH)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO107)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAK(SH)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO108)， R1-HAibEGTFTSDLSKQMEK(SH)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO110)， R1-HAibEGTFTSDLSKQK(SH)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO111)和 R1-HAibEGTFTSDLSKK(SH)MEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO112)。
在某些方面，本發(fā)明提供了GA靶向劑，其中所述GA靶向劑是GLP-1受體的肽激動(dòng)劑，所述GA靶向劑包括包含與下列序列基本同源的序列的肽 R1-H1x2E3G4T5F6T7S8D9x10S11x12x13x14E15x16x17A18x19x20x21F22x23x24x25x26x27x28x29x30x31x32x33x34x35x36x37x38x39-R2 其中 R1缺失或者是CH3、C(O)CH3、C(O)CH2CH3、C(O)CH2CH2CH3或C(O)CH(CH3)CH3；和 R2缺失或者是OH、NH2、NH(CH3)、NHCH2CH3、NHCH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH3、NHCH2CH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH2CH3、NHC6H5、NHCH2CH2OCH3、NHOCH3、NHOCH2CH3、羧基保護(hù)基、脂類脂肪酸基或糖， x2是諸如Aib、A、S、T、V、L、I或D-Ala等阻斷基團(tuán)，x10是V、L、I或A，x12是S或K，x13是Q或Y，x14是G、C、F、Y、W、M或L，x16是K、D、E或G，x17是E或Q，x19是L、I、V或A，x20是Orn、K(SH)、R或K，x21是L或E，x23是I或L，x24是A或E，x25是W或F，x26是L或I，x27是I、K或V，x28是R、Orn、N或K，x29是Aib或G，x30是任何氨基酸且優(yōu)選為G或R，x31是P或缺失，x32是S或缺失，x33是S或缺失，x34是G或缺失，x35是A或缺失，x36是P或缺失，x37是P或缺失，x38是P或缺失，x39是S或缺失，x40是連接殘基或缺失， 且其中所述肽經(jīng)中間接頭(L’)與抗體結(jié)合位點(diǎn)共價(jià)連接，且L’與C端或連接殘基(-[LR]-)的親核側(cè)鏈共價(jià)連接，從而-[LR]-選自K、R、Y、C、T、S、賴氨酸同系物(包括K(SH))、高半胱氨酸和高絲氨酸，且當(dāng)其存在時(shí)將取代x10、x11、x12、x13、x14、x16、x17、x19、x20、x21、x24、x26、x27、x28、x32、x33、x34、x35、x36、x37、x38、x39或x40之一。
在某些方面，本發(fā)明提供了GA靶向劑，所述GA靶向劑包括包含與下列序列基本同源的序列的肽 R1-H1Aib2E3G4T5F6T7S8D9V10S11S12Y13x14E15x16Q17A18x19x20E21F22I23A24x25L26x27x28x29R30-R2 其中x14是G、C、F、Y、W或L，x16是K、D、E或G，x19是L、I、V或A，x20是Orn、R或K，x25是W或F、x27是I或V，x28是R或K，且x29是Aib或G。
在某些方面，本發(fā)明提供了GA靶向劑，所述GA靶向劑包括包含與下列序列基本同源的序列的肽 R1-H1Aib2E3G4T5F6T7S8D9L10S11K12Q13M14E15E16E17A18V19R20L21F22I23E24W25L26K27N28G29G30P31S32S33G34A35P36P37P38S39-R2。
在某些方面，連接殘基選自K、Y、T和賴氨酸同系物(包括K(SH))。所述連接殘基可以是K(L)，其中K(L)是與接頭L相連的賴氨酸殘基，其中L能與抗體結(jié)合位點(diǎn)中的氨基酸側(cè)鏈形成共價(jià)鍵。
在整個(gè)本說(shuō)明書(shū)、權(quán)利要求和附圖及序列列表中，采用“(L)”來(lái)表示與在前殘基共價(jià)相連的接頭。當(dāng)描述氨基酸殘基亮氨酸時(shí)，使用單氨基酸編碼“L”。對(duì)接頭“(L)”使用括號(hào)和對(duì)亮氨酸“L”不存在括號(hào)以及其使用的上下文將能使本領(lǐng)域技術(shù)人員避免在兩個(gè)術(shù)語(yǔ)之間的混淆。
連接殘基可以選自x11、x12、x13、x14、x16、x17、x19、x20、x21、x24、x27、x28、x32、x34、x38和C端。連接殘基可以選自x11、x12、x13、x14、x16、x19、x20、x21、x27、x28、x32和x34。連接殘基可以選自x11、x12、x13、x14、x16、x19、x20和x21。連接殘基可以選自x13、x14、x16、x19、x20和x21。x14可以是連接殘基。
在本發(fā)明的某些方面，R1是C(O)CH3，因而乙酰化了GA靶向劑的氨基端。
在本發(fā)明的某些方面，R2是NH2，因而酰胺化了GA靶向劑的羧基端。
在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了GA靶向化合物，所述GA靶向化合物包括包含與下列序列同源的序列的肽 Hx2E G T F T S D x10x11x12x13x14Ex16x17Ax19x20x21Fx23x24x25x26x27x28x29x30x31x32x33x34x35x36x37x38x39x40 其中 x2是諸如Aib、A、S、T、V、L、I或D-Ala等阻斷基團(tuán)，x10是V、L、I或A，x11是連接基團(tuán)或S，x12是連接基團(tuán)、S或K，x13是連接基團(tuán)、Q或Y，x14是連接基團(tuán)、G、C、F、Y、W、M或L，x16是連接基團(tuán)、K、D、E或G，x17是連接基團(tuán)、E或Q，x19是連接基團(tuán)、L、I、V或A，x20是連接基團(tuán)、Orn、K(SH)、R或K，x21是連接基團(tuán)、L或E，x23是連接基團(tuán)、I或L，x24是連接基團(tuán)、A或E，x25是連接基團(tuán)或芳香殘基，x26是連接基團(tuán)、L或I，x27是連接基團(tuán)、I、K或V，x28是連接基團(tuán)、R、Orn、N或K，x29是連接基團(tuán)、Aib或G，x30是連接基團(tuán)、任何氨基酸或G，x31是連接基團(tuán)、P、K(SH)或缺失，x32是連接基團(tuán)、S或缺失，x33是連接基團(tuán)、S或缺失，x34是連接基團(tuán)、G或缺失，x35是連接基團(tuán)、A或缺失，x36是連接基團(tuán)、P或缺失，x37是連接基團(tuán)、P或缺失，x38是連接基團(tuán)、P或缺失，x39是連接基團(tuán)、S或缺失，x40是連接基團(tuán)或缺失，從而所述GA靶向化合物含有一個(gè)連接基團(tuán)，該連接基團(tuán)包含選自K、R、C、T和S的親核側(cè)鏈。
連接殘基可以是K。
N端可以不被封端(uncapped)。
連接殘基的側(cè)鏈可以是可與抗體結(jié)合位點(diǎn)直接或經(jīng)中間接頭而共價(jià)連接的。在某些實(shí)施方式中，連接殘基的側(cè)鏈與抗體結(jié)合位點(diǎn)直接或經(jīng)中間接頭而共價(jià)連接。
在某些實(shí)施方式中x26是L。在某些實(shí)施方式中x11是S。在某些實(shí)施方式中x25是W或F。在某些實(shí)施方式中x25是W。x2可以是Aib。
在本發(fā)明的某些方面，本發(fā)明包括了GA靶向化合物，所述GA靶向化合物包括包含與下列序列同源的序列的肽 H Aib E G T F T S D x10S x12x13x14Ex16x17Ax19x20x21Fx23x24x25Lx27x28x29x30x31x32x33x34x35x36x37x38x39。
在某些方面，本發(fā)明包括了包含肽的GA靶向化合物，所述GA靶向化合物包括包含與下列序列同源的序列的肽 H1x2E3G4T5F6T7S8D9L10S11K12Q13M14E15E16E17A18V19R20L21F22I23E24x25L26K27N28G29G30P31S32S33G34A35P36P37P38S39x40 其中 x2是諸如Aib、A、S、T、V、L、I或D-Ala等阻斷基團(tuán)， x25是連接殘基或芳香殘基， 從P31至S39的一個(gè)或多個(gè)殘基可能缺失， x40是連接殘基或缺失，且 S11至x40的殘基之一是包含適于形成共價(jià)鍵的側(cè)鏈的連接殘基，所述連接殘基選自K、R、C、T和S。
在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明的GA靶向劑包含色氨酸籠(Trp-cage)且包含肽序列，所述肽序列與至少包含殘基P31S32S33G34A35P36P37P38和S39的序列基本同源。在其它實(shí)施方式中，包含色氨酸籠的一個(gè)或多個(gè)殘基或者所有色氨酸籠都從所述GA靶向劑中缺失。
連接殘基可以用于取代S11、K12、Q13、M14、E16、E17、V19、R20、L21、I23、E24、L26、K27、N28、G29和G30之一，或P31、S32、S33、G34、A35、P36、P37、P38之一，或S39，或X40。這些實(shí)施方式的實(shí)例為SEQ IDNO3、SEQ ID NO172、SEQ ID NO4、SEQ ID NO173、SEQ ID NO115、SEQ ID NO114、SEQ ID NO113、SEQ ID NO169 SEQ ID NO112、SEQID NO111、SEQ ID NO110、SEQ ID NO109、SEQ ID NO108、SEQ IDNO107、SEQ ID NO106、SEQ ID NO105、SEQ ID NO104、SEQ IDNO103、SEQ ID NO170、SEQ ID NO102、SEQ ID NO168、SEQ IDNO101、SEQ ID NO100、SEQ ID NO99、SEQ ID NO31、SEQ IDNO30、SEQ ID NO29、SEQ ID NO28、SEQ ID NO27、SEQ ID NO26、SEQ ID NO25、SEQ ID NO24、SEQ ID NO23、SEQ ID NO22、SEQID NO21、SEQ ID NO20、SEQ ID NO19、SEQ ID NO18、SEQ IDNO17、SEQ ID NO16、SEQ ID NO15、SEQ ID NO14和SEQ ID NO5。
這些實(shí)施方式的實(shí)例還有SEQ ID NO32、SEQ ID NO34、SEQ IDNO36、SEQ ID NO37、SEQ ID NO38、SEQ ID NO39、SEQ ID NO40、SEQ ID NO41、SEQ ID NO42、SEQ ID NO43、SEQ ID NO44、SEQID NO45、SEQ ID NO46、SEQ ID NO47、SEQ ID NO48、SEQ IDNO49、SEQ ID NO50、SEQ ID NO51、SEQ ID NO52、SEQ ID NO53、SEQ ID NO54、SEQ ID NO55、SEQ ID NO56、SEQ ID NO57、SEQID NO58、SEQ ID NO59、SEQ ID NO60、SEQ ID NO61、SEQ IDNO62、SEQ ID NO63、SEQ ID NO64、SEQ ID NO65、SEQ ID NO66、SEQ ID NO67、SEQ ID NO68、SEQ ID NO69、SEQ ID NO70、SEQID NO71、SEQ ID NO72、SEQ ID NO73、SEQ ID NO74、SEQ IDNO75和SEQ ID NO76。
在某些實(shí)施方式中，連接殘基可以用于取代K12、Q13、M14、E16、E17、V19、R20、L21、I23、E24、L26、K27和N28之一。這些實(shí)施方式的實(shí)例為SEQ ID NO169、SEQ ID NO112、SEQ ID NO111、SEQ IDNO110、SEQ ID NO109、SEQ ID NO108、SEQ ID NO107、SEQ IDNO106、SEQ ID NO105、SEQ ID NO104、SEQ ID NO103、SEQ IDNO170、SEQ ID NO102、SEQ ID NO28、SEQ ID NO27、SEQ IDNO26、SEQ ID NO25、SEQ ID NO24、SEQ ID NO23、SEQ ID NO22、SEQ ID NO21、SEQ ID NO20、SEQ ID NO19、SEQ ID NO18和SEQID NO5。
連接殘基可以用于取代I23。這些實(shí)施方式的實(shí)例為SEQ ID NO21和SEQ ID NO105。
連接殘基可以用于取代L26。這些實(shí)施方式的實(shí)例為SEQ ID NO19和SEQ ID NO103。
連接殘基可以是K12。這些實(shí)施方式的實(shí)例為SEQ ID NO5。
在某些實(shí)施方式中，連接殘基可以用于取代Q13、M14、E16、E17、V19、R20、L21和E24之一。這些實(shí)施方式的實(shí)例為SEQ ID NO112、SEQID NO111、SEQ ID NO110、SEQ ID NO109、SEQ ID NO108、SEQ IDNO107、SEQ ID NO106、SEQ ID NO104、SEQ ID NO28、SEQ IDNO27、SEQ ID NO26、SEQ ID NO25、SEQ ID NO24、SEQ ID NO23、SEQ ID NO22和SEQ ID NO20。
連接殘基可以用于取代Q13。這些實(shí)施方式的實(shí)例為SEQ ID NO28和SEQ ID NO112。
在某些實(shí)施方式中，連接殘基可以用于取代M14、E16、E17、V19、R20、L21和E24之一。這些實(shí)施方式的實(shí)例為SEQ ID NO111、SEQ IDNO110、SEQ ID NO109、SEQ ID NO108、SEQ ID NO107、SEQ IDNO106、SEQ ID NO104、SEQ ID NO27、SEQ ID NO26、SEQ IDNO25、SEQ ID NO24、SEQ ID NO23、SEQ ID NO22和SEQ IDNO20。
連接殘基可以為E24。這些實(shí)施方式的實(shí)例為SEQ ID NO20和SEQID NO104。
在某些實(shí)施方式中，連接殘基可以用于取代M14、E16、E17、V19、R20和L21之一。這些實(shí)施方式的實(shí)例為SEQ ID NO111、SEQ IDNO110、SEQ ID NO109、SEQ ID NO108、SEQ ID NO107、SEQ IDNO106、SEQ ID NO27、SEQ ID NO26、SEQ ID NO25、SEQ IDNO24、SEQ ID NO23和SEQ ID NO22。
連接殘基可以用于取代M14。這些實(shí)施方式的實(shí)例為SEQ IDNO27和SEQ ID NO111。
連接殘基可以用于取代E16。這些實(shí)施方式的實(shí)例為SEQ ID NO26和SEQ ID NO110。
連接殘基可以用于取代E17。這些實(shí)施方式的實(shí)例為SEQ ID NO25和SEQ ID NO109。
連接殘基可以用于取代V19。這些實(shí)施方式的實(shí)例為SEQ ID NO24和SEQ ID NO108。
連接殘基可以用于取代R20。這些實(shí)施方式的實(shí)例為SEQ ID NO23和SEQ ID NO107。
連接殘基可以用于取代L21。這些實(shí)施方式的實(shí)例為SEQ ID NO22和SEQ ID NO106。
在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明的GA靶向劑包含色氨酸籠且包含肽序列，所述肽序列與至少包含殘基P31S32S33G34A35P36P37P38和S39的序列基本同源。在其它實(shí)施方式中，一個(gè)或多個(gè)或所有色氨酸籠都從所述GA靶向劑中缺失。
在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了GA靶向化合物，所述GA靶向化合物包括包含與以下序列同源的序列的肽 H1x2E3G4T5F6T7S8D9x10x11x12x13x14E15x16x17Ax19x20x21F22x23x24x25x26x27x28x29x30x31x32x33x34x35x36x37x38x39x40， 其中 x2是諸如Aib、A、S、T、V、L或I等阻斷基團(tuán)，x10是V、L、I或A，x11是連接殘基或S，x12是連接殘基、S或K，x13是連接殘基或Y，x14是連接殘基、G、C、F、Y、W或L，x16是連接殘基、K、D、E或G，x17是連接殘基或Q，x19是連接殘基、L、I、V或A，x20是連接殘基、Orn、K(SH)、R或K，x21是連接殘基或E，x23是連接殘基或I，x24是連接殘基或A，x25是連接殘基或芳香殘基，x26是連接殘基或L，x27是連接殘基、I或V，x28是連接殘基、R、Orn或K，x29是連接殘基、Aib或G，x30是連接殘基或G，x31是連接殘基、P、K(SH)或缺失，x32是連接殘基、S或缺失，x33是連接殘基、S或缺失，x34是連接殘基、G或缺失，x35是連接殘基、A或缺失，x36是連接殘基、P或缺失，x37是連接殘基、P或缺失，x38是連接殘基、P或缺失，x39是連接殘基、S或缺失，且x40是連接殘基或缺失， 從而所述GA靶向化合物含有一個(gè)包含親核側(cè)鏈的連接殘基，所述連接殘基選自K、R、C、T和S。
在某些實(shí)施方式中，x2是Aib。在某些實(shí)施方式中，x31是Aib。
在某些實(shí)施方式中，x16是E。在某些實(shí)施方式中，x19是V。
在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了GA靶向化合物，所述GA靶向化合物包括包含與以下序列同源的序列的肽 H1Aib2E3G4T5F6T7S8D9x10x11x12x13x14E15E16x17AV19x20x21F22x23x24x25x26x27x28x29x30Aib31x32x33x34x35x36x37x38x39x40 在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明包含GA靶向化合物，所述GA靶向化合物包含與如下序列基本同源的序列 H1Aib2E3G4T5F6T7S8D9V10S11S12Y13L14E15E16Q17A18V19K20E21F22I23A24W25L26I27K28G29R30Aib31S32S33G34A35P36P37P38S39x40， 其中從Aib31至S39的一個(gè)或多個(gè)殘基可能缺失，且x40是連接殘基或缺失，且其中從S11至x40的殘基之一是包含適于形成共價(jià)鍵的側(cè)鏈的連接殘基，所述連接殘基選自K、R、C、T和S。這些實(shí)施方式的實(shí)例是SEQ ID NO57、SEQ ID NO64、SEQ ID NO65、SEQ ID NO66、SEQ ID NO67、SEQ ID NO68、SEQ ID NO69、SEQ ID NO70、SEQID NO71和SEQ ID NO72。
在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明包含GA靶向化合物，所述GA靶向化合物包含與如下序列基本同源的序列 H1x2E3G4T5F6T7S8D9V10S11S12Y13L14E15G16Q17A18A19K20E21F22I23A24x25L26V27K28G29R30P31S32S33G34A35P36P37P38S39x40 其中 x2是諸如Aib、A、S、T、V、L或I等阻斷基團(tuán)， x25是連接殘基或芳香殘基， 從P31至S39的一個(gè)或多個(gè)殘基可能缺失， x40是連接殘基或缺失，且 其中從S11 to x40的殘基之一是包含親核側(cè)鏈的連接殘基，所述連接殘基選自K、R、C、T和S。
這些實(shí)施方式的實(shí)例是SEQ ID NO32、SEQ ID NO33、SEQ IDNO34、SEQ ID NO35、SEQ ID NO36和SEQ ID NO37。
在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明的GA靶向劑包含色氨酸籠且包含肽序列，所述肽序列與至少包含殘基P31S32S33G34A35P36P37P38和S39的序列基本同源。在其它實(shí)施方式中，包含色氨酸籠的一個(gè)或多個(gè)殘基或者所有色氨酸籠都從所述GA靶向劑中缺失。
連接殘基可以為K。
N端可以不被封端。
連接殘基的側(cè)鏈可以與抗體結(jié)合位點(diǎn)直接或經(jīng)中間接頭共價(jià)連接。在某些實(shí)施方式中，連接殘基的側(cè)鏈與抗體結(jié)合位點(diǎn)直接或經(jīng)中間接頭共價(jià)連接。
在某些實(shí)施方式中，這些肽選自如本文所述的GA靶向化合物，包括但不限于 R1-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK-R2(SEQ ID NO3) R1-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO172) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK-R2(SEQ ID NO4) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO173) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO5) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGG-R2(SEQ ID NO6) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-R2(SEQ ID NO7) R1-HAibEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEFLKN-R2(SEQ ID NO8) R1-HAibEGTFTSDLSKQLEEEAVRLAIEFLKN-R2(SEQ ID NO9) R1-HAibEGTFTSDLSKQLEEEAVRLAIEFLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO10) R1-HAibEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEFLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO11) R1-HAibEGTFTSDLSK(Ac)QMEEEAVRLFIEWLK(Ac)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO12) R1-HAibEGTFTSDLSK(苯甲?；?QMEEEAVRLFIEWLK(苯甲酰基)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO13) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPKS-R2(SEQ ID NO14) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPK(SH)S-R2(SEQ ID NO99) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAKPPS-R2(SEQ ID NO15) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAK(SH)PPS-R2(SEQ ID NO100) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSKAPPPS-R2(SEQ ID NO16) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSK(SH)APPPS-R2(SEQ ID NO101) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPKSGAPPPS-R2(SEQ ID NO17) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPK(SH)SGAPPPS-R2(SEQ ID NO168) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKKGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO18) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKK(SH)GGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO102) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWKKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO19) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK(SH)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO170) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWK(SH)KNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO103) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIKWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO20) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIK(SH)WLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO104) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFKEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO21) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFK(SH)EWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO105) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO22) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(SH)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO106) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVKLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO23) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVK(SH)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO107) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAKRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO24) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAK(SH)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO108) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEKAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO25) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEK(SH)AVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO109) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEKEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO26) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEK(SH)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO110) R1-HAibEGTFTSDLSKQKEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO27) R1-HAibEGTFTSDLSKQK(SH)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO111) R1-HAibEGTFTSDLSKKMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO28) R1-HAibEGTFTSDLSKK(SH)MEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO112) R1-HAibEGTFTSDLKKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO29) R1-HAibEGTFTSDLSK(SH)QMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO169) R1-HAibEGTFTSDLK(SH)KQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO113) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGK-R2(SEQ ID NO30) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGK(SH)-R2(SEQ ID NO114) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLKNGGPSS-R2(SEQ ID NO31) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLK(SH)NGGPSS-R2(SEQ ID NO115) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-R2(SEQ ID NO32) R1-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK-R2(SEQ ID NO33) R1-HGEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK-R2(SEQ ID NO34) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO35) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKAibRK-R2(SEQ ID NO36) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK-R2(SEQ ID NO37) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK(SH)-R2(SEQ ID NO38) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAK(SH)EFIAWLVKGR-R2(SEQ ID NO39) R1-HAibEGTFTSDVSSYGEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO40) R1-HAibEGTFTSDVSSYCEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO41) R1-HAibEGTFTSDVSSYFEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO42) R1-HAibEGTFTSDVSSYYEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO43) R1-HAibEGTFTSDVSSYWEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO44) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO45) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEDQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO46) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEKQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO47) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAVKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO48) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAIKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO49) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQALKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO50) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAREFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO51) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAOrnEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO52) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAFLVKAibR-R2(SEQ ID NO53) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO54) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVRAibR-R2(SEQ ID NO55) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVOrnAibR-R2(SEQ ID NO56) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO57) R1-HAibEGTFTSDVSSYFEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO58) R1-HAibEGTFTSDVSSYYEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO59) R1-HAibEGTFTSDVSSYWEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO60) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIRAibR-R2(SEQ ID NO61) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVREFIAWLIRAibR-R2(SEQ ID NO62) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibRPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO63) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVK(SH)EFIAWLIKAibRPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO171) R1-HAibEGTFTSDKSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO64) R1-HAibEGTFTSDK(SH)SSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO116) R1-HAibEGTFTSDVSKYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO65) R1-HAibEGTFTSDVSK(SH)YLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO117) R1-HAibEGTFTSDVSSYKEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO66) R1-HAibEGTFTSDVSSYK(SH)EEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO118) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEKQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO67) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEK(SH)QAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO119) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQKVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO68) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQK(SH)VKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO120) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEKIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO69) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVK(SH)EKIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO121) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIKWLIKAibR-R2(SEQ ID NO70) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIK(SH)WLIKAibR-R2(SEQ ID NO122) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWKIKAibR-R2(SEQ ID NO71) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWK(SH)IKAibR-R2(SEQ ID NO123) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibRPSSGAPPPSK-R2(SEQ ID NO72) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibRPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO124) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIK(Ac)AibR-R2(SEQ ID NO73) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIK(苯甲?；?AibR-R2(SEQ ID NO74) R1-H(反-3-己?；?AibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO75) R1-H(3-氨基苯基乙?；?AibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAib R-R2(SEQ ID NO76) R1缺失或者是CH3、C(O)CH3、C(O)CH2CH3、C(O)CH2CH2CH3或C(O)CH(CH3)CH3；和 R2是OH、NH2、NH(CH3)、NHCH2CH3、NHCH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH3、NHCH2CH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH2CH3、NHC6H5、NHCH2CH2OCH3、NHOCH3、NHOCH2CH3、羧基保護(hù)基、脂類脂肪酸基或糖。
在某些實(shí)施方式中，這些肽選自如本文所述的GA靶向化合物，包括但不限于 R1-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVRGR(SEQ ID NO125) R1-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAREFIAWLVRGRK(SEQ ID NO126) R1-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAREFIAWLVRGK(SEQ ID NO127) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEAibQAAKEFIAWLVKAibR(SEQ ID NO128) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKAibR(SEQ ID NO35) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEAibQAAKEFIAWLVKGR(SEQ ID NO129) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEAibQAAREFIAWLVRAibRK(SEQ ID NO130) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAREFIAWLVRAibRK(SEQ ID NO131) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEAibQAAREFIAWLVRGRK(SEQ ID NO132) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEAibQAAREFIAWLVKAibR(SEQ ID NO133) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAREFIAWLVKGRK(SEQ ID NO134) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEAibQAAREFIAWLVKGRK(SEQ ID NO135) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEAibQAAKEFIAWLVRAibR(SEQ ID NO136) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVRAibRK(SEQ ID NO137) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEAibQAAKEFIAWLVRGRK(SEQ ID NO138) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEAibQAAKEFIAWLVKAibRAK(SEQ ID NO139) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKAibRAK(SEQ ID NO140) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEAibQAAKEFIAWLVKGRAK(SEQ ID NO141) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEAibQAAKEFIAWLVKAibRK(SEQ ID NO142) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKAibRK(SEQ ID NO36) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEAibQAAKEFIAWLVKGRK(SEQ ID NO143) R1-H(D-Ala)EGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK(SEQ ID NO144) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEAibQAAibKEFIAWLVKGRK(SEQ ID NO145) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEEAAREFIEWLVRGRK(SEQ ID NO146) 其中 R1缺失或者是CH3、C(O)CH3、C(O)CH2CH3、C(O)CH2CH2CH3或C(O)CH(CH3)CH3；且 R2是OH、NH2、NH(CH3)、NHCH2CH3、NHCH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH3、NHCH2CH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH2CH3、NHC6H5、NHCH2CH2OCH3、NHOCH3、NHOCH2CH3、羧基保護(hù)基、脂類脂肪酸基或糖。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，所述GA靶向化合物包含具有與SEQID NO1或SEQ ID NO2至少80％的氨基酸同源性的序列 R1-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR(SEQ ID NO1)[Glp-1] R1-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS(SEQ ID NO2)[Exendin-4] 所述GA靶向化合物可以包含下式的氨基酸序列 X1X2E3G4T5F6T7S8D9X10S11X12X13X14E15X16X17A18X19X20X21F22I23X24W25L26X27X28X29X30X31X32X33X34X35X36X37X38X39X40 其中 X1是L-組氨酸、D-組氨酸、脫氨組氨酸、2-氨基組氨酸、β-羥基組氨酸、高組氨酸、Nα-乙酰基組氨酸、α-氟甲基組氨酸、α-甲基組氨酸、3-吡啶基丙氨酸、2-吡啶基丙氨酸或4-吡啶基丙氨酸；X2是A、D-Ala、G、V、L、I、K、Aib、(1-氨基環(huán)丙基)甲酸、(1-氨基環(huán)丁基)甲酸、1-氨基環(huán)戊基)甲酸、(1-氨基環(huán)己基)甲酸、(1-氨基環(huán)庚基)甲酸或(1-氨基環(huán)辛基)甲酸；X10是V或L；X12是S、K或R、X13是Y或Q；X14是L或M；X16是G、E或Aib；X17是Q、E、K或R；X19是A或V；X20是K、E或A；X21是E或L；X24是A、E或R；X27是V或K；X28是K、E、N或R；X29是G或R；X30是R、G或K；X31是G、A、E、P、K、酰胺或缺失；X32是K、S、酰胺或缺失；X33是S、K、酰胺或缺失；X34是G、酰胺或缺失；X35是A、酰胺或缺失；X36是P、酰胺或缺失；X37是P、酰胺或缺失；X38是P、酰胺或缺失；X39是S、酰胺或缺失；X40是酰胺或缺失； 條件是如果X32、X33、X34、X35、X36、X37、X38、X39或X40缺失則各個(gè)下游氨基酸殘基也缺失。
在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的GA靶向化合物可以包含下式的氨基酸序列 X1X2E3G4T5F6T7S8D9V10S11X12Y13L14E15X16X17A18A19X20E21F22I23X24W25L26V27X28X29X30X31X32 其中X1是L-組氨酸、D-組氨酸、脫氨組氨酸、2-氨基組氨酸、β-羥基組氨酸、高組氨酸、Nα-乙?；M氨酸、α-氟甲基組氨酸、α-甲基組氨酸、3-吡啶基丙氨酸、2-吡啶基丙氨酸或4-吡啶基丙氨酸；X2是A、D-Ala、G、V、L、I、K、Aib、(1-氨基環(huán)丙基)甲酸、(1-氨基環(huán)丁基)甲酸、1-氨基環(huán)戊基)甲酸或(1-氨基環(huán)己基)甲酸、(1-氨基環(huán)庚基)甲酸或(1-氨基環(huán)辛基)甲酸；X12是S、K或R；X16是G、E或Aib；X17是Q、E、K或R；X20是K、E或T；X24是A、E或R；X28是K、E或R；X29是G或Aib；X30是R或K；X31是G、A、E或K；X32是K、酰胺或缺失。
在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中，所述GA靶向劑是被保護(hù)的二肽基氨基肽酶IV。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中，所述GA靶向劑被DPP-IV以一定速率水解，所述一定速率低于使用本文公開(kāi)的DPP-IV水解測(cè)試進(jìn)行的SEQ ID NO1水解的速率。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中，所述GA靶向劑的A2被另一個(gè)氨基酸殘基(X2)取代。在某些實(shí)施方式中，X2是Aib。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中，X1選自D-組氨酸、脫氨組氨酸、2-氨基組氨酸、β-羥基組氨酸、高組氨酸、Nα-乙?；M氨酸、α-氟甲基組氨酸、α-甲基組氨酸、3-吡啶基丙氨酸、2-吡啶基丙氨酸和4-吡啶基丙氨酸。
在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中，所述GA靶向劑與SEQ ID NO1或SEQ ID NO2相比包含不超過(guò)12個(gè)被交換、添加或缺失的氨基酸殘基。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中，所述GA靶向劑與SEQ ID NO1或SEQ ID NO2相比包含不超過(guò)6個(gè)被交換、添加或缺失的氨基酸殘基。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中，所述GA靶向劑與SEQ ID NO1或SEQ ID NO2相比包含不超過(guò)4個(gè)被交換、添加或缺失的氨基酸殘基。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中，所述GA靶向劑與SEQ ID NO1或SEQ ID NO2相比包含不超過(guò)2個(gè)被交換、添加或缺失的氨基酸殘基。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中，所述GA靶向劑包含不超過(guò)4個(gè)不是由遺傳密碼編碼的氨基酸殘基。
在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中，所述GA靶向化合物是 HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPS SGAPPPSKKKKKK-酰胺(SEQ ID NO147)。
在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了與GLP-1基本同源的GA靶向劑。本發(fā)明的GA靶向劑可以與GLP-1(SEQ ID NO1)至少95％同源。本發(fā)明的GA靶向劑可以與GLP-1至少90％同源。本發(fā)明的GA靶向劑可以與GLP-1至少80％同源。本發(fā)明的GA靶向劑可以與GLP-1至少70％同源。本發(fā)明的GA靶向劑可以與GLP-1至少60％同源。本發(fā)明的GA靶向劑可以與GLP-1至少53％同源。本發(fā)明的GA靶向劑可以與GLP-1至少50％同源。
在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了與Exendin-4(SEQ ID NO2)基本同源的GA靶向劑。本發(fā)明的GA靶向劑可以與Exendin-4至少95％同源。本發(fā)明的GA靶向劑可以與Exendin-4至少90％同源。本發(fā)明的GA靶向劑可以與Exendin-4至少80％同源。本發(fā)明的GA靶向劑可以與Exendin-4至少70％同源。本發(fā)明的GA靶向劑可以與Exendin-4至少60％同源。本發(fā)明的GA靶向劑可以與Exendin-4至少53％同源。本發(fā)明的GA靶向劑可以與Exendin-4至少50％同源。
在某些實(shí)施方式中，提供了具有式I的GA靶向劑-接頭偶聯(lián)物 L-[GA靶向劑] (I) 其中 [GA靶向劑]是GLP-1R的肽激動(dòng)劑。在某些實(shí)施方式中，[GA靶向劑]是選自如本文所述的GA靶向化合物的肽，包括但不限于 R1-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK-R2(SEQ ID NO3) R1-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO172) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK-R2(SEQ ID NO4) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO173) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO5) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGG-R2(SEQ ID NO6) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-R2(SEQ ID NO7) R1-HAibEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEFLKN-R2(SEQ ID NO8) R1-HAibEGTFTSDLSKQLEEEAVRLAIEFLKN-R2(SEQ ID NO9) R1-HAibEGTFTSDLSKQLEEEAVRLAIEFLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO10) R1-HAibEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEFLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO11) R1-HAibEGTFTSDLSK(Ac)QMEEEAVRLFIEWLK(Ac)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO12) R1-HAibEGTFTSDLSK(苯甲酰基)QMEEEAVRLFIEWLK(苯甲?；?NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO13) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPKS-R2(SEQ ID NO14) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPK(SH)S-R2(SEQ ID NO99) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAKPPS-R2(SEQ ID NO15) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAK(SH)PPS-R2(SEQ ID NO100) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSKAPPPS-R2(SEQ ID NO16) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSK(SH)APPPS-R2(SEQ ID NO101) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPKSGAPPPS-R2(SEQ ID NO17) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPK(SH)SGAPPPS-R2(SEQ ID NO168) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKKGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO18) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKK(SH)GGPSSGAPPPS-R2(SEQ IDNO102) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWKKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO19) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK(SH)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO170) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWK(SH)KNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO103) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIKWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO20) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIK(SH)WLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO104) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFKEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO21) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFK(SH)EWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO105) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO22) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(SH)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO106) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVKLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO23) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVK(SH)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO107) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAKRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO24) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAK(SH)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO108) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEKAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO25) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEK(SH)AVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO109) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEKEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO26) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEK(SH)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO110) R1-HAibEGTFTSDLSKQKEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO27) R1-HAibEGTFTSDLSKQK(SH)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO111) R1-HAibEGTFTSDLSKKMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO28) R1-HAibEGTFTSDLSKK(SH)MEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO112) R1-HAibEGTFTSDLKKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO29) R1-HAibEGTFTSDLSK(SH)QMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO169) R1-HAibEGTFTSDLK(SH)KQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO113) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGK-R2(SEQ ID NO30) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGK(SH)-R2(SEQ ID NO114) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLKNGGPSS-R2(SEQ ID NO31) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLK(SH)NGGPSS-R2(SEQ ID NO115) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-R2(SEQ ID NO32) R1-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK-R2(SEQ ID NO33) R1-HGEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK-R2(SEQ ID NO34) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO35) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKAibRK-R2(SEQ ID NO36) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK-R2(SEQ ID NO37) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK(SH)-R2(SEQ ID NO38) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAK(SH)EFIAWLVKGR-R2(SEQ ID NO39) R1-HAibEGTFTSDVSSYGEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO40) R1-HAibEGTFTSDVSSYCEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO41) R1-HAibEGTFTSDVSSYFEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO42) R1-HAibEGTFTSDVSSYYEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO43) R1-HAibEGTFTSDVSSYWEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO44) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO45) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEDQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO46) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEKQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO47) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAVKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO48) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAIKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO49) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQALKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO50) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAREFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO51) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAOrnEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO52) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAFLVKAibR-R2(SEQ ID NO53) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO54) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVRAibR-R2(SEQ ID NO55) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVOrnAibR-R2(SEQ ID NO56) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO57) R1-HAibEGTFTSDVSSYFEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO58) R1-HAibEGTFTSDVSSYYEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO59) R1-HAibEGTFTSDVSSYWEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO60) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIRAibR-R2(SEQ ID NO61) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVREFIAWLIRAibR-R2(SEQ ID NO62) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibRPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO63) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVK(SH)EFIAWLIKAibRPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO171) R1-HAibEGTFTSDKSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO64) R1-HAibEGTFTSDK(SH)SSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO116) R1-HAibEGTFTSDVSKYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO65) R1-HAibEGTFTSDVSK(SH)YLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO117) R1-HAibEGTFTSDVSSYKEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO66) R1-HAibEGTFTSDVSSYK(SH)EEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO118) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEKQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO67) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEK(SH)QAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO119) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQKVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO68) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQK(SH)VKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO120) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEKIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO69) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVK(SH)EKIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO121) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIKWLIKAibR-R2(SEQ ID NO70) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIK(SH)WLIKAibR-R2(SEQ ID NO122) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWKIKAibR-R2(SEQ ID NO71) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWK(SH)IKAibR-R2(SEQ ID NO123) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibRPSSGAPPPSK-R2(SEQ ID NO72) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibRPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO124) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIK(Ac)AibR-R2(SEQ ID NO73) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIK(苯甲酰基)AibR-R2(SEQ ID NO74) R1-H(反-3-己?；?AibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO75) R1-H(3-氨基苯基乙?；?AibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO76) 其中 R1缺失或者是CH3、C(O)CH3、C(O)CH2CH3、C(O)CH2CH2CH3或C(O)CH(CH3)CH3；和 R2是OH、NH2、NH(CH3)、NHCH2CH3、NHCH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH3、NHCH2CH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH2CH3、NHC6H5、NHCh2CH2OCH3、NHOCH3、NHOCH2CH3、羧基保護(hù)基、脂類脂肪酸基或糖； 并且可以從這些肽形成任何C端截短物和類似物；且 L是具有式-X-Y-Z的接頭部分，其中 X可選地存在，且為與構(gòu)成GA靶向劑的殘基之一相連的生物相容性聚合物、嵌段共聚物、C、H、N、O、P、S、鹵素(F、Cl、Br、I)或其鹽、烷基、烯基、炔基、氧代烷基、氧代烯基、氧代炔基、氨基烷基、氨基烯基、氨基炔基、硫代烷基、硫代烯基、硫代炔基、磷酸烷基、磷酸烯基或磷酸炔基； Y是可選地存在的包含至少一個(gè)環(huán)結(jié)構(gòu)的識(shí)別基團(tuán)；且 Z是能與抗體結(jié)合位點(diǎn)的側(cè)鏈共價(jià)連接的反應(yīng)性基團(tuán)；和 其可藥用鹽、立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、溶劑合物和前體藥物。
在某些實(shí)施方式中，X與GA靶向劑的羧基端、S側(cè)鏈、K側(cè)鏈、K(SH)側(cè)鏈、T側(cè)鏈或Y側(cè)鏈相連。
在其它方面，本發(fā)明提供了具有選自下列化合物的式的化合物 R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK(L)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO148) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(L)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO149) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVK(L)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO150) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAK(L)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO151) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEK(L)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO164) R1-HAibEGTFTSDLSKQK(L)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO152) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibRPSSGAPPPSK(L)-R2(SEQ ID NO153) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVK(L)EFIAWLIKAibRPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO154) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAK(L)EFIAWLVKGR-R2(SEQ ID NO155) 其中 R1缺失或者是CH3、C(O)CH3、C(O)CH2CH3、C(O)CH2CH2CH3或C(O)CH(CH3)CH3；和 R2是OH、NH2、NH(CH3)、NHCH2CH3、NHCH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH3、NHCH2CH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH2CH3、NHC6H5、NHCH2CH2OCH3、NHOCH3、NHOCH2CH3、羧基保護(hù)基、脂類脂肪酸基或糖，且 K(L)是與接頭L共價(jià)連接的賴氨酸殘基。在某些實(shí)施方式中，K(L)是
其中u是1、2或3； -L-是具有式-X-Y-Z-的接頭部分，其中 X是
其中v是0、1、2或3；t是1、2或3，r是1或2；s是0、1或2； Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基； Y是包含至少一個(gè)環(huán)結(jié)構(gòu)的識(shí)別基團(tuán)；和 Z是能與抗體結(jié)合位點(diǎn)的氨基酸側(cè)鏈形成共價(jià)鍵的反應(yīng)性基團(tuán)。
在某些實(shí)施方式中，Y具有任選取代的結(jié)構(gòu)
其中a、b、c、d和e各自獨(dú)立地為碳或氮；f是碳、氮、氧或硫；Y獨(dú)立地與X和Z在足夠價(jià)態(tài)的任何兩個(gè)環(huán)位置處相連；且a、b、c、d、e和f中不超過(guò)四個(gè)同時(shí)為氮。
在某些實(shí)施方式中，Z選自取代1，3-二酮或?；?β-內(nèi)酰胺。
在某些實(shí)施方式中，Z具有結(jié)構(gòu)
其中q＝0、1、2、3、4或5。在其它實(shí)施方式中，q＝1、2或3。在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X是 -R22-P-R23-或-R22-P-R21-P’-R23- 其中 P和P’獨(dú)立地選自聚氧化烯氧化物(諸如聚氧化乙烯、聚乙基噁唑啉、聚-N-乙烯基吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚丙烯酸羥乙酯、聚甲基丙烯酸羥乙酯和聚丙烯酰胺)、在聚合物主鏈或聚合物側(cè)鏈上帶有氨基的聚胺(諸如聚賴氨酸、聚鳥(niǎo)氨酸、聚精氨酸和聚組氨酸)、非肽聚胺(諸如聚氨基苯乙烯、聚氨基丙烯酸酯、聚(N-甲基氨基丙烯酸酯)、聚(N-乙基氨基丙烯酸酯)、聚(N，N-二甲基氨基丙烯酸酯)、聚(N，N-二乙基氨基丙烯酸酯)、聚(氨基甲基丙烯酸酯)、聚(N-甲基氨基甲基丙烯酸酯)、聚(N-乙基氨基甲基丙烯酸酯)、聚(N，N-二甲基氨基甲基丙烯酸酯)、聚(N，N-二乙基氨基甲基丙烯酸酯)、聚乙烯亞胺)、季胺聚合物(諸如聚(氯化N，N，N-三甲基氨基丙烯酸酯)、聚(氯化甲基丙烯酰胺基丙基三甲基銨))、蛋白多糖(諸如硫酸軟骨素-A(4-硫酸鹽)、硫酸軟骨素-C(6-硫酸鹽)和硫酸軟骨素-B)、多肽(諸如聚絲氨酸、聚蘇氨酸、聚谷氨酰胺)、天然或合成多糖(諸如殼聚糖、羥乙基纖維素)和脂類； R21、R22和R23各自獨(dú)立地為共價(jià)鍵、-O-、-S-、-NRb-、酰胺、取代或未取代的直鏈或支鏈C1-50亞烷基或者取代或未取代的直鏈或支鏈C1-50雜亞烷基； Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基；且 選擇R21、R22和R23從而使得X的主鏈長(zhǎng)度保持為約200個(gè)原子或約200個(gè)原子以下。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X與[GA靶向劑]中的氨基酸殘基相連，且是任選地取代的-R22-[CH2-CH2-O]t-R23-、-R22-環(huán)烷基-R23-、-R22-芳基-R23-或-R22-雜環(huán)基-R23-，其中t是0～50。
在某些實(shí)施方式中，X與GA靶向劑的羧基端、S側(cè)鏈、K側(cè)鏈、K(SH)側(cè)鏈、T側(cè)鏈或Y側(cè)鏈相連。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，R22是-(CH2)v-、-(CH2)u-C(O)-(CH2)v-、-(CH2)u-C(O)-O-(CH2)v-、-(CH2)u-C(S)-NRb-(CH2)v-、-(CH2)u-C(O)-NRb-(CH2)v-、-(CH2)u-NRb-(CH2)v-、-(CH2)u-O-(CH2)v-、-(CH2)u-S(O)0-2-(CH2)v-、-(CH2)u-S(O)0-2-NRb-(CH2)v-或-(CH2)u-P(O)(ORb)-O-(CH2)v-，其中u和v獨(dú)立地為0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，R21和R23獨(dú)立地為-(CH2)s-、-(CH2)r-C(O)-(CH2)s-、-(CH2)r-C(O)-O-(CH2)v-、-(CH2)r-C(S)-NRb-(CH2)s-、-(CH2)r-C(O)-NRb-(CH2)s-、-(CH2)r-NRb-(CH2)s-、-(CH2)r-O-(CH2)s-、-(CH2)r-S(O)0-2-(CH2)s-、-(CH2)r-S(O)0-2-NRb-(CH2)s-或-(CH2)r-P(O)(ORb)-O-(CH2)s-，其中r、s和v獨(dú)立地為0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20。
在式I的某些實(shí)施方式中，如果t＞1或如果X是-R22-[CH2-CH2-O]t-R23-、-R22-環(huán)烷基-R23、-R22-芳基-R23-或-R22-雜環(huán)基-R23-，則Y存在。
根據(jù)式I的示例性化合物如圖1和圖3中所示。
如式II所示，本發(fā)明的另一個(gè)方面是一種GA靶向化合物，所述GA靶向化合物包含經(jīng)介入接頭L’與抗體結(jié)合位點(diǎn)共價(jià)連接的GA靶向劑。當(dāng)在本文中使用該術(shù)語(yǔ)時(shí)，GA靶向化合物的抗體部分可以包括整個(gè)(全長(zhǎng))抗體、獨(dú)特抗體片段或抗體的任何其它形式。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述抗體是包含來(lái)自人IgG、IgA、IgM、IgD或IgE抗體的恒定區(qū)的小鼠醛縮酶抗體的人源化形式。在另一個(gè)實(shí)施方式中，所述抗體是包含來(lái)自小鼠醛縮酶抗體的可變區(qū)和來(lái)自人IgG、IgA、IgM、IgD或IgE抗體的恒定區(qū)的嵌合抗體。在再一個(gè)實(shí)施方式中，所述抗體是包含來(lái)自自然或天然人IgG、IgA、IgM、IgD或IgE抗體的多肽序列的小鼠醛縮酶抗體的完全人類形式。
抗體-L’-[GA靶向劑](II) 其中 [GA靶向劑]是GLP-1R的肽激動(dòng)劑。在某些實(shí)施方式中，[GA靶向劑]選自如本文所述的GA靶向化合物，包括但不限于 R1-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK-R2(SEQ ID NO3) R1-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO172) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK-R2(SEQ ID NO4) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO173) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO5) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGG-R2(SEQ ID NO6) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-R2(SEQ ID NO7) R1-HAibEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEFLKN-R2(SEQ ID NO8) R1-HAibEGTFTSDLSKQLEEEAVRLAIEFLKN-R2(SEQ ID NO9) R1-HAibEGTFTSDLSKQLEEEAVRLAIEFLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO10) R1-HAibEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEFLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO11) R1-HAibEGTFTSDLSK(Ac)QMEEEAVRLFIEWLK(Ac)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO12) R1-HAibEGTFTSDLSK(苯甲?；?QMEEEAVRLFIEWLK(苯甲酰基)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO13) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPKS-R2(SEQ ID NO14) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPK(SH)S-R2(SEQ ID NO99) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAKPPS-R2(SEQ ID NO15) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAK(SH)PPS-R2(SEQ ID NO100) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSKAPPPS-R2(SEQ ID NO16) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSK(SH)APPPS-R2(SEQ ID NO101) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPKSGAPPPS-R2(SEQ ID NO17) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPK(SH)SGAPPPS-R2(SEQ ID NO168) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKKGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO18) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKK(SH)GGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO102) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWKKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO19) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK(SH)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO170) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWK(SH)KNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO103) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIKWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO20) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIK(SH)WLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO104) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFKEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO21) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFK(SH)EWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO105) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO22) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(SH)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO106) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVKLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO23) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVK(SH)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO107) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAKRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO24) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAK(SH)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO108) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEKAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO25) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEK(SH)AVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO109) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEKEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO26) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEK(SH)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO110) R1-HAibEGTFTSDLSKQKEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO27) R1-HAibEGTFTSDLSKQK(SH)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO111) R1-HAibEGTFTSDLSKKMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO28) R1-HAibEGTFTSDLSKK(SH)MEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO112) R1-HAibEGTFTSDLKKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO29) R1-HAibEGTFTSDLSK(SH)QMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO169) R1-HAibEGTFTSDLK(SH)KQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO113) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGK-R2(SEQ ID NO30) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGK(SH)-R2(SEQ ID NO114) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLKNGGPSS-R2(SEQ ID NO31) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLK(SH)NGGPSS-R2(SEQ ID NO115) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-R2(SEQ ID NO32) R1-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK-R2(SEQ ID NO33) R1-HGEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK-R2(SEQ ID NO34) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO35) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKAibRK-R2(SEQ ID NO36) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK-R2(SEQ ID NO37) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK(SH)-R2(SEQ ID NO38) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAK(SH)EFIAWLVKGR-R2(SEQ ID NO39) R1-HAibEGTFTSDVSSYGEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO40) R1-HAibEGTFTSDVSSYCEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO41) R1-HAibEGTFTSDVSSYFEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO42) R1-HAibEGTFTSDVSSYYEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO43) R1-HAibEGTFTSDVSSYWEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO44) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO45) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEDQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO46) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEKQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO47) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAVKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO48) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAIKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO49) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQALKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO50) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAREFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO51) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAOrnEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO52) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAFLVKAibR-R2(SEQ ID NO53) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO54) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVRAibR-R2(SEQ ID NO55) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVOrnAibR-R2(SEQ ID NO56) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO57) R1-HAibEGTFTSDVSSYFEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO58) R1-HAibEGTFTSDVSSYYEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO59) R1-HAibEGTFTSDVSSYWEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO60) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIRAibR-R2(SEQ ID NO61) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVREFIAWLIRAibR-R2(SEQ ID NO62) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibRPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO63) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVK(SH)EFIAWLIKAibRPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO171) R1-HAibEGTFTSDKSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO64) R1-HAibEGTFTSDK(SH)SSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO116) R1-HAibEGTFTSDVSKYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO65) R1-HAibEGTFTSDVSK(SH)YLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO117) R1-HAibEGTFTSDVSSYKEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO66) R1-HAibEGTFTSDVSSYK(SH)EEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO118) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEKQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO67) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEK(SH)QAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO119) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQKVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO68) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQK(SH)VKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO120) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEKIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO69) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVK(SH)EKIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO121) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIKWLIKAibR-R2(SEQ ID NO70) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIK(SH)WLIKAibR-R2(SEQ ID NO122) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWKIKAibR-R2(SEQ ID NO71) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWK(SH)IKAibR-R2(SEQ ID NO123) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibRPSSGAPPPSK-R2(SEQ ID NO72) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibRPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO124) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIK(Ac)AibR-R2(SEQ ID NO73) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIK(苯甲?；?AibR-R2(SEQ ID NO74) R1-H(反-3-己酰基)AibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO75) R1-H(3-氨基苯基乙?；?AibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO76) 其中 R1缺失或者是CH3、C(O)CH3、C(O)CH2CH3、C(O)CH2CH2CH3或C(O)CH(CH3)CH3；和 R2是OH、NH2、NH(CH3)、NHCH2CH3、NHCH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH3、NHCH2CH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH2CH3、NHC6H5、NHCH2CH2OCH3、NHOCH3、NHOCH2CH3、羧基保護(hù)基、脂類脂肪酸基或糖， 且可以從這些肽形成任何C端截短物和類似物；且 L’是具有式-X-Y-Z’的接頭部分，其中 X是與構(gòu)成GA靶向劑的殘基之一相連的生物相容性聚合物或嵌段共聚物； Y是任選地存在的包括至少一個(gè)環(huán)結(jié)構(gòu)的識(shí)別基團(tuán)；和 Z是與抗體結(jié)合位點(diǎn)的側(cè)鏈共價(jià)連接的基團(tuán)； 及其可藥用鹽、立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、溶劑合物和前體藥物。
在式II的化合物的某些實(shí)施方式中，X是 -R22-P-R23-或-R22-P-R21-P’-R23- 其中 P和P’獨(dú)立地選自聚氧化烯氧化物(諸如聚氧化乙烯、聚乙基噁唑啉、聚-N-乙烯基吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚丙烯酸羥乙酯、聚甲基丙烯酸羥乙酯和聚丙烯酰胺)、在聚合物主鏈或聚合物側(cè)鏈上帶有氨基的聚胺(諸如聚賴氨酸、聚鳥(niǎo)氨酸、聚精氨酸和聚組氨酸)、非肽聚胺(諸如聚氨基苯乙烯、聚氨基丙烯酸酯、聚(N-甲基氨基丙烯酸酯)、聚(N-乙基氨基丙烯酸酯)、聚(N，N-二甲基氨基丙烯酸酯)、聚(N，N-二乙基氨基丙烯酸酯)、聚(氨基甲基丙烯酸酯)、聚(N-甲基氨基甲基丙烯酸酯)、聚(N-乙基氨基甲基丙烯酸酯)、聚(N，N-二甲基氨基甲基丙烯酸酯)、聚(N，N-二乙基氨基甲基丙烯酸酯)、聚乙烯亞胺)、季胺聚合物(諸如聚(氯化N，N，N-三甲基氨基丙烯酸酯)、聚(氯化甲基丙烯酰胺基丙基三甲基銨))、蛋白多糖(諸如硫酸軟骨素-A(4-硫酸鹽)、硫酸軟骨素-C(6-硫酸鹽)和硫酸軟骨素-B)、多肽(諸如聚絲氨酸、聚蘇氨酸、聚谷氨酰胺)、天然或合成多糖(諸如殼聚糖、羥乙基纖維素)和脂類； R21、R22和R23各自獨(dú)立地為共價(jià)鍵、-O-、-S-、-NRb-、酰胺、取代或未取代的直鏈或支鏈C1-50亞烷基或者取代或未取代的直鏈或支鏈C1-50雜亞烷基； Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基；且 選擇R21、R22和R23從而使得X的主鏈長(zhǎng)度保持為約200個(gè)原子或200個(gè)原子以下。
在式II的化合物的某些實(shí)施方式中，X與[GA靶向劑]中的氨基酸殘基相連，且是任選取代的-R22-[CH2-CH2-O]t-R23-、-R22-環(huán)烷基-R23-、-R22-芳基-R23-或-R22-雜環(huán)基-R23-，其中t是0～50。
在式II的化合物的某些實(shí)施方式中，R22是-(CH2)v-、-(CH2)u-C(O)-(CH2)v-、-(CH2)u-C(O)-O-(CH2)v-、-(CH2)u-C(S)-NRb-(CH2)v-、-(CH2)u-C(O)-NRb-(CH2)v-、-(CH2)u-NRb-(CH2)v-、-(CH2)u-O-(CH2)v-、-(CH2)u-S(O)0-2-(CH2)v-、-(CH2)u-S(O)0-2-NRb-(CH2)v-或-(CH2)u-P(O)(ORb)-O-(CH2)v-，其中u和v獨(dú)立地為0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20。
在式II的化合物的某些實(shí)施方式中，R21和R23獨(dú)立地為-(CH2)s-、-(CH2)r-C(O)-(CH2)s-、-(CH2)r-C(O)-O-(CH2)v-、-(CH2)r-C(S)-NRb-(CH2)s-、-(CH2)r-C(O)-NRb-(CH2)s-、-(CH2)r-NRb-(CH2)s-、-(CH2)r-O-(CH2)s-、-(CH2)r-S(O)0-2-(CH2)s-、-(CH2)r-S(O)0-2-NRb-(CH2)s-或-(CH2)r-P(O)(ORb)-O-(CH2)s-，其中r、s和v獨(dú)立地為0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20。
在式II的化合物的某些實(shí)施方式中，[GA靶向劑]是選自下列化合物的肽 R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK(L’)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO156) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(L’)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO157) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVK(L’)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO158) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAK(L’)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO159) R1-HAibEGTFTSDLSKQK(L’)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO160) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibRPSSGAPPPSK(L’)-R2(SEQ ID NO161) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVK(L’)EFIAWLIKAibRPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO162) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAK(L’)EFIAWLVKGR-R2(SEQ ID NO163) 其中 R1缺失或者是CH3、C(O)CH3、C(O)CH2CH3、C(O)CH2CH2CH3或C(O)CH(CH3)CH3；和 R2是OH、NH2、NH(CH3)、NHCH2CH3、NHCH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH3、NHCH2CH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH2CH3、NHC6H5、NHCH2CH2OCH3、NHOCH3、NHOCH2CH3、羧基保護(hù)基、脂類脂肪酸基或糖，且 K(L’)是與接頭L’共價(jià)連接的賴氨酸殘基。在某些實(shí)施方式中，K(L’)是
其中u是1、2或3； -L’-是具有式-X-Y-Z-的接頭部分，其中 X是
其中v是0、1、2或3；t是1、2或3；r是1或2；s是0、1或2； Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基； Y是包含至少一個(gè)環(huán)結(jié)構(gòu)的識(shí)別基團(tuán)；和 Z’是包含與抗體結(jié)合位點(diǎn)中的氨基酸側(cè)鏈相連的共價(jià)連接的附著部分， 及其可藥用鹽、立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、溶劑合物和前體藥物。
在某些實(shí)施方式中，Y具有任選取代的結(jié)構(gòu)
其中a、b、c、d和e各自獨(dú)立地為碳或氮；f是碳、氮、氧或硫；Y獨(dú)立地與X和Z在足夠價(jià)態(tài)的任何兩個(gè)環(huán)位置處相連；且a、b、c、d、e和f中不超過(guò)四個(gè)同時(shí)為氮。
在某些實(shí)施方式中，Z’具有結(jié)構(gòu)
其中q＝0、1、2、3、4或5且-N-抗體是指與帶有氨基的抗體結(jié)合位點(diǎn)的氨基酸側(cè)鏈的共價(jià)連接。在其它方面，q＝1、2或3。
如式III所示，本發(fā)明的另一個(gè)方面是一種GA靶向化合物，其中可以相同或不同的兩個(gè)GA靶向劑與抗體結(jié)合位點(diǎn)共價(jià)相連。當(dāng)在本文中使用該術(shù)語(yǔ)時(shí)，GA靶向化合物的抗體部分可以包括整個(gè)(全長(zhǎng))抗體、獨(dú)特抗體片段或抗體的任何其它形式。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述抗體是包含來(lái)自人IgG、IgA、IgM、IgD或IgE抗體的恒定區(qū)的小鼠醛縮酶抗體的人源化形式。在另一個(gè)實(shí)施方式中，所述抗體是包含來(lái)自小鼠醛縮酶抗體的可變區(qū)和來(lái)自人IgG、IgA、IgM、IgD或IgE抗體的恒定區(qū)的嵌合抗體。在再一個(gè)實(shí)施方式中，所述抗體是包含來(lái)自自然或天然人IgG、IgA、IgM、IgD或IgE抗體的多肽序列的小鼠醛縮酶抗體的完全人類形式 抗體[-L’-[GA靶向劑]]2(III) 其中[GA靶向劑]、抗體和L’如式II所定義。
式I的示例性化合物如圖2和圖4所示。
在某些實(shí)施方式中，提供了用于治療受試對(duì)象的糖尿病或糖尿病相關(guān)病癥的方法，所述方法包括對(duì)所述受試對(duì)象施用治療有效量的GA靶向化合物或其藥物衍生物。
在某些實(shí)施方式中，提供了用于增加受試對(duì)象的胰島素分泌的方法，所述方法包括對(duì)所述受試對(duì)象施用治療有效量的GA靶向化合物或其藥物衍生物。
在某些實(shí)施方式中，提供了用于降低受試對(duì)象的血糖水平的方法，所述方法包括對(duì)所述受試對(duì)象施用治療有效量的GA靶向化合物或其藥物衍生物。
在某些實(shí)施方式中，提供了用于生成藥劑的GA靶向化合物及其藥物衍生物的使用，所述藥劑用于治療糖尿病或糖尿病相關(guān)病癥，或用于增加胰島素分泌或降低血糖水平。
本發(fā)明的某些GA靶向化合物包括 R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO22) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVKLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO23) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAKRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO24) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEKEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO26) R1-HAibEGTFTSDLSKQKEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO27) 本發(fā)明的某些GA靶向化合物包括 R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(SH)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO106) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVK(SH)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO107) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAK(SH)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO108) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEK(SH)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO110) R1-HAibEGTFTSDLSKQK(SH)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO111) 本發(fā)明的某些GA靶向化合物包括 R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(L)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO149) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVK(L)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO150) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAK(L)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO151) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEK(L)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO164 R1-HAibEGTFTSDLSKQK(L)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO152) 其中K(L)是與接頭L相連的賴氨酸殘基，其中L能與抗體結(jié)合位點(diǎn)的氨基酸側(cè)鏈形成共價(jià)鍵。
本發(fā)明的某些化合物包括 R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(L’)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO157) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVK(L’)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO158) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAK(L’)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO159) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEK(L’)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO165) R1-HAibEGTFTSDLSKQK(L’)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO160) 其中K(L’)是與接頭L’相連的賴氨酸殘基，其中L’能與抗體結(jié)合位點(diǎn)的氨基酸側(cè)鏈形成共價(jià)鍵。在某些實(shí)施方式中，K(L’)是
其中u是1、2或3； -L-是具有式-X-Y-Z-或式-X-Y-Z’其中之一的接頭，其中 X是
其中v是0、1、2或3；t是1、2或3，r是1或2；s是0、1或2； Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基C0-6烷基； Y是任選地存在的包含至少一個(gè)環(huán)結(jié)構(gòu)的識(shí)別基團(tuán)；且 Z是能與抗體結(jié)合位點(diǎn)的氨基酸側(cè)鏈形成共價(jià)鍵的反應(yīng)性基團(tuán)。



圖1a和圖1b分別顯示了根據(jù)式I的一個(gè)實(shí)施方式和根據(jù)式II或式III的一個(gè)實(shí)施方式。
圖2a和圖2b分別顯示了根據(jù)式I的一個(gè)實(shí)施方式和根據(jù)式II或式III的一個(gè)實(shí)施方式。
圖3顯示了根據(jù)式I的一個(gè)實(shí)施方式。
圖4顯示了根據(jù)式II或式III的一個(gè)實(shí)施方式。
圖5A和圖5B顯示了本發(fā)明的靶向劑-接頭偶聯(lián)物的固相合成。
圖6顯示了m38c2(SEQ ID NO77和SEQ ID NO78)、h38c2(SEQID NO79和SEQ ID NO80)以及人類種系DPK-9(SEQ ID NO81)、DP-47(SEQ ID NO82)、JK4(SEQ ID NO83)和JH4(SEQ ID NO84)的可變域的氨基酸序列比對(duì)?？蚣軈^(qū)(FR)和互補(bǔ)決定區(qū)如Kabat等所定義。星號(hào)標(biāo)出了m38c2與h38c2之間或h38c2與人類種系之間的區(qū)別。
圖7顯示了可以充當(dāng)接頭反應(yīng)性基團(tuán)的各種結(jié)構(gòu)。結(jié)構(gòu)A中的X可以是N、C或任何其它雜原子。結(jié)構(gòu)A～C中R′1、R′2、R3和R4的表示包含例如C、H、N、O、P、S、鹵素(F、Cl、Br、I)或其鹽的取代基。這些取代基還可以包含諸如烷基、烯基、炔基、氧代烷基、氧代烯基、氧代炔基、氨基烷基、氨基烯基、氨基炔基、硫代烷基、硫代烯基、硫代炔基、磷酸烷基、磷酸烯基或磷酸炔基等基團(tuán)。R′2和R3可以為環(huán)結(jié)構(gòu)的一部分，如結(jié)構(gòu)B和結(jié)構(gòu)C所示例。結(jié)構(gòu)A～C與抗體結(jié)合位點(diǎn)的表面可接近的反應(yīng)性親核基團(tuán)(例如，賴氨酸或半胱氨酸側(cè)鏈)形成了可逆共價(jià)鍵。例如，如果X是N且如果R′1和R3形成環(huán)結(jié)構(gòu)的一部分，則結(jié)構(gòu)A可以與反應(yīng)性親核試劑形成可逆共價(jià)鍵。結(jié)構(gòu)D～G可以與抗體結(jié)合位點(diǎn)中的反應(yīng)性親核基團(tuán)形成不可逆共價(jià)鍵。在這些結(jié)構(gòu)中，R″1和R″2表示C、O、N、鹵素或諸如甲磺?；蚣妆交酋；入x去基團(tuán)。
圖8顯示了適用于用抗體結(jié)合位點(diǎn)的反應(yīng)性氨基酸側(cè)鏈的反應(yīng)修飾并因而可以充當(dāng)接頭反應(yīng)性基團(tuán)的各種親電試劑。圖例(A)?；?β-內(nèi)酰胺；(B)簡(jiǎn)單二酮；(C)琥珀酰亞胺活性酯；(D)馬來(lái)酰亞胺；(E)帶有接頭的鹵代乙酰胺；(F)鹵代酮；(G)環(huán)己基二酮；和(H)醛?；w線表示與接頭或靶向劑剩余部分的附著點(diǎn)。X指鹵素。
圖9顯示了抗體結(jié)合位點(diǎn)的親核(“nu”)側(cè)鏈與圖7的化合物A～G的加成。
圖10顯示了抗體結(jié)合位點(diǎn)的親核側(cè)鏈與圖8的化合物A～H的加成。
圖11顯示了如下化合物的合成
圖12顯示了如下化合物的合成
圖13顯示了如下化合物的合成
圖14顯示了如下化合物的合成
圖15顯示了如下化合物的合成
圖16顯示了如下化合物的合成
圖17顯示了如下化合物的合成
圖18顯示了如下化合物的合成
圖19顯示了如下化合物的合成
圖20顯示了如下化合物的合成
圖21顯示了如下化合物的合成
圖22顯示了如下化合物的合成
圖23顯示了如下化合物的合成
圖24顯示了如下化合物的合成
圖25顯示了如下化合物的合成
圖26顯示了如下化合物的合成
圖27顯示了哺乳動(dòng)物表達(dá)載體PIGG-h38c2。所述9kb載體包含由雙向CM啟動(dòng)子構(gòu)建體驅(qū)動(dòng)的重鏈γ1和輕鏈κ表達(dá)盒。
圖28顯示了如下化合物的合成
圖29顯示了20-原子AZD馬來(lái)酰亞胺接頭的合成
圖30顯示了用在GA靶向肽中的側(cè)鏈修飾的賴氨酸的合成。
圖31顯示了包含SEQ ID NO22的GA靶向肽的GA靶向劑-接頭偶聯(lián)物的合成，所述GA靶向肽與圖29所示的20-原子AZD馬來(lái)酰亞胺接頭經(jīng)由該肽中側(cè)鏈修飾的Lys殘基相連。
圖32顯示了包含SEQ ID NO32的GA靶向肽的GA靶向劑-接頭偶聯(lián)物的合成，所述GA靶向肽與圖29所示的20-原子AZD馬來(lái)酰亞胺接頭經(jīng)由該肽中側(cè)鏈修飾的Lys殘基相連。
圖33顯示了人源化38c2 IgG1的一個(gè)實(shí)施方式的輕鏈和重鏈的氨基酸序列。
圖34顯示了包含根據(jù)如下的本發(fā)明的SEQ ID之一的肽的本發(fā)明的化合物的皮下半衰期(SC T1/2)和生物有效性百分比K11SEQ IDNO29、K12SEQ ID NO5、K13SEQ ID NO28、K14SEQ ID NO27、K16SEQ ID NO26、K17SEQ ID NO25、K19SEQ ID NO24、K20SEQ ID NO23、K21SEQ ID NO22、K23SEQ ID NO21、K24SEQ ID NO20、K26SEQ ID NO19、K27SEQ ID NO132、K28SEQ ID NO18、K38SEQ ID NO14、CSEQ ID NO3、C1-30SEQ ID NO30、K21 1-33SEQ ID NO31，所述化合物通過(guò)賴氨酸殘基或K(SH)殘基(在所示位置處，例如，K11是指通過(guò)在第11位的K或K(SH)殘基連接)經(jīng)由圖1～圖4的接頭與h38c2抗體相連。SC T1/2(皮下半衰期)通過(guò)將化合物SC注射到小鼠內(nèi)并通過(guò)ELISA檢測(cè)化合物濃度來(lái)獲得。SC生物有效性表示來(lái)自IV注射的小鼠的化合物曲線下方面積與來(lái)自SC注射的小鼠的相同化合物曲線下方的面積之比。
圖35顯示了葡萄糖耐受測(cè)試(GTT)的結(jié)果。單一0.3mg/kg SC劑量——用于圖35的本發(fā)明的化合物被稱作經(jīng)由圖1～圖4所示的接頭結(jié)構(gòu)與人源化醛縮酶抗體h38c2偶聯(lián)的特異性SEQ ID NO。如上所述以0.3mg/kg SC將化合物給藥(仍然通過(guò)在各自的氨基酸位置的K或K(SH)取代相連)。A來(lái)自48小時(shí)測(cè)試和72小時(shí)測(cè)試的數(shù)據(jù)的合并。B48小時(shí)數(shù)據(jù)。C72小時(shí)數(shù)據(jù)。
圖36A～D每日食物攝取量顯示了對(duì)與圖35所測(cè)試相同的動(dòng)物的體重變化分析的結(jié)果。
圖37A～D與圖35所測(cè)試相同的動(dòng)物的累積體重變化。
圖38a和圖38b分別顯示了根據(jù)式I的一個(gè)實(shí)施方式和根據(jù)式II或式III的一個(gè)實(shí)施方式。
圖39a和圖39b分別顯示了根據(jù)式I的一個(gè)實(shí)施方式和根據(jù)式II或式III的一個(gè)實(shí)施方式。
圖40a和圖40b分別顯示了根據(jù)式I的一個(gè)實(shí)施方式和根據(jù)式II或式III的一個(gè)實(shí)施方式。
圖41a和圖41b分別顯示了根據(jù)式I的一個(gè)實(shí)施方式和根據(jù)式II或式III的一個(gè)實(shí)施方式。
圖42a和圖42b分別顯示了根據(jù)式I的一個(gè)實(shí)施方式和根據(jù)式II或式III的一個(gè)實(shí)施方式。
圖43a和圖43b分別顯示了根據(jù)式I的一個(gè)實(shí)施方式和根據(jù)式II或式III的一個(gè)實(shí)施方式。
圖44a和圖44b分別顯示了根據(jù)式I的一個(gè)實(shí)施方式和根據(jù)式II或式III的一個(gè)實(shí)施方式。

具體實(shí)施例方式 定義 本文所用的下列縮寫(xiě)、術(shù)語(yǔ)和短語(yǔ)定義如下。
氨基酸 單字母縮寫(xiě)三字母縮寫(xiě) 2-氨基異丁酸--Aib2或Aib 丙氨酸 A Ala 精氨酸 R Arg 天冬酰胺N Asn 天冬氨酸D Asp 半胱氨酸C Cys 谷氨酸 E Glu 谷氨酰胺Q Gln 甘氨酸 G Gly 組氨酸 H His 異亮氨酸I Ile 亮氨酸 L Leu 賴氨酸 K Lys 蛋氨酸M Met 正亮氨酸 --Nle 鳥(niǎo)氨酸--Orn 苯丙氨酸 F Phe 脯氨酸P Pro 絲氨酸S Ser 蘇氨酸T Thr 色氨酸W Trp 酪氨酸Y Tyr 纈氨酸V Val 除非另外通過(guò)“D”前綴(例如，D-Ala或N-Me-D-Ile)進(jìn)行標(biāo)明，本文所述的肽中的氨基酸或氨基?；鶜埢摩?碳的立體化學(xué)是天然構(gòu)型或“L”構(gòu)型。Cahn-Ingold-Prelog“R”和“S”標(biāo)示用于指明肽的N端某些酰基取代基的手性中心的立體化學(xué)?！癛，S”標(biāo)示用來(lái)表明兩種對(duì)應(yīng)異構(gòu)形式的外消旋混合物。該命名遵循R.S.Cahn，等，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.，5385-415(1966)中所述。
D-H是指D-組氨酸。
本文所用的2-氨基異丁酸具有如下結(jié)構(gòu)
“多肽”、“肽”和“蛋白”可互換地用于指代氨基酸殘基的聚合物。如本文所用，這些術(shù)語(yǔ)可以應(yīng)用于其中一個(gè)以上氨基酸殘基是對(duì)應(yīng)于天然存在的氨基酸的人造化學(xué)類似物的氨基酸聚合物。這些術(shù)語(yǔ)也應(yīng)用于天然存在的氨基酸聚合物。氨基酸可以為L(zhǎng)型或D型，只要保持了肽的結(jié)合功能即可。肽可以是環(huán)形的，具有肽內(nèi)兩個(gè)非相鄰氨基酸之間的分子內(nèi)鍵，例如，主鏈與主鏈環(huán)化、支鏈與主鏈環(huán)化和支鏈與支鏈環(huán)化。環(huán)肽可以通過(guò)本領(lǐng)域內(nèi)公知的方法來(lái)制備。見(jiàn)例如，美國(guó)專利第6,013,625號(hào)；S.Cheng等，J Med.Chem.371-8(1994)。
所有肽序列都根據(jù)普遍接受的公約來(lái)書(shū)寫(xiě)，從而α-N端氨基酸殘基在左側(cè)而α-C端氨基酸殘基在右側(cè)。如本文所用，術(shù)語(yǔ)“N端”是指肽中的氨基酸的自由α-氨基，而術(shù)語(yǔ)“C端”是指肽中的氨基酸的自由羧酸端。以一個(gè)基團(tuán)進(jìn)行N-封端的肽是指在N端氨基酸殘基的α-氨基氮上帶有基團(tuán)的肽。以一個(gè)基團(tuán)進(jìn)行N-封端的氨基酸是指在α-氨基氮上帶有基團(tuán)的氨基酸。
通常，“取代的”是指如下定義的基團(tuán)，其中所含的一個(gè)或多個(gè)與氫原子的成鍵被與非氫或非碳原子的成鍵替代，所述非氫或非碳原子諸如但不限于諸如F、Cl、Br和I等鹵素原子；諸如羥基、烷氧基、芳氧基和酯基等基團(tuán)中的氧原子；諸如巰基、烷硫基、芳硫基、砜基、磺?；蛠嗧炕然鶊F(tuán)中的硫原子；諸如胺基、酰胺基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、烷基芳基氨基、二芳基氨基、N-氧基、酰亞胺基和烯胺基等基團(tuán)中的氮原子；諸如三烷基甲硅烷基、二烷基芳基甲硅烷基、烷基二芳基甲硅烷基和三芳基甲硅烷基等基團(tuán)中的硅原子；以及各種其它基團(tuán)中的其它雜原子。取代烷基、取代環(huán)烷基和其它被取代基團(tuán)還包括其中一個(gè)或多個(gè)與碳原子或氫原子的成鍵被與雜原子的成鍵替代的基團(tuán)，所述雜原子諸如羰基、羧基和酯基中的氧或諸如亞胺基、肟基、肼基和腈基等基團(tuán)中的氮。如本文所用，“任選取代的”基團(tuán)可以被取代或未被取代。因此，例如“任選取代的烷基”既指取代烷基亦指未取代烷基。
短語(yǔ)“未取代烷基”是指不含雜原子的烷基。因此，該短語(yǔ)包括直鏈烷基，諸如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基等等。該短語(yǔ)還包括直鏈烷基的支鏈異構(gòu)體，包括但不限于下列實(shí)例-CH(CH3)2、-CH(CH3)(CH2CH3)、-CH(CH2CH3)2、-C(CH3)3、-C(CH2CH3)3、-CH2CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)(CH2CH3)、-CH2CH(CH2CH3)2、-CH2C(CH3)3、-CH2C(CH2CH3)3、-CH(CH3)CH(CH3)(CH2CH3)、-CH2CH2CH(CH3)2、-CH2CH2CH(CH3)(CH2CH3)、-CH2CH2CH(CH2CH3)2、-CH2CH2C(CH3)3、-CH2CH2C(CH2CH3)3、-CH(CH3)CH2CH(CH3)2、-CH(CH3)CH(CH3)CH(CH3)2、-CH(CH2CH3)CH(CH3)CH(CH3)(CH2CH3)等。該短語(yǔ)不包括環(huán)烷基。因此，短語(yǔ)未取代烷基包括伯烷基、仲烷基和叔烷基。未取代烷基可以與母體化合物中的一個(gè)或多個(gè)碳原子、氧原子、氮原子和/或硫原子鍵合?？赡艿奈慈〈榛ň哂?～20個(gè)碳原子的直鏈烷基和支鏈烷基。替代性地，這些未取代烷基具有1～10個(gè)碳原子或者是具有1個(gè)～約6個(gè)碳原子的低級(jí)烷基。其它未取代烷基包括具有1～3個(gè)碳原子的直鏈烷基和支鏈烷基并且包括甲基、乙基、丙基和-CH(CH3)2。
短語(yǔ)“取代烷基”是指其中一個(gè)或多個(gè)與碳或氫的成鍵由與非氫或非碳原子的成鍵替代的未取代烷基，所述非氫或非碳原子諸如但不限于諸如F、Cl、Br和I等鹵化物中的鹵素原子；諸如羥基、烷氧基、芳氧基和酯基等基團(tuán)中的氧原子；諸如巰基、烷硫基、芳硫基、砜基、磺?；蛠嗧炕然鶊F(tuán)中的硫原子；諸如胺基、酰胺基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、烷基芳基氨基、二芳基氨基、N-氧基、酰亞胺基和烯胺基等基團(tuán)中的氮原子；諸如三烷基甲硅烷基、二烷基芳基甲硅烷基、烷基二芳基甲硅烷基和三芳基甲硅烷基等基團(tuán)中的硅原子；以及各種其它基團(tuán)中的其它雜原子。取代烷基還包括其中一個(gè)或多個(gè)與碳原子或氫原子的成鍵被與雜原子的成鍵替代的基團(tuán)，所述雜原子諸如羰基、羧基和酯基中的氧或諸如亞胺基、肟基、肼基和腈基等基團(tuán)中的氮。取代烷基此外還包括其中一個(gè)或多個(gè)與碳原子或氫原子的成鍵被一個(gè)或多個(gè)與氟原子的成鍵替代的基團(tuán)。取代烷基的一個(gè)實(shí)例是三氟甲基和其它含三氟甲基的烷基。其它烷基包括其中一個(gè)或多個(gè)與碳原子或氫原子的成鍵被與氧原子的成鍵替代從而該取代烷基含有羥基、烷氧基、芳氧基或雜環(huán)氧基的基團(tuán)。還有其它烷基包括具有胺基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、(烷基)(芳基)氨基、二芳基氨基、雜環(huán)基氨基、(烷基)(雜環(huán)基)氨基、(芳基)(雜環(huán)基)氨基或二雜環(huán)基氨基的烷基。
短語(yǔ)“未取代亞烷基”是指二價(jià)的如本文所定義的未取代烷基。因此，亞甲基、亞乙基和亞丙基各自為未取代亞烷基的實(shí)例。短語(yǔ)“取代亞烷基”是指二價(jià)的如本文所定義的取代烷基。取代或未取代的低級(jí)亞烷基具有1個(gè)～約6個(gè)碳原子。
短語(yǔ)“未取代環(huán)烷基”是指諸如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基和環(huán)辛基等環(huán)烷基，以及以本文所定義的直鏈和支鏈烷基取代的這類環(huán)。該短語(yǔ)還包括諸如但不限于金剛烷基降冰片烯基、二環(huán)[2.2.2]辛基等多環(huán)烷基，以及以本文所定義的直鏈和支鏈烷基取代的這類環(huán)。因此，該短語(yǔ)將此外還包括甲基環(huán)己基。該短語(yǔ)不包括含雜原子的環(huán)烷基。未取代環(huán)烷基可以與母體化合物中的一個(gè)或多個(gè)碳原子、氧原子、氮原子和/或硫原子鍵合。在某些實(shí)施方式中，未取代環(huán)烷基具有3～20個(gè)碳原子。在其它實(shí)施方式中，這類未取代環(huán)烷基具有3～8個(gè)碳原子，而在其它實(shí)施方式中這類基團(tuán)具有3～7個(gè)碳原子。
短語(yǔ)“取代環(huán)烷基”相對(duì)于未取代環(huán)烷基具有與“取代烷基”相對(duì)于未取代烷基相同的意義。因此，該短語(yǔ)包括但不限于氧代環(huán)己基、氯代環(huán)己基、羥基環(huán)己基和氯甲基環(huán)己基。
短語(yǔ)“未取代芳基”是指不含雜原子的任何芳基。因此，該短語(yǔ)包括但不限于諸如苯基、聯(lián)苯基、蒽基和萘基等基團(tuán)。盡管短語(yǔ)“未取代芳基”包括含有諸如萘等稠環(huán)的基團(tuán)，但它不包括具有諸如烷基或鹵代基等與環(huán)的成員之一鍵合的其它基團(tuán)的芳基，因?yàn)楸疚闹袑⒅T如甲苯基等芳基認(rèn)為是如下所述的取代芳基。通常，未取代芳基可以是具有6個(gè)～約10個(gè)碳原子的低級(jí)芳基。一個(gè)未取代芳基是苯基。未取代芳基可以與母體化合物中的一個(gè)或多個(gè)碳原子、氧原子、氮原子和/或硫原子鍵合。
短語(yǔ)“取代芳基”相對(duì)于未取代芳基具有與“取代烷基”相對(duì)于未取代烷基相同的意義。然而，取代芳基還包括其中一個(gè)芳香碳與本文所述的一個(gè)非碳或非氫原子鍵合的芳基，還包括其中芳基的一個(gè)或多個(gè)芳香碳與本文所定義的取代和/或未取代的烷基、烯基或炔基鍵合的芳基。這包括了其中芳基的兩個(gè)碳原子與烷基、烯基或炔基的兩個(gè)原子鍵合以確定稠環(huán)體系(例如，二氫萘基或四氫萘基)的鍵合設(shè)置。因此，短語(yǔ)“取代芳基”包括但不限于甲苯基和羥基苯基等等。
短語(yǔ)“未取代烯基”是指諸如相關(guān)于本文所定義的未取代烷基所述的那些直鏈和支鏈及環(huán)狀基團(tuán)，但其中至少存在一個(gè)在兩個(gè)碳原子之間的雙鍵。實(shí)例包括但不限于乙烯基、-CH＝C(H)(CH3)、-CH＝C(CH3)2、-C(CH3)＝C(H)2、-C(CH3)＝C(H)(CH3)、-C(CH2CH3)＝CH2、環(huán)己烯基、環(huán)戊烯基、環(huán)己二烯基、丁二烯基、戊二烯基和己二烯基等等。低級(jí)未取代烯基具有1個(gè)～約6個(gè)碳原子。
短語(yǔ)“取代烯基”相對(duì)于未取代烯基具有與“取代烷基”相對(duì)于未取代烷基相同的意義。取代烯基包括其中與另一個(gè)碳原子成雙鍵的碳與非碳或非氫原子鍵合的烯基，和其中一個(gè)非碳或非氫原子與未參與和另一個(gè)碳的雙鍵的碳原子鍵合的烯基。例如，-CH＝CH-OCH3和-CH＝CH-CH2-OH都是取代烯基。諸如-CH＝CH-C(O)-CH3等其中羰基取代了CH2基團(tuán)的氧代烯基也是取代烯基。
短語(yǔ)“未取代亞烯基”是指二價(jià)的如本文所定義的未取代烯基。因此，-CH＝CH-是未取代亞烯基的一個(gè)實(shí)例。短語(yǔ)“取代亞烯基”是指二價(jià)的如本文所定義的取代烯基。
短語(yǔ)“未取代炔基”是指諸如相關(guān)于本文所定義的未取代烷基所述的那些直鏈和支鏈及環(huán)狀基團(tuán)，但其中至少存在一個(gè)在兩個(gè)碳原子之間的三鍵。實(shí)例包括但不限于-C≡C(H)、-C≡C(CH3)、-C≡C(CH2CH3)、-C(H2)C≡C(H)、-C(H)2C≡C(CH3)和-C(H)2C≡C(CH2CH3)等等。未取代的低級(jí)炔基具有1個(gè)～約6個(gè)碳。
短語(yǔ)“取代炔基”相對(duì)于未取代炔基具有與“取代烷基”相對(duì)于未取代烷基相同的意義。取代炔基包括其中與另一個(gè)碳原子成三鍵的碳與非碳或非氫原子鍵合的炔基，和其中非碳或非氫原子與未參與和另一個(gè)碳的三鍵的碳原子鍵合的炔基。實(shí)例包括但不限于其中羰基取代了CH2基團(tuán)的氧代炔基，諸如-C(O)-CH≡CH-CH3和-C(O)-CH2-CH≡CH等等。
短語(yǔ)“未取代亞炔基”是指二價(jià)的如本文所定義的未取代炔基。因此，-C≡C-是未取代亞炔基的一個(gè)實(shí)例。短語(yǔ)“取代亞炔基”是指二價(jià)的如本文所定義的取代炔基。
短語(yǔ)“未取代芳烷基”是指如本文所定義的未取代烷基，其中該未取代烷基的氫鍵或碳鍵由與本文所定義的芳基的成鍵所替代。例如，甲基(-CH3)是未取代烷基。如果甲基的氫原子被與苯基的成鍵所替代，諸如如果甲基的碳與苯的碳鍵合，則該化合物是未取代芳烷基(即，芐基)。因此，該短語(yǔ)包括但不限于諸如芐基、二苯基甲基和1-苯基乙基(-CH(C6H5)(CH3))等基團(tuán)。
短語(yǔ)“取代芳烷基”相對(duì)于未取代芳烷基具有與“取代烷基”相對(duì)于未取代烷基相同的意義。然而，取代芳烷基還包括其中該基團(tuán)的烷基部分的碳鍵或氫鍵被與非碳或非氫原子的成鍵所替代的基團(tuán)。取代芳烷基的實(shí)例包括但不限于-CH2C(＝O)(C6H5)和-CH2(2-甲基苯基)等等。
短語(yǔ)“未取代芳烯基”是指如本文所定義的未取代烯基，其中該未取代烯基的氫鍵或碳鍵被與本文所定義的芳基的成鍵所替代。例如，乙烯基是未取代烯基。如果乙烯基的氫原子被與苯基的成鍵所替代，諸如如果乙烯基的碳與苯的碳鍵合，則該化合物是未取代芳烯基(即，苯乙烯基)。因此，該短語(yǔ)包括但不限于諸如苯乙烯基、二苯基乙烯基和1-苯基乙烯基(-C(C6H5)(CH2))等基團(tuán)。
短語(yǔ)“取代芳烯基”相對(duì)于未取代芳烯基具有與“取代烷基”相對(duì)于未取代烷基相同的意義。然而，取代芳烯基還包括其中該基團(tuán)的烯基部分的碳鍵或氫鍵被與非碳或非氫原子的成鍵替代的基團(tuán)。取代芳烯基的實(shí)例包括但不限于-CH＝C(Cl)(C6H5)和-CH＝CH(2-甲基苯基)等等。
短語(yǔ)“未取代芳炔基”是指如本文所定義的未取代炔基，其中該未取代炔基的氫鍵或碳鍵被與如本文所定義的芳基的成鍵所替代。例如，乙炔基是未取代炔基。如果乙炔基的氫原子被與苯基的成鍵所替代，諸如如果乙炔基的碳與苯的碳鍵合，則該化合物是未取代芳炔基。因此，該短語(yǔ)包括但不限于諸如-C≡C-苯基和-CH2-C≡C-苯基等基團(tuán)。
短語(yǔ)“取代芳炔基”相對(duì)于未取代芳炔基具有與“取代烷基”相對(duì)于未取代烷基相同的意義。然而，取代芳烯基還包括其中該基團(tuán)的炔基部分的碳鍵或氫鍵被與非碳或非氫原子的成鍵替代的基團(tuán)。取代芳炔基的實(shí)例包括但不限于-C≡C-C(Br)(C6H5)和-C≡C(2-甲基苯基)等等。
短語(yǔ)“未取代雜烷基”是指如本文所定義的未取代烷基，其中碳鏈被選自N、O和S的一個(gè)或多個(gè)雜原子中斷。含N的未取代雜烷基可以在碳鏈中帶有NH或N(未取代烷基)。因此，未取代雜烷基包括烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基烷氧基、硫醚基、烷基氨基烷基、氨基烷氧基和其它這類基團(tuán)。通常，未取代雜烷基含有1～5個(gè)雜原子，特別是1～3個(gè)雜原子。在某些實(shí)施方式中，未取代雜烷基包括例如，諸如乙氧基乙氧基乙氧基等烷氧基烷氧基烷氧基。
短語(yǔ)“取代雜烷基”相對(duì)于未取代雜烷基具有與“取代烷基”相對(duì)于未取代烷基相同的意義。
短語(yǔ)“未取代雜亞烷基”是指二價(jià)的如本文所定義的未取代雜烷基。因此，-CH2-O-CH2-和-CH2-NH-CH2CH2-都是未取代雜亞烷基的實(shí)例。短語(yǔ)“取代雜亞烷基”是指二價(jià)的如本文所定義的取代雜烷基。
短語(yǔ)“未取代雜烯基”是指如本文所定義的未取代烯基，其中碳鏈被選自N、O和S的一個(gè)或多個(gè)雜原子中斷。含N的未取代雜烯基可以在碳鏈中帶有NH或N(未取代烷基或烯基)。短語(yǔ)“取代雜烯基”相對(duì)于未取代雜烯基具有與“取代雜烷基”相對(duì)于未取代雜烷基相同的意義。
短語(yǔ)“未取代雜亞烯基”是指二價(jià)的如本文所定義的未取代雜烯基。因此，-CH2-O-CH＝CH-是未取代雜亞烯基的一個(gè)實(shí)例。短語(yǔ)“取代雜亞烯基”是指二價(jià)的如本文所定義的取代雜烯基。
短語(yǔ)“未取代雜炔基”是指如本文所定義的未取代炔基，其中碳鏈被選自N、O和S的一個(gè)或多個(gè)雜原子中斷。含N的未取代雜炔基可以在碳鏈中帶有NH或N(未取代烷基、未取代烯基或炔基)。短語(yǔ)“取代雜炔基”相對(duì)于未取代雜炔基具有與“取代雜烷基”相對(duì)于未取代雜烷基相同的意義。
短語(yǔ)“未取代雜亞炔基”是指二價(jià)的如本文所定義的未取代雜炔基。因此，-CH2-O-CH2-C≡C-是未取代雜亞炔基的一個(gè)實(shí)例。短語(yǔ)“取代雜亞炔基”是指二價(jià)的如本文所定義的取代雜炔基。
短語(yǔ)“未取代雜環(huán)基”是指芳香環(huán)化合物和非芳香環(huán)化合物，包括含有三個(gè)以上的環(huán)成員的單環(huán)、雙環(huán)和多環(huán)的環(huán)化合物(例如，喹核堿基quinuclidyl)，在所述環(huán)成員中有一個(gè)以上為諸如但不限于N、O和S等雜原子。盡管短語(yǔ)“未取代雜環(huán)基”包括諸如苯并咪唑基等稠雜環(huán)，但它不包括具有諸如烷基或鹵代基等與環(huán)成員之一鍵合的其它基團(tuán)的雜環(huán)基，因?yàn)橹T如2-甲基苯并咪唑基等化合物是取代的雜環(huán)基。雜環(huán)基的實(shí)例包括但不限于含有1～4個(gè)氮原子的不飽和三元環(huán)～八元環(huán)，諸如但不限于吡咯基、吡咯啉基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、二氫吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基、三唑基(例如，4H-1，2，4-三唑基、1H-1，2，3-三唑基、2H-1，2，3-三唑基等)、四唑基(例如，1H-四唑基、2H-四唑基等)；含有1～4個(gè)氮原子的飽和三元環(huán)～八元環(huán)，諸如但不限于吡咯烷基、咪唑烷基、哌啶基、哌嗪基；含有1～4個(gè)氮原子的不飽和雜稠環(huán)基，諸如但不限于吲哚基、異吲哚基、吲哚啉基、吲哚烷基、吲嗪基、苯并咪唑基、喹啉基、異喹啉基、吲唑基、苯并三唑基；含有1～3個(gè)氧原子和1～3個(gè)氮原子的不飽和三元環(huán)～八元環(huán)，諸如但不限于噁唑基、異噁唑基、噁二唑基(例如，1，2，4-噁二唑基、1，3，4-噁二唑基、1，2，5-噁二唑基等)；含有1～2個(gè)氧原子和1～3個(gè)氮原子的飽和三元環(huán)～八元環(huán)，諸如但不限于嗎啉基；含有1～2個(gè)氧原子和1～3個(gè)氮原子的不飽和雜稠環(huán)基，例如，苯并噁唑基、苯并噁二唑基、苯并噁嗪基(例如，2H-1，4-苯并噁嗪基等)；含有1～3個(gè)硫原子和1～3個(gè)氮原子的不飽和三元環(huán)～八元環(huán)，諸如但不限于噻唑基、異噻唑基、噻二唑基(例如，1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基等)；含有1～2個(gè)硫原子和1～3個(gè)氮原子的飽和三元環(huán)～八元環(huán)，諸如但不限于噻唑烷基(thiazolodinyl)；含有1～2個(gè)硫原子的飽和及不飽和三元環(huán)～八元環(huán)，諸如但不限于噻吩基、二氫二硫雜環(huán)己二烯基(dihydrodithiinyl)、二氫二硫雜環(huán)己二酮基(dihydrodithionyl)、四氫噻吩基、四氫噻喃基；含有1～2個(gè)硫原子和1～3個(gè)氮原子的不飽和雜稠環(huán)基，諸如但不限于苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并噻嗪基(例如，2H-1，4-苯并噻嗪基等)、二氫苯并噻嗪基(例如，2H-3，4-二氫苯并噻嗪基等)；含氧原子的不飽和三元環(huán)～八元環(huán)，諸如但不限于呋喃基；含有1～3個(gè)氧原子的不飽和雜稠環(huán)基，諸如苯并間二氧雜環(huán)戊烯基(例如，1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯基等)；含氧原子和1～2個(gè)硫原子的不飽和三元環(huán)～八元環(huán)，諸如但不限于二氫氧硫雜環(huán)己烯基(dihydrooxathiinyl)；含有1～3個(gè)氧原子和1～2個(gè)硫原子的飽和三元環(huán)～八元環(huán)，諸如1，4-氧硫雜環(huán)己烷基；含有1～2個(gè)硫原子的不飽和稠環(huán)，諸如苯并噻吩基、苯并二硫雜環(huán)己烯基(benzodithiinyl)；以及含有一個(gè)氧原子和1～3個(gè)硫原子的不飽和雜稠環(huán)基，諸如苯并氧二硫雜環(huán)己烯基(benzoxathiinyl)。雜環(huán)基還包括其中環(huán)中的一個(gè)以上S原子與一個(gè)或兩個(gè)氧原子成雙鍵的上述那些基團(tuán)(亞砜和砜)。例如，雜環(huán)基包括四氫噻吩、氧化四氫噻吩和1，1-二氧化四氫噻吩。在某些實(shí)施方式中，雜環(huán)基含有5個(gè)或6個(gè)環(huán)成員。在其它實(shí)施方式中，雜環(huán)基包括嗎啉、哌嗪、哌啶、吡咯烷、咪唑、吡唑、1，2，3-三唑、1，2，4-三唑、四唑、硫代嗎啉、其中硫代嗎啉的S原子與一個(gè)以上的O原子鍵合的硫代嗎啉、吡咯、高哌嗪、噁唑烷-2-酮、吡咯烷-2-酮、噁唑、奎寧環(huán)、噻唑、異噁唑、呋喃和四氫呋喃。
短語(yǔ)“取代雜環(huán)基”是指其中一個(gè)環(huán)成員與非氫原子鍵合的如本文所定義的未取代雜環(huán)基，諸如相對(duì)于取代烷基和取代芳基如上所述。實(shí)例包括但不限于2-甲基苯并咪唑基、5-甲基苯并咪唑基、5-氯苯并噻唑基、1-甲基哌嗪基和2-氯吡啶基等等。
短語(yǔ)“未取代雜芳基”是指未取代的如本文所定義的芳香雜環(huán)基。因此，未取代雜芳基包括但不限于呋喃基、咪唑基、噁唑基、異噁唑基、吡啶基、苯并咪唑基和苯并噻唑基。短語(yǔ)“取代雜芳基”是指取代的如本文所定義的芳香雜環(huán)基。
短語(yǔ)“未取代雜環(huán)基烷基”是指如本文所定義的未取代烷基，其中該未取代烷基的氫鍵或碳鍵被與如本文所定義的雜環(huán)基的成鍵所替代。例如，甲基(-CH3)是未取代烷基。如果甲基的氫原子被與雜環(huán)基的成鍵所替代，諸如如果甲基的碳與吡啶的碳2(與吡啶的N鍵合的碳之一)鍵合或與吡啶的碳3或碳4鍵合，則該化合物是未取代雜環(huán)基烷基。
短語(yǔ)“取代雜環(huán)基烷基”相對(duì)于未取代雜環(huán)基烷基具有與“取代芳烷基”相對(duì)于未取代芳烷基相同的意義。然而，取代雜環(huán)基烷基還包括其中非氫原子與該雜環(huán)基烷基的雜環(huán)中的雜原子(諸如但不限于哌啶基烷基的哌啶環(huán)中的氮原子)鍵合的基團(tuán)。
短語(yǔ)“未取代雜環(huán)基烯基”是指如本文所定義的未取代烯基，其中該未取代烯基的氫鍵或碳鍵被與如本文所定義的雜環(huán)基的成鍵所替代。例如，乙烯基是未取代烯基。如果乙烯基的氫原子被與雜環(huán)基的成鍵所替代，諸如如果乙烯基的碳與吡啶的碳2鍵合或與吡啶的碳3或碳4鍵合，則該化合物是未取代雜環(huán)基烯基。
短語(yǔ)“取代雜環(huán)基烯基”相對(duì)于未取代雜環(huán)基烯基具有與“取代芳烯基”相對(duì)于未取代芳烯基相同的意義。然而，取代雜環(huán)基烯基還包括其中非氫原子與該雜環(huán)基烯基的雜環(huán)中的雜原子(諸如但不限于哌啶基烯基的哌啶環(huán)中的氮原子)鍵合的基團(tuán)。
短語(yǔ)“未取代雜環(huán)基炔基”是指如本文所定義的未取代炔基，其中該未取代炔基的氫鍵或碳鍵被與如本文所定義的雜環(huán)基的成鍵所替代。例如，乙炔基是未取代炔基。如果乙炔基的氫原子被與雜環(huán)基的成鍵所替代，諸如如果乙炔基的碳與吡啶的碳2鍵合或與吡啶的碳3或碳4鍵合，則該化合物是未取代雜環(huán)基炔基。
短語(yǔ)“取代雜環(huán)基炔基”相對(duì)于未取代雜環(huán)基炔基具有與“取代芳炔基”相對(duì)于未取代芳炔基相同的意義。然而，取代雜環(huán)基炔基還包括其中非氫原子與該雜環(huán)基炔基的雜環(huán)中的雜原子(諸如但不限于哌啶基炔基的哌啶環(huán)中的氮原子)鍵合的基團(tuán)。
短語(yǔ)“未取代烷氧基”是指其中與氫原子的成鍵被與烷基的碳原子的成鍵所替代的羥基(-OH)，所述烷基在未進(jìn)行所述成鍵替代時(shí)是本文所定義的未取代烷基。
短語(yǔ)“取代烷氧基”是指其中與氫原子的成鍵被與烷基的碳原子的成鍵所替代的羥基(-OH)，所述烷基在未進(jìn)行所述成鍵替代時(shí)是本文所定義的取代烷基。
“可藥用鹽”包括與無(wú)機(jī)堿、有機(jī)堿、無(wú)機(jī)酸、有機(jī)酸或者堿性或酸性氨基酸所成的鹽。無(wú)機(jī)堿的鹽包含，例如，諸如鈉或鉀等堿金屬；諸如鈣和鎂等堿土金屬或鋁；和氨。有機(jī)堿的鹽包含，例如三甲胺、三乙胺、吡啶、甲基吡啶、乙醇胺、二乙醇胺和三乙醇胺。無(wú)機(jī)酸的鹽包含，例如鹽酸、氫硼酸(hydroboric acid)、硝酸、硫酸和磷酸。有機(jī)酸的鹽包含，例如甲酸、乙酸、三氟乙酸、富馬酸、草酸、酒石酸、馬來(lái)酸、檸檬酸、琥珀酸、蘋(píng)果酸、甲磺酸、苯磺酸和對(duì)甲苯磺酸。堿性氨基酸的鹽包含，例如精氨酸、賴氨酸和鳥(niǎo)氨酸。酸性氨基酸包括，例如天冬氨酸和谷氨酸。
“互變異構(gòu)體”是指處在彼此之間的平衡中的化合物的異構(gòu)形式。異構(gòu)形式的濃度取決于發(fā)現(xiàn)化合物的環(huán)境并且可能根據(jù)例如化合物是固體還是在有機(jī)溶液或水溶液中而不同。例如，在水溶液中，酮通常與其烯醇形式處于平衡。因此，酮及其烯醇稱作彼此的互變異構(gòu)體。本領(lǐng)域技術(shù)人員容易理解，各種各樣的官能團(tuán)和其它結(jié)構(gòu)可能展示出互變異構(gòu)，并且具有式I、II和III的化合物的所有互變異構(gòu)體都在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
可以將本發(fā)明的化合物溶劑化，尤其是水化。水化可以發(fā)生在所述化合物或包含該化合物的組合物的制造期間，或由于該化合物的吸濕性質(zhì)可以隨著時(shí)間進(jìn)行而發(fā)生。
某些實(shí)施方式是稱作前體藥物的衍生物。表述“前體藥物”是指藥物學(xué)活性藥物或治療活性藥物的衍生物，例如酯和酰胺，其中該衍生物與原藥相比增強(qiáng)了傳輸特性和治療價(jià)值并由酶促過(guò)程或化學(xué)過(guò)程轉(zhuǎn)化為藥物。見(jiàn)例如，R.E.Notari，Methods Enzymol.112309-323(1985)；N.Bodor，Drugs of the Future 6165-182(1981)；H.Bundgaard，Chapter 1 in Design of Prodrugs(H.Bundgaard，ed.)，Elsevier，New York(1985)；和A.G.Gilman等，Goodman And Gilman‘s The PharmacologicalBasis of Therapeutics，8th ed.，McGraw-Hill(1990)。因此，可以將前體藥物設(shè)計(jì)來(lái)改變藥物的代謝穩(wěn)定性或輸送特性、屏蔽藥物的副作用或毒性、改善藥物的口感或改變藥物的其它特性或性質(zhì)。
本發(fā)明的化合物包括富集的或拆分的在任何或所有不對(duì)稱原子處的光學(xué)異構(gòu)體，如圖示中顯而易見(jiàn)。可以將外消旋混合物和非對(duì)映異構(gòu)混合物以及個(gè)體光學(xué)異構(gòu)體分離或合成從而基本不含其對(duì)應(yīng)異構(gòu)體或非對(duì)應(yīng)異構(gòu)體。所有這些立體異構(gòu)體都在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“羧基保護(hù)基”是指用來(lái)在涉及化合物的其它官能位點(diǎn)的反應(yīng)進(jìn)行時(shí)阻斷或保護(hù)羧酸官能度的羧酸保護(hù)性酯基。羧基保護(hù)基公開(kāi)于例如Greene，Protective Groups in Organic Synthesis，pp.152-186，John Wiley&Sons，New York(1981)中，本文通過(guò)參考將其引入。此外，羧基保護(hù)基可以用作前體藥物，從而可以在體內(nèi)通過(guò)例如酶水解將該羧基保護(hù)基輕易切割以釋放其生物活性母體。T.Higuchi和V.Stella在″Pro-drugs as Novel Delivery Systems”，Vol.14，A.C.S.Symposium Series，American Chemical Society(1975)中提供了對(duì)前體藥物概念的透徹討論，本文通過(guò)參考將其引入。這些羧基保護(hù)基對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是公知的，且在青霉素和頭孢菌素領(lǐng)域中被廣泛用于保護(hù)羧基，如美國(guó)專利第3,840,556和3,719,667號(hào)、S.Kukolja，J.Am.Chem.Soc.936267-6269(1971)和G.E.Gutowski，Tetrahedron Lett.211779-1782(1970)中所述，本文通過(guò)參考引入其公開(kāi)內(nèi)容。可用作含羧基的化合物的前體藥物的酯類的實(shí)例可以在例如BioreversibleCarriers in Drug DesignTheory and Application(E.B.Roche，ed.)，Pergamon Press，New York(1987)中的第14～21頁(yè)中找到，本文通過(guò)參考將其引入。代表性羧基保護(hù)基是C1～C8烷基(例如，甲基、乙基或叔丁基等等)；鹵代烷基；烯基；環(huán)烷基及其取代衍生物，諸如環(huán)己基、環(huán)戊基等等；環(huán)烷基烷基及其取代衍生物，諸如環(huán)己基甲基、環(huán)戊基甲基等等；芳烷基，例如，苯乙基或芐基及其諸如烷氧基芐基或硝基芐基等取代衍生物；芳烯基，例如，苯乙烯基等等；芳基及其取代衍生物，例如，5-茚滿基等等；二烷基氨基烷基(例如，二甲基氨基乙基等等)；鏈烷醇氧基，諸如乙酰氧基甲基、丁酰氧基甲基、戊酰氧基甲基(valeryloxymethyl)、異丁酰氧基甲基、異戊酰氧基甲基(isovaleryloxymethyl)、1-(丙酰氧基)-1-乙基、1-(特戊酰氧基)-1-乙基、1-甲基-1-(丙酰氧基)-1-乙基、特戊酰氧基甲基、丙酰氧基甲基等等；環(huán)烷醇氧基烷基，諸如環(huán)丙基羰基氧基甲基、環(huán)丁基羰基氧基甲基、環(huán)戊基羰基氧基甲基、環(huán)己基羰基氧基甲基等等；芳酰氧基烷基，諸如苯甲酰氧基甲基、苯甲酰氧基乙基等等；芳烷基羰基氧基烷基，諸如芐基羰基氧基甲基、2-芐基羰基氧基乙基等等；烷氧基羰基烷基，諸如甲氧基羰基甲基、環(huán)己氧基羰基甲基、1-甲氧基羰基-1-乙基等等；烷氧基羰基氧基烷基，諸如甲氧基羰基氧基甲基、叔丁氧基羰基氧基甲基、1-乙氧基羰基氧基-1-乙基、1-環(huán)己氧基羰基氧基-1-乙基等等；烷氧基羰基氨基烷基，諸如叔丁氧基羰基氨基甲基等等；烷基氨基羰基氨基烷基，諸如甲基氨基羰基氨基甲基等等；鏈烷醇氨基烷基，諸如乙酰氨基甲基等等；雜環(huán)基羰基氧基烷基，諸如，4-甲基哌嗪基羰基氧基甲基等等；二烷基氨基羰基烷基，諸如二甲基氨基羰基甲基、二乙基氨基羰基甲基等等；(5-(烷基)-2-氧代-1，3-二氧環(huán)戊烯-4-yl)烷基，諸如(5-叔丁基-2-氧代-1，3-二氧環(huán)戊烯-4-基)甲基等等；以及(5-苯基-2-氧代-1，3-二氧環(huán)戊烯-4-基)烷基，諸如(5-苯基-2-氧代-1，3-二氧環(huán)戊烯-4-基)甲基等等。
本文所用術(shù)語(yǔ)“N保護(hù)基”或“N保護(hù)”是指用于在合成過(guò)程中保護(hù)氨基酸或肽的N端或者保護(hù)氨基不受不希望的反應(yīng)的那些基團(tuán)。常用N保護(hù)基公開(kāi)于例如Greene、Protective Groups in OrganicSynthesis、John Wiley&Sons、New York(1981)中，本文通過(guò)參考將其引入。N保護(hù)基包括酰基，諸如甲酰基、乙酰基、丙酰基、特戊?；?、叔丁基乙酰基、2-氯乙?；?-溴乙?；?、三氟乙?；?、三氯乙?；?、鄰苯二甲?；?、鄰硝基苯氧基乙?；?、α-氯丁?；?、苯甲酰基、4-氯苯甲酰基、4-溴苯甲?；?、4-硝基苯甲?；鹊龋换酋；?，諸如苯磺酰基、對(duì)甲苯磺酰基等等；形成氨基甲酸酯的基團(tuán)，諸如芐氧基羰基、對(duì)氯芐氧基羰基、對(duì)甲氧基芐氧基羰基、對(duì)硝基芐氧基羰基、2-硝基芐氧基羰基、對(duì)溴芐氧基羰基、3，4-二甲氧基芐氧基羰基、3，5-二甲氧基芐氧基羰基、2，4-二甲氧基芐氧基羰基、4-甲氧基芐氧基羰基、2-硝基-4，5-二甲氧基芐氧基羰基、3，4，5-三甲氧基芐氧基羰基、1-(對(duì)聯(lián)苯基)-1-甲基乙氧基羰基、α，α-二甲基-3，5-二甲氧基芐氧基羰基、benzhydryloxycarbonyl、叔丁氧基羰基、二異丙基甲氧基羰基、異丙氧基羰基、乙氧基羰基、甲氧基羰基、烯丙氧基羰基、2，2，2，-三氯乙氧基羰基、苯氧基羰基、4-硝基苯氧基羰基、芴基-9-甲氧基羰基、環(huán)戊氧基羰基、金剛烷氧基羰基、環(huán)己氧基羰基、苯硫基羰基得到；烷基，諸如芐基、三苯基甲基、芐氧基甲基等等；以及甲硅烷基，諸如三甲基甲硅烷基等等。在某些實(shí)施方式中，N保護(hù)基是甲?；?、乙?；?、苯甲?；?、特戊酰基、叔丁基乙?；?、苯磺?；⑵S基、9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)、叔丁氧基羰基(Boc)和芐氧基羰基(Cbz)。
如本文所用，“鹵代”、“鹵素”或“鹵化物”是指F、Cl、Br或I。
如本文所用，除非另外指出，對(duì)任何保護(hù)基、氨基酸或其它化合物的縮寫(xiě)與它們的習(xí)慣用法、公認(rèn)縮寫(xiě)或IUPAC-IUB Commission onBiochemical Nomenclature，Biochem.11942-944(1972)相一致。
如本文所用，“基本純凈”是指基本均勻以至沒(méi)有呈現(xiàn)出通過(guò)由本領(lǐng)域技術(shù)人員用來(lái)評(píng)價(jià)純度的標(biāo)準(zhǔn)分析方法(諸如薄層色譜(TLC)、凝膠電泳、高效液相色譜(HPLC)等)可輕易檢測(cè)的雜質(zhì)，或足夠純凈以至于進(jìn)一步純化不會(huì)可檢測(cè)地改變物質(zhì)的物理性質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)，諸如酶活性和生物活性等。用于純化化合物以產(chǎn)生基本化學(xué)純凈的化合物的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。然而，基本化學(xué)純凈的化合物可以為立體異構(gòu)體的混合物。在這種情況下，進(jìn)一步純化可以增加該化合物的特異性活性。
如本文所用，“生物活性”是指化合物、組合物或其它混合物或者在體內(nèi)施用化合物、組合物或其它混合物時(shí)造成的生理應(yīng)答的體內(nèi)活性。因此生物活性涵蓋了這些化合物、組合物和混合物的治療效果和藥物活性。
如本文所用，“藥代動(dòng)力學(xué)”是指隨著時(shí)間進(jìn)行在血清中被施用化合物的濃度。藥效學(xué)是指隨著時(shí)間進(jìn)行被施用化合物在靶標(biāo)和非靶標(biāo)組織中的濃度以及在靶標(biāo)組織上的效果(療效)和非靶標(biāo)組織上的效果(毒性)。對(duì)于特定靶向劑或生物劑可以通過(guò)諸如使用不穩(wěn)定鍵或改變?nèi)魏谓宇^的化學(xué)性質(zhì)(改變?nèi)芙舛?、電荷?來(lái)設(shè)計(jì)在例如藥代動(dòng)力學(xué)或藥效學(xué)上的改善。
如本文所用，短語(yǔ)“有效量”和“治療有效量”是指足以提供在其接受體上賦予有益效果(例如，癥狀的改善)的足夠高的濃度的劑量。對(duì)于任何特定受試對(duì)象的具體治療有效劑量水平將取決于各種因素，這些因素包括所治療的病癥、病癥的嚴(yán)重性、具體化合物的活性、施用途徑、該化合物的清除率、治療持續(xù)時(shí)間、與該化合物組合或重合使用的藥物、受試對(duì)象的年齡、體重、性別、飲食和一般健康狀況以及醫(yī)學(xué)領(lǐng)域和醫(yī)學(xué)科學(xué)中公知的類似因素。在確定“治療有效量”中所考慮的各種一般性考量是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的并且在例如Gilman，A.G.，等，Goodman And Gilman′s The Pharmacological Basis ofTherapeutics，8th ed.，McGraw-Hill(1990)；和Remington′sPharmaceutical Sciences，17th ed.，Mack Publishing Co.，Easton，PA(1990)中進(jìn)行了說(shuō)明。
在一方面，本發(fā)明提供了其中GA靶向劑與抗體結(jié)合位點(diǎn)共價(jià)連接的各種靶向化合物。
在另一方面，本發(fā)明提供了改變GA靶向劑的至少一個(gè)物理特性或生物特性的方法。所述方法包括將GA靶向劑直接或通過(guò)接頭來(lái)與抗體結(jié)合位點(diǎn)共價(jià)連接。可以被修飾的GA靶向劑的特性包括但不限于結(jié)合親和力、對(duì)降解的敏感性(例如，通過(guò)蛋白酶)、藥代動(dòng)力學(xué)、藥效學(xué)、免疫原性、溶解度、親脂性、親水性、疏水性、穩(wěn)定性(更穩(wěn)定或更不穩(wěn)定，以及計(jì)劃性降解)、剛性、柔性、抗體結(jié)合的調(diào)節(jié)等等。此外，通過(guò)加入抗體提供的效應(yīng)子功能能夠增加特定GA靶向劑的生物效價(jià)。例如，一種抗體提供了諸如互補(bǔ)的受介導(dǎo)效應(yīng)子功能。不希望受任何理論約束，GA靶向化合物的抗體部分通?？梢匝娱L(zhǎng)更小尺寸的GA靶向劑在體內(nèi)的半衰期。因此，在一方面，本發(fā)明提供了用于增加GA靶向劑的有效循環(huán)半衰期的方法。
在另一方面，本發(fā)明提供了用于通過(guò)將GA靶向劑與抗體結(jié)合位點(diǎn)共價(jià)相連來(lái)調(diào)節(jié)抗體的結(jié)合活性的方法。盡管不希望受任何理論約束，抗體與抗原的結(jié)合顯著降低可能是由所連接的GA靶向劑在空間上阻礙了抗原與抗體結(jié)合位點(diǎn)相接觸而造成的。替代性的是，如果被共價(jià)鍵修飾的抗體結(jié)合位點(diǎn)的氨基酸側(cè)鏈對(duì)于與抗原的結(jié)合很重要，則可能造成抗原結(jié)合的顯著降低。相反，當(dāng)所連接的GA靶向劑沒(méi)有在空間上阻礙抗原與抗體結(jié)合位點(diǎn)的接觸和/或當(dāng)被共價(jià)鍵修飾的抗體結(jié)合位點(diǎn)的氨基酸側(cè)鏈對(duì)于與抗原的結(jié)合不重要時(shí)，可能造成抗體與抗原的結(jié)合顯著增加。
在另一方面，本發(fā)明包括修飾抗體結(jié)合位點(diǎn)以產(chǎn)生對(duì)GLP-1R的結(jié)合特異性的方法。這種方法包括將抗體結(jié)合位點(diǎn)的反應(yīng)性氨基酸側(cè)鏈與如本文所述的GA靶向劑-接頭化合物的接頭上的化學(xué)部分共價(jià)連接，其中該GA靶向劑對(duì)GLP-1R特異。所述接頭的化學(xué)部分離GA靶向劑足夠遠(yuǎn)從而在GA靶向劑-接頭化合物與抗體結(jié)合位點(diǎn)共價(jià)連接時(shí)GA靶向劑能與GLP-1R結(jié)合。在一個(gè)實(shí)施方式中，共價(jià)連接前的抗體將具有小于約1×10-5摩爾/升的對(duì)GLP-1R的親和力。然而，在該抗體與GA靶向劑-接頭化合物共價(jià)連接后，修飾后的抗體優(yōu)選具有至少約1×10-6摩爾/升的對(duì)靶標(biāo)分子的親和力，替代性的是至少約1×10-7摩爾/升，替代性的是至少約1×10-8摩爾/升，替代性的是至少約1×10-9摩爾/升，或替代性的是至少約1×10-10摩爾/升。
GA靶向劑 在一個(gè)實(shí)施方式中，GA靶向劑是 R1-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-R2(SEQ IDNO1)， 其中 R1缺失或者是CH3、C(O)CH3、C(O)CH2CH3、C(O)CH2CH2CH3或C(O)CH(CH3)CH3；和 R2是OH、NH2、NH(CH3)、NHCH2CH3、NHCH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH3、NHCH2CH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH2CH3、NHC6H5、NHCH2CH2OCH3、NHOCH3、NHOCH2CH3、羧基保護(hù)基、脂類脂肪酸基或糖。
SEQ ID NO1是通過(guò)二肽基肽酶IV(DPP-IV)對(duì)GLP-1在第2位丙氨酸處切割而產(chǎn)生的30個(gè)氨基酸的GLP-1(7-36)。D.J.Drucker.Endocrinology 142521-527(2001)。GLP-1(7-36)充當(dāng)GLP-1R激動(dòng)劑，從而造成葡萄糖依賴的胰島素分泌的增加。然而，GLP-1(7-36)的半衰期僅為數(shù)分鐘。
在另一個(gè)實(shí)施方式中，GA靶向劑是 R1-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO2)； 其中 R1缺失或者是CH3、C(O)CH3、C(O)CH2CH3、C(O)CH2CH2CH3或C(O)CH(CH3)CH3；和 R2是OH、NH2、NH(CH3)、NHCH2CH3、NHCH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH3、NHCH2CH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH2CH3、NHC6H5、NHCH2CH2OCH3、NHOCH3、NHOCH2CH3、羧基保護(hù)基、脂類脂肪酸基或糖。
SEQ ID NO2是39個(gè)氨基酸的肽(exendin-4，腸促胰島素類似物-4)。與GLP-1(7-36)相似，exendin-4充當(dāng)GLP-1R激動(dòng)劑并刺激葡萄糖依賴的胰島素分泌。然而，與GLP-1(7-36)不同的是，exendin-4對(duì)DPP-IV的切割具有耐受性。GLP-1(7-36)和exendin-4的N端區(qū)幾乎相同，顯著的區(qū)別是第二個(gè)氨基酸殘基。該殘基在GLP-1(7-36)中是丙氨酸，但在exendin-4中是甘氨酸。這個(gè)單一氨基酸是exendin-4對(duì)DPP-IV消化耐受的原因。exendin-4與GLP-1(7-36)之間的另一個(gè)顯著區(qū)別是在exendin-4的C端處存在九個(gè)額外氨基酸殘基，這些額外氨基酸殘基形成了色氨酸籠。
除了SEQ ID NO1或SEQ ID NO2的肽之外，本文所公開(kāi)的GA靶向劑可以是這些序列的類似物。這些類似物可能用于額外的有利特點(diǎn)，諸如，例如增加的生物有效性、增加的穩(wěn)定性、改善的糖尿病治療概況、改善的食欲控制、改善的體重控制、改善的葡萄糖耐受性、胰島細(xì)胞測(cè)試反應(yīng)性和/或降低的寄主免疫識(shí)別。如本文所用，SEQ IDNO1或SEQ ID NO2的肽的類似物是基本具有SEQ ID NO1或SEQID NO2的序列，但帶有一個(gè)或多個(gè)氨基酸取代、插入或缺失或者它們的組合。
在某些實(shí)施方式中，本文所提供的GA靶向劑包含SEQ ID NO1或SEQ ID NO2，但帶有一個(gè)或多個(gè)氨基酸取代。GA靶向劑中的一類可能的氨基酸取代將包括被預(yù)測(cè)為可以穩(wěn)定SEQ ID NO1或SEQ IDNO2的結(jié)構(gòu)的那些氨基酸變化。利用SEQ ID NO1或SEQ ID NO2，本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員能容易地編寫(xiě)出共有序列，并從這些共有序列中確定代表優(yōu)選的氨基酸取代的保守氨基酸殘基。氨基酸取代可以為保守性或非保守性。保守性氨基酸殘基取代包括以相似電荷、尺寸和/或疏水性特性的氨基酸來(lái)替代SEQ ID NO1或SEQ ID NO2的一個(gè)或多個(gè)氨基酸，諸如，例如谷氨酸(E)到天冬氨酸(D)的氨基酸取代。非保守性氨基酸取代包括以擁有不相似的電荷、尺寸和/或疏水性特性的氨基酸來(lái)替代SEQ ID NO1或SEQ ID NO2的一個(gè)或多個(gè)氨基酸，諸如，例如谷氨酸(E)到纈氨酸(V)的取代。在某些實(shí)施方式中，本文所提供的GA靶向劑包含SEQ ID NO1或SEQ ID NO2類似物，但用2-氨基異丁酸(Aib2)取代了第2位上的甘氨酸殘基(或丙氨酸，視情況而定)。在某些實(shí)施方式中，本文所提供的GA靶向劑包含SEQ ID NO1或SEQID NO2，但帶有以賴氨酸取代的一個(gè)或多個(gè)殘基。
在某些實(shí)施方式中，本文所提供的GA靶向劑包含SEQ ID NO1或SEQ ID NO2，但帶有一個(gè)或多個(gè)氨基酸插入。氨基酸插入可以包括單個(gè)氨基酸殘基或殘基段。插入可以在肽的羧基端末端處或肽的內(nèi)部位置處進(jìn)行。這樣的插入的長(zhǎng)度范圍通常為2～10個(gè)氨基酸。預(yù)期的是在肽的羧基端處進(jìn)行的插入可能具有更寬的尺寸范圍，可能為約2個(gè)～約20個(gè)氨基酸。可以在SEQ ID NO1或SEQ ID NO2中引入一個(gè)或多個(gè)這樣的插入，只要這樣的插入產(chǎn)生仍然展示出GLP-1R激動(dòng)劑活性的肽即可。
在某些實(shí)施方式中，本文所提供的GA靶向肽包含SEQ ID NO2的氨基酸序列，但帶有一個(gè)或多個(gè)插入的賴氨酸殘基。例如，在一個(gè)實(shí)施方式中，GA靶向劑是 R1-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK-R2(SEQ ID NO3)； 其中 R1缺失或者是CH3、C(O)CH3、C(O)CH2CH3、C(O)CH2CH2CH3或C(O)CH(CH3)CH3；和 R2是OH、NH2、NH(CH3)、NHCH2CH3、NHCH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH3、NHCH2CH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH2CH3、NHC6H5、NHCH2CH2OCH3、NHOCH3、NHOCH2CH3、羧基保護(hù)基、脂類脂肪酸基或糖。
除了在羧基端加入了一個(gè)額外的賴氨酸殘基之外，SEQ ID NO3的GA靶向劑與SEQ ID NO2相同。
在一個(gè)相似實(shí)施方式中，GA靶向劑是 R1-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK-R2(SEQ IDNO33)； 其中 R1缺失或者是CH3、C(O)CH3、C(O)CH2CH3、C(O)CH2CH2CH3或C(O)CH(CH3)CH3；和 R2是OH、NH2、NH(CH3)、NHCH2CH3、NHCH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH3、NHCH2CH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH2CH3、NHC6H5、NHCH2CH2OCH3、NHOCH3、NHOCH2CH3、羧基保護(hù)基、脂類脂肪酸基或糖。
除了在羧基端加入了一個(gè)額外的賴氨酸殘基之外，SEQ ID NO33的GA靶向劑與SEQ ID NO1相同。
在某些實(shí)施方式中，本文所提供的GA靶向劑包含SEQ ID NO1或SEQ ID NO2，但帶有一個(gè)或多個(gè)氨基酸缺失。這樣的缺失可以包括從肽的羧基端的截短，或它們可以包括從肽的內(nèi)部位置中除去一個(gè)或多個(gè)氨基酸。這樣的缺失可能涉及單點(diǎn)缺失、兩個(gè)以上的連續(xù)殘基的連續(xù)缺失或點(diǎn)缺失和連續(xù)缺失的組合?？梢栽赟EQ ID NO1或SEQID NO2中引入一個(gè)或多個(gè)這樣的缺失，只要這樣的缺失產(chǎn)生仍然展示出GLP-1R激動(dòng)劑活性的肽即可。在某些實(shí)施方式中，本文所提供的GA靶向肽包含SEQ ID NO2的氨基酸序列，但有一個(gè)或多個(gè)氨基酸從肽的羧基端缺失。
合適的示例性SEQ ID NO1和SEQ ID NO2類似物描述于下表I中，并在本文中以通式格式進(jìn)行說(shuō)明。表I中的肽序列從氨基端(左)到羧基端(右)列出。
表I SEQ ID NO1和SEQ ID NO2類似物 R1-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK-R2(SEQ ID NO3) R1-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO172) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK-R2(SEQ ID NO4) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO173) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO5) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGG-R2(SEQ ID NO6) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-R2(SEQ ID NO7) R1-HAibEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEFLKN-R2(SEQ ID NO8) R1-HAibEGTFTSDLSKQLEEEAVRLAIEFLKN-R2(SEQ ID NO9) R1-HAibEGTFTSDLSKQLEEEAVRLAIEFLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO10) R1-HAibEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEFLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO11) R1-HAibEGTFTSDLSK(Ac)QMEEEAVRLFIEWLK(Ac)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO12) R1-HAibEGTFTSDLSK(苯甲酰基)QMEEEAVRLFIEWLK(苯甲?；?NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO13) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPKS-R2(SEQ ID NO14) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPK(SH)S-R2(SEQ ID NO99) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAKPPS-R2(SEQ ID NO15) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAK(SH)PPS-R2(SEQ ID NO100) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSKAPPPS-R2(SEQ ID NO16) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSK(SH)APPPS-R2(SEQ ID NO101) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPKSGAPPPS-R2(SEQ ID NO17) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPK(SH)SGAPPPS-R2(SEQ ID NO168) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKKGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO18) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKK(SH)GGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO102) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWKKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO19) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK(SH)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO170) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWK(SH)KNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO103) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIKWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO20) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIK(SH)WLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO104) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFKEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO21) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFK(SH)EWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO105) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO22) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(SH)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO106) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVKLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO23) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVK(SH)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO107) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAKRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO24) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAK(SH)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO108) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEKAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO25) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEK(SH)AVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO109) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEKEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO26) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEK(SH)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO110) R1-HAibEGTFTSDLSKQKEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO27) R1-HAibEGTFTSDLSKQK(SH)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO111) R1-HAibEGTFTSDLSKKMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO28) R1-HAibEGTFTSDLSKK(SH)MEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO112) R1-HAibEGTFTSDLKKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO29) R1-HAibEGTFTSDLSK(SH)QMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO169) R1-HAibEGTFTSDLK(SH)KQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO113) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGK-R2(SEQ ID NO30) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGK(SH)-R2(SEQ ID NO114) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLKNGGPSS-R2(SEQ ID NO31) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLK(SH)NGGPSS-R2(SEQ ID NO115) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-R2(SEQ ID NO32) R1-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK-R2(SEQ ID NO33) R1-HGEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK-R2(SEQ ID NO34) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO35) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKAibRK-R2(SEQ ID NO36) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK-R2(SEQ ID NO37) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK(SH)-R2(SEQ ID NO38) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAK(SH)EFIAWLVKGR-R2(SEQ ID NO39) R1-HAibEGTFTSDVSSYGEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO40) R1-HAibEGTFTSDVSSYCEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO41) R1-HAibEGTFTSDVSSYFEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO42) R1-HAibEGTFTSDVSSYYEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO43) R1-HAibEGTFTSDVSSYWEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO44) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO45) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEDQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO46) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEKQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO47) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAVKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO48) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAIKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO49) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQALKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO50) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAREFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO51) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAOrnEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO52) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAFLVKAibR-R2(SEQ ID NO53) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO54) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVRAibR-R2(SEQ ID NO55) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVOrnAibR-R2(SEQ ID NO56) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO57) R1-HAibEGTFTSDVSSYFEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO58) R1-HAibEGTFTSDVSSYYEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO59) R1-HAibEGTFTSDVSSYWEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO60) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIRAibR-R2(SEQ ID NO61) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVREFIAWLIRAibR-R2(SEQ ID NO62) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibRPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO63) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVK(SH)EFIAWLIKAibRPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO171) R1-HAibEGTFTSDKSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO64) R1-HAibEGTFTSDK(SH)SSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO116) R1-HAibEGTFTSDVSKYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO65) R1-HAibEGTFTSDVSK(SH)YLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO117) R1-HAibEGTFTSDVSSYKEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO66) R1-HAibEGTFTSDVSSYK(SH)EEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO118) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEKQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO67) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEK(SH)QAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO119) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQKVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO68) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQK(SH)VKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO120) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEKIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO69) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVK(SH)EKIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO121) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIKWLIKAibR-R2(SEQ ID NO70) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIK(SH)WLIKAibR-R2(SEQ ID NO122) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWKIKAibR-R2(SEQ ID NO71) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWK(SH)IKAibR-R2(SEQ ID NO123) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibRPSSGAPPPSK-R2(SEQ ID NO72) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibRPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO124) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIK(Ac)AibR-R2(SEQ ID NO73) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIK(苯甲酰基)AibR-R2(SEQ ID NO74) R1-H(反-3-己?；?AibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO75) R1-H(3-氨基苯基乙?；?AibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO76) 本文所用K(SH)是指
本文所用K(苯甲?；?是指與具有如下結(jié)構(gòu)的苯甲酰基封端相連的賴氨酸殘基
本文所用的“反-3-己?；笔侵概cGA靶向肽相連并具有如下結(jié)構(gòu)的封端
本文所用的“3-氨基苯基乙?；笔侵概cGA靶向肽相連并具有如下結(jié)構(gòu)的封端
可以使用本領(lǐng)域公知技術(shù)來(lái)制備GA靶向化合物。通常，肽基GA靶向劑的合成是第一步，且如本文所述進(jìn)行。然后將該靶向劑與連接組分(接頭)連接來(lái)進(jìn)行衍生化，接著與抗體合并。本領(lǐng)域技術(shù)人員將容易理解，所用的具體合成步驟取決于三個(gè)組分的確切性質(zhì)。因此，可以容易地合成本文所述的GA靶向劑-接頭偶聯(lián)物和GA靶向化合物。
可以通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的許多技術(shù)來(lái)合成GA靶向劑肽。對(duì)于固相多肽合成，對(duì)許多技術(shù)的總結(jié)可以在Chemical Approaches tothe Synthesis of Peptides and Proteins(Williams等，eds.)，CRC Press，Boca Raton，F(xiàn)L(1997)中找到。
通常，根據(jù)本領(lǐng)域公知方法連續(xù)固相合成期望的GA靶向劑肽。見(jiàn)例如，美國(guó)專利申請(qǐng)第10/205,924號(hào)(公開(kāi)第2003/0045477A1號(hào))?？梢詫⒔宇^在固相上部分或完全附加到肽上，或可在將肽從樹(shù)脂上除去后用溶液相技術(shù)加入(見(jiàn)圖5A和圖5B)。例如，可以將含有N保護(hù)的氨基和羧酸的連接部分附加到諸如4-羥甲基-苯氧基甲基-聚(苯乙烯-1％二乙烯基苯)等樹(shù)脂。可以用適當(dāng)?shù)乃?例如，TFA用于Boc)或堿(例如，哌啶用于Fmoc)來(lái)除去N保護(hù)基，然后產(chǎn)生的正常的C端至N端形式的肽序列(見(jiàn)圖5A)。替代性的是，可以先合成肽序列然后將接頭在柱上加入肽中(見(jiàn)圖5B)。還有另一種方法需要在合成期間將適當(dāng)?shù)膫?cè)鏈脫保護(hù)并以適當(dāng)反應(yīng)活性的接頭進(jìn)行衍生化。例如，可以將賴氨酸殘基脫保護(hù)并與具有活性酯基的接頭反應(yīng)。替代性的是，可以將氨基酸衍生物或某些情況下的α-氨基氮加入作為增長(zhǎng)中的肽序列的一部分，所述氨基酸衍生物帶有已經(jīng)附加到側(cè)鏈上的適當(dāng)保護(hù)的接頭部分。
在固相合成結(jié)束時(shí)，先后或在單一操作中將靶向劑-接頭偶聯(lián)物從樹(shù)脂上除去并脫保護(hù)?？梢酝ㄟ^(guò)以切割試劑(例如，含有諸如茴香硫醚(thioanisole)、水或乙二硫醇等清除劑的三氟乙酸)對(duì)與樹(shù)脂結(jié)合的肽-接頭偶聯(lián)物進(jìn)行處理來(lái)在單一操作中完成靶向劑-接頭偶聯(lián)物的除去和脫保護(hù)。在靶向劑的脫保護(hù)和釋放后，可以進(jìn)行靶向劑肽的進(jìn)一步衍生化。
通過(guò)一系列色譜步驟對(duì)完全脫保護(hù)的靶向劑-接頭偶聯(lián)物進(jìn)行純化，所述色譜步驟采用任何或所有下列類型在醋酸鹽形式的弱堿性樹(shù)脂上的離子交換；在未衍生化的聚苯乙烯-二乙烯基苯(例如，AMBERLITE XAD)上的疏水吸附色譜；硅膠吸附色譜；在羧甲基纖維素上的離子交換色譜；分配色譜，例如，在SEPHADEX G-25、LH-20上或逆流分配；高效液相色譜(HPLC)，尤其是在辛基氧化硅或十八烷基甲硅烷基氧化硅結(jié)合的色譜柱調(diào)料上的反相HPLC。
抗體 本文所用的“抗體”包括B細(xì)胞的產(chǎn)物免疫球蛋白及其變異體以及T細(xì)胞的產(chǎn)物T細(xì)胞受體(TcR)及其變異體。免疫球蛋白是包含基本由免疫球蛋白κ和λ、α、γ、δ、ζ和μ恒定區(qū)基因以及大量免疫球蛋白可變區(qū)基因編碼的一個(gè)或多個(gè)多肽的蛋白。輕鏈劃分為κ和λ。重鏈劃分為γ、μ、α、δ或ζ，它們反過(guò)來(lái)分別定義了免疫球蛋白種類IgG、IgM、IgA、IgD和IgE。重鏈的亞類也是已知的。例如，人類IgG重鏈可以為IgG1、IgG2、IgG3和IgG4任何亞類。
已知典型的免疫球蛋白結(jié)構(gòu)單元包含四聚體。各四聚體由兩個(gè)相同的多肽鏈對(duì)組成，而各多肽鏈對(duì)具有一條“輕”鏈(約25kD)和一條“重”鏈(約50kD～70kD)。各條鏈的N端確定了主要負(fù)責(zé)抗原識(shí)別的約100～110個(gè)以上的氨基酸的可變區(qū)。術(shù)語(yǔ)可變輕鏈(VL)和可變重鏈(VH)分別指這些輕鏈和重鏈?？贵w的氨基酸可以為天然或非天然的。
含有兩條重鏈和兩條輕鏈的抗體由于具有兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn)因而是二價(jià)的。典型的天然二價(jià)抗體是IgG。抗體可以為多價(jià)，如IgA的二聚體形式和五聚體IgM分子的情形?？贵w也可以是單價(jià)，諸如，例如Fab或Fab’片段的情形。
抗體作為全長(zhǎng)的無(wú)損抗體存在或作為由各種肽酶或化學(xué)物質(zhì)的消化產(chǎn)生的多個(gè)表征良好的片段存在。因此，例如，胃蛋白酶在鉸鏈區(qū)的二硫鍵處消化抗體從而產(chǎn)生了Fab的二聚體F(ab’)2，F(xiàn)ab自身是通過(guò)二硫鍵與VH-CH1連接的輕鏈?？梢栽跍睾蜅l件下還原F(ab’)2以便使鉸鏈區(qū)中的二硫鍵斷裂，從而將F(ab’)2二聚體轉(zhuǎn)化為Fab’單體。Fab’單體基本上是帶有部分鉸鏈區(qū)的Fab片段(對(duì)于其它抗體片段的更詳細(xì)的說(shuō)明見(jiàn)例如，F(xiàn)undamental Immunology(W.E.Paul，ed.)，Raven Press，N.Y.(1993))。盡管各種抗體片段根據(jù)無(wú)損抗體的消化來(lái)確定，但本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，任何各種抗體片段可以進(jìn)行化學(xué)全合成或通過(guò)利用重組DNA方法學(xué)來(lái)合成。因此，本文所用術(shù)語(yǔ)抗體還包括通過(guò)對(duì)完整抗體的修飾產(chǎn)生的抗體片段、全合成的抗體片段或由重組DNA方法學(xué)獲得的抗體片段。通過(guò)重組技術(shù)產(chǎn)生的抗體片段可能包括通過(guò)蛋白水解酶加工已知的片段或者可能是通過(guò)蛋白水解酶加工不可得到的或迄今未知的獨(dú)特片段。本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)認(rèn)識(shí)到在某些情況下使用抗體片段比使用完整抗體更加有利。例如，抗體片段更小的尺寸允許了快速清除，并且可以導(dǎo)致對(duì)固體腫瘤的進(jìn)入的改善。
T細(xì)胞受體(TcR)是由兩條鏈組成的二硫鍵連接的異二聚體。這兩條鏈通常在緊靠T細(xì)胞質(zhì)膜外側(cè)的短延伸氨基酸段中形成二硫鍵，所述氨基酸段與抗體鉸鏈區(qū)相似。各條TcR鏈由一個(gè)抗體樣可變區(qū)和一個(gè)恒定區(qū)組成。完全TcR具有約95kD的分子量，而個(gè)體鏈的尺寸從35kD～47kD不等。此外，TcR的含義還涵蓋了部分的該受體，諸如，例如可以用本領(lǐng)域公知方法作為可溶性蛋白產(chǎn)生的可變區(qū)。例如，美國(guó)專利第6,080,840號(hào)和A.E.Slanetz和A.L.Bothwell，Eur.J.Immunol.21179-183(1991)對(duì)通過(guò)將TcR的細(xì)胞外區(qū)域剪接到Thy-1的糖基化磷脂酰肌醇(GPI)的膜錨定序列來(lái)制備的可溶T細(xì)胞受體。該分子被在不存在CD3時(shí)表達(dá)在細(xì)胞表面，并且能通過(guò)磷脂酰肌醇特異性磷脂酶(PI-PLC)的處理來(lái)從膜上切割?？扇躎cR還可以通過(guò)將TcR可變域與抗體重鏈CH2域或CH3域進(jìn)行耦合來(lái)制備，基本如美國(guó)專利第5,216,132號(hào)和G.S.Basi等，J.Immunol.Methods 155175-191(1992)中所述，或作為可溶的TcR單鏈來(lái)制備，如E.V.Shusta等，Nat.Biotechnol.18754-759(2000)或P.D.Holler等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.975387-5392(2000)所述。本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式使用TcR“抗體”作為可溶性抗體?？梢酝ㄟ^(guò)使用與如上對(duì)抗體所討論相同的方法通過(guò)參考CDR區(qū)和其它框架殘基來(lái)鑒定TcR的結(jié)合位點(diǎn)。
重組抗體可以是常規(guī)全長(zhǎng)抗體、從蛋白水解酶消化已知的抗體片段、諸如Fv或單鏈Fv(scFv)等抗體片段、諸如VH或VL等單域片段、雙鏈抗體、域缺失抗體、微型抗體等等。Fv抗體的尺寸為約50kD并且包含輕鏈和重鏈的可變區(qū)?？梢詫⑤p鏈和重鏈分別表達(dá)在細(xì)菌中，它們?cè)谄渲薪M裝成Fv片段。替代性的是，可以將兩條鏈工程化以形成鏈間二硫鍵以給出dsFv。單鏈Fv(“scFv”)是包含由介入接頭序列連接的VH和VL序列域的單一多肽，從而當(dāng)該多肽折疊時(shí)所得的三級(jí)結(jié)構(gòu)模擬了抗體結(jié)合位點(diǎn)的結(jié)構(gòu)。見(jiàn)J.S.Huston等，Proc.Nat.Acad.Sci.U.S.A.855879-5883(1988)。單域抗體是抗體的最小功能性結(jié)合單元(尺寸大約13kD)，對(duì)應(yīng)于重VH鏈或輕VL鏈的可變區(qū)。見(jiàn)美國(guó)專利第6,696,245號(hào)、WO04/058821、WO04/003019和WO03/002609。單域抗體在細(xì)菌、酵母菌和其它低等真核生物表達(dá)體系中很好地表達(dá)。域缺失抗體相對(duì)于全長(zhǎng)抗體缺失了諸如CH2等域。在許多情況下這些域缺失抗體特別是CH2缺失抗體相對(duì)于它們的對(duì)應(yīng)物提供了改善的清除。與全長(zhǎng)抗體相似，雙鏈抗體是二價(jià)的。微型抗體時(shí)含有與CH3直接相連或經(jīng)由介入IgG鉸鏈相連的VH、VL或scFv的融合蛋白。見(jiàn)T.Olafsen等，Protein Eng.Des.Sel.17315-323(2004)。與域缺失抗體相似，微型抗體被工程化來(lái)保留了全長(zhǎng)抗體的結(jié)合特異性但由于其更小的分子量從而帶有改善的清除。
已經(jīng)發(fā)展了各種技術(shù)用于產(chǎn)生抗體片段。傳統(tǒng)上，這些片段經(jīng)由無(wú)損抗體的蛋白水解酶消化而產(chǎn)生(見(jiàn)例如，K.Morimoto和K.Inouye，J.Biochem.Biophys.Methods 24107-117(1992)；M.Brennan等，Science22981-83(1985))。然而，現(xiàn)在能通過(guò)重組寄主細(xì)胞來(lái)直接產(chǎn)生這些片段。Fab、Fv和scFv抗體片段都能表達(dá)到大腸桿菌中并從其中分泌出來(lái)，因而使得能輕易產(chǎn)生大量的這些片段?？梢詮纳厦嬗懻摰目贵w噬菌體庫(kù)中分離出抗體片段。替代性的是，可以從大腸桿菌中直接回收Fab′-SH片段并進(jìn)行化學(xué)偶聯(lián)從而形成F(ab′)2片段(P.Carter等，Biotechnology 10163-167(1992))。根據(jù)另一種方法，可以從重組寄主細(xì)胞培養(yǎng)物中直接分離出F(ab′)2片段。在美國(guó)專利第5,869,046號(hào)中對(duì)包含補(bǔ)救受體的結(jié)合表位的帶有增加的體內(nèi)半衰期的Fab和F(ab′)2片段進(jìn)行了說(shuō)明。其它用于產(chǎn)生抗體片段的技術(shù)將對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見(jiàn)。
結(jié)合位點(diǎn)是指參與抗原結(jié)合的抗體分子部分?？贵w結(jié)合位點(diǎn)由重鏈(“H”)和輕鏈(“L”)的N端可變區(qū)(“V”)的氨基酸殘基形成。抗體可變區(qū)包含稱作“高變區(qū)(hypervariable region)”和“互補(bǔ)決定區(qū)”(CDR)的三個(gè)高度發(fā)散性片段，這些高度發(fā)散性片段介于稱作“框架區(qū)”(FR)的更保守的側(cè)翼片段之間。在抗體分子中，輕鏈的三個(gè)高變區(qū)(LCDR1、LCDR2和LCDR3)和重鏈的三個(gè)高變區(qū)(HCDR1、HCDR2和HCDR3)在三維空間中相對(duì)于彼此排列從而形成了抗原結(jié)合表面或抗原結(jié)合口袋。因此，抗體結(jié)合位點(diǎn)代表了構(gòu)成抗體的CDR的氨基酸和構(gòu)成結(jié)合位點(diǎn)口袋的任何框架殘基。
可以使用本領(lǐng)域公知方法來(lái)確定構(gòu)成結(jié)合位點(diǎn)的特定抗體中的氨基酸殘基的身份。例如，可以將抗體CDR鑒定為最初由Kabat等定義的高變區(qū)。見(jiàn)E.A.Kabat等，Sequences of Proteins of ImmunologicalInterest，5th ed.，Public Health Service，NIH，Washington D.C.(1992)。還可以將CDR的位置鑒定為最初由Chothia等說(shuō)明的結(jié)構(gòu)性環(huán)結(jié)構(gòu)。見(jiàn)例如，C.Chothia&A.M.Lesk，J.Mol.Biol.196901-917(1987)；C.Chothia等，Nature 342877-883(1989)；和A.Tramontano等，J.Mol.Biol.215175-182(1990)。其它方法包括“AbM定義”(Kabat與Chothia之間的折衷，使用Oxford Molecular的AbM抗體模擬軟件(現(xiàn)在的Accelrys)來(lái)派生)，或R.M.MacCallum等，J.Mol.Biol.262732-745(1996)中所述的“接觸定義(contact definition)”。下表基于各種已知定義來(lái)鑒定CDR CDR Kabat AbM Chothia 接觸(Contact) L1 L24-L34 L24-L34 L24-L34 L30-L36 L2 L50-L56 L50-L56 L50-L56 L46-L55 L3 L89-L97 L89-L97 L89-L97 L89-L96 H1(Kabat編號(hào)) H31-H35BH26-H35BH26-H32..H34H30-H35B H1(Chothia編號(hào)) H31-H35 H26-H35 H26-H32 H30-H35 H2 H50-H56 H50-H58 H52-H56 H47-H58 H3 H95-H102H95-H102H95-H102H93-H101 可以單獨(dú)從序列鑒定抗體中的CDR的一般方針如下 LCDR1 起始——約24號(hào)殘基。
之前殘基總是Cys。
之后殘基總是Trp，通常繼以Tyr-Gln，但也繼以Leu-Gln、Phe-Gln或Tyr-Leu。
長(zhǎng)度為10～17個(gè)殘基。
LCDR2 起始——L1結(jié)束后16個(gè)殘基。
之前序列通常是Ile-Tyr，但也可以是Val-Tyr、Ile-Lys或Ile-Phe。
長(zhǎng)度通常為7個(gè)殘基。
LCDR3 起始——L2結(jié)束后33個(gè)殘基。
之前殘基是Cys。
之后序列是Phe-Gly-X-Gly。
長(zhǎng)度為7～11個(gè)殘基。
HCDR1 起始——約26號(hào)殘基，Chothia/AbM定義下的Cys后4個(gè)殘基；在Kabat定義下從5個(gè)殘基后起始。
之前序列是Cys-X-X-X。
之后殘基是Trp，通常繼以Val，但也繼以Ile或Ala。
長(zhǎng)度在AbM定義下為10～12個(gè)殘基；Chothia定義排除最后4個(gè)殘基。
HCDR2 起始——Kabat/AbM定義的CDR-H1結(jié)束后15個(gè)殘基。
之前序列通常是Leu-Glu-Trp-Ile-Gly，但可能有一些變化。
之后序列是Lys/Arg-Leu/Ile/Val/Phe/Thr/Ala-Thr/Ser/Ile/Ala。
長(zhǎng)度在Kabat定義下為16～19個(gè)殘基；AbM定義排除最后7個(gè)殘基。
HCDR3 起始——CDR-H2結(jié)束后33個(gè)殘基(Cys后兩個(gè)殘基)。
之前序列是Cys-X-X(通常是Cys-Ala-Arg)。
之后序列是Trp-Gly-X-Gly。
長(zhǎng)度為3～25個(gè)殘基。
可以使用諸如分子模擬和X射線晶體學(xué)等本領(lǐng)域公知方法來(lái)確定處在CDR之外然而卻構(gòu)成結(jié)合位點(diǎn)的一部分的特定抗體中氨基酸殘基的身份，所述氨基酸殘基帶有作為結(jié)合位點(diǎn)的內(nèi)襯(lining)的一部分的側(cè)鏈(即可用于通過(guò)結(jié)合位點(diǎn)的連接)從而構(gòu)成該結(jié)合位點(diǎn)的一部分。見(jiàn)例如，L.Riechmann等，Nature 332323-327(1988)。
如上所討論，可以用于制備基于抗體的GA靶向化合物的抗體需要在抗體結(jié)合位點(diǎn)中的反應(yīng)性側(cè)鏈。反應(yīng)性側(cè)鏈可以天然存在或通過(guò)突變置于抗體中?？贵w結(jié)合位點(diǎn)的反應(yīng)性殘基可能與抗體有關(guān)，諸如當(dāng)所述殘基由存在于淋巴樣細(xì)胞中的核酸編碼時(shí)，所述核酸最初被鑒定以制造所述抗體。替代性的是，氨基酸殘基可以通過(guò)有目的地突變DNA從而編碼特定殘基來(lái)產(chǎn)生(見(jiàn)例如，WO 01/22922)。反應(yīng)性殘基可以為例如通過(guò)使用獨(dú)特密碼子tRNA和本文所討論的氨基?；鵷RNA的生物合成結(jié)合產(chǎn)生的非天然殘基。在另一種方法中，可以將氨基酸殘基或其反應(yīng)性官能團(tuán)(例如，親核氨基或巰基)附加到抗體結(jié)合位點(diǎn)的氨基酸殘基上。因此，本文所用的“通過(guò)抗體結(jié)合位點(diǎn)的氨基酸殘基”產(chǎn)生的與抗體的共價(jià)鍵是指直接或通過(guò)化學(xué)部分與抗體結(jié)合位點(diǎn)的氨基酸殘基的成鍵，所述化學(xué)部分與抗體結(jié)合位點(diǎn)的氨基酸殘基的側(cè)鏈相連。
催化抗體是帶有包含一個(gè)或多個(gè)反應(yīng)性氨基酸側(cè)鏈的結(jié)合位點(diǎn)的抗體的一個(gè)來(lái)源。這種抗體包括醛縮酶抗體、β-內(nèi)酰胺酶抗體、酯酶抗體、酰胺酶抗體等等。
一個(gè)實(shí)施方式包括醛縮酶抗體，諸如小鼠單克隆抗體mAb 38C2或mAb 33F12以及這類抗體適當(dāng)人源化和嵌合形式。小鼠mAb 38C2具有靠近HCDR3但在其外側(cè)的反應(yīng)性賴氨酸，并且是通過(guò)反應(yīng)性免疫和機(jī)理性模擬天然醛縮酶產(chǎn)生的新型催化抗體的原型。見(jiàn)C.F.Barbas3rd等，Science 2782085-2092(1997))?？梢允褂玫钠渌┛s酶催化抗體包括由下列雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體雜交瘤細(xì)胞85A2，ATCC登錄號(hào)為PTA-1015；雜交瘤細(xì)胞85C7，ATCC登錄號(hào)為PTA-1014；雜交瘤細(xì)胞92F9，ATCC登錄號(hào)為PTA-1017；雜交瘤細(xì)胞93F3，ATCC登錄號(hào)為PTA-823；雜交瘤細(xì)胞84G3，ATCC登錄號(hào)為PTA-824；雜交瘤細(xì)胞84G11，ATCC登錄號(hào)為PTA-1018；雜交瘤細(xì)胞84H9，ATCC登錄號(hào)為PTA-1019；雜交瘤細(xì)胞85H6，ATCC登錄號(hào)為PTA-825；雜交瘤細(xì)胞90G8，ATCC登錄號(hào)為PTA-1016。通過(guò)反應(yīng)性賴氨酸，這些抗體使用天然醛縮酶的烯胺機(jī)理催化了羥醛縮合反應(yīng)和逆羥醛縮合反應(yīng)。見(jiàn)例如，J.Wagner等，Science 2701797-1800(1995)；C.F.Barbas 3rd等，Science 2782085-2092(1997)；G.Zhong等，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.383738-3741(1999)；A.Karlstrom等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，973878-3883(2000)。在美國(guó)專利第6,210,938、6,368,839、6,326,176、6,589,766、5,985,626和5,733,757號(hào)中公開(kāi)了醛縮酶抗體和產(chǎn)生醛縮酶抗體的方法。
還可以通過(guò)將GA靶向劑與諸如在硫酯酶催化抗體和酯酶催化抗體的結(jié)合位點(diǎn)中發(fā)現(xiàn)的那些反應(yīng)性半胱氨酸成鍵來(lái)形成GA靶向化合物。K.D.Janda等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.912532-2536(1994)對(duì)合適的硫酯酶催化抗體進(jìn)行了說(shuō)明。P.Wirsching等，Science2701775-1782(1995)對(duì)合適的酯酶抗體進(jìn)行了說(shuō)明。可以通過(guò)本領(lǐng)域公知方法來(lái)制備含有反應(yīng)性氨基酸的抗體，所述方法包括將抗體結(jié)合位點(diǎn)殘基進(jìn)行突變以編碼反應(yīng)性氨基酸或用含有反應(yīng)性基團(tuán)的接頭對(duì)抗體結(jié)合位點(diǎn)的氨基酸側(cè)鏈進(jìn)行化學(xué)衍生化。
在本文中適用的抗體可以通過(guò)常規(guī)免疫、體內(nèi)反應(yīng)性免疫或通過(guò)諸如用噬菌體展示的體外反應(yīng)性選擇來(lái)獲得?？梢栽谌嘶蚱渌鼊?dòng)物物種中產(chǎn)生抗體?？梢詫?lái)自一個(gè)動(dòng)物物種的抗體修飾來(lái)反映另一個(gè)動(dòng)物物種。例如，人嵌合抗體是其中抗體的至少一個(gè)區(qū)來(lái)自人免疫球蛋白的抗體。通常可以理解人嵌合抗體具有來(lái)自例如嚙齒類的非人類動(dòng)物的可變區(qū)以及來(lái)自人的恒定區(qū)。相反，人源化抗體使用來(lái)自非人類抗體的CDR而大多數(shù)或所有的可變框架區(qū)和所有恒定區(qū)都來(lái)自人免疫球蛋白。可以通過(guò)本領(lǐng)域公知方法來(lái)制備嵌合抗體和人源化抗體，所述方法包括CDR接枝法(見(jiàn)例如，N.Hardman等，Int.J.Cancer44424-433(1989)；C.Queen等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.8610029-10033(1989))、鏈改組策略(見(jiàn)例如，Rader等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.958910-8915(1998)、分子模擬策略(見(jiàn)例如，M.A.Roguska等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.91969-973(1994))等等。
在本領(lǐng)域中已經(jīng)對(duì)用于對(duì)非人類抗體進(jìn)行人源化的方法進(jìn)行了說(shuō)明。優(yōu)選的是，人源化抗體具有從非人類的來(lái)源引入到其中的一個(gè)或多個(gè)氨基酸。這些非人類氨基酸殘基通常稱作”引入”殘基，所述”引入”殘基通常取自”引入”可變域。基本上可以遵循Winter等人的方法(見(jiàn)例如，P.T.Jones等，Nature 321522-525(1986)；L.Riechmann等，Nature 332323-327(1988)；M.Verhoeyen等，Science 2391534-1536(1988))通過(guò)用高變區(qū)序列取代人類抗體的對(duì)應(yīng)序列來(lái)進(jìn)行人源化。于是，這種“人源化”抗體是嵌合抗體(S.Cabilly等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.813273-3277(1984))，其中基本上少于一個(gè)無(wú)損人類可變區(qū)被來(lái)自非人類物種的對(duì)應(yīng)序列所取代。在實(shí)踐中，人源化抗體通常是其中某些高變區(qū)殘基和可能某些框架(FR)殘基被嚙齒類抗體的類似位點(diǎn)的殘基所取代的人類抗體。
當(dāng)意圖將抗體用于人的治療用途時(shí)，待用于制造人源化抗體的人類可變域(輕域和重域)的選擇對(duì)于降低抗原性和人抗小鼠抗體(HAMA)應(yīng)答非常重要。根據(jù)稱為“最佳擬合”的方法，用于人源化的人類可變域選自已知域庫(kù)，所述已知域庫(kù)基于與感興趣的嚙齒類可變區(qū)的高度同源性(M.J.Sims等，J.Immunol.，1512296-2308(1993)；M.Chothia和A.M.Lesk，J.Mol.Biol.196901-917(1987))。另一種方法使用了源自特定的輕鏈或重鏈亞組的所有人類抗體共有序列的框架區(qū)。相同框架區(qū)可以用于幾種不同的人源化抗體(見(jiàn)例如，P.Carter等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.894285-4289(1992)；L.G.Presta等，J.Immunol.，1512623-2632(1993))。
此外重要的是在抗體在人源化中保留了對(duì)Z基團(tuán)的高連接親和力。為了達(dá)此目的，根據(jù)一種方法，通過(guò)使用母序列和人源化序列的三維模型來(lái)分析母序列和各種概念性人源化產(chǎn)物來(lái)制備了人源化抗體。三維免疫球蛋白模型通常是本領(lǐng)域技術(shù)人員可以利用并且熟悉的?？梢岳脤?duì)選中的候選免疫球蛋白序列的可能三維構(gòu)象結(jié)構(gòu)進(jìn)行說(shuō)明和展示的計(jì)算機(jī)程序。對(duì)這些展示的檢查使得可以分析殘基在關(guān)于與Z基團(tuán)的連接的候選免疫球蛋白序列的功能中的可能作用。這樣一來(lái)，可以從接受體和引進(jìn)序列選擇和合并FR殘基從而達(dá)到期望的抗體特性，諸如增加的對(duì)靶標(biāo)抗原的親和力。
對(duì)人源化小鼠醛縮酶抗體的各種形式進(jìn)行了仔細(xì)考慮。一個(gè)實(shí)施方式使用了帶有人類恒定區(qū)Cκ和Cγ11的人源化醛縮酶催化抗體h38c2IgG1或h38c2Fab。C.Rader等，J.Mol.Bio.332889-899(2003)公開(kāi)了可以用來(lái)產(chǎn)生h38c2Fab和h38c2IgG1的基因序列和載體。h38c2IgG1的輕鏈和重鏈序列如圖33中所示。圖6顯示了m38c2的可變輕鏈和可變重鏈(分別為SEQ ID NO77和SEQ ID NO78)、h38c2的可變輕鏈和可變重鏈(分別為SEQ ID NO79和SEQ ID NO80)以及人類種系的可變輕鏈和可變重鏈之間的序列比對(duì)。人類種系Vk基因DPK-9(SEQ IDNO81)和人Jk基因JK4(SEQ ID NO83)作為框架用于κ輕鏈可變域的人源化，而人類種系基因DP-47(SEQ ID NO82)和人JH基因JH4(SEQID NO84)作為框架用于m38c2的重鏈可變域的人源化。h38c2也可以使用IgG2、IgG3或IgG4恒定域，包括任何其同種異型(allotype)。h38c2IgG1的一個(gè)實(shí)施方式使用了Glm(f)同種異型。另一個(gè)實(shí)施方式使用了包含h38c2的可變域(VL和VH)和來(lái)自IgG1、IgG2、IgG3或IgG4的恒定域的嵌合抗體。
此外還對(duì)人源化醛縮酶抗體片段的各種形式進(jìn)行了仔細(xì)考慮。一個(gè)實(shí)施方式使用了h38c2F(ab’)2。h38c2F(ab’)2可以通過(guò)h38c2IgG1的蛋白水解酶消化而產(chǎn)生。另一個(gè)實(shí)施方式使用了包含來(lái)自h38c2的VL和VH域的h38c2scFv，所述h38c2的VL和VH域可任選地由介入接頭(Gly4Ser)3相連。
作為人源化的替代方法，可以生成人類抗體。例如，現(xiàn)在可以產(chǎn)生能夠在免疫(或在催化抗體的情形中的反應(yīng)性免疫)時(shí)在不存在內(nèi)源性免疫球蛋白產(chǎn)物下產(chǎn)生全譜(full repertoire)人類抗體的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物(例如，小鼠)。例如，已經(jīng)說(shuō)明了在這些種系的突變小鼠中的嵌合及種系免疫球蛋白基因陣列中抗體重鏈連接區(qū)(JH)基因的純合性缺失會(huì)造成在抗原激發(fā)時(shí)產(chǎn)生人類抗體。見(jiàn)例如，A.Jakobovits等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.902551-2555(1993)；A.Jakobovits等，Nature362255-258(1993)；M.Bruggemann等，Year Immunol.733-40(1993)；L.D.Taylor，等Nucleic Acids Res.206287-6295(1992)；M.Bruggemann等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.866709-6713(1989))；和WO 97/17852。
與典型的抗體的化學(xué)衍生物不同，源自免疫的抗體衍生物可以在其結(jié)合位點(diǎn)中在特定位置被特異性標(biāo)記，從而有助于快速和受控地制備均質(zhì)產(chǎn)物。此外，與抗體的化學(xué)衍生物不同，源自用1，3-二酮的反應(yīng)性免疫的抗體衍生物是可逆的。由于該可逆性，可以通過(guò)與共價(jià)結(jié)合半抗原JW(see J.Wagner等，Science 2701797-1800(1995))或相關(guān)化合物的競(jìng)爭(zhēng)從抗體中釋放與mAb 38C2結(jié)合的GA靶標(biāo)化合物的二酮衍生物。這使得在不良反應(yīng)的情況下在體內(nèi)能夠立刻中和偶聯(lián)物。替代性的是，非可逆共價(jià)鍵是可能的，諸如與醛縮酶抗體和靶向化合物的β內(nèi)酰胺衍生物的共價(jià)鍵。與典型抗半抗原抗體不同，共價(jià)二酮結(jié)合的抗體具有形成于二酮與抗體之間的共價(jià)鍵處在pH 3～pH11之間的優(yōu)勢(shì)。與其靶向劑共價(jià)相連的抗體穩(wěn)定性的增加在配方、傳輸和長(zhǎng)期儲(chǔ)存方面提供了額外的優(yōu)勢(shì)。
替代性的是，可以使用噬菌體展示技術(shù)(見(jiàn)例如，J.McCafferty等，Nature 348552-553(1990))來(lái)用來(lái)自未免疫的供體的免疫球蛋白可變(V)域基因譜來(lái)在體外產(chǎn)生人類抗體和抗體片段。根據(jù)該技術(shù)，將抗體V域基因符合讀框地(in-frame)克隆到諸如M13或fd等絲狀噬菌體的主要衣殼蛋白基因或次要衣殼蛋白基因中，并作為功能性抗體片段展示在該噬菌體顆粒的表面上。由于絲狀噬菌體顆粒含有噬菌體基因組的單鏈DNA復(fù)本，基于抗體的功能性質(zhì)的選擇也造成了對(duì)展現(xiàn)了這些性質(zhì)的抗體進(jìn)行編碼的基因的選擇。因此，該噬菌體模擬了B細(xì)胞的某些性質(zhì)。噬菌體展示可以在多種形式中進(jìn)行，在例如K.S.Johnson和D.J.Chiswell，Curr.Opin.Struct.Biol.3564-571(1993)中進(jìn)行了綜述。V基因片段的幾種來(lái)源可以用于噬菌體展示。T.Clackson等，Nature352624-628(1991)從源自免疫小鼠的脾臟的V基因的小隨機(jī)組合庫(kù)中分離出了多種抗噁唑酮抗體陣列?？梢詷?gòu)建來(lái)自未免疫的人類供體的V基因譜，并且可以基本遵循J.D.Marks等，J.Mol.Biol.222581-597(1991)或A.D.Griffiths等，EMBO J.12725-734(1993)所述的技術(shù)來(lái)對(duì)抗多種抗原陣列(包括自身抗原)的抗體進(jìn)行分離。也見(jiàn)美國(guó)專利第5,565,332和5,573,905號(hào)；和L.S.Jespers等，Biotechnology 12899-903(1994)。
如上所表明，人類抗體也可以由體外激活的B細(xì)胞產(chǎn)生。見(jiàn)例如，美國(guó)專利第5,567,610和5,229,275；和C.A.K.Borrebaeck等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.853995-3999(1988)。
對(duì)本文所述的抗體的氨基酸序列修飾進(jìn)行了仔細(xì)考慮。例如，可能理想的是改善抗體的結(jié)合親和力和/或其它生物性質(zhì)?？贵w的氨基酸序列變異體通過(guò)在抗體核酸中引入適當(dāng)?shù)暮塑账岣淖兓蛲ㄟ^(guò)多肽合成來(lái)制備。這些修飾包括例如，對(duì)抗體的氨基酸序列內(nèi)的殘基的缺失、插入和/或取代?？蛇M(jìn)行任何組合的缺失、插入和取代來(lái)到達(dá)最終構(gòu)建體，只要最終構(gòu)建體擁有期望的特性即可。氨基酸變化也改變了抗體的翻譯后過(guò)程，諸如改變了糖基化位點(diǎn)的數(shù)目或位置。
用于鑒定作為優(yōu)選的突變位置的抗體的特定殘基或區(qū)域的有用方法稱作“丙氨酸掃描突變”，如B.C.Cunningham&J.A.Wells，Science2441081-1085(1989)中所述。此處，鑒定了目標(biāo)殘基的殘基或基團(tuán)(例如，諸如Arg、Asp、His、Lys和Glu等帶電荷的殘基)并將其用中性氨基酸或帶負(fù)電荷的氨基酸(最優(yōu)選Ala或聚丙氨酸)替代從而影響氨基酸與接頭的Z基團(tuán)的相互作用。然后通過(guò)在取代位點(diǎn)處進(jìn)一步引入突變體或引入其它突變體來(lái)對(duì)顯示出對(duì)取代的功能性敏感性的那些氨基酸位置進(jìn)行細(xì)化。因此，盡管預(yù)先確定了用于引入氨基酸序列變化的位點(diǎn)，突變本身的性質(zhì)不需要預(yù)先確定。例如，為了分析給定位點(diǎn)處的突變的表現(xiàn)，在靶標(biāo)密碼子或靶標(biāo)區(qū)域進(jìn)行了丙氨酸掃描突變或隨機(jī)突變，然后將表達(dá)的抗體變異體對(duì)其與Z形成共價(jià)鍵的能力進(jìn)行篩選。
氨基酸序列插入包括長(zhǎng)度范圍從一個(gè)殘基到含一百個(gè)以上殘基的多肽的氨基端融合和/或羧基端融合，以及單個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基的序列內(nèi)插入。末端插入的實(shí)例包括帶有N端甲硫氨?；目贵w或與細(xì)胞毒性多肽融合的抗體。其它抗體分子的插入性變異體包括抗體的N端或C端與酶或增加抗體的血清半衰期的多肽的融合體。
另一種變異體類型是氨基酸取代變異體。這些變異體具有由不同殘基替代的抗體分子中的至少一個(gè)氨基酸殘基。對(duì)于取代性突變最感興趣的位點(diǎn)包括高變區(qū)，但也考慮了FR改變。標(biāo)題為“優(yōu)選取代”的下表中顯示了保守性突變。如果這些突變?cè)斐闪松锘钚缘母淖?，則可以引入在下面參考氨基酸類型進(jìn)一步說(shuō)明的名為“示例性取代”的更實(shí)質(zhì)性的變化并對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行篩選。
通過(guò)選擇取代來(lái)實(shí)現(xiàn)了抗體生物性質(zhì)的實(shí)質(zhì)性修飾，所述取代在其保持(a)取代區(qū)域中的多肽主鏈結(jié)構(gòu)，例如折疊構(gòu)象或螺旋構(gòu)象，(b)靶標(biāo)位點(diǎn)處分子的電荷或疏水性，或(c)側(cè)鏈的體積的效果上有顯著差別。將天然存在的殘基基于普通側(cè)鏈性質(zhì)進(jìn)行分組 (1)疏水殘基Nle、Met、Ala、Val、Leu、Ile； (2)中性親水殘基Cys、Ser、Thr； (3)酸性殘基Asp、Glu； (4)堿性殘基Asn、Gln、His、Lys、Arg； (5)影響鏈取向的殘基Gly、Pro；和 (6)芳香殘基Trp、Tyr、Phe。
非保守性取代將承擔(dān)以這些類型之一的成員對(duì)另一類的成員的交換。
通?？梢杂媒z氨酸取代不參與保持抗體的正確構(gòu)象的半胱氨酸殘基來(lái)改善分子的氧化穩(wěn)定性并防止異常交聯(lián)。反之，可以將半胱氨酸鍵加入抗體中來(lái)改善其穩(wěn)定性(特別是當(dāng)抗體是諸如Fv片段等抗體片段時(shí))。
一類取代性變異體涉及對(duì)母抗體的一個(gè)或多個(gè)高變區(qū)殘基的取代(例如，人源化抗體或人類抗體)。通常，選用于進(jìn)一步開(kāi)發(fā)的所得變異體將具有相對(duì)于產(chǎn)生其的母抗體的改善的生物性質(zhì)。產(chǎn)生這類取代性變異體的便利方法涉及使用噬菌體展示的親和力成熟。簡(jiǎn)言之，將幾個(gè)高變區(qū)位點(diǎn)(例如，6～7個(gè)位點(diǎn))突變來(lái)在各個(gè)位點(diǎn)處產(chǎn)生所有可能的氨基酸取代。將如此產(chǎn)生的抗體突變體以單價(jià)形式作為與各顆粒內(nèi)封裝的M13的基因III產(chǎn)物的融合體來(lái)從絲狀噬菌體進(jìn)行展示。然后如本文所公開(kāi)將噬菌體展示的變異體對(duì)其生物活性(例如，結(jié)合親和力)進(jìn)行篩選。為了鑒定修飾用的候選高變區(qū)位點(diǎn)，可以進(jìn)行丙氨酸掃描突變以便鑒定對(duì)抗原結(jié)合有顯著貢獻(xiàn)的高變區(qū)殘基。替代性的是，或此外，可能有利的是對(duì)抗原偶聯(lián)物復(fù)合體的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析以便鑒定抗原和Z基團(tuán)之間的接觸點(diǎn)。這些接觸殘基和臨近殘基是用于根據(jù)本文闡述的技術(shù)的取代的候選物。一旦產(chǎn)生了這些變異體，如本文所述對(duì)全體變異體進(jìn)行篩選并且可以選出具有在一個(gè)或多個(gè)相關(guān)測(cè)試中的優(yōu)越性質(zhì)的抗體用于進(jìn)一步開(kāi)發(fā)。
另一類抗體的氨基酸變異體通過(guò)缺失發(fā)現(xiàn)于抗體中的一個(gè)或多個(gè)糖基和/或添加抗體中不存在的一個(gè)或多個(gè)糖基化位點(diǎn)來(lái)改變了抗體的原始糖基化格局。
抗體的糖基化通常為N-連接或O-連接的。N-連接是指糖部分與天冬酰胺殘基的側(cè)鏈的連接。三肽序列Asn-X-Ser和Asn-X-Thr是用于糖基和天冬酰胺側(cè)鏈的酶促連接的識(shí)別序列，其中X是除脯氨酸外的任何氨基酸。因此，這些三肽序列中任一個(gè)在多肽中的存在創(chuàng)造了潛在糖基化位點(diǎn)。O-連接糖基化是指N-乙酰半乳糖胺、半乳糖等糖之一與羥基氨基酸(最常見(jiàn)為絲氨酸或蘇氨酸，但也可以使用5-羥基脯氨酸或5-羥基賴氨酸)的連接。
通過(guò)改變氨基酸序列從而其含有一個(gè)或多個(gè)上述三肽序列可以方便地實(shí)現(xiàn)在抗體中添加糖基化位點(diǎn)(用于N-連接的糖基化位點(diǎn))。也可以通過(guò)在原始抗體序列中以一個(gè)或多個(gè)絲氨酸或蘇氨酸殘基來(lái)添加或取代從而進(jìn)行改變(用于O-連接的糖基化位點(diǎn))。
理想的是根據(jù)效應(yīng)子功能來(lái)修飾本發(fā)明的抗體，例如以便增強(qiáng)或降低抗體的抗原依賴性細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞毒性(ADCC)和/或補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒性(CDC)。這可以通過(guò)在抗體的Fc區(qū)中引入一個(gè)或多個(gè)氨基酸取代來(lái)實(shí)現(xiàn)。替代性的是，可以對(duì)具有雙Fc區(qū)并可能從而具有增強(qiáng)的補(bǔ)體溶血能力和ADCC能力的抗體進(jìn)行工程化。見(jiàn)G.T.Stevenson等，Anticancer Drug Des.3219-230(1989)。
為了增加抗體的血清半衰期，可以在抗體(尤其是抗體片段)內(nèi)加入補(bǔ)救受體結(jié)合表位，例如美國(guó)專利第5,739,277號(hào)中所述。如本文所用，術(shù)語(yǔ)“補(bǔ)救受體結(jié)合表位”是指IgG分子(例如，IgG1、IgG2、IgG3或IgG4)的Fc區(qū)的表位，該表位負(fù)責(zé)增加所述IgG分子的體內(nèi)血清半衰期。


接頭和連接化合物 本文所述GA靶向劑可以直接或經(jīng)由接頭來(lái)與抗體結(jié)合位點(diǎn)共價(jià)連接?？梢赃x擇合適的接頭以便在靶向劑與抗體之間提供足夠的距離。式X-Y-Z中顯示了用于制備GA靶向化合物的接頭的一個(gè)實(shí)施方式的一般設(shè)計(jì)，其中X是連接鏈，Y是識(shí)別基團(tuán)而Z是反應(yīng)性基團(tuán)。接頭可以是直鏈或支鏈的，并且任選地包括一個(gè)或多個(gè)碳環(huán)基或雜環(huán)基?？梢愿鶕?jù)直鏈原子的數(shù)目來(lái)查看接頭的長(zhǎng)度，而通過(guò)選取沿環(huán)的最短路徑來(lái)對(duì)諸如芳香環(huán)等環(huán)形基團(tuán)進(jìn)行計(jì)數(shù)。在某些實(shí)施方式中，接頭具有5～15個(gè)原子之間的直鏈段，在其它實(shí)施方式中為15～30個(gè)原子，在再有其它實(shí)施方式中為30～50個(gè)原子，在再有其它實(shí)施方式中為50～100個(gè)原子，而在再有其它實(shí)施方式中為100～200個(gè)原子。其它對(duì)接頭的考慮包括所得GA靶向化合物或GA靶向劑-接頭在物理性質(zhì)或藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)上的效果、溶解性、親脂性、親水性、疏水性、穩(wěn)定性(更穩(wěn)定或更不穩(wěn)定以及計(jì)劃性降解)、剛性、柔性、免疫原性、抗體結(jié)合的調(diào)節(jié)、進(jìn)入膠束或脂質(zhì)體內(nèi)的能力等等。
接頭的連接鏈X包含來(lái)自C、H、N、O、P、S、鹵素(F、Cl、Br、I)的任何原子或其鹽。X還可以包含諸如烷基、烯基、炔基、氧代烷基、氧代烯基、氧代炔基、氨基烷基、氨基烯基、氨基炔基、硫代烷基、硫代烯基、硫代炔基、磷酸烷基、磷酸烯基或磷酸炔基等基團(tuán)。在某些實(shí)施方式中，X可以包含一個(gè)或多個(gè)環(huán)結(jié)構(gòu)。在某些實(shí)施方式中，接頭是諸如包含2～100個(gè)單元的聚乙烯醇等重復(fù)聚合物。
接頭的識(shí)別基團(tuán)Y是可選的，并且在存在時(shí)位于反應(yīng)性基團(tuán)和連接鏈之間。在某些實(shí)施方式中，Y的位置遠(yuǎn)離Z有1～20個(gè)原子。盡管不希望受任何理論越是，據(jù)信識(shí)別基團(tuán)起著將反應(yīng)性基團(tuán)正確定位到抗體結(jié)合位點(diǎn)中從而該反應(yīng)性基團(tuán)可以與反應(yīng)性氨基酸側(cè)鏈進(jìn)行反應(yīng)的作用。識(shí)別基團(tuán)的實(shí)例包括優(yōu)選具有5個(gè)或6個(gè)原子的碳環(huán)和雜環(huán)。然而，也可以使用更大的環(huán)結(jié)構(gòu)。在某些實(shí)施方式中，沒(méi)有使用介入接頭而將GA靶向劑與Y直接相連。
Z能夠與抗體結(jié)合位點(diǎn)的反應(yīng)性側(cè)鏈形成共價(jià)鍵。在某些實(shí)施方式中，Z包含一個(gè)或多個(gè)C＝O基團(tuán)，所述C＝O基團(tuán)被安排來(lái)形成二酮、?；?β-內(nèi)酰胺、活性酯、鹵代酮、環(huán)己基二酮基、醛、馬來(lái)酰亞胺、活化烯、活化炔或一般而言的包含易于被親和取代或親電取代的離去基團(tuán)的分子。其它基團(tuán)可能包括內(nèi)酯、酸酐、α-鹵代乙酰胺、亞胺、酰肼或環(huán)氧化物。能與抗體結(jié)合位點(diǎn)中的反應(yīng)性親核基團(tuán)(例如，賴氨酸或半胱氨酸側(cè)鏈)共價(jià)鍵合的接頭親電反應(yīng)性基團(tuán)的實(shí)例包括?；?β-內(nèi)酰胺、簡(jiǎn)單二酮、琥珀酰亞胺活性酯、馬來(lái)酰亞胺、帶接頭的鹵代乙酰胺、鹵代酮、環(huán)己基二酮、醛、脒、胍、亞胺、烯胺、磷酸酯、膦酸酯、環(huán)氧化物、氮雜環(huán)丙烷、硫代環(huán)氧化物、掩蔽二酮或保護(hù)二酮(例如縮酮)、內(nèi)酰胺、磺酸酯等等，掩蔽的C＝O基團(tuán)諸如亞胺、縮酮、縮醛和任何其它已知親電基團(tuán)。在一個(gè)實(shí)施方式中，反應(yīng)性基團(tuán)包括一個(gè)或多個(gè)C＝O基團(tuán)，所述C＝O基團(tuán)被安排來(lái)形成?；?β-內(nèi)酰胺、簡(jiǎn)單二酮、琥珀酰亞胺活性酯、馬來(lái)酰亞胺、帶接頭的鹵代乙酰胺、鹵代酮、環(huán)己基二酮或醛。
選擇接頭反應(yīng)性基團(tuán)或相似的這類反應(yīng)性基團(tuán)來(lái)與特定結(jié)合位點(diǎn)中的反應(yīng)性殘基一起使用。例如，用于由醛縮酶抗體修飾的化學(xué)部分可以是酮、二酮、β-內(nèi)酰胺、活性酯鹵代酮、內(nèi)酯、酸酐、馬來(lái)酰亞胺、α-鹵代乙酰胺、環(huán)己基二酮、環(huán)氧化物、醛、脒、胍、亞胺、烯胺、磷酸酯、膦酸酯、環(huán)氧化物、氮雜環(huán)丙烷、硫代環(huán)氧化物、掩蔽二酮或保護(hù)二酮(例如縮酮)、內(nèi)酰胺、鹵代酮、醛等等。
適用于由抗體中的反應(yīng)性巰基共價(jià)修飾的接頭反應(yīng)性基團(tuán)的化學(xué)部分可以是二硫化物、芳基鹵化物、馬來(lái)酰亞胺、α-鹵代乙酰胺、異氰酸酯、環(huán)氧化物、硫酯、活性酯、脒、胍、亞胺、烯胺、磷酸酯、膦酸酯、環(huán)氧化物、氮雜環(huán)丙烷、硫代環(huán)氧化物、掩蔽二酮或保護(hù)二酮(例如縮酮)、內(nèi)酰胺、鹵代酮、醛等等。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將易于理解，抗體結(jié)合位點(diǎn)的反應(yīng)性氨基酸側(cè)鏈可以擁有與GA靶向劑或其接頭上的親核基團(tuán)進(jìn)行反應(yīng)的親電基團(tuán)，然而在其它實(shí)施方式中氨基酸側(cè)鏈中的反應(yīng)性親核基團(tuán)與GA靶向劑或接頭中的親電基團(tuán)進(jìn)行反應(yīng)。
可以通過(guò)幾種方法來(lái)制備GA靶向化合物。在一種方法中，用接頭合成了GA靶向劑-接頭化合物，所述接頭包含設(shè)計(jì)用于與抗體結(jié)合位點(diǎn)的氨基酸側(cè)鏈的共價(jià)反應(yīng)的一個(gè)或多個(gè)反應(yīng)性基團(tuán)。將靶向劑-接頭化合物與抗體在其中接頭反應(yīng)性基團(tuán)與氨基酸側(cè)鏈形成共價(jià)鍵的條件下混合。
在另一種方法中，可以通過(guò)合成包含抗體和接頭的抗體-接頭化合物來(lái)實(shí)現(xiàn)連接，其中所述接頭包含設(shè)計(jì)用于與合適的GA靶向劑的化學(xué)部分的共價(jià)反應(yīng)的一個(gè)或多個(gè)反應(yīng)性基團(tuán)?？赡苄枰獙?duì)GA靶向劑進(jìn)行修飾以便為與接頭反應(yīng)性基團(tuán)的反應(yīng)提供合適的部分。將抗體-接頭和GA靶向劑在其中接頭反應(yīng)性基團(tuán)與靶向劑和/或生物劑共價(jià)連接的條件下混合。
用于形成抗體-GA靶向化合物的另一種方法使用了雙接頭設(shè)計(jì)。在一個(gè)實(shí)施方式中，合成了包含GA靶向劑和帶有反應(yīng)性基團(tuán)的接頭的GA靶向劑-接頭化合物。接著合成了包含抗體和帶有易于與第一步的GA靶向劑-接頭的反應(yīng)性基團(tuán)反應(yīng)的化學(xué)基團(tuán)的接頭的抗體-接頭化合物。然后將這兩個(gè)含接頭的化合物在其中接頭共價(jià)相連的條件下混合，從而形成了抗體-GA靶向化合物。
能參與成鍵的官能團(tuán)的實(shí)例包括例如，酯基、酰胺基、醚基、磷酸基、氨基、酮基、脒、胍基、亞胺、烯胺、磷酸酯、膦酸酯、環(huán)氧化物、氮雜環(huán)丙烷、硫代環(huán)氧化物、掩蔽二酮或保護(hù)二酮(例如縮酮)、內(nèi)酰胺、鹵代酮、醛、硫代氨基甲酸酯、硫代酰胺、硫酯、硫化物、二硫化物、磷酰胺、磺酰胺、脲、硫脲、氨基甲酸酯、碳酸酯、羥基酰胺(hydroxyamide)等等。
接頭包含來(lái)自C、H、N、O、P、S、鹵素(F、C1、Br、I)的任何原子或其鹽。接頭還可以包含諸如烷基、烯基、炔基、氧代烷基、氧代烯基、氧代炔基、氨基烷基、氨基烯基、氨基炔基、硫代烷基、硫代烯基、硫代炔基、磷酸烷基、磷酸烯基或磷酸炔基等基團(tuán)。接頭還可以包含一個(gè)或多個(gè)環(huán)結(jié)構(gòu)。如本文所用“環(huán)結(jié)構(gòu)”包括飽和碳環(huán)、不飽和碳環(huán)和芳香碳環(huán)以及飽和雜環(huán)、不飽和雜環(huán)和芳香雜環(huán)。環(huán)結(jié)構(gòu)可以為單環(huán)、雙環(huán)或多環(huán)，并且包括稠環(huán)和非稠環(huán)。此外，環(huán)結(jié)構(gòu)任選地被本領(lǐng)域公知的官能團(tuán)所取代，所述官能團(tuán)包括但不限于鹵素、氧代、-OH、-CHO、-COOH、-NO2、-CN、-NH2、-C(O)NH2、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6氧代烷基、氧代烯基、氧代炔基、氨基烷基、氨基烯基、氨基炔基、硫代烷基、硫代烯基、硫代炔基、磷酸烷基、磷酸烯基或磷酸炔基。以上基團(tuán)和環(huán)的組合也可以存在于GA靶向化合物的接頭中。
本發(fā)明的一方面是具有式I的GA靶向劑-接頭偶聯(lián)物 L-[GA靶向劑](I) 其中[GA靶向劑]是GA靶向劑肽。合適的GA靶向劑肽包括但不限于SEQ ID NO1、SEQ ID NO2和SEQ ID NO1或SEQ ID NO2的類似物(包括例如羧基截短物或突變體)以及本文所述的GA靶向化合物。
接頭部分L可以與GA靶向劑的羧基端或者其氨基酸側(cè)的任何親電側(cè)鏈或親核側(cè)鏈相連。L與GA靶向劑的連接點(diǎn)在本文中稱作“系縛點(diǎn)(tethering point)”。
在某些實(shí)施方式中，L與GA靶向劑中的氨基酸的親核側(cè)鏈或親電側(cè)鏈相連。親核側(cè)鏈的實(shí)例是Lys、Cys、Ser、Thr和Tyr。在其中L與親核側(cè)鏈相連的那些實(shí)施方式中，L應(yīng)該包含易于與所述親核側(cè)鏈進(jìn)行共價(jià)反應(yīng)的親電基團(tuán)。親電側(cè)鏈的實(shí)例是Asp和Glu。在其中L與親電側(cè)鏈相連的那些實(shí)施方式中，L應(yīng)該包含易于與所述親電側(cè)鏈進(jìn)行共價(jià)反應(yīng)的親核基團(tuán)。
在其中L與GA靶向劑的氨基酸(連接殘基)的親核側(cè)鏈相連的某些實(shí)施方式中，L與Lys殘基的親核側(cè)鏈相連。在這些實(shí)施方式中的某些之中，所述Lys殘基是SEQ ID NO1的20位或28位殘基，或者SEQ IDNO2的12位或27位殘基。在某些其它實(shí)施方式中，SEQ ID NO1或SEQ ID NO2或其類似物的GA靶向劑的羧基端插入了Lys殘基，并且接頭L與該額外氨基酸的側(cè)鏈共價(jià)相連。例如，在一個(gè)實(shí)施方式中，GA靶向劑是 HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(SEQID NO3)，或 HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(SEQ ID NO4)。
SEQ ID NO3與SEQ ID NO2相同，除了在該多肽的羧基端插入了Lys殘基。SEQ ID NO4與SEQ ID NO3相同，除了以Aib2取代了2位的Gly殘基。
包含基于SEQ ID NO3或SEQ ID NO4的靶向劑的式I的化合物的實(shí)例包括但不限于 HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(L)(SEQ ID NO166)； HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(L)(SEQ ID NO167)；和 R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGK-R2(SEQ IDNO30)。
在某些其它實(shí)施方式中，在SEQ ID NO1或SEQ ID NO2或其類似物的內(nèi)部位置處以Lys殘基插入或取代，并且接頭L與該額外氨基酸的側(cè)鏈共價(jià)相連。這些實(shí)施方式的實(shí)例如下表II中所示。在充當(dāng)接頭L的連接的系縛點(diǎn)的插入Lys殘基下劃線。
表II 帶有賴氨酸取代的基于SEQ ID NO1和SEQ ID NO2的GA靶向劑 R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPKS-R2(SEQ ID NO14) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAKPPS-R2(SEQ ID NO15) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSKAPPPS-R2(SEQ ID NO16) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPKSGAPPPS-R2(SEQ ID NO17) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKKGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO18) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWKKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO19) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIKWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO20) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFKEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO21) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO22) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVKLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO23) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAKRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO24) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEKAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO25) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEKEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO26) R1-HAibEGTFTSDLSKQKEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO27) R1-HAibEGTFTSDLSKKMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO28) R1-HAibEGTFTSDLKKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO29) R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLKNGGPSS-R2(SEQ ID NO31) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEKQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO47) R1-HAibEGTFTSDKSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO64) R1-HAibEGTFTSDVSKYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO65) R1-HAibEGTFTSDVSSYKEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO66) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEKQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO67) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQKVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO68) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEKIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO69) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIKWLIKAibR-R2(SEQ ID NO70) R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWKIKAibR-R2(SEQ ID NO71) 在其中接頭L與GA靶向肽中的Lys殘基共價(jià)連接的那些實(shí)施方式中，該Lys殘基可以是側(cè)鏈修飾的Lys。在這些實(shí)施方式中的某些之中，側(cè)鏈修飾的Lys是
在式I的化合物中，L是具有式-X-Y-Z的接頭部分，其中 X是與構(gòu)成GA靶向劑的殘基之一相連的生物相容性聚合物或嵌段共聚物； Y是任選地存在的包含至少一個(gè)環(huán)結(jié)構(gòu)的識(shí)別基團(tuán)；和 Z是與抗體結(jié)合位點(diǎn)的側(cè)鏈共價(jià)連接的反應(yīng)性基團(tuán)。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X是 -R22-P-R23-或-R22-P-R21-P’-R23- 其中 P和P’獨(dú)立地選自聚氧化烯氧化物(諸如聚氧化乙烯、聚乙基噁唑啉、聚-N-乙烯基吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚丙烯酸羥乙酯、聚甲基丙烯酸羥乙酯和聚丙烯酰胺)、在聚合物主鏈或聚合物側(cè)鏈上帶有氨基的聚胺(諸如聚賴氨酸、聚鳥(niǎo)氨酸、聚精氨酸和聚組氨酸)、非肽聚胺(諸如聚氨基苯乙烯、聚氨基丙烯酸酯、聚(N-甲基氨基丙烯酸酯)、聚(N-乙基氨基丙烯酸酯)、聚(N，N-二甲基氨基丙烯酸酯)、聚(N，N-二乙基氨基丙烯酸酯)、聚(氨基甲基丙烯酸酯)、聚(N-甲基氨基甲基丙烯酸酯)、聚(N-乙基氨基甲基丙烯酸酯)、聚(N，N-二甲基氨基甲基丙烯酸酯)、聚(N，N-二乙基氨基甲基丙烯酸酯)、聚乙烯亞胺)、季胺聚合物(諸如聚(氯化N，N，N-三甲基氨基丙烯酸酯)、聚(氯化甲基丙烯酰胺基丙基三甲基銨))、蛋白多糖(諸如硫酸軟骨素-A(4-硫酸鹽)、硫酸軟骨素-C(6-硫酸鹽)和硫酸軟骨素-B)、多肽(諸如聚絲氨酸、聚蘇氨酸、聚谷氨酰胺)、天然或合成多糖(諸如殼聚糖、羥乙基纖維素)和脂類； R21、R22和R23各自獨(dú)立地為共價(jià)鍵、-O-、-S-、-NRb-、取代或未取代的直鏈或支鏈C1-50亞烷基或者取代或未取代的直鏈或支鏈C1-50雜亞烷基； Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基；且 選擇R21、R22和R23從而使得X的主鏈長(zhǎng)度保持為約200個(gè)原子或200個(gè)原子以下。
在式I的混合物的某些實(shí)施方式中，R22是-(CH2)v-、-(CH2)u-C(O)-(CH2)v-、-(CH2)u-C(O)-O-(CH2)v-、-(CH2)u-C(S)-NRb-(CH2)v-、-(CH2)u-C(O)-NRb-(CH2)v-、-(CH2)u-NRb-(CH2)v-、-(CH2)u-O-(CH2)v-、-(CH2)u-S(O)0-2-(CH2)v-、-(CH2)u-S(O)0-2-NRb-(CH2)v-或-(CH2)u-P(O)(ORb)-O-(CH2)v-，其中u和v各自獨(dú)立地為0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20。
在式I的化合物的其它實(shí)施方式中，R22是-(CH2)v-、-(CH2)u-C(O)-(CH2)v-、-(CH2)u-C(O)-O-(CH2)v-、-(CH2)u-C(O)-NRb-(CH2)v-或-(CH2)u-NRb-(CH2)v。在其它實(shí)施方式中，R22是-(CH2)u-C(O)-NRb-(CH2)v-。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，R21和R23各自獨(dú)立地為-(CH2)s-、-(CH2)r-C(O)-(CH2)s-、-(CH2)r-C(O)-O-(CH2)v-、-(CH2)r-C(S)-NRb-(CH2)s-、-(CH2)r-C(O)-NRb-(CH2)s-、-(CH2)r-NRb-(CH2)s-、-(CH2)r-O-(CH2)s-、-(CH2)r-S(O)0-2-(CH2)s-、-(CH2)r-S(O)0-2-NRb-(CH2)s-或-(CH2)r-P(O)(ORb)-O-(CH2)s-，其中r、s和v各自獨(dú)立地為0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20。
在其它實(shí)施方式中，R21和R23各自獨(dú)立地為-(CH2)s-、-(CH2)r-C(O)-(CH2)s-、-(CH2)r-C(O)-O-(CH2)s-、-(CH2)r-C(O)-NRb-(CH2)s-或-(CH2)r-NRb-(CH2)s和-(CH2)r-C(O)-NRb-(CH2)s-。
在其它實(shí)施方式中，R21和R23各自獨(dú)立地具有結(jié)構(gòu)
其中p是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、32、43、44或45；w、r和s各自獨(dú)立地為0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X具有結(jié)構(gòu)
其中H1和H1’在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為N、O、S或CH2；r和s各自獨(dú)立地為1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20；t和t’各自獨(dú)立地為0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、32、43、44、45、46、47、48、49或50；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X具有結(jié)構(gòu)
其中H1和H1’在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為N、O、S或CH2；r和s各自獨(dú)立地為1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20；t和t’各自獨(dú)立地為0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、32、43、44、45、46、47、48、49或50；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X具有結(jié)構(gòu)
其中H1和H1’在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為N、O、S或CH2；r和s各自獨(dú)立地為1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20；t和t’各自獨(dú)立地為0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、32、43、44、45、46、47、48、49或50；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X具有結(jié)構(gòu)
其中H1和H1’在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為N、O、S或CH2；r和s各自獨(dú)立地為1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20；t和t’各自獨(dú)立地為0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、32、43、44、45、46、47、48、49或50；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X具有結(jié)構(gòu)
其中H1和H1’在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為N、O、S或CH2；r和s各自獨(dú)立地為1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20；t和t’各自獨(dú)立地為0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、32、43、44、45、46、47、48、49或50；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X具有結(jié)構(gòu)
其中H1和H1’在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為N、O、S或CH2；r和s各自獨(dú)立地為1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20；t和t’各自獨(dú)立地為0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、32、43、44、45、46、47、48、49或50；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X具有結(jié)構(gòu)
其中H1和H1’在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為N、O、S或CH2；r和s各自獨(dú)立地為1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20；t和t’各自獨(dú)立地為0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、32、43、44、45、46、47、48、49或50；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X具有結(jié)構(gòu)
其中v和w各自獨(dú)立地為1、2、3、4或5且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是1、2或3，w是1、2或3，且Rb是氫。
在式I的某些實(shí)施方式中，L是具有式X-Y-Z的接頭部分，其中 X與構(gòu)成GA靶向劑的殘基之一相連，且任選地由-R22-[CH2-CH2-O]t-R23-、-R22-環(huán)烷基-R23-、-R22-芳基-R23-或-R22-雜環(huán)基-R23-取代，其中 R22和R23各自獨(dú)立地為共價(jià)鍵、-O-、-S-、-NRb-、取代或未取代的直鏈或支鏈C1-50亞烷基、取代或未取代的直鏈或支鏈C1-50雜亞烷基、取代或未取代的直鏈或支鏈C2-50亞烯基或者取代或未取代的C2-50雜亞烯基； Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基； t是0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、32、43、44、45、46、47、48、49或50； 且R22和R23的尺寸使得X的主鏈長(zhǎng)度保持在約200個(gè)原子或約200個(gè)原子以下； Y是任選地存在的包含至少一個(gè)環(huán)結(jié)構(gòu)的識(shí)別基團(tuán)；且 Z是能夠與抗體結(jié)合位點(diǎn)的側(cè)鏈共價(jià)相連的反應(yīng)性基團(tuán)。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，如果t＞1或如果-X是-R22-環(huán)烷基-R23-、-R22-芳基-R23-或-R22-雜環(huán)基-R23-，則Y存在。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X是 -R22-[CH2-CH2-O]t-R23-， 其中 R22是-(CH2)v-、-(CH2)u-C(O)-(CH2)v-、-(CH2)u-C(O)-O-(CH2)v-、-(CH2)u-C(O)-NRb-(CH2)v-、-(CH2)u-C(S)-NRb-(CH2)v-、-(CH2)u-NRb-(CH2)v-、-(CH2)u-O-(CH2)v-、-(CH2)u-S(O)0-2-(CH2)v-、-(CH2)u-S(O)0-2-NRb-(CH2)v-或-(CH2)u-P(O)(ORb)-O-(CH2)v-； u和v各自獨(dú)立地為0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20且t是0～50。
R23具有結(jié)構(gòu)
其中 p是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、32、43、44或45； w和r各自獨(dú)立地為1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20； s是0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20；且 Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基； 且選擇t、u、w、p、v、r和s的值從而使得X主鏈長(zhǎng)度保持在約200個(gè)原子或200個(gè)原子以下。
在式I的化合物的一個(gè)實(shí)施方式中，X具有式
其中選擇v、t、w和p的值從而使得X主鏈長(zhǎng)度小于200個(gè)原子，替代性的是小于100個(gè)原子，替代性的是小于75個(gè)原子，或替代性的是小于50個(gè)原子。
在式I的化合物的另一個(gè)實(shí)施方式中，X具有式
其中選擇v、t、r和s的值從而使得X主鏈長(zhǎng)度小于200個(gè)原子，替代性的是小于100個(gè)原子，替代性的是小于75個(gè)原子，或替代性的是小于50個(gè)原子。
在式I的化合物的另一個(gè)實(shí)施方式中，X具有式
其中選擇u、v、t、w和p的值從而使得X主鏈長(zhǎng)度小于200個(gè)原子，替代性的是小于100個(gè)原子，替代性的是小于75個(gè)原子，或替代性的是小于50個(gè)原子。
在式I的化合物的另一個(gè)實(shí)施方式中，X具有式
其中選擇u、v、t、r和s的值從而使得X主鏈長(zhǎng)度小于200個(gè)原子，替代性的是小于100個(gè)原子，替代性的是小于75個(gè)原子，或替代性的是小于50個(gè)原子。
在式I的化合物的另一個(gè)實(shí)施方式中，X具有式
其中選擇u、v、t、w和p的值從而使得X主鏈長(zhǎng)度小于200個(gè)原子，替代性的是小于100個(gè)原子，替代性的是小于75個(gè)原子，或替代性的是小于50個(gè)原子。
在式I的化合物的另一個(gè)實(shí)施方式中，X具有式
其中選擇u、v、t、r和s的值從而使得X主鏈長(zhǎng)度小于200個(gè)原子，替代性的是小于100個(gè)原子，替代性的是小于75個(gè)原子，或替代性的是小于50個(gè)原子。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X具有結(jié)構(gòu)
其中選擇u、v、t、w和p的值從而使得X主鏈長(zhǎng)度小于200個(gè)原子，替代性的是小于100個(gè)原子，替代性的是小于75個(gè)原子，替代性的是小于50個(gè)原子，替代性的是小于25個(gè)原子，或替代性的是小于15個(gè)原子。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X具有結(jié)構(gòu)
其中選擇u、v、t、r和s的值從而使得X主鏈長(zhǎng)度小于200個(gè)原子，替代性的是小于100個(gè)原子，替代性的是小于75個(gè)原子，替代性的是小于50個(gè)原子，替代性的是小于25個(gè)原子，或替代性的是小于15個(gè)原子。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X具有結(jié)構(gòu)
其中選擇u、v、t、w和p的值從而使得X主鏈長(zhǎng)度小于200個(gè)原子，替代性的是小于100個(gè)原子，替代性的是小于75個(gè)原子，替代性的是小于50個(gè)原子，替代性的是小于25個(gè)原子，或替代性的是小于15個(gè)原子。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X具有結(jié)構(gòu)
其中選擇u、v、t、r和s的值從而使得X主鏈長(zhǎng)度小于200個(gè)原子，替代性的是小于100個(gè)原子，替代性的是小于75個(gè)原子，替代性的是小于50個(gè)原子，替代性的是小于25個(gè)原子，或替代性的是小于15個(gè)原子。
在式I的化合物的另一個(gè)實(shí)施方式中，X具有式
其中選擇u、v、t、w和p的值從而使得X主鏈長(zhǎng)度小于200個(gè)原子，替代性的是小于100個(gè)原子，替代性的是小于75個(gè)原子，或替代性的是小于50個(gè)原子。
在式I的化合物的另一個(gè)實(shí)施方式中，X具有式
其中選擇u、v、t、r和s的值從而使得X主鏈長(zhǎng)度小于200個(gè)原子，替代性的是小于100個(gè)原子，替代性的是小于75個(gè)原子，或替代性的是小于50個(gè)原子。
在其中L具有式-X-Y-Z的具有式I的化合物中，Y的環(huán)結(jié)構(gòu)包括飽和碳環(huán)、不飽和碳環(huán)和芳香碳環(huán)以及飽和雜環(huán)、不飽和雜環(huán)和芳香雜環(huán)。環(huán)結(jié)構(gòu)可以是單環(huán)、雙環(huán)或多環(huán)，并且包括稠環(huán)和非稠環(huán)。此外，環(huán)結(jié)構(gòu)任選地被本領(lǐng)域公知的官能團(tuán)取代，所述官能團(tuán)包括但不限于氫、氧代、-OH、-CHO、-COOH、-NO2、-CN、-NH2、脒基、胍基、羥氨基、-C(O)NH2、仲酰胺基和叔酰胺基、磺酰胺基、取代或未取代烷基、取代或未取代烯基、取代或未取代炔基、氧代烷基、氧代烯基、氧代炔基、氨基烷基、氨基烯基、氨基炔基、硫代烷基、硫代烯基、硫代炔基、磷酸烷基、磷酸烯基和磷酸炔基。
在具有式I的化合物的某些實(shí)施方式中，Y的環(huán)結(jié)構(gòu)具有任選取代的下式
其中 a、b、c、d和e獨(dú)立地為碳或氮；且 f是碳、氮氧或硫； Y獨(dú)立地與X和Z在足夠價(jià)態(tài)的任何兩個(gè)環(huán)位置處相連；且 a、b、c、d、e或f中不超過(guò)四個(gè)同時(shí)為氮。
構(gòu)成環(huán)結(jié)構(gòu)的原子上剩余的任何開(kāi)放價(jià)態(tài)可以由氫或其它取代基或者與X和Z的連接來(lái)填充。例如，如果b是碳，則其價(jià)態(tài)可以由氫、諸如氫等取代基、與X的共價(jià)鍵或與Z的共價(jià)鍵來(lái)填充。在某些實(shí)施方式中，a、b、c、d和e各自為碳，而在其它實(shí)施方式中，a、c、d和f各自為碳。在其它實(shí)施方式中，至少a、b、c、d或e之一為氮，而在還有其它實(shí)施方式中，f是氧或硫。在另一個(gè)實(shí)施方式中，Y的環(huán)結(jié)構(gòu)未被取代。在一個(gè)實(shí)施方式中，Y是苯基。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X-Y具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是1、2、3、4或5；w是1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些其它實(shí)施方式中，v是1、2或3且w是1、2或3。在其它實(shí)施方式中，v是1或2且w是1或2。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X-Y具有結(jié)構(gòu)
其中H1和H1’各自獨(dú)立地為N、O、S或CH2；r和s各自獨(dú)立地為1、2、3、4或5；且t和t’各自獨(dú)立地為0、1、2、3、4或5。在這些實(shí)施方式中的某些之中，H1和H1’各自獨(dú)立地為O或CH2；r和s各自獨(dú)立地為1或2；且t和t’各自獨(dú)立地為0或1。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X-Y具有結(jié)構(gòu)
其中H1和H1’各自獨(dú)立地為N、O、S或CH2；r和s各自獨(dú)立地為1、2、3、4或5；t和t’各自獨(dú)立地為0、1、2、3、4或5，且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在這些實(shí)施方式中的某些之中，H1和H1’各自獨(dú)立地為O或CH2；r和s各自獨(dú)立地為1或2；且t和t’各自獨(dú)立地為0或1。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X-Y具有結(jié)構(gòu)
其中H1和H1’各自獨(dú)立地為N、O、S或CH2；r和s各自獨(dú)立地為1、2、3、4或5；t和t’各自獨(dú)立地為0、1、2、3、4或5，且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在這些實(shí)施方式中的某些之中，H1和H1’各自獨(dú)立地為O或CH2；r和s各自獨(dú)立地為1或2；且t和t’各自獨(dú)立地為0或1。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X-Y具有結(jié)構(gòu)
其中H1和H1’各自獨(dú)立地為N、O、S或CH2；r和s各自獨(dú)立地為1、2、3、4或5；t和t’各自獨(dú)立地為0、1、2、3、4或5，且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在這些實(shí)施方式中的某些之中，H1和H1’各自獨(dú)立地為O或CH2；r和s各自獨(dú)立地為1或2；且t和t’各自獨(dú)立地為0或1。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X-Y具有結(jié)構(gòu)
其中H1和H1’各自獨(dú)立地為N、O、S或CH2；r和s各自獨(dú)立地為1、2、3、4或5；t和t’各自獨(dú)立地為0、1、2、3、4或5，且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在這些實(shí)施方式中的某些之中，H1和H1’各自獨(dú)立地為O或CH2；r和s各自獨(dú)立地為1或2；且t和t’各自獨(dú)立地為0或1。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X-Y具有結(jié)構(gòu)
其中H1和H1’各自獨(dú)立地為N、O、S或CH2；r和s各自獨(dú)立地為1、2、3、4或5；t和t’各自獨(dú)立地為0、1、2、3、4或5，且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在這些實(shí)施方式中的某些之中，H1和H1’各自獨(dú)立地為O或CH2；r和s各自獨(dú)立地為1或2；且t和t’各自獨(dú)立地為0或1。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X-Y具有結(jié)構(gòu)
其中H1和H1’各自獨(dú)立地為N、O、S或CH2；r和s各自獨(dú)立地為1、2、3、4或5；且t和t’各自獨(dú)立地為0、1、2、3、4或5。在這些實(shí)施方式中的某些之中，H1和H1’各自獨(dú)立地為O或CH2；r和s各自獨(dú)立地為1或2；且t和t’各自獨(dú)立地為0或1。
在某些式I的化合物的這些實(shí)施方式中，X-Y具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5，且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；且p是3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、w是1；且p是1或2。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X-Y具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；且s是3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；且s是1或2。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X-Y具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；且p是3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1或2；w是1；且p是1或2。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X-Y具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；且s是3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1、2或3；r是1；且s是1或2。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X-Y具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；且p是3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1或2；w是1；且p是1或2。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X-Y具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；且s是3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1、2或3、r是1；且s是1或2。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X-Y具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；且p是3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1或2；w是1；且p是1或2。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X-Y具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；且s是3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1、2或3、r是1；且s是1或2。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X-Y具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；且p是3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1或2；w是1；且p是1或2。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X-Y具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；且s是3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1、2或3、r是1；且s是1或2。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X-Y具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；且p是3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1或2；w是1；且p是1或2。
在式I的化合物的某些實(shí)施方式中，X-Y具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；且s是3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1、2或3、r是1；且s是1或2。
在一個(gè)實(shí)施方式中，X-Y具有式
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是0或1。
在其中L具有式-X-Y-Z的具有式I的化合物中，反應(yīng)性基團(tuán)Z含有能夠與抗體結(jié)合位點(diǎn)的氨基酸形成共價(jià)鍵的部分。例如，Z可以是取代烷基、取代環(huán)烷基、取代芳基、取代芳烷基、取代雜環(huán)基或取代雜環(huán)基烷基，其中至少一個(gè)取代基是1，3-二酮部分、?；?β-內(nèi)酰胺、活性酯、α-鹵代酮、醛、馬來(lái)酰亞胺、內(nèi)酯、酸酐、α-鹵代乙酰胺、胺、酰肼或環(huán)氧化物。在某些這類實(shí)施方式中，Z是取代烷基。
Z可以是形成可逆或不可逆共價(jià)鍵的基團(tuán)。在某些實(shí)施方式中，可以使用諸如圖7所示的那些二酮Z基來(lái)形成可逆共價(jià)鍵。因此，結(jié)構(gòu)A～C可以與抗體結(jié)合位點(diǎn)中的反應(yīng)性親核基團(tuán)(例如，賴氨酸或半胱氨酸側(cè)鏈)形成可逆共價(jià)鍵。圖7的結(jié)構(gòu)A～C中R′1、R′2、R3和R4的表示可以為C、H、N、O、P、S、鹵素(F、Cl、Br、I)或其鹽的取代基。這些取代基也可以包含諸如烷基、烯基、炔基、氧代烷基、氧代烯基、氧代炔基、氨基烷基、氨基烯基、氨基炔基、硫代烷基、硫代烯基或硫代炔基、磷酸烷基、磷酸烯基或磷酸炔基等基團(tuán)。R′2和R3也可以形成如結(jié)構(gòu)B和C中舉例說(shuō)明的環(huán)結(jié)構(gòu)。圖7中的X可以是雜原子。能形成可逆共價(jià)鍵的其它Z基包括脒、亞胺和由圖7的結(jié)構(gòu)式G所涵蓋的其它反應(yīng)性基團(tuán)。圖8包括了形成可逆共價(jià)鍵的其它接頭反應(yīng)性基團(tuán)的結(jié)構(gòu)，例如，結(jié)構(gòu)B、G、H以及其中X不是離去基團(tuán)的E和F。
能與抗體結(jié)合位點(diǎn)形成不可逆共價(jià)鍵的Z反應(yīng)性基團(tuán)包括圖7中的結(jié)構(gòu)D～G(例如，當(dāng)G是亞胺酯(imidate)時(shí))和圖8的結(jié)構(gòu)A、C和D。當(dāng)X是離去基團(tuán)時(shí)，圖8的結(jié)構(gòu)E和F也可以形成不可逆共價(jià)鍵。這些結(jié)構(gòu)可用于將靶向劑-接頭與抗體結(jié)合位點(diǎn)中的反應(yīng)性親核基團(tuán)不可逆地相連。
在其它這類實(shí)施方式中，Z是1，3-二酮部分。在再其它這些實(shí)施方式中，Z是由1，3-二酮部分所取代的烷基。在一個(gè)實(shí)施方式中，Z具有結(jié)構(gòu)
其中q＝0～5。在另一個(gè)實(shí)施方式中，Z具有結(jié)構(gòu)
用于GA靶向化合物中且用于制備GA靶向劑-接頭化合物的一種接頭包括1，3-二酮反應(yīng)性基團(tuán)作為Z。在式I的一個(gè)實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是2或3。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是2或3。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是2或3。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、5或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、5或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、5或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是2或3。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是2或3。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、5或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、5或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、5或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是2或3。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是2或3。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、5或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、5或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、5或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是2或3。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在還有某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是2或3。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、5或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、5或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、5或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是2或3。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在其它實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是2或3。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、5或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、5或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是0、1、2、3、5或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是0；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是0或1；v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是2或3。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是0；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1或2；s是0；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是0；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1或2；s是0；且q是1或2。
在式I的某些實(shí)施方式中，L具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是0；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1或2；s是0；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是2或3。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是2或3。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是2或3。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是2或3。
根據(jù)式I的另一個(gè)實(shí)施方式是
其中v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；且q是0、1、2、3、4或5。在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是2。
本文所用

是指GA靶向劑，其中“AA1”是從N端算起GA靶向劑序列中的第一個(gè)氨基酸，“AA2”是N端算起GA靶向劑序列中的第二個(gè)氨基酸，且“AAn”是N端算起GA靶向劑序列中的第n個(gè)氨基酸。該靶向劑還包含從N端算起的任意位置m+1處的Lys殘基?？梢岳斫獾氖浅伺cGA靶向劑主體中的Lys側(cè)鏈相連之外，也可能與GA靶向劑的N端或C端上的Lys側(cè)鏈相連。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是2或3。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是2或3。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是1、2、3、4或5；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是0；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是1、2或3；v是0；t是1、2或3、r是1或2；s是0；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是1、2、3、4或5；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是0；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是1、2或3；v是0；t是1、2或3、r是1或2；s是0；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是1、2、3、4或5；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是0；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是1、2或3；v是0；t是1、2或3、r是1或2；s是0；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是2或3。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是2或3。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是2或3。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是2或3。
在某些實(shí)施方式中，根據(jù)式1的接頭L是
對(duì)免疫活性個(gè)體施用GA靶向化合物可能導(dǎo)致生成抗所述偶聯(lián)物的抗體?？梢詫⑦@些抗體導(dǎo)向包括抗體獨(dú)特型的可變區(qū)以及靶向劑或用于將靶向劑與抗體偶聯(lián)的任何接頭?？梢酝ㄟ^(guò)本領(lǐng)域公知方法諸如通過(guò)將基于長(zhǎng)鏈聚乙二醇(PEG)的間隔區(qū)等等與GA靶向化合物相連來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)GA靶向化合物的免疫原性的降低。已知長(zhǎng)鏈PEG和其它聚合物具有掩蔽外來(lái)表位從而造成展示外來(lái)表位的治療性蛋白的免疫原性降低的能力(N.V.Katre，J.Immunol.144209-213(1990)；G.E.Francis等，Int.J.Hematol.681-18(1998))。替代性的是，或附加性的是，可以對(duì)施用了抗體-GA靶向劑偶聯(lián)物的個(gè)體施用諸如環(huán)孢素A、抗CD3抗體等免疫抑制劑。
在一個(gè)實(shí)施方式中，GA靶向化合物如式II所示，并且包括其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、溶劑合物、前體藥物和可藥用鹽。
抗體-L’-[GA靶向劑](II) 在式II的化合物中，[GA靶向劑]如式I中所定義，并且L’是將抗體與靶向劑相連且具有式-X-Y-Z’-的接頭部分。在式II的化合物中，X和Y如式I中所定義，且抗體(Antibody)是本文所定義的抗體。圖9和圖10分別顯示了抗體結(jié)合位點(diǎn)中的反應(yīng)性親核殘基在圖7和圖8中顯示的Z基團(tuán)中加成機(jī)理。
在一個(gè)實(shí)施方式中，其中抗體是醛縮酶催化抗體，Z’-抗體具有式
在一個(gè)實(shí)施方式中，其中抗體是醛縮酶催化抗體，Z’-抗體具有式
在一個(gè)實(shí)施方式中，其中抗體是醛縮酶催化抗體，Z’-抗體具有式
在一個(gè)實(shí)施方式中，其中抗體是醛縮酶催化抗體，Z’-抗體具有式
在一個(gè)實(shí)施方式中，其中抗體是醛縮酶催化抗體，Z’-抗體具有式
在一個(gè)實(shí)施方式中，其中抗體是醛縮酶催化抗體，Z’-抗體具有式
在一個(gè)實(shí)施方式中，其中抗體是醛縮酶催化抗體，Z’-抗體具有式
在一個(gè)實(shí)施方式中，其中抗體是醛縮酶催化抗體，Z’-抗體具有式
在一個(gè)實(shí)施方式中，其中抗體是醛縮酶催化抗體，Z’-抗體具有式
在一個(gè)實(shí)施方式中，其中抗體是醛縮酶催化抗體，Z’-抗體具有式
在一個(gè)實(shí)施方式中，其中抗體是醛縮酶催化抗體，Z’-抗體具有式
在一個(gè)實(shí)施方式中，其中抗體是醛縮酶催化抗體，Z’-抗體具有式
在一個(gè)實(shí)施方式中，其中抗體是醛縮酶催化抗體，Z’-抗體具有式
在一個(gè)實(shí)施方式中，其中抗體是醛縮酶催化抗體，Z’-抗體具有式
在一個(gè)實(shí)施方式中，其中抗體是醛縮酶催化抗體，Z’-抗體具有式
在具有式II的化合物中，Z’是包含共價(jià)鍵和與抗體相連的0～20個(gè)碳原子的連接部分。對(duì)于其中接頭具有二酮部分作為反應(yīng)性基團(tuán)(見(jiàn)式I的Z)且存在與抗體結(jié)合位點(diǎn)中的賴氨酸殘基的側(cè)鏈氨基的連接的情形，如下所示。示意性顯示了對(duì)各個(gè)指明的結(jié)合位點(diǎn)與反應(yīng)性氨基酸側(cè)鏈成二價(jià)的抗體。

如下所示的另一個(gè)實(shí)施方式用于其中接頭具有β-內(nèi)酰胺部分作為反應(yīng)性基團(tuán)且存在與抗體結(jié)合位點(diǎn)中的賴氨酸殘基的側(cè)鏈氨基的連接的情形。示例性顯示了對(duì)各個(gè)指明的結(jié)合位點(diǎn)與反應(yīng)性氨基酸側(cè)鏈成二價(jià)的抗體。

根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是2或3。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；且p是3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；且p是1或2。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是2或3。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；且s是3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；且s是1或2。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是2或3。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；且p是3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；且p是1或2。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是2或3。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；且s是3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；且s是1或2。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是2或3。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；且p是3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；且p是1或2。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是2或3。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；且s是3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；且s是1或2。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是1、2、3、4或5；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是0；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是1、2或3；v是0；t是1、2或3、r是1或2；s是0；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是1、2、3、4或5；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是0；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是1、2或3；v是0；t是1、2或3、r是1或2；s是0；且q是1或2。
根據(jù)式I的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，u是1、2、3、4或5；v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，u是1、2、3、4或5；v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是0；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，u是1、2或3；v是0；t是1、2或3、r是1或2；s是0；且q是1或2。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是2或3。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；且p是3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；且p是1或2。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是2或3。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；且Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；且s是3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；且s是1或2。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；p是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；p是1或2；且q是2或3。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；w是1、2、3、4或5；p是1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；w是1；且p是3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1或2；w是1；且p是1或2。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是1或2。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；q是0、1、2或3；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；s是3；且q是0、1、2或3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；s是1或2；且q是2或3。
根據(jù)式II的某些實(shí)施方式具有結(jié)構(gòu)
在這些實(shí)施方式中的某些之中，v是0、1、2、3、4或5；t是1、2、3、4、5或6；r是1、2、3、4或5；s是0、1、2、3、4或5；且Rb在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或者取代或未取代的芳基-C0-6烷基。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2、3、4、5或6；r是1或2；且s是3。在某些實(shí)施方式中，v是0；t是1、2或3、r是1；且s是1或2。
替代性的是，接頭可以帶有作為反應(yīng)性集團(tuán)的胺或酰肼并且可以將抗體工程化來(lái)帶有二酮部分?？梢允褂帽绢I(lǐng)域公知方法輕易將含有二酮的非天然氨基酸加入抗體結(jié)合位點(diǎn)；已將含非天然氨基酸的蛋白引入酵母菌和細(xì)菌中。見(jiàn)例如，J.W.Chin等，Science 301964-966(2003)；L.Wang等，Science 292498-500(2001)；J.W.Chin等，J.Am.Chem.Soc.1249026-9027(2002)；L.Wang，等，J.Am.Chem.Soc.1241836-1837(2002)；J.W.Chin和P.G.Schultz，Chembiochem.31135-1137(2002)；J.W.Chin等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.9911020-11024(2002)；L.Wang和P.G.Schultz，Chem.Commun.(1)1-11(2002)；Z.Zhang等，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.412840-2842(2002)；L.Wang，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.10056-61(2003)。因此，例如，為了將含二酮部分的非天然氨基酸插入釀酒酵母菌(Saccharomycescerevisiae)需要將包括獨(dú)特密碼子、tRNA和安吉酰基-tRNA合成酶(aaRS)的新成分加入蛋白生物合成機(jī)制。例如，可以對(duì)真核生物使用來(lái)自大腸桿菌的琥珀抑制劑酪氨酰-tRNA合成酶(TyrRS)-tRNACUA對(duì)，如J.W.Chin等，Science 301964-966(2003)中所報(bào)導(dǎo)。琥珀密碼子用于對(duì)感興趣的非天然氨基酸編碼。然后可以產(chǎn)生突變體TyrRS和tRNACUA的庫(kù)并選擇其中TyrRS將感興趣的非天然氨基酸(例如，含二酮的氨基酸)充入tRNACUA的那些aaRS-tRNACUA對(duì)。隨后，可以通過(guò)將含所述琥珀密碼子的基因在一個(gè)或多個(gè)抗體結(jié)合位點(diǎn)處克隆并表達(dá)來(lái)產(chǎn)生加入了含二酮的氨基酸的抗體。
在式II的化合物的某些實(shí)施方式中所述抗體是全長(zhǎng)抗體。在其它實(shí)施方式中，所述抗體是Fab、Fab’F(ab’)2、Fv、VH、VL或scFv。在其它實(shí)施方式中，所述抗體是人類抗體、人源化抗體或嵌合人類抗體。在其它實(shí)施方式中，所述抗體是催化抗體。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述抗體是包含來(lái)自人類IgG、IgA、IgM，IgD或IgE抗體的恒定區(qū)的小鼠38c2的人源化形式。在另一個(gè)實(shí)施方式中，所述抗體是包含來(lái)自小鼠38c2的可變區(qū)和來(lái)自人類IgG、IgA、IgM，IgD或IgE抗體的恒定區(qū)的嵌合抗體。
在某些情況下，可以將兩個(gè)或多個(gè)GA靶向劑與單一全長(zhǎng)二價(jià)抗體相連。這以如下式III所示 抗體[-L’-[GA靶向劑]]2(III) 此外還提供了它的立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、溶劑合物、前體藥物和可藥用鹽。
在式III的化合物中，[GA靶向劑]、L’和抗體各自如式II中所定義。
諸如式II的那些化合物等靶向化合物還可以通過(guò)將靶向劑-接頭與多價(jià)抗體結(jié)合位點(diǎn)共價(jià)連接來(lái)容易地合成。例如，可以將其中接頭包含二酮反應(yīng)性部分的靶向劑-接頭偶聯(lián)物與0.5當(dāng)量的諸如h38C2IgG1等醛縮酶抗體一起溫育從而產(chǎn)生GA靶向化合物。替代性的是，諸如式III的那些化合物等GA靶向化合物可以通過(guò)將如本文所述的GA靶向劑-接頭化合物與二價(jià)抗體的各個(gè)結(jié)合位點(diǎn)共價(jià)連接來(lái)產(chǎn)生。
GA靶向化合物的藥物組合物 本發(fā)明的另一方面提供了GA靶向化合物的藥物組合物?？梢允褂帽绢I(lǐng)域技術(shù)人員公知的技術(shù)來(lái)施用GA靶向化合物。優(yōu)選將試劑系統(tǒng)地配方和施用。用于配方和施用的技術(shù)可以在Remington′sPharmaceutical Sciences，18th Ed.，1990，Mack Publishing Co.，Easton，PA中找到。對(duì)于注射而言，可以將GA靶向化合物配方為水溶液、乳化液或懸浮液。優(yōu)選將GA靶向化合物配方在含有諸如檸檬酸鹽、乙酸鹽、組氨酸或磷酸鹽等生理相容性緩沖液的水溶液中。必要時(shí)，這些制劑也可以含有各種張力調(diào)節(jié)劑、增溶劑和/或穩(wěn)定劑(例如，諸如氯化鈉等鹽，諸如蔗糖、甘露醇和海藻糖等糖，諸如白蛋白等蛋白，諸如甘氨酸和組氨酸等氨基酸，諸如聚山梨酸酯(Tweens)等表面活性劑，或諸如乙醇、聚乙二醇和丙二醇等助溶劑)。
GA靶向化合物的使用方法 本發(fā)明的一個(gè)方面是用于治療糖尿病或糖尿病相關(guān)病癥的方法，所述方法包括對(duì)患有糖尿病或糖尿病相關(guān)病癥的受試對(duì)象施用治療有效量的GA靶向化合物。對(duì)于在人類中的治療應(yīng)用，優(yōu)選的靶向化合物的抗體形式是人類抗體、人源化抗體或人類嵌合抗體。
本發(fā)明的另一方面是用于增加受試對(duì)象中胰島素分泌的方法，所述方法包括對(duì)受試對(duì)象施用治療有效量的GA靶向化合物或其藥物衍生物。
本發(fā)明的再一方面是用于降低受試對(duì)象中血糖的方法，所述方法包括對(duì)受試對(duì)象使用治療有效量的GA靶向化合物或其藥物衍生物。
施用方法和劑量 GA靶向化合物的施用途徑可以包括胃腸外輸送(包括肌內(nèi)注射、皮下注射或髓內(nèi)注射)以及鞘內(nèi)輸送、直接腦室輸送、靜脈內(nèi)輸送和腹腔內(nèi)輸送。在一個(gè)實(shí)施方式中，施用是靜脈內(nèi)施用。可以通過(guò)直接注射制劑或通過(guò)滴注靶向GA化合物制劑與滴注基質(zhì)(諸如普通鹽水、D5W、乳酸林格氏液或其它常用滴注介質(zhì))的混合物從而經(jīng)任何胃腸外途徑來(lái)施用GA靶向化合物。
在治療患糖尿病或糖尿病相關(guān)病癥的包括人類的哺乳動(dòng)物時(shí)，施用了治療有效量的GA靶向化合物或可藥用衍生物。例如，可以將GA靶向化合物作為從約0.1mg/kg體重～15mg/kg體重的每日靜脈滴注來(lái)施用。于是，一個(gè)實(shí)施方式提供了約0.5mg/kg體重的劑量。另一個(gè)實(shí)施方式提供了約0.75mg/kg體重的劑量。另一個(gè)實(shí)施方式提供了約1.0mg/kg體重的劑量。另一個(gè)實(shí)施方式提供了約2.5mg/kg體重的劑量。另一個(gè)實(shí)施方式提供了約5mg/kg體重的劑量。另一個(gè)實(shí)施方式提供了約10.0mg/kg體重的劑量。另一個(gè)實(shí)施方式提供了約15.0mg/kg體重的劑量。應(yīng)該將GA靶向化合物或可藥用衍生物的劑量以約每日一次至每周2次的間隔來(lái)施用，或者替代性地以約每周一次至每月一次的間隔來(lái)施用。在一個(gè)實(shí)施方式中，施用了一定劑量從而達(dá)到了從約0.002mg/mL～30mg/mL的根據(jù)本發(fā)明的GA靶向化合物或其可藥用衍生物的峰值血漿濃度。這可以通過(guò)將施用成分在適當(dāng)制劑中的溶液進(jìn)行無(wú)菌注射來(lái)實(shí)現(xiàn)(可以使用化學(xué)領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何合適的制劑溶液)?？梢酝ㄟ^(guò)連續(xù)滴注根據(jù)本發(fā)明的GA靶向化合物來(lái)保持所需血液水平，所述血液水平由通過(guò)有效分析方法測(cè)定的血漿水平來(lái)確定。
用于對(duì)個(gè)體施用GA靶向化合物的一種方法包括對(duì)個(gè)體施用GA靶向劑-接頭偶聯(lián)物并使其與體內(nèi)適當(dāng)抗體的結(jié)合位點(diǎn)形成共價(jià)化合物?？梢詫⒃隗w內(nèi)形成的GA靶向化合物的抗體部分在施用靶向劑-接頭偶聯(lián)物之前、同時(shí)或之后來(lái)對(duì)個(gè)體施用。已經(jīng)討論到，GA靶向劑可以包含接頭/反應(yīng)性部分，或可以適當(dāng)修飾抗體結(jié)合位點(diǎn)以便與靶向劑共價(jià)相連。替代性的是，或者此外，抗體可能在以適當(dāng)抗原進(jìn)行免疫之后出現(xiàn)在個(gè)體的循環(huán)中。例如，可以通過(guò)以與載體蛋白偶聯(lián)的底物的反應(yīng)性中間體進(jìn)行免疫來(lái)產(chǎn)生催化抗體。見(jiàn)R.A.Lerner和C.F.Barbas3rd，Acta Chem.Scand.50672-678(1996)。具體而言，可以通過(guò)以連接了二酮部分的鑰孔戚血藍(lán)蛋白(keyhole limpet hemocyanin)進(jìn)行施用來(lái)產(chǎn)生醛縮酶催化抗體，如P.Wirsching等，Science 2701775-1782(1995)(對(duì)J.Wagner等，Science 2701797-1800(1995)的評(píng)論)中所述。
組合療法 在本發(fā)明的另一方面，可以將GA靶向化合物與其它用于治療糖尿病或糖尿病相關(guān)病癥、或者用于增加胰島素分泌或降低血糖水平的治療劑組合使用。在一個(gè)實(shí)施方式中，可以將GA靶向化合物與諸如合成人胰島素(包括超短效、短效、中效或長(zhǎng)效胰島素)等胰島素組合施用。在其它實(shí)施方式中，可以將GA靶向化合物與屬于α-葡萄糖苷酶抑制劑、磺酰脲、美格列奈、雙胍或噻唑烷二酮(TZD)家族的化合物組合施用。還可以將GA靶向化合物與諸如葡萄糖激酶(GK)、葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)、解偶聯(lián)蛋白2和3(UCP2和UCP3)、過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α(PPARα)、瘦素受體(OB-Rb)、DPP-IV抑制劑、磺酰脲或其它腸促胰島素肽等代謝修飾性蛋白或肽組合施用。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員應(yīng)該了解目前用在糖尿病或糖尿病相關(guān)病癥的治療中的各種各樣的試劑。
為了評(píng)價(jià)與用于治療糖尿病或糖尿病相關(guān)病癥、增加胰島素分泌或降低血糖水平的其它治療劑組合的GA靶向化合物或其可藥用衍生物的可能治療效果，可以使用本領(lǐng)域已知方法來(lái)對(duì)這些組合進(jìn)行測(cè)試。例如，可以使用體外葡萄糖刺激的胰島素分泌測(cè)試來(lái)測(cè)定根據(jù)本發(fā)明的GA靶向化合物與另一種治療劑的組合增加胰島素分泌的能力。在這樣的測(cè)試中，用各種濃度的葡萄糖在設(shè)定的時(shí)段內(nèi)處理胰腺β細(xì)胞，然后用諸如放射免疫測(cè)定法等本領(lǐng)域已知方法來(lái)測(cè)定胰島素水平。也可以通過(guò)將試劑直接對(duì)受試對(duì)象進(jìn)行施用并測(cè)定不同時(shí)間點(diǎn)的體液樣品中的胰島素水平從而在體內(nèi)測(cè)定根據(jù)本發(fā)明的GA靶向化合物與其它治療劑在胰島素分泌上的效果。用于對(duì)將已知治療劑對(duì)受試對(duì)象進(jìn)行施用的組合治療中所用的方法是臨床保健提供者所公知的。
待施用的GA靶向化合物的有效劑量可以通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的處理諸如生物半衰期、生物有效性和毒性等參數(shù)的方法來(lái)確定。與GA靶向化合物或其可藥用衍生物組合使用的治療劑的有效量基于本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的對(duì)這些治療劑的推薦劑量。在測(cè)試了與本發(fā)明的GA靶向化合物或可藥用衍生物組合的這些劑量的有效性后，優(yōu)選將這些推薦量或已知水平降低所引用的劑量的10％～50％。應(yīng)該注意，主治醫(yī)師應(yīng)該知道如何和何時(shí)因毒性、骨髓功能紊亂、肝功能紊亂或腎功能紊亂或者不良藥物-藥物相互作用而終止、中斷或調(diào)整治療以降低劑量。反之，主治醫(yī)師也應(yīng)該知道如果臨床響應(yīng)不足則將治療調(diào)整至更高水平(防范毒性)。
治療有效劑量是指足以造成癥狀改善或患者生存時(shí)間延長(zhǎng)的化合物量?？梢酝ㄟ^(guò)測(cè)定EC50來(lái)確定GA靶向劑的有效體內(nèi)濃度。這些試劑在體內(nèi)的毒性和治療效果可以通過(guò)在細(xì)胞培養(yǎng)物或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物上執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)藥物方法來(lái)確定，例如用于確定LD50(使50％的群體致死的劑量)和ED50(在50％的群體中治療有效的劑量)的方法。毒性效果與治療效果之間的劑量比是治療指數(shù)，且可以將其表達(dá)為比例LD50/ED50。優(yōu)選顯示出大的治療指數(shù)的化合物。從這些細(xì)胞培養(yǎng)物測(cè)試和動(dòng)物研究中獲得的數(shù)據(jù)可以用于配制用于人類的劑量范圍。這些化合物的劑量?jī)?yōu)選地處在包括了ED50且?guī)в袠O少毒性或沒(méi)有毒性的循環(huán)濃度的范圍內(nèi)。劑量可能根據(jù)所采用的劑型和所利用的施用途徑而在該范圍內(nèi)變化。對(duì)于任何化合物，可以從細(xì)胞培養(yǎng)物測(cè)試來(lái)對(duì)治療有效劑量進(jìn)行初步估計(jì)?？梢詫⒁欢▌┝渴┯玫絼?dòng)物模型中以達(dá)到包括了IC50(即與未處理的對(duì)照相比，在細(xì)胞培養(yǎng)物中確定的達(dá)到對(duì)從感染細(xì)胞產(chǎn)生的RT的一半最大抑制的測(cè)試化合物的濃度)的循環(huán)血漿濃度范圍?？梢允褂眠@些信息來(lái)更準(zhǔn)確地確定人類中的有用劑量?？梢岳缤ㄟ^(guò)高效液相色譜(HPLC)來(lái)測(cè)定血漿中的水平。
在其中GA靶向化合物與其它治療劑組合施用的那些實(shí)施方式中，可以通過(guò)Chou和Talalay的多重藥物分析方法(T.C.Chou和P.Talalay，Adv.Enzyme Regul.2227-55(1984))使用以下方程來(lái)計(jì)算所述試劑的組合效果 其中，CI是組合指數(shù)，(Dx)1是單獨(dú)產(chǎn)生x％的效果所需的藥物1的劑量，D1是與D2組合而產(chǎn)生相同的x％的效果所需的藥物1的劑量。(Dx)2和(D)2的值類似地從藥物2導(dǎo)出。使用以下中值效應(yīng)方程從劑量效果曲線的圖中確定α的值 其中fa是受劑量D影響的部分，fu是未受影響的部分，Dm是50％效果所需的劑量，而m是劑量效果曲線的斜率。對(duì)于互斥藥物(即相似的作用模式)，兩種藥物單獨(dú)和它們的混合物在中值效應(yīng)圖中給出平行線。非互斥藥物(即獨(dú)立的作用模式)將在中值效應(yīng)圖中給出平行線，但混合物將給出上凹曲線。如果試劑互斥則α是0，并且如果它們不互斥則α是1。假設(shè)不互斥所獲的值總是比互斥藥物略高。CI值小于1表明協(xié)同效應(yīng)，CI值大于1表明拮抗效應(yīng)，且CI值等于1表明疊加效應(yīng)。
也可以用來(lái)自Biosoft(Cambridge，UK)的CalcuSyn軟件包來(lái)計(jì)算組合藥物效果。
實(shí)施例 實(shí)施例1HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR(SEQ IDNO1)的合成 使用Fmoc化學(xué)在Symphony多肽合成儀上采用Fmoc保護(hù)的PL-Rink樹(shù)脂(0.68mmol/g，Polymer Laboratories)在100mol的規(guī)模上進(jìn)行修飾肽的固相多肽合成。在合成中利用了以下Nα-Fmoc保護(hù)的氨基酸Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Glu(tBut)-OH、Fmoc-Gln-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Tyr(tBut)-OH、Fmoc-Ser(tBut)-OH、Fmoc-Asp(tBut)-OH、Fmoc-Thr(tBut)-OH和Fmoc-His(Trt)-OH。簡(jiǎn)言之，使用10當(dāng)量的氨基酸與10當(dāng)量的活化劑O-苯并三唑-1-基-N，N，N1，N1-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)及N-羥基苯并三唑(HOBT)在30當(dāng)量的N-甲基嗎啉(NMM)存在下在N-甲基吡咯烷酮(NMP)中進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng)，每次偶聯(lián)進(jìn)行2小時(shí)。使用25％(體積/體積)的哌啶NMP溶液4次每次5分鐘來(lái)除去Nα-Fmoc保護(hù)基。在每次偶聯(lián)之間，以NMP洗滌樹(shù)脂6次。用85％TFA/5％TIS/5％茴香硫醚和5％苯酚將多肽從樹(shù)脂上切下，接著由干冰冷Et2O進(jìn)行沉淀。將粗制肽離心并凍干，然后通過(guò)反相HPLC用C18柱采用0.1％TFA的乙腈溶液和0.1％TFA的水溶液作為流動(dòng)相來(lái)純化產(chǎn)物以得到白色固體的純化合物。
將氨基酸和N-羥基苯并三唑(HOBT)溶在NMP中，并根據(jù)序列使用HBTU或O-(7-疊氮苯并三唑-1-基)-N，N，N，N’，N’-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)來(lái)激活。對(duì)于HBTU活化，將氨基酸、HBTU以相對(duì)于樹(shù)脂填料的10當(dāng)量加入，并將NMM以30當(dāng)量加入。對(duì)于各個(gè)氨基酸進(jìn)行兩次HBTU活化，每次兩小時(shí)。對(duì)于HATU活化，將氨基酸、HATU以相對(duì)于樹(shù)脂填料的10當(dāng)量加入，并將二異丙基乙基胺(DIEA)以20當(dāng)量加入。對(duì)于各個(gè)氨基酸進(jìn)行三小時(shí)的HATU活化。使用25％(體積/體積)的哌啶NMP溶液4次每次5分鐘來(lái)除去Fmoc保護(hù)基。在每次偶聯(lián)之間，以NMP洗滌樹(shù)脂6次。用85％TFA/5％TIS/5％茴香硫醚和5％苯酚將多肽從樹(shù)脂上切下，接著由干冰冷Et2O進(jìn)行沉淀。將粗肽離心并凍干，然后通過(guò)反相HPLC用C18柱采用0.1％TFA的乙腈溶液和0.1％TFA的水溶液作為流動(dòng)相來(lái)純化產(chǎn)物以得到白色固體的純化合物。
實(shí)施例2HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS(SEQ ID NO2)的合成 使用Fmoc化學(xué)在Symphony多肽合成儀上采用Fmoc保護(hù)的PL-Rink樹(shù)脂(0.68mmol/g，Polymer Laboratories)在100mol的規(guī)模上進(jìn)行修飾肽的固相多肽合成。在合成中使用了以下Nα-Fmoc保護(hù)的氨基酸Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Glu(tBu)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Met-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Asp(tBu)-OH、Fmoc-Thr(tBut)-OH和Fmoc-His(Trt)-OH。簡(jiǎn)言之，使用10當(dāng)量的氨基酸與10當(dāng)量的活化劑O-苯并三唑-1-基-N，N，N1，N1-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)或O-(7-疊氮苯并三唑-1-基)-N，N，N，N’，N’-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)以及N-羥基苯并三唑(HOBT)在N-甲基吡咯烷酮(NMP)中進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng)。對(duì)于HBTU活化，將氨基酸、HBTU以相對(duì)于樹(shù)脂填料的10當(dāng)量加入，并將NMM以30當(dāng)量加入。對(duì)于各個(gè)氨基酸進(jìn)行兩次HBTU活化，每次兩小時(shí)。對(duì)于HATU活化，將氨基酸和HATU以相對(duì)于樹(shù)脂填料的10當(dāng)量加入，并將二異丙基乙基胺(DIEA)以20當(dāng)量加入。對(duì)于各個(gè)氨基酸進(jìn)行三小時(shí)的HATU活化。使用25％(體積/體積)的哌啶NMP溶液4次每次5分鐘來(lái)除去Nα-Fmoc保護(hù)基。在每次偶聯(lián)之間，以NMP洗滌樹(shù)脂6次。用85％TFA/5％TIS/5％茴香硫醚和5％苯酚將多肽從樹(shù)脂上切下，接著由干冰冷Et2O進(jìn)行沉淀。將粗肽離心并凍干，然后通過(guò)反相HPLC用C18柱采用0.1％TFA的乙腈溶液和0.1％TFA的水溶液作為流動(dòng)相來(lái)純化產(chǎn)物以得到白色固體的純化合物。
實(shí)施例3

的合成提供于圖11中。
實(shí)施例4

的合成提供于圖12中。
實(shí)施例5

的合成提供于圖13中。
實(shí)施例6

的合成提供于圖14中。
實(shí)施例7

的合成提供于圖15中。
實(shí)施例8

的合成提供于圖16中。
實(shí)施例9

的合成提供于圖17中。
實(shí)施例10

的合成提供于圖18中。
實(shí)施例11

的合成提供于圖19中。
實(shí)施例12

的合成提供于圖20中。
實(shí)施例13

的合成提供于圖21中。
實(shí)施例14

的合成提供于圖22中。
實(shí)施例15

的合成提供于圖23中。
實(shí)施例16

的合成提供于圖24中。盡管該實(shí)施例使用了實(shí)施例11的化合物，另一種合成也能在第一步中充分利用實(shí)施例12的化合物。此外，盡管該實(shí)施例顯示了與N端的連接，也可以將實(shí)施例11和12的化合物左側(cè)的自由酸與肽上的諸如C、K、S、T或Y等任何親核側(cè)鏈相連。也如該實(shí)施例所示，用實(shí)施例11和12的化合物右側(cè)的Fmoc保護(hù)的氨基與抗體識(shí)別基團(tuán)G經(jīng)由酰胺鍵相連。
實(shí)施例17

的合成提供于圖25中。盡管該實(shí)施例使用了實(shí)施例14的化合物，另一種合成也能在第一步中充分利用實(shí)施例13或15的化合物。此外，盡管該實(shí)施例顯示了與N端的連接，也可以將實(shí)施例13～15的化合物左側(cè)的自由酸與肽上的諸如C、K、S、T或Y等任何親核側(cè)鏈相連。也如該實(shí)施例所示，用實(shí)施例13～15的化合物右側(cè)的自由酸與抗體識(shí)別基團(tuán)G經(jīng)由酰胺鍵相連。
實(shí)施例18

的合成提供于圖26中。盡管，該實(shí)施例使用了實(shí)施例11的化合物，另一種合成也能在第一步中充分利用實(shí)施例12的化合物。
實(shí)施例193-{2-[2-(2-{2-[2-(2-叔丁氧基羰基-乙氧基)-乙氧基]-乙氧基}-乙氧基)-乙氧基]乙氧基}-丙酸叔丁酯
采用已報(bào)道的方法(O.Seitz和H.Kunz，J.Org.Chem.62813-826(1997))來(lái)制備標(biāo)題化合物。將一小片金屬鈉加入四(乙二醇)(47.5g，244mmol)的在THF(200mL)中的溶液中并攪拌直至鈉完全溶解。然后加入丙烯酸叔丁酯(94g，730mmol)并在室溫繼續(xù)攪拌2天。加入另一份丙烯酸叔丁酯(94g，730mmol)并繼續(xù)攪拌2天。用數(shù)滴1N HCl中和反應(yīng)混合物并減壓濃縮。將殘留物懸浮在水中并用乙酸乙酯萃取(3×150mL)。將合并后的有機(jī)層用鹽水洗滌并在硫酸鈉上干燥。減壓蒸發(fā)掉易揮發(fā)物從而得到無(wú)色液體粗產(chǎn)物，將該粗產(chǎn)物用硅膠柱純化(42g，51％)。
實(shí)施例203-{2-[2-(2-{2-[2-(2-羰基-乙氧基)-乙氧基]-乙氧基}-乙氧基)-乙氧基]-乙氧基}丙酸的合成
將3-{2-[2-(2-{2-[2-(2-叔丁氧基羰基-乙氧基)-乙氧基]-乙氧基}-乙氧基)-乙氧基]乙氧基}-丙酸叔丁酯(6g，18.6mmol)在苯甲醚(20mL)中的溶液在冰浴中冷卻并加入三氟乙酸(65g)。在室溫3小時(shí)后減壓除去易揮發(fā)物并將殘留物在乙酸乙酯(50mL)和5％的碳酸氫鈉溶液之間配分。用1N HCl酸化水層，用NaCl飽和然后用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。將合并后的有機(jī)層用鹽水洗滌并在硫酸鈉上干燥。減壓除去易揮發(fā)物從而得到無(wú)色液體產(chǎn)物(3.8g，82％)，該產(chǎn)物在冷藏時(shí)固化。
實(shí)施例213-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(4-{2-[2-(2-甲基-[1，3]二氧戊環(huán)-2-基甲基)-[1，3]二氧戊環(huán)-2-基]-以及}-苯基氨甲?；?-乙氧基]-乙氧基}-乙氧基)-乙氧基]-乙氧基}-乙氧基)-丙酸的合成
將來(lái)自實(shí)施例20的化合物(0.6g，1.8mmol)溶在二氯甲烷(10mL)中，然后在室溫下加入4-{2-[2-(2-甲基-[1，3]二氧戊環(huán)-2-基甲基)-[1，3]二氧戊環(huán)-2-基]-乙基}-苯胺(0.3g，1.4mmol)并隨后加入EDCI(0.28g，1.8mmol)。在室溫1小時(shí)后用水洗滌RM并在硫酸鈉上干燥。蒸發(fā)掉易揮發(fā)物并在硅膠柱上用1％～15％的甲醇的二氯甲烷溶液純化從而得到膠質(zhì)的標(biāo)題化合物(0.47g，32％)。
實(shí)施例224-{2-[2-(2-甲基-[1，3]二氧戊環(huán)-2-基甲基)-[1，3]二氧戊環(huán)-2-基]-乙基}-苯胺的合成
在烘箱干燥的干凈燒瓶中充以6-(4-硝基苯基)-己烷-2，4-二酮(3.7g，15.72mmol)，接著在該燒瓶中加入干燥CH2Cl2(20mL)并隨后加入二TMS乙二醇(38.5mL，157.3mL)，然后將所得溶液冷卻至-5℃并在氬氣下攪拌。在反應(yīng)混合物中加入TMSOTf(300μL)并將溶液在-5℃攪拌6小時(shí)。用吡啶(10ml)終止反應(yīng)并將其倒入飽和NaHCO3中。用EtOAc萃取混合物，然后將有機(jī)層用水和鹽水洗滌、干燥并濃縮以得到黃色固體。用己烷將該固體磨碎從而得到自由流動(dòng)的淺黃色固體(3.5g，72％)，將其溶解在EtOAc(50mL)中并在Parr搖擺器上以50psi的氫氣壓進(jìn)行氫化。兩小時(shí)后讓反應(yīng)過(guò)濾通過(guò)硅藻土板，用CH2Cl2/MeOH徹底地洗滌硅藻土板，然后將合并后的有機(jī)相濃縮從而得到油狀標(biāo)題化合物(1.46g，100％)，該化合物在靜置時(shí)固化。
實(shí)施例23A4-[4-(3，5-二氧代己基)-苯基氨甲?；鵠-丁酸2，5-二氧代吡咯烷-1-基酯(10)的合成
步驟16-(4-硝基苯基)-己烷-2，4-二酮(11) 在反應(yīng)容器(加熱并真空干燥且?guī)в写判詳嚢璐抛?中加入四氫呋喃和二異丙基酰胺鋰(2M庚烷/乙苯/四氫呋喃；69.4mL，138.9mmol)。將溶液冷卻至-78℃。逐滴加入庚烷-2，4-二酮(7.13mL，69.4mmol)并在-78℃將溶液攪拌30分鐘。將4-硝基芐基溴(15.0g，69.4mmol)以一份加入。從干冰/丙酮浴上移走溶液，讓其升溫至室溫并攪拌16小時(shí)。將溶液冷卻至大約0℃并用1M HCl終止反應(yīng)。減壓除去四氫呋喃。將粗材料吸收到二氯甲烷中并用1M HCl和鹽水洗滌。用二氯甲烷再次洗滌水層。將合并后的二氯甲烷層干燥(Na2SO4)并減壓除去二氯甲烷。用5％～15％的乙酸乙酯/己烷進(jìn)行梯度快速柱色譜(FCC)從而得到標(biāo)題化合物(8.5g，52％；黃色固體)。1H NMR(CDCl3)δ8.14(d，J＝9.0Hz，2H)，δ7.43(d，J＝8.4Hz，2H)，δ5.45(s，1H)，δ3.06(t，J＝7.5Hz，2H)，δ2.64(t，J＝7.8Hz，2H)，δ2.04(s，3H)。
步驟24-[4-(3，5-二氧代己基)-苯基氨甲?；鵠-丁酸(12) 在反應(yīng)容器中加入200mL四氫呋喃、6-(4-硝基苯基)-己烷-2，4-二酮(8.0g，34.0mmol)和二氫吡喃-2，6-二酮(3.88g，34.0mmol)。用氬氣吹掃反應(yīng)容器三次。加入約200mg鈀(活性炭中10重量％)。再次用氬氣吹掃反應(yīng)容器并經(jīng)氣球?qū)脒^(guò)量氫氣。將溶液在室溫?cái)嚢?6小時(shí)。減壓除去氫氣并通過(guò)過(guò)濾經(jīng)硅藻土除去催化劑。減壓除去四氫呋喃從而得到標(biāo)題化合物(10.5g，97％，黃色固體)。
步驟34-[4-(3，5-二氧代己基)-苯基氨甲酰基]-丁酸2，5-二氧代吡咯烷-1-基酯(10) 在反應(yīng)容器(加熱并真空干燥且?guī)в写判詳嚢璐抛?中加入4-[4-(3，5-二氧代己基)-苯基氨甲?；鵠-丁酸(10.53g，33.0mmol)、N-羥基琥珀酰亞胺(3.8g，33.0mmol)和1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(6.3g，33.0mmol)以及二氯甲烷(250mL)。將溶液在室溫氮?dú)庀聰嚢?6小時(shí)然后用檸檬酸、鹽水洗滌并干燥(Na2SO4)。減壓除去二氯甲烷。用70％的乙酸乙酯/己烷的FCC得到標(biāo)題化合物(7.4g，黃色固體，54％)。1H NMR(CDCl3)δ7.87(s，1H)，δ7.43(d，J＝8.4Hz，2H)，δ7.12(d，J＝8.4Hz，2H)，δ5.46(s，1H)，δ2.89(t(&m)，J＝8.1Hz(對(duì)t)，7H)，δ2.73(t，J＝6.0Hz，2H)，δ2.56(t，J＝7.2Hz，2H)，δ2.47(t，J＝6.9Hz，2H)，δ2.21(p，J＝6.6Hz，2H)，δ2.04(s，3H)。
實(shí)施例23B3-{2-[2-(2-{4-[4-(3，5-二氧代己基)-苯基氨甲?；鵠-丁酰氨基}-乙氧基)-乙氧基]-乙氧基}-丙酸2，5-二氧代-吡咯烷-1-基酯(20)的合成
步驟13-{2-[2-(2-羥基乙氧基)-乙氧基]-乙氧基}-丙酸叔丁酯 將金屬Na(催化性)在0℃加入攪拌中的丙烯酸叔丁酯(6.7mL，46mmol)和2-[2-(2-羥基乙氧基)-乙氧基]-乙醇(20.7g，138mmol)在THF(100mL)中的溶液中并將該混合物攪拌過(guò)夜。除去溶劑并將剩余油狀物溶解在EtOAc(100mL)中。將有機(jī)層用水洗滌(3×50mL)并在Na2SO4上干燥然后在真空中除去溶劑從而得到對(duì)應(yīng)于標(biāo)題化合物的油狀物，所述油狀物將直接用于下一步。(M+1)＝279。
步驟23-{2-[2-(2-對(duì)甲苯磺酰基磺酰氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙氧基}-丙酸叔丁酯 將對(duì)甲苯磺酰氯(22.3g，117mmol)逐份加入攪拌中的3-{2-[2-(2-羥基乙氧基)-乙氧基]-乙氧基}-丙酸叔丁酯(16.3g，58.6mmol)和60mL吡啶在(240mL)中的溶液中并將該混合物攪拌過(guò)夜。用水(300mL)終止反應(yīng)并分離出有機(jī)層。用CH2Cl2萃取水層(2×100mL)。將合并后的有機(jī)層用HCl(1N，100mL)和水(100mL)洗滌并在Na2SO4上干燥，然后在真空中除去溶劑從而得到對(duì)應(yīng)于標(biāo)題化合物的油狀物，所述油狀物將直接用于下一步。(M+1)＝433。
步驟33-{2-[2-(2-氨基乙氧基)-乙氧基]-乙氧基}-丙酸叔丁酯 將NaN3(35g，538mmol)加入攪拌中的3-{2-[2-(2-對(duì)甲苯磺?；酋Ｑ趸?乙氧基)-乙氧基]-乙氧基}-丙酸叔丁酯(20g，46mmol)的DMF(150mL)溶液中并將反應(yīng)攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)用水(200mL)稀釋并用EtOAc(4×100mL)萃取。將有機(jī)層用水(100mL)和鹽水(100mL)洗滌并在Na2SO4上干燥。在真空中除去溶劑從而得到油狀物。采用EtOAc/Hex(1∶4)的柱色譜得到了對(duì)應(yīng)于3-{2-[2-(2-疊氮基乙氧基)-乙氧基]-乙氧基}-丙酸叔丁酯的油狀物，(M+1)＝304。用Pd(在碳上5％)在EtOAc中在氫氣(1atm.)下對(duì)該油狀物氫化3天。過(guò)濾除去催化劑并在真空中除去溶劑從而得到對(duì)應(yīng)于標(biāo)題化合物的油狀物，(M+1)＝278。
步驟43-{2-[2-(2-{4-[4-(3，5-二氧代己基)-苯基氨甲?；鵠-丁酰氨基}-乙氧基)-乙氧基]-乙氧基}丙酸叔丁酯 將4-[4-(3，5-二氧代己基)-苯基氨甲?；鵠-丁酸2，5-二氧代吡咯烷-1-基酯(1.5g，3.6mmol)、3-{2-[2-(2-氨基乙氧基)-乙氧基]-乙氧基}-丙酸叔丁酯(1.0g，3.6mmol)和DIEA(1.3μL，7.2mmol)在CH2Cl2(10mL)中的溶液在室溫?cái)嚢柽^(guò)夜。在真空中除去溶劑并用采用EtOAc/MeOH的柱色譜對(duì)殘留油狀物進(jìn)行純化從而得到透明油狀標(biāo)題化合物，(M+1)＝579。
步驟53-{2-[2-(2-{4-[4-(3，5-二氧代己基)-苯基氨甲酰基]-丁酰氨基}-乙氧基)-乙氧基]-乙氧基}-丙酸2，5-二氧代吡咯烷-1-基酯 將3-{2-[2-(2-{4-[4-(3，5-二氧代己基)-苯基氨甲?；鵠-丁酰氨基}-乙氧基)-乙氧基]-乙氧基}-丙酸叔丁酯(400mg，0.692mmol)溶于TFA/CH2Cl2(1∶1，3mL)中并將該混合物攪拌過(guò)夜。除去溶劑從而得到作為酸中間體的油狀物。將該油狀物溶于含DIEA(569L，3.09mmol)、N-羥基琥珀酰亞胺(119mg，1.03mmol)和EDC(197mg，1.0mmol)的CH2Cl2(4mL)中并將該混合物攪拌過(guò)夜。除去溶劑并用采用EtOAc/MeOH(95∶5)的柱色譜對(duì)殘留油狀物進(jìn)行純化從而得到油狀標(biāo)題化合物，(M+1)＝620。
實(shí)施例24基于h38c2的GA靶向化合物的合成 可以通過(guò)以下過(guò)程將實(shí)施例16和17的化合物與h38c2相連將1mL抗體h38c2在磷酸鹽緩沖液(10mg/mL)加入12μL的10mg/mL靶向化合物的儲(chǔ)備溶液中，并在使用前將所得混合物在室溫保持2小時(shí)。
實(shí)施例25 C.Rader，等，J.Mol.Biol.332889-899(2003)詳細(xì)說(shuō)明了一種制備h38c2的方法。以下對(duì)該參考文獻(xiàn)中的結(jié)果、材料和方法進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。
結(jié)果 人源化將人Vκ基因DPK-9和人Jκ基因JK4用作κ輕鏈可變域的人源化的框架，并且將人VH基因DP-47和人JH基因JH4用作m38C2的重鏈可變域的人源化的框架。將由Kabat等定義的所有互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)殘基以及在輕鏈可變域和重鏈可變域中的確定的框架殘基從m38C2移植到人類框架中。移植的框架殘基的選擇基于小鼠mAb33F12Fab(PDB 1AXT)的晶體結(jié)構(gòu)。mAb 33F12Fab與m38c2在可變域中共享92％的序列同源性和相同的CDR長(zhǎng)度。此外，33F12和m38C2兩者具有相似的催化活性。嫁接的框架殘基由輕鏈中的5個(gè)殘基和重鏈中的7個(gè)殘基組成并且包含可能直接或間接地參與m38C2的催化活動(dòng)的殘基。這些殘基包括m38C2的位于重鏈的框架區(qū)3(FR3)的反應(yīng)性賴氨酸(LysH93)。小鼠mAb 33F12和小鼠mAb 38C2之間的6個(gè)保守性殘基SerH35、ValH37、TrpH47、TrpH103和PheL98處在LysH93的ε氨基的

半徑之內(nèi)。這些殘基在人源化中也被保留。LysH93位于小鼠mAb 33F12和小鼠mAb 38C2的高度疏水底物結(jié)合位點(diǎn)的底部。除CDR殘基之外，許多框架殘基襯于該口袋中。其中，LeuL37、GlnL42、SerL43、ValL85、PheL87、ValH5、SerH40、GluH42、GlyH88、IleH89和ThrH94被移植到人類框架中。
表達(dá)通過(guò)將人源化可變域與人類恒定域Cκ和Cγ11的融合，首先產(chǎn)生了作為Fab表達(dá)在大腸桿菌中的h38C2。接著，用工程化用于人類IgG1在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)的PIGG載體從h38c2Fab形成了h38c2IgG。讓來(lái)自瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的人293T細(xì)胞的上清液通過(guò)親和色譜在重組蛋白A上純化，從而生成約1mg/L h38C2IgG1。通過(guò)SDS-PAGE接著考馬斯藍(lán)染色來(lái)確定純度。
β-二酮化合物——
β-二酮化合物——通過(guò)β-二酮與m38c2的共價(jià)加成形成的烯胺酮在λmax＝318nm處具有特征性紫外吸收。與m38C2IgG相似，h38C2IgG在與β-二酮溫育后顯示出特征性的烯胺酮吸收。作為負(fù)對(duì)照，帶有與h38C2相同的IgG1同種型但不帶反應(yīng)性賴氨酸的重組人抗HIV-1gp120mAb b12在與β-二酮2溫育后沒(méi)有顯示出烯胺酮吸收。對(duì)于β-二酮與m38C2和h38C2的結(jié)合的定量對(duì)比，作者采用了競(jìng)爭(zhēng)ELISA。將抗體與遞增濃度的β-二酮2和3溫育并對(duì)抗固定化的BSA-偶聯(lián)β-二酮1進(jìn)行測(cè)試。表觀平衡解離常數(shù)對(duì)β-二酮2是38μM(m38C2)和7.6μM(h38C2)，而對(duì)β-二酮3是0.43μM(m38C2)和1.0μM(h38C2)，顯示出β-二酮對(duì)小鼠抗體和人源化抗體相似的結(jié)合性質(zhì)。
材料和方法 分子模擬——通過(guò)同源性模擬用相關(guān)的醛縮酶抗體小鼠33F12Fab(Protein Data Bank ID1AXT)作為模板來(lái)構(gòu)建了h38C2Fab的分子模型。此前在

的分辨率下確定了小鼠33F12Fab的晶體結(jié)構(gòu)。4用INSIGHT II軟件(Accelrys)的HOMOLOGY模塊對(duì)小鼠33F12和38C2氨基酸序列的比對(duì)證實(shí)了兩個(gè)序列高度同源。它們彼此的區(qū)別是兩個(gè)可變域的226個(gè)氨基酸中有19個(gè)不同，并且它們的CDR共享相同的長(zhǎng)度。除了高度序列同源性以外，從38C2的低分辨晶體結(jié)構(gòu)觀察，兩個(gè)結(jié)構(gòu)都展示出可觀的結(jié)構(gòu)相似性，將模型中的殘基突變以符合h38C2的氨基酸序列并且基于標(biāo)準(zhǔn)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體來(lái)放置側(cè)鏈。然后用INSIGHTII中的DISCOVER模塊采用100步各自為先最陡下降最小化然后共軛梯度最小化的步驟來(lái)將該模型最小化。
h38C2 Fab的構(gòu)建——用m38C2的可變輕鏈域和可變重鏈域的序列以及人種系序列DPK-9、JK4、DP-47和JH4的序列(V BASE；見(jiàn)互聯(lián)網(wǎng)，mrc-cpe.cam.ac.uk/vbase)來(lái)設(shè)計(jì)分別用于人源化Vκ和VH的合成組裝體的重疊寡核苷酸。避開(kāi)了帶有序列NXS/T的N-糖基化位點(diǎn)以及內(nèi)部限制性位點(diǎn)HindIII、Xbal、SacI、ApaI和SfiI。使用擴(kuò)展高保真PCR系統(tǒng)(Expand High Fidelity PCR System(Roche Molecular Systems))進(jìn)行PCR。人源化的Vκ寡核苷酸是L同義側(cè)翼(flank sense)(C.Rader等，J.Biol.Chem.27513668-13676(2000))；h38C2L1(同義；5′-GAGCTCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGTGACCGCGTCACCATCACTTG-3′)(SEQ.ID.NO85)；h38C2L2(反義；5′-ATTCAGATATGGGCTGCCATAAGTGTGCAGGAGGCTCTGACTGGAGCGGCAAGTGATGGTGACGCGGTC-3′)(SEQ.ID.NO86)；h38C2L3(同義；5′-TATGGCAGCCCATATCTGAATTGGTATCTCCAGAAACCAGGCCAGTCTCCTAAGCTCCTGATCTAT-3′)(SEQ.ID.NO87)；h38C2L4(反義；5′-CTGAAACGTGATGGGACACCACTGAAACGATTGGACACTTTATAGATCAGGAGCTTAGGAGACTG-3′)(SEQ.ID.NO88)；h38C2L5(同義；5′-AGTGGTGTCCCATCACGTTTCAGTGGCAGTGGTTCTGGCACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGTCTGCAACCTGAAGATTTTGCAGTG-3′)(SEQ.ID.NO89)；h38C2L6(反義；5′-GATCTCCACCTTGGTCCCTCCGCCGAAAGTATAAGGGAGGTGGGTGCCCTGACTACAGAAGTACACTGCAAAATCTTCAGGTTGCAG-3′)(SEQ.ID.NO90)和L反義側(cè)翼(antisense flank)(C.Rader等，J.Biol.Chem.27513668-13676(2000))。人源化的VH寡核苷酸是H同義側(cè)翼(C.Rader等，J.Biol.Chem.27513668-13676(2000))；h38C2H1(同義；5′-GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGCGGTGGCTTGGTACAGCCTGGCGGTTCCCTGCGCCTCTCCTGTGCAGCCTCTGGCT-3′)(SEQ.ID.NO91)；h38C2H2(反義；5′-CTCCAGGCCCTTCTCTGGAGACTGGCGGACCCAGCTCATCCAATAGTTGCTAAAGGTGAAGCCAGAGGCTGCACAGGAGAG-3′)(SEQ.ID.NO92)；h38C2H3(同義；5′-TCTCCAGAGAAGGGCCTGGAGTGGGTCTCAGAGATTCGTCTGCGCAGTGACAACTACGCCACGCACTATGCAGAGTCTGTC-3′)(SEQ.ID.NO93)；h38C2H4(反義；5′-CAGATACAGCGTGTTCTTGGAATTGTCACGGGAGATGGTGAAGCGGCCCTTGACAGACTCTGCATAGTGCGTG-3′)(SEQ.ID.NO94)；h38C2H5(同義；5′-CAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGCGCGCCGAGGACACGGGCATTTATTACTGTAAAACG-3′)(SEQ.ID.NO95)；h38C2H6(反義；5′-TGAGGAGACGGTGACCAGGGTGCCCTGGCCCCAGTAGCTGAAACTGTAGAAGTACGTTTTACAGTAATAAATGCCCGTG-3′)(SEQ.ID.NO96)；H反義側(cè)翼(C.Rader等，J.Biol.Chem.27513668-13676(2000))。在組裝后，將人源化Vκ和VH分別與人Cκ和Cγ11融合，并將所得輕鏈和重鏈片段融合并且如“C.Rader et al，J.Biol.Chem.27513668-13676(2000)；C.F.Barbas 3rd等，Phage DisplayA laboratorymanual，Cold Spring Harbor Laboratory，Cold Spring Harbor N.Y.(2001)”所述將SfiI克隆到噬菌粒載體pComb3X內(nèi)。為了富集帶有正確h38C2序列的克隆體，將Fab展示在噬菌體上并通過(guò)一輪抗固定化的與BSA偶聯(lián)的β-二酮i(JW)的淘選來(lái)選擇。從單一克隆體產(chǎn)生了可溶性Fab并對(duì)其與固定化的JW-BSA的結(jié)合通過(guò)ELISA用與辣根過(guò)氧化物酶(Jackson ImmunoResearch Laboratories)偶聯(lián)的驢抗人F(ab′)2多克隆抗體作為二抗來(lái)進(jìn)行測(cè)試。通過(guò)DNA測(cè)序分別采用引物OMPSEQ和PELSEQ來(lái)分析正克隆體的輕鏈和重鏈編碼序列(C.F.Barbas 3rd等，Phage DisplayA laboratory manual，Cold Spring Harbor Laboratory，ColdSpring Harbor N.Y.，(2001))以便確定h38C2的Vκ和VH組裝序列。
h38C2 IgG1的構(gòu)建、生成和純化——將近來(lái)描述的載體PIGG(C.Rader et al，F(xiàn)ASEB J.，162000-2002(2002))用于h38C2IgG1的哺乳動(dòng)物表達(dá)。哺乳動(dòng)物表達(dá)載體PIGG-h38c2如圖23所示。該9kb載體包含由雙向CM啟動(dòng)子構(gòu)建體驅(qū)動(dòng)的重鏈γ1和輕鏈κ表達(dá)盒。使用引物PIGG-h38C2H(同義；5′-GAGGAGGAGGAGGAGGAGCTCACTCCGAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTG-3′)(SEQ.ID.NO97)和GBACK(C.F.Barbas 3rd等，PhageDisplayA laboratory manual，Cold Spring Harbor Laboratory，ColdSpring Harbor N.Y.(2001))來(lái)將來(lái)自噬菌粒載體pComb3X中的h38C2Fab的VH編碼序列擴(kuò)增，用SacI和ApaI消化，并克隆到經(jīng)適當(dāng)消化的載體PIGG中。使用引物PIGG-h38C2L(同義；5′-GAGGAGGAGGAGGAGAAGCTTGTTGCTCTGGATCTCTGGTGCCTACGGGGAGCTCCAGATGACCCAGTCTCC-3′)(SEQ.ID.NO98)和LEADB(C.F.Barbas 3rd等，Phage DisplayA laboratory manual，ColdSpring Harbor Laboratory，Cold Spring Harbor N.Y.(2001))將來(lái)自噬菌粒載體pComb3X中的h38C2Fab的VL編碼序列擴(kuò)增，用HindIII和XbaI消化，并克隆到已經(jīng)含有h38C2重鏈的經(jīng)適當(dāng)消化的載體PIGG中。將中間體和最終PIGG載體構(gòu)建體在大腸桿菌菌株SURE(Stratagene)中擴(kuò)增并用QIAGEN質(zhì)粒大量提取試劑盒(Plasmid Maxi Kit)制備。從制備的最終PIGG載體構(gòu)建體通過(guò)用Lipofectamine 2000(Invitrogen)瞬時(shí)轉(zhuǎn)染人293T細(xì)胞來(lái)生成h38C2IgG1。將轉(zhuǎn)染細(xì)胞在RPMI 1640(Hyclone)中的GIBCO 10％超低IgG(＜0.1％)FCS(Invitrogen)中保持2周。在此期間，收集培養(yǎng)基并替換三次。將收集的培養(yǎng)基通過(guò)親和色譜在重組蛋白A HiTrap柱(Amersham Biosciences)上純化。該純化步驟從2,300mL收集的培養(yǎng)基中生成了2.45mg h38C2IgG1，該產(chǎn)量通過(guò)用Eppendorf生物分光光度計(jì)測(cè)定280nm處的光學(xué)密度來(lái)確定。在Slide-A-Lyzer 10K透析盒(Pierce)中以PBS透析后，用Ultrafree-15離心過(guò)濾機(jī)(UFV2BTK40；Millipore)將抗體濃縮至760μg/mL，然后通過(guò)0.2-μm Acrodisc 13MM S-200針頭式過(guò)濾器(Pall)進(jìn)行無(wú)菌過(guò)濾。最終產(chǎn)量為2.13mg(87％)。通過(guò)非還原性SDS-PAGE繼以考馬斯藍(lán)染色來(lái)確認(rèn)了純化的h38C2IgG1。
烯胺酮的形成——將抗體(h38C2IgG1或b12IgG1)加入β-二酮(ii)中以達(dá)到25μM的抗體結(jié)合位點(diǎn)濃度和125μM的β-二酮濃度。將該混合物在室溫溫育10分鐘然后用SOFTmax Pro軟件(版本3.1.2)在SpectraMax Plus 384UV讀板器(Molecular Devices)上采集紫外光譜。
結(jié)合測(cè)試——除非另外注明，所有溶液都是磷酸鹽緩沖液(pH7.4)。將β-二酮(ii)或(iii)的2×溶液(50μL)加入50μL抗體(h38C2或m38C2)中并讓其在37℃溫育1小時(shí)。將溶液通過(guò)移液器混合。抗體的最終濃度為0.4nM～8nM的抗體結(jié)合位點(diǎn)，且β-二酮(ii)和(iii)的最終濃度分別為10-9～10-2M和10-10～10-4M。用100ng的β-二酮(i)的BSA偶聯(lián)物的TBS溶液對(duì)Costar 3690 96孔板(Corning)的各孔進(jìn)行涂布。然后加入50μL抗體/β-二酮混合物，接著加入50μL的與辣根過(guò)氧化物酶偶聯(lián)的羊抗人Fc IgG多克隆抗體(Pierce)或兔抗小鼠Fc IgG多克隆抗體(Jackson ImmunoResearch Laboratories)的1∶1,000稀釋液。隨后加入50μL ABTS底物溶液。在每次加入之間，將板蓋好并在37℃溫育1小時(shí)，然后用去離子H2O洗滌5次。如上所述監(jiān)測(cè)405nm處的吸光度直到?jīng)]有β-二酮的反應(yīng)達(dá)到適當(dāng)值(0.5＜A405＜1.0)。對(duì)于各孔，用方程(a)計(jì)算ELISA信號(hào)的分式抑制(fractional inhibition) vi＝(Ao-Ai)/(Ao)(a) 其中Ao是在β-二酮不存在時(shí)獲得的ELISA吸光度，而Ao是在β-二酮存在時(shí)獲得的ELISA吸光度。對(duì)于單價(jià)的結(jié)合蛋白，與可溶性β-二酮(fi)結(jié)合的抗體的組分等于vi。然而，IgG抗體為二價(jià)，且ELISA信號(hào)僅受雙配位的抗體的存在的抑制而不受單價(jià)結(jié)合的抑制。因此，使用了對(duì)二價(jià)抗體的Stevens校正， fi＝(vi)1/2 (b) 使用了以下關(guān)系來(lái)確定表觀平衡解離常數(shù) fi＝fmin+(fmax-fmin)(1+KD/a0)-1 (c) 其中a0對(duì)應(yīng)于β-二酮的總濃度，KD是平衡解離常數(shù)，而fmin和fmax分別表示當(dāng)抗體結(jié)合位點(diǎn)未被占據(jù)或飽和時(shí)的實(shí)驗(yàn)確定值。由于該方程僅在KD值比抗體濃度至少高10倍時(shí)有效，證實(shí)了從方程iii確定的KD值達(dá)到了這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)。使用KaleidaGraph(版本3.0.5，Abelbeck software)的非線性最小二乘擬合法以KD、fmax和fmin作為可調(diào)參數(shù)來(lái)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合并用方程(d)歸一化 fnorm＝(fi-fmin)/(fmax-fmin)(d) 實(shí)施例2620原子AZD馬來(lái)酰亞胺接頭的合成
提供于圖29中。
實(shí)施例27 可以與圖29所示的接頭一同使用的側(cè)鏈修飾的Lys的合成提供于圖30中。
實(shí)施例28 在圖3l中提供了GA靶向劑-接頭偶聯(lián)物的合成，該GA靶向劑-接頭偶聯(lián)物包含經(jīng)由肽中的側(cè)鏈修飾的Lys殘基與圖29所示的20原子AZD馬來(lái)酰亞胺接頭相連的SEQ ID NO22的GA靶向肽。
實(shí)施例29 在圖32中提供了GA靶向劑-接頭偶聯(lián)物的合成，該GA靶向劑-接頭偶聯(lián)物包含經(jīng)由肽中的側(cè)鏈修飾的Lys殘基與圖29所示的20原子AZD馬來(lái)酰亞胺接頭相連的SEQ ID NO32的GA靶向肽。
實(shí)施例30GA靶向肽介導(dǎo)的體外胰島素分泌的表征 用與實(shí)施例1和2中所述的用于SEQ ID NO1和SEQ ID NO2的GA靶向肽的相同一般方法生成了具有SEQ ID NO1～76描述的氨基酸序列的GA靶向肽類似物。
采用葡萄糖刺激的胰島素分泌(GSIS)測(cè)試來(lái)測(cè)試SEQ IDNO1～13、32、35、40～47、49～51、53～55和57～63的GA靶向肽在體外刺激從胰腺β細(xì)胞的胰島素分泌的能力。簡(jiǎn)言之，將葡萄糖和GA靶向肽以不同濃度加入胰腺β細(xì)胞培養(yǎng)物中，然后通過(guò)測(cè)定隨時(shí)間進(jìn)行的胰島素水平來(lái)檢測(cè)胰島素分泌。對(duì)各個(gè)肽計(jì)算EC50。該測(cè)試結(jié)果列于下表III中。
表III GA靶向肽EC50(μM) SEQ ID NO1(GLP-17-36) ＜10 SEQ ID NO2(exendin-4) ＜10 SEQ ID NO3 ＜10 SEQ ID NO4 ＜10 SEQ ID NO5 ＜10 SEQ ID NO6 ＜10 SEQ ID NO7 ＜10 SEQ ID NO8 ＜10 SEQ ID NO9 ＜10 SEQ ID NO10 ＜10 SEQ ID NO11 ＜10 SEQ ID NO12 ＜10 SEQ ID NO13 ＜10 SEQ ID NO32 ＜10 SEQ ID NO35 ＜10 SEQ ID NO40 ＜10 SEQ ID NO41 ＜10 SEQ ID NO42 ＜10 SEQ ID NO43 ＜10 SEQ ID NO44 ＜10 SEQ ID NO45 ＜10 SEQ ID NO46 ＜10 SEQ ID NO47 ＜10 SEQ ID NO49 ＜10 SEQ ID NO50 ＜10 SEQ ID NO51 ＜10 SEQ ID NO53 ＜10 SEQ ID NO54 ＜10 SEQ ID NO55 ＜10 SEQ ID NO57 ＜10 SEQ ID NO58 ＜10 SEQ ID NO59 ＜10 SEQ ID NO60 ＜10 SEQ ID NO61 ＜10 SEQ ID NO62 ＜10 SEQ ID NO63＜10 實(shí)施例31GA靶向肽-接頭偶聯(lián)物介導(dǎo)的體外胰島素分泌的表征 將SEQ ID NO1～76的GA靶向肽與不同接頭連接以生成GA靶向肽-接頭偶聯(lián)物。將SEQ ID NO3～5、14～33、35～37、57和63～72的GA靶向肽與實(shí)施例26中合成的20原子AZD馬來(lái)酰亞胺接頭(“20-原子AZD”)連接，該接頭具有如下結(jié)構(gòu)
對(duì)于SEQ ID NO22和SEQ ID NO32的GA靶向肽的肽與20-原子AZD的連接反應(yīng)分別如圖26和圖27中所示。
SEQ ID NO32和37的GA靶向肽與10-原子AZD馬來(lái)酰亞胺接頭“10-原子AZD”連接，該接頭具有如下結(jié)構(gòu)
SEQ ID NO37的GA靶向肽與13-原子AZD馬來(lái)酰亞胺接頭“13-原子AZD”連接，該接頭具有如下結(jié)構(gòu)
SEQ ID NO35和37的GA靶向肽與16-原子AZD馬來(lái)酰亞胺接頭“16-原子AZD”連接，該接頭具有如下結(jié)構(gòu)
SEQ ID NO35的GA靶向肽與26-原子AZD馬來(lái)酰亞胺接頭“26-原子AZD”連接，該接頭具有如下結(jié)構(gòu)
SEQ ID NO33和37的GA靶向肽與接頭“Gly-AZD”連接，該接頭具有如下結(jié)構(gòu)
SEQ ID NO1、33、34和36～37的GA靶向肽與接頭“PEG4-Glu-DK接頭”連接，該接頭具有如下結(jié)構(gòu)
采用實(shí)施例30所述的GSIS測(cè)試對(duì)這些GA靶向劑-接頭偶聯(lián)物在體外刺激胰島素分泌的能力進(jìn)行測(cè)定。使用由與20-原子AZD相連的SEQ ID NOs4-5和14-31的GA靶向肽組成的那些偶聯(lián)物進(jìn)行系縛行走實(shí)驗(yàn)(tethered walk experiment)以確定連接GA靶向肽與接頭的最佳位置。這些肽每個(gè)都在不同的位置含有根據(jù)圖30所示的方案的側(cè)鏈修飾的Lys殘基。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果列于下表IV中。
圖IV GA靶向劑-接頭偶聯(lián)物EC50(μM) SEQ ID NO4-20原子AZD ＜10 SEQ ID NO5-20原子AZD ＜10 SEQ ID NO19-20原子AZD＜10 SEQ ID NO20-20原子AZD＜10 SEQ ID NO21-20原子AZD＜10 SEQ ID NO22-20原子AZD＜10 SEQ ID NO23-20原子AZD＜10 SEQ ID NO24-20原子AZD＜10 SEQ ID NO25-20原子AZD ＜10 SEQ ID NO26-20原子AZD ＜10 SEQ ID NO27-20原子AZD ＜10 SEQ ID NO28-20原子AZD ＜10 SEQ ID NO32-20原子AZD ＜10 SEQ ID NO37-20原子AZD ＜10 SEQ ID NO32-10原子AZD ＜10 SEQ ID NO37-10原子AZD ＜10 SEQ ID NO35-26原子AZD ＜10 SEQ ID NO33-Gly-AZD ＜10 SEQ ID NO1-PEG4-Glu-DK＜10 SEQ ID NO33-PEG4-Glu-DK ＜10 SEQ ID NO34-PEG4-Glu-DK(經(jīng)K20連接)＜10 SEQ ID NO34-PEG4-Glu-DK(在N端連接)＜10 SEQ ID NO36-PEG4-G1u-DK ＜10 SEQ ID NO37-PEG4-Glu-DK ＜10 SEQ ID NO74(經(jīng)K28與苯甲?；舛讼噙B) ＜10 SEQ ID NO75(與N端的反-3-乙酰基封端相連) ＜10 SEQ ID NO76(與N端的3-氨基苯基乙?；舛讼噙B) ＜10 實(shí)施例32葡萄糖耐受測(cè)試(GTT)、體重變化和食物攝入 使用單一劑量或重復(fù)劑量的葡萄糖耐受測(cè)試范式(圖35)對(duì)本發(fā)明的示例性GA靶向化合物和試劑的體內(nèi)藥效進(jìn)行評(píng)估。對(duì)年輕成年雄性ob/ob小鼠(Jackson Laboratories，Bar Harbor，ME)在中肩胛區(qū)采用簡(jiǎn)短手動(dòng)約束(brief manual restraint.)用本發(fā)明的化合物以0.2mL～0.3mL的注射體積進(jìn)行皮下(SC)給藥。用載體(Vehicle)對(duì)瘦小的同窩生仔畜對(duì)照小鼠(n＝8/組，Jackson Laboratories，Bar Harbor，ME)相似地給藥。每日早晨(08:00～09:00H；06:00H開(kāi)燈，18:00H關(guān)燈)監(jiān)測(cè)食物攝入(圖36)和累積體重變化(圖37)。
遵循標(biāo)準(zhǔn)方案使小鼠經(jīng)受口服葡萄糖耐受測(cè)試(OGTT)。簡(jiǎn)言之，將種群中的小鼠在開(kāi)燈期開(kāi)始時(shí)禁食4小時(shí)～5小時(shí)。在該階段結(jié)束時(shí)(下午早期)，在施以口服葡萄糖負(fù)荷(1.5g/kg)之前和其后以15分鐘～120分鐘的規(guī)則間隔對(duì)小鼠取尾血。將食物返回籠中并在120分鐘時(shí)間點(diǎn)后收集。用自測(cè)試血糖儀確定葡萄糖水平，并用線性梯形方程對(duì)口服葡萄糖負(fù)荷后作為時(shí)間的函數(shù)的葡萄糖的曲線下面積(AUC)進(jìn)行計(jì)算。
在位置23處的連接(SEQ ID NO21)沒(méi)有降低體重或攝食量并且沒(méi)有在48小時(shí)內(nèi)改善葡萄糖耐受量。在位置17、24、38處和在C端的連接(SEQ ID NO25、20、14、131、132)降低了體重和攝食量但沒(méi)有在72小時(shí)內(nèi)改善葡萄糖耐受量。在位置26處的連接(SEQ ID NO19)沒(méi)有降低體重或攝食量但沒(méi)有在48小時(shí)內(nèi)改善葡萄糖耐受量。所有實(shí)例采用K或K(SH)作為連接殘基。在本發(fā)明的某些方面，在某些條件下表現(xiàn)良好的化合物可能適于某些應(yīng)用。在本方面的其它方面，在多個(gè)測(cè)試條件下展現(xiàn)出優(yōu)點(diǎn)的化合物可能是有利的。
數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差表示并且用Dunnett驗(yàn)后多重比較(Dunnett’s post-hoc test)通過(guò)單向ANOVA(GraphPad Prism 4.0，GraphPad Software Inc.，San Diego，CA)分析組間差異。
由此已經(jīng)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了廣泛地公開(kāi)并參考上述代表性實(shí)施方式進(jìn)行了示例說(shuō)明。本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到可以在不背離本發(fā)明的精神和范圍下對(duì)本發(fā)明作出各種更改。本文中通過(guò)參考引入所有出版物、專利申請(qǐng)和公開(kāi)專利，其程度如同具體且特定地表明了將各個(gè)單獨(dú)出版物、專利申請(qǐng)或公開(kāi)專利通過(guò)參考以整體引入。通過(guò)參考引入的正文所含的定義被排除在外以致于這些定義與本公開(kāi)中的定義相抵觸。
詞語(yǔ)“comprises/comprising”和詞語(yǔ)“having/including”用來(lái)指明所陳述的特征、整體、步驟或成分的存在但不排除一種或多種特征、整體、步驟、成分或它們的組的存在或添加。
可以理解，為明晰起見(jiàn)而在分開(kāi)的實(shí)施方式的上下文中描述的本發(fā)明的某些特征也可以組合提供于單一實(shí)施方式中。反之，為簡(jiǎn)短起見(jiàn)而在單一實(shí)施方式的上下文中描述的本發(fā)明的不同特征也可以分別地或以任何適當(dāng)?shù)膩喗M合提供。
如上所述，顯而易見(jiàn)可以有效地進(jìn)行各種更改和變化而不背離本發(fā)明的新穎概念的真實(shí)精神和范圍?？梢岳斫獗竟_(kāi)意在陳述本發(fā)明的范例，這些范例并非意在將本發(fā)明限定在所說(shuō)明的具體實(shí)施方式
中。本公開(kāi)意在通過(guò)后附權(quán)利要求囊括所有在權(quán)利要求范圍內(nèi)的更改。
當(dāng)任何權(quán)利要求中提及的技術(shù)特征后帶參考符號(hào)時(shí)，包括這些參考符號(hào)的目的僅在于增加該權(quán)利要求的清晰性，因此這些參考符號(hào)沒(méi)有任何對(duì)由這些參考符號(hào)通過(guò)實(shí)例的方式確定的各個(gè)元素的范圍的限制性效果。
序列表
<110>Covx科技愛(ài)爾蘭有限公司
<120>胰高血糖素樣蛋白-1受體GLP-1R激動(dòng)劑化合物
<130>56633.8018.US03
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<151>2007-06-20
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<151>2007-05-23
<150>60/879,048
<151>2007-01-05
<160>173
<170>PatentIn version 3.4
<210>1
<211>30
<212>PRT
<213>智人
<400>1
His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg
20 25 30
<210>2
<211>39
<212>PRT
<213>鈍尾毒蜥
<400>2
His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>3
<211>40
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有C-端添加賴氨酸的Exendin-4肽
<400>3
His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu PheIle Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Lys
35 40
<210>4
<211>40
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和C-端添加賴氨酸的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>4
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Lys
35 40
<210>5
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>5
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>6
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和9個(gè)氨基酸羧基截短的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>6
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly
20 25 30
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<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和11個(gè)氨基酸羧基截短的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>7
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
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Glu Ala Val Arg Leu PheIle Glu Trp Leu Lys Asn
20 25
<210>8
<211>28
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代、14位上Met由Leu替代、25位上Trp由Phe替代和11個(gè)氨基酸羧基截短的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>8
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Phe Leu Lys Asn
20 25
<210>9
<211>28
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代、14位上Met由Leu替代、22位上Phe由Ala替代、25位上Trp由Phe替代和11個(gè)氨基酸羧基截短的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>9
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Ala Ile Glu Phe Leu Lys Asn
20 25
<210>10
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代、14位上Met由Leu替代、22位上Phe由Ala替代、25位上Trp由Phe替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>10
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Ala Ile Glu Phe Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>11
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代、14位上Met由Leu替代和25位上Trp由Phe替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>11
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Phe Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>12
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代、12位上K由K(Ac)替代和27位上K由K(Ac)替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(12)..(12)
<223>賴氨酸(Ac)
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(27)..(27)
<223>賴氨酸(Ac)
<400>12
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Xaa Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Xaa Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>13
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代、12位上K由K(苯甲?；?替代和27位上K由K(苯甲?；?替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(12)..(12)
<223>賴氨酸(苯甲?；?
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(27)..(27)
<223>賴氨酸(苯甲酰基)
<400>13
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Xaa Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Xaa Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>14
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和38位上Pro由Lys替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>14
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Lys Ser
35
<210>15
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和36位上Pro由Lys替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>15
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Lys Pro Pro Ser
35
<210>16
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和34位上Gly由Lys替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>16
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Lys Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>17
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和32位上Ser由Lys替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>17
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Lys
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>18
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和28位上Asn由Lys替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>18
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Lys Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>19
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和26位上Leu由Lys替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>19
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Lys Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>20
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和24位上Glu由Lys替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>20
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Lys Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>21
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和23位上Ile由Lys替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>21
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Lys Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>22
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和21位上Leu由Lys替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>22
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Lys Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>23
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和20位上Arg由Lys替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>23
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Lys Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>24
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和19位上Val由Lys替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>24
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Lys Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>25
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和17位上Glu由Lys替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>25
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Lys Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>26
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和16位上Glu由Lys替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>26
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Lys
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>27
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和14位上Met由Lys替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>27
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Lys Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>28
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和13位上Gln由Lys替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>28
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Lys Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>29
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和11位上Ser由Lys替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>29
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Lys Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>30
<211>31
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代、31位上Pro由Lys替代和8個(gè)氨基酸羧基截短的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>30
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Lys
20 25 30
<210>31
<211>33
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代、21位上Leu由Lys替代和6個(gè)氨基酸羧基截短的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>31
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Lys Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser
<210>32
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>32
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg
20 25 30
<210>33
<211>31
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有C-端添加賴氨酸的GLP-1(7-36)肽
<400>33
His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Lys
20 25 30
<210>34
<211>31
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代和C-端添加賴氨酸的GLP-1(7-36)肽
<400>34
His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Lys
20 25 30
<210>35
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>35
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>36
<211>31
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、29位上Gly由Aib2替代和C-端添加賴氨酸的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>36
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Xaa Arg Lys
20 25 30
<210>37
<211>31
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代和C-端添加賴氨酸的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>37
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Lys
20 25 30
<210>38
<211>31
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代和C-端添加賴氨酸(SH)的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(31)..(31)
<223>賴氨酸(SH)
<400>38
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Xaa
20 25 30
<210>39
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代和20位上Lys由Lys(SH)替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(20)..(20)
<223>賴氨酸(SH)
<400>39
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Xaa Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg
20 25 30
<210>40
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、14位上Leu由Gly替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>40
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Gly Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>41
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、14位上Leu由Cys替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>41
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Cys Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>42
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、14位上Leu由Phe替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>42
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Phe Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>43
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、14位上Leu由Tyr替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>43
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Tyr Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>44
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、14位上Leu由Trp替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>44
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Trp Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>45
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Glu替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>45
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>46
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Asp替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>46
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Asp
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>47
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Lys替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>47
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Lys
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>48
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、19位上Ala由Val替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>48
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>49
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、19位上Ala由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>49
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ile Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>50
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、19位上Ala由Leu替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>50
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Leu Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>51
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、20位上Lys由Arg替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>51
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>52
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、20位上Lys由Orn替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(20)..(20)
<223>鳥(niǎo)氨酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>52
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Xaa Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>53
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、25位上Trp由Phe替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>53
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu PheIle Ala Phe Leu Val Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>54
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>54
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>55
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、28位上Lys由Arg替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>55
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Arg Xaa Arg
20 25 30
<210>56
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、28位上Lys由Orn替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(28)..(28)
<223>鳥(niǎo)氨酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>56
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu PheIle Ala Trp Leu Val Xaa Xaa Arg
20 25 30
<210>57
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>57
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>58
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、14位上Leu由Phe替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>58
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Phe Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>59
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、14位上Leu由Tyr替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>59
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Tyr Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>60
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、14位上Leu由Trp替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>60
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Trp Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu PheIle Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>61
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、27位上Val由Ile替代、28位上Lys由Arg替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>61
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu PheIle Ala Trp LeuIle Arg Xaa Arg
20 25 30
<210>62
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有分別于2、16、19、20、27、28和29位上Ala由Aib2替代、Gly由Glu替代、Ala由Val替代、Lys由Arg、Val由Ile、Lys由Arg和Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>62
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Arg Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Arg Xaa Arg
20 25 30
<210>63
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>GLP-1(7-36)/exendin-4融合肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(30)
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(31)..(39)
<223>對(duì)應(yīng)于exendin-4的31-39殘基
<400>63
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>64
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、10位上Val由Lys替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>64
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>65
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、12位上Ser由Lys替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>65
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Lys Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>66
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、14位上Leu由Lys替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>66
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Lys Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>67
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Lys替代、19位上Ala由Val替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>67
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Lys
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>68
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Glu替代、18位上Ala由Lys替代、19位上Ala由Val替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>68
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Lys Val Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>69
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、22位上Phe由Lys替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>69
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Lys Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>70
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、24位上Ala由Lys替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>70
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Phe Ile Lys Trp Leu Ile Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>71
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、26位上Leu由Lys替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>71
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Phe Ile Ala Trp Lys Ile Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>72
<211>40
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>GLP-1(7-36)/exendin-4融合肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(30)
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(31)..(39)
<223>對(duì)應(yīng)于Exendin-4的31-39殘基
<400>72
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Lys
35 40
<210>73
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、27位上Val由Ile替代、28位上Lys由Lys(Ac)替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(28)..(28)
<223>賴氨酸(Ac)
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>73
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Xaa Xaa Arg
20 25 30
<210>74
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、27位上Val由Ile替代、28位上Lys由Lys(苯甲?；?替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(28)..(28)
<223>賴氨酸(苯甲酰基)
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>74
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Xaa Xaa Arg
20 25 30
<210>75
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有通過(guò)His殘基與N-端相連的反-3-己?；⒂?位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(1)
<223>與反-3-己?；噙B的組氨酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>75
Xaa Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>76
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有與N-端His殘基相連的3-氨基苯基乙酰基、于2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(1)
<223>與3-氨基苯基乙酰基相連的組氨酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>76
Xaa Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>77
<211>112
<212>PRT
<213>小家鼠
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(23)
<223>FR1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(24)..(39)
<223>CDR1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(54)
<223>FR2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(55)..(61)
<223>CDR2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(62)..(93)
<223>FR3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(94)..(102)
<223>CDR3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(103)..(112)
<223>FR4
<400>77
Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Arg Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Thr
20 25 30
Tyr Gly Ser Pro Tyr Leu Asn Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Phe Cys Ser Gln Gly
85 90 95
Thr His Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210>78
<211>118
<212>PRT
<213>小家鼠
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(30)
<223>FR1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(31)..(35)
<223>CDR1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(36)..(49)
<223>FR2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(50)..(68)
<223>CDR2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(69)..(100)
<223>FR3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(101)..(107)
<223>CDR3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(108)..(118)
<223>FR4
<400>78
Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Thr Met Lys Leu Ser Cys Glu Ile Ser Gly Leu Thr Phe Arg Asn Tyr
20 25 30
Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ser Pro Glu Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Glu Ile Arg Leu Arg Ser Asp Asn Tyr Ala Thr His Tyr Ala Glu
50 55 60
Ser Val Lys Gly Lys Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Ser Arg
65 70 75 80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Thr Glu Asp Thr Gly Ile Tyr
85 90 95
Tyr Cys Lys Thr Tyr Phe Tyr Ser Phe Ser Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100105 110
Leu Val Thr Val Ser Ala
115
<210>79
<211>112
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(23)
<223>FR1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(24)..(39)
<223>CDR1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(54)
<223>FR2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(55)..(61)
<223>CDR2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(62)..(93)
<223>FR3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(94)..(102)
<223>CDR3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(103)..(112)
<223>FR4
<400>79
Glu Leu Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Thr
20 25 30
Tyr Gly Ser Pro Tyr Leu Asn Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
65 70 75 80
Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Ser Gln Gly
85 90 95
Thr His Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210>80
<211>118
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(30)
<223>FR1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(31)..(35)
<223>CDR1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(36)..(49)
<223>FR2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(50)..(68)
<223>CDR2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(69)..(100)
<223>FR3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(101)..(107)
<223>CDR3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(108)..(118)
<223>FR4
<400>80
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ser Pro Glu Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Glu Ile Arg Leu Arg Ser Asp Asn Tyr Ala Thr His Tyr Ala Glu
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr
65 70 75 80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Gly Ile Tyr
85 90 95
Tyr Cys Lys Thr Tyr Phe Tyr Ser Phe Ser Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210>81
<211>95
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(23)
<223>FR1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(24)..(34)
<223>CDR1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(35)..(49)
<223>FR2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(50)..(56)
<223>CDR2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(57)..(88)
<223>FR3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(89)..(95)
<223>CDR3
<400>81
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser LeuGln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro
85 90 95
<210>82
<211>98
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(30)
<223>FR1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(31)..(35)
<223>CDR1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(36)..(49)
<223>FR2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(50)..(66)
<223>CDR2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(67)..(98)
<223>FR3
<400>82
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys
<210>83
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(2)
<223>CDR3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(3)..(12)
<223>FR4
<400>83
Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
1 5 10
<210>84
<211>15
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(4)
<223>CDR3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(5)..(15)
<223>FR4
<400>84
Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10 15
<210>85
<211>68
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>產(chǎn)生人源Vk的PCR引物
<400>85
gagctccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggtga ccgcgtcacc60
atcacttg 68
<210>86
<211>69
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>產(chǎn)生人源Vk的PCR引物
<400>86
attcagatat gggctgccat aagtgtgcag gaggctctga ctggagcggc aagtgatggt60
gacgcggtc69
<210>87
<211>66
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>產(chǎn)生人源Vk的PCR引物
<400>87
tatggcagcc catatctgaa ttggtatctc cagaaaccag gccagtctcc taagctcctg60
atctat 66
<210>88
<211>65
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>產(chǎn)生人源Vk的PCR引物
<400>88
ctgaaacgtg atgggacacc actgaaacga ttggacactt tatagatcag gagcttagga60
gactg65
<210>89
<211>90
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>產(chǎn)生人源Vk的PCR引物
<400>89
agtggtgtcc catcacgttt cagtggcagt ggttctggca cagatttcac tctcaccatc60
agcagtctgc aacctgaaga ttttgcagtg 90
<210>90
<211>87
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>產(chǎn)生人源Vk的PCR引物
<400>90
gatctccacc ttggtccctc cgccgaaagt ataagggagg tgggtgccct gactacagaa60
gtacactgca aaatcttcag gttgcag87
<210>91
<211>79
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>產(chǎn)生人源VH的PCR引物
<400>91
gaggtgcagc tggtggagtc tggcggtggc ttggtacagc ctggcggttc cctgcgcctc60
tcctgtgcag cctctggct 79
<210>92
<211>81
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>產(chǎn)生人源VH的PCR引物
<400>92
ctccaggccc ttctctggag actggcggac ccagctcatc caatagttgc taaaggtgaa60
gccagaggct gcacaggaga g 81
<210>93
<211>81
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>產(chǎn)生人源VH的PCR引物
<400>93
tctccagaga agggcctgga gtgggtctca gagattcgtc tgcgcagtga caactacgcc60
acgcactatg cagagtctgt c 81
<210>94
<211>73
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>產(chǎn)生人源VH的PCR引物
<400>94
cagatacagc gtgttcttgg aattgtcacg ggagatggtg aagcggccct tgacagactc60
tgcatagtgc gtg 73
<210>95
<211>76
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>產(chǎn)生人源VH的PCR引物
<400>95
caattccaag aacacgctgt atctgcaaat gaacagcctg cgcgccgagg acacgggcat60
ttattactgt aaaacg76
<210>96
<211>79
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>產(chǎn)生人源VH的PCR引物
<400>96
tgaggagacg gtgaccaggg tgccctggcc ccagtagctg aaactgtaga agtacgtttt60
acagtaataa atgcccgtg 79
<210>97
<211>48
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>用于擴(kuò)增h38C2 VH編碼序列的PCR引物
<400>97
gaggaggagg aggaggagct cactccgagg tgcagctggt ggagtctg 48
<210>98
<211>72
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>PCR primer for amplifying h38C2 VL coding sequence
<400>98
gaggaggagg aggagaagct tgttgctctg gatctctggt gcctacgggg agctccagat60
gacccagtct cc72
<210>99
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和38位上Pro由K(SH)替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(38)..(38)
<223>賴氨酸(SH)
<400>99
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Xaa Ser
35
<210>100
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和36位上Pro由K(SH)替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(36)..(36)
<223>賴氨酸(SH)
<400>100
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Xaa Pro Pro Ser
35
<210>101
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和34位上Gly由K(SH)替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(34)..(34)
<223>賴氨酸(SH)
<400>101
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Xaa Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>102
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和28位上Asn由K(SH)替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(28)..(28)
<223>賴氨酸(SH)
<400>102
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Xaa Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>103
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和26位上Leu由K(SH)替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(26)..(26)
<223>賴氨酸(SH)
<400>103
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Xaa Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>104
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和24位上Glu由K(SH)替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(24)..(24)
<223>賴氨酸(SH)
<400>104
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Xaa Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>105
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和23位上Ile由K(SH)替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(23)..(23)
<223>賴氨酸(SH)
<400>105
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Xaa Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>106
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和21位上Leu由K(SH)替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(21)..(21)
<223>賴氨酸(SH)
<400>106
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Xaa Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>107
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和20位上Arg由K(SH)替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(20)..(20)
<223>賴氨酸(SH)
<400>107
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Xaa Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>108
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和19位上Val由K(SH)替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(19)..(19)
<223>賴氨酸(SH)
<400>108
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Xaa Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>109
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和17位上Glu由K(SH)替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(17)..(17)
<223>賴氨酸(SH)
<400>109
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Xaa Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>110
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和16位上Glu由K(SH)替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(16)..(16)
<223>賴氨酸(SH)
<400>110
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Xaa
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>111
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和14位上Met由K(SH)替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(14)..(14)
<223>賴氨酸(SH)
<400>111
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Xaa Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu PheIle Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>112
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和13位上Gln由K(SH)替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(13)..(13)
<223>賴氨酸(SH)
<400>112
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Xaa Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>113
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和11位上Ser由K(SH)替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(11)..(11)
<223>賴氨酸(SH)
<400>113
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Xaa Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu PheIle Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>114
<211>31
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代、31位上Pro由Lys(SH)替代和8個(gè)氨基酸羧基截短的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(31)..(31)
<223>賴氨酸(SH)
<400>114
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Xaa
20 25 30
<210>115
<211>33
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代、21位上leu由Lys替代、27位上Lys由Lys(SH)替代
和6個(gè)氨基酸羧基截短的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(27)..(27)
<223>賴氨酸(SH)
<400>115
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Lys PheIle Glu Trp Leu Xaa Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser
<210>116
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、10位上Val由Lys(SH)替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(10)..(10)
<223>賴氨酸(SH)
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>116
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Xaa Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>117
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、12位上Ser由Lys(SH)替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(12)..(12)
<223>賴氨酸(SH)
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>117
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Xaa Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>118
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、14位上Leu由Lys(SH)替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(14)..(14)
<223>賴氨酸(SH)
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>118
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Xaa Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>119
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Lys(SH)替代、19位上Ala由Val替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(16)..(16)
<223>賴氨酸(SH)
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>119
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>120
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Glu替代、18位上Ala由Lys(SH)替代、19位上Ala由Val替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(18)..(18)
<223>賴氨酸(SH)
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>120
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Xaa Val Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>121
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、20位上Lys由Lys(SH)替代、22位上Phe由Lys替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(20)..(20)
<223>賴氨酸(SH)
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>121
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Xaa Glu Lys Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>122
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、24位上Ala由Lys(SH)替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(24)..(24)
<223>賴氨酸(SH)
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>122
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Phe Ile Xaa Trp Leu Ile Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>123
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、26位上Leu由Lys(SH)替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(26)..(26)
<223>賴氨酸(SH)
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>123
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Phe Ile Ala Trp Xaa Ile Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>124
<211>40
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>GLP-1(7-36)/exendin-4融合肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(30)
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(31)..(39)
<223>對(duì)應(yīng)于exendin-4的31-39殘基
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(40)
<223>賴氨酸(SH)
<400>124
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Xaa
35 40
<210>125
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有28位上Lys由Arg替代的GLP-1(7-36)肽
<400>125
His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Arg Gly Arg
20 25 30
<210>126
<211>31
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有20位上Lys由Arg替代、28位上Lys由Arg替代和C-端添加Lys的GLP-1(7-36)肽
<400>126
His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Arg Gly Arg Lys
20 25 30
<210>127
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有20位上Lys由Arg替代、28位上Lys由Arg替代和30位上Arg由Lys替代的GLP-1(7-36)肽
<400>127
His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Arg Gly Lys
20 25 30
<210>128
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Aib2替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(16)..(16)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>128
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>129
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代和16位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(16)..(16)
<223>2-氨基異丁酸
<400>129
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg
20 25 30
<210>130
<211>31
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Aib2替代、20位上Lys由Arg替代、28位上Lys由Arg替代、29位上Gly由Aib2替代和C-端添加Lys的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(16)..(16)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>130
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Arg Xaa Arg Lys
20 25 30
<210>131
<211>31
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、20位上Lys由Arg替代、28位上Lys由Arg替代、29位上Gly由Aib2替代和C-端添加Lys的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>131
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Arg Xaa Arg Lys
20 25 30
<210>132
<211>31
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Aib2替代、20位上Lys由Arg替代、28位上Lys由Arg替代和C-端添加Lys的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(16)..(16)
<223>2-氨基異丁酸
<400>132
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Arg Gly Arg Lys
20 25 30
<210>133
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Aib2替代、20位上Lys由Arg替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(16)..(16)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>133
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Xaa Arg
20 25 30
<210>134
<211>31
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、20位上Lys由Arg替代和和C-端添加Lys的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>134
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Lys
20 25 30
<210>135
<211>31
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Aib2替代、20位上Lys由Arg替代和C-端添加Lys的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(16)..(16)
<223>2-氨基異丁酸
<400>135
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Lys
20 25 30
<210>136
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Aib2替代、28位上Lys由Arg替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(16)..(16)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>136
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Arg Xaa Arg
20 25 30
<210>137
<211>31
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、28位上Lys由Arg替代、29位上Gly由Aib2替代和C-端添加Lys的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>137
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Arg Xaa Arg Lys
20 25 30
<210>138
<211>31
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Aib2替代、28位上Lys由Arg替代和C-端添加Lys的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(16)..(16)
<223>2-氨基異丁酸
<400>138
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Arg Gly Arg Lys
20 25 30
<210>139
<211>32
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Aib2替代、29位上Gly由Aib2替代和C-端添加Lys的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(16)..(16)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>139
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Xaa Arg Ala Lys
20 25 30
<210>140
<211>32
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、29位上Gly由Aib2替代和C-端添加Ala-Lys的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>140
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Xaa Arg Ala Lys
20 25 30
<210>141
<211>32
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Aib2替代和C-端添加Ala-Lys的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(16)..(16)
<223>2-氨基異丁酸
<400>141
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Ala Lys
20 25 30
<210>142
<211>31
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Aib2替代、29位上Gly由Aib2替代和C-端添加Lys的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(16)..(16)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<400>142
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Xaa Arg Lys
20 25 30
<210>143
<211>31
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Aib2替代和C-端添加Lys的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(16)..(16)
<223>2-氨基異丁酸
<400>143
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Lys
20 25 30
<210>144
<211>31
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由D-Ala替代和C-端添加Lys的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>D-Alanine
<400>144
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Lys
20 25 30
<210>145
<211>31
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Aib2替代、19位上Ala由Aib2替代和C-端添加Lys的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(16)..(16)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(19)..(19)
<223>2-氨基異丁酸
<400>145
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Xaa Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Lys
20 25 30
<210>146
<211>31
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有分別于2、16、17、20、24和28位上Ala由Aib2替代、Gly由Glu替代、Gln由Glu替代、Lys由Arg、Ala由Glu和Lys由Arg替代的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<400>146
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Ala Arg Glu Phe Ile Glu Trp Leu Val Arg Gly Arg Lys
20 25 30
<210>147
<211>45
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有C-端添加六個(gè)Lys的Exendin-4肽
<400>147
His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Lys Lys Lys Lys Lys Lys
35 40 45
<210>148
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和27位上Lys與接頭L相連的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(27)..(27)
<223>與接頭L相連的賴氨酸
<400>148
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Xaa Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>149
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和21位上Leu由Lys替代的Exendin-4肽，其中21位上的Lys與接頭L相連
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(21)..(21)
<223>與接頭L相連的賴氨酸
<400>149
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Xaa Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>150
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和20位上Arg由Lys替代的Exendin-4肽，其中20位上的Lys與接頭L相連
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(20)..(20)
<223>與接頭L相連的賴氨酸
<400>150
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Xaa Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>151
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和19位上Val由Lys替代的Exendin-4肽，其中19位上的Lys與接頭L相連
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(19)..(19)
<223>與接頭L相連的賴氨酸
<400>151
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Xaa Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>152
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和14位上Met由Lys替代的Exendin-4肽，其中14位上的Lys與接頭L相連
<220>
<221>MISC_FEAIURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(14)..(14)
<223>與接頭L相連的賴氨酸
<400>152
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Xaa Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>153
<211>40
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>GLP-1(7-36)/exendin-4融合肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(30)
<223>具有2位上Gly由Aib2替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Val由Lys替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(31)..(39)
<223>對(duì)應(yīng)于exendin-4的31-39殘基
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(40)
<223>與接頭L相連的賴氨酸
<400>153
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Xaa
35 40
<210>154
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>GLP-1(7-36)/exendin-4融合肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(30)
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代的、27位上Val由Ile替代、29位上Gly由Aib2替代和20位上的Lys與接頭L相連的GLP-1肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(20)..(20)
<223>與接頭L相連的賴氨酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(31)..(39)
<223>對(duì)應(yīng)于exendin-4的31-39殘基
<400>154
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Xaa Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>155
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Ala由Aib2替代和20位上Lys與接頭L相連的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(20)..(20)
<223>與接頭L相連的賴氨酸
<400>155
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Xaa Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg
20 25 30
<210>156
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和27位上Lys與接頭L′相連的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(27)..(27)
<223>與接頭L′相連的賴氨酸
<400>156
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Xaa Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>157
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和21位上Lys與接頭L′相連的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(21)..(21)
<223>與接頭L′相連的賴氨酸
<400>157
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Xaa Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>158
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和20位上Lys與接頭L′相連的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(20)..(20)
<223>與接頭L′相連的賴氨酸
<400>158
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Xaa Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>159
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和19位上Lys與接頭L ′相連的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(19)..(19)
<223>與接頭L′相連的賴氨酸
<400>159
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Xaa Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>160
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和14位上Lys與接頭L′相連的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(14)..(14)
<223>與接頭L′相連的賴氨酸
<400>160
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Xaa Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>161
<211>40
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>GLP-1(7-36)/exendin-4融合肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(30)
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、27位上Val由Ile替代和29位上Gly由Aib2替代的GLP-1肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(31)..(39)
<223>對(duì)應(yīng)于exendin-4的31-39殘基
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(40)
<223>與接頭L相連的賴氨酸
<400>161
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Xaa
35 40
<210>162
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>GLP-1(7-36)/exendin-4融合肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(30)
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代、27位上Val由Ile替代、29位上Gly由Aib2替代和20位上Lys與L′相連的GLP-1肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(20)..(20)
<223>與接頭L′相連的賴氨酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(31)..(39)
<223>對(duì)應(yīng)于exendin-4的31-39殘基
<400>162
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Xaa Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>163
<211>30
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和20位上Lys與接頭L′相連的GLP-1(7-36)肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(20)..(20)
<223>與接頭L′相連的賴氨酸
<400>163
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Xaa Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg
20 25 30
<210>164
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和16位上Glu由Lys替代的Exendin-4肽，其中16位上的Lys與接頭L相連
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(16)..(16)
<223>與接頭L相連的賴氨酸
<400>164
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Xaa
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>165
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和16位上Glu由Lys替代的Exendin-4肽，其中16位上的Lys與接頭L′相連
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(16)..(16)
<223>與接頭L′相連的賴氨酸
<400>165
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Xaa
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>166
<211>40
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有C-端添加Lys的Exendin-4肽，其中40位上的Lys與接頭L相連
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(40)
<223>與接頭L相連的賴氨酸
<400>166
His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Xaa
35 40
<210>167
<211>40
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和C-端添加Lys的Exendin-4肽，其中40位上的Lys與接頭L相連
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(40)
<223>與接頭L相連的賴氨酸
<400>167
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Xaa
35 40
<210>168
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和32位上Ser由K(SH)替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(32)..(32)
<223>賴氨酸(SH)
<400>168
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Xaa
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>169
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和12位上Lys由K(SH)替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(12)..(12)
<223>賴氨酸(SH)
<400>169
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Xaa Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>170
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和27位上Lys由K(SH)替代的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(27)..(27)
<223>賴氨酸(SH)
<400>170
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Xaa Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>171
<211>39
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>GLP-1(7-36)/exendin-4融合肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(30)
<223>具有2位上Ala由Aib2替代、16位上Gly由Glu替代、19位上Ala由Val替代的、27位上Val由Ile替代、29位上Gly由Aib2替代和20位上的Lys(SH)的GLP-1肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(20)..(20)
<223>賴氨酸(SH)
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(29)..(29)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(31)..(39)
<223>對(duì)應(yīng)于exendin-4的31-39殘基
<400>171
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Gln Ala Val Xaa Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys Xaa Arg Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210>172
<211>40
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有C-端添加Lys(SH)的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(40)
<223>Lys(SH)
<400>172
His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Xaa
35 40
<210>173
<211>40
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>具有2位上Gly由Aib2替代和C-端添加Lys(SH)的Exendin-4肽
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>2-氨基異丁酸
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(40)
<223>賴氨酸(SH)
<400>173
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser G1y Ala Pro Pro Pro Ser Xaa
35 40
權(quán)利要求
1.一種GA靶向劑，其中該GA靶向劑是GLP-1受體的肽激動(dòng)劑，所述GA靶向劑包括包含與下列序列基本同源的序列的肽
R1-H1x2E3G4T5F6T7S8D9x10S11x12x13x14E15x16x17A18x19x20x21F22x23x24x25x26x27x28x29x30x31x32x33x34x35x36x37x38x39-R2，其中
R1缺失，或者是CH3、C(O)CH3、C(O)CH2CH3、C(O)CH2CH2CH3或C(O)CH(CH3)CH3；
R2缺失，或者是OH、NH2、NH(CH3)、NHCH2CH3、NHCH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH3、NHCH2CH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH2CH3、NHC6H5、NHCH2CH2OCH3、NHOCH3、NHOCH2CH3、羧基保護(hù)基、脂類脂肪酸基或糖；
x2是諸如Aib、A、S、T、V、L、I、D-Ala等阻斷基團(tuán)；
x10是V、L、I或A；
x12是S或K；
x13是Q或Y；
x14是G、C、F、Y、W、M或L；
x16是K、D、E或G；
x17是E或Q；
x19是L、I、V或A；
x20是Orn、K(SH)、R或K；
x21是L或E；
x23是I或L；
x24是A或E；
x25是W或F；
x26是L或I；
x27是I、K或V；
x28是R、Orn、N或K；
x29是Aib或G；
x30是任何氨基酸，優(yōu)選為G或R；
x31是P或缺失；
x32是S或缺失；
x33是S或缺失；
x34是G或缺失；
x35是A或缺失；
x36是P或缺失；
x37是P或缺失；
x38是P或缺失；
x39是S或缺失；和
x40是連接殘基或缺失；
其中x10、x11、x12、x13、x14、x16、x17、x19、x20、x21、x24、x26、x27、x28、x32、x33、x34、x35、x36、x37、x38、x39或x40之一由連接殘基-[LR]-取代，所述連接殘基包含可與抗體結(jié)合位點(diǎn)直接或經(jīng)中間接頭共價(jià)連接的親核側(cè)鏈，且其中所述連接殘基是K(SH)。
2.如權(quán)利要求1所述的GA靶向劑，其中x2是Aib。
3.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的GA靶向劑，其包括包含與下列序列基本同源的序列的肽
R1-H1Aib2E3G4T5F6T7S8D9V10S11S12Y13x14E15x16Q17A18x19x20E21F22I23A24x25L26x27x28x29R30-R2，其中
x14是G、C、F、Y、W或L；
x16是K、D、E或G；
x19是L、I、V或A；
x20是Orn、R或K；
x25是W或F；
x27是I或V；
x28是R或K；和
x29是Aib或G。
4.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的GA靶向劑，其包括包含與下列序列基本同源的序列的肽
R1-H1Aib2E3G4T5F6T7S8D9L10S11K12Q13M14E15E16E17A18V19R20L21F22I23E24W25L26K27N28G29G30P31S32S33G34A35P36P37P38S39-R2。
5.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的GA靶向劑，其中所述連接殘基選自x11、x12、x13、x14、x16、x17、x19、x20、x21、x24、x27、x28、x32、x34、x38和C端。
6.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的GA靶向劑，其中所述連接殘基選自x11、x12、x13、x14、x16、x19、x20、x21、x27、x28、x32和x34。
7.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的GA靶向劑，其中所述連接殘基選自x11、x12、x13、x14、x16、x19、x20和x21。
8.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的GA靶向劑，其中所述連接殘基選自x13、x14、x16、x19、x20和x21。
9.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的GA靶向劑，其中所述連接殘基是x14。
10.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的GA靶向劑，其中R1是C(O)CH3。
11.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的GA靶向劑，其中R2是NH2。
12.如權(quán)利要求1所述的GA靶向劑，其中所述GA靶向劑包括包含與選自下列化合物的一個(gè)或多個(gè)化合物基本同源的序列的肽
R1-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO172)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO173)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPK(SH)S-R2(SEQ ID NO99)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAK(SH)PPS-R2(SEQ ID NO100)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSK(SH)APPPS-R2(SEQ ID NO101)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPK(SH)SGAPPPS-R2(SEQ ID NO168)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKK(SH)GGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO102)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK(SH)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO170)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWK(SH)KNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO103)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIK(SH)WLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO104)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFK(SH)EWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO105)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(SH)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO106)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVK(SH)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO107)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAK(SH)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO108)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEK(SH)AVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO109)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEK(SH)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO110)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQK(SH)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO111)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKK(SH)MEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO112)，
R1-HAIBEGTFTSDLSK(SH)QMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO169)，
R1-HAIBEGTFTSDLK(SH)KQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO113)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGK(SH)-R2(SEQ ID NO114)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLK(SH)NGGPSS-R2(SEQ ID NO115)，
R1-HAIBEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK(SH)-R2(SEQ ID NO38)，
R1-HAIBEGTFTSDVSSYLEGQAAK(SH)EFIAWLVKGR-R2(SEQ ID NO39)，
R1-HAIBEGTFTSDVSSYLEEQAVK(SH)EFIAWLIKAIBRPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO171)，
R1-HAIBEGTFTSDK(SH)SSYLEEQAVKEFIAWLIKAIBR-R2(SEQ ID NO116)，
R1-HAIBEGTFTSDVSK(SH)YLEEQAVKEFIAWLIKAIBR-R2(SEQ ID NO117)，
R1-HAIBEGTFTSDVSSYK(SH)EEQAVKEFIAWLIKAIBR-R2(SEQ ID NO118)，
R1-HAIBEGTFTSDVSSYLEK(SH)QAVKEFIAWLIKAIBR-R2(SEQ ID NO119)，
R1-HAIBEGTFTSDVSSYLEEQK(SH)VKEFIAWLIKAIBR-R2(SEQ ID NO120)，
R1-HAIBEGTFTSDVSSYLEEQAVK(SH)EKIAWLIKAIBR-R2(SEQ ID NO121)，
R1-HAIBEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIK(SH)WLIKAIBR-R2(SEQ ID NO122)，
R1-HAIBEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWK(SH)IKAIBR-R2(SEQ ID NO123)和
R1-HAIBEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAIBRPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO124)。
13.如權(quán)利要求1所述的GA靶向劑，其中所述GA靶向劑包括包含與選自下列化合物的一個(gè)或多個(gè)化合物基本同源的序列的肽
R1-HAIBEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK(SH)-R2(SEQ ID NO38)，
R1-HAIBEGTFTSDVSSYLEGQAAK(SH)EFIAWLVKGR-R2(SEQ ID NO39)，
R1-HAIBEGTFTSDK(SH)SSYLEEQAVKEFIAWLIKAIBR-R2(SEQ ID NO116)，
R1-HAIBEGTFTSDVSK(SH)YLEEQAVKEFIAWLIKAIBR-R2(SEQ ID NO117)，
R1-HAIBEGTFTSDVSSYK(SH)EEQAVKEFIAWLIKAIBR-R2(SEQ ID NO118)，
R1-HAIBEGTFTSDVSSYLEK(SH)QAVKEFIAWLIKAIBR-R2(SEQ ID NO119)，
R1-HAIBEGTFTSDVSSYLEEQK(SH)VKEFIAWLIKAIBR-R2(SEQ ID NO120)，
R1-HAIBEGTFTSDVSSYLEEQAVK(SH)EKIAWLIKAIBR-R2(SEQ ID NO121)，
R1-HAIBEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIK(SH)WLIKAIBR-R2(SEQ ID NO122)和
R1-HAIBEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWK(SH)IKAIBR-R2(SEQ ID NO123)。
14.如權(quán)利要求1所述的GA靶向劑，其中所述GA靶向劑包括包含與選自下列化合物的一個(gè)或多個(gè)化合物基本同源的序列的肽
R1-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO172)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO173)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPK(SH)S-R2(SEQ ID NO99)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAK(SH)PPS-R2(SEQ ID NO100)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSK(SH)APPPS-R2(SEQ ID NO101)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPK(SH)SGAPPPS-R2(SEQ ID NO168)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKK(SH)GGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO102)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK(SH)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO170)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWK(SH)KNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO103)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIK(SH)WLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO104)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFK(SH)EWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO105)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(SH)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO106)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVK(SH)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO107)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAK(SH)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO108)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEK(SH)AVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO109)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEK(SH)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO110)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQK(SH)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO111)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKK(SH)MEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO112)，
R1-HAIBEGTFTSDLSK(SH)QMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO169)，
R1-HAIBEGTFTSDLK(SH)KQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO113)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGK(SH)-R2(SEQ ID NO114)和
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLK(SH)NGGPSS-R2(SEQ ID NO115)。
15.如權(quán)利要求14所述的GA靶向劑，其中所述GA靶向劑包括包含與選自下列化合物的一個(gè)或多個(gè)化合物基本同源的序列的肽
R1-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO172)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO173)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPK(SH)S-R2(SEQ ID NO99)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAK(SH)PPS-R2(SEQ ID NO100)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSK(SH)APPPS-R2(SEQ ID NO101)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPK(SH)SGAPPPS-R2(SEQ ID NO168)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKK(SH)GGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO102)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK(SH)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO170)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWK(SH)KNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO103)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIK(SH)WLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO104)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFK(SH)EWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO105)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(SH)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO106)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVK(SH)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO107)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAK(SH)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO108)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEK(SH)AVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO109)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEK(SH)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO110)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQK(SH)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO111)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKK(SH)MEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO112)，
R1-HAIBEGTFTSDLSK(SH)QMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO169)，
R1-HAIBEGTFTSDLK(SH)KQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO113)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGK(SH)-R2(SEQ ID NO114)和
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLK(SH)NGGPSS-R2(SEQ ID NO115)。
16.如權(quán)利要求1所述的GA靶向劑，其中所述GA靶向劑包括包含選自以下序列的肽
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPK(SH)S-R2(SEQ ID NO99)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAK(SH)PPS-R2(SEQ ID NO100)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSK(SH)APPPS-R2(SEQ ID NO101)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPK(SH)SGAPPPS-R2(SEQ ID NO168)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKK(SH)GGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO102)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK(SH)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO170)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(SH)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO106)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVK(SH)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO107)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAK(SH)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO108)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEK(SH)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO110)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQK(SH)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO111)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKK(SH)MEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO112)，
R1-HAIBEGTFTSDLSK(SH)QMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO169)，
R1-HAIBEGTFTSDLK(SH)KQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO113)和
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLK(SH)NGGPSS-R2(SEQ ID NO115)。
17.如權(quán)利要求1所述的GA靶向劑，其中所述GA靶向劑包括包含選自以下序列的肽
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(SH)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO106)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVK(SH)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO107)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAK(SH)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO108)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEK(SH)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO110)和
R1-HAIBEGTFTSDLSKQK(SH)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO111)。
18.一種結(jié)構(gòu)如下的化合物
19.一種具有下式的化合物
L-[GA靶向劑]或L’-[GA靶向劑]
其中
[GA靶向劑]是如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的GA靶向劑；
L是具有式-X-Y-Z-的接頭；
L’是具有式-X-Y-Z’的接頭部分；
L或L’與所述連接殘基共價(jià)連接；
X任選地存在且是包含選自C、H、N、O、P、S、F、Cl、Br和I的任何原子的生物相容性連接鏈，并且能包含聚合物或嵌段共聚物；
Y是任選地存在的包括至少一個(gè)環(huán)結(jié)構(gòu)的識(shí)別基團(tuán)；
Z是能與抗體結(jié)合位點(diǎn)中的氨基酸側(cè)鏈形成共價(jià)鍵的反應(yīng)性基團(tuán)；知
Z’是包含與抗體結(jié)合位點(diǎn)中的氨基酸側(cè)鏈相連的共價(jià)連接的附著部分。
20.如權(quán)利要求19所述的化合物，其中
X與所述GA靶向劑的連接殘基相連，其被取代或未被取代，且選自-R22-[CH2-CH2-O]t-R23-、-R22-環(huán)烷基-R23-、-R22-芳基-R23-和R22-雜環(huán)基-R23-，其中
R22和R23各自獨(dú)立地選自共價(jià)鍵、-O-、-S-、-NRb-、取代或未取代的直鏈或支鏈C1-50亞烷基、取代或未取代的直鏈或支鏈C1-50雜亞烷基、取代或未取代的直鏈或支鏈C2-50亞烯基或者取代或未取代的C2-50雜亞烯基；
Rb在出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地選自氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或取代及未取代的芳基-C0-6烷基；
t＝2～50；和
R22和R23的尺寸使得X的主鏈長(zhǎng)度保持在約200個(gè)原子或約200個(gè)原子以下。
21.如權(quán)利要求20所述的化合物，其中
R22選自-(CH2)v-、-(CH2)u-C(O)-(CH2)v-、-(CH2)u-C(O)-O-(CH2)v-、-(CH2)u-C(O)-NRb-(CH2)v-、-(CH2)u-C(S)-NRb-(CH2)v-、-(CH2)u-NRb-(CH2)v-、-(CH2)u-O-(CH2)v-、-(CH2)u-S(O)0-2-(CH2)v-、-(CH2)u-S(O)0-2-NRb-(CH2)v-和-(CH2)u-P(O)(ORb)-O-(CH2)v-，其中u和v獨(dú)立地為0～20；
R23選自-O-、-S-、-NRb-、取代或未取代的直鏈或支鏈C1-50亞烷基、取代或未取代的直鏈或支鏈C1-50雜亞烷基、取代或未取代的直鏈或支鏈C2-50亞烯基和取代或未取代的C2-50雜亞烯基，且能夠具有結(jié)構(gòu)
其中p是2～45；w是1～20；r是1～20；s是0～20；且Rb在出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地選自氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或取代及未取代的芳基-C0-6烷基；和
R22和R23的尺寸使得X的主鏈長(zhǎng)度保持在約200個(gè)原子或約200個(gè)原子以下。
22.如權(quán)利要求21所述的化合物，其中X的結(jié)構(gòu)選自
其中X的主鏈長(zhǎng)度是1～100個(gè)原子。
23.如權(quán)利要求22所述的化合物，其中X的主鏈長(zhǎng)度是1～50個(gè)原子。
24.如權(quán)利要求23所述的化合物，其中X的主鏈長(zhǎng)度是1～25個(gè)原子。
25.如權(quán)利要求24所述的化合物，其中X的主鏈長(zhǎng)度是1～15個(gè)原子。
26.如權(quán)利要求19～21中任一項(xiàng)所述的化合物，其中X是
其中選擇v和w從而使得X的主鏈長(zhǎng)度是6～12個(gè)原子。
27.如權(quán)利要求26所述的化合物，其中X-Y是
其中
V是1或2；w是1或2；且Rb是氫。
28.如權(quán)利要求19所述的GA靶向劑，其中與所述接頭相連的連接殘基的結(jié)構(gòu)是
29.如權(quán)利要求19～28中任一項(xiàng)所述的化合物，其中環(huán)結(jié)構(gòu)Y存在且具有如下任選取代的結(jié)構(gòu)
其中
a、b、c、d和e各自獨(dú)立地為碳或氮；f是碳、氮、氧或硫；Y獨(dú)立地與X和Z或Z’在足夠價(jià)態(tài)的任何兩個(gè)環(huán)位置處相連；且a、b、c、d、e和f中不超過(guò)四個(gè)同時(shí)為氮，且優(yōu)選環(huán)結(jié)構(gòu)中的a、b、c、d和e各自為碳。
30.如權(quán)利要求19～29中任一項(xiàng)所述的化合物，其中所述環(huán)結(jié)構(gòu)Y是苯基。
31.如權(quán)利要求19～30中任一項(xiàng)所述的化合物，其中
Z如果存在時(shí)選自取代烷基、取代環(huán)烷基、取代芳基、取代芳基烷基、取代雜環(huán)基或取代雜環(huán)基烷基，其中至少一個(gè)取代基是1，3-二酮部分、?；?β-內(nèi)酰胺、活性酯、α-鹵代酮、醛、馬來(lái)酰亞胺、內(nèi)酯、酸酐、α-鹵代乙酰胺、胺、肼或環(huán)氧化物；和
Z’如果存在時(shí)選自取代烷基、取代環(huán)烷基、取代芳基、取代芳基烷基、取代雜環(huán)基或取代雜環(huán)基烷基，其中至少一個(gè)取代基是1，3-二酮部分、酰基-β-內(nèi)酰胺、活性酯、α-鹵代酮、醛、馬來(lái)酰亞胺、內(nèi)酯、酸酐、α-鹵代乙酰胺、胺、肼或環(huán)氧化物，或者通過(guò)抗體結(jié)合位點(diǎn)中的氨基酸側(cè)鏈上的氨基與1，3-二酮部分、酰基-β-內(nèi)酰胺、活性酯、α-鹵代酮、醛、馬來(lái)酰亞胺、內(nèi)酯、酸酐、α-鹵代乙酰胺、胺、肼或環(huán)氧化物的加成所形成的產(chǎn)物。
32.如權(quán)利要求31所述的化合物，其中至少一個(gè)取代基選自取代1，3-二酮或?；?β-內(nèi)酰胺，以及通過(guò)抗體結(jié)合位點(diǎn)中的氨基酸側(cè)鏈上的氨基與1，3-二酮部分或?；?β-內(nèi)酰胺的加成所形成的產(chǎn)物。
33.如權(quán)利要求31和32任一項(xiàng)所述的化合物，其中
Z如果存在時(shí)選自取代1，3-二酮、酰基-β-內(nèi)酰胺、烷基取代的1，3-二酮和烷基取代的?；?β-內(nèi)酰胺；和
Z’如果存在時(shí)是通過(guò)抗體結(jié)合位點(diǎn)中的氨基酸側(cè)鏈上的氨基與一個(gè)部分加成所形成的產(chǎn)物，所述部分選自取代1，3-二酮、?；?β-內(nèi)酰胺、烷基取代的1，3-二酮和烷基取代的?；?β-內(nèi)酰胺。
34.如權(quán)利要求19～33中任一項(xiàng)所述的化合物，其中Z如果存在時(shí)具有結(jié)構(gòu)
且其中Z’如果存在時(shí)具有結(jié)構(gòu)
其中q＝0～5且抗體如果存在時(shí)是與抗體結(jié)合位點(diǎn)側(cè)鏈相連的共價(jià)鍵。
35.如權(quán)利要求19～34中任一項(xiàng)所述的GA靶向化合物，其中結(jié)構(gòu)L當(dāng)與所述連接殘基相連時(shí)是
u是1、2或3；v是1或2，t是1、2或3，r是1或2；s是0且q是1或2。
36.如權(quán)利要求35所述的GA靶向化合物，其中u是2，v是2，t是2，r是2且q是2。
37.一種下式的化合物
38.一種下式的化合物
39.一種下式的化合物
40.一種下式的化合物
41.一種下式的化合物
42.一種下式的化合物
43.一種下式的化合物
44.一種下式的化合物
45.一種下式的化合物
46.一種下式的化合物
47.如權(quán)利要求19～46中任一項(xiàng)所述的化合物，其中Z基團(tuán)與抗體結(jié)合位點(diǎn)共價(jià)連接。
48.一種GA靶向劑，其中所述GA靶向劑是GLP-1受體的肽激動(dòng)劑，所述GA靶向劑包括包含與下列序列基本同源的序列的肽
R1-H1x2E3G4T5F6T7S8D9x10S11x12x13x14E15x16x17A18x19x20x21F22x23x24x25x26x27x28x29x30x31x32x33x34x35x36x37x38x39-R2，
其中
R1缺失，或者是CH3、C(O)CH3、C(O)CH2CH3、C(O)CH2CH2CH3或C(O)CH(CH3)CH3；
R2缺失，或者是OH、NH2、NH(CH3)、NHCH2CH3、NHCH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH3、NHCH2CH2CH2CH3、NHCH(CH3)CH2CH3、NHC6H5、NHCH2CH2OCH3、NHOCH3、NHOCH2CH3、羧基保護(hù)基、脂類脂肪酸基或糖；
x2是諸如Aib、A、S、T、V、L、I、D-Ala等阻斷基；
x10是V、L、I，或A；
x12是S或K；
x13是Q或Y；
x14是G、C、F、Y、W、M，或L；
x16是K、D、E，或G；
x17是E或Q；
x19是L、I、V，或A；
x20是Orn、K(SH)、R，或K；
x21是L或E；
x23是I或L；
x24是A或E；
x25是W或F；
x26是L或I；
x27是I、K，或V；
x28是R、Orn、N，或K；
x29是Aib或G；
x30是任何氨基酸，優(yōu)選為G或R；
x31是P或缺失；
x32是S或缺失；
x33是S或缺失；
x34是G或缺失；
x35是A或缺失；
x36是P或缺失；
x37是P或缺失；
x38是P或缺失；
x39是S或缺失；和
x40是連接殘基或缺失；
其中所述肽經(jīng)中間接頭L’與抗體結(jié)合位點(diǎn)共價(jià)連接，且L’與C端或連接殘基-[LR]-的親核側(cè)鏈共價(jià)連接，
從而使得-[LR]-選自K、R、Y、C、T、S、包括K(SH)在內(nèi)的賴氨酸同系物、高半胱氨酸和高絲氨酸，且當(dāng)其存在時(shí)將取代x10、x11、x12、x13、x14、x16、x17、x19、x20、x21、x24、x26、x27、x28、x32、x33、x34、x35、x36、x37、x38、x39或x40之一。
49.如權(quán)利要求48所述的GA靶向劑，其中x2是Aib。
50.如權(quán)利要求48～49中任一項(xiàng)所述的GA靶向劑，其中所述GA靶向劑包括包含與下列序列基本同源的序列的肽
R1-H1Aib2E3G4T5F6T7S8D9V10S11S12Y13x14E15x16Q17A18x19x20E21F22I23A24x25L26x27x28x29R30-R2，
其中x14是G、C、F、Y、W或L；
x16是K、D、E或G；
x19是L、I、V或A；
x20是Orn、R或K；
x25是W或F；
x27是I或V；
x28是R或K；和
x29是Aib或G。
51.如權(quán)利要求48～50中任一項(xiàng)所述的GA靶向劑，其中所述GA靶向劑包括包含與下列序列基本同源的序列的肽
R1-H1Aib2E3G4T5F6T7S8D9L10S11K12Q13M14E15E16E17A18V19R20L21F22I23E24W25L26K27N28G29G30P31S32S33G34A35P36P37P38S39-R2。
52.如權(quán)利要求48～51中任一項(xiàng)所述的GA靶向劑，其中所述連接殘基選自K、Y、T和包括K(SH)在內(nèi)的賴氨酸同系物。
53.如權(quán)利要求52所述的GA靶向劑，其中所述連接殘基是K。
54.如權(quán)利要求52所述的GA靶向劑，其中所述連接殘基是K(SH)。
55.如權(quán)利要求52所述的GA靶向劑，其中所述連接殘基是K(L’)，其中K(L’)是與接頭L相連的賴氨酸殘基，所述接頭L已經(jīng)與抗體結(jié)合位點(diǎn)的氨基酸側(cè)鏈形成共價(jià)鍵。
56.如權(quán)利要求55所述的GA靶向劑，其中K(L’)是
其中u是1、2或3；和
-L’-是具有式-X-Y-Z’的接頭，其中
X是
其中v是0、1、2或3；t是1、2或3，r是1或2；s是0、1或2；
Rb是氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基或取代或未取代的芳基-C0-6烷基；
Y是任選地存在的包含至少一個(gè)環(huán)結(jié)構(gòu)的識(shí)別基團(tuán)；和
Z’是包含與抗體結(jié)合位點(diǎn)中的氨基酸側(cè)鏈的共價(jià)鏈接的的連接部分。
57.一種具有下式的化合物
L’-[GA靶向劑]
其中
[GA靶向劑]是如權(quán)利要求48～56中任一項(xiàng)所述的GA靶向劑；和
L’是具有式-X-Y-Z’的接頭部分，從而L’與所述連接殘基共價(jià)連接；
其中
X任選地存在且是包含選自C、H、N、O、P、S、F、Cl、Br和I的任何原子的生物相容性連接鏈，并且能夠包含聚合物或嵌段共聚物；
Y是任選地存在的包括至少一個(gè)環(huán)結(jié)構(gòu)的識(shí)別基團(tuán)；和
Z’是包含與抗體結(jié)合位點(diǎn)中的氨基酸側(cè)鏈相連的共價(jià)連接的附著部分。
58.如權(quán)利要求57所述的化合物，其中
X與所述GA靶向劑的連接殘基相連，其被取代或未被取代，且選自-R22-[CH2-CH2-O]t-R23-、-R22-環(huán)烷基-R23-、-R22-芳基-R23-和-R22-雜環(huán)基-R23-；其中
R22和R23獨(dú)立地選自共價(jià)鍵、-O-、-S-、-NRb-、取代或未取代的直鏈或支鏈C1-50亞烷基、取代或未取代的直鏈或支鏈C1-50雜亞烷基、取代或未取代的直鏈或支鏈C2-50亞烯基和取代或未取代的C2-50雜亞烯基；
Rb在出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地選自氫、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基和取代或未取代的芳基-C0-6烷基；
t＝2～50；和
R22和R23的尺寸使得X的主鏈長(zhǎng)度保持在約200個(gè)原子或約200個(gè)原子以下。
59.如權(quán)利要求58所述的化合物，其中
R22選自-(CH2)v-、-(CH2)u-C(O)-(CH2)v-、-(CH2)u-C(O)-O-(CH2)v-、-(CH2)u-C(O)-NRb-(CH2)v-、-(CH2)u-C(S)-NRb-(CH2)v-、-(CH2)u-NRb-(CH2)v-、-(CH2)u-O-(CH2)v-、-(CH2)u-S(O)0-2-(CH2)v-、-(CH2)u-S(O)0-2-NRb-(CH2)v-和-(CH2)u-P(O)(ORb)-O-(CH2)v-，其中u和v獨(dú)立地為0～20；
R23選自-O-、-S-、-NRb-、取代或未取代的直鏈或支鏈C1-50亞烷基、取代或未取代的直鏈或支鏈C1-50雜亞烷基、取代或未取代的直鏈或支鏈C2-50亞烯基和取代或未取代的C2-50雜亞烯基；且能夠選自
其中p是2～45；w是1～20；r是1～20；s是0～20；且Rb在出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地選自氫、取代或未取代的C1-10烷基；取代或未取代的C3-7環(huán)烷基-C0-6烷基和取代或未取代的芳基-C0-6烷基；且
R22和R23的尺寸使得X的主鏈長(zhǎng)度保持在約200個(gè)原子或約200個(gè)原子以下。
60.如權(quán)利要求59所述的化合物，其中X的結(jié)構(gòu)選自
其中X的主鏈長(zhǎng)度是1～100個(gè)原子。
61.如權(quán)利要求60所述的化合物，其中X的主鏈長(zhǎng)度是1～50個(gè)原子。
62.如權(quán)利要求61所述的化合物，其中X的主鏈長(zhǎng)度是1～25個(gè)原子。
63.如權(quán)利要求62所述的化合物，其中X的主鏈長(zhǎng)度是1～15個(gè)原子。
64.如權(quán)利要求57-63中任一項(xiàng)所述的化合物，其中X是
其中選擇v和w從而使得X的主鏈長(zhǎng)度是6～12個(gè)原子。
65.如權(quán)利要求64所述的化合物，其中X-Y是
其中
v＝1或2；w＝1或2；Rb是氫。
66.如權(quán)利要求57～65中任一項(xiàng)所述的化合物，其中環(huán)結(jié)構(gòu)Y存在且具有如下任選取代的結(jié)構(gòu)
其中a、b、c、d和e各自獨(dú)立地為碳或氮；f是碳、氮、氧或硫；Y獨(dú)立地與X和Z或Z’在足夠價(jià)態(tài)的任何兩個(gè)環(huán)位置處相連；且a、b、c、d、e和f中不超過(guò)四個(gè)同時(shí)為氮，且優(yōu)選環(huán)結(jié)構(gòu)中的a、b、c、d和e各自為碳。
67.如權(quán)利要求57～66中任一項(xiàng)所述的化合物，其中所述環(huán)結(jié)構(gòu)Y是苯基。
68.如權(quán)利要求57～67中任一項(xiàng)所述的化合物，其中Z’是取代烷基、取代環(huán)烷基、取代芳基、取代芳基烷基、取代雜環(huán)基或取代雜環(huán)基烷基，其中至少一個(gè)取代基是1，3-二酮部分、酰基-β-內(nèi)酰胺、活性酯、α-鹵代酮、醛、馬來(lái)酰亞胺、內(nèi)酯、酸酐、α-鹵代乙酰胺、胺、肼或環(huán)氧化物，或者通過(guò)抗體結(jié)合位點(diǎn)中的氨基酸側(cè)鏈上的氨基與1，3-二酮部分、?；?β-內(nèi)酰胺、活性酯、α-鹵代酮、醛、馬來(lái)酰亞胺、內(nèi)酯、酸酐、α-鹵代乙酰胺、胺、肼或環(huán)氧化物的加成所形成的產(chǎn)物。
69.如權(quán)利要求68所述的化合物，其中Z是通過(guò)抗體結(jié)合位點(diǎn)中的氨基酸側(cè)鏈上的氨基與1，3-二酮部分或?；?β-內(nèi)酰胺加成所形成的產(chǎn)物。
70.如權(quán)利要求68或69任一項(xiàng)所述的化合物，其中Z’是通過(guò)抗體結(jié)合位點(diǎn)中的氨基酸側(cè)鏈上的氨基與一個(gè)部分加成所形成的產(chǎn)物，所述部分選自取代1，3-二酮、?；?β-內(nèi)酰胺、烷基取代的1，3-二酮或烷基取代的酰基-β-內(nèi)酰胺。
71.如權(quán)利要求57～70中任一項(xiàng)所述的化合物，其中Z’具有結(jié)構(gòu)
且其中q是0～5，且抗體如果存在時(shí)是與抗體結(jié)合位點(diǎn)側(cè)鏈相連的共價(jià)鍵。
72.如權(quán)利要求48～71中任一項(xiàng)所述的GA靶向劑，其包括包含與選自下列化合物的一個(gè)或多個(gè)化合物基本同源的序列的肽
R1-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO2)
R1-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK-R2(SEQ ID NO3)
R1-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO4)
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWKKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO19)
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIKWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO20)
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFKEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO21)
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEKAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO25)
R1-HAibEGTFTSDLKKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO29)
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGK-R2(SEQ ID NO30)
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLKNGGPK-R2(SEQ ID NO31)
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWK(SH)KNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO103)
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIK(SH)WLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO104)
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFK(SH)EWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO105)
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEK(SH)AVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO109)
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGK(SH)SSGAPPPS-R2(SEQ ID NO114)
R1-HAibEGTFTSDLSK(SH)QMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO169)
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK(SH)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO170)
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO173)
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK-R2(SEQ ID NO4)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO5)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGG-R2(SEQ ID NO6)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-R2(SEQ ID NO7)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEFLKN-R2(SEQ ID NO8)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQLEEEAVRLAIEFLKN-R2(SEQ ID NO9)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQLEEEAVRLAIEFLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO10)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEFLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO11)，
R1-HAibEGTFTSDLSK(Ac)QMEEEAVRLFIEWLK(Ac)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID
NO12)，
R1-HAibEGTFTSDLSK(苯甲?；?QMEEEAVRLFIEWLK(苯甲?；?NGGPSSGAPPPS-R2
(SEQ ID NO13)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPKS-R2(SEQ ID NO14)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPK(SH)S-R2(SEQ ID NO99)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAKPPS-R2(SEQ ID NO15)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAK(SH)PPS-R2(SEQ ID NO100)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSKAPPPS-R2(SEQ ID NO16)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSK(SH)APPPS-R2(SEQ ID NO101)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPKSGAPPPS-R2(SEQ ID NO17)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSK(SH)APPPS-R2(SEQ ID NO101)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKKGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO18)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKK(SH)GGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO102)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWKKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO19)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWK(SH)KNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO103)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIKWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO20)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIK(SH)WLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO104)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFKEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO21)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFK(SH)EWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO105)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO22)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(SH)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO106)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVKLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO23)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVK(SH)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO107)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAKRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO24)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAK(SH)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO108)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEKAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO25)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEK(SH)AVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO109)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEKEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO26)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEK(SH)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO110)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQKEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO27)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQK(SH)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO111)，
R1-HAibEGTFTSDLSKKMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO28)，
R1-HAibEGTFTSDLSKK(SH)MEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO112)，
R1-HAibEGTFTSDLKKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO29)，
R1-HAibEGTFTSDLK(SH)KQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO113)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGK-R2(SEQ ID NO30)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGK(SH)-R2(SEQ ID NO114)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLKNGGPSS-R2(SEQ ID NO31)，
R1-HAibEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLK(SH)NGGPSS-R2(SEQ ID NO115)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-R2(SEQ ID NO32)，
R1-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK-R2(SEQ ID NO33)，
R1-HGEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK-R2(SEQ ID NO34)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO35)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKAibRK-R2(SEQ ID NO36)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK-R2(SEQ ID NO37)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK(SH)-R2(SEQ ID NO38)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAK(SH)EFIAWLVKGR-R2(SEQ ID NO39)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYGEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO40)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYCEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO41)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYFEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO42)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYYEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO43)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYWEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO44)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO45)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEDQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO46)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEKQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO47)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAVKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO48)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAIKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO49)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQALKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO50)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAREFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO51)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAOrnEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO52)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAFLVKAibR-R2(SEQ ID NO53)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO54)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVRAibR-R2(SEQ ID NO55)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVOrnAibR-R2(SEQ ID NO56)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO57)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYFEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO58)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYYEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO59)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYWEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO60)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIRAibR-R2(SEQ ID NO61)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVREFIAWLIRAibR-R2(SEQ ID NO62)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibRPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO63)，
R1-HAibEGTFTSDKSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO64)，
R1-HAibEGTFTSDK(SH)SSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO116)，
R1-HAibEGTFTSDVSKYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO65)，
R1-HAibEGTFTSDVSK(SH)YLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO117)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYKEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO66)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYK(SH)EEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO118)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEKQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO67)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEK(SH)QAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO119)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQKVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO68)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQK(SH)VKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO120)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEKIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO69)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVK(SH)EKIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO121)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIKWLIKAibR-R2(SEQ ID NO70)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIK(SH)WLIKAibR-R2(SEQ ID NO122)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWKIKAibR-R2(SEQ ID NO71)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWK(SH)IKAibR-R2(SEQ ID NO123)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibRPSSGAPPPSK-R2(SEQ ID NO72)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibRPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO124)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIK(Ac)AibR-R2(SEQ ID NO73)，
R1-HAibEGTFTSDvSSYLEEQAvKEFIAWLIK(苯甲酰基)AibR-R2(SEQ ID NO74)，
R1-H(反-3-己?；?AibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO75)和
R1-H(3-氨基苯基乙?；?AibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIK AibR-R2(SEQ IDNO76)。
73.如權(quán)利要求48～71中任一項(xiàng)所述的GA靶向劑，其包括包含與選自下列化合物的一個(gè)或多個(gè)化合物基本同源的序列的肽
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-R2(SEQ ID NO32)
R1-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK-R2(SEQ ID NO33)
R1-HGEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK-R2(SEQ ID NO34)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO35)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKAibRK-R2(SEQ ID NO36)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK-R2(SEQ ID NO37)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK(SH)-R2(SEQ ID NO38)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAK(SH)EFIAWLVKGR-R2(SEQ ID NO39)
R1-HAibEGTFTSDVSSYGEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO40)
R1-HAibEGTFTSDVSSYCEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO41)
R1-HAibEGTFTSDVSSYFEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO42)
R1-HAibEGTFTSDVSSYYEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO43)
R1-HAibEGTFTSDVSSYWEGQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO44)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO45)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEDQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO46)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEKQAAKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO47)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAVKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO48)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAIKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO49)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQALKEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO50)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAREFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO51)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAOrnEFIAWLVKAibR-R2(SEQ ID NO52)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAFLVKAibR-R2(SEQ ID NO53)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO54)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVRAibR-R2(SEQ ID NO55)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVOrnAibR-R2(SEQ ID NO56)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO57)
R1-HAibEGTFTSDVSSYFEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO58)
R1-HAibEGTFTSDVSSYYEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO59)
R1-HAibEGTFTSDVSSYWEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO60)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIRAibR-R2(SEQ ID NO61)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVREFIAWLIRAibR-R2(SEQ ID NO62)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibRPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO63)
R1-HAibEGTFTSDKSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO64)
R1-HAibEGTFTSDK(SH)SSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO116)
R1-HAibEGTFTSDVSKYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO65)
R1-HAibEGTFTSDVSK(SH)YLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO117)
R1-HAibEGTFTSDVSSYKEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO66)
R1-HAibEGTFTSDVSSYK(SH)EEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO118)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEKQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO67)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEK(SH)QAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO119)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQKVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO68)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQK(SH)VKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO120)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEKIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO69)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVK(SH)EKIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO121)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIKWLIKAibR-R2(SEQ ID NO70)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIK(SH)WLIKAibR-R2(SEQ ID NO122)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWKIKAibR-R2(SEQ ID NO71)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWK(SH)IKAibR-R2(SEQ ID NO123)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibRPSSGAPPPSK-R2(SEQ ID NO72)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibRPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO124)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIK(Ac)AibR-R2(SEQ ID NO73)
R1-H(反-3-己?；?AibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO75)
R1-H(3-氨基苯基乙酰基)AibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIK AibR-R2(SEQ ID NO76)
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIK(苯甲?；?AibR-R2(SEQ ID NO74)
R1-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-R2(SEQ ID NO1)，
R1-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK-R2(SEQ ID NO125)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRK-R2(SEQ ID NO126)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-R2(SEQ ID NO127)，
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibR-R2(SEQ ID NO128)和
R1-HAibEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKAibRPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO129)。
74.如權(quán)利要求48～71中任一項(xiàng)所述的GA靶向劑，其包括包含與選自下列化合物的一個(gè)或多個(gè)化合物基本同源的序列的肽
R1-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO2)
R1-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK-R2(SEQ ID NO3)
R1-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO4)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWKKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO19)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIKWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO20)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFKEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO21)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEKAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO25)
R1-HAIBEGTFTSDLKKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO29)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGK-R2(SEQ ID NO30)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLKNGGPK-R2(SEQ ID NO31)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWK(SH)KNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO103)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIK(SH)WLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO104)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFK(SH)EWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO105)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEK(SH)AVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO109)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGK(SH)SSGAPPPS-R2(SEQ ID NO114)
R1-HAIBEGTFTSDLSK(SH)QMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO169)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK(SH)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO170)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO173)
R1-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID NO172)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGG-R2(SEQ ID NO6)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-R2(SEQ ID NO7)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEFLKN-R2(SEQ ID NO8)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQLEEEAVRLAIEFLKN-R2(SEQ ID NO9)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQLEEEAVRLAIEFLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO10)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEFLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO11)
R1-HAIBEGTFTSDLSK(AC)QMEEEAVRLFIEWLK(AC)NGGPSSGAPPPS-R2 (SEQ ID
NO12)
R1-HAIBEGTFTSDLSK(苯甲?；?QMEEEAVRLFIEWLK(苯甲酰基)NGGPSSGAPPPS-R2
(SEQ ID NO13)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK-R2(SEQ ID NO132)
R1-HAIBEGTFTSDLK(SH)KQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID
NO147)
R1-HAIBEGTFTSDLK(SH)KQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO113)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO5)
R1-HAIBEGTFTSDLSKKMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO28)
R1-HAIBEGTFTSDLSKK(SH)MEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO112)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO113)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK(SH)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO115)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK(L’)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO156)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKKGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO18)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKK(SH)GGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO102)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPKSGAPPPS-R2(SEQ ID NO17)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPK(SH)SGAPPPS-R2(SEQ ID NO168)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSKAPPPS-R2(SEQ ID NO16)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSK(SH)APPPS-R2(SEQ ID NO101)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAKPPS-R2(SEQ ID NO15)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAK(SH)PPS-R2(SEQ ID NO100)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPKS-R2(SEQ ID NO14)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPK(SH)S-R2(SEQ ID NO99)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(L)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO22)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVK(L)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO23)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAK(L)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO24)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEK(L)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO26)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQK(L)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO27)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(L)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO106)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVK(L)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO107)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAK(L)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO108)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEK(L)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO110)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQK(L)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO111)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(L)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO157)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVK(L)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO158)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAK(L)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO159)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEK(L)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO165)和
R1-HAIBEGTFTSDLSKQK(L)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO160)。
75.如權(quán)利要求74所述的GA靶向劑，其包括包含與選自下列化合物的一個(gè)或多個(gè)化合物基本同源的序列的肽
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK-R2(SEQ ID NO132)，
R1-HAIBEGTFTSDLK(SH)KQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSK(SH)-R2(SEQ ID
NO147)，
R1-HAIBEGTFTSDLK(SH)KQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO113)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO5)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKKMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO28)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKK(SH)MEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO112)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO113)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK(SH)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO115)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK(L’)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO156)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKKGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO18)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKK(SH)GGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO102)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPKSGAPPPS-R2(SEQ ID NO17)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPK(SH)SGAPPPS-R2(SEQ ID NO168)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSKAPPPS-R2(SEQ ID NO16)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSK(SH)APPPS-R2(SEQ ID NO101)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAKPPS-R2(SEQ ID NO15)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAK(SH)PPS-R2(SEQ ID NO100)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPKS-R2(SEQ ID NO14)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPK(SH)S-R2(SEQ ID NO99)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(L)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO22)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVK(L)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO23)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAK(L)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO24)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEK(L)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO26)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQK(L)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO27)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(L)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO106)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVK(L)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO107)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAK(L)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO108)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEK(L)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO110)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQK(L)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO111)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(L)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO157)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVK(L)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO158)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAK(L)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO159)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEK(L)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO165)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQK(L)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO160)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPK(SH)S-R2(SEQ ID NO99)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAK(SH)PPS-R2(SEQ ID NO100)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSK(SH)APPPS-R2(SEQ ID NO101)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPK(SH)SGAPPPS-R2(SEQ ID NO168)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKK(SH)GGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO102)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK(SH)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO170)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWK(SH)KNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO103)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIK(SH)WLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO104)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFK(SH)EWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO105)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(SH)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO106)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVK(SH)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO107)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAK(SH)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO108)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEK(SH)AVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO109)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEK(SH)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO110)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQK(SH)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO111)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKK(SH)MEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO112)，
R1-HAIBEGTFTSDLSK(SH)QMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO169)，
R1-HAIBEGTFTSDLK(SH)KQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO113)和
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLK(SH)NGGPSS-R2(SEQ ID NO115)。
76.如權(quán)利要求75所述的GA靶向劑，其包括包含選自以下序列的肽
R1-HAIBEGTFTSDLKKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO29)，
R1-HAIBEGTFTSDLK(SH)KQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO113)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO5)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKKMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO28)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKK(SH)MEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO112)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO113)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK(SH)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO115)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK(L’)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO156)
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKKGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO18)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKK(SH)GGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO102)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPKSGAPPPS-R2(SEQ ID NO17)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPK(SH)SGAPPPS-R2(SEQ ID NO168)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSKAPPPS-R2(SEQ ID NO16)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSK(SH)APPPS-R2(SEQ ID NO101)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAKPPS-R2(SEQ ID NO15)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAK(SH)PPS-R2(SEQ ID NO100)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPKS-R2(SEQ ID NO14)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPK(SH)S-R2(SEQ ID NO99)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(L)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO22)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVK(L)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO23)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAK(L)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO24)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEK(L)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO26)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQK(L)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO27)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(L)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO106)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVK(L)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO107)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAK(L)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO108)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEK(L)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO110)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQK(L)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO111)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(L)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO157)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVK(L)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO158)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAK(L)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO159)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEK(L)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO165)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQK(L)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO160)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPK(SH)S-R2(SEQ ID NO99)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAK(SH)PPS-R2(SEQ ID NO100)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSK(SH)APPPS-R2(SEQ ID NO101)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPK(SH)SGAPPPS-R2(SEQ ID NO168)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKK(SH)GGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO102)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLK(SH)NGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO170)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(SH)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO106)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVK(SH)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO107)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAK(SH)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO108)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEK(SH)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO110)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQK(SH)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO111)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKK(SH)MEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO112)，
R1-HAIBEGTFTSDLSK(SH)QMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO169)，
R1-HAIBEGTFTSDLK(SH)KQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO113)和
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRKFIEWLK(SH)NGGPSS-R2(SEQ ID NO115)。
77.如權(quán)利要求76所述的GA靶向劑，其包括包含選自以下序列的肽
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(L)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO22)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVK(L)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO23)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAK(L)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO24)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEK(L)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO26)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQK(L)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO27)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(L)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO106)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVK(L)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO107)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAK(L)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO108)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEK(L)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO110)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQK(L)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO111)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(L)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO157)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVK(L)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO158)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAK(L)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO159)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEK(L)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO165)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQK(L)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO160)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVRK(SH)FIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO106)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAVK(SH)LFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO107)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEEEAK(SH)RLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO108)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQMEK(SH)EAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO110)，
R1-HAIBEGTFTSDLSKQK(SH)EEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO111)和
R1-HAIBEGTFTSDLSKK(SH)MEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-R2(SEQ ID NO112)。
78.一種下式的化合物
其中-MAb是與抗體結(jié)合位點(diǎn)相連的共價(jià)連接。
79.一種下式的化合物
其中-MAb是與抗體結(jié)合位點(diǎn)相連的共價(jià)連接。
80.一種下式的化合物
其中-MAb是與抗體結(jié)合位點(diǎn)相連的共價(jià)連接。
81.一種下式的化合物
其中-MAb是與抗體結(jié)合位點(diǎn)相連的共價(jià)連接。
82.一種下式的化合物
其中-MAb是與抗體結(jié)合位點(diǎn)相連的共價(jià)連接。
83.一種下式的化合物
其中-MAb是與抗體結(jié)合位點(diǎn)相連的共價(jià)連接。
84.一種下式的化合物
其中-MAb是與抗體結(jié)合位點(diǎn)相連的共價(jià)連接。
85.一種下式的化合物
其中-MAb是與抗體結(jié)合位點(diǎn)相連的共價(jià)連接。
86.一種下式的化合物
其中-MAb是與抗體結(jié)合位點(diǎn)相連的共價(jià)連接。
87.一種下式的化合物
其中-MAb是與抗體結(jié)合位點(diǎn)相連的共價(jià)連接。
88.如權(quán)利要求47～87中任一項(xiàng)所述的化合物，其中所述抗體是催化抗體。
89.如權(quán)利要求88所述的化合物，其中所述抗體是醛縮酶抗體。
90.如權(quán)利要求47～89中任一項(xiàng)所述的化合物，其中所述抗體是全長(zhǎng)抗體、Fab、Fab’、F(ab’)2、Fv、dsFv、scFv、VH、雙鏈抗體或包含來(lái)自h38c2的VH和VL域的微型抗體。
91.如權(quán)利要求47～90中任一項(xiàng)所述的化合物，其中所述抗體是全長(zhǎng)抗體。
92.如權(quán)利要求47～91中任一項(xiàng)所述的化合物，其中所述抗體是包含來(lái)自h38c2的VH和VL域以及選自IgG1、IgG2、IgG3和IgG4的恒定域的抗體。
93.如權(quán)利要求47～92中任一項(xiàng)所述的化合物，其中所述抗體是具有SEQ ID NO79所表述的可變輕鏈序列和SEQ ID NO80所表述的可變重鏈序列的h38c2。
94.一種藥物組合物，所述藥物組合物包含治療有效量的如權(quán)利要求1～93中任一項(xiàng)所述的化合物。
95.如權(quán)利要求94所述的藥物組合物，其中所述藥物組合物還包含治療有效量的選自磺酰脲、雙胍、噻唑烷二酮、α葡萄糖苷酶抑制劑和美格替奈的化合物。
96.如權(quán)利要求1～66中任一項(xiàng)所述的GA靶向劑或如權(quán)利要求94～95中任一項(xiàng)所述的藥物組合物在增加個(gè)體的血糖水平的方法中的應(yīng)用。
97.一種增加個(gè)體的血糖水平的方法，所述方法包括以治療有效量的如權(quán)利要求1～93中任一項(xiàng)所述的化合物或如權(quán)利要求94～95中任一項(xiàng)所述的藥物組合物來(lái)治療所述個(gè)體。
98.一種制造GA靶向化合物的方法，所述方法包括將如權(quán)利要求1～93中任一項(xiàng)所述的化合物與h38c2IgG1的至少一個(gè)結(jié)合位點(diǎn)共價(jià)連接。
99.一種基本如本文中參考附圖和序列列表所述的肽。
100.一種基本如本文中參考附圖和序列列表所述的化合物。
101.一種基本如本文中參考附圖和序列列表所述的藥物組合物。
102.一種基本如本文中參考附圖和序列列表所述的方法。
103.一種基本如本文中參考附圖和序列列表所述的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供了胰高血糖素樣蛋白1受體靶向化合物，該化合物包含與抗體結(jié)合位點(diǎn)相連的胰高血糖素樣蛋白1受體靶向劑-接頭偶聯(lián)物。本發(fā)明提供了所述化合物的各種用途，包括預(yù)防或治療糖尿病或糖尿病相關(guān)病癥的方法。
文檔編號(hào)C07K14/435GK101663317SQ200880007364
公開(kāi)日2010年3月3日 申請(qǐng)日期2008年1月7日 優(yōu)先權(quán)日2007年1月5日
發(fā)明者柯特·布拉德肖, 薩庫(kù)馬·薩卡穆里, 傅彥文, 布賴恩·奧茨, 喬爾·德沙奈斯, 戴維·圖梅爾蒂 申請(qǐng)人:CovX科技愛(ài)爾蘭有限公司