專(zhuān)利名稱：：膜型-1基質(zhì)金屬蛋白抑制劑及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及能夠抑制膜型-1金屬蛋白酶(MT1-MMP或MMP-14)的化合物，以及利用這些化合物治療疾病如癌癥、心臟和血管疾病及關(guān)節(jié)炎的方法。
背景技術(shù)：
：包括癌癥、心臟和血管疾病及關(guān)節(jié)炎在內(nèi)的疾病過(guò)程涉及胞外基質(zhì)(ECM)的分解和重構(gòu)。癌癥是以異常細(xì)胞生長(zhǎng)不受控制為標(biāo)志的疾病。癌癥細(xì)胞克服了施加于壽命有限的正常細(xì)胞的屏障從而無(wú)限生長(zhǎng)。隨著癌癥細(xì)胞的繼續(xù)生長(zhǎng)，可能會(huì)持續(xù)發(fā)生基因改變，直至癌癥細(xì)胞表現(xiàn)為更具攻擊性的生長(zhǎng)表型。如果不加以治療，轉(zhuǎn)移、癌癥細(xì)胞通過(guò)淋巴系統(tǒng)或血流擴(kuò)散到較遠(yuǎn)的身體區(qū)域，將繼而損害健康組織。癌癥轉(zhuǎn)移要求癌癥細(xì)胞通常通過(guò)進(jìn)入血液或淋巴系統(tǒng)而離開(kāi)原始腫瘤部位，并擴(kuò)散到身體其它區(qū)域中。所以轉(zhuǎn)移性細(xì)胞必須擺脫最初形成它們的組織。這個(gè)過(guò)程可能會(huì)涉及ECM結(jié)構(gòu)的分解。關(guān)節(jié)炎也與ECM的變化關(guān)聯(lián)。在骨關(guān)節(jié)炎中，關(guān)節(jié)軟骨的ECM降解導(dǎo)致諸如疼痛、僵硬、運(yùn)動(dòng)受限、觸痛(tenderness)和腫脹等癥狀。ECM的變化也與心血管疾病關(guān)聯(lián)，如動(dòng)脈粥樣硬化癥，尤其是在該疾病的早期階段。因而，期望控制ECM變化或降解的新途徑。
發(fā)明內(nèi)容我們意外地發(fā)現(xiàn)，包含不可磷酸化(nonphosphorylatable)形式的膜型_1金屬蛋白酶(MTl-MMP)胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域的可溶性多肽，能夠抑制MTl-MMP活性并且此種抑制不需要MTl-MMP序列的跨膜或胞外部分。因此，本發(fā)明的特征在于能夠抑制MTl-MMP活性的組合物，如包括MTl-MMP序列的573位置處有突變或缺失的MTl-MMP胞質(zhì)序列的可溶性多肽。MTl-MMP活性與膠原降解、癌癥細(xì)胞能動(dòng)性和侵襲力的增大，以及諸如心臟病、血管病和關(guān)節(jié)炎等疾病關(guān)聯(lián)。因而，這些組合物可用于治療這些疾病、或期望降低MTl-MMP活性的任何疾病。此種組合物也可以連同如本文所述的用于治療這些疾病的標(biāo)準(zhǔn)療法一起給予。因此，在第一方面，本發(fā)明的特征在于包含多肽(例如，可溶性多肽)的組合物，其包含與膜型-1基質(zhì)金屬蛋白酶(MTl-MMP)或其片段基本上相同的氨基酸序列，其中該多肽能夠抑制(例如，選擇性地抑制)MT1-MMP活性。該氨基酸序列在與人MTl-MMP序列位置573相對(duì)應(yīng)的氨基酸位置處沒(méi)有可磷酸化的酪氨酸，如在位置573處有替代(替換，substitution)、缺失或修飾。在某些實(shí)施方式中，可利用天然存在的氨基酸(例如，苯丙氨酸)、非天然存在的氨基酸或其修飾形式進(jìn)行替代。相比相應(yīng)的人MTl-MMP胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域序列，該氨基酸序列可具有0、1、2、3、4、5、6或7個(gè)替代。在特定實(shí)施方式中，該氨基酸序列與人MTl-MMP胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域序列，或在與人MTl-MMP序列位置573相對(duì)應(yīng)的位置處有缺失、替代或修飾的人MTl-MMP胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域序列有至少80%(例如，85%、90%、95%，或98%)的同一性(例如，RRHGTPRRLLFCQRSLLDKV(SEQIDNO118)或其MT1-MMP抑制性片段)。在其它實(shí)施方式中，該多肽包括遞送載體(例如，能夠穿透細(xì)胞膜、能夠進(jìn)入特定細(xì)胞類(lèi)型、或能夠穿過(guò)血腦屏障(BBB)的氨基酸序列，如本文所述的那些)。能夠穿透細(xì)胞膜的氨基酸序列與選自以下所構(gòu)成的組的多肽基本上相同觸角足蛋白同源結(jié)構(gòu)域第三螺方寵(thirdhelixofthehomeodomainoftheantennapediaprotein)(SEQIDNO119)、觸角足前導(dǎo)肽(CT)(SEQIDNO:120)、觸角足肽酰胺(SEQIDNO:121)、Cys(Npys)-觸角足肽酰胺(SEQID而122)、胞質(zhì)轉(zhuǎn)導(dǎo)肽(0)(例如，本文所述的那些)、把￥-1￥22、(Arg)9(SEQIDNO137),Cys(Npys)-(Arg)9(SEQIDNO:138)、Cys(Npys)-(D-Arg)9、[Cys58]105Y細(xì)胞穿透肽(SEQIDNO:139)、肽105Y(SEQIDNO:140)、抗菌肽(buforin)(SEQIDNO:141)、嵌合狂犬病病毒糖蛋白片段(RVG-9R;SEQIDN0:142)、Cys(Npys)-TAT(47-57)(SEQIDNO:143)、Cys-TAT(47-57)(SEQIDNO:144)、脂質(zhì)膜轉(zhuǎn)位肽(SEQIDN0:145)、D-異構(gòu)體-脂質(zhì)膜轉(zhuǎn)位肽、肥大細(xì)胞脫粒肽(mastoparan)(SEQIDNO146)、肥大細(xì)胞脫粒肽7(SEQIDNO:147)、肥大細(xì)胞脫粒肽X(SEQIDNO:148)、MEK1來(lái)源的肽抑制劑1(SEQIDNO149)、十四酰-MEKl來(lái)源的肽抑制劑1(SEQIDNO:150)、硬脂酰-MEK-I來(lái)源的肽抑制劑1酰胺(SEQIDNO:151)、膜滲透序列(SEQIDNO:152),HIVffi關(guān)的MPG((SEQIDNO:153)、氨基肽酶N配體(CD13)、NGR肽(SEQIDNO154),NGR肽1、NGR肽2(SEQIDNO:155)、NGR肽3(SEQIDNO:156)、NGR肽4、Pep-I(Chariot；SEQIDNO:157)、SynBl(SEQIDNO:158)、生物素-TAT(47-57)(SEQIDNO:159)、TAT(47-57)(SEQIDNO160)、TAT(47-57)GGG-Cys(Npys)(SEQIDNO:161)、TAT(48-57)(SEQIDNO:162)、Tat-C(48-57)(SEQIDNO:163)、透皮肽(SEQIDNO:164)、轉(zhuǎn)運(yùn)子(transportan)(SEQIDNO:165)，和轉(zhuǎn)運(yùn)子10&儀仙？0汁&1110)(SEQIDNO166)。在某些實(shí)施方式中，該多肽包括序列RQIKIWFQNRRMKWKK(SEQIDNO:119)和RRHGTPRRLLFCQRSLLDKV(SEQIDNO:118)(例如，序列RQIKIWFQNRRMKffKKRRHGTPRRLLFCQRSLLDKV(SEQIDNO:176))。在某些實(shí)施方式中，能夠穿過(guò)BBB的氨基酸序列是抗體，或與血管肽(Angiop印)-2(SEQIDNO97)或血管肽(Angiopep)-l(SEQIDNO67)有至少90%的同一性(例如，100%的同一性)。該多肽可以包括血管肽-2(SEQIDNO97)和序列RRHGTPRRLLFCQRSLLDKV(SEQIDNO:118)(例如，序列TFFYGGSRGKRNNFKTEETORHGTPRRLLFCQRSLLDKV(SEQIDNO:178))。在還有的一些實(shí)施方式中，能夠進(jìn)入特定細(xì)胞類(lèi)型中的氨基酸序列與血管肽-7(SEQIDNO112)有至少90%的同一性(例如，100%的同一性)。該組合物可以配制成脂質(zhì)體制劑。該脂質(zhì)體可以包括遞送載體(例如，本文所述的任何遞送載體)。該遞送載體可以在脂質(zhì)體的外表面上。該組合物中的任何一種都可以與藥學(xué)上可接受的載體(例如，本文所述的那些)一起配制。在另一方面，本發(fā)明的特征在于降低細(xì)胞中的MTl-MMP磷酸化的方法。該方法包括向該細(xì)胞給予上述方面的組合物(例如，本文所述的任何組合物)。該細(xì)胞可以在主體(對(duì)象、受驗(yàn)者，subject)(例如，人)中。在另一方面，本發(fā)明的特征在于治療(例如，預(yù)防性治療)以MTl-MMP活性提高為特征的疾病的方法。該方法包括向該主體給予足以治療該疾病(例如，癌癥、心臟或血管疾病、或關(guān)節(jié)炎)的量的第一方面的組合物(例如，本文所述的任何組合物)。在另一方面，本發(fā)明的特征在于治療(例如，預(yù)防性治療)患有癌癥的主體的方法。該方法包括向該主體給予足以治療癌癥(例如，選自以下所構(gòu)成的組中的癌癥腦癌、急性白血病、急性淋巴細(xì)胞白血病、急性髓細(xì)胞白血病、急性成髓細(xì)胞白血病、急性早幼粒細(xì)胞白血病、急性粒單核細(xì)胞白血病、急性單核細(xì)胞白血病、急性紅白血病、慢性白血病、慢性髓細(xì)胞白血病、慢性淋巴細(xì)胞白血病、真性紅細(xì)胞增多癥、霍奇金病、非霍奇金病、華氏巨球蛋白血癥(Waldenstrom，smacroglobulinemia)、重鏈病、纖維肉瘤、粘液肉瘤、脂肪肉瘤、軟骨肉瘤、成骨肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、內(nèi)皮肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管成內(nèi)皮肉瘤(Iymphangioendotheliosarcoma)、滑膜瘤、間皮瘤、尤文氏瘤(Ewing'stumor)、平滑肌肉瘤(leiomyosarcoma)、橫紋肌肉瘤、結(jié)腸癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、鱗狀細(xì)胞癌、基底細(xì)胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭狀癌、乳頭狀腺癌、囊腺癌、髓樣癌、支氣管癌、腎細(xì)胞癌、肝癌、膽管癌、絨癌、精原細(xì)胞瘤、胚胎癌、腎母細(xì)胞瘤(Wilm’stumor)、子宮頸癌、子宮癌、睪丸癌、肺癌、小細(xì)胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、顱咽管瘤、松果體瘤(pinealoma)、血管母細(xì)胞瘤、聽(tīng)神經(jīng)瘤、神經(jīng)鞘瘤、黑色素瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、肺癌、鱗狀細(xì)胞癌、腺癌、大細(xì)胞癌和結(jié)腸癌；或者選自以下構(gòu)成的組中的腦癌膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、星形細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、髓母細(xì)胞瘤(meduloblastoma)、少突神經(jīng)瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、室管膜瘤和腦膜瘤)的量的第一方面的組合物(例如，本文所述的任何組合物)。在另一方面，本發(fā)明的特征在于治療(例如，預(yù)防性治療)患有心臟病或血管病的主體的方法。該方法包括向主體給予足以治療該疾病(例如，其中，該血管病選自以下構(gòu)成的組動(dòng)脈粥樣硬化癥、再狹窄(restinosis)、腹主動(dòng)脈瘤(abdominalaorticaneurysm)、胸主動(dòng)脈瘤、頸動(dòng)脈疾病、外周動(dòng)脈疾病和腎動(dòng)脈疾病，或者其中，該心臟病是高血壓心臟病)的量的第一方面的組合物(例如，本文描述的任何組合物)。在另一方面，本發(fā)明的特征在于治療患有關(guān)節(jié)炎的主體的方法。該方法包括向該主體給予足以治療該關(guān)節(jié)炎(例如，骨關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，或本文所述的任何形式的關(guān)節(jié)炎)的量的第一方面的組合物(例如，本文描述的任何組合物)。在上述任何一種方法中，該主體可以是人。"MTI-MMP抑制劑”是指能夠使至少一種MTl-MMP活性降低(例如，至少1%、5%、10%,15%,25%,50%,75%,85%,90%,9%,98%,99%,99.9%)的化合物(例如，可溶性多肽或模擬多肽)。MTl-MMP活性包括激活proMMP-2和降解蛋白質(zhì)，該蛋白質(zhì)包括膠原I、膠原II、膠原III、明膠、纖連蛋白、Ln-Ι、玻連蛋白、聚集蛋白聚糖(aggrecan)、肌糖蛋白(tenascin)、巢蛋白(nidogen)、基底膜蛋白聚糖(perlecan)、纖維蛋白原/纖維蛋白、原纖蛋白、α1ΡΙ、α2M、Ln_5、⑶44和tTG。其它的MTl-MMP活性描述在本文中并且在本領(lǐng)域中是已知的。MTl-MMP抑制劑的“選擇性抑制”是指它能夠降低至少一種MTl-MMP活性(例如，通過(guò)結(jié)合MT1-MMP)，但基本上不降低其它蛋白質(zhì)(例如，其它膜金屬蛋白酶)的活性(例如，基本上不結(jié)合到其它蛋白質(zhì)上)?！斑f送載體”是指這樣的部分(moiety)或化合物，與不存在該部分或化合物(例如，多肽)的情況相比，當(dāng)連接到治療劑上時(shí)它們能夠促進(jìn)治療劑被運(yùn)送穿過(guò)生物屏障(例如，穿過(guò)細(xì)胞膜或穿過(guò)血腦屏障)。被“高效地運(yùn)送穿過(guò)BBB”的遞送載體是指能夠至少以與血管肽-6相同的效率穿過(guò)BBB(即，大于WO2008/144919描述的原位腦灌注試驗(yàn)中血管肽_1O50nM)的38.5%)的載體。因此，“沒(méi)有被高效地運(yùn)送穿過(guò)ΒΒΒ”的載體或結(jié)合物以較低水平運(yùn)送到大腦中(例如，以比血管肽-6低的效率運(yùn)送)。被“高效地運(yùn)送到特定細(xì)胞類(lèi)型中”的載體或結(jié)合物是指能夠在該細(xì)胞類(lèi)型中蓄積(積累，accumulate)(由于進(jìn)入該細(xì)胞運(yùn)送量的增加、從該細(xì)胞流出量的減少，或其結(jié)合)的載體或結(jié)合物，其蓄積程度至少比對(duì)照物質(zhì)，或者如果是結(jié)合物，則其蓄積程度至少較未結(jié)合試劑(例如，MTl-MMP抑制劑)，大10%(例如25%、50%、100%、200%、500%、1，000%,5,000%或10，000%)?！盎就恍浴被颉盎旧舷嗤笔侵付嚯幕蚨嗪塑账嵝蛄蟹謩e與參照序列具有相同的多肽或多核苷酸序列，或當(dāng)將該兩種序列進(jìn)行最佳比對(duì)時(shí)，該多肽或多核苷酸序列分別與參照序列內(nèi)相應(yīng)位置具有指定百分比的相同的氨基酸殘基或核苷酸。例如，與參照序列“基本上相同”的氨基酸序列與該參照氨基酸序列有至少50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的同一性。對(duì)于多肽，對(duì)比序列的長(zhǎng)度一般為至少5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、25、50、75、90、100、150、200、250、300或350個(gè)鄰接的氨基酸(例如，全長(zhǎng)序列)。對(duì)于核酸，對(duì)比序列長(zhǎng)度一般為至少5、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25個(gè)鄰接的核苷酸(例如，全長(zhǎng)核苷酸序列)。序列同一性可利用序列分析軟件在缺省設(shè)置下測(cè)量(例如，遺傳學(xué)計(jì)算機(jī)組序列分析軟件包，UniversityofWisconsinBiotechnologyCenter,1710UniversityAvenue,Madison,W153705)。通過(guò)指定與不同替代、缺失和其他修飾的同源程度，此種軟件可使相似序列匹配?！盎旧霞兊摹被颉胺蛛x的”是指已與其它化學(xué)組分分離的化合物(例如，多肽或結(jié)合物)。通常，當(dāng)該化合物以重量計(jì)至少30%不含其它組分時(shí)，該化合物是基本上純的。在某些實(shí)施方式中，該制劑以重量計(jì)至少50%,60%,75%,85%,90%,95%,96%,97%,98%或99%不含其它組分。純化的多肽可通過(guò)例如編碼此種多肽的重組多核苷酸的表達(dá)或通過(guò)化學(xué)合成該多肽而獲得。純度可通過(guò)任何合適的方法，例如柱色譜、聚丙烯酰胺凝膠電泳，或者通過(guò)HPLC分析測(cè)得。“提高(增大)”是指與對(duì)照值相比提高(增大)至少5%、10%、25%、25%、50%、75%、100%、150%、200%、500%或1000%?！皩?duì)照”是指與健康或正常主體(例如，未患癌癥或未患與MTl-MMP活性提高相關(guān)的疾病的主體)關(guān)聯(lián)的值或量。“治療”主體的疾病、障礙或病況是指通過(guò)向該主體給予治療劑減輕該疾病、障礙或病況的至少一種癥狀?！邦A(yù)防性治療”主體的疾病、障礙或病況是指通過(guò)在疾病出現(xiàn)之前，向主體給予治療劑來(lái)降低疾病、障礙或病況的發(fā)生頻率或嚴(yán)重性(例如，防止)?！坝行Я俊笔侵敢耘R床相關(guān)方式，單獨(dú)地或聯(lián)合另一種治療方案治療患者所需的化合物的量?！爸黧w”是指人或非人動(dòng)物(例如，哺乳動(dòng)物)?！把懿　笔侵概c血管結(jié)構(gòu)變化關(guān)聯(lián)的任何疾病。此種疾病包括動(dòng)脈粥樣硬化癥、8再狹窄、腹主動(dòng)脈瘤(AAA)、胸主動(dòng)脈瘤、頸動(dòng)脈疾病、外周動(dòng)脈疾病(PAD)和腎動(dòng)脈疾病。通過(guò)下面的詳細(xì)描述、附圖和權(quán)利要求，本發(fā)明的其它特征和優(yōu)點(diǎn)將變得明顯。圖1是示出MTl-MMP結(jié)構(gòu)以及M14、ACM-14和scACM_14多肽序列的示意圖。圖2是表明在植入到無(wú)胸腺裸鼠中時(shí)，不可磷酸化MTl-MMP在HT-1080纖維肉瘤細(xì)胞中的表達(dá)使這些細(xì)胞腫瘤生長(zhǎng)減速(減小，reduces)的一組圖片。圖3是示出細(xì)胞攝取scACM-14和ACM-14的一組顯微照片。圖4是Western印跡的照片，其示出MT1-MMP磷酸化受到ACM-14的抑制，但未受到scACM-14的抑制。圖5是示出在存在或不存在ACM-14或scACM-14的情況下，膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(U-87)、髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞(DAOY)、前列腺癌細(xì)胞(PC-3)、乳腺癌細(xì)胞(MDA-MB-231)、骨肉瘤細(xì)胞(MG-6;3)和纖維肉瘤細(xì)胞(HT-1080)的2D和3D培養(yǎng)物中腫瘤生長(zhǎng)的一組圖。在所有細(xì)胞中都觀察到在ACM-14的存在下三維腫瘤生長(zhǎng)減速。圖6是示出用單獨(dú)的媒劑(vehicle)、scACM_14，或ACM-14治療的無(wú)胸腺裸鼠的植入纖維肉瘤細(xì)胞的腫瘤尺寸的圖表。觀察到ACM-14治療顯著減小了腫瘤大小。圖7是示出接受單獨(dú)的媒劑、scACM-14,或ACM-14的帶有植入纖維肉瘤細(xì)胞的無(wú)胸腺裸鼠存活率的圖表。接受ACM-14的小鼠比接受媒劑或scACM-14的小鼠存活期長(zhǎng)。圖8是血管肽-ACM-14結(jié)合物的示意圖。具體實(shí)施例方式我們已發(fā)現(xiàn)，包含不可磷酸化(nonphosphorylatable)形式的膜型_1金屬蛋白酶(MTl-MMP)胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域的可溶性多肽能夠抑制MTl-MMP活性。因?yàn)镸Tl-MMP活性與包括癌癥、關(guān)節(jié)炎、纖維化和動(dòng)脈粥樣硬化細(xì)胞在內(nèi)的疾病相關(guān)聯(lián)，本文所述的MTl-MMP抑制劑可用于治療這些疾病。我們進(jìn)一步證明，MTl-MMP抑制性多肽在結(jié)合到能夠?qū)⒃摱嚯倪f送到細(xì)胞質(zhì)中的載體上時(shí)，能夠在給予哺乳動(dòng)物后抑制癌癥生長(zhǎng)。此種載體包括觸角足蛋白同源結(jié)構(gòu)域第三螺旋，其能夠穿透細(xì)胞膜。該MTl-MMP多肽/觸角足同源結(jié)構(gòu)域第三螺旋融合蛋白抑制腫瘤形成，并延長(zhǎng)患有癌癥腫瘤的小鼠存活期，從而提供了原理論證，即，此種蛋白質(zhì)可用于治療期望降低MTl-MMP活性的疾病，如癌癥、心臟和血管疾病及關(guān)節(jié)炎。MTI-MMP及其生物活性MTl-MMP是膜結(jié)合膠原酶。Itoh等人在JCellPhysiol206108，2006中描述了它的活性。MTl-MMP活性的提高與胞外基質(zhì)降解的提高和癌癥侵襲力、生長(zhǎng)和血管生成的提高關(guān)聯(lián)。MTl-MMP參與活化可降解基膜組分IV型膠原的膜金屬蛋白酶-2。除去催化結(jié)構(gòu)域的蛋白水解處理對(duì)MTl-MMP具有負(fù)性調(diào)節(jié)作用。這種處理導(dǎo)致MTl-MMP下調(diào)。MTl-MMP的底物包括膠原I、膠原II、膠原III、明膠、纖連蛋白、Ln_l、玻連蛋白、聚集蛋白聚糖、肌糖蛋白、巢蛋白、基底膜蛋白聚糖、纖維蛋白原/纖維蛋白、原纖蛋白、α1ΡΙ、α2Μ、Ln_5、CD44，和tTG(參見(jiàn)，例如，Hijova等人，BratislLekListy106127-132，2005)。Src激酶在Tyr573處將MTl-MMP磷酸化。當(dāng)用趨化鞘氨醇磷酸鹽(SlP)刺激時(shí)，HT-1080纖維肉瘤細(xì)胞中的MTl-MMP磷酸化增強(qiáng)。SlP增強(qiáng)了內(nèi)皮細(xì)胞轉(zhuǎn)移和分化成毛細(xì)管樣結(jié)構(gòu)的能力。進(jìn)一步地，當(dāng)用SlP刺激該細(xì)胞時(shí)，誘導(dǎo)磷酸化MTl-MMP對(duì)細(xì)胞周緣的亞細(xì)胞定位。最后，MTl-MMP的磷酸化對(duì)于腫瘤細(xì)胞在3D膠原基質(zhì)中生長(zhǎng)和腫瘤細(xì)胞的非錨定依賴性生長(zhǎng)(anchorage-independentgrowth)是重要的(Nyalendo等人，Carcinogenesis29:1655-1664,2008)。MTl-MMP和疾病MTl-MMP與涉及胞外基質(zhì)(ECM)蛋白降解的疾病有關(guān)系。例如，已證明MTl-MMP活性在腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲中有著重要的作用。MTl-MMP使得ECM蛋白(d’Ortho等人，EurJBiochem250:751_757，1997;Hiraoka等人，Cell95:365_377，1998;Pei等人，JBiolChem271:9135-9140,1996)以及許多細(xì)胞表面相關(guān)性粘附受體(Belkin等人，JBiolChem27618415-18422，2001；Kajita等人，JCellBiol153:893-904,2001)發(fā)生蛋白水解(proteolyse)。MTl-MMP在許多類(lèi)型的腫瘤中過(guò)度表達(dá)(Nakada等人，AmJPathol154，417-428，1999;Zhai等人，CancerRes65，6543-6550，2005)，并且由該酶介導(dǎo)的I型膠原纖維的密集交聯(lián)網(wǎng)狀物的胞周蛋白水解賦予腫瘤細(xì)胞以組織侵襲活性(Sabeh等人，JCellBiol167，769-781，2004)并維持在其他情況下生長(zhǎng)受限的三維(3D)基質(zhì)中的腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)(Hotary等人，Cell114，33-45，2003)。MTl-MMP表達(dá)也與包括骨關(guān)節(jié)炎和類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的關(guān)節(jié)炎有關(guān)系。關(guān)節(jié)炎的一個(gè)特征是軟骨中的ECM蛋白如膠原的降解。已在骨關(guān)節(jié)炎(Imai等人，AmJPathol151245-256,1997)和類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(Konttinen等人，AnnRheumDis58:691-697,1999)中觀察到可用作膠原酶的MTl-MMP水平升高。因而，MTl-MMP活性被認(rèn)為對(duì)關(guān)節(jié)炎病有影響。MTl-MMP活性也與血管病有關(guān)系。MTl-MMP在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的平滑肌細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中表達(dá)。MTl-MMP表達(dá)通過(guò)這些細(xì)胞中的促炎分子而上調(diào)(Tripathi等人，Circulation99:3103_3109，1999)。因?yàn)檠懿“▋?nèi)皮細(xì)胞和平滑肌結(jié)構(gòu)的變化，所以MTl-MMP被認(rèn)為涉及動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)展。MTl-MMP抑制劑本發(fā)明組合物包括MTl-MMP抑制劑，如能夠抑制MTl-MMP活性(如本文所述的任何MTl-MMP活性)的多肽或模擬肽。在某些實(shí)施方式中，該多肽包括與人MTl-MMP(RRHGTPRRLLYCQRSLLDKV；SEQIDNO117)的胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域基本上相同(例如，60%、70%,80%,85%,90%,95%,98%(同一性))的氨基酸序列。該多肽可以在與人MTl-MMP序列的573位置相對(duì)應(yīng)的位置處的酪氨酸上有替代、修飾或缺失。該酪氨酸可以用任何天然存在的氨基酸(例如，Ala、Arg,Asn、Asp、Cys,Gin、Glu、Gly、His、lie、Leu、Iys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp和Val)、非天然存在的氨基酸、或其修飾形式替代。在某些實(shí)施方式中，該酪氨酸用苯丙氨酸(例如，RRHGTPRRLLFCQRSLLDKV;SEQIDNO:118)替代。在其它實(shí)施方式中，該酪氨酸用酪氨酸類(lèi)似物替代。示例性酪氨酸類(lèi)似物描述在美國(guó)專(zhuān)利6，469，047和PCT公開(kāi)WO2002/085923中(圖26)。在其它實(shí)施方式中，該MTl-MMP抑制劑多肽包括與MTl-MMP胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域片段基本上相同的氨基酸序列。該片段可以在人MTl-MMP序列(例如，本文所述的那些)的Tyr573處有替代、修飾或缺失。在某些實(shí)施方式中，該片段具有從MTl-MMP胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域N-末端缺失的0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14，或15個(gè)氨基酸，從肌1-匪？胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域(-末端缺失的0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15個(gè)氨基酸，或其結(jié)合。在某些實(shí)施方式中，該片段在與人MTl-MMP序列的殘基573相對(duì)應(yīng)的位置處含有氨基酸。與人野生型序列相比，任何一種MTl-MMP抑制性多肽中可具有0、1、2、3、4、5、6或7個(gè)替代(例如，保守或非保守性替代)。在某些實(shí)施方式中，該多肽可以是模擬肽(例如，本文所述的那些)。遞送載體本文所述的MTl-MMP抑制性治療劑可以與能夠增強(qiáng)該治療劑到靶細(xì)胞(或多種靶細(xì)胞)的遞送或提高該治療劑穿過(guò)生物屏障如血腦屏障(BBB)的能力的遞送載體結(jié)合存在。遞送載體包括細(xì)胞穿透性肽、能夠被運(yùn)送穿過(guò)BBB的肽、和能夠增強(qiáng)到特定細(xì)胞類(lèi)型中的遞送的脂質(zhì)體。在某些實(shí)施方式中，多肽遞送載體與MTl-MMP抑制劑形成融合蛋白。在其它實(shí)施方式中，該遞送載體化學(xué)結(jié)合到MTl-MMP抑制劑上。細(xì)胞穿透性肽載體在某些實(shí)施方式中，該遞送載體是細(xì)胞穿透性肽。在細(xì)胞穿透性肽連結(jié)(coupled)到治療劑上后，此種肽能夠遞送該治療劑穿過(guò)細(xì)胞膜。在某些實(shí)施方式中，該細(xì)胞穿透性肽是觸角足蛋白同源結(jié)構(gòu)域第三螺旋(RQIKIWFQNRRMKWKK；SEQIDNO119)，或相關(guān)肽(例如，觸角足前導(dǎo)肽(CT)(KKffKMRRNQFffVKVQRG；SEQIDNO:120)、觸角足肽酰胺(RQIKIWFQNRRMKWKK-NH2；SEQIDNO121),和Cys(Npys)-觸角足肽酰胺(C(Npys)-RQIKIffFQNRRMKffKK-NH2:SEQIDNO:122))。在某些實(shí)施方式中，該肽是胞質(zhì)轉(zhuǎn)導(dǎo)肽(CTP)。此種肽描述在美國(guó)專(zhuān)利No.7，101，844中，并包括氨基酸序列YGRRARRRRRR(SEQIDNO123),YGRRARRRARR(SEQIDNO124)、YGRRARRAARR(SEQIDNO:125)、YKRKARRMRR(SEQIDNO:126)、YARKARRAARR(SEQIDNO:127)、YKRAARRAARR(SEQIDNO:128)、YEREARRAARR(SEQIDNO:129)、YAREARRAARR(SEQIDNO:130)、YGRAARRAARR(SEQIDNO:131)、YRRAARRAARA(SEQIDNO132)、YPRAARRAARR(SEQIDNO:133)、PARAARRAARR(SEQIDNO:134)、YGRRRRRRRRR(SEQIDNO:135)，和TORRRRRRRRR(SEQIDNO:136)。在其它實(shí)施方式中，該肽是HSV-1VP22、(Arg)9(SEQIDNO:137)、Cys(Npys)-(Arg)9(SEQIDNO:138)、Cys(Npys)-(D-Arg)9、[Cys58]105Y細(xì)胞穿透性肽(CSIPPEVKFNKPFVYLI;SEQIDNO:139)、肽105Y(SIPPEVKFNKPFVYLI;SEQIDNO:140)、抗菌肽(buforin)(TRSSRAGLQFPVGRVHRLLRK；SEQIDNO:141)、嵌合狂犬病病毒糖蛋白片段(RVG-9R)(YTIWMPENPRPGTPCDIFTNSRGKRASNGGGGRRRRRRRRR；SEQIDNO:142)、Cys(Npys)-TAT(47-57)(C(Npys)YGRKKRRQRRR-NH2；SEQIDNO:143)、Cys-TAT(47-57)(cygrkkrrqrrr-nh2；seqidno:i44)、脂質(zhì)膜轉(zhuǎn)位肽(kkaaavllpvllaap;seqidno:145)、D-異構(gòu)體-脂質(zhì)膜轉(zhuǎn)位肽(“AllD”KKAAAVLLPVLLAAP)、肥大細(xì)胞脫粒肽(inlkalaalakkil-nh2；seqidno:146)、肥大細(xì)胞脫粒肽7(inlkalaalakall-nh2；SEQIDNO147)、月巴大細(xì)胞脫粒肽X(INWKGIAAMAKKLL_NH2；SEQIDNO:148)、MEKl來(lái)源的肽抑制劑1(MPKKKPTPIQLNP；SEQIDNO149)、十四酰-MEKl來(lái)源的肽抑制劑1(Myr-MPKKKPTPIQLNP；SEQIDNO:150)、硬脂酰-MEK-I來(lái)源的肽抑制劑1酰胺(Ste-MPKKKPTPIQLNP-NH2；SEQIDNO:151)、膜滲透序列(MPS；AAVALLPAVLLALLAK；SEQIDNO152),HIV相關(guān)的MPG(GALFLGFLGAAGSTMGAWSQPKSKRKV；SEQIDNO153)、氨基肽酶N配體(CDi;3)、NGR肽(CNGRCG、Cysl-Cys5二硫橋；SEQIDNO:154)、NGR肽1(Cys-Asn-Gly-Arg-Cys-Gly-Gly-D-Lys-D-Leu-D-Ala-D-Lys-D-Leu-D-Ala-D-Lys-D-Lys-D-Leu-D-Ala-D-Lys-D-Leu-D-Ala-D-Lys-NH2(二硫橋1-5))、NGR肽2(CNGRCGGLVTT(二硫橋1-5)；SEQIDNO155)、NGR肽3(CNGRC-NH2(二硫橋1-5)；SEQIDNO156)、NGR肽4(Cys-Asn-Gly-Arg-Cys-Gly-Gly-D-Lys-D-Lys-D-Leu-D-Lys-D-Leu-D-Leu-D-Leu-D-Lys-D-Leu-D-Leu-OH(二硫橋1-5))、P印_1(Chariot;KETWWETffffTEWSQPKKKRKV；SEQIDNO:157)、SynBl(RGGRLSYSRRRFSTSTGRA；SEQIDNO:158)、生物素-TAT(47-57)(生物素-YGRKKRRQRRR；SEQIDNO:159)、TAT(47-57)(YGRKKRRQRRR；SEQIDNO:160)、TAT(47-57)GGG-Cys(Npys)(YGRKKRRQRRRGGG-C(Npys)-NH2；SEQIDNO:161)、TAT(48-57)(GRKKRRQRRR；SEQIDNO:162),Tat-C(48-57)(CGRKKRRQRRR；SEQIDNO:163)、透皮肽(ACSSSPSKHCG；SEQIDNO:164)、轉(zhuǎn)運(yùn)子(transportan)(GWTLNSAGYLLGKINLKALMLAKKIL；SEQIDNO:165)，和轉(zhuǎn)運(yùn)子10(AGYLLGKINLKALAALAKKIL-NH2；SEQIDNO:166)。能夠進(jìn)入或蓄積在細(xì)胞中的多肽載體我們已開(kāi)發(fā)出能夠進(jìn)入和蓄積在諸如肝、肺、腎、脾和肌肉等細(xì)胞類(lèi)型中的多肽。參見(jiàn)，例如，PCT公開(kāi)WO2008/144919。此種肽包括能夠進(jìn)入這些細(xì)胞類(lèi)型但無(wú)法高效地穿過(guò)血腦屏障的血管肽-7(TFFYGGSRGRRNNFRTEEY；SEQIDNO:112)。能夠進(jìn)入和蓄積在這些細(xì)胞類(lèi)型中的其它肽包括也可以穿過(guò)BBB的下述血管肽。在某些實(shí)施方式中，該多肽包括與血管肽-7基本上相同的氨基酸序列。該多肽可以包括與血管肽-7序列相比具有0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個(gè)氨基酸替代的序列，或可以是血管肽-7的片段(例如，能夠蓄積在選自由肝、肺、脾、肌肉或胰腺構(gòu)成的組的至少一種細(xì)胞類(lèi)型中的片段)。在某些實(shí)施方式中，該血管肽-7多肽可以包括N-末端或C-末端半胱氨酸殘基(例如，CTFFYGGSRGRRNNFRTEEY(SEQIDNO:115)和TFFYGGSRGRRNNFRTEEYC(SEQIDNO:116))。在某些實(shí)施方式中，該多肽包括具有下式的氨基酸序列X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X12-X13-X14-X15-X16-X17-X18-X19其中Χ1-Χ19Η^Ι^Π，Χ1-Χ6、Χ8、Χ9、Χ11-Χ14*Χ16-Χ19)中的每一個(gè)獨(dú)立地為任何氨基酸(例如，天然存在的氨基酸如Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gin、Glu、Gly、His、lie、Leu、Lys,Met,Phe,Pro,Ser,Thr,Trp,Tyr和Val)或不存在，并且X1、X10和X15中的至少1個(gè)(例如2或3個(gè))是精氨酸。在一些實(shí)施方式中，X7是Ser或Cys；或者XlO和X15各自獨(dú)立地為Arg或Lys。在一些實(shí)施方式中，來(lái)自包括Xl和X19在內(nèi)的XlX19的殘基與SEQIDNO:1-105和107-116(例如，血管肽-1、血管肽-2、血管肽-3、血管肽-4a、血管肽-4b、血管肽_5、血管肽-6和血管肽-7)中任何一個(gè)的氨基酸序列中的任何一個(gè)序列基本上相同。在一些實(shí)施方式中，氨基酸XlX19中至少1個(gè)(例如，2、3、4或5個(gè))是Arg。在一些實(shí)施方式中，該多肽在該多肽的N-末端、該多肽的C-末端，或者二者上具有一個(gè)或多個(gè)另外的半胱氨酸殘基。該多肽能夠蓄積在特定細(xì)胞類(lèi)型中，并且可以(或不可以)高效地穿過(guò)BBB。能夠穿過(guò)血腦屏障的遞送載體在某些實(shí)施方式中，該治療劑連接在能夠穿過(guò)血腦屏障的遞送載體上。此種多肽包括抑肽酶(aprotinin)來(lái)源的血管肽系列的肽及其類(lèi)似物，包括抑肽酶(例如，美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)2006/0189515中描述的)、抗體和本文所述的其它物質(zhì)。血管肽在某些實(shí)施方式中，該治療劑連接在與表1所列序列中的任何一個(gè)基本上相同的多肽或其片段上。此種多肽的具體實(shí)例是具有以下序列的那些，即，血管肽-1(SEQIDNO67)、血管肽-2(SEQIDNO:97)、血管肽-3(SEQIDNO:107)、血管肽_4a(SEQIDNO:108)、血管肽_4b(SEQIDNO:109)、血管肽-5(SEQIDNO:110)或血管肽_6(SEQIDNO:111)。該肽載體可以為任何長(zhǎng)度，例如，至少6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、25、35、50、75、100、200或500個(gè)氨基酸，或這些數(shù)值之間的任何范圍。在某些實(shí)施方式中，該肽載體的長(zhǎng)度可以為1050個(gè)氨基酸。該多肽可以通過(guò)重組基因技術(shù)或化學(xué)合成而產(chǎn)生。該多肽可以包含C-末端半胱氨酸、N-末端半胱氨酸或二者。表1示例性多肽序列號(hào)1TFVYGGCRAKRNNFKSAED2TFQYGGCMGNGNNFVTEKE3PFFYGGCGGNRNNFDTEEY4SFYYGGCLGNKNNYLREEE5TFFYGGCRAKRNNFKRAKY6TFFYGGCRGKRNNFKRAKY7TFFYGGCRAKKNNYKRAKY8TFFYGGCRGKKNNFKRAKY9TFQYGGCRAKRNNFKRAKY10TFQYGGCRGKKNNFKRAKY11TFFYGGCLGKRNNFKRAKY12TFFYGGSLGKRNNFKRAKY13PFFYGGCGGKKNNFKRAKY14TFFYGGCRGKGNNYKRAKY15PFFYGGCRGKRNNFLRAKY16TFFYGGCRGKRNNFKREKY17PFFYGGCRAKKNNFKRAKE18TFFYGGCRGKRNNFKRAKD19TFFYGGCRAKRNNFDRAKY20TFFYGGCRGKKNNFKRAEY21PFFYGGCGANRNNFKRAKY22TFFYGGCGGKKNNFKTAKY23TFFYGGCRGNRNNFLRAKY24TFFYGGCRGNRNNFKTAKY25TFFYGGSRGNRNNFKTAKY26TFFYGGCLGNGNNFKRAKY0100]27TFFYGGCLGNRNNFLRAKY0101]28TFFYGGCLGNRNNFKTAKY0102]29TFFYGGCRGNGNNFKSAKY0103]30TFFYGGCRGKKNNFDREKY0104]31TFFYGGCRGKRNNFLREKE0105]32TFFYGGCRGKGNNFDRAKY0106]33TFFYGGSRGKGNNFDRAKY0107]34TFFYGGCRGNGNNFVTAKY0108]35PFFYGGCGGKGNNYVTAKY0109]36TFFYGGCLGKGNNFLTAKY0110]37SFFYGGCLGNKNNFLTAKY0111]38TFFYGGCGGNKNNFVREKY0112]39TFFYGGCMGNKNNFVREKY0113]40TFFYGGSMGNKNNFVREKY0114]41PFFYGGCLGNRNNYVREKY0115]42TFFYGGCLGNRNNFVREKY0116]43TFFYGGCLGNKNNYVREKY0117]44TFFYGGCGGNGNNFLTAKY0118]45TFFYGGCRGNRNNFLTAEY0119]46TFFYGGCRGNGNNFKSAEY0120]47PFFYGGCLGNKNNFKTAEY0121]48TFFYGGCRGNRNNFKTEEY0122]49TFFYGGCRGKRNNFKTEED0123]50PFFYGGCGGNGNNFVREKY0124]51SFFYGGCMGNGNNFVREKY0125]52PFFYGGCGGNGNNFLREKY0126]53TFFYGGCLGNGNNFVREKY0127]54SFFYGGCLGNGNNYLREKY0128]55TFFYGGSLGNGNNFVREKY0129]56TFFYGGCRGNGNNFVTAEY0130]57TFFYGGCLGKGNNFVSAEY0131]58TFFYGGCLGNRNNFDRAEY0132]59TFFYGGCLGNRNNFLREEY0133]60TFFYGGCLGNKNNYLREEY0134]61PFFYGGCGGNRNNYLREEY0135]62PFFYGGSGGNRNNYLREEY0136]63MRPDFCLEPPYTGPCVARI0137]64ARIIRYFYNAKAGLCQTFV0138]65YGGCRAKRNNYKSAEDCMR66PDFCLEPPYTGPCVARIIRYFY67TFFYGGCRGKRNNFKTEEY68KFFYGGCRGKRNNFKTEEY69TFYYGGCRGKRNNYKTEEY70TFFYGGSRGKRNNFKTEEY71CTFFYGCCRGKRNNFKTEEY72TFFYGGCRGKRNNFKTEEYC73CTFFYGSCRGKRNNFKTEEY74TFFYGGSRGKRNNFKTEEYC75PFFYGGCRGKRNNFKTEEY76TFFYGGCRGKRNNFKTKEY77TFFYGGKRGKRNNFKTEEY78TFFYGGCRGKRNNFKTKRY79TFFYGGKRGKRNNFKTAEY80TFFYGGKRGKRNNFKTAGY81TFFYGGKRGKRNNFKREKY82TFFYGGKRGKRNNFKRAKY83TFFYGGCLGNRNNFKTEEY84TFFYGCGRGKRNNFKTEEY85TFFYGGRCGKRNNFKTEEY86TFFYGGCLGNGNNFDTEEE87TFQYGGCRGKRNNFKTEEY88YNKEFGTFNTKGCERGYRF89RFKYGGCLGNMNNFETLEE90RFKYGGCLGNKNNFLRLKY91RFKYGGCLGNKNNYLRLKY92KTKRKRKKQRVKIAYEE]FKNY93KTKRKRKKQRVKIAY94RGGRLSYSRRFSTSTGR95RRLSYSRRRFR96QIKIWFQNRRMKWKK97TFFYGGSRGKRNNFKTEEY98MRPDFCLEPPYTGPCVARIIRYFYNAKAGLCQTFVYGGCRAKRNNFKSAEDCMRTCGGA99TFFYGGCRGKRNNFKTKEY100RFKYGGCLGNKNNYLRLKY101TFFYGGCRAKRNNFKRAKY102NAKAGLCQTFVYGGCLAKRNNFESAEDCMRTCGGA103YGGCRAKRNNFKSAEDCMRTCGGA104GLCQTFVYGGCRAKRNNFKSAE105LCQTFVYGGCEAKRNNFKSA107TFFYGGSRGKRNNFKTEEY108RFFYGGSRGKRNNFKTEEY109RFFYGGSRGKRNNFKTEEY110RFFYGGSRGKRNNFRTEEY111TFFYGGSRGKRNNFRTEEY113CTFFYGGSRGKRNNFKTEEY114TFFYGGSRGKRNNFKTEEYC多肽No.5、67、76和91分別包括SEQIDNO:5、67、76和91序列，并在C-末端酰胺化。多肽No.107、109和110分別包括SEQIDNO:97、109和110序列，并在N-末端乙?；?。在某些實(shí)施方式中，該血管肽多肽能夠高效地穿過(guò)BBB并且包括具有下式的氨基酸序列X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X12-X13-X14-X15-X16-X17-X18-X19其中Χ1-Χ19Η^Ι^Π，Χ1-Χ6、Χ8、Χ9、Χ11-Χ14*Χ16-Χ19)中的每個(gè)都獨(dú)立地為任何氨基酸(例如，天然存在的氨基酸如Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gin、Glu、Gly、His、lie、Leu、Lys,Met、Phe,Pro、Ser,Thr,Trp,Tyr和Val)或不存在，并且XI、XlO和X15中至少1個(gè)(例如，2或3個(gè))是精氨酸。在一些實(shí)施方式中，X7是Ser或Cys；或者XlO和X15各自獨(dú)立地為Arg或Lys。在一些實(shí)施方式中，來(lái)自包括Xl和X19在內(nèi)的XlX19的殘基與SEQIDNO1-105和107-116(例如，血管肽_1、血管肽_2、血管肽_3、血管肽_4a、血管肽_4b、血管肽_5、血管肽-6和血管肽-7)中任何一個(gè)的氨基酸序列中的任何一個(gè)序列基本上相同。在一些實(shí)施方式中，氨基酸XlX19中的至少1個(gè)(例如，2、3、4或5個(gè))是Arg。在一些實(shí)施方式中，該多肽在該多肽的N-末端、該多肽的C-末端或者二者上具有一個(gè)或多個(gè)另外的半胱氨酸殘基。抗體在某些實(shí)施方式中，與能夠介導(dǎo)穿過(guò)BBB的轉(zhuǎn)胞吞作用的受體結(jié)合的抗體或抗體片段用作遞送載體，從而運(yùn)送MTl-MMP抑制劑穿過(guò)BBB。在結(jié)合到受體上后，該抗體可以被運(yùn)送穿過(guò)BBB。因此，當(dāng)該藥劑結(jié)合到此種抗體或以其它方式與此種抗體關(guān)聯(lián)時(shí)，可利用此種抗體運(yùn)送藥劑穿過(guò)BBB。這些抗體包括抗胰島素受體抗體(描述在美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)2004/0101904中)、抗轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體(Pardridge等人描述在Pharmacol.Exp.Ther.256:66-70,1991中)。靶向能夠介導(dǎo)轉(zhuǎn)胞吞作用的受體的另外的抗體可以利用本領(lǐng)域中熟知的方法生成。在某些實(shí)施方式中，該抗體是人抗體或人源化抗體其它肽可以用作遞送載體、能夠穿過(guò)BBB的其它肽包括狂犬病病毒糖蛋白(RVG;YTIWMPENPRPGTPCDIFTNSRGKRASNG；SEQIDNO:167)、p97、轉(zhuǎn)鐵蛋白、胰島素、受體相關(guān)蛋白(RAP)、組織型血纖維蛋白溶酶原激活劑(tPA)和乳鐵蛋白。能夠穿過(guò)BBB的LRP配體、胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF)、瘦素(1印tin)、低密度脂蛋白(LDL)也描述在美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)No.2003/0U9186和2004/0102369中。還有其它的肽，如淋病奈瑟氏菌(Neisseriagonorrhoeae)F62Laz蛋白(CSQEPAAPAAEATPAGEAPASEAPAAEAAPADAAEAPAA;SEQIDNO:168)的H.8區(qū)，或具有至少4個(gè)完全(perfect)或不完全(imperfect)AAEAP重復(fù)的肽描述在美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)No.2008/0213185中。此種肽能夠穿過(guò)BBB。還有其它的多肽包括含有Kunitz結(jié)構(gòu)域的多肽，如抑肽酶、比庫(kù)蛋白(bikunin)、β-淀粉樣前體蛋白和Kimitz抑制劑蛋白。脂質(zhì)體遞送系統(tǒng)該MTl-MMP抑制劑也可以利用脂質(zhì)體遞送到特定組織中。在某些實(shí)施方式中，該MTl-MMP抑制治療劑(例如，多肽)可利用免疫脂質(zhì)體遞送到特定細(xì)胞中。在這種途徑中，該多肽封裝在脂質(zhì)體(例如，本領(lǐng)域中已知的任何合適的脂質(zhì)體)中，其中該脂質(zhì)體在其外表面上結(jié)合到能夠結(jié)合到在靶細(xì)胞上表達(dá)的抗原的抗體上。在一個(gè)實(shí)施例中，該免疫脂質(zhì)體靶向癌細(xì)胞。此種免疫脂質(zhì)體可以使用抗-EGF受體抗體(例如，Mamot等人在CancerRes63:3154-61,2003描述的)、抗-HER2抗體(例如，Kirpotin等人在Biochemistry，3666-75,1997中描述的和Park等人在ProcNatlAcadSciUSA92:1327_1331，1995中描述的)、抗-MUCl抗體(例如，Moase等人在BiochimBiophysActa1510:43-55,2001中描述的)、抗-CC52抗體(Kamps等人在JDrugTarget8=235-45,2000中描述的)、抗神經(jīng)節(jié)苷脂G(M3)抗體(DH2)或抗-Le(χ)抗體(SHl)(例如，Nam等人描述在OncolRes11:9_16，1999中)。穿過(guò)BBB的遞送也可以類(lèi)似方式完成。例如，包含MTl-MMP抑制劑的脂質(zhì)體可以結(jié)合到針對(duì)能夠介導(dǎo)穿過(guò)BBB的轉(zhuǎn)胞吞作用的受體的抗體上。此種抗體為如上描述的，其包括抗轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體和抗胰島素受體抗體。多肽衍生物和模擬肽除了由天然存在的氨基酸組成的多肽之外，模擬肽或多肽類(lèi)似物也包括在本發(fā)明中，并可以形成用在本發(fā)明組合物中的遞送載體或MTl-MMP抑制劑。多肽類(lèi)似物通常作為非肽類(lèi)藥物用在藥物工業(yè)中，其與模板多肽具有類(lèi)似的性質(zhì)。該非肽類(lèi)化合物稱為“肽模擬物”或模擬肽(Fauchere等人，Infect.Immun.54:283-287,1986；Evansetal,J.Med.Chem.301229-1239，1987)。結(jié)構(gòu)上與治療有用的肽或多肽相關(guān)的肽模擬物可用來(lái)產(chǎn)生等效的或增強(qiáng)的治療或預(yù)防效果。一般地，模擬肽在結(jié)構(gòu)上與范例多肽(paradigmpolypeptide)(即，具有生物或藥物活性的多肽)如天然存在的受體結(jié)合的多肽相似，但具有一個(gè)或多個(gè)肽連鍵(P印tidelinkage)通過(guò)本領(lǐng)域已熟知的方法(Spatola，PeptideBackboneModifications,VegaData,1(3):267,1983；Spatola等人’LifeSci.381243-1249，1986；Hudson等人，Int.J.Pept.Res.14:177-185,197)；和ffeinstein.B.，1983,ChemistryandBiochemistry,ofAminoAcids,PeptidesandProteins,ffeinsteineds,MarcelDekker,New-York)可選地被諸如-CH2NH-,-CH2S-,-CH2-CH2-,-CH=CH-(順式和反式)、-CH2S0-、-CH(OH)CH2-、-COCH2-等連鍵所替換。與天然存在的多肽相比，此種多肽模擬物可具有明顯的優(yōu)點(diǎn)，包括生產(chǎn)更經(jīng)濟(jì)、化學(xué)穩(wěn)定性更高、藥理特性(例如，半衰期、吸收、藥效、效率)增強(qiáng)、抗原性降低及其它優(yōu)點(diǎn)。雖然本文所述的肽載體可以高效地穿過(guò)BBB或靶向特定細(xì)胞類(lèi)型(例如，本文所述的這些)，但蛋白酶的存在可能會(huì)降低其效力。同樣，可能會(huì)類(lèi)似地降低本發(fā)明中使用的MTl-MMP抑制劑的效力。血清蛋白酶具有特殊的底物要求，包括L-氨基酸和用于斷裂(cleavage)的肽鍵。此外，外肽酶代表血清中蛋白酶活性的最重要組分，通常作用于多肽的第一肽鍵且需要自由的N-末端(Powell等人，Pharm.Res.10:1洸8-1273，1993)。鑒于此，使用多肽的修飾形式(version)往往是有利的。經(jīng)修飾的多肽保留了原始L-氨基酸多肽的結(jié)構(gòu)特性，但有利地的是，不容易受到通過(guò)蛋白酶和/或外肽酶斷裂的影響。共有序列(consensussequence)的一個(gè)或多個(gè)氨基酸用相同類(lèi)型的D-氨基酸的系統(tǒng)替代(Systematicsubstitution)(例如，對(duì)映體；D-賴氨酸代替L-賴氨酸)可用于產(chǎn)生更加穩(wěn)定的多肽。因而，本文所述的多肽衍生物或模擬肽可以都是L-，都是D-，或混合的D，L多肽。N-末端或C-末端D-氨基酸的存在可提高多肽在體內(nèi)的穩(wěn)定性，這是因?yàn)殡拿笩o(wú)法利用D-氨基酸作為底物(Powell等人，Pharm.Res.10:1268_1273，1993)。反向-D多肽是包含布置在相對(duì)于含有L-氨基酸的多肽的反向序列中的D-氨基酸的多肽。因而，L-氨基酸多肽的C-末端殘基變成D-氨基酸多肽的N-末端，等等。反向D-多肽保留了與L-氨基酸多肽相同的三級(jí)構(gòu)象(tertiaryconformation)，因而保留了與L-氨基酸多肽相同的活性，但對(duì)在體外和體內(nèi)的酶促降解則更穩(wěn)定，因而比原始多肽具有更強(qiáng)的治療功效(BradyandDodson,Nature368:692-693,1994Jameson等人，Nature368:744_746，1994)。除了反向-D-多肽之外，也可以通過(guò)本領(lǐng)域所熟知的方法制備包含共有序列或基本相同的共有序列變異的約束多月太(受限多月太，constrainedpolypeptide)(RizoandGierasch,Ann.Rev.Biochem.61:387-418,1992)。例如，約束多肽可通過(guò)添加能夠形成二硫橋，從而形成環(huán)狀多肽的半胱氨酸殘基制備。環(huán)狀多肽沒(méi)有自由的N-或C-末端(termini)。因此，它們不易受到通過(guò)外肽酶的蛋白水解的影響，然而它們當(dāng)然易受內(nèi)肽酶的影響，內(nèi)肽酶不在多肽末端進(jìn)行斷裂。除了存在N-末端或C-末端的D-氨基酸殘基或它們的環(huán)狀結(jié)構(gòu)外，帶有N-末端或C-末端的D-氨基酸多肽和環(huán)狀多肽的氨基酸序列通常分別與它們對(duì)應(yīng)的多肽序列相同。含有分子內(nèi)二硫鍵的環(huán)狀衍生物可通過(guò)傳統(tǒng)的固相合成制備，而在選擇作為環(huán)化的位置，例如氨基和羧基末端并入合適的S-被保護(hù)的半胱氨酸或高半胱氨酸殘基(Sah等人，J.Pharm.Pharmacol.48:197，1996)。鏈組裝完成后，可通過(guò)(1)選擇性去除S-保護(hù)基，隨后使相應(yīng)的兩個(gè)游離SH-官能擔(dān)載氧化(on-functionofoxidation)，從而形成S-S鍵，接著從載體中常規(guī)地去除產(chǎn)物并進(jìn)行合適的純化程序，或(2)從載體中去除多肽并同時(shí)完成側(cè)鏈脫保護(hù)，接著在高度稀釋的水溶液中氧化游離的SH-官能，來(lái)進(jìn)行環(huán)化。含有分子內(nèi)酰胺鍵的環(huán)狀衍生物可以通過(guò)常規(guī)固相合成制備，同時(shí)在選擇用于環(huán)化的位置處并入合適的氨基和羧基側(cè)鏈被保護(hù)的氨基酸衍生物。含有分子內(nèi)-S-烷基鍵的環(huán)狀衍生物可以通過(guò)常規(guī)固相合成化學(xué)制備，同時(shí)在選擇用于環(huán)化的位置處并入具有合適的氨基-被保護(hù)的側(cè)鏈的氨基酸殘基和合適的S-被保護(hù)的半胱氨酸或高半胱氨酸殘基。賦予對(duì)作用于多肽N-末端或C-末端殘基的肽酶的抗性(resistance)的另一種有效方法是在多肽末端添加化學(xué)基團(tuán)，使得修飾的多肽不再是肽酶的底物。一種此類(lèi)化學(xué)修飾是在多肽的兩個(gè)末端中的任一末端或該兩個(gè)末端對(duì)它進(jìn)行糖基化。某些化學(xué)修飾，特別是N-末端糖基化，已證明可提高多肽在人血清中的穩(wěn)定性(Powell等人，Pharm.Res.101268-1273，1993)。提高血清穩(wěn)定性的其它化學(xué)修飾包括，但不限于，添加由120個(gè)碳原子的低級(jí)烷基組成的N-末端烷基基團(tuán)，例如乙?；?或添加C-末端酰胺或取代的酰胺基。特別地，本發(fā)明包括由帶有N-末端乙?；?或C-末端酰胺基的多肽組成的修飾多肽。本發(fā)明也包括其它類(lèi)型的多肽衍生物，其含有通常不是多肽部分的另外的化學(xué)部分，條件是該衍生物可保留該多肽的期望功能活性(functionalactivity)。此種衍生物的實(shí)例包括(1)氨基末端或另一個(gè)游離氨基的N-?；苌铮渲性擋；梢允峭轷；?例如，乙?；?、己?；?、辛酰基)、芳?；?例如，苯甲酰基)或封端基團(tuán)(blockinggroup)，如F-moc(芴甲基-0-C0-)；(2)羧基末端或另一個(gè)游離羧基或羥基的酯；(；3)羧基末端的酰胺或另一個(gè)游離羧基與氨或與合適的胺反應(yīng)制得的酰胺；(4)磷酸化衍生物；(結(jié)合到抗體或其它生物配體上的衍生物及其它類(lèi)型的衍生物。本發(fā)明也包括通過(guò)在本文所述多肽中加入另外的氨基酸殘基形成的較長(zhǎng)的多肽序列。預(yù)期此種較長(zhǎng)的多肽序列與上述多肽具有相同的生物活性和專(zhuān)化性(例如，細(xì)胞嗜性)。雖然不排除具有大量另外氨基酸的多肽，但已認(rèn)識(shí)到一些較大的多肽可能會(huì)呈現(xiàn)遮蔽有效序列的構(gòu)象，從而妨礙與靶的結(jié)合。這些衍生物可充當(dāng)競(jìng)爭(zhēng)性拮抗劑。因而，雖然本發(fā)明包括具有延伸(extension)的本文所述的多肽或多肽衍生物，但期望該延伸不會(huì)破壞多肽或其衍生物的細(xì)胞靶向活性。包括在本發(fā)明中的其它衍生物是由本文所述的兩個(gè)相同，或兩個(gè)不同多肽組成的雙重多肽，其中該兩個(gè)多肽彼此直接或通過(guò)間隔物(spacer)共價(jià)連接，例如通過(guò)丙氨酸殘基的短鏈(短區(qū)段，shortstretch)或通過(guò)蛋白質(zhì)水解的推定位點(diǎn)(例如，通過(guò)組織蛋白酶，參見(jiàn)例如美國(guó)專(zhuān)利No.5，126，249和歐洲專(zhuān)利No.495049)共價(jià)連接。本文所述多肽的多聚體由相同或不同多肽或其衍生物形成的分子聚合物組成。本發(fā)明也包括多肽衍生物，該多肽衍生物是嵌合或融合蛋白，其含有在其氨基或羧基末端或該兩端處連接到不同蛋白質(zhì)的氨基酸序列上的本文所述的多肽或其片段。此種嵌合或融合蛋白可以通過(guò)編碼該蛋白質(zhì)的核酸重組表達(dá)生成。例如，嵌合或融合蛋白可以包含與所述多肽中的一種共享的至少6個(gè)氨基酸，該多肽期望形成具有相當(dāng)或較高功能活性的嵌合或融合蛋白。識(shí)別模擬肽的試驗(yàn)如上所述，產(chǎn)生用于模擬本文所述多肽的骨架結(jié)構(gòu)和藥效團(tuán)表現(xiàn)的非肽類(lèi)化合物(模擬肽)，通常具有更高的代謝穩(wěn)定性、更高的效力、更長(zhǎng)的作用持久性和更佳的生物利用率。模擬肽化合物可以利用本領(lǐng)域已知的組合文庫(kù)方法的許多途徑中的任一種獲得，包括生物學(xué)文庫(kù)、可空間尋址并行的(spatiallyaddressableparallel)固相或液相文庫(kù)、需要解卷積(requiringdeconvolution)的合成文庫(kù)、“一珠一化合物”(one-beadone-compound)文庫(kù)方法，以及利用親和層析選擇的合成文庫(kù)方法。生物學(xué)文庫(kù)途徑局限于肽文庫(kù)，而其它四個(gè)途徑可適用于肽、非肽低聚體或化合物的小分子文庫(kù)(Lam，AnticancerDrugDes.12:145,1997)。合成分子文庫(kù)的方法實(shí)例可在本領(lǐng)域中找到，例如，在以下文獻(xiàn)中找到DeWitt等人，(Proc.NatlAcad.Sci.USA90:6909,1993)；Erb等人，(Proc.NatlAcad.Sci.USA91:11422,1994)；Zuckermann等人，(J.Med.Chem.37:2678，1994)；Cho等人，(Science261:1303,1993)；Care11等人，(Angew.Chem,Int.Ed.Engl.33:2059,1994andibid2061)；以及在Gallop等人，(Med.Chem.37:1233，1994)?；衔镂膸?kù)可存在于溶液中(例如,Houghten，Biotechniques13:412-421,1992)或珠體(Lam,Nature35482-84，1991)、芯片(碎片，chips)(Fodor,Nature364:555_556，1993)、細(xì)菌或孢子(美國(guó)專(zhuān)利5，223，409)、質(zhì)粒(Cull等人，Proc.NatlAcad.Sci.USA891865-1869，1992)或噬菌體(ScottandSmith,Science249:386_390，1990)，或螢光素酶上，以及通過(guò)確定適當(dāng)?shù)孜锵虍a(chǎn)物的轉(zhuǎn)化而檢測(cè)的酶標(biāo)記上。一旦本文中所述的多肽被識(shí)別，就能夠分離并通過(guò)任何多種標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行純化，包括但不限于，差異溶解度(如沉淀法)、離心法、色譜法(如親合性、離子交換和體積排阻)、或通過(guò)任何用于純化肽、肽模擬物或蛋白的其它標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)。所識(shí)別的感興趣多肽的功能性質(zhì)可以采用任何本領(lǐng)域內(nèi)已知的功能性分析法進(jìn)行評(píng)價(jià)。理想地，采用評(píng)價(jià)胞內(nèi)信號(hào)傳遞的下游受體功能的分析法(如細(xì)胞增殖)。例如，本發(fā)明的肽模擬物化合物可以采用以下三階段方法獲得(1)掃描本文中所述多肽以識(shí)別靶向本文中所述特定細(xì)胞類(lèi)型所必需的二級(jí)結(jié)構(gòu)的區(qū)域；(2)采用構(gòu)象上受約束的二肽替代物來(lái)精修骨架幾何結(jié)構(gòu)并提供對(duì)應(yīng)于這些替代物的有機(jī)平臺(tái)；和(3)采用最佳有機(jī)平臺(tái)來(lái)表現(xiàn)設(shè)計(jì)用于模擬所需天然多肽活性的候選物文庫(kù)中的有機(jī)藥效團(tuán)。更詳細(xì)地，三階段法如下所述。在階段1中，掃描主要的候選多肽并消減其結(jié)構(gòu)以識(shí)別其活性必要的條件。合成一系列原始多肽的多肽類(lèi)似物。在階段2中，采用構(gòu)象上受約束的二肽替代物來(lái)探究最佳多肽類(lèi)似物。吲哚里西啶-2-酮(indolizidin-2-one)、吲哚里西啶-9-酮和喹啉里西啶酮(quinolizidinone)氨基酸(分別為I2aa、I9aa和Qaa)用作研究最佳肽候選物的骨架幾何結(jié)構(gòu)的平臺(tái)。這些和相關(guān)的平臺(tái)(綜述于文獻(xiàn)Halabetal,Biopolymers55101-122，2000和Hanessianetal.，Tetrahedron5312789-12854，1997中)可以在多肽的特定區(qū)域引入而在不同方向上定向藥效團(tuán)。這些類(lèi)似物的生物學(xué)評(píng)價(jià)識(shí)別出模擬活性所必需的幾何條件的改善的前導(dǎo)多肽(leadpolypeptides)。在階段3中，最具活性的前導(dǎo)多肽的平臺(tái)用于表現(xiàn)產(chǎn)生天然肽活性的藥效團(tuán)的有機(jī)替代物。藥效團(tuán)和支架結(jié)合為并行合成形式。多肽的衍生化和上述階段可通過(guò)采用本領(lǐng)域內(nèi)已知方法的其它方式完成。由文中所述的多肽、多肽衍生物、肽模擬物或其它小分子確定的結(jié)構(gòu)功能關(guān)系可用于精修和制備具有類(lèi)似或更好性能的類(lèi)似分子結(jié)構(gòu)。因此，本發(fā)明的化合物也包括共享本文中所述多肽的結(jié)構(gòu)、極性、電荷特性和側(cè)鏈性質(zhì)的分子。總之，基于本文的公開(kāi)內(nèi)容，本領(lǐng)域的技術(shù)人員能夠開(kāi)發(fā)出適用于識(shí)別將藥劑靶向特定細(xì)胞類(lèi)型(如本文中描述的那些)的化合物的肽和肽模擬物篩選分析法。本發(fā)明的分析法可以開(kāi)發(fā)用于低通量、高通量或超高通量篩選形式。本發(fā)明的分析法包括適用于自動(dòng)化的分析法。連接子(接頭，linkers)在MTl-MMP共價(jià)結(jié)合到遞送載體上的實(shí)施方式中，該MTl-MMP抑制劑可以直接(例如，通過(guò)共價(jià)鍵如肽鍵)或可以通過(guò)接頭結(jié)合到遞送載體上。連接子包括化學(xué)連接劑20(例如，可斷裂的連接子)和肽。在一些實(shí)施方式中，連接子是化學(xué)連接劑。MTl-MMP抑制劑(例如，多肽或肽模擬物)和載體肽可以通過(guò)巰基、氨基(胺)和/或碳水化合物或任何合適的反應(yīng)性基團(tuán)結(jié)合。同雙官能性(homobifunctional)和雜雙官能性交聯(lián)連接子(結(jié)合劑)可從多種商業(yè)來(lái)源獲得?？捎糜诮宦?lián)的區(qū)域可在本發(fā)明的多肽上找到。交聯(lián)連接子可以包含柔性臂(flexible&1~111)，例如，2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、或15個(gè)碳原子。示例性的交聯(lián)連接子包括BS3([雙(磺基琥珀酰亞胺基)辛二酸酯]；BS3是靶向可接近的伯胺的同雙官能N-羥基琥珀酰亞胺酯)、NHS/EDC(N-羥基琥珀酰亞胺和1-乙基-3-[3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺；NHS/EDC容許伯胺基團(tuán)結(jié)合羧基)、磺基-EMCS([N-e-馬來(lái)酰亞胺基己酸]酰胼；磺基-EMCS是對(duì)巰基和氨基具有反應(yīng)性的雜雙官能反應(yīng)基(馬來(lái)酰亞胺和NHS-酯))、酰胼(大多數(shù)蛋白包含暴露的碳水化合物而酰胼是適用于將羧基連接至伯胺的有用試劑)和SATA(N-琥珀酰亞胺基-S-乙酰基硫代乙酸酯；SATA對(duì)胺具有反應(yīng)性并加入被保護(hù)的巰基)。為了形成共價(jià)鍵，可采用各種活性羧基(例如酯)作為化學(xué)反應(yīng)性基團(tuán)，其中羥基部分在修飾肽所需的水平下為生理上可接受的。具體試劑包括N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)、N-羥基-磺基琥珀酰亞胺(磺基-NHS)、馬來(lái)酰亞胺-苯甲?；?琥珀酰亞胺(MBS)、γ-馬來(lái)酰亞胺基-丁酰氧基琥珀酰亞胺酯(GMBS)、馬來(lái)酰亞胺基丙酸(MPA)、馬來(lái)酰亞胺基己酸(MHA)和馬來(lái)酰亞胺基i^一酸(MUA)。伯胺是NHS酯的主要靶。存在于蛋白N-端的可接近的α-胺基和賴氨酸的ε-胺與NHS酯發(fā)生反應(yīng)。酰胺鍵在NHS酯結(jié)合反應(yīng)與釋放N-羥基琥珀酰亞胺的伯胺反應(yīng)時(shí)形成。這些含反應(yīng)基的琥珀酰亞胺在本文中稱之為琥珀酰亞胺基。在本發(fā)明的某些實(shí)施方式中，在蛋白上的官能團(tuán)是硫醇基團(tuán)而化學(xué)反應(yīng)性基團(tuán)是含馬來(lái)酰亞胺基的基團(tuán)如Y-馬來(lái)酰亞胺-丁酰胺(GMBA或ΜΡΑ)。這種含馬來(lái)酰亞胺基的基團(tuán)在本文中稱之為馬來(lái)酰亞胺基。馬來(lái)酰亞胺基當(dāng)反應(yīng)混合物ρΗ為6.5-7.4時(shí)對(duì)于肽上的巰基最具選擇性。在ρΗ為7.0時(shí)，馬來(lái)酰亞胺基與巰基(例如，蛋白質(zhì)如血清白蛋白或IgG上的硫醇)的反應(yīng)速率比與胺反應(yīng)快1000倍。因此，馬來(lái)酰亞胺基和巰基之間的穩(wěn)定硫醚連接能夠形成。在其他實(shí)施方式中，連接子包含至少一個(gè)氨基酸(如至少2、3、4、5、6、7、10、15、20、25、40、或50個(gè)氨基酸的肽)。在某些實(shí)施方式中，連接子是單個(gè)氨基酸(例如，任何天然存在的氨基酸，如Cys)。在其他實(shí)施方式中，使用富含甘氨酸的肽，如具有序列Kny-Gly-Gly-Gly-Ser]n的肽，其中η為1、2、3、4、5或6，其描述于美國(guó)專(zhuān)利No.7，271，149中。在其他實(shí)施方式中，使用富含絲氨酸的肽連接子，其描述于美國(guó)專(zhuān)利No.5，525，491中。富含絲氨酸的肽連接子包括式[X-X-X-X_Gly]y的那些，其中多達(dá)2個(gè)χ是Thr，而其余X是Ser，且y為15(例如，Ser-Ser-Ser-Ser-Gly(SEQIDNO175)，其中y大于1)。在一些情況下，連接子是單個(gè)氨基酸(如任何氨基酸，如Gly或Cys)。合適連接子的實(shí)例有琥珀酸、Lys,Glu和Asp，或二肽如Gly-Lys。當(dāng)連接子是琥珀酸時(shí)，其一個(gè)羧基可以與氨基酸殘基的氨基形成酰胺鍵，而其另一羧基可以例如與肽或取代基的氨基形成酰胺鍵。當(dāng)這種連接子是Lys、Glu或Asp時(shí)，其羧基可以與氨基酸殘基的氨基形成酰胺鍵，其氨基可以例如與取代基的羧基形成酰胺鍵。當(dāng)Lys用作連接子時(shí)，另一連接子可以插入Lys的氨基和取代基之間。在一個(gè)具體實(shí)施方式中，另一連接子是琥珀酸，例如其與Lys的ε-氨基和取代基中存在的氨基形成酰胺鍵。在一個(gè)實(shí)施方式中，另一連接子是Glu或Asp(例如其與Lys的ε-氨基形成酰胺鍵并與取代基中存在的羧基形成另一酰胺鍵)，即，這種取代基是N、?；嚢彼釟埢?。疾病治療因?yàn)镸Tl-MMP與包括癌癥、心臟或血管疾病及關(guān)節(jié)炎在內(nèi)的疾病有關(guān)，所以本文所述的MTl-MMP抑制劑和包括該抑制劑的組合物(例如，藥物組合物)可以用于治療(例如，預(yù)防性治療)其中期望MTl-MMP抑制的任何疾病?？梢愿鶕?jù)本發(fā)明進(jìn)行治療的示例性癌癥包括諸如以下的癌癥膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、星形細(xì)胞瘤、髓母細(xì)胞瘤、顱咽管瘤、室管膜瘤、松果體瘤、血管母細(xì)胞瘤、聽(tīng)神經(jīng)瘤、少突神經(jīng)瘤、神經(jīng)鞘瘤、腦膜瘤、黑色素瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、白血病(例如，急性白血病、急性淋巴細(xì)胞白血病、急性髓細(xì)胞白血病、急性成髓細(xì)胞白血病、急性早幼粒細(xì)胞白血病、急性粒單核細(xì)胞白血病、急性單核細(xì)胞白血病、急性紅白血病、慢性白血病、慢性髓細(xì)胞白血病、慢性淋巴細(xì)胞白血病)、肺癌(例如，鱗狀細(xì)胞癌、腺癌、或大細(xì)胞癌)、結(jié)腸直腸癌、卵巢癌(例如，卵巢腺癌)、前列腺癌、真性紅細(xì)胞增多癥、淋巴瘤(霍奇金病、非霍奇金病)、華氏巨球蛋白血癥、重鏈病，和實(shí)體瘤如肉瘤和癌(例如，纖維肉瘤、粘液肉瘤、脂肪肉瘤、軟骨肉瘤、成骨肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、內(nèi)皮肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管成內(nèi)皮肉瘤、滑膜瘤、間皮瘤、尤文氏瘤、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、結(jié)腸癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、鱗狀細(xì)胞癌、基細(xì)胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭狀癌、乳頭狀腺癌、囊腺癌、髓樣癌、支氣管癌、腎細(xì)胞癌、肝癌、膽管癌、絨癌、精原細(xì)胞瘤、胚胎癌、腎母細(xì)胞瘤、子宮頸癌、子宮癌、睪丸癌、肺癌、小細(xì)胞肺癌、膀胱癌和上皮癌。在一些情況下，該癌癥是腦癌(例如，膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、星形細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、髓母細(xì)胞瘤以及少突神經(jīng)瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、室管膜瘤和腦膜瘤)?？衫帽景l(fā)明組合物治療的關(guān)節(jié)炎類(lèi)型包括骨關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、幼年類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性多肌痛和強(qiáng)直性脊柱炎。可利用本發(fā)明組合物治療的心臟和血管疾病包括高血壓心臟病、動(dòng)脈粥樣硬化癥、再狹窄、腹主動(dòng)脈瘤(AAA)、胸主動(dòng)脈瘤、頸動(dòng)脈疾病、外周動(dòng)脈疾病(PAD)和腎動(dòng)脈疾病。劑型、給予和劑量本發(fā)明的特征還在于含有治療有效量的本發(fā)明MTA-MMP抑制性化合物的藥物組合物。這種組合物能夠配制用于各種藥物遞送系統(tǒng)。一種或多種生理可接受的賦形劑或載體也可包含在用于合適劑型的組合物中。用于本發(fā)明中的合適劑型可見(jiàn)于Remington’sPharmaceuticalSciences,MackPublishingCompany,Philadelphia,PA,17thed.,1985。對(duì)于藥物遞送方法的簡(jiǎn)單綜述，參見(jiàn)，例如，LangerGcience2491527-1533，1990)。藥物組合物旨在用于非腸道、鼻內(nèi)、外用(topical)、口服或局部(local)給予，如通過(guò)透皮途徑，用于預(yù)防和/或治療性治療。這種藥物組合物可通過(guò)非腸道(例如，經(jīng)過(guò)靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)或皮下注射)或通過(guò)口服消化或通過(guò)在受到血管或癌癥影響的區(qū)域局部涂用或關(guān)節(jié)內(nèi)注射而給予。其它給予途徑包括脈管內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、瘤內(nèi)、腹膜內(nèi)、腔室內(nèi)、硬膜內(nèi)、以及鼻、眼、鞏膜內(nèi)、眼窩內(nèi)、直腸、外用或霧化吸入給予。緩釋給予也特別地包含在本發(fā)明中，例如借助于儲(chǔ)藥池注射(Cbpotinjections)或易蝕移植物或組分。因此本發(fā)明提供用于非腸道給予的組合物，其包含上述溶解于或懸浮于可接受載體，優(yōu)選水性載體，如水、緩沖水、鹽水、PBS等中的藥劑。組合物可以包含近似生理?xiàng)l件所需的藥用輔助物質(zhì)，如pH調(diào)節(jié)和緩沖劑、張力調(diào)節(jié)劑、潤(rùn)濕劑、洗滌劑等。本發(fā)明也提供了用于口服遞送的組合物，其可以包含用于配制片劑、膠囊等的惰性成分，如粘合劑或填料。而且，本發(fā)明提供了用于局部給予的組合物，其可以包含用于配制霜?jiǎng)?、油膏等的惰性成分，如溶劑或乳化劑。這些組合物可以通過(guò)傳統(tǒng)的滅菌技術(shù)滅菌，或可以進(jìn)行無(wú)菌過(guò)濾。所得的水性溶液可以就此包裝待用，或凍干，凍干的制劑與無(wú)菌水性載體在給予之前合并。制劑的PH值典型地為311，59或68(例如78或77.5)。固體形式的所得組合物可以包裝于多個(gè)單劑量單元中，每個(gè)包含固定量的上述一種藥劑或多種藥劑，如包裝在片劑或膠囊的密封包裝中。固體形式的組合物也能以靈活的量包裝于容器中，如包裝于設(shè)計(jì)用于外用霜?jiǎng)┗蛴透嗟臄D壓管中。含有有效量的組合物可以給予用于預(yù)防性或治療性治療。在預(yù)防應(yīng)用中，可向臨床上確定對(duì)于MTl-MMP活性相關(guān)的疾病具有傾向性或易感性提高的主體給予組合物。本發(fā)明的組合物可按照足以延緩、降低或優(yōu)選防止臨床疾病發(fā)作的量向患者(如人)給予。在治療應(yīng)用中，向已經(jīng)患有疾病的主體(如人)以足以治愈或至少部分抑制病癥癥狀及其綜合癥的量給予組合物。足以實(shí)現(xiàn)這個(gè)目的的量定義為“治療有效量”，即，足以基本上改善一些與疾病或醫(yī)學(xué)病癥相關(guān)的癥狀的化合物的量。例如，在與MTl-MMP活性相關(guān)的疾病(本文中描述的那些)的預(yù)防性治療中，降低、預(yù)防、延緩、抑制或遏制這種疾病或病癥的任何癥狀的藥劑或化合物是治療上有效的。治療有效量的藥劑或化合物并不需要治愈疾病或病癥，但是將會(huì)提供對(duì)疾病或病癥的治療使得這種疾病或病癥的發(fā)作得以延緩、阻滯或防止，或使這種疾病或病癥的癥狀被改善，或使這種疾病或病癥的期限被改變或者例如在個(gè)體中變得不太嚴(yán)重或恢復(fù)加速。本文所述組合物的有效量可取決于疾病或病癥的嚴(yán)重程度和患者的體重和總體狀態(tài)，但通常范圍為約0.05μg至約lg(例如，0.5-100mg)當(dāng)量的一種藥劑或多種藥劑/劑量/患者。初始給予和增強(qiáng)給予的合適方案典型地為初始給予然后是以一或多小時(shí)、天、星期或月間隔后續(xù)給予重復(fù)劑量。本發(fā)明組合物中存在的藥劑的總有效量可以單劑量，作為丸劑或通過(guò)在相對(duì)較短的時(shí)期內(nèi)輸注而給予哺乳動(dòng)物，或可采用分級(jí)治療方案(fractionaltreatmentprotocol)進(jìn)行給予，其中多劑量在更加延長(zhǎng)的時(shí)期內(nèi)(如每4-6,8-12,14-16或18-小時(shí)一次，或每2_4天、1_2星期一次，每月一次的劑量)給予?？商鎿Q地，足以維持血液中治療有效濃度的連續(xù)靜脈輸注被考慮在內(nèi)。在本發(fā)明組合物中存在的和在用于哺乳動(dòng)物(如人)的本發(fā)明方法中使用的一種或多種藥劑的治療有效量可通過(guò)普通的技術(shù)人員考慮哺乳動(dòng)物的年齡、體重和病癥的個(gè)體差異而確定。本發(fā)明的藥劑以有效量向主體(如哺乳動(dòng)物，如人)給予，有效量是在受治療主體中產(chǎn)生所需療效(如MTl-MMP活性降低)的量。治療有效量也可由本領(lǐng)域的技術(shù)人員經(jīng)驗(yàn)性確定?；颊咭部山邮芊秶诩s0.05至Ig劑量1次或多次/星期(如2、3、4、5、6、或7或更多次/星期)、0.1至2，500(如2，000、1，500、1，000、500、100、10、1、0.5或0.1)μg劑量/星期的藥劑?；颊咭部山邮芊秶鸀槊?jī)尚瞧诨蛉瞧谝淮蔚拿縿┝?.1至3，OOOyg的組合物藥劑。單次或多次給予包含有效量的本發(fā)明組合物可通過(guò)治療醫(yī)師所選的劑量水平和方式實(shí)施。劑量和給予方案可基于患者疾病或病癥的嚴(yán)重程度進(jìn)行確定和調(diào)節(jié)，這可以根據(jù)臨床醫(yī)師常用的或本文中所描述的方法在整個(gè)療程中進(jìn)行監(jiān)控。本發(fā)明的化合物可以結(jié)合傳統(tǒng)治療方法或療法使用或獨(dú)立于傳統(tǒng)治療方法或療法使用。當(dāng)本發(fā)明的化合物結(jié)合采用其它藥劑的療法給予時(shí)，它們可以按序或同時(shí)向個(gè)體給予?？商鎿Q地，根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物可由本發(fā)明化合物連同本文中描述的藥用賦形劑、本領(lǐng)域內(nèi)已知的另一種治療或預(yù)防藥劑的組合構(gòu)成。聯(lián)合療法本發(fā)明組合物可以與本領(lǐng)域中已知的任何其它治療方案一起配制和給予。例如，當(dāng)利用本發(fā)明組合物治療癌癥時(shí)，可將該組合物連同本領(lǐng)域中已知的任何抗增殖劑(如，本文所述的那些)一起給予。治療癌癥的另外治療劑包括下表2給出的這些。表權(quán)利要求1.一種包含可溶性多肽的組合物，所述多肽包含與膜型1基質(zhì)金屬蛋白酶(MTl-MMP)基本上相同的氨基酸序列或其片段，其中，所述多肽能夠抑制MTl-MMP活性。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中，所述多肽選擇性地抑制MTl-MMP活性。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中，所述氨基酸序列在與人MTl-MMP序列的573位置對(duì)應(yīng)的氨基酸位置處缺少可磷酸化的酪氨酸。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的組合物，其中，所述氨基酸序列在所述573位置處具有替代、缺失或修飾。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的組合物，其中，所述替代是苯丙氨酸。6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的組合物，其中，相比于人MTl-MMP的胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域序列，所述氨基酸序列具有0、1、2、3、4、5、6或7個(gè)替代。7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的組合物，其中，所述氨基酸序列與人MTl-MMP的胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域序列、或在與人MTl-MMP序列的位置573對(duì)應(yīng)的位置處具有缺失、替代或修飾的人MTl-MMP的胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域序列具有至少80%的同一性。8.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)所述的組合物，其中，所述氨基酸序列是RRHGTPRRLLFCQRSLLDKV(SEQIDNO:118)或其MT1-MMP抑制性片段。9.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的組合物，其中，所述多肽進(jìn)一步包含能夠穿透細(xì)胞膜、能夠進(jìn)入特定細(xì)胞類(lèi)型或能夠穿過(guò)血腦屏障(BBB)的氨基酸序列。10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的組合物，其中，所述能夠穿透細(xì)胞膜的氨基酸序列與選自由以下構(gòu)成的組中的多肽基本上相同觸角足蛋白同源結(jié)構(gòu)域第三螺旋(SEQIDNO119),觸角足前導(dǎo)肽(CT)(SEQIDNO:120)、觸角足肽酰胺(SEQIDNO121)、Cys(Npys)-觸角足肽酰胺(SEQIDNO:122)、胞質(zhì)轉(zhuǎn)導(dǎo)肽(CTP)、HSV-1VP22、(Arg)9(SEQIDNO:137)、Cys(Npys)-(Arg)9(SEQIDNO138)、Cys(Npys)-(D_Arg)9、[Cys58]105Y細(xì)胞穿透性肽(SEQIDNO:139)、肽105Y(SEQIDNO:140)、抑菌肽(SEQIDNO:141)、嵌合狂犬病病毒糖蛋白片段(RVG-9R；SEQIDNO:142)、Cys(Npys)-TAT(47-57)(SEQIDNO:143)、Cys-TAT(47-57)(SEQIDNO:144)、脂質(zhì)膜轉(zhuǎn)位肽(SEQIDNO:145)、D-異構(gòu)體-脂質(zhì)膜轉(zhuǎn)位肽、肥大細(xì)胞脫粒肽(SEQIDNO:146)、肥大細(xì)胞脫粒肽7(SEQIDNO:147)、肥大細(xì)胞脫粒肽X(SEQIDNO:148)、MEKl來(lái)源的肽抑制劑1(SEQIDNO149)、十四酰-MEKl來(lái)源的肽抑制劑1(SEQIDNO150)、硬脂酰-MEK-1來(lái)源的肽抑制劑1酰胺(SEQIDNO:151)、膜滲透序列(SEQIDNO152)、HIV相關(guān)的MPG((SEQIDNO:153)、氨基肽酶N配體(CD13)、NGR肽(SEQIDNO154),NGR肽1、NGR肽2(SEQIDNO155)、NGR肽3(SEQIDNO156)、NGR肽4、Pep-I(Chariot；SEQIDNO:157)、SynBl(SEQIDNO:158)、生物素-TAT(47-57)(SEQIDNO159)、TAT(47-57)(SEQIDNO:160)、TAT(47-57)GGG-Cys(Npys)(SEQIDNO:161)、TAT(48-57)(SEQIDNO162)、Tat-C(48-57)(SEQIDNO:163)、透皮肽(SEQIDNO:164)、轉(zhuǎn)運(yùn)子(SEQIDNO165)和轉(zhuǎn)運(yùn)子10(SEQIDNO:166)。11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的組合物，其中，所述能夠穿透細(xì)胞膜的氨基酸序列是觸角足蛋白同源結(jié)構(gòu)域第三螺旋(RQIKIWFQNRRMKWKK；SEQIDNO:119)。12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的組合物，其中，所述多肽包含序列RQIKIWFQNRRMKWKK(SEQIDNO119)和RRHGTPRRLLFCQRSLLDKV(SEQIDNO:118)。13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的組合物，其中，所述多肽包含序列RQIKIWFQNRRMKffKKRRHGTPRRLLFCQRSLLDKV(SEQIDNO:176)。14.根據(jù)權(quán)利要求9所述的組合物，其中，所述能夠穿過(guò)BBB的氨基酸序列與血管肽-2(SEQIDNO97)或血管肽_1(SEQIDNO:67)具有至少90%的同一性。15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的組合物，其中，所述能夠穿過(guò)BBB的氨基酸序列是血管肽-1(SEQIDNO67)或血管肽_2(SEQIDNO97)。16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的組合物，其中，所述多肽包含血管肽-2(SEQIDNO97)和序列RRHGTPRRLLFCQRSLLDKV(SEQIDNO:118)二者。17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的組合物，其中，所述多肽包含序列TFFYGGSRGKRNNFKTEEYRRHGTPRRLLFCQRSLLDKV(SEQIDNO:178)。18.根據(jù)權(quán)利要求9所述的組合物，其中，能夠進(jìn)入特定細(xì)胞類(lèi)型的氨基酸序列與血管肽-7(SEQIDNO112)具有至少90%的同一性。19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的組合物，其中，所述能夠進(jìn)入特定細(xì)胞類(lèi)型的氨基酸序列是血管肽-7(SEQIDNO:112)。20.根據(jù)權(quán)利要求1-19中任一項(xiàng)所述的組合物，其中，所述組合物是脂質(zhì)體制劑。21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的組合物，其中，所述脂質(zhì)體包含肽載體，其中，所述載體肽在所述脂質(zhì)體的外表面上。22.根據(jù)權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)所述的組合物，其中，所述組合物與藥學(xué)上可接受的載體一起配制。23.一種降低細(xì)胞中的MTl-MMP磷酸化的方法，所述方法包括向所述細(xì)胞給予根據(jù)權(quán)利要求1-22中任一項(xiàng)所述的組合物。24.根據(jù)權(quán)利要求23所述的方法，其中，所述細(xì)胞在主體中。25.一種治療以MTl-MMP活性提高為特征的疾病的方法，所述方法包括以足以治療所述疾病的量向所述主體給予根據(jù)權(quán)利要求1-22中任一項(xiàng)所述的組合物。26.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中，所述疾病選自由癌癥、心臟病或血管病、以及關(guān)節(jié)炎構(gòu)成的組。27.一種治療患有癌癥的主體的方法，所述方法包括以足以治療所述癌癥的量向所述主體給予根據(jù)權(quán)利要求1-22中任一項(xiàng)所述的組合物。28.根據(jù)權(quán)利要求27所述的方法，其中，所述癌癥選自由以下構(gòu)成的組腦癌、急性白血病、急性淋巴細(xì)胞白血病、急性髓細(xì)胞白血病、急性成髓細(xì)胞白血病、急性早幼粒細(xì)胞白血病、急性粒單核細(xì)胞白血病、急性單核細(xì)胞白血病、急性紅白血病、慢性白血病、慢性髓細(xì)胞白血病、慢性淋巴細(xì)胞白血病、真性紅細(xì)胞增多癥、霍奇金病、非霍奇金病、華氏巨球蛋白血癥、重鏈病、纖維肉瘤、粘液肉瘤、脂肪肉瘤、軟骨肉瘤、成骨肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、內(nèi)皮肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管成內(nèi)皮肉瘤、滑膜瘤、間皮瘤、尤文氏瘤、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、結(jié)腸癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、鱗狀細(xì)胞癌、基底細(xì)胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭狀癌、乳頭狀腺癌、囊腺癌、髓樣癌、支氣管癌、腎細(xì)胞癌、肝癌、膽管癌、絨癌、精原細(xì)胞瘤、胚胎癌、腎母細(xì)胞瘤、子宮頸癌、子宮癌、睪丸癌、肺癌、小細(xì)胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、顱咽管瘤、松果體瘤、血管母細(xì)胞瘤、聽(tīng)神經(jīng)瘤、神經(jīng)鞘瘤、黑色素瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、肺癌、鱗狀細(xì)胞癌、腺癌、大細(xì)胞癌和結(jié)腸癌。29.根據(jù)權(quán)利要求觀所述的方法，其中，所述腦癌是膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、星形細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、髓母細(xì)胞瘤、少突神經(jīng)瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、室管膜瘤或腦膜瘤。30.一種治療患有心臟病或血管病的主體的方法，所述方法包括以足以治療所述疾病的量向所述主體給予根據(jù)權(quán)利要求1-22中任一項(xiàng)所述的組合物。31.根據(jù)權(quán)利要求30所述的方法，其中，所述血管病選自由動(dòng)脈粥樣硬化癥、再狹窄、腹主動(dòng)脈瘤、胸主動(dòng)脈瘤、頸動(dòng)脈病、外周動(dòng)脈病和腎動(dòng)脈病構(gòu)成的組。32.根據(jù)權(quán)利要求30所述的方法，其中，所述心臟病是高血壓心臟病。33.一種治療患有關(guān)節(jié)炎的主體的方法，所述方法包括以足以治療所述關(guān)節(jié)炎的量向所述主體給予根據(jù)權(quán)利要求1-22中任一項(xiàng)所述的組合物。34.根據(jù)權(quán)利要求33所述的方法，其中，所述關(guān)節(jié)炎是骨關(guān)節(jié)炎或類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎。35.根據(jù)權(quán)利要求M-34中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述主體是人。全文摘要基于包含不可磷酸化形式MT1-MMP胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域的可溶性多肽能夠以顯性負(fù)性方式抑制MT1-MMP的發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明提供了包括MT1-MMP抑制劑如肽抑制劑的組合物、以及用于治療與MT1-MMP活性相關(guān)的疾病的方法。此種疾病包括癌癥、關(guān)節(jié)炎和心臟病、以及血管病。文檔編號(hào)C07K14/81GK102300987SQ200980155900公開(kāi)日2011年12月28日申請(qǐng)日期2009年12月17日優(yōu)先權(quán)日2008年12月17日發(fā)明者丹尼斯·金格拉斯,卡里納·恩亞倫多,理查德·貝利沃申請(qǐng)人:安吉奧開(kāi)米公司