專利名稱：3β,5α,6β-三羥基甾體化合物及其合成方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及3 β，5 α，6 β -三羥基留體化合物及其合成方法和應(yīng)用。神經(jīng)活性留體對神經(jīng)元損傷、死亡以及多種中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病有密切關(guān)系，目前已將一些留體激素作為替代療法運(yùn)用于臨床。雌激素是已知神經(jīng)保護(hù)作用較強(qiáng)的神經(jīng)活性甾體，臨床上將雌激素用于AD的治療，收到良好的效果；別孕烯醇酮可以保護(hù)由低氧和谷氨酸引起的體外培養(yǎng)海馬細(xì)胞不可逆的神經(jīng)毒性損傷。脫氫表雄酮能降低谷氨酸類似物和皮質(zhì)留類的神經(jīng)毒性作用；7-羥基去表雄酮也顯示明顯的神經(jīng)保護(hù)作用。一些研究表明 具有3 β，5 α，6 β -三羥基留環(huán)結(jié)構(gòu)的化合物具有顯著的神經(jīng)保護(hù)作用，如化學(xué)合成的孕甾-3 β，5 α，6 β -三醇對低鉀誘導(dǎo)的神經(jīng)元凋亡細(xì)胞有顯著的保護(hù)作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種3 β，5 α，6 β _三羥基留體類化合物。本發(fā)明的目的還在于提供3 β，5 α，6 β _三羥基留體類化合物的合成方法，該合成方法原料廉價易得，反應(yīng)條件溫和，操作簡單，合成路線短。本發(fā)明的另一目的在于提供3 β，5 α，6 β -三羥基甾體類化合物在制備對谷氨酸誘導(dǎo)的神經(jīng)元細(xì)胞具有保護(hù)作用的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明提供的3 β，5 α，6 β _三羥基甾體類化合物，具有如下結(jié)構(gòu)
權(quán)利要求
1. 3 β，5 α，6 β -三羥基留體類化合物，其特征在于，具有如下結(jié)構(gòu)
2.權(quán)利要求1所述的3β，5 α，6 β -三羥基留體類化合物的合成方法，其特征在于，以去氫表雄酮為原料，通過叔丁基二甲基氯硅烷保護(hù)3位羥基得3-0-叔丁基二甲基硅基-去氫表雄酮；經(jīng)過硼氫化鈉還原得3-0-叔丁基二甲基硅基-5-烯-雄留-17-醇；再將3-0-叔丁基二甲基硅基-5-烯-雄留-17-醇甲基化得白色固體化合物I ；白色固體化合物I經(jīng)氫氟酸脫保護(hù)得化合物17-甲氧基去氫表雄酮；17-甲氧基去氫表雄酮經(jīng)環(huán)氧化得化合物II ； 化合物II在酸性條件下開環(huán)得化合物III ；以去氫表雄酮為原料，經(jīng)環(huán)氧化、酸性條件開環(huán)得 3 β，5 α，6 β -三羥基去氫表雄酮；孕烯醇酮經(jīng)環(huán)氧化、酸性條件開環(huán)得3 β，5 α，6 β -三羥基孕烯醇酮；3 β，5 α，6 β -三羥基去氫表雄酮和3 β，5 α，6 β -三羥基孕烯醇酮經(jīng)過與 wittig試劑碘代甲基三苯基磷、溴代乙基三苯基磷、溴代丙基三苯基磷、溴代丁基三苯基磷反應(yīng)得到化合物IV - VDI ；化合物IV - VDI分別經(jīng)氫化還原得化合物IX - XIII。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的3β，5 α，6 β -三羥基留體類化合物的合成方法，其特征在于，具體反應(yīng)步驟是(1)以去氫表雄酮為原料，通過叔丁基二甲基氯硅烷保護(hù)3位羥基制備得3-0-叔丁基二甲基硅基_去氫表雄酮，3-0-叔丁基二甲基硅基-去氫表雄酮經(jīng)過硼氫化鈉還原得 3-0-叔丁基二甲基硅基-5-烯-雄留-17-醇；(2)將化合物3-0-叔丁基二甲基硅基-5-烯-雄留-17-醇溶于無水溶劑，通保護(hù)氣， 加入NaH，密閉，室溫反應(yīng)一段時間后注入CH3I,繼續(xù)攪拌，反應(yīng)液分散到冰水中，調(diào)pH至中性，萃取，干燥，減壓濃縮，丙酮重結(jié)晶，得白色固體化合物I ；(3)將白色固體化合物I經(jīng)氫氟酸脫保護(hù)所得化合物17-甲氧基去氫表雄酮溶于二氯甲烷中，加入水和無水碳酸鈉，攪拌成乳濁液后，分批加入間氯過氧苯甲酸，室溫下反應(yīng)，經(jīng) TLC跟蹤監(jiān)測到原料基本反應(yīng)完全時加入飽和亞硫酸鈉溶液淬滅反應(yīng)，靜置分層，水相用溶劑萃取，洗至中性，干燥，濃縮得到淡黃色固體，硅膠柱層析提純得化合物II ；(4)將化合物II溶于溶劑中，加入硫酸，室溫下攪拌反應(yīng)，調(diào)pH至中性，蒸除溶劑，萃取，水洗，干燥，濃縮得到白色固體，硅膠柱層析純化得化合物III ；(5)去氫表雄酮經(jīng)過環(huán)氧化，酸性條件開環(huán)得3β，5 α，6 β -三羥基去氫表雄酮；孕烯醇酮經(jīng)過環(huán)氧化，酸性條件開環(huán)得3 β，5 α，6 β -三羥基孕烯醇酮；(6)將碘代甲基三苯基磷溶于無水溶劑中，通保護(hù)氣，分批加入叔丁醇鉀，密封，室溫攪拌，將3 β，5 α，6 β -三羥基去氫表雄酮的溶液加入到反應(yīng)液中，先室溫反應(yīng)后回流一段時間，冷卻，冰水稀釋，萃取，干燥，減壓濃縮，柱色譜分離，得化合物IV ；(7 )將溴代乙基三苯基磷溶于無水溶劑中，通保護(hù)氣，分批加入叔丁醇鉀，密封，室溫攪拌，將3 β，5 α，6 β -三羥基去氫表雄酮的溶液加入到反應(yīng)液中，先室溫反應(yīng)后回流一段時間，冷卻，冰水稀釋，萃取，干燥，減壓濃縮，柱色譜分離，得化合物V ；(8 )將溴代丙基三苯基磷溶于無水溶劑中，通保護(hù)氣，分批加入叔丁醇鉀，密封，室溫攪拌，將3 β，5 α，6 β -三羥基去氫表雄酮的溶液加入到反應(yīng)液中，先室溫反應(yīng)后回流一段時間，冷卻，冰水稀釋，萃取，干燥，減壓濃縮，柱色譜分離，得化合物VI ；(9 )將碘代甲基三苯基磷溶于無水溶劑中，通保護(hù)氣，密封，注入正丁基鋰至溶液澄清， 室溫攪拌一段時間，將化合物3 β，5 α，6 β -三羥基孕烯醇酮的溶液加入到反應(yīng)液中，加熱條件下反應(yīng)，冷卻，加入飽和NH4Cl溶液，萃取，干燥，減壓濃縮，柱色譜分離，得化合物ΥΠ ；(10)將溴代丁基三苯基磷溶于無水溶劑中，通保護(hù)氣，分批加入叔丁醇鉀，密封，室溫攪拌，將3 β，5 α，6 β -三羥基去氫表雄酮的溶液加入到反應(yīng)液中，先室溫反應(yīng)后回流一段時間，冷卻，冰水稀釋，萃取，干燥，減壓濃縮，柱色譜分離，得化合物VDI ；(11)將化合物IV溶于甲醇中，加入Pd/C，密封，將反應(yīng)體系中的空氣置換為氫氣，在氫氣體系下反應(yīng)，經(jīng)LC-MS跟蹤監(jiān)測到原料基本反應(yīng)完全時結(jié)束反應(yīng)，過濾除去鈀碳，濾餅用溶劑沖洗，減壓蒸干溶劑，得化合物IX ；(12)將化合物V溶于甲醇中，加入Pd/C，密封，將反應(yīng)體系中的空氣置換為氫氣，在氫氣體系下反應(yīng)，經(jīng)LC-MS跟蹤監(jiān)測到原料基本反應(yīng)完全時結(jié)束反應(yīng)，過濾除去鈀碳，濾餅用溶劑沖洗，減壓蒸干溶劑，得化合物X ；(13)將化合物VI溶于甲醇中，加入Pd/C，密封，將反應(yīng)體系中的空氣置換為氫氣，在氫氣體系下反應(yīng)，經(jīng)LC-MS跟蹤監(jiān)測到原料基本反應(yīng)完全時結(jié)束反應(yīng)，過濾除去鈀碳，濾餅用溶劑沖洗，減壓蒸干溶劑，得化合物XI ；(14)將化合物ΥΠ溶于甲醇中，加入Pd/C，密封，將反應(yīng)體系中的空氣置換為氫氣，在氫氣體系下反應(yīng)，經(jīng)LC-MS跟蹤監(jiān)測到原料基本反應(yīng)完全時結(jié)束反應(yīng)，過濾除去鈀碳，濾餅用溶劑沖洗，減壓蒸干溶劑，得化合物ΧΠ ；(15)將化合物VDI溶于甲醇中，加入Pd/C，密封，將反應(yīng)體系中的空氣置換為氫氣，在氫氣體系下反應(yīng)，經(jīng)LC-MS跟蹤監(jiān)測到原料基本反應(yīng)完全時結(jié)束反應(yīng)，過濾除去鈀碳，濾餅用溶劑沖洗，減壓蒸干溶劑，得化合物XIII。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的3 β，5 α，6 β -三羥基留體類化合物的合成方法，其特征在于，步驟(2)中無水溶劑為THF ；保護(hù)氣為氮氣或氬氣；3-0-叔丁基二甲基硅基-5-烯-雄甾-17-醇、NaH和CH3I的摩爾比為1 3 6 3 6 ；加入NaH后反應(yīng)的時間為20min_60min ； 注入CH3I后室溫反應(yīng)8 24 h。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的3β，5 α，6 β -三羥基留體類化合物的合成方法，其特征在于，步驟(3)中17-甲氧基去氫表雄酮、二氯甲烷和水的用量比為Ig 2(T40mL 4(T60mL ； 17-甲氧基去氫表雄酮、碳酸鈉和間氯過氧苯甲酸的摩爾比為1 2.5、 1.2 1.6。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的3β，5 α，6 β -三羥基留體類化合物的合成方法，其特征在于，步驟(4)中的溶劑為丙酮；硫酸為1Ν-3Ν硫酸；反應(yīng)時間為2(T48h。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的3β，5α，6β_三羥基留體類化合物的合成方法，其特征在于，步驟(6-8)和步驟(10)中無水溶劑為THF或DMS0;保護(hù)氣為氮氣或氬氣； 3β，5α，6β-三羥基去氫表雄酮、wittig試劑和叔丁醇鉀的摩爾比為1 2、 2 4 ；反應(yīng)時間為室溫反應(yīng)2、h，回流反應(yīng)2、h。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的3β，5 α，6 β -三羥基留體類化合物的合成方法，其特征在于，步驟(9)中無水溶劑為THF，保護(hù)氣為氮氣或氬氣；3 β，5 α，6 β -三羥基孕烯醇酮、 wittig試劑和正丁基鋰的摩爾比為1:2、 8 12 ；反應(yīng)時間為室溫反應(yīng)3飛h，60°C反應(yīng)2 8 h。
9.根據(jù)權(quán)利要求3所述的3β，5 α，6 β -三羥基留體類化合物的合成方法，其特征在于，步驟(11-15)中化合物IV-VILPd/C的用量比為Ig 10(T300mg，在氫氣體系下反應(yīng) 12 48 h。
10.權(quán)利要求1所述的3β，5 α，6 β _三羥基留體類化合物在制備對谷氨酸誘導(dǎo)的小腦顆粒神經(jīng)元興奮性損傷具有保護(hù)作用的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了3β,5α,6β-三羥基甾體類化合物及其合成方法和應(yīng)用。本發(fā)明利用去氫表雄酮、孕酮為原料經(jīng)環(huán)氧化、開環(huán)、Wittig反應(yīng)、還原氫化反應(yīng)獲得目標(biāo)化合物。其中三個目標(biāo)化合物對經(jīng)體外谷氨酸誘導(dǎo)的神經(jīng)元細(xì)胞具有顯著的保護(hù)作用，并存在量效關(guān)系。
文檔編號C07J7/00GK102180928SQ20111006123
公開日2011年9月14日 申請日期2011年3月15日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月15日
發(fā)明者周樹佳, 張靜夏, 李心花, 胡海燕, 邱鵬新, 陳婕思, 顏光美, 黃奕俊 申請人:中山大學(xué)