專利名稱：千金子中二萜醇酯類物質(zhì)的提純方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然植物有效成分提取技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及ー種以千金子為原料提純兩種ニ萜醇酯類物質(zhì)的方法。
背景技術(shù)：
千金子為大戟科植物續(xù)隨子Euphorbia lathyris L.的干燥成熟種子,具有逐水消腫，破血散結(jié)之功效，用于水腫痰飲、積滯脹滿，ニ便不通，血瘀經(jīng)閉等癥，外治頑癬、疣贅?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)千金子在治黒子、去疣贅、美白等護(hù)膚美容方面有一定效果；另一方面，千金子辛、溫，有毒，有劇烈的瀉下作用，屬有毒中藥。千金子是ー種少用的有毒中藥，主要含有大量脂肪油、香豆素類等成分，油中含有油酸等甘油酯及多種ニ萜醇酯等，如千金ニ萜醇ニこ酸苯甲酸酷、續(xù)隨ニ萜醇等。脂肪油中所含的續(xù)隨ニ萜醇，對胃腸道具有刺激作用，可產(chǎn)生峻瀉，作用強(qiáng)度為蓖麻油的三倍，具有一定的臨床意義。房子婷等以千金ニ萜醇ニこ酸酯苯甲酸酯為主要成分研制的千金子美白祛痘霜，臨床用于黃褐斑、雀斑的治療，結(jié)果表明該制劑療效可靠，可用于治療黃褐斑、雀斑
坐寸o千金ニ萜醇ニこ酸苯甲酸酷、續(xù)隨ニ萜醇，易溶于甲醇、こ醇、氯仿，微溶于石油醚、こ酸こ酷、苯等溶媒?，F(xiàn)有文獻(xiàn)對千金ニ萜醇ニこ酸苯甲酸酷、續(xù)隨ニ萜醇兩種物質(zhì)的研究較少，大多停留在對其的含量測定和結(jié)構(gòu)鑒定上，如李英霞等發(fā)表的“ HPLC測定千金子和千金子霜中兩種瀉下成分的含量”，該文獻(xiàn)公開了這兩種物質(zhì)的含量測定方法。再如碩士論文“千金子化學(xué)成分的研究”，該論文對千金子脂肪油中的化學(xué)成分進(jìn)行了少量分離和結(jié)構(gòu)鑒定。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為了解決上述現(xiàn)有技術(shù)的空白，提供千金子中二萜醇酯類物質(zhì)的提純方法。本發(fā)明采用超臨界流體萃取法，再結(jié)合制備高效液相色譜法制得高純度的續(xù)隨ニ萜醇和千金ニ萜醇ニこ酸苯甲酸酷。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的千金子中二萜醇酯類物質(zhì)的提純方法，其特征在于包含以下步驟I)超臨界萃取將千金子粉碎，過20 60目篩，置于萃取釜，通入處于超臨界狀態(tài)的CO2進(jìn)行萃取，通入こ醇或丙酮作為夾帶劑參與萃取，在分離釜中得到呈油膏狀的ニ萜醇酯混合物；2)高效液相制備色譜純化將上述油膏狀物質(zhì)用甲醇溶解，濾膜過濾，經(jīng)制備型高效液相色譜分離，采用紫外監(jiān)測手段，分別收集兩段目標(biāo)洗脫液，回收溶剤，分別干燥得
續(xù)隨ニ萜醇和千金ニ萜醇ニこ酸苯甲酸酷。所述步驟I)中萃取釜的操作參數(shù)萃取溫度為35 50°C，壓カ為20 40MPa，時間為2 4h，通入CO2流量為25 35L/h，夾帶劑的用量是8 15%。
所述步驟I)中的分 離釜的操作參數(shù)分離釜I壓カ為12 20MPa，溫度為14 20°C，分離釜II壓カ為6 lOMPa，溫度為8 15°C。所述步驟2)中的濾膜孔徑為0. 45 u m,制備型高效液相色譜采用的固定相是反相C-18鍵和硅膠，流動相為甲醇-水或こ腈-水溶劑系統(tǒng)。所述步驟2)中的紫外監(jiān)測器波長設(shè)定為280nm。綜上所述，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)I.超臨界萃取萃取過程耗能低，萃取劑CO2來源豐富、清潔無污染；2.高效液相制備色譜純化分離度高、重現(xiàn)性好、時間短、分離量大，分離的到產(chǎn)品純度可達(dá)98%以上。下面將結(jié)合具體實施方式
進(jìn)ー步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實施方式。
具體實施例方式實施例I :將千金子粉碎，過20目篩，取IKg置于萃取釜，通入處于超臨界狀態(tài)的CO2進(jìn)行萃取，設(shè)定萃取釜參數(shù)萃取溫度35°C，壓カ為40MPa，時間為2h，通入CO2流量為25L/h，待萃取罐內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定后，通入80mlこ醇作為夾帶劑參與萃取，設(shè)定分離釜參數(shù)分離釜I壓カ為12MPa，溫度為14°C，分離釜II壓カ為6MPa，溫度為8°C，萃取結(jié)束后，在分離釜II中得到呈油膏狀的ニ萜醇酯類物質(zhì)；將上述得到的油膏狀物質(zhì)用適量甲醇溶解，經(jīng)孔徑為0. 45 y m濾膜濾過，濾液采用制備型高效液相色譜分離，以反相C-18鍵和硅膠為固定相，75%甲醇水為流動相，分離流速為15ml/min，紫外監(jiān)測器波長設(shè)定為280nm，分別收集兩段目標(biāo)洗脫液，回收溶劑，干燥得續(xù)隨ニ萜醇3. 5g和千金ニ萜醇ニこ酸苯甲酸酯3. 9g，含量均不低于98%。實施例2 將千金子粉碎，過60目篩，取IKg置于萃取釜，通入處于超臨界狀態(tài)的CO2進(jìn)行萃取，設(shè)定萃取釜參數(shù)萃取溫度50°C，壓カ為20MPa，時間為4h，通入CO2流量為35L/h，待萃取罐內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定后，通入150ml丙酮作為夾帶劑參與萃取，設(shè)定分離釜參數(shù)分離釜I壓カ為20MPa，溫度為20°C，分離釜II壓カ為lOMPa，溫度為15°C，萃取結(jié)束后，在分離釜II中得到呈油膏狀的ニ萜醇酯類物質(zhì)；將上述得到的油膏狀物質(zhì)用適量甲醇溶解，經(jīng)孔徑為0. 45 y m濾膜濾過，濾液采用制備型高效液相色譜分離，以反相C-18鍵和硅膠為固定相，80%甲醇為流動相，分離流速為100ml/min，紫外監(jiān)測器波長設(shè)定為280nm，分別收集兩段目標(biāo)洗脫液，回收溶劑，干燥得續(xù)隨ニ萜醇3. Ig和千金ニ萜醇ニこ酸苯甲酸酯3. Sg，含量均不低于98%。實施例3 將千金子粉碎，過30目篩，取2Kg置于萃取釜，通入處于超臨界狀態(tài)的CO2進(jìn)行萃取，設(shè)定萃取釜參數(shù)萃取溫度40°C，壓カ為25MPa，時間為2. 5h，通入CO2流量為28L/h，待萃取罐內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定后，通入200mlこ醇作為夾帶劑參與萃取，設(shè)定分離釜參數(shù)分離釜I壓カ為13MPa，溫度為15°C，分離釜II壓カ為7MPa，溫度為10°C，萃取結(jié)束后，在分離釜II中得到呈油膏狀的ニ萜醇酯類物質(zhì)；
將上述得到的油膏狀物質(zhì)用適量甲醇溶解，經(jīng)孔徑為0. 45 y m濾膜濾過，濾液采用制備型高效液相色譜分離，以反相C-18鍵和硅膠為固定相，65%こ腈水為流動相，分離流速為35ml/min，紫外監(jiān)測器波長設(shè)定為280nm，分別收集兩段目標(biāo)洗脫液，回收溶劑，干燥得續(xù)隨ニ萜醇6. 8g和千金ニ萜醇ニこ酸苯甲酸酯8. lg，含量均不低于98%。實施例4 將千金子粉碎，過40目篩，取5Kg置于萃取釜，通入處于超臨界狀態(tài)的CO2進(jìn)行萃取，設(shè)定萃取釜參數(shù)萃取溫度45°C，壓カ為30MPa，時間為3h，通入CO2流量為30L/h，待萃取罐內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定后，通入600mlこ醇作為夾帶劑參與萃取，設(shè)定分離釜參數(shù)分離釜I壓カ為16MPa，溫度為18°C，分離釜II壓カ為8MPa，溫度為12°C，萃取結(jié)束后，在分離釜II中得到呈油膏狀的ニ萜醇酯類物質(zhì)；將上述得到的油膏狀物質(zhì)用適量甲醇溶解，經(jīng)孔徑為0. 45 y m濾膜濾過，濾液采用制備型高效液相色譜分離，以反相C-18鍵和硅膠為固定相，72%甲醇為流動相，分離流 速為40ml/min，紫外監(jiān)測器波長設(shè)定為280nm，分別收集兩段目標(biāo)洗脫液，回收溶劑，干燥得續(xù)隨ニ萜醇17. Ig和千金ニ萜醇ニこ酸苯甲酸酯21. 3g，含量均不低于98%。實施例5:將千金子粉碎，過60目篩，取IOKg置于萃取釜，通入處于超臨界狀態(tài)的CO2進(jìn)行萃取，設(shè)定萃取釜參數(shù)萃取溫度48°C，壓カ為36MPa，時間為3. 5h，通入CO2流量為33L/h，待萃取罐內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定后，通入IOOOml丙酮作為夾帶劑參與萃取，設(shè)定分離釜參數(shù)分離釜I壓カ為18MPa，溫度為17°C，分離釜II壓カ為9MPa，溫度為14°C，萃取結(jié)束后，在分離釜II中得到呈油膏狀的ニ萜醇酯類物質(zhì)；將上述得到的油膏狀物質(zhì)用適量甲醇溶解，經(jīng)孔徑為0. 45 y m濾膜濾過，濾液采用制備型高效液相色譜分離，以反相C-18鍵和硅膠為固定相，72%こ腈為流動相，分離流速為80ml/min，紫外監(jiān)測器波長設(shè)定為280nm，分別收集兩段目標(biāo)洗脫液，回收溶劑，干燥得續(xù)隨ニ萜醇33. 2g和千金ニ萜醇ニこ酸苯甲酸酯37. 4g，含量均不低于98%。
權(quán)利要求
1.千金子中二萜醇酯類物質(zhì)的提純方法，其特征在于包含以下步驟 1)超臨界萃取將千金子粉碎，過20 60目篩，置于萃取釜，通入處于超臨界狀態(tài)的CO2進(jìn)行萃取，通入こ醇或丙酮作為夾帶劑參與萃取，在分離釜中得到呈油膏狀的ニ萜醇酯混合物； 2)高效液相制備色譜純化將上述油膏狀物質(zhì)用甲醇溶解，濾膜過濾，經(jīng)制備型高效液相色譜分離，采用紫外監(jiān)測手段，分別收集兩段目標(biāo)洗脫液，回收溶剤，分別干燥得續(xù)隨ニ萜醇和千金ニ萜醇ニこ酸苯甲酸酷。
2.如權(quán)利要求I所述的千金子中二萜醇酯類物質(zhì)的提純方法，其特征在于所述步驟I)中萃取釜的操作參數(shù)萃取溫度為35 50°C，壓カ為20 40MPa，時間為2 4h，通入CO2流量為25 35L/h，夾帶劑的用量是8 15%。
3.如權(quán)利要求I所述的千金子中二萜醇酯類物質(zhì)的提純方法，其特征在于所述步驟I)中的分離釜的操作參數(shù)分離釜I壓カ為12 20MPa，溫度為14 20°C，分離釜II壓カ為6 lOMPa，溫度為8 15°C。
4.如權(quán)利要求I所述的千金子中二萜醇酯類物質(zhì)的提純方法，其特征在于所述步驟2)中的濾膜孔徑為O. 45 μ m,制備型高效液相色譜采用的固定相是反相C-18鍵和硅膠，流動相為甲醇-水或こ腈-水溶劑系統(tǒng)。
全文摘要
本發(fā)明公開了千金子中二萜醇酯類物質(zhì)的提純方法。其中千金子二萜醇酯類物質(zhì)為續(xù)隨二萜醇和千金二萜醇二乙酸苯甲酸酯兩種物質(zhì)。該方法主要包括兩個步驟①將千金子粉碎，過20～60目篩，置于萃取釜，通入處于超臨界狀態(tài)的CO2進(jìn)行萃取，獲得呈油膏狀的二萜醇酯混合物；②利用高效液相制備色譜法對其進(jìn)行純化。本方法具有制得產(chǎn)品純度高，質(zhì)量好的優(yōu)點(diǎn)，且制備過程收率高，重現(xiàn)性好。
文檔編號C07C69/78GK102649720SQ201110045360
公開日2012年8月29日 申請日期2011年2月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年2月25日
發(fā)明者劉東鋒, 李法慶 申請人:蘇州寶澤堂醫(yī)藥科技有限公司