專(zhuān)利名稱(chēng)：一種牛彌菜醇a的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及ー種牛彌菜醇A的制備方法，尤其是一種應(yīng)用膜分離和高速逆流色譜技術(shù)從匙羹藤中制備牛彌菜醇A的方法。
背景技術(shù)：
匙羹藤為蘿摩科植物匙羹藤的干燥莖及葉，又稱(chēng)武靴藤，羊角藤，金剛藤。分布于印度，越南及我國(guó)廣東、廣西、福建、臺(tái)灣和云南等省，具有清熱解毒、生肌消腫、祛風(fēng)止痛等功效，匙羹藤在民間應(yīng)用已久，民間用以治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、癰癤腫毒、毒蛇咬傷、深部膿腫等癥。國(guó)外學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)匙羹藤有降血糖及抑制甜味反應(yīng)等作用，在日本，美國(guó)，歐洲申請(qǐng) 有20多項(xiàng)專(zhuān)利。匙羹藤性平，味苦，具祛風(fēng)涼血，消腫止痛，健胃利尿之功效。用于風(fēng)寒濕痹，糖尿病，脈管炎等。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)其具有降血糖、抑制甜味反應(yīng)等作用。匙羹藤可以抑制吃甜食的欲望、抑制身體對(duì)糖的吸收，降低血糖，幫助修復(fù)胰臟受損細(xì)胞，改善胰島素的分泌量。匙羹藤主要含有皂苷類(lèi)、留醇類(lèi)化合物，韋建華等從匙羹藤こ醇提取物和正丁醇提取物中分離純化得到牛彌菜醇A，經(jīng)過(guò)研究表明，牛彌菜醇A具有降血糖作用。丘琴等通過(guò)薄層掃描法測(cè)定匙羹藤中牛彌菜醇A的含量為2. 08%。牛彌菜醇A (Condnritol A),分子式C6HltlO4,無(wú)色針狀結(jié)晶，較多地溶于熱水,不溶于醚。具有多元醇的化學(xué)性質(zhì)，可以被酯化、醚化、氧化、脫水?，F(xiàn)有技術(shù)中，牛彌菜醇A提取分離方法較少，均為實(shí)驗(yàn)室成分鑒別應(yīng)用方法，如正丁醇萃取、硅膠柱層析等，這些方法制備的牛彌菜醇A純度低，制備量小。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供ー種操作簡(jiǎn)單，成本低，純度高的牛彌菜醇A的制備方法。為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用下列技術(shù)方案ー種牛彌菜醇A的制備方法，其特征在于包含以下步驟I)醇提取匙羹藤莖葉，加入5-10倍量(V/W)的70-80%的こ醇溶液加熱回流提取2-3次，毎次l-3h，過(guò)濾，合并提取液；2)活性炭脫色上述提取液加入藥用活性炭，30-50°C保溫脫色30-60min，得到脫色液；3)膜分離上述脫色液通過(guò)超濾膜系統(tǒng)，收集透過(guò)液；4)高速逆流色譜分離將透過(guò)液濃縮，干燥得到牛彌菜醇A粗品，采用高速逆流色譜進(jìn)行分離，制得牛彌菜醇A。所述活性炭的用量為5%。所述超濾膜系統(tǒng)為聚礬中空纖維超濾膜系統(tǒng)，截留分子量為1000-3000，壓カ
0.5-lMPa。
所述高速逆流色譜中兩相溶劑系統(tǒng)為庚烷(5-8)丙酮(2-3)甲醇(4-6)。綜上所述，本發(fā)明存在以下優(yōu)點(diǎn)本エ藝采用提取法制備牛彌菜醇A，超濾除具有明顯的濾除膠體雜質(zhì)的性能外，還具有良好的脫色效果；采用高速逆流色譜分離制備量大，周期短，產(chǎn)品純度高，而且分離過(guò)程樣品無(wú)損失，無(wú)污染。下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
對(duì)本發(fā)明做進(jìn)ー步闡述，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I取匙羹藤莖葉lkg，粉碎，加入5倍量(V/W)的75%的こ醇溶液加熱回流提取2次，毎次lh，過(guò)濾，合并提取液，加入5%藥用活性炭，40°C保溫脫色30min，過(guò)濾得到脫色液，將脫色液通過(guò)截留分子量為1000-3000的聚礬中空纖維超濾膜系統(tǒng)，壓カ0. 8MPa，收集透過(guò) 液，濃縮，干燥得到牛彌菜醇A粗品。取庚烷(5)丙酮(3)甲醇(4)置于分液漏斗中混合均勻，靜止分層，分離上下相，以上相為固定相，以下相為流動(dòng)相，取上述粗品適量溶于下相中待用，開(kāi)啟高速逆流色譜儀，以3ml/min流速泵入流動(dòng)相，當(dāng)流動(dòng)相流出，開(kāi)始連續(xù)進(jìn)樣，首尾洗脫，轉(zhuǎn)速控制為900r/min，收集牛彌菜醇A流分，濃縮，低溫干燥即得牛彌菜醇A13. 8g，經(jīng)HPLC檢測(cè)，純度為96. 5 %。實(shí)施例2取匙羹藤莖葉1kg，粉碎，加入10倍量(V/W)的75%的こ醇溶液加熱回流提取2次，毎次3h，過(guò)濾，合并提取液，加入5 %藥用活性炭，35°C保溫脫色60min，過(guò)濾得到脫色液，將脫色液通過(guò)截留分子量為1000-3000的聚礬中空纖維超濾膜系統(tǒng)，壓カ0. 7MPa，收集透過(guò)液，濃縮，干燥得到牛彌菜醇A粗品。取庚烷(7)丙酮(3)甲醇(5)置于分液漏斗中混合均勻，靜止分層，分離上下相，以上相為固定相，以下相為流動(dòng)相，取上述粗品適量溶于下相中待用，開(kāi)啟高速逆流色譜儀，以3ml/min流速泵入流動(dòng)相，當(dāng)流動(dòng)相流出，開(kāi)始連續(xù)進(jìn)樣，首尾洗脫，轉(zhuǎn)速控制為700r/min，收集牛彌菜醇A流分，濃縮，低溫干燥即得牛彌菜醇A13. 9g，經(jīng)HPLC檢測(cè)，純度為97.6%0實(shí)施例3取匙羹藤莖葉1kg，粉碎，加入6倍量(V/W)的80%的こ醇溶液加熱回流提取3次，毎次lh，過(guò)濾，合并提取液，加入5%藥用活性炭，50°C保溫脫色40min，過(guò)濾得到脫色液，將脫色液通過(guò)截留分子量為1000-3000的聚礬中空纖維超濾膜系統(tǒng)，壓カI(xiàn)MPa，收集透過(guò)液，濃縮，干燥得到牛彌菜醇A粗品。取庚烷(5):丙酮(3):甲醇(4)置于分液漏斗中混合均勻，靜止分層，分離上下相，以上相為固定相，以下相為流動(dòng)相，取上述粗品適量溶于下相中待用，開(kāi)啟高速逆流色譜儀，以5ml/min流速泵入流動(dòng)相，當(dāng)流動(dòng)相流出，開(kāi)始連續(xù)進(jìn)樣，首尾洗脫，轉(zhuǎn)速控制為750r/min，收集牛彌菜醇A流分，濃縮，低溫干燥即得牛彌菜醇A12. 5g，經(jīng)HPLC檢測(cè)，純度為97. 2%0實(shí)施例4取匙羹藤莖葉1kg，粉碎，加入8倍量(V/W)的70%的こ醇溶液加熱回流提取3次，毎次2，過(guò)濾，合并提取液，加入5%藥用活性炭，30°C保溫脫色50min，過(guò)濾得到脫色液，將脫色液通過(guò)截留分子量為1000-3000的聚礬中空纖維超濾膜系統(tǒng)，壓カ0. 5MPa，收集透過(guò)液，濃縮，干燥得到牛彌菜醇A粗品。取庚烷(8)丙酮(3)甲醇(6)置于分液漏斗中混合均勻，靜止分層，分離上下 相，以上相為固定相，以下相為流動(dòng)相，取上述粗品適量溶于下相中待用，開(kāi)啟高速逆流色譜儀，以5ml/min流速泵入流動(dòng)相，當(dāng)流動(dòng)相流出，開(kāi)始連續(xù)進(jìn)樣，首尾洗脫，轉(zhuǎn)速控制為800r/min，收集牛彌菜醇A流分，濃縮，低溫干燥即得牛彌菜醇A14. 6g，經(jīng)HPLC檢測(cè)，純度為96. 8%0
權(quán)利要求
1.ー種牛彌菜醇A的制備方法，其特征在于包含以下步驟 1)醇提取匙羹藤莖葉，加入5-10倍量(V/W)的70-80%的こ醇溶液加熱回流提取2-3次，每次l_3h，過(guò)濾，合并提取液； 2)活性炭脫色上述提取液加入藥用活性炭，30-50°C保溫脫色30-60min，得到脫色液； 3)膜分離上述脫色液通過(guò)超濾膜系統(tǒng)，收集透過(guò)液； 4)高速逆流色譜分離將透過(guò)液濃縮，干燥得到牛彌菜醇A粗品，采用高速逆流色譜進(jìn)行分離，制得牛彌菜醇A。
2.如權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于步驟2)中所述活性炭的用量為5%。
3.如權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于步驟3)中所述超濾膜系統(tǒng)為聚礬中空纖維超濾膜系統(tǒng)，截留分子量為1000-3000，壓カO. 5-lMPa。
4.如權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于步驟4)中所述高速逆流色譜中兩相溶劑系統(tǒng)為庚烷(5-8)丙酮(2-3)甲醇(4-6)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種牛彌菜醇A的制備方法。該方法以匙羹藤莖葉為原料，加入5-10倍量(V/W)的70-80％的乙醇溶液加熱回流提取2-3次，每次1-3h，過(guò)濾，合并提取液，加入適量活性炭保溫脫色，脫色液通過(guò)膜分離系統(tǒng)，透過(guò)液濃縮，干燥得到牛彌菜醇A粗品，采用高速逆流色譜進(jìn)行分離，制得牛彌菜醇A。本工藝操作簡(jiǎn)單，純度高，易于實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化放大。
文檔編號(hào)C07C35/14GK102649710SQ20111004533
公開(kāi)日2012年8月29日 申請(qǐng)日期2011年2月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年2月25日
發(fā)明者劉東鋒, 李法慶 申請(qǐng)人:蘇州寶澤堂醫(yī)藥科技有限公司