專利名稱：一種三尖杉寧堿和紫杉醇的分離方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種化學(xué)分離方法，具體是指兩種藥用成分的分離方法。
技術(shù)背景
紫杉醇是治療各種轉(zhuǎn)移腫瘤的有名的化療藥。它已被美國食品與藥品管理部門 批準(zhǔn)用于治療卵巢癌和乳腺癌等癌癥。
紫杉醇是一種天然化合物，最早是在太平洋紅豆杉中提取分離出來。目前主要 提取的原料有歐洲紅豆杉、西藏紅豆杉、云南紅豆杉、中國東北紅豆杉和中國南方紅豆 杉。紫杉醇也可通過植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)以及霉菌中得到。
在各種原料中，紫杉醇的濃度特別低，例如在短葉紅豆杉皮中，其含量在 0.0004-0.08% (重量比)之間。從含量這么低的原料中，提取并且純化提供臨床用的化 合物是很困難的，要推向市場更是不現(xiàn)實。
三尖杉寧堿是與紫杉醇共生的一種天然紫杉烷類化合物和紫杉醇在化學(xué)結(jié)構(gòu)上 只有酰胺基側(cè)鏈有所不同。其可以作為化學(xué)合成紫杉醇和多西紫杉醇的重要原料，并且 能作為新型紫杉烷類開發(fā)的前體。
由于三尖杉寧堿和紫杉醇在結(jié)構(gòu)和性質(zhì)上極其相似，反復(fù)多次分離是必需的。
分離紫杉醇的和三尖杉寧堿的非層析方法已有報道。例如將三尖杉寧堿的側(cè)鏈 上雙鍵進(jìn)行化學(xué)改造。例如Kingston等(J.Nat.Prod.55 N0.2，259-2，洸1[1992])報道， 在氧化鋨(0s04)存在的條件下，催化氧化三尖杉寧堿側(cè)鏈雙鍵，得到二醇，然后用層析 和重結(jié)晶方法來與紫杉醇分離。這個方法的問題在于，它不能采用未經(jīng)純化的紫杉烷類 混合物，因氧化鋨的氧化三尖杉寧堿側(cè)鏈上雙鍵的選擇性太低。另外氧化鋨有嚴(yán)重的毒 性，不適用于制藥工業(yè)，當(dāng)然這個方法能夠大大降低萃取和純化過程的價格。
在美國專利(NOs.5334732和5336648 Murray等)中，介紹了用臭氧氧化三尖杉 寧堿側(cè)鏈的方法。該方法用臭氧氧化粗提物，將會產(chǎn)生許多不希望發(fā)生的反應(yīng)。臭氧分 解反應(yīng)是很強(qiáng)的、而且無選擇性，他能因紫杉醇和三尖杉寧堿中的許多官能團(tuán)發(fā)生不希 望的氧化反應(yīng)。例如同紫杉醇分子中的酮，醇，胺等反應(yīng)，或者同紫杉醇及三尖杉寧堿 的紫杉烷環(huán)上的雙鍵反應(yīng)。此外，臭氧發(fā)生器設(shè)備也很昂貴。
在中國專利(96193149.3潘德伊等)中介紹了用鹵素加成在三尖杉寧堿側(cè)鏈上， 再由正相硅膠柱分離的方法。該方法對反應(yīng)的條件要求比較苛刻，需要在0-5°C左右，避 光。并且溴作為一種低沸點液體鹵素并且毒性較大的情況下，對于生產(chǎn)條件有較高的要 求。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有三尖杉寧堿和紫杉醇分離方法的缺陷，提 供了一種簡單、經(jīng)濟(jì)有效、分離純度高的處理方法。
為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案一種三尖杉寧堿和紫
權(quán)利要求
1.一種三尖杉寧堿和紫杉醇的分離方法，其特征在于包括以下步驟a、1，4-加成反應(yīng)將紫杉醇和三尖杉寧堿的混合物溶于短鏈脂肪醇中，加入有機(jī) 堿類催化劑，室溫攪拌；b、濃縮上述溶解液，柱層析分離，得3”-烷氧基三尖杉寧堿衍生物和紫杉醇；C、將3” -烷氧基三尖杉寧堿衍生物溶解，加入酸化活性炭，加熱回流；過濾，濾 液濃縮后經(jīng)重結(jié)晶得三尖杉寧堿。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的三尖杉寧堿和紫杉醇的分離方法，其特征在于所述步驟a 中，短鏈脂肪醇包括甲醇、乙醇、異丙醇。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的三尖杉寧堿和紫杉醇的分離方法，其特征在于所述步 驟a中，有機(jī)堿類催化劑包括N-甲基嗎啉，吡啶，1，8-二氮雜二環(huán)-雙環(huán)(5，4， 0)-7-i^一烯。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的三尖杉寧堿和紫杉醇的分離方法，其特征在于所述步驟a 中，所述三尖杉寧堿與有機(jī)堿類催化劑的摩爾比是1 0.075 0.125。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的三尖杉寧堿和紫杉醇的分離方法，其特征在于所述步驟b 中，柱層析的流動相為乙酸乙酯與石油醚體積比從1 1逐步增至2 1。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的三尖杉寧堿和紫杉醇的分離方法，其特征在于所述步驟c 中，所述酸化活性炭指濃硝酸處理過的活性碳。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的三尖杉寧堿和紫杉醇的分離方法，其特征在于所述步驟c 中，所述溶解三尖杉寧堿衍生物的溶劑為甲苯。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的三尖杉寧堿和紫杉醇的分離方法，其特征在于所述步驟c 中，重結(jié)晶溶劑為乙醇和水混合液。
全文摘要
一種三尖杉寧堿和紫杉醇的分離方法，包括以下步驟a、1，4-加成反應(yīng)將紫杉醇和三尖杉寧堿的混合物溶于短鏈脂肪醇中，加入有機(jī)堿類催化劑，室溫攪拌；b、濃縮上述溶解液，柱層析分離，得三尖杉寧堿衍生物和紫杉醇；c、將三尖杉寧堿衍生物溶解，加入酸化活性炭，加熱回流；過濾，濾液濃縮后經(jīng)重結(jié)晶得三尖杉寧堿。本發(fā)明的分離純化方法所用原料價廉易得，反應(yīng)及處理條件溫和，產(chǎn)物收率及純度高，大大方便了三尖杉寧堿是與紫杉醇的分離，便于實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化。
文檔編號C07D305/14GK102020619SQ20101025865
公開日2011年4月20日 申請日期2010年8月20日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月20日
發(fā)明者冉秀瓊, 徐信保, 李隆, 秦月紅, 葛月蘭, 蔡強(qiáng), 黃輝 申請人:江蘇紅豆杉藥業(yè)有限公司