專利名稱：一種超高壓聯(lián)合超聲技術(shù)提取海蜇糖蛋白的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從海蜇中提取糖蛋白的方法，具體的說是一種超高壓聯(lián)合超聲技術(shù)提取海蜇糖蛋白的方法。
背景技術(shù)：
海蜇是一種醫(yī)食同源的大型水母，在我國(guó)分布較廣，年產(chǎn)量高，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明海蜇具有降血壓，降血脂，預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化，美容護(hù)膚等功效。目前，從海蜇體內(nèi)提取多種活性成分，如膠原蛋白，糖胺聚糖，多肽，毒液，糖蛋白，均具有不同的生物活性。研究活性物質(zhì)，關(guān)鍵一步在于提取。由于海蜇含水量高，易自溶等特點(diǎn)，從海蜇中大量提取活性物質(zhì)較難。目前，關(guān)于海蜇體內(nèi)活性物質(zhì)提取的方法有常溫常壓提取，超高壓輔助提取，如超高壓輔助提取海蜇皮中得膠原蛋白；超聲輔助提取法，如超聲輔助提取海蜇頭中糖蛋白，但這些方法提取時(shí)間較長(zhǎng)，一般需要幾個(gè)小時(shí)，且提取率不高，造成原料浪費(fèi)， 不能快速高效的從含水量高的水產(chǎn)品中提取活性物質(zhì)，因而需要進(jìn)一步改進(jìn)。由于超高壓作用，可以使原料內(nèi)外壓差發(fā)生變化，導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，再結(jié)合超聲輔助提取，利用超聲空化作用，可以使目標(biāo)組分更易從被提取物中游離出來(lái)，縮短提取時(shí)間，提高得率。到目前為止，尚沒有人采用超高壓和超聲聯(lián)合技術(shù)來(lái)提取海蜇糖蛋白。

發(fā)明內(nèi)容
為解決現(xiàn)有技術(shù)從海蜇中提取糖蛋白的缺點(diǎn)，本發(fā)明提供了一種超高壓聯(lián)合超聲技術(shù)提取海蜇糖蛋白的方法。本發(fā)明為解決上述技術(shù)問題采用的技術(shù)方案為一種超高壓聯(lián)合超聲技術(shù)提取海蜇糖蛋白的方法，包含以下步驟
1)用組織搗碎機(jī)將新鮮海蜇絞碎，取組織搗碎液，按每克組織搗碎液加入細(xì)1濃度為 0. 5mol/L NaCl溶液的比例加入NaCl溶液，混合均勻后裝入高壓袋內(nèi)，密封后備用；
2)將步驟1中裝有混合料的高壓袋施加100-500MPa的壓力進(jìn)行浸提，升壓速度為 50MPa/s，升壓完畢后保壓l-5min，然后卸除壓力，卸壓速度為100 MPa/s，卸壓完畢后再重復(fù)上述加壓、保壓和卸壓操作1-2次；
3)將步驟2中經(jīng)過超高壓處理后的混合料倒入燒杯中，置入超聲波萃取儀，在超聲頻率為M50MHz、超聲功率為100-500W的條件下進(jìn)行提取，超聲提取時(shí)間為l-5min，提取完成后，在4000r/min的離心速度下離心20min，然后取上清液，備用；
4)邊攪拌邊向步驟3)中制得的上清液中加入質(zhì)量濃度為95%的乙醇，直至上清液中乙醇的質(zhì)量濃度達(dá)到75%，靜置池，然后在lOOOOr/min的離心速度下離心15min，過濾后得到沉淀，將沉淀凍干，得到海蜇糖蛋白。所述的凍干操作為常規(guī)操作，可在任意型號(hào)的凍干機(jī)中進(jìn)行。通過單因素實(shí)驗(yàn)和正交試驗(yàn)，優(yōu)化出了超高壓聯(lián)合超聲技術(shù)提取海蜇糖蛋白的最佳工藝參數(shù)料液比lg:^il，壓力400MPa，保壓時(shí)間anin，加壓2次；超聲功率400W，超聲提取時(shí)間2min，糖蛋白得率為2. 3%。有益效果本發(fā)明采用超高壓聯(lián)合超聲提取技術(shù)，由于超高壓作用，可以使原料內(nèi)外壓差發(fā)生變化，導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，再結(jié)合超聲輔助提取，利用超聲空化作用，可以使目標(biāo)組分更易從被提取物中游離出來(lái)，可以快速、高效的從生物體內(nèi)提取活性物質(zhì)，得率大大提高，適合于從含水量高、易自溶的生物體中提取活性物質(zhì)。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的闡述。實(shí)施例1
精確稱取IOg海蜇絞碎液5份，分別準(zhǔn)確加入40ml0. 5mol/L的氯化鈉提取液，置入高壓袋密封，分別施加100、200、300、400、500MPa的壓力進(jìn)行浸提，升壓速度為50MPa/s，升壓完畢后保壓aiiin，然后卸除壓力，卸壓速度為100 MPa/s，總共加壓2次；然后進(jìn)行超聲波萃取，超聲功率400W，超聲提取時(shí)間2min，超聲提取結(jié)束后取上清液，邊攪拌邊加入質(zhì)量濃度為95%的乙醇，直至乙醇的質(zhì)量濃度達(dá)到75%，靜置沉淀池，然后在lOOOOr/min的離心速度下離心15min，過濾后得到沉淀，將沉淀凍干，得到海蜇糖蛋白，測(cè)量并計(jì)算各試樣所獲得的糖蛋白得率如下表所示。 實(shí)施例2
精確稱取IOg海蜇絞碎液5份，分別準(zhǔn)確加入40ml0. 5mol/L的氯化鈉提取液，置入高壓袋密封，加壓400MPa，升壓速度為50MPa/s，升壓完畢后保壓，保壓時(shí)間分別為1、2、3、4、 5min，然后卸除壓力，卸壓速度為100 MPa/s，總共加壓2次；然后進(jìn)行超聲波萃取，超聲功率400W，超聲提取時(shí)間2min，超聲提取結(jié)束后取上清液，邊攪拌邊加入質(zhì)量濃度為95%的乙醇，直至乙醇的質(zhì)量濃度達(dá)到75%，靜置沉淀2h，然后在lOOOOr/min的離心速度下離心 15min，過濾后得到沉淀，將沉淀凍干，得到海蜇糖蛋白，測(cè)量并計(jì)算各試樣所獲得的糖蛋白得率如下表所示。 實(shí)施例3
精確稱取IOg海蜇絞碎液3份，分別準(zhǔn)確加入40ml0. 5mol/L的氯化鈉提取液，置入高壓袋密封，加壓400MPa，升壓速度為50MPa/s，升壓完畢后保壓2min，然后卸除壓力，卸壓速度為100 MPa/s，加壓次數(shù)分別為1、2、3次；然后進(jìn)行超聲波萃取，超聲功率400W，超聲提取時(shí)間2min，超聲提取結(jié)束后取上清液，邊攪拌邊加入質(zhì)量濃度為95%的乙醇，直至乙醇的質(zhì)量濃度達(dá)到75%，靜置沉淀池，然后在lOOOOr/min的離心速度下離心15min，過濾后得到沉淀，將沉淀凍干，得到海蜇糖蛋白，測(cè)量并計(jì)算各試樣所獲得的糖蛋白得率如下表所示。
權(quán)利要求
1. 一種超高壓聯(lián)合超聲技術(shù)提取海蜇糖蛋白的方法，其特征在于，包含以下步驟1)用組織搗碎機(jī)將新鮮海蜇絞碎，取組織搗碎液，按每克組織搗碎液加入細(xì)1濃度為 0. 5mol/L NaCl溶液的比例加入NaCl溶液，混合均勻后裝入高壓袋內(nèi)，密封后備用；2)將步驟1中裝有混合料的高壓袋施加100-500MPa的壓力進(jìn)行浸提，升壓速度為 50MPa/s，升壓完畢后保壓l-5min，然后卸除壓力，卸壓速度為100 MPa/s，卸壓完畢后再重復(fù)上述加壓、保壓和卸壓操作1-2次；3)將步驟2中經(jīng)過超高壓處理后的混合料倒入燒杯中，置入超聲波萃取儀，在超聲頻率為M50MHz、超聲功率為100-500W的條件下進(jìn)行提取，超聲提取時(shí)間為l-5min，提取完成后，在4000r/min的離心速度下離心20min，然后取上清液，備用；4)邊攪拌邊向步驟3)中制得的上清液中加入質(zhì)量濃度為95%的乙醇，直至上清液中乙醇的質(zhì)量濃度達(dá)到75%，靜置池，然后在lOOOOr/min的離心速度下離心15min，過濾后得到沉淀，將沉淀凍干，得到海蜇糖蛋白。
全文摘要
一種超高壓聯(lián)合超聲技術(shù)提取海蜇糖蛋白的方法，取新鮮海蜇絞碎后的組織搗碎液，加入NaCl溶液混合均勻后裝入高壓袋內(nèi)，然后施加100-500MPa的壓力進(jìn)行浸提，再置入超聲波萃取儀中進(jìn)行超聲提取，提取完成后，離心取上清液，在上清液中加入乙醇，靜置2h，然后離心過濾后得到沉淀，將沉淀凍干，得到海蜇糖蛋白。本發(fā)明采用超高壓聯(lián)合超聲提取技術(shù)，由于超高壓作用，可以使原料內(nèi)外壓差發(fā)生變化，導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，再結(jié)合超聲輔助提取，利用超聲空化作用，可以使目標(biāo)組分更易從被提取物中游離出來(lái)，可以快速、高效的從生物體內(nèi)提取活性物質(zhì)，得率大大提高。
文檔編號(hào)C07K1/36GK102516378SQ20111040334
公開日2012年6月27日 申請(qǐng)日期2011年12月7日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月7日
發(fā)明者任國(guó)艷, 劉志龍, 崔國(guó)庭, 康懷彬, 梁華, 梁旺春, 樊金玲 申請(qǐng)人:河南科技大學(xué)