專利名稱：以特異方式與磷脂酰絲氨酸結(jié)合的多肽及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種以特異方式與磷脂酰絲氨酸結(jié)合的多肽及其用途，具體涉及一種 具有序列號碼為1的氨基酸序列并以特異方式與磷脂酰絲氨酸結(jié)合的多肽、其檢測磷脂酰 絲氨酸的用途、利用其檢測磷脂酰絲氨酸的方法、其檢測凋亡細(xì)胞的用途、其傳達(dá)藥物用 途、其治療腫瘤病癥用途以及患腫瘤部位成像用途等。
背景技術(shù)：
磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine，PS)是巨噬細(xì)胞識別凋亡細(xì)胞而去除的重 要的標(biāo)志物(Schlegel，R.A. et al. ,Cell Death and Differentiation, 2001,8 :551_563 ； Lauber, K. et al. , Mol Cell 2004，14 :277_287 Henson, P. M. et al. , Curr Biol 2001， 11 :R795-805Grimsley,C. et al. ,Trends Cell Biol. 2003，13 :648_656)。在正常情況下， 磷脂酰絲氨酸存在于細(xì)胞膜內(nèi)部，或者細(xì)胞接到凋亡信號，或者紅血球老化時，會顯露到細(xì) 胞膜的外部(Fadeel, B. et al.，Cell Mol Life Sci，2003，60 :2575_2585)。對此，由巨噬 細(xì)胞通過細(xì)胞表面的接受體進(jìn)行識別而吞噬(Fadok，V.A. et al.，J immunol 1992,148 2207-2216 ；Fadok, V. A. et al.，Nature 2000，405 :85_90 ；Park, S. Y. et. al.，Cell Death and_Differentiation, in press)。除了凋亡細(xì)胞之外，磷脂酰絲氨酸也同樣在各種疾患狀態(tài)下顯露到細(xì)胞膜的 外部(Zwaal，R.F.A. et al. , Cell. Mol. Life Sci 2005，62 :971_988)，如斯科特綜合癥 (Scottsyndrome)、抗磷脂綜合癥(antiphospholipid syndrome)、鐮狀細(xì)胞性貧血(sickle cellanemia)、地中海型貧血(thalassemia)、口形紅細(xì)胞增多癥(stomatocytosis)、尿 毒癥(uremia)、腎結(jié)石病(kidney stone disease)、糖尿病(diabetes)、血糖過高癥 (hyperglycemia)、病毒及微生物感染癥、瘧疾(malaria)、子癇前癥(pre-eclampsia)、高 膽紅素血癥(hyperbilirubinemia)及瘤變(neoplasia)等。特別是，很多腫瘤細(xì)胞向細(xì) 胞膜的外部異位表達(dá)磷脂酰絲氨酸(Utsugi, T. et al.，Cancer Res. 1991，15 =3062-3066 ； Rao,L. etal. ,Thromb Res. 1992,67 :517_531 ；Sigimura,M. et al. ,Fibrinolysis. 1994,5 365-373 ；Ran,S.et al. , Cancer Res. 2002,62 :6132_6140 ；ffoehlecke, H. et al. ,Biochem J. 2003，376 489-495)，這種現(xiàn)象在未分化的細(xì)胞瘤(undifferentiatedtumorigenic cell)里更明顯。腫瘤組織也同樣伸出向細(xì)胞膜的外部顯露磷脂酰絲氨酸的小血管(Ran， S. et al. , Cancer Res. 2002,62 6132-6140 ；Zwaal, R. F. A. et al. , Blood. 1997,89 1121-1132)。而且，在各種細(xì)胞內(nèi)生理過程中的非凋亡細(xì)胞也可以觀察到磷脂酰絲氨酸。，如血 小板的活化過程、肌肉細(xì)胞的融合過程、合體滋養(yǎng)細(xì)胞(syncytiotrophoblast)的形成、 肥大細(xì)胞(mast cells)的免疫球蛋白依賴性刺激及T細(xì)胞的移動等(Fadeel，B. et al.， CellDeathDiffer 2006,13:360-2 Ran,S.et al. ，Int J Radiat Oncol Biol Phys 2002， 54 1479-84 Schlegel, R. A. etal. , Cell Death Differ 2001，8 :551_63·)。其中，特別 是，阻止在活化血小板的過程中異位表達(dá)的磷脂酰絲氨酸時，通過抑制由于動脈硬化可能會形成的血栓形成(thrombosi s)過程而表達(dá)其治療效果(Cederholm，A. and Frosteg， J. , AnnN Y Acad Sci. 2007,1108 :96-103Cederholm, A. and Frosteg, J. , Drug News Perspect. 200720(5) :321_6)。因此，由于上述磷脂酰絲氨酸起到的作用，特別是，在包括腫 瘤性及炎癥性疾病在內(nèi)的各種情況下，磷脂酰絲氨酸正在成為診斷、治療及治療追蹤的目 標(biāo)物質(zhì)。另外，據(jù)有關(guān)資料的報告內(nèi)容，抑制磷脂酰絲氨酸的識別可以增強(qiáng)被檢測淋巴瘤 (irradiated lymphoma)的細(xì)胞免疫性(immunogenicity) (Bondanza, A. et al.，J Exp Med2004、200 1157-65).因此，可以與磷脂酰絲氨酸有效結(jié)合的蛋白質(zhì)阻礙凋亡細(xì)胞識 別磷脂酰絲氨酸和去除免疫抑制性，可以用于增強(qiáng)以凋亡細(xì)胞為基礎(chǔ)的疫苗(apoptotic cell-basedvaccines)的效果。鑒于此，本發(fā)明人探索和研究可以將磷脂酰絲氨酸作為目標(biāo)物的新蛋白質(zhì)或者其 片段的結(jié)果發(fā)現(xiàn)，具有序列號碼為1的氨基酸序列的多肽可以以特異方式與磷脂酰絲氨酸 結(jié)合，并完成了本發(fā)明。發(fā)明技術(shù)問題的公開為了解決以上問題，本發(fā)明提供一種以特異方式與磷脂酰絲氨酸結(jié)合的多肽及其 用途。技術(shù)方案為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，本發(fā)明提供一種具有序列號碼為1的氨基酸序列并 以特異方式與磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine)結(jié)合的多肽。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的另一目的，本發(fā)明還提供一種對于所述多肽實(shí)施加密的多聚核苷酸。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的又另一目的，本發(fā)明還提供一種包含所述多肽作為有效成分的 用于檢測磷脂酰絲氨酸的組成物。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的又另一目的，本發(fā)明還提供一種檢測磷脂酰絲氨酸的所述多肽 的用途。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的又另一目的，本發(fā)明還提供一種將所述多肽與飼料混合并去除 未結(jié)合或者以特異方式結(jié)合的多肽之后確認(rèn)所述多肽和飼料是否結(jié)合以及位置的磷脂酰 絲氨酸的檢測方法。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的又另一目的，本發(fā)明還提供一種包含所述多肽作為有效成分的 用于檢測凋亡細(xì)胞(apoptotic cell)的組成物。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的又另一目的，本發(fā)明還提供一種檢測凋亡細(xì)胞(apoptotic cell)的所述多肽的用途。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的又另一目的，本發(fā)明還提供一種包含所述多肽作為有效成分的 用于傳達(dá)藥物的組成物。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的又另一目的，本發(fā)明還提供一種傳達(dá)藥物的所述多肽的用途。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的又另一目的，本發(fā)明還提供一種包含所述多肽以及與其結(jié)合的 抗腫瘤性藥物制劑作為有效成分的用于防治腫瘤病癥的藥物性組成物。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的又另一目的，本發(fā)明還提供一種制造腫瘤病癥治療制劑的所述 多肽以及與其結(jié)合的抗腫瘤制劑的用途。
為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的又另一目的，本發(fā)明還提供一種包含所述多肽作為有效成分的 用于患腫瘤部位成像的組成物。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的又另一目的，本發(fā)明還提供一種成像患腫瘤部位的所述多肽的 用途。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的又另一目的，本發(fā)明還提供一種包含所述多肽作為有效成分的 用于診斷斯科特綜合癥等病癥的診斷用組成物。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的又另一目的，本發(fā)明還提供一種診斷斯科特綜合癥等病癥的所 述多肽的用途。以下詳細(xì)說明本發(fā)明。本發(fā)明根據(jù)具有序列號碼為1的氨基酸的多肽以特異方式與顯露在細(xì)胞表面的 磷脂酰絲氨酸結(jié)合的特性，基于具有序列號嗎為1的氨基酸的新序列多肽及其用途提供包 含所述多肽的用于檢測磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine)的組成物等。本發(fā)明中多肽是指以特異方式與磷脂酰絲氨酸結(jié)合并具有序列號碼為1的氨基 酸序列的多肽。本發(fā)明中肽片段是指包含所有種類的肽、多肽、蛋白質(zhì)、肽模仿物、化合物及 生物制劑且具有可以以特異方式與異位表達(dá)在腫瘤細(xì)胞等細(xì)胞的表面的磷脂酰絲氨酸結(jié) 合的活性的物質(zhì)。本發(fā)明中多肽可以來自天然，也可以利用公知肽合成方法通過合成制造 而成。而且，本發(fā)明進(jìn)一步提供一種對于多肽實(shí)施加密的具有堿基序列的多聚核苷酸。另外，本發(fā)明提供一種對于本發(fā)明中多肽實(shí)施加密的具有堿基序列的載體及基因 轉(zhuǎn)殖成所述載體的基因轉(zhuǎn)殖體。本發(fā)明中載體包括質(zhì)粒載體、噬菌粒載體、噬菌體載體及病毒載體等，但并不局限 于此。本發(fā)明中載體可以是通常的選殖載體或者異位表達(dá)載體，該表達(dá)載體除了包含促進(jìn) 劑、操作符、起始密碼、終止密碼、多聚腺苷酸信號及增強(qiáng)劑(促進(jìn)基因)等已位表達(dá)調(diào)整序 列之外，還包含以膜定位或者分泌為目的的信號序列或者前導(dǎo)序列，并根據(jù)目的制造成多 種形態(tài)。另外，所述載體包含選擇內(nèi)含載體的宿主細(xì)胞的選擇標(biāo)記。如果是可以復(fù)制的載 體，會包含復(fù)制起始點(diǎn)?？梢岳帽景l(fā)明所屬領(lǐng)域技術(shù)人員公知基因轉(zhuǎn)殖技術(shù)基因轉(zhuǎn)殖成所述載體。優(yōu) 選地，利用基因槍法(microprojectile bombardment)、電穿孑L法(electroporation)、磷 酸鈣(CaP04)沉淀、氯化鈣(CaC12)襯墊、PEG-介導(dǎo)融合法(PEG-mediated fusion)、微 量注射法(microinjection)及脂質(zhì)體介導(dǎo)法(liposome-mediated method)，所述基因 轉(zhuǎn)殖體可以是大腸桿菌(Escherichia coli)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、鏈霉 菌(Streptomyces)、假單胞菌(Pseudomonas)lif (Proteus mirabilis)、葡萄球菌 (Staphylococcus)及根癌土壤桿菌(Agrobacterium tumefaciens)，但并不局限于此。本發(fā)明人為了核實(shí)以特異方式與磷脂酰絲氨酸結(jié)合的所述多肽的功能進(jìn)行各種 試驗的結(jié)果發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的肽以特異方式識別老化的細(xì)胞以及異位表達(dá)在凋亡細(xì)胞的表面 的磷脂酰絲氨酸，從而介導(dǎo)所述細(xì)胞的粘附和吞噬。而且，本發(fā)明的肽以特異方式與腫瘤細(xì) 胞結(jié)合，從而在活體內(nèi)(in vivo)或者在活體外(ex vivo)確認(rèn)及成像腫瘤細(xì)胞。由此本 發(fā)明人理解到，本發(fā)明的肽可以利用為檢測磷脂酰絲氨酸的組成物，更進(jìn)一步講，本發(fā)明的 肽可以利用為識別腫瘤組織內(nèi)磷脂酰絲氨酸的用于診斷或者治療追蹤的制劑或者特異的治療腫瘤制劑以及防治腫瘤病癥的藥物性組成物等。更具體地講，本發(fā)明一實(shí)施例利用常用M13噬菌體庫篩選了以特異方式與磷脂酰 絲氨酸結(jié)合的噬菌體。其結(jié)果，通過共4輪篩選終于篩選出了以特異方式與磷脂酰絲氨酸 結(jié)合的噬菌體。分析其序列的結(jié)果發(fā)現(xiàn)，篩選的噬菌體主要是具有CLSYYPSYC的氨基酸共 同序列的肽。而且，還核實(shí)了本發(fā)明另一實(shí)施例篩選的噬菌體與磷脂酰絲氨酸結(jié)合時顯示出的 特異性。其結(jié)果，對比群噬菌體幾乎不會與磷脂酰膽堿或者磷脂酰絲氨酸。與此相反，被篩 選的噬菌體以特異方式與磷脂酰絲氨酸結(jié)合。另外，被篩選的噬菌體以特異方式與磷脂酰 絲氨酸脂質(zhì)體，且由于膜聯(lián)蛋白V的參與阻礙與磷脂酰絲氨酸之間的結(jié)合。另外，本發(fā)明又另一實(shí)施例核實(shí)了被篩選的噬菌體克隆體或者本發(fā)明中肽是否與 凋亡細(xì)胞結(jié)合。核實(shí)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，被篩選的噬菌體克隆體和本發(fā)明中肽與顯露在凋亡細(xì)胞的 磷脂酰絲氨酸之間的結(jié)合狀態(tài)良好。本發(fā)明又另一實(shí)施例核實(shí)了本發(fā)明中肽是否可以引導(dǎo)到被移植的腫瘤部位以及 是否可以將其成像。核實(shí)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在本發(fā)明中肽進(jìn)行處理的群中，本發(fā)明中肽確實(shí)被引導(dǎo) 到腫瘤組織，且可以通過標(biāo)志核實(shí)其過程。總而言之，本發(fā)明中多肽以特異方式與磷脂酰絲氨酸結(jié)合，并在或體內(nèi)識別和吞 噬凋亡細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞。上述內(nèi)容中核苷酸及蛋白質(zhì)作業(yè)可以參考以下文獻(xiàn)(Maniatis et al., MolecularCloning :A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, N. Y. (1982) ；Sambrook et al. , Molecular Cloning :A Laboratory Manual,2d Ed. , ColdSpring Harbor Laboratory Press (1989) ；Deutscher, Μ. , Guide to Protein PurificationMethods Enzymology, vol.182. Academic Press. Inc.，San Diego, CA (1990))。因此，本發(fā)明提供一種包含序列號碼為1的氨基酸序列的本發(fā)明中多肽作為有效 成分的用于檢測磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine)的組成物。而且，本發(fā)明還提供一種檢測磷脂酰絲氨酸的具有序列號碼為1的氨基酸序列的 本發(fā)明中多肽的用途。而且，由于本發(fā)明的多肽以特異方式與磷脂酰絲氨酸結(jié)合，本發(fā)明提供一種包括 如下步驟磷脂酰絲氨酸檢測方法，其步驟如下(a)將本發(fā)明中多肽與飼料混合的步驟；(b)去除未結(jié)合或者以非特異方式結(jié)合的所述多肽的步驟；(c)核實(shí)所述多肽是否結(jié)合以及位置的步驟。為了本發(fā)明中多肽的核實(shí)是否結(jié)合、檢測及定量變?nèi)菀?，本發(fā)明中多肽可以以 標(biāo)志的狀態(tài)提供。、即，可以涂在可以檢測的標(biāo)志上(如，共價貼附或者交聯(lián))提供。所 述可檢測標(biāo)志可以是顯色酶(如，過氧化酶、堿性磷酸鹽)、放射形同位素(如，1251、 32P、35S)、發(fā)色團(tuán)(chromophore)、發(fā)光物質(zhì)或者熒光物質(zhì)(如，F(xiàn)ITC、RITC、熒光蛋白質(zhì) (GFP(Green FluorescentProtein)禾口 EGFP (Enhanced Green Fluorescent Protein)、 RFP(Red Fluorescent Protein)禾口 DsRed(Discosoma sp. redfluorescent protein)禾口 CFP(Cyan Fluorescent Protein) > CCFP(Cyan GreenFluorescent Protein) > YFP(YellowFluorescent Protein)、Cy3、Cy5 及 Cy7. 5)、超順磁性納米粒子(super paramagnetic particles)或者超小型順磁性納米粒子(ultrasuper paramagnetic particles)。依據(jù)標(biāo)志的檢測方法是本發(fā)明所屬領(lǐng)域公知技術(shù)，例如，可以采用如下方法實(shí)施。 采用可檢測標(biāo)志利用熒光物質(zhì)時，可以利用免疫熒光染色法。例如，使以熒光物質(zhì)標(biāo)記的本 發(fā)明中多肽與試劑產(chǎn)生反應(yīng)并去除未結(jié)合或者特異的結(jié)合物之后，采用熒光顯微鏡觀察由 于肽產(chǎn)生的熒光。另外，將可檢測標(biāo)志用于酶時，依據(jù)通過酶反應(yīng)產(chǎn)生的基質(zhì)的顯色反應(yīng)檢 測吸光度。如果是放射性物質(zhì)，可以通過檢測放射線的放射量達(dá)到檢測目的。而且，本發(fā)明的多肽可以使磷脂酰絲氨酸以特異方式與顯露在細(xì)胞表面的細(xì)胞結(jié) 合。鑒于磷脂酰絲氨酸在凋亡細(xì)胞(apoptotic cell)顯露到細(xì)胞膜，本發(fā)明提供一種包含 本發(fā)明中多肽作為有效成分的用于檢測凋亡細(xì)胞(apoptotic cell)的組成物。而且，本發(fā) 明還提供一種檢測凋亡細(xì)胞的本發(fā)明中多肽的用途。上述內(nèi)容中，本發(fā)明并不限定凋亡細(xì) 胞的檢測方法，例如，可以采用檢測所述磷脂酰絲氨酸時的方法。如上所述，為了使本發(fā)明 中多肽的核實(shí)是否結(jié)合、檢測及定量變得更容易，本發(fā)明的多肽可以以標(biāo)志的狀態(tài)提供，其 檢測結(jié)果可以依據(jù)基于檢測標(biāo)志公開的成像方法實(shí)施成像。另外，由于本發(fā)明中多肽可以使磷脂酰絲氨酸以特異方式與顯露在細(xì)胞表面的細(xì) 胞結(jié)合，可以用作可以將藥物選擇性地傳達(dá)給所述細(xì)胞的智能型傳達(dá)藥物劑。鑒于此，本發(fā) 明提供一種包含本發(fā)明中多肽作為有效成分的用于傳達(dá)藥物的組成物。如上所述，越來越多的磷脂酰絲氨酸異位表達(dá)在細(xì)胞膜外部的情況出現(xiàn)在黑色素 瘤及大腸癌細(xì)胞(Utsugi，T. et al.，Cancer Res. 1991，15 :3062_3066)、卵巢癌細(xì)胞(Rao, L. etal.，Thromb Res. 1992,67 :517_531)、胃癌及月干癌細(xì)胞(Sugimura, M. et al.，Blood Coagul.Fibrinolysis. 1994, 5 365-373 ；Woehlecke, H. et al. , Biochem J. 2003,376 489-495)、癌組織的內(nèi)皮細(xì)胞(Ran, S. et al.，Cancer Res. 2002，62 :6132_6140)等各種腫 瘤細(xì)胞中，這種情況在未分化的細(xì)胞瘤(undifferentiated tumorigenie cell)里更明顯。腫瘤組織也同樣伸出向細(xì)胞膜的外部顯露磷脂酰絲氨酸的小血管(Ran，S. etal.， Cancer Res. 2002,62 :6132_6140 ；Zwaal, R. F. A.et al.，Blood.1997,89 :1121_1132)。因此，所述用于傳達(dá)藥物的組成物有可能對于腫瘤病癥起到特異作用。腫瘤 病癥是指由于惡性腫瘤出現(xiàn)病理性癥狀的疾病，如，大腸癌、肺癌、胃癌、食道癌、胰腺 癌、膽囊癌、腎癌、膀胱癌、前列腺癌、睪丸癌、子宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌、絨毛癌、卵巢癌、 乳房癌、甲狀腺癌、腦癌、頭頸部癌、惡性黑色素瘤、皮膚癌、肝癌、白血病(leukemia)、 淋巴瘤(lymphoma)、多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma)、慢性骨髓性白血病(chronic myelogenous leukemia)、神經(jīng)母細(xì)胞瘤(neuroblastoma)及再生障礙性貧血，但是，并不局 限于此。如果將包含于本發(fā)明中用于傳達(dá)藥物的組成物的本發(fā)明多肽和現(xiàn)有抗腫瘤性藥 物制劑聯(lián)系起來治療病癥，就可以通過本發(fā)明的多肽使所述制劑選擇性地只傳達(dá)到腫瘤細(xì) 胞之中。如此，不僅可以提高藥效，還可以顯著減少對于正常組織產(chǎn)生的副作用。本發(fā)明不特別限定可以與本發(fā)明多肽聯(lián)系起來的抗腫瘤性藥物制劑，只要是用 于治療腫瘤的現(xiàn)有藥物均可，如紫杉醇、阿霉素、長春新堿、柔紅霉素(daimorubicin)、 長春花堿(vinblastine)、放線菌素 _D (actinomycin-D)、多烯紫衫醇(docetaxel)、 依托泊苷(etoposide)、替尼泊苷(teniposide)、比生群(bisantrene)、高三尖杉酯堿(homoharringtonine)、格里維克(Gleevec ；STI-571)、順鉬(cisplain)、5_ 氟尿 嘧啶(5-f luouracil)、亞德里亞霉素(adriamycin)、甲氨蝶呤(methotrexate)、白消 安(busulfan)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide)、美法侖 (melphalan)、氮芥(ni trogen mustard)及亞硝基尿素(ni trosourea)等。所述制 劑和本發(fā)明中多肽的聯(lián)系是可以通過本發(fā)明所屬領(lǐng)域公知技術(shù)方法實(shí)施，如共價貼附、 交聯(lián)等。為此，本發(fā)明的肽根據(jù)需要在不丟失其活性的范圍內(nèi)可以對其實(shí)施化學(xué)改性 (modification)。包含于本發(fā)明組成物的本發(fā)明肽的量根據(jù)結(jié)合的抗腫瘤藥物的種類和量 不同。另外，本發(fā)明以本發(fā)明中多肽及與其結(jié)合的抗腫瘤性藥物制劑為有效成分提供一 種用于防治腫瘤病癥的藥物性組成物。而且，本發(fā)明還提供一種制造腫瘤病癥治療制劑的 本發(fā)明中多肽以及與其結(jié)合的抗腫瘤制劑的用途。此時，所述藥物性組成物中的抗腫瘤性藥物制劑、結(jié)合方法及腫瘤病癥相關(guān)說明 與上述內(nèi)容相同。另外，本發(fā)明中藥物性組成物可以以所述多肽的純粹形態(tài)提供或者與藥物學(xué)方面 允許的載體一起配制成妥當(dāng)?shù)男螒B(tài)來提供?！幬飳W(xué)方面允許’是指生理學(xué)方面允許，且投 藥給人類時，通常不會引起胃腸障礙、眩暈等過敏性反應(yīng)或者與其類似的反應(yīng)的非毒性組 成物。所述載體包含左右種類的溶劑、方差矩陣、水中油或者油中水乳劑、水性組成物、脂質(zhì) 體、微型珠及微粒體。而且，本發(fā)明的藥物性組成物可以根據(jù)給藥途徑與妥當(dāng)?shù)妮d體一起配制。所述本 發(fā)明中藥物性組成物的給藥途徑可以采用口腔給藥方式也可以采用非口腔給藥方式，但 是，其給藥途徑并不限于此。非口腔給藥方式包括各種途徑，如，透皮、鼻腔、腹腔、肌肉、皮 下或者靜脈等。通過口腔給藥本發(fā)明的藥物性組成物時，本發(fā)明的藥物性組成物可以根據(jù)本發(fā)明 所屬領(lǐng)域公知技術(shù)方法，與適合口腔給藥的載體一起配制成粉末、顆粒、片劑、丸劑、糖丸、 膠囊、藥液、凝膠制劑、糖漿制劑、懸浮液、薄片等形態(tài)。適合用作載體的有內(nèi)含乳糖、葡萄 糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、木糖醇、赤蘚糖醇及麥芽糖醇等的糖類和內(nèi)含玉米淀粉、小麥淀 粉、大米淀粉及土豆淀粉等的淀粉類、內(nèi)含纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉及羥丙基 甲基纖維素等的纖維素類以及凝膠、聚乙烯吡咯烷酮等填充物。而且，根據(jù)情況，還可以添 加交聯(lián)結(jié)合聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂、海藻酸或者海藻酸鈉等作為崩解劑。進(jìn)一步，所述藥物 性組成物還可以包含抗凝結(jié)劑、潤滑劑、濕潤劑、香辛料、乳化劑及防腐劑等。另外，通過非口腔途徑給藥時，本發(fā)明的藥物性組成物可以根據(jù)本發(fā)明所屬領(lǐng)域 公知技術(shù)方法，適合采用非口腔給藥方式的載體一起配制成注射劑、透皮制劑及鼻腔吸入 制劑形態(tài)。所述注射劑必須要徹底殺菌，保證不受到病毒和真菌等微生物的污染。適合于 注射劑的載體可以是水、乙醇、多元醇(例如，甘油、丙二醇及液狀聚乙二醇等)、其混合物 及/或者內(nèi)含植物油的溶劑或者方差矩陣。進(jìn)一步優(yōu)選地，適合的載體有內(nèi)含平衡鹽溶液、 林格液、三乙醇胺的PBS (phosphate buffered saline)或者用于注射的滅菌水、10%乙醇、 40 %丙二醇及5 %葡萄糖等等滲溶液等。為了保護(hù)所述注射劑免收微生物的污染，還可以進(jìn) 一步包含滅菌劑、氯丁醇、苯酚、山梨酸、消毒液等各種抗菌劑及抗真菌劑。而且，所述注射 劑在大部分情況下還可以進(jìn)一步包含糖或者氯化鈉等等滲劑。
透皮劑包含軟膏劑、乳膏劑、涂劑、凝膠劑、外用藥水、糊劑、擦劑、氣孔劑等形 態(tài)。所述“透皮給藥”是指將藥物性組成物局部投放到皮膚里，使內(nèi)含于藥物性組成物的 有效量活性成分傳達(dá)到皮膚內(nèi)部的給藥方式，其配制方式可以采用制藥化學(xué)行業(yè)通常公 知的處方索弓I 文獻(xiàn)(Remington’ s Pharmaceutical Science, 15th Edition, 1975, Mack Pub 1ishingCompany, Easton,Pennsylvania)里。吸入制劑中，本發(fā)明使用的化合物可以使用妥當(dāng)?shù)耐七M(jìn)劑，例如，使用二氯氟甲 烷、三氯氟乙烷、四氟二氯乙烷、二氧化碳或者其它妥當(dāng)?shù)臍怏w，以氣霧劑噴霧形態(tài)從加壓 包或者霧化器順利傳達(dá)。使用加壓氣霧劑時，可以通過提供傳達(dá)已計量好的投入量的管路 決定給藥單位。例如，用于吸入器或者吹入器的軟膠囊劑和卡局式劑型可以內(nèi)含化合物及 乳糖或者淀粉等妥當(dāng)?shù)姆勰罘勰┗旌衔?。要想了解除此之外的藥理上允許采用的載體，可以參考以下文獻(xiàn)中記載的內(nèi)容 (Remington' s Pharmaceutical Sciences,19th ed. ,Mack Publishing Company,Easton, PA,1995)。而且，本發(fā)明中藥物性組成物進(jìn)一步包含一種以上緩沖劑(如生理鹽水或者 PBS)、碳水化物(如葡萄糖、甘露糖、蔗糖或者葡萄聚糖)、穩(wěn)定劑(亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉 或者抗壞血酸)、抗氧化劑、抑菌劑、螯合萃取劑(如EDTA或者谷胱甘肽)、輔助劑(如氫氧 化鋁)、懸浮劑、增稠劑及/或抗菌防腐劑(氯化苯甲烴胺、甲基_或丙基_滅菌劑及氯丁 醇)。而且，本發(fā)明中藥物性組成物可以采用本領(lǐng)域公知的方法制備，從而保證將其投 入到哺乳動物之后迅速、持續(xù)或者推遲放出活性成分?？梢酝ㄟ^包括口腔、透皮、皮下、靜脈或者肌肉在內(nèi)的各種途徑投入通過上述方法 制備而成的藥物性組成物。所述’有效量’是指投入給患者時可以追蹤其診斷或者治療效 果的化合物或者提取物的量。本發(fā)明中藥物性組成物的的投入量可以根據(jù)投入途徑、投入 對象、對象病癥及其重癥程度、年齡、性別、體重、體質(zhì)差異和患病狀態(tài)妥當(dāng)選擇。優(yōu)選地，包 含本發(fā)明多肽的藥物性組成物可以根據(jù)患病程度改變有效成分的含量，可通常情況下，以 成人為準(zhǔn)時，可以以一次10 μ g至IOmg有效容量每日反復(fù)投入數(shù)次。而且，由于本發(fā)明中多肽以特異方式與磷脂酰絲氨酸結(jié)合，可以有效使用于腫瘤 病癥患病部位的成像。鑒于此，本發(fā)明提供一種包含所述多肽作為有效成分的用于腫瘤病 癥部位成像的組成物。而且，本發(fā)明還提供一種成像腫瘤病癥部位的本發(fā)明中多肽的用途。 為了易于確認(rèn)是否結(jié)合、檢測及定量，可以以標(biāo)記的狀態(tài)提供所述多肽，其方法可遵照上述 內(nèi)容里記載的方法。另外，除了上述腫瘤病癥之外的各種患病狀況下，磷脂酰絲氨酸也顯露到細(xì) 胞膜夕卜部(Zwaal, R. F. A. et al.，Cell. Mol. Life Sci. 2005，62 :971_988)，例如，斯 科特綜合癥(Scott syndrome)、抗磷脂綜合癥(antiphospholipid syndrome)、鐮狀 細(xì)胞性貧血(sicklecell anemia)、地中海型貧血(thalathemia)、口形紅細(xì)胞增多 癥(stomatocytosis)、尿毒癥(uremia)、腎結(jié)石病(kidney stone disease)、糖尿病 (diabetes)、血糖過高癥(hyperglycemia)、病毒及微生物感染癥、瘧疾(malaria)、子癇前 癥(pre-eclampsia)、高膽紅素血癥(hyperbilirubinemia)及瘤變(neoplasia)等。鑒于此，本發(fā)明提供一種包含本發(fā)明中多肽作為有效成分且由斯科特綜合癥(Scottsyndrome)、抗磷脂綜合癥(antiphospholipid syndrome)、鐮狀細(xì)胞性貧血(sickle cellanemia)、地中海型貧血(thalathemia)、口形紅細(xì)胞增多癥(stomatocytosis)、尿 毒癥(uremia)、腎結(jié)石病(kidney stone disease)、糖尿病(diabetes)、血糖過高癥 (hyperglycemia)、病毒及微生物感染癥、瘧疾(malaria)、子癇前癥(pre-eclampsia)、高 膽紅素血癥(hyperbilirubinemia)及瘤變(neoplasia)組成的群中選擇且用于診斷病癥 的組成物。而且，本發(fā)明還提供一種由斯科特綜合癥(Scott syndrome)、抗磷脂綜合 ^E (antiphospholipid syndrome)、H Ifi 個生 H (sickle cell anemia) > jft Φ 型貧血(thalathemia)、口形紅細(xì)胞增多癥(stomatocytosis)、尿毒癥(uremia)、腎 結(jié)石病(kidneystone disease)、糖尿病(diabetes)、血糖過高癥(hyperglycemia) > 病毒及微生物感染癥、瘧疾(malaria)、子癇前癥(pre-eclampsia)、高膽紅素血癥 (hyperbilirubinemia)及瘤變(neoplasia)組成的群中選擇且用于診斷病癥的本發(fā)明中 多肽的用途。有益效果如上所述，本發(fā)明中具有序列號碼為1的氨基酸序列的多肽以特異方式與磷脂酰 絲氨酸結(jié)合。因此，本發(fā)明中多肽可以廣泛應(yīng)用于檢測磷脂酰絲氨酸乃至檢測將磷脂酰絲 氨酸異位表達(dá)在細(xì)胞表面的凋亡細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞或者成像等。附圖簡要說明

圖1圖示了在噬菌體庫篩選對于磷脂酰絲氨酸特別的噬菌體時其篩選過程(A)、 確認(rèn)上包磷脂酰絲氨酸和磷脂酰膽堿的細(xì)胞培養(yǎng)板(B)以及各個篩選步驟中噬菌體滴定 量(C)和篩選結(jié)果(D) (PC 磷脂酰膽堿、PS 磷脂酰絲氨酸)。圖2核實(shí)了被篩選噬菌體和對比群噬菌體庫的磷脂酰絲氨酸(噬菌體滴定量㈧、 噬菌體ELISA(B))和磷脂酰絲氨酸脂質(zhì)體(C)的結(jié)合特異性以及處理膜聯(lián)蛋白V時抑制結(jié) 合(D) (PhageLib.噬菌體庫(對比群)、CLSYYPSYC 本發(fā)明中肽的序列)。圖3核實(shí)了本發(fā)明中多肽與凋亡細(xì)胞結(jié)合時特異性(A、B、C)以及附著在凋亡細(xì)胞 的噬菌體對于磷脂酰絲氨酸的特異性(D) (Normal 正常細(xì)胞菌、Apoptotic 凋亡細(xì)胞群、 Conp印tide 對比群肽)。圖4中采用采用FACS (A)、免疫組織化學(xué)法(B)和共聚焦顯微鏡(C)核實(shí)了本發(fā)明 中多肽與凋亡細(xì)胞結(jié)合時特異性。圖5圖示了本發(fā)明中多肽對于腫瘤病癥部位的活體內(nèi)(in vivo)引導(dǎo)和成像㈧ 以及活體外(ex vivo)引導(dǎo)和成像(B)的結(jié)果。圖6通過冷凍切片組織的腫瘤血管(A)和凋亡細(xì)胞(B)的免疫組織染色核實(shí)了本 發(fā)明中多肽對于腫瘤病癥部位的活體內(nèi)(in vivo)引導(dǎo)。實(shí)施本發(fā)明的最佳方式以下詳細(xì)說明本發(fā)明實(shí)施例。但是，以下實(shí)施例只用于說明本發(fā)明而非限制本發(fā)明。<實(shí)施例1>細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞培養(yǎng)板的制作<1-1>細(xì)胞培養(yǎng)
本發(fā)明使用的H460及H157人類肺癌細(xì)胞株和U937白血病細(xì)胞株是在包含添加 抗生素(青霉素及鏈霉素)的10%胎牛血清(FBS，F(xiàn)etal bovine serum)的RMPI 1640培 養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，并每隔3日至4日進(jìn)行了傳代培養(yǎng)。<1-2>制作上包磷脂酰膽堿或者磷脂酰絲氨酸的細(xì)胞培養(yǎng)板為了制作出上包磷脂酰膽堿或者磷脂酰絲氨酸的細(xì)胞培養(yǎng)板(或者細(xì)胞)，首先， 用乙醇溶化磷脂酰膽堿或者磷脂酰絲氨酸之后(3/ml，100)，放入96-細(xì)胞免疫吸附IB微滴 U (ImmulonlBmicrotiter plates, Thermo, Milford, MA, USA) ^i2SI巾〒6 f/J、0^。 為了防止非特異性結(jié)合，加入包含 10mg/ml BSA(bovine serum albumin)的 TBS (Tris-HCl 50mM, pH 7.4，NaC1150mM)并在室溫環(huán)境下堵塞了(blocking) 了 1個小時。通過以下磨、 膜聯(lián)蛋白V結(jié)合測定(armexin V binding test)評估上包通過上述方法制造的磷脂酰膽 堿或者磷脂酰絲氨酸的細(xì)胞培養(yǎng)板，并選用上包狀態(tài)好的細(xì)胞培養(yǎng)板。為了膜聯(lián)蛋白V的結(jié)合，采用包含10mg/ml BSA的TBS緩沖劑溶化附著組氨酸的 重組膜聯(lián)蛋白 V 蛋白質(zhì)(his-tagged recombinant annexin Vprotein(20/ml))之后，放入 上包磷脂酰膽堿或者磷脂酰絲氨酸的ELISA細(xì)胞培養(yǎng)板之中。然后，在室溫狀態(tài)下放置1 個小時。對其采用TBS-T緩沖劑淘洗3次，使結(jié)合的膜聯(lián)蛋白V蛋白質(zhì)與上述結(jié)合HRP的 老鼠抗-組氨酸IgG抗體(Santa Cruz Biotechnology)反應(yīng)之后采用TBM基質(zhì)引起反應(yīng) 而進(jìn)行檢測。其結(jié)果，如圖IB (上包磷脂酰絲氨酸之后進(jìn)行測試的結(jié)果)，本發(fā)明使用的細(xì)胞培 養(yǎng)板與膜聯(lián)蛋白V的結(jié)合狀態(tài)良好，由此可知，所述細(xì)胞培養(yǎng)板的上包狀態(tài)也良好。上包的 細(xì)胞培養(yǎng)板用于以下測試當(dāng)中。<實(shí)施例2>篩查與磷脂酰絲氨酸的結(jié)合的噬菌體<2-1>篩查與磷脂酰絲氨酸的結(jié)合的噬菌體采用顯露溶入pill的7-mer隨機(jī)環(huán)肽庫(random cyclic peptides)的M13噬菌 體庫(NewEngland Biolabs, Ipswich, ΜΑ)篩查通過以下方法與磷脂酰絲氨酸結(jié)合的肽。在包含10mg/ml BSA的TBS緩沖劑(100)里具備2 X IO11噬斑形成單位 (plaque-formingunits, pfu)的所述 M13 噬菌體庫(phage library, 10)放入上包磷脂酰 膽堿的細(xì)胞之中，在室溫狀態(tài)下緩慢攪拌(gentle shaking)并放置1個小時(subtraction step)。然后，將去除(subtracted)附著于磷脂酰膽堿的噬菌體的噬菌體庫放入上包磷脂 酰絲氨酸的細(xì)胞之中，在室溫狀態(tài)下緩慢攪拌并放置1個小時。為了去除沒有結(jié)合或者 結(jié)合力弱的噬菌體，對其采用TBS-T (TBS containing 0. 05% Tween-20)緩沖劑強(qiáng)力淘洗 (washing) 10次以上。在室溫狀態(tài)下，采用包含lmg/ml BSA的100的0. 2M glycine-HCl (pH 2.2)緩沖劑洗提(elution) 10分鐘與上包磷脂酰絲氨酸的細(xì)胞結(jié)合的噬菌體。立即采用 IM Tris-HCKpH 9.1)中和被洗提的噬菌體，并按照制造公司的操作指南，擴(kuò)增到20ml的 ER2738 細(xì)菌(New England Biolabs 公司)(參考圖 1A)。擴(kuò)增之后，采用聚乙二醇/NaCl溶液沉淀培養(yǎng)液上清液中噬菌體之后，檢測滴定 量(titer)。檢測滴定量時，使用包含IPTG和Χ-gal的LB細(xì)胞培養(yǎng)板，并在37°C溫度環(huán)境 下培養(yǎng)一夜之后，計算藍(lán)色菌落的數(shù)量。對于利用檢測到的滴定量首次篩選的噬菌體，按照2X IO11Pfu標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行進(jìn)一步的篩選(2次至4次)，其篩選過程與上述內(nèi)容相同。<2-2>核實(shí)對于磷脂酰絲氨酸特異的噬菌體克隆體為了核實(shí)上述實(shí)施例<2_1>中對于磷脂酰絲氨酸特異的噬菌體是否得到濃縮 (enrichment)，在上述實(shí)施例<2_1>中各個環(huán)節(jié)(1次至4次)進(jìn)行篩選時，連上包磷脂酰 膽堿的細(xì)胞也包括在其中。而且，相互對比了上包磷脂酰膽堿和磷脂酰絲氨酸的細(xì)胞的噬 菌體滴定量。其結(jié)果，如圖IC所示，對于磷脂酰絲氨酸特異的肽從第二次環(huán)節(jié)開始得到了濃縮。<2"3>篩選對于磷脂酰絲氨酸特異的噬菌體如上述實(shí)施例<2_1>，總共通過4個篩選環(huán)節(jié)篩選出對于磷脂酰絲氨酸特異的噬 菌體，并從被篩選的噬菌體克隆體中分離出單鏈DNA。從至少30個以上噬菌體克隆體分離 出DNA，并分析(sequencing) 了其堿基序列。將通過堿基序列分析結(jié)果得到的氨基酸序列 排列成CLUSTAL W算法來確認(rèn)共同的肽序列(consensus peptide sequence)。為了確認(rèn)與 所述肽的序列之間的同源性強(qiáng)的蛋白質(zhì)，實(shí)施高級局域序列對位排列算法搜索(advanced BLAST search(EMBL/GenBank/DDBJ))功能。其結(jié)果，如圖ID所示，主要篩選出了具備CLSYYPSYC的氨基酸共同序列的肽。經(jīng) 核實(shí)，與具有所述CLSYYPSYC的氨基酸序列的肽之間的同源性強(qiáng)的人類蛋白質(zhì)如下表1。表 1Examp1e of human proteins containing identical amino acid sequences to peptide
權(quán)利要求
具有序列號碼為1的氨基酸序列且以特異方式與磷脂酰絲氨酸結(jié)合的多肽。
2.具有加密權(quán)利要求1所述多肽的堿基序列的多聚核苷酸。
3.包含權(quán)利要求2所述多聚核苷酸的載體。
4.基因轉(zhuǎn)殖成權(quán)利要求3所述載體的基因轉(zhuǎn)殖體。
5.包含權(quán)利要求1所述多肽作為有效成分的用于檢測磷脂酰絲氨酸的組成物。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的組成物，其特征在于所述多肽采用由顯色酶、放射形同位 素、發(fā)色團(tuán)(chromophore)、發(fā)光物質(zhì)及熒光物質(zhì)(fluorescer)組成的群中選擇的一種做 標(biāo)記。
7.一種磷脂酰絲氨酸檢測方法，包括以下步驟(a)將權(quán)利要求1所述多肽與試劑混合的步驟；(b)去除未結(jié)合或者以非特異方式結(jié)合的所述多肽的步驟；以及(c)核實(shí)所述多肽是否結(jié)合及位置的步驟。
8.包含權(quán)利要求1所述多肽作為有效成分的用于檢測凋亡細(xì)胞(apoptoticcell)的 組成物。
9.包含權(quán)利要求1所述多肽作為有效成分的用于傳達(dá)藥物的組成物。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的組成物，其特征在于；所述組成物對于腫瘤病癥具有特異性。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的組成物，其特征在于所述腫瘤病癥是由大腸癌、肺癌、 胃癌、食道癌、胰腺癌、膽囊癌、腎癌、膀胱癌、前列腺癌、睪丸癌、子宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌、 絨毛癌、卵巢癌、乳房癌、甲狀腺癌、腦癌、頭頸部癌、惡性黑色素瘤、皮膚癌、肝癌、白血病 (leukemia)、淋巴瘤(lymphoma)、多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma)、慢性骨髓性白血病 (chronic myelogenous leukemia)、神經(jīng)母細(xì)胞瘤(neuroblastoma)及再生障礙性貧血組 成的群中選擇的一種。
12.根據(jù)權(quán)利要求9所述的組成物，其特征在于所述多肽與由紫杉醇、阿霉素、長春 ifil、柔紅β素(daunorubicin)、長春花 (vinblastine)、放線菌素-D(actinomycin-D)、 多烯紫衫醇(docetaxel)、依托泊苷(etoposide)、替尼泊苷(teniposide)、比生群 (bisantrene)、高三尖杉酯堿(homoharringtonine)、格里維克(Gleevec ；STI-571)、 順鉬(cisplain)、5_氟尿嘧啶(5-fluouracil)、亞德里亞霉素(adriamycin)、甲氨 蝶呤(methotrexate)、白消安(busulfan)、苯丁 酸氮芥(chlorambucil)、環(huán)磷酰胺 (cyclophosphamide)、美法倉(melphalan)、氮芥(nitrogen mustard)及亞硝基尿素 (nitrosourea)組成的群中選擇的抗腫瘤制劑結(jié)合。
13.包含權(quán)利要求1所述多肽以及與其結(jié)合的抗腫瘤制劑作為有效成分的用于防治腫 瘤病癥的藥物性組成物。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的組成物，其特征在于所述抗腫瘤制劑是由紫杉 醇、阿霉素、長春新堿、柔紅霉素(daunorubicin)、長春花堿(vinblastine)、放線菌 素-D (actinomycin-D)、多烯紫衫醇(docetaxel)、依托泊苷(etoposide)、替尼泊 昔(teniposide)、比生群(bisantrene)、高三尖杉酉旨喊(homoharringtonine)、格里 維克(Gleevec ；STI-571)、順鉬(ci splain)、5_ 氟尿嘧啶(5-fluouracil)、亞德里 亞霉素(adriamycin)、甲氨蝶呤(methotrexate)、白消安(busulfan)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、環(huán)憐酉先胺(cyclophosphamide)、美法倉(melphalan)、氮芥(nitrogen mustard)及亞硝基尿素(nitrosourea)組成的群中選擇的。
15.包含權(quán)利要求1所述多肽作為有效成分的用于成像患腫瘤部位的組成物。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的組成物，其特征在于所述多肽采用由顯色酶、放射 形同位素、發(fā)色團(tuán)、發(fā)光物質(zhì)或者熒光物質(zhì)(fluoresce!·)、超順磁性納米粒子(super paramagneticpartides)及超小型順磁性納米粒子(ultrasuper paramagnetic particles)組成的群中選擇的一種做標(biāo)記。
17.包含權(quán)利要求1所述的多肽作為有效成分且由斯科特綜合癥(Scottsyndrome), 抗磷脂綜合癥(antiphospholipid syndrome)、鐮狀細(xì)胞性貧血(sickle cell anemia)、 地中海型貧血(thalassemia)、口形紅細(xì)胞增多癥(stomatocytosis)、尿毒癥(uremia)、 腎結(jié)石病(kidney stone disease)、糖尿病(diabetes)、血糖過高癥(hyperglycemia) > 病毒及微生物感染癥、瘧疾(malaria)、子癇前癥(pre-eclampsia)、高膽紅素血癥 (hyperbilirubinemia)及瘤變(neoplasia)組成的群中選擇并用于診斷病癥的組成物。
18.檢測磷脂酰絲氨酸時權(quán)利要求1所述多肽的用途。
19.檢測凋亡細(xì)胞(apoptoticcell)時權(quán)利要求1所述多肽的用途。
20.傳達(dá)藥物時權(quán)利要求1所述多肽的用途。
21.制造治療腫瘤制劑時權(quán)利要求1所述多肽以及與其結(jié)合的抗腫瘤制劑的用途。
22.成像患腫瘤部位時權(quán)利要求1所述多肽的用途。
23.由斯科特綜合癥(Scottsyndrome)、抗磷脂綜合癥(antiphospholipid syndrome)、鐮狀細(xì)胞性貧血(sickle cell anemia)、地中海型貧血(thalassemia)、口形紅 細(xì)胞增多癥(stomatocytosis)、尿毒癥(uremia)、腎結(jié)石病(kidney stone disease)、糖尿 病(diabetes)、血糖過高癥(hyperglycemia)、病毒及微生物感染癥、瘧疾(malaria)、子癇 前癥(pre-eclampsia)、高膽紅素血癥(hyperbilirubinemia)及瘤變(neoplasia)組成的 群中選擇的用于診斷病癥的權(quán)利要求1所述多肽的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種以特異方式與磷脂酰絲氨酸結(jié)合的多肽及其用途，具體涉及一種具有序列號碼為1的氨基酸序列并以特異方式與磷脂酰絲氨酸結(jié)合的多肽、包含該多肽作為有效成分的用于檢測磷脂酰絲氨酸的組成物、利用該組成物的磷脂酰絲氨酸檢測方法、包含該組成物作為有效成分的用于檢測凋亡細(xì)胞的組成物、包含該組成物作為有效成分的用于傳達(dá)藥物的組成物、用于防治腫瘤疾病的組成物以及用于患腫瘤部位成像的組成物等。本發(fā)明中具有序列號碼為1的氨基酸序列的多肽以特異方式與磷脂酰絲氨酸結(jié)合。因此，本發(fā)明的多肽可以廣泛應(yīng)用于磷脂酰絲氨酸的檢測，更進(jìn)一步，可以廣泛應(yīng)用于將磷脂酰絲氨酸異位表達(dá)在細(xì)胞表面的凋亡細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞的檢測或者成像等。
文檔編號C07K7/06GK101965356SQ200980106312
公開日2011年2月2日 申請日期2009年2月25日 優(yōu)先權(quán)日2008年2月25日
發(fā)明者他帕.娜仁德拉, 李炳憲, 金仁山 申請人:分子基術(shù)事業(yè)化集團(tuán)(株)