專利名稱：一種從金蓮花中提取葒草苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從金蓮花中提取葒草苷的方法，特別是涉及一種采用大孔樹脂和 中壓硅膠柱分離葒草苷的方法。
背景技術(shù)：
葒草苷，葒草素；2_(3，4-二羥基苯基)-8-BETA-D-吡喃葡萄糖基_5，7_ 二羥 基-4H-1-苯并吡喃-4-酮。分子式=C21H2tlO11；分子量448·38理化性質(zhì)熔點(diǎn)260_285°C，可溶于水、乙醇，略溶于丙酮、正丁醇、乙酸乙酯等，不 溶于氯仿、乙醚、石油醚等非極性溶劑。葒草苷廣泛存在于植物中，尤其是金蓮花最高，含量高達(dá)2 %。葒草苷具有殺菌、抗 病毒作用，并具有抗氧化性。目前，葒草苷提取工藝主要是色譜分離法，部分文獻(xiàn)中國專利(申請(qǐng)?zhí)?00610041165) “一種烏蕨葒草苷和牡荊素提取純化方法”，該 工藝采用反向硅膠柱分離，該方法處理量小，成本高。中國專利(申請(qǐng)?zhí)朇N200410093126. 4) “短瓣金蓮花總黃酮和幾種高純度藥用物 質(zhì)的制備工藝”，該種方法采用逆流色譜制備，制備量小。中國專利(申請(qǐng)?zhí)朇N200710121800. 9) “葒草苷標(biāo)準(zhǔn)品的制備方法”，該專利采用
凝膠柱分離，制備較小。此外還有文獻(xiàn)李德強(qiáng)發(fā)表的“金蓮花有效成分的提取分離和藥動(dòng)學(xué)研究”，該文獻(xiàn) 采用常壓硅膠柱分離，周期較長。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)的缺陷及不足，提供一種處理量較大、成 本低的葒草苷提取方法。本發(fā)明的技術(shù)解決方案是一種從金蓮花中提取葒草苷的方法，其特征在于包含以下步驟1)提取把金蓮花原料粉碎加入10-20倍量80-95%乙醇溶液加熱提取1_2小時(shí)， 提取2-3次，合并提取液；2)大孔樹脂富集上述提取液減壓回收乙醇至浸膏狀加水ph3_5的酸性水溶解， 濾出不溶物，濾液加入大孔樹脂柱吸附，先水洗至糖反應(yīng)呈陰性，再用4-7BV40-60%乙醇溶 液洗脫有效成分，收集洗脫液；3)濃縮萃取將上述洗脫液加入減壓濃縮，濃縮液加入乙酸乙酯萃取2-3次，得萃 取液；4)中壓硅膠柱分離將上述萃取液減壓回收乙酸乙酯加入硅膠拌樣烘干，裝入中壓硅膠柱，氯仿甲醇溶液梯度洗脫，薄層檢測，收集葒草苷高濃度流分，回收試劑，加入洗脫 劑回流溶解，冷藏結(jié)晶，結(jié)晶物真空干燥即得葒草苷。所述步驟1)中的提取溫度控制在50_70°C。所述步驟2)中的酸為鹽酸、硫酸或磷酸的一種，大孔樹脂型號(hào)可選HZ816、DlOU SPD100.AB-8 中的一種。所述步驟4)中的中壓硅膠柱為直徑為10-50cm，徑高比1 15_20，壓力 0. 8-1. 2Mpa.，硅膠選 200-300 目硅膠。所述步驟4)中的氯仿甲醇洗脫為10_20BV氯仿甲醇(20 1_3)—氯仿甲醇 (15 4)。所述步驟4)中的結(jié)晶溶劑為氯仿甲醇(15 4)混合溶液。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是金蓮花為原料，高濃度乙醇提取減少了多糖蛋白的溶出；酸性 水分散，可除去非水溶性黃酮，利于大孔樹脂富集；后段乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯用量少； 中壓硅膠柱可選粒度細(xì)的硅膠分離度好，加壓洗脫處理速度快。下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限 于下列實(shí)施方式
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 金蓮花粉碎，稱取Ikg加入小型不銹鋼提取罐，再加入10L80%乙醇加熱70°C，提 取1小時(shí)，提取3次，合并提取液減壓回收乙醇至浸膏狀，加入ph3的鹽酸水溶液溶解充分 溶解，濾去不溶物，濾液加入700mlHZ816大孔樹脂柱吸附，流速不超過lL/h，吸附結(jié)束后先 水洗至糖反應(yīng)呈陰性，再用4. 9L40%乙醇溶液洗脫葒草苷，收集洗脫液回收乙醇，濃縮液加 入3BV乙酸乙酯萃取3次，收集乙酸乙酯層回收，加入硅膠(200-300目)拌樣烘干，再和新 硅膠1 10裝入中壓柱(直徑為10cm，徑高比1 20)，先用IOBV氯仿甲醇(20 3)洗 脫雜質(zhì)，再用氯仿甲醇(15 4)葒草苷，壓力控制0.8-1. 2mpa.，薄層監(jiān)測，收集高濃度流分 回收試劑，再用氯仿甲醇(15 4)混合溶液，回流溶解冷藏結(jié)晶，濾出結(jié)晶物，真空減壓干 燥得到50g葒草苷，含量98%。實(shí)施例2 金蓮花粉碎，稱取Ikg加入小型不銹鋼提取罐，再加入10L90%乙醇加熱60°C，提 取1小時(shí)，提取3次，合并提取液減壓回收乙醇至浸膏狀，加入ph5的硫酸水溶液溶解充分 溶解，濾去不溶物，濾液加入800mlD101大孔樹脂柱吸附，流速不超過900ml/h，吸附結(jié)束后 先水洗至糖反應(yīng)呈陰性，再用4. 8L50%乙醇溶液洗脫葒草苷，收集洗脫液回收乙醇，濃縮液 加入2BV乙酸乙酯萃取4次，收集乙酸乙酯層回收，加入硅膠(200-300目)拌樣烘干，再和 新硅膠1 15裝入中壓柱(直徑為10cm，徑高比1 15)，先用15BV氯仿甲醇(10 1) 洗脫雜質(zhì)，再用氯仿甲醇(15 4)葒草苷，壓力控制0.8-1. 2mpa.，薄層監(jiān)測，收集高濃度流 分回收試劑，再用氯仿甲醇(15 4)混合溶液，回流溶解冷藏結(jié)晶，濾出結(jié)晶物，真空減壓 干燥得到52. 5g葒草苷，含量98. 5%。實(shí)施例3 金蓮花粉碎，稱取Ikg加入小型不銹鋼提取罐，再加入10L95%乙醇加熱50°C，提取1小時(shí)，提取3次，合并提取液減壓回收乙醇全浸膏狀，加入ph4的磷酸水溶液溶解充分 溶解，濾去不溶物，濾液加入800ml SPD100大孔樹脂柱吸附，流速不超過lL/h，吸附結(jié)束后 先水洗至糖反應(yīng)呈陰性，再用3. 2L60%乙醇溶液洗脫葒草苷，收集洗脫液回收乙醇，濃縮液 加入等體積乙酸乙酯萃取5次，收集乙酸乙酯層回收，加入硅膠(200-300目)拌樣烘干，再 和新硅膠1 20裝入中壓柱(直徑為10cm，徑高比1 20)，先用20BV氯仿甲醇(20 1) 洗脫雜質(zhì)，再用氯仿甲醇(15 4)葒草苷，壓力控制0.8-1. 2mpa.，薄層監(jiān)測，收集高濃度流 分回收試劑，再用氯仿甲醇(15 4)混合溶液，回流溶解冷藏結(jié)晶，濾出結(jié)晶物，真空減壓 干燥得到47g葒草苷，含量99 %。實(shí)施例4 金蓮花粉碎，稱取5kg加入小型不銹鋼提取罐，再加入15L90%乙醇加熱60°C，提 取2小時(shí)，提取2次，合并提取液減壓回收乙醇至浸膏狀，加入ph5的鹽酸水溶液溶解充分 溶解，濾去不溶物，濾液加入3. 5L AB-8大孔樹脂柱吸附，流速不超過5L/h，吸附結(jié)束后先 水洗至糖反應(yīng)呈陰性，再用21L50%乙醇溶液洗脫葒草苷，收集洗脫液回收乙醇，濃縮液加 入3BV乙酸乙酯萃取3次，收集乙酸乙酯層回收，加入硅膠(200-300目)拌樣烘干，再和新 硅膠1 15裝入中壓柱(直徑為20cm，徑高比1 20)，先用15BV氯仿甲醇(20 3)洗 脫雜質(zhì)，再用氯仿甲醇(15 4)葒草苷，壓力控制0.8-1. 2mpa.，薄層監(jiān)測，收集高濃度流分 回收試劑，再用氯仿甲醇(15 4)混合溶液，回流溶解冷藏結(jié)晶，濾出結(jié)晶物，真空減壓干 燥得到240g葒草苷，含量98. 2%。實(shí)施例5 金蓮花粉碎，稱取IOkg加入小型不銹鋼提取罐，再加入100L85%乙醇加熱60°C， 提取2小時(shí)，提取3次，合并提取液減壓回收乙醇至浸膏狀，加入ph4的鹽酸水溶液溶解充 分溶解，濾去不溶物，濾液加入7LHZ816大孔樹脂柱吸附，流速不超過7L/h，吸附結(jié)束后先 水洗至糖反應(yīng)呈陰性，再用35L60%乙醇溶液洗脫葒草苷，收集洗脫液回收乙醇，濃縮液加 入2BV乙酸乙酯萃取4次，收集乙酸乙酯層回收，加入硅膠(200-300目)拌樣烘干，再和新 硅膠1 :20裝入中壓柱(直徑為30cm，徑高比1 20)，先用15BV氯仿甲醇(20 3)洗脫 雜質(zhì)，再用氯仿甲醇(15 4)葒草苷，壓力控制0.8-1. 2mpa.，薄層監(jiān)測，收集高濃度流分回 收試劑，再用氯仿甲醇(15 4)混合溶液，回流溶解冷藏結(jié)晶，濾出結(jié)晶物，真空減壓干燥 得到490g葒草苷，含量98%。
權(quán)利要求
一種從金蓮花中提取葒草苷的方法，其特征在于包含以下步驟1)提取把金蓮花原料粉碎加入10 20倍量80 95％乙醇溶液加熱提取1 2小時(shí)，提取2 3次，合并提取液；2)大孔樹脂富集上述提取液減壓回收乙醇至浸膏狀加水ph3 5的酸性水溶解，濾出不溶物，濾液加入大孔樹脂柱吸附，先水洗至糖反應(yīng)呈陰性，再用4 7BV40 60％乙醇溶液洗脫有效成分，收集洗脫液；3)濃縮萃取將上述洗脫液加入減壓濃縮，濃縮液加入乙酸乙酯萃取2 3次，得萃取液；4)中壓硅膠柱分離將上述萃取液減壓回收乙酸乙酯加入硅膠拌樣烘干，裝入中壓硅膠柱，氯仿甲醇溶液梯度洗脫，薄層檢測，收集葒草苷高濃度流分，回收試劑，加入洗脫劑回流溶解，冷藏結(jié)晶，結(jié)晶物真空干燥即得葒草苷。
2.如權(quán)利要求1所述的從金蓮花中提取葒草苷的方法，其特征在于所述步驟1)中的提 取溫度控制在50-70°C。
3.如權(quán)利要求1所述從金蓮花中提取葒草苷的方法，其特征在于所述步驟2)中的酸為 鹽酸、硫酸或磷酸的一種，大孔樹脂型號(hào)可選HZ816、D101、SPD100、AB-8中的一種。
4.如權(quán)利要求1所述的從金蓮花中提取葒草苷的方法，其特征在于所述步驟4)中的 中壓硅膠柱為直徑為10_30cm，徑高比1 15-20，壓力0. 8-1. 2Mpa.，硅膠選200-300目硅 膠。
5.如權(quán)利要求1所述的從金蓮花中提取葒草苷的方法，其特征在于所述步驟4)中的氯 仿甲醇洗脫為10-20BV氯仿甲醇(20 1-3)—氯仿甲醇(15 4)。
6.如權(quán)利要求1所述的從金蓮花中提取葒草苷的方法，其特征在于所述步驟4)中的結(jié) 晶溶劑為氯仿甲醇(15 4)混合溶液。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從金蓮花中提取葒草苷的方法，工藝是以金蓮花為原料，乙醇加熱提取，提取液回收乙醇，浸膏加pH2-5酸性水溶解濾過，加入大孔樹脂樹脂柱吸附，40-60％乙醇洗脫，洗脫液濃縮加乙酸乙酯萃取，萃取液濃縮拌硅膠烘干裝入中壓硅膠柱，氯仿甲醇洗脫，洗脫液濃縮再結(jié)晶，干燥即得產(chǎn)品。本工藝操作簡單，分離純化周期短，處理量大，成本低，產(chǎn)品含量高，適合小規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07D407/04GK101973983SQ20101023574
公開日2011年2月16日 申請(qǐng)日期2010年7月26日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月26日
發(fā)明者蘇劉花 申請(qǐng)人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司