專利名稱：何首烏多種活性成分聯(lián)合提取純化技術(shù)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥用植物多種活性成分的聯(lián)合提取純化技術(shù)，具體為一種何首烏中二苯乙烯苷、大黃素、大黃酚和淀粉的聯(lián)合提取純化技術(shù)。
背景技術(shù)：
對何首烏中不同活性成分進行單一成分提取純化的方法多有報道，但對何首烏中多種活性成分進行聯(lián)合提取和分離純化的綜合方法未見報道。在已報道的何首烏單一成分提取純化方法中，傳統(tǒng)的提取方式是采用溶劑浸取法或輔助超聲法，提取后用酯或醚萃取并濃縮為浸膏，最后用柱層析方法對浸膏混合物進行純化。除了傳統(tǒng)技術(shù)或和傳統(tǒng)技術(shù)類似的醇提后直接柱層析技術(shù)外，還包括超臨界流體萃取技術(shù)、高速逆流色譜技術(shù)等。顯然， 在已報道的提取純化方法中，只針對何首烏中的某一成分進行提取，忽略了其它成分，提取溶劑的利用率低。而純化步驟采用柱分離技術(shù)，在工業(yè)化制備時成本較高，不易實現(xiàn)大量制備。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種可同時提取純化何首烏中二苯乙烯苷、大黃素、大黃酚和淀粉的成本低、產(chǎn)品純度高可用于大量生產(chǎn)并且環(huán)境友好的聯(lián)合制備技術(shù)。本發(fā)明采用技術(shù)方案如下，何首烏多種活性成分聯(lián)合提取純化技術(shù)，按照下述步驟進行
(1)將何首烏粉碎為70-80目的顆粒，按照何首烏與乙醇的比例l/10-14(g/mL)的比例加入質(zhì)量濃度為70-80%乙醇，在38-42°C溫度下以IkW超聲功率回流提取1. 8-2. 2h ；
(2)提取液過濾，殘渣用乙醇洗一次，洗液合并到提取液中；在40-50°C溫度下將提取液減壓濃縮為稠膏并回收提取溶劑，二苯乙烯苷、大黃素和大黃酚可被無損耗地濃縮到稠膏中；用8-10倍體積的蒸餾水溶解稠膏并過濾，濾渣待用。濾液減壓濃縮為原體積的 1/4-1/6，即為二苯乙烯苷粗品；
(3)向水提液濾渣中加入適量乙醚溶解濾渣，過濾后用等體積乙醚再次沖洗濾渣，合并濾液；將濾液體積2-3倍的5% NaHCO3溶液分2_3次加入濾液除雜后，將乙醚層體積2_3倍的5% Na2CO3溶液分2-3次加入其中萃取；取出水層，加入HCl調(diào)pH為3_4，濾出沉淀，即為大黃素粗品；取出乙醚層，將其體積2-3倍的5% NaOH溶液分2-3次加入萃??；取出水層，加入HCl調(diào)pH為3-4，濾出沉淀，即為大黃酚粗品，乙醚可回收再利用；
(4)將何首烏乙醇提取后的殘渣用清水反復(fù)清洗3次，靜置清洗液，待溶液完全澄清后倒出上清液，將沉淀于45°C烘干，過100目篩即得到何首烏淀粉產(chǎn)品；
(5)按照何首烏的二苯乙烯苷粗品與乙醚的比例為1/18-20(g /mL)的比例將乙醚分2-3次加入何首烏的二苯乙烯苷粗品中除雜，乙醚層可回收再利用；向水相溶液加入2-3 倍其體積的乙酸乙酯，回流提取4-4. 5h ；將乙酸乙酯層在40-50°C溫度下濃縮至原體積的 1/4-1/6，加熱使?jié)饪s液中結(jié)晶溶解并過濾，濾液放冷析晶，濾出晶體；用熱乙酸乙酯溶解晶體，重復(fù)析晶、濾晶，如此反復(fù)2次以上，揮干溶劑，得到純度為76. 5%-78. 9%的二苯乙烯苷產(chǎn)品。(6)將大黃素和大黃酚粗品用乙酸乙酯進行加熱溶解，放冷析晶，濾晶的重結(jié)晶處理2次以上，揮去溶劑，得到純度為80. 7%-82. 9%的大黃素產(chǎn)品和78. 2%_83. 0%的大黃酚產(chǎn)品；提純過程使用的乙酸乙酯可回收再利用。本發(fā)明的積極效果如下在一個提取過程中可同時提取出何首烏中的4種成分， 并實現(xiàn)了二苯乙烯苷、大黃素和大黃酚與何首烏淀粉的分離；通過優(yōu)化的濃縮條件使得二苯乙烯苷、大黃素和大黃酚無損耗地被濃縮到稠膏中并回收溶劑；利用二苯乙烯苷與大黃素和大黃酚水溶性的差異，采用水提何首烏乙醇提取物的方法實現(xiàn)了二苯乙烯苷與大黃素和大黃酚的分離；利用大黃素與大黃酚PKa值的差異，以5% NaCOjP 5% NaOH溶液作為溶劑先后萃取二苯乙烯苷水提殘渣乙醚提取液的方法實現(xiàn)了大黃素與大黃酚的分離。用乙酸乙酯對各粗品進行加熱溶解、放冷析晶和濾晶的重結(jié)晶處理得到純度高的產(chǎn)品；整個流程無有機溶劑排放，環(huán)境友好。
具體實施例方式實施例1
將何首烏粉碎為70目的顆粒，按照Ig何首烏14mL的比例加入80%乙醇，在42°C溫度下以IkW超聲功率回流提取池。二苯乙烯苷、大黃素和大黃酚的提取率分別為90. 6%,88. 2% 和86.4%。提取液過濾，殘渣用乙醇洗一次，洗液合并到提取液中。在40°C溫度下將提取液減壓濃縮為稠膏并回收提取溶劑，二苯乙烯苷、大黃素和大黃酚可被無損耗地濃縮到稠膏中。用8倍體積的蒸餾水溶解稠膏并過濾，濾渣待用。濾液減壓濃縮為原體積的1/6，即為二苯乙烯苷粗品。向水提液濾渣中加入IOmL乙醚溶解濾渣，過濾后用等體積乙醚再次沖洗濾渣，合并濾液。將濾液體積2倍的5% NaHCO3溶液分2次加入濾液除雜后，將乙醚層體積 2倍的5% Na2CO3溶液分2次加入其中萃取。取出水層，加入HCl調(diào)pH為3，濾出沉淀，即為大黃素粗品。取出乙醚層，將其體積2倍的5% NaOH溶液分2次加入萃取。取出水層，加入 HCl調(diào)pH為3，濾出沉淀，即為大黃酚粗品，乙醚可回收再利用。將何首烏乙醇提取后的殘渣用清水反復(fù)清洗3次，靜置清洗液，待溶液完全澄清后倒出上清液，將沉淀于45°C烘干， 過100目篩即得到純度為86%的何首烏淀粉產(chǎn)品。將20mL乙醚分2次加入得自Ig何首烏的二苯乙烯苷粗品中除雜，乙醚層可回收再利用。向水相溶液加入2倍其體積的乙酸乙酯， 回流提取4h。將乙酸乙酯層在40°C溫度下濃縮至原體積的1/6，加熱使?jié)饪s液中結(jié)晶溶解并過濾，濾液放冷析晶，濾出晶體。用熱乙酸乙酯溶解晶體，重復(fù)析晶、濾晶，如此反復(fù)2次， 揮干溶劑，得到純度為77. 6%的二苯乙烯苷產(chǎn)品。將大黃素和大黃酚粗品用乙酸乙酯進行加熱溶解，放冷析晶，濾晶的重結(jié)晶處理2次，揮去溶劑，得到純度為80. 7%的大黃素產(chǎn)品和 79. 7%的大黃酚產(chǎn)品。提純過程使用的乙酸乙酯可回收再利用。實施例2
將何首烏粉碎為80目的顆粒，按照Ig何首烏12mL的比例加入80%乙醇，在40°C溫度下以IkW超聲功率回流提取2. 2h。二苯乙烯苷、大黃素和大黃酚的提取率分別為91. 2%,88. 3% 和85.7%。提取液過濾，殘渣用乙醇洗一次，洗液合并到提取液中。在45°C溫度下將提取液減壓濃縮為稠膏并回收提取溶劑，二苯乙烯苷、大黃素和大黃酚可被無損耗地濃縮到稠膏中。用10倍體積的蒸餾水溶解稠膏并過濾，濾渣待用。濾液減壓濃縮為原體積的1/4，即為二苯乙烯苷粗品。向水提液濾渣中加入SmL乙醚溶解濾渣，過濾后用等體積乙醚再次沖洗濾渣，合并濾液。將濾液體積3倍的5% NaHCO3溶液分3次加入濾液除雜后，將乙醚層體積 2倍的5% Na2CO3溶液分2次加入其中萃取。取出水層，加入HCl調(diào)pH為3. 5，濾出沉淀，即為大黃素粗品。取出乙醚層，將其體積3倍的5% NaOH溶液分3次加入萃取。取出水層，加入HCl調(diào)pH為3. 5，濾出沉淀，即為大黃酚粗品，乙醚可回收再利用。將何首烏乙醇提取后的殘渣用清水反復(fù)清洗3次，靜置清洗液，待溶液完全澄清后倒出上清液，將沉淀于45°C烘干，過100目篩即得到純度為85%的何首烏淀粉產(chǎn)品。將19mL乙醚分2次加入得自Ig何首烏的二苯乙烯苷粗品中除雜，乙醚層可回收再利用。向水相溶液加入3倍其體積的乙酸乙酯，回流提取4. 5h。將乙酸乙酯層在45°C溫度下濃縮至原體積的1/4，加熱使?jié)饪s液中結(jié)晶溶解并過濾，濾液放冷析晶，濾出晶體。用熱乙酸乙酯溶解晶體，重復(fù)析晶、濾晶，如此反復(fù)2次，揮干溶劑，得到純度為78.洲的二苯乙烯苷產(chǎn)品。將大黃素和大黃酚粗品用乙酸乙酯進行加熱溶解，放冷析晶，濾晶的重結(jié)晶處理2次，揮去溶劑，得到純度為82. 9%的大黃素產(chǎn)品和80. 6%的大黃酚產(chǎn)品。提純過程使用的乙酸乙酯可回收再利用。實施例3
將何首烏粉碎為80目的顆粒，按照Ig何首烏IOmL的比例加入80%乙醇，在38°C溫度下以IkW超聲功率回流提取1. Sh0 二苯乙烯苷、大黃素和大黃酚的提取率分別為88. 3%,86. 7% 和84.3%。提取液過濾，殘渣用乙醇洗一次，洗液合并到提取液中。在50°C溫度下將提取液減壓濃縮為稠膏并回收提取溶劑，二苯乙烯苷、大黃素和大黃酚可被無損耗地濃縮到稠膏中。用9倍體積的蒸餾水溶解稠膏并過濾，濾渣待用。濾液減壓濃縮為原體積的1/5，即為二苯乙烯苷粗品。向水提液濾渣中加入9mL乙醚溶解濾渣，過濾后用等體積乙醚再次沖洗濾渣，合并濾液。將濾液體積3倍的5% NaHCO3溶液分2次加入濾液除雜后，將乙醚層體積 3倍的5% Na2CO3溶液分2次加入其中萃取。取出水層，加入HCl調(diào)pH為4，濾出沉淀，即為大黃素粗品。取出乙醚層，將其體積3倍的5% NaOH溶液分2次加入萃取。取出水層，加入 HCl調(diào)pH為4，濾出沉淀，即為大黃酚粗品，乙醚可回收再利用。將何首烏乙醇提取后的殘渣用清水反復(fù)清洗3次，靜置清洗液，待溶液完全澄清后倒出上清液，將沉淀于45°C烘干， 過100目篩即得到純度為87%的何首烏淀粉產(chǎn)品。將ISmL乙醚分3次加入得自Ig何首烏的二苯乙烯苷粗品中除雜，乙醚層可回收再利用。向水相溶液加入2. 5倍其體積的乙酸乙酯，回流提取4. 3h。將乙酸乙酯層在50°C溫度下濃縮至原體積的1/5，加熱使?jié)饪s液中結(jié)晶溶解并過濾，濾液放冷析晶，濾出晶體。用熱乙酸乙酯溶解晶體，重復(fù)析晶、濾晶，如此反復(fù) 2次，揮干溶劑，得到純度為76. 5%的二苯乙烯苷產(chǎn)品。將大黃素和大黃酚粗品用乙酸乙酯進行加熱溶解，放冷析晶，濾晶的重結(jié)晶處理2次，揮去溶劑，得到純度為81. 4%的大黃素產(chǎn)品和78. 2%的大黃酚產(chǎn)品。提純過程使用的乙酸乙酯可回收再利用。實施例4
將何首烏粉碎為80目的顆粒，取40g何首烏，加入80%乙醇480mL，在40°C溫度下以 Ikff超聲功率回流提取池。二苯乙烯苷、大黃素和大黃酚的提取率分別為92. 3%,89. 6%和 87. 2%。提取液過濾，殘渣用乙醇洗一次，洗液合并到提取液中。在50°C溫度下將提取液減壓濃縮為30mL稠膏并回收提取溶劑，二苯乙烯苷、大黃素和大黃酚可被無損耗地濃縮到稠膏中。用300mL蒸餾水溶解稠膏并過濾，濾渣待用。濾液減壓濃縮為原體積的1/5，即為二苯乙烯苷粗品。向水提液濾渣中加入350mL乙醚溶解濾渣，過濾后用等體積乙醚再次沖洗濾渣，合并濾液。將5% NaHCO3溶液2IOOmL分3次加入濾液除雜后，將5% Na2CO3溶液2IOOmL 分3次加入乙醚層萃取。取出水層，加入HCl調(diào)pH為4，濾出沉淀，即為大黃素粗品。將5% NaOH溶液2100mL分3次加入乙醚層萃取。取出水層，加入HCl調(diào)pH為4，濾出沉淀，即為大黃酚粗品，乙醚可回收再利用。將何首烏乙醇提取后的殘渣用清水反復(fù)清洗3次，靜置清洗液，待溶液完全澄清后倒出上清液，將沉淀于45°C烘干，過100目篩即得到純度為85%的何首烏淀粉產(chǎn)品9. 49g。將750mL乙醚分3次加入上述二苯乙烯苷粗品中除雜，乙醚層可回收再利用。向水相溶液加入150mL乙酸乙酯，回流提取4. ^！。將乙酸乙酯層在50°C溫度下濃縮至原體積的1/5，加熱使?jié)饪s液中結(jié)晶溶解并過濾，濾液放冷析晶，濾出晶體。用熱乙酸乙酯溶解晶體，重復(fù)析晶、濾晶，如此反復(fù)2次，揮干溶劑，得到純度為78. 9%的二苯乙烯苷產(chǎn)品0. 114g。將大黃素和大黃酚粗品用乙酸乙酯進行加熱溶解，放冷析晶，濾晶的重結(jié)晶處理2次，揮去溶劑，得到純度為81. 9%的大黃素產(chǎn)品11. Img和83. 2%的大黃酚產(chǎn)品0. 9mg。 提純過程使用的乙酸乙酯可回收再利用。
權(quán)利要求
1.何首烏多種活性成分聯(lián)合提取純化技術(shù)，其特征在于按照下述步驟進行(1)將何首烏粉碎為70-80目的顆粒，按照何首烏與乙醇的比例1/10-14的比例加入質(zhì)量濃度為70-80%乙醇，在38-42°C溫度下以IkW超聲功率回流提取1. 8-2. 2h ；(2)提取液過濾，殘渣用乙醇洗一次，洗液合并到提取液中；在40-50°C溫度下將提取液減壓濃縮為稠膏并回收提取溶劑，二苯乙烯苷、大黃素和大黃酚可被無損耗地濃縮到稠膏中；用8-10倍體積的蒸餾水溶解稠膏并過濾，濾渣待用，濾液減壓濃縮為原體積的1/4-1/6，即為二苯乙烯苷粗品；(3)向水提液濾渣中加入適量乙醚溶解濾渣，過濾后用等體積乙醚再次沖洗濾渣，合并濾液；將濾液體積2-3倍的5% NaHCO3溶液分2_3次加入濾液除雜后，將乙醚層體積2_3倍的5% Na2CO3溶液分2-3次加入其中萃取；取出水層，加入HCl調(diào)pH為3_4，濾出沉淀，即為大黃素粗品；取出乙醚層，將其體積2-3倍的5% NaOH溶液分2-3次加入萃取；取出水層，加入HCl調(diào)pH為3-4，濾出沉淀，即為大黃酚粗品，乙醚可回收再利用；(4)將何首烏乙醇提取后的殘渣用清水反復(fù)清洗3次，靜置清洗液，待溶液完全澄清后倒出上清液，將沉淀于45°C烘干，過100目篩即得到何首烏淀粉產(chǎn)品；(5)按照何首烏的二苯乙烯苷粗品與乙醚的比例為1/18-20的比例將乙醚分2-3次加入何首烏的二苯乙烯苷粗品中除雜，乙醚層可回收再利用；向水相溶液加入2-3倍其體積的乙酸乙酯，回流提取4-4. 5h ；將乙酸乙酯層在40-50°C溫度下濃縮至原體積的1/4-1/6， 加熱使?jié)饪s液中結(jié)晶溶解并過濾，濾液放冷析晶，濾出晶體；用熱乙酸乙酯溶解晶體，重復(fù)析晶、濾晶，如此反復(fù)2次以上，揮干溶劑，得到純度為76. 5%-78. 9%的二苯乙烯苷產(chǎn)品；(6)將大黃素和大黃酚粗品用乙酸乙酯進行加熱溶解，放冷析晶，濾晶的重結(jié)晶處理2 次以上，揮去溶劑，得到純度為80. 7%-82. 9%的大黃素產(chǎn)品和78. 2%_83. 0%的大黃酚產(chǎn)品； 提純過程使用的乙酸乙酯可回收再利用。
全文摘要
本發(fā)明何首烏多種活性成分聯(lián)合提取純化技術(shù)，涉及藥用植物多種活性成分的聯(lián)合提取純化技術(shù)。以70-80%的乙醇作為提取溶劑可將何首烏中的二苯乙烯苷、大黃素和大黃酚最大限度地從何首烏中提取到溶劑中來，并與殘渣中淀粉分離。利用二苯乙烯苷與大黃素和大黃酚的水溶性差異，以水作為溶劑可使二苯乙烯苷自醇提物中與大黃素和大黃酚分離，得到其粗品。先后以5%NaCO3和5%NaOH溶液作為溶劑，可將大黃素和大黃酚分別自醇提物中分離出來，經(jīng)酸沉，可得大黃素與大黃酚粗品。對何首烏醇提殘渣用水清洗，水洗液經(jīng)沉淀可得純度為85%-87%的淀粉。本發(fā)明具有成本低、效率高、無污染、產(chǎn)品純度高的特點。
文檔編號C07H15/203GK102321128SQ20111017725
公開日2012年1月18日 申請日期2011年6月28日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月28日
發(fā)明者吳嫻, 王坤, 石杰, 陳冠華 申請人:江蘇大學(xué)