專(zhuān)利名稱(chēng)：一種從馬鈴果中提取柳葉水甘草堿的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種植物提取方法，特別是涉及一種柳葉水甘草堿的提取方法。
背景技術(shù)：
柳葉水甘草堿(Tabersonine，CAS NO. 4429-63-4 )是從夾竹桃植物柳葉水 甘草葉、長(zhǎng)春花種子、橢圓葉水甘草種子或者非洲加納沃坎加樹(shù)種子馬鈴果中提取的， 其化學(xué)名禾爾為 Aspidospernidine-3-carboxylic acid, 2, 3, 6, 7-tetradehydro- (5 α， 12 β, 19 α) -methylseter,分子式為C21H24N2O2，分子量為336. 42。柳葉水甘草堿目前主要用 于合成一種抗癌藥物長(zhǎng)春西汀；同時(shí)經(jīng)動(dòng)物毒理實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，柳葉水甘草堿具有明顯的降 血壓作用。美國(guó)專(zhuān)利US3758478，公開(kāi)了一種從非洲馬鈴果種提取柳葉水甘草堿的工藝，包括 多次溶劑提取、萃取、結(jié)晶等步驟，該方案存在的問(wèn)題是步驟繁瑣、需要使用大量的有苯、 氯仿等有毒溶劑，且提取率低。申請(qǐng)?zhí)枮?00810017789. 6的中國(guó)發(fā)明專(zhuān)利申請(qǐng)，張小燕等 公開(kāi)了一種柳葉水甘草堿的制備工藝，主要包括原料預(yù)處理、加熱回流處理、酸化、上柱純 化、堿化、萃取、然后用水洗正烷層，除溶劑得產(chǎn)物等步驟。該工藝具有化學(xué)步驟簡(jiǎn)單、生產(chǎn) 周期短等優(yōu)點(diǎn)，但是該工藝也存在以下缺點(diǎn)1)采用正已烷或石油醚提取，安全性較差、提 取效率偏低，提取時(shí)間長(zhǎng)；2)提取液中含有的可溶性大分子雜質(zhì)含量高，直接上柱純化，純 化效果差，且樹(shù)脂使用時(shí)間短，再生頻繁。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中柳葉水甘草堿提取方法，提取率低、提取時(shí)間長(zhǎng)，純化效果差等缺 點(diǎn)，本發(fā)明的目的是提供一種工藝簡(jiǎn)單、生產(chǎn)成本低、產(chǎn)品純度高的從馬鈴果中提取柳葉水 甘草堿的方法。為達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供的技術(shù)方案為，一種從馬鈴果中提取柳葉水甘草堿 的方法，包括如下步驟
1)預(yù)處理將馬鈴果粉碎后，備用；
2)超聲波提取采用5-8倍馬鈴果粉末體積、質(zhì)量比為80%-99.5%的乙醇溶液，在超聲 波作用下，進(jìn)行提取2次，合并提取液，過(guò)濾提取液，得濾液；
3)濃縮酸化減壓濃縮濾液，回收乙醇，濃縮液采用5-6倍體積、PH值為4-5的酸水溶 液溶解，酸水液備用；
4)超濾過(guò)濾酸水液進(jìn)行超濾過(guò)濾，除去可溶性大分子雜質(zhì)，得到超濾透析液；
5)上柱純化超濾透析液過(guò)大孔樹(shù)脂吸附，用水洗雜，再用質(zhì)量比為70%-80%的乙醇水 溶液洗脫產(chǎn)品，洗脫液濃縮備用，回收乙醇；
6)堿化、萃取調(diào)節(jié)洗脫濃縮液的濃度，用濃氨水調(diào)節(jié)PH值至10-11，采用正己烷數(shù)次 萃取，溶液用水洗滌正己烷層，回收正己烷，得到目標(biāo)產(chǎn)物柳葉水甘草堿。步驟2)中所述的超聲波提取，采用超聲波功率為200-250瓦，工作時(shí)間20_40分鐘，工作溫度為50-60°C，工作方式為工作5秒，間歇5秒。步驟4)中所述的超濾過(guò)濾，采用的超濾膜的特征為截留分子量為3000-8000道爾 頓，優(yōu)選5000道爾頓，超濾膜的材質(zhì)為聚砜、聚醚砜、復(fù)合超濾膜，其工作條件為溫度25 35 0C，工作壓力0. 5 2. 5 Mpa0步驟5)中所述的大孔樹(shù)脂優(yōu)選HPD-100大孔吸附樹(shù)脂，HPD-100大孔吸附樹(shù)脂屬 于非極性樹(shù)脂，由苯乙烯和二乙烯苯縮合而成，故又稱(chēng)芳香族吸附樹(shù)脂，市面上即可購(gòu)得。 HPD-100大孔吸附樹(shù)脂適用范圍比較廣譜，適用于皂苷類(lèi)、黃酮類(lèi)、萜類(lèi)等天然產(chǎn)物及中草 藥植物的提取分離。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是
1)步驟1中采用超聲波提取，具有提取溫度低、提取率高、提取時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)，可以提 高柳葉水甘草堿的提取率和縮短提取時(shí)間；
2)步驟1中采用乙醇提取，安全可靠；
3)步驟4中酸水液采用超濾過(guò)濾，可以有效除去溶液中的可溶性大分子雜質(zhì)，如色素 等，減輕了后續(xù)的大孔樹(shù)脂吸附負(fù)擔(dān)，提高了目標(biāo)產(chǎn)物的吸附率，以及產(chǎn)品純度，特別是在 超濾膜截留分子量為5000道爾頓時(shí)，具有純化效果好，雜質(zhì)去除率高，目標(biāo)產(chǎn)物損失小、過(guò) 濾速度快等優(yōu)點(diǎn)；
4)步驟4采用HPD100大孔吸附樹(shù)脂吸附，對(duì)目標(biāo)產(chǎn)物柳葉水甘草堿的吸附效果好、且 樹(shù)脂壽命長(zhǎng)、再生容易。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)發(fā)明做進(jìn)一步說(shuō)明。實(shí)施例1
1)預(yù)處理將馬鈴果果實(shí)干燥、粉碎過(guò)20目篩后，備用；
2)超聲波提取取500克粉末，采用6倍體積，質(zhì)量比為90%的乙醇溶液，溫度為 50-60°C，在200瓦超聲波作用下，超聲波工作5秒，間歇5秒，提取40分鐘，提取2次，合并 提取液，過(guò)濾，得濾液；
3)濃縮酸化濃縮濾液，回收乙醇，得濃縮液，加入6倍體積，PH值為4-5的鹽酸水溶液 洗滌濃縮液，得酸水液備用；
4)超濾過(guò)濾采用的超濾膜的特征為截留分子量為5000道爾頓的復(fù)合超濾膜，其工作 條件為溫度25 35°C，工作壓力2. 0 2. 5 Mpa,酸水液直接進(jìn)行超濾過(guò)濾，除去可溶性大 分子雜質(zhì)，得到超濾透析液；
5)上柱純化采用HDP-100大孔樹(shù)脂吸附，超濾透析液直接上樣，水洗雜，再用質(zhì)量比 為80%的乙醇水溶液洗脫產(chǎn)品，洗脫液濃縮備用，回收乙醇；
6)堿化、萃取濃縮液中加入500ml水調(diào)節(jié)濃度，用濃氨水調(diào)節(jié)PH值至10-11，采用 500ml正己烷數(shù)次萃取，溶液用200ml水洗滌正己烷層，回收正己烷，得到純度大于98%的目 標(biāo)產(chǎn)物柳葉水甘草堿9. lg，得率1. 82%。實(shí)施例2
1)預(yù)處理將馬鈴果果實(shí)干燥、粉碎過(guò)20目篩后，備用；
2)超聲波提取取500克粉末，采用5倍體積，質(zhì)量比為80%的乙醇溶液，溫度為
450-60°C，在250瓦超聲波作用下，超聲波工作5秒，間歇5秒，提取20分鐘，提取2次，合并 提取液，過(guò)濾，得濾液；
3)濃縮酸化濃縮濾液，回收乙醇，得濃縮液，加入5倍體積，PH值為4-5的鹽酸水溶液 洗滌濃縮液，得酸水液備用；
4)超濾過(guò)濾采用的超濾膜的特征為截留分子量為3000道爾頓的聚砜超濾膜，其工作 條件為溫度25 35°C，工作壓力1. 0 1. 8Mpa，酸水液直接進(jìn)行超濾過(guò)濾，除去可溶性大 分子雜質(zhì)，得到超濾透析液；
5)上柱純化超濾透析液過(guò)大孔樹(shù)脂吸附，用水洗雜，再用質(zhì)量比為80%的乙醇水溶液 洗脫產(chǎn)品，洗脫液濃縮備用，回收乙醇；
6)堿化、萃取濃縮液中加入500ml水調(diào)節(jié)濃度，用濃氨水調(diào)節(jié)PH值至10-11，采用 500ml正己烷數(shù)次萃取，溶液用200ml水洗滌正己烷層，回收正己烷，得到純度大于98%的目 標(biāo)產(chǎn)物柳葉水甘草堿8. 9g，得率1. 82%。實(shí)施例3
1)預(yù)處理將馬鈴果果實(shí)干燥、粉碎過(guò)20目篩后，備用；
2)超聲波提取取500克粉末，采用6倍體積，質(zhì)量比為99%的乙醇溶液，溫度為 50-60°C，在220瓦超聲波作用下，超聲波工作5秒，間歇5秒，提取30分鐘，提取2次，合并 提取液，過(guò)濾，得濾液；
3)濃縮酸化濃縮濾液，回收乙醇，得濃縮液，加入5倍體積，PH值為4-5的鹽酸水溶液 洗滌濃縮液，得酸水液備用；
4)超濾過(guò)濾采用的超濾膜的特征為截留分子量為5000道爾頓的聚醚砜超濾膜，其工 作條件為溫度25 35°C，工作壓力5. 0 1. 5 Mpa,酸水液直接進(jìn)行超濾過(guò)濾，除去可溶性 大分子雜質(zhì)，得到超濾透析液；
5)上柱純化超濾透析液過(guò)大孔樹(shù)脂吸附，用水洗雜，再用質(zhì)量比為70%的乙醇水溶液 洗脫產(chǎn)品，洗脫液濃縮備用，回收乙醇；
6)堿化、萃取濃縮液中加入500ml水調(diào)節(jié)濃度，用濃氨水調(diào)節(jié)PH值至10-11，采用 500ml正己烷數(shù)次萃取，溶液用200ml水洗滌正己烷層，回收正己烷，得到純度大于98%的目 標(biāo)產(chǎn)物柳葉水甘草堿9. lg，得率1. 74%。實(shí)施例4
1)預(yù)處理將馬鈴果果實(shí)干燥、粉碎過(guò)20目篩后，備用；
2)超聲波提取取500克粉末，采用8倍體積，質(zhì)量比為99%的乙醇溶液，溫度為 50-60°C，在250瓦超聲波作用下，超聲波工作5秒，間歇5秒，提取30分鐘，提取2次，合并 提取液，過(guò)濾，得濾液；
3)濃縮酸化濃縮濾液，回收乙醇，得濃縮液，加入6倍體積，PH值為4-5的鹽酸水溶液 洗滌濃縮液，得酸水液備用；
4)超濾過(guò)濾采用的超濾膜的特征為截留分子量為8000道爾頓的聚砜超濾膜，其工作 條件為溫度25 35°C，工作壓力5. 0 1. 0 Mpa,酸水液直接進(jìn)行超濾過(guò)濾，除去可溶性大 分子雜質(zhì)，得到超濾透析液；
5)上柱純化超濾透析液過(guò)大孔樹(shù)脂吸附，用水洗雜，再用質(zhì)量比為75%的乙醇水溶液 洗脫產(chǎn)品，洗脫液濃縮備用，回收乙醇；6)堿化、萃取濃縮液中加入500ml水調(diào)節(jié)濃度，用濃氨水調(diào)節(jié)PH值至10-11，采用 500ml正己烷數(shù)次萃取，溶液用200ml水洗滌正己烷層，回收正己烷，得到純度大于98%的目 標(biāo)產(chǎn)物柳葉水甘草堿8. 5g，得率1. 70%。
權(quán)利要求
1.一種從馬鈴果中提取柳葉水甘草堿的方法，包括如下步驟1)預(yù)處理將馬鈴果粉碎后，備用；2)超聲波提取采用5-8倍馬鈴果粉末體積、質(zhì)量比為80%-99. 5%的乙醇溶液，在超 聲波作用下，進(jìn)行超聲波提取2次，合并提取液，過(guò)濾提取液，得濾液；3)濃縮酸化減壓濃縮濾液，回收乙醇，濃縮液采用PH值為4-5的酸水溶液溶解，酸 水液備用；4)超濾過(guò)濾酸水液進(jìn)行超濾過(guò)濾，除去可溶性大分子雜質(zhì)，得到超濾透析液；5)上柱純化超濾透析液過(guò)大孔樹(shù)脂吸附，用水洗雜，再用質(zhì)量比為70%-80%的乙 醇水溶液洗脫產(chǎn)品，洗脫液濃縮備用，回收乙醇；6)堿化、萃取調(diào)節(jié)洗脫濃縮液的濃度，用濃氨水調(diào)節(jié)PH值至10-11，采用正己烷數(shù) 次萃取，溶液用水洗滌正己烷層，回收正己烷，得到目標(biāo)產(chǎn)物柳葉水甘草堿。
2.如權(quán)利要求1所述的一種從馬鈴果中提取柳葉水甘草堿的方法，其特征在于步驟2) 采用6倍馬鈴果粉末體積、質(zhì)量比為80%-99. 5%的乙醇溶液。
3.如權(quán)利要求1所述的一種從馬鈴果中提取柳葉水甘草堿的方法，其特征在于步驟 2)所述的超聲波提取采用超聲波功率為200-250瓦，工作時(shí)間20-40分鐘，工作溫度為 50-60°C，超聲波提取工作方式為工作5秒，間歇5秒。
4.如權(quán)利要求1所述的一種從馬鈴果中提取柳葉水甘草堿的方法，其特征在于步 驟4)所述的超濾過(guò)濾，采用的超濾膜的材質(zhì)為聚砜、聚醚砜或復(fù)合超濾膜，截留分子量為 3000-8000 道爾頓。
5.如權(quán)利要求1所述的一種從馬鈴果中提取柳葉水甘草堿的方法，其特征在于所述的 超濾膜的特征為截留分子量為5000道爾頓。
6.如權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的一種從馬鈴果中提取柳葉水甘草堿的方法，其特征 在于步驟4)所述的超濾過(guò)濾，其工作條件為溫度25 35°C，工作壓力0. 5 2. 5 Mpa0
7.如權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的一種從馬鈴果中提取柳葉水甘草堿的方法，其特征 在于步驟5)所述的上柱純化，所述的大孔樹(shù)脂為HPD-100大孔樹(shù)脂。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種從馬鈴果中提取柳葉水甘草堿的方法，包括預(yù)處理、超聲波提取、濃縮酸化、超濾過(guò)濾、上柱純化、堿化、萃取等步驟，采用超聲波提取和超濾過(guò)濾技術(shù)，可以有效的縮短提取時(shí)間，提高提取效率，具有產(chǎn)品純度高、收率大等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)C07D471/20GK102060856SQ20101059835
公開(kāi)日2011年5月18日 申請(qǐng)日期2010年12月21日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月21日
發(fā)明者林志華, 甘全明, 蔣荔馨, 鄭志忠, 陳義 申請(qǐng)人:英杰華納(廈門(mén))生物工程有限公司