專(zhuān)利名稱(chēng)：可斷裂peg脂質(zhì)衍生物在制劑中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體地說(shuō)是涉及可斷裂PEG脂質(zhì)衍生物在制劑中的用 途。
背景技術(shù)：
在臨床使用中，為達(dá)到療效，PEG化液體微粒制劑往往需要進(jìn)行重復(fù)注射，但是， 目前關(guān)于體內(nèi)重復(fù)注射PEG化制劑的藥動(dòng)學(xué)研究資料較為匱乏。有研究者發(fā)現(xiàn)，當(dāng)向同一 動(dòng)物體內(nèi)重復(fù)注射(間隔幾天)PEG化脂質(zhì)體時(shí)，會(huì)引起二次注射PEG化脂質(zhì)體的藥動(dòng)學(xué)行 為和肝脾組織分布發(fā)生異常變化，這一現(xiàn)象被稱(chēng)之為加速血液清除(Accelerated Blood Clearance,簡(jiǎn)稱(chēng) ABC)(參見(jiàn)Dams ETM, Laverman P, Oyen WJG, et al. Accelerated Blood Clearance and Altered Biodistribution of Repeated Injections of Sterically Stabilized Liposomes [J], J Pharmacol Exp Ther, 2000, 292: 1071-1079 ； Laverman P, Carstens MG, Boerman 0C, et al. Factors affecting the accelerated blood clearance of polyethylene glycol-liposomes upon repeated injection [J]· J Pharmacol Exp Ther, 2001， 298: 607-612 ； Ishida Τ, Atobe K, Wang XY, et al. Accelerated blood clearance of PEGylated liposomes upon repeated injections: Effect of doxorubicin-encapsulation and high-dose first injection [J]. J Control Release, 2006, 115: 251-258.)。也有研究表明重復(fù)注射陽(yáng)離子牛血清白 蛋白修飾的PEG與PLA交聯(lián)形成的納米粒(CBSA-NP)也產(chǎn)生了 ABC現(xiàn)象，并且與前人對(duì) PEG化脂質(zhì)體誘導(dǎo)ABC現(xiàn)象的研究結(jié)論基本一致(參見(jiàn)Lu W, Wan J, She ZJ, et al. Brain delivery property and accelerated blood clearance of cationic albumin conjugated pegylated nanoparticle [J]· J Control Release, 2007, 118:38-53·)。 因此，PEG化液體微粒制劑都具有產(chǎn)生加速血液清除即ABC現(xiàn)象的可能?？烧T導(dǎo)免疫反應(yīng)的不依賴(lài)胸腺的二級(jí)抗原(TI-2)是由細(xì)菌的細(xì)胞壁和莢膜 多糖組成的，其具有高度重復(fù)結(jié)構(gòu)(參見(jiàn)Ishida T, Masuda K, Ichikawa T, et al. Accelerated clearance of a second injection of PEGylated liposomes in mice [J]· Int J Pharm, 2003, 255: 167-174.)。該抗原有可能通過(guò)與B細(xì)胞表面的免疫球蛋白廣泛 交聯(lián)，而導(dǎo)致B細(xì)胞分泌IgM和IgG。當(dāng)TI-2激活B細(xì)胞時(shí)，抗原決定簇的密度是非常關(guān)鍵 的密度過(guò)低對(duì)于激活細(xì)胞是不夠的；密度過(guò)高則細(xì)胞反應(yīng)性反而降低。PEG聚合物也具有 高度重復(fù)結(jié)構(gòu)，低劑量的PEG化制劑即能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生ABC現(xiàn)象，表明在此條件下抗原決定簇 (PEG)的密度足以激活B細(xì)胞。一旦PEG化制劑到達(dá)脾臟，就會(huì)與被PEG (或PEG化制劑)激 活的B細(xì)胞表面的抗原結(jié)合、交聯(lián)，導(dǎo)致抗PEG IgM的產(chǎn)生(參見(jiàn)Ishida T, Atobe K, Wang XY, et al. Accelerated blood clearance of PEGylated liposomes upon repeated injections: Effect of doxorubicin-encapsulation and high-dose first injection [J], J Control Release, 2006， 115: 251-258.)。眾所周知，脾在免疫反應(yīng)中扮演著重要角色。首次注射PEG化脂質(zhì)體之前將脾切
4除，則二次注射PEG化脂質(zhì)體的ABC現(xiàn)象完全消失；未切除脾的對(duì)照組中大鼠血清與脂質(zhì)體 結(jié)合的IgM量比脾切除組高8倍，這表明PEG化脂質(zhì)體與IgM的結(jié)合是誘導(dǎo)ABC現(xiàn)象的關(guān)鍵 因素(參見(jiàn) Ishida T, Ichihara M, Wang XY, et al. Spleen plays an important role in the induction of accelerated blood clearance of PEGylated liposomes [J]. J Control Release, 2006，115: 243-250.)。PEG化脂質(zhì)體充當(dāng)了脾臟中B細(xì)胞的活化劑。綜合目前的研究結(jié)果，認(rèn)為ABC現(xiàn)象是通過(guò)以下假設(shè)機(jī)理產(chǎn)生的PEG化制劑的 首劑量在脾臟產(chǎn)生抗PEG IgM，該血清因子選擇性結(jié)合到幾天后注射的PEG化制劑表面的 PEG上，并隨后激活補(bǔ)體系統(tǒng)。而這會(huì)依次導(dǎo)致補(bǔ)體C3片段對(duì)制劑的調(diào)理作用，結(jié)果增強(qiáng) 了肝臟枯否(Kupffer)細(xì)胞對(duì)制劑的攝取，于是產(chǎn)生了 ABC現(xiàn)象(參見(jiàn)Ishida T, Masuda K, Ichikawa T, et al. Accelerated clearance of a second injection of PEGylated liposomes in mice [J]· Int J Pharm, 2003, 255: 167-174 ； Ishida Τ, Harada Μ, Wang XY, et al. Accelerated blood clearance of PEGylated liposomes following preceding liposome injection: Effects of lipid dose and PEG surface-density and chain length of the first-dose liposomes [J]· J Control Release, 2005, 105: 305-317 ； Ishida Τ, Ichihara Μ, Wang XY, et al. Spleen plays an important role in the induction of accelerated blood clearance of PEGylated liposomes [J]. J Control Release, 2006，115: 243-250.)。藥物或藥用輔料具有免疫原性是一個(gè)非常嚴(yán)重的問(wèn)題，因?yàn)榭贵w的產(chǎn)生會(huì)嚴(yán)重降 低藥物的安全性和效力，這已經(jīng)阻礙了一些藥物的發(fā)展，包括以蛋白質(zhì)為基礎(chǔ)的療法，如單 克隆抗體和帶有致免疫成分的病毒載體。隨著基因藥物治療的發(fā)展，脂質(zhì)體作為基因藥物 載體得到了廣泛而深入的研究，甚至在美國(guó)已經(jīng)進(jìn)入I期臨床試驗(yàn)。ABC現(xiàn)象表明非病毒載 體致免疫的潛在危險(xiǎn)，特別是當(dāng)這些載體攜帶免疫刺激因子一如質(zhì)粒DNA (pDNA)時(shí)，可以 充當(dāng)強(qiáng)的免疫佐劑(參見(jiàn)Judge A, McClintock K, Phelps JR, et al. Hypersensitivity and loss of disease site targeting caused by antibody responses to PEGylated liposomes [J], Mol Ther, 2006，13:3^-337. )。kmple 等的研究表明，重復(fù)注射包封 寡核苷酸(0DN)、pDNA或RNA核酶的PEG化脂質(zhì)體會(huì)誘導(dǎo)強(qiáng)烈的免疫應(yīng)答，導(dǎo)致制劑血液 循環(huán)時(shí)間縮短和小鼠死亡率顯著增加(參見(jiàn)kmple SC, Harasym TO, Clow ΚΑ, et al. Immunogenicity and rapid blood clearance of liposomes containing polyethylene glycol-lipid conjugates and nucleic acid [J]. J Pharmacol Exp Ther, 2005, 312: 1020-1026.)。另外，如果PEG化制劑攜載的藥物毒性較強(qiáng)，ABC現(xiàn)象會(huì)引起對(duì)非治療器官(如肝 臟)的毒性。盡管從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)得出的結(jié)論不可能與臨床表現(xiàn)完全一致，但是對(duì)于液體微粒制 劑來(lái)說(shuō)，當(dāng)需要多次注射或組合給藥時(shí)，深入研究其體內(nèi)分布和藥代動(dòng)力學(xué)是必要的。對(duì)于 “細(xì)胞穿透肽”、“siRNA”等PEG化載體制劑，ABC現(xiàn)象會(huì)極大地降低其臨床應(yīng)用前景與價(jià)值。有人研究通過(guò)調(diào)整藥物制劑表面PEG脂質(zhì)衍生物的性質(zhì)來(lái)避免ABC現(xiàn)象。研究 人員采用較小的C14脂質(zhì)錨定物增加PEG從粒子表面的解離，結(jié)果發(fā)現(xiàn)這會(huì)使ABC現(xiàn)象減 弱(參見(jiàn) Judge ADj McClintock K, Shaw JRj et al. Hypersensitivity and loss of disease site targeting caused by antibody responses to pegylated liposomes [J]. Mol. Ther. 2006，13: 3^-337.)。因此，應(yīng)用可交換的PEG脂質(zhì)替換牢固結(jié)合于
綜上所述，本發(fā)明的目的是利用可斷裂PEG脂質(zhì)衍生物修飾液體微粒制劑來(lái)達(dá)到 減輕或避免PEG化藥物制劑產(chǎn)生ABC。此種技術(shù)還未見(jiàn)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供可斷裂PEG脂質(zhì)衍生物在制備減輕或避免加速血液清除(以 下簡(jiǎn)稱(chēng)ABC) PEG化制劑中的應(yīng)用。在同一動(dòng)物體內(nèi)重復(fù)注射不可斷裂PEG脂質(zhì)衍生物修飾微粒制劑會(huì)產(chǎn)生加速血 液清除(即ABC)，這對(duì)疾病的治療顯然是不利的。本發(fā)明人通過(guò)大量試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，利用可 斷裂PEG脂質(zhì)衍生物修飾液體微粒制劑(包括脂質(zhì)體、囊泡、乳劑、微乳、膠束和納米粒等制 劑)，重復(fù)注射此類(lèi)PEG化制劑后能夠達(dá)到減輕或避免ABC產(chǎn)生的目的。本發(fā)明提供的可斷裂PEG脂質(zhì)衍生物中PEG與脂質(zhì)鏈段之間是通過(guò)酯鍵相連的， 優(yōu)選的方案是，所述可斷裂PEG脂質(zhì)衍生物中PEG與脂質(zhì)鏈段之間是通過(guò)羧酸酯鍵、碳酸酯 鍵或磷酸酯鍵相連的。優(yōu)選的方案是，本發(fā)明的可斷裂PEG脂質(zhì)衍生物具有下列通式所示的結(jié)構(gòu)
權(quán)利要求
1.可斷裂PEG脂質(zhì)衍生物在制備減輕或避免加速血液清除PEG化制劑中的應(yīng)用。
2.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述可斷裂PEG脂質(zhì)衍生物中PEG與脂質(zhì) 鏈段之間是通過(guò)酯鍵相連的。
3.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于所述可斷裂PEG脂質(zhì)衍生物中PEG與脂質(zhì) 鏈段之間是通過(guò)羧酸酯鍵、碳酸酯鍵或磷酸酯鍵相連的。
4.如權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于所述可斷裂PEG脂質(zhì)衍生物具有下列 通式所示的結(jié)構(gòu)
5.如權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于所述可斷裂PEG脂質(zhì)衍生物具有下列 通式所示的結(jié)構(gòu)
6.如權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于所述可斷裂PEG脂質(zhì)衍生物具有下列 通式所示的結(jié)構(gòu)
7.如權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于所述可斷裂PEG脂質(zhì)衍生物具有下列 通式所示的結(jié)構(gòu)
8.如權(quán)利要求1或2所述的衍生物，其特征在于所述可斷裂PEG脂質(zhì)衍生物具有下 列通式所示的結(jié)構(gòu)
9.如權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于所述可斷裂PEG脂質(zhì)衍生物具有下列通式所示的結(jié)構(gòu)
10.如權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于所述可斷裂PEG脂質(zhì)衍生物具有下列 通式所示的結(jié)構(gòu)
11.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述PEG化制劑為液體微粒制劑，包括脂 質(zhì)體、囊泡、乳劑、微乳、膠束和納米粒制劑。
12.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述PEG化制劑中可斷裂PEG脂質(zhì)衍生物 在脂質(zhì)材料中的質(zhì)量濃度> H
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，提供可斷裂聚乙二醇脂質(zhì)衍生物在制備減輕或避免加速血液清除PEG化制劑中的應(yīng)用。本發(fā)明是利用可斷裂聚乙二醇脂質(zhì)衍生物如PEG-膽固醇半琥珀酸酯、PEG-膽固醇碳酸甲酯或PEG-α生育酚半琥珀酸酯等修飾脂質(zhì)體、囊泡、乳劑、微乳、膠束和納米粒等液體微粒制劑，通過(guò)測(cè)定重復(fù)注射可斷裂PEG脂質(zhì)衍生物修飾藥物制劑后動(dòng)物血漿中以及肝脾等組織中制劑消除的變化，證明重復(fù)注射可斷裂PEG脂質(zhì)衍生物修飾的微粒制劑僅引起輕微的或不能引起加速血液清除，即可以減輕或避免加速血液清除產(chǎn)生。本發(fā)明開(kāi)拓了可斷裂PEG脂質(zhì)衍生物的新用途。
文檔編號(hào)C07D311/72GK102068701SQ20111002003
公開(kāi)日2011年5月25日 申請(qǐng)日期2011年1月18日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月18日
發(fā)明者宋陽(yáng), 張玲, 徐緩, 洪維維, 王龍, 鄧意輝, 鄒佳 申請(qǐng)人:沈陽(yáng)藥科大學(xué)