專利名稱：：一種提取高純度齊墩果酸的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及齊墩果酸，特別是齊墩果酸的提取方法。
背景技術(shù)：
：齊墩果酸是天然植物化學(xué)成分，毒性很低，具有多種生物活性——抗病毒、消炎、增強免疫和抑制免疫(免疫雙向調(diào)節(jié)作用)、抑制血小板凝集、降血脂、降糖、保肝、護腎、抗艾滋病毒等。惡性腫瘤是對人類生命威脅最嚴(yán)重的疾病，損害人類健康，研究表明，齊墩果酸對惡性腫瘤化療造成的免疫功能下降的恢復(fù)和對抗結(jié)核藥物的肝損害的保護意義重大。降血脂、降糖、抗病毒，特別是抗艾滋病病毒活性的發(fā)現(xiàn)，都是非?？上驳拿珙^。由于齊墩果酸結(jié)構(gòu)復(fù)雜，目前仍難以用合成法獲得，從植物中提取分離為獲取唯一途徑。提取分離一般采用物理和化學(xué)手段，有實驗室方法和生產(chǎn)工藝之別。目前大多從橡木、青葉膽、女貞子、雪膽等植物中進(jìn)行提取。齊墩果酸是一種齊墩果烷型五環(huán)三萜類化合物，以游離形式和與糖結(jié)合形式廣泛于多種植物中，人們對調(diào)查了的35種植物樣品用薄層掃描法測定了齊墩果酸的含量，分析結(jié)果表明以橡木根皮含量最高，達(dá)8.3%。橡木為五加科橡木屬草本植物，該植物喜溫暖濕潤，野生于山坡灌木叢、稀疏的次生林中及林緣，陽生及半陽生均有，垂直分布可達(dá)海拔2600m。目前國內(nèi)實驗研究的齊墩果酸提取工藝有以下三種(1)醇提一酸堿處理法；該方法在制得齊墩果酸過程中，要兩次或兩次以上使用醇，在加熱過程中，醇損耗量，成本增高；(2)酸醇提取一堿、氯仿處理法；該方法在制得齊墩果酸過程中，要使用到有毒的有機溶劑氯仿，對環(huán)境污染，操作不易；(3)發(fā)酵一酸堿處理法；該方法在制得齊墩果酸過程中，藥材要發(fā)酵處理，藥材易霉變長毛，氣味酸臭難；發(fā)酵后變?yōu)楹隣畹乃幉男枰L時間干燥，方可進(jìn)行提取，生產(chǎn)周期長，成本增高，此外，過多雜質(zhì)對后續(xù)純化工序造成壓力。此外，水解濃度、水解時間、提取次數(shù)、ra值等都可能影響提取齊墩果酸的效果。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是一種提取高純度齊墩果酸的方法，該方法能克服上述現(xiàn)有提取方法的缺陷，提取的齊墩果酸含量超過98%。本發(fā)明解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是—種提取高純度齊墩果酸的方法，它包括以下步驟步驟(1)、將橡木皮切碎，加入酸性溶液，水解48小時，水洗壓濾至中性；步驟(2)、調(diào)pH值至810，堿解48小時，水洗壓濾至中性，烘干；步驟(3)、在95%乙醇浸泡812小時，過濾；步驟(4)、調(diào)pH值至l3，靜置812小時，抽濾；步驟(5)、水洗至中性，干燥，成品?！N提取高純度齊墩果酸的方法，它包括以下步驟步驟(1)、將橡木皮切碎，加入橡木皮重量610倍量的38%重量濃度的硫酸溶液，在蒸氣壓力13kg/cm3下水解48小時，水洗壓濾至中性；步驟(2)、調(diào)pH值至810，在蒸氣壓力13kg/cm3下堿解48小時，水洗壓濾至中性，烘干；步驟(3)、在橡木皮重量10倍量95%乙醇浸泡812小時，過濾；步驟(4)、調(diào)pH值至13，靜置812小時，抽濾；步驟(5)、蒸餾水抽洗至中性，干燥，成品。—種提取高純度齊墩果酸的方法，它包括以下步驟步驟(1)、將橡木皮切碎，加入橡木皮重量8倍量的5%重量濃度的硫酸溶液，在蒸氣壓力2kg/cm3下水解8小時，水洗壓濾至中性；步驟(2)、調(diào)pH值至9，在蒸氣壓力2kg/cn^下堿解8小時，水洗壓濾至中性，干燥；步驟(3)、在橡木皮重量10倍量95%乙醇浸泡12小時，過濾；步驟(4)、加鹽酸調(diào)pH值至l，靜置12小時，抽濾；步驟(5)、蒸餾水抽洗至中性，干燥，成品。本發(fā)明方法可得到齊墩果酸含量達(dá)到98%以上的成品，且流程簡單，生產(chǎn)周期短，易于操作，常規(guī)設(shè)備即能生產(chǎn)，生產(chǎn)過程中輔料使用量小，生產(chǎn)成本低。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明方法乙醇使用量少，整個生產(chǎn)過程中乙醇未加熱，損耗低；在水解和堿解過程中采用水洗壓濾至中性的方法，能快速較多的去除雜質(zhì)，產(chǎn)品一次收得率上有很大提高，且方便酸液和堿液的回收和重復(fù)利用，無毒，對環(huán)境污染小。具體實施例方式本發(fā)明提取高純度齊墩果酸的方法，它包括以下步驟步驟(1)、將橡木皮切碎，加入橡木皮重量610倍量的38%重量濃度的硫酸溶液，在蒸氣壓力13kg/cm3下水解48小時，水洗壓濾至中性；正交實驗法設(shè)計本步驟(水解)條件以水解濃度、水解用量、水解時間、蒸氣壓力4個因素，每因素選擇3個水平，設(shè)計正交實驗，見下表<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>水解物水洗至中性后干燥得酸渣，測得收率和齊墩果酸含〗正交實驗法設(shè)計水解條件結(jié)果與分析每次實驗取同批藥材500克，以齊墩果酸含量和齊墩果酸獲得量(齊墩果酸含量X收率X生藥量)為指標(biāo)，正交實驗結(jié)果見下表編號ABCD含量(°/)收率(％)齊墩果酸量(g)111111.6154.444.38212223.8461.2811.77313332.8466.569.45421233.5567.7512.0322313.9562.4512.33623122.7862.348.67731323.0865.2810.05832132,1563.956.87933211.3358.413.88Kl8.298.246.546.89K210.289.948.929.70K36.566.959.878.54i:y=25.14&2.762.752.182.30—K23.433.312.973.23yc:t=2.79K32.192.323.292.85R1.241.001.110.94經(jīng)分析結(jié)果表明，A因素K2>Kl>K3;B因素K2>Kl>K3;C因素K3>K2>Kl;D因素K2>K3>Kl;因素A、B、C、D對齊墩果酸提取含量的影響有顯著性，其中酸水濃度對于提取含量影響最大。確定最佳水解條件為生藥量8倍量的5%硫酸溶液，蒸氣壓力2kg/cm3水解8h。步驟(2)、調(diào)pH值至810，在蒸氣壓力13kg/cm3堿解48小時，水洗壓濾至中性，烘干；正交實驗法設(shè)計本步驟(堿化)條件以ra值、堿化時間、蒸氣壓力3個因素，每個因素選擇3個水平設(shè)計正交試驗，見下表水^\素平^\APH值B堿化時間D蒸氣壓力184hlkg/cm3296h2kg/cm33108h3kg/cm35堿化物水洗至中性后干燥得堿渣，以齊墩果酸含量齊墩果酸獲得量為指標(biāo)，進(jìn)行分析。試驗結(jié)果見下表<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>綜合分析上述數(shù)據(jù)，A因素K2>K3>Kl;B因素K3>K2>Kl;C因素K2>K3>Ki;因素A、B、c對齊墩果酸堿水提取含量的影響有顯著性，其中ra值影響堿水提取含量最大。結(jié)合生產(chǎn)實際，確定最佳堿化條件為調(diào)值為9，蒸氣壓力保持2kg/cm3堿化8h。步驟(3)、在橡木皮重量610倍量95%乙醇浸泡812小時，過濾；步驟(4)、調(diào)pH值至13，靜置812小時，抽濾；正交實驗設(shè)計步驟(3)、(4)(酸化結(jié)晶)條件以溶劑用量、溶解時間、ra值3個因素，每個因素選擇3個水平設(shè)計正交試驗，見下表<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>以齊墩果酸含量齊墩果酸獲得量為指標(biāo)，進(jìn)行分析。試驗結(jié)果見下表<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>綜合比較分析數(shù)據(jù)，A因素K3>K2>Kl;B因素K3>K2>Kl;C因素Kl>K2>K3;因素A、B、C對齊墩果酸乙醇浸泡的收率影響有顯著性，其中值影響乙醇浸泡收率最大。從收率和生產(chǎn)實際考慮，確定最佳酸化結(jié)晶條件為10倍量95%乙醇浸泡12h，調(diào)ra值1結(jié)晶。水洗至中性，微波干燥即得。步驟(5)、蒸餾水抽洗至中性，微波干燥，成品。采用上述方法均可得到齊墩果酸含量達(dá)到98%以上的成品，但通過以上實驗對比，本發(fā)明最佳實施例包括以下步驟步驟(1)、將橡木皮切碎，加入橡木皮重量8倍量的5%重量濃度的硫酸溶液，在蒸氣壓力2kg/cm3水解8小時，水洗壓濾至中性；步驟(2)、調(diào)pH值至9，在蒸氣壓力2kg/cm3堿解8小時，水洗壓濾至中性，干燥；步驟(3)、在橡木皮重量10倍量95%乙醇浸泡12小時，過濾；步驟(4)、加鹽酸調(diào)pH值至l，靜置12小時，抽濾；步驟(5)、蒸餾水抽洗至中性，微波干燥，成品。本實施例的重復(fù)性實驗按上述工藝，重復(fù)做3次實驗。每次使用5000克齊墩果酸含量為2.4%的橡木粗粉，得到三批產(chǎn)品，滴定法測齊墩果酸的含量和綜合得率，結(jié)果如下(含量均以干品計算)；<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>應(yīng)說明，所述實施方案僅僅只是本發(fā)明較佳和最佳的實施方案，實際上，本專業(yè)領(lǐng)域技術(shù)人員均應(yīng)該想到，在以下技術(shù)條件下也可得到齊墩果酸含量達(dá)到98%以上的成品，它包括以下步驟步驟(1)、將橡木皮切碎，加入酸性溶液，水解48小時，水洗壓濾至中性；步驟(2)、調(diào)pH值至810，堿解48小時，水洗壓濾至中性，烘干；步驟(3)、在95%乙醇浸泡812小時，過濾；步驟(4)、調(diào)pH值至l3，靜置812小時，抽濾；步驟(5)、水洗至中性，干燥，成品。權(quán)利要求一種提取高純度齊墩果酸的方法，其特征在于它包括以下步驟步驟(1)、將楤木皮切碎，加入酸性溶液，水解4～8小時，水洗壓濾至中性；步驟(2)、調(diào)pH值至8～10，堿解4～8小時，水洗壓濾至中性，烘干；步驟(3)、在95％乙醇浸泡8～12小時，過濾；步驟(4)、調(diào)pH值至1～3，靜置8～12小時，抽濾；步驟(5)、水洗至中性，干燥，成品。2.—種提取高純度齊墩果酸的方法，其特征在于它包括以下步驟步驟(1)、將橡木皮切碎，加入橡木皮重量610倍量的38%重量濃度的硫酸溶液，在蒸氣壓力13kg/cm3下水解48小時，水洗壓濾至中性；步驟(2)、調(diào)pH值至810，在蒸氣壓力13kg/cm3下堿解48小時，水洗壓濾至中性，烘干；步驟(3)、在橡木皮重量610倍量95%乙醇浸泡812小時，過濾；步驟(4)、調(diào)pH值至13，靜置812小時，抽濾；步驟(5)、蒸餾水抽洗至中性，干燥，成品。3.—種提取高純度齊墩果酸的方法，其特征在于它包括以下步驟步驟(1)、將橡木皮切碎，加入橡木皮重量8倍量的5%重量濃度的硫酸溶液，在蒸氣壓力2kg/cm3下水解8小時，水洗壓濾至中性；驟(2)、調(diào)pH值至9，在蒸氣壓力2kg/cm3下堿解8小時，水洗壓濾至中性，干燥；驟(3)、在橡木皮重量10倍量95%乙醇浸泡12小時，過濾；驟(4)、加鹽酸調(diào)pH值至l，靜置12小時，抽濾；驟(5)、蒸餾水抽洗至中性，干燥，成品。步步步步全文摘要本發(fā)明涉及一種提取高純度齊墩果酸的方法，它包括以下步驟步驟(1)將楤木皮切碎，加入酸性溶液，水解4～8小時，水洗壓濾至中性；步驟(2)調(diào)pH值至8～10，堿解4～8小時，水洗壓濾至中性，烘干；步驟(3)在95％乙醇浸泡8～12小時，過濾；步驟(4)調(diào)pH值至1～3，靜置8～12小時，抽濾；步驟(5)水洗至中性，干燥，成品。本發(fā)明方法可得到齊墩果酸含量達(dá)到98％以上的成品，且流程簡單，生產(chǎn)周期短，易于操作，常規(guī)設(shè)備即能生產(chǎn)，生產(chǎn)過程中輔料使用量小，生產(chǎn)成本低。文檔編號C07J63/00GK101735301SQ20091027326公開日2010年6月16日申請日期2009年12月15日優(yōu)先權(quán)日2009年12月15日發(fā)明者李月江,胡昌強,趙仕元,韓琦申請人:湖北香連藥業(yè)有限責(zé)任公司