專利名稱：一種提取棗中環(huán)磷酸腺苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種提取棗中環(huán)磷酸腺苷的方法。
背景技術(shù)：
環(huán)磷酸腺苷(cyclic ademodsine monophosphate,簡(jiǎn)稱cAMP)分子式為 C1()H12N506P*H20，相對(duì)分子量347.23，是一種廣泛存在于生物體內(nèi)的一種沒(méi) 有特異性的小分子高生物活性物質(zhì)，參與酶活性調(diào)節(jié)、基因表達(dá)、細(xì)胞增殖 與分化、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝等生理活動(dòng)，是機(jī)體代謝的重要調(diào)節(jié)因子，對(duì)提高動(dòng) 物的生產(chǎn)性能和胴體品質(zhì)有明顯作用?；A(chǔ)醫(yī)學(xué)研究證明至少40多種疾病(包 括癌癥、高血壓、冠心病、心肌梗塞和心源性休克等重大疾病)與cAMP的 代謝有關(guān)；臨床醫(yī)學(xué)研究證明cAMP能舒張平滑肌、擴(kuò)張血管、改善肝功能、 激活蛋白、促進(jìn)神經(jīng)再生、抑制皮膚外層細(xì)胞分裂、轉(zhuǎn)化異常細(xì)胞、促進(jìn)呼 吸鏈氧化酶的活性、改善心肌缺氧并對(duì)心肌梗塞、冠心病、心源性休克、牛 皮癬等疾病具有顯著療效?，F(xiàn)在cAMP已經(jīng)作為一種核普酸類藥物開(kāi)發(fā)使用， 在臨床上主要用于心絞痛、心肌梗死、心肌炎及心源性休克等的治療，另外 對(duì)改善風(fēng)濕性心臟病的心悸、氣急、胸悶等癥狀有一定的緩解作用，亦可用 于急性白血病的誘導(dǎo)緩解等。
目前在棗果中cAMP的檢測(cè)、提取和分離等方面，國(guó)內(nèi)外研究者做了大 量工作。JC Cyong等人于1980在Photochemistry上發(fā)表的文章"Cyclic Adenosine Monophosphate in the fruit of Ziziphus Jujuba"，率先禾ll用離子交換柱 從麥中分離出cAMP，并對(duì)cAMP分離提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化。KHanabusa等 人于1981年在Planta Medica上發(fā)表的文章"High level of Cyclic AMP in the Jujube Plum",報(bào)導(dǎo)了大棗中cAMP的含量在高等植物中是最高的，是鍔梨含 量10倍以上，達(dá)到500nmol/gfW，他利用Dowex 1x4型甲酸鹽柱對(duì)中國(guó)大麥 進(jìn)行多次處理，提取的cAMP的純度為34%，再經(jīng)TLC純化后純度可達(dá)97%。 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)的王向紅，發(fā)表的學(xué)位論文"棗果主要活性成分分析方法及其 綜合加工技術(shù)研究"中，對(duì)提取溶劑進(jìn)行篩選，最大量的沉淀?xiàng)椫械墓z， 以提取cAMP為目標(biāo)，對(duì)各提取因素如時(shí)間、固液比、溫度進(jìn)行優(yōu)化，得出提取因素的最優(yōu)水平組合。中國(guó)專利號(hào)ZL200410018617.2公開(kāi)了一種從棗中 提取環(huán)磷酸腺苷的工藝，其工藝主要利用陰離子交換樹(shù)脂柱和氧化鋁柱進(jìn)行 層析處理，提取棗中的環(huán)磷酸腺苷。上述幾種提取方法都存在提取周期長(zhǎng)， 效率低，成本高，工藝復(fù)雜的缺點(diǎn)，影響了其工藝的推廣應(yīng)用，而且在提取 過(guò)程中加入了一些對(duì)人體有害的有機(jī)溶劑，不僅污染了環(huán)境，還影響了環(huán)磷 酸腺苷的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種快速，高效，安全的提取棗中環(huán)磷酸腺苷的方法。
為了實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是 一種提取棗中環(huán)磷酸 腺苷的方法，該方法如下:將棗粉碎，加水勻漿，將棗漿在微波功率為150-900W 條件下微波處理10-450s，然后于20-100'C、超聲波功率100 250W條件下超 聲波處理10-60min，再將處理后的棗漿固液分離，分離后的液體進(jìn)行濃縮， 得到環(huán)磷酸腺苷濃縮制品。
所述加水量與棗的重量比為5-50: 1。
所述勻漿時(shí)勻漿機(jī)的轉(zhuǎn)速為8000-20000r/min，勻漿時(shí)間為l-15min。 所述固液分離后的固體進(jìn)行至少一次的重復(fù)提取和分離，提取前將上次
固液分離得到的固體配置成0.02 0.2 g/ml棗漿，提取完畢后合并固液分離得
到的液體。
所述的固液分離采用的方法為離心分離。
本發(fā)明從棗中提取環(huán)磷酸腺苷的方法利用微波的高能作用以及超聲波振 動(dòng)的空穴作用，使棗漿中的各點(diǎn)受到得作用一致，降低環(huán)磷酸腺苷與棗基體 的結(jié)合力，相比現(xiàn)有的提取方法大大縮短了提取時(shí)間，提高了提取率，減少 了原料的浪費(fèi)。另外，在提取過(guò)程中，采用水為提取劑，沒(méi)有添加任何有害 的化學(xué)試劑進(jìn)行輔助提取，不會(huì)造成環(huán)境的污染，而且提取工藝簡(jiǎn)單，操作 方便，成本低廉，提取率高，適于工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明從棗中提取制成的環(huán) 磷酸腺苷濃縮制品，可以供保健食品用，具有增強(qiáng)人的免疫力、促進(jìn)睡眠、 幫助記憶等功效。此外，環(huán)磷酸腺苷濃縮制品屬于棗深加工產(chǎn)品，其獨(dú)特的 生理功效，受到人們的廣泛歡迎，增加了棗產(chǎn)品的附加值，因此，必將提升 棗產(chǎn)業(yè)的整體水平，增加棗農(nóng)收入，對(duì)促進(jìn)棗系列產(chǎn)品產(chǎn)業(yè)化的發(fā)展和帶動(dòng)農(nóng)民致富具有重要的意義。
具體實(shí)施例方式
結(jié)合本發(fā)明的技術(shù)方案，以市場(chǎng)上容易購(gòu)得的各品種的棗為提取原料， 提供以下從棗中提取環(huán)磷酸腺苷的具體實(shí)施例 實(shí)施例1
本實(shí)施例以新疆灰棗為提取原料提取環(huán)磷酸腺苷，其方法如下 稱取100g新疆灰棗，清水洗凈后，加入1.5kg的水，用勻漿機(jī)進(jìn)行勻漿，
設(shè)定勻漿機(jī)轉(zhuǎn)速13000r/min，勻漿時(shí)間2min;將勻漿后的棗漿在微波爐中進(jìn) 行微波處理，設(shè)定微波功率為450W，微波時(shí)間為90s，然后在超聲波機(jī)中進(jìn) 行超聲波處理，設(shè)定功率120W，處理溫度6(TC，處理時(shí)間30min;將超聲波 處理后的棗漿離心處理20分鐘，離心轉(zhuǎn)速4200rpm，上清液為一級(jí)cAMP提 取液，棗渣加水配制成0.17g/ml樣液經(jīng)過(guò)上述相同條件的提取后，再次進(jìn)行 離心處理，上清液為二級(jí)cAMP提取液，合并兩次處理的提取液，將提取液 在6(TC， 0.095Mpa條件下進(jìn)行真空濃縮得到環(huán)磷酸腺苷濃縮制品。經(jīng)測(cè)定， 本實(shí)施例新疆灰棗中的cAMP的提取率為113.34 pg/g。 實(shí)施例2
稱取100g新疆雞心棗，清水洗凈后，加入2.5kg的水，用勻漿機(jī)進(jìn)行勻 漿，設(shè)定勻漿機(jī)轉(zhuǎn)速10000r/min，勻漿時(shí)間4min;將勻漿后的棗漿在微波爐 中進(jìn)行微波處理，設(shè)定微波功率為650W，微波時(shí)間為40s;然后在超聲波機(jī) 中進(jìn)行超聲波處理，設(shè)定功率150W，處理溫度70。C，處理時(shí)間20min;將超 聲波處理后的棗漿離心處理20分鐘，離心轉(zhuǎn)速4200rpm，上清液為一級(jí)cAMP 提取液，棗渣加水配制成0.2g/ml樣液經(jīng)過(guò)上述相同條件的提取后，再次進(jìn)行 離心處理，上清液為二級(jí)cAMP提取液，合并兩次處理的提取液，將提取液 在65t:， 0.095Mpa條件下進(jìn)行真空濃縮得到環(huán)磷酸腺苷濃縮制品。經(jīng)測(cè)定， 本實(shí)施例新疆雞心棗中的cAMP的提取率為149.98 jxg/g。
實(shí)施例3
稱取100g新鄭雞心棗，清水洗凈后，加入1 kg的水，用勻漿機(jī)進(jìn)行勻漿， 設(shè)定勻漿機(jī)轉(zhuǎn)速19000r/min，勻漿時(shí)間7min;將勻漿后的棗漿在微波爐中進(jìn) 行微波處理，設(shè)定微波功率為800W，微波時(shí)間為180s;然后在超聲波機(jī)中進(jìn) 行超聲波處理，設(shè)定功率175W，處理溫度9(TC，處理時(shí)間10min;將超聲波處理后的棗漿離心處理20分鐘，離心轉(zhuǎn)速4200rpm，上清液為一級(jí)cAMP提 取液，棗渣加水配制成0.06g/ml樣液經(jīng)過(guò)上述相同條件的提取后，再次進(jìn)行 離心處理，上清液為二級(jí)cAMP提取液，合并兩次處理的提取液，將提取液 在65。C， 0.095Mpa條件下進(jìn)行真空濃縮得到環(huán)磷酸腺苷濃縮制品。經(jīng)測(cè)定， 本實(shí)施例新鄭雞心棗中的cAMP的提取率為169.27嗎/g。 實(shí)施例4
稱取100g山東金絲小棗，清水洗凈后，加入4.5kg的水，用勻漿機(jī)進(jìn)行 勻漿，設(shè)定勻漿機(jī)轉(zhuǎn)速11000r/min,勻漿時(shí)間13min;將勻漿后的棗漿在微波 爐中進(jìn)行微波處理，設(shè)定微波功率為550W，微波時(shí)間為400s;然后在超聲波 機(jī)中進(jìn)行超聲波處理，設(shè)定功率100W，處理溫度5(TC,處理時(shí)間50min;將 超聲波處理后的棗漿離心處理20分鐘，離心轉(zhuǎn)速4200rpm，上清液為一級(jí) cAMP提取液，棗渣加水配制成0.08g/ml樣液經(jīng)過(guò)上述相同條件的提取后， 再次進(jìn)行離心處理，上清液為二級(jí)cAMP提取液，合并兩次處理的提取液， 將提取液在60°C ， 0.095Mpa條件下進(jìn)行真空濃縮得到環(huán)磷酸腺苷濃縮制品。 經(jīng)測(cè)定，本實(shí)施例山東金絲小棗中的cAMP的提取率為95.57 pg/g。
實(shí)施例5
稱取100g山西灘棗，清水洗凈后，加入5kg的水，用勻槳機(jī)進(jìn)行勻漿， 設(shè)定勻漿機(jī)轉(zhuǎn)速20000r/min，勻漿時(shí)間llmin;將勻漿后的棗槳在微波爐中進(jìn) 行微波處理，設(shè)定微波功率為250W，微波時(shí)間為270s;然后在超聲波機(jī)中進(jìn) 行超聲波處理，設(shè)定功率220W，處理溫度10(TC，處理時(shí)間35min;將超聲 波處理后的棗漿離心處理20分鐘，離心轉(zhuǎn)速4200rpm，上清液為一級(jí)cAMP 提取液，棗渣加水配制成0.12g/ml樣液經(jīng)過(guò)上述相同條件的提取后，再次進(jìn) 行離心處理，上清液為二級(jí)cAMP提取液，合并兩次處理的提取液，將提取 液在70°C， 0.095Mpa條件下進(jìn)行真空濃縮得到環(huán)磷酸腺苷濃縮制品。經(jīng)測(cè)定， 本實(shí)施例山西灘棗中的cAMP的提取率為179.80嗎/g。
實(shí)施例6
稱取100g滄州金絲小棗，清水洗凈后，加入0.5kg的水，用勻漿機(jī)進(jìn)行 勻漿，設(shè)定勻漿機(jī)轉(zhuǎn)速17000r/min，勻漿時(shí)間15min;將勻漿后的棗漿在微波 爐中進(jìn)行微波處理，設(shè)定微波功率為150W，微波時(shí)間為360s;然后在超聲波 機(jī)中進(jìn)行超聲波處理，設(shè)定功率135W，處理溫度30"C，處理時(shí)間55min;將超聲波處理后的棗漿離心處理20分鐘，離心轉(zhuǎn)速4200rpm，上清液為一級(jí) cAMP提取液，棗渣加水配制成0.1g/ml樣液經(jīng)過(guò)上述相同條件的提取后，再 次進(jìn)行離心處理，上清液為二級(jí)cAMP提取液，合并兩次處理的提取液，將 提取液在65。C， 0.095Mpa條件下進(jìn)行真空濃縮得到環(huán)磷酸腺苷濃縮制品。經(jīng) 測(cè)定，本實(shí)施例滄州金絲小棗中的cAMP的提取率為100.44 ng/g。 實(shí)施例7
稱取100g新疆駿棗，清水洗凈后，加入3.5kg的水，用勻漿機(jī)進(jìn)行勻漿， 設(shè)定勻漿機(jī)轉(zhuǎn)速15000r/min,勻漿時(shí)間lmin;將勻漿后的棗漿在微波爐中進(jìn) 行微波處理，設(shè)定微波功率為900W，微波時(shí)間為10s;然后在超聲波機(jī)中進(jìn) 行超聲波處理，設(shè)定功率160W，處理溫度25'C,處理時(shí)間45min;將超聲波 處理后的棗漿離心處理20分鐘，離心轉(zhuǎn)速4200rpm，上清液為一級(jí)cAMP提 取液，棗渣加水配制成0.04g/ml樣液經(jīng)過(guò)上述相同條件的提取后，再次進(jìn)行 離心處理，上清液為二級(jí)cAMP提取液，合并兩次處理的提取液，將提取液 在70'C， 0.095Mpa條件下進(jìn)行真空濃縮得到環(huán)磷酸腺苷濃縮制品。經(jīng)測(cè)定， 本實(shí)施例新疆駿棗中的cAMP的提取率為347.89 pg/g。
實(shí)施例8
稱取100g新鄭灰棗，清水洗凈后，加入4kg的水，用勻漿機(jī)進(jìn)行勻漿， 設(shè)定勻漿機(jī)轉(zhuǎn)速8000r/min，勻漿時(shí)間9min;將勻槳后的棗漿在微波爐中進(jìn)行 微波處理，設(shè)定微波功率為350W，微波時(shí)間為450s;然后在超聲波機(jī)中進(jìn)行 超聲波處理，設(shè)定功率250W，處理溫度20'C，處理時(shí)間60min;將超聲波處 理后的棗漿離心處理20分鐘，離心轉(zhuǎn)速4200rpm，上清液為一級(jí)cAMP提取 液，棗渣加水配制成0.14g/ml樣液經(jīng)過(guò)上述相同條件的提取后，再次進(jìn)行離 心處理，上清液為二級(jí)cAMP提取液，合并兩次處理的提取液，將提取液在 65°C， 0.095Mpa條件下進(jìn)行真空濃縮得到環(huán)磷酸腺苷濃縮制品。經(jīng)測(cè)定，本 實(shí)施例新鄭灰棗中的cAMP的提取率為103.15 pg/g。
實(shí)施例9
稱取100g內(nèi)黃紅棗(扁核酸)，清水洗凈后，加入4kg的水，用勻漿機(jī) 進(jìn)行勻漿，設(shè)定勻漿機(jī)轉(zhuǎn)速12000r/min，勻漿時(shí)間6min;將勻漿后的棗槳在 微波爐中進(jìn)行微波處理，設(shè)定微波功率為750W，微波時(shí)間為60s;然后在超 聲波機(jī)中進(jìn)行超聲波處理，設(shè)定功率195W，處理溫度4(TC，處理時(shí)間30min;將超聲波處理后的棗漿離心處理20分鐘，離心轉(zhuǎn)速4200rpm，上清液為一級(jí) cAMP提取液，棗渣加水配制成0.02g/ml樣液經(jīng)過(guò)上述相同條件的提取后， 再次進(jìn)行離心處理，上清液為二級(jí)cAMP提取液，合并兩次處理的提取液， 將提取液在60°C ， 0.095Mpa條件下進(jìn)行真空濃縮得到環(huán)磷酸腺苷濃縮制品。 經(jīng)測(cè)定，本實(shí)施例新鄭灰棗中的cAMP的提取率為421.22 pg/g。 對(duì)比例
稱取100g新鄭灰棗，清水洗凈后，分別采用四種方法提取
1) 傳統(tǒng)水浴提取按照料液比l: 25加入蒸餾水進(jìn)行勻漿，勻漿條件
均漿機(jī)轉(zhuǎn)速13000r/min，勻漿時(shí)間2min;然后在沸騰的水浴中加熱30min;
2) 微波輔助提取加入蒸餾水，料液比l: 20，浸泡時(shí)間6h，微波功率 200W，微波時(shí)間3min;
3) 超聲波輔助提取加入蒸餾水，料液比l: 12，處理溫度60。C，浸泡
時(shí)間12h，超聲波處理時(shí)間20min;
4) 本發(fā)明的方法提取提取條件同實(shí)施例l。
上述的四種提取方法，均對(duì)cAMP進(jìn)行一級(jí)提取，離心處理，經(jīng)測(cè)定結(jié)
果如表1所示
表l四種提取方法對(duì)比
提取方法提取時(shí)間min提取率ug/g
水浴提取3044.86
微波輔助提取36348.61
超聲波輔助提取74049.27
本發(fā)明的方法提取31.564.32
通過(guò)對(duì)比，本發(fā)明從棗中提取環(huán)磷酸腺苷的方法，采用了微波和超聲波 聯(lián)合的提取方法，相比其它的提取方法，提取的時(shí)間大大縮短，提取率顯著 提高。
權(quán)利要求
1、一種提取棗中環(huán)磷酸腺苷的方法，其特征在于該方法如下將棗粉碎，加水勻漿，將棗漿在微波功率為150-900W條件下微波處理10-450s，然后于20-100℃、超聲波功率100～250W條件下超聲波處理10-60min，再將處理后的棗漿固液分離，分離后的液體進(jìn)行濃縮，得到環(huán)磷酸腺苷濃縮制品。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述加水量與棗的重量比 為5-50: 1。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述勻漿時(shí)勻漿機(jī)的轉(zhuǎn)速 為8000-20000r/min，勻漿時(shí)間為l-15min。
4、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述固液分離后的固體進(jìn) 行至少一次的重復(fù)提取和分離，提取前將上次固液分離得到的固體配置成0.02 0.2 g/ml棗漿，提取完畢后合并固液分離得到的液體。
5、 根據(jù)權(quán)利要求1-4任一條所述的方法，其特征在于所述的固液分離 采用的方法為離心分離。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種提取棗中環(huán)磷酸腺苷的方法，該方法如下將棗粉碎，加水勻漿，將棗漿在微波功率為150-900W條件下微波處理10-450s，然后于20-100℃、超聲波功率100～250W條件下超聲波處理10-60min，再將處理后的棗漿固液分離，分離后的液體進(jìn)行濃縮，得到環(huán)磷酸腺苷濃縮制品。本發(fā)明的從棗中提取環(huán)磷酸腺苷的方法是利用微波的高能作用以及超聲波振動(dòng)的空穴作用，使得棗漿中的各點(diǎn)受到得作用一致，降低環(huán)磷酸腺苷與棗基體的結(jié)合力，縮短了提取時(shí)間，提高了提取率。提取過(guò)程中，采用水為提取劑，沒(méi)有添加任何有害的化學(xué)試劑進(jìn)行輔助提取，不會(huì)造成環(huán)境污染，而且提取工藝簡(jiǎn)單，提取率高，適于工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07H19/00GK101643491SQ20091006607
公開(kāi)日2010年2月10日 申請(qǐng)日期2009年9月7日 優(yōu)先權(quán)日2009年9月7日
發(fā)明者盧國(guó)杰, 潘治利, 娜 王, 勇 石, 石聚彬, 石聚領(lǐng), 艾志錄, 馬靜一 申請(qǐng)人:河南農(nóng)業(yè)大學(xué);好想你棗業(yè)股份有限公司