專利名稱：一種芍藥苷和白芍苷的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種芍藥苷和白芍苷的制備方法。
背景技術(shù)：
芍藥苷(paeoniflorin)和白芍苷(又稱芍藥內(nèi)酯苷，albiflorin)是一種單萜苷類成份，在牡丹科植物中普遍存在，是傳統(tǒng)中藥白芍、赤芍、牡丹皮中的主要有效成份和質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，具有多種藥理作用和用途，白勺總苷在中國是一種治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，芍藥苷和白芍苷可作為有效成份應(yīng)用于相關(guān)的藥品和功能食品領(lǐng)域。芍藥總苷的制備工藝相關(guān)研究文獻(xiàn)主要集中在我國。游松等(中國專利申請?zhí)?02133298. 3)公開了一種“芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的組合物及其制備方法”，所述組合物從芍藥中提取分離得到，其中芍藥苷與芍藥內(nèi)酯苷在該組合物中的比例為7 3 9 1，其制備工藝主要通過吸附樹脂精制、氧化鋁柱層析和硅膠柱層析制得。張現(xiàn)濤等(中國專利申請?zhí)?00510041212. 5)公開了一種“芍藥苷提取物的制備方法”，所述工藝主要采用乙醇提取赤芍藥材，上大孔樹脂后，乙醇洗脫，洗脫液濃縮后上聚酰胺樹脂，得含量90 %以上芍藥苷。朱靜建等(中國專利申請?zhí)?2110973. 7)公開了一種“芍藥中甙類化合物單體、提取和分離的方法”，所述成份包括芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、苯甲酰芍藥苷和羥基芍藥苷，其方法主要采用白芍或赤芍在醇水溶液中溶脹，加熱回流，濃縮至浸膏，用丙酮溶液超聲提取，濃縮，硅膠拌樣，上真空色譜柱粗分，再經(jīng)硅膠柱反復(fù)進(jìn)行分配色譜獲得。石任兵等(中國專利申請?zhí)?00710111231. X)公開了一種“芍藥總苷提取物及其制備方法”，所述提取物主要包括芍藥苷、白芍藥苷、芍藥新苷、芍藥內(nèi)酯A、B、C、氧化芍藥苷、苯甲酰芍藥苷及其衍生物等，可從芍藥科各植物部位中制備。通過長期研究，目前采用大孔樹脂技術(shù)純化芍藥總苷的工藝較為成熟，但芍藥苷和白芍苷不能分開，一般的溶劑萃取等技術(shù)也難以達(dá)到分離效果。文獻(xiàn)報(bào)道采用常壓硅膠柱層析、高速逆流層析等方法分離純化芍藥苷和白芍苷單體，但前者柱效較低、裝柱和檢測操作復(fù)雜，后者需要特殊的儀器設(shè)備，二者均難以實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。目前規(guī)?；纳炙庈蘸桶咨周諉误w尚無市售產(chǎn)品，探索可行的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)工藝，是目前有待解決的技術(shù)難題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種純度大于90%、易于實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化的芍藥苷和白芍苷制備工藝。本發(fā)明提供的制備芍藥苷和白芍苷的方法包括以下步驟(1)選取含有芍藥苷和白芍苷的牡丹科植物原料，采用水或醇-水混合溶劑進(jìn)行提取，提取液合并，濃縮，過濾，得粗提取液；(2)由(1)所得粗提取液，采用預(yù)處理好的大孔樹脂進(jìn)行吸附，再用乙醇-水混合溶媒按0-20%、30-75%乙醇梯度洗脫，收集30-75%乙醇洗脫部位洗脫液，濃縮，干燥，得精制提取物；
(3)由( 所得精制提取物，采用加壓柱色譜，以硅膠或改性硅膠為填料，適宜有機(jī)溶劑為流動相進(jìn)行分離，分別收集含有芍藥苷和白芍苷的流份，濃縮，干燥，即可獲得純度大于90 %的芍藥苷和白芍苷成品。所述工藝步驟(1)中所述牡丹科植物為白芍、赤芍、牡丹中的任意一種，所述植物原料為植物根、莖、葉、根莖中的任意一種。提取溶劑為水、乙醇-水中的任意一種。所述提取方法可為回流提取、超聲提取、微波輔助提取、逆流提取中的任意一種。所述工藝步驟O)中，所述大孔樹脂為苯乙烯系或丙烯酸系樹脂，其中優(yōu)選非極性或弱極性大孔樹脂。大孔樹脂梯度洗脫時(shí)優(yōu)選按0-10%、30-70%乙醇梯度洗脫。所述工藝步驟(3)中所述加壓柱色譜為低壓或中壓柱色譜，柱長度為10-100厘米范圍，優(yōu)選15-100厘米；柱內(nèi)徑可根據(jù)生產(chǎn)需要選擇為2-100厘米范圍，優(yōu)選10-50厘米。所述填料可為硅膠，所述流動相為氯仿-甲醇、二氯甲烷-甲醇、乙酸乙酯-甲醇、乙酸乙酯-乙醇中的任意一種。所述填料也可為碳18改性硅膠，所述流動相為甲醇-水、甲醇-水-有機(jī)酸中的任意一種，其中有機(jī)酸優(yōu)選揮發(fā)性的甲或乙酸。所述含有芍藥苷和白芍苷的流份可采用在線紫外檢測，或離線的薄層檢測或液相檢測。本發(fā)明通過芍藥苷和白芍苷工藝研究，所完成的制備技術(shù)路線有以下特色和優(yōu)勢(1)藥材可選用含有芍藥苷和白芍苷的牡丹科各種植物原料，包括白芍、赤芍、牡丹中的任意一種，包括植物的根、莖、葉、根莖中的任意一種部位，擴(kuò)大和豐富了植物資源的有效綜合利用；( 采用優(yōu)選的大孔樹脂梯度洗脫工藝，有效富集了富含芍藥苷和白芍苷的組份，簡化了后續(xù)純化工藝負(fù)擔(dān)；C3)創(chuàng)新性應(yīng)用低壓或中壓柱色譜工序，實(shí)現(xiàn)了單體純化工序的自動化和可操作性，成功獲得純度大于90%的單體成品。本發(fā)明工藝路線經(jīng)濟(jì)合理、效率高、能耗低，可實(shí)現(xiàn)植物資源的充分利用，溶劑便于回收和循環(huán)利用，容易實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明內(nèi)容是通過大量實(shí)驗(yàn)研究、工藝優(yōu)化分析完成的，以下述具體實(shí)施例進(jìn)行說明。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明所述的芍藥苷和白芍苷是按以下實(shí)施例所表示的方法制造，所涉及到的方法是本領(lǐng)域的技術(shù)人員能夠掌握和運(yùn)用的技術(shù)手段。但以下實(shí)施例不得理解為任何意義上的對本領(lǐng)域發(fā)明權(quán)利要求的限制。實(shí)施例1大孔樹脂靜態(tài)吸附性能考察稱取Ikg白芍飲片，用8L70%乙醇回流提取2次，每次池，濾過，合并濾液，減壓濃縮至無醇味，調(diào)整藥液使每Iml藥液相當(dāng)于0. 5g生藥，備用。稱取各型號樹脂干重1. 00g，分別置于10個50ml的具塞錐形瓶中，加白芍提取液 (0. 5g生藥/ml) 10ml，于恒溫振蕩箱內(nèi)35°C條件下振蕩Mi，振速為180prm，將吸附后的白芍提取液真空抽濾，濾液經(jīng)適當(dāng)稀釋，參照2010版藥典方法用HPLC法測定白芍苷及白芍苷含量。吸附好的樹脂用水洗3次，真空干燥后，加入10ml95%乙醇，同樣于恒溫振蕩箱內(nèi)35°C 條件下振蕩他，振速為180prm，進(jìn)行解吸附。解吸液經(jīng)適當(dāng)稀釋后用HPLC測定芍藥苷及白芍苷含量。吸附好的樹脂用水洗3次，真空干燥后，加入10ml95%乙醇，同樣于恒溫振蕩箱內(nèi)35°C條件下振蕩他，振速為180prm，進(jìn)行解吸附。解吸液經(jīng)適當(dāng)稀釋后用HPLC測定芍藥苷及白芍苷含量。通過計(jì)算吸附量與解吸率來評價(jià)樹脂。吸附量計(jì)算公式(1)和解吸率計(jì)算公式 ⑵為；(l)qe = (C0-Ce) ViZ^ ； (2) D = CdVd/ (C0-Ce) ViXlOO^式(1)中，qe為樹脂吸附量(mg/g)，C0溶液初始濃度，Ce吸附飽和后溶液濃度，Vi 為樣品體積，W為樹脂干重。式O)中D為解吸率，Cd為解吸附后洗脫液待測成分的濃度， Vd為洗脫液體積，Q、(；、Vi與上同。結(jié)果見表1。表1各型號樹脂對芍藥的最大吸附量和解吸率
權(quán)利要求
1.一種芍藥苷和白芍苷的制備方法，其特征在于所述芍藥苷和白芍苷的制備方法如下(1)選取含有芍藥苷和白芍苷的牡丹科植物原料，采用水或醇-水混合溶劑進(jìn)行提取， 提取液合并，濃縮，過濾，得粗提取液；(2)由(1)所得粗提取液，采用預(yù)處理好的大孔樹脂進(jìn)行吸附，再用乙醇-水混合溶媒按0-20%、30-75%乙醇梯度洗脫，收集30-75%乙醇洗脫部位洗脫液，濃縮，干燥，得精制提取物；(3)由( 所得精制提取物，采用加壓柱色譜，以硅膠或改性硅膠為填料，適宜有機(jī)溶劑為流動相進(jìn)行分離，分別收集含有芍藥苷和白芍苷的流份，濃縮，干燥，即可獲得純度大于90 %的芍藥苷和白芍苷成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述芍藥苷和白芍苷的制備方法，其特征在于所述牡丹科植物為白芍、赤芍、牡丹中的任意一種，所述植物原料為植物根、莖、葉、根莖中的任意一種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述芍藥苷和白芍苷的制備方法，其特征在于其提取溶劑為水、乙醇-水中的任意一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述芍藥苷和白芍苷的制備方法，其特征在于其制備方法步驟(1) 中所述提取方法為回流提取、超聲提取、微波輔助提取、逆流提取中的任意一種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述芍藥苷和白芍苷的制備方法，其特征在于其制備方法步驟(2) 中所述大孔樹脂為苯乙烯系或丙烯酸系樹脂，其中優(yōu)選非極性或弱極性大孔樹脂。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述芍藥苷和白芍苷的制備方法，其特征在于其制備方法步驟(2) 中乙醇-水混合溶媒優(yōu)選按0-10%、30-70%乙醇梯度洗脫。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述芍藥苷和白芍苷的制備方法，其特征在于其制備方法步驟(3) 中所述加壓柱色譜為低壓或中壓柱色譜，柱長度為10-100厘米范圍，柱內(nèi)徑為2-100厘米范圍。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述芍藥苷和白芍苷的制備方法，其特征在于其制備方法步驟(3) 中所述填料為硅膠，所述流動相為氯仿-甲醇、二氯甲烷-甲醇、乙酸乙酯-甲醇、乙酸乙酯-乙醇中的任意一種。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述芍藥苷和白芍苷的制備方法，其特征在于其制備方法步驟(3) 中所述填料為碳18改性硅膠，所述流動相為甲醇-水、甲醇-水-有機(jī)酸中的任意一種。
10.根據(jù)權(quán)利要求7所述芍藥苷和白芍苷的制備方法，其特征在于其制備方法步驟(3) 中所述含有芍藥苷和白芍苷的流份采用在線紫外檢測或離線檢測。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種芍藥苷和白芍苷的制備方法，其主要步驟如下選取含有芍藥苷和白芍苷的牡丹科植物原料，采用水或醇-水混合溶劑進(jìn)行提取，提取液合并，濃縮，過濾；所得粗提取液采用預(yù)處理好的大孔樹脂進(jìn)行吸附，再用乙醇-水混合溶媒進(jìn)行梯度洗脫，收集30-75％乙醇洗脫部位洗脫液進(jìn)行濃縮、干燥；所得精制提取物再采用加壓柱色譜，以硅膠或改性硅膠為填料，適宜有機(jī)溶劑為流動相進(jìn)行分離，分別收集含有芍藥苷和白芍苷的流份，濃縮，干燥，即可獲得純度大于90％的芍藥苷和白芍苷成品。本發(fā)明方法工藝簡潔、可操作性強(qiáng)、便于自動化；可實(shí)現(xiàn)植物資源的綜合利用，溶劑便于回收和循環(huán)利用，能耗低，產(chǎn)品純度高，易于實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化放大。
文檔編號C07H1/08GK102492005SQ20111041006
公開日2012年6月13日 申請日期2011年12月12日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月12日
發(fā)明者馮育林, 劉江云, 彭曉國, 楊世林, 王蓉 申請人:蘇州大學(xué)