專利名稱：一種注射用門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸粉針劑的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，更具體涉及一種溶媒結(jié)晶制備注射用門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸 粉針劑的方法。該產(chǎn)品治療因急、慢性肝病如肝硬化、脂肪肝、肝炎所致的高血氨癥，特別適 用于因肝臟疾患引起的中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀的解除及肝昏迷的搶救。
背景技術(shù)：
門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸(Ornithine Aspartate)為L(zhǎng)-鳥(niǎo)氨酸與L-門冬氨酸經(jīng)過(guò)化學(xué)反 應(yīng)而形成的鹽，化學(xué)名稱為(S)-2，5-二氨基戊酸-(S)-2-氨基丁二酸鹽。其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下(國(guó)家藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)WS-745(X-592_2001)) 門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸可提供尿素和谷氨酰胺合成的底物。而谷氨酰胺是氨的解毒產(chǎn) 物，同時(shí)也是氨的儲(chǔ)存及運(yùn)輸形式；在生理和病理?xiàng)l件下，尿素的合成及谷氨酰胺的合成會(huì) 受到鳥(niǎo)氨酸、門冬氨酸和其他二羧基化合物的影響。鳥(niǎo)氨酸幾乎涉及尿素循環(huán)的活化和氨的解毒的全過(guò)程。在此過(guò)程中形成精氨酸， 繼而分裂出尿素形成鳥(niǎo)氨酸。門冬氨酸參與肝細(xì)胞內(nèi)核酸的合成，以利于修復(fù)被損傷的肝細(xì)胞。另外，由于門冬 氨酸對(duì)肝細(xì)胞內(nèi)三羧酸循環(huán)代謝過(guò)程的間接促進(jìn)作用，促進(jìn)了肝細(xì)胞內(nèi)的能量生成，使得 被損傷的肝細(xì)胞的各項(xiàng)功能得以迅速恢復(fù)。因此門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸可以從尿素合成及三羧酸循環(huán)兩方面改善肝功能受損患者 的血氨代謝。臨床上主要用于治療因急、慢性肝病引起的血氨升高，如各型肝炎、肝硬化、脂肪 肝和肝炎后綜合癥等。特別適用于因肝臟病患引起的中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀的解除及肝昏迷的 搶救。鳥(niǎo)氨酸的制備方法已有不少文獻(xiàn)報(bào)道。德國(guó)專利(DE 4040980C1)報(bào)道了用L-精 氨酸酶使精氨酸轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)-鳥(niǎo)氨酸，并在該反應(yīng)過(guò)程中加入L-門冬氨酸調(diào)節(jié)pH而直接制 備本品；英國(guó)專禾U (Brit965637t Brit 1067742)及歐洲專利(EP0477991A1)報(bào)道了以 L-鳥(niǎo)氨酸鹽酸鹽為初始原料，經(jīng)過(guò)陽(yáng)離子吸收，再用3-5%氨水洗脫，經(jīng)濃縮后加入等摩 爾的門冬氨酸成鹽，再濃縮后加入醇或丙酮結(jié)晶制備本品收率約50% ；中國(guó)專利(申請(qǐng)?zhí)?200610028597. 6)則報(bào)道了以L-鳥(niǎo)氨酸硫酸鹽為初始原料，加入門冬氨酸和過(guò)量的氫氧化 鋇除去硫酸，然后加入D403螯合樹(shù)脂除去過(guò)量的氫氧化鋇，最后加入乙醇結(jié)晶制備本品， 收率近80%。
L-鳥(niǎo)氨酸是一種膠狀物質(zhì)，可溶于水，不溶于醇，常以鹽的形式存在。其制備 方法可以用L-精氨酸為基質(zhì)，通用發(fā)酵的方法直接制備L-鳥(niǎo)氨酸鹽酸鹽[日本專利 JP53003586]，也可以用L-精氨酸為初始原料，通過(guò)精氨酸酶催化水解制備L-鳥(niǎo)氨酸門冬 氨酸鹽[德國(guó)專利DE4020980C1]，或以用L-精氨酸為初始原料，在堿性條件下使其水解制 備L-鳥(niǎo)氨酸鹽酸鹽[J. Am. Chem. Sco. 1955，77，1260 ；中國(guó)專利號(hào)ZL 03150789. 1 ；中國(guó)專 利申請(qǐng)?zhí)朇N200410013463. 8]，還有的以其它化工原料為初始原料制備成DL-鳥(niǎo)氨酸鹽酸 鹽，然后用拆分的方法制備成L-鳥(niǎo)氨酸鹽酸鹽。由此可見(jiàn)，現(xiàn)有的化學(xué)合成技術(shù)在制備門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸的過(guò)程中都經(jīng)過(guò)了一個(gè)中 間體，即鳥(niǎo)氨酸鹽酸鹽或硫酸鹽，無(wú)形中增加了反應(yīng)的操作過(guò)程，降低了收率。同時(shí)也由于 引入了新的雜質(zhì)如C1_和so42_，給最終產(chǎn)物的分離純化帶來(lái)新了的麻煩，增加了生產(chǎn)成本。以門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸為原料藥制備的藥物制劑主要口服顆粒劑和注射劑。其中水針 注射劑常用規(guī)格為10ml:5g，由于濃度偏高，在低溫條件下容易析出結(jié)晶，不利于臨床使用。為了克服該技術(shù)的不足，市場(chǎng)上出現(xiàn)了以凍干工藝生產(chǎn)的凍干粉針劑(注射劑)， 同樣由于其規(guī)格較大，在凍干過(guò)程中，除了需要特制的西林瓶以防凍干過(guò)程中出現(xiàn)大量西 林瓶破裂外，產(chǎn)品規(guī)格也只能達(dá)到2. 5g/瓶。該規(guī)格給臨床使用造成極不方便，因?yàn)楸酒放R 床每次使用量為10 20g。同時(shí)因?yàn)閮龈蓵r(shí)間較長(zhǎng)，一般需要3 4天才能完成一個(gè)生產(chǎn) 周期(實(shí)際生產(chǎn)中一般凍干產(chǎn)品的凍干量低于0. 5g/瓶，凍干時(shí)間約為一天)，因而生產(chǎn)成 本較高，不利于大規(guī)模生產(chǎn)。綜上所述，現(xiàn)有的化學(xué)合成技術(shù)在制備門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸的過(guò)程中都經(jīng)過(guò)了一個(gè)中 間體，即鳥(niǎo)氨酸鹽酸鹽或硫酸鹽，無(wú)形中增加了反應(yīng)的操作過(guò)程，降低了收率。同時(shí)也由于 引入了新的雜質(zhì)如C1_和so42_，給最終產(chǎn)物的分離純化帶來(lái)新了的麻煩，增加了生產(chǎn)成本。 除此外現(xiàn)有的門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸注射制劑在制備過(guò)程中存在如下的難點(diǎn)和不足1、現(xiàn)有的門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸水針注射劑常用規(guī)格為10ml:5g，由于濃度偏高，在低溫 條件下容易析出結(jié)晶，不利于臨床使用。2、現(xiàn)有的門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸凍干粉針劑(注射劑)，由于規(guī)格較大，在凍干過(guò)程中， 需要特制的西林瓶以防凍干過(guò)程中出現(xiàn)大量西林瓶破裂。即便如此，產(chǎn)品規(guī)格也只能達(dá)到 2. 5g/瓶，給臨床使用造成極不方便(臨床每次使用量為10 20g)。同時(shí)因?yàn)閮龈蓵r(shí)間 較長(zhǎng)，一般需要3 4天才能完成一個(gè)生產(chǎn)周期(實(shí)際生產(chǎn)中一般凍干產(chǎn)品的凍干量低于 0. 5g/瓶，凍干時(shí)間約為一天)，因而生產(chǎn)成本較高，不利于大規(guī)模生產(chǎn)

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是在于提供了一種注射用門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸粉針劑的制備方法，方法 易行，操作簡(jiǎn)便，提高了收率，成本低廉，還可以方便其注射劑產(chǎn)品在臨床中的使用。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案一種(注射用)門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸粉針劑的制備方法，該方法包括下列步驟1、取精氨酸，加入適量的氫氧化鋇溶液攪拌使溶解，并在90 100°C的溫度下加 熱水解，使精氨酸全部轉(zhuǎn)化為鳥(niǎo)氨酸(薄層色譜法控制反應(yīng)終點(diǎn))。2、向上述步驟1反應(yīng)溶液中加入與精氨酸等摩爾的門冬氨酸，攪拌均勻，慢慢加 入適當(dāng)?shù)匿^離子Ba2+沉淀劑，過(guò)濾除去鋇離子Ba2+沉淀物，并調(diào)節(jié)溶液的pH至中性。所加入的鋇離子Ba2+沉淀劑首選含有硫酸根S042—、磷酸根Po/—、碳酸根CO/—和亞硫酸根SO:的 酸性物質(zhì)或者能與水反應(yīng)產(chǎn)生硫酸根S042—、磷酸根Po/—、碳酸根CO/—和亞硫酸根SO:的酸 性物質(zhì)，如硫酸、磷酸等。 3、將步驟2反應(yīng)溶液過(guò)濾后，加入與水互溶的惰性有機(jī)溶劑進(jìn)行結(jié)晶，過(guò)濾，洗 滌，抽干，得門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸結(jié)晶粗品。惰性有機(jī)溶劑主要指甲醇、乙醇、異丙醇和丙酮中的 一種或2-4種的任意混合。首選乙醇和丙酮。4、取步驟3門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸結(jié)晶，按1 2的比例加入注射用水使溶解，加針用活 性炭脫色除熱原后，粗濾除炭，再用0. 22 μ m的微孔濾膜過(guò)濾至無(wú)菌澄明。5、在生產(chǎn)控制區(qū)無(wú)菌環(huán)境下，向上述步驟4無(wú)菌澄明溶液中加入經(jīng)0. 22 μ m的微 孔濾膜過(guò)濾的乙醇溶液并不斷攪拌使其結(jié)晶，減壓過(guò)濾，抽干。洗滌2-3次，再抽干，減壓干 燥。得門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸無(wú)菌粉末。6、在無(wú)菌條件下將所制備的門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸無(wú)菌粉末分裝于滅菌西林瓶中，加蓋 丁基膠塞，軋鋁蓋，即得注射用門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸無(wú)菌粉針劑。本發(fā)明與現(xiàn)在技術(shù)比較，有著不可比似的優(yōu)點(diǎn)和效果。其一，本制備方法其特征在于以精氨酸為初始原料，用“一鍋煮”的辦法制備門冬 氨酸鳥(niǎo)氨酸，即在全部反應(yīng)中在不經(jīng)分離提取的情況下直接制備門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸。具有生 產(chǎn)成本低、生產(chǎn)設(shè)備簡(jiǎn)單、生產(chǎn)周期短等優(yōu)點(diǎn)，特別適合大規(guī)模生產(chǎn)。其二，由于生產(chǎn)的無(wú)菌粉，可以直接進(jìn)行無(wú)菌分裝成臨床所需規(guī)格，以滿足臨床所 需。也避免了凍干工藝帶來(lái)的種種弊端。其三，無(wú)菌粉便于運(yùn)輸、貯藏穩(wěn)定，在臨床上使用方便，解出了水針劑在低溫條件 下容易析出結(jié)晶的不便。
具體實(shí)施例方式現(xiàn)在通過(guò)以下非限定性實(shí)施例對(duì)本發(fā)明方案作進(jìn)一步說(shuō)明。實(shí)施例1一種注射用門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸粉針劑的制備方法，該方法包括下列步驟1、取4. 5kg氫氧化鋇，加30L水加熱攪拌使完全溶解后，加入3. 5kg精氨酸，加熱 至90或93或95或98或100°C后，繼續(xù)攪拌使精氨酸水解，用薄層色譜法監(jiān)控反應(yīng)終止，每 隔半小時(shí)一次，當(dāng)檢不出精氨酸斑點(diǎn)后，再反應(yīng)半小時(shí)確保反應(yīng)溶液中無(wú)精氨酸殘留。2、在攪拌條件下逐漸向步驟1反應(yīng)溶液中加入50%的硫酸溶液2. 7kg和門冬氨 酸2. 7kg，并繼續(xù)用50%的硫酸溶液調(diào)節(jié)溶液的pH為中性(6.5左右)且再無(wú)硫酸鋇沉淀 產(chǎn)生后，繼續(xù)攪拌2小時(shí)，過(guò)濾，除去硫酸鋇沉淀和未反應(yīng)完的門冬氨酸。3、在攪拌條件下向?yàn)V液中加入200L乙醇，使生成的門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸結(jié)晶析出，放 置結(jié)晶4小時(shí)后抽濾，抽干，分別用80%的乙醇和乙醇洗滌，抽干。得鳥(niǎo)氨酸門冬氨酸鹽粗品。4、取步驟3門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸鹽粗品，加IOL注射用水?dāng)嚢枋谷芙?，加針用活性?250g攪拌30分鐘后，用0. 45 μ m鈦棒過(guò)濾芯粗濾脫炭，再用0. 22 μ m的微孔濾膜過(guò)濾反復(fù) 過(guò)濾至澄明。5、在生產(chǎn)控制區(qū)無(wú)菌環(huán)境下，將該門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸無(wú)菌溶液泵入反應(yīng)罐中，加入經(jīng)0. 22 μ m的微孔濾膜過(guò)濾的乙醇溶液60L并不斷攪拌，降低反應(yīng)罐(結(jié)晶罐)溫度至0°C， 繼續(xù)攪拌4小時(shí)后，將結(jié)晶溶液抽入雙錐中進(jìn)行減壓過(guò)濾，抽干。用經(jīng)0. 22 μ m的微孔濾膜 過(guò)濾的乙醇IOL浸泡洗滌30分鐘，抽干。直接在雙錐中進(jìn)行減壓干燥(干燥溫度設(shè)置為 80°C )，定時(shí)自動(dòng)翻轉(zhuǎn)雙錐防止結(jié)塊。6小時(shí)后取樣，檢測(cè)水分、含量、pH和無(wú)菌合格后，封 裝于無(wú)菌不銹鋼容器中，即得冬氨酸鳥(niǎo)氨酸無(wú)菌粉末。6、按照無(wú)菌粉針劑的生產(chǎn)工藝，將所制備的無(wú)菌原料藥按每瓶2. 5g或5g的裝量 分裝于滅菌西林瓶中，加膠塞，軋鋁蓋，即得到注射用門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸無(wú)菌粉針劑。實(shí)施例2一種注射用門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸粉針劑的制備方法，該方法包括下列步驟1、取4. 5kg Ba(OH)2. 8H20，加30L水加熱攪拌使完全溶解后，加入3. 5kg精氨酸，力口 熱至91或92或94或97或99°C后，繼續(xù)攪拌使精氨酸水解，用薄層色譜法監(jiān)控反應(yīng)終止， 每隔半小時(shí)一次，當(dāng)檢不出精氨酸斑點(diǎn)后，再反應(yīng)半小時(shí)確保反應(yīng)溶液中無(wú)精氨酸殘留。2、在攪拌條件下逐漸向步驟1反應(yīng)溶液中加入75%的磷酸溶液1. 2kg和門冬氨 酸2. 7kg，并繼續(xù)用75%的磷酸溶液調(diào)節(jié)溶液的pH為中性(6.5左右)且再無(wú)磷酸鋇沉淀 產(chǎn)生后，繼續(xù)攪拌2小時(shí)，過(guò)濾，除去磷酸鋇沉淀和未反應(yīng)完的門冬氨酸。3、在攪拌條件下向?yàn)V液中加入200L乙醇，使生成的門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸結(jié)晶析出，放 置結(jié)晶4小時(shí)后抽濾，抽干，分別用80%的乙醇和乙醇洗滌，抽干。得鳥(niǎo)氨酸門冬氨酸鹽粗
ΡΠ O4、按實(shí)施例1的方法步驟4進(jìn)行。5、按實(shí)施例1的方法步驟5進(jìn)行。6、按實(shí)施例1的方法步驟6進(jìn)行，即得到注射用門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸無(wú)菌粉針劑。通過(guò)參照已有報(bào)道專利技術(shù)方案的對(duì)照例與本發(fā)明工藝的比較，說(shuō)明本發(fā)明的優(yōu) 勢(shì)。對(duì)照例一參照英國(guó)專利(Brit965637t Brit 1067742)技術(shù)方案制備；對(duì)照例二參照中 國(guó)專利(申請(qǐng)?zhí)?00610028597.6)技術(shù)方案制備。本發(fā)明工藝技術(shù)與已有技術(shù)比較表
權(quán)利要求
一種注射用門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸粉針劑的制備方法，其步驟是A、取精氨酸，加入氫氧化鋇溶液攪拌使溶解，并在90～100℃的溫度下加熱水解，使精氨酸全部轉(zhuǎn)化為鳥(niǎo)氨酸；B、向步驟(A)反應(yīng)溶液中加入與精氨酸等摩爾的門冬氨酸，攪拌均勻，慢慢加入適當(dāng)?shù)匿^離子沉淀劑，過(guò)濾除去鋇離子沉淀物，并調(diào)節(jié)溶液的pH至中性，所加入的鋇離子沉淀劑首選含有硫酸根、磷酸根、碳酸根和亞硫酸根的酸性物質(zhì)或者能與水反應(yīng)產(chǎn)生硫酸根、磷酸根、碳酸根和亞硫酸根的酸性物質(zhì)；C、將步驟(B)反應(yīng)溶液過(guò)濾后，加入與水互溶的惰性有機(jī)溶劑進(jìn)行結(jié)晶，過(guò)濾，洗滌，抽干，得門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸結(jié)晶粗品，所加入的惰性有機(jī)溶劑為甲醇、乙醇、異丙醇和丙酮；D、取步驟(C)門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸結(jié)晶，按1∶2的比例加入注射用水使溶解，加針用活性炭脫色除熱原后，粗濾除炭，再用0.22μm的微孔濾膜過(guò)濾至無(wú)菌澄明；E、在生產(chǎn)控制區(qū)無(wú)菌環(huán)境下，向步驟(D)無(wú)菌澄明溶液中加入經(jīng)0.22μm的微孔濾膜過(guò)濾的乙醇溶液并不斷攪拌使其結(jié)晶，減壓過(guò)濾，抽干，洗滌2-3次，再抽干，減壓干燥，得門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸無(wú)菌粉末；F、在無(wú)菌條件下將所制備的門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸無(wú)菌粉末分裝于滅菌西林瓶中，加蓋丁基膠塞，軋鋁蓋，即得注射用門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸無(wú)菌粉針劑。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種注射用門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸粉針劑的制備方法，其步驟取精氨酸，加入氫氧化鋇溶液攪拌溶解，加熱水解，使精氨酸全部轉(zhuǎn)化為鳥(niǎo)氨酸。加入門冬氨酸，攪拌均勻，加入沉淀劑，過(guò)濾除去鋇離子沉淀物，并調(diào)節(jié)溶液的pH至中性；加入惰性有機(jī)溶劑結(jié)晶，過(guò)濾抽干，加入注射用水使溶解，加針用活性炭脫色除熱原后，粗濾除炭，再用0.22μm的微孔濾膜過(guò)濾至無(wú)菌澄明；加入乙醇結(jié)晶，得門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸無(wú)菌粉末，在無(wú)菌條件下分裝于滅菌西林瓶中，加塞，軋鋁蓋，即得到注射用門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸無(wú)菌粉針劑。方法易行，操作簡(jiǎn)便，提高了收率，成本低廉，用一鍋煮的辦法制備門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸，生產(chǎn)周期短，適合大規(guī)模生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07C229/26GK101843587SQ20101016587
公開(kāi)日2010年9月29日 申請(qǐng)日期2010年4月30日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月30日
發(fā)明者劉萬(wàn)忠, 劉偉華 申請(qǐng)人:湖北荷普藥業(yè)有限公司