專利名稱：一種從銀杏樹根皮中提取銀杏內(nèi)酯a、c的制作工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于植物中提取藥物的工藝，特別涉及一種從銀杏樹根皮中提取銀杏內(nèi)酯 A、C的制作工藝。
背景技術(shù)：
銀杏內(nèi)酯成分在國內(nèi)外各種文獻(xiàn)及專利報(bào)道較多的是從銀杏葉當(dāng)中提取分離，在 專利CN97107809. 2《銀杏內(nèi)酯的提取工藝和含有銀杏內(nèi)酯的制劑》周國柱等。工藝是水提 取銀杏葉或銀杏樹根皮，活性炭或大孔樹脂分離，濃縮沉淀后得到內(nèi)酯混合物。CN101134758A《從銀杏葉中提取分離銀杏內(nèi)酯A、B、C、J及白果內(nèi)酯單體的工藝》， 使用了乙醇提取銀杏葉，乙酸乙酯萃取，無極性樹脂柱吸附，乙醇結(jié)晶，硅膠柱層析，不同濃 度重結(jié)晶分離得到白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、B、C、J各個(gè)單體。CN1634925A《一種銀杏內(nèi)酯單體的分離純化工藝》采用柱色譜_重結(jié)晶_超臨界 co2精制純化組合工藝，制取高純銀杏內(nèi)酯類單體。柱色譜采用正相或反相固定填料，使用 水、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、氯仿、石油醚等溶劑梯度洗脫。當(dāng)中涉及的原料是工業(yè)純化后的 GBE標(biāo)準(zhǔn)提取物，色譜柱填料包含正相硅膠，反相硅膠，氧化鋁，金屬螯合樹脂，配位色譜填 料。上述工藝雖然得到的是銀杏內(nèi)酯成分，但是要么純度和產(chǎn)率偏低，要么工藝路線 長而且色譜填料循環(huán)使用頻次低、費(fèi)用高，不利于工業(yè)化應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決在提取銀杏內(nèi)酯過程中存在一些不理想的問題，本發(fā)明提供了一種從銀 杏樹根皮中分離純化銀杏內(nèi)酯A、C的生產(chǎn)工藝，目的是通過簡單的工藝得到收率高、純度 達(dá)到92%的銀杏內(nèi)酯A、C，銀杏內(nèi)酯A產(chǎn)率> 0. 04%，銀杏內(nèi)酯C產(chǎn)率> 0. 02%。本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是該發(fā)明從銀杏樹根皮中分離純化銀 杏內(nèi)酯A、C，其制作工藝的步驟為(1)原料準(zhǔn)備選取銀杏樹根皮，去除泥沙和木屑。(2)提取使用35%稀乙醇回流提取，溶解有效成分，提取液真空濃縮，回收溶劑。(3)萃取使用乙酸乙酯作為萃取劑，萃取富集有效成分，加入2% -4%乙醇或 8. 5%氯化鈉調(diào)節(jié)成分，減少乳化層；(4)回收萃取溶劑后，使用60 80%乙醇溶解，過濾去除雜質(zhì)；(5)色譜分離使用PRP512C大孔高分子反相樹脂作為色譜填料，30 40%乙醇 溶液作為流動(dòng)相，0. 1 0. 3MPa低壓淋洗，按色譜流出順序收集銀杏內(nèi)酯c和銀杏內(nèi)酯A成 分。(6)重結(jié)晶，去除其他酯性雜質(zhì)，純化銀杏內(nèi)酯C和銀杏內(nèi)酯A。(7)真空干燥，脫除殘留溶劑。本發(fā)明的有益效果是該一種從銀杏樹根皮中提取銀杏內(nèi)酯A、C的制作工藝操作簡便、重復(fù)性好，產(chǎn)率高，適用于工業(yè)化生產(chǎn)，不含毒害溶劑，PRP512C高效填料色譜分離效 率高，可低壓運(yùn)行操作，可以有效分離銀杏內(nèi)酯成分，且該色譜填料能使用NaOH溶液再生， 耐久性強(qiáng)，能夠連續(xù)使用2年以上，降低了運(yùn)行成本，純度能夠穩(wěn)定在92%以上。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例做進(jìn)一步的說明。實(shí)施例1 干燥銀杏樹根皮10kg，切短至1 3cm。加入60-75L濃度33-35% 乙醇回流提取兩次，每次2-3小時(shí)。合并提取液，趁熱過濾，真空濃縮，真空度控制 在-0. 80—0. 96Mpa,濃縮后體積控制在原體積的1/3 1/4，加入少量乙醇，調(diào)整濃度 3-5%。降溫到40 45攝氏度后，分三次加入10-15L乙酸乙酯，攪拌萃取，分離合并輕相。 回收乙酸乙酯至干。濃縮后的中間體，使用400 500ml80%乙醇攪拌溶解，溶解后過濾澄 清。加入等量純化水，將乙醇濃度稀釋到40%，得到上柱溶液。取吸附柱按照徑長比1 5 10裝入4L型號(hào)PRP512C高效色譜樹脂，8L30%乙醇洗滌樹脂柱，去除樹脂中殘留氣泡后備 用。將上柱溶液經(jīng)過泵增壓，控制壓力0. 1 0. 3MP，流速33ml/min，將上柱溶液送入色譜 柱。然后分別使用12L30%乙醇和12L40%乙醇洗脫，控制流速33 35ml/min。分段收集 色譜柱流出液，取樣10ml。使用《中國藥典2010版》當(dāng)中銀杏葉提取物內(nèi)酯檢測工藝，分析 檢測銀杏內(nèi)酯含量，分別收集含銀杏內(nèi)酯C和銀杏內(nèi)酯A洗脫液段。真空濃縮含有效成份 的洗脫液，真空控制在-0. 80-0. 96Mpa,濃縮至糊狀得到銀杏內(nèi)酯C和銀杏內(nèi)酯A濃縮液。 銀杏內(nèi)酯C段濃縮物加入30ml30%乙醇重結(jié)晶。結(jié)晶過濾后，收集沉淀，母液含有銀杏內(nèi) 酯J成分需要另外處理，沉淀再使用20ml40%乙醇重結(jié)晶三次，得到銀杏內(nèi)酯C無色針狀晶 體2. 47克。按藥典工藝，分析檢測銀杏內(nèi)酯C，含量92.8%。取銀杏內(nèi)酯A段濃縮物，加入 30ml95%乙醇，75攝氏度溶解，轉(zhuǎn)移到冰箱中，-10攝氏度靜置24小時(shí)，過濾去除黃色脂狀 析出物，黃色脂狀物含有部分銀杏內(nèi)酯B成分。取母液回收溶劑，加入60%乙醇40ml75攝 氏度溶解，重結(jié)晶三次，60 80攝氏度真空干燥10 14小時(shí)，得到銀杏內(nèi)酯A無色針狀晶 體3. 89克。按藥典工藝，分析檢測銀杏內(nèi)酯A，含量96 %。實(shí)施例2 干燥銀杏樹根皮10kg，切短至1 3cm。加入75L濃度35%乙醇回流提 取兩次，每次2-3小時(shí)。合并提取液，趁熱過濾，真空濃縮，真空度控制在-0. 80-0. 96Mpa, 濃縮后體積控制在原體積的1/3 1/4，加入少量乙醇，調(diào)整濃度3-5%。降溫到40 45 攝氏度后，分三次加入15L乙酸乙酯，攪拌萃取，分離合并輕相?；厥找宜嵋阴ブ粮?。濃縮 后的中間體，使用500ml60%乙醇攪拌溶解，過濾澄清。加入等量純化水，將乙醇濃度稀釋 到30%，得到上柱溶液。取裝入4L型號(hào)PRP512C高效色譜樹脂的吸附柱。按照流速33 35ml/min將上柱溶液送入吸附柱。使用32L35%乙醇洗脫，分段收集色譜柱流出液。取樣， 使用藥典工藝，分析檢測銀杏內(nèi)酯含量，分別收集含銀杏內(nèi)酯C和銀杏內(nèi)酯A洗脫液段。銀 杏內(nèi)酯C段濃縮物加入30ml30%乙醇重結(jié)晶四次，得到銀杏內(nèi)酯C無色針狀晶體3. 67克。 按藥典工藝，分析檢測銀杏內(nèi)酯C，含量92.8%。取銀杏內(nèi)酯A段濃縮物，加入60%乙醇 40ml重結(jié)晶四次，60 80攝氏度真空干燥10 14小時(shí)，得到銀杏內(nèi)酯A無色針狀晶體 3. 9 克。實(shí)施例3 干燥銀杏樹根皮10kg，切短至1 3cm。加入75L濃度35%乙醇回流提 取三次，每次2-3小時(shí)。合并提取液，趁熱過濾，真空濃縮，真空度控制在-0. 80-0. 96Mpa,，加入少量乙醇，調(diào)整濃度3-5%。降溫到40 45 攝氏度后，分三次加入15L乙酸乙酯，攪拌萃取，分離合并輕相。回收乙酸乙酯至干。濃縮 后的中間體，使用500ml60%乙醇攪拌溶解，過濾澄清。加入等量純化水，將乙醇濃度稀釋 到30%，得到上柱溶液。取裝入4L型號(hào)PRP512C高效色譜樹脂的吸附柱。按照流速33 35ml/min將上柱溶液送入吸附柱。使用40L35%乙醇洗脫，分段收集色譜柱流出液。取樣， 使用藥典工藝，分析檢測銀杏內(nèi)酯含量，分別收集含銀杏內(nèi)酯C和銀杏內(nèi)酯A洗脫液段。銀 杏內(nèi)酯C段濃縮物加入30ml30%乙醇重結(jié)晶四次，得到銀杏內(nèi)酯C無色針狀晶體6. 62克。 按藥典工藝，分析檢測銀杏內(nèi)酯C，含量92.5%。取銀杏內(nèi)酯A段濃縮物，加入60%乙醇 40ml重結(jié)晶四次，60 80攝氏度真空干燥10 14小時(shí)，得到銀杏內(nèi)酯A無色針狀晶體 4. 03克。按藥典工藝，分析檢測銀杏內(nèi)酯A，含量94%。 實(shí)施例4 干燥銀杏樹根皮10kg，切短至1 3cm。加入75L濃度35%乙醇回流提 取三次，每次2-3小時(shí)。合并提取液，趁熱過濾，真空濃縮，真空度控制在-0. 80-0. 96Mpa, 濃縮后體積控制在原體積的1/3 1/4，加入氯化鈉，調(diào)整濃度8. 5%。降溫到40 45攝 氏度后，分四次加入15L乙酸乙酯，攪拌萃取，分離合并輕相?；厥找宜嵋阴ブ粮伞饪s后 的中間體，使用500ml60%乙醇攪拌溶解，過濾澄清。加入等量純化水，將乙醇濃度稀釋到 30%，得到上柱溶液。取裝入4L型號(hào)PRP512C高效色譜樹脂的吸附柱。按照流速33 35ml/min將上柱溶液送入吸附柱。使用40L35%乙醇洗脫，分段收集色譜柱流出液。取樣， 使用藥典工藝，分析檢測銀杏內(nèi)酯含量，分別收集含GC和GA洗脫液段。GC段濃縮物加入 30ml30%乙醇重結(jié)晶四次，得到GC無色針狀晶體3. 74克。按藥典工藝，分析檢測銀杏內(nèi)酯 C，含量92. 8%。取GA段濃縮物，加入60%乙醇40ml重結(jié)晶四次，60 80攝氏度真空干燥 10 14小時(shí)，得到GA無色針狀晶體4. 15克，按藥典工藝，分析檢測銀杏內(nèi)酯A含量94%。
權(quán)利要求
一種從銀杏樹根皮中提取銀杏內(nèi)酯A、C的制作工藝，其特征是(1)原料準(zhǔn)備選取銀杏樹根皮，去除泥沙和木屑。(2)提取使用35％稀乙醇回流提取，溶解有效成分，提取液真空濃縮，回收溶劑。(3)萃取使用乙酸乙酯作為萃取劑，萃取富集有效成分，加入2％ 4％乙醇或8.5％氯化鈉調(diào)節(jié)成分，減少乳化層；(4)回收萃取溶劑后，使用60～80％乙醇溶解，過濾去除雜質(zhì)；(5)色譜分離使用PRP512C大孔高分子反相樹脂作為色譜填料，30～40％乙醇溶液作為流動(dòng)相，0.1～0.3MPa低壓淋洗，按色譜流出順序收集銀杏內(nèi)酯C和銀杏內(nèi)酯A成分。(6)重結(jié)晶，去除其他酯性雜質(zhì)，純化銀杏內(nèi)酯C和銀杏內(nèi)酯A。(7)真空干燥，脫除殘留溶劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從銀杏樹根皮中提取銀杏內(nèi)酯A、C的制作工藝。該發(fā)明的制作工藝為干燥銀杏樹根皮，35％乙醇回流提取，真空濃縮，乙酸乙酯萃取三次，回收溶劑，60～80％乙醇溶解過濾，然后使用PRP512C反相色譜樹脂進(jìn)行色譜純化，稀乙醇解析，接收相應(yīng)有效成分餾分，真空濃縮，各使用30％和60％乙醇，按照1∶8～15重結(jié)晶三次。該種從銀杏樹根皮中提取銀杏內(nèi)酯A、C的制作工藝操作簡便、重復(fù)性好，產(chǎn)率高，適用于工業(yè)化生產(chǎn)，不含毒害溶劑。
文檔編號(hào)C07D493/22GK101974014SQ20101029466
公開日2011年2月16日 申請(qǐng)日期2010年9月27日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月27日
發(fā)明者張艷, 曹如, 曹禮群, 李五洲, 李慧芳, 李新晴, 蔣永紅 申請(qǐng)人:徐州技源天然保健品有限公司