專利名稱：一種小麥黃素的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥提取分離技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種從白羊草中分離制備小麥黃素的方法。
背景技術(shù)：
白羊草(Mothriochloa ischaemum (L. ) Keng)為禾本科孔穎草屬多年生草本植物， 起源于歐洲南部和亞洲，現(xiàn)在各大洲均有分布。白羊草屬于叢生多年生暖季型植物，具短根莖，耐干旱、耐鹽堿、耐牧、休眠期耐火燒、侵入性強(qiáng)、種子生產(chǎn)能力高。適合于在排水良好的肥沃粘土上生長(zhǎng)，在沙地和腐蝕土地上也能正常生長(zhǎng)。白羊草主要有效成分為黃酮類化合物，以小麥黃素含量最高。小麥黃素又名麥黃酮，對(duì)離體豚鼠腸管有松弛作用，有輕度抗氧化作用，可防止腎上腺素氧化，并有輕度雌激素樣作用。可作染料中間體。目前，市場(chǎng)上售小麥黃素相關(guān)產(chǎn)品大多含量低，且資源有限，工藝復(fù)雜、成本高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種小麥黃素的制備方法。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的
(1)取白羊草，經(jīng)粉碎處理，加入到超臨界(X)2萃取器中，用甲醇作為夾帶劑，進(jìn)行萃取， 得到萃取物；
(2)萃取物加入乙酸乙酯攪拌使溶解，過濾，濾液濃縮干燥，得粗提物；
(3)采用高速逆流色譜法分離純化粗提物中的小麥黃素，其兩相溶劑系統(tǒng)為石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，上相注滿高速逆流色譜柱為固定相，轉(zhuǎn)動(dòng)主機(jī)，泵入下相做流動(dòng)相，流動(dòng)相溶解粗提物由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測(cè)器在線監(jiān)測(cè)，收集小麥黃素組分；
(4)將小麥黃素組分進(jìn)行真空濃縮，析出結(jié)晶，濾出結(jié)晶，加入丙酮-石油醚重結(jié)晶，過濾、洗滌干燥即得小麥黃素。所述步驟(1)中的超臨界CO2萃取參數(shù)條件為萃取溫度為30_55°C，萃取壓力為 25-35MPa，萃取時(shí)間為2_3. 5h，分離釜I溫度為30_40°C，壓力為8_10MPa，分離釜II溫度為 ^-35°C，壓力為 5-8MPa，CO2 流量為 2-%il/g 生藥 /min。所述步驟(1)中夾帶劑的用量為藥材重量的10-20%。所述步驟(3)中石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水溶劑系統(tǒng)的體積比為 3-7:5-8:2-4:4-6。所述步驟(4)中丙酮-石油醚體積比為1-2.5 :1。本方法積極效果是
(1)本方法采用超臨界ω2萃取，能耗低，萃取劑(X)2清潔無污染；
(2)本方法采用高速逆流色譜法，收率高、制備量大、制備周期短，解決了柱層析效率低而且污染嚴(yán)重的技術(shù)缺陷；(3)本方法工藝步驟操作較簡(jiǎn)單，易操作，所得產(chǎn)品純度高。下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1
取白羊草，經(jīng)粉碎處理，稱取1kg，加入到超臨界(X)2萃取器中，用甲醇作為夾帶劑，用量為藥材重量的10%，進(jìn)行萃取，萃取溫度為35°C，萃取壓力為25MPa，CO2流量為2ml/g生藥/min，萃取時(shí)間為2h，分離釜I溫度為30°C，壓力為8MPa，分離釜II溫度為^°C，壓力為 5MPa,得到萃取物，用乙酸乙酯攪拌使溶解，過濾，濾液濃縮干燥，得粗提物；采用高速逆流色譜法分離純化粗提物中的小麥黃素，其兩相溶劑系統(tǒng)為石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，體積比為3 8 4 5，上相注滿高速逆流色譜柱為固定相，轉(zhuǎn)動(dòng)主機(jī)，泵入下相做流動(dòng)相，流動(dòng)相溶解粗提物由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測(cè)器在線監(jiān)測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為352nm，收集小麥黃素組分，真空濃縮，析出結(jié)晶，濾出結(jié)晶，加入丙酮-石油醚(體積比為1 :1)重結(jié)晶，過濾、洗滌干燥即得小麥黃素，含量96. 5%。實(shí)施例2:
取白羊草，經(jīng)粉碎處理，稱取1kg，加入到超臨界(X)2萃取器中，用甲醇作為夾帶劑，用量為藥材重量的18%，進(jìn)行萃取，萃取溫度為30°C，萃取壓力為35MPa，CO2流量為％il/g生藥 /min，萃取時(shí)間為3. 5h，分離釜I溫度為30°C，壓力為8MPa，分離釜II溫度為^°C，壓力為 8MPa,得到萃取物，用乙酸乙酯攪拌使溶解，過濾，濾液濃縮干燥，得粗提物；采用高速逆流色譜法分離純化粗提物中的小麥黃素，其兩相溶劑系統(tǒng)為石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，體積比為6 5 3 5，上相注滿高速逆流色譜柱為固定相，轉(zhuǎn)動(dòng)主機(jī)，泵入下相做流動(dòng)相，流動(dòng)相溶解粗提物由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測(cè)器在線監(jiān)測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為352nm，收集小麥黃素組分，真空濃縮，析出結(jié)晶，濾出結(jié)晶，加入丙酮-石油醚(體積比為2. 5:1)重結(jié)晶，過濾、洗滌干燥即得小麥黃素，含量95. 4%。實(shí)施例3:
取白羊草，經(jīng)粉碎處理，稱取^ig,加入到超臨界(X)2萃取器中，用甲醇作為夾帶劑，用量為藥材重量的20%，進(jìn)行萃取，萃取溫度為55°C，萃取壓力為^MPa，CO2流量為3ml/g生藥 /min,萃取時(shí)間為2. 5h，分離釜I溫度為40°C，壓力為lOMPa，分離釜II溫度為35°C，壓力為 8MPa,得到萃取物，用乙酸乙酯攪拌使溶解，過濾，濾液濃縮干燥，得粗提物；采用高速逆流色譜法分離純化粗提物中的小麥黃素，其兩相溶劑系統(tǒng)為石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，體積比為7 8 4 6，上相注滿高速逆流色譜柱為固定相，轉(zhuǎn)動(dòng)主機(jī)，泵入下相做流動(dòng)相，流動(dòng)相溶解粗提物由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測(cè)器在線監(jiān)測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為352nm，收集小麥黃素組分，真空濃縮，析出結(jié)晶，濾出結(jié)晶，加入丙酮-石油醚(體積比為1.5:1)重結(jié)晶，過濾、洗滌干燥即得小麥黃素，含量96. 1。實(shí)施例4:
取白羊草，經(jīng)粉碎處理，稱取^g，加入到超臨界(X)2萃取器中，用甲醇作為夾帶劑，用量為藥材重量的10%，進(jìn)行萃取，萃取溫度為55°C，萃取壓力為35MPa，CO2流量為％il/g生藥 /min,萃取時(shí)間為2. 5h，分離釜I溫度為40°C，壓力為lOMPa，分離釜II溫度為30°C，壓力為
6. 5MPa，得到萃取物，用乙酸乙酯攪拌使溶解，過濾，濾液濃縮干燥，得粗提物；采用高速逆流色譜法分離純化粗提物中的小麥黃素，其兩相溶劑系統(tǒng)為石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水， 體積比為3 5 2 4，上相注滿高速逆流色譜柱為固定相，轉(zhuǎn)動(dòng)主機(jī)，泵入下相做流動(dòng)相，流動(dòng)相溶解粗提物由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測(cè)器在線監(jiān)測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為352nm，收集小麥黃素組分， 真空濃縮，析出結(jié)晶，濾出結(jié)晶，加入丙酮-石油醚(體積比為1.5:1)重結(jié)晶，過濾、洗滌干燥即得小麥黃素，含量95. 6%。
實(shí)施例5:
取白羊草，經(jīng)粉碎處理，稱取10kg，加入到超臨界(X)2萃取器中，用甲醇作為夾帶劑，用量為藥材重量的15%，進(jìn)行萃取，萃取溫度為35°C，萃取壓力為^MPa，CO2流量為3. 5ml/g生藥/min，萃取時(shí)間為3. 5h，分離釜I溫度為35°C，壓力為9MPa，分離釜II溫度為30°C，壓力為7MPa，得到萃取物，用乙酸乙酯攪拌使溶解，過濾，濾液濃縮干燥，得粗提物；采用高速逆流色譜法分離純化粗提物中的小麥黃素，其兩相溶劑系統(tǒng)為石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水， 體積比為3 8 4 6，上相注滿高速逆流色譜柱為固定相，轉(zhuǎn)動(dòng)主機(jī)，泵入下相做流動(dòng)相，流動(dòng)相溶解粗提物由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測(cè)器在線監(jiān)測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為352nm，收集小麥黃素組分， 真空濃縮，析出結(jié)晶，濾出結(jié)晶，加入丙酮-石油醚(體積比為2:1)重結(jié)晶，過濾、洗滌干燥即得小麥黃素，含量97. 7%。
權(quán)利要求
1.一種小麥黃素的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1)取白羊草，經(jīng)粉碎處理，加入到超臨界(X)2萃取器中，用甲醇作為夾帶劑，進(jìn)行萃取， 得到萃取物；(2)萃取物加入乙酸乙酯攪拌使溶解，過濾，濾液濃縮干燥，得粗提物；(3)采用高速逆流色譜法分離純化粗提物中的小麥黃素，其兩相溶劑系統(tǒng)為石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，上相注滿高速逆流色譜柱為固定相，轉(zhuǎn)動(dòng)主機(jī)，泵入下相做流動(dòng)相，流動(dòng)相溶解粗提物由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測(cè)器在線監(jiān)測(cè)，收集小麥黃素組分；(4)將小麥黃素組分進(jìn)行真空濃縮，析出結(jié)晶，濾出結(jié)晶，加入丙酮-石油醚重結(jié)晶，過濾、洗滌干燥即得小麥黃素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種小麥黃素的制備方法，其特征在于所述步驟(1)中的超臨界( 萃取參數(shù)條件為萃取溫度為30-55°C，萃取壓力為25-35MPa，萃取時(shí)間為2_3. 5h， 分離釜I溫度為30-40°C，壓力為8-lOMPa，分離釜II溫度為，壓力為5_8MPa，CO2流量為2-%il/g生藥/min。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種小麥黃素的制備方法，其特征在于所述步驟(1)中夾帶劑的用量為藥材重量的10-20%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種小麥黃素的制備方法，其特征在于所述步驟(3)中石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水溶劑系統(tǒng)的體積比為3-7:5-8:2-4:4-6。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種小麥黃素的制備方法，其特征在于所述步驟(4)中丙酮-石油醚體積比為1-2.5 =I0
全文摘要
本發(fā)明涉及一種操作簡(jiǎn)單、污染少的小麥黃素的制備方法，工藝步驟為(1)取白羊草，經(jīng)粉碎處理，加入到超臨界CO2萃取器中，用甲醇作為夾帶劑，進(jìn)行萃取，得到萃取物；(2)萃取物加入乙酸乙酯攪拌使溶解，過濾，濾液濃縮干燥，得粗提物；(3)采用高速逆流色譜法分離純化粗提物中的小麥黃素，其兩相溶劑系統(tǒng)為石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，收集小麥黃素組分；(4)將小麥黃素組分進(jìn)行真空濃縮，析出結(jié)晶，濾出結(jié)晶，加入丙酮-石油醚重結(jié)晶。本發(fā)明制備小麥黃素，產(chǎn)品純度高，易于實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化放大。
文檔編號(hào)C07D311/40GK102276566SQ20111026483
公開日2011年12月14日 申請(qǐng)日期2011年9月8日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月8日
發(fā)明者萬冬梅, 劉東鋒 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司