專利名稱：抗腫瘤環(huán)五肽化合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一類具有藥用活性的肽類化合物，特別涉及一類具有抗腫瘤 活性的環(huán)五肽化合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
環(huán)肽是一類結(jié)構(gòu)比較特殊的肽類化合物，按成環(huán)的特點(diǎn)，分為環(huán)肽和雜 環(huán)肽兩大類。這些化合物大多具有良好的生理和藥理活性，其中在抗腫瘤方 面，表現(xiàn)得尤為突出。臨床應(yīng)用的巻曲霉素和環(huán)孢素是發(fā)酵得到的環(huán)肽類藥
物， 一些抗腫瘤環(huán)肽如Cilengitide已進(jìn)入臨床二期。與鏈肽相似，隨著氨 基酸排列的順序的不同，環(huán)肽的結(jié)構(gòu)不同，性質(zhì)不同，活性也不同。
由于環(huán)肽結(jié)構(gòu)中，沒(méi)有確切的碳端和氮端，在體內(nèi)不易降解，有較長(zhǎng)的 半衰期，表現(xiàn)出良好的酶穩(wěn)定性，所以研究具有藥用活性環(huán)肽化合物是目前 發(fā)現(xiàn)新藥的一種新的重要途徑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一類抗腫瘤環(huán)五肽化合物。 本發(fā)明的另一目的是提供該抗腫瘤環(huán)五肽化合物的制備方法。
本發(fā)明所述的抗腫瘤環(huán)五肽化合物，由五個(gè)氨基酸彼此之間以肽鍵連接 成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，所述五個(gè)氨基酸選自N-取代氨基酸、芳基氨基酸、脂肪基氨基 酸、取代脂肪基氨基酸；且五個(gè)氨基酸相互獨(dú)立，并非完全相同，按隨機(jī)順 序排列。
本發(fā)明所述的抗腫瘤環(huán)五肽化合物，所述五個(gè)氨基酸中，最多只含有一 個(gè)N-烷基化氨基酸，至少一個(gè)芳基氨基酸，其他為脂肪基氨基酸或官能團(tuán)取 代的脂肪基氨基酸或環(huán)狀氨基酸。所述五個(gè)氨基酸中的一個(gè)可以為D-型氨基其中，所述N-取代氨基酸的取代基包括但不限于氫、甲基、乙基、芐基、 羥基。
所述芳基氨基酸包括取代芳基氨基酸，
所述芳基選自苯基、聯(lián)苯基、萘基、吡啶基、喹啉基、噻吩基、吡咯基、 呋喃基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、吲哚基或苯并呋喃基等芳雜環(huán) 基；
所述取代芳基氨基酸的取代基選自鹵素、烷基、氨基、磺酰基、羥基、 烷氧基、糖基、苯氧基、二甲氨基乙氧基、二乙氨基乙氧基、二甲氨基丙氧 基或二乙氨基丙氧基，其中所述垸基選自6碳以下的垸基、環(huán)烷基、糖基、 二甲氨基乙基、二乙氨基乙基、吡咯基乙基或哌啶基乙基；
所述脂肪基氨基酸或官能團(tuán)取代的脂肪基氨基酸選自亮氨酸、異亮氨 酸、纈氨酸、丙氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、精氨酸、賴氨酸、甘 氨酸、絲氨酸或蘇氨酸等天然氨基酸或D-型非天然氨基酸；
所述環(huán)狀氨基酸選自脯氨酸、羥脯氨酸的一個(gè)。
作為本發(fā)明的優(yōu)選，所述芳基氨基酸中的芳基為4-烷氧基苯基或4-卣 代苯基；所述4-烷氧基中的垸基選自6碳以下不含官能團(tuán)的脂肪基或含有官 能團(tuán)的脂肪基以及糖苷 基；所述4-鹵代苯基中的鹵代基選自氟、氯、溴或碘。
本發(fā)明所述的抗腫瘤環(huán)五肽化合物，具有式(I )結(jié)構(gòu)，
Ar為芳基或取代芳基，
芳基包括苯基、聯(lián)苯基、萘基、吡啶基、喹啉基、噻吩基、吡咯基、呋
7喃基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、吲哚基或苯并呋喃基等芳雜環(huán)基； 取代芳基中的取代基包括鹵素、垸基、氨基、磺?；⒘u基、烷氧基、 糖苷基、苯氧基、二甲氨基乙氧基、二乙氨基乙氧基、二甲氨基丙氧基或二
Rt R4各自為獨(dú)立的異丙基、異丁基、甲基、氨基烷基、胍基烷基、羧 基垸基、氨甲酰烷基、羧甲基或羥基烷基等； R、 R'5各自為獨(dú)立氫、甲基或乙基等。
進(jìn)一步，式(I )結(jié)構(gòu)的環(huán)五肽化合物，所述Ar為4-烷氧基苯，其中 4-垸氧基苯中的垸基為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、節(jié)基、糖 基、二甲氨基乙基、二乙氨基乙基、二甲氨基丙基、二乙氨基丙基、(l-吡 咯基)乙基或(1-哌啶基)乙基等。
本發(fā)明所述的抗腫瘤環(huán)五肽化合物對(duì)多種腫瘤細(xì)胞，顯示出良好的活性。
本發(fā)明所述抗腫瘤環(huán)五肽化合物的制備采用液相合成方法實(shí)現(xiàn)的，其策 略為Boc保護(hù)氨基酸氮端的技術(shù)，合成路線為2+3的會(huì)聚式，肽鏈的增長(zhǎng)使 用HBTU或HATU或HCTU或PyB0P等作為縮合劑，其合成方法包括如下步驟 (1)三肽片段的合成<formula>formula see original document page 8</formula>(2) 二肽片段的合成:<formula>formula see original document page 9</formula>
本發(fā)明的有益效果
本發(fā)明所述的抗腫瘤環(huán)五肽化合物具有抗腫瘤活性，特別是針對(duì)結(jié)腸癌 細(xì)胞株HT-29、結(jié)腸癌細(xì)胞株HCT-15、結(jié)腸癌細(xì)胞株HCT-116、白血病細(xì) 胞株K562，肺癌細(xì)胞株A549、前列腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3 、乳腺癌細(xì)胞株 MDA-MB231、黑色素癌細(xì)胞株WM-115以及兩種胰腺癌細(xì)胞株S2-013和 AsPC-1更為突出。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合具體實(shí)施方式
對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。
實(shí)例1對(duì)氟苯丙-亮-亮-纈-亮環(huán)五肽的合成
1)亮-對(duì)氟苯丙甲酯的合成。將2mmolBoc-亮氨酸、2 mmol HBTU、 4 mmol DIPEA加入到盛有30 mL THF禾tU mL DMF溶液的配有氯化鈣干燥管 的100 mL單口瓶中攪拌反應(yīng)30min.，然后再加入1 mmol對(duì)氟苯丙氨酸甲 酯，于室溫下攪拌反應(yīng)過(guò)夜。反應(yīng)液濃縮除去大部分溶劑，殘余物用乙酸乙酯溶解后，分別用20 mL水、20 mL 5 % NaHC03、 20 mL飽和NaCl各洗2 次，有機(jī)相用無(wú)水Na2S04干燥過(guò)夜。過(guò)濾，濃縮，重結(jié)晶得類白色固體產(chǎn) 物，產(chǎn)率為92%。然后將此溶解到30mL二氯甲烷和20mL三氟醋酸中，于 室溫下攪拌反應(yīng)45 min。減壓除去DCM和TFA，即得產(chǎn)物亮-對(duì)氟苯丙甲酯 粗產(chǎn)品。
2) Boc-亮-亮-纈三肽的合成。在盛有30 mL THF、4 mL DMF、2 mmol Boc-亮氨酸和2 mmol HBTU以及4 mmol DIPEA的100 mL單口瓶中，于攪拌條 件下加入1 mmol的纈氨酸甲酯鹽酸鹽，室溫反應(yīng)過(guò)夜。反應(yīng)液濃縮，在所 得殘余物中加入50mL水，用40mL乙酸乙酯萃取5次，合并有機(jī)相，分別 用水、5%NaHC03、 2 % HC1、飽和NaCl各洗2次，無(wú)水Na2S04干燥， 過(guò)濾，濃縮。在剩余物中加入30mLDCM和20mLTFA，室溫下攪拌反應(yīng) 45min。減壓除去DCM和TFA，獲得亮-纈甲酯三氟醋酸鹽。將此鹽溶于30 mL THF和4 mL DMF，此后加入2 mmol Boc-亮氨酸和2 mmol HBTU以及4 mmol的DIPEA，攪拌過(guò)夜。反應(yīng)液濃縮，在所得殘余物中加入50 mL水， 用乙酸乙酯萃取，有機(jī)相分別用水、5°/。NaHC03、 2 % HC1飽和NaCl各洗 2次，無(wú)水Na2S04干燥過(guò)夜。過(guò)濾、濃縮，產(chǎn)物經(jīng)重結(jié)晶純化，得固體產(chǎn) 物，產(chǎn)率83%。用17.5mLTHF溶解所得固體，并轉(zhuǎn)移到盛有5 mmol LiOH 與2.5mL水形成的溶液的燒瓶中，室溫下攪拌反應(yīng)6h。減壓除去THF，加 入20mL水，用2Q/。鹽酸調(diào)節(jié)溶液的pH至4.5-6，用乙酸乙酯萃取，合并有 機(jī)相，無(wú)水Na2S04干燥過(guò)夜。過(guò)濾，濃縮，即得Boc-亮-亮-纈三肽。
3) 對(duì)氟苯丙-亮-亮-纈-亮五肽的合成。在盛有1.1 mmol Boc-亮-亮-纈三肽的30 mL THF和6 mL DMF溶液中，先加入2. 5 mmol HATU以及5 mmol 的DIPEA，攪拌溶解后繼續(xù)反應(yīng)10min，再加入lmmol亮-對(duì)氟苯丙甲酯，于 室溫條件下攪拌反應(yīng)過(guò)夜，用TLC檢測(cè)反應(yīng)的進(jìn)展。減壓濃縮，加水150mL， 用乙酸乙酯萃取五次，合并有機(jī)相。依次用水、5%NaHC03、 2%鹽酸和飽和食 鹽水各洗兩次，無(wú)水硫酸鈉干燥。抽濾，減壓除去溶劑，重結(jié)晶得Boc-亮-亮-纈-亮-對(duì)氟苯丙甲酯，產(chǎn)率88%。用30mLTHF溶解所得固體，并轉(zhuǎn)移到盛有5 mmol LiOH與4 mL水形成的溶液的燒瓶中，室溫下攪拌反應(yīng)8 h。用 TLC跟蹤反應(yīng)，待反應(yīng)結(jié)束后減壓除去THF。在殘余物中加水30mL，用稀 鹽酸調(diào)pH-3 4， 80mL乙酸乙酯萃取四次，合并有機(jī)相，無(wú)水硫酸鈉干燥 過(guò)夜。減壓濃縮獲得Boc-亮-亮-纈-亮-對(duì)氟苯丙五肽后，溶解到30mL 二氯甲 烷和30mL三氟乙酸的溶液中，常溫?cái)嚢璺磻?yīng)2h。減壓除去二氯甲烷和三氟 乙酸，即得對(duì)氟苯丙-亮-亮-纈-亮五肽。
4)對(duì)氟苯丙-亮-亮-纈-亮環(huán)五肽的合成0.5 mmol對(duì)氟苯丙-亮-亮-纈-亮加入到單口瓶中，溶解于30mLDMF和270mL二氯甲垸形成的溶液。攪 拌溶解之后，加入2.5 mmol PyBOP、 0.5 mmol HATU、 6mmol二異丙基乙 胺，常溫?cái)嚢璺磻?yīng)36h。減壓濃縮除去溶劑，在殘余液中加入50 mL水，用 100 mL乙酸乙酯萃取五次，合并有機(jī)相。依次用水、5% NaHC03、 2%鹽酸、 水和飽和食鹽水各洗兩次，無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜。抽濾，濃縮除去溶劑。經(jīng) 硅膠柱層析純化，得到對(duì)氟苯丙-亮-亮-纈-亮環(huán)五肽，產(chǎn)率64%。 1HNMR (500MHz， CDC13) S 0.83 (d， J= 7,0Hz， 3H), 0.86 (d， J=6.5Hz， 3H)， 0.89 (d， J=7.0Hz， 3H), 0.96 (d， J=7.5 Hz, 9H),0.99 (d, J=7.0 Hz， 6H), 1.37-1.43 (m， 1H), 1.48-1.50 (m， 2H)， 1.56-1.59 (m, 2H), 1.70-1.72 (m， 2H)， 1.84-2.0l(m, 2H), 2.36 (m， 1H), 3.08 (dd, J=13.0Hz， 5.5Hz， 1H), 3.22 (t, J=7.5Hz, 1H)， 3.66 (brs， 1H)， 4.03 (t, J=7.5Hz， 1H), 4.35 (dd， J=10.5Hz， 6Hz， 1H), 4.42 (t, J=8.0Hz， 1H)， 4.78 (dd, J=9.0Hz, 3.0Hz， 1H); 6.64 (brs, 1H), 6.84 (brs， 1H), 7.02 (d， J=7Hz， 2H)， 7.17 (d, J-7Hz， 2H), 7.48 (brs, 1H)， 7.53 (brs， 1H); HRMS (ESI， M+l) C32H50FN5O5,計(jì)算值為603.3796，實(shí)測(cè)值為603.3794。
實(shí)例2亮-亮-纈-亮-4-甲氧基苯丙環(huán)五肽的合成
1)亮-4-甲氧基苯丙甲酯的合成。將2 mmol Boc-亮氨酸、2 mmol HBTU、 4 mmol DIPEA加入到盛有30 mL THF和4 mL DMF溶液的配有氯化f!干燥 管的100mL單口瓶中攪拌反應(yīng)30min.，然后再加入1 mmol4-甲氧基苯丙氨 酸甲酯，于室溫下攪拌反應(yīng)過(guò)夜。反應(yīng)液濃縮除去大部分溶劑，殘余物用乙 酸乙酯溶解后，分別用20mL水、20mL5%NaHCO3、 20 mL飽和NaCl各 洗2次，有機(jī)相用無(wú)水Na2S04干燥過(guò)夜。過(guò)濾，濃縮，重結(jié)晶得類白色固
ii體產(chǎn)物，產(chǎn)率為85%。然后將此溶解到30mL二氯甲垸和20mL三氟醋酸中， 于室溫下攪拌反應(yīng)45 min。減壓除去DCM和TFA，即得產(chǎn)物亮-4-甲氧基苯 丙甲酯粗產(chǎn)品。
2) Boc-亮-亮-纈三肽的合成。在盛有30mLTHF、 4mLDMF、 2 mmol Boc-亮氨酸和2 mmol HBTU以及4 mmol DIPEA的100 mL單口瓶中，于攪 拌條件下加入1 mmol的纈氨酸甲酯鹽酸鹽，室溫反應(yīng)過(guò)夜。反應(yīng)液濃縮， 在所得殘余物中加入50mL水，用40mL乙酸乙酯萃取5次，合并有機(jī)相， 分別用水、5%NaHC03、 2 % HC1、飽和NaCl各洗2次，無(wú)水Na2S04干 燥，過(guò)濾，濃縮。在剩余物中加入30mLDCM和20mLTFA，室溫下攪拌 反應(yīng)45min。減壓除去DCM和TFA，獲得亮-纈甲酯三氟醋酸鹽。將此鹽溶 于30 mL THF和4 mL DMF，此后加入2 mmol Boc-亮氨酸和2 mmol HBTU 以及4 mmol的DIPEA，攪拌過(guò)夜。反應(yīng)液濃縮，在所得殘余物中加入50 mL 水，用乙酸乙酯萃取，有機(jī)相分別用水、5%NaHC03、 2。/。HCl和飽和NaCl 各洗2次，無(wú)水Na2S(X干燥過(guò)夜。過(guò)濾、濃縮，產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析純化，得 固體產(chǎn)物，產(chǎn)率83%。用17.5mLTHF溶解所得固體，并轉(zhuǎn)移到盛有5 mmol LiOH與2.5 mL水形成的溶液的燒瓶中，室溫下攪拌反應(yīng)6 h。減壓除去THF， 加入20mL水，用2n/。鹽酸調(diào)節(jié)溶液的pH至4.5-6，用乙酸乙酯萃取，合并 有機(jī)相，無(wú)水Na2S04干燥過(guò)夜。過(guò)濾，濃縮，即得Boc-亮-亮-纈三肽。
3) 亮-亮-纈-亮-4-甲氧基苯丙五肽的合成。在盛有U mmolBoc-亮-亮-纈三肽的30 mL THF和6 mL DMF溶液中，先加入2.5 mmol HATU以及5 mmol的DIPEA，攪拌溶解后繼續(xù)反應(yīng)10min，再加入lmmol亮-4-甲氧基苯 丙甲酯，于室溫條件下攪拌反應(yīng)過(guò)夜，用TLC檢測(cè)反應(yīng)的進(jìn)展。減壓濃縮， 加水150mL，用乙酸乙酯萃取五次，合并有機(jī)相。依次用水、5%NaHC03、 2%鹽酸和飽和食鹽水各洗兩次，無(wú)水硫酸鈉干燥。抽濾，減壓除去溶劑，重 結(jié)晶得Boc-亮-亮-纈-亮-4-甲氧基苯丙甲酯五肽，產(chǎn)率88%。用30mLTHF 溶解所得固體，并轉(zhuǎn)移到盛有5 mmol LiOH與4 mL水形成的溶液的燒瓶中， 室溫下攪拌反應(yīng)8 h。用TLC跟蹤反應(yīng)，待反應(yīng)結(jié)束后減壓除去THF。在殘
12余物中加水30mL，用稀鹽酸調(diào)pH-3 4， 80 mL乙酸乙酯萃取四次，合并 有機(jī)相，無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜。減壓濃縮獲得Boc-脯-亮-纈-亮-苯丙五肽后， 溶解到30mL 二氯甲烷和30mL三氟乙酸的溶液中，常溫?cái)嚢璺磻?yīng)2 h。減 壓除去二氯甲烷和三氟乙酸，即得亮-亮_纈-亮-4-甲氧基苯丙五肽。
4)亮-亮-纈-亮-對(duì)甲氧苯丙環(huán)五肽的合成。將0.5 mmol亮-亮-纈-亮-4-甲氧基苯丙五肽加入到單口瓶中，溶解于30mLDMF和270mL二氯甲烷形 成的溶液。攪拌溶解之后，加入2.5 mmol PyBOP、 0.5 mmol HATU、 6 mmol 二異丙基乙胺，常溫?cái)嚢璺磻?yīng)36h。減壓濃縮除去溶劑，在殘余液中加入50 mL水，用100 mL乙酸乙酯萃取五次，合并有機(jī)相。依次用水、5%NaHC03、 2%鹽酸、水和飽和食鹽水各洗兩次，無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜。抽濾，濃縮除去 溶劑。經(jīng)硅膠柱層析純化，得到亮-亮-纈-亮一4-甲氧基苯丙環(huán)五肽，產(chǎn)率 67%。 1H醒R (500MHz, CDC13) S 0.78 (d， J= 7.0Hz， 3H)， 0.83 (d， J=6.5Hz， 3H), 0.88-0.96 (m， 15H)， 0.99 (d, J-7.0 Hz, 3H)， 1.14 (m, 1H)， 1.38-1.41 (m, 2H): 1.43-1.50 (m， 2H), 1.62-1.65 (m， 2H), 1.78-1.90(m, 2H), 2.02 (m, 1H)， 3.38 (m, 1H), 3.46 (m, 1H)， 3.66 (brs, 1H)， 3.76(s, 3H)， 4.20 (m, 1H), 4.43(m, 1H), 4.51-4.0 (m， 2H), 4.69 (m 1H); 6.62 (brs， 1H)， 6.81 (d， J=10Hz, 2H)， 7.14 (d， J=10Hz， 2H)， 7.28 (brs， 2H)， 7.73 (brs， 1H); HRMS (ESI， M+l) C33H53N506， 計(jì)算值為615.3996，實(shí)測(cè)值為615.3989。
實(shí)例3 抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)
基于四氮唑鹽(MTT)法進(jìn)行測(cè)試。待測(cè)樣品環(huán)五肽分別配制成IO、 5、 1、 0.5、 0.1pmol/L等不同濃度的DMSO溶液。將選擇的腫瘤細(xì)胞懸浮于10% 新鮮的胎牛血清的PRMI培養(yǎng)液中，胰酶消化，并細(xì)胞計(jì)數(shù)，將細(xì)胞濃度定 容到5X104cells/mL， 96孔板中每孔加入200 pL細(xì)胞，然后在每孔中加入不 同濃度的藥液10nL，在37'C、 100%相對(duì)濕度和含032與空氣比例為5: 95的 混合氣氛的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h。在每孔中加入10nL5mg/mL的MTT溶液后， 接著在上述條件下繼續(xù)培養(yǎng)4h。每一孔中加入0.04NHC1的異丙醇溶液，用 酶標(biāo)儀測(cè)定在570nm處與活細(xì)胞數(shù)相關(guān)的溶液吸光率，測(cè)定細(xì)胞增殖情況。
13每組實(shí)驗(yàn)均有備份，報(bào)道數(shù)據(jù)為其平均值。0.0325pmol/mL的條件下亮-亮-纈-亮-4-甲氧基苯丙環(huán)五肽對(duì)腸癌細(xì)胞株HT-29、結(jié)腸癌細(xì)胞株HCT-15、結(jié) 腸癌細(xì)胞株HCT-116、白血病細(xì)胞株K562，肺癌細(xì)胞株A549、乳腺癌細(xì)胞株 MDA-MB231的抑制率超過(guò)95%。顯然，本發(fā)明的上述實(shí)施例僅僅是為清楚地說(shuō)明本發(fā)明所作的舉例，而 并非是對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方式的限定。對(duì)于所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在 上述說(shuō)明的基礎(chǔ)上還可以做出其它不同形式的變化或變動(dòng)。這里無(wú)需也無(wú)法 對(duì)所有的實(shí)施方式予以窮舉。而這些屬于本發(fā)明的精神所引伸出的顯而易見(jiàn) 的變化或變動(dòng)仍處于本發(fā)明的保護(hù)范圍之中。
權(quán)利要求
1、抗腫瘤環(huán)五肽化合物，其特征在于，該化合物由五個(gè)氨基酸彼此之間以肽鍵連接成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，所述五個(gè)氨基酸選自N-取代氨基酸、芳基氨基酸、脂肪基氨基酸以及官能團(tuán)取代的脂肪基氨基酸；且五個(gè)氨基酸相互獨(dú)立，并非完全相同，按隨機(jī)順序排列。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗腫瘤環(huán)五肽化合物，其特征在于， 所述五個(gè)氨基酸中，只含有一個(gè)N-烷基化氨基酸，至少一個(gè)芳基氨基酸，其他為脂肪基氨基酸或官能團(tuán)取代的脂肪基氨基酸或環(huán)狀氨基酸。
3、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的抗腫瘤環(huán)五肽化合物，其特征在于， 所述五個(gè)氨基酸中的一個(gè)為D-型氨基酸。
4、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗腫瘤環(huán)五肽化合物，其特征在于，所述N-取代氨基酸的取代基包括但不限于氫、甲基、乙基、芐基、羥基。
5、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的抗腫瘤環(huán)五肽化合物，其特征在于， 所述芳基氨基酸包括取代芳基氨基酸；所述芳基選自苯基、聯(lián)苯基、萘基、吡啶基、喹啉基、噻吩基、吡咯基、 呋喃基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、B引哚基或苯并呋喃基等芳雜環(huán) 基；所述取代芳基氨基酸的取代基選自鹵素、烷基、氨基、磺?；?、羥基、 烷氧基、糖基、苯氧基、二甲氨基乙氧基、二乙氨基乙氧基、二甲氨基丙氧 基或二乙氨基丙氧基，其中所述烷基選自6碳以下的垸基、環(huán)烷基、糖基、 二甲氨基乙基、二乙氨基乙基、吡咯基乙基或哌啶基乙基。
6、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗腫瘤環(huán)五肽化合物，其特征在于，所述脂 肪基氨基酸或官能團(tuán)取代的脂肪基氨基酸選自亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、 丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、精氨酸、賴氨酸、甘氨酸、絲氨酸或蘇氨酸等 天然氨基酸或D-型非天然氨基酸。
7、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的抗腫瘤環(huán)五肽化合物抗腫瘤環(huán)五肽化合物，其特征在于，所述環(huán)狀氨基酸選自脯氨酸、羥脯氨酸的一種。
8、 根據(jù)權(quán)利要求5所述的抗腫瘤環(huán)五肽化合物，其特征在于，所述取 代芳基氨基酸中的芳基為4-烷氧基苯基或4-鹵代苯基；所述4-烷氧基中的 烷基選自6碳以下不含官能團(tuán)的脂肪基或含有官能團(tuán)的脂肪基以及糖苷基； 所述4-鹵代苯基中的鹵代基選自氟、氯、溴或碘。
9、 根據(jù)權(quán)利要求5所述的抗腫瘤環(huán)五肽化合物，其特征在于，具有式 (I )結(jié)構(gòu)，<formula>formula see original document page 3</formula>其中Ar為芳基或取代芳基，芳基包括苯基、聯(lián)苯基、萘基、吡啶基、喹啉基、噻吩基、吡咯基、呋 喃基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、B引哚基或苯并呋喃基等芳雜環(huán)基；取代芳基中的取代基包括鹵素、烷基、氨基、磺?；?、羥基、烷氧基、 糖苷基、苯氧基、二甲氨基乙氧基、二乙氨基乙氧基、二甲氨基丙氧基或二 乙氨基丙氧基；R, R^各自為獨(dú)立的異丙基、異丁基、甲基、氨基烷基、胍基烷基、羧 基烷基、氨甲酰烷基、羧甲基或羥基烷基； R'i R'5各自為獨(dú)立氫、甲基或乙基。
10、根據(jù)權(quán)利要求9所述的環(huán)五肽化合物，其特征在于，所述Ar為4-垸氧基苯，其中4-烷氧基苯中的烷基為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、 苯基、芐基、糖基、二甲氨基乙基、二乙氨基乙基、二甲氨基丙基、二乙氨基丙基、a-吡咯基)乙基或(l-哌啶基)乙基等。
11、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗腫瘤環(huán)五肽化合物，其特征在于，表現(xiàn)出 良好的抗腫瘤活性，腫瘤細(xì)胞株包括結(jié)腸癌細(xì)胞株、白血病細(xì)胞株、肺癌細(xì) 胞株、前列腺癌細(xì)胞株、乳腺癌細(xì)胞株、黑色素癌細(xì)胞株和胰腺癌細(xì)胞株。
12、 一種根據(jù)權(quán)利要求1 11所述的抗腫瘤環(huán)五肽化合物的制備方法， 其特征在于，包括以下步驟(1)三肽片段的合成<formula>formula see original document page 0</formula>(3)五肽的合成和環(huán)合反應(yīng)<formula>formula see original document page 0</formula>其中Ar為芳基或取代芳基，芳基包括苯基、聯(lián)苯基、萘基、吡啶基、喹啉基、噻吩基、吡咯基、呋喃基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、吲哚基或苯并呋喃基等芳雜環(huán)基;取代芳基中的取代基包括鹵素、烷基、氨基、磺?；?、羥基、烷氧基、 糖苷基、苯氧基、二甲氨基乙氧基、二乙氨基乙氧基、二甲氨基丙氧基或二乙氨基丙氧基等；R, R4各自為獨(dú)立的異丙基、異丁基、甲基、氨基垸基、胍基烷基、羧 基垸基、氨甲酰烷基、羧甲基或羥基烷基等；R、 R's各自為獨(dú)立氫、甲基或乙基等。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一類抗腫瘤環(huán)五肽化合物，該抗腫瘤環(huán)五肽化合物由五個(gè)氨基酸彼此之間以肽鍵連接成環(huán)狀構(gòu)成，所述五個(gè)氨基酸選自N-取代氨基酸、芳香基氨基酸、脂肪氨基酸和官能團(tuán)取代的脂肪氨基酸，且五個(gè)氨基酸相互獨(dú)立，并非完全相同，按隨機(jī)順序排列。本發(fā)明所述的環(huán)五肽化合物具有抗腫瘤活性，特別是針對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞株HT-29、結(jié)腸癌細(xì)胞株HCT-15、結(jié)腸癌細(xì)胞株HCT-116、白血病細(xì)胞株K562，肺癌細(xì)胞株A549、前列腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3、乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB231、黑色素癌細(xì)胞株WM-115以及兩種胰腺癌細(xì)胞株S2-013和AsPC-1更為突出。
文檔編號(hào)C07K7/64GK101659694SQ200910074288
公開(kāi)日2010年3月3日 申請(qǐng)日期2009年5月6日 優(yōu)先權(quán)日2009年5月6日
發(fā)明者劉守信, 明常鑫, 朱亞超, 甄小麗, 趙翠然, 韓建榮 申請(qǐng)人:河北科技大學(xué)