專利名稱：一種銀柴胡素h的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種銀柴胡素H的制備方法，尤其是一種從植物中提取銀柴胡素H的制備方法。
背景技術(shù)：
銀柴胡素H(Dichotomin H),分子式=C47H66N8O10,分子量:903. 086，CAS 登錄號 193672-86-5，主要存在于石竹科植物銀柴胡 Stellaria dichotoma L. var. Ianceolata Bge.中。現(xiàn)代研究表明，銀柴胡素H具有抗病毒、抗腫瘤等多種作用，同時(shí)其也作為合成其它活性衍生物的原料。石竹科植物銀柴胡Stellaria dichotoma L. var. Ianceolata Bge.的根被作為中藥銀柴胡使用，清虛熱，除疳熱。用于陰虛發(fā)熱，骨蒸勞熱，小兒疳熱?，F(xiàn)有技術(shù)中，尚沒有適用于高純度銀柴胡素H工業(yè)化大生產(chǎn)的制備工藝報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種利于大生產(chǎn)操作、產(chǎn)品純度高的銀柴胡素 H的制備方法。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用下列技術(shù)方案。取銀柴胡根，粉碎，加入到CO2超臨界萃取器中，甲醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為2-4%，萃取壓力20-30MPa，溫度40-60°C，CO2流量l_3ml/g生藥·π η，萃取時(shí)間100-150min，得萃取物，加入到大孔吸附樹脂柱上吸附，40-60%乙醇洗脫，收集3-8倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮、干燥，加到硅膠層析柱上，以甲醇-氯仿混合溶劑洗脫，該混合溶劑中甲醇與氯仿的比例為8:1，洗脫液按柱體積分份收集，合并第4-8份柱體積的洗脫液，濃縮，加入丙酮，冷藏，析出沉淀，分離沉淀，洗滌、干燥， 粉碎即得。CO2超臨界萃取夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為3%。CO2超臨界萃取壓力25MPa，溫度50°C，CO2流量2ml/g生藥· min。CO2超臨界萃取時(shí)間120min
大孔吸附樹脂選自DlOl型、D102型、AB-8型大孔吸附樹脂中的一種。大孔吸附樹脂洗脫用乙醇的濃度為50%。大孔吸附樹脂洗脫用乙醇的收集量為5倍量柱體積。制備所得銀柴胡素H可采用下列方法檢測。試驗(yàn)例1 HPLC法測定銀柴胡素H純度色譜條件
色譜柱十八烷基硅烷鍵合膠硅膠為填充劑；流動相甲醇-1%醋酸的水溶液 (95 5)；流速:lmL/min ；檢測波長:257nm ；柱溫:30°C。
測定方法
精密稱取銀柴胡素H2mg，置于50mL量瓶中，加人甲醇20mL，超聲振蕩使溶解，甲醇定容至刻度，吸取10μ L，注入高效液相色譜儀，采用歸一化法測定樣品純度。采用本發(fā)明制備銀柴胡素H，利于大生產(chǎn)操作，能耗小，污染小。下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
對本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1
取銀柴胡根10Kg，粉碎，加入到CO2超臨界萃取器中，甲醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為2%，萃取壓力20MPa，溫度40°C，CO2流量lml/g生藥·π η，萃取時(shí)間 lOOmin，得萃取物，加入到DlOl型大孔吸附樹脂柱上吸附，40%乙醇洗脫，收集3倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮、干燥，加到硅膠層析柱上，以甲醇-氯仿混合溶劑洗脫，該混合溶劑中甲醇與氯仿的比例為8:1，洗脫液按柱體積分份收集，合并第4-8份柱體積的洗脫液，濃縮，加入丙酮，冷藏，析出沉淀，分離沉淀，洗滌、干燥，粉碎即得銀柴胡素HO. 33g，經(jīng) HPLC檢測，純度為96. 8%，UV、IR、MS、2HNMR、13CNMR等表征其物理性狀的數(shù)據(jù)與現(xiàn)有技術(shù)相一致。實(shí)施例2
取銀柴胡根10Kg，粉碎，加入到CO2超臨界萃取器中，甲醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為4%，萃取壓力30MPa，溫度60°C，CO2流量3ml/g生藥·π η，萃取時(shí)間 150min，得萃取物，加入到D102型大孔吸附樹脂柱上吸附，60%乙醇洗脫，收集8倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮、干燥，加到硅膠層析柱上，以甲醇-氯仿混合溶劑洗脫，該混合溶劑中甲醇與氯仿的比例為8:1，洗脫液按柱體積分份收集，合并第4-8份柱體積的洗脫液，濃縮，加入丙酮，冷藏，析出沉淀，分離沉淀，洗滌、干燥，粉碎即得銀柴胡素HO. 47g，經(jīng) HPLC檢測，純度為95. 5%，UV、IR、MS、2HNMR、13CNMR等表征其物理性狀的數(shù)據(jù)與現(xiàn)有技術(shù)相一致。實(shí)施例3
取銀柴胡根10Kg，粉碎，加入到CO2超臨界萃取器中，甲醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為3%，萃取壓力25MPa，溫度50°C，CO2流量2ml/g生藥·π η，萃取時(shí)間 120min,得萃取物，加入到AB-8型大孔吸附樹脂柱上吸附，50%乙醇洗脫，收集5倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮、干燥，加到硅膠層析柱上，以甲醇-氯仿混合溶劑洗脫，該混合溶劑中甲醇與氯仿的比例為8:1，洗脫液按柱體積分份收集，合并第4-8份柱體積的洗脫液，濃縮，加入丙酮，冷藏，析出沉淀，分離沉淀，洗滌、干燥，粉碎即得銀柴胡素HO. 43g，經(jīng) HPLC檢測，純度為98. 8%，UV、IR、MS、2HNMR、13CNMR等表征其物理性狀的數(shù)據(jù)與現(xiàn)有技術(shù)相一致。
權(quán)利要求
1.一種銀柴胡素H的制備方法，其特征在于所述的方法由下列步驟組成取銀柴胡根，粉碎，加入到CO2超臨界萃取器中，甲醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為2-4%，萃取壓力20-30MPa，溫度40_60°C，CO2流量l_3ml/g生藥· min，萃取時(shí)間 100-150min，得萃取物，加入到大孔吸附樹脂柱上吸附，40-60%乙醇洗脫，收集3_8倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮、干燥，加到硅膠層析柱上，以甲醇-氯仿混合溶劑洗脫， 該混合溶劑中甲醇與氯仿的比例為8:1，洗脫液按柱體積分份收集，合并第4-8份柱體積的洗脫液，濃縮，加入丙酮，冷藏，析出沉淀，分離沉淀，洗滌、干燥，粉碎即得。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種銀柴胡素H的制備方法，其特征在于所述CO2超臨界萃取夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為3%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種銀柴胡素H的制備方法，其特征在于所述CO2超臨界萃取壓力25MPa,溫度50°C，CO2流量2ml/g生藥· min。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種銀柴胡素H的制備方法，其特征在于所述CO2超臨界萃取時(shí)間 120min。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種銀柴胡素H的制備方法，其特征在于所述大孔吸附樹脂選自DlOl型、D102型、AB-8型大孔吸附樹脂中的一種。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種銀柴胡素H的制備方法，其特征在于所述大孔吸附樹脂洗脫用乙醇的濃度為50%。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種銀柴胡素H的制備方法，其特征在于所述大孔吸附樹脂洗脫用乙醇的收集量為5倍量柱體積。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種操作簡便、污染小、能耗少的銀柴胡素H的制備方法。工藝步驟為取銀柴胡根，粉碎，加入到CO2超臨界萃取器中，甲醇作為夾帶劑，得萃取物，加入到大孔吸附樹脂柱上吸附，40-60%乙醇洗脫，收集3-8倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮、干燥，加到硅膠層析柱上，以甲醇-氯仿混合溶劑洗脫，收集洗脫液，濃縮，加入丙酮，冷藏，析出沉淀，分離沉淀，洗滌、干燥，粉碎即得。采用本發(fā)明制備銀柴胡素H，產(chǎn)品純度高，易于實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化放大。
文檔編號C07K1/14GK102329369SQ201110143950
公開日2012年1月25日 申請日期2011年5月31日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月31日
發(fā)明者張發(fā)成, 王峰, 王琳 申請人:蘇州派騰生物醫(yī)藥科技有限公司