專利名稱：：一種從披針葉黃華種籽中提取金雀花堿和黃華堿的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種采用植物化學方法從披針葉黃華種籽中制備可用于醫(yī)藥化學原料的金雀花堿和黃華堿的生產(chǎn)工藝。
背景技術(shù)：
：披針葉黃華(r.7aflceW"aR.Br.)又名牧馬豆、野決明，系豆科Ue卵/w77ase朋)野決明屬(7^er雙o/^'s)多年生草本植物，藥用其成熟的種籽，分布于中國東北、華北及西北等廣大地區(qū)，資源豐富。據(jù)資料記載，本種為有毒植物，種籽和全草可引起牲畜中毒，但該植物也是有名的藥用植物，具有興奮呼吸、抗輻射及祛痰止咳等功效，其主要有效成分金雀花堿(Cytisiiie)對呼吸系統(tǒng)的作用類似煙堿，能反射性地興奮呼吸，其興奮作用強于同劑量的山梗堿；臨床上用O.15%水溶液肌肉或靜脈注射，搶救手術(shù)創(chuàng)傷，戰(zhàn)傷及窒息性毒劑、氰類毒劑、麻醉藥等引起中毒時的反射性呼吸暫停、傳染性疾病時呼吸、心血管活動的衰竭以及休克、虛脫狀態(tài)和新生兒窒息等。根據(jù)金雀花堿的特有生物活性，前蘇聯(lián)臨床上用該生物堿刺激呼吸；最近兩年，金雀花堿作為療效明顯的戒煙制劑原料引起國際醫(yī)藥界的關(guān)注，以其為主要前提物合成的一種新化學實體化合物瓦倫尼克林(Varenicline)，能夠與神纟i^^煙堿樣乙截膽堿受體a4P2亞型高度選擇性結(jié)合，是一種通過影響尼古丁依賴性神經(jīng)機制產(chǎn)生戒煙效果的藥物。目前關(guān)于從披針葉黃華種籽中制備金雀花堿的工藝研究公開資料比較少，其方法主要有以下兩種(1)披針葉黃華種籽粉碎，用甲醇、乙醇等有機溶劑提取，提取液濃縮得到含金雀花堿的總堿溶液，用鹽酸等調(diào)PH使成酸性，用氯仿萃取除去一定雜質(zhì)后，用K0H或K2C03等堿化酸水溶液，再用氯仿等有機溶劑萃取金雀^M等生物堿，回收溶劑，用丙酮結(jié)晶、重結(jié)晶，得到金雀花堿；(2)披針葉黃華種籽粉碎后加入氨水或其他堿性試劑堿化，用氯仿或其他有機溶劑加熱回流提取，提取液用一定比例的酸水反萃吸收，得到含金雀花堿的總堿酸水溶液，再加入NaOH等堿化，用氯仿等有機溶劑萃取，得到粗生物堿，用丙酮結(jié)晶、重結(jié)晶，得到金雀花堿。上述兩種方法各有優(yōu)點，只能得到金雀花堿一種產(chǎn)品，且存在金雀花堿得率較低，產(chǎn)品外觀較差(顏色為淡黃色)，金雀花堿質(zhì)量不穩(wěn)定，含量達不到98%以上；另外，僅憑重結(jié)晶提高產(chǎn)品質(zhì)量導致得率和原輔料使用效率不高，溶劑消耗較大等不足。發(fā)萌內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種從披針葉黃華種籽中同時制備金雀花堿和黃華堿的方法，該方法工藝簡單，成本低，產(chǎn)品純度可達9鄉(xiāng)以上，適宜大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)兩種產(chǎn)品。實現(xiàn)本發(fā)明目的所采用的技術(shù)方案是:用一定比例的乙醇提取披針葉黃華種籽，得到總生物堿浸膏，用苯類溶劑、鹵代烴中的一種萃取，用酸性水溶液吸收萃取溶劑，至萃取劑中無生物堿反應，獲得主要含黃華堿的酸性水溶液，調(diào)節(jié)酸性水溶g—定PH值，濃縮，析晶，重結(jié)晶獲得黃華堿；萃取過的浸膏再用堿化試劑調(diào)節(jié)PH值，再次萃取，真空濃縮萃取溶液，濃縮物用有機溶劑結(jié)晶、重結(jié)晶，獲得金雀花堿。本發(fā)明具體生產(chǎn)方法如下(1)將披針葉黃華種籽粉碎，粒度為10^60目，裝入不銹鋼多功能提取罐中，用95%的乙醇或甲醇反復提取三次，溶劑用量為物料重量的10倍，合并提取液，提取液用雙效蒸發(fā)器濃縮成浸膏狀，比重1.15~1.25,料渣棄去；(2)—次萃取將步驟(1)所得浸膏用萃取溶劑反復萃取，萃取溶劑用酸化試劑吸收后可再次使用，反復萃取直至薄層檢測萃取溶劑無明顯生物堿反應為止；O)將步驟(2)所得主要含黃華堿的酸水溶液用堿化試劑喊化，使Whl2,放置，結(jié)晶，即可得到黃華堿；(4)二次萃取將步驟(2)的水層用堿化試劑堿化，使其PH—2,用萃取溶荊反復萃取，至薄層檢測萃取溶劑無明顯生物堿反應為止，真空回收溶劑，得到主薆含金雀花堿的總生物堿；(5)將步驟(4)所得金雀花堿的總生物堿用有機溶劑在50'C溶解，濃縮，皿，結(jié)晶，過濾，烘干，即可得到金雀花堿。所用的萃取溶劑為苯、二甲苯、甲苯，乙酸乙酯、石油醚、三氯甲烷、二氯甲烷中的一種或兩種混合物。所用的酸化試劑為鹽酸、硫酸、磷酸、硝酸中的一種。所用的堿化試劑為氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、氨水中的一種。所用的結(jié)晶溶劑為丙酮、甲醇、乙醇中的一種或兩種。本發(fā)明薄層層析檢測的具體方法是取薄層層析硅膠G，用2^aOH溶液調(diào)制成乳膏狀，制成薄層板，105"C活化1小時，以金雀花滅和黃華堿為對照品，以苯丙酮甲醇=4:2:2(體積比)為展開劑，進行薄層層析，用改良的碘化鉍鉀試劑為顯色劑，Rf值分別為0.65和0-9D。本發(fā)明具有以下優(yōu)點次投料可以獲得兩種產(chǎn)品，提高了藥材的使用效率；2.工藝簡單，不需要復雜的生產(chǎn)設備，適合工業(yè)化生產(chǎn)3.本發(fā)明所得產(chǎn)品純度高，質(zhì)量好，有效成分含量可達98%以上。附國說明圖l是本發(fā)明生產(chǎn)工藝簡圖。圖2是金雀花堿對照品高效液相色譜圖。圖3是實施例一所得金雀花堿高效液相色譜圖。圖4是實施例二所得金雀花堿高效液相色譜圖。具體錢方式圖2是金雀花堿對照品高效液相色譜圖<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>實施例一取披針葉黃華種籽200公斤，粉碎至20目，裝入2000L不銹鋼多功能提取罐中，第一次加入800公斤含醇量為95%的工業(yè)乙醇，加熱至75'C，保持此溫度2小時以上，得到乙醇提取液；第二次，加入600公斤含醇量為站%的工業(yè)乙醇,加熱至75t:，保持此溫度2小時以上，濾出溶液第三次，加入600公斤含醇量為95%的工業(yè)乙醇，加熱至75。C，保持此溫度2小時以上，濾出溶液；合并三次提取液，用雙效蒸發(fā)器在65TC,-0.08MPa以下真空條件下濃縮，除去乙醇和部分水，使成浸膏狀，比重為1.18，得浸膏92公斤，收率為46.0%;浸膏用苯萃取6次，每次250公斤，至萃取液無生物堿反應為止；苯萃取液用1096的鹽酸水溶液反萃取，至苯溶液無明顯生物堿反應為止，使主要為黃華堿的生物堿轉(zhuǎn)移至酸性水溶液中，苯可重復使用；分離出酸水溶液，加入30%的NaOH水溶液堿化，結(jié)晶，過濾，用丙酮重結(jié)晶，得到黃華堿0.2公斤；苯萃取過的浸膏用20%NaOH水溶液堿化，用二氯甲烷萃取6次，每次280公斤，至萃取液中無生物堿反應為止；二氯甲烷萃取液真空濃縮，濃縮物用丙圉溶解，過濾，801C常壓蒸餾至有結(jié)晶析出為止，放置，結(jié)晶，過濾，得到金雀花堿粗品，用丙酮重結(jié)晶，真空干燥，即可得到金雀花堿產(chǎn)品1.15公斤，含量98.6%，含水量O.鄉(xiāng)，總得率0.57鄰所得金雀花堿高效液相色譜圖如圖3所示。峰號保留時間峰高_峰面積_含量12.2481359,19211015.6470.228422.640167.691949.7630.019733.882200.7351111.7580.023044.107607315.1884810527.50099.7254J_6.632_25.966_167.850_0.0035總計609068.7714823772.518100.0000實施例二取披針葉黃華種籽300公斤，粉碎至40目，裝入2000L不銹鋼多功能提取罐中，第一次加入1200公斤含醇量為95%的工業(yè)甲醇，加熱至75'C,保持此溫度2小時以上，濾出溶液；第二次，加入900公斤含醇量為95%的工業(yè)甲醇，加熱至75t:,保持此溫度2小時以上，濾出溶液；第三次，加入900公斤含醇量為95鵬工業(yè)甲醇，加熱至75r,保持此溫度2小時以上，濾出溶液合并三次提取液，用雙效蒸發(fā)器在65t:，-0.08MPa以下真空條件下濃縮，除去甲醇和部分水，使成浸膏狀，比重為1.2，得浸膏145公斤，收率為48.3%;浸膏用二甲苯萃取6次，每次380公斤，至二甲苯萃取液無生物堿反應為止；二甲苯M液用5嫩硫酸水溶液反萃取，至二甲苯溶液中無生物堿反應為止，使主要為黃華堿的生物堿轉(zhuǎn)移至酸水溶液中，二甲苯可重復使用；分離出酸水溶液，加入2(m的KOH水溶液堿化，結(jié)晶，過濾，用丙醣重結(jié)晶，得到黃華堿0.35公斤；苯萃取過的浸膏用2WKOH水溶液堿化，用三氯甲垸萃取6次，每次600公斤至萃取液中無生物堿反應為止；三氯甲垸萃取液真空濃縮，濃縮物用丙酮溶解，過濾，8(TC蒸餾至有結(jié)晶析出為止，放置，結(jié)晶，過濾，得到金雀花堿，用丙s重結(jié)晶，真空干燥，即可得到金雀花堿產(chǎn)品1.83公斤,含量98.5%,含水量0.8%,總得率0.61%。所得金雀花堿高效液相色譜圖如圖4所示。峰號保留時間峰高_峰面積_含量12.248497.9464819.6000.109223.890110.500538.3000.012234.115_628151.3754406585.000_99.8786S￥628759.8214411942-900100.0000實施例三色譜柱為C18柱(4.6咖X250咖，5um)，流動相為0.05西ol/L磷酸二氯鈉溶液甲醇高氯酸氨(15ml:85ml:0.5g);體積流量為1.0l/iim檢測波長306咖；柱溫25TC;進樣量10ul;理論塔板數(shù)按金雀花堿峰計算應不低于5000。權(quán)利要求1、一種從披針葉黃華種籽中提取金雀花堿和黃華堿的方法，其特征在于該方法包括以下步驟(1)將披針葉黃華種籽粉碎，粒度為10～60目，裝入不銹鋼多功能提取罐中，用95％的乙醇或甲醇反復提取三次，溶劑用量為物料重量的10倍，合并提取液，提取液用雙效蒸發(fā)器濃縮成浸膏狀，比重1.15～1.25，料渣棄去；(2)一次萃取將步驟(1)所得浸膏用萃取溶劑反復萃取，萃取溶劑用酸化試劑吸收后可再次使用，反復萃取直至薄層檢測萃取溶劑無明顯生物堿反應為止；(3)將步驟(2)所得主要含黃華堿的酸水溶液用堿化試劑堿化，使PH＝12，放置，結(jié)晶，即可得到黃華堿；(4)二次萃取將步驟(2)的水層用堿化試劑堿化，使其PH＝12，用萃取溶劑反復萃取，至薄層檢測萃取溶劑無明顯生物堿反應為止，真空回收溶劑，得到主要含金雀花堿的總生物堿；(5)將步驟(4)所得金雀花堿的總生物堿用有機溶劑在50℃溶解，濃縮，放置，結(jié)晶，過濾，烘干，即可得到金雀花堿。2、如權(quán)利要求1所述的一種從披針葉黃華種籽中提取金雀花堿和黃華堿的方法,其特征在于所用的萃取溶劑為苯、二甲苯、甲苯，乙酸乙酯、石油醚、三氯甲烷、二氯甲烷中的一種或兩種混合物。3、如權(quán)利要求，所述的一種從披針葉黃華種籽中提取金雀花堿和黃華堿的方法,其特征在于所用的酸化試劑為鹽酸、硫酸、磷酸、硝酸中的一種。4、如權(quán)利要求1所述的一種從披針葉黃華種籽中提取金雀花堿和黃華堿的方法，其特征在于所用的堿化試劑為氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、氨水中的一種。5、如權(quán)利要求1所述的一種從披針葉黃華種籽中提取金雀花堿和黃華堿的方法,其特征在于所用的結(jié)晶溶劑為丙S、甲醇、乙醇中的一種或兩種。全文摘要本發(fā)明涉及一種從披針葉黃華種籽中提取金雀花堿和黃華堿的方法，其特征在于將披針葉黃華種籽粉碎后，經(jīng)提取、濃縮得浸膏，用有機溶劑萃取浸膏，酸水溶液反萃取、凈化萃取溶劑，同時得到含黃華堿的酸水溶液，此酸水溶液加入堿性試劑堿化，析晶，重結(jié)晶，可得到黃華堿產(chǎn)品；萃取過的浸膏溶液堿化后用有機溶劑萃取，濃縮，結(jié)晶，重結(jié)晶，可得到純度98％以上的金雀花堿產(chǎn)品。金雀花堿用于搶救手術(shù)創(chuàng)傷，戰(zhàn)傷及窒息性毒劑、麻醉藥等引起中毒時的反射性呼吸暫停和新生兒窒息等，以其為主要原料的化學合成物是一種療效顯著的新型戒煙藥，本發(fā)明具有工藝簡單，成本低，所得金雀花堿產(chǎn)品得率高，純度好，適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)，同時又可得到黃華堿產(chǎn)品。文檔編號C07D471/00GK101624393SQ20091002348公開日2010年1月13日申請日期2009年8月4日優(yōu)先權(quán)日2009年8月4日發(fā)明者周軍輝,靜李,王新莉,王答祺申請人:王答祺