專利名稱：一種從野菊花中提取蒙花苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種蒙花苷的提取方法，尤其是涉及一種從野菊花中提取蒙花苷的方法。
背景技術(shù)：
目前關(guān)于蒙花苷的研究主要是對其藥理方面的研究，不管是國內(nèi)還是國外，對其提取工藝方面的研究報道較為罕見。CN101857621A于2010. 10. 13公開了一種從野菊花中提取蒙花苷的方法，其基本工藝流程是以干燥的野菊花為原料，經(jīng)醇提、濃縮、PH值調(diào)節(jié)、大孔樹脂吸附洗脫分離，收集洗脫液，再通過濃縮、干燥，得成品，成品蒙花苷含量50%以上。 從其介紹的三個實施例看，蒙花苷含量最高的優(yōu)選實施例3是“60%以上”(三個實施例均未提供具體檢測數(shù)據(jù))，按照一般情況推斷，應(yīng)是在70%以下。產(chǎn)品純度尚欠理想。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是，提供一種產(chǎn)品中蒙花苷的含量可達95%以上的從野菊花中提取蒙花苷的方法。本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是一種從野菊花中提取蒙花苷的方法，包括以下步驟
(1)原料預(yù)處理將干燥的野菊花除雜、切碎，使用去離子水常溫浸泡5 10h，甩干水液后，備用；
(2)堿水提取加入重量為野菊花原料干重6 10倍的質(zhì)量濃度為2%廣8%。的堿水溶液， 在70°C 80°C的條件下，浸泡提取> 2次，每次浸泡2lh，過濾，得提取液；
(3)醇沉將步驟(2)所得提取液蒸發(fā)濃縮至原提取液重的l/2(Tl/15，然后加入重量為所得濃縮液2 3倍的95% (體積)乙醇，在20°C 30°C下靜置6 10h，過濾，得醇液；
(4)萃取將步驟(3)所得醇液蒸發(fā)濃縮至原所得醇液量重的1ΑΓ1/5，然后加入重量為所得濃縮液2 3倍的石油醚萃取萃取> 2次，收集下層重液，上層輕液石油醚層回收；
(5)調(diào)酸將步驟(4)所得重液蒸發(fā)濃縮至其重量的1/3 1/2后，向其中加入0.2^0. 4 mol/L的酸溶液，調(diào)節(jié)pH至；Γ5后，冷卻至10°C 20°C，靜置l(T20h，收集沉淀物；
(6)大孔樹脂吸附分離將步驟(5)所得沉淀物用相當(dāng)于沉淀物重量壙12倍的濃度為 609Γ80% (體積)的乙醇溶解，上大孔吸附樹脂柱，流速為1. 5^2. 0倍柱體積/h，靜置2 3h， 使用2 3倍柱體積去離子水進行洗脫后，再使用8 12倍柱體積的組合有機溶劑進行洗脫， 收集有機溶劑洗脫液；
(7)結(jié)晶與重結(jié)晶將步驟(6)所得有機洗脫液蒸發(fā)濃縮、干燥后，使用重量為所得干物質(zhì)1(Γ15倍的組合有機溶劑溶解，并加溫至40°C ^60oC，保持此溫度2(T30min后，降溫至 5°C 10°C，靜置l(Tl5h，收集晶體，重結(jié)晶3、次，干燥得成品。進一步，所述2%0、％。的堿水溶液優(yōu)選氫氧化鈉溶液、碳酸鈉溶液或者氫氧化鈣溶液。
進一步，所述0. 2^0. 4mol/L的酸溶液優(yōu)選鹽酸、硫酸或者磷酸溶液。進一步，所述大孔吸附樹脂優(yōu)選0101、01300、朋0450或々8-8大孔吸附樹脂。進一步，所述步驟(6)洗脫時所用的組合有機溶劑可為甲醇-乙酸乙酯混合液，其中甲醇與乙酸乙酯重量配比為2 4:1。進一步，所述步驟(7)結(jié)晶時所用的組合有機溶劑可為甲醇-乙酸乙酯-丙酮混合液，其中甲醇、乙酸乙酯、丙酮重量配比為廣2:廣2:1。本發(fā)明所得的野菊花提取物產(chǎn)品，經(jīng)高效液相色譜法檢測，其蒙花苷含量可達95% 以上。
具體實施例方式以下結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步詳細說明。實施例1
本實施例是通過以下步驟來實現(xiàn)的
(1)原料預(yù)處理將100kg干燥的野菊花除雜、切碎，使用600kg去離子水常溫浸泡 10h，甩干水液后，備用；
(2)堿水提取使用IOOOkg6%。的氫氧化鈉溶液，在70°C 80°C的條件下，浸泡提取3 次，每次浸泡2. 5h,過濾，得提取液；
(3)醇沉將步驟(2)所得提取液蒸發(fā)濃縮至1卯kg，然后加入400kg的95%(體積)乙醇，在20°C靜置10h，過濾，得醇液；
(4)萃取將步驟(3)所得醇液蒸發(fā)濃縮至10 ,使用300kg的石油醚萃取3次，收集下層重液，上層輕液石油醚層回收；
(5)調(diào)酸將步驟(4)所得重液蒸發(fā)濃縮至34.5kg后，向其中加入0. 2 mol/L的鹽酸溶液，調(diào)節(jié)PH至3. 5，冷卻至10°C，靜置20h后，收集沉淀物；
(6)大孔吸附樹脂吸附分離將步驟(5)所得沉淀物使用15kg的70%(體積)乙醇溶解，過HPD450大孔吸附樹脂吸附，控制流速為1. 5倍柱體積/h，靜置池，使用2倍柱體積去離子水進行洗脫后，再使用12倍柱體積的甲醇-乙酸乙酯(4:1)進行洗脫，收集甲醇-乙酸乙酯洗脫液；
(7)結(jié)晶與重結(jié)晶將步驟(6)所得洗脫液蒸發(fā)濃縮、干燥后得干物595g，再使用6kg 甲醇-乙酸乙酯-丙酮(1 1 1)溶解，并加溫至55°C，保持此溫度20min后，降溫至5°C，靜置15h，收集晶體，重結(jié)晶3次，干燥，得505g產(chǎn)品。
經(jīng)液相色譜法檢測，所得產(chǎn)品中含蒙花苷95. 40%。實施例2
本實施例是通過以下步驟來實現(xiàn)的
(1)原料預(yù)處理將100kg干燥的野菊花除雜、切碎，使用600kg去離子水常溫浸泡 10h，甩干水液后，備用；
(2)堿水提取使用IOOOkg2%。的氫氧化鈣溶液，在70°C 80°C的條件下浸泡提取3 次，每次浸泡池，過濾，得提取液；
(3)醇沉將步驟(2)所得提取液蒸發(fā)濃縮至l^kg，然后加入400kg的95%乙醇，在 20°C靜置10h，過濾，得醇液；(4)萃取將步驟(3)所得醇液蒸發(fā)濃縮至l(^kg，使用300kg的石油醚萃取4次，收集下層重液，上層輕液石油醚層回收；
(5)調(diào)酸將步驟(4)所得重液蒸發(fā)濃縮至52.5kg后，向其中加入0. 2 mol/L的鹽酸溶液，調(diào)節(jié)PH至3. 5，冷卻至10°C，靜置20h后，收集沉淀物；
(6)大孔吸附樹脂吸附分離將步驟(5)所得沉淀物使用IOkg的70%的乙醇(體積)溶解，過DlOl大孔吸附樹脂吸附，控制流速為1. 5倍柱體積/h，靜置池，使用2倍柱體積去離子水進行洗脫，再使用12倍柱體積的甲醇-乙酸乙酯(2:1)進行洗脫，收集甲醇-乙酸乙酯洗脫液；
(7)結(jié)晶與重結(jié)晶將步驟(6)所得洗脫液蒸發(fā)濃縮、干燥后得干物564g，再使用9kg 甲醇-乙酸乙酯-丙酮(2:2:1)溶解，并加溫至55°C，保持此溫度30min后，降溫至5°C，靜置15h，收集晶體，重結(jié)晶4次，干燥，得475g產(chǎn)品。經(jīng)液相色譜法檢測，所得產(chǎn)品中含蒙花苷97. 67%。實施例3
本實施例是通過以下步驟來實現(xiàn)的
(1)原料預(yù)處理將IOOkg干燥的野菊花原料除雜、切碎，使用600kg去離子水常溫浸泡10h，甩干水液后，備用；
(2)堿水提取使用IOOOkg4%。的碳酸鈉溶液，在70°C 80°C的條件下提浸泡提取3 次，每次浸泡池，過濾，得提取液；
(3)醇沉將步驟(2)所得提取液蒸發(fā)濃縮至16Ag，然后加入420kg的95%乙醇，在 20°C靜置10h，過濾，得醇液；
(4)萃取將步驟(3)所得醇液蒸發(fā)濃縮至l(^kg，使用275kg的石油醚萃取3次，收集下層重液，上層輕液石油醚層回收；
(5)調(diào)酸將步驟(4)所得重液蒸發(fā)濃縮至51.5kg后，向其中加入0. 2mol/L的硫酸溶液，調(diào)節(jié)PH至4，冷卻至10°C，靜置20h，收集沉淀物；
(6)大孔吸附樹脂吸附分離將步驟(5)所得沉淀物使用12kg的70%(體積)乙醇溶解， 過HPD450大孔吸附樹脂吸附，控制流速為1. 5倍柱體積/h，靜置池后，使用2倍柱體積去離子水進行洗脫后，再使用12倍柱體積的甲醇-乙酸乙酯(2:1)進行洗脫，收集甲醇-乙酸乙酯洗脫液；
(7)結(jié)晶與重結(jié)晶將步驟(6)洗脫液蒸發(fā)濃縮、干燥后得干物599g，再使用9kg甲醇-乙酸乙酯-丙酮(2 2 1)溶解，并加溫至55°C，保持此溫度20min后，降溫至5°C，靜置 15h，收集晶體，重結(jié)晶3次，干燥，得487g產(chǎn)品。
經(jīng)液相色譜法檢測，所得產(chǎn)品中含蒙花苷96. 18%。實施例4
本實施例是通過以下步驟來實現(xiàn)的
(1)原料預(yù)處理將IOOkg干燥的野菊花除雜、切碎，使用600kg去離子水常溫浸泡 10h，甩干水液后，備用；
(2)堿水提取使用IOOOkg4%。的氫氧化鈉溶液，在70°C 80°C的條件下浸泡提取3 次，每次浸泡池，過濾，得提取液；
(3)醇沉將步驟(2)所得提取液蒸發(fā)濃縮至181kg，然后加入400kg的95%乙醇，在20°C靜置10h，過濾，得醇液；
(4)萃取將步驟(3)所得醇液蒸發(fā)濃縮至103kg，使用300kg的石油醚萃取4次，收集下層重液，上層輕液石油醚層回收；
(5)調(diào)酸將步驟(4)所得重液蒸發(fā)濃縮至43kg后，向其中加入0.2 mol/L的硫酸溶液，調(diào)節(jié)PH至3. 8，冷卻至10°C，靜置20h后，收集沉淀物；
(6)大孔吸附樹脂吸附分離將步驟(5)所得沉淀物使用8kg的70%(體積)乙醇溶解， 控制流速為1.5倍柱體積/h，過HPD450大孔吸附樹脂吸附，靜置3h，使用2倍柱體積去離子水進行洗脫后，再使用12倍柱體積的甲醇-乙酸乙酯(2:1)進行洗脫，收集甲醇-乙酸乙酯洗脫液；
(7)結(jié)晶與重結(jié)晶將步驟(6)所得洗脫液蒸發(fā)濃縮、干燥后得干物613g，再使用9.5kg 甲醇-乙酸乙酯-丙酮(1 1 1)溶解，并加溫至55°C，保持此溫度30min后，降溫至7°C，靜置15h，收集晶體，重結(jié)晶3次，干燥，得491g產(chǎn)品。經(jīng)液相色譜法檢測，所得產(chǎn)品中含蒙花苷96. 89%。實施例5
本實施例是通過以下步驟來實現(xiàn)的
(1)原料預(yù)處理將IOOkg干燥的野菊花原料除雜、切碎，使用600kg去離子水常溫浸泡10h，甩干水液后，備用；
(2)堿水提取使用IOOOkg3%。的碳酸鈉溶液，在70°C 80°C條件下提取浸泡提取3 次，每次浸泡池，過濾，得提取液；
(3)醇沉將步驟(2)所得提取液蒸發(fā)濃縮至17^g，然后加入400kg的95%乙醇，在 20°C靜置10h，過濾，得醇液；
(4)萃取將步驟(3)所得醇液蒸發(fā)濃縮至110kg，使用300kg的石油醚萃取3次，收集下層重液，上層輕液石油醚層回收；
(5)調(diào)酸將步驟(4)所得重液蒸發(fā)濃縮至51.5kg,向其中加入0. 4 mol/L的鹽酸溶液， 調(diào)節(jié)PH至4. 5，冷卻至10°C，靜置20h后，收集沉淀物；
(6)大孔吸附樹脂吸附分離將步驟(5)所得沉淀物使用7.5kg的70% (體積)乙醇溶解，過D1300大孔吸附樹脂吸附，控制流速為1. 5倍柱體積/h，靜置池，使用2倍柱體積去離子水進行洗脫后，再使用10倍柱體積的甲醇-乙酸乙酯(2:1)進行洗脫，收集甲醇-乙酸乙酯洗脫液；
(7)結(jié)晶與重結(jié)晶將步驟(6)所得洗脫液蒸發(fā)濃縮、干燥后得干物644g，再使用8.5kg 甲醇-乙酸乙酯-丙酮(1 2 1)溶解，并加溫至55°C，保持此溫度20min后，降溫至6°C，靜置15h，收集晶體，重結(jié)晶4次，干燥，得496g產(chǎn)品。經(jīng)液相色譜法檢測，所得產(chǎn)品中含蒙花苷96. 45%。實施例6
本實施例是通過以下步驟來實現(xiàn)的
(1)原料預(yù)處理將100kg干燥的野菊花原料除雜、切碎，使用800kg去離子水常溫浸泡10h，甩干水液后，備用；
(2)堿水提取使用800kg5%。的氫氧化鈉溶液，在70°C 80°C的條件下提浸泡提取3 次，每次浸泡池，過濾，得提取液；(3)醇沉將步驟(2)所得提取液蒸發(fā)濃縮至15Ag，然后加入350kg的95%乙醇，在 20°C靜置10h，過濾，得醇液；
(4)萃取將步驟(3)所得醇液蒸發(fā)濃縮至100.^g，使用300kg的石油醚萃取3次，收集下層重液，上層輕液石油醚層回收；
(5)調(diào)酸將步驟(4)所得重液蒸發(fā)濃縮至48kg后，向其中加入0.4 mol/L的磷酸溶液，調(diào)節(jié)PH至3. 2，冷卻至10°C，靜置20h后，收集沉淀物；
(6)大孔吸附樹脂吸附分離將步驟(5)所得沉淀物使用7kg的70%(體積)乙醇溶解， 過AB-8大孔吸附樹脂吸附，控制流速為1. 5倍柱體積/小時，靜置池，使用2倍柱體積去離子水進行洗脫后，再使用12倍柱體積的甲醇-乙酸乙酯(1:1)進行洗脫，收集甲醇-乙酸乙酯洗脫液；
(7)結(jié)晶與重結(jié)晶將步驟(6)上述所得的洗脫液蒸發(fā)濃縮、干燥后得干物599g，再使用9kg甲醇-乙酸乙酯-丙酮(2 1 1)溶解，并加溫至55°C，保持此溫度30min后，降溫至 5°C，靜置15h，收集晶體，重結(jié)晶3次，干燥，得483g產(chǎn)品。 經(jīng)液相色譜法檢測，所得產(chǎn)品中含蒙花苷96. 37%。
權(quán)利要求
1.一種從野菊花中提取蒙花苷的方法，其特征在于，包括如下步驟(1)原料預(yù)處理將干燥的野菊花除雜、切碎，使用去離子水常溫浸泡5 10h，甩干水液后，備用；(2)堿水提取加入重量為野菊花原料干重6 10倍的質(zhì)量濃度為2%。 8%。的堿水溶液，在70°C 80°C的條件下，浸泡提取> 2次，每次浸泡2 池，過濾，得提取液；(3)醇沉將步驟(2)所得提取液蒸發(fā)濃縮至原提取液重的1/20 1/15，然后加入重量為所得濃縮液2 3倍的95% (體積)乙醇，在20°C 30°C下靜置6 10h，過濾，得醇液；(4)萃取將步驟(3)所得醇液蒸發(fā)濃縮至原所得醇液量重的1/6 1/5，然后加入重量為所得濃縮液2 3倍的石油醚萃取> 2次，收集下層重液，上層輕液石油醚層回收；(5)調(diào)酸將步驟(4)所得重液蒸發(fā)濃縮至其重量的1/3 1/2后，向其中加入0.2 0.4 mol/L的酸溶液，調(diào)節(jié)pH至3 5后，冷卻至10°C 20°C，靜置10 20h，收集沉淀物；(6)大孔樹脂吸附分離將步驟(5)所得沉淀物用相當(dāng)于沉淀物重量8 12倍體積濃度為60% 80%的乙醇溶解，上大孔吸附樹脂柱，流速為1. 5 2. 0倍柱體積/h，靜置2 池，使用2 3倍柱體積去離子水進行洗脫后，再使用8 12倍柱體積的組合有機溶劑進行洗脫，收集有機溶劑洗脫液；(7)結(jié)晶與重結(jié)晶將步驟(6)所得有機溶劑洗脫液蒸發(fā)濃縮、干燥后，使用重量為所得干物質(zhì)10 15倍的組合有機溶劑溶解，并加溫至40°C 60°C，保持此溫度20 30min 后，降溫至5°C 10°C，靜置10 15h，收集晶體，重結(jié)晶3 4次，干燥得成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從野菊花中提取蒙花苷的方法，其特征在于所述2%0 8%。 的堿水溶液為氫氧化鈉溶液、碳酸鈉溶液或者氫氧化鈣溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的從野菊花中提取蒙花苷的方法，其特征在于所述0.2 0. 4mol/L的酸溶液為鹽酸、硫酸或者磷酸溶液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的從野菊花中提取蒙花苷的方法，其特征在于所述大孔吸附樹脂為D101、D1300、HPD450或AB-8大孔吸附樹脂。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的從野菊花中提取蒙花苷的方法，其特征在于所述步驟(6)，洗脫時所用的組合有機溶劑為甲醇-乙酸乙酯混合液，其中甲醇與乙酸乙酯重量配比為2 4:1。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的從野菊花中提取蒙花苷的方法，其特征在于所述步驟(6)， 洗脫時所用的組合有機溶劑為甲醇-乙酸乙酯混合液，其中甲醇與乙酸乙酯重量配比為 2 4:1。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的從野菊花中提取蒙花苷的方法，其特征在于所述步驟(7)，結(jié)晶時所用的組合有機溶劑為甲醇-乙酸乙酯-丙酮混合液，其中甲醇、乙酸乙酯、丙酮重量配比為1 2:1 2:1。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的從野菊花中提取蒙花苷的方法，其特征在于所述步驟(7)， 結(jié)晶時所用的組合有機溶劑為甲醇-乙酸乙酯-丙酮混合液，其中甲醇、乙酸乙酯、丙酮重量配比為1 2:1 2:1。
全文摘要
一種從野菊花中提取蒙花苷的方法，包括如下步驟(1)原料預(yù)處理；(2)堿水提?。?3)醇沉；(4)石油醚萃?。?5)調(diào)酸；(6)大孔樹脂吸附分離；(7)結(jié)晶與重結(jié)晶，干燥。本發(fā)明所得的野菊花提取物產(chǎn)品，經(jīng)高效液相色譜法檢測，其蒙花苷含量可達95%以上。
文檔編號C07H17/07GK102250172SQ201110195580
公開日2011年11月23日 申請日期2011年7月13日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月13日
發(fā)明者劉永勝, 唐方華, 陳淼芬, 黃華學(xué) 申請人:長沙華誠生物科技有限公司