專利名稱：水溶性蛋殼膜多肽的制作方法
水溶性蛋殼膜多肽的制作方法本發(fā)明是關(guān)于一種與人體真皮纖維芽細(xì)胞的親和性高、促進細(xì)胞黏著和增殖、促進細(xì)胞外基質(zhì)成分的合成、具有水溶性及熱穩(wěn)定性高的蛋殼膜多肽的制作方法。是將鳥類的蛋殼膜在含BaH4堿性條件下進行水解，制作出水溶性蛋殼膜多肽的簡易方法。蛋殼膜自古以來涂在火傷、擦傷、裂傷等患部，就具有抑制炎癥和促進上皮形成的效果。作為化妝品原料，蛋殼膜在改善皮膚粗糙、抗老化作用等方面的功效備受期待。但是，由于制作方法的繁瑣以及蛋類特有的硫化氫的異味、蛋白分解臭味等原因，一直沒有得以廣泛利用。水溶性蛋殼膜的制作方法在日本受到多方各界的研究，現(xiàn)在已知的方法有蛋白分解酶、堿水解、堿性含水有機溶媒等。這些方法全都要將蛋殼膜從蛋殼中分離，蛋白分解酶需要在50°C下處理20小時，堿性含水有機溶媒需要5小時以上的處理時間。無論使用以上哪種方法，水解后都必須用活性炭或離子交換樹脂進行去臭、脫色工序。本發(fā)明的目的在于追求SkDa分子量蛋殼膜多肽的抑制皮膚炎癥、促進上皮形成等功效的同時，尋求簡單的新型制作方法。為此發(fā)明人經(jīng)過多番研究實踐，事前不分離蛋殼膜，在含BaH4堿條件下水解，可以得到水溶性蛋殼膜多肽，并且發(fā)現(xiàn)此水溶性蛋殼膜多肽能有效促進皮膚纖維芽細(xì)胞的親和性和細(xì)胞增殖。具體實施方法本發(fā)明所說的蛋殼膜多肽是將鳥類蛋殼內(nèi)側(cè)的蛋殼膜水解后得到的。蛋殼膜多肽的制作方法打破雞蛋，清洗蛋殼，加入蛋殼2倍量的脫離子水，然后加入BaH4和NaOH(最終濃度分別為ImM和20mM)，在100°C下加熱60分鐘。收集溶解物，用過濾或離心分離等方法進行澄清，用排出界限為3kDa的超濾模塊過濾。截留(分子量3kDa以上)收集、冷凍干燥。 本蛋殼膜多肽的平均分子量為8kDa，氨基酸構(gòu)成如表1所示。分子量為SDS-PAGE，采用氨基酸自動分析法。表1蛋殼膜多肽的氨基酸構(gòu)成
權(quán)利要求
1.將蛋殼膜在含BaH4堿性條件下進行水解，所得水溶性蛋殼膜多肽的制造方法。
2.運用權(quán)利要求1中所述方法，分解蛋殼整體(包括蛋殼膜)。
全文摘要
本發(fā)明目的在于提供一種與人真皮纖維芽細(xì)胞的親和性高、促進細(xì)胞黏著和增殖、促進細(xì)胞外基質(zhì)成分的合成、具有水溶性及熱穩(wěn)定性高的蛋殼膜多肽的制作方法。用清水洗凈蛋殼整體(包括蛋殼膜)，在含BaH4堿性條件下水解，用排出界限為3kDa的超濾模塊過濾。截留(分子量3kDa以上)收集、干燥。通過本發(fā)明的制作方法所提取的蛋殼膜多肽的平均分子量為8kDa，易溶于水。
文檔編號C07K14/47GK102399281SQ201010274429
公開日2012年4月4日 申請日期2010年9月7日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月7日
發(fā)明者丁慶, 吉田博雅, 大石一二三 申請人:丁慶, 吉田博雅, 大石一二三