專利名稱：一種富集純化石竹中丁香酚的方法
技術領域：
本發(fā)明屬于天然有機化學領域，涉及一種丁香酚的純化方法，特別是涉及一種利 用高速逆流色譜分離法富集純化石竹中丁香酚的制備方法。
背景技術：
石竹中國石竹、中國沼竹、石竹子花、石柱花、十樣景花、洛陽花、汪穎花、洛陽石 竹、石菊、繡竹、常夏、日暮草、瞿麥草等。是石竹科石竹屬的多年生草本植物，可以全草或根 入藥。具清熱利尿、破血通經之功效。全草含皂甙、揮發(fā)油，油中主要為丁香酚(eugenol)、 苯乙醇、苯甲酸芐酯、水楊酸芐酯、水楊酸甲酯。丁香酚是一種對人類健康有顯著保健作用的天然活性物質，已引起國際社會的普 遍關注。經科學研究及臨床應用證明，丁香酚具有很強的殺菌性，兼有局部防腐的作用，由 于具有很強的石竹麝香氣味，可用于香水香精以及各種化妝品香精和皂用香精配方中，還 可以用于食用香精的調配。之前所用的丁香酚多是從丁香花中提取，但是近年來，人們發(fā)現 天然植物石竹中含有大量的丁香酚，由于其原料石竹來源分布較廣，從中提取丁香酚并且 取得了可喜進展，其分離純化效果遠遠不如高速逆流色譜分離法的分離效果。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的在于克服常規(guī)技術提取率相對較低、提取純度低等缺點，提供一種 利用高速逆流色譜分離法富集純化石竹中丁香酚的制備方法。為實現上述目的，本發(fā)明采 用的技術方案是一種利用高速逆流色譜分離法富集純化石竹中丁香酚的制備方法。其步驟如下(1)用70%乙醇浸提石竹，浸提液蒸去乙醇后，得初提物；(2) 丁香酚的初步純化將初提物用高速逆流色譜分離法進行初步分離，收集含 丁香酚的組分，蒸干溶劑；(3)石竹的精制再將(2)所得組分用高速逆流色譜分離法制成高純度90%以上 的丁香酚純品高速逆流色譜法對石竹進行初步純化，可選用的溶劑體系主要有三個。均以上相 為固定相，下相為流動相。一號溶劑體系由三個組分構成，A組分可選用乙酸乙酯、乙酸丙 酯、乙酸異丙酯、乙酸正丁酯等脂肪脂類。B組分可選用正丁醇、異丁醇、叔丁醇等脂肪醇。 C組分為水，優(yōu)選乙酸乙酯-正丁醇-水體系。A、B、C體積比為2-10 2-10 0.5-2. 二 號溶劑體系由四個組分構成，A組分可選用乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸異丙酯、乙酸正丁酯 等脂肪脂類。B、C組分可選用甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丙酮、正丁醇、異丁醇、叔丁醇等脂 肪醇或脂肪酮。D組分為水，優(yōu)選乙酸乙酯-正丁醇-甲醇-水體系。A、B、C、D體積比為 0.5-5 10-100 10-100 0.5-5.三號溶劑體系由兩個組分構成，A組分可選用正丁醇、 異丁醇、叔丁醇等脂肪醇。B組分為水，優(yōu)選正丁醇-水體系。A、B體積比為1-100 1-100.
高速逆流色譜分離法對丁香酚精制溶劑體系主要有三個。均以上相為固定相，下 相為流動相。一號溶劑體系由三個組分構成，A組分可選用氯仿、二氯甲烷、四氯化碳等鹵 代烴。B組分可選用甲醇、乙醇、丙醇、丙酮等脂肪醇或脂肪酮。C組分為水，優(yōu)選氯仿-甲 醇-水體系。A、B、C體積比為2-25 2-25 1-10. 二號溶劑體系由四個組分構成，A組 分可選用氯仿、二氯甲烷、四氯化碳等鹵代烴。B、C組分可選用甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丙 酮、正丁醇、異丁醇、叔丁醇等脂肪醇或脂肪酮。D組分為水，優(yōu)選氯仿-異丙醇-甲醇-水 體系。A、B、C、D體積比為2-10 0.5-5 2-10 0.5-5.三號溶劑體系由五個組分構成， A、C組分可選用氯仿、二氯甲烷、四氯化碳等鹵代烴。B、D組分可選用甲醇、乙醇、丙醇、異 丙醇、丙酮、正丁醇、異丁醇、叔丁醇等脂肪醇或脂肪酮。E組分為水，優(yōu)選二氯甲烷-異丙 醇-氯仿-甲醇-水體系。A、B、C、D、E 體積比為 0. 5-2 1-10 2-10 2-10 0.5-2.實驗適用于室溫為15_30°C下進行。用本法制備的丁香酚純度可達到90%以上。本法適用于以各種含丁香酚的天然植 物，天然植物的提取物為原料制備高純度的丁香酚。適用于采用各種型號的逆流色譜儀分 離制備丁香酚，用高速逆流色譜法制備丁香酚可連續(xù)、高效、快速的液液分配色譜分離，具 有分離量大、樣品無損失、回收率高、分離環(huán)境緩和、節(jié)約溶劑等特點。
具體實施例方式實施例1 采用乙酸乙酯_正丁醇_水和氯仿_甲醇-異丙醇_水兩溶劑體系制備純度高 于90%的丁香酚使用半制備型高速逆流色譜儀，配有NS-1007泵，20ml進樣閥，聚四氟乙 烯柱，柱的容積為240ml,8823A-UV紫外檢測器Yokogawa 3057便攜式記錄儀。進樣前，先 用固定相充滿整個柱子，調整主機轉速為800rpm，以2. Oml/min的流速將流動相泵入柱內， 待整個體系建立動態(tài)平衡后，由進樣閥進樣，然后根據檢測器紫外圖譜，接收目標成分。丁 香酚的制備分兩步進行(1)將體積比為2 3 1的乙酸乙酯-正丁醇-水混溶于分液 漏斗中，搖勻后靜止分層。取其上層溶液(上相)為固定相，下層溶液(下相)為流動相。 用1 1的上相和下相混合液20ml溶解取得的粗提取物IOOmg進行分離，收集含丁香酚的 組分，蒸干。(2)將體積比為6 5 4 0.5的氯仿-甲醇-異丙醇-水混溶于分液漏 斗中，搖勻后靜止分層。取其上層溶液(上相)為固定相，下層溶液(下相)為流動相。用 1 1的上相和下相混合液2ml溶解(1)所得樣品進行分離，收集含丁香酚的組分峰，冷凍 干燥。得丁香酚，經HPLC分析，其純度達到91%。實施例2:采用乙酸乙酯_異丁醇_丙酮-水和氯仿_甲醇_水兩溶劑體系制備純度高于 90%的丁香酚使用半制備型高速逆流色譜儀，配有NS-1007泵，20ml進樣閥，聚四氟乙烯 柱，柱的容積為240ml，8823A-UV紫外檢測器Yokogawa 3057便攜式記錄儀。進樣前，先用固 定相充滿整個柱子，調整主機轉速為800rpm，以2. Oml/min的流速將流動相泵入柱內，待整 個體系建立動態(tài)平衡后，由進樣閥進樣，然后根據檢測器紫外圖譜，接收目標成分。胡蘿卜 素的制備分兩步進行(1)將體積比為5 40 60 1的乙酸乙酯-異丁醇-丙酮-水混 溶于分液漏斗中，搖勻后靜止分層。取其上層溶液(上相)為固定相，下層溶液(下相)為 流動相。用1 1的上相和下相混合液20ml溶解取得的粗提取物200mg進行分離，收集含丁香酚的組分，蒸干。(2)將體積比為15 13 5的氯仿-甲醇-水混溶于分液漏斗中， 搖勻后靜止分層。取其上層溶液(上相)為固定相，下層溶液(下相)為流動相。用1 1 的上相和下相混合液2ml溶解(1)所得樣品進行分離，收集含丁香酚的組分峰，冷凍干燥。 得丁香酚，經HPLC分析，其純度達到91. 25%。實施例3:采用正丁醇_水和二氯甲烷_異丙醇_氯仿-甲醇-水兩溶劑體系制備純度高 于90%的丁香酚使用半制備型高速逆流色譜儀，配有NS-1007泵，20ml進樣閥，聚四氟乙 烯柱，柱的容積為240ml,8823A-UV紫外檢測器Yokogawa 3057便攜式記錄儀。進樣前，先 用固定相充滿整個柱子，調整主機轉速為800rpm，以2. Oml/min的流速將流動相泵入柱內， 待整個體系建立動態(tài)平衡后，由進樣閥進樣，然后根據檢測器紫外圖譜，接收目標成分。胡 蘿卜素的制備分兩步進行(1)將體積比為45 5的正丁醇-水混溶于分液漏斗中，搖勻 后靜止分層。取其上層溶液(上相)為固定相，下層溶液(下相)為流動相。用1 1的 上相和下相混合液20ml溶解取得的粗提取物150mg進行分離，收集含丁香酚的組分，蒸干。 (2)將體積比為1 4 7 7 1的二氯甲烷-異丙醇-氯仿-甲醇-水混溶于分液漏 斗中，搖勻后靜止分層。取其上層溶液(上相)為固定相，下層溶液(下相)為流動相。用 1 1的上相和下相混合液2ml溶解(1)所得樣品進行分離，收集含丁香酚的組分峰，冷凍 干燥。得丁香酚，經HPLC分析，其純度達到92. 5%以上。
權利要求
1.一種利用高速逆流色譜法富集純化石竹中丁香酚的方法，其特征在于，其步驟如下(1)用70%乙醇浸提石竹，浸提液蒸去乙醇后，得初提物；(2)丁香酚的初步純化將初提物用高速逆流色譜分離法進行初步分離，收集含丁香 酚的組分，蒸干溶劑；(3)石竹的精制再將( 所得組分用高速逆流色譜分離法制成高純度的丁香酚純品。
2.根據權利要求1所述的利用高速逆流色譜分離法富集純化石竹中丁香酚的制備方 法其特質是用高速逆流色譜分離法對丁香酚進行初步純化，可選的溶劑體系由三個體系 構成，A組分可選用乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸異丙酯、乙酸正丁酯等脂肪脂類。B組分可選 用正丁醇、異丁醇、叔丁醇等脂肪醇。C組分為水，優(yōu)選乙酸乙酯-正丁醇-水體系。A、B、C 體積比為 2-10 2-10 0.5-2。.
3.根據權利要求1所述的利用高速逆流色譜分離法富集純化石竹中丁香酚的制 備方法其特質是用高速逆流色譜分離法對丁香酚進行初步純化，可選的溶劑體系由 四個體系構成，A組分可選用乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸異丙酯、乙酸正丁酯等脂肪脂 類。B、C組分可選用甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丙酮、正丁醇、異丁醇、叔丁醇等脂肪醇 或脂肪酮。D組分為水，優(yōu)選乙酸乙酯-正丁醇-甲醇-水體系。A、B、C、D體積比為 0.5-5 10-100 10-100 0.5-5。
4.根據權利要求1所述的利用高速逆流色譜分離法富集純化石竹中丁香酚的制備方 法其特質是用高速逆流色譜分離法對丁香酚進行初步純化，可選的溶劑體系由兩個體系 構成，A組分可選用正丁醇、異丁醇、叔丁醇等脂肪醇。B組分為水，優(yōu)選正丁醇-水體系。 A、B 體積比為 1-100 1-100。
5.根據權利要求1所述的利用高速逆流色譜分離法富集純化石竹中丁香酚的制備方 法其特質是用高速逆流色譜分離法對丁香酚精制溶劑體系由三個組分構成，A組分可選 用氯仿、二氯甲烷、四氯化碳等鹵代烴。B組分可選用甲醇、乙醇、丙醇、丙酮等脂肪醇或脂肪 酮。C組分為水，優(yōu)選氯仿-甲醇-水體系。A、B、C體積比為2-25 2-25 I-IO0
6.根據權利要求1所述的利用高速逆流色譜分離法富集純化石竹中丁香酚的制備方 法其特質是用高速逆流色譜分離法對丁香酚精制溶劑體系由四個組分構成，A組分可選 用氯仿、二氯甲烷、四氯化碳等鹵代烴。B、C組分可選用甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丙酮、正 丁醇、異丁醇、叔丁醇等脂肪醇或脂肪酮。C組分為水，優(yōu)選氯仿-異丙醇-甲醇-水體系。 A、B、C、D 體積比為 2-10 0.5-5 2-10 0.5-5。
7.根據權利要求1所述的利用高速逆流色譜分離法富集純化石竹中丁香酚的制備方 法其特質是用高速逆流色譜分離法對丁香酚精制溶劑體系由五個組分構成，A、C組分可 選用氯仿、二氯甲烷、四氯化碳等鹵代烴。B、D組分可選用甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丙酮、 正丁醇、異丁醇、叔丁醇等脂肪醇或脂肪酮。E組分為水，優(yōu)選二氯甲烷-異丙醇-氯仿-甲 醇-水體系。A、B、C、D、E 體積比為 0. 5-2 1-10 2-10 2-10 0.5-2·。
全文摘要
本發(fā)明屬于天然有機化學領域，涉及一種丁香酚的純化方法，特別是涉及一種利用高速逆流色譜分離法富集純化石竹中丁香酚的制備方法。其特點是采用高速逆流色譜分離法從天然植物石竹浸提液經過兩次純化得到90％純度的丁香酚。本法適用于以各種含丁香酚的天然植物，天然植物的提取物為原料制備高純度的丁香酚。適用于采用各種型號的逆流色譜儀分離制備丁香酚，用高速逆流色譜法制備丁香酚可連續(xù)、高效、快速的液液分配色譜分離，具有分離量大、樣品無損失、回收率高、分離環(huán)境緩和、節(jié)約溶劑等特點。
文檔編號C07C43/23GK102060677SQ20101062294
公開日2011年5月18日 申請日期2010年12月20日 優(yōu)先權日2010年12月20日
發(fā)明者劉德文, 姚德利, 姚德坤, 姚航, 鄭君, 閆峰, 黃運生 申請人:大興安嶺嘉迪歐營養(yǎng)原料有限公司