專利名稱：聯(lián)苯人工完全抗原的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種聯(lián)苯(Biphenyl)人工完全抗原的制備方法，屬于有機(jī)化學(xué)及免疫學(xué)技術(shù)范疇。
背景技術(shù)：
^1^77 (Polycyclic Aromatic Hydrocarbons ；PAHs) ^^^^^ 致癌/助癌特性且在環(huán)境中較為穩(wěn)定的微污染物。多環(huán)芳烴主要來源于城市生活排污、工業(yè)廢水排放、石油污染和有機(jī)質(zhì)自燃等，具有高毒、持久、長距離遷移和高生物蓄積性等特點，對環(huán)境安全和人類健康具有嚴(yán)重的危害。PAHs在空氣、水、土壤等環(huán)境中廣泛分布，同時 PAHs在各種溶劑中具有很高的溶解度，由于食品產(chǎn)地環(huán)境受到污染以及在飲料和酒品加工制作過程中均可產(chǎn)生PAHs，致使PAHs在食品、飲料及酒品等非水體系中存在，有人在烤制的面包片、牛奶、酒、茶飲料中發(fā)現(xiàn)了微量的PAHs，長期食用含有PAHs的食物會對人體健康將產(chǎn)生潛在威脅。目前對多環(huán)芳烴的檢測分析方法有很多，如高效液相色譜法，氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用法等。但樣品預(yù)處理煩瑣，操作復(fù)雜，儀器昂貴，很難達(dá)到快速、簡便的現(xiàn)場檢測要求。如果能夠采用金標(biāo)免疫或酶聯(lián)免疫的方法，則可達(dá)到快速、靈敏并能現(xiàn)場檢測PAHs的需要。為了建立其免疫分析的方法，首先必須得到PAHs的抗體。PAHs分子結(jié)構(gòu)簡單，分子量小，屬于半抗原，不能直接免疫制取抗體，必須首先將其與載體蛋白偶聯(lián)制備出它的完全抗原，才能誘發(fā)動物產(chǎn)生抗體。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于尋求適當(dāng)?shù)脑噭?，用簡單、實用的方法合成出?lián)苯(Biphenyl) 的完全抗原，為以后篩選出它的特異性抗體和建立免疫分析方法提供基礎(chǔ)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及一種聯(lián)苯(Biphenyl)人工完全抗原的制備方法，屬于有機(jī)化學(xué)及免疫學(xué)技術(shù)范疇。利用聯(lián)苯乙酸的羧酸基團(tuán)，將聯(lián)苯乙酸直接或者通過適當(dāng)長度的連接臂鏈接到載體蛋白上，制備聯(lián)苯的完全抗原。載體蛋白可以是牛血清白蛋白(BSA)，卵清蛋白 (0VA)，血蘭蛋白(KLH)或人血清蛋白(HSA)。MALDI-T0F-MS質(zhì)譜確定載體蛋白上聯(lián)苯的數(shù)量。本方法操作簡單，無需特別的儀器設(shè)備，成本低廉，為以后篩選出它的特異性抗體和建立免疫分析方法提供了基礎(chǔ)。
具體實施例方式實施例1
權(quán)利要求
1.本發(fā)明涉及一種聯(lián)苯(Biphenyl)人工完全抗原的制備方法，屬于有機(jī)化學(xué)及免疫學(xué)技術(shù)范疇。利用1-聯(lián)苯丁酸的羧酸基團(tuán)，將1-聯(lián)苯丁酸直接或者通過適當(dāng)長度的連接臂鏈接到載體蛋白上，制備聯(lián)苯的完全抗原。載體蛋白可以是牛血清白蛋白(BSA)，卵清蛋白(OVA)，血蘭蛋白(KLH)或人血清蛋白(HSA)。MALDI-T0F-MS質(zhì)譜確定載體蛋白上聯(lián)苯的數(shù)量。本方法操作簡單，無需特別的儀器設(shè)備，成本低廉，為以后篩選出它的特異性抗體和建立免疫分析方法提供了基礎(chǔ)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，載體蛋白可以是牛血清白蛋白(BSA)，卵清蛋白(0VA)，血蘭蛋白(KLH)，人血清蛋白(HSA)或其他蛋白以及蛋白的衍生物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，可以將1-聯(lián)苯丁酸直接或者通過適當(dāng)長度的連接臂鏈接到載體蛋白上；連接臂的類型或者長度的選擇取決于由此抗原產(chǎn)生的抗體的活性。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，能夠?qū)⒙?lián)苯鏈接到載體蛋白上的方法和試齊LU
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，反應(yīng)溫度在-100°C-100°C之間。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，反應(yīng)時間在1分鐘-200小時之間。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，聯(lián)苯的用量為載體蛋白的0.001-2000摩爾當(dāng)量。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種聯(lián)苯(Biphenyl)人工完全抗原的制備方法，屬于有機(jī)化學(xué)及免疫學(xué)技術(shù)范疇。利用聯(lián)苯乙酸的羧酸基團(tuán)，將聯(lián)苯乙酸直接或者通過適當(dāng)長度的連接臂鏈接到載體蛋白上，制備聯(lián)苯的完全抗原。載體蛋白可以是牛血清白蛋白(BSA)，卵清蛋白(OVA)，血蘭蛋白(KLH)或人血清蛋白(HSA)。MALDI-TOF-MS質(zhì)譜確定載體蛋白上聯(lián)苯的數(shù)量。本方法操作簡單，無需特別的儀器設(shè)備，成本低廉，為以后篩選出它的特異性抗體和建立免疫分析方法提供了基礎(chǔ)。
文檔編號C07K14/77GK102276715SQ20101020279
公開日2011年12月14日 申請日期2010年6月10日 優(yōu)先權(quán)日2010年6月10日
發(fā)明者孫艷靈, 杜宇國, 魏國華 申請人:中國科學(xué)院生態(tài)環(huán)境研究中心