專利名稱：一種從臭靈丹中提取臭靈丹酸的工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種臭靈丹中倍半萜的提取方法，具體涉及一種從臭靈丹中提取臭靈 丹酸的工藝，屬于植物提取領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
臭靈丹酸(pterodontic acid)是天然存在的一種倍半萜類化合物，分子式C 15^22^2。楊光忠等用濾紙擴(kuò)散法對(duì)臭靈丹酸和臭靈丹二醇的抑菌活性進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明 這兩個(gè)化合物對(duì)金黃色葡球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、草分支桿菌和環(huán)狀芽孢桿菌 均呈現(xiàn)明顯的抑菌活性。臭靈丹[Laggera pterodonta ((DC. ) Beath]系菊科(Compositae)四棱峰(亦稱 六棱菊)屬植物。在云南民間，臭靈丹作為抗菌消炎、清熱解毒的良藥，一直被用來(lái)防止感 冒、咽喉炎、支氣管炎、瘧疾等。同時(shí)，也作為外敷藥用來(lái)治療疥瘡、腫毒、燒燙傷、毒蛇咬傷、 跌打損傷等。另?yè)?jù)藥理報(bào)道，除祛痰作用和實(shí)驗(yàn)性急性氣管炎有效外，還具有抗腫瘤活性， 對(duì)急性淋巴細(xì)胞型白血病，急性粒細(xì)胞型白血病及急性單核細(xì)胞型白血病患者的血細(xì)胞脫 氫酶均具有較強(qiáng)的抑制作用。全草含揮發(fā)油、倍半萜及其苷類和黃酮類成分，葉中含揮發(fā)油 約0. 05%?，F(xiàn)代研究表明其所含化學(xué)成分復(fù)雜，具有多方面的藥理活性，尤其在抗菌消炎應(yīng) 用上具有廣闊的發(fā)展前景。但目前對(duì)有效部位、有效成分以及藥理機(jī)制的研究較少，說(shuō)明了 臭靈丹還有很大的研究開(kāi)發(fā)潛力。今后應(yīng)加強(qiáng)成分的分離鑒定和藥理研究，為研制出療效 確切、副作用小和能廣泛應(yīng)用于臨床的中藥新藥提供依據(jù)。臭靈丹酸一般是從臭靈丹中提取，目前國(guó)內(nèi)外大多數(shù)報(bào)道主要是關(guān)于臭靈丹有效 成分的研究，而未見(jiàn)有從臭靈丹中提取臭靈丹酸的相關(guān)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的技術(shù)方案包括藥材干燥粉碎后經(jīng)堿溶酸沉、有機(jī)溶劑萃取，樹(shù)脂吸附洗 脫，將洗脫液濃縮干燥制得臭靈丹酸。因此，本發(fā)明提供一種從臭靈丹中提取臭靈丹酸的工藝，步驟包括將臭靈丹根干 燥并粉碎至30-60目，經(jīng)堿液浸取，將浸取液酸化至pHl-4，得沉淀物；收集沉淀物，以有機(jī) 溶劑萃取1-3次，濃縮萃取液，得濃縮物；濃縮物再經(jīng)大孔吸附樹(shù)脂柱，先以乙酸乙酯-甲醇 洗脫，得到臭靈丹酸富集流份，再濃縮上柱，用石油醚-乙酸乙酯進(jìn)行梯度洗脫，回收試劑， 濃縮干燥即得產(chǎn)品。所述堿液為氫氧化鈉溶液、碳酸氫鈉溶液、飽和石灰水、氨水等堿性水溶液，用量 為藥材質(zhì)量的5-12倍，室溫下浸提，浸提時(shí)間8-M小時(shí)。所述酸為鹽酸、醋酸、硫酸，體積百分比為0. 5-10%。所述有機(jī)溶劑為氯仿、丙酮、甲醇、乙醇、乙醚。所述大孔吸附樹(shù)脂為苯乙烯型樹(shù)脂、α -甲基苯乙烯型樹(shù)脂，孔徑20-200Α，比表面積 150-750cm2/g。所述乙酸乙酯-甲醇體積比為3 1-1 1 ；石油醚-乙酸乙酯體積比為 6:1-1: 1。綜上所述，本發(fā)明整個(gè)提取分離過(guò)程操作簡(jiǎn)單、對(duì)設(shè)備要求不高，成本低，所得產(chǎn) 品純度高。下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明要求的保護(hù)的范圍并不局 限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 將臭靈丹根烘干至含水低于13%，取Ikg粉碎至40目，得臭靈丹粉末，以5%氫氧 化鈉水溶液6L室溫下浸提12小時(shí)，過(guò)濾得浸取液，加入2%醋酸酸化至pH為2，得沉淀物； 收集沉淀物，將沉淀物以氯仿萃取3次，將氯仿層旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)減壓濃縮至萃取體積的1/20，加 入大孔樹(shù)脂成粉末狀，然后上大孔吸附樹(shù)脂柱進(jìn)行柱層析，用體積比為3 1的乙酸乙酯和 甲醇的混合洗脫液進(jìn)行洗脫；收集富集臭靈丹酸的流分，濃縮后再加入大孔樹(shù)脂拌樣上柱， 用體積比為6 1、3 1、1 1的石油醚-乙酸乙酯的混合溶劑進(jìn)行梯度洗脫，收集流分， 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，濃縮得臭靈丹酸，含量為87%，進(jìn)一步用少量丙酮溶解所得產(chǎn)物，重結(jié)晶得到純 度98. 7%的無(wú)色晶體。實(shí)施例2:將臭靈丹根烘干至含水低于13%，取Ikg粉碎至60目，得臭靈丹粉末，以飽和石 灰水溶液5L室溫下浸提M小時(shí)，過(guò)濾得浸取液，加入5%鹽酸酸化至pH為1，得沉淀物；收 集沉淀物，將沉淀物以乙醚萃取2次，將乙醚層旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)減壓濃縮至萃取體積的1/12，加入 大孔樹(shù)脂成粉末狀，然后上大孔吸附樹(shù)脂柱進(jìn)行柱層析，用體積比為2 1的乙酸乙酯和甲 醇的混合洗脫液進(jìn)行洗脫；收集富集臭靈丹酸的流分，濃縮后再加入大孔樹(shù)脂拌樣上柱，用 體積比為6 1、4 1、2 1的石油醚-乙酸乙酯的混合溶劑進(jìn)行梯度洗脫，收集流分，旋 轉(zhuǎn)蒸發(fā)，濃縮得臭靈丹酸，含量為90 %，進(jìn)一步用少量丙酮溶解所得產(chǎn)物，重結(jié)晶得到純度 99. 2%的無(wú)色晶體。實(shí)施例3:將臭靈丹根烘干至含水低于13%，取2kg粉碎至80目，得臭靈丹粉末，以2%碳 酸氫鈉水溶液20L室溫下浸提18小時(shí)，過(guò)濾得浸取液，加入0. 5%硫酸酸化至pH為2，得 沉淀物；收集沉淀物，將沉淀物以甲醇萃取1次，將甲醇層旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)減壓濃縮至萃取體積的 1/15，加入大孔樹(shù)脂成粉末狀，然后上大孔吸附樹(shù)脂柱進(jìn)行柱層析，用體積比為3 1的乙 酸乙酯和甲醇的混合洗脫液進(jìn)行洗脫；收集富集臭靈丹酸的流分，濃縮后再加入大孔樹(shù)脂 拌樣上柱，用體積比為6 1、3 1、1 1的石油醚-乙酸乙酯的混合溶劑進(jìn)行梯度洗脫， 收集流分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，濃縮得臭靈丹酸，含量為82%，進(jìn)一步用少量丙酮溶解所得產(chǎn)物，重結(jié) 晶得到純度98. 的無(wú)色晶體。實(shí)施例4:將臭靈丹根烘干至含水低于13%，取5kg粉碎至40目，得臭靈丹粉末，以2%氨水 溶液35L室溫下浸提16小時(shí)，過(guò)濾得浸取液，加入2%硫酸酸化至pH為3，得沉淀物；收集沉淀物，將沉淀物以丙酮萃2次，將丙酮層旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)減壓濃縮至萃取體積的1/20，加入大孔 樹(shù)脂成粉末狀，然后上大孔吸附樹(shù)脂柱進(jìn)行柱層析，用體積比為2 1的乙酸乙酯和甲醇 的混合洗脫液進(jìn)行洗脫；收集富集臭靈丹酸的流分，濃縮后再加入大孔樹(shù)脂拌樣上柱，用體 積比為6 1、5 1、3 1的石油醚-乙酸乙酯的混合溶劑進(jìn)行梯度洗脫，收集流分，旋 轉(zhuǎn)蒸發(fā)，濃縮得臭靈丹酸，含量為88 %，進(jìn)一步用少量丙酮溶解所得產(chǎn)物，重結(jié)晶得到純度 98. 6%的無(wú)色晶體。實(shí)施例5 將臭靈丹根烘干至含水低于13%，取IOkg粉碎至40目，得臭靈丹粉末，以2%氫 氧化鈉水溶液90L室溫下浸提12小時(shí)，過(guò)濾得浸取液，加入8%鹽酸酸化至pH為2，得沉 淀物；收集沉淀物，將沉淀物以乙醇萃取2次，將乙醇層旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)減壓濃縮至萃取體積的 1/20，加入大孔樹(shù)脂成粉末狀，然后上大孔吸附樹(shù)脂柱進(jìn)行柱層析，用體積比為1 1的乙 酸乙酯和甲醇的混合洗脫液進(jìn)行洗脫；收集富集臭靈丹酸的流分，濃縮后再加入大孔樹(shù)脂 拌樣上柱，用體積比為6 1、3 1、1 1的石油醚-乙酸乙酯的混合溶劑進(jìn)行梯度洗脫， 收集流分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，濃縮得臭靈丹酸，含量為82%，進(jìn)一步用少量丙酮溶解所得產(chǎn)物，重結(jié) 晶得到純度98. 3%的無(wú)色晶體。實(shí)施例6 將臭靈丹根烘干至含水低于13%，取IOkg粉碎至80目，得臭靈丹粉末，以3%碳 酸氫鈉水溶液80L室溫下浸提14小時(shí)，過(guò)濾得浸取液，加入10%醋酸酸化至pH為2，得沉 淀物；收集沉淀物，將沉淀物以氯仿萃取2次，將氯仿層旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)減壓濃縮至萃取體積的 1/20，加入大孔樹(shù)脂成粉末狀，然后上大孔吸附樹(shù)脂柱進(jìn)行柱層析，用體積比為3 1的乙 酸乙酯和甲醇的混合洗脫液進(jìn)行洗脫；收集富集臭靈丹酸的流分，濃縮后再加入大孔樹(shù)脂 拌樣上柱，用體積比為6 1、4 1、2 1的石油醚-乙酸乙酯的混合溶劑進(jìn)行梯度洗脫， 收集流分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，濃縮得臭靈丹酸，含量為85%，進(jìn)一步用少量丙酮溶解所得產(chǎn)物，重結(jié) 晶得到純度98. 2%的無(wú)色晶體。實(shí)施例7 將臭靈丹根烘干至含水低于13%，取20kg粉碎至60目，得臭靈丹粉末，以5%氫 氧化鈉水溶液120L室溫下近體13小時(shí)，過(guò)濾得浸取液，加入2%硫酸酸化至pH為3，得沉 淀物；收集沉淀物，將沉淀物以內(nèi)酮萃取3次，將內(nèi)酮層旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)減壓濃縮全萃取體積的 1/18，加入大孔樹(shù)脂成粉末狀，然后上大孔吸附樹(shù)脂柱進(jìn)行柱層析，用體積比為3 1的乙 酸乙酯和甲醇的混合洗脫液進(jìn)行洗脫；收集富集臭靈丹酸的流分，濃縮后再加入大孔樹(shù)脂 拌樣上柱，用體積比為6 1、4 1、1 1的石油醚-乙酸乙酯的混合溶劑進(jìn)行梯度洗脫， 收集流分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，濃縮得臭靈丹酸，含量為87%，進(jìn)一步用少量丙酮溶解所得產(chǎn)物，重結(jié) 晶得到純度98. 4%的無(wú)色晶體。實(shí)施例8 將臭靈丹根烘干至含水低于13%，取50kg粉碎至40目，得臭靈丹粉末，以飽和石 灰水溶液600L室溫下浸提10小時(shí)，過(guò)濾得浸取液，加入1 %醋酸酸化至pH為3，得沉淀物； 收集沉淀物，將沉淀物以乙醚萃取3次，將乙醚層旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)減壓濃縮至萃取體積的1/15，加 入大孔樹(shù)脂成粉末狀，然后上大孔吸附樹(shù)脂柱進(jìn)行柱層析，用體積比為3 1的乙酸乙酯和 甲醇的混合洗脫液進(jìn)行洗脫；收集富集臭靈丹酸的流分，濃縮后再加入大孔樹(shù)脂拌樣上柱，用體積比為6 1、3 1、1 1的石油醚-乙酸乙酯的混合溶劑進(jìn)行梯度洗脫，收集流分， 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，濃縮得臭靈丹酸，含量為89%，進(jìn)一步用少量丙酮溶解所得產(chǎn)物，重結(jié)晶得到純 度98. 9%的無(wú)色晶體。
權(quán)利要求
1.一種從臭靈丹中提取臭靈丹酸的工藝，其特征在于包括以下步驟將臭靈丹根干燥 并粉碎至30-60目，經(jīng)堿液浸取，將浸取液酸化至PH1-4，得沉淀物；收集沉淀物，以有機(jī)溶 劑萃取1-3次，濃縮萃取液，得濃縮物；濃縮物再經(jīng)大孔吸附樹(shù)脂柱，先以乙酸乙酯-甲醇洗 脫，得到臭靈丹酸富集流份，再濃縮上柱，用石油醚-乙酸乙酯進(jìn)行梯度洗脫，回收試劑，濃 縮干燥即得產(chǎn)品。
2.如權(quán)利要求1所述一種從臭靈丹中提取臭靈丹酸的工藝，其特征在于所述堿液為氫 氧化鈉溶液、碳酸氫鈉溶液、飽和石灰水、氨水等堿性水溶液，用量為藥材質(zhì)量的5-12倍， 室溫下浸提，浸提時(shí)間8-M小時(shí)。
3.如權(quán)利要求1所述一種從臭靈丹中提取臭靈丹酸的工藝，其特征在于所述酸為鹽 酸、醋酸、硫酸，體積百分比為0. 5-10%。
4.如權(quán)利要求1所述一種從臭靈丹中提取臭靈丹酸的工藝，其特征在于所述有機(jī)溶劑 為氯仿、丙酮、甲醇、乙醇、乙醚。
5.如權(quán)利要求1所述一種從臭靈丹中提取臭靈丹酸的工藝，其特征在于所述大孔吸附 樹(shù)脂為苯乙烯型樹(shù)脂、α -甲基苯乙烯型樹(shù)脂，孔徑20-200 Α，比表面積150-750cm2/g。
6.如權(quán)利要求1所述的一種從臭靈丹中提取臭靈丹酸的工藝，其特征在于所述乙酸乙 酯-甲醇體積比為3 1-1 1 ；石油醚-乙酸乙酯體積比為6 1-1 1。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種從臭靈丹中提取臭靈丹酸的工藝，是將臭靈丹根干燥粉碎，經(jīng)堿液浸取，浸取液酸化后靜置沉淀，得沉淀物，收集沉淀物，以有機(jī)溶劑萃取1-3次，濃縮萃取液，得濃縮物；濃縮物再經(jīng)大孔吸附樹(shù)脂柱，先以乙酸乙酯-甲醇洗脫，得到臭靈丹酸富集流份，再濃縮上柱層析，用石油醚-乙酸乙酯進(jìn)行梯度洗脫，回收試劑，濃縮干燥即得產(chǎn)品。本發(fā)明得到的臭靈丹酸純度高，含量在98％以上。
文檔編號(hào)C07C57/26GK102040506SQ20101029323
公開(kāi)日2011年5月4日 申請(qǐng)日期2010年9月27日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月27日
發(fā)明者劉東鋒, 楊成東, 郭琴 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司